KR20140053911A - 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단 - Google Patents

세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단 Download PDF

Info

Publication number
KR20140053911A
KR20140053911A KR1020137033994A KR20137033994A KR20140053911A KR 20140053911 A KR20140053911 A KR 20140053911A KR 1020137033994 A KR1020137033994 A KR 1020137033994A KR 20137033994 A KR20137033994 A KR 20137033994A KR 20140053911 A KR20140053911 A KR 20140053911A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
rtd
inflammatory
drug composition
tnf
disease
Prior art date
Application number
KR1020137033994A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102060207B1 (ko
Inventor
마이클 이. 셀스테드
다트 큐. 트랜
Original Assignee
더 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 더 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 filed Critical 더 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아
Publication of KR20140053911A publication Critical patent/KR20140053911A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102060207B1 publication Critical patent/KR102060207B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A61K38/1729—Cationic antimicrobial peptides, e.g. defensins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4723—Cationic antimicrobial peptides, e.g. defensins
    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F01—MACHINES OR ENGINES IN GENERAL; ENGINE PLANTS IN GENERAL; STEAM ENGINES
    • F01P—COOLING OF MACHINES OR ENGINES IN GENERAL; COOLING OF INTERNAL-COMBUSTION ENGINES
    • F01P5/00—Pumping cooling-air or liquid coolants
    • F01P5/02—Pumping cooling-air; Arrangements of cooling-air pumps, e.g. fans or blowers
    • F01P5/04—Pump-driving arrangements
    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F24—HEATING; RANGES; VENTILATING
    • F24F—AIR-CONDITIONING; AIR-HUMIDIFICATION; VENTILATION; USE OF AIR CURRENTS FOR SCREENING
    • F24F5/00—Air-conditioning systems or apparatus not covered by F24F1/00 or F24F3/00, e.g. using solar heat or combined with household units such as an oven or water heater
    • F24F5/0007—Air-conditioning systems or apparatus not covered by F24F1/00 or F24F3/00, e.g. using solar heat or combined with household units such as an oven or water heater cooling apparatus specially adapted for use in air-conditioning
    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F24—HEATING; RANGES; VENTILATING
    • F24F—AIR-CONDITIONING; AIR-HUMIDIFICATION; VENTILATION; USE OF AIR CURRENTS FOR SCREENING
    • F24F6/00—Air-humidification, e.g. cooling by humidification
    • F24F6/12—Air-humidification, e.g. cooling by humidification by forming water dispersions in the air
    • F24F6/16—Air-humidification, e.g. cooling by humidification by forming water dispersions in the air using rotating elements
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B63—SHIPS OR OTHER WATERBORNE VESSELS; RELATED EQUIPMENT
    • B63J—AUXILIARIES ON VESSELS
    • B63J3/00—Driving of auxiliaries
    • B63J2003/001—Driving of auxiliaries characterised by type of power supply, or power transmission, e.g. by using electric power or steam
    • B63J2003/002—Driving of auxiliaries characterised by type of power supply, or power transmission, e.g. by using electric power or steam by using electric power
    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F01—MACHINES OR ENGINES IN GENERAL; ENGINE PLANTS IN GENERAL; STEAM ENGINES
    • F01P—COOLING OF MACHINES OR ENGINES IN GENERAL; COOLING OF INTERNAL-COMBUSTION ENGINES
    • F01P5/00—Pumping cooling-air or liquid coolants
    • F01P5/02—Pumping cooling-air; Arrangements of cooling-air pumps, e.g. fans or blowers
    • F01P5/04—Pump-driving arrangements
    • F01P2005/046—Pump-driving arrangements with electrical pump drive
    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F24—HEATING; RANGES; VENTILATING
    • F24F—AIR-CONDITIONING; AIR-HUMIDIFICATION; VENTILATION; USE OF AIR CURRENTS FOR SCREENING
    • F24F2203/00—Devices or apparatus used for air treatment
    • F24F2203/10—Rotary wheel
    • F24F2203/1028—Rotary wheel combined with a spraying device
    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F24—HEATING; RANGES; VENTILATING
    • F24F—AIR-CONDITIONING; AIR-HUMIDIFICATION; VENTILATION; USE OF AIR CURRENTS FOR SCREENING
    • F24F2203/00—Devices or apparatus used for air treatment
    • F24F2203/10—Rotary wheel
    • F24F2203/1076—Rotary wheel comprising three rotors

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • Combustion & Propulsion (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)

Abstract

하나 이상의 염증성 병태들의 치료를 위한 약물 조성물들은 세타-디펜신 (theta defensin), 그의 유사체 또는 유도체의 적어도 하나를 포함할 수 있다. 발명적 방법들은 항-염증성 효과들에 관하여 세타-디펜신들, 그들의 유사체들 또는 유도체를 그들의 효능을 탐색하는 단계, 및 이러한 조성물들을 염증성 병태들을 치료할 목적으로 시장에 제공하는 단계를 포함한다. 종양괴사인자 알파 (TNF-알파)-전환효소 (TACE) 또는 RTD-1-27, RTD-1-28 또는 RTD-1-29와 같은 다른 염증성 프로테아제들, 및/또는 쉐다제들 (sheddase)의 임상적으로 적절한 저해를 생산하는 데 효과적인 약물 조성물들은 특히 흥미롭다. 바람직한 조성물들은 류마티스 관절염, 염증성 장 질환, 및 기타 만성 염증성 질환들, 자가면역 질환들, 암, 및 알츠하이머병, 골관절염, 염증-관련 신경퇴화성 및 기타 염증-관련 질환들을 치료하는 데 사용될 수 있다.

