KR20160066172A - Composition for preventing gray hair and for treatment of leukoplakia containing picrionoside A - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 백모 방지용 및 백반증 개선용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 피크리오노시드 A를 유효성분으로 함유함으로써 멜라노사이트의 MITF (Microphthalmia-associated transcription facto) 발현을 증가시켜 멜라노사이트를 활성화시키고 멜라닌 합성을 촉진함으로써 백모의 유발을 사전에 예방하고 흑모 유발을 촉진하며, 또한 백반증 개선에 효과적인 조성물에 관한 것이다.More particularly, the present invention relates to a composition for preventing and treating wheat hair, and more particularly, to a composition for improving melanocyte activity by increasing the expression of MITF (microphthalmia-associated transcription facto) of melanocytes by containing picronoside A as an active ingredient, The present invention relates to a composition which is effective for prevention of white mite induction, promoting black mite induction and also for improving vitiligo by promoting the synthesis.
백모는 일반적으로 노화가 진행되면서 발생하는 것으로 노령이라는 인상을 강하게 주기 때문에, 생성된 백모를 감추기 위하여 백모를 검게 염색하는 염색제가 많이 연구되어 왔다. 그러나 염색은 일시적인 방법으로 백모의 성장에 의해 다시 염색해야 하고, 또한 현재 널리 사용되고 있는 산화형 흑발염색제는 산화제 등의 사용에 의해 피부에 손상을 준다.Since white moth generally occurs when aging progresses, it gives strong impression of old age. Therefore, a lot of dyes have been studied for dyeing white moths in order to hide white moths. However, dyeing is a temporary method and must be stained again by the growth of white hair. In addition, oxidized black hair dye which is widely used at present causes skin damage by the use of an oxidizing agent and the like.
백모억제제로서, 검정참깨, 호도살, 한련초, 꿀에 보조성분으로 숙지황, 천문동, 맥문동을 배합하여 이용하거나, 적하수오, 측백나무잎, 여정자, 한련초, 석염과 숙지황, 천문동, 맥문동과 함께 검정콩과 함께 용기에 넣은 후 50℃의 온도에서 끓여 약액이 검정콩을 흑모 유지하는 방법, 검정깨, 흑송잎, 다시마를 이용한 것, 오갈피추출 엑기스를 이용한 것, 뇌하수체 호르몬을 이용한 것, cAMP(3'-5'-cyclic adenosine monophosphate)를 이용한 것, 비타민 D3을 이용한 것 등이 개시되어 있으나, 체감할 수 있는 효과는 발휘되지 못하고 있다.As an inhibitor of wheat bloom, black sesame seeds, horseradish, hanshiksu, and honey can be used as supplementary ingredients, such as Sukjipu, Chunmundong, and Maekmundong. The method of boiling at a temperature of 50 ° C and then keeping the black bean black in the chemical solution, using black sesame seeds, black sesame leaf, kelp, using aqua extract extract, using pituitary hormone, cAMP (3'-5 '-cyclic adenosine monophosphate), vitamin D3, and the like have been disclosed, but the effect that can be sensed is not shown.
한편, 피크리오노시드 A (picrionoside A)는 양치식물꼬리고사릿과에 속한 여러해살이풀인 골고사리 (Aspleniumscolopendrium)의 일부분에서 추출한 터페노이드 (terpenoid) 성분에서 분리하거나, 화학적으로도 합성이 가능하다(Natural Product Sciences, 14(4): 265-268 (2008)). 이카리시드 계열 화합물인 이카리시드 II (icarisideII)에 대하여, 미백 활성은 이미 알려 져있다 (국제특허공개공보 WO 2008/035918, 2008년 3월 27일 공개). 반면, 이카리시드 계열 화합물인 피크리오노시드 A에 대한 주목할만한 연구성과는 아직까지 보고된 바 없다.On the other hand, picrionoside A can be isolated or chemically synthesized from terpenoid components extracted from a part of the perennial plant Asplenium scolopendrium belonging to the fern tail gosaris (Natural Product Sciences, 14 (4): 265-268 (2008)). For icaricide II compound icariside II, whitening activity is already known (International Patent Publication No. WO 2008/035918, published on Mar. 27, 2008). On the other hand, remarkable research results of picronoside A, an icaricide-based compound, have not been reported yet.
