KR20140067533A - Composition for anti-diabetes using of citrus fermented by lactice acid bacteria - Google Patents

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Abstract

Disclosed is a composition for anti-diabetes using lactic acid bacteria fermented citrus. Specifically, the composition for anti-diabetes using lactic acid bacteria fermented citrus which clearly shows activities of blood sugar level decrease when administered into laboratory animals in which diabetes is induced by streptozotocin and clearly shows blood sugar level decrease in a glucose tolerance test is disclosed in the present invention.

Description

감귤 유산균 발효물을 이용한 항당뇨 조성물{Composition for Anti-Diabetes Using of Citrus Fermented by Lactice Acid Bacteria} TECHNICAL FIELD The present invention relates to an antidiabetic composition using citrus fermented lactic acid bacteria fermented by fermentation,

본 발명은 감귤 유산균 발효물을 이용한 항당뇨 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to an antidiabetic composition using a citrus lactic acid fermented product.

당뇨병이란 췌장의 β세포에서 분비되는 글루코스 조절 호르몬인 인슐린이 부족하거나 제대로 작용하지 못하여 혈액 속의 혈당이 에너지로 이용되지 않고 혈액 속에 쌓여 고혈당을 유발하고 요중에 당이 검출되는 증상을 말한다. Diabetes is a condition in which insulin in the pancreas is secreted from the β-cells of the pancreas and insufficiency or insufficiency is caused and blood glucose in the blood is not used as energy but accumulated in the blood to cause hyperglycemia and urinary glucose is detected.

당뇨병은 보통 인슐린 의존형 당뇨병(I형 당뇨병)과 인슐린 비의존형 당뇨병(II형 당뇨병)으로 구분된다. 인슐린 의존형 당뇨병은 바이러스 감염 등이 원인이 되어 췌장의 베타세포가 파괴된 결과 인슐린이 분비되지 않아 발병하며, 주로 10 내지 20대의 젊은 연령층에서 발병되기 때문에 소아 당뇨병이라고도 하는데, 인슐린이 외부에서 공급되지 않으면 생명유지가 어렵기 때문에 붙여진 이름이다. 인슐린 비의존형 당뇨병은 췌장의 베타 세포에서 인슐린이 분비되기는 하지만 그 양이 부족하고 그 작용력이 감소하여 발병하며, 주로 30대 이후에 발병하므로 성인형 당뇨병이라고도 한다. 생명유지를 위해서는 외부로부터 인슐린을 반드시 공급할 필요가 없다고 하여 인슐린 비의존형 당뇨병이라 불리고 있지만, 그렇다고 고혈당 치료를 위하여 인슐린 치료가 필요하지 않다는 의미는 아니다. Diabetes is usually divided into insulin-dependent diabetes (type I diabetes) and non-insulin dependent diabetes (type II diabetes). Insulin-dependent diabetes mellitus is caused by viral infection, resulting in the disruption of the beta cells of the pancreas, resulting in insulin secretion, which is mainly caused by a young age group of 10 to 20 years. Therefore, it is called pediatric diabetes, It is a name given because it is difficult to maintain life. Non-insulin-dependent diabetes mellitus is a type of diabetes mellitus that is caused by insulin secretion in the pancreatic beta cells, but it is lacking in its amount and its ability to function diminishes. It is not called insulin non-dependent diabetes because it is not necessary to supply insulin from the outside in order to maintain life, but this does not mean that insulin treatment is not necessary for the treatment of hyperglycemia.

당뇨가 오래 지속되면 포도당이 제대로 체내에 흡수되지 못하여 영양 공급의 불균형으로 인해 각종 대사장애가 발생함에 따라 여러 당뇨 합병증이 발병하게 된다.As long as diabetes is persistent, glucose can not be properly absorbed into the body, resulting in various diabetic complications due to imbalance in nutritional supply, resulting in various diabetic complications.

당뇨 합병증으로서는 신경섬유와 신경 막이 손상되어 발생하는 신경 합병증, 당뇨성 망막증(비증식성 망막증, 증식성 망막증, 당뇨성 백내장), 신부전증, 성기능 장애, 피부질환(알레르기), 고혈압, 동맥 경화증, 뇌졸증(중풍), 심장병(심근경색증, 협심증, 심장마비), 괴저 등을 들 수 있다.Diabetic complications include neurological complications caused by damage to nerve fibers and nerve membranes, diabetic retinopathy (non-proliferative retinopathy, proliferative retinopathy, diabetic cataract), renal failure, sexual dysfunction, skin disease (allergy), hypertension, arteriosclerosis, Stroke), heart disease (myocardial infarction, angina pectoris, heart attack), gangrene, and the like.

당뇨병 치료에는 비구아니드(biguanides), 티아졸리딘디온 (thiazolidinediones), 설포닐우레아(sulfonylureas), 벤조산(benzoic acid) 유도체, α-글루코시다제 저해제(α-glucosidase inhibitor) 등이 사용되고 있으나, 이들 약물을 이용한 당뇨병 치료는 많은 부작용이 따르고 있어, 세계보건기구(WHO)는 당뇨병에 부작용이 적은 천연물의 이용을 적극 추천하고 있다(Grover J.K., Vats. V., Rathi. S.S., Journal of Ethnopharmacology, 73, pp461-470, 2000).For the treatment of diabetes, biguanides, thiazolidinediones, sulfonylureas, benzoic acid derivatives, and? -Glucosidase inhibitors are used. Drug-induced diabetes treatment has many side effects, and the World Health Organization (WHO) strongly recommends the use of natural products with less side effects on diabetes (Grover JK, Vats V., Rathi SS, Journal of Ethnopharmacology, 73 , pp 461-470, 2000).

당뇨병 치료에 효과가 있다고 제안된 천연물로서는 뜸부기 추출물(대한민국 특허 제464815호), 잔나비걸상버섯으로부터 분리한 아플아나산 유도체 화합물(대한민국 특허 제457690호), 헛개나무의 추출물(대한민국 특허 제417287호), 참당귀에서 분리한 다당류(국제공개 제2001-60386호), 반추동물의 담즙(미국특허 제6451355호) 등을 예시할 수 있다.As the natural products proposed to be effective for the treatment of diabetes, there have been reported the extracts of Cucurbitaceae (Korean Patent No. 464815), the phthalic acid derivatives (Korean Patent No. 457690) and the extracts of Hovenia japonica (Korean Patent No. 417287) , Polysaccharides isolated from Angelica gigas Nakai (International Publication No. 2001-60386), and ruminant bile (US Patent No. 6451355).