Description

세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단 {Blockade of inflammatory proteases with theta-defensins}
본 발명은 다양한 질환들에서 신호전달 및 염증 경로들을 포함하는 사이토카인 활성을 조정하기 위한 고리 펩타이드들 (cyclic peptide)의 용도에 관한 것이다. 보다 상세하게, 고리 펩타이드들은 본 명세서에서, 이들 프로테아제들의 활성들은 질환의 발병기전과 관련되어 있는 질환들에 걸친 적용을 가지는 쉐다제들 (sheddase) 및 다른 적절한 프로테아제들 (금속단백질분해효소들 및 시스테인 프로테아제들)의 저해와 같은 미지의 생물학적 활성들을 소유한다.
모든 출판물들은 본 명세서에서 각각의 개별 출판물 또는 특허 출원이 참고문헌으로 통합되도록 상세하게 및 개별적으로 표시된 바와 동일한 정도로 참고문헌으로 통합되어 있다. 다음의 상세한 설명은 발명적 주제 문제를 이해하는 데 유용할 수 있는 정보를 포함한다. 이것이 본 명세서에서 제공된 임의의 정보가 선행기술이거나 현재 청구된 발명들에 적절한 점, 또는 특정하게 또는 함축적으로 참조된 임의의 출판물이 선행기술인 점의 승인은 아니다.
본 명세서에서 기술된 고리 펩타이드들은, 종양괴사인자 알파 (TNF-α)-전환효소 ("TACE", ADAM17이라고도 역시 알려짐) 및 병리학적 염증, 조직 분해와 암세포 증식을 촉진하는 성장인자들의 가동화에 관여하는 다른 금속성효소들 (예로, 쉐다제들 (sheddase) 및 기질 금속단백질분해효소들 ("MMP"))과 같은, 기지의 임상적 중요도를 가지는 전-염증성 효소적 경로들을 표적하는 치료적 제제들로서 최근에 밝혀졌다.
금속단백질분해효소들 (matrix metalloproteinase)은 발생적 프로그램화, 조직 손상 또는 감염에 대한 반응, 상처 리모델링, 및 세포 분열의 자극 (3)의 범위를 가지는 많은 생물학적 과정들을 조절한다. 금속단백질분해효소 활성의 조절은 세포 및 조직 항상성 (homeostasis)을 위해 결정적이다. 많은 질환 상태들은 금속성효소 활성들의 과다-발현과 연관되어 있다. 예를 들면, 류마티스 및 다른 형태들의 관절염으로 고생하는 관절들은 MMP들뿐만 아니라 TNF-α의 증가된 수준들을 가지는 데, 이는 TACE에 의해 전-TNF-α를 발현하는 세포들의 세포 표면으로부터 방출된다 (7, 8, 13, 16). 단일클론 항체들로의 TNF-α의 차단은 낮은 용량의 메토트렉세이트 (methotrexate)와 같은 첫 번째 계열의 약물들에 대하여 미반응성인 류마티스 관절염 (RA)를 가진 환자들의 유의한 비율에서 RA의 치료에 효과적인 것으로 입증되었다. RA를 위한 TNF-α의 차단은 모든 경우들에서 효과적인 것은 아니기 때문에, 그리고 환자들의 소집합에서 TNF-α 차단제들과 연관된 심각한 부작용들이 있기 때문에, 대안의 항-염증 전략들을 개발하려는 노력들이 계속되어 왔다. 본 관점에서, 수많은 제약회사들은 약물 개발 프로그램들을 TACE 저해제들의 발견에 초점을 맞추어 왔지만 (17), 아무 것도 FDA에 의한 승인을 받지 못하였다.
세타 디펜신들 (theta defensin; θ-디펜신들)은 레서스 원숭이들, 비비들, 및 기타 구대륙 원숭이들의 조직들에서 발현되는 자연적으로 생기는 고리 펩타이드들이다. 그들은 인간들 또는 기타 유인원들에서는 발현되지 않는다. 자연적으로 생기는 θ-디펜신들은 모든 기지의 θ-디펜신들 중에서 보존되는 세 개의 디설파이드 결합들에 의해 안정화되는 18개 아미노산들의 고리로 구성된다 (9, 21-23, 25). 다른 디펜신들과 같이, θ-디펜신들은 펩타이드들의 항미생물 성질들을 기초로 하여 원래 발견되었다. 그러나, 본 발명자들은 본 명세서에서 강력한 항-염증성 인자들로서 θ-디펜신들의 두 번째 미지의 성질들을 발견하였다. 본 명세서에서 더 기술된 바와 같이, θ-디펜신들의 천연의 및 변형된 구조들은 생체외 및 생체내 둘 다에서 염증을 저하 조절 (down regulating)할 수 있다. 가장 중요하게는, θ-디펜신들 및 θ-디펜신들의 구조로부터 유래된 펩타이드들 (예로, 고리 펩타이드들)은 TNF-α 염증에서 핵심 인자인 TACE를 저해할 수 있는 것으로 밝혀졌다. θ-디펜신들이 천연의 TACE 저해제들이라는 전적으로 새로운 본 발견은 지금 개체에 존재하는 내인성 사이토카인-관련 경로들을 통해 염증을 조절할 수 있는 분자들을 위한 생체 출처를 제공한다. 이들 펩타이드들은 동물들에서 발현된 유일한, TACE의 용해성 조절인자가 되는, 기지의 천연 산물이다. 따라서, 고리 펩타이드들은 자가면역성 및 다른 염증성 질환들과 같은, 기능장애성 사이토카인 활성으로부터 유발되는 다양한 질환 상태들 또는 병태들에 걸친 치료제들로서 사용될 수 있고, 인간들에서 다양한 염증성 질환들 및/또는 병태들은 유인원 진화과정 동안 θ-디펜신 발현의 소실로 인한 것일 수 있다.
또한, TACE와 같은 인자들은 쉐다제들 (sheddase)로서 알려져 있는 더 광범위한 부류의 분자들의 구성원들이고, 이는 세포외 단백질 도메인들을 절단하는 생물학적 활성을 소유한다. 본 절단 활성은 유방암의 용도의 경우 쉐다제 ADAM10의 저해에 의한 트라스투주마브 (trastuzumab)(허셉틴 (Herceptin))과 같은 소정의 치료들의 효능을 강화하는 치료적 경로를 제공하였다. 전형적으로, Her2의 ADAM10 쉐다제 절단은 리간드-비의존성 성장 및 증식하는 세포들에 대한 생존 신호들과 함께 전신적 (constitutive) 키나제 활성을 소유하는 Her2 단편을 유도한다. 그러나, 본 과정의 해로운 효과들은 쉐다제 저해를 통하여 방해받을 수 있다. 따라서, 쉐다제 저해 활성을 소유하는 고리 펩타이드들은, 금속단백질분해효소 구조, 발현, 및/또는 기능에서 변화들이 질환 및/또는 병태의 발병기전과 연관되는 것들을 포함하여 보다 더 광범위하고 다양한 질환들 및/또는 병태들을 위한 치료적 접근법들을 제공한다.
12년 이상 동안, 제약회사들은 TACE 저해제들을 개발하도록 추구하여 왔다 (14, 17). 여러 소분자들 (대부분 하이드록사메이트들)이 RA의 동물 모델들에서 효과적인 것으로 확인되었던 한편, 이들 화합물들은 인간들에서 허용가능하지 않은 독성들로 인해 모두 승인되지 못하였다 (14, 17). 따라서, 기존의 TNF 길항제들 모두는 블랙박스 경고들, 투약이 미국의 시장에서 계속 남을 수 있는 미국 식품의약품 안전청 (FDA)에 의한 가장 엄격한 경고를 가진다.
따라서, RA와 같은 질환에서 효능을 가진 비-독성 TACE 저해제의 출현은 RA, 자가면역 및 염증성 질환들, 뿐만 아니라 암과 같은 금속단백질분해효소 활성이 관여하는 다른 질환들을 위한 치료적 접근법들에 소중하게 추가될 것이다. 더욱 일반적인 말하자면, 염증성 및 염증-관련 병태들, 특히 만성 염증성 병태들을 치료하는 약제들, 뿐만 아니라 이러한 약제들을 제조하고, 시판하고, 투여하는 방법들을 위한 필요성이 여전히 존재한다.
본 출원은 2011년 6월 2일에 제출된 미국 가특허출원 일련번호 제 61/492753호에 대한 우선권 주장을 하고 있다.
본 발명의 주제 문제는 θ-디펜신, 그의 유사체 또는 유도체를 포함하는 약물 조성물이 염증성 병태를 치료하도록 연구되고 시판되는 장치들, 시스템들 및 방법들을 제공한다.
본 출원일 현재, 바람직한 약물 조성물로는 RTD-1-27, RTD-1-28 및 RTD-1-29의 적어도 하나를 포함한다.
발명적 주제 문제의 연구 관점에서, 독성, 효능 및 용량-반응 연구들이 고려된다. 임의의 이러한 연구들은 직접적으로 제약회사 또는 다른 회사에 의해 그 자신의 연구실들에서, 또는 간접적으로 자회사 또는 심지어 미관련 회사를 통하여도 시행될 수 있고, 이들 모두는 본 명세서에서 약물 조성물의 효능을 결정하는 개념에 포함되는 것으로서 이해되어야 한다.
본 명세서에서 고려되는 항-염증성 효과(들)은, 예를 들면 종양괴사인자 알파 (TNF-α)-전환효소 (TACE), 카텝신 C (cathepsin C), 또는 기타 전염증성 프로테아제들, 금속성프로테아제들 (metalloprotease)의 ADAM 패밀리 및 기타 쉐다제들 (sheddase)의 저해를 포함하는, 염증-관련 화합물들의 임상적으로 적절한 저해 모두를 광범위하게 포함하는 것으로 해석되어야 한다.
약물 조성물을 시장에 제공하는 단계는 본 명세서에서 약물 조성물의 시판되는 정량을 제조하거나, 제조하였거나, 이의 제조를 감독하거나, 통제하거나, 기타 다른 방식으로 지도하는 것으로서 해석되어야 한다. 고려된 최소의 시판되는 정량들로는 하나 이상의 생산 시설들에서 임의의 주어진 1년의 기간 동안, 전부 1 킬로그램, 10 킬로그램, 100 킬로그램, 및 1000 킬로그램을 포함한다.
고려된 θ-디펜신 (θ-defensin), 그의 유사체 또는 유도체들의 한 가지 흥미로운 관점은 많은 이들 화합물들이 산들 및 프로테아제들에 대해 매우 안정하고, 경구적 제형물로 투여될 수 있는 점이다.
적어도 부분적으로 고려된 치료적 조성물들은 TACE 및/또는 쉐다제들에 영향을 줄 수 있기 때문에, 예를 들면 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease), 및 기타 만성 염증성 질환들 (chronic inflammatory disease), 자가면역 질환, 급성 박테리아혈증 (acute bacteremia), 패혈증 (sepsis), 낭성 섬유증 (cystic fibrosis), 암 (cancer), 알츠하이머병 (Alzheimer's), 골관절염 (osteoarthritis), 염증-관련 신경퇴화성 및 기타 염증-관련 질환들을 포함하는, 많은 서로 다른 염증성 병태들이 치료될 수 있는 것으로 고려된다. 특히 본 명세서에서 고려된 방법들 및 조성물들은 항-TNF-α 치료에 미-반응자들인 사람들을 치료하도록 유리하게 시판될 수 있는 것으로 고려된다.
또한 인간 또는 비-인간 동물에게 투여를 위한 약제들 및 약제들을 제조하는 방법들로서, 투약은 염증성 병태를 치료하도록 시판되는 본 명세서에서 또는 우선권 출원에서 개시된 새로운 θ-디펜신, 그의 유사체 또는 유도체의 적어도 하나를 포함하는 것들이 고려된다. RTD-1-27, RTD-1-28 및 RTD-1-29가 특히 흥미롭다.
본 발명의 주제 문제의 다양한 목적들, 특징들, 관점들 및 장점들은 바람직한 구현예들의 다음의 상세한 설명으로부터 더욱 명확해질 것이다.
본 명세서에서 인용된 모든 참고문헌들은 그들의 전부가 완벽하게 개시된 것과 같이 참고문헌으로 통합된다. 달리 정의되지 않는 경우라면, 본 명세서에서 사용된 기술학적 및 과학적 용어들은 발명적 주제 문제가 속하는 기술분야에서 당업자에 의해 공통적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. Singleton et al., Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 제 3판, J. Wiley & Sons (New York, NY 2001); March, Advanced Organic Chemistry Reactions , Mechanisms and Structure 제 5판, J. Wiley & Sons (New York, N Y 2001); 및 Sambrook and Russel, Molecular Cloning : A Laboratory Manual 제 3판, Cold Spring Harbor Laboratory Press (Cold Spring Harbor. NY 2001);는 당업자에게 본 출원에서 사용된 많은 용어들에 관한 일반 지침을 제공한다.
당업자라면 본 명세서에서 기술된 것들과 유사하거나 동등한 많은 방법들 및 재료들을 인식할 것이고, 이는 청구된 발명들의 실행에 사용될 수 있다. 따라서, 발명적 주제 문제는 기술된 방법들 및 재료들에 제한되는 것으로서 해석되어야 한다. 본 목적들을 위해, 다음의 용어들이 하기에 정의된다.
문맥 상 정반대로 진술하지 않은 경우라면, 본 명세서에서 설명된 모든 범위들은 그들의 종료점들을 포함하는 것으로서 해석되어야 하고, 종료점이 개방된 범위들은 시판되는 실제적인 수치들을 포함하도록 해석되어야 한다. 유사하게, 모든 수치들의 리스트들은 문맥 상 정반대로 진술하지 않은 경우라면 중간 수치들을 포함하는 것으로서 고려되어야 한다.
본 명세서에서 사용되는 바 용어들 "세타-디펜신들 (theta-defensin)" 또는 "θ-디펜신들 (θ-defensin)"은 구대륙 원숭이들 및 유인원들 (예들로는 레서스 원숭이, 올리브 비비, 큰 긴팔 원숭이, 및 오랑우탄임)과 같은 다양한 영장류 종들에서 발견되는 바와 같은 디펜신 단백질들의 θ-디펜신 패밀리의 구성원들을 포함하고, 여기에서 θ-디펜신들 전구체들은 전사적으로 발현되고 해독후 변형 (post-translational modification)을 통해 θ-디펜신으로 프로세싱된다. 이것은 또한 그레이트 유인원들 (예들로는 인간, 침팬지들, 보노보들, 및 고릴라들임)에서 발견되는 슈도유전자들 (pseudogene)을 포함하고, θ-디펜신 슈도유전자들의 유전적 변형은 포유동물 세포들에서 θ-디펜신 단백질들의 발현을 허용하도록 당해 기술분야에서 잘 알려진 기법들에 따라 변경될 수 있다. 이것은 핵산 및/또는 아미노산 서열들의 비교 창에서 서열 상동성 또는 보존된 구조를 도시하는 컴퓨터 모델화 기법들, 또는 핵산 탐침들을 동종유래 θ-디펜신들을 확인하는 데 사용하는 선택적 혼성화 기법들과 같은, 당해 기술분야에서 잘 알려진 기법들에 따라 동일하거나 서로 다른 종에서 확인될 수 있는 θ-디펜신 단백질들도 역시 포함한다. θ-디펜신들은 내인성 출처들로부터 분리되고, 자가유래 또는 이종유래 세포주들에서 생산되고, 펩타이드 합성을 통해, 또는 당업자에게 알려진 임의의 입수가능한 방법에 따라 생산될 수 있다. θ-디펜신들의 예들로는 RTD-1, RTD-2, RTD-3, RTD-4, RTD-5, RTD-6, BTD-1, BTD-2, BTD-3, BTD-4, BTD-5, BTD-6, BTD-7, BTD-8, BTD-9, BTD-10 또는 HTDp를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바, "쉐다제 (sheddase)"는 막통과 단백질들의 세포외 부분들을 절단하는 효소적 단백질들을 포함한다. 예들로는 무엇보다도 단백질들의 디스인테그린 및 금속단백질분해효소 패밀리 (ADAM), 단백질들의 아스파테이트 프로테아제 (BACE) 패밀리의 구성원들을 포함한다. 쉐다제들인 ADAM 단백질들의 예들로는 ADAM 2, ADAM 7, ADAM 8, ADAM 9, ADAM 10, ADAM 11, ADAM 12, ADAM 15, ADAM 17, ADAM 18 (ADAM 27이라고도 역시 알려짐), ADAM 19, ADAM 20, ADAM 21 (ADAM 31이라고도 역시 알려짐), ADAM 22, ADAM 23, ADAM 28, ADAM 29, ADAM 30, 및 ADAM 33을 포함한다.
용어, "유사체 (analog)"는 본 명세서에서 θ-디펜신들에 적용된 바, 사이토카인 활성을 조정하고, 단백질분해성 쉐다제 활성을 저해하고, 세포 표면 수용체들과 관련된 효소 기능을 변경하고/하거나 항-미생물 활성을 소유할 수 있는, θ-디펜신과 같은 디펜신으로부터 유래된 코아 구조를 포함하는 폴리펩타이드들 및 펩타이드들이다. 예들로는 다수의 시스테인 잔기들 또는 실질적으로 유사한 치환기들에 걸쳐서 1개, 2개, 3개, 또는 4개 이상의 디설파이드 결합들을 포함하는 고리 펩타이드들을 포함하고, 여기에서 유사체는 길이가 8 내지 24개 아미노산들의 범위를 가질 수 있고 순 양성 전하를 포함한다.
디펜신들은 척추동물들, 무척추동물들, 뿐만 아니라 식물들에서 발견되는 바와 같이 진화적으로 높게 보존되는 작은 시스테인-농축 양이온성 단백질들이다. 이들 단백질들은 세균들, 곰팡이들 및 많은 외투 및 비-외투 바이러스들과 같은 넓은 범위의 유기체들에 대한 생물학적 활성을 소유한다. 일반적으로, 디펜신들은 6개 (척추동물들에서) 내지 8개의 보존된 시스테인 잔기들을 포함하는 18개 내지 45개의 아미노산들로 구성된다. 호중성 과립구들 및 거의 모든 상피세포들과 같은 다양한 면역 세포들은 숙주 세포들과 같이 식작용된 또는 세포외 미생물들을 살상하는 핵심 기능을 가진 이들 펩타이드들을 포함한다. 많은 디펜신들은 미생물 세포막과 결합하여 기능하고, 일단 포매되면 미생물 특성 (integrity)을 파괴하도록 필수적 이온들 및 영양분들의 유출을 허용하는 공극-유사 막 결함들을 형성한다. 그러나 본 명세서에서 더 기술된 바와 같이, θ-디펜신들을 포함하는 디펜신 단백질들의 소정의 구성원들은 숙주세포 면역 기능의 조정을 통하여도 역시 작용한다. 이것은 TNF-α와 같은 사이토카인 관련된 염증성 경로들을 포함한다.
일반적인 디펜신들 . 디펜신들은 백혈구들 및 다양한 상피들에 의해 생산되는 양이온성, 삼중디설파이드-포함하는 항미생물성 펩타이드들이다. 그들은 α-, β-, θ-디펜신 소패밀리들로 소분되고, 이는 펩타이드 크기 및 서로 다른 디설파이드 모티브들에 의해 구별된다. 인간들에서, 4가지 α-디펜신들 (HNP-1 내지 HNP-4)가 호중성구들로부터 분리되어 왔고 2가지의 장내 α-디펜신들 (HD-5 및 HD-6)이 소장의 소와들에 있는 파네스 세포들 (Paneth cell)에 의해 발현된다. HD-5의 발현은 여성의 비뇨생식관에서도 역시 검출되어 왔다. 3가지 인간 β-디펜신들 (hBD-1 내지 hBD-3)이 다양한 기관들의 상피 및 비상피 세포 유형들로부터 분리되었고, 여러 다른 것들의 발현이 cDNA 분석에 의해 또는 인간 게놈의 분석으로부터 유추되어 왔다. 수많은 계열들의 증거는 디펜신들이 피부, 호흡 상피, 비뇨생식관, 및 다양한 배혈구들 (예로, 호중성구들, 단핵구들, 및 NK 세포들)에서 항미생물 효과기 기능을 제공하는 점을 제시한다. 또한, 디펜신들이 선천적 및 적응적 면역 반응들 둘 다에 관여하는 세포들을 활성화하고, 그들이 면역성의 2가지 계열들 내에서 작용하고 이들을 연결하는 점을 제시한다.
거대고리 θ- 디펜신들 . θ-디펜신들은 76개-아미노산 α-디펜신-관련 전구체들로부터 유래된 2개의 노나펩타이드들의 해독후 스프라이싱에 의해 형성되는 고리 옥타데카펩타이드들이다. θ-디펜신들의 발현은 오랑우탄들이 펩타이드 전구체에 전성숙한 종결 코돈을 도입하였던 돌연변이로 인한 진화로 출현하였던 시간 근방에 정지되었기 때문에 인간들은 θ-디펜신 펩타이드들을 발현하지 않는다.
