KR20160056620A - Composition for Preventing Biofilm Formation Containing Enzyme Treated Extract of licorice - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 감초 추출물을 효소처리한 추출물을 유효성분으로 함유하는 미생물의 바이오필름 형성 방지용 조성물에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 감초의 용매추출물을 효소로 처리하는 것을 특징으로 하는 감초 추출물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 효소처리된 감초 추출물을 함유하는 병원성 균주의 바이오필름 형성 방지용 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for inhibiting the formation of a biofilm of a microorganism containing an extract obtained by enzymatically treating a licorice extract with an active ingredient, and more particularly to a process for producing a licorice extract, which comprises treating a solvent extract of licorice with an enzyme, To a composition for preventing the formation of a biofilm of a pathogenic strain containing an enzyme-treated licorice extract prepared by the method.
바이오필름은 미생물에 의하여 형성된 막 모양 구조체이며, 표면에 연결된 미생물 세포층으로 이루어진 잘 구성된 미생물계로 복잡한 구조적 기능적 특징을 가지고 있다. 생체막은 미생물의 대사 과정에 영향을 주는 물리 화학적 구배를 갖는다. 바이오필름을 형성하는 세포는 부유세포보다 항생제에 대한 저향성이 1000배 이상 높으며, 바이오필름 형성은 여러 질병의 발병(pathogenesis)에 중요한 역할을 한다(Anderson and O?oole et al., 2008, Bacterial Biofilms 322:85-105).Biofilm is a membrane-like structure formed by microorganisms, and is a well-organized microbial system composed of microbial cell layers connected to the surface. Biomembranes have physicochemical gradients that affect the metabolism of microorganisms. Cells that form biofilms are more than 1,000 times more resistant to antibiotics than floating cells, and biofilm formation plays an important role in the pathogenesis of many diseases (Anderson and O? Oole et al., 2008, Bacterial Biofilms 322: 85-105).
바이오필름의 형성 억제효과는 미생물의 생육, 증식을 억제하거나 사멸시키는 효과와는 무관하게 고체 표면에 들러붙는 혼합체의 형성을 저해하는 효과를 의미한다. 특히, 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)와 같은 구강 미생물은 구강 내의 침에 의해 미생물이 씻겨 없어질 수 있기 때문에 바이오필름을 형성하여 씻겨 나가지 않도록하는 작용을 하고 있다. 이러한 구강 미생물은 바이오필름의 형성 없이는 미생물이 구강 내에 머무를 수 없다. 따라서 구강 미생물을 제거하기 위한 방법으로 양치질과 같은 물리적 제거 방법과 바이오필름의 형성을 억제하는 물질을 이용하여 미생물을 제거하는 방법을 사용할 수 있다.The inhibitory effect of the biofilm formation means the effect of inhibiting the formation of the mixture adhering to the solid surface irrespective of the effect of inhibiting or killing the growth and proliferation of the microorganism. Particularly, such as Streptococcus mutans Since oral microorganisms can be washed away by saliva in the oral cavity, they form a biofilm so that they do not wash out. These oral microorganisms can not stay in the oral cavity without the formation of the biofilm. Therefore, as a method for removing oral microorganisms, a physical removal method such as tooth brushing and a method of removing microorganisms using a substance inhibiting the formation of biofilm can be used.
한편, 구강은 다양한 세균으로 구성된 미생물 생태계를 이루고 있으며, 이에 서식하는 많은 세균은 바이오 필름 형태로 존재한다. 치아 표면에 형성되는 바이오필름, 즉 프라그(plaque)에 복합적으로 참여하여 충치 및 구강 질병을 일으키는데 핵심적인 역할을 하는 구강세균들로는 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans), 스트렙토코커스 살리바리우스(Strpetococcus salivarius), 스트렙토코커스 고르도니(Streptococcus gordonii), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 캐세이(Lactobacillus casei) 및 엔테로코커스 패카리스(Enterococcus faecalis) 등이 존재한다(Marsh et al., 2003, Oral disease 9:16-22). 특히, 치주염은 성인의 대표적 구강 질환으로서, 치은연하에 형성된 복합세균의 바이오 필름에 의해 야기되는 숙주의 염증 및 면역 반응 결과로 조직파괴를 동반하며, 치아 상실의 주된 원인이 된다.On the other hand, the oral cavity constitutes a microbial ecosystem composed of various bacteria, and many bacteria inhabiting the oral cavity exist in the form of biofilm. Oral bacteria that are involved in the biofilm formed on the surface of the tooth, that is, the plaque, and play a key role in causing cavities and oral diseases include Streptococcus mutans , Strpetococcus salivarius , Streptococcus gordonii , Lactobacillus acidophilus , Lactobacillus casei , And Enterococcus faecalis , and the like (Marsh et al., 2003, Oral disease 9: 16-22). In particular, periodontitis is a typical oral disease of adults, accompanied by tissue destruction as a result of host inflammation and immune responses caused by biofilms of complex bacteria formed in the subgingival gingiva, and is a major cause of tooth loss.
또한, 잔토모나스 오리재(Xanthomonas oryzae)가 생산하는 바이오필름은 벼에 감염되었을 때, 도관의 통로를 막게 되고, 이를 통해 영양분의 전달이나 물의 전달이 원활하지 않아서 잎이 죽기 시작하여 벼가 죽거나 살아남더라도 쌀을 정상적으로 생산할 수 없게 되는 흰잎마름병을 일으키게 된다.In addition, the biofilm produced by Xanthomonas oryzae obstructs the passage of the conduit when it is infected with rice. As a result, the nutrients are not transferred smoothly or the water is not transmitted smoothly, so that the leaves die and the rice dies or survives. Even if the rice can not be produced normally can cause blight of blight.
기존에는 이러한 바이오필름의 형성을 억제하기 위해 바이오필름을 형성하는 균주의 성장을 저해하는 방식을 이용하였다. 하지만 구강 내에는 유해한 균과 유익한 균이 동시에 존재하기 때문에 무조건적인 살균을 하기보다 세균 세포의 성장은 그대로 유지한 채로 바이오필름의 형성만을 억제하는 조성물을 개발하고자 하였다.In order to inhibit the formation of such biofilms, a method of inhibiting the growth of strains forming the biofilm has been used. However, since the harmful bacteria and the beneficial bacteria are present in the oral cavity, a composition which inhibits only the formation of biofilm while maintaining the growth of bacterial cells rather than unconditionally sterilization was developed.
이에, 본 발명자들은 인체에 독성이 없이 안정하고 세포의 성장은 그대로 유지한 채 바이오필름 형성 억제 효과가 뛰어난 새로운 천연물질을 개발하고자 예의 노력한 결과, 효소처리된 감초추출물이 세균의 바이오필름 형성을 효과적으로 억제하는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
Accordingly, the present inventors have made intensive efforts to develop a new natural substance which is stable without toxicity to the human body and which is capable of maintaining the growth of the cells while retaining the effect of inhibiting the formation of biofilm. As a result, it has been found that the enzyme-treated licorice extract effectively inhibits biofilm formation And the present invention was completed.
본 발명의 목적은 미생물의 성장은 유지한 채 바이오필름의 형성을 효과적으로 억제할 수 있는 천연물 유래 바이오필름 형성 억제용 조성물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 바이오필름 억제용 조성물을 제공하는 데 있다.
