KR20140052448A - 털여뀌 뿌리 추출물을 함유하는 약학적 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화 예방 및 치료용 약학적 조성물 또는 건강 기능성 식품에 관한 것으로서, 상세하게는 상기 약학적 조성물 또는 건강 기능성 식품이 항산화 및 항동맥경화 활성이 있는 것을 특징으로 한다.

Description

털여뀌 뿌리 추출물을 함유하는 약학적 조성물{Pharmaceutical composition comprising leaf extract of Persicaria orientalis (L.) Spach}
본 발명은 털여뀌 뿌리 추출물을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물 및 건강 기능성 식품에 관한 것이다.
털여뀌는 마디풀과에 딸린 한해살이풀이로서 북반구 도처에 서식하고 노인장대라고도 부른다. 길가나 빈터에서 자라며 키가 1 ~ 2 미터에 달해 한국에 서식하는 여뀌속 중 가장 크다. 줄기 전체에 털이 많으며 굵고 윗부분에서 줄기가 많이 갈라진다. 잎은 어긋나고 넓은 달걀 모양이거나 달걀꼴 심장 모양이며 길이 10 ~ 20 센티미터, 너비 7 ~ 15 센티미터로 꽤 크다. 끝이 뾰족하고 가장자리는 밋밋하며 앞뒤로 털이 난다. 꽃은 7 ~ 9월에 가지 끝 이삭꽃차례에 여러 개가 빽빽하게 달려 핀다. 꽃차례의 길이는 5 ~ 12 센티미터 정도이며 벼이삭처럼 밑으로 드리운다. 꽃은 붉은색이며 꽃잎은 없고 수술이 8개인데 꽃받침보다 길다. 열매는 길이 3 mm 정도의 수과로 흑갈색이며 꽃받침에 싸여 익는다.
항산화(antioxidation)란 체내에서 일어나는 여러 산화작용을 방지하는 것을 말한다. 산화작용은 체내에 존재하는 여러 종류의 불포화 지방산이 산소에 의해 산화되면 과산화 지질이라고 하는 물질이 생성되고 이것이 증가하면 노화 현상이 촉진되는 현상을 말한다. 인간의 질병 및 노화는 체내 대사과정 중 발생하는 O2-(superoxide), NO·(nitric oxide), NO2·(nitrogen dioxide), OH·(hydroxyl), ROO·(proxyl), RO·(alkoxyl), NO3·(peroxynitrite) 라디칼(radical) 등의 산화반응에 기인하며 생체 내에서는 이런 유해한 라디칼인 유리기로부터 생체를 방어하기 위한 수단으로써 수퍼옥사이드 디스무타제(SOD, superoxide dismutase), 카탈라제(CAT; catalase), 글루타치온 퍼옥시다제(GSHpx; glutathione peroxidase) 등의 항산화 효소나 비타민 E, 글루타치온 등의 항산화 물질이 존재하여 유리기를 제거함으로써 생체를 산화적 손상으로부터 보호한다. 그러나 이러한 항산화 방어계가 유리기 생성을 조절할 수 없을 정도로 저하될 때 조직의 산화적 스트레스와 손상이 촉진되며 체내에서 생성된 과잉의 유리기와 지질 과산화물은 단백질의 산화, DNA 손상과 같은 산화적 스트레스에 의한 상해를 증가시킨다. 그러므로 이러한 산화적 스트레스의 감소를 위해 많은 합성 또는 천연 항산화 물질이 개발되어 왔으나 합성 항산화제의 경우 안전성에 문제가 있어, 최근에는 각종생약과 식용식물 추출물 등에서 보다 안전하며 항산화 효과가 뛰어난 천연 항산화제를 개발하기 위한 노력을 하고 있다.
