WO2014069923A1 - Novel aspergillus oryzae cj ky strain isolated from traditional fermented soybeans, method for preparing soybean paste using same, and soybean paste prepared by method thereof - Google Patents

Novel aspergillus oryzae cj ky strain isolated from traditional fermented soybeans, method for preparing soybean paste using same, and soybean paste prepared by method thereof Download PDF

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aspergillus oryzae
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    • C12R2001/69Aspergillus oryzae

Definitions

  • doenjang are traditional soybeans soaked in soy sauce and dumped, and dried salted soybeans mixed with salted soybeans, and fermented soybeans. Etc. can be mentioned.
  • the liquor yeast added at the time of purchase in the mass production process is difficult to homogenize, so that not only the quality deviation occurs, but when the growth is active, the alcohol odor becomes stronger and the flavor of miso is lowered.
  • the present inventors apply the same bacteria as in the conventional improved method to streamline the manufacturing process, but the amount of decomposition products due to bitter taste is small, and the savory taste and the delicious flavor are
  • the new strain Aspergillus oryzae CJ KY which has excellent characteristics, is isolated and selected from traditional meju, and used for making soybean paste. Miso was developed and the present invention was completed.
  • Patent Document 1 KR10-0369841 B1
  • An object of the present invention is to isolate and select a novel strain Aspergillus oryzae CJ KY, which shows high enzyme titer based on wheat flour or wheat, in traditional meju, and to use it for making miso, resulting in better flavor. It is an object of the present invention to provide a method of preparing miso and a miso produced by the method.
  • the flour or milssal, soybean, etc. exhibit a high amylase and protease activity as a substrate, low production of degradation products resulting from the bitter taste, flavor and Kaoru new strain Aspergillus duck material that has excellent properties of flavor (Aspergillus oryzae ) CJ KY is separated and selected from traditional meju and used for making miso, and an object of the present invention is to provide a method of preparing miso and a miso prepared by the method.
  • the present invention is isolated and identified from traditional meju, Aspergillus oryzae CJ KY which is excellent in carbohydrate and protease activity based on wheat flour and wheat as a substrate To provide.
  • the present invention provides a miso prepared by the above method of producing miso.
  • FIG. 1 is a diagram showing the classification of a novel Aspergillus oryzae CJ KY.
  • the Aspergillus oryza (Aspergillus oryzae) CJ KY was isolated and identified from traditional meju collected by a traditional food manufacturer.
  • Aspergillus oryzae strains were selected as a fungus that was excellent in spore generation ability without generating toxins and causing allergies among fungi isolated from traditional meju. Thereafter, the first selection strain was subjected to solid culture of wheat flour as a raw material to secondarily select strains having high carbohydrate and proteolytic ability, and finally select strains to improve flavor of doenjang from the second selected strains. This was named Aspergillus oryzae CJ KY and was deposited with the Korea Microorganism Conservation Center on September 27, 2012 (Accession No .: KCCM 11302P) .
  • the present invention is a fermented wheat flour using fermented wheat flour using Aspergillus oryzae CJ KY, a strain that improves the flavor of miso, while having strong carbohydrate and proteolytic ability as the substrate based on the above-mentioned wheat flour It is about a method.
  • the imperial step is a step of inoculating and cultivating Aspergillus oryza CJ KY in the cooked wheat flour to make a wheat flour coo, specifically, the total amount of raw material in the cooked wheat flour Compared to 0.1 to 0.3% by weight of Aspergillus oryzae CJ KY and 0.5 to 1.5% by weight of cereal or bean flour as an extender, and then 30 to 40 °C, more preferably 32 Fermented and dried for 3 days at 35 °C to make wheat flour coji.
  • the first aging step 1 or more salt selected by adding salt or saline to the wheat flour coo, and mixed with at least one selected from the group consisting of increased rice, steamed soybean, meju and miso It is the step of aging the tea mixture.
  • the salt or brine is preferably added so that the salinity is 9 to 13% by weight relative to the primary mixture.
  • the primary mixture is preferably fermented at 25 to 35 ° C. for 10 to 30 days.
  • strain used as a starter in the present invention was isolated and selected from traditional meju collected from traditional food manufacturers in Gyeonggi, Gangwon, Chungbuk, Jeonnam.
  • the selected strains were CJ 1333, CJ 1334, CJ 1335, CJ 1336, CJ 1354, CJ KY, CJ KG, and the results of sporulation were shown in Table 1.
  • the first mixture was prepared as in Example 2 and Comparative Example 2 using wheat flour coji of Example 1 and Comparative Example 1, and then aged at 25 to 35 ° C. for 10 to 30 days.
  • Volatile fragrance components of the conventional Aspergillus duck reapply primary mixture are shown in Table 6.
  • Example 2 is butanoic acid, 3-methylbutanoate showing a cuminous aroma that can be expressed as a odor of miso, 2-methylbutanal, 3-methylbutanal, phenol, 4 showing bitter miso It was confirmed that the content of -ethyl-2-methoxyphenol was relatively lower than that of Comparative Example 2. In addition, esters such as ethyl acetate and ethyl butanoate, which gave fruit flavor to doenjang and contributed positively to the overall flavor, showed higher concentrations in Example 2 than in Comparative Example 2.
  • Example 3 and Comparative Example 3 2 Using the first mixture of Example 2 and Comparative Example 2 subjected to the first aging step as described above to prepare a secondary mixture as in Example 3 and Comparative Example 3, Example 3 and Comparative Example 3 2 The tea mixture was sterilized and aged to prepare miso.

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Abstract

The present invention relates to Aspergillus oryzae CJ KY, which is a novel strain, a method for manufacturing soybean paste using the same, and soybean paste prepared by the method thereof. More particularly, soybean paste having uniform quality and improved flavor can be prepared by isolating, from traditional fermented soybeans, the novel strain Aspergillus oryzae CJ KY, which is a koji mold having excellent enzyme activities for decomposing carbohydrates and proteins using whole meal or wheat-rice as a substrate, and then selecting the strain when preparing the soybean paste.

Description

전통 메주에서 분리한 신규한 균주인 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 균주와 이를 이용한 된장 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장Aspergillus duck CJ KY strain, a new strain isolated from traditional meju, and a method of preparing doenjang using the same and doenjang prepared by the method
본 발명은 신규한 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY 와, 이를 이용한 된장의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장에 관한 것이다. The present invention relates to a novel strain, Aspergillus oryzae CJ KY, a method of preparing doenjang using the same, and a doenjang prepared by the method.
보다 상세하게는, 소맥분 또는 밀쌀을 기질로 탄수화물 및 단백질 분해 효소 활성이 우수한 국균(麴菌)인 신규의 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하여 된장 제조에 사용함으로써 풍미가 향상된 된장에 관한 것이다.More specifically, a new strain Aspergillus oryzae CJ KY, which is a bacterium with excellent carbohydrate and protease activity, is isolated and selected from traditional meju for the production of miso. It relates to miso with improved flavor by use.
된장의 종류는 간장을 담가서 장물을 떠내고 건더기를 쓰는 재래식 된장과 알콩 메주에 소금물을 알맞게 부어 장물을 떠내지 않고 먹는 개량식 된장, 2가지 방법을 절충한 절충식 된장, 그리고 전분질 원료를 이용한 개량식 된장 등을 들 수 있다.The types of doenjang are traditional soybeans soaked in soy sauce and dumped, and dried salted soybeans mixed with salted soybeans, and fermented soybeans. Etc. can be mentioned.
재래식 된장은 대두로 메주를 쑤어 벽돌형 또는 구형으로 빚어 자연발효 시킨 후 식염수에 침지시켜 6 내지 12개월 숙성한 다음 간장을 분리하고 고형분을 숙성시켜 제조된다. Traditional soybean paste is prepared by fermenting meju with soybeans and forming it into brick or spherical shape and then fermenting it naturally in saline solution and aging for 6 to 12 months, then separating soy sauce and aging solids.
전분질 원료를 이용한 개량식 된장은 소맥분 등의 전분질 원료를 증자하고 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 등의 국균(麴菌)을 이용하여 제국 과정을 거친 후 식염 또는 염수, 증자된 전분질 원료, 증자된 대두 등을 혼합하여 침지 과정 없이 숙성시켜 제조된다.Improved doenjang using starch ingredients is made by adding starch ingredients, such as wheat flour, and empire process using aspergillus oryzae . It is prepared by mixing soybeans and the like without immersion.
상기의 재래식 된장은 대두의 영양성분이 간장으로 용출되어 손실이 발생하는 단점이 있고, 토착 미생물에 의한 발효가 진행되기 때문에 품질 편차가 심할 뿐만 아니라, 잡균 오염에 의한 이상 발효가 발생한다. 또한, 대두 원료의 발효 과정에서 생성되는 펩타이드류, 아민류 등의 발효산물에 의한 쓴맛 생성의 문제가 있다. The conventional soybean paste has a disadvantage in that the nutritional component of soybean is eluted into the soy sauce, and the loss occurs. As the fermentation is performed by indigenous microorganisms, the quality variation is severe, and abnormal fermentation is caused by bacterial contamination. In addition, there is a problem of bitter taste produced by fermentation products such as peptides, amines and the like produced during the fermentation process of soybean raw materials.
