KR20140026328A

KR20140026328A - 사이클로스포린 유사체

Info

Publication number: KR20140026328A
Application number: KR1020137012144A
Authority: KR
Inventors: 윌리암 로버트 칼링; 데이비드 아서 스코웬; 마이클 이. 가스트; 마이클 이. 스턴; 크리스토퍼 에스. 샤움버그
Original assignee: 알러간, 인코포레이티드
Priority date: 2010-10-12
Filing date: 2011-10-11
Publication date: 2014-03-05
Also published as: CA2814191A1; JP5805773B2; US20160022765A1; BR112013008749A2; JP2013544786A; RU2013120927A; EP2627663B1; AU2011316689B2; AU2011316689A1; CN103261212A; WO2012051193A1; EP2627663A1; US9561259B2; US20120135939A1; IL225616A0; US9175042B2; MX2013004062A

Abstract

본 명세서에서 개시된 것은 사이클로스포린의 신규한 유사체, 이를 함유하는 약제학적 조성물, 및 안구건조증 및 기타 병태의 치료에서 이의 사용 방법이다.

Description

사이클로스포린 유사체{CYCLOSPORIN ANALOGS}

상호참조

본출원은 2010년 10월 12일에 출원된 미국 가특허출원 일련번호 제61/392,451호에 대하여 우선권의 이익을 주장하고, 이 개시물 전체는 본 명세서에 특이적 참고문헌으로 포함된다.

사이클로스포린은 폴리-N-메틸화 환상 운데카펩티드의 부류이다. 자연발생적 사이클로스포린 ("Cs") 가령 사이클로스포린 A, 및 비-자연적 사이클로스포린 유도체가 있다.

사이클로스포린 A는, 예를 들면, 다음 구조를 가진다:

다음 구조는 사이클로스포린 A의 11 아미노산 잔기를 나타낸다:

본 발명은 다음 식 (I)의 신규한 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:

(I)

본 신규한 식 (I)의 화합물은 "Cs 골격"의 3-위치 아미노산 (사르코신) α-탄소에서의 변형으로부터 얻어지고, 본 명세서에서는 하나 이상의 치환기 A, B, C, 및 D의 정체성에서 서로 상이한 서로 다른 사이클로스포린 (예를 들면, Cs A, Cs C, Cs D, 등)을 지칭한다. 다시 말하면, "Cs 골격"은 3-위치 아미노산 α-탄소에서의 모이어티를 뺀 신규한 식 (I)의 화합물을 지칭한다.

A는

(a) -CH=CHR,

(b) -CH=CH-CH=CHR,

또는

(c) -CH₂CH₂R을 나타내고,

여기서 R는

(a) -CH_3,

(b) -CH₂SH,

(c) -CH₂S-C_n, 여기서 n=1-6,

(d) -CH₂-카르복실

,

(e) 카르복실

,

(f) 알콕시카르보닐

여기서 R = C₁-C₆ 알킬,

또는

(g) -CH₂-알콕시카르보닐

여기서 R = C₁-C₆ 알킬을 나타내고;

B는

(a) -CH₂CH_3,

(b) 1-히드록시에틸,

(c) 이소프로필

또는

(d) n-프로필;

을 나타내고

C는

(a) 이소부틸,

(b) 2-히드록시이소부틸

또는

(c) 1-메틸프로필

을 나타내고;

D는

(a) -CH₃

또는

(b) -CH₂OH을 나타낸다

본 발명의 하나의 구체예에서, 아래에 식 (IA)에서 나타낸 바와 같이 A는 -CH=CHCH_3,B는 -CH₂CH₃, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₃이다:

(IA)

하나의 구체예에서, 아래에 식 (IB)에서 나타낸 바와 같이 A는 -CH=CHCH_3,B는 1-히드록시에틸, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₃이다:

(IB)

하나의 구체예에서, 아래에 식 (IC)에서 나타낸 바와 같이 A는 -CH=CHCH_3,B는 이소프로필, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₃이다:

(IC)

하나의 구체예에서, 아래에 식 (ID)에서 나타낸 바와 같이 A는 -CH=CHCH_3,B는 n-프로필, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₃이다:

(ID)

또다른 구체예에서, 아래에 식 (IE)에서 나타낸 바와 같이 A는 -CH=CHCH_3,B는 -CH₂CH₃, C는 1-메틸프로필, 및 D는 -CH₃이다:

(IE)

하나의 구체예에서, 아래에 식 (IF)에서 나타낸 바와 같이 A는 -CH=CHCH_3,B는 -CH₂CH₃, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₂OH이다:

(IF)

하나의 구체예에서, 아래에 식 (IG)에서 나타낸 바와 같이 A는 -CH=CHCH₃, B는 -CH₂CH₃, C는 2-히드록시 이소부틸, 및 D는 -CH₃이다:

(IG)

식 (I)에서, 다양한 타입의 사이클로스포린 골격의 아미노산은 1 내지 11로 수치적으로 라벨링된다. 상기 변형은 상기 Cs 골격의 위치-3 아미노산 (3-위치에서의 사르코신)의 α-탄소에서 일어난다. 상기 변형은 일반적으로 위치-3 아미노산의 α-탄소에서 수소 원자를 식 (I)의 모이어티로 치환하는 것을 포함하고 여기서:

R₁ 및 R₂은 같거나 또는 서로 다르고 독립적으로

(a) C₁-C₆ 알킬

또는

(b) 모노, 디, 또는 트리불소화 알킬을 나타내고,

(c) R₁ 및 R₂는 자신들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께, 산소로부터 선택된 하나의 다른 헤테로원자를 함유하는 포화된 또는 부분적으로 불포화된 3-7 원 헤테로시클로알킬;

S(O)n, 여기서 n=0, 1, 2;

및 C₁-C₆ 알킬 또는 플루오로알킬로 임의로 치환되는 질소를 형성할 수 있다.

화합물 실시예

식 (I)의 구체예는 다음 식 (I)의 화합물 (위치-3 아미노산의 α-탄소에서의 모이어티만 나타내며; 물결선은 식 (I)의 화합물의 상기 Cs의 나머지를 나타낸다)을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다:

화합물 실시예 1

화합물 실시예 2

화합물 실시예 3

정의

"알킬"은 1 내지 6 탄소 원자를 가지는 1가 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 예시는 메틸, 에틸, 프로필 (예를 들면, 1-프로필, 이소프로필), 부틸 (예를 들면, 1-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸), 펜틸 (예를 들면, 1-펜틸, 네오펜틸), 및 헥실 (예를 들면, 3-헥실)을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

"플루오로알킬 또는 불소화 알킬"은 하나 이상의 불소 기에 의해 치환된, 본 명세서에서 정의된 바와 같은 알킬을 지칭한다.

"알케닐"은 2 내지 6 탄소 원자 및 하나 이상의 이중 결합을 가지는 1가 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 예시는 에테닐, 프로페닐, 및 부테닐을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

"알키닐"은 2 내지 6 탄소 원자 및 하나 이상의 삼중 결합을 가지는 1가 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 예시는 에티닐, 프로피닐 및 부티닐을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

"시클로알킬"은 3 내지 6 탄소 원자를 가지는 1가 포화된 또는 부분적으로 불포화된 환상 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 예시는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 및 시클로헥실을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

"헤테로시클릴"은 1가, 포화된 또는 부분적으로 불포화된 환상 탄화수소 라디칼을 가지는 3 내지 6 링 원자, 링 원자의 적어도 하나는 질소, 산소 및 황으로부터 선택되는 헤테로원자를 지칭한다. 상기 라디칼은 탄소 또는 헤테로원자 상에 존재할 수 있다. 예시는 모르폴리닐, 피페리디닐, 피롤리디닐, 피라닐, 및 피라졸리닐을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

"헤테로아릴"은 질소, 황 및 산소로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 가지는 1가 5-7 원 방향족 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 예시는 이미다졸릴, 피리디닐, 푸릴, 피리미디닐 및 피라지닐을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

상기 알킬, 시클로알킬 및 헤테로시클릴은 본 명세서에서 기술된 하나 이상의 치환기로 독립적으로 치환될 수 있다.

"아미노"은 -NH₂또는 아미드 기를 지칭한다.

"모노알킬아미노"은 -NHR' 기를 지칭하고, 여기서 R'은 본 명세서에서 정의된 바와 같은 알킬을 나타낸다.

"디알킬아미노"은 -NRR' 기를 지칭하고 여기서 R 및 R'은 독립적으로 본 명세서에서 정의된 바와 같은 알킬을 나타낸다.

"히드록실"은 -OH 기를 지칭한다.

"카르복실"은 다음 기를 지칭한다:

.

"알콕시카르보닐"은 다음 기를 지칭한다:

.

여기서 R는 본 명세서에서 정의된 바와 같은 알킬을 나타낸다.

"약제학적으로 허용가능한 염"은 본출원에서 청구된 화합물의 어느 염이되, 이 화합물에 대한 생물학적 효과를 가지고 약제학적 용도에 대해 독성이거나 유해하지 않은 염을 지칭하고; 이들 염은 본 업계에서 널리 공지된 유기 및 무기 반대 이온으로부터 유래할 수 있다.

합성 실시예

본 발명은 다음 비-제한적 합성 실시예에 의해 예시된다.

다르게 나타내지 않는다면, 다음 화학적 약어를 합성 실시예에서 사용한다:

Ac: 아세톤

DCM: 디클로로메탄

LDA: 리튬 디이소프로필아미드

Me: 메틸

THF: 테트라하이드로푸란

식 (I)의 본 화합물에 대한 출발 물질인 상기 Cs 골격을 본 업계에서 입수가능한 합성 반응식 및 시약을 사용하여 제조할 수 있고, 상업적 공급자를 통해 얻을 수 있다. 본 발명의 신규한 화합물의 합성을 위해 사용하는 시약은 상업적 공급자를 통해 또한 얻을 수 있다.