It is an object of the present invention to provide a method for producing a composition for inhibiting the formation of a natural product-derived biofilm capable of effectively inhibiting the formation of a biofilm while maintaining the growth of the microorganism and a composition for inhibiting the biofilm prepared by the method.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (a) 감초를 용매로 추출하여 감초 용매추출물을 수득하는 단계; (b) 상기 감초 용매추출물에서 용매를 제거하는 단계; 및 (c) 상기 용매가 제거된 추출물을 효소로 처리하여, 효소처리된 감초추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 미생물의 바이오필름 형성 방지능을 가지는 효소처리된 감초 추출물의 제조방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a process for producing a licorice extract, comprising: (a) extracting licorice with a solvent to obtain a licorice solvent extract; (b) removing the solvent from the licorice solvent extract; And (c) treating the extract from which the solvent has been removed with an enzyme to obtain an enzyme-treated licorice extract, wherein the enzyme-treated licorice extract has an ability to inhibit biofilm formation of microorganisms.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 효소처리된 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 미생물의 바이오필름 형성 방지용 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for preventing the formation of a biofilm of a microorganism containing an enzyme-treated licorice extract prepared by the above-mentioned method as an active ingredient.
본 발명은 또한, 상기 효소처리된 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 치아 우식증 또는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for preventing or treating dental caries or periodontitis containing the enzyme-treated licorice extract as an active ingredient.
본 발명은 또한, 상기 효소처리된 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 벼의 흰잎마른병 방제용 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for controlling dry leaf blight of rice, comprising the enzyme-treated licorice extract as an active ingredient.
본 발명은 또한, 상기 효소처리된 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성위장염, 종말회장염, 패혈증, 결핵성 홍반, 식중독 및 장염으로 구성된 군에서 선택되는 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica)에 의해 발생하는 질병의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
The present invention also relates to a method for the treatment and / or prophylaxis of diseases caused by Yersinia enterocolitica selected from the group consisting of acute gastroenteritis, endophthalmitis, sepsis, tuberculous erythema, food poisoning and enteritis containing the enzyme-treated licorice extract as an active ingredient And a composition for preventing or treating the disease.
본 발명에 따른 효소처리된 감초 추출물을 함유하는 조성물은 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans), 잔토모나스 오리재(Xanthomonas oryzae) 또는 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica)의 성장은 그대로 유지하면서 바이오필름의 형성을 억제하여 우식증, 치주염과 같은 구강 질환의 예방 및 치료와 벼의 흰잎마른병의 방제 및 장염의 예방 및 치료에 효과적이다.
The composition containing the enzyme-treated licorice extract according to the present invention is useful for the treatment of Streptococcus mutans , Xanthomonas oryzae , Or Yersinia enterocolitica , while inhibiting the formation of biofilm, preventing and treating oral diseases such as caries, periodontitis, prevention of dry blight of rice plants and prevention and treatment of enteritis effective.
도 1은 50% 에탄올 감초 추출물 처리에 따른 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)의 세포 성장과 바이오필름 형성방지 효과를 나타낸 것이다.
도 2는 펩티다제 효소로 처리한 50% 에탄올 감초 추출물 처리에 따른 스트렙토코커스 뮤탄스의 세포 성장과 바이오필름 형성방지 효과를 나타낸 것이다.
도 3은 베타 글루코시다제 효소로 처리한 50% 에탄올 감초 추출물 처리에 따른 스트렙토코커스 뮤탄스의 세포 성장과 바이오필름 형성방지 효과를 나타낸 것이다.
도 4는 50% 에탄올 감초 추출물 처리에 따른 잔토모나스 오리재(Xanthomonas oryzae)의 세포 성장과 바이오필름 형성방지 효과를 나타낸 것이다.
도 5는 펩티다제 효소로 처리한 50% 에탄올 감초 추출물 처리에 따른 잔토모나스 오리재의 세포 성장과 바이오필름 형성방지 효과를 나타낸 것이다.
도 6은 베타 글루코시다제 효소로 처리한 50% 에탄올 감초 추출물 처리에 따른 잔토모나스 오리재의 세포 성장과 바이오필름 형성방지 효과를 나타낸 것이다.
도 7은 50% 에탄올 감초 추출물 처리에 따른 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica)의 세포 성장과 바이오필름 형성방지 효과를 나타낸 것이다.
도 8은 펩티다제 효소로 처리한 50% 에탄올 감초 추출물 처리에 따른 예르시니아 엔테로콜리티카의 세포 성장과 바이오필름 형성방지 효과를 나타낸 것이다.
도 9는 베타 글루코시다제 효소로 처리한 50% 에탄올 감초 추출물 처리에 따른 예르시니아 엔테로콜리티카의 세포 성장과 바이오필름 형성방지 효과를 나타낸 것이다.1 shows the cell growth and biofilm formation inhibition effect of Streptococcus mutans treated with 50% ethanol licorice extract.
FIG. 2 shows the cell growth of Streptococcus mutans and the effect of preventing biofilm formation by treatment with 50% ethanol licorice extract treated with peptidase enzyme.
FIG. 3 shows the cell growth of Streptococcus mutans and the effect of preventing biofilm formation by 50% ethanol licorice extract treatment with beta-glucosidase enzyme.
Figure 4 shows the effect of 50% ethanol licorice extract treatment on cell growth and biofilm formation inhibition of Xanthomonas oryzae .
FIG. 5 shows the effect of 50% ethanol licorice extract treated with peptidase enzyme on cell growth and biofilm formation inhibition effect of Zanthomonas oryzae.
FIG. 6 shows the effect of 50% ethanol licorice extract treated with beta-glucosidase enzyme on cell growth and biofilm formation inhibition effect of Zanthomonas duck.
FIG. 7 shows the effect of inhibiting cell growth and biofilm formation of Yersinia enterocolitica by 50% ethanol licorice extract treatment.
FIG. 8 shows the effect of 50% ethanol licorice extract treated with a peptidase enzyme on cell growth and biofilm formation of Yersinia enterocolitica.
FIG. 9 shows the effect of 50% ethanol licorice extract treated with beta-glucosidase on cell growth and biofilm formation of Yersinia enterocolitica.
일 관점에서, 본 발명은 (a) 감초를 용매로 추출하여 감초 용매추출물을 수득하는 단계; (b) 상기 감초 용매추출물에서 용매를 제거하는 단계; 및 (c) 상기 용매가 제거된 추출물을 효소로 처리하여, 효소처리된 감초추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 미생물의 바이오필름 형성 방지능을 가지는 효소처리된 감초 추출물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 효소처리된 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 미생물의 바이오필름 형성 방지용 조성물에 관한 것이다.In one aspect, the present invention provides a process for preparing a licorice solvent extract comprising: (a) extracting licorice with a solvent to obtain a licorice solvent extract; (b) removing the solvent from the licorice solvent extract; And (c) treating the extract from which the solvent has been removed with an enzyme to obtain an enzyme-treated licorice extract, wherein the enzyme-treated licorice extract has an ability to inhibit biofilm formation of microorganisms and The present invention relates to a composition for preventing the formation of a biofilm of a microorganism containing an enzyme-treated licorice extract prepared as an active ingredient.
본 발명에 있어서, 상기 효소는 펩티다제(Peptidase) 또는 베타 글루코시다제(β-glucosidase)인 것을 특징으로 할 수 있으며, 상기 미생물은 바이오필름을 형성하는 미생물이라면 모두 해당되나, 바람직하게는 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans), 스트렙토코커스 살리바리우스(Streptococcus salivarius), 스트렙토코커스 고르도니(Streptococcus gordonii), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 캐세이(Lactobacillus casei), 엔테로코커스 패카리스(Enterococcus faecalis), 잔토모나스 오리재(Xanthomonas oryzae) 및 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 등이 선택될 수 있다.In the present invention, the enzyme may be a peptidase or a beta-glucosidase. The microorganism may be any microorganism that forms a biofilm, Streptococcus mutans , Streptococcus salivarius , Streptococcus gordonii , Lactobacillus acidophilus , Lactobacillus casei , Enterococcus faecalis, Streptococcus spp ., Streptococcus spp ., Streptococcus spp . Enterococcus faecalis , Xanthomonas oryzae , And Yersinia enterocolitica . Etc. may be selected.