θ-디펜신들은 θ-디펜신 전구체들로부터 유래된 2가지 9개-아미노산 서열들의 머리-꼬리 방향 스프라이싱을 사용하여 생합성될 수 있다. θ-디펜신들은 먼저 다른 구대륙 원숭이들 및 두 가지 유인원들 (큰 긴팔 원숭이 및 오랑우탄)에서 θ-디펜신 유전자들의 존재를 드러내는 연속적인 계통유전학적 조사로 레서스 원숭이의 호중성구들 및 단핵구들에서 확인되었지만, 아직까지 신대륙 원숭이들 또는 전원숭이들에서 θ-디펜신들의 존재는 보고된 적이 없었다. 인간들, 침팬지들, 보노보들, 및 고릴라들은 전구체 mRNA가 신호 서열에서 종결 코돈을 생산하여 θ-디펜신 전구체의 해독을 방지하는 돌연변이를 포함하는 θ-디펜신 슈도유전자들을 발현한다. 레서스 θ-디펜신-1 (RTD-1)은 두 가지 θ-디펜신 전구체들인 프로RTD-1a 및 프로RTD1b의 이종이량체 스프라이싱으로부터 생산된다. 프로RTD-1a 및 프로RTD1b가 관여하는 동종이량체 절단/결찰 반응들은 RTD-2 및 RTD-3의 분리에 의해 드러났다. RTD-1, -2, 및 -3는 세균들 및 곰팡이들에 대한 강력한 살미생물 활성들을 가지고, 인간 면역결핍 바이러스 제 1형 (HIV-1) 및 헤르페스 심플렉스 바이러스 (HSV)에 대한 항바이러스 활성들을 소유하는 것으로 알려져 왔다.
우리는 항세균 및 항바이러스 활성들을 소유하는 천연의 θ-디펜신의 서열을 기초로 하여 합성 θ-디펜신 설계들을 제작하여 왔다. 또한, θ-디펜신들은 바실러스 안트라시스 (Bacillus anthracis)로부터 얻은 치명적 독소와 결합하고 이를 불활성화하는 것으로 보고되어 있다. θ-디펜신들은 생리학적 농도들의 염, 이가 양이온들, 및 혈청의 존재 시 미생물을 살상한다. 대조적으로, α- 및 β-디펜신들의 항미생물 활성들은 염 및 이가 양이온들의 존재 시 현저하게 감소된다. 비고리 RTD-1은 생리적 식염수에서 스태필로코커스 아우레우스 (Staphylococcus aureus)에 대해 불활성인 반면, 천연의 고리 형태의 펩타이드는 이들 조건들 하에서 강력한 살상 활성을 보유하였다. 이들 데이타는 θ-디펜신들의 고리 골격 구조가 염 비민감성을 부여하면서, 생리학적으로 적절한 조건들 하에서 강력한 생물학적 활성을 보유할 수 있는 안정한 분자를 제공하는 점을 가리킨다.
θ- 디펜신들의 항미생물 활성 . 고대 유형의 θ-디펜신 펩타이드는 레서스 원숭이 θ-디펜신-1 (RTD-1), 18개-아미노산 거대고리 펩타이드이다 (22). 기술된 바와 같이, 성숙한 펩타이드는 독특한 공정에 의해 생산되고 이에 의해 절단 (truncated) α-디펜신-유사 전구체들로부터 유래된 2가지 9개-아미노산 펩타이드들이 머리-꼬리 방향으로 스프라이싱되어 3개의 디설파이드들에 의해 안정화된 거대고리 분자를 형성한다 (도 1). 성숙한 거대고리 θ-디펜신을 만드는 생화학적 경로는 새로운 것이다. 레서스 원숭이들 (22, 23, 25) 및 올리브 비비들 (9)은 각각 3 및 4가지의 θ-디펜신 전구체들을 발현한다. 각각의 전구체는 일치하거나 (동종이량체 스프라이싱) 또는 서로 다른 (이종이량체 스프라이싱) 노나펩타이드와 모든 이원적 조합들로 쌍을 형성하는 독특한 노나펩타이드를 공여한다. 이것은 6가지의 독특한 머카크 원숭이 θ-디펜신들 및 10가지의 비비 θ-디펜신들의 생산을 가능하게 한다. 본 발명자들은 모두 6가지의 예측된 머카크 원숭이 펩타이드들을 분리하였고 (23), 비비에서 예측된 이들의 7가지를 분리하였다 (9).
α-디펜신들과 같은 다른 디펜신들과 유사하게, θ-디펜신들은 머카크 원숭이 및 비비 호중성구들의 일차 과립들에 포장되고 또한 단핵구들에서 발현된다 (23). 미생물들이 호중성구들, 단핵구들, 및 대식세포들에 의해 식작용된 바와 같이, 디펜신들은 그들이 살미생물제들로서 세포내 살상에 참여하는 파고좀 (phagosome)으로 이동된다. θ-디펜신들은 그램 양성 세균들, 곰팡이들에 대항하여 마이크로몰 이하 농도들에서 미생물 살상하고 (9, 22, 25) HIV-1의 세포 흡수를 저해한다 (5, 6, 27, 28). 특이적 중화 항체를 사용하여, 본 발명자들은 θ-디펜신들이 θ-디펜신들이 머카크 원숭이 호중성구들의 시험관내 S. 아우레우스, 대장균, 및 C. 알비칸스 (C. albicans)에 대한 대부분의 과립-유래된 항미생물 활성들을 담당하는 점을 보여주었다 (23). 게다가, θ-디펜신들은 인간 호중성구 과립들로부터 얻은 추출물들과 대비하여 머카크 원숭이 PMN 과립 추출물의 월등한 살상 활성들을 담당하는 것으로 관찰되었다 (23). 인간들에서 전신적 염증 (예로, 패혈증) 동안, α-디펜신들은 유도된 및/또는 우연한 방식으로 세포외 공간으로 방출된다 (2, 18). 비비 θ-디펜신들 (22)은 유사하게 세균혈증 동물들의 혈청 내로 방출된다. 또한, 세포외 θ-디펜신들은 본 명세서에서 더 기술될 바와 같이, 설치동물들로부터 인간들까지의 범위를 가지는 종들에서 작용하는 항-염증성 기작들을 통해 염증을 조정하도록 능력을 소유하는 것으로 보인다. 따라서, θ-디펜신들 및 θ-디펜신들의 구조로부터 유래된 펩타이드들은 면역 기능 조정인자들의 중요한 부류를 나타낸다.
TNF -α 및 염증 . 종양괴사인자 알파 ("TNF-α", 카켁신 (cachexin) 또는 카켁틴 (cachectin)이라고도 역시 알려짐)는 전신적 염증에 관여하는 사이토카인이고 급성기 반응을 자극하는 사이토카인들 그룹의 구성원이다.
TNF-α는 세포사멸 (apoptotic) 사포 사망의 유도, 염증의 촉진, 종양발생의 저해 및 바이러스 증식을 포함하는, 면역 세포들의 조절에서 핵심 역할을 담당한다. TNF-α 활성의 광범위한 범위를 가지는 효과들이 주어져 있어, TNF-α 발현, 생산 및 신호전달의 조절 장애가 무엇보다도 류마티스 관절염, 알츠하이머병, 결핵, 크론병을 포함하는 다양한 인간 질환들에서 관여하였던 점을 찾아내는 것은놀랍지 않다.
TNF-α 신호전달은 먼저 성숙과정 동안 세포막 내로 삽입하게 되는 26 kDa, 212개-아미노산-길이의 제 Ⅱ형 막통과 단백질로서 생산된다. 세포 표면에서, 막-결합된 TNF-α ("프로-TND-α")는 생물학적으로 활성을 가지고, 인접분비 (juxtacrine) 세포내 신호전달을 통해 면역 반응을 유도할 수 있다. 그러나, 프로-TNF-α는 금속단백질분해효소 TNF-α 전환효소 ("TACE", ADAM17이라고도 역시 알려짐)에 의해 그의 76번 Ala - 77번 Val에서 단백질분해 절단을 겪을 수 있다. 이러한 막-통합된 형태로부터, TNF-α로서 공통적으로 알려진, 주변분비 신호전달에서 중추적 중요성이 있는 용해성 17 kDa 세포외 도메인 (엑토도메인)이 방출된다.
일반적으로, TNF-α 활성을 표적하는 기존의 치료적 전략들은 수용체 결합을 빙지하도록 용해성 및/또는 막통과 결합된 형태들의 TNF-α에 대한 항체들을 제공하는 데, 또는 순환하는 TNF-α를 중화하도록 용해성 하이브리드 융합 수용체들을 만드는데 초점을 맞추어 왔다. 이들 치료적 접근법들의 중요한 유익들에도 불구하고, 거의 삼분의 일의 환자들은 임의 형태의 TNF-α 치료법에 반응하지 않으며, 면역원성, 감염들, 지연된 과민성-유형 반응들 및 약물-유도성 루푸스 및 탈미엘린화와 같은 자가면역 질환들을 포함하는 여러 유해 효과들이 보고되어 왔다.
TACE 및 쉐다제 활성 . 기술된 바와 같이, TNF-α 신호전달 활성에서 핵심 단계는 "배출 (shedding)"이라고 알려진 공정, TACE에 의해 촉매화된 바, 용해성 형태의 순환하는 TNF-α 내로 막 결합 형태의 단백질의 방출 (liberation)이다. 824개 아미노산들로 구성된 70-kDa 단백질인, TACE는 디스인테그린들 및 금속단백질분해효소 (A Disintegrin And Metalloproteinase)의 ADAM 단백질 패밀리에 속한다. ADAM 단백질 패밀리의 구성원들은 진화적으로 보존된 구조들 그리고 막-결합 프로-단백질들로부터 용해성 엑토도메인의 절단 및 방출의 기능적 능력 둘 다를 소유한다. 염증 과정에서 강력하고 중추적인 매개인자로서 TNF-α의 역할이 주어져서, TACE 저해제들로서 기능하는 고리 펩타이드들은 항체 또는 용해성 수용체-기초 조성물들과 같은 최근의 항-TNF-α 제제들에 대한 핵심 대안을 제공할 것이다.
또한, TNF-α 및 TACE는 여러 서로 다른 단백질들에 걸친 "배출 (shedding)" 활성의 범위 및 다양성이 주어지고 그리고 많은 서로 다른 질환 상태들 및/또는 병태들에 관여된 바와 같이, 고리 펩타이드 치료적 활성을 위한 여러 잠재적인 치료적 표적들의 단지 두 가지를 나타낸다. TACE 및 다른 ADAM 패밀리 분자들은 더 큰 패밀리의 "쉐다제들"의 대다수 구성원들을 구성한다. 그러나, 다른 쉐다제들은 아스파테이트 프로테아제 (BACE)의 구성원들을 포함한다. 쉐다제 유형들의 범위를 넘어서, 쉐다제 활성의 기능은 막통과 단백질 수용체 엑토도메인 (예로, Her2)의 절단 또는 이어서 방출된 작동제가 또 다른 수용체 (예로, EGFR)을 자극하도록 허용하는 수용체에 대한 작동제 결합을 통한 신호전달 활성화로부터 다양하다. 신호전달 기능을 가능하게 하고 전파하는 데 이러한 핵심 역할로 인하여, 쉐다제 활성의 저해는 새로운 치료적 여정들을 열고, 또한 기존의 약물 치료들의 효능을 강화하도록 중요한 치료적 전략을 제공한다. 예를 들면, Her2의 ADAM10 쉐다제 절단은 증식하는 세포들에 대한 리간드-비의존성 성장 및 생존 신호들과 함께 전신 키나제 활성을 소유하는 Her2 단편을 가져온다. 본 과정의 유독한 효과들은 트라스투주마브 (허셉틴) 투여 및 ADAM 10 쉐다제 활성의 저해를 통해 방해될 수 있다 (30, 31). 그 결과로, 고리 펩타이드들은 면역 기능과 연관된 바 해로운 사이토카인 활성을 제한하는 데 사용될 수 있고, 암과 같은 질환들, 또는 쉐다제 기능 장애가 관여하는 다른 질환들 및/또는 병태들을 위한 보다 더 넓은 치료적 기회들을 열어준다. 내인성 쉐다제 저해 활성을 소유한 바, θ-디펜신들의 본 관점은 영장류 진화 과정 동안 θ-디펜신 발현의 소실로 인한, 인간 개체들에서 많은 자가면역, 염증성 질환들 및 다른 질환 병태들을 설명할 수 있다. 따라서, θ-디펜신들 및 다양한 θ-디펜신들의 구조로부터 유래된 고리 펩타이드들은 금속단백질분해효소 조절 장해와 연관된 질환 및 병태들로 고생하는 인간 개체들에서 적합한 치료제들로서 사용될 수 있다.
다양한 구현예들에서, 발명적 주제 문제는 고리 펩타이드들을 제공한다. 한 가지 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 디펜신, 그의 유사체 또는 유도체이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 α-디펜신, β-디펜신, θ-디펜신, 그들의 유사체 또는 유도체이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 θ-디펜신, 그의 유사체 또는 유도체이다.
또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 영장류에서 내인성으로 발현된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 레서스 원숭이에서 내인성으로 발현된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 BTD-1, BTD-2, BTD-3, BTD-4, BTD-5, BTD-6, BTD-7, BTD-8, BTD-9 또는 BTD-10이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 인간에서 내인성으로 발현된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 인간 θ-디펜신 슈도유전자 (HTDp)이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 큰 긴팔 원숭이 또는 오랑우탄에서 발현된다.
또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 포유동물로부터 분리된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 영장류로부터 분리된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 인간으로부터 분리된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 포유동물로부터 획득된 생물학적 시료로부터 정제된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 영장류로부터 획득된 생물학적 시료로부터 정제된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 인간으로부터 획득된 생물학적 시료로부터 정제된다.
또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 24개 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 24개 초과의 아미노산들의 길이이다. 상세한 구현예에서, 고리펩타이드는 14개 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 1개의 디설파이드 결합을 형성하는 적어도 2개의 시스테인 잔기들을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 2개의 디설파이드 결합을 형성하는 적어도 4개의 시스테인 잔기들을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 3개의 디설파이드 결합을 형성하는 적어도 6개의 시스테인 잔기들을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 합성 아미노산을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 순 양성 전하를 가진다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 및/또는 서열번호 7과 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85% 이상의 일치도 백분율보다 적게 소유하는 폴리뉴클레오타이드에 의해 인코딩될 수 있다. 당업자라면 기준 서열 및 두 번째 폴리뉴클레오타이드 서열 간의 비교 창을 확립하는 것을 포함하는, 당해 기술분야에서 알려진 방법들에 따라 일치도 백분율의 정도를 확립하도록 일치도 백분율을 확립할 수 있다.
또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 염증을 조정한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 사이토카인 및/또는 케모카인의 활성을 조정한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 TNF-α의 활성을 조정한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 디스인테그린 및 금속단백질분해효소 패밀리의 구성원으로의 경쟁적인 저해를 통하여 TNF-α의 활성을 조정한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 디스인테그린 및 금속단백질분해효소 패밀리의 구성원은 쉐다제이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 쉐다제는 TACE이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 쉐다제는 ADAM10이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 단백질분해 효소 활성을 조정할 수 있다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 항-미생물 살상을 할 수 있다.
다양한 구현예들에서, 발명적 주제 문제는 고리 펩타이드의 정량을 제공하는 단계, 염증성 질환 및/또는 병태를 위한 치료를 필요로 하는 개체에게 고리 펩타이드의 정량을 투여하는 단계를 포함하는, 고리 펩타이드를 사용하여 염증성 질환 및/또는 병태를 치료하는 방법들을 제공하고, 고리 펩타이드는 염증을 조정할 수 있고 이에 의해 개체를 치료한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 θ-디펜신, 그의 유사체 또는 유도체이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 RTD-l, RTD-2, RTD-3, RTD-4, RTD-5, RTD-6, BTD-l, BTD-2 BTD-3, BTD-4, BTD-5, BTD-6, BTD-7, BTD-8, BTD-9 또는 BTD-10이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 24개 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 24개 초과의 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리펩타이드는 14개 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 1개의 디설파이드 결합을 형성하는 적어도 2개의 시스테인 잔기들을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 2개 이상의 디설파이드 결합들을 형성하는 적어도 4개의 시스테인 잔기들을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 투여되는 고리 펩타이드의 정량은 치료적 유효량의 고리 펩타이드이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 개체는 포유동물이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 개체는 인간이다.
다양한 구현예들에서, 염증성 질환 및/또는 병태는 급성 또는 만성 염증 또는 자가면역 질환이다. 다양한 구현예들에서, 염증성 질환 및/또는 병태는 사이토카인 또는 케모카인의 활성과 관련된다. 다양한 구현예들에서, 염증성 질환 및/또는 병태는 TNF-α의 활성과 관련된다. 다양한 구현예들에서, 염증성 질환 및/또는 병태는 류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis), 강직 척추염 (ankylosing spondylitis), 염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease), 궤양성 장염 (ulcerative colitis), 소장결장염 (autistic enterocolitis), 건선증 (psoriasis), 건선 관절염 (psoriatic arthritis), 크론병 (Crohn's disease), 베체트병 (Behcet's disease), 루푸스 (lupus), 화농 땀샘염 (hidradenitis suppurativa), 난치성 천식 (refractory asthma), 장염 (colitis), 피부염 (dermatitis), 게실염 (diverticulkis), 간염 (hepatitis), 신장염 (nephritis), 파킨슨병 (Parkinson's disease), 알츠하이머병 (Alzheimer's disease), 헌팅턴병 (Hunting's disease), 선천성 심장병 (congestive heart disease), 죽상동맥경화증 (atherosclerosis), 포도막염 (uveitis), 및 알레르기 (allergy)이다.