상기의 문제점을 보완하기 위해 전분질 원료를 이용한 개량식 된장이 제조되고 있지만, 발효 과정에서의 쓴맛 원인의 발효산물이 여전히 생성되고, 전분질 원료 사용으로 감칠맛이 적은 단점이 있다.In order to supplement the above problems, improved doenjang using starch raw materials has been manufactured, but fermentation products of the bitter cause of the fermentation process are still produced, and there is a disadvantage that the taste is low due to the use of starch raw materials.
상기 종래의 재래식 된장의 문제점을 해결하는 방안으로 대한민국 등록특허 제10-0369841호는 전분질 원료를 이용한 개량식 된장을 제조함에 있어, 주정효모를 첨가하여 향미 부여와 고미(苦味) 성분 생성을 억제하여 풍미가 개선된 된장의 제조방법을 제안하였다.In order to solve the problems of the conventional conventional miso, Korean Patent No. 10-0369841, in the preparation of improved type miso using starch raw materials, add flavored yeast by suppressing flavor and flavor production by adding yeast yeast Proposed an improved method of making doenjang.
그러나, 상기 선행기술에 의한 경우, 대량 생산 공정에서 사입시 첨가되는 주정효모는 균질화가 어려워 품질 편차가 생길 뿐만 아니라, 생육이 활발해지면 알코올취가 강해져 된장의 향미가 저하되는 문제가 발생하게 된다.However, in the case of the prior art, the liquor yeast added at the time of purchase in the mass production process is difficult to homogenize, so that not only the quality deviation occurs, but when the growth is active, the alcohol odor becomes stronger and the flavor of miso is lowered.
본 발명자들은 상기와 같은 종래의 문제를 해결하기 위하여 종래의 개량식 방법과 동일하게 국균(麴菌)만을 적용하여 제조 공정을 효율화하되, 쓴맛에 기인하는 분해산물의 생성량은 적고, 감칠맛과 구수한 향미의 특성은 우수하게 하는 신규 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하고, 이를 된장 제조에 사용함으로써, 향미가 보다 우수한 된장의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장을 개발하고 본 발명을 완성하게 되었다.In order to solve the above-mentioned problems, the present inventors apply the same bacteria as in the conventional improved method to streamline the manufacturing process, but the amount of decomposition products due to bitter taste is small, and the savory taste and the delicious flavor are The new strain Aspergillus oryzae CJ KY, which has excellent characteristics, is isolated and selected from traditional meju, and used for making soybean paste. Miso was developed and the present invention was completed.
[선행기술문헌][Preceding technical literature]
[특허문헌][Patent Documents]
(특허문헌 1) KR10-0369841 B1(Patent Document 1) KR10-0369841 B1
본 발명의 목적은 소맥분 또는 밀쌀을 기질로 높은 효소 역가를 나타내는 신규의 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하고, 이를 된장 제조에 사용함으로써, 향미가 보다 우수한 된장의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장을 제공하는 것을 목적으로 한다. An object of the present invention is to isolate and select a novel strain Aspergillus oryzae CJ KY, which shows high enzyme titer based on wheat flour or wheat, in traditional meju, and to use it for making miso, resulting in better flavor. It is an object of the present invention to provide a method of preparing miso and a miso produced by the method.
구체적으로, 소맥분 또는 밀쌀, 대두 등을 기질로 높은 아밀라아제 및 프로테아제 활성을 나타내며, 쓴맛에 기인하는 분해 산물의 생성량이 적고, 감칠맛과 구수한 향미의 특성이 우수하게 하는 신규 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하여, 이를 된장 제조에 사용함으로써, 향미가 보다 우수한 된장의 제조방법 및 그 제조방법에 의해 제조된 된장을 제공하는 것을 목적으로 한다. Specifically, the flour or milssal, soybean, etc. exhibit a high amylase and protease activity as a substrate, low production of degradation products resulting from the bitter taste, flavor and Kaoru new strain Aspergillus duck material that has excellent properties of flavor (Aspergillus oryzae ) CJ KY is separated and selected from traditional meju and used for making miso, and an object of the present invention is to provide a method of preparing miso and a miso prepared by the method.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 전통 메주로부터 분리·동정한, 소맥분 및 밀쌀을 기질로 탄수화물 및 단백질 분해효소 활성이 우수한 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 제공한다.In order to achieve the object of the present invention as described above, the present invention is isolated and identified from traditional meju, Aspergillus oryzae CJ KY which is excellent in carbohydrate and protease activity based on wheat flour and wheat as a substrate To provide.
또한, 본 발명은 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 이용한 된장 제조방법에 관한 것으로, 소맥분 원료에 가수하여 증자시키는 증자 단계; 상기 증자된 소맥분에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 접종 및 배양하여 소맥분 코오지를 만드는 제국 단계; 상기 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시키는 1차 숙성 단계; 및 상기 숙성된 1차 혼합물에 메주 및 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 살균, 숙성시키는 2차 숙성 단계;를 포함하는 된장의 제조 방법을 제공한다.In addition, the present invention relates to a method for producing soybean paste using Aspergillus oryzae CJ KY, a steaming step of adding water to the wheat flour raw material; Empire step of inoculating and cultivating aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) CJ KY to the increased wheat flour to make wheat flour coo; Adding a saline or brine to the wheat flour coji, and ripening a primary mixture of at least one selected from the group consisting of increased rice, steamed soybean, meju and soybean paste; And a second aging step of sterilizing and aging a secondary mixture of at least one selected from the group consisting of meju and soybean paste, salt, flavor enhancer, and grain processed product to the aged primary mixture. To provide.
또한, 본 발명은 상기의 된장의 제조방법에 의해 제조된 된장을 제공한다. In addition, the present invention provides a miso prepared by the above method of producing miso.
본 발명은 소맥분 및 밀쌀을 기질로 높은 효소 역가를 나타내는 신규한 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 전통 메주에서 분리, 선별하고 이를 된장 제조에 사용함으로써, 품질이 일정하고, 우수한 향미를 나타내는 된장을 제조할 수 있는 효과가 있다.The present invention isolates and selects a new strain, Aspergillus oryzae CJ KY, which shows high enzyme titer based on wheat flour and wheat, in traditional meju, and uses it for making miso, so that the quality is consistent and excellent flavor. There is an effect that can be prepared soybean paste.
도 1은 신규한 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY의 분류 계통도를 나타낸 도이다.1 is a diagram showing the classification of a novel Aspergillus oryzae CJ KY.
도 2는 신규한 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY의 16S rDNA 염기 서열 분석 결과를 나타낸 도이다.Figure 2 is a diagram showing the results of 16S rDNA sequencing of the novel Aspergillus oryzae CJ KY.
본 발명은 소맥분 및 밀쌀을 기질로 하는 탄수화물 및 단백질 분해효소 활성이 우수한 균주인 신규 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY에 관한 것이다. The present invention relates to a novel Aspergillus oryzae CJ KY, a strain having excellent carbohydrate and protease activity based on wheat flour and wheat.
상기 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY는 전통 식품 제조 업체에서 수거한 전통 메주로부터 분리·동정하였다. The Aspergillus oryza (Aspergillus oryzae) CJ KY was isolated and identified from traditional meju collected by a traditional food manufacturer.
분리·동정 방법은 전통 메주에서 분리한 곰팡이 중 포자 생성력이 우수하면서 독소를 생성하지 않고 알러지를 유발하지 않아, 국균으로 활용가능한 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주를 1차 선별하였다. 그후, 1차 선별 균주를 대상으로 소맥분을 원료로 고체 배양하여 탄수화물 및 단백질 분해력이 강한 균주를 2차 선별하고, 2차 선별된 균주 중에서 된장의 풍미를 향상시키는 균주를 최종 선별하였다. 이를 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzaeCJ KY라 명명하고, 2012년 9월 27일에 한국미생물보존센터에 기탁하였다 (기탁번호: KCCM 11302P). In the isolation and identification method, Aspergillus oryzae strains were selected as a fungus that was excellent in spore generation ability without generating toxins and causing allergies among fungi isolated from traditional meju. Thereafter, the first selection strain was subjected to solid culture of wheat flour as a raw material to secondarily select strains having high carbohydrate and proteolytic ability, and finally select strains to improve flavor of doenjang from the second selected strains. This was named Aspergillus oryzae CJ KY and was deposited with the Korea Microorganism Conservation Center on September 27, 2012 (Accession No .: KCCM 11302P) .