본 발명에 있어서, 용매는 감초의 바이오필름 형성 억제 유효성분을 추출할 수 있는 용매라면 제한없이 사용될 수 있으나, 알코올, 특히 에탄올을 사용하는 것이 바람직하다.In the present invention, the solvent may be any solvent which can extract the active ingredient for inhibiting biofilm formation of licorice, but it is preferable to use alcohol, particularly ethanol.
본 발명의 일 실시예에서는, 균주가 성장을 그대로 유지한 채 바이오필름의 형성이 억제되는지 확인하기 위하여 효소처리를 하지 않은 감초의 에탄올 추출물과 효소처리 된 감초의 에탄올 추출물을 스트렙토코커스 뮤탄스에 처리한 결과, 효소처리된 감초의 에탄올 추출물의 경우에서 효소처리를 하지 않은 감초 에탄올 추출물에 비해 낮은 농도에서도 바이오필름의 형성이 빠르게 억제됨을 확인할 수 있었으며, 세포의 성장이 유지되는 것을 확인할 수 있었다.In one embodiment of the present invention, in order to confirm that the formation of the biofilm is inhibited while the growth of the strain is maintained, the ethanol extract of licorice without enzyme treatment and the ethanol extract of licorice treated with enzyme are treated with streptococcus mutans As a result, it was confirmed that the ethanol extract of the enzyme treated liquorice rapidly inhibited the formation of the biofilm at lower concentration than the enzyme treated liquor ethanol extract, and the cell growth was maintained.
본 발명은 다른 관점에서, 상기 효소처리된 추출물을 유효성분으로 함유하는 치아 우식증 또는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.In another aspect, the present invention relates to a composition for preventing or treating dental caries or periodontitis containing the enzyme-treated extract as an active ingredient.
본 발명에서 스트렙토코커스 뮤탄스 등의 구강 미생물은 구강내의 침에 의해 미생물이 씻겨 없어질 수 있기 때문에 바이오필름을 형성하여 씻겨 나가는 현상을 극복하고 있다. 이러한 구강 미생물은 바이오필름의 형성 없이는 미생물이 구강 내에 머무를 수 없다. 따라서 구강 미생물을 제거하기 위한 방법으로 양치질과 같은 물리적 제거 방법과 바이오필름의 형성을 억제하는 물질을 이용하여 미생물을 제거하는 방법을 사용할 수 있다.In the present invention, Streptococcus mutans The oral microorganisms have overcome the phenomenon that the microorganisms are washed away by the saliva in the oral cavity and thus the biofilm is formed and washed away. These oral microorganisms can not stay in the oral cavity without the formation of the biofilm. Therefore, as a method for removing oral microorganisms, a physical removal method such as tooth brushing and a method of removing microorganisms using a substance inhibiting the formation of biofilm can be used.
본 발명의 다른 실시예에서는, 스트렙토코커스 뮤탄스 이외의 균주에도 동일한 효과가 나타나는지 확인하기 위해, 잔토모나스 오리재 균주에서 같은 방법으로 실험을 진행하였다. 효소처리를 하지 않은 감초의 에탄올 추출물과 효소처리 된 감초의 에탄올 추출물을 잔토모나스 오리재에 처리한 결과, 효소처리 된 감초의 에탄올 추출물의 경우에서 효소처리를 하지 않은 감초 에탄올 추출물에 비해 낮은 농도에서도 바이오필름의 형성이 빠르게 억제됨을 확인할 수 있었으며, 세포의 성장이 유지되는 것을 확인할 수 있었다.In another embodiment of the present invention, in order to confirm whether or not the same effect is exhibited in strains other than Streptococcus mutans, the same experiment was carried out in the strain of Zanthomonas duck. The ethanol extract of licorice without enzyme treatment and the ethanol extract of licorice liquor treated with zotomonas oryzae showed that the ethanol extract of enzyme treated liquorice showed lower concentration than the untreated licorice ethanol extract It was confirmed that the formation of biofilm was rapidly inhibited and the growth of cells was maintained.
본 발명은 또 다른 관점에서, 상기 효소처리된 추출물을 유효성분으로 함유하는 벼의 흰잎마른병 방제용 조성물에 관한 것이다.In another aspect, the present invention relates to a composition for controlling dry leaf blight of rice, comprising the enzyme-treated extract as an active ingredient.
본 발명에서 잔토모나스 오리재에 의해 발생되는 벼의 흰잎마름병은 쌀의 생산에 가장 많은 경제적 손실을 야기시키는 벼의 질병으로 세계적으로 광범위하게 발생한다. 질병을 일으키는 기작의 하나로 벼의 도관에 잔토모나스 오리재가 흡착하여 바이오 필름을 형성하여 도관의 통로를 막게 되고, 이를 통해 영양분의 전달이나 물의 전달이 원활하지 않아서 잎이 죽기 시작하여 벼가 죽거나 살아남더라도 쌀을 정상적으로 생산할 수 없게 된다. 따라서 잔토모나스 오리재의 바이오필름의 형성을 억제하면 벼 도관의 막힘 현상을 억제하여 잔토모나스 오리재가 감염되어도 벼가 정상적인 생육을 할 수 있으며 벼의 수확량을 정상적으로 유지할 수 있다. In the present invention, the blight of blight of blight caused by the Manta manta oryzae occurs widely in the world as rice disease causing the greatest economic loss in the production of rice. One of the mechanisms that cause disease is the adsorption of xanthanum duck ash on the conduit of rice to prevent the passage of the conduit by forming a biofilm. As a result, the transfer of nutrients and the transfer of water are not smooth and the leaves start to die, Rice can not be produced normally. Therefore, inhibiting the formation of biofilm of Manganese duck ash suppresses the clogging of the rice conduit, so that the rice can grow normally even if the manganese duck is infected, and the rice yield can be maintained normally.
본 발명의 또 다른 실시예에서는, 균주를 바꿔 예르시니아 엔테로콜리티카 균주에도 동일한 효과가 나타나는지 확인하기 위해 같은 방법으로 실험을 진행하였다. 효소처리를 하지 않은 감초의 에탄올 추출물과 효소처리 된 감초의 에탄올 추출물을 예르시니아 엔테로콜리티카에 처리한 결과, 효소처리 된 감초의 에탄올 추출물의 경우에서 효소처리를 하지 않은 감초 에탄올 추출물과 유사한 수준으로 바이오필름의 형성이 억제됨을 확인할 수 있었지만, 세포의 성장은 유지되는 것을 확인할 수 있었다.In another embodiment of the present invention, the experiment was conducted in the same manner to confirm whether the same effect was also exhibited in the strain of Enterococci strain Yersinia by changing the strain. The ethanol extract of licorice without enzyme treatment and the ethanol extract of licorice treated with enzyme were treated with yersinia enterocolitica. As a result, it was found that the ethanol extract of enzyme treated liquorice showed similar level as that of liquorice ethanol extract without enzyme treatment It was confirmed that the formation of the biofilm was suppressed, but the growth of the cells was maintained.