다양한 구현예들에서, 발명적 주제 문제는 또한 고리 펩타이드의 정량을 제공하는 단계, 염증성 질환 및/또는 병태를 위한 치료를 받는 개체에게 고리 펩타이드의 정량을 투여하는 단계를 포함하는, 고리 펩타이드를 사용하여 염증성 질환 및/또는 병태를 위한 치료의 효능을 증진하는 방법들을 제공하고, 고리 펩타이드는 염증성 질환 및/또는 병태를 위한 치료의 효능을 증진할 수 있고 이에 의해 치료의 효능을 증진한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 염증성 질환 및/또는 병태를 치료할 수 있는 조성물과 동시에 투여된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 염증성 질환 및/또는 병태를 치료할 수 있는 조성물과 연속적으로, 이의 투여 이전 또는 이후에 투여된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 개체는 포유동물이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 개체는 인간이다.
다양한 구현예들에서, 발명적 주제 문제는 또한 고리 펩타이드를 사용하여 개체에서 질환 및/또는 병태를 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 질환 및/또는 병태는 암 또는 신경퇴화성 질환이다. 다양한 구현예들에서, 발명적 주제 문제는 또한 고리 펩타이드를 사용하여 개체에서 질환 및/또는 병태를 위한 치료의 효능을 증진하는 방법을 제공한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 질환 및/또는 병태를 치료할 수 있는 조성물과 동시에 투여된다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 질환 및/또는 병태를 치료할 수 있는 조성물과 연속적으로, 이의 투여 이전 또는 이후에 투여된다. 바람직한 구현예들에서, 개체는 포유동물이고, 특히 바람직한 구현예들에서, 개체는 인간이다.
다양한 구현예들에서, 발명적 주제 문제는 또한 약제학적 조성물을 제공한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 약제학적 조성물은 고리 펩타이드 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 θ-디펜신, 그의 유사체 또는 유도체이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 RTD-l, RTD-2, RTD-3, RTD-4, RTD-5, RTD-6, BTD-l, BTD-2 BTD-3, BTD-4, BTD-5, BTD-6, BTD-7, BTD-8, BTD-9 또는 BTD-10이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 24개 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리펩타이드는 14개 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 24개 초과의 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 1개의 디설파이드 결합을 형성하는 적어도 2개의 시스테인 잔기들을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 2개 이상의 디설파이드 결합들을 형성하는 적어도 4개의 시스테인 잔기들을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 약제학적 조성물에서 고리 펩타이드는 치료적 유효량의 고리 펩타이드를 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 약제학적 조성물은 하나 이상의 고리 펩타이드들 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함한다.
다양한 구현예들에서, 발명적 주제 문제는 또한 고리 펩타이드를 제조하는 방법을 제공한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 본 제조 방법은 고리 펩타이드를 인코딩하는 하나 이상의 폴리뉴클레오타이드들을 제공하는 단계, 하나 이상의 폴리뉴클레오타이드들을 숙주세포에서 발현시키는 단계, 및 숙주세포로부터 고리 펩타이드를 추출하는 단계를 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 본 제조 방법은 하나 이상의 폴리뉴클레오타이드들을 숙주세포에서 발현시키는 단계, 및 숙주세포로부터 고리 펩타이드를 추출하는 단계를 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 하나 이상의 폴리뉴클레오타이드들은 서열번호 1, 서열번호 2, 및/또는 서열번호 3을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 하나 이상의 폴리뉴클레오타이드들은 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 및/또는 서열번호 7을 포함한다.
또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 θ-디펜신, 그의 유사체 또는 유도체이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, θ-디펜신은 RTD-l, RTD-2, RTD-3, RTD-4, RTD-5, RTD-6, BTD-l, BTD-2 BTD-3, BTD-4, BTD-5, BTD-6, BTD-7, BTD-8, BTD-9 또는 BTD-10이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 24개 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리펩타이드는 14개 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 24개 초과의 아미노산들의 길이이다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 1개의 디설파이드 결합을 형성하는 적어도 2개의 시스테인 잔기들을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고리 펩타이드는 2개 이상의 디설파이드 결합들을 형성하는 적어도 4개의 시스테인 잔기들을 포함한다. 또 다른 구현예들에서, 제조 방법은 액상 합성 또는 고체상 합성을 사용하는 펩타이드 합성의 단계들을 포함한다. 또 다른 부류의 구현예들에서, 고체상 합성은 Fmoc 또는 BOC 합성이다.
본 명세서에서 고려된 조성물들의 제조는, 예를 들면 발현 벡터들을 사용하는 것을 포함하여, 임의의 적합한 방식으로 달성될 수 있다. 당업자라면 적합한 발현 벡터를 선택할 수 있고, 엄청나게 많은 수의 선택들이 존재하는 점을 인식할 것이다. 세포주들의 많은 선택이, 예를 들면 세균들, 효모, 곤충 세포들, 및 식물들을 포함하여, 숙주세포에 적합하다.
약물 조성물들, 용량들, 용량 형태들 및 투여의 경로들
발명적 주제 문제에 따른 조성물들은 경구적으로, 비경구적으로, 흡입에 의해, 국소적으로, 직장으로, 비강으로, 또는 이식된 저장조를 통한 것으로 포함하는 다양한 경로들을 사용하여 투여될 수 있고, 여기에서 "비경구적"은 본 명세서에서 사용되는 바 피하로, 정맥내로, 근육내로, 동맥내로, 활액내로, 경막내로, 간내로, 상처내로, 및 두개골내로 투여 (전형적으로 주사 또는 주입)를 포함한다. 바람직하게, 조성물들은 경구로, 피하로, 복강내로, 또는 정맥내로 투여된다.
예를 들면, 고려된 화합물들의 무균의 주사가능한 형태들은 수용성 용액들 또는 지용성 현탁액들일 수 있다. 이들 현탁액들은 적합한 분산 또는 습윤 제제들 및 현탁 제제들을 사용하여 당해 기술분야에 알려진 기법들에 따라 제형화될 수 있다. 무균의 주사가능한 조제물은 비-독성의 비경구적으로 허용가능한 희석제 또는 용매에 넣은 무균의 주사가능한 용액 또는 현탁액으로서, 예를 들면 1,3-부탄디올에 넣은 용액으로서 역시 제조될 수 있다. 다른 허용가능한 운반체들 및 용매들 중에서, 특히 고려된 액체들은 물, 링거 용액, 및 등장성 염화나트륨 용액을 포함한다. 또한, 무균의 고정된 오일들은 공-용매 또는 현탁 배지 (예로, 천연 또는 합성 모노- 또는 디글리세라이드들)로서 사용될 수 있다. 지방산들도 역시 사용될 수 있고, 적합한 지방산들은 올레산 및 그의 글리세라이드 유도체들, 올리브 오일, 캐스터 오일, 특히 그들의 폴리옥시에틸화된 버전들로 포함한다. 이러한 오일 용액들 또는 현탁액들은 또한 긴-사슬 알코올 희석제 또는 분산제를 포함한다.
또 다른 예에서, 고려된 화합물들은 캡슐들, 정제들, 수용성 현탁액들, 또는 용액들을 포함하는 임의의 경구적으로 허용가능한 용량 형태로 경구로 투여될 수 있다. 경구적 사용을 위한 정제들의 경우에서, 모든 약제학적으로 허용가능한 담체들 (예로, 락토스, 옥수수 전분 등)은 적합한 것으로 판단된다. 유사하게, 다양한 광택 제제들이 첨가될 수 있다 (예로, 마그네슘 스테아레이트). 캡슐 형태로의 경구적 투여를 위해, 유용한 희석제들로는 락토스 및 건조된 옥수수 전분을 포함한다. 수용성 현탁액들이 경구적 사용에 요구될 때, 활성 성분은 에멀전화 및 현탁 제제들과 조합된다. 원하는 경우, 소정의 감미, 향미 또는 채색 제제들도 역시 첨가될 수 있다.
발명적 주제 문제의 약제학적 조성물들은, 특히 치료의 표적이 눈, 피부, 하부 창자관, 또는 수술적 개입 동안 노출된 영역들의 질환들을 포함하는 국소적 적용에 의해 바로 접근가능한 영역들 또는 기관들을 포함할 때, 국소적으로 투여될 수 있는 것으로 고려된다. 당해 기술분야에서 알려진 수많은 국소적 제형물들이 존재하고, 이러한 제형물들의 모두가 본 명세서에서의 용도에 적합한 것으로 고려된다.
국소적 적용들을 위해, 고려된 조성물들은 하나 이상의 담체들로 현탁되거나 용해된 활성 성분을 포함하는 적합한 연고로 제형화될 수 있다. 발명적 주제 문제의 화합물들의 국소적 투여를 위한 담체들은 미네랄 오일, 액체 바셀린, 흰색 바셀린, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 에멀전화 왁스 및 물을 포함한다. 대안적으로, 약제학적 조성물들은 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체들로 현탁되거나 용해된 활성 성분들을 포함하는 적합한 로션 또는 크림으로 제형화될 수 있다. 적합한 담체들로는 미네랄 오일, 소비탄 모노스테아레이트, 폴리솔베이트 60, 세틸 에스테르들 옥스, 세테아릴 알코올, 2-옥틸도데칸올, 벤질 알코올 및 물을 포함한다.
발명적 주제 문제에 따른 약제학적 조성물들은 코 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 이러한 조성물들은 약제학적 제형물의 기술분야에서 잘-알려진 기법들에 따라 제조되고 식염수에 넣은 용액들로서, 벤질 알코올 또는 기타 적합한 보존제들, 생물유용성을 증진하는 흡수 촉진제들, 불화탄소들, 및/또는 다른 통상적인 용해화 또는 분산 제제들을 사용하여 제조될 수 있다.
본 조성물에서 고려된 화합물들의 양에 관하여, 특정한 정량은 전형적으로 특이적 제형물, 활성 성분, 및 원하는 목적에 의존할 것으로 인식되어야 한다. 따라서, 고려된 화합물들의 양은 유의하게 변화할 것으로 인식되어야 한다. 그러나, 화합물들은 일반적으로 치료적 효과를 전달하고/하거나 시험관내 및/또는 생체내에서 관찰되도록 최소량으로 존재하는 것이 바람직하다.
따라서, 가장 바람직한 액체 제형물들에서, 고려된 화합물들은 약 20 mg/mL 내지 약 30 mg/mL 사이의 범위의 양으로, 더욱 전형적으로는 약 24 mg/mL 내지 약 30 mg/mL 사이의 범위의 양으로, 가장은 약 25 mg/mL로 존재할 것이다. 체형물이 고체 또는 젤인 곳에서, 고려된 화합물들은 약 1 mg/g 내지 약 100 mg/g 사이의 범위의 양으로 존재할 것이다. 용량 단위에 관하여, 고려된 화합물들은 원하는 치료적 효과를 달성하는 데 효과적인 용량으로 또는 시험관내 및/또는 생체내 관찰을 제공하는 데 효과적인 용량으로 투여된다.
인간 및 비-인간 포유동물들 둘 다를 위해, 고려된 화합물들의 적합한 투여량은 약 1 내지 10 mg/kg의 범위이어야 한다.
염증성 질환의 치료 및/또는 예방에서, 발명적 주제 문제에 따른 화합물들 또는 조성물들은 일반적으로 약제학적으로 허용가능한 방식으로 제형화되는 것이 바람직하다. 적합한 제형물들은 바람직하게 눈의 전방 및/또는 후방 내로 주사를 위한, 또는 반고리관들, 와우, 및/또는 관자뼈의 골미로 내로 주사를 위한 액체 조제물들을 포함할 것이다. 대안적으로 또는 추가적으로, 이식가능한 담체들은 (예로, 생분해가능성/용해성) 단체가 화합물 또는 조성물의 치료적 유효량들을 포함하고, 담체가 조절되고 선결정된 방식으로 화합물 또는 조성물을 방출할 수 있도록 제형화될 수 있다. 다른 적합한 담체들보다도, 방출은 시간-의존적이고/이거나 하나 이상의 파장들의 광 조사에 의해 개시될 수 있다.
발명적 주제 문제에 따른 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께 고려된 화합물들의 적어도 하나를 (예로, RTD-1-27, RTD-1-28 및 RTD-1-29의 적어도 하나) 포함한다. 특정한 용도에 의존하여, 제형화, 경로, 및/또는 투여 스케줄은 상당하게 변화할 수 있는 것으로 인식되어야 하고, 일반적으로 특이적 제형화, 경로 및/또는 투여는 발명적 주제 문제에 제한되지 않는 것으로 고려된다.
그러나 약제학적 조성물의 투여된 용량은 상당하게 변화할 것이고, 특정한 용량은 적어도 부분적으로는 (a) 원하는 치료적 반응을 달성하는 데 효과적인 활성 성분의 양, (b) 고려된 화합물들의 제형화, (c) 투여의 경로, (d) 특정한 화합물의 약물역학적 및 약물동력학적 특성, 그리고 (e) 연령, 성별, 체중, 일반적인 건강, 및 치료될 환자의 이전의 진료기록을 포함하는 다른 요인들에 의존할 것으로 이해되어야 한다. 당업자라면 요구된 약제학적 조성물의 유효량을 바로 결정하고 처방할 수 있다. 예를 들면, 의사는 환자들 원하는 치료적 효과를 위해 정상적으로 요구되는 것보다 더 낮은 수준에서 투여하기 시작하고, 다음으로 원하는 효과가 달성될 때까지 용량을 증가시킬 수 있다.
일반적으로 발명적 주제 문제에 따른 화합물들은 비경구적 사용을 위한 제형물로 제조될 수 있는 것으로 고려되고, 특히 비경구적 제형물들은 주사를 위한 액체 제형물들일 것으로 고려된다. 따라서, 적당한 제형물들은 일반적으로 약제학적으로 허용가능한 용매 (예로, 무균의 등장성 수용성 또는 비-수용성 용액)를 포함할 것이고, 분산액, 현탁액, 또는 에멀전으로서 제조될 수 있다. 대안적으로, 비경구적 제형물들은 사용 전 액체 산물로 재구성될 수 있는 고려된 화합물들 및 기타 성분들을 포함하는 키트로서도 역시 제공될 수 있다. 보다 더 고려된 관점들에서, 발명적 주제 문제에 따른 화합물들은 숙주세포에서 화합물의 발현을 허용하는 방식으로 재조합 핵산으로서도 역시 투여될 수 있다. 예를 들면, 재조합 핵산들은 아데노바이러스성 벡터들, 액체들 또는 리포좀들을 사용한 형질전환법, 전기천공법, 또는 당해 기술분야에서 잘 알려진 다른 방식들을 통해 표적 조직으로 제공될 수 있다.
약제학적 조성물들에서 채용될 수 있는 적합한 수용성 및 비-수용성 담체들의 예들로는 물, 에탄올, 폴리올들 (예로, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 등), 및 그들의 적합한 혼합물들, 식물성 오일들, 및 에틸 올레이트와 같은 주사가능한 유기 에스테르들을 포함한다. 적절한 유동성은, 예를 들면 레시틴과 같은 코팅 물질들의 사용에 의해, 분산액들의 경우에 요구된 입자 크기의 유지에 의해, 그리고 표면활성제들의 사용에 의해 유지될 수 있다. 가장 전형적으로는, 적합한 유동액들은 무균이고 활성 성분 및 주사 부위 또는 다른 용도의 안정도에 적합한 pH를 유지하도록 완충된다.
고려된 화합물들은 약제학적으로 허용가능한 염(들)로서 제조될 수 있고, 이는 특히 고려된 화합물들에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 기들의 염들을 포함한다. 예를 들면, 자연에서 염기성인 고려된 화합물들은 다양한 무기 및 유기산들과 광범위하게 다양한 염들을 형성할 수 있다. 적합한 산들은 염소, 브롬, 요오드, 나이트레이트, 설페이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 아세테이트, 락테이트, 살리실레이트, 시트레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 판토테네이트, 바이타르트레이트, 아스코베이트, 숙시네이트, 말레이트, 젠티시네이트, 퓨마레이트, 글루코네이트, 글루카로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄술포네이트, 에탄술포네이트, 벤젠술포네이트, p-톨루엔술포네이트, 및 파모에이트 [1,1'-메틸렌-비스-(2-하이드록시-3-나프토에이트)] 음이온들을 포함하는, 약학적으로 허용가능한 음이온들을 제공할 것이다. 유사하게, 자연에서 산성인 화합물들은 다양한 약학적으로 허용가능한 양이온들과 염기성 염들을 형성할 수 있고, 특히 적합한 양이온들은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 이온들 (예로, 소듐 및 포타슘 양이온들)을 포함한다.
발명적 주제 문제에 따른 화합물들은 프로드러그들로서도 역시 제조될 수 있는 것으로 보다 더 특히 고려되고, 모든 기지의 방식들 및 프로그러그들의 유형들이 이러한 프로드러그가 표적 기관 또는 표적 세포에서 약물 (또는 프로드러그의 대사물)의 농도를 증가시키는 한, 본 명세서에서의 용도에 적합한 것으로 고려된다.
예를 들면, 화합물들이 자유 아미노, 아미도, 하이드록시, 티오, 또는 카복실 기를 가지는 곳에서, 이러한 기들은 약물을 프로드러그로 전환하는 분체와 공유적으로 및 방출가능하게 결합하도록 채용될 수 있다. 따라서, 프로드러그들로는 상세하게 고려된 화합물들이 또 다른 절단가능한 분체와 에스테르, 아마이드, 또는 디설파이드 결합을 형성하는 것들을 포함한다. 이러한 분체들은 약물의 기관 또는 세포-특이적 전달에서 도울 수 있다. 예를 들면, 카복실기는 아마이드 또는 알킬 에스테르를 형성하도록 유도체화될 수 있고, 이로는 에테르, 아민-, 및/또는 카복실산 기를 포함할 수 있다. 자유 하이드록시 기들은 D. Fleisher, R. Bong, B. H. Stewart, Advanced Drug Delivery 40 Reviews (1996) 19, 115에서 개략된 바와 같이, 헤미숙시네이트들, 포스페이트 에스테르들, 디메틸아미노아세테이트들, 및 포스포릴옥시메틸옥시카보닐들을 사용하여 유도체화될 수 있다. 하이드록시 및 아미노 기들의 카바메이트 프로드러그들도 하이드록시 기들의 카보메이트 프로드러그들 및 설페이트 에스테르들과 같이, 역시 포함된다. (아실옥시)메틸 및 (아실옥시)에틸에테르들로서 하이드록시 기들의 유도체화로서, 아실 기가 알킬 에스테르 (선택적으로 치환된)일 수 있거나, 아실 기가 아미노산 에스테르인, 것들도 역시 고려된다 (본 유형의 프로드러그들은 R. P. Robinson et al ., J. Medicinal Chemistry (19961) 39:p.10에 기술된다).