본 발명도 천연물의 일종인 감귤 유산균 발효물의 항당뇨 효능을 개시한다.
The present invention also discloses the antidiabetic effect of a fermented product of citrus lactic acid bacteria, which is a kind of natural product.

본 발명의 목적은 항당뇨 조성물을 제공하는 데 있다.It is an object of the present invention to provide an anti-diabetic composition.

본 발명의 기타의 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.
Other objects and specific objects of the present invention will be described below.

본 발명자들은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 감귤의 유산균에 의한 발효물이 스트렙토조토신(streptozotocin)으로 당뇨가 유도된 실험동물에 투여될 때 뚜렷하게 혈당 강하 활성을 보이고, 내당능 실험에서도 뚜렷하게 혈당 수치가 감소함을 확인할 수 있었다. As shown in the following Examples and Experimental Examples, the present inventors showed that the fermented product of citrus lactic acid bacteria showed remarkable hypoglycemic activity when administered to streptozotocin-induced diabetic animals, The blood glucose level was significantly decreased.

본 발명은 이러한 실험 결과에 기초하여 제공되는 것으로, 본 발명의 항당뇨 조성물은 (a) 감귤 분쇄물에 유산균의 탄소원과 에너지원을 첨가하여 혼합하는 단계 및 (b) 그 혼합물에 유산균을 접종하여 발효시키는 단계를 통하여 얻어진 감귤 유산균 발효물을 유효성분으로 포함함을 특징으로 한다.The present invention provides an antidiabetic composition comprising (a) adding a carbon source and an energy source of a lactic acid bacterium to citrus pulverized product and mixing them, and (b) inoculating the mixture with a lactic acid bacterium And fermenting the citrus lactic acid bacteria obtained through the fermentation step as an active ingredient.

본 명세서에서 "항당뇨"는 당뇨병의 예방, 치료, 개선 또는 발병 지연을 의미하는 것으로, 구체적으로 인슐린이 생성되지 않거나 인슐린이 부족함으로써 발생하는 고혈당, 요중에 당이 검출되는 등 병리적 증상의 예방, 치료, 개선 또는 이러한 병리적 증상의 발병 지연을 의미한다.In the present specification, "anti-diabetic" means the prevention, treatment, improvement or delay of the onset of diabetes, specifically, prevention of pathological symptoms such as hyperglycemia caused by lack of insulin or lack of insulin, , Treatment, improvement, or delayed onset of such pathological symptoms.

또 본 명세서에서 "당뇨병"이란 전술한 바의 인슐린 의존형 당뇨병과 인슐린 비의존형 당뇨병을 포함하는 의미이며, 나아가 다른 질병 등으로 인하여 췌장이 손상됨에 따라 발생하는 당뇨병 예컨대, 갑상선 기능 항진증, 부신피질 기능 항진증, 성장호르몬 과다증 또는 카테콜라민 과다증에 의한 당뇨병, 임신성 당뇨병을 포함하는 의미이다.In the present specification, "diabetes" is meant to include insulin-dependent diabetes mellitus and non-insulin dependent diabetes mellitus as described above. Further, the term " diabetes mellitus " means diabetes mellitus caused by damage to the pancreas due to other diseases, , Growth hormone hypertrophy or diabetes due to catecholamine hypertrophy, and gestational diabetes mellitus.

또한 본 명세서에서 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.The term "active ingredient" as used herein alone means an ingredient which exhibits the desired activity or which can exhibit activity together with a carrier which is itself inactive.

또한 본 명세서에서 "발효물"은 그 발효 대상인 감귤에 탄소원과 에너지원을 첨가·혼합하고 유산균을 접종하여 배양시켜 얻어진 배양물을 의미한다. 이 배양물은 그대로 이용되거나, 여과 등을 통하여 정제된 형태로 이용되거나 감압농축 및/또는 동결건조시켜 액상 또는 분말상으로 이용되거나, 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 알콜, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 물 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 이용될 수 있다. 추출하여 이용할 경우, 추출 방법에는 특별한 제한이 없는데, 구체적으로 추출 대상(즉 감귤의 유산균 발효물을 말함)을 추출 용매에 침지시키는 방법과 추출 대상을 추출 용매로 증류시키는 방법을 모두 포함한다. 또한 침지를 통한 추출 방법에는 냉침, 가온, 초음파, 환류 등 임의의 방식이 적용될 수 있다. 여기서도 추출물의 의미에는 여과 등을 통하여 정제된 형태의 추출물, 추출 용매가 일부 또는 전부 제거된 액상 또는 분말상의 추출물이 포함된다.In the present specification, the term "fermented product" means a culture obtained by adding a carbon source and an energy source to a citrus fruit to be fermented, mixing and inoculating the lactic acid bacteria. The culture may be used as it is, or it may be used in a purified form through filtration or the like, or may be used in a liquid or powder form by concentration under reduced pressure and / or lyophilization, or an alcohol having 1 to 4 carbon atoms such as methanol, ethanol, acetone, Chloroform, methylene chloride, water or a mixed solvent thereof. When extracted and used, there is no particular limitation on the extraction method. Specifically, the extraction method includes both a method of immersing the object to be extracted (that is, a fermented product of a lactic acid bacteria of citrus fruits) into an extraction solvent and a method of distilling the object to be extracted with an extraction solvent. In addition, any method such as cold-pressing, heating, ultrasonic wave, and reflux may be applied to the extraction method through immersion. Herein, the meaning of the extract includes the purified form of the extract through filtration, and the liquid or powdery extract in which the extraction solvent is partially or completely removed.

