KR20140055615A - Novel aspergillus oryzae cj ky isolated from the korean traditional meju and the manufacturing method of doenjang using this fungi and the doenjang from manufactured thereof - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a novel Aspergillus oryzae CJ KY strain, a soybean paste manufacturing method using the same, and a soybean paste manufactured by the manufacturing method. More specifically, a soybean paste having uniform quality and improved flavor can be manufactured by isolating from a traditional fermented soybean cake the novel strain Aspergillus oryzae CJ KY which is a koji mold having excellent enzyme activities for decomposing carbohydrates and proteins using whole meal or wheat-rice as a substrate, and then selecting the strain to manufacture the soybean paste.

Description

전통 메주에서 분리한 신규한 균주인 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 균주와 이를 이용한 된장 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장{Novel Aspergillus oryzae CJ KY isolated from the Korean traditional meju and the manufacturing method of doenjang using this fungi and the doenjang from manufactured thereof}Aspergillus oryzae CJ KY strain isolated from a traditional meju and a soybean paste prepared by the method and a method for preparing the soybean paste, using this fungi and the doenjang from manufactured them}

본 발명은 신규한 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY 와, 이를 이용한 된장의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장에 관한 것이다. The present invention relates to novel strains, such as Aspergillus oryzae ) CJ KY, a process for producing the soybean paste using the same, and a soybean paste prepared by the process.

보다 상세하게는, 소맥분 또는 밀쌀을 기질로 탄수화물 및 단백질 분해 효소 활성이 우수한 국균(麴菌)인 신규의 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하여 된장 제조에 사용함으로써 풍미가 향상된 된장에 관한 것이다.More specifically, a novel strain Aspergillus oryzae CJ KY, which is a yeast strain having excellent carbohydrate and protease activity with wheat flour or wheat as a substrate, is separated and selected from traditional meju, And to improve the flavor by using it.

된장의 종류는 간장을 담가서 장물을 떠내고 건더기를 쓰는 재래식 된장과 알콩 메주에 소금물을 알맞게 부어 장물을 떠내지 않고 먹는 개량식 된장, 2가지 방법을 절충한 절충식 된장, 그리고 전분질 원료를 이용한 개량식 된장 등을 들 수 있다.The types of miso are as follows: conventional soy sauce made by immersing soy sauce into flour, traditional sweet soy sauce made using conventional methods, traditional sweet soy sauce made using traditional methods such as soy sauce, sweet soy sauce, And the like.

재래식 된장은 대두로 메주를 쑤어 벽돌형 또는 구형으로 빚어 자연발효 시킨 후 식염수에 침지시켜 6 내지 12개월 숙성한 다음 간장을 분리하고 고형분을 숙성시켜 제조된다. Conventional doenjang is made by fermenting meju into soybean and brick or spherical shape, fermenting it naturally, immersing it in saline, aging for 6 to 12 months, separating the soy sauce and aging the solid.

전분질 원료를 이용한 개량식 된장은 소맥분 등의 전분질 원료를 증자하고 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 등의 국균(麴菌)을 이용하여 제국 과정을 거친 후 식염 또는 염수, 증자된 전분질 원료, 증자된 대두 등을 혼합하여 침지 과정 없이 숙성시켜 제조된다.Improved doenjang using starch raw materials increased starch raw materials such as wheat flour and Aspergillus oryzae ), followed by emulsification without mixing with salt, salt water, expanded starch raw materials, and soybean seeds.

상기의 재래식 된장은 대두의 영양성분이 간장으로 용출되어 손실이 발생하는 단점이 있고, 토착 미생물에 의한 발효가 진행되기 때문에 품질 편차가 심할 뿐만 아니라, 잡균 오염에 의한 이상 발효가 발생한다. 또한, 대두 원료의 발효 과정에서 생성되는 펩타이드류, 아민류 등의 발효산물에 의한 쓴맛 생성의 문제가 있다. Conventional soybean paste soybean has a disadvantage in that soybean nutrients are eluted into soy sauce to cause loss, and fermentation by indigenous microorganisms proceeds, resulting in not only a significant quality deviation but also abnormal fermentation due to contamination of germs. In addition, there is a problem of generation of bitter taste due to fermentation products such as peptides and amines produced in the fermentation process of the soybean raw material.

상기의 문제점을 보완하기 위해 전분질 원료를 이용한 개량식 된장이 제조되고 있지만, 발효 과정에서의 쓴맛 원인의 발효산물이 여전히 생성되고, 전분질 원료 사용으로 감칠맛이 적은 단점이 있다.
In order to overcome the above-mentioned problems, a modified doenjang using a starch raw material has been produced, but a fermented product as a cause of bitter taste is still produced in the fermentation process, and the use of the starch raw material has a disadvantage in that the fermented beverage is poor in taste.

상기 종래의 재래식 된장의 문제점을 해결하는 방안으로 대한민국 등록특허 제10-0369841호는 전분질 원료를 이용한 개량식 된장을 제조함에 있어, 주정효모를 첨가하여 향미 부여와 고미(苦味) 성분 생성을 억제하여 풍미가 개선된 된장의 제조방법을 제안하였다.In order to solve the problems of the conventional conventional doenjang, Korean Patent Registration No. 10-0369841 discloses a method of preparing soybean paste using a starch raw material by adding a fermented yeast to inhibit the flavor impartation and the formation of bitterness components, Which is an improved method of making the soybean paste.

그러나, 상기 선행기술에 의한 경우, 대량 생산 공정에서 사입시 첨가되는 주정효모는 균질화가 어려워 품질 편차가 생길 뿐만 아니라, 생육이 활발해지면 알코올취가 강해져 된장의 향미가 저하되는 문제가 발생하게 된다.
However, in the case of the prior art, in the mass production process, the fermented yeast added at the time of ingestion is not easily homogenized to cause a quality variation, and when the growth becomes active, the alcohol becomes stronger and the flavor of the soybean paste is lowered.

본 발명자들은 상기와 같은 종래의 문제를 해결하기 위하여 종래의 개량식 방법과 동일하게 국균(麴菌)만을 적용하여 제조 공정을 효율화하되, 쓴맛에 기인하는 분해산물의 생성량은 적고, 감칠맛과 구수한 향미의 특성은 우수하게 하는 신규 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하고, 이를 된장 제조에 사용함으로써, 향미가 보다 우수한 된장의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장을 개발하고 본 발명을 완성하게 되었다.The inventors of the present invention have found that, in order to solve the above conventional problems, the same process as that of the conventional modification method is applied only to the microorganism, and the production process is efficiently performed. However, the amount of decomposition products produced due to the bitter taste is small, The characteristics of the new strain Aspergillus oryzae ) CJ KY was isolated and selected from traditional meju and used for the preparation of doenjang, and the doenjang prepared by the method and the preparation method of the doenjang having better flavor were developed and the present invention was completed.

KR10-0369841 B1KR10-0369841 B1

본 발명의 목적은 소맥분 또는 밀쌀을 기질로 높은 효소 역가를 나타내는 신규의 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하고, 이를 된장 제조에 사용함으로써, 향미가 보다 우수한 된장의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장을 제공하는 것을 목적으로 한다.
An object of the present invention is a novel Aspergillus strains showing a high enzyme activity as a substrate or a flour milssal Aspergillus's duck material (Aspergillus oryzae ) CJ KY is separated and selected from traditional meju and used in the manufacture of miso, and a method for producing doenjang having better flavor and a doenjang prepared by the method.

구체적으로, 소맥분 또는 밀쌀, 대두 등을 기질로 높은 아밀라아제 및 프로테아제 활성을 나타내며, 쓴맛에 기인하는 분해 산물의 생성량이 적고, 감칠맛과 구수한 향미의 특성이 우수하게 하는 신규 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하여, 이를 된장 제조에 사용함으로써, 향미가 보다 우수한 된장의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장을 제공하는 것을 목적으로 한다. Specifically, a novel strain Aspergillus ( Aspergillus oryzae) which exhibits high amylase activity and protease activity with a substrate such as wheat flour, wheat flour, or soybean and has a small amount of decomposition products due to bitter taste and excellent in flavor and savory flavor oryzae ) CJ KY is separated and selected from traditional meju and used for the preparation of doenjang, thereby providing a method of producing doenjang having better flavor and a doenjang prepared by the method.

상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 전통 메주로부터 분리·동정한, 소맥분 및 밀쌀을 기질로 탄수화물 및 단백질 분해효소 활성이 우수한 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 제공한다.
According to an aspect of the present invention as described above, the present invention is isolated and is in the identification, wheat flour, and a carbohydrate substrate milssal and excellent protease activity strain Aspergillus duck material from traditional Meju (Aspergillus oryzae ) CJ KY.