합성 실시예 1

[(R)-(3-모르폴린-4-일-프로필티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A

단계 1: 톨루엔-4-티오설폰산 S-(3-클로로프로필) 에스테르의 합성:

포타슘 티오토실레이트 (50.0g, 221 mmol, 1.0 eq.) 및 1-브로모-3-클로로프로판 (38.0 g, 241 mmol, 1.09 eq.)을 함께 아세톤 (1 L) 내에서 실온에서 72 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 이후 농축하였다. 다음, 혼합물을 디클로로메탄 및 물 사이에서 분배시켰다. 유기 용액을 식염수 (2x)로 세척하고, MgSO₄을 사용하여 건조시키고, 농축하고 톨루엔으로 공비증류하여 54 g 중량의 옅은 황색 오일을 생성하였다 (92%).

1H NMR (CDCL3, ppm) δ 7.84 (d, J=8.4Hz, 2H), 7.37 (d, J=8.2Hz, 2H), 3.59 (t, J=6.1Hz, 2H), 3.15 (t, J=7.0Hz, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.14 (m, J=7.0Hz, 2H).

단계 2: 톨루엔-4-티오설폰산 S-(3-모르폴린-4-일-프로필) 에스테르의 합성

톨루엔-4-티오설폰산 S-(3-클로로-프로필) 에스테르 (61.7 g, 233 mmol, 1.00 eq.), 모르폴린 (22.2 g, 255 mmol, 1.09 eq.) 및 포타슘 카보네이트 (33.8 g, 240 mmol, 1.06 eq.)을 함께 아세토니트릴 (1 L) 내에서 64 시간 동안 50℃에서 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 이후 에틸 아세테이트 및 물 사이에서 분배시켰다. 유기 용액을 물 (2x)로 세척하고, MgSO₄을 사용하여 건조시키고, 농축하여 61.5 g 중량의 밝은 황색 오일을 생성하였다 (84%)

1H NMR (300 MHz, CDCl₃, ppm) δ 7.83 (d, J=8.4Hz, 2H), 7.36 (d, J=8.2Hz, 2H), 3.68 (t, J=4.8Hz, 4H), 3.07 (t, J=7.0Hz, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.39-2.33 (m, 6H), 1.84 (m. 6.7Hz, 2H).

단계 3: [(R)-(3-모르폴린-4-일-프로필티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A의 합성

우선, 디이소프로필아민 (13.3 ml, 95 mmol, 10 eq.)을 THF (238 ml) 내 n-부틸리튬 (헥산 내 2.5 M, 38 ml, 95 mmol, 10 eq.)의 용액에 -78℃에서 질소의 분위기 하에서 부가하고; 얻어진 혼합물을 90 분 동안 교반하였다. 다음, THF (38 ml) 내 사이클로스포린 A (11.4 g, 9.5 mmol, 1.0 eq.; 사용 직전에 톨루엔으로 공비증류적으로 건조된)의 용액을 혼합물에 부가하고, 이를 이후 동일한 조건 하에서 (-78℃ 질소의 분위기 하에서) 2.5 시간 동안 교반하였다. 이후, THF (5 ml) 내 톨루엔-4-티오설폰산 S-(3-모르폴린-4-일-프로필) 에스테르 (13.5 g, 42.8 mmol, 4.5 eq.)를 부가하고; 얻어진 혼합물을 2 시간 동안 교반하면서 실온까지 데워지도록 방치하였다. 이후, 혼합물을 -20℃까지 냉각시키고 아세트산 (6.0 ml, 105 mmol, 11 eq.)을 부가하였다. 혼합물을 밤새 실온까지 데워지도록 방치하였다. 용매를 혼합물로부터 증발시킨 후, 얻어진 혼합물을 에틸 아세테이트 및 포화된 암모늄 클로라이드 용액 사이에서 분배시켰다. 유기 상을 우선 암모늄 클로라이드 용액, 이후 식염수로 세척하고; MgSO₄을 사용하여 건조시키고, 농축하였다. 크루드 생성물을 MPLC (SiO₂, 디에틸 에테르 이후 5% 메탄올/95% 디에틸 에테르 이후 5% (10% 수성 암모니아/90% 메탄올)/95% 디에틸 에테르에 의해 정제하였다. 얻어진 재료를 더욱 HPLC (SiO2, 4.5% MeOH/95.5% 디클로로메탄)에 의해 정제하여 800 mg (6%)의 백색 무정형 고체를 얻었다.

ESMS MH⁺1361.9.

1H NMR (CDCl3, ppm, 진단 프로톤) δ 7.95 (d, J=10Hz, 1H, 아미드 NH), 7.69 (d, J=8Hz, 1H, 아미드 NH), 7.35 (d, J=8Hz, 1H, 아미드 NH), 7.17 (d, J=8Hz, 1H, 아미드 NH), 5.97 (s, 1H, 사르코신 H).