또한 본 명세서에서, "유산균"이란 포도당 등 당류를 분해하여 젖산을 생성하는 세균으로서 스트렙토코쿠스속 유산균(Streptococcus sp .), 페디오코쿠스속 유산균(Pediococcus sp .), 류코노스톡속 유산균(Leuconostoc sp .), 락토바실루스속 유산균(Lactobacillus sp .) 및 비피도박테리움속 유산균(Bifidobacterium sp.)를 포함하는 의미이며, 구체적으로는 락토바실러스 델브루에키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 페디오코커스 펜토사세우스(Pediococcus pentosaceus), 페디오코커스 세레비세(Pediococcus cerevisiae), 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 레코노스톡 시트레움(Leuconostoc citreum), 레코노스톡 메센테로이드(Leuconostoc mesenteroides), 비피도박테리움 비피둠(Bifidobacterium bifidum), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus) 등을 의미한다. 바람직하게는 락토바실루스속 유산균(Lactobacillus spp.)을 의미하며, 특히 바람직하게는 아래의 실시예에서 사용된 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) 및/또는 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus)를 의미한다.In the present specification, the term "lactic acid bacteria" means bacteria that decompose saccharides such as glucose to produce lactic acid, such as Streptococcus sp . ), Pediococcus lactic acid bacteria sp . ), Leuconostoc sp. Lactic acid bacteria ( Leuconostoc sp . ), Lactobacillus ( Lactobacillus sp . And Bifidobacterium sp. ) . Specific examples thereof include Lactobacillus delbrueckii , Lactobacillus spp., And Lactobacillus spp. bulgaricus , Lactobacillus < RTI ID = 0.0 > casei), Lactobacillus brevis (Lactobacillus brevis , Lactobacillus < RTI ID = 0.0 > acidophilus , Pediococcus pentosaceus , Pediococcus S. cerevisiae , Lactococcus lactis , < RTI ID = 0.0 > Leuconostoc < citreum), Les Kono Stock mesen steroid (Leuconostoc mesenteroides), Bifidobacterium Bifidobacterium Doom (Bifidobacterium bifidum , Lactobacillus rhamnosus and the like. Preferably Lactobacillus genus of lactic acid bacteria (Lactobacillus spp.), And a means, and particularly preferably is a filler's (Lactobacillus know the Lactobacillus used in the examples below, acidophilus , Lactobacillus < RTI ID = 0.0 > plantarum , Lactobacillus < RTI ID = 0.0 > casei ) and / or Lactobacillus rhamnosus .

또 본 명세서에서, "감귤"은 그것의 종류를 불문하고 분류학상 감귤류에 속하는 과수(즉 쌍떡잎식물 운향목 운향과 감귤나무아과에 속하는 과수)로부터 얻어진 열매로서 정의되는데, 구체적으로는 감귤속, 금감속, 탱자나무속에 속하는 각종의 과수와 이들 3개의 속에서 파생된 과수로부터 얻어진 열매의 총칭으로 정의된다. 따라서 상기 "감귤"의 의미에는 아래 실시예에서 사용된 온주 밀감(Citrus unshiu) 뿐만 아니라 유럽 남부 등지에서 재배되는 시트론(citron), 미국 캘리포니아 등지에서 재배되는 레몬(lemon), 열대 지방 등지에서 재배되는 문단이나 자몽 등의 문단류, 미국의 플로리디 등지에 재배되는 문단의 돌연변이종인 그레이프 프루트(grape fruit), 인도, 이탈리아 등지에서 재배되는 광귤(sour orange), 인도 등 세계 각지에서 재배되는 당귤, 중국이나 우리나라에서 재배되는 유자(柚子), 하귤, 진귤, 한라봉, 진지향, 천혜향, 당유자 등 우리나라 제주도 등에서 재배되는 감귤, 중국 등에서 재배되는 금감, 기타 탱귤 등이 모두 포함되는 것으로 이해된다. 다만 바람직하게는 성숙과보다는 미성숙과, 특히 온주 밀감의 미성숙과가 바람직한데, 여기서 "미성숙과"란 과피가 녹색인 상태의 과실을 의미한다. 일반적으로 감귤은 과육과 과피가 미분화된 상태에서 분화되어 가는 과정을 거치며 성숙해간다. 과육과 과피가 분화된 후에도 과피는 전체적으로 녹색을 유지하며 과실의 생체량이 증가하는 단계를 거치다가 과실의 생체량의 증가가 정점에 이르면 온도의 변화, 일조량의 변화 등에 의하여 당도가 점차적으로 증가함과 함께 과실의 과피가 부분적으로 담황색을 띠며 성숙해 간다. 이러한 성숙 과정은 과실 전체의 과피가 짙은 담황색을 띠게 되는 완숙과에 이를 때까지 계속되게 된다. 따라서 감귤의 성숙 과정은 (i) 과육과 과피가 분화되기까지의 단계(과실의 과육과 과피가 미분화된 상태로서 서로 결합되어 있는 과실), (ii) 과육과 과피가 분화된 후 과피가 녹색인 상태에서 과실의 생체량이 증가하는 단계 및 (iii) 과실 생체량의 증가가 정점에 이른 후 녹색의 과피가 점차적으로 담황색으로 변해가면서 과피 전체가 담황색을 띠게 되는 단계로 구분해 볼 수 있는데, 상기 "미성숙과"란 상기 (ii) 단계까지의 과실을 의미하며, 바람직하게는 상기 (i) 단계까지의 과실을 의미한다고 할 수 있다. In the present specification, "citrus fruit" is defined as a fruit obtained from a fruit belonging to citrus fruits of any taxonomic class (that is, a fruit belonging to the dicotyledonous fruit tree and the citrus fruit), specifically citrus, gold Deceleration, various fruit trees belonging to the tangerine tree, and fruits obtained from fruit trees derived from these three genera. Therefore, the meaning of the term "citrus" is not limited to citrus unshiu , citron used in the following examples, citron cultivated in southern Europe, lemon cultivated in California, USA, Grape fruit, which is a mutant species of paragraphs cultivated in the US Floridians, such as paragraphs and grapefruits, sour orange cultivated in India and Italy, citrus fruits cultivated all over the world such as India, China And citrus cultivated in Korea such as Jeju Island, China, etc., and other tangerines, which are cultivated in Korea or in Korea, such as yuzu, citrus, jinju, haraabong, However, it is preferable to be immature rather than mature. Especially, the immature part of the mandarin orange is preferable. Here, "immature fruit" In general, citrus fruits mature through the process of differentiation of pulp and perilla. After the differentiation of the flesh and the perilla, the perilla maintains the green as a whole and through the step of increasing the biomass of the fruit, when the increase of the biomass of the fruit reaches the peak, the sugar content gradually increases due to the change of temperature and the change of the amount of sunshine The fruit of the fruit grows partially muddy. This process of maturation continues until the fruit of the whole fruit reaches a mature, deep-pale fruit. Therefore, the process of maturation of citrus fruits is as follows: (i) the stage until the differentiation of the flesh and the perilla (the fruit in which the flesh of the fruit and the perilla are undifferentiated); (ii) And (iii) a step in which green peel gradually turns to light yellow after the peak of the increase in fruit biomass is reached, and the whole of the perianth becomes yellowish in color. In the above-mentioned "immature And "means an error up to the step (ii), preferably the error up to the step (i).

본 명세서에서 특별히 정의되지 아니한 용어는 당업계의 통상적인 의미를 따른다. Terms not specifically defined in this specification follow conventional meanings in the art.