또한, 본 발명은 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 이용한 된장 제조방법에 관한 것으로, 소맥분 원료에 가수하여 증자시키는 증자 단계; 상기 증자된 소맥분에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 접종 및 배양하여 소맥분 코오지를 만드는 제국 단계; 상기 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시키는 1차 숙성 단계; 및 상기 숙성된 1차 혼합물에 메주 및 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 살균, 숙성시키는 2차 숙성 단계;를 포함하는 된장의 제조 방법을 제공한다.
The present invention is Aspergillus duck material (Aspergillus oryzae ) CJ KY, which comprises the steps of adding and adding to a flour of wheat flour; Aspergillus ( Aspergillus oryzae) was added to the above- oryzae ) CJ KY inoculated and cultured to make wheat flour coagulum; A first aging step of adding a salt or brine to the wheat flour koji and aging a primary mixture of at least one selected from the group consisting of wheat germ, added soybean, meju and miso; And a second aging step of sterilizing and aging the aged primary mixture with a secondary mixture of meju and at least one selected from the group consisting of miso, salt, flavor enhancer, and grain processed product. .

또한, 본 발명은 상기의 된장의 제조방법에 의해 제조된 된장을 제공한다. In addition, the present invention provides a doenjang prepared by the above-described process for producing doenjang.

본 발명은 소맥분 및 밀쌀을 기질로 높은 효소 역가를 나타내는 신규한 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하고 이를 된장 제조에 사용함으로써, 품질이 일정하고, 우수한 향미를 나타내는 된장을 제조할 수 있는 효과가 있다.The present invention relates to novel strains Aspergillus duck material (Aspergillus showing a high enzyme activity, and the wheat flour as substrate milssal oryzae ) CJ KY is isolated and selected from traditional meju and used in the manufacture of miso, so that it is possible to produce doenjang which has constant quality and excellent flavor.

도 1은 신규한 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae ) CJ KY의 분류 계통도를 나타낸 도이다.
도 2는 신규한 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae ) CJ KY의 16S rDNA 염기 서열 분석 결과를 나타낸 도이다.
Figure 1 shows a schematic representation of a novel Aspergillus oryzae ) CJ KY.
Fig. 2 is a schematic view of a novel Aspergillus oryzae ) 16S rDNA sequence analysis of CJ KY.

본 발명은 소맥분 및 밀쌀을 기질로 하는 탄수화물 및 단백질 분해효소 활성이 우수한 균주인 신규 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY에 관한 것이다. The present invention relates to novel carbohydrates and wheat flour based on wheat flour and a novel strain of protease activity such as Aspergillus oryzae ) CJ KY.

상기 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY는 전통 식품 제조 업체에서 수거한 전통 메주로부터 분리·동정하였다. Aspergillus oryzae CJ KY was isolated and identified from traditional meju collected from traditional food manufacturers.

분리·동정 방법은 전통 메주에서 분리한 곰팡이 중 포자 생성력이 우수하면서 독소를 생성하지 않고 알러지를 유발하지 않아, 국균으로 활용가능한 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 1차 선별하였다. 그후, 1차 선별 균주를 대상으로 소맥분을 원료로 고체 배양하여 탄수화물 및 단백질 분해력이 강한 균주를 2차 선별하고, 2차 선별된 균주 중에서 된장의 풍미를 향상시키는 균주를 최종 선별하였다. 이를 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzaeCJ KY라 명명하고, 2012년 9월 27일에 한국미생물보존센터에 기탁하였다 (기탁번호: KCCM 11302P).
The separation and identification method is a method for isolating the fungus isolated from the traditional meju, and it is known that Aspergillus oryzae were selected first. After that, wheat flour was solid - cultured from raw wheat flour to primary sorting strains, and strains which had strong carbohydrate and protein degrading ability were secondly selected and strains which improved the flavor of soybean paste were finally selected from the second selected strains. This is called Aspergillus oryzae CJ KY, deposited on September 27, 2012 at the Korean Microorganism Conservation Center (Accession No .: KCCM 11302P) .

또한, 본 발명은 상기의 소맥분을 기질로 탄수화물 및 단백질 분해력이 강하면서 된장의 풍미를 향상시키는 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 이용하여 증자된 소맥분을 발효시켜 된장을 제조하는 방법에 관한 것이다. In addition, the present invention relates to a method for preparing soybean paste by fermenting wheat flour, which has been grown by using Aspergillus oryzae CJ KY, which is a strain which enhances the flavor of soybean paste with strong carbohydrate and protein hydrolysis ability, ≪ / RTI >

보다 상세히는, 소맥분 원료을 가수하여 증자시키는 증자 단계; 상기 증자된 소맥분에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 접종 및 배양하여 소맥분 코오지를 만드는 제국 단계; 상기 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시키는 1차 숙성 단계; 및 상기 숙성된 1차 혼합물에 메주 및 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 살균, 숙성시키는 2차 숙성 단계;를 포함하는 된장의 제조 방법을 제공한다.
More particularly, the present invention relates to a method for producing a flour, Aspergillus ( Aspergillus oryzae) was added to the above- oryzae ) CJ KY inoculated and cultured to make wheat flour coagulum; A first aging step of adding a salt or brine to the wheat flour koji and aging a primary mixture of at least one selected from the group consisting of wheat germ, added soybean, meju and miso; And a second aging step of sterilizing and aging the aged primary mixture with a secondary mixture of meju and at least one selected from the group consisting of miso, salt, flavor enhancer, and grain processed product. .

본 발명의 된장 제조방법에서 상기 증자단계는, 연속증자기를 이용하여 일정량의 가온된 정수를 소맥분에 가수(加水)한 후 1.0 내지 2.0 kgf/cm2의 스팀을 이용하여 증자하는 공정으로, 증자된 소맥분의 수분 함량이 32 내지 38 중량%가 되도록 조절하는 것이 바람직하다.
In the doenjang manufacturing method of the present invention, the above-mentioned boiling step is a step of adding a certain amount of warmed water to a wheat flour by using a continuous boiler and then increasing the steam using 1.0 to 2.0 kgf / cm 2 of steam. It is preferable to adjust the water content of the wheat flour to be 32 to 38% by weight.

본 발명의 된장 제조방법에서, 상기 제국 단계는, 상기 증자된 소맥분에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 접종 및 배양하여 소맥분 코오지를 만드는 단계로서, 구체적으로는 증자된 소맥분에 원료 총량 대비 0.1 내지 0.3 중량%의 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY 와 0.5 내지 1.5 중량%의 곡류분 또는 두류분을 증량제로 사용하여 균일하게 혼합한 후 30 내지 40℃, 보다 바람직하게는 32 내지 35℃에서 3일간 발효 건조하여 소맥분 코오지를 만든다.
In the doenjang manufacturing method of the present invention, the empowering step may include a step of adding Aspergillus oryzae ) CJ KY and inoculating and culturing the flour to produce wheat flour koji . Specifically, 0.1 to 0.3% by weight of Aspergillus oryzae CJ KY and 0.5-1.5% by weight of cereal flour or soy flour are used as an extender, mixed uniformly, and then fermented and dried at 30 to 40 ° C, more preferably at 32 to 35 ° C for 3 days to produce a wheat flour coagulum.

본 발명의 된장 제조방법에서, 상기 1차 숙성 단계는, 상기 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시키는 단계이다. In the soybean paste manufacturing method of the present invention, the first aging step may include a step of adding 1 or more selected from the group consisting of wheat flour, soy sauce, soy sauce, soy sauce, soybean paste and soy sauce added with salt or salt water to the wheat flour koji And aging the tea mixture.

구체적으로는, 제국 단계를 통해 제조된 건조 상태의 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 대두, 증자된 밀쌀, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시킨다. Specifically, a salt or salt water is added to the dry wheat flour koji prepared through the empire stage, and a primary mixture obtained by mixing at least one selected from the group consisting of soybean, It ages.

상기 식염 또는 염수는 바람직하게는 1차 혼합물에 대하여 염도가 9 내지 13 중량% 함량이 되도록 첨가한다. The salt or salt water is preferably added so as to have a salt content of 9 to 13% by weight with respect to the primary mixture.

상기 메주 또는 된장은 특별히 제한되지 아니하며 공지의 것을 사용할 수 있다. 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상은, 바람직하게는 1차 혼합물 전체 중량에 대하여 1 내지 38 중량% 함량이 되도록 첨가한다. The meju or miso is not particularly limited and any known one may be used. The at least one selected from the group consisting of boiled rice, soy sauce, bean paste and soybean paste is preferably added in an amount of 1 to 38% by weight based on the total weight of the first mixture.