또한, 본 발명은 상기의 소맥분을 기질로 탄수화물 및 단백질 분해력이 강하면서 된장의 풍미를 향상시키는 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 이용하여 증자된 소맥분을 발효시켜 된장을 제조하는 방법에 관한 것이다. In addition, the present invention is a fermented wheat flour using fermented wheat flour using Aspergillus oryzae CJ KY, a strain that improves the flavor of miso, while having strong carbohydrate and proteolytic ability as the substrate based on the above-mentioned wheat flour It is about a method.
보다 상세히는, 소맥분 원료을 가수하여 증자시키는 증자 단계; 상기 증자된 소맥분에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 접종 및 배양하여 소맥분 코오지를 만드는 제국 단계; 상기 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시키는 1차 숙성 단계; 및 상기 숙성된 1차 혼합물에 메주 및 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 살균, 숙성시키는 2차 숙성 단계;를 포함하는 된장의 제조 방법을 제공한다.More specifically, the steaming step of increasing the hydrolyzed wheat flour raw material; Empire step of inoculating and cultivating aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) CJ KY to the increased wheat flour to make wheat flour coo; Adding a saline or brine to the wheat flour coji, and ripening a primary mixture of at least one selected from the group consisting of increased rice, steamed soybean, meju and soybean paste; And a second aging step of sterilizing and aging a secondary mixture of at least one selected from the group consisting of meju and soybean paste, salt, flavor enhancer, and grain processed product to the aged primary mixture. To provide.
본 발명의 된장 제조방법에서 상기 증자단계는, 연속증자기를 이용하여 일정량의 가온된 정수를 소맥분에 가수(加水)한 후 1.0 내지 2.0 kgf/cm2의 스팀을 이용하여 증자하는 공정으로, 증자된 소맥분의 수분 함량이 32 내지 38 중량%가 되도록 조절하는 것이 바람직하다. In the doenjang method of the present invention, the steaming step is a process of steaming a constant amount of warmed purified water in wheat flour using a continuous steamer and then steaming the steam using 1.0 to 2.0 kgf / cm 2 . It is preferred to adjust the wheat flour so that the moisture content is from 32 to 38% by weight.
본 발명의 된장 제조방법에서, 상기 제국 단계는, 상기 증자된 소맥분에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 접종 및 배양하여 소맥분 코오지를 만드는 단계로서, 구체적으로는 증자된 소맥분에 원료 총량 대비 0.1 내지 0.3 중량%의 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY 와 0.5 내지 1.5 중량%의 곡류분 또는 두류분을 증량제로 사용하여 균일하게 혼합한 후 30 내지 40℃, 보다 바람직하게는 32 내지 35℃에서 3일간 발효 건조하여 소맥분 코오지를 만든다. In the soybean paste manufacturing method of the present invention, the imperial step is a step of inoculating and cultivating Aspergillus oryza CJ KY in the cooked wheat flour to make a wheat flour coo, specifically, the total amount of raw material in the cooked wheat flour Compared to 0.1 to 0.3% by weight of Aspergillus oryzae CJ KY and 0.5 to 1.5% by weight of cereal or bean flour as an extender, and then 30 to 40 ℃, more preferably 32 Fermented and dried for 3 days at 35 ℃ to make wheat flour coji.
본 발명의 된장 제조방법에서, 상기 1차 숙성 단계는, 상기 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시키는 단계이다. In the doenjang manufacturing method of the present invention, the first aging step, 1 or more salt selected by adding salt or saline to the wheat flour coo, and mixed with at least one selected from the group consisting of increased rice, steamed soybean, meju and miso It is the step of aging the tea mixture.
구체적으로는, 제국 단계를 통해 제조된 건조 상태의 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 대두, 증자된 밀쌀, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시킨다. Specifically, adding a salt or brine to the dry wheat flour coji prepared through the imperial step, the primary mixture is mixed with at least one selected from the group consisting of soybean, steamed wheat, meju and miso Mature.
상기 식염 또는 염수는 바람직하게는 1차 혼합물에 대하여 염도가 9 내지 13 중량% 함량이 되도록 첨가한다. The salt or brine is preferably added so that the salinity is 9 to 13% by weight relative to the primary mixture.
상기 메주 또는 된장은 특별히 제한되지 아니하며 공지의 것을 사용할 수 있다. 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상은, 바람직하게는 1차 혼합물 전체 중량에 대하여 1 내지 38 중량% 함량이 되도록 첨가한다. The meju or miso is not particularly limited and known ones may be used. At least one selected from the group consisting of cooked wheat, cooked soybean, meju and miso is preferably added in an amount of 1 to 38% by weight based on the total weight of the primary mixture.
또한, 상기 1차 혼합물은 바람직하게는 전체 중량에 대하여 45 내지 52 중량% 함량으로 수분을 함유할 수 있다. In addition, the primary mixture may preferably contain moisture in an amount of 45 to 52% by weight based on the total weight.
상기 1차 혼합물은 숙성 전에 쵸핑(Chopping) 공정을 포함할 수 있다. The primary mixture may comprise a chopping process prior to aging.
상기 쵸핑은 1차 혼합물을 작은 크기의 물질로 자르는 공정을 의미하며, 그 크기는 특별히 제한되지 않으나, 바람직하게는 5 내지 20 mm 크기(1차 혼합물의 무정형 입자의 내경 크기 기준), 보다 바람직하게는 10 내지 15 mm 크기로 쵸핑될 수 있다. The chopping refers to the process of cutting the primary mixture into small sized materials, the size of which is not particularly limited, but preferably 5 to 20 mm in size (based on the inner diameter size of the amorphous particles of the primary mixture), more preferably. May be chopped to a size of 10 to 15 mm.
상기 1차 혼합물을 숙성시키기 전 쵸핑하는 공정을 거치게 되면, 곡물의 심부까지 효소 및 식염의 침투하기 용이해져 보다 다양한 맛과 풍미가 생성되며, 이상 발효를 제어할 수 있는 이점이 있다.When the first mixture is subjected to a chopping process before aging, it is easy to penetrate the enzyme and the salt to the deep portion of the grain to produce a variety of flavors and flavors, there is an advantage that can control the abnormal fermentation.
상기 1차 혼합물은 바람직하게는 10 내지 30일 동안 25 내지 35℃에서 발효 숙성한다.The primary mixture is preferably fermented at 25 to 35 ° C. for 10 to 30 days.
본 발명의 된장 제조방법에서, 상기 2차 숙성 단계는, 상기 숙성된 1차 혼합물에 메주, 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 살균, 숙성시키는 단계를 말한다. In the doenjang manufacturing method of the present invention, the secondary aging step, sterilize the secondary mixture of at least one selected from the group consisting of meju, miso, salt, flavor enhancer and grain processed product to the aged primary mixture, Refers to the step of aging.
구체적으로는, 먼저, 상기 숙성된 1차 혼합물에 메주, 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 60 내지 85 ℃에서 1 내지 60분 동안 살균한 후, 식용 알코올을 첨가하여 숙성한다. Specifically, first, sterilize the secondary mixture in which the aged primary mixture is mixed with at least one selected from the group consisting of meju, miso, salt, flavor enhancer and grain processed products at 60 to 85 ℃ for 1 to 60 minutes After that, it is aged by adding edible alcohol.
상기 메주 또는 된장은 2차 혼합물 100 중량에 대하여 바람직하게는 3 내지 15 중량부로 첨가될 수 있으며, 상기 소금, 향미 증진제, 곡물 가공품 중 선택된 1종 이상은, 바람직하게는 1 내지 5 중량부로 첨가될 수 있다. The meju or miso may be added in an amount of preferably 3 to 15 parts by weight based on 100 parts by weight of the secondary mixture, and at least one selected from the salt, the flavor enhancer and the processed grains may be added in an amount of 1 to 5 parts by weight. Can be.
상기의 메주, 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품은 특별히 제한되지 아니하며 공지의 것을 사용할 수 있다. Meju, miso, salt, flavor enhancer and grain processed products are not particularly limited and known ones may be used.
상기 향미 증진제의 비제한적인 예로는 효모 추출물, 콩 또는 밀단백 추출물 등을 들 수 있다.Non-limiting examples of the flavor enhancer include yeast extract, soybean or wheat protein extract.
이와 같이 본 발명의 된장 제조방법은 소맥분을 기질로 높은 효소 역가를 보이는 신규한 균주 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 사용함으로써, 쓴맛이 적고, 감칠맛과 구수한 맛이 향상된 된장의 제조가 가능하게 하였다.As described above, the method for preparing soybean paste of the present invention uses a novel strain Aspergillus oryzae CJ KY, which shows high enzyme titer as wheat flour, so that bitterness is low, and the umami and sweet taste are improved. Made it possible.
이하 본 발명의 내용을 실시예에 의해 보다 상세하게 설명한다. 다만 이들 실시예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 이들 실시예로 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the content of the present invention will be described in more detail by examples. However, these examples are only presented to understand the contents of the present invention, the scope of the present invention is not limited to these examples.