한편 상기 (a) 단계의 유산균의 탄소원과 에너지원은 당업계에 잘 알려져 있고, 따라서 당업계에 알려진 임의의 것을 사용할 수 있는데, 통상은 올리고당, 유당, 포도당, 과당, 설탕, 이들의 혼합물 등이 사용될 것이다. 이러한 탄소원과 에너지원은 의도한 발효 시간, 발효 정도 등을 고려하여 임의의 범위로 첨가될 수 있다. 통상 감귤 분쇄물 100 중량부 기준 3 중량부 내지 30 중량부의 범위로 첨가될 것이다.Meanwhile, the carbon source and the energy source of the lactic acid bacteria in step (a) are well known in the art and thus any of those known in the art can be used. Generally, oligosaccharides, lactose, glucose, fructose, Will be used. These carbon sources and energy sources can be added in an arbitrary range in consideration of the intended fermentation time and degree of fermentation. Usually from 3 parts by weight to 30 parts by weight based on 100 parts by weight of citrus pulverized product.

또 상기 (b)의 발효 단계는 접종된 미생물의 생장이 최대에 이를 때까지 발효시키는 것이 바람직하다. 접종된 미생물이 생장이 최대에 이르는 시점은 발효 온도, 발효 원료(상기 (a) 단계의 혼합물로서, 즉 감귤 분쇄물과 유산균의 탄소원과 에너지원의 혼합물임)의 양, 접종되는 유산균 양 등에 따라 결정될 것이다. 당업자는 그의 통상의 능력 범위 내에서 발효 온도, 발효 원료의 양, 접종되는 유산균 양 등을 고려하여 접종된 미생물의 생장이 최대에 이르는 시점이 어느 시점인가를 결정할 수 있다. 본 발명자의 경험에 의할 때, 아래의 실시예가 보여주듯이 발효 온도가 25~30℃고, 감귤 습식 분쇄물이 50L이고 탄소원이 감귤 분쇄물 기준 5%(w/v)인 경우에 미생물을 5%(v/v)로 접종하였을 때, 접종된 미생물의 생장이 최대에 이르기까지 상온에서 14일 정도가 소요되었다. The fermentation step (b) is preferably carried out until the inoculated microorganism reaches the maximum growth. The time point at which the inoculated microorganism reaches its maximum is determined depending on the fermentation temperature, the amount of the fermentation raw material (mixture of the above-mentioned step (a), that is, the mixture of the citrus crushed material and the carbon source and energy source of the lactic acid bacteria) Will be determined. Those skilled in the art will be able to determine at what point in time the maximum growth of the inoculated microorganisms will take into account, taking into account the fermentation temperature, the amount of fermentation material, the amount of lactic acid bacteria inoculated, and the like within its normal capabilities. According to the present inventors' experience, when the fermentation temperature is 25 to 30 ° C, the citrus wet pulverized product is 50 L, and the carbon source is 5% (w / v) based on the citrus pulverized product, % (v / v), it took 14 days at room temperature until the maximum growth of the inoculated microorganism.

또 상기 (b)의 발효 단계에서 발효 온도는 15℃~45℃의 범위 내에서 이루어질 수 있다. 바람직하게는 20℃~40℃의 범위 내에서 이루어질 수 있다. 발효 온도가 위 범위보다 낮을 경우 발효 속도가 느려질 수 있고 또한 원하지 발효 산물이 생겨날 수 있으며, 발효 온도가 위 범위보다 높을 경우도 발효 미생물의 사멸에 따라 마찬가지로 발효 속도가 느려지거나 원하지 발효 산물이 생겨날 수 있다.In the fermentation step (b), the fermentation temperature may be in the range of 15 ° C to 45 ° C. Preferably in the range of 20 [deg.] C to 40 [deg.] C. If the fermentation temperature is lower than the above range, the fermentation rate may be slowed down and a desired fermentation product may be produced. Even if the fermentation temperature is higher than the above range, the fermentation rate may be slowed down or the desired fermentation product may be produced have.

또 상기 (b)의 발효 단계에서 유산균과 함께 효모, 누룩균, 고초균 및 홍국균 중 하나 이상의 미생물을 함께 접종하여 발효시킬 수도 있다. 이렇게 효모 등을 추가로 접종하여 발효시키는 것은 감귤 유산균 발효물의 항당뇨 활성 등의 기능성을 보강·상승시키기 위한 것이다.In addition, in the fermentation step (b), one or more microorganisms such as yeast, Aspergillus, Bacillus subtilis, and Bacillus subtilis may be inoculated together with lactic acid bacteria. The addition of yeast and the like to ferment is intended to enhance or enhance the functionality of the fermented product of citrus lactic acid bacteria, such as antidiabetic activity.

상기에서 사용가능한 효모는 사카로마이세스 속 효모로서, 예컨대 사카로마이세스 루시(Saccharomyces rouxii), 사카로마이세스 세레비시아에(Saccharomyces cereviciae), 사카로마이세스 오비폴미스(Saccharomyces oviformis), 사카로마이세스 스테이네리(Saccharomyces steineri) 등을 들 수 있으며, 특히 사카로마이세스 세레비시아에를 사용하는 것이 바람직하다. The yeast that can be used in the above is the genus Saccharomyces As yeast, for example, Saccharomyces rouxii), in my process to the three Levy cyano Saccharomyces (Saccharomyces cereviciae), access to the MY Ob pole miss Saccharomyces (Saccharomyces oviformis), a saccharide My process stay Neri (Saccharomyces steineri ), and it is particularly preferable to use Saccharomyces cerevisiae.

또 상기에서 사용가능한 누룩균은 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae), 아스퍼질러스 소제(Aspergillus sojae) 등을 들 수 있으며, 고초균은 청국장, 된장, 치즈 등 식품의 발효에 관여하는 바실러스속 미생물(Bacillus sp.)이면 모두 사용될 수 있는데, 구체적으로 바실러스 섭틸리스(B. subtilis), 바실러스 리크네포르미스(B. lichneformis), 바실러스 메가테리움(B. megaterium), 바실러스 아밀로리퀘파시엔스(B. amyloliquefaciens), 바실러스 낫토(B. natto), 바실러스 안스라시스(B. antharcis), 바실러스렌투스(B. lentus), 바실러스 퍼미러스(B. pumilus), 바실러스 더링지엔시스(B. thuringiensis), 바실러스 알베이(B. alvei), 바실러스 아조토픽산스(B. azotofixans), 바실러스 매세란스(B. macerans), 바실러스 포리믹사(B. polymyxa), 바실러스 파필리에(B. popilliae), 바실러스 코아글란스(B. coagulans), 바실러스 스테아로더모필러스(B. stearothermophilus), 바실러스 파스퇴리(B. pasteurii), 바실러스 패리커스(B. sphaericus), 바실러스 패스티디오서스(B. fastidiosus) 등을 들 수 있다.The usable strains of Aspergillus oryzae include Aspergillus oryzae , Aspergillus and the like sojae), Bacillus subtilis may be used both when the microorganism Bacillus (Bacillus sp.) are involved in the fermentation of soybean, soybean paste, cheese, food, specifically Bacillus subtilis (B. subtilis), Bacillus leak B. lichnerformis , B. megaterium , B. amyloliquefaciens , B. natto , B. antharcis , Bacillus amyloliquefaciens , Bacillus amyloliquefaciens , B. lentus , B. pumilus , B. thuringiensis , B. alvei , B. azotofixans , Bacillus macerans , Bacillus subtilis, (B. macerans), Bacillus Poly miksa (B. polymyxa), Bacillus papil Rie (B. popilliae), Bacillus core posts lance (B. coagulans), Bacillus stearate loader Russ a brush (B. stearothermophilus), Bacillus Pas toeri (B . pasteurii ), Basil B. sphaericus , B. fastidiosus , and the like.