또한, 상기 1차 혼합물은 바람직하게는 전체 중량에 대하여 45 내지 52 중량% 함량으로 수분을 함유할 수 있다. In addition, the primary mixture may preferably contain moisture in an amount of 45 to 52% by weight based on the total weight.

상기 1차 혼합물은 숙성 전에 쵸핑(Chopping) 공정을 포함할 수 있다. The primary mixture may include a chopping process prior to aging.

상기 쵸핑은 1차 혼합물을 작은 크기의 물질로 자르는 공정을 의미하며, 그 크기는 특별히 제한되지 않으나, 바람직하게는 5 내지 20 mm 크기(1차 혼합물의 무정형 입자의 내경 크기 기준), 보다 바람직하게는 10 내지 15 mm 크기로 쵸핑될 수 있다. The chopping refers to a process of cutting the primary mixture into a small-sized material. The size is not particularly limited, but is preferably 5 to 20 mm (based on the inner diameter of the amorphous particles of the primary mixture) Can be chopped to a size of 10 to 15 mm.

상기 1차 혼합물을 숙성시키기 전 쵸핑하는 공정을 거치게 되면, 곡물의 심부까지 효소 및 식염의 침투하기 용이해져 보다 다양한 맛과 풍미가 생성되며, 이상 발효를 제어할 수 있는 이점이 있다.If the above-mentioned primary mixture is subjected to a chopping process before aging, permeation of enzyme and salt into the deep portion of the grains becomes easy, so that more various flavors and flavors are produced, and abnormal fermentation can be controlled.

상기 1차 혼합물은 바람직하게는 10 내지 30일 동안 25 내지 35℃에서 발효 숙성한다.
The primary mixture preferably undergo fermentative aging at 25-35 占 폚 for 10-30 days.

본 발명의 된장 제조방법에서, 상기 2차 숙성 단계는, 상기 숙성된 1차 혼합물에 메주, 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 살균, 숙성시키는 단계를 말한다. In the method of manufacturing doenjang of the present invention, the second aging step may be a step of sterilizing and mixing a secondary mixture obtained by mixing at least one selected from the group consisting of meju, miso, salt, flavor enhancer, It refers to the step of aging.

구체적으로는, 먼저, 상기 숙성된 1차 혼합물에 메주, 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 60 내지 85 ℃에서 1 내지 60분 동안 살균한 후, 식용 알코올을 첨가하여 숙성한다. Specifically, first, the secondary mixture obtained by mixing at least one selected from the group consisting of Meju, miso, soybean paste, salt, flavor enhancer and grain processed product is sterilized at 60 to 85 ° C for 1 to 60 minutes After that, the edible alcohol is added and aged.

상기 메주 또는 된장은 2차 혼합물 100 중량에 대하여 바람직하게는 3 내지 15 중량부로 첨가될 수 있으며, 상기 소금, 향미 증진제, 곡물 가공품 중 선택된 1종 이상은, 바람직하게는 1 내지 5 중량부로 첨가될 수 있다. The meju or soybean paste may be added in an amount of preferably 3 to 15 parts by weight based on 100 parts by weight of the secondary mixture, and at least one selected from the group consisting of the salt, the flavor enhancer and the processed grain is preferably added in an amount of 1 to 5 parts by weight .

상기의 메주, 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품은 특별히 제한되지 아니하며 공지의 것을 사용할 수 있다. The above-mentioned meju, miso, salt, flavor enhancer and grain processed product are not particularly limited and known ones can be used.

상기 향미 증진제의 비제한적인 예로는 효모 추출물, 콩 또는 밀단백 추출물 등을 들 수 있다.
Non-limiting examples of the flavor enhancer include yeast extract, soybean or wheat protein extract, and the like.

이와 같이 본 발명의 된장 제조방법은 소맥분을 기질로 높은 효소 역가를 보이는 신규한 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 사용함으로써, 쓴맛이 적고, 감칠맛과 구수한 맛이 향상된 된장의 제조가 가능하게 하였다.
As described above, the soybean paste manufacturing method of the present invention is characterized in that wheat flour is used as a substrate for a new strain Aspergillus oryzae ) CJ KY, it is possible to prepare a soy sauce having a reduced bitter taste and improved flavor and savory taste.

이하 본 발명의 내용을 실시예에 의해 보다 상세하게 설명한다. 다만 이들 실시예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 이들 실시예로 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood, however, that these examples are provided only for the understanding of the present invention, and the scope of the present invention is not limited to these examples.

1. One. 전통 메주 유래 미생물의 분리·동정 및 선별Isolation, Identification and Screening of Traditional Meju-derived Microorganisms

1) 미생물의 분리 · 동정 1) Isolation and identification of microorganisms

본 발명에서 스타터로 사용된 균주는 경기, 강원, 충북, 전남 소재의 전통 식품 제조 업체에서 수거한 전통 메주에서 분리, 선별하였다.The strains used as starters in the present invention were isolated and sorted from traditional meju collected from traditional food manufacturers in Gyeonggi, Gangwon, Chungbuk, and Chonnam.

곰팡이 분리 배지로는 potato dextrose agar(Difco) 배지에 20㎍/㎖ chloramphenicol를 첨가하여 사용하였고, 상기의 전통 메주에서 우점종으로 서식하는 곰팡이 32종을 순수 분리하여 동정하였으며, 동정 결과는 표 1과 같다.
As the fungus isolation medium, 20 μg / ml chloramphenicol was added to the potato dextrose agar (Difco) medium. In the above-mentioned traditional meju, the 32 fungi living in the dominant species were isolated and purified, and the identification results are shown in Table 1 .

2) 1차 선별, 2) Primary screening ,

상기의 전통 메주에서 분리한 곰팡이 32종의 포자 생성력 등 국균(麴菌)으로 활용이 가능한 것을 종합적으로 판단하여 7종을 1차로 선정하였다.Seven species were selected as the first to judge synthetically that 32 kinds of fungi isolated from the above-mentioned traditional meju could be used as a fungus such as spore production ability.

선정 균주는 CJ 1333, CJ 1334, CJ 1335, CJ 1336, CJ 1354, CJ KY, CJ KG 이었고, 포자 생성력 결과는 표 1과 같다.
The selected strains were CJ 1333, CJ 1334, CJ 1335, CJ 1336, CJ 1354, CJ KY and CJ KG.

전통 메주 유래 분리 균주의 동정결과 및 각 균주의 포자 생성력Identification results of the isolates derived from traditional meju and spore production of each strain 균주 NO.Strain NO. 동정결과Identification result 포자생성력Spore production 비고Remarks CJ 1333CJ 1333 AspergillusAspergillus oryzaeoryzae **** CJ 1334CJ 1334 AspergillusAspergillus oryzaeoryzae ****** CJ 1335CJ 1335 AspergillusAspergillus oryzaeoryzae ****** CJ 1336CJ 1336 AspergillusAspergillus oryzaeoryzae ****** CJ 1337CJ 1337 AspergillusAspergillus flavusflavus ** 독소생성Toxin production CJ 1338CJ 1338 AspergillusAspergillus nigerniger ****** CJ 1339CJ 1339 AspergillusAspergillus flavusflavus ** 독소생성Toxin production CJ 1340CJ 1340 AspergillusAspergillus tubingensistubingensis ****** 흑국균Black germ CJ 1341CJ 1341 -- ×× 포자 미생성Spore formation CJ 1342CJ 1342 AspergillusAspergillus sydowiisydowii **** CJ 1343CJ 1343 PenicilliumPenicillium polonicumpolonicum ** CJ 1344CJ 1344 MucorMucor racemosusracemosus **** CJ 1345CJ 1345 PenicilliumPenicillium polonicumpolonicum ** 알러지allergy 유발 cause CJ 1346CJ 1346 MucorMucor racemosusracemosus ****** CJ 1347CJ 1347 PenicilliumPenicillium polonicumpolonicum ** CJ 1348CJ 1348 EmericellaEmericella nidulansnidulans ** 알러지allergy 유발 cause CJ 1349CJ 1349 TalaromycesTalaromyces spectabilisspectabilis **** CJ 1350CJ 1350 EmericellaEmericella rugulosarugulosa **** 알러지allergy 유발 cause CJ 1351CJ 1351 MucorMucor racemosusracemosus ****** CJ 1352CJ 1352 EmericellaEmericella dentatadentata ** 알러지allergy 유발 cause CJ 1353CJ 1353 MycocladusMycocladus corymbiferuscorymbiferus ****** CJ 1354CJ 1354 AspergillusAspergillus oryzaeoryzae ****** CJ 1355CJ 1355 MycocladusMycocladus corymbiferuscorymbiferus ****** CJ 1356CJ 1356 AspergillusAspergillus flavusflavus ****** 독소생성Toxin production CJ 1357CJ 1357 AbsidiaAbsidia corymbiferacorymbifera ** CJ 1358CJ 1358 AspergillusAspergillus oryzaeoryzae **** CJ 1359CJ 1359 AspergillusAspergillus oryzaeoryzae **** CJ 1360CJ 1360 AspergillusAspergillus vadensisvadensis **** CJ 1361CJ 1361 -- ** CJ 1362CJ 1362 -- ** CJ KYCJ KY AspergillusAspergillus oryzaeoryzae ****** CJ KGCJ KG AspergillusAspergillus oryzaeoryzae ******