1. One. 전통 메주 유래 미생물의 분리·동정 및 선별Isolation, Identification and Screening of Traditional Meju-derived Microorganisms
1) 미생물의 분리 · 동정 1) Isolation and Identification of Microorganisms
본 발명에서 스타터로 사용된 균주는 경기, 강원, 충북, 전남 소재의 전통 식품 제조 업체에서 수거한 전통 메주에서 분리, 선별하였다.The strain used as a starter in the present invention was isolated and selected from traditional meju collected from traditional food manufacturers in Gyeonggi, Gangwon, Chungbuk, Jeonnam.
곰팡이 분리 배지로는 potato dextrose agar(Difco) 배지에 20㎍/㎖ chloramphenicol를 첨가하여 사용하였고, 상기의 전통 메주에서 우점종으로 서식하는 곰팡이 32종을 순수 분리하여 동정하였으며, 동정 결과는 표 1과 같다.As mold separation medium, 20 µg / ml chloramphenicol was added to potato dextrose agar (Difco) medium, and 32 fungi were isolated and isolated from the traditional Meju, and the results were identified in Table 1. .
2) 1차 선별, 2) primary screening ,
상기의 전통 메주에서 분리한 곰팡이 32종의 포자 생성력 등 국균(麴菌)으로 활용이 가능한 것을 종합적으로 판단하여 7종을 1차로 선정하였다.Seven species were selected as the first by comprehensively judging that they could be used as a Korean bacterium such as spore generating ability of 32 species of fungi isolated from the traditional meju.
선정 균주는 CJ 1333, CJ 1334, CJ 1335, CJ 1336, CJ 1354, CJ KY, CJ KG 이었고, 포자 생성력 결과는 표 1과 같다.The selected strains were CJ 1333, CJ 1334, CJ 1335, CJ 1336, CJ 1354, CJ KY, CJ KG, and the results of sporulation were shown in Table 1.
표 1 전통 메주 유래 분리 균주의 동정결과 및 각 균주의 포자 생성력
균주 NO. 동정결과 포자생성력 비고
CJ 1333 Aspergillus oryzae **
CJ 1334 Aspergillus oryzae ***
CJ 1335 Aspergillus oryzae ***
CJ 1336 Aspergillus oryzae ***
CJ 1337 Aspergillus flavus * 독소생성
CJ 1338 Aspergillus niger ***
CJ 1339 Aspergillus flavus * 독소생성
CJ 1340 Aspergillus tubingensis *** 흑국균
CJ 1341 - × 포자 미생성
CJ 1342 Aspergillus sydowii **
CJ 1343 Penicillium polonicum *
CJ 1344 Mucor racemosus **
CJ 1345 Penicillium polonicum * 알러지 유발
CJ 1346 Mucor racemosus ***
CJ 1347 Penicillium polonicum *
CJ 1348 Emericella nidulans * 알러지 유발
CJ 1349 Talaromyces spectabilis **
CJ 1350 Emericella rugulosa ** 알러지 유발
CJ 1351 Mucor racemosus ***
CJ 1352 Emericella dentata * 알러지 유발
CJ 1353 Mycocladus corymbiferus ***
CJ 1354 Aspergillus oryzae ***
CJ 1355 Mycocladus corymbiferus ***
CJ 1356 Aspergillus flavus *** 독소생성
CJ 1357 Absidia corymbifera *
CJ 1358 Aspergillus oryzae **
CJ 1359 Aspergillus oryzae **
CJ 1360 Aspergillus vadensis **
CJ 1361 - *
CJ 1362 - *
CJ KY Aspergillus oryzae ***
CJ KG Aspergillus oryzae ***
Table 1 Identification Results of Isolated Strains Derived from Traditional Meju and Spore Formation Capacity of Each Strain
Strain NO. Identification result Spore Production Remarks
CJ 1333 Aspergillus oryzae **
CJ 1334 Aspergillus oryzae ***
CJ 1335 Aspergillus oryzae ***
CJ 1336 Aspergillus oryzae ***
CJ 1337 Aspergillus flavus * Toxin production
CJ 1338 Aspergillus niger ***
CJ 1339 Aspergillus flavus * Toxin production
CJ 1340 Aspergillus tubingensis *** Black Bacillus
CJ 1341 - × Spore not generated
CJ 1342 Aspergillus sydowii **
CJ 1343 Penicillium polonicum *
CJ 1344 Mucor racemosus **
CJ 1345 Penicillium polonicum * Allergens
CJ 1346 Mucor racemosus ***
CJ 1347 Penicillium polonicum *
CJ 1348 Emericella nidulans * Allergens
CJ 1349 Talaromyces spectabilis **
CJ 1350 Emericella rugulosa ** Allergens
CJ 1351 Mucor racemosus ***
CJ 1352 Emericella dentata * Allergens
CJ 1353 Mycocladus corymbiferus ***
CJ 1354 Aspergillus oryzae ***
CJ 1355 Mycocladus corymbiferus ***
CJ 1356 Aspergillus flavus *** Toxin production
CJ 1357 Absidia corymbifera *
CJ 1358 Aspergillus oryzae **
CJ 1359 Aspergillus oryzae **
CJ 1360 Aspergillus vadensis **
CJ 1361 - *
CJ 1362 - *
CJ KY Aspergillus oryzae ***
CJ KG Aspergillus oryzae ***
3) 2차 선별 3) secondary screening
상기의 1차 선별한 균주 7종을 대상으로 소맥분 코오지를 제조하여 아밀라아제 및 프로테아제 효소 역가를 비교하여 우수 균주를 2차 선별하였다. Wheat flour coji was prepared from the seven primary strains, and the superior strains were secondarily selected by comparing amylase and protease enzyme titers.
상기의 소맥분 코오지는 소맥분 1kg을 수분 함량이 33 내지 38 중량%가 되도록 가수한 후 고압증기멸균기(Autoclave)로 120℃에서 15분간 증자하였으며, 증자 후 35℃로 냉각하였다. 냉각된 증자 소맥분에 1차 선별 균주를 원료 총 중량 대비 0.2 중량%로 혼합한 후 35℃에서 3일간 각각 배양하였으며, 각각의 소맥분 코오지의 효소 역가는 표 2와 같다.The wheat flour koji was added to 1 kg of wheat flour to have a water content of 33 to 38% by weight, and then steamed at 120 ° C. for 15 minutes using an autoclave. The steam was cooled to 35 ° C. after the steaming. The primary selection strain was mixed with 0.2 wt% of the total weight of the raw material in chilled cooked wheat flour, and then incubated at 35 ° C. for 3 days. The enzyme titers of the wheat flour cojis are shown in Table 2.
표 2의 결과로부터, 아밀라아제와 프로테아제 효소 역가가 우수한 CJ 1334, CJ 1354, CJ KY, CJ KG 균주 4종을 2차 선정하였다. From the results of Table 2, four strains of CJ 1334, CJ 1354, CJ KY, and CJ KG which were excellent in amylase and protease enzyme titers were selected.
표 2 1차 선별 균주 적용 소맥분 코오지의 효소 역가 비교
아밀라아제 역가 (U/g) 프로테아제 역가 (U/g)
CJ 1333 439.4 118.4
CJ 1334 565.9 140.4
CJ 1335 496.6 131.6
CJ 1336 536.7 109.1
CJ 1354 542.4 105.3
CJ KY 537.6 146.1
CJ KG 553.3 134.0
TABLE 2 Comparison of Enzyme Titer of Wheat Flour Coji with Primary Screened Strains
Amylase titer (U / g) Protease Titer (U / g)
CJ 1333 439.4 118.4
CJ 1334 565.9 140.4
CJ 1335 496.6 131.6
CJ 1336 536.7 109.1
CJ 1354 542.4 105.3
CJ KY 537.6 146.1
CJ KG 553.3 134.0
상기 표 2에서 아밀라아제 효소 역가 측정은 소맥분 코오지를 2% NaCl 수용액에 30℃에서 1시간 동안 추출하고 여과한 조효소액을 100배 희석하여 사용하였다. 효소 반응액은 조효소액 1㎖, 기질로 1% 전분당 2㎖, pH 5.2 인산염 버퍼 2㎖를 가하여 제조하였으며, 이를 40℃에서 30분간 반응시킨 후 0.1N CH3COOH 10㎖를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 반응이 종료된 효소 반응액 0.005% KI+I2 용액 10㎖를 넣어 실온에서 발색시켜 UV 분광 광도계(spectrophotometer)를 이용하여 660nm에서 흡광도를 측정하였다. Amylase enzyme titer measurement in Table 2 was used to extract wheat flour koji in 2% aqueous NaCl solution for 1 hour at 30 ℃ and diluted 100 times the filtered crude enzyme solution. The enzyme reaction solution was prepared by adding 1 ml of crude enzyme solution, 2 ml of 1% starch as a substrate, and 2 ml of pH 5.2 phosphate buffer.The reaction was carried out at 40 ° C. for 30 minutes, followed by addition of 10 N of 0.1N CH 3 COOH. Stopped. 10 ml of 0.005% KI + I 2 solution of the enzyme reaction solution after completion of the reaction was colored at room temperature, and the absorbance was measured at 660 nm using a UV spectrophotometer.