또 상기에서 사용 가능한 홍국균(Monascus sp.)으로서는 모나스쿠스 루버(Monascus ruber), 모나스쿠스 퍼퍼레우스(Monascus purpureus), 모나스쿠스 루버반(Monascus rubervan), 모나스쿠스 풀리기노서스(Monascus fuliginosus), 모나스쿠스 필로수스(Monascus pilosus), 모나스쿠스 안카(Monascus anka), 모나스쿠스 바리케리(Monascus barykery), 모나스쿠스 퍼퓨렌스(Monascus purpurens), 모나스쿠스 알비두스(Monascus albidus Sato) 등을 들 수 있다.Also as honggukgyun (Monascus sp.) Available from the Pseudomonas kusu louver (Monascus ruber , Monascus purpureus , Monascus rubervan , Monascus fuliginosus), Pseudomonas kusu Philo Versus (Monascus pilosus), Pseudomonas kusu Anka (Monascus anka , Monascus barykery , Monascus purpurens , Monascus albidus Sato).

상기 (b) 단계 후에는 숙성 단계가 추가로 포함될 수 있다. 이러한 숙성 단계는 접종된 미생물의 생장이 정지된 후에도 미생물에 의한 발효 산물이 안정화되도록 하기 위한 것인데, 이러한 숙성 단계는 10일 내지 12개월 정도 수행될 수 있다. After the step (b), an aging step may be further included. This aging step is intended to stabilize the fermentation product by the microorganism even after the inoculated microorganism stops growing, and this aging step may be performed for about 10 to 12 months.

또 상기 (b) 단계 후에 살균 단계가 추가로 포함될 수 있다. 이러한 살균 단계는 열 처리, 자외선 방사 등 당업계에 공지된 통상의 방법을 이용하여 수행될 수 있다. In addition, a sterilization step may be further included after the step (b). This sterilization step can be carried out using conventional methods known in the art such as heat treatment, ultraviolet radiation, and the like.

본 발명의 항당뇨 조성물은 그 유효성분을 항당뇨 효과를 나타낼 수 있는 한 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 임의의 양(유효량)으로 포함할 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 60.000 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 항당뇨 효과를 유도할 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.The antidiabetic composition of the present invention may be contained in an arbitrary amount (effective amount) depending on the purpose of use, formulation, compounding, and the like, so long as the effective ingredient can exhibit an anti-diabetic effect. To < RTI ID = 0.0 > 60, 000 < / RTI > Here, "effective amount" refers to the amount of active ingredient capable of inducing an anti-diabetic effect. Such effective amounts can be determined experimentally within the ordinary skill of those skilled in the art.

본 발명의 항당뇨 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 식품 조성물로 파악할 수 있다.The antidiabetic composition of the present invention can be identified as a food composition in a specific embodiment.

본 발명의 항당뇨 조성물이 식품 조성물로 파악될 경우, 식품의 형태는 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구루트 등의 가공 유류, 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 산제, 정제, 캡슐제 등의 건강식품 제제류 등이 될 수 있다.When the antidiabetic composition of the present invention is identified as a food composition, the form of the food may be selected from the group consisting of tea, juice, carbonated beverage, beverage such as ionic beverage, milk processed, processed oil such as root, gum, rice cake, Food products such as cotton, powders, tablets, capsules, and the like.

본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 감미제, 풍미제, 생리활성 성분, 미네랄 등이 포함될 수 있다.The food composition of the present invention may contain sweetening agents, flavoring agents, physiologically active ingredients, minerals and the like in addition to the active ingredients thereof.

감미제는 식품이 적당한 단맛을 나게 하는 양으로 사용될 수 있으며, 천연의 것이거나 합성된 것일 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다. Sweetening agents may be used in an amount that sweetens the food in a suitable manner, and may be natural or synthetic. Preferably, natural sweeteners are used. Examples of natural sweeteners include sugar sweeteners such as corn syrup solids, honey, sucrose, fructose, lactose and maltose.

풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다. Flavors may be used to enhance taste or flavor, both natural and synthetic. Preferably, a natural one is used. When using natural ones, the purpose of nutritional fortification can be performed in addition to the flavor. Examples of natural flavoring agents include those obtained from apples, lemons, citrus fruits, grapes, strawberries, peaches, and the like, or those obtained from green tea leaves, Asiatica, Daegu, Cinnamon, Chrysanthemum leaves and Jasmine. Also, those obtained from ginseng (red ginseng), bamboo shoots, aloe vera, banks and the like can be used. The natural flavoring agent may be a liquid concentrate or a solid form of extract. Synthetic flavors may be used depending on the case, and synthetic flavors such as esters, alcohols, aldehydes, terpenes and the like may be used.

생리 활성 물질로서는 카테킨, 에피카테킨, 갈로가테킨, 에피갈로카테킨 등의 카테킨류나, 레티놀, 아스코르브산, 토코페롤, 칼시페롤, 티아민, 리보플라빈 등의 비타민류 등이 사용될 수 있다.Examples of the physiologically active substance include catechins such as catechin, epicatechin, gallocatechin and epigallocatechin, and vitamins such as retinol, ascorbic acid, tocopherol, calciferol, thiamine and riboflavin.

미네랄로서는 칼슘, 마그네슘, 크롬, 코발트, 구리, 불소화물, 게르마늄, 요오드, 철, 리튬, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 인, 칼륨, 셀레늄, 규소, 나트륨, 황, 바나듐, 아연 등이 사용될 수 있다.As the mineral, calcium, magnesium, chromium, cobalt, copper, fluoride, germanium, iodine, iron, lithium, magnesium, manganese, molybdenum, phosphorus, potassium, selenium, silicon, sodium, sulfur, vanadium and zinc can be used.