합성 실시예 2

[(R)-(3-에틸이소프로필아미노-프로필티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A

단계 1: 톨루엔-4-티오설폰산 S-[3(에틸이소프로필아미노)-프로필] 에스테르의 합성

톨루엔-4-티오설폰산 S-(3-클로로-프로필) 에스테르 (12.0 g, 45.3 mol, 1.00 eq.), N-에틸이소프로필아민 (4.2 g, 48.0 mmol, 1.05 eq.) 및 포타슘 카보네이트 (6.9 g, 49.9 mmol, 1.10 eq.)을 함께 아세토니트릴 (160 mL) 내에서 60℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 잔사를 에틸 아세테이트 (500 mL) 및 물 (250 mL) 사이에서 분배시켰다. 유기 용액을 식염수 (250 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO₄) 및 얻어진 오일을 MPLC 크로마토그래피에 의해 정제하여 2.98 g 중량의 오일을 얻었다 (21%).

1H NMR (CDCl3, ppm) δ 7.83 (d, J=8Hz, 2H), 7.35 (d, J=8Hz, 2H), 3.08 (t, J=7Hz, 2H), 2.88 (m, J=7Hz, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.39 (m, 4H), 1.75 (m, J=7Hz, 2H), 0.95 (t, 7Hz, 2H), 0.90 (d. 7Hz, 6H).

단계 2: [(R)-(3-에틸이소프로필아미노-프로필티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A

우선, n-부틸리튬 (헥산 내 1.6M, 17.5 ml, 28 mmol, 10 eq.)을 THF (70 ml) 내 디이소프로필아민 (3.92 ml, 28 mmol, 10 eq.)의 용액에 한방울씩 (질소의 분위기 하에서) 0℃에서 부가하였다. 혼합물을 -10℃에서 30 분 동안 교반하고 -78℃까지 질소의 분위기 하에서 냉각시켰다.

다음, THF (10 ml) 내 사이클로스포린 A (3.35 g, 2.8 mmol, 1.0 eq.; 사용 직전에 톨루엔으로 공비증류적으로 건조된)의 용액을 부가하고 반응 혼합물을 동일한 조건 하에서 2.5 시간 동안 교반하였다. THF (10 ml) 내 톨루엔-4-티오설폰산 S-[3-(에틸이소프로필아미노)-프로필] 에스테르 (4.4 g, 13.9 mmol, 5.0 eq.)를 이후 부가하고 얻어진 혼합물을 실온까지 데워지도록 방치하고 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 -78℃까지 냉각시키고 이후 아세트산 (1.8 ml, 31 mmol, 11 eq.)을 거기에 부가하고; 혼합물을 밤새 실온까지 데워지도록 방치하였다. 용매를 증발시키고 얻어진 혼합물을 에틸 아세테이트 (600 mL) 및 포화된 암모늄 클로라이드 용액 (300 ml) 사이에서 분배시켰다. 유기 상을 우선 암모늄 클로라이드 용액 (2x 200 ml), 이후 물 (200 ml)로 세척하고; MgSO₄을 사용하여 건조시키고, 진공에서 농축하여 농후한 오일을 얻었다.

크루드 생성물을 MPLC (SiO₂, 에틸 아세테이트, 이후 10% 메탄올/90% 에틸 아세테이트, 이후 10% (메탄올 내 7M 암모니아)/90% 에틸 아세테이트), 헥산을 사용한 트리터레이션(과량의 시약의 제거), SCX 칼럼의 사용에 의해(남은 CsA의 제거), 및 마지막으로 HPLC (SiO₂, 4.5% MeOH/95.5% 디클로로메탄)에 의해 정제하여 385 mg (10%)의 백색 무정형 고체를 얻었다.

ESMS MH⁺1362.1

1H NMR (500 MHz, CDCl3, ppm, 진단 프로톤) δ 7.95 (d, J=10Hz, 1H, 아미드 NH), 7.68 (d, J=8Hz, 1H, 아미드 NH), 7.32 (d, J=8Hz, 1H, 아미드 NH), 7.18 (d, J=8Hz, 1H, 아미드 NH), 5.87 (s, 1H, 사르코신 H).

합성 실시예 3

[(R)-(3-(4-메틸-피페라진-1-일)-프로필티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A

단계 1: 톨루엔-4-티오설폰산 S-[3-(4-메틸-피페라진-1-일)-프로필] 에스테르의 합성

톨루엔-4-티오설폰산 S-(3-클로로-프로필) 에스테르 (4.9 g, 18.4 mol, 1.00 eq.), N-메틸피페라진 (1.9 g, 19.3 mmol, 1.0 5eq.) 및 포타슘 카보네이트 (2.7 g, 19.4 mmol, 1.05 eq.)을 함께 아세토니트릴 (100 mL) 내에서 실온에서 64 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고 잔사를 에틸 아세테이트 (500 ml) 및 물 (250 ml) 사이에서 분배시켰다. 유기 용액을 물 (2x 200 mL)로 세척하고, MgSO₄을 사용하여 건조시키고, 농축하고 MPLC에 의해 정제하여 2.1 g 중량의 밝은 황색 오일을 얻었다 (36%).

1H NMR (CDCl3, ppm) δ 7.83 (d, J=8Hz, 2H), 7.35 (d, J=8Hz, 2H), 3.05 (t, J=7Hz, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.41 (넓음, 4H), 2.35 (t, J=7Hz, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.39-2.33 (m, 6H), 1.82 (m, 7Hz, 2H).