또한, 프로테아제 효소 역가 측정은 소맥분 코오지를 증류수에 30℃에서 1시간 동안 추출, 여과하여 조효소액으로 사용하였다. 효소 반응액은 조효소액 0.5㎖, 기질로 2% 밀크 카제인(Milk casein) 1.5㎖, Mcllivine 버퍼(pH 6.0) 1㎖를 첨가하여 38℃에서 1시간 반응하였다. 이후 0.4M TCA 용액을 3㎖ 넣어 반응을 정지시켜 여과 후 0.4M Na2CO3 5㎖와 페놀 시약 1㎖를 넣어 충분히 혼합 후 38℃에서 30분간 발색시키고 분광 광도계를 이용하여 660nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 효소 활성은 1분간 1㎍에 해당하는 티로신을 생성하는 효소의 양을 1 유닛으로 정의하였고 티로신을 표준 물질로 이용하여 검량선을 작성하였다In addition, the protease enzyme titer was used as a crude enzyme solution by extracting and filtering wheat flour koji in distilled water at 30 ° C. for 1 hour. The enzyme reaction solution was reacted at 38 ° C. for 1 hour by adding 0.5 ml of crude enzyme solution, 1.5 ml of 2% milk casein and 1 ml of Mcllivine buffer (pH 6.0) as a substrate. Then, 3 ml of 0.4M TCA solution was added to stop the reaction. After filtration, 5 ml of 0.4M Na 2 CO 3 and 1 ml of phenolic reagent were mixed, followed by sufficient color development at 38 ° C. for 30 minutes. The absorbance was measured at 660 nm using a spectrophotometer. It was. In this case, the enzyme activity was defined as 1 unit of the amount of the enzyme that produces 1 μg of tyrosine for 1 minute, and a calibration curve was prepared using tyrosine as a standard substance.
4) 최종 선별 4) Final Screening
상기의 2차 선별한 균주 4종을 대상으로 소맥분 코오지의 용량을 확대 제조하여 아밀라아제 및 프로테아제 효소 역가를 비교하고, 이를 이용하여 제조된 된장의 맛 품질을 비교하여 우수 균주를 최종 선별하였다. The secondary strain was selected from four strains of the second selected strain to increase the dose of wheat flour coji to compare amylase and protease enzyme titers, and to compare the taste quality of soybean paste.
상기의 소맥분 코오지는 5단 연속 증자기로 소맥분 10kg을 수분 함량이 33 내지 38 중량%가 되도록 증자하였으며, 증자 후 35℃로 냉각하였다. 냉각된 증자 소맥분에 2차 선별 균주를 원료 총량 대비 0.2 중량%로 혼합한 후 고체 발효기로 30 내지 35℃에서 3일간 각각 배양하였으며, 각각의 소맥분 코오지의 효소 역가는 표 3과 같다. The wheat flour coji was steamed 10 kg of wheat flour in a 5-stage continuous steamer to have a water content of 33 to 38% by weight, and then cooled to 35 ° C after the steaming. Secondary selection strains were mixed in the cooled cooked wheat flour at 0.2% by weight relative to the total amount of the raw materials, and then incubated for 3 days at 30 to 35 ° C. with a solid fermenter. The enzyme titers of the wheat flour cojis are shown in Table 3 below.
또한, 상기의 소맥분 코오지에 식염 또는 염수, 증자된 대두, 증자된 밀쌀, 메주 또는 된장을 혼합하여 1차 혼합물을 제조한 후 10 내지 30일간 25 내지 35℃에서 숙성하였으며, 숙성된 1차 혼합물에 메주 및 된장, 소금, 향미 증진제를 혼합하여 2차 혼합물을 제조하고 후(後)숙성하여 제조된 된장으로 간이 관능평가를 하였으며, 결과는 표 3과 같다.In addition, after preparing a primary mixture by mixing salt or saline, steamed soybeans, steamed wheat, meju or doenjang to the wheat flour coji above was aged at 25 to 35 ℃ for 10 to 30 days, to the aged primary mixture Meju and doenjang, salt, and flavor enhancers were mixed to prepare a secondary mixture and then aged (後) to make a simple sensory evaluation with a doenjang prepared, the results are shown in Table 3.
표 3의 결과로부터, 아밀라아제와 프로테아제 효소 역가 및 맛 품질이 가장 우수한 CJ KY 균주를 최종 선정하였다. From the results in Table 3, the CJ KY strains with the best amylase and protease enzyme titers and taste quality were finally selected.
최종 선정 균주인 CJ KY의 분류 계통도는 도 1과 같다.The classification system of CJ KY, the final selected strain, is shown in FIG. 1.
또한, 최종 선정 균주인 CJ KY의 16S rDNA 염기서열분석 결과는 도 2와 같다.In addition, 16S rDNA sequencing results of the final selection strain CJ KY is shown in FIG.
표 3 2차 선별 균주 적용 소맥분 코오지의 효소 역가 및 된장의 맛 품질 비교
아밀라아제 역가 (U/g) 프로테아제 역가 (U/g) 간이 관능평가
CJ 1334 393.6 104.2 3.21
CJ 1354 440.1 140.5 3.57
CJ KY 546.8 157.4 4.21
CJ KG 477.3 163.3 3.64
TABLE 3 Comparison of Enzyme Titer and Taste Quality of Soybean Powder Coji with Second Screening Strain
Amylase titer (U / g) Protease Titer (U / g) Simple sensory evaluation
CJ 1334 393.6 104.2 3.21
CJ 1354 440.1 140.5 3.57
CJ KY 546.8 157.4 4.21
CJ KG 477.3 163.3 3.64
2. 2. 된장의 제조Manufacture of miso
1) 증자 단계 및 제국 단계 1) Capital increase stage and Imperial stage
상기의 최종 선정 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY와 시중의 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 함유한 소맥분 코오지를 실시예 1 및 비교예 1과 같이 제조하여 효소 역가를 비교하였다.The wheat flour coji containing Aspergillus oryzae CJ KY and Aspergillus oryzae on the market was prepared as in Example 1 and Comparative Example 1 to compare enzyme titers. It was.
실시예 1 : 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 적용 소맥분 코오지 제조Example 1 Preparation of New Aspergillus Duck CJ KY-Applied Wheat Flour Coo
소맥분 8,000kg을 5단 연속증자기로 수분 함량 33 내지 38 중량%가 되도록 증자 한 후 방냉기를 이용하여 온도를 35 내지 40℃로 냉각하여 제국실로 이송하였다. 그 다음, 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY를 소맥분 중량의 0.2 중량%로 접종하고 30 내지 35℃에서 3일간 제국 발효 과정을 수행하였다.8,000kg of wheat flour was increased to a moisture content of 33 to 38% by weight with a five-stage continuous steamer, and then cooled to 35 to 40 ° C using an air conditioner and transferred to the imperial chamber. The new Aspergillus duck CJ KY was then inoculated at 0.2% by weight of the wheat flour and subjected to an imperial fermentation process at 30-35 ° C. for 3 days.
신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 적용 소맥분 코오지의 효소 역가는 표 4와 같다.The enzyme titers of the novel Aspergillus duck CJ KY-applied wheat flour coji are shown in Table 4.
비교예 1 : 통상의 아스퍼질러스 오리재 적용 소맥분 코오지 제조Comparative Example 1: Normal Aspergillus duck reapply wheat flour coji production
소맥분 8,000kg을 5단 연속증자기로 수분 함량 33 내지 38 중량%가 되도록 증자 한 후 방냉기를 이용하여 온도를 35 내지 40℃로 냉각하여 제국실로 이송하였다. 그 다음, 시중의 아스퍼질러스 오리자에를 소맥분 중량의 0.2 중량%로 접종하고 30 내지 35℃에서 3일간 제국 발효 과정을 수행하였다.8,000kg of wheat flour was increased to a moisture content of 33 to 38% by weight with a five-stage continuous steamer, and then cooled to 35 to 40 ° C using an air conditioner and transferred to the imperial chamber. Next, commercial Aspergillus Orissa was inoculated at 0.2% by weight of the wheat flour and subjected to imperial fermentation for 3 days at 30 to 35 ° C.
통상의 아스퍼질러스 오리자에 적용 소맥분 코오지의 효소 역가는 표 4와 같다.Enzyme titer of wheat flour coji applied to conventional Aspergillus Oriza is shown in Table 4.