또한, 고려된 화합물들은 세포 또는 세포외 구획에서 대사될 수 있고, 이러한 대사물들은 동일하거나 다른 약학적 효과를 나타낼 수 있는 것으로도 역시 인식되어야 한다. 예를 들면, 고려된 화합물들은 인산화되어 부모 화합물보다 더욱 활성을 가질 수 있다. 한편으로, 환원 또는 당화는 고려된 화합물들의 생물유용성에 영향을 줄 수 있다. 결론적으로, 고려된 화합물들은 상기에 기술된 것들을 포함할 뿐만 아니라 그들의 대사물들도 포함할 것이다.
기타 사항들
상기에 기술된 다양한 방법들 및 기법들은 발명적 주제 문제와 관련된 방법들을 수행하도록 많은 방식들을 제공한다. 물론, 기술된 목적들 또는 장점들 모두가 본 명세서에서 기술된 임의의 특정한 구현예에 따라 반드시 달성될 수 있는 것은 아니라는 점을 이해해야 한다. 따라서 예를 들면, 당업자들이라면 방법들이 본 명세서에서 제시된 하나의 장점 또는 장점들의 그룹을 달성하거나 최적화하는 방식으로 본 명세서에서 배우거나 제안될 수 있는 다른 목적들 또는 장점들을 반드시 달성하지 않고도 수행될 수 있는 것으로 인식할 것이다. 다양한 유리한 및 불리한 대안들이 본 명세서에서 언급된다. 일정의 바람직한 구현예들은 특정하게 하나, 또 다른, 또는 여러 유리한 특징들을 포함하는 한편, 다른 것들은 특정하게 하나, 또 다른, 또는 여러 불리한 특징들을 배제하는 한편, 보다 다른 것들은 특정하게 하나, 또 다른, 또는 여러 유리한 특징들의 포함에 의해 본 불리한 특징을 경감하는 것으로 이해되어야 한다.
또한, 당업자라면 서로 다른 구현예들로부터 나온 다양한 특징의 적용성을 인식할 것이다. 유사하게, 상기에서 논의된 다양한 요소들, 특징들 및 단계들, 뿐만 아니라 이러한 요소, 특징 또는 단계 각각의 다른 기지의 동등물들이 본 명세서에서 기술된 원리들에 따라 방법들을 수행하도록 당해 기술분야에서 당업자에 의해 혼합되고 매칭될 수 있다. 다양한 요소들, 특징들, 및 단계들 중에서도 일정이 특정하게 포함되고 다른 것들은 다양한 구현예들에서 특정하게 배제될 것이다.
발명적 주제 문제가 소정의 구현예들 및 실시예들의 맥락에서 개시되었더라도, 당업자들에 의해 발명적 주제 문제는 상세하게 개시된 구현예들을 넘어 다른 대안의 구현예들 및/또는 용도들 그리고 그들의 변형들 및 동등물들로 확장되는 것으로 이해될 것이다.
많은 변화들 및 대안의 요소들이 발명적 주제 문제의 구현예들에서 개시되어 왔다. 더욱 심화 변화들 및 대안의 요소들이 당업자에게 자명하게 될 것이다. 이들 변화들 중에서도, 제한되지는 않지만 θ-디펜신을 포함하는 고리 펩타이드들의 출처들, θ-디펜신들, 그들의 유사체들 및 유도체들을 제조하거나, 분리하거나, 정제하는 방법들, θ-디펜신들, 그들의 유사체들 및 유도체들을 사용하여 다양한 질환 및/또는 병태들을 치료하는 방법들, 기법들 및 조성물 그리고 본 명세서에서 사용된 용액들의 용도 및 본 명세서에서의 제시들을 통하여 제작된 산물들의 특정한 용도가 있다. 다양한 구현예들은 임의의 이들 변화들 또는 요소들을 특정하게 포함하거나 배제할 수 있다.
일정 구현예들에서, 소정의 구현예들을 기술하고 청구하는 데 사용된 성분들의 정량들을 표현하는 수들, 농도, 반응 조건과 같은 성질들 등은 일정 경우들에서 용어 "약 (about)"에 의해 변형되는 것으로서 이해될 것이다. 이에 따라, 일정 구현예들에서, 기록된 상세한 설명 및 첨부된 청구항들에서 개시된 수적 매개변수들 특정한 구현예에 의해 획득되도록 추구되는 원하는 성질들에 의존하여 변화할 수 있는 근사치들이다. 일정 구현예들에서, 수적 매개변수들은 보고된 유의한 자리수들의 수에 비추어 그리고 보통의 반올림 기법들을 적용하여 참작되어야 한다. 일정 구현예들의 광범위한 범위를 설정하는 수적인 범위들 및 매개변수들이 근사치들일지라도, 특정한 예들에서 개시된 수적인 수치들은 실행가능한 한 정확하게 보고된다. 일정 구현예들에서 표현된 수적인 수치들은 필수적으로 그들의 개별적 시험 측정들에서 관찰된 표준 편차로부터 나온 소정의 오류들을 포함할 수 있다.
본 명세서의 상세한 설명에서 사용된 바와 같이 그리고 이어지는 청구항들 전체를 통하여, "하나 (a)", "하나 (an)" 및 "그 (the)"의 의미는 달리 문맥상 분명하게 진술하지 않은 경우라면 복수의 참조를 포함한다. 또한, 본 명세서의 상세한 설명에서 사용된 바와 같이, "에서 (in)"의 의미는 달리 문맥상 분명하게 진술하지 않은 경우라면 "에서 (in)" 및 "상에서 (on)"를 포함한다.
본 명세서에서 수치들의 범위들의 재인용은 단지 범위 내에 속하는 각각의 개별 수치를 개별적으로 언급하는 빠른 방법으로서 제공하려고 한다. 달리 본 명세서에서 표시되지 않은 경우라면, 각각의 개별 수치는 이것이 개별적으로 본 명세서에서 재인용된 것과 같이 명세서 내에 통합된다. 본 명세서에서 기술된 모든 방법들은 달리 본 명세서에서 표시되지 않거나 달리 문맥상 분명하게 반대하지 않는 경우라면, 임의의 적합한 순서로 수행될 수 있다. 소정의 구현예들에 관하여 제공된 어떤 및 모든 예들, 또는 대표적인 언어 (예로, "와 같은 (such as)")의 사용은 단지 발명적 주제 문제를 더 잘 조명하려는 것이고, 청구된 발명들의 범위 상에는 제한이 되지 않는다. 명세서에서의 언어는 청구된 발명들의 실행에 필수적인 임의의 청구되지 않은 요소를 가리키는 것으로서 참작되어서는 안 된다.
본 명세서에서 개시된 발명적 주제 문제의 대안의 요소들 또는 구현예들의 그룹화는 제한들로서 참작되어서는 안 된다. 각각의 그룹 구성원은 개별적으로 또는 그룹의 다른 구성원들 또는 본 명세서에서 확인된 다른 요소들과 임의의 조합으로 언급되거나 청구될 수 있다. 그룹의 하나 이상의 구성원들은 편의성 및/또는 특허성의 이유로 그룹에 포함되거나, 이로부터 삭제될 수 있다. 임의의 이러한 포함 또는 삭제가 일어날 때, 본 명세서는 변형된 것으로서 그룹을 포함하여 첨부된 청구항들에서 사용된 모든 마쿠시 그룹들의 기록된 상세한 설명을 실현하는 것으로 여기에서 판단된다.
본 발명적 주제 문제의 바람직한 구현예들은, 본 발명자들에게 알려진 청구된 발명들을 수행하는 최고의 방식을 포함하여 본 명세서에서 기술된다. 이들 바람직한 구현예들에 관한 변화들이 전술한 상세한 설명을 읽을 때 당업자들에게 자명하게 될 것이다. 당업자들은 적절한 경우 이러한 변화들을 채용할 수 있고, 청구된 발명들은 본 명세서에서 상세하게 기술된 것보다 달리 시행될 수 있다. 이에 따라, 청구된 발명은 적용가능한 법에 의해 허용되는 한 재인용된 주제 문제의 모든 변형들 및 동등물들을 포함하는 것으로서 해석된다. 게다가, 모든 가능한 그들의 변형으로 상기-기술된 요소들의 임의의 조합은 달리 본 명세서에서 표시되지 않거나 달리 문맥상 분명하게 반대하지 않는 경우라면 해당하는 청구된 발명들에 의해 포괄된다.
또한, 특허들 및 인쇄된 출판물들에 대한 수많은 참고문헌들이 본 명세서 전체를 통하여 기재되었다. 상기 인용된 참고문헌들 및 인쇄된 출판물들의 각각은 본 명세서에서 개별적으로 그들의 전부가 참고문헌으로 통합된다.
본 명세서에서 기재된 구현예들은 발명적 주제 문제의 원리들을 설명하는 것으로 이해된다. 따라서, 예로서 그러나 제한되지 않고도, 발명적 주제 문제의 대안의 형태들이 본 명세서에서 제시들에 따라 사용될 수 있다. 이에 따라, 발명적 문제의 구현예들은 정확하게 관찰되고 기술된 바에 제한되지 않는다.
도 1은 θ-디펜신 생합성 및 구조를 나타낸 것이다. 치환기 노나펩타이드들 (색상 기호 표시됨)은 성숙한 펩타이드 RTD-1을 생산하도록 절단되고 스프라이싱된다 ((21)로부터 나옴).
도 2는 전 (prepro)-θ-디펜신들의 정렬을 나타낸 것이다. A. cDNA로부터 예측된 BTD-a 내지 -d 아미노산 서열들은 RTD1a 내지 c 및 인간 θ-디펜신 슈도유전자 (HTDp)과 수작업으로 정렬된다. 정렬된 서열들에서 점들은 BRD-a에서와 일치하는 아미노산들을 표시하고, 별표 기호는 종결 코돈의 위치를 표시하고, # 기호는 해독을 미성숙하게 종결하는 종결 코돈을 표시한다. B. 10개의 고리 구조들은 cDNA 서열들로부터 유래된 BTD 펩타이드들을 유추하였다.
도 3은 RTD-1가 마우스 다중미생물 패혈증에서 치사도를 감소시키는 점을 나타낸 것이다. 어른 Balb/c 마우스는 T = 0에서 맹장 결찰 및 천자 (CLP)를 수여받았다. 마우스는 CLP 이후 4시간째 (●, n = 10) 정상 식염수 또는 CLP 수술 이후 4시간째 (▲, n = 11) 또는 24시간째 (■, n = 5) 5 mg/kg의 RTD-1을 포함하는 식염수의 단일한 150 μL 주사를 수여받았다.
도 4는 θ-디펜신들의 항-TNF 활성들을 나타낸 것이다. A. 치환기 노나펩타이드들의 유도체화를 보여주는 (23) 색상 기호로 표시된 RTD-1 내지 6의 공유적 구조들 (23). B. 인간 전혈 (1 : 10)은 0 내지 10 μg/mL의 θ-디펜신 RTD-1의 존재 시 100 CFU/mL의 살아있는 대장균과 4시간 동안 배양되었고 두 가지의 인간 α-디펜신들 (HNP-2 및 HNP-4) 및 TNF-α가 엘라이자에 의해 정량되었다. C. RTD들 1 내지 5는 패널 B에서와 같이 인간 전혈로부터 TNF-α 방출에 미치는 효과에 대해 테스트되었고; TNF-α는 엘라이자에 의해 정량되었다. PMN들에서 단지 미량의 정량들로 존재하는 RTD-6는 테스트되지 않았다.
도 5는 θ-디펜신들이 다수의 TLR 작동제들에 의해 유도되는 전-염증성 사이토카인들/케모카인들을 저해하는 점을 나타낸 것이다. RPMI 1640 + 5% 인간 혈장에 넣은 인간 말초혈액 세포들 (5 ×105개 세포들/mL)은 10 μg/mL의 RTD-1 단독 (무-작동제 대조군) 또는 펩타이드 용매 (0.01% HOAc) 또는 동시에 TLR 작동제들과 함께 가만히 교반하면서 5% CO2에서 37℃로 4시간 동안 배양되었다. 상청액들이 원심분리에 의해 수확되었고 사이토카인/케모카인 수준들은 밀리플렉스 사이토카인/케모카인 패널을 사용한 루미넥스 xMAP 분석법에 의해 정량되었다. 작동제들: TLR2 - 1 × 108개의 열 사멸된 L. 모노사이토게네스; TLR4 - 3.3 ng/mL의 대장균 K12 LPS; TLR5 - 30 ng/mL의 S. 티피무리움 플라젤린; TLR8 - 0.9 μg/mL의 ssRNA40.
도 6은 θ-디펜신들이 TACE의 경쟁적 저해제들인 점을 나타낸 것이다. A. 재조합 TACE (rTACE)는 표시된 농도들의 펩타이드들 + TACE - 특이적 기질 (Mca-PLAQAV-Dpa-RSSSR-NH2)와 배양되었고 효소적 활성은 형광측정법으로 측정되었다. B. RTD들 1 내지 5는 패널 A에서 TACE 저해를 위해 분석되었다. C. 0, 50, 100, 및 150 ng/mL의 펩타이드 농도들에서 rTACE의 RTD-1 저해의 라인위버-버크 (Lineweaver-Burke) 분석. D. RTD-1 및 "고유의" 비고리 유사체 (S-7) 구조들의 비교. E. RTD-1 및 RTD-1-S7 유사체에 의한 rTACE의 상대적 저해. F. 휴지 또는 LPS-감작된 (2시간) THP-1 세포들 상의 RTD-1에 의한 TACE의 저해 (1).
도 7은 θ-디펜신들이 ADAM10의 강력한 저해제들인 점을 나타낸 것이다. 재조합 ADAM 10 및 기질 (Mca-PLAQAV-Dpa-RSSSR-NH2; 0,05μg/mL)이 RTD 1 내지 3과 37℃에서 60분 동안 배양되었고 효소적 활성은 형광측정법으로 측정되었다.
도 8은 미니-θ-디펜신들의 생체내 효능 그리고 항-TNFα 및 TACE 차단 활성들을 나타낸 것이다. A. 미니-θ-디펜신들의 공유적 구조들. B. CLP 패혈증에서 미니-θ-디펜신들의 효능. CLP 수술은 BALB/c 마우스 상의 T = 0에서 수행되었다. 수술 이후 4시간째, 마우스들은 정맥내 PBS (샴 대조군) 또는 PBS에 넣은 5 mg/mL의 표시된 미니-θ-디펜신으로 처리되었다. 처리의 효능은 15일까지의 생존으로서 감시되었다. C. 미니-θ-디펜신들은 인간 전혈로부터 TNFα 방출에 미치는 효과들에 대해 평가되었다. EDTA-항응고된 전혈은 RPMI 1640으로 1 : 10 희석되었고 0 내지 10 μg/mL의 RTD-1 (천연의 θ-디펜신) 또는 표시된 3가지 미니-θ-디펜신들과 함께 살아있는 대장균 세포들과 4시간 동안 배양되었다. D. TACE 활성에 미치는 RTD-1 및 3가지 미니-θ-디펜신들의 효과가 도 5에서 도시된 바와 같이 결정되었다.
도 9는 래트 프리스탄-유도성 관절염 (PIA)에서 RTD-1의 효과를 나타낸 것이다. PIA가 텍스트로 기술된 바와 같이 DA에서 유도되었고 무작위화되어 매일 식염수 (N = 10) 또는 5 mg/kg RTD-1 (N = 11)의 정맥내 주사들을 수여받았다. 총 병리학이 평가되었고 점수 매겨졌다 (12). 각각의 기호는 개별 동물의 총 병리학 점수를 나타낸다. 모든 경우들에서, RTD-1 처리는 정상적 보행의 회복이 동반된 관절 질환의 해소를 유도하였다.
실시예들
실시예 1 - 다표현형 θ- 디펜신들의 독특한 성질들 및 항-염증성 성질들.
θ-디펜신들은 그들 자신의 흡수를 매개하는 세포 외투에서 작은 공극들을 생성하여 대장균 세포들을 죽인다 (24). 본 연구에서, 본 발명자들은 많은 α- 및 β-디펜신들과는 달리, θ-디펜신들은 숙주 세포들에 대해 비-독성이고 (24) 마우스들에게 다양한 경로들에 의해 투여될 수 있는 점의 (29) 탁월한 발견을 이루었다. 본 관점에서, 마우스들은 세 가지 서로 다른 θ-디펜신들의 적어도 80 mg/kg 용량들의 정맥내 투여에 바로 내성을 가진다. 본 발명자들은 RTD-1도 역시 2마리의 어른 침팬지들에게 증가하는 정맥내 용량들로 (최대 3 mg/kg) 투여하였다. 임상적 독성은 어느 시점에서도 관찰되지 않았고 모든 임상적 화학 및 혈액적 연구실 수치들은 모든 주사들에 이어서 정상 한계들 이내이었다. 동물은 RTD-1에게로 항체를 전혀 생산하지 않았고, 이에 의해 서로 다른 포유동물 종들에 걸친 독성 및 면역원성의 현저한 결여를 보여준다. 이들 및 다른 데이타를 기초로 하여, RTD-1은 맹장 결찰 및 천자 (CLP)에 의해 유도된 중증 패혈증의 마우스 모델에서 효능에 대해 테스트되었다. 도 1에서 나타난 바와 같이, RTD-1 (5 mg/kg)의 단일 주사는 펩타이드가 CLP 수술 이후 4 또는 24시간째 투여되었을 때 BALB/c 마우스에서 사망을 현저하게 감소시켰다 (4 및 7일에서 p < 0.01). 5일에 생존 동물들은 그들이 희생되었던 15일까지 임상적으로 정상이었다. CLP-패혈증에서 θ-디펜신들의 이러한 치료적 효과는 높게 재생산 가능하였다 (N = 5 실험들). 그러나, θ-디펜신들의 높은 정도의 효능은 다중미생물 패혈증에서 미생물 생태군 (microbiome)이 엄청나게 크기 때문에, 본 모델에서 RTD-1의 효능은 주로 항미생물 효과에 의해 매개되지는 않았던 점을 제시하였다. 오히려, 관찰된 치료적 효과의 효력은 항-염증 기작을 통하여 더 매개되는 것으로 여겨졌다. 본 가능성을 탐구하기 위하여, 본 발명자들은 추가적인 실험들을 시행하였고, 여기에서 CMP 마우스의 RTD-1 처리는 TNF-α, IL-6, 및 MIF를 포함하는 광범위하게 다양한 혈청 전염증성 사이토카인들에서 현저한 감소에 의해 동반되었다.
다른 연구들은 천연의 (10, 15) 또는 설계된 (11) AMP들이 패혈증의 설치류 모델들에서 효과적인 점을 보여주어 왔다. 각각의 경우에, 명백한 보호적 기작은 펩타이드에 의한 세균성 LPS의 결합이었고, 이에 의해 숙주세포 단백질들 (LPS 결합 단백질) 또는 수용체들 (TLR-4, CD14)와의 상호작용을 속인다. 본 관점에서, 분석된 거의 모든 AMP들이 LPS와 결합하고 이를 중화하는 것으로 확인되어 왔고, 이것이 그들의 항-패혈증 활성들을 매개하는 주요한 기작이라는 결론을 지지한다 (19).
그러나, θ-디펜신들은 LPS를 직접 중화하는 데는 덜 효과적이고, 내독소를 중화하는 데 폴리마이신 B (polymyxin B)보다 100배 낮은 활성을 가진다. 오히려, 하기에 논의된 바와 같이, 연구들은 θ-디펜신들이 숙주 세포들과의 상호작용들에 의해 염증을 조정하는 일차적인 수단을 포함하는, 여러 기능적 능력들을 소유하는 점을 보여준다. 본 관찰은 RTD-1이 SARS-코로나바이러스 (SARS-CoV) 폐렴의 마우스 모델에서 효능에 대해 평가되었던 이전의 연구들과 부합한다. 본 연구에서, 본 발명자들은 RTD-1의 비강내 투여가 바이러스로-감염된 마우스의 사망을 예방하는 데 100% 효과적인 점을 발견하였다. 유의하게, RTD-1은 SARS-CoV에 대해 바이러스 살상적이지는 않았다. 그러나, 펩타이드 투여는 호흡기 염증 및 여러 전-염증성 사이토카인들의 발현을 감소시켰고, 이에 의해 치료적 효과가 RTD-1의 항-염증성 성질들에 의해 매개되었던 점을 제시한다. 임의의 특정한 이론에 얽매이지 않더라도, θ-디펜신들이 전-염증성 자극들에 대한 반응들을 조정한다는 본 발명자들의 믿음은 RTD-1이 래트의 프리스탄-유도성 관절염에서 (도 9; 하기에 논의됨) 및 콜라겐-유도성 관절염에서 치료적으로 효과적인 점을 보여주는 심화 실험들에 의해 입증되었다.
실시예 2 - RTD -1 활성은 항미생물 효과가 아닌 숙주세포 상호작용을 통해 매개된다.