단계 2: [(R)-(3-(4-메틸-피페라진-1-일)-프로필티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A의 합성

우선, n-부틸리튬 (헥산 내 2.5M, 10.5 ml, 26 mmol, 10 eq.)을 한방울씩 (질소의 분위기 하에서) THF (70 ml) 내 디이소프로필아민 (3.7 ml, 26 mmol, 10 eq.)의 용액에 -78℃에서 부가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 동일한 조건 하에서 교반하였다.

THF (15 ml) 내 사이클로스포린 A (3.2 g, 2.6 mmol, 1.0 eq.; 사용 직전에 톨루엔으로 공비증류적으로 건조된)의 용액을 혼합물에 부가하고 혼합물을 동일한 조건 하에서 2 시간 동안 교반하였다. THF (15 ml) 내 톨루엔-4-티오설폰산 S-[3-(4-메틸-피페라진-1-일)-프로필] 에스테르 (4.3 g, 13 mmol, 5 eq.)을 이후 부가하고 얻어진 혼합물을 실온까지 데워지도록 방치하고 90 분 동안 교반하였다. 혼합물을 -70 ℃까지 냉각시키고 이후 아세트산 (1.66 ml, 30 mmol, 11 eq.)을 부가하였다. 혼합물을 밤새 실온까지 데워지도록 방치하였다. 다음, 용매를 혼합물로부터 증발시키고 얻어진 혼합물을 에틸 아세테이트 (500 mL) 및 포화된 암모늄 클로라이드 용액 (250 mL) 사이에서 분배시켰다. 유기 상을 우선 암모늄 클로라이드 용액 (200 mL), 이후 식염수 (200 mL)로 세척하고, MgSO₄을 사용하여 건조시키고 진공에서 농축하였다.

크루드 생성물을 MPLC (SiO2, 디에틸 에테르, 이후 10% 메탄올/90% 디에틸 에테르, 이후 10% (10% 수성 암모니아/90% 메탄올)/90% 디에틸 에테르), 헥산을 사용한 트리터레이션(과량의 시약의 제거), SCX 칼럼의 사용에 의해(남은 CsA의 제거) 및 마지막으로 HPLC (SiO2, 6% MeOH/94% 디클로로메탄)에 의해 정제하여 백색 무정형 고체를 얻었다.

ESMS MH⁺1374.89.

1H NMR (500 MHz, CDCl3, ppm, 진단 프로톤) δ 7.92 (d, J=10Hz, 1H, 아미드 NH), 7.67 (d, J=8Hz, 1H, 아미드 NH), 7.30 (d, J=8Hz, 1H, 아미드 NH), ), 7.18 (d, J=8Hz, 1H, 아미드 NH), 5.86 (s, 1H, 사르코신 H).

시험 데이터

안정성 데이터

식(I)의 화합물은 메탄올성 용액 내에 안정하게 남아 있는 장점을 나타낸다. 이는 식(I)의 화합물을 포함하는 제제가 바람직한 저장 기간을 가지는 것을 나타내고, 이는 안과용 약제에 대해 중요한데 왜냐하면 안과용 약제는 통상 용액, 겔 등으로서 제제화되기 때문이다. 본발명의 화합물의 실시예 1-3의 안정성을 입증하기 위해, MeOH 내 에피머화 데이터를 아래 표 1에서 [(R)-(3-디에틸아미노에틸티오-Sar]³ 사이클로스포린 A의 데이터와 비교한다.

표 1

비록 [(R)-(3-디에틸아미노에틸티오-Sar]³ 사이클로스포린 A가 본발명의 실시예 1-3과 유사한 생물학적 활성을 가지고 있지만 (아래 표 2 참조), 여기서 제시된 데이터는 실시예 1-3의 화합물이 용액 내에서 상당히 더욱 안정하다는 것을 나타낸다. [(R)-(3-디에틸아미노에틸티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A는 수성 및 메탄올성 용액 모두 내에서 불안정하고 급속히 에피머화하여 R- 및 S- 이성질체의 혼합물이 얻어지는 것으로 발견되었다. 메탄올성 용액 내에서, 평형비는 ~4:1 R/S이다. 500MHz nmr 스펙트럼의 비교에 의해 에피머화의 상대 비율의 분석을 수행하였다. 사르코신 중심(황 원자에 인접한)에 부착된 프로톤은 R-이성질체에서 ~δ 5.9에서 나타나지만, S-이성질체 내에서는 ~δ 6.5쪽으로 다운필드로 이동한다.

표 2

데이터를 얻음에 있어서의 이후의 일반 절차:

*50℃에서 메탄올 내에서 수행됨. 500MHz NMR에 의해 측정되는 전환.

** 프로테아제-없는 PPlase 어세이

프로테아제-없는 PPlase 어세이는 효소 시클로필린 A에 의해 촉매화된, 펩티드 기질의 cis에서 trans로의 전환 속도를 측정한다. 저해제의 부가는 촉매화된 속도를 지연시키고 K_i 값이 얻어진다.