3) 2차 선별 3) Secondary selection

상기의 1차 선별한 균주 7종을 대상으로 소맥분 코오지를 제조하여 아밀라아제 및 프로테아제 효소 역가를 비교하여 우수 균주를 2차 선별하였다. Seven strains of the above-mentioned primary selected strains were prepared and wheat flour koji was prepared to compare the amylase and protease enzyme titer to select the second best strain.

상기의 소맥분 코오지는 소맥분 1kg을 수분 함량이 33 내지 38 중량%가 되도록 가수한 후 고압증기멸균기(Autoclave)로 120℃에서 15분간 증자하였으며, 증자 후 35℃로 냉각하였다. 냉각된 증자 소맥분에 1차 선별 균주를 원료 총 중량 대비 0.2 중량%로 혼합한 후 35℃에서 3일간 각각 배양하였으며, 각각의 소맥분 코오지의 효소 역가는 표 2와 같다.
1 kg of the flour of wheat flour was heated to 120 ° C for 15 minutes and then cooled to 35 ° C by heating to a moisture content of 33 to 38% by weight in a high pressure steam sterilizer (Autoclave). The primary selection strains were mixed at 0.2 wt% of the total weight of the raw materials and incubated at 35 ° C for 3 days. The enzyme activity of each of the wheat flour soybean sprouts was as shown in Table 2.

표 2의 결과로부터, 아밀라아제와 프로테아제 효소 역가가 우수한 CJ 1334, CJ 1354, CJ KY, CJ KG 균주 4종을 2차 선정하였다.
From the results shown in Table 2, four types of CJ 1334, CJ 1354, CJ KY and CJ KG strains excellent in amylase and protease enzyme titers were secondarily selected.

1차 선별 균주 적용 소맥분 코오지의 효소 역가 비교Application of primary screening strain Enzyme activity of wheat flour koji 아밀라아제 역가 (U/g)Amylase activity (U / g) 프로테아제 역가 (U/g)Protease activity (U / g) CJ 1333CJ 1333 439.4439.4 118.4118.4 CJ 1334CJ 1334 565.9565.9 140.4140.4 CJ 1335CJ 1335 496.6496.6 131.6131.6 CJ 1336CJ 1336 536.7536.7 109.1109.1 CJ 1354CJ 1354 542.4542.4 105.3105.3 CJ KYCJ KY 537.6537.6 146.1146.1 CJ KGCJ KG 553.3553.3 134.0134.0

상기 표 2에서 아밀라아제 효소 역가 측정은 소맥분 코오지를 2% NaCl 수용액에 30℃에서 1시간 동안 추출하고 여과한 조효소액을 100배 희석하여 사용하였다. 효소 반응액은 조효소액 1㎖, 기질로 1% 전분당 2㎖, pH 5.2 인산염 버퍼 2㎖를 가하여 제조하였으며, 이를 40℃에서 30분간 반응시킨 후 0.1N CH3COOH 10㎖를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 반응이 종료된 효소 반응액 0.005% KI+I2 용액 10㎖를 넣어 실온에서 발색시켜 UV 분광 광도계(spectrophotometer)를 이용하여 660nm에서 흡광도를 측정하였다. In Table 2, amylase enzyme activity was measured by extracting wheat flour koji in a 2% aqueous solution of NaCl at 30 ° C for 1 hour and diluting the filtered enzyme solution 100 times. The enzyme reaction solution was prepared by adding 1 ml of crude enzyme solution, 2 ml of 1% starch as substrate and 2 ml of pH 5.2 phosphate buffer. The reaction was carried out at 40 ° C for 30 minutes, and then 10 ml of 0.1 N CH 3 COOH was added Stopped. The reaction solution was diluted with 10 ml of 0.005% KI + I 2 solution, and developed at room temperature. The absorbance at 660 nm was measured using a UV spectrophotometer.

또한, 프로테아제 효소 역가 측정은 소맥분 코오지를 증류수에 30℃에서 1시간 동안 추출, 여과하여 조효소액으로 사용하였다. 효소 반응액은 조효소액 0.5㎖, 기질로 2% 밀크 카제인(Milk casein) 1.5㎖, Mcllivine 버퍼(pH 6.0) 1㎖를 첨가하여 38℃에서 1시간 반응하였다. 이후 0.4M TCA 용액을 3㎖ 넣어 반응을 정지시켜 여과 후 0.4M Na2CO3 5㎖와 페놀 시약 1㎖를 넣어 충분히 혼합 후 38℃에서 30분간 발색시키고 분광 광도계를 이용하여 660nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 효소 활성은 1분간 1㎍에 해당하는 티로신을 생성하는 효소의 양을 1 유닛으로 정의하였고 티로신을 표준 물질로 이용하여 검량선을 작성하였다
In addition, the protease enzyme activity measurement was performed by extracting and filtering the wheat flour koji in distilled water at 30 ° C for 1 hour as a crude enzyme solution. 0.5 ml of crude enzyme solution, 1.5 ml of 2% milk casein and 1 ml of Mcllivine buffer (pH 6.0) were added to the enzyme reaction solution and reacted at 38 ° C for 1 hour. Then, 3 ml of 0.4 M TCA solution was added to stop the reaction. After filtration, 5 ml of 0.4 M Na 2 CO 3 and 1 ml of phenol reagent were added, sufficiently mixed, and developed at 38 ° C. for 30 minutes. Absorption was measured at 660 nm using a spectrophotometer Respectively. At this time, the enzyme activity was defined as 1 unit of the amount of the enzyme producing tyrosine corresponding to 1 μg per minute, and a calibration curve was prepared using tyrosine as a standard substance

4) 최종 선별 4) Final selection

상기의 2차 선별한 균주 4종을 대상으로 소맥분 코오지의 용량을 확대 제조하여 아밀라아제 및 프로테아제 효소 역가를 비교하고, 이를 이용하여 제조된 된장의 맛 품질을 비교하여 우수 균주를 최종 선별하였다. The capacity of the wheat flour koji was enlarged and the amylase and protease enzyme titer were compared with each other and the quality of taste of the soybean paste was compared with each other.

상기의 소맥분 코오지는 5단 연속 증자기로 소맥분 10kg을 수분 함량이 33 내지 38 중량%가 되도록 증자하였으며, 증자 후 35℃로 냉각하였다. 냉각된 증자 소맥분에 2차 선별 균주를 원료 총량 대비 0.2 중량%로 혼합한 후 고체 발효기로 30 내지 35℃에서 3일간 각각 배양하였으며, 각각의 소맥분 코오지의 효소 역가는 표 3과 같다. The flour of wheat flour was prepared by adding 5 kg of soybean flour to 10 kg of wheat flour so that the moisture content was 33 to 38% by weight. Secondary sorting strains were mixed at 0.2 wt% with respect to the total amount of the raw materials, and then cultured in a solid fermenter at 30 to 35 ° C for 3 days, respectively. Table 3 shows the enzyme activity of each wheat flour.

또한, 상기의 소맥분 코오지에 식염 또는 염수, 증자된 대두, 증자된 밀쌀, 메주 또는 된장을 혼합하여 1차 혼합물을 제조한 후 10 내지 30일간 25 내지 35℃에서 숙성하였으며, 숙성된 1차 혼합물에 메주 및 된장, 소금, 향미 증진제를 혼합하여 2차 혼합물을 제조하고 후(後)숙성하여 제조된 된장으로 간이 관능평가를 하였으며, 결과는 표 3과 같다.
In addition, the above-mentioned flour was mixed with salt or salt water, boiled soybean, boiled wheat, meju or doenjang to prepare a primary mixture, aged at 25 to 35 ° C for 10 to 30 days, The results are shown in Table 3. The results are shown in Table 3. The results are shown in Table 3. The results are shown in Table 3.