본 발명은 또 다른 관점에서, 상기 효소처리된 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성위장염, 종말회장염, 패혈증, 결핵성 홍반, 식중독 및 장염으로 구성된 군에서 선택되는 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica)에 의해 발생하는 질병의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.In another aspect of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition comprising Yersinia enterocolitica selected from the group consisting of acute gastroenteritis, endophthalmitis, sepsis, tuberculous erythema, food poisoning and enteritis containing the enzyme-treated extract as an active ingredient, To a composition for preventing or treating diseases caused by < RTI ID = 0.0 >
본 발명에서 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica)는 장내세균과에 속하며 gastroenteritis(식중독, 장염)을 일으키는 그람 음성(Gram-negative)균이다. 사람에서 급성위장염, 종말회장염, 패혈증, 결핵성 홍반 등 다양한 질병을 발생시키는 것으로 알려져 있다. 이 균은 매우 넓은 범위의 온도에서 생육하며, 바이오 필름을 형성함으로써 외부의 자극이나 항생제 처리에 대해 저항을 지녀 관리가 어렵다. In the present invention, Yersinia enterocolitica belongs to the intestinal bacteria and is a Gram-negative bacterium causing gastroenteritis (food poisoning, enteritis). It is known that it causes various diseases such as acute gastroenteritis, endocarditis, sepsis, tuberculous erythema and the like in humans. The bacterium grows over a very wide range of temperatures, and biofilms form resistance to external stimuli or antibiotic treatment, making it difficult to manage.
본 발명에서 조성물은 기능성 식품을 포함할 수 있다. 본 발명의 기능성 식품은, 예를 들어, 각종 식품류, 캔디, 초콜릿, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.In the present invention, the composition may comprise a functional food. The functional food of the present invention can be used in the form of powder, granule, tablet, capsule or beverage, for example, various foods, candy, chocolate, beverage, gum, tea, vitamin complex and health supplement.
본 발명에서 상기 효소처리된 추출물은 바이오필름 형성 균주에 의해 발생하는 질병의 예방을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물의 양은 일반적으로 본 발명의 건강 기능 식품 조성물은 전체 식품 중량의 0.01 내지 50 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 20 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다. In the present invention, the enzyme-treated extract may be added to foods or beverages for the purpose of preventing disease caused by a biofilm-forming strain. At this time, the amount of the above extract in the food or beverage may generally be 0.01 to 50% by weight, preferably 0.1 to 20% by weight, of the total food weight of the health functional food composition of the present invention, In a proportion of 0.02 to 10 g, preferably 0.3 to 1 g.
본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 외에는 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기의 향미제 이외의 것으로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.The health beverage composition of the present invention has no particular limitation on the liquid ingredient other than the above-mentioned extract as an essential ingredient in the indicated ratio, and may contain various flavors or natural carbohydrates as an additional ingredient such as ordinary beverages. Examples of such natural carbohydrates include monosaccharides such as disaccharides such as glucose and fructose, polysaccharides such as maltose, sucrose, and the like, such as dextrins, cyclodextrins, and the like. Xylitol, sorbitol, and erythritol. Natural flavors (tau martin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavors (saccharine, aspartame, etc.) other than the above-mentioned flavor agents can be advantageously used. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 to 20 g, preferably about 5 to 12 g per 100 ml of the composition of the present invention.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above-mentioned composition, the composition of the present invention can be used as a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, coloring agents and aging agents (cheese, chocolate etc.), pectic acid and its salts, , Organic acids, protective colloid thickening agents, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks, and the like. In addition, the compositions of the present invention may contain flesh for the production of natural fruit juices and fruit juice drinks and vegetable drinks. These components may be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical, but is generally selected in the range of 0 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.
본 발명에서 조성물은 바이오필름 형성 억제효과를 필요로 하는 화장료 조성물을 포함할 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물에 추가로 사용가능한 유용 물질에는 항산화제, 결합제, 벌크화제(bulking agent), 킬레이트제, 색소, 연화제, 에멀션 안정제, 막형성제, 충전재, 방향 성분, 젤화제, 두발 조절제, 헤어 고정제, 습윤제, 가소제, 보존제, 피부 조절제, 용매, 햇빛차단제, 계면활성제, 자외선 흡수제, 점도조절제, 왁스 등이 포함되나 이에 한정되지 않는다.In the present invention, the composition may include a cosmetic composition that requires an effect of inhibiting biofilm formation. Useful substances which can be further used in the cosmetic composition of the present invention include antioxidants, binders, bulking agents, chelating agents, pigments, softeners, emulsion stabilizers, film formers, fillers, directional ingredients, gelling agents, But are not limited to, hair fixatives, wetting agents, plasticizers, preservatives, skin conditioners, solvents, sunscreens, surfactants, ultraviolet absorbers, viscosity modifiers, waxes and the like.
본 발명의 화장료 조성물은 미용상 허용가능한 담체를 포함할 수 있으며, 물과 같은 수용액 또는 극성 유기 용매, 에탄올과 같은 알콜 또는 그 밖의 극성 용매, 천연 또는 합성 오일; 수중유 에멀션; 유중수 에멀션; 또는 왁스 등이 될 수 있다. 상기 담체는 분명히 무독성이다. 본 발명 조성물의 양호한 담체는 수용액이다.The cosmetic composition of the present invention may contain a cosmetically acceptable carrier and may be an aqueous solution such as water or a polar organic solvent, alcohol such as ethanol or other polar solvent, natural or synthetic oil; Oil-in-water emulsion; Water-in-oil emulsion; Or wax. The carrier is clearly non-toxic. A preferred carrier for the composition of the present invention is an aqueous solution.
본 발명의 화장료 조성물은 기능에 따라, 용액(로션형 조성물), 농축 용액, 젤, 연고, 에멀션(크림, 유제), 소포 분산, 파우더, 조밀 파우더(dense powder), 페이스트 또는 고형제 등의 다양한 형태로 제공될 수 있다. 더 자세히 설명하자면, 본 발명의 화장품 조성물은 볼연지, 크림(안면 크림, 핸드 크림, 보습 크림, 햇빛 차단 크림), 크림 파우더, 아이 라이너, 아이 셰도우, 아이브로우 펜슬, 파운데이션, 로션, 마스카라, 마이크로에멀션, 연고, 포마드 및 루즈 등의 다양한 형태 내에서 분산될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 이들은 거품 또는 스프레이의 형태로 적용할 수 있는 충진제를 포함한 압착 팩으로 포장될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be used in various forms such as a solution (lotion-like composition), a concentrated solution, a gel, an ointment, an emulsion (cream or oil), a vesicular dispersion, a powder, a dense powder, And the like. More specifically, the cosmetic composition of the present invention can be used as a cosmetic composition for oral use such as ball puff, cream (facial cream, hand cream, moisturizing cream, sunscreen cream), cream powder, eyeliner, eye shade, eyebrow pencil, foundation, lotion, Emulsions, ointments, pomades, lozes, and the like, but are not limited thereto. They may be packed in a squeeze pack containing a filler that can be applied in the form of a foam or spray.
상기 화장료 조성물에는 천연 또는 인공 왁스가 함유될 수 있다. 천연 왁스에는 라놀린, 밀랍, 스퍼마세티(spermaceti) 또는 라놀린 알콜, 경화 또는 아세틸화 라놀린, 라놀린 지방산 또는 아세틸화 라놀린 알콜 등의 라놀린 유도체와 같은 동물성과 카나우바(carnauba), 칸델릴라(candelilla), 카폭(kapok), 쌀, 경화 호호바(jojoba), 알파(alfa) 또는 야판(yapan)왁스 또는 코르크(cork)섬유, 사탕수수 왁스, 코코아 버터 등의 식물성이 있다. 대안적으로, 무기 왁스에는 파라핀, 몬탄, 리그나이트, 페트로라툼, 페트로라툼 왁스 또는 미소결정화 왁스, 세레신, 또는 오조케라이트 등이 포함될 수 있다. 사용되는 합성 왁스의 예에는 피셔-트롭쉬 합성에 의해 얻은 폴리에틸렌 왁스 및 포화 C10-C40 카르복실산 및 포화 C10-C40 알콜의반응 산물인 미리스틸 미리스테이트와 같은 선형 에스테르가 포함된다. 사용되는 그 밖의 왁스에는 칼슘 라놀레이트 또는 스테아레이트 또는 경화 코코넛유 등이 포함된다.The cosmetic composition may contain natural or artificial wax. Natural waxes include animal and carnauba such as lanolin, beeswax, spermaceti or lanolin alcohol, hardened or acetylated lanolin, lanolin derivatives such as lanolin fatty acids or acetylated lanolin alcohols, carnauba, candelilla, There are vegetable such as kapok, rice, hardened jojoba, alfa or japanese wax or cork fiber, sugar cane wax, cocoa butter and the like. Alternatively, the inorganic wax may include paraffin, montan, lignite, petrolatum, petrolatum wax or microcrystalline wax, ceresin, or ozokerite. Examples of synthetic waxes used include linear esters such as myristyl myristate, a reaction product of a polyethylene wax obtained by Fischer-Tropsch synthesis and a saturated C10-C40 carboxylic acid and a saturated C10-C40 alcohol. Other waxes used include calcium lanolate or stearate or hardened coconut oil and the like.