또한 본 발명의 식품 조성물은 상기 감미제 등 이외에도 필요에 따라 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등을 포함할 수 있다. In addition, the food composition of the present invention may contain preservatives, emulsifiers, acidifiers, thickeners and the like as needed in addition to the above sweeteners.

이러한 보존제, 유화제 등은 그것이 첨가되는 용도를 달성할 수 있는 한 극미량으로 첨가되어 사용되는 것이 바람직하다. 극미량이란 수치적으로 표현할 때 식품 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.0005중량% 내지 약 0.5중량% 범위를 의미한다.Such preservatives, emulsifiers and the like are preferably added in a very small amount as long as they can attain an application to which they are added. The term " trace amount " means, when expressed numerically, in the range of 0.0005% by weight to about 0.5% by weight based on the total weight of the food composition.

사용될 수 있는 보존제로서는 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등을 들 수 있다. Preservatives that can be used include calcium sorbate, sodium sorbate, potassium sorbate, calcium benzoate, sodium benzoate, potassium benzoate, and EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid).

사용될 수 있는 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있다.Examples of the emulsifier which can be used include acacia gum, carboxymethyl cellulose, xanthan gum, pectin and the like.

사용될 수 있는 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등을 들 수 있다. 이러한 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다.Examples of the acidulant that can be used include acid, malic acid, fumaric acid, adipic acid, phosphoric acid, gluconic acid, tartaric acid, ascorbic acid, acetic acid, and phosphoric acid. Such an acidulant may be added so that the food composition has a proper acidity for the purpose of inhibiting the growth of microorganisms other than the purpose of enhancing the taste.

사용될 수 있는 점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔 형성제, 팽화제 등을 들 수 있다. Agents that may be used include suspending agents, sedimentation agents, gel formers, bulking agents and the like.

본 발명의 항당뇨 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서 약제학적 조성물로 파악될 수 있다.The antidiabetic composition of the present invention may be identified as a pharmaceutical composition in another specific embodiment.

본 발명의 약제학적 조성물은 그 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 등을 포함하여, 국소형 제형 예컨대 크림, 로션, 연고(반고형의 외용약), 마이크로로에멀젼, 젤, 페이스트, 경피제제(TTS)(예컨대 패치제, 붕대 등) 등으로 제조될 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may be formulated into a wide variety of dosage forms, including pharmaceutically acceptable carriers, excipients and the like, in addition to the active ingredient, and may be formulated into a wide variety of preparations such as creams, lotions, ointments (semi-solid external medicine) (TTS) (e.g., patches, bandages, etc.), and the like.

상기에서 "약제학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다.The term "pharmaceutically acceptable" as used herein means that the application (prescribing) subject does not have the above-mentioned toxicity that is adaptable without inhibiting the activity of the active ingredient.

약제학적으로 허용되는 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 전분(예컨대 옥수수 전분, 감자 전분 등), 셀룰로오스, 그것의 유도체(예컨대 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 등), 맥아, 젤라틴, 탈크, 고체 윤활제(예컨대 스테아르산, 스테아르산 마그네슘 등), 황산 칼슘, 식물성 기름(예컨대 땅콩 기름, 면실유, 참기름, 올리브유 등), 폴리올(예컨대 프로필렌 글리콜, 글리세린 등), 알긴산 등을 들 수 있으며 이러한 담체는 본 발명의 약제학적 조성물의 제형에 따라 적당한 것을 하나 이상 선택하여 사용할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 적합한 담체와 제제에 대해서는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)]을 참조할 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 유화제(예컨대 TWEENS), 습윤제(예컨대 라우릴 황산 나트륨), 착색제, 풍미제, 안정화제, 보존제, 물, 식염수, 인산염 완충 용액 등을 추가로 포함할 수 있다. Examples of pharmaceutically acceptable carriers include lactose, glucose, sucrose, starch (e.g. corn starch, potato starch, etc.), cellulose, derivatives thereof (e.g. sodium carboxymethylcellulose, ethylcellulose, etc.), malt, gelatin, talc, (E.g., peanut oil, cottonseed oil, sesame oil, olive oil, etc.), polyols (e.g., propylene glycol, glycerin and the like), alginic acid, and the like. Depending on the formulation of the pharmaceutical composition of the present invention, one or more suitable ones may be selected and used. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and formulations are described in Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995). The pharmaceutical composition of the present invention may further comprise an emulsifier (e.g., TWEENS), a wetting agent (e.g., sodium lauryl sulfate), a coloring agent, a flavoring agent, a stabilizer, a preservative, water, saline, a phosphate buffer solution and the like.

부형제도 본 발명의 약제학적 조성물의 제형에 따라 적합한 것을 선택하여 사용할 수 있는데, 예컨대 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 히드로프로필메틸셀룰로오스, 알긴산 나트륨, 폴리비닐피롤리돈 등의 현탁제나 분산제 등을 들 수 있다. The excipient may be selected according to the formulation of the pharmaceutical composition of the present invention. For example, suspending agents such as sodium carboxymethyl cellulose, methyl cellulose, hydropropyl methyl cellulose, sodium alginate, polyvinyl pyrrolidone, .

본 발명의 약제학적 조성물은 그 1일 투여량이 통상 0.001 ~ 150 mg/kg 체중 범위이고, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 본 발명의 약제학적 조성물의 투여량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중, 환자의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되는 것이므로 상기 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 아니 된다.
The daily dose of the pharmaceutical composition of the present invention is usually 0.001 to 150 mg / kg body weight, and may be administered once or several times. However, since the dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is determined in view of various related factors such as route of administration, age, sex, weight, and patient's severity of the patient, the dose is limited in any aspect to the scope of the present invention Should not be understood to be.

전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 감귤 유산균 발효물을 이용한 항당뇨 조성물을 제공할 수 있다. As described above, according to the present invention, an antidiabetic composition using the fermented product of citrus lactic acid bacteria can be provided.

본 발명의 항당뇨 조성물은 식품 또는 약품으로 제품화될 수 있다.
The antidiabetic composition of the present invention can be commercialized as food or medicine.

도 1은 실험 기간인 6주 동안 마우스 혈당 수치의 변화를 나타낸 결과이다.
도 2는 실험 종료 전 12시간 절식시킨 마우스 복강 내에 5% 포도당을 2g/kg 용량으로 투여하고 혈당 수치 변화를 관찰한 결과이다.
도 3은 실험 종료 후의 마우스 췌장조직의 면역조직화학적 염색 사진이다.
FIG. 1 shows the change in mouse blood glucose level during the experimental period of 6 weeks.
FIG. 2 shows the result of administering 5% glucose in a dose of 2 g / kg in the mouse abdominal cavity fasted for 12 hours before the end of the experiment and observing changes in blood glucose level.
3 is an immunohistochemical staining photograph of mouse pancreatic tissue after the end of the experiment.