재료

어세이 완충액: 0.2 μm 필터를 통해 여과시킨 35 mM HEPES pH 7.8. 사용 이전에 매일 50 μM DTT를 부가하고 이후 상기 완충액을 얼음 상에 저장하였다.

효소: 인간 재조합 Cyp A (Sigma C3805) 효소를 효소 희석 완충액 (20 mM HEPES pH 7.8, 40% 글리세롤, 50 μM DTT 및 1 μM BSA)으로 1 μM까지 희석하고 -20 ℃에서 저장하였다.

기질: SUC-AAPF-pNA (Bachem AG, L-1400로부터), 트리플루오로에탄올 내 0.5 M LiCl 20mg/ml을 제조하였다.

방법

큐벳 홀더, 교반기 및 10.0 ±0.1 ℃의 교반 큐벳 온도를 유지하기 위한 냉각기로 구성된 Agilent 8453 분광광도계를 사용하여 모든 판독을 행하였다. 온도는 온도 프로브를 사용하여 모니터링한다. 시험 화합물의 UV 분해를 방지하기 위해, 광 경로 내 유리 슬라이드를 사용하여 290 nm 아래의 광을 차단하였다. 1.5 ml의 어세이 완충액을 3ml 석영 큐벳 내에 넣고 교반(격하게 그러나 캐비테이션을 생성하지 않도록)하면서 10.0 ±0.1℃까지 냉각시켰다. 상기 저해제를 100% DMSO 내에 희석하고, 이후 상기 어세이 내 0.5% DMSO의 최대 최종 농도까지 상기 어세이에 부가하였다. 블랭크 스펙트럼을 얻고, 이후 3 μL의 효소를 부가하고 (2 nM 최종 농도) 및 이후 3 μL 기질 (60 μM 최종 농도)을 부가하였다. 흡광도를 330 nm에서 300s 또는 블랭크 런에 대해 500s 동안 측정하였다 (주의: 상기 기질은 한번에 재빨리 주사로 부가되고 측정은 혼합 오차를 최소화하기 위해 즉시 시작되어야 한다).

저해제의 각각의 농도에 대해, 흡광도 데이터에 대해 일차속도식을 피팅하여 속도 상수를 얻었다 (최초 10 내지 15초는 커브의 이 부분에서 혼합 원인 오차로서 제외시켰다). 촉매 속도 상수에서 배경 속도 상수를 빼서 촉매 속도를 계산하였다. 촉매 속도 상수 대 저해제 농도를 사용하여 지수 곡선을 생성하여 저해제에 대한 K_i 값을 얻었다.

**칼시뉴린 포스파타제 (CaN) 어세이

칼시뉴린은 활성화에 의해 T 림프구 활성화에 중요한 활성화된 T 세포 (NFAT)의 핵인자의 구성원을 탈인산화시키는 세린-트레오닌 단백질 포스파타제이다. 시클로필린 A ("Cyp A")에 결합된 Cs A는 칼시뉴린 활성을 저해하여, 면역억제 효과를 유발한다. 비록 Cs A는 Cyp A에 결합된 때에만 칼시뉴린을 저해하지만, 어떤 Cs A 유사체는 Cyp A의 부재 하에도 또한 칼시뉴린에 결합할 것이다. 사이클로스포린 유사체인 예시적 식 (I)의 화합물의 면역억제 가능성을 연구하기 위해, 칼시뉴린 활성을 저해하는 그의 능력을 Cyp A의 존재 및 부재 하에 측정하였다.

사용된 CaN 어세이 키트는 칼시뉴린 포스파타제 활성을 측정하기 위한 비색 어세이에 기초하고, 상업적으로 입수가능하다 (Enzo Life Sciences 및 Calbiochem). 칼모듈린은 또한 칼시뉴린 활성에 대해 필요하고 RII 포스포펩티드는 칼시뉴린에 대한 효과적인 펩티드 기질로서 사용된다. 본발명자들은 상기 방법을 변형하여 상기 저해제와 1:1로 Cyp A의 부가를 통하여 Cyp A-의존성 및 Cyp A-비의존성 칼시뉴린의 저해의 측정을 가능하게 하였다. 방출된 유리 포스파테이트의 검출은 전통적인 말라카이트 그린(Malachite green) 어세이에 기초한다.

사용된 재료

Enzo Life Sciences CaN 어세이 키트: BML-AK804

2X 어세이 완충액: 100mM Tris, pH7.5, 200mM NaCl, 12mM MgCl₂, 1mM DTT, 0.05% NP-40, 1mM CaCl₂)

말라카이트 그린( Malachite Green ): BIOMOL Green^TM 시약

칼모듈린 (인간, 재조합):을 얼음 상에 녹이고, 2X 어세이 완충액으로 1:50 희석하고, 이후 얼음 상에 저장하였다.

칼시뉴린:을 재빨리 녹이고, 즉시 얼음 상에 저장하고 1X 어세이 완충액으로1:12.5 희석하고, 이후 얼음 상에 저장하였다.