이에 본 발명자들은 피크리오노시드 A가 형질 전환 세포주 멜라노사이트에서 MITF의 발현을 증가시키고 백모 진행을 억제시켜 주는 효과가 있음을 관찰하였다. Thus, the present inventors observed that picronoside A has an effect of increasing the expression of MITF and inhibiting the white hair progression in transformed melanocytes.
따라서, 본 발명의 목적은 백모 방지용 및 백반증 개선용 조성물을 제공하는 것이다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a composition for preventing white spot and for improving leukosis.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 피크리오노시드 A를 유효성분으로 함유하는 백모 방지 또는 백반증 개선용 조성물을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a composition for preventing or inhibiting white mold, comprising picronoside A as an active ingredient.
본 발명의 조성물은 피크리오노시드 A를 유효성분으로 함유함으로써 멜라노사이트의 MITF 발현을 증가시켜 멜라노사이트를 활성화시키고 멜라닌 합성을 촉진함으로써 백모의 유발을 사전에 예방하고 흑모유발을 촉진하며, 또한 백반증 개선에 효과적이다.The composition of the present invention increases the expression of MITF in melanocytes by containing picronoside A as an active ingredient, thereby activating melanocytes and promoting melanin synthesis, thereby preventing the generation of white moths in advance and promoting the induction of black cohosh, It is effective for improvement.
본 발명에 의한 조성물은 피크리오노시드 A를 유효성분으로 함유함으로써 백모 방지 또는 백반증 개선 효과를 제공할 수 있다.The composition according to the present invention can provide an anti-whiplash or anti-whitening effect by containing picronoside A as an active ingredient.
본 발명에서 사용되는 피크리오노시드 A는 하기 화학식 1의 구조를 가진다.The picronoside A used in the present invention has a structure represented by the following formula (1).
[화학식 1][Chemical Formula 1]
본 발명의 피크리오노시드 A는 식물에서 추출될 수도 있고, 당업계에 공지된 방법에 따라 합성하여 사용할 수도 있으며, 상업적으로 시판되는 것을 사용할 수도 있다. The picronoside A of the present invention may be extracted from a plant, synthesized according to a method known in the art, or commercially available one may be used.
본 발명에 의한 조성물은 피크리오노시드 A를 조성물 총 중량에 대하여 0.001~50중량%, 바람직하게는 0.01~30 중량%, 보다 바람직하게는 0.1~10% 중량%의 양으로 함유할 수 있다. 상기 피크리오노시드 A의 함량이 0.001중량% 미만이면 상기 성분에 의한 효능, 효과가 미약하고, 50중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.The composition according to the present invention may contain 0.001 to 50% by weight, preferably 0.01 to 30% by weight, more preferably 0.1 to 10% by weight, of picronoside A based on the total weight of the composition. If the content of picronoside A is less than 0.001% by weight, the effect and effect of the above components are insufficient, and if it exceeds 50% by weight, there is a problem of skin safety or shape.
백모의 발생원인으로는 멜라노사이트의 줄기세포 소실, 및 멜라노사이트의 활성 저하가 제기되고 있다. 특히 노화로 인한 백모는 주로 줄기세포의 소실에 의하여 발생하고, 새치를 포함한 백모 발생은 현대 사회의 환경적, 정신적인 스트레스로 인한 멜라노사이트의 활성 저하에 의한다고 알려져 있다.The cause of white moths is the disappearance of melanocyte stem cells and the degradation of melanocytes. Especially, it is known that white moths caused by aging are mainly caused by loss of stem cells, and white moths including mites are caused by degradation of melanocytes due to environmental and mental stress of modern society.
멜라노사이트의 멜라닌 합성 활성은 MITF의 활성에 크게 영향을 받는데, 본 발명에 따른 피크리오노시드 A는 멜라노사이트에서 MITF의 발현을 현저히 상승시켜 백모를 억제하며 흑모 유발을 촉진시킬 수 있다.The melanin synthesis activity of melanocytes is greatly influenced by the activity of MITF. Pichryonoside A according to the present invention can significantly increase the expression of MITF in melanocytes, thereby inhibiting white moth and promoting the induction of blood coagulation.