상기 화장품 조성물에는 식물성 또는 동물성 오일의 개질 또는 비개질 오일이 포함될 수 있다. 예를 들어, 스위트 아몬드오일, 아보카도 오일, 캐스터 오일올리브 오일, 조조바 오일, 해바라기 오일, 밀눈 오일, 참깨 오일, 땅콩 오일, 포도씨 오일, 두유, 홍화 오일, 코코넛 오일, 메이즈 오일, 헤즐넛 오일, 카라이트 버터, 팜 오일, 살구씨 오일, 칼로필럼 오일 또는 퍼하이드로스쿠알렌 등이 있다. 더욱이, 오일 상은 액체 파라핀, 액체 페트로라툼 등과 같은 무기 오일일 수 있다. 상기 오일은 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 2-에틸헥실 팔미테이트, 페니실린 오일(스테아릴 옥토네이트)와 같은 지방산 에스테르, 올레, 팔미트, 스테아르, 베헨, 리놀레, 라놀레산과 같은 불포화 지방산 또는 C8-C16의 이소파라핀과 같은 휘발성 또는 비휘발성 이소파라핀 등일 수 있다.The cosmetic composition may include modified or unmodified oils of vegetable or animal oils. For example, sweet almond oil, avocado oil, castor oil olive oil, jojoba oil, sunflower oil, turmeric oil, sesame oil, peanut oil, grape seed oil, soy milk, safflower oil, coconut oil, maze oil, hazelnut oil, Butter, palm oil, apricot seed oil, calf pill oil or perhydro-squalene. Furthermore, the oil phase may be an inorganic oil such as liquid paraffin, liquid petrolatum, and the like. The oil may be selected from the group consisting of fatty acid esters such as isopropyl myristate, isopropyl palmitate, 2-ethylhexyl palmitate, penicillin oil (stearyloctonate), unsaturated fatty acids such as oleate, palmitate, stearate, behen, linoleic, Volatile or non-volatile isoparaffins such as fatty acids or C8-C16 isoparaffins.
더욱이, 상기 오일은 올레일 알콜, 세틸 알콜 및 스테아릴 알콜과 같은 C12-C18의 지방 알콜 등일 수 있다.Moreover, the oil may be C12-C18 fatty alcohols such as oleyl alcohol, cetyl alcohol and stearyl alcohol.
본 발명의 유화된 조성물은 에멀션으로 제공된다면, 오일 상 및 수성 상을 포함한다. 상기 오일 상은 조성물 총 중량에 대하여 약 1 내지 약 75 중량%의 범위로 제공되는 것이 좋으며, 더 좋기로는 약 5 내지 약 60 중량%, 가장 좋기로는 약 40 내지 약 60 중량%로 제공되는 것이 바람직하다.The emulsified composition of the present invention includes an oil phase and an aqueous phase, if provided as an emulsion. The oil phase is preferably provided in a range of about 1 to about 75 wt%, more preferably about 5 to about 60 wt%, and most preferably about 40 to about 60 wt%, based on the total weight of the composition desirable.
본 발명의 의약 조성물에 사용된 담체는 약제학적으로 허용되는 담체, 보조제 및 비히클을 포함하며 총괄적으로 "약제학적으로 허용되는 담체" 라고 한다. 본 발명의 의약조성물에 사용될 수 있는 약제학적으로 허용되는 담체로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 이온 교환, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질(예, 사람 혈청 알부민), 완충 물질(예, 여러 인산염, 글리신, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분적인 글리세라이드 혼합물), 물, 염 또는 전해질(예, 프로타민 설페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨 및 아연 염), 교질성 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로즈-계 기질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카르복시메틸셀룰로즈, 폴리아릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-차단 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모지 등이 포함된다.The carrier used in the pharmaceutical composition of the present invention includes a pharmaceutically acceptable carrier, adjuvant and vehicle and is collectively referred to as a "pharmaceutically acceptable carrier ". Pharmaceutically acceptable carriers that can be used in the medicinal compositions of the present invention include, but are not limited to, ion exchange, alumina, aluminum stearate, lecithin, serum proteins (e.g., human serum albumin), buffer substances Water, salts or electrolytes (such as protamine sulfate, disodium hydrogen phosphate, potassium hydrogen phosphate, sodium chloride and zinc salts), colloidal silicas such as glycerin, sorbic acid, potassium sorbate, partial glyceride mixtures of saturated vegetable fatty acids, , Magnesium trisilicate, polyvinyl pyrrolidone, cellulose-based substrate, polyethylene glycol, sodium carboxymethyl cellulose, polyarylate, wax, polyethylene-polyoxypropylene-barrier polymer, polyethylene glycol and wool.
본 발명에 따른 의약 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함된다.The route of administration of the pharmaceutical composition according to the present invention may be, but is not limited to, oral, intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, intraperitoneal, intranasal, Sublingual or rectal.
본 발명의 의약 조성물의 투여 방법으로는 경구 및 비경구 투여가 바람직하다. 본원에 사용된 용어 "비경구"는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액낭내, 흉골내, 경막내, 병소내 및 두개골내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. The method of administration of the pharmaceutical composition of the present invention is preferably oral or parenteral administration. The term "parenteral" as used herein includes subcutaneous, intradermal, intravenous, intramuscular, intraarticular, intrasynovial, intrasternal, intrathecal, intralesional and intracranial injection or infusion techniques.
본 발명의 의약조성물은 멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액으로서 멸균 주사용 제제의 형태일 수 있다. 이 현탁액은 적합한 분산제 또는 습윤제(예, 트윈 80) 및 현탁화제를 사용하여 본 분야에 공지된 기술에 따라 제형될 수 있다. 본 발명의 멸균 주사용 제제는 또한 무독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매중의 멸균 주사용액 또는 현탁액(예, 1,3-부탄디올중의 용액)일 수 있다. 허용적으로 사용될 수 있는 비히클 및 용매로는 만니톨, 물, 링겔 용액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균 불휘발성 오일이 통상적으로 용매 또는 현탁화 매질로서 사용된다. 이러한 목적을 위해, 합성 모노 또는 디글리세라이드를 포함하여 자극성이 적은 어떠한 불휘발성 오일도 사용할 수 있다. 올레산 및 이의 글리세라이드 유도체와 같은 지방산이 약제학적으로 허용되는 천연 오일(예, 올리브유 또는 피마자유), 특히 이들의 폴리옥시에틸화된 것과 마찬가지로 주사 제제에 유용하다.The pharmaceutical composition of the present invention may be in the form of a sterile injectable preparation as a sterile injectable aqueous or oleaginous suspension. The suspension may be formulated according to techniques known in the art using suitable dispersing or wetting agents (e. G., Tween 80) and suspending agents. The sterile injectable preparation of the present invention may also be a sterile injectable solution or suspension in a non-toxic parenterally acceptable diluent or solvent (e.g., a solution in 1,3-butanediol). Vehicles and solvents that may be used tolerably include mannitol, water, a Ringgel solution and an isotonic sodium chloride solution. In addition, sterile, nonvolatile oils are conventionally employed as a solvent or suspending medium. For this purpose, any non-volatile oil with low irritation, including synthetic mono- or diglycerides, may be used. Fatty acids such as oleic acid and glyceride derivatives thereof are useful in injection formulations as well as pharmaceutically acceptable natural oils (e.g., olive oil or castor oil), especially those polyoxyethylated.