여러 계열들의 데이타는 고대 유형의 θ-디펜신, RTD-1은 항미생물 효과를 통하기 보다는 숙주 세포들과 상호작용하여 그의 항-염증 효과들을 나타내는 점을 보여주고 있다 (29). 이들 관찰들은 대장균 또는 S. 아우레우스로 자극된 인간 전혈에 의한 TNF-α의 생산에 미치는 RTD들의 효과를 평가하는 심화 실험들로 인도되었다. 도 4 (B 및 C)에 나타낸 대표적인 실험은 RTD들 1 내지 5가 (도 4A) 대장균-유도성 TNF-α 방출을 저해하는 점을 보여준다.; 서로 다른 θ-디펜신들 중에서도 명확하게 서로 다른 저해적 효력이 그들 중에 존재하는 점을 주목하라. 유사한 결과들은 S. 아우 레우스로의 실험들에서 획득되었다. 대조군 실험들에서, 본 발명자들은 많은 다른 디펜신들과 달리, θ-디펜신들은 TNF-α와 직접적으로 상호작용하지 않는 점을 펩타이드들이 엘라이자 표준 곡선들을 변경하지 않고 면역검정법은 단지 활성을 가진 TNF-α만을 검출하는 점을 보여주는 결과들을 기초로 하여 발견하였다. 이들 및 다른 실험들의 결과들은 CLP 패혈증에서 RTD-1의 보호적 효과들이 (도 3) 항미생물 효과라기 보다는 면역조정 활성들로 인하였던 점을 제시하였다. 이러한 결과에 이어서, 본 발명자들은 인간 말초혈액 백혈구들 (PBL)을 10 μg/mL의 RTD-1의 동시적 첨가가 있거나 없이 TLR들 1 내지 9에 대한 작동제들로 4시간 동안 자극하였다. 도 5에서 나타난 바와 같이, RTD-1으로의 PBL들의 공동-배양은 TLR 2, 4, 5 및 8에 대한 작동제들에 의해 유도된 TNF-α를 현저하게 감소시켰다. 또한, RTD-1은 각각의 작동제에 의해 자극된 IL-1β 및 IL-6의 방출도 역시 저해하였고, IL-8은 TLR2 작동제의 존재 시를 제외하고 모든 유도들에서 강하게 저해하였다. RTD-1은 필수적으로 미자극된 세포들에 미치는 효과를 가지지 않았다 (도 5, 상부 왼쪽 패널). MCP-1 수준들에 미치는 RTD-1 치료의 효과는 다양하였다. 본 발명자들은 마우스 SARS 폐렴에서, RTD-1이 호흡기 MCP-1 수준들을 현저하게 감소시켰기 때문에 분석에서 이러한 케모카인을 포함시켰다 (29). 이것은 바이러스 ssRNA로 자극된 PBL들 상에 미치는 RTD-1의 효과와 부합한다 (도 5). 마지막으로, 본 발명자들은 또한 RTD-1가 내독소-생산 S. 아우레우스로 생체내 자극된 인간 PBMC들에 의해 IL-17A의 발현 (> 85% 감소)을 용량 의존적 방식으로 억제하였던 점을 발견하였다.
실시예 3 - θ- 디펜신들에 의한 TACE 의 저해
이들 결과들은 세균들 (도 4), 다양한 TLR 작동제들 (도 5), 및 동물들에서 측정된 것 (상기를 참조하라)에 의해 유도된 TNF-α의 θ-디펜신-매개성 저해를 보여주기 때문에, 한 가지 가능한 작동 기작은 TNF-α 전환효소의 활성이 θ-디펜신들에 의해 길항될 수 있는 것이다. 이러한 TNF-α 전환효소 ("TACE", ADAM17이라고도 역시 알려짐, ADAM (디스인테그린들 및 금속단백질분해효소; a disintegrin and metalloproteinase) 패밀리의 구성원)는 막 결합 TNF-α의 방출을 담당하는 쉐다제이다. 놀랍게도, 본 발명자들은 RTD-1이 ~ 0.1 μg/mL (40 nM)의 IC50을 가진 재조합 TACE (rTACE)의 강력한 저해제인 점을 밝혔다. 명확하게, 인간 θ-디펜신 (HNP-2, HNP-4)은 rTACE를 어느 것도 저해하지 않았고 (도 6A), 디펜신들 중에서 독특한 θ-디펜신의 활성을 만든다. 천연 θ-디펜신들 (RTD 1 내지 5; 도 4A의 구조들)의 상대적 활성들이 테스트되었고 IC50 수치들의 ~ 10배 초과 범위로 변화하는 것으로 밝혀졌다 (도 6B). 명확하게, RTD 1 내지 5에 의한 TACE 저해의 계층은 인간 혈액에서 펩타이드들에 의한 TNF-α 저해와 잘 상관되었다 (도 4C). RTD-1에 의한 TACE 저해는 TACE와의 15분 전-배양에 의해 증진되지 않았고, 신속한 결합 및 경쟁적 저해를 제시하는 결과이다. 이것른 효소 역학적 데이타의 이중-역수 좌표 분석에 의해 입증되었고 (도 6C), RTD-1이 TACE의 유사기질로서 작용하는 점을 가리킨다. RTD-1의 개방 사슬 유사체 (S-7; 도 6D)가 TACE 저해에 대해 테스트되었고 고리 입체형태가 효과적인 TACE 저해에 요구되는 점을 가리키는 RTD-1 활성의 20% 이하를 가지는 것으로 밝혀졌다 (도 6E).
TACE의 저해는 또한 세포-기초 검정법에서 입증되었다. RTD-1은 알바레즈-이글레시아스 등 (Alvarez-Iglesias et al .) (1)에 의해 기술된 검정법의 변형을 사용하여 휴지기 및 LPS-자극된 THP-1 세포들 상에 발현된 TACE를 저해하는 것으로 확인되었다 (도 6F). 세포-기초 검정법들에서 RTD-1에 대해 획득된 IC50은 ~ 15 μg/mL (7.4 μM)이었다. 이것은 THP-1 세포들 상의 TACE 차단의 연구에서 소분자 TACE 저해제 GM6001 (5.5+/- 3 μM)의 IC50과 선호적으로 비교된다 (1).
실시예 4 - θ- 디펜신들은 ADAM10 을 저해한다.
다양한 ADAM들은 막-고정된 성장인자들, 사이토카인들, 및 수용체들을 방출하는 조절성 쉐다제들로서 관여하여 왔다 (3). ADAM들은 염증의 조절 및 암을 포함하는 많은 핵심 생물학적 과정들에서 관여되어 있기 때문에, ADAM 저해제들의 확인은 연구의 중요한 영역이다. 본 발명자들은 천연의 θ-디펜신들 RTD 1 내지 3이 TACE의 저해로 관찰된 바와 대략 동일한 IC50으로 (도 6을 참조하라) ADAM10을 저해하는 점을 확립하였다. (도 7). 따라서, θ-디펜신들은 적어도 2가지 ADAM들의 금속성프로테아제 저해제들이다.
실시예 5 - 미니-θ- 디펜신들에 의한 항- TNF -α 및 TACE 저해.
천연된 및 변형된 θ-디펜신들의 구조-활성 분석들은 이들 펩타이들의 항-염증 효과들을 매개하는 것으로 예측된 소정의 서열 특징들을 제시하였다. 예로서, 3가지 테트라데카펩타이드들 (미니-θ-디펜신들)은 천연의 θ-디펜신들의 항-염증 성질들을 위해 중요하게 판단되는 특징들을 포함하도록 설계되었다. 이들은 도 8A에 나타낸 펩타이드들의 서열들 내로 통합되었다. 각각의 펩타이드는 마우스 CLP 패혈증에서 그의 효능에 대해 평가되었다. 도 8B에 나타난 바와 같이, 모두 3가지 미니-θ-디펜신들은 PBS 샴 처리와 대비하여 마우스에서 치사도를 감소시켰다. 본 발명자들은 또한 자극된 인간 혈액으로부터 TNF-α 방출에 미치는 그의 효과 (도 8C) 그리고 그의 TACE에 대한 저해적 효과를 위해 각각의 미니-θ-디펜신을 평가하였다 (도 8D). 도 8의 데이타로 나타난 바와 같이, 미니-θ-디펜신들은 CLP 검정법 (도 3과 대비함), TNF-α 저해 검정법 (도 8C), 또는 TACE 저해 검정법 (도 8D)에서 RTD-1와 유사하거나 월등한 활성을 가졌다.
성숙한 θ-디펜신 펩타이드 RTD-1은 α- 및 β-디펜신들과 같이 3개의 디설파이드들에 의해 안정화되는 2개 가닥의 베타-판이다. 그러나 RTD-1 디설파이드 배열의 평행 방향성은 그의 짧은 축 주변에 실질적인 유연성을 허용한다. α- 및 β-디펜신들과는 달리, RTD-1은 양친화성 구조학 (topology)이 결여되고, 임의의 이론에 얽매이지 않더라도, 이러한 및 다른 유사한 구조적 차이들은 θ-디펜신에 독특한 면역 조절 능력들을 설명할 수 있다.
실시예 6 - 래트 프리스탄 -유도성 관절염 ( PIA )에서 θ- 디펜신의 효능.
TNF-α의 θ-디펜신에 의한 생체내 또는 생체외 차단이 펩타이드의 항-염증 효과들에 중심이 되는 경우라면, 본 발명자들은 이것이 TNF-α에 의해 추진되는 것으로 알려진 질환의 경로를 조정해야 하는 것으로 믿었다. 본 발명자들은 확립된 PIA를 가진 래트들 상에 미치는 RTD-1의 효과를 테스트하도록 진행하였다. 대표적인 실험에서 (N = 3), 어른 다크 아구티 (DA; Olahsd 품종) 래트들은 (N = 21) 빙스보 등 (Vingsbo et al .)에 의해 기술된 바와 같이 0일째 0.3 mL 프리스탄으로 피하로 주사되었다 (26). 임상적 질환의 첫 번째 징후에서 (14 내지 21일; 브랜드 등 (Brand et al.)의 참고문헌의 총 병리학 측정을 기초로 함)(4), 동물들은 대안적으로 식염수 (N = 10) 또는 RTD-1 처리 (N = 11) 그룹들로 배당되었다. 식염수 (0.2 내지 0.25 mL) 또는 RTD-1 (0.2 내지 0.25 mL 식염수에서 5 mg/kg)의 가려진 (blinded) 투여가 관절염 중증도 (3명의 관찰자들에 의해 36일 동안까지 각각의 일에 가려져서 점수 매겨짐)가 이전에 0으로 돌아오지 않았던 경우라면 14일까지 동안 매일 꼬리 정맥 주사에 의해 수행되었다 (식염수 그룹에서 N = 1; RTD-1 그룹에서 N = 8). RTD-1 처리된 동물들은 7일에 시작하여 관절 병리학의 통계학적으로 유의한 (쌍을 형성하지 않은 2개 미단을 가진 스튜던트 T 테스트에 의해 * = p ≤ 0.05) 감소를 가졌다 (도 9). 본 모델에서 효능도 역시 동일한 RTD-1 용량 및 제형물의 피하 주사에 의해 나타났다. 처리의 중단 이후 적어도 45일 동안 질환 재발의 증거는 전혀 존재하지 않았다.
실시예 7 - θ- 디펜신은 매우 안정하다.
θ-디펜신 RTD-1이 인간 혈장, 인간 혈청 50 μg/mL에서 또는 인간 혈청 알부민 50 mg/mL에서 72시간 동안 상온에서 배양되었다. 정량적 HPLC 분석법이 수행되어, 펩타이드의 95% 이상이 각각의 테스트된 조건들 하에서 미변경되었던 점을 보여주었다. 게다가, θ-디펜신들은 낮은 (~ pH 2.5) 또는 중성 (pH 7.4) 조건들 하에서 연장된 보관에 안정하였다.
요약하면, θ-디펜신들은 TACE 및 다른 금속성효소들과 같은 전염증성 프로테아제들의 차단에 의해 매개되는 항-염증 성질들을 소유하고 있다. 그들은 감염성 및 비-감염성 염증 질환의 동물 모델들에서 효과적이고, 전신적으로 투여될 때 좋은 내성을 가지고, 비-면역원성이다. 또한, 다른 항-염증성 제제들과 달리 θ-디펜신들은 면역억제성을 가지지 않는다.
SEQUENCE LISTING <110> The Regents of The University of California <120> BLOCKADE OF INFLAMMATORY PROTEASES WITH CYCLIC PEPTIDES <130> 100843.0058US1 <150> US 61/492753 <151> 2011-06-02 <150> US 61/492,753 <151> 2011-06-02 <160> 7 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 500 <212> DNA <213> Macaca mulatta <220> <221> misc_feature <222> (1)..(500) <223> theta defensin 1a precursor (RTD1A), mRNA <400> 1 gacggctgct gttgctacag gagacccagg acagaggact gctgtctgca ctctctcttc 60 actctgccta acttgaggat ctgtcactcc agccatgagg accttcgccc tcctcaccgc 120 catgcttctc ctggtggccc tgcacgctca ggcagaggca cgtcaggcaa gagctgatga 180 agctgccgcc cagcagcagc ctggaacaga tgatcaggga atggctcatt cctttacatg 240 gcctgaaaac gccgctcttc cactttcaga gtcagcgaaa ggcttgaggt gcatttgcac 300 acgaggattc tgccgtttgt tataatgtca ccttgggtcc tgcgcttttc gtggttgact 360 ccaccggatc tgctgccgct gagcttccag aatcaagaaa aatatgctca gaagttactt 420 tgagagttaa aagaaattct tgctactgct gtaccttctc ctcagtttcc ttttctcatc 480 ccaaataaat accttatcgc 500 <210> 2 <211> 460 <212> DNA <213> Macaca mulatta <220> <221> misc_feature <222> (1)..(460) <400> 2 gtctgccctc tctgctcgcc ctgcctaact tgaggatctg tcactccagc catgaggacc 60 tttgccctcc tcactgccat gcttctcctg gtggccctgc acgctcaggc agaggcacgt 120 caggcaagag ctgatgaagc tgccgcccag cagcagcctg gagcagacga tcagggaatg 180 gctcattcct ttacacggcc tgaaaacgcc gctcttccgc tttcagagtc agcgagaggc 240 ttgaggtgcc tttgcagacg aggagtttgc caactgttat aaaggcgttt ggggtcctgc 300 gcttttcgtg gttgactctg ccggatctgc tgccgctgag cttccagaat caagaaaaat 360 acgctcagaa gttactttga gagttgaaag aaattcctgt tactcctgta ccttgtcctc 420 aatttccttt tctcatccca aataaatacc ttctcgcaag 460 <210> 3 <211> 421 <212> DNA <213> Macaca mulatta <220> <221> misc_feature <222> (1)..(421) <223> demidefensin 3 (LOC574121), mRNA <400> 3 gtgaccccag ccatgaggac cctcgccctc cacactgcca tgcttctcct ggtggccctg 60 cacgctcagg cagaggcacg tcaggcaaga gctgatgaag ctgccgccca gcagcagcct 120 ggagcagatg atcagggaat ggctcactcc tttacatggc ctgaaaacgc cgctcttccg 180 ctttcagagt cagagagagg cttgaggtgc atttgcgtac taggaatttg ccgtctgtta 240 taacggcatt tgcggtcctg cgacttttgt ggttgactct atcggatctg ttgccgctga 300 gcttgcagaa tcaagaaaaa caagctcaga agttactttg agagttaaaa gaaattcttg 360 ttactcctct accttgccct aaatttcctt ttctcatccc aaataaatac cttctcgcaa 420 g 421 <210> 4 <211> 514 <212> DNA <213> Papio anubis <220> <221> misc_feature <222> (1)..(514) <223> theta defensin a precursor (BTD-a) mRNA, complete cds <400> 4 agacctggga cagaggactg ctgtctgcac tctctcttca ctctgcctaa cttgacgatc 60 tgtcactcca gccatgagga ccttcgccct cctcaccgcc atgcttctcc tggtggccct 120 gcatgctcag gcagaggcac gtcaggcaag agctgatgaa gctgctgccc agcagcagcc 180 tggagcagat gatcagggaa tggctcattc ctttacatgg cctgaaaacg ccgctcttcc 240 gctttcagag tcagcgaaag gcttgaggtg cgtttgcaca cgaggattct gccgtttgtt 300 ataatgtcac cttgggtcct gcgcctttca tggttgactc caccggatct gctgccgctg 360 agcttccaga atcaagaaaa atacgctcag aagttacttt gagagttaca agaaattctt 420 gctactgctg taccttctcc tcagtttcct tttctcatcc caaataaata ccttatcgca 480 agaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaa 514 <210> 5 <211> 504 <212> DNA <213> Papio anubis <220> <221> misc_feature <222> (1)..(504) <223> theta defensin b (BTDB), mRNA <400> 5 agacccggga cagaggactg ctgtctgccc tctctcttca ctctgcctaa cttgaggatc 60 tgtcactcca gccatgagga cctttgccct cctcaccgcc atgcttctcc tggtggccct 120 gcagcctcag gcagaggcac gtcaggcaag agctgatgaa gctgccgccc agcagcagcc 180 tggagcagat gatcagggaa tggctcattc ctttacacgg cctgaaaacg ccgctcttcc 240 actttcagag tcagcgaaag gcttgaggtg cgtttgcaga cgaggagttt gccaactgtt 300 ataaaggcgt ttggggtcct gcgcttttcg tggttgactc tgtcagatct gctgccgctg 360 agcttccaga atcaagaaaa atacgctcag aagttacttt gagagttgaa agaaattctt 420 gttactcctg taccttgtcc tcaatttcct tttctcatcc caaataaata ccttctcgca 480 aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaa 504 <210> 6 <211> 542 <212> DNA <213> Papio anubis <220> <221> misc_feature <222> (1)..(542) <223> theta defensin c (BTDC), mRNA <400> 6 agacccggga cagaggactg ctgtctgccc tctctggtca ctctgcgtag cacaaggatc 60 tgtcactcca gccatgagga ccttcgcctt cctcactgcc atgcttctcc tggtggccct 120 gcacgcacag gcagaggcac gtcaggcaag agctgatgaa gctgccatcc aggagcagcc 180 tggagcagat gatcagggaa tggctcattc ctttacacgg aatgaaagtg ccgttcttcc 240 gctttcagag tcagagagag gcttgaggtg catttgctta ctaggaattt gccgtctgtt 300 ataacggcgt ttgcggtcct gcgactttcg tggttgactc tatcggatct gttgccactg 360 agcttgcaga atcaagaaaa accagctcag aagttacttt gagagttaaa agaaattctt 420 gttactcctc taccttgccc tcaatttcct tttctcatcc caaataaata ccttgtcgca 480 agaaaaaaaa agaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 540 aa 542 <210> 7 <211> 258 <212> DNA <213> Papio anubis <220> <221> misc_feature <222> (1)..(258) <223> theta defensin d (LOC100196942), mRNA <400> 7 actccagcca tgaggacctt tgccctcctc accgccatgc ttctcctggt ggccctgcag 60 gctcaggcag aggcacgtca ggcaagagct gatgaagctg ccgcccagca gcagcctgga 120 gcagatgatc agggaatggc tcattccttt acacggcctg aaaacgccgc tcttcctctt 180 tcagagtcag cgaaaggctt gaggtgcttt tgcagacgag gagtttgcca actgttataa 240 aggcgcttgg ggtcctgc 258