동맥경화는 지질대사와 관련된 유전적 요인과 식습관, 흡연, 운동부족 등 환경적 요인에 의하여 동맥이 경화되는 질환으로서, 이로 인하여 심장질환, 뇌혈관 질환 등의 순환계 질환의 원인이 된다. 동맥경화의 초기 발생에 관한 가설은 '손상에 대한 반응(response-to-injury hypothesis)'으로서 유전적 변이, 과산화물, 고혈압, 당뇨, 혈장 호모시스테인 농도 증가, 미생물 감염 등의 원인에 의하여 혈관 내피세포가 정상적인 항상성을 유지하지 못하는 기능부전상태가 되는 것이다. 내피세포가 기능부전 상태로 되면 세포부착물질이 크게 발현되고 세포 투과성이 증가되어 혈중 면역세포, 혈소판, 지방질 등의 부착 및 조직으로의 투과성이 증가되며, 이들 면역세포들의 염증매개인자 및 성장인자 분비 등 염증반응 때문에 동맥경화성 병변이 발생 및 발달하게 된다는 것이다. 이때 혈중 저밀도지단백(low density lipoprotein, 이하 LDL)이 산화, 당결합, 집적화, 당단백 결합 등의 원인으로 변형-LDL(modified-LDL, 이하 MLDL)이 생성되고, 이들은 혈관 내피세포 및 평활근의 자극 및 손상을 유발한다. 이로 인하여, 내피세포의 혈관세포부착물질-1(vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1) 발현 및 염증세포의 염증매개인자 방출이 촉진되면 LDL은 내피 세포 아래에 유입 및 축적이 되고, 축적된 LDL 및 산화된 MLDL은 다시 대식세포, T 임파구 등 면역세포의 유입 및 활성화를 유발하는 과정을 되풀이하여 병변의 염증반응을 촉진하게 된다. 그 후 병변으로 유입된 대식세포나 임파구로부터 방출된 가수분해효소, 염증매개인자, 성장인자 등의 작용으로 병반은 괴사하게 되고, 괴사된 병소 부위로 단핵구의 유입, 평활근의 이동 및 분화, 섬유성 조직의 형성 등의 반복적인 과정을 통하여 병변 조직은 MLDL을 핵으로 한 괴사조직에 섬유질이 덮인 복잡한 구조의 섬유질 병변으로 발달하게 되며, 발달된 병변 조직으로부터 혈전이 생성되고 동맥이 경화되어 혈류장애 등 순환기 질환이 나타나게 되는 것이다. 따라서 LDL의 산화작용을 저해하여 동맥경화를 예방 및 치료 효과가 탁월하며 부작용이 적은 항동맥경화제의 개발이 절실히 요구되고 있는 실정이다.
따라서 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 인공적으로 합성된 항산화제보다 안전하며 항산화 효과가 뛰어난 천연 항산화제를 제공하는 것이다. 또한 본 발명은 종래의 인공적으로 합성된 동맥경화 치료제보다 부작용이 적으며 동맥경화 예방 및 치료 효과가 탁월한 동맥경화 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명은 털여뀌 추출물의 항산화 또는 항동맥경화 활성에 관한 것으로서, 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화 예방 및 개선용 건강 기능성 식품에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 활성이 있는 건강 기능성 식품에 관한 것이다.
본 발명은 종래의 인공적으로 합성된 동맥경화 치료제보다 부작용이 적으며 동맥경화 예방 및 치료 효과가 탁월한 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공할 수 있다. 또한 본 발명은 종래의 인공적으로 합성된 항산화제보다 안전하며 항산화 효과가 뛰어난 천연 추출물로서 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하여 항산화 및 항동맥경화 활성이 있는 동맥경화 예방 및 개선용 건강 기능성 식품을 제공할 수 있다.
도 1은 털여뀌 추출물(Persicaria orientalis (L.) Spach; Po)의 활성산소(ROS) 소거능을 나타낸 도면이며, Con : 포스페이트 버퍼 190 ㎕에 DCFH 용액을 처리한 기준군, SIN-1 : 포스페이트 버퍼 190 ㎕에 DCFH 용액 및 50 uM SIN-1 처리한 음성 대조군 이다.
도 2는 털여뀌 추출물(Persicaria orientalis (L.) Spach; Po)의 퍼옥시나이트라이트(peroxynitrite) 소거능을 나타낸 도면이며, Con : 소듐 포스페이트 버퍼 180 ㎕를 처리한 기준군, SIN-1 : 소듐 포스페이트 버퍼 180 ㎕를 처리한 후, SIN-1 50 uM로 유도된 음성 대조군이다.