본 발명의 의약조성물은 이들로 한정되는 것은 아니지만 캡슐, 정제 및 수성 현탁액 및 용액을 포함하여 경구적으로 허용되는 어떠한 용량형으로도 경구 투여될 수 있다. 경구용 정제의 경우, 흔히 사용되는 담체로는 락토즈 및 옥수수 전분이 포함된다. 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제가 또한 전형적으로 첨가된다. 캡슐형으로 경구 투여하는 경우 유용한 희석제로는 락토즈 및 건조된 옥수수 전분이 포함된다. 수성 현탁액이 경구 투여될 때 활성 성분은 유화제 및 현탁화제와 배합된다. 필요한 경우, 감미제 및/또는 풍미제 및/또는 착색제가 첨가될 수 있다.The pharmaceutical compositions of the present invention may be orally administered in any dosage form orally acceptable, including, but not limited to, capsules, tablets, and aqueous suspensions and solutions. In the case of oral tablets, commonly used carriers include lactose and corn starch. Lubricants such as magnesium stearate are also typically added. For oral administration in a capsule form, useful diluents include lactose and dried corn starch. When the aqueous suspension is orally administered, the active ingredient is combined with an emulsifying agent and a suspending agent. If desired, sweetening and / or flavoring agents and / or coloring agents may be added.
본 발명의 의약조성물은 또한 직장 투여를 위한 좌제의 형태로 투여될 수 있다. 이들 조성물은 본 발명의 화합물을 실온에서 고형이지만 직장 온도에서는 액상인 적합한 비자극성 부형제와 혼합하여 제조할 수 있다. 이러한 물질로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 코코아 버터, 밀랍 및 폴리에틸렌 글리콜이 포함된다.The pharmaceutical compositions of the present invention may also be administered in the form of suppositories for rectal administration. These compositions may be prepared by mixing the compounds of the invention with suitable non-polar excipients which are solid at room temperature but liquid at rectal temperature. Such materials include, but are not limited to, cocoa butter, beeswax, and polyethylene glycols.
본 발명에 따른 의약조성물의 경구 투여는 목적하는 치료가 국소 적용으로 접근이 용이한 부위 또는 기관과 관련이 있을 때 특히 유용하다. 피부에 국소적으로 적용하는 경우, 의약조성물은 담체에 현탁 또는 용해된 활성 성분을 함유한 적합한 연고로 제형되어야 한다. 본 발명의 화합물을 국소 투여하기 위한 담체로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 광유, 유동 파라핀, 백색 와셀린, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화 왁스 및 물이 포함된다. 다른 방도로서, 의약조성물은 담체에 현탁 또는 용해된 활성 화합물을 함유한 적합한 로션 또는 크림으로 제형될 수 있다. 적합한 담체로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 광유, 솔비탄 모노스테아레이트, 폴리솔베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴 알코올, 2-옥틸도데카놀, 벤질 알코올 및 물이 포함된다. 본 발명의 의약조성물은 또한 직장 좌제에 의해 또한 적합한 관장제로 하부 장관으로 국소 적용할 수 있다. 국소 적용된 경피 패치가 또한 본 발명에 포함된다.Oral administration of a pharmaceutical composition according to the present invention is particularly useful when the desired treatment is associated with a site or organ that is accessible by topical application. When topically applied to the skin, the pharmaceutical composition should be formulated with a suitable ointment containing the active ingredient suspended or dissolved in the carrier. Carriers for topical administration of the compounds of the present invention include, but are not limited to, mineral oil, liquid paraffin, white petrolatum, propylene glycol, polyoxyethylene, polyoxypropylene compounds, emulsifying wax and water. Alternatively, the pharmaceutical composition may be formulated with a suitable lotion or cream containing the active compound suspended or dissolved in a carrier. Suitable carriers include, but are not limited to, mineral oil, sorbitan monostearate, polysorbate 60, cetyl ester wax, cetearyl alcohol, 2-octyldodecanol, benzyl alcohol and water. The pharmaceutical compositions of the present invention may also be topically applied by rectal suppositories to the lower intestinal tract with a suitable enema. Topically applied transdermal patches are also included in the present invention.
본 발명의 의약조성물은 비내 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여할 수 있다. 이러한 조성물은 약제의 분야에 잘 알려진 기술에 따라 제조하며 벤질 알코올 또는 다른 적합한 보존제, 생체이용률을 증강시키기 위한 흡수 촉진제, 플루오로카본 및/또는 기타 본 분야에 알려진 가용화제 또는 분산제를 사용하여 염수중의 용액으로서 제조할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention can be administered by inhalation aerosol or by inhalation. Such compositions are prepared according to techniques well known in the art of pharmacy and can be prepared using benzyl alcohol or other suitable preservatives, absorption enhancers to enhance bioavailability, fluorocarbons and / or other solubilizing or dispersing agents known in the art, Solution.
특정 환자에 대한 특정 유효량은 사용된 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 규정식, 투여시간, 투여경로, 배출율, 약물 배합 및 예방 또는 치료될 특정 질환의 중증을 포함한 여러 요인에 따라 변할 수 있음은 이해될 것이다. 본 발명에 따른 의약 조성물은 환제, 당의정, 캡슐, 액제, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁제로 제형될 수 있다. The specific effective amount for a particular patient will depend on a variety of factors including the activity of the particular compound employed, age, body weight, general health, sex, diet, time of administration, route of administration, rate of excretion, drug combination and the severity of the particular disease It will be appreciated that it can vary. The pharmaceutical composition according to the present invention can be formulated into pills, dragees, capsules, solutions, gels, syrups, slurries, suspensions.
본 발명에 따른 의약 조성물은 어류의 피하세포에 투입할 경우 새낭 또는 소화관에 투여할 수 있다. 주사는 근육조직내의 근육세포 또는 다른 세포에 주사할 수 있으며 복강내의 내장세포에 주사할 수 있다.The pharmaceutical composition according to the present invention can be administered to the dalsa or digestive tract when it is injected into subcutaneous cells of a fish. Injection can be injected into muscle cells or other cells within the muscle tissue and injected into the intestinal cells in the abdominal cavity.
바람직한 양태로서, 구강내 투여를 위한 의약 조성물은 고체상의 부형제와 함께 활성 성분을 혼합함으로써 제조할 수 있으며 정제 또는 당의정 형태로 제조하기 위해 과립형태로 제조할 수 있다. 적합한 부형제로는 락토스, 수크로스, 만니톨 및 소비톨과 같은 슈가 형태 또는 옥수수, 밀가루, 쌀, 감자 또는 다른 식물로부터 전분, 메틸 셀룰로스, 하이드로시프로필메틸-셀룰로스 또는 나트륨 카복시메틸세룰로스와 같은 세룰로스, 아라빅 검, 타가칸쓰 검을 포함하는 검류와 같은 카보하이드레이트 또는 젤라틴, 콜라겐과 같은 단백질 필러를 사용할 수 있다. 필요한 경우에는, 교차결합된 폴리비닐피롤리돈, 아가 및 알긴산 또는 나트륨 알긴산과 같은 각각의 염 형태의 붕해제 또는 용해제를 첨가할 수 있다.In a preferred embodiment, the pharmaceutical compositions for oral administration can be prepared by mixing the active ingredients together with solid excipients and may be prepared in the form of granules for preparation in the form of tablets or dragees. Suitable excipients include sugars such as lactose, sucrose, mannitol and sorbitol or starches from corn, wheat flour, rice, potato or other plants, cellulose such as methylcellulose, hydrocyclopropylmethylcellulose or sodium carboxymethylcellulose , Arabic gum, carbohydrates such as gum including Tagakans gum, or protein fillers such as gelatin and collagen. If necessary, disintegrating or solubilizing agents in the form of respective salts such as cross-linked polyvinylpyrrolidone, agar and alginic acid or sodium alginic acid may be added.