표 3의 결과로부터, 아밀라아제와 프로테아제 효소 역가 및 맛 품질이 가장 우수한 CJ KY 균주를 최종 선정하였다.
From the results shown in Table 3, the CJ KY strain having the best amylase and protease enzyme activity and taste quality was finally selected.

최종 선정 균주인 CJ KY의 분류 계통도는 도 1과 같다.The classification scheme of the final selection strain, CJ KY, is shown in FIG.

또한, 최종 선정 균주인 CJ KY의 16S rDNA 염기서열분석 결과는 도 2와 같다.
The results of 16S rDNA sequencing analysis of the final selected strain CJ KY are shown in FIG.

2차 선별 균주 적용 소맥분 코오지의 효소 역가 및 된장의 맛 품질 비교Comparison of the enzyme titer and the taste quality of soybean paste soybean paste koji 아밀라아제 역가 (U/g)Amylase activity (U / g) 프로테아제 역가 (U/g)Protease activity (U / g) 간이 관능평가Simple sensory evaluation CJ 1334CJ 1334 393.6393.6 104.2104.2 3.213.21 CJ 1354CJ 1354 440.1440.1 140.5140.5 3.573.57 CJ KYCJ KY 546.8546.8 157.4157.4 4.214.21 CJ KGCJ KG 477.3477.3 163.3163.3 3.643.64

2. 2. 된장의 제조Manufacture of miso

1) 증자 단계 및 제국 단계 1) Stage and Empire Stage

상기의 최종 선정 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY와 시중의 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 함유한 소맥분 코오지를 실시예 1 및 비교예 1과 같이 제조하여 효소 역가를 비교하였다.
The final selected strains, Aspergillus oryzae CJ KY and commercially available aspergillus oryzae were prepared as in Example 1 and Comparative Example 1 to compare the enzyme activity.

실시예Example 1 : 신규의  1: New 아스퍼질러스Aspergillus 오리재  Duck CJCJ KYKY 적용  apply 소맥분Wheat flour 코오지Koji 제조 Produce

소맥분 8,000kg을 5단 연속증자기로 수분 함량 33 내지 38 중량%가 되도록 증자 한 후 방냉기를 이용하여 온도를 35 내지 40℃로 냉각하여 제국실로 이송하였다. 그 다음, 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY를 소맥분 중량의 0.2 중량%로 접종하고 30 내지 35℃에서 3일간 제국 발효 과정을 수행하였다.
8000 kg of wheat flour was heated to a temperature of 35 to 40 캜 using a warm air cooler to a water content of 33 to 38% by weight in a five-stage continuous thickener and transferred to an emulsion chamber. Then, the new Aspergillus oryzae CJ KY was inoculated at 0.2 wt% of the weight of the flour and the emulsion fermentation was performed at 30 to 35 캜 for 3 days.

신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 적용 소맥분 코오지의 효소 역가는 표 4와 같다.
New Aspergillus oryzae CJ KY Applied Table 4 shows the enzyme content of wheat flour koji.

비교예Comparative Example 1 : 통상의  1: normal 아스퍼질러스Aspergillus 오리재 적용  Reapply ducks 소맥분Wheat flour 코오지Koji 제조 Produce

소맥분 8,000kg을 5단 연속증자기로 수분 함량 33 내지 38 중량%가 되도록 증자 한 후 방냉기를 이용하여 온도를 35 내지 40℃로 냉각하여 제국실로 이송하였다. 그 다음, 시중의 아스퍼질러스 오리자에를 소맥분 중량의 0.2 중량%로 접종하고 30 내지 35℃에서 3일간 제국 발효 과정을 수행하였다.
8000 kg of wheat flour was heated to a temperature of 35 to 40 캜 using a warm air cooler to a water content of 33 to 38% by weight in a five-stage continuous thickener and transferred to an emulsion chamber. Then, commercially available Aspergillus oryzae was inoculated at 0.2 wt% of the flour weight, and imperial fermentation was performed at 30 to 35 DEG C for 3 days.

통상의 아스퍼질러스 오리자에 적용 소맥분 코오지의 효소 역가는 표 4와 같다.
Applied to normal Aspergillus oryzae The enzyme activity of wheat flour koji is shown in Table 4.

신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY와 통상의 아스퍼질러스 오리재 적용 소맥분 코오지의 효소 역가 New Aspergillus oryzae CJ KY and ordinary Aspergillus dyes Re-applied Wheat flour Enzyme activity of koji 아밀라아제 역가 (U/g)Amylase activity (U / g) 프로테아제 역가 (U/g)Protease activity (U / g) 실시예 1Example 1 395395 115115 비교예 1Comparative Example 1 238238 110110

상기 표 4의 결과로부터, 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY를 적용한 소맥분 코오지의 아밀라아제 및 프로테아제 효소 역가가 통상의 아스퍼질러스 오리재를 적용한 소맥분 코오지 보다 각각 66.0% 및 4.5%가 향상되었음을 확인할 수 있었다.
From the results in Table 4, it was confirmed that the amylase and protease enzyme titer of wheat flour based on the new Aspergillus oryzae CJ KY was improved by 66.0% and 4.5%, respectively, compared with the wheat flour based soybean flour applied with conventional Aspergillus oryzae there was.

3) 1차 숙성 단계 3) First stage of ripening

상기 실시예 1 및 비교예 1의 소맥분 코오지를 이용하여 아래의 실시예 2 및 비교예 2와 같이 1차 혼합물을 제조한 후 10 내지 30일간 25 내지 35℃에서 숙성하였다.
The first mixture was prepared as in Example 2 and Comparative Example 2 below using the wheat flour coagulant of Example 1 and Comparative Example 1, and then aged at 25 to 35 ° C for 10 to 30 days.

실시예Example 2 : 신규의  2: New 아스퍼질러스Aspergillus 오리재  Duck CJCJ KYKY 를 이용한 1차 혼합물 제조Preparation of primary mixture using

실시예 1에 의해 제조된 소맥분 코오지에 1차 혼합물 전체 중량을 기준으로, 증자된 대두를 25 내지 28 중량%로, 증자된 밀쌀을 2 내지 5 중량%로, 메주 (콩 단독 또는 콩과 전분질 원료 등을 혼합하여 개량 또는 재래식으로 발효한 메주)를 1 내지 5 중량%로 혼합하고, 염수 또는 식염을 혼합하여 1차 혼합물의 최종 수분이 48 중량%이고, 최종 염도가 11 중량%인 1차 혼합물을 제조하였다.
To the wheat flour koji prepared in Example 1 was added 25 to 28% by weight of the soybeans and 2 to 5% by weight of the wheat flour, based on the total weight of the primary mixture, And 1 to 5% by weight of a mixture of sodium chloride and sodium chloride to prepare a primary mixture having a final water content of 48% by weight and a final salt content of 11% by weight .

신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 적용 1차 혼합물의 일반성분은 표 5와 같다.Table 5 shows the general composition of the primary mixture of the novel aspergillus oryzae CJ KY.

신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 적용 1차 혼합물의 휘발성 향기 성분은 표 6과 같다.
The volatile flavor components of the first mixture of the new aspergillus dough CJ KY are shown in Table 6.

비교예Comparative Example 2 : 통상의  2: normal 아스퍼질러스Aspergillus 오리재를Duck 이용한 1차 혼합물 제조 Manufacture of primary mixture using

비교예 1에 의해 제조된 소맥분 코오지에 1차 혼합물 전체 중량을 기준으로, 증자된 대두를 25 내지 28 중량%로, 증자된 밀쌀을 2 내지 5 중량%로, 메주(콩 단독 또는 콩과 전분질 원료 등을 혼합하여 개량 또는 재래식으로 발효한 메주 또는 분말)를 1 내지 5 중량%로 혼합하고, 염수 또는 식염을 혼합하여 1차 혼합물의 최종 수분이 48 중량%이고, 최종 염도가 11 중량%인 1차 혼합물을 제조하였다.The wheat flour coagulum prepared in Comparative Example 1 was added with 25 to 28% by weight of the increased soybeans and 2 to 5% by weight of the increased wheat flour based on the total weight of the primary mixture, And 1 to 5% by weight of a mixture), and the mixture is mixed with salt water or salt to prepare a mixture having a final water content of 48% by weight and a final salt content of 11% by weight Tea mixture.

통상의 아스퍼질러스 오리재 적용 1차 혼합물의 일반성분은 표 5와 같다.Table 5 shows the general composition of the first mixture of conventional aspergillus duck re-applied.