도 3는 Raw 264.7 세포에 대한 털여뀌 추출물(Persicaria orientalis (L.) Spach; Po)의 세포생존율(cell viability)을 나타낸 도면이며, Con : 약물을 무 처리한 기준군, LPS : LPS 1㎍/㎖로 염증 유도된 음성 대조군이다.
본 발명은 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화의 예방 및 치료용 약학적 조성물 또는 건강 기능성 식품을 제공한다.
상기 털여뀌 추출물은 항산화 또는 항동맥경화 활성이 있는 것을 특징으로 가질 수 있다.
상기 추출물은 C1 내지 C4의 알코올, 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올로 추출된 추출물을 포함한다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명의 털여뀌 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
털여뀌(Persicaria orientalis (L.) Spach)를 건조, 분쇄하는 단계;
상기 건조, 분쇄된 털여뀌 뿌리를 추출용매로 추출하는 단계; 및
상기 추출물 중에 포함된 추출용매를 감압농축하여 제거하는 단계.
상기 방법에 있어서, 털여뀌는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다. 털여뀌 추출에 사용되는 부분은 잎, 줄기 및 뿌리이며, 바람직하게는 뿌리를 사용할 수 있다. 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 분쇄는 조분쇄 또는 미분쇄하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 추출용매는 알코올을 용매, 바람직하게는 C1 내지 C4 알코올로 사용하는 것이 바람직하다. 더 바람직하게는 에탄올 또는 메탄올을 사용할 수 있다.
상기 털여뀌에서 추출물을 추출하는 추출방법으로는 가속용매추출 또는 환류추출을 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 추출온도는 30 내지 70℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 방법에 있어서, 상기 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명은 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화제용 약학적 조성물을 제공한다. 상기 항산화제용 약학적 조성물은 노화방지 또는 피로회복을 특징으로 하는 항산화제용 약학적 조성물일 수 있다.
본 발명에 따른 털여뀌 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상세하게는, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 털여뀌 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween)61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 털여뀌 추출물은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 일반적으로 0.01 내지 50mg/㎏의 양, 바람직하게는 0.1 내지 10mg/㎏의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 또한 털여뀌 추출물의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명은 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화 예방 및 개선용 건강 기능성 식품을 제공한다.
본 발명은 털여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 활성이 있는 건강 기능성 식품을 제공한다. 상기 항산화 활성이 있는 건강 기능성 식품의 항산화 활성으로 노화를 억제하는 것을 특징으로 하는 건강 기능성 식품일 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 식품은 털여뀌 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
상기 건강 기능성 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 털여뀌 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있고 통상적인 의미에서의 건강 기능성 식품을 모두 포함한다.
이때, 식품 또는 음료 중 털여뀌 추출물의 양은, 일반적으로 본 발명의 건강 기능성 식품 조성물의 경우 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물의 경우 100㎖를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 털여뀌 추출물을 함유하는 외에는 액체성분에는 특별한 제한은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예로는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린; 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 건강 기능성 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그밖에 본 발명의 건강 기능성 식품들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명하기로 한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[ 실시예 ]
준비예 1 : 털여뀌 ( Persicaria orientalis (L.) Spach ) 추출물의 제조
털여뀌(Persicaria orientalis (L.) Spach) 뿌리는 충북 음성군에서 채취한 것을 세척, 절단하여 -80℃에서 동결건조한 후 해머밀(hammer mill)과 핀밀(pin mill)로 조분쇄 및 미분쇄한 가루형태의 털여뀌 뿌리 시료를 준비하였다. 이후 상기 털여뀌 뿌리 시료를 가속용매추출장치를 이용하여 50℃에서 에탄올로 추출하여 털여뀌 뿌리 추출물을 준비하였다. 상기 털여뀌 뿌리 추출물에 포함된 에탄올은 감압농축기를 사용하여 제거하였다.