바람직한 양태로서, 비경구적 투여의 경우 본 발명의 의약 조성물은 수용성 용액으로 제조할 수 있다. 바람직하게는, 한스 용액 (Hank's solution), 링거 용액 (Ringer's solution) 또는 물리적으로 완충된 염수와 같은 물리적으로 적절한 완충용액을 사용할 수 있다. 수용성 주입 (injection) 현탁액은 소디움 카복시메틸 셀루로스, 솔비톨 또는 덱스트란과 같이 현탁액의 점도를 증가시킬 수 있는 기질을 첨가할 수 있다. 덧붙여서, 활성 성분의 현탁액은 적합한 유질의 주입 현탁액 (oily injection suspensions)으로 제조될 수 있다. 적합한 친지성 용매 또는 담체는 참기름과 같은 지방산 또는 에틸 올레이트, 트리글리세라이드 또는 리포솜과 같은 합성 지방산 에스테르를 포함한다. 복수양이온성 비지질 아미노 폴리머(polycationic amino polymers)도 운반체로서 사용될 수 있다. 임의로, 현탁액은 화합물의 용해도를 증가시키고 고농도의 용액을 제조하기 위해 적합한 안정화제 또는 약제를 사용할 수 있다.In a preferred embodiment, for parenteral administration, the pharmaceutical composition of the present invention can be prepared as a water-soluble solution. Preferably, physically suitable buffer solutions such as Hank's solution, Ringer's solution or physically buffered saline can be used. Water-soluble injection suspensions may contain a substrate capable of increasing the viscosity of the suspension, such as sodium carboxymethylcellulose, sorbitol or dextran. In addition, suspensions of the active ingredient may be prepared in suitable oily injection suspensions. Suitable lipophilic solvents or carriers include fatty acids such as sesame oil or synthetic fatty acid esters such as ethyl oleate, triglycerides or liposomes. Polycationic amino polymers can also be used as carriers. Optionally, the suspension may employ a suitable stabilizing agent or agent to increase the solubility of the compound and to produce a high concentration of solution.
이상과 같은 안정화제, 완충제 혹은 흡착방지제를 가하여 본 발명 제제를 조제할 수 있지만, 특히 의료용 또는 동물약용 주사제로서 이용하는 경우는 삼투압비로서 허용되는 삼투압비는 1 내지 2가 좋다. 삼투압비는 약제화시에 염화나트륨의 증감에 의해 조제할 수 있다.
The formulation of the present invention can be prepared by adding a stabilizer, a buffer or an anti-adsorption agent as described above. In particular, when used as an injection for medical use or an animal medicine, an osmotic pressure ratio of 1 to 2 is acceptable as an osmotic pressure ratio. The osmotic pressure ratio can be adjusted by increasing or decreasing sodium chloride during the chemical reduction.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for illustrating the present invention and that the scope of the present invention is not construed as being limited by these embodiments.
효소처리 과정없이 감초 추출물 제조Manufacture of licorice extract without enzymatic treatment
감초 100 g을 50% 에탄올 2000 ㎖를 사용하여 4시간동안 추출하였다. 상기 단계에서 추출된 감초 추출물을 200 mesh 체로 여과하였다. 그 후 여과된 감초추출물을 증류하여 농축하고 추출물을 수득하였다.
100 g of licorice was extracted with 2000 ml of 50% ethanol for 4 hours. The licorice extract extracted in the above step was filtered with a 200-mesh sieve. The filtered licorice extract was then distilled and concentrated to obtain an extract.
효소처리 과정을 포함한 감초 추출물 제조Manufacture of licorice extract including enzymatic treatment
감초 100 g을 50% 에탄올 2000 ㎖를 사용하여 4시간 동안 추출하였다. 상기 단계에서 추출된 감초 추출물을 200 mesh 체로 여과하였다. 그 후 여과된 감초 추출물의 중량 대비 0.05%(w/v)만큼 펩티다제(peptidase)를 넣어주었다. 상기 효소가 첨가된 감초 추출물을 항온수조(water bath)에서 24시간 동안 효소 활성의 최적 온도인 50 ℃를 유지하며 반응 시켰다. 반응 후 3000 rpm에서 10분 간 원심분리를 통해 상등액과 침전물을 분리하였고, 분리된 추출물 각각을 증류하여 농축하고 추출물을 수득하였다.
100 g of licorice was extracted with 2000 ml of 50% ethanol for 4 hours. The licorice extract extracted in the above step was filtered with a 200-mesh sieve. Then, peptidase was added by 0.05% (w / v) to the weight of the filtered licorice extract. The licorice extract to which the enzyme was added was reacted in a water bath for 24 hours while maintaining the enzyme activity at an optimum temperature of 50 ° C. After the reaction, the supernatant and the precipitate were separated by centrifugation at 3000 rpm for 10 minutes. Each of the separated extracts was distilled and concentrated to obtain an extract.
감초 추출물의 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans of licorice extract Streptococcus mutansStreptococcus mutans )의 바이오필름 형성 억제 효과 분석) Inhibition of biofilm formation
상기의 방법으로 제조된 추출물 중에 효소처리를 하지 않은 감초 추출물을 이용하여 스트렙토코커스 뮤탄스에서 실험해 본 결과, 바이오필름 형성 억제효과가 있는 결과를 보였으나, 세포 성장은 농도가 짙어짐에 따라 감소한 것을 확인할 수 있었다(도 1). As a result of the experiment using Streptococcus mutans using the licorice extract without the enzyme treatment, the effect of inhibiting the biofilm formation was shown in the extract prepared by the above method, but the cell growth was decreased as the concentration was increased (Fig. 1).
두 번째로 펩티다제를 처리한 감초 추출물을 이용하여 실험해 본 결과, 효소처리를 하지 않은 감초 추출물에 비해 낮은 농도에서도 바이오필름의 형성이 빠르게 억제되는 것을 확인할 수 있었고, 세포의 성장은 농도가 짙어짐에도 유지되는 것을 확인할 수 있었다(도 2).As a result of the experiment using the peptidase - treated licorice extract, it was confirmed that the formation of biofilm was inhibited at a lower concentration than the untreated licorice extract, (Fig. 2).
세 번째로는 베타 글루코시다제를 처리한 감초 추출물을 이용하여 실험해 본 결과, 펩티다제를 처리했을 때와 마찬가지로 세포의 성장은 유지된 채 바이오필름의 형성이 효소처리를 하지 않은 감초 추출물에 비해 빠르게 억제되는 것을 확인할 수 있었다(도 3). As a result of experiments using beta-glucosidase-treated licorice extract, it was found that the growth of the cells was maintained as in the case of peptidase treatment and the formation of the biofilm was inhibited by the enzyme-free licorice extract (Fig. 3).
따라서 50% 에탄올 감초 추출물에 효소를 처리하면 세포의 성장은 그대로 유지한 채 바이오필름의 형성이 억제되는 것을 확인하였다.
Therefore, it was confirmed that the treatment of 50% ethanolic licorice extract inhibited the formation of biofilm while maintaining cell growth.