Claims (33)

  1. 약물 조성물을 시판하는 방법으로서, 약물 조성물은 θ-디펜신, 그의 유사체 또는 유도체를 포함하고,
    상기 약물 조성물의 효능을 인간에서 항-염증성 효과에 관하여 결정하는 단계;
    상기 약물 조성물을 만성 염증성 병태를 치료하도록 시장에 제공하는 단계:
    를 포함하는, 방법.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물은 RTD-1-27인, 방법.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물은 RTD-1-28인, 방법.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물은 RTD-1-29인, 방법.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 효능을 결정하는 단계는 약물 조성물에 관하여 독성 연구, 효능 연구 및 용량-반응 연구의 적어도 하나를 지원하는 단계를 포함하는, 방법.
  6. 제 1항에 있어서,
    상기 효능을 결정하는 단계는 약물 조성물에 관하여 독성 연구, 효능 연구 및 용량-반응 연구의 적어도 하나에 관한 또 다른 것에 의해 생성되는 데이타에 의존하는 단계를 포함하는, 방법.
  7. 제 1항에 있어서,
    상기 항-염증성 효과는 전염증성 프로테아제의 임상적으로 적절한 저해를 포함하는, 방법.
  8. 제 7항에 있어서,
    상기 전염증성 프로테아제는 종양괴사인자 알파 (TNF-α)-전환효소 (TACE)인, 방법.
  9. 제 1항에 있어서,
    상기 항-염증성 효과는 전염증성 프로테아제의 임상적으로 적절한 저해를 포함하는, 방법.
  10. 제 1항에 있어서,
    상기 항-염증성 효과는 쉐다제 (sheddase)의 임상적으로 적절한 저해를 포함하는, 방법.
  11. 제 1항에 있어서,
    상기 항-염증성 효과는 카텝신-C (cathepsin-C)의 임상적으로 적절한 저해를 포함하는, 방법.
  12. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 시장에 제공하는 단계는 판매를 위해 적어도 1 킬로그램의 약물 조성물을 생산하는 단계를 포함하는, 방법.
  13. 제 12항에 있어서,
    상기 생산하는 단계는 적어도 1 킬로그램의 약물 조성물을 제조하는 단계를 포함하는, 방법.
  14. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 경구적 제형물로 포장하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  15. 제 1항에 있어서,
    상기 염증성 병태는 단백질분해-매개성 질환을 포함하는, 방법.
  16. 제 1항에 있어서,
    상기 염증성 병태는 류마티스 관절염을 포함하는, 방법.
  17. 제 1항에 있어서,
    상기 염증성 병태는 자가면역 질환을 포함하는, 방법.
  18. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 암을 위한 치료로서 시판하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  19. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 신경퇴화성 질환을 위한 치료로서 시판하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  20. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 염증성 장 질환을 위한 치료로서 시판하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  21. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 알츠하이머병을 위한 치료로서 시판하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  22. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 골관절염을 위한 치료로서 시판하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  23. 제 1항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 항-TNF-α 치료에 미-반응자들인 사람들을 치료하도록 시판하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  24. 만성 염증성 병태를 치료하도록 동물에게 투여를 위한 약제를 제조하는 방법으로서, 상기 약제는 θ-디펜신, 그의 유사체 또는 유도체의 적어도 하나를 포함하는, 방법.
  25. 제 24항에 있어서,
    상기 약제는 RTD-1-27, RTD-1-28 및 RTD-1-29의 적어도 하나를 포함하는, 방법.
  26. 제 24항에 있어서,
    상기 약제는 전염증성 프로테아제의 임상적으로 적절한 저해를 생산하는 데 효과적인, 방법.
  27. 제 26항에 있어서,
    상기 전염증성 프로테아제는 종양괴사인자 알파 (TNF-α)-전환효소 (TACE)인, 방법.
  28. 제 25항에 있어서,
    상기 약제는 전염증성 프로테아제의 임상적으로 적절한 저해를 생산하는 데 효과적인, 방법.
  29. 제 24항에 있어서,
    상기 약제는 쉐다제의 임상적으로 적절한 저해를 생산하는 데 효과적인, 방법.
  30. 제 24항에 있어서,
    상기 염증성 병태는 류마티스 관절염을 포함하는, 방법.
  31. 제 24항에 있어서,
    상기 염증성 병태는 자가면역 질환을 포함하는, 방법.
  32. 제 24항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 암을 위한 치료로서 시판하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  33. 제 24항에 있어서,
    상기 약물 조성물을 신경퇴화성 질환을 위한 치료로서 시판하는 단계를 더 포함하는, 방법.
KR1020137033994A 2011-06-02 2012-06-01 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단 KR102060207B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161492753P 2011-06-02 2011-06-02
US61/492,753 2011-06-02
PCT/US2012/040455 WO2012167077A1 (en) 2011-06-02 2012-06-01 Blockade of inflammatory proteases with theta - defensins