통상의 아스퍼질러스 오리재 적용 1차 혼합물의 휘발성 향기 성분은 표 6과 같다.
Table 6 shows the volatile flavor components of the first mixture of conventional Aspergillus oryzae.

1차 혼합물의 일반성분 비교Comparison of general components of primary mixture 수분(%)moisture(%) 염도(%)Salinity (%) 성숙도(mg%)Maturity (mg%) 환원당(%)Reducing sugar (%) pHpH 실시예 2Example 2 49.749.7 10.210.2 367.3367.3 14.914.9 5.335.33 비교예 2Comparative Example 2 50.850.8 10.910.9 304.7304.7 14.214.2 5.345.34

상기 표 5의 결과로부터, 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY를 적용한 1차 혼합물의 성숙도가 통상의 아스퍼질러스 오리재를 적용한 1차 혼합물보다 20.1% 가 향상되었음을 확인할 수 있었다.
From the results shown in Table 5, it was confirmed that the maturity of the primary mixture using the novel Aspergillus oryzae CJ KY was 20.1% higher than that of the primary mixture using the conventional Aspergillus oryzae.

1차 혼합물의 주요 휘발성 향기 성분 비교 (unit: peak area %)Comparison of the main volatile flavor components of the first mixture (unit: peak area%) 주요 휘발성 향기 성분Major Volatile Flavor Components 비교예 2Comparative Example 2 실시예 2Example 2 p-valuep-value butanoic acidbutanoic acid 1.808±0.0881.808 + 0.088 1.440±0.4621.440 0.462 0.2460.246 3-methylbutanoate3-methylbutanoate 0.275±0.0190.275 + 0.019 0.150±0.0590.150 ± 0.059 0.0260.026 1-octen-3-ol1-octen-3-ol 0.970±0.0730.970 + 0.073 1.224±0.2481.224 + 0.248 0.1640.164 2-methylbutanal2-methylbutanal 0.531±0.0590.531 ± 0.059 0.171±0.1290.171 + 0.129 0.0120.012 3-methylbutanal3-methylbutanal 0.639±0.0480.639 + 0.048 0.081±0.0300.081 0.030 0.0000.000 ethyl acetateethyl acetate 0.640±0.1110.640 + 0.111 2.593±0.8402.593 + 0.840 0.0160.016 ethyl butanoateethyl butanoate 8.054±1.1218.054 ± 1.121 18.033±3.81118.033 + - 3.811 0.0120.012 2-methoxyphenol2-methoxyphenol 0.108±0.0110.108 0.011 0.159±0.0400.159 + 0.040 0.0980.098 phenolphenol 0.043±0.0040.043 + 0.004 0.032±0.0100.032 0.010 0.1360.136 4-ethyl-2-methoxyphenol4-ethyl-2-methoxyphenol 0.026±0.0090.026 ± 0.009 0.017±0.0030.017 ± 0.003 0.1780.178

상기 표 6의 결과로부터, 실시예 2는 된장의 이취(異臭)로 발현될 수 있는 쿰쿰한 향을 나타내는 butanoic acid, 3-methylbutanoate와 쓴 된장향을 나타내는 2-methylbutanal, 3-methylbutanal, phenol, 4-ethyl-2-methoxyphenol의 함량이 비교예 2보다 상대적으로 낮은 것을 확인할 수 있었다. 또한, 된장에 과일 향을 내어 전반적인 향미에 긍정적으로 기여하는 ethyl acetate, ethyl butanoate 등의 ester류가 실시예 2가 비교예 2보다 높은 농도를 보였다.
From the results shown in Table 6, Example 2 shows that butanoic acid, 3-methylbutanoate and 2-methylbutanal, 3-methylbutanal, phenol, and 4-methylbutanal, which exhibit a smell of odor, -ethyl-2-methoxyphenol was relatively lower than that of Comparative Example 2. In addition, the ester of ethyl acetate and ethyl butanoate, which contributes positively to the overall flavor by giving incense to the miso, showed higher concentration than that of Comparative Example 2.

4) 2차 숙성 단계 4) Second stage of ripening

상기와 같이 1차 숙성 단계를 거친 실시예 2 및 비교예 2의 1차 혼합물을 사용하여 하기의 실시예 3 및 비교예 3과 같이 2차 혼합물을 제조하고, 실시예 3 및 비교예 3의 2차 혼합물을 살균, 숙성하여 된장을 제조하였다. A secondary mixture was prepared in the same manner as in Example 3 and Comparative Example 3 below using the primary mixture of Example 2 and Comparative Example 2 which had undergone the primary aging step as described above and the secondary mixture of Example 2 and Comparative Example 3 The tea mixture was sterilized and aged to prepare doenjang.

또한, 제조된 각 된장의 향기 성분을 비교하였다.
The fragrance components of each doenjang prepared were also compared.

실시예Example 3 : 신규의  3: New 아스퍼질러스Aspergillus 오리재  Duck CJCJ KYKY 를 적용한 2차 혼합물 제조To prepare a second mixture

상기 실시예 2에 따라 10 내지 30일 동안 발효 숙성 완료된 1차 혼합물에, 2차 혼합물 전체 중량을 기준으로, 된장 3 내지 15중량%, 소금 0.1 내지 0.5 중량%, 향미 증진제 0.01 내지 0.1 중량%를 투입하여 혼합하였다. 3 to 15% by weight of doenjang, 0.1 to 0.5% by weight of salt and 0.01 to 0.1% by weight of a flavor enhancer were added to the primary mixture which had been fermented and aged for 10 to 30 days according to Example 2, And mixed.

그 다음, 75℃에서 20분간 살균 및 냉각한 후 2차 혼합물 전체 중량을 기준으로 식용 알코올 1.5 내지 2.5 중량%를 혼합하고 숙성시켰다.
After sterilization and cooling at 75 캜 for 20 minutes, 1.5 to 2.5% by weight of edible alcohol based on the total weight of the secondary mixture was mixed and aged.

신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 적용 2차 혼합물을 살균, 숙성하여 제조된 된장의 유리 아미노산은 표 7과 같다.
Table 7 shows the free amino acids of doenjang prepared by sterilizing and aging the secondary mixture of the new aspergillus oryzae CJ KY application.

비교예Comparative Example 3 : 통상의  3: normal 아스퍼질러스Aspergillus 오리재를Duck 적용한 2차 혼합물 제조 Manufacture of secondary mixtures

상기 비교예 2에 따라 10 내지 30일 동안 발효 숙성 완료된 1차 혼합물에, 2차 혼합물 전체 중량을 기준으로, 된장 3 내지 15 중량%, 소금 0.01 내지 0.5 중량%, 향미 증진제 0.01 내지 0.1 중량%를 투입하여 혼합하였다. 3 to 15% by weight of doenjang, 0.01 to 0.5% by weight of salt and 0.01 to 0.1% by weight of a flavor enhancer were added to the primary mixture which had been fermented and aged for 10 to 30 days according to the above Comparative Example 2, And mixed.

그 다음, 75℃에서 20분간 살균, 냉각한 후 2차 혼합물 전체 중량을 기준으로 식용 알코올 1.5 내지 2.5 중량%를 혼합하고 숙성시켰다.
After sterilization and cooling at 75 캜 for 20 minutes, 1.5 to 2.5% by weight of edible alcohol based on the total weight of the secondary mixture was mixed and aged.

통상의 아스퍼질러스 오리재 적용 2차 혼합물을 살균, 숙성하여 제조된 된장의 유리 아미노산은 표 7과 같다.
Table 7 shows the free amino acids of doenjang prepared by sterilizing and aging the secondary mixture of common aspergillus ducks.