실험예 1 : 털여뀌 추출물의 항산화 활성 측정 실험.
실험예 1-1. 털여뀌 추출물의 활성산소 생성 저해 실험
본 발명의 털여뀌 추출물의 활성산소(Reactive oxygen species; ROS) 생성 저해 효과를 확인하기 위하여, 3-모폴리노사이드논이민 하이드로클로라이드(3-Morpholinosydnonimine hydrochloride; SIN-1) 50 uM을 추가한 50 mM의 포스페이트 버퍼(phosphate buffer, pH7.4) 190㎕와 준비예 1에서 준비한 털여뀌 뿌리 추출물 10, 20, 40, 80 ㎕/㎖을 혼합하여 혼합액을 만들었다. 0.125 mM 2',7'-디클로로디하이드로플루오레세인 디아세테이트(2', 7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate; DCFDA)와 6 U/㎖ 에스테라아제(esterase)를 혼합하여 DCFH 용액을 조제했다. 이후 상기 혼합액에 상기 DCFH 용액 50 ㎕를 투여하여 485 nm / 530 nm(여기파장/방출파장)에서 플루어레슨스 마이크로플레이트 리더(fluorescence microplate reader)에서 형광 측정하였다.
이후 프리즘5(미국 캘리포니아주 소재 (주)Graphic Pad의 prism5 for windows)의 뉴먼-쿨즈 다중비교 검증(Newman-Keuls Multiple comparison test)에 의한 일원분산분석(one way ANOVA)을 이용하여 통계학적 분석을 시행하였다.
상기 통계학적 분석 결과, 털여뀌 뿌리 추출물은 SIN-1 50uM가 생성한 활성산소를 농도 의존적으로 제거하는 것을 확인하였다(도 1). 따라서 털여뀌 뿌리 추출물은 활성 산소의 생성을 저해하여 항산화 활성을 갖는 것을 확인하였다.
털여뀌 뿌리 추출물의 SIN-1 50uM이 생성하는 활성산소를 50% 저해하는 양은 23.4 ± 1.3 ㎍/㎖이었으며 이러한 수치는 천연항산화제인 아스코르브산이 42.68 ± 0.67 ㎍/㎖이었던 것에 비해 매우 높은 항산화 활성을 나타냄을 알 수 있다(표 1).
구분 ROS IC50(활성산소 50% 저해에 필요량)
털여뀌 뿌리 추출물 23.35 ±1.27 ㎍/㎖
아스코르브산 42.68 ± 0.67㎍/㎖
실험예 1-2. 털여뀌 추출물의 퍼옥시나이트라이트 생성 저해 실험
본 발명의 털여뀌 추출물의 퍼옥시나이트라이트(Peroxynitrite; ONOO-) 생성 저해 효과를 확인하기 위하여, 3-모폴리노사이드논이민 하이드로클로라이드(3-Morpholinosydnonimine hydrochloride; SIN-1) 50 uM을 추가한 소듐 포스페이트 버퍼(sodium phosphate buffer, pH7.4) 180㎕와 준비예 1에서 준비한 털여뀌 뿌리 추출물 0.5, 1, 2, 4 ㎕/㎖을 혼합하여 혼합액을 만들었다. 상기 소듐 포스페이트 버퍼는 5 mM KCl, 100 uM 디에틸렌트리아민펜타 아세트산(diethylenetriaminepenta acetic acid) 및 10uM DHR 123(dihydrorhodamine 1, 2, 3)을 함유한 것이다. 이후 상기 혼합액을 485 nm / 530 nm(여기파장/방출파장)에서 플루어레슨스 마이크로플레이트 리더(fluorescence microplate reader)에서 형광 측정하였다.
이후 프리즘5(미국 캘리포니아주 소재 (주)Graphic Pad의 prism5 for windows)의 뉴먼-쿨즈 다중비교 검증(Newman-Keuls Multiple comparison test)에 의한 일원분산분석(one way ANOVA)을 이용하여 통계학적 분석을 시행하였다.