본 발명의 조성물은 피부 외용제 조성물, 특히 화장료 조성물로서 제형화될 수 있으며, 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있으며, 예를 들어 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.The composition of the present invention may be formulated as an external preparation for skin, in particular as a cosmetic composition, and may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. In addition, the composition of the present invention may be provided in any form suitable for topical application, for example, as a solution, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in water phase, an emulsion obtained by dispersing water phase in water phase, a suspension, a solid, a gel, Pastes, foams, or aerosol compositions. Compositions of such formulations may be prepared according to conventional methods in the art.
특히, 본 발명의 피부 외용제 조성물은 모발 또는 두피용 조성물로서 제형이 특별히 한정되는 것은 아니지만, 예를 들어 헤어토닉, 모발 영양화장수, 스칼프트리트먼트, 헤어트리트먼트, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어로션 또는 두피 모발 겸용 트리트먼트 등으로 제형화될 수 있다.In particular, the composition for external application for skin of the present invention is not particularly limited as a composition for hair or scalp. For example, hair tonic, hair nutritional lotion, scalp treatment, hair treatment, hair shampoo, hair rinse, Scalp hair combined treatment, and the like.
또한, 본 발명에 따른 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~5중량%, 구체적으로 0.01~3중량%일 수 있다.In addition, the composition according to the present invention may contain, in addition to the above-mentioned substances, other ingredients which can give a synergistic effect to the main effect, to the extent that the main effect is not impaired. The composition according to the present invention may further comprise a humectant, an emollient, an ultraviolet absorber, an antiseptic, a bactericide, an antioxidant, a pH adjuster, an organic or inorganic pigment, a perfume, a cold agent or a limiting agent. The compounding amount of the above components can be easily selected by a person skilled in the art within the range not impairing the object and effect of the present invention, and the amount thereof may be from 0.01 to 5% by weight, specifically from 0.01 to 3% by weight based on the total weight of the composition .
또한, 본 발명의 조성물은 약학 조성물로서 제형화될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물을 의약품에 적용할 경우에는, 본 발명에서 사용되는 유효성분에 상용되는 무기 또는 유기의 담체를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 경구 투여제 혹은 비경구 투여제로 제형화할 수 있으며, 본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다. In addition, the composition of the present invention can be formulated as a pharmaceutical composition. When the composition according to the present invention is applied to medicines, it may be formulated into oral, parenteral or parenteral dosage forms in solid, semi-solid or liquid form by adding an inorganic or organic carrier compatible with the active ingredient used in the present invention , The pharmaceutical composition according to the present invention may be administered orally, parenterally, rectally, topically, transdermally, intravenously, intramuscularly, intraperitoneally, subcutaneously, and the like.
상기 경구 투여를 위한 제형으로서는 정제, 환제, 과립제, 캡슐제, 산제, 세립제, 분제, 유탁제, 시럽제, 펠렛제 등을 들 수 있다. 또한, 상기 비경구 투여를 위한 제형으로는 주사제, 점적제, 연고, 로션, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제 등을 들 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 상법에 따라 실시함으로써, 유효성분을 용이하게 제형화할 수 있으며, 이 때 계면활성제, 부형제, 착색료, 향신료, 보존료, 안정제, 완충제, 현탁제, 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.Examples of the formulations for oral administration include tablets, pills, granules, capsules, powders, fine granules, powders, emulsions, syrups and pellets. In addition, the formulations for parenteral administration include injections, drops, ointments, lotions, sprays, suspensions, emulsions, suppositories, and the like. The composition according to the present invention can be easily formulated into an active ingredient by carrying out the composition according to a conventional method. In this case, a surfactant, excipient, coloring agent, spice, preservative, stabilizer, buffer, suspending agent, have.
본 발명의 약학 조성물의 유효 성분의 투여 용량은 투여받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적당한 용량의 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1mg/kg/일 내지 100mg/kg/일, 보다 구체적으로는 5mg/kg/일 내지 50mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The dosage of the active ingredient of the pharmaceutical composition of the present invention will vary depending on the age, sex, body weight, pathological condition and severity of the subject to be treated, route of administration, or judgment of the prescriber. Determination of the appropriate dose based on these factors is well within the level of ordinary skill in the art and its daily dose is, for example, from 0.1 mg / kg / day to 100 mg / kg / day, more specifically from 5 mg / kg / day to 50 mg / / Day, but is not limited thereto.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for illustrating the present invention and that the scope of the present invention is not construed as being limited by these embodiments.