R-II 기질: 915 μL 초순수 (UPW)를 상기 1.5 mg 바이알 기질에 부가하여 0.75mM의 최종 농도를 얻었다.

저해제: 100% DMSO 내 2.5 mM 저해제.

Cyp A: 재조합 인간 Cyp A (Sigma C3805), 1mg/ml

방법

저해제 희석: 저해제 화합물을 5x 최종 어세이 농도에서 폴리프로필렌 저-결합 96 웰 플레이트 내에서 UPW 내에 희석하였다. 'Cyp A가 없는' 샘플에 대해 이중으로 저해제의 4-점 희석 시리즈를 제조하여 10, 1, 0.1 및 0.01 μM의 최종 어세이 농도를 얻었다. 'Cyp A가 있는' 샘플에 대해, 7-점 희석 시리즈를 제조하여 CypA와 상기 저해제의 1:1 복합체를 얻었고; 상기 저해제 및 10, 3.33, 1.11, 0.37, 0.12, 0.04, 0.014 μM의 Cyp A 최종 어세이 농도를 제조하였다. Cs A 저해제 대조구를 또한 제조하여 10 μM Cyp A가 있는 및 없는 10 μM Cs A의 최종 농도를 얻었다.

어세이 설정: 상기 키트와 함께 제공된 절반 면적 96 웰 플레이트를 사용하여, 10 μl UPW를 이중 웰에 부가하여 비-저해 대조구를 제공하였다. 10 μl의 상기 저해제 또는 상기 저해제/Cyp A 복합체를 상기 적절한 샘플 웰에 부가하였다. CaM을 가지는 25 μl의 상기 2x 어세이 완충액을 모든 웰에 부가하고, 이후 5 μl의 CaN를 5 μL 1x 어세이 완충액을 부가한 복제본 '칼시뉴린 없는 블랭크' 웰을 제외한 모든 웰 (웰당 40 U 최종 농도)에 부가하였다. 상기 어세이 플레이트를 오븐 내에 30℃에서 15 분 동안 배치하여 반응물 온도까지 평형화시켰다. 10 μl RII-펩티드 (0.15 mM 최종 농도)의 부가에 의해 반응을 시작하였다. 반응이 선형인 약 60분 동안의 시간 동안 30℃에서 반응이 진행하도록 방치하였다. 이후 100μl의 상기 말라카이트 그린(Malachite Green) 시약의 부가에 의해 반응을 종료시켰다. 15-30 분 동안 실온에서 색상이 발현되도록 하고 이후 플레이트 판독기 (분자 장치 - SpectraMax M5)을 사용하여 620 nm에서 흡광도를 측정하였다. 모든 흡광도 판독치로부터 '칼시뉴린 없는 블랭크'을 빼고 Log₁₀ 저해제 농도에 대해 배경 보정된 흡광도를 플로팅함에 의해 데이터를 분석하였다. GraphPad Prism Software을 사용하여 상기 데이터에 대해 에스자형-용량 반응 곡선을 피팅하였다.

***혼합림프구 반응 ("MLR") 어세이

MLR 어세이는 시험 화합물의 면역억제 가능성을 추정하는 또다른 수단이다. 6-8주령 암컷 C57BL/6 및 BALB/c 마우스를 National Cancer Institute의 Frederick Cancer Research and Development Center (Frederick, MD)로부터 얻었다. 모든 마우스로부터 비장을 무균적으로 수확하고 파편이 침전되도록 하면서 동결 유리 슬라이드로 세포를 분해하고, 완전 배지로 이 세포를 두번 세척하였다. 완전 배지는 10% 가열-불활성화된 태아소혈청 (FBS; Atlanta Biologicals, Lawrenceville, GA), 100 μg/mL 스트렙토마이신, 100 U/mL 페니실린 G, 0.25μg/mL 암포테리신 B (HyClone), 2 mM L-글루타민 디펩티드 (HyClone), 및 2 x 10^-5 M 2-메르캅토에탄올 (Sigma)로 보충된 25 mM HEPES 완충액 (HyClone, Logan, UT)을 함유하는 RPMI 1640 배지로 구성되었다. 세포를 두번 세척하고 완전 배지 내에 재현탁시켰다. Beckman Coulter Z-1 입자 계수기 (Fullerton, CA)을 사용하여 세포 계수(count)를 수행하였다. Accuri C6 유세포계산기 (Ann Arbor, MI)을 사용하여 프로피듐 요오드 (PI) 염색에 의해 세포 생존능력을 결정하였다.