상기 통계학적 분석 결과, 털여뀌 뿌리 추출물은 SIN-1 50uM가 생성한 퍼옥시나이트라이트를 농도 의존적으로 제거하는 것을 확인하였다(도 2). 따라서 털여뀌 뿌리 추출물은 퍼옥시나이트라이트의 생성을 저해하여 항산화 활성을 갖는 것을 확인하였다.
털여뀌 뿌리 추출물의 SIN-1 50uM이 생성하는 활성산소를 50% 저해하는 양은 2.19 ± 0.04 ㎍/㎖이었으며 이와 같은 수치는 비교적 높은 퍼옥시나이트라이트 소거능을 보이는 것을 확인하였다(도 2 참조).
실험예 2 : 털여뀌 추출물의 세포생존율 실험 및 항동맥경화 활성 측정 실험.
실험예 2-1. 털여뀌 추출물의 세포생존율 실험
본 발명의 털여뀌 추출물의 세포생존율을 확인하기 위하여, 생쥐의 대식세포인 Raw 264.7 세포를 아메리칸 타입 컬처 콜렉션(American type culture collection)으로부터 분양받아 실험하였다. 상기 Raw 264.7 세포를 24 웰 플레이트(well plate)에 7 × 104 /well이 되도록 분주하고 16시간 동안 배양하였다. 이 후 상기 배양된 세포에 준비예 1에서 준비한 털여뀌 추출물을 10, 20, 40, 80 uM/㎖의 농도로 처리하고 24시간 동안 배양한 후 3-(4,5-디메틸시아졸-2-닐)-2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide; MTT)를 처리하였다. 이후 살아있는 세포가 생성한 포르마잔(formazan)을 마이크로플레이트 리더(microplate reader)에서 540nm로 흡광도값을 측정하였다. 이후 프리즘5(미국 캘리포니아주 소재 (주)Graphic Pad의 prism5 for windows)의 뉴먼-쿨즈 다중비교 검증(Newman-Keuls Multiple comparison test)에 의한 일원분산분석(one way ANOVA)을 이용하여 통계학적 분석을 시행하였다.
상기 통계학적 분석 결과, 털여뀌 추출물은 10 uM/㎖ 에서 80 uM/㎖ 로 농도가 증가하여도 대조구와 비슷한 수준으로 높은 세포생존율을 나타내 세포독성이 없음을 확인하였다(도 3).
실험예 2-2. 털여뀌 추출물의 항동맥경화 활성 측정 실험
본 발명의 털여뀌 추출물의 항동맥경화 활성 중 동맥경화를 촉진하는 인자인 저밀도지단백(저밀도지방단백질; LDL; Low-density lipoprotein)의 산화 저해 효과를 확인하기 위하여, 50 ~ 100 ㎍의 단백질을 함유하도록 사람의 혈액에서 분리한 LDL을 조제한다. 이후 4 ㎍/㎖(=ppm) , 20 ㎍/㎖(=ppm) 또는 100 ㎍/㎖(=ppm) 농도의 준비예 1에서 준비한 털여뀌 추출물 0.02 ㎖, 10 mM 인산완충액(Phosphate Buffered Saline; PBS) 0.115 ㎖ 및 0.25 mM CuSO4 0.04 ㎖를 상기 조제한 LDL에 혼합하여 반응액 만든 후 상기 반응액을 37℃에서 3시간 동안 반응시켰다. 이후 상기 반응액에 20% TCA(Trichloroacetic acid) 용액 1 ㎖를 가하여 반응을 중지시킨 후 0.05 N NaOH에 녹인 0.67% TBA(Thiobarbituric acid) 용액 1 ㎖를 가하고 95℃에서 15분간 가열 후 15분간 냉각했다.
상기 냉각한 반응액을 3000 rpm에서 15분 동안 원심분리한 후 분리된 상등액 중에 함유된 말론디알데하이드(malondialdehyde; MDA)의 양을 540 nm에서 측정하여 대조군에 대한 저해율을 통계학적으로 분석하였다.
상기 통계학적 분석은 통계 분석 시스템(statistical analysis systems; SAS) 프로그램을 이용하여 p<0.05의 수준에서 일원분산분석(one way ANOVA) 및 던컨의 다중 검정(Duncan's multiple range test)으로 유의성을 검정하였다.