[참고예 1][Referential Example 1]
본 발명의 조성물의 효능을 실험하기 위한 피크리오노시드 A(Picrionoside A)를 획득하기 위하여, 건조한 나도파초일엽의 지상부를 세절한 뒤 MeOH로 초음파 추출하여 MeOH추출물을 확보하였으며, 이를 다시 n-hexane, CH2Cl2, n-BuOH, H2O 층으로분획을 실시하였다. 분획 중 CH2Cl2층으로부터 Sephadex LH-20와 실리카겔컬럼크로마토그래피 (silica gel columnchromatography)를 통하여 1종의 화합물을 분리하였고, n-BuOH층으로부터 분획한 것을 MCI-겔 컬럼크로마토그래피 (MCI-gelcolumn chromatography, 100% H2O->100% MeOH)을 실시하여 4개부로 분획하였다. 이를HPLC (High-performance liquid chromatography, AcCN-H2O=19:81, 2 ml/min, YMC J'sphere ODS-H80)을 사용하여 피크리오노시드 A 3.0 mg을 획득하였다.To obtain Picrionoside A for the test of the efficacy of the composition of the present invention, MeOH extract was obtained by extracting with a MeOH in the ground part of dried nadobacoshi leaves, , CH 2 Cl 2 , n-BuOH, and H 2 O layers. One compound was separated from the CH 2 Cl 2 layer through Sephadex LH-20 and silica gel column chromatography, and fractionated from the n-BuOH layer was purified by MCI-gel column chromatography (MCI-gel column chromatography, 100% H2O- > 100% MeOH). 3.0 mg of picronoside A was obtained using HPLC (High-performance liquid chromatography, AcCN-H2O = 19: 81, 2 ml / min, YMC J'sphere ODS-H80).
[시험예 1] 피크리오노시드 A의 멜라닌 생성 촉진 효과 시험Test Example 1 Melanin production promoting effect test of picronoside A
RPMI(Rosewell Park Menorial Institute)사에서 제조된 RPMI 배지에 5%의 우태아혈청, 100IU의 페니실린G (penicillin G) 및 0.2μM의 TPA(12-O-tetradecanoyl phorbol-13-acetate)를 첨가한 배지에 멜라닌 세포(melan-a)를 24웰플레이트(24-well microtiter plate)에 50,000세포/웰이 되도록 분주하였다. 다음날 분주된 세포에 시험 물질로서 상기 참고예 1의 피크리오노시드 A를 최종농도 50ppm 및 100ppm으로 각각 처리하고, 음성 대조군으로는 0.1% DMSO(Dimethyl sulfoxide)를, 양성 대조군으로는 100μM IBMX(3-isobutyl-1-methylxanthine)를 처리한 후에 37℃ 온도에서 3일간 배양하였다. 배양 후, PBS(phosphate buffered saline)로 웰을 씻어주고 1N NaOH를 100㎕씩 넣은 후 세포 안의 멜라닌을 용해시켰다. 용해된 멜라닌의 흡광도를 평판배양측정기(microplate reader)를 이용하여 405nm에서 측정하였다. 측정된 결과를 음성 대조군을 100으로 하고 이 값과 비교하여 하기 표 1에 나타내었다. A medium supplemented with 5% fetal bovine serum, 100 IU penicillin G and 0.2 μM TPA (12- O- tetradecanoyl phorbol-13-acetate) in RPMI medium manufactured by Rosewell Park Menorial Institute The melanocytes (melan-a) were dispensed in a 24-well microtiter plate at 50,000 cells / well. On the next day, the picronoside A of Reference Example 1 as the test substance was treated at final concentrations of 50 ppm and 100 ppm as test substances, and 0.1% DMSO (dimethyl sulfoxide) was used as a negative control and 100 μM IBMX -isobutyl-1-methylxanthine) and then incubated at 37 ° C for 3 days. After incubation, the wells were washed with phosphate buffered saline (PBS), and 100 μl of 1N NaOH was added thereto. Melanin in the cells was dissolved. The absorbance of dissolved melanin was measured at 405 nm using a microplate reader. The measured results were compared with the negative control group of 100 and are shown in Table 1 below.