이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described with reference to Examples and Experimental Examples. However, the scope of the present invention is not limited to these examples and experimental examples.

<< 실시예Example > > 감귤의 유산균 Citrus lactic acid bacteria 발효물의Fermented 제조 Produce

수분 함량이 약 60% 감귤(Citrus unshiu) 미성숙과 분쇄물 50L에 탄소원과 에너지원으로 설탕 5%(w/v)을 첨가하여 혼합하고 멸균기를 이용 121℃에서 20분 동안 멸균하였다. 멸균된 혼합물에 MRS(DeMan, Rogosa, and Sharpe) broth에서 준비한 유산균(Lactobacillus acidophilus KCCM 3151, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei Lactobacillus rhamnosus의 1:1:1:1(부피비)의 혼합물, 균수 3×108 CFU, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei Lactobacillus rhamnosus는 출원인이 자체 분리한 균주임)을 5%(v/v) 접종하여 25~30℃에서 14일 동안 상온 발효시키고 4℃에서 15일간 저온 숙성하여 감귤의 유산균 발효물을 제조하였다. 제조된 유산균 발효물은 100℃에서 10분간 살균처리한 후에 감압농축하고 동결건조시켜 분말상으로 제조하고 냉장보관하면서 아래의 실험에 사용하였다.
The moisture content is about 60% Citrus unshiu) were further added and mixed and pulverized 50L immature sugar 5% (w / v as the carbon source and energy source in) and sterilized at 121 ℃ using a sterilizer for 20 minutes. Lactobacillus ( Lactobacillus ) prepared from MRS (DeMan, Rogosa, and Sharpe) broth was added to the sterilized mixture acidophilus KCCM 3151 , Lactobacillus plantarum , Lactobacillus casei And Lactobacillus A mixture of rhamnosus in a 1: 1: 1: 1 (volume ratio), 3 x 10 8 CFU, Lactobacillus plantarum , Lactobacillus casei And Lactobacillus rhamnosus were strains isolated by the applicant) were inoculated 5% (v / v), fermented at 25 ~ 30 ℃ for 14 days at room temperature, and fermented for 15 days at 4 ℃ for 15 days to produce citrus lactic acid fermented product. The lactic acid bacteria fermented product was sterilized at 100 ° C for 10 minutes, concentrated under reduced pressure, lyophilized to prepare powder, and used in the following experiment while refrigerated.

<< 실험예Experimental Example > > 항당뇨Anti-diabetic 활성 실험 Active experiment

<실험예 1> 당뇨 유발 실험동물에서 혈당 수치 변화의 측정 <Experimental Example 1> Measurement of blood glucose level change in experimental animals induced by diabetes mellitus

체중인 20~30g인 약 5주령의 ICR계 마우스(mal, (주)나라바이오텍, 한국)를 구입하여 동물 사육실에서 고형사료((주)두열바이오텍, 한국)와 물을 자유섭취시키면서 실험 시작 전 1주일 동안 순화시킨 후 실험에 사용하였다. 사육환경은 온도: 22~25℃, 습도:50~60%, 조명:12hr/day로 조절하였다. ICR mice (mal, biotech, Korea) purchased at about 5 weeks of age, weighing 20 ~ 30g, were given free access to solid feed (Duodyl Biotech, Korea) After being purified for 1 week, it was used for the experiment. Breeding environment was controlled at temperature: 22 ~ 25 ℃, humidity: 50 ~ 60%, illumination: 12hr / day.

적응기간이 끝난 8주령의 마우스에 스트렙토조토신(steptozotocin)을 0.01M Citrate Buffer (pH 4.6)에 용해시켜 120mg/kg 용량으로 꼬리 정맥을 통해 단회 투여하여 당뇨를 유발하고, 투여 3일 후 고혈당(≥300mg/dL)이 유발된 실험동물을 선별하여 아래와 같이 실험군을 구성하여 실시예의 시료를 멸균수에 현탁하고 120, 60, 30mg/kg/day 투여 용량을 존데를 이용하여 강제로 경구투여하였으며, 실험은 6주간 진행하였다.Streptozotocin was dissolved in 0.01M Citrate Buffer (pH 4.6) at the end of the adaptation period, and diabetes was induced by a single dose of 120 mg / kg via the tail vein. Three days after the administration, hyperglycemia ≥300 mg / dL) was selected, and the experimental group was constructed as follows. Samples of the examples were suspended in sterilized water and orally administered at doses of 120, 60 and 30 mg / kg / day using sonde, The experiment was carried out for 6 weeks.

Figure pat00001
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상기에서 실험군 G1은 정상대조군이고, 실험군 G2는 양성대조군이며, 실험군 G3, G4 및 G5는 시료 투여군이다. 양성대조군 G2는 스트렙토조토신에 의한 당뇨 유발군으로서 시료 비투여군이며, 멸균수를 시료 투여군인 G3, G4 및 G5와 동일하게 500㎕를 투여하였다.In the above, the experimental group G1 is the normal control group, the experimental group G2 is the positive control group, and the experimental groups G3, G4 and G5 are the sample-treated group. The positive control group G2 was a group of streptozotocin-induced diabetes mellitus and administered with 500 μl of sterilized water as in the case of G3, G4 and G5.

혈당은 매주 1회 꼬리 정맥혈을 이용하여 측정하였으며, 시험 시작일과 시험 종료일에는 12시간 공복 혈당을 측정하였고, 나머지는 모두 식후 혈당을 측정하였다. Blood glucose was measured once a week using caudal venous blood. Fasting blood glucose was measured for 12 hours on the test start date and the end of test, and the postprandial blood glucose was measured for the rest.

결과를 [도 1]에 나타내었다. [도 1]을 참조하여 보면 양성대조군과 비교하여 고농도 시료 투여군인 G3의 경우 뚜렷하게 혈당 수치의 변화가 관찰되었다. 특히 실험 종료일 12시간 공복 후 측정한 고농도 시험물질 투여군의 혈당치는 매우 유의한 수준의 변화를 나타내었다.The results are shown in Fig. As shown in FIG. 1, a significant change in blood glucose level was observed in the case of G3, which is a high-dose group, as compared with the positive control group. In particular, the blood glucose level of the high-concentration test substance-administered group measured after 12 hours of fasting on the end of the experiment showed a significant change.