상기 통계학적 분석 결과, 털여뀌 추출물은 농도에 비례하여 LDL 산화 저해 효과가 증가하였으며, 양성대조물질인 아스코르브산(L-ascorbic acid)에 비하여도 유의하게 더 우수한 활성을 나타내는 것을 확인하였다. 특히, 100ppm 농도에서 털여뀌 추출물은 60.5 ± 3.6 %의 LDL 산화 저해율을 보였으나 양성대조물질인 아스코르브산(L-ascorbic acid)은 23.9 ± 0.9 %로 나타나 털여뀌 추출물이 LDL 산화 저해에 대하여 아스코르브산보다 약 2.6배 더 효과적인 것으로 확인되었다(도 4 참조).
사람의 혈액에서 분리한 LDL에 털여뀌 추출물을 4, 20, 100 ppm을 처리하여 LDL의 산화 저해율을 관찰한 결과, 털여뀌 추출물을 처리한 세포와 아스코르브산을 처리한 세포에서 LDL 산화 저해효과가 아스코르브산을 처리한 세포보다 털여뀌 추출물을 처리한 세포에서 LDL 산화 저해율이 더 높은 것으로 관찰되었음을 확인하였다(도 4).
앞서 실시한 실험예를 통하여 알 수 있듯, 털여뀌 추출물은 저밀도지단백(lowdensity lipoprotein; LDL)의 산화를 저해하여 항동맥경화 활성을 갖고 퍼옥시나이트라이트(peroxynitrite; ONOO-) 또는 활성산소(Reaction oxygen species; ROS) 생성을 저해하여 항산화 활성을 갖는 것을 확인할 수 있다.
[ 제조예 ]
제조예 1 : 약학적 조성물의 제조
본 발명의 털여뀌 추출물을 포함하는 약학적 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제조예 1-1. 산제의 제조
털여뀌 추출물 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
제조예 1-2. 정제의 제조
털여뀌 추출물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
제조예 1-3. 캡슐제의 제조
털여뀌 추출물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
제조예 1-4. 환의 제조
털여뀌 추출물 1 g
유당 1.5 g
글리세린 1 g
자일리톨 0.5 g
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1환 당 4 g이 되도록 제조하였다.
제조예 1-5. 과립의 제조
털여뀌 추출물 150 ㎎
대두추출물 50 ㎎
포도당 200 ㎎
전분 600 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 30% 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 섭씨 60 ℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.
제조예 2 : 건강 기능성 식품의 제조.
제조예 2-1. 건강 기능성 식품의 제조
털여뀌 추출물 3000 ㎎
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 제조예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제조예 2-2. 건강 음료의 제조
털여뀌 추출물 3 g
구연산 1000 ㎎
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 ㎖
통상의 건강 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강 기능성 음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 제조예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (8)

  1. 털여뀌(Persicaria orientalis (L.) Spach) 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  2. 털여뀌(Persicaria orientalis (L.) Spach) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화제용 약학적 조성물.
  3. 제 2항에 있어서, 상기 항산화제용 약학적 조성물이 노화방지 또는 피로회복을 특징으로 하는 항산화제용 약학적 조성물.
  4. 제 1항 내지 제 3항 중 선택된 어느 한 항에 있어서,
    상기 털여뀌 추출물이 C1 ~ C4의 알코올 추출물인 약학적 조성물.
  5. 털여뀌(Persicaria orientalis (L.) Spach) 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화 예방 및 개선용 건강 기능성 식품.
  6. 털여뀌(Persicaria orientalis (L.) Spach) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 활성이 있는 건강 기능성 식품.
  7. 제 6항에 있어서 상기 건강 기능성 식품의 항산화 활성으로 노화를 억제하는 것을 특징으로 하는 건강 기능성 식품.
  8. 제 5항 내지 제 7항 중 선택된 어느 한 항에 있어서,
    상기 털여뀌 추출물이 C1 ~ C4의 알코올 추출물인 건강 기능성 식품.
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