표 4 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY와 통상의 아스퍼질러스 오리재 적용 소맥분 코오지의 효소 역가
아밀라아제 역가 (U/g) 프로테아제 역가 (U/g)
실시예 1 395 115
비교예 1 238 110
Table 4 Enzyme titer of new Aspergillus duckwood CJ KY and normal Aspergillus duckwood application wheat flour koji
Amylase titer (U / g) Protease Titer (U / g)
Example 1 395 115
Comparative Example 1 238 110
상기 표 4의 결과로부터, 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY를 적용한 소맥분 코오지의 아밀라아제 및 프로테아제 효소 역가가 통상의 아스퍼질러스 오리재를 적용한 소맥분 코오지 보다 각각 66.0% 및 4.5%가 향상되었음을 확인할 수 있었다.From the results of Table 4, it can be seen that the amylase and protease enzyme titers of wheat flour coji to which the new Aspergillus duck material CJ KY was applied were 66.0% and 4.5% higher than the wheat flour coji to which the conventional Aspergillus duck material was applied. there was.
3) 1차 숙성 단계 3) First ripening step
상기 실시예 1 및 비교예 1의 소맥분 코오지를 이용하여 아래의 실시예 2 및 비교예 2와 같이 1차 혼합물을 제조한 후 10 내지 30일간 25 내지 35℃에서 숙성하였다. The first mixture was prepared as in Example 2 and Comparative Example 2 using wheat flour coji of Example 1 and Comparative Example 1, and then aged at 25 to 35 ° C. for 10 to 30 days.
실시예 2 : 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY를 이용한 1차 혼합물 제조Example 2 Preparation of Primary Mixture Using Novel Aspergillus Duck CJ KY
실시예 1에 의해 제조된 소맥분 코오지에 1차 혼합물 전체 중량을 기준으로, 증자된 대두를 25 내지 28 중량%로, 증자된 밀쌀을 2 내지 5 중량%로, 메주 (콩 단독 또는 콩과 전분질 원료 등을 혼합하여 개량 또는 재래식으로 발효한 메주)를 1 내지 5 중량%로 혼합하고, 염수 또는 식염을 혼합하여 1차 혼합물의 최종 수분이 48 중량%이고, 최종 염도가 11 중량%인 1차 혼합물을 제조하였다. Based on the total weight of the primary mixture in the wheat flour coji prepared by Example 1, 25 to 28% by weight cooked soybean, 2 to 5% by weight cooked wheat flour, meju (soybean alone or soybean starch raw material) Meju) fermented by improved or conventional fermentation by mixing, etc.) to 1 to 5% by weight, and mixed with brine or saline, the final mixture of 48% by weight of the final moisture content, 11% by weight of the final salinity mixture Was prepared.
신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 적용 1차 혼합물의 일반성분은 표 5와 같다.The general composition of the novel Aspergillus duck CJ KY application primary mixture is shown in Table 5.
신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 적용 1차 혼합물의 휘발성 향기 성분은 표 6과 같다.Volatile fragrance components of the novel Aspergillus duck CJ KY application primary mixture are shown in Table 6.
비교예 2 : 통상의 아스퍼질러스 오리재를 이용한 1차 혼합물 제조Comparative Example 2 Preparation of Primary Mixture Using Conventional Aspergillus Duck
비교예 1에 의해 제조된 소맥분 코오지에 1차 혼합물 전체 중량을 기준으로, 증자된 대두를 25 내지 28 중량%로, 증자된 밀쌀을 2 내지 5 중량%로, 메주(콩 단독 또는 콩과 전분질 원료 등을 혼합하여 개량 또는 재래식으로 발효한 메주 또는 분말)를 1 내지 5 중량%로 혼합하고, 염수 또는 식염을 혼합하여 1차 혼합물의 최종 수분이 48 중량%이고, 최종 염도가 11 중량%인 1차 혼합물을 제조하였다.Based on the total weight of the primary mixture in the wheat flour coji prepared by Comparative Example 1, 25 to 28% by weight of cooked soybean, 2 to 5% by weight of cooked wheat, meju (soybean alone or soybean and starch raw materials) Meju or powder fermented by improved or conventional fermentation, etc.) to 1 to 5% by weight, and mixed with brine or saline to obtain a final moisture content of 48% by weight, and a final salinity of 11% by weight. A tea mixture was prepared.
통상의 아스퍼질러스 오리재 적용 1차 혼합물의 일반성분은 표 5와 같다.Typical components of the conventional Aspergillus duck material application primary mixture is shown in Table 5.
통상의 아스퍼질러스 오리재 적용 1차 혼합물의 휘발성 향기 성분은 표 6과 같다.Volatile fragrance components of the conventional Aspergillus duck reapply primary mixture are shown in Table 6.
표 5 1차 혼합물의 일반성분 비교
수분(%) 염도(%) 성숙도(mg%) 환원당(%) pH
실시예 2 49.7 10.2 367.3 14.9 5.33
비교예 2 50.8 10.9 304.7 14.2 5.34
Table 5 Comparison of General Components of Primary Mixture
moisture(%) Salinity (%) Maturity (mg%) Reducing Sugar (%) pH
Example 2 49.7 10.2 367.3 14.9 5.33
Comparative Example 2 50.8 10.9 304.7 14.2 5.34
상기 표 5의 결과로부터, 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY를 적용한 1차 혼합물의 성숙도가 통상의 아스퍼질러스 오리재를 적용한 1차 혼합물보다 20.1% 가 향상되었음을 확인할 수 있었다. From the results in Table 5, it was confirmed that the maturity of the primary mixture to which the new Aspergillus duck material CJ KY was applied was 20.1% improved from the primary mixture to which the conventional Aspergillus duck material was applied.
표 6 1차 혼합물의 주요 휘발성 향기 성분 비교 (unit: peak area %)
주요 휘발성 향기 성분 비교예 2 실시예 2 p-value
butanoic acid 1.808±0.088 1.440±0.462 0.246
3-methylbutanoate 0.275±0.019 0.150±0.059 0.026
1-octen-3-ol 0.970±0.073 1.224±0.248 0.164
2-methylbutanal 0.531±0.059 0.171±0.129 0.012
3-methylbutanal 0.639±0.048 0.081±0.030 0.000
ethyl acetate 0.640±0.111 2.593±0.840 0.016
ethyl butanoate 8.054±1.121 18.033±3.811 0.012
2-methoxyphenol 0.108±0.011 0.159±0.040 0.098
phenol 0.043±0.004 0.032±0.010 0.136
4-ethyl-2-methoxyphenol 0.026±0.009 0.017±0.003 0.178
Table 6 Comparison of Main Volatile Flavor Components in Primary Mixtures (unit: peak area%)
Main Volatile Flavor Ingredients Comparative Example 2 Example 2 p-value
butanoic acid 1.808 ± 0.088 1.440 ± 0.462 0.246
3-methylbutanoate 0.275 ± 0.019 0.150 ± 0.059 0.026
1-octen-3-ol 0.970 ± 0.073 1.224 ± 0.248 0.164
2-methylbutanal 0.531 ± 0.059 0.171 ± 0.129 0.012
3-methylbutanal 0.639 ± 0.048 0.081 ± 0.030 0.000
ethyl acetate 0.640 ± 0.111 2.593 ± 0.840 0.016
ethyl butanoate 8.054 ± 1.121 18.033 ± 3.811 0.012
2-methoxyphenol 0.108 ± 0.011 0.159 ± 0.040 0.098
phenol 0.043 ± 0.004 0.032 ± 0.010 0.136
4-ethyl-2-methoxyphenol 0.026 ± 0.009 0.017 ± 0.003 0.178
상기 표 6의 결과로부터, 실시예 2는 된장의 이취(異臭)로 발현될 수 있는 쿰쿰한 향을 나타내는 butanoic acid, 3-methylbutanoate와 쓴 된장향을 나타내는 2-methylbutanal, 3-methylbutanal, phenol, 4-ethyl-2-methoxyphenol의 함량이 비교예 2보다 상대적으로 낮은 것을 확인할 수 있었다. 또한, 된장에 과일 향을 내어 전반적인 향미에 긍정적으로 기여하는 ethyl acetate, ethyl butanoate 등의 ester류가 실시예 2가 비교예 2보다 높은 농도를 보였다.From the results of Table 6, Example 2 is butanoic acid, 3-methylbutanoate showing a cuminous aroma that can be expressed as a odor of miso, 2-methylbutanal, 3-methylbutanal, phenol, 4 showing bitter miso It was confirmed that the content of -ethyl-2-methoxyphenol was relatively lower than that of Comparative Example 2. In addition, esters such as ethyl acetate and ethyl butanoate, which gave fruit flavor to doenjang and contributed positively to the overall flavor, showed higher concentrations in Example 2 than in Comparative Example 2.