<실험예 2> 내당능 검사 <Experimental Example 2> glucose tolerance test

상기 <실험예 1>의 실험 종료 전 12시간 절식시킨 마우스 복강 내에 5% 포도당을 2g/kg 용량으로 투여한 후, 0, 30, 60, 90, 120, 180분 간격으로 마우스 꼬리 정맥혈로 혈당을 측정하여, [도 2]에 나타내었다.5% glucose was administered at a dose of 2 g / kg in the abdominal cavity of the mouse fasted for 12 hours before the end of the experiment of Experimental Example 1, and blood glucose was measured by mouse tail vein blood at 0, 30, 60, 90, And the results are shown in Fig.

[도 2]를 참조하여 보면, 고농도 시료 투여군 G3를 제외한 정상대조군 및 나머지 당뇨 유도군의 혈당치는 30분 만에 최고치에 이르렀고, 정상대조군은 1시간 이후 혈당 수치가 감소하기 시작하여 3시간째 거의 정상 수치를 회복한 반면, 모든 당뇨 유발군은 계속 증가하다가 2시간 이후에야 혈당 수치가 감소하기 시작했고 3시간이 되어도 여전히 높은 혈당 수치를 유지하였다. 고농도 시료 투여군 G3는 1시간 만에 최고치에 이르렀다가 1시간 30분부터 감소하기 시작하여 3시간째 이르러 유의 한 수준으로 감소하였다.2, the blood glucose levels of the normal control group and the rest of the diabetic induction group except for the high-concentration sample-administered group G3 peaked at 30 minutes, and in the normal control group, the blood glucose level started to decrease after 1 hour, While normal levels were restored, all diabetic induction groups continued to increase. After 2 hours, blood glucose levels began to decrease and still remained high at 3 hours. G3 in the high concentration group reached its peak at 1 hour, then decreased from 1 hour 30 minutes and decreased to a significant level at 3 hours.

<실험예 3> 췌장조직의 면역조직화학적 염색 &Lt; Experimental Example 3 & gt ; Immunohistochemical staining of pancreatic tissue

상기 <실험예 1>의 실험이 종료된 후 마우스를 희생시키고, 일반적인 조직 표본 제작 과정을 거쳐 만들어진 포매 Block을 3㎛ 두께로 자른 후 면역 염색용 slide에 부착하여 탈 파라핀 및 함수과정을 거친 후, 최적화된 농도로 희석된 Insulin Ab를 도포하고 발색시켜 현미경으로 관찰하였다. 파라핀 Block과 표본 Slide 제작, 그리고 면역조직 화학적 표본 제작 및 판독은 제주한라병원 병리과(제주도 제주시 소재)에 의뢰하여 실시하였다.After completion of the experiment of Experimental Example 1, the mouse was sacrificed, and the formed block, which was prepared through a general tissue specimen preparation process, was cut into a thickness of 3 쨉 m and attached to a slide for immunostaining, followed by deparaffinization and functional treatment, Insulin Ab diluted to the optimal concentration was applied, developed and observed under a microscope. Paraffin block and specimen slides were prepared and immunohistochemistry specimens were prepared and read at the pathology department of Jeju Halla Hospital (Jeju city).

결과를 [도 3]에 나타내었는데, [도 3]은 인슐린 항체를 조직 표본 slide에 부착시켜 특수 염색한 조직 사진이다. [도 3]을 참조하여 보면 정상대조군의 경우 랑거한스섬(Islets of Langerhans)의 형태나 인슐린 분비 상태에서 비정상적인 소견이 나타나지 않았다. 반면 모든 당뇨 유도군의 췌장 조직 내 랑거한스섬은 위축되었고 세포 손실이 있어 인슐린이 거의 분비 되지 않는 상태로 관찰되었다. 그러나 고농도 시험물질 투여군의 경우 경미한 세포 손상 결과를 나타내어 실시예의 시료가 인슐린을 분비하는 췌장의 랑거한스섬의 위축이나 세포 손실을 어느 정도 억제하거나 보호하는 것으로 생각된다.The results are shown in Fig. 3, which is a specially stained tissue photograph obtained by attaching an insulin antibody to a tissue specimen slide. 3, there was no abnormality in the form of islets of Langerhans or insulin secretion in the case of the normal control group. On the other hand, in all diabetic induction group, Langerhans islands in the pancreatic tissues were atrophied and cell loss was observed and insulin was almost secreted. However, in the case of the group administered with the high concentration test substance, slight cytotoxicity was observed, and it is considered that the sample of the example suppresses or protects the atrophy or cell loss of the insulin-secreting pancreatic islet of Langerhans to some extent.

Claims (8)

(a) 감귤 분쇄물에 유산균의 탄소원과 에너지원을 첨가하여 혼합하는 단계 및 (b) 그 혼합물에 유산균을 접종하여 발효시키는 단계를 통하여 얻어진 감귤 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨 조성물.
(a) adding a carbon source and an energy source of a lactic acid bacterium to the crushed citrus fruits and mixing them, and (b) fermenting the mixture by inoculating the lactic acid bacterium with the mixture, and then fermenting the fermented product.
제1항에 있어서,
상기 유산균은 락토바실루스속 유산균(Lactobacillus spp .)인 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.
The method according to claim 1,
The lactic acid bacterium may be selected from the group consisting of Lactobacillus spp . ). &Lt; / RTI &gt;
제1항에 있어서,
상기 유산균은 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) 및 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus)로 구성된 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.
The method according to claim 1,
The lactic acid bacteria may be selected from the group consisting of Lactobacillus acidophilus , Lactobacillus &lt; RTI ID = 0.0 &gt; plantarum , Lactobacillus &lt; RTI ID = 0.0 &gt; casei ) and Lactobacillus rhamnosus . &lt; RTI ID = 0.0 &gt; 11. &lt; / RTI &gt;
제1항에 있어서,
상기 감귤은 미성숙과인 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the citrus is immature.
제1항에 있어서,
상기 감귤은 온주 밀감(Citrus unshiu)인 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.
The method according to claim 1,
The citrus is Satsuma Mandarin (Citrus RTI ID = 0.0 &gt; unshiu . &lt; / RTI &gt;
제1항에 있어서,
상기 발효 단계는 유산균과 함께, 효모, 누룩균, 고초균 및 홍국균 중 하나 이상의 미생물이 함께 접종되어 수행되는 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the fermentation step is carried out by inoculating together at least one microorganism selected from the group consisting of yeast, Mycobacterium tuberculosis, Bacillus subtilis, and Bacillus subtilis, together with lactic acid bacteria.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.
7. The method according to any one of claims 1 to 6,
Wherein the composition is a food composition.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물.


7. The method according to any one of claims 1 to 6,
Wherein the composition is a pharmaceutical composition.


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