감초 추출물의 잔토모나스 오리재(Licorice extract of Zanthomonas oryzae Xanthomonas oryzaeXanthomonas oryzae )의 바이오필름 형성 억제 효과 분석) Inhibition of biofilm formation
스트렙토코커스 뮤탄스 이외의 균주에도 동일한 효과가 나타나는지 확인하기 위해, 잔토모나스 오리재 균주에서 실시예 3과 같은 방법으로 실험을 진행하였다. 첫 번째로 효소처리를 하지 않은 감초 추출물을 이용하여 실험해 본 결과, 바이오 필름 형성 억제효과가 있는 결과를 보였으나, 세포 성장은 농도가 짙어짐에 따라 감소한 것을 확인할 수 있었다(도 4). In order to confirm whether the same effect was exhibited in strains other than Streptococcus mutans, the experiment was carried out in the same manner as in Example 3 in the strain of Zanthomonas duck. As a result of the experiment using the licorice extract without the enzyme treatment, it was found that the biofilm formation inhibitory effect was shown, but the cell growth was decreased as the concentration was increased (FIG. 4).
두 번째로 펩티다제를 처리한 감초 추출물을 이용하여 실험해 본 결과, 효소처리를 하지 않은 감초 추출물에 비해 낮은 농도에서도 바이오필름의 형성이 빠르게 억제되는 것을 확인할 수 있었고, 세포의 성장은 농도가 짙어짐에도 유지되는 것을 확인할 수 있었다(도 5).As a result of the experiment using the peptidase - treated licorice extract, it was confirmed that the formation of biofilm was inhibited at a lower concentration than the untreated licorice extract, (Fig. 5).
세 번째로는 베타 글루코시다제를 처리한 감초 추출물을 이용하여 실험해 본 결과, 펩티다제를 처리했을 때와 마찬가지로 세포의 성장은 유지된 채 바이오필름의 형성이 효소처리를 하지 않은 감초 추출물에 비해 빠르게 억제되는 것을 확인할 수 있었다(도 6).As a result of experiments using beta-glucosidase-treated licorice extract, it was found that the growth of the cells was maintained as in the case of peptidase treatment and the formation of the biofilm was inhibited by the enzyme-free licorice extract (Fig. 6).
따라서 50% 에탄올 감초 추출물에 효소를 처리하면 세포의 성장은 그대로 유지한 채 바이오필름의 형성이 억제되는 것을 확인하였다.
Therefore, it was confirmed that the treatment of 50% ethanolic licorice extract inhibited the formation of biofilm while maintaining cell growth.
감초 추출물의 예르시니아 엔테로콜리티카(Licorice extract, Yersinia enterocolitica ( Yersinia enterocoliticaYersinia enterocolitica )의 바이오필름 형성 억제 효과 분석) Inhibition of biofilm formation
이번에는 균주를 바꿔 예르시니아 엔테로콜리티카 균주에서 실시예 3과 같은 방법으로 실험을 진행하였다. 첫 번째로 효소처리를 하지 않은 감초 추출물을 이용하여 실험해 본 결과, 바이오 필름 형성 억제효과가 있는 결과를 보였으나, 세포 성장은 농도가 짙어짐에 따라 감소한 것을 확인할 수 있었다(도 7). The experiment was carried out in the same manner as in Example 3 except that the strain was changed to Yersinia enterocolitica strain. As a result of the experiment using the licorice extract without the enzyme treatment, it was found that the biofilm formation inhibitory effect was shown, but the cell growth was decreased as the concentration was increased (FIG. 7).
두 번째로 펩티다제를 처리한 감초 추출물을 이용하여 실험해 본 결과, 상기 두 균주보다는 느리지만 효소처리를 하지 않은 감초 추출물에 비해 낮은 농도에서도 바이오필름의 형성이 빠르게 억제되는 것을 확인할 수 있었고, 세포의 성장은 농도가 짙어짐에도 유지되는 것을 확인할 수 있었다(도 8).As a result of the experiment using the peptidase-treated licorice extract, it was confirmed that the formation of the biofilm was inhibited even at a lower concentration than that of the licorice extract which was slower than the two strains but not subjected to the enzyme treatment. It was confirmed that the cell growth was maintained even when the concentration was increased (Fig. 8).
세 번째로는 베타 글루코시다제를 처리한 감초 추출물을 이용하여 실험해 본 결과, 효소처리를 하지 않은 감초 추출물과 비슷한 경향으로 바이오필름의 억제와 세포 성장을 확인할 수 있었다(도 9).As a result of experiments using the beta-glucosidase-treated licorice extract, the biofilm inhibition and cell growth could be confirmed with a tendency similar to that of the licorice extract without enzyme treatment (FIG. 9).
따라서 50% 에탄올 감초 추출물에 펩티다제 효소를 처리하면 세포의 성장은 그대로 유지한 채 바이오필름의 형성이 억제되는 것을 확인하였다. 반면에 베타 글루코시다제를 처리한 경우에서는 그 효과를 확인할 수 없었다.
Therefore, it was confirmed that the peptidase enzyme treatment of 50% ethanolic licorice extract inhibited the formation of biofilm while maintaining cell growth. On the other hand, the effect of beta glucosidase treatment could not be confirmed.
이상으로, 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to specific embodiments thereof, those skilled in the art will appreciate that such specific embodiments are merely preferred embodiments, It will be obvious. It is therefore intended that the scope of the invention be defined by the claims appended hereto and their equivalents.
Claims (12)
(a) 감초를 용매로 추출하여 감초 용매추출물을 수득하는 단계;
(b) 상기 감초 용매추출물에서 용매를 제거하는 단계; 및
(c) 상기 용매가 제거된 추출물을 효소로 처리하여, 효소처리된 감초추출물을 수득하는 단계.
A method for producing an enzyme-treated licorice extract having the ability to inhibit biofilm formation of microorganisms, comprising the steps of:
(a) extracting licorice with a solvent to obtain a licorice solvent extract;
(b) removing the solvent from the licorice solvent extract; And
(c) treating the extract from which the solvent has been removed with an enzyme to obtain an enzyme-treated licorice extract.
The method according to claim 1, wherein the enzyme is a peptidase or a beta-glucosidase.
The microorganism according to claim 1, wherein the microorganism is selected from the group consisting of Streptococcus mutans , Streptococcus salivarius , Streptococcus gordonii , Lactobacillus acidophilus , Lactobacillus casei Lactobacillus casei , Enterococcus faecalis , Xanthomonas oryzae , and Yersinia enterocolitica . The method according to claim 1, wherein the composition is selected from the group consisting of Lactobacillus casei , Enterococcus faecalis , Xanthomonas oryzae and Yersinia enterocolitica .
The method of claim 1, wherein the solvent is an alcohol.
5. The method of claim 4, wherein the alcohol is ethanol.
A composition for preventing the formation of a biofilm of a microorganism containing an enzyme-treated licorice extract prepared by the method of claim 1 as an active ingredient.
7. The composition of claim 6, wherein the enzyme is a peptidase or a beta-glucosidase.
The microorganism according to claim 6, wherein the microorganism is selected from the group consisting of Streptococcus mutans , Streptococcus salivarius , Streptococcus gordonii , Lactobacillus acidophilus , Lactobacillus casei Wherein the composition is selected from the group consisting of Lactobacillus casei , Enterococcus faecalis , Xanthomonas oryzae , and Yersinia enterocolitica .
7. The composition of claim 6, wherein the extract is extracted with ethanol.
A composition for preventing or treating dental caries or periodontitis comprising an enzyme-treated licorice extract prepared by the method of claim 1 as an active ingredient.
A composition for controlling dry leaf blight of rice, comprising an enzyme-treated licorice extract prepared by the method of claim 1 as an active ingredient.
A method for treating Yersinia enterocolitica selected from the group consisting of acute gastroenteritis, endophthalmitis, sepsis, tuberculous erythema, food poisoning and enteritis, which comprises an enzyme-treated licorice extract prepared by the method of claim 1 as an active ingredient Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
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