된장의 유리 아미노산 함량 분석 (unit : mM)Analysis of free amino acid content of doenjang (unit: mM) 아미노산amino acid 비교예 3Comparative Example 3 실시예 3Example 3 aspartateaspartate 32.432.4 29.429.4 glutamateglutamate 397.2397.2 411.2411.2 asparagineasparagine 11.311.3 10.410.4 serineserine 55.655.6 55.355.3 histidinehistidine 12.412.4 9.79.7 glycinglycin 33.433.4 34.134.1 threoninethreonine 33.733.7 33.533.5 Arginine+glutamineArginine + glutamine 59.459.4 59.459.4 alaninefield 61.861.8 62.262.2 cysteinecysteine 26.826.8 24.724.7 valinevaline 50.550.5 51.551.5 methionine메티오 로 5.85.8 6.06.0 tryptophantryptophan 0.00.0 0.00.0 phenylalanine피 phenylalanine 63.763.7 54.654.6 isoleucineisoleucine 56.756.7 54.654.6 leucineleucine 76.376.3 77.277.2 lysinelysine 54.154.1 58.758.7 prolineproline 13.913.9 12.412.4

상기 표 7의 결과로부터, 실시예 3의 아미노산 조성에서 쓴맛에 기여하는 아미노산인 histidine, alanine, valine, methionine, phenylalanine, isoleucine, leucine, lysine 등의 총 함량이 비교예 3보다 낮은 함량을 보였다.
From the results shown in Table 7, the total content of histidine, alanine, valine, methionine, phenylalanine, isoleucine, leucine and lysine, which are amino acids contributing to the bitter taste in the amino acid composition of Example 3,

3. 된장의 관능 평가3. Sensory evaluation of miso

상기의 비교예 3 및 실시예 3에 의해 제조된 종래의 전분질을 이용한 개량식 된장과 신규의 아스퍼질러스 오라이자에 CJ KY를 이용하여 제조한 된장을 이용하여, 서울 및 경기권에 거주하는 30 내지 49세 주부 200명을 대상으로 된장의 관능 평가를 실시하였다. 관능평가는 5점 만점을 기준으로 세부 맛 속성에 대해 선호도를 조사하는 방식으로 평가하였다. 상기의 관능 평가 결과는 표 8과 같다.
Using the modified starch prepared using the conventional starch prepared by Comparative Examples 3 and 3 and the soybean paste prepared by using CJ KY in the new Aspergillus oryzae, Sensory evaluation of doenjang was conducted on 200 housewives. The sensory evaluation was evaluated in such a manner that the preference degree was examined for the detailed taste attribute based on the score of 5 points. The results of the above sensory evaluation are shown in Table 8.

또한, 훈련된 패널 10명을 대상으로 묘사 분석을 실시하였으며, 3반복으로 평가하여 평균값을 제시하였다. 상기의 묘사 분석 결과는 표 9와 같다.
In addition, descriptive analysis was performed on 10 trained panelists, and the mean value was presented by evaluating it with 3 repetitions. Table 9 shows the above analysis results.

된장의 관능 평가 (선호도, 5점 척도)Sensory evaluation of miso (Preference, 5 point scale) 맛 속성Taste property 비교예 3Comparative Example 3 실시예 3Example 3 전반적인 맛Overall taste 3.743.74 3.853.85 전반적인 외관Overall appearance 3.593.59 3.653.65 짠맛Salty taste 3.813.81 3.893.89 진한맛A deep flavor 3.383.38 3.543.54 텁텁한 맛Tough taste 3.383.38 3.883.88 구수한 맛Savory taste 3.663.66 3.763.76 개운한 맛Refreshing taste 3.763.76 3.823.82 느끼한 맛Tastes 3.833.83 3.933.93 단맛sweetness 3.523.52 3.643.64 뒷맛aftertaste 3.713.71 3.733.73 국물에 풀어지는 정도Degree of loosening in broth 4.044.04 4.074.07 되직함Back 3.853.85 3.953.95

된장의 묘사 분석 (향, 맛/향미, 15점 척도)Analysis of description of miso (incense, taste / flavor, 15 point scale) 특성characteristic 비교예 3Comparative Example 3 실시예 3Example 3 p-valuep-value incense 짠내Knit 6.206.20 5.135.13 0.000.00 단내Internally 4.104.10 4.554.55 0.020.02 신내New 5.135.13 4.084.08 0.000.00 쓴내Bitter 3.903.90 3.183.18 0.000.00 메주향Meju incense 6.936.93 5.555.55 0.000.00 콩구수한향Soybean fragrance 7.787.78 8.988.98 0.000.00 미소된장향Miso miso incense 8.308.30 9.829.82 0.000.00 간장향Soy sauce flavor 5.655.65 4.204.20 0.000.00 야채우린향Vegetables We Flavor 1.751.75 3.003.00 0.000.00 소독약향Disinfectant incense 2.382.38 1.451.45 0.000.00 탄내In-tank 2.552.55 1.431.43 0.000.00 소금짠내Salty salty 3.553.55 2.132.13 0.000.00 군내Inside 3.533.53 1.981.98 0.000.00 맛/향미Taste / flavor 짠맛Salty taste 8.508.50 7.337.33 0.000.00 단맛sweetness 5.155.15 6.456.45 0.000.00 신맛Sour taste 5.185.18 4.154.15 0.000.00 쓴맛bitter 3.583.58 2.782.78 0.000.00 우마미Umami 5.835.83 7.087.08 0.000.00 메주향미Meju flavor 6.886.88 5.655.65 0.000.00 삶은콩구수한향미Boiled bean savory flavor 8.258.25 9.209.20 0.000.00 곡물구수한향미Grain savory flavor 3.953.95 5.155.15 0.000.00 미소된장향미Miso miso flavor 8.638.63 10.1010.10 0.000.00 오래묵힌향미Long-lasting flavor 3.983.98 2.602.60 0.000.00 간장향미Soy flavor 3.883.88 2.422.42 0.000.00 야채우린향미Vegetables we flavor 2.032.03 2.802.80 0.000.00 소독약향미Disinfectant flavor 2.152.15 1.251.25 0.000.00 미역/다시마향미Seaweed / kelp flavor 1.451.45 2.652.65 0.000.00 소금향미Salt flavor 3.553.55 2.082.08 0.000.00

상기 표 8, 표 9의 결과로부터, 실시예 3의 쓴내, 쓴맛, 군내 등이 비교예 3보다 유의차 있게 낮은 수준을 보였으며, 구수한 향미, 우마미, 미소된장 향미 등이 유의차 있게 높은 수준을 보였다. 선호도에서는 진한맛, 텁텁한 맛, 구수한 맛, 단맛 등이 실시예 3이 높게 평가되었고, 전반적인 맛도 비교예 3보다 높게 평가되었다. 이는 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY의 높은 효소 역가로 분해율이 높아지면서, 우마미 및 구수한 향미 등의 향미 특성이 우수해진 반면, 쓴맛을 기인하는 발효산물은 적게 생성되어 된장의 맛 품질이 향상되었다.
From the results of the above Tables 8 and 9, the bitterness, bitterness, and intramuscularity of Example 3 were significantly lower than those of Comparative Example 3, and the levels of savory flavor, umami, miso miso flavor were significantly higher It looked. The taste of Example 3 was evaluated to be higher than that of Comparative Example 3, and the overall taste was evaluated to be higher than that of Comparative Example 3 in terms of preference, thick taste, savory taste, sweet taste and sweet taste. As a result, the flavor quality of the fresh Aspergillus oryzae CJ KY was improved, and the flavor characteristics such as umami and savory flavor were improved. On the other hand, the fermented product resulting from the bitter taste was less and the taste quality of the soybean paste was improved .

한국미생물보존센터(국외)Korea Microorganism Conservation Center (overseas) KCCM11302PKCCM11302P 2012092720120927