피크리오노시드 A의 멜라닌 생성 촉진 효과를 대조군과 비교하여 나타낸 하기 표 1에 나타내었다.
The melanin production promoting effect of picronoside A was shown in Table 1, which is shown in comparison with the control group.
표 1을 살펴보면, 피크리오노시드 A가 멜라노사이트의 멜라닌 합성을 촉진시켜 멜라닌 생성이 늘어났으며, 특히 100ppm에서는 양성대조군보다 높은 멜라닌 생성 촉진 효과를 나타냄을 알 수 있다.As shown in Table 1, it can be seen that picronoside A promotes melanin synthesis in melanocytes, thereby increasing melanin production. Especially, at 100 ppm, melanin production is promoted higher than positive control.
[시험예 2] 피크리오노시드 A의 멜라노사이트에서의 MITF 및 티로시나제(tyrosinase) 발현 촉진 효과[Test Example 2] Promotion of MITF and tyrosinase expression in melanocytes of picronoside A
501mel 세포주 (제공: Dr S.A. Rosenberg, Surgery Branch, National Cancer Institute, Bethesda, MD, USA)를 이용하여 6웰플레이트(6-well microtiter plate)에 500,000세포/웰이 되도록 분주하고, 각공에 음성 대조군으로는 DMSO 0.1%, 양성 대조군으로는 IBMX 100μM, 그리고 시험군으로는 피크리오노시드 A를 50ppm으로 처리하여, 37℃ 온도에서 24시간, 48시간, 72시간 동안 배양한 후 단백질을 얻었다. 이렇게 얻은 단백질에 대하여 MITF 및 티로시나제 항체를 이용하여 웨스턴 블랏(western blot)을 실시하였다. 단백질 추출과 웨스턴 블랏은 통상적으로 당업자가 사용하는 표준 방법으로 수행하였다. 웨스턴 블랏 실시 후 그 결과를 음성 대조군을 100으로 하고 이 값과 비교하여 하기 표 2에 나타내었다. The cells were divided into 6-well microtiter plates at 500,000 cells / well using a 501mel cell line (provided by Dr SA Rosenberg, Surgery Branch, National Cancer Institute, Bethesda, MD, USA) Was treated with 0.1% DMSO, IBMX 100 μM as a positive control, and 50 ppm of picronoside A as a test group, and cultured at 37 ° C. for 24 hours, 48 hours, and 72 hours. The protein thus obtained was subjected to western blotting using MITF and tyrosinase antibodies. Protein extraction and Western blotting were routinely performed by standard methods used by those skilled in the art. The result of the Western blotting was compared with the negative control group of 100, and the results are shown in Table 2 below.
상기 표 2를 살펴보면, 피크리오노시드 A는 멜라노사이트에서 MITF와 티로시나제 단백질 발현을 상승시킴을 확인할 수 있다.As shown in Table 2, it can be confirmed that picronoside A increases MITF and tyrosinase protein expression in melanocytes.
[제제예 1] 헤어 토닉[Formulation Example 1] Hair tonic
하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 헤어 토닉을 제조하였다.A hair tonic was prepared according to a conventional method according to the composition shown in Table 3 below.
[제제예 2] 헤어 로션[Formulation Example 2] Hair lotion
하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 헤어 로션을 제조하였다.Hair lotions were prepared according to the compositions shown in Table 4 below in a conventional manner.
[제제예 3] 모발 영양화장수[Formulation Example 3] Hair nutritional lotion
하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 모발 영양화장수를 제조하였다.The hair nutritional lotion was prepared by a conventional method according to the composition shown in Table 5 below.
[제제예 4] 헤어샴푸 [Formulation Example 4] Hair shampoo
하기 표 6에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 헤어샴푸를 제조하였다.Hair shampoos were prepared in a conventional manner according to the composition shown in Table 6 below.
[제제예 5] 헤어 린스[Formulation Example 5] Hair rinse
하기 표 7에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 헤어 린스를 제조하였다.Hair rinses were prepared according to the compositions shown in Table 7 below by a conventional method.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to specific embodiments thereof, those skilled in the art will readily appreciate that many modifications are possible in the exemplary embodiments without materially departing from the novel teachings and advantages of this invention. something to do. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.
Claims (4)
[화학식 1]
[Chemical Formula 1]
[화학식 1]
[Chemical Formula 1]
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