4) 2차 숙성 단계 4) secondary ripening step
상기와 같이 1차 숙성 단계를 거친 실시예 2 및 비교예 2의 1차 혼합물을 사용하여 하기의 실시예 3 및 비교예 3과 같이 2차 혼합물을 제조하고, 실시예 3 및 비교예 3의 2차 혼합물을 살균, 숙성하여 된장을 제조하였다. Using the first mixture of Example 2 and Comparative Example 2 subjected to the first aging step as described above to prepare a secondary mixture as in Example 3 and Comparative Example 3, Example 3 and Comparative Example 3 2 The tea mixture was sterilized and aged to prepare miso.
또한, 제조된 각 된장의 향기 성분을 비교하였다.In addition, the fragrance components of the prepared soybean paste were compared.
실시예 3 : 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY를 적용한 2차 혼합물 제조Example 3 Preparation of Secondary Mixture Applying New Aspergillus Duck CJ KY
상기 실시예 2에 따라 10 내지 30일 동안 발효 숙성 완료된 1차 혼합물에, 2차 혼합물 전체 중량을 기준으로, 된장 3 내지 15중량%, 소금 0.1 내지 0.5 중량%, 향미 증진제 0.01 내지 0.1 중량%를 투입하여 혼합하였다. To the primary mixture fermented and matured for 10 to 30 days according to Example 2, based on the total weight of the secondary mixture, 3 to 15% by weight of soybean paste, 0.1 to 0.5% by weight salt, 0.01 to 0.1% by weight flavor enhancer Input and mixed.
그 다음, 75℃에서 20분간 살균 및 냉각한 후 2차 혼합물 전체 중량을 기준으로 식용 알코올 1.5 내지 2.5 중량%를 혼합하고 숙성시켰다.Then, after sterilization and cooling for 20 minutes at 75 ° C 1.5 to 2.5% by weight of edible alcohol based on the total weight of the secondary mixture was mixed and aged.
신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY 적용 2차 혼합물을 살균, 숙성하여 제조된 된장의 유리 아미노산은 표 7과 같다.The free amino acids of doenjang prepared by sterilizing and aging a new Aspergillus duck CJ KY application secondary mixture are shown in Table 7.
비교예 3 : 통상의 아스퍼질러스 오리재를 적용한 2차 혼합물 제조Comparative Example 3 Preparation of Secondary Mixture Applying Conventional Aspergillus Duck
상기 비교예 2에 따라 10 내지 30일 동안 발효 숙성 완료된 1차 혼합물에, 2차 혼합물 전체 중량을 기준으로, 된장 3 내지 15 중량%, 소금 0.01 내지 0.5 중량%, 향미 증진제 0.01 내지 0.1 중량%를 투입하여 혼합하였다. In the primary mixture fermented and matured for 10 to 30 days according to Comparative Example 2, 3 to 15% by weight of soybean paste, 0.01 to 0.5% by weight of salt, 0.01 to 0.1% by weight of flavor enhancer, based on the total weight of the secondary mixture Input and mixed.
그 다음, 75℃에서 20분간 살균, 냉각한 후 2차 혼합물 전체 중량을 기준으로 식용 알코올 1.5 내지 2.5 중량%를 혼합하고 숙성시켰다.Then, after sterilization and cooling for 20 minutes at 75 ℃, 1.5 to 2.5% by weight of edible alcohol based on the total weight of the secondary mixture was mixed and aged.
통상의 아스퍼질러스 오리재 적용 2차 혼합물을 살균, 숙성하여 제조된 된장의 유리 아미노산은 표 7과 같다.The free amino acids of doenjang prepared by sterilizing and aging a secondary mixture of conventional Aspergillus duck material are shown in Table 7.
표 7 된장의 유리 아미노산 함량 분석 (unit : mM)
아미노산 비교예 3 실시예 3
aspartate 32.4 29.4
glutamate 397.2 411.2
asparagine 11.3 10.4
serine 55.6 55.3
histidine 12.4 9.7
glycin 33.4 34.1
threonine 33.7 33.5
Arginine+glutamine 59.4 59.4
alanine 61.8 62.2
cysteine 26.8 24.7
valine 50.5 51.5
methionine 5.8 6.0
tryptophan 0.0 0.0
phenylalanine 63.7 54.6
isoleucine 56.7 54.6
leucine 76.3 77.2
lysine 54.1 58.7
proline 13.9 12.4
TABLE 7 Analysis of Free Amino Acid Content in Doenjang (unit: mM)
amino acid Comparative Example 3 Example 3
aspartate 32.4 29.4
glutamate 397.2 411.2
asparagine 11.3 10.4
serine 55.6 55.3
histidine 12.4 9.7
glycin 33.4 34.1
threonine 33.7 33.5
Arginine + glutamine 59.4 59.4
alanine 61.8 62.2
cysteine 26.8 24.7
valine 50.5 51.5
methionine 5.8 6.0
tryptophan 0.0 0.0
phenylalanine 63.7 54.6
isoleucine 56.7 54.6
leucine 76.3 77.2
lysine 54.1 58.7
proline 13.9 12.4
상기 표 7의 결과로부터, 실시예 3의 아미노산 조성에서 쓴맛에 기여하는 아미노산인 histidine, alanine, valine, methionine, phenylalanine, isoleucine, leucine, lysine 등의 총 함량이 비교예 3보다 낮은 함량을 보였다.From the results of Table 7, the total content of the amino acids histidine, alanine, valine, methionine, phenylalanine, isoleucine, leucine, lysine, etc., which contribute to the bitter taste in the amino acid composition of Example 3 showed a lower content than Comparative Example 3.
3. 된장의 관능 평가3. Sensory evaluation of miso
상기의 비교예 3 및 실시예 3에 의해 제조된 종래의 전분질을 이용한 개량식 된장과 신규의 아스퍼질러스 오라이자에 CJ KY를 이용하여 제조한 된장을 이용하여, 서울 및 경기권에 거주하는 30 내지 49세 주부 200명을 대상으로 된장의 관능 평가를 실시하였다. 관능평가는 5점 만점을 기준으로 세부 맛 속성에 대해 선호도를 조사하는 방식으로 평가하였다. 상기의 관능 평가 결과는 표 8과 같다.30 to 49 residing in Seoul and Gyeonggi-do using the modified doenjang using conventional starch prepared by Comparative Example 3 and Example 3 above and the new aspergillus orisa using doenjang prepared using CJ KY. Soybean paste sensory evaluation was performed on 200 housewives. Sensory evaluation was made by examining preferences for detailed taste attributes based on a 5-point scale. The sensory evaluation results are shown in Table 8.
또한, 훈련된 패널 10명을 대상으로 묘사 분석을 실시하였으며, 3반복으로 평가하여 평균값을 제시하였다. 상기의 묘사 분석 결과는 표 9와 같다.In addition, a descriptive analysis was performed on 10 trained panelists, and the average value was presented by evaluating 3 repetitions. The above description analysis results are shown in Table 9.