<110> CJ Cheiljedang Corporation <120> Novel Aspergillus oryzae CJ KY isolated from the Korean traditional meju and the manufacturing method of doenjang using this fungi and the doenjang from manufactured thereof <130> PA12-0449 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 544 <212> DNA <213> Aspergillus oryzae CJ KY <400> 1 gttctagcga gcccaacctc ccacccgtgt ttactgtacc ttagttgctt cggcgggccc 60 gccattcatg gccgccgggg gctctcagcc ccgggcccgc gcccgccgga gacaccacga 120 actctgtctg atctagtgaa gtctgagttg attgtatcgc aatcagttaa aactttcaac 180 aatggatctc ttggttccgg catcgatgaa gaacgcagcg aaatgcgata actagtgtga 240 attgcagaat tccgtgaatc atcgagtctt tgaacgcaca ttgcgccccc tggtattccg 300 gggggcatgc ctgtccgagc gtcattgctg cccatcaagc acggcttgtg tgttgggtcg 360 tcgtcccctc tccggggggg acgggcccca aaggcagcgg cggcaccgcg tccgatcctc 420 gagcgtatgg ggctttgtca cccgctctgt aggcccggcc ggcgcttgcc gaacgcaaat 480 caatcttttt ccaggttgac ctcggatcag gtagggatac ccgctgaact taagcatatc 540 aaag 544 <110> CJ Cheiljedang Corporation <120> Novel Aspergillus oryzae CJ KY isolated from the Korean traditional meju and the manufacturing method of doenjang using this fungi and the doenjang from manufactured thereof <130> PA12-0449 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 544 <212> DNA <213> Aspergillus oryzae CJ KY <400> 1 gttctagcga gcccaacctc ccacccgtgt ttactgtacc ttagttgctt cggcgggccc 60 gccattcatg gccgccgggg gctctcagcc ccgggcccgc gcccgccgga gacaccacga 120 actctgtctg atctagtgaa gtctgagttg attgtatcgc aatcagttaa aactttcaac 180 aatggatctc ttggttccgg catcgatgaa gaacgcagcg aaatgcgata actagtgtga 240 attgcagaat tccgtgaatc atcgagtctt tgaacgcaca ttgcgccccc tggtattccg 300 gggggcatgc ctgtccgagc gtcattgctg cccatcaagc acggcttgtg tgttgggtcg 360 tcgtcccctc tccggggggg acgggcccca aaggcagcgg cggcaccgcg tccgatcctc 420 gagcgtatgg ggctttgtca cccgctctgt aggcccggcc ggcgcttgcc gaacgcaaat 480 caatcttttt ccaggttgac ctcggatcag gtagggatac ccgctgaact taagcatatc 540 aaag 544 <110> CJ Cheiljedang Corporation <120> Novel Aspergillus oryzae CJ KY isolated from the Korean          traditional meju and the manufacturing method of doenjang using          this fungi and the doenjang <130> PA12-0449 <160> 1 <170> Kopatentin 2.0 <210> 1 <211> 544 <212> DNA <213> Aspergillus oryzae CJ KY <400> 1 gttctagcga gcccaacctc ccacccgtgt ttactgtacc ttagttgctt cggcgggccc 60 gccattcatg gccgccgggg gctctcagcc ccgggcccgc gcccgccgga gacaccacga 120 actctgtctg atctagtgaa gtctgagttg attgtatcgc aatcagttaa aactttcaac 180 aatggatctc ttggttccgg catcgatgaa gaacgcagcg aaatgcgata actagtgtga 240 attgcagaat tccgtgaatc atcgagtctt tgaacgcaca ttgcgccccc tggtattccg 300 gggggcatgc ctgtccgagc gtcattgctg cccatcaagc acggcttgtg tgttgggtcg 360 tcgtcccctc tccggggggg acgggcccca aaggcagcgg cggcaccgcg tccgatcctc 420 gagcgtatgg ggctttgtca cccgctctgt aggcccggcc ggcgcttgcc gaacgcaaat 480 caatcttttt ccaggttgac ctcggatcag gtagggatac ccgctgaact taagcatatc 540 aaag 544 <110> CJ Cheiljedang Corporation <120> Novel Aspergillus oryzae CJ KY isolated from the Korean          traditional meju and the manufacturing method of doenjang using          this fungi and the doenjang <130> PA12-0449 <160> 1 <170> Kopatentin 2.0 <210> 1 <211> 544 <212> DNA <213> Aspergillus oryzae CJ KY <400> 1 gttctagcga gcccaacctc ccacccgtgt ttactgtacc ttagttgctt cggcgggccc 60 gccattcatg gccgccgggg gctctcagcc ccgggcccgc gcccgccgga gacaccacga 120 actctgtctg atctagtgaa gtctgagttg attgtatcgc aatcagttaa aactttcaac 180 aatggatctc ttggttccgg catcgatgaa gaacgcagcg aaatgcgata actagtgtga 240 attgcagaat tccgtgaatc atcgagtctt tgaacgcaca ttgcgccccc tggtattccg 300 gggggcatgc ctgtccgagc gtcattgctg cccatcaagc acggcttgtg tgttgggtcg 360 tcgtcccctc tccggggggg acgggcccca aaggcagcgg cggcaccgcg tccgatcctc 420 gagcgtatgg ggctttgtca cccgctctgt aggcccggcc ggcgcttgcc gaacgcaaat 480 caatcttttt ccaggttgac ctcggatcag gtagggatac ccgctgaact taagcatatc 540 aaag 544

Claims (11)

전통 메주에서 분리·동정한 신규한 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY (기탁번호: KCCM 11302P).Away from the traditional Meju, a novel strain of Aspergillus identified duck material (Aspergillus oryzae ) CJ KY (Accession No .: KCCM 11302P). 제1항에 있어서,
상기 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY는 소맥분 또는 밀쌀을 기질로 아밀라아제 및 프로테아제의 활성이 우수한 균주인 것을 특징으로 하는 균주.
The method according to claim 1,
The Aspergillus duck material (Aspergillus oryzae ) CJ KY is a strain having excellent activity of amylase and protease with wheat flour or wheat as a substrate.
소맥분 원료을 가수하여 증자시키는 증자 단계;
상기 증자된 소맥분에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 접종 및 배양하여 소맥분 코오지를 만드는 제국 단계;
상기 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시키는 1차 숙성 단계; 및
상기 숙성된 1차 혼합물에 메주 및 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 살균, 숙성시키는 2차 숙성 단계;를 포함하는 된장의 제조 방법.
A step of adding wheat flour raw material to increase the amount;
Aspergillus ( Aspergillus oryzae) was added to the above- oryzae ) CJ KY inoculated and cultured to make wheat flour coagulum;
A first aging step of adding a salt or brine to the wheat flour koji and aging a primary mixture of at least one selected from the group consisting of wheat germ, added soybean, meju and miso; And
And a second aging step of sterilizing and aging a secondary mixture obtained by mixing at least one selected from the group consisting of soybean paste, salt, flavor enhancer and grain processed product into the aged primary mixture.
제3항에 있어서,
상기 증자 단계에서, 증자된 소맥분의 수분 함량은 32 내지 38 중량% 인 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법.
The method of claim 3,
Wherein the water content of the flour is in the range of 32 to 38% by weight.
제3항에 있어서,
상기 제국 단계에서, 증자된 소맥분에 원료 총량 대비 0.1 내지 0.3 중량%의 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY 및 0.5 내지 1.5 중량%의 증량제를 첨가한 후, 30~40℃에서 3일간 발효하여 소맥분 코오지를 만드는 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법.
The method of claim 3,
In the empire stage, 0.1 to 0.3% by weight of Aspergillus ( Aspergillus oryzae) oryzae CJ KY and 0.5 to 1.5% by weight of an increasing agent, and fermenting the mixture at 30 to 40 占 폚 for 3 days to produce wheat flour coagulum.
제3항에 있어서,
상기 1차 숙성 단계에서, 상기 식염 또는 염수는 1차 혼합물 전체 중량에 대하여 염분 농도가 9 내지 13 중량% 함량이 되도록 첨가하고, 증자된 대두, 증자된 밀쌀, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상은, 1차 혼합물 전체 중량에 대하여 1 내지 38 중량% 함량이 되도록 첨가하는 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법.
The method of claim 3,
In the primary aging step, the salted or salted water is added so that the salt concentration is 9 to 13% by weight based on the total weight of the primary mixture, and 1 &lt; RTI ID = 0.0 &gt; By weight based on the total weight of the primary mixture is added so as to be 1 to 38% by weight based on the total weight of the primary mixture.
제3항에 있어서,
상기 1차 숙성 단계에서, 상기 1차 혼합물은 45 내지 52 중량% 함량으로 수분을 함유하는 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법.
The method of claim 3,
Wherein in the primary aging step, the primary mixture contains moisture in an amount of 45 to 52 wt.%.
제3항에 있어서,
상기 1차 숙성 단계에서, 숙성 온도는 25 내지 35℃, 숙성 시간은 10 내지 30일인 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법.
The method of claim 3,
Wherein the aging temperature is 25 to 35 占 폚 and the aging time is 10 to 30 days in the primary aging step.
제3항에 있어서,
상기 2차 숙성 단계에서, 2차 혼합물을 60 내지 85 ℃에서 1 내지 60분 동안 살균한 후, 식용 알코올을 첨가하여 숙성하는 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법.
The method of claim 3,
In the secondary aging step, the secondary mixture is sterilized at 60 to 85 ° C for 1 to 60 minutes, and then the edible alcohol is added thereto to aged.
제3항에 있어서,
상기 2차 숙성 단계에서, 2차 혼합물 100 중량부에 대하여 메주 또는 된장 3 내지 15 중량부, 소금, 향미 증진제 또는 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 1 내지 5 중량부를 함유하도록 첨가하여 혼합한 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법.
The method of claim 3,
In the second aging step, 100 parts by weight of the secondary mixture is added so as to contain 1 to 5 parts by weight of at least one selected from the group consisting of 3 to 15 parts by weight of meju or soybean paste, salt, flavor enhancer or grain processed product &Lt; / RTI &gt; wherein the soybean paste is mixed.
제3항 내지 제10항 중 어느 한 항의 제조방법에 의하여 제조된 된장.
A miso produced by the method of any one of claims 3 to 10.
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