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197027535A Division KR20190110156A (ko) 2011-06-02 2012-06-01 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20140053911A true KR20140053911A (ko) 2014-05-08
KR102060207B1 KR102060207B1 (ko) 2019-12-30

Family

ID=46331683

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197027535A KR20190110156A (ko) 2011-06-02 2012-06-01 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단
KR1020137033994A KR102060207B1 (ko) 2011-06-02 2012-06-01 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단
KR1020217018121A KR102456795B1 (ko) 2011-06-02 2012-06-01 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197027535A KR20190110156A (ko) 2011-06-02 2012-06-01 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020217018121A KR102456795B1 (ko) 2011-06-02 2012-06-01 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단

Country Status (11)

Country Link
US (4) US10512669B2 (ko)
EP (1) EP2714064B1 (ko)
JP (3) JP6177769B2 (ko)
KR (3) KR20190110156A (ko)
CN (2) CN103732239A (ko)
BR (1) BR112013030874B8 (ko)
CA (1) CA2837858C (ko)
ES (1) ES2740953T3 (ko)
IL (1) IL229760B (ko)
RU (1) RU2652605C2 (ko)
WO (1) WO2012167077A1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020264389A1 (en) * 2019-06-26 2020-12-30 Selsted Michael E Novel theta defensin analogs

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190110156A (ko) * 2011-06-02 2019-09-27 더 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단
HUE057737T2 (hu) * 2014-06-18 2022-06-28 Medicell Tech Llc Õssejtstimuláló készítmények és eljárások
WO2017027411A1 (en) * 2015-08-07 2017-02-16 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for inhibiting pro-inflammatory cytokine gene expression
US20190008828A1 (en) 2015-12-28 2019-01-10 The U.S.A., As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Methods for inhibiting human immunodeficiency virus (hiv) release from infected cells
JP2022502472A (ja) * 2018-10-09 2022-01-11 トラン、ダットTRAN, Dat カチオン性大環状ペプチドの全身送達性、忍容性、および有効性を向上させる組成物および方法
WO2021263126A1 (en) * 2020-06-26 2021-12-30 The University Of Southern California Compositions and methods for treatment of fungal infections
WO2022159314A1 (en) * 2021-01-20 2022-07-28 The University Of Southern California Use of naturally occurring cyclic peptides for treatment of sars-cov-2 infection

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3845000C2 (de) * 1987-07-10 1998-11-19 Novartis Ag Anwendung von Octreotid zur Behandlung von Brustkrebs
AU720405B2 (en) 1996-02-16 2000-06-01 Regents Of The University Of California, The Antimicrobial peptides and methods of use
US6303575B1 (en) 1998-05-12 2001-10-16 The Regents Of The University Of California Indolicidin analogs and methods of using same
US6444645B1 (en) 1998-06-18 2002-09-03 The Regents Of The University Of California Crosslink-stabilized indolicidin analogs
AU775260B2 (en) 1999-03-31 2004-07-29 Bayer Corporation Single channel, single dilution detection method
US6335318B1 (en) 1999-05-10 2002-01-01 The Regents Of The University Of California Antimicrobial theta defensins and methods of using same
WO2003070176A2 (en) * 2002-02-19 2003-08-28 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Modified defensins and their use
HRP20020303A8 (en) * 2002-04-10 2009-03-31 GlaxoSmithKline istra�iva�ki centar Zagreb d.o.o. Benzonaphthoazulenes as inhibitors of tumour necrosis factor production and intermediates for the preparation thereof
US7119070B2 (en) 2002-04-30 2006-10-10 The Regents Of The University Of California Antimicrobial theta defensins, analogs thereof, and methods of use
DE10226216A1 (de) * 2002-06-13 2003-12-24 Bayer Ag Behandlung von schweren Infektionen und septischem Schock
AU2003288507A1 (en) * 2002-12-19 2004-07-14 Yitzchak Hillman Disease treatment via antimicrobial peptide inhibitors
GB0300718D0 (en) * 2003-01-13 2003-02-12 Ares Trading Sa Proteins
US7452598B2 (en) 2003-10-06 2008-11-18 Certainteed Corporation Mineral-surfaced roofing shingles with increased solar heat reflectance, and process for producing same
US20080255052A1 (en) * 2004-12-23 2008-10-16 The Regents Of The University Of California Immunologic regulation by theta defensins
WO2007044998A1 (en) * 2005-10-12 2007-04-19 The Regents Of The University Of California Retrocyclins: antiviral and antimicrobial peptides
US8962530B2 (en) * 2007-06-27 2015-02-24 Regents Of The University Of Colorado Inflammatory bowel disease therapies
US7992235B2 (en) 2008-04-10 2011-08-09 Kohler Co. Utility sink
CN103347532A (zh) 2011-02-04 2013-10-09 爱奇司治疗公司 口服可生物利用肽药物组合物及其方法
KR20190110156A (ko) * 2011-06-02 2019-09-27 더 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020264389A1 (en) * 2019-06-26 2020-12-30 Selsted Michael E Novel theta defensin analogs
US11021518B2 (en) 2019-06-26 2021-06-01 The University Of Southern California Theta defensin analogs
US11427617B2 (en) 2019-06-26 2022-08-30 The University Of Southern California Compositions and methods for treatment of fungal infections

Also Published As

Publication number Publication date
CA2837858A1 (en) 2012-12-06
US20160303194A1 (en) 2016-10-20
JP6794409B2 (ja) 2020-12-02
RU2652605C2 (ru) 2018-04-27
EP2714064A1 (en) 2014-04-09
US10603356B2 (en) 2020-03-31
BR112013030874A2 (pt) 2017-03-01
ES2740953T3 (es) 2020-02-07
US9346866B2 (en) 2016-05-24
JP2017149745A (ja) 2017-08-31
CN109248310B (zh) 2022-07-01
US10512669B2 (en) 2019-12-24
JP6177769B2 (ja) 2017-08-09
JP6403240B2 (ja) 2018-10-10
IL229760A0 (en) 2014-01-30
US20150080319A1 (en) 2015-03-19
BR112013030874B1 (pt) 2021-07-13
KR102060207B1 (ko) 2019-12-30
WO2012167077A1 (en) 2012-12-06
IL229760B (en) 2019-08-29
CN103732239A (zh) 2014-04-16
JP2014516990A (ja) 2014-07-17
KR102456795B1 (ko) 2022-10-19
KR20190110156A (ko) 2019-09-27
US20200333024A1 (en) 2020-10-22
US20130157964A1 (en) 2013-06-20
RU2013154505A (ru) 2015-07-20
CN109248310A (zh) 2019-01-22
EP2714064B1 (en) 2019-05-15
BR112013030874B8 (pt) 2021-09-14
JP2019014722A (ja) 2019-01-31
KR20210075218A (ko) 2021-06-22
CA2837858C (en) 2022-05-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102060207B1 (ko) 세타-디펜신들로 염증성 프로테아제들의 차단
Vandooren et al. Biochemistry and molecular biology of gelatinase B or matrix metalloproteinase-9 (MMP-9): the next decade
JP6647330B2 (ja) Ｍｉｒａｃタンパク質
JP6567147B2 (ja) 皮膚状態改善活性を有するペプチド及びその用途
ES2770073T3 (es) Uso terapéutico de proteínas morfogenéticas óseas
CN101500593A (zh) 调节炎性介质的方法及用于该方法的肽
WO1999022756A1 (en) Cell-permeable protein inhibitors of calpain
KR20180064534A (ko) 조건부 활성 폴리펩티드
JP2001512319A (ja) 細胞のＮＦ−κＢ活性化を調節するための組成物および方法
CN102666845B (zh) 磷酸酶和张力蛋白同系物(pten)抑制剂组合物,用途以及方法
US20210113654A1 (en) Methods and Compositions to Alleviate Vascular Permeability
EP3884055A1 (en) Double and inducible suicide gene construct and its use in gene therapy
KR101607282B1 (ko) 유리형 산화환원조절단백-1 및 이를 함유하는 항염증 약학조성물
Vincent et al. The role of neutrophil-derived myeloperoxidase in organ dysfunction and sepsis
WO2023004021A2 (en) Zinc finger ccch-type containing 14 (zc3h14) mutants and methods of use
US20030138427A1 (en) Modulation of plasma membrane human leukocyte elastase
Vandooren et al. inhibit MEK1 and MEK2 Menu

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
A107 Divisional application of patent
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)