표 8 된장의 관능 평가 (선호도, 5점 척도)
맛 속성 비교예 3 실시예 3
전반적인 맛 3.74 3.85
전반적인 외관 3.59 3.65
짠맛 3.81 3.89
진한맛 3.38 3.54
텁텁한 맛 3.38 3.88
구수한 맛 3.66 3.76
개운한 맛 3.76 3.82
느끼한 맛 3.83 3.93
단맛 3.52 3.64
뒷맛 3.71 3.73
국물에 풀어지는 정도 4.04 4.07
되직함 3.85 3.95
Table 8 Sensory Evaluation of Doenjang (Preferences, 5-point Scale)
Taste properties Comparative Example 3 Example 3
Overall taste 3.74 3.85
Overall appearance 3.59 3.65
Salty 3.81 3.89
Taste 3.38 3.54
A heavy taste 3.38 3.88
A delicious taste 3.66 3.76
Refreshing taste 3.76 3.82
Taste 3.83 3.93
sweetness 3.52 3.64
aftertaste 3.71 3.73
Degree to loosen in broth 4.04 4.07
Reassignment 3.85 3.95
표 9 된장의 묘사 분석 (향, 맛/향미, 15점 척도)
특성 비교예 3 실시예 3 p-value
짠내 6.20 5.13 0.00
단내 4.10 4.55 0.02
신내 5.13 4.08 0.00
쓴내 3.90 3.18 0.00
메주향 6.93 5.55 0.00
콩구수한향 7.78 8.98 0.00
미소된장향 8.30 9.82 0.00
간장향 5.65 4.20 0.00
야채우린향 1.75 3.00 0.00
소독약향 2.38 1.45 0.00
탄내 2.55 1.43 0.00
소금짠내 3.55 2.13 0.00
군내 3.53 1.98 0.00
맛/향미 짠맛 8.50 7.33 0.00
단맛 5.15 6.45 0.00
신맛 5.18 4.15 0.00
쓴맛 3.58 2.78 0.00
우마미 5.83 7.08 0.00
메주향미 6.88 5.65 0.00
삶은콩구수한향미 8.25 9.20 0.00
곡물구수한향미 3.95 5.15 0.00
미소된장향미 8.63 10.10 0.00
오래묵힌향미 3.98 2.60 0.00
간장향미 3.88 2.42 0.00
야채우린향미 2.03 2.80 0.00
소독약향미 2.15 1.25 0.00
미역/다시마향미 1.45 2.65 0.00
소금향미 3.55 2.08 0.00
Table 9 Descriptive analysis of miso (flavor, taste / flavour, 15-point scale)
characteristic Comparative Example 3 Example 3 p-value
incense Squeeze 6.20 5.13 0.00
Dandan 4.10 4.55 0.02
Shinto 5.13 4.08 0.00
Bitter 3.90 3.18 0.00
Meju flavor 6.93 5.55 0.00
Bean and sour flavor 7.78 8.98 0.00
Miso flavor 8.30 9.82 0.00
Soy Sauce 5.65 4.20 0.00
Vegetable flavor 1.75 3.00 0.00
Antiseptic 2.38 1.45 0.00
Bullet 2.55 1.43 0.00
Salt 3.55 2.13 0.00
Within 3.53 1.98 0.00
Taste / flavor Salty 8.50 7.33 0.00
sweetness 5.15 6.45 0.00
Sour taste 5.18 4.15 0.00
bitter 3.58 2.78 0.00
Umami 5.83 7.08 0.00
Meju flavor 6.88 5.65 0.00
Boiled soybean flavor 8.25 9.20 0.00
Grain flavor 3.95 5.15 0.00
Miso flavor flavor 8.63 10.10 0.00
Old flavor 3.98 2.60 0.00
Soy Sauce Flavor 3.88 2.42 0.00
Vegetable flavor 2.03 2.80 0.00
Antiseptic 2.15 1.25 0.00
Seaweed / Tashima Flavor 1.45 2.65 0.00
Salt flavor 3.55 2.08 0.00
상기 표 8, 표 9의 결과로부터, 실시예 3의 쓴내, 쓴맛, 군내 등이 비교예 3보다 유의차 있게 낮은 수준을 보였으며, 구수한 향미, 우마미, 미소된장 향미 등이 유의차 있게 높은 수준을 보였다. 선호도에서는 진한맛, 텁텁한 맛, 구수한 맛, 단맛 등이 실시예 3이 높게 평가되었고, 전반적인 맛도 비교예 3보다 높게 평가되었다. 이는 신규의 아스퍼질러스 오리재 CJ KY의 높은 효소 역가로 분해율이 높아지면서, 우마미 및 구수한 향미 등의 향미 특성이 우수해진 반면, 쓴맛을 기인하는 발효산물은 적게 생성되어 된장의 맛 품질이 향상되었다.From the results of Table 8 and Table 9, the bitterness, bitter taste, and group of Example 3 showed a significantly lower level than Comparative Example 3, and the delicious flavor, umami, miso flavor, etc. were significantly higher. Seemed. In preference, Example 3 was highly evaluated, and the overall taste was also higher than that of Comparative Example 3, such as dark taste, heavy taste, sweet taste, and sweet taste. This is due to the high enzyme titer of the new Aspergillus duck material CJ KY, which has improved the flavor characteristics such as umami and sweet flavor, while producing less fermented products resulting from bitter taste, improving the taste quality of miso. .
[수탁번호][Accession number]
기탁기관명 : 한국미생물보존센터(국외)Depositary Name: Korea Microorganism Conservation Center (overseas)
수탁번호 : KCCM11302PAccession number: KCCM11302P
수탁일자 : 20120927Trust Date: 20120927
[규칙 제91조에 의한 정정 20.01.2014] 
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[Revision 20.01.2014 under Rule 91]
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Claims (11)

  1. 전통 메주에서 분리·동정한 신규한 균주인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY (기탁번호: KCCM 11302P). Aspergillus oryzae CJ KY (Accession No .: KCCM 11302P), a novel strain isolated and identified from traditional Meju.
  2. 제1항에 있어서, The method of claim 1,
    상기 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY는 소맥분 또는 밀쌀을 기질로 아밀라아제 및 프로테아제의 활성이 우수한 균주인 것을 특징으로 하는 균주. Aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) CJ KY is a strain characterized in that the excellent activity of amylase and protease on the basis of wheat flour or wheat.
  3. 소맥분 원료을 가수하여 증자시키는 증자 단계; A steaming step of hydrolyzing and increasing the wheat flour raw material;
    상기 증자된 소맥분에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY를 접종 및 배양하여 소맥분 코오지를 만드는 제국 단계; Empire step of inoculating and cultivating aspergillus duck material ( Aspergillus oryzae ) CJ KY to the increased wheat flour to make wheat flour coo;
    상기 소맥분 코오지에 식염 또는 염수를 첨가하고, 이에 증자된 밀쌀, 증자된 대두, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 1차 혼합물을 숙성시키는 1차 숙성 단계; 및 Adding a saline or brine to the wheat flour coji, and ripening a primary mixture of at least one selected from the group consisting of increased rice, steamed soybean, meju and soybean paste; And
    상기 숙성된 1차 혼합물에 메주 및 된장, 소금, 향미 증진제 및 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합한 2차 혼합물을 살균, 숙성시키는 2차 숙성 단계;를 포함하는 된장의 제조 방법.And a second aging step of sterilizing and aging a second mixture of at least one selected from the group consisting of meju and soybean paste, salt, flavor enhancer, and grain processed product to the aged primary mixture.
  4. 제3항에 있어서, The method of claim 3,
    상기 증자 단계에서, 증자된 소맥분의 수분 함량은 32 내지 38 중량% 인 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법. In the cooking step, the moisture content of the cooked wheat flour is 32 to 38% by weight of the production of doenjang.
  5. 제3항에 있어서, The method of claim 3,
    상기 제국 단계에서, 증자된 소맥분에 원료 총량 대비 0.1 내지 0.3 중량%의 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) CJ KY 및 0.5 내지 1.5 중량%의 증량제를 첨가한 후, 30~40℃에서 3일간 발효하여 소맥분 코오지를 만드는 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법. In the imperial step, 0.1 to 0.3% by weight of Aspergillus oryzae CJ KY and 0.5 to 1.5% by weight of an extender are added to the cooked wheat flour, followed by fermentation at 30 to 40 ° C for 3 days. Soybean flour manufacturing method of miso characterized in that the making of wheat flour.
  6. 제3항에 있어서, The method of claim 3,
    상기 1차 숙성 단계에서, 상기 식염 또는 염수는 1차 혼합물 전체 중량에 대하여 염분 농도가 9 내지 13 중량% 함량이 되도록 첨가하고, 증자된 대두, 증자된 밀쌀, 메주 및 된장으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상은, 1차 혼합물 전체 중량에 대하여 1 내지 38 중량% 함량이 되도록 첨가하는 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법. In the first ripening step, the salt or saline is added so that the salt concentration is 9 to 13% by weight relative to the total weight of the primary mixture, 1 selected from the group consisting of soybean, steamed wheat, meju and miso Species or more is added to the content of 1 to 38% by weight based on the total weight of the primary mixture, characterized in that the method for producing miso.
  7. 제3항에 있어서, The method of claim 3,
    상기 1차 숙성 단계에서, 상기 1차 혼합물은 45 내지 52 중량% 함량으로 수분을 함유하는 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법. In the first ripening step, the first mixture is a method of producing miso characterized in that it contains water in the content of 45 to 52% by weight.
  8. 제3항에 있어서, The method of claim 3,
    상기 1차 숙성 단계에서, 숙성 온도는 25 내지 35℃, 숙성 시간은 10 내지 30일인 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법. In the first aging step, the aging temperature is 25 to 35 ℃, aging time is 10 to 30 days, characterized in that the manufacturing method of doenjang.
  9. 제3항에 있어서, The method of claim 3,
    상기 2차 숙성 단계에서, 2차 혼합물을 60 내지 85 ℃에서 1 내지 60분 동안 살균한 후, 식용 알코올을 첨가하여 숙성하는 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법. In the second aging step, the second mixture is sterilized at 60 to 85 ℃ for 1 to 60 minutes, and then the edible alcohol is added to the production method of doenjang characterized in that the aging.
  10. 제3항에 있어서, The method of claim 3,
    상기 2차 숙성 단계에서, 2차 혼합물 100 중량부에 대하여 메주 또는 된장 3 내지 15 중량부, 소금, 향미 증진제 또는 곡물 가공품으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 1 내지 5 중량부를 함유하도록 첨가하여 혼합한 것을 특징으로 하는 된장의 제조방법. In the second aging step, by adding 1 to 5 parts by weight of one or more selected from the group consisting of 3 to 15 parts by weight of meju or soybean paste, salt, flavor enhancer or processed grains based on 100 parts by weight of the secondary mixture A method for producing miso, characterized in that the mixture.
  11. 제3항 내지 제10항 중 어느 한 항의 제조방법에 의하여 제조된 된장. Doenjang prepared by the method of any one of claims 3 to 10.
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