C57BL/6 (H-2^b) 및 BALB/c (H-2^d)로부터의 비장 세포를 응답자(responder) (R) 및 자극자(stimulator) (S) 세포로 각각 사용하였다. 각각의 웰이 2 x 10⁵ R 및 8 x 10⁵ S 세포를 함유하도록 96-웰 평판 마이크로적정 플레이트 (Costar, Cambridge, MA) 내에 삼중으로 플레이팅하였다. 가습된 5% CO₂ 내에서 37℃에서 5일간 Cs A, 시험 화합물, 또는 배지의 다양한 농도의 부재 또는 존재 하에서 배양물을 배양하고, 배양의 최종 16시간 동안 ³H-티미딘 (³H-TdR)으로 펄스를 주고, Brandel 96-웰 세포 수확기 (Gaithersburg, MD)를 사용하여 수확하였다. Wallac 1450 Microbeta TriLux 신틸레이션 계수기 (Turku, Finland) 내에서 필터 매트 상의 방사활성을 계수함으로써 증식을 측정하였다. 상기 S 세포를 2 x 10⁵ 세포/웰에서 5 μg/mL PHA와 함께 배양함에 의해 x-선 조사에 의한 효율적인 불활성화를 입증하는 대조를 수행하였다. 이들 대조 배양물을 상기 MLR에 대해 기술된 것과 동일한 조건 하에서 3일간 배양하고; 상기한 바와 동일한 방식으로 림프구증식을 결정하였다.

치료 방법

본 발명의 조성물은 안구건조증을 겪는 환자를 치료하고, 안검염 및 마이봄샘 질환을 치료하고, 눈의 각막 또는 기타 표면 상의 수술로 인해 손상된 각막 감수성을 회복시키고, 알레르기성 결막염 및 봄철 각결막염을 치료하고, 익상편(ptyregia), 이식편 대 호스트 질환의 안구 증상, 안구 알레르기, 아토피성 각결막염, 봄철 각결막염, 포도막염, 전방 포도막염, 베체트병, 스티브 존슨 증후군, 안구 반흔성 유천포창, 바이러스성 감염에 의해 야기된 만성 안구 표면 염증, 단순포진성 각막염, 안구 주사(ocular rosacea), 검열반을 치료하고, 각막 이식 거부를 예방하기 위해 사용될 수 있다.

국제 안구건조증 워크샵 (International Dry Eye Workshop, DEWS)은 안구건조증을 "눈물막의 삼투압증가 및 안구 표면의 염증을 동반하고, 안구 표면에 잠재적 손상과 함께 불쾌감, 시각 장애 및 눈물막의 증상을 초래하는 눈물 및 안구 표면의 다요인 질환"이라고 정의한다. 안구건조증은 눈물 결핍 또는 눈물의 과도한 증발에 의해 야기되는 건성 각결막염과 같은 병태를 포함한다.

안검염은 피부 및 그의 관련 구조(모발 및 피지선), 점막피부 접합부 및 마이봄샘을 수반하면서, 전방 및 후방 안검연의 염증을 유발하는 만성 장애이다. 안검염은 결막, 눈물막 및 경과 단계에서 각막 표면에도 영향을 미칠 수 있고 안구건조증과 관련될 수 있다. 안검염은 전방 또는 후방 안검염으로 흔히 분류되고, 전방 안검염은 눈꺼풀의 속눈썹 포함 영역에 영향을 미치고, 후방 안검염은 주로 마이봄샘 구멍에 영향을 미친다.

마이봄샘 질환은 가장 흔하게는 다음 세가지 형태: 1차 마이봄샘염, 2차 마이봄샘염, 및 마이봄샘 지루 중의 하나로서 발생한다. 마이봄샘 지루는 염증의 부재 하에 과도한 마이봄샘 분비를 특징으로 한다 (과분비 마이봄샘 질환). 1차 마이봄샘염은 반대로 정체되고 농축된 마이봄샘 분비에 의해 구별된다 (폐쇄성 과분비 마이봄샘 질환). 2차 마이봄샘염은 마이봄샘이 전방 안검연 안검염으로부터 점처럼 2차 감염되는 국소적 염증성 반응을 나타낸다.

손상된 각막 감수성은 굴절 수술, 가령 광굴절 각막절제술, 레이저 각막 절삭 성형술 (laser assisted sub-epithelium keratomileusis, LASEK), EPI-LASEK, 맞춤형 경상피 비접촉 삭마, 또는 각막 신경이 분리되는 기타 수술 후 흔히 발생한다. 손상된 각막 감수성은 또한 가령 HSV-1, HSV-2, 및 VZV 바이러스에 의한 바이러스성 감염 후 일어날 수 있다. 손상된 각막 감수성을 가진 환자는 눈물 생산이나 증발은 정상일 수 있을 지라도 눈이 건조함을 느낀다고 종종 불평하여, 그러한 환자에서의 "건조"은 실질적으로 각막 신경이 수술에 의해 분리되거나 바이러스성 감염 후 염증에 걸렸을 때 발생하는 각막 신경증의 형태일 수 있다.

알레르기성 결막염은 하나 이상의 알레르겐에 대한 과민성으로부터 발생하는 결막의 염증이다. 알레르기성 결막염은 급성, 간헐성 또는 만성일 수 있다. 알레르기성 결막염은 계절성으로, 즉, 일년 중 특정 시기에만 발생하거나, 혹은 연중, 즉 일년을 통틀어 만성적으로 발생한다. 계절성 및 연중 알레르기성 결막염의 증상은, 결막의 염증 이외에, 유루, 눈물흘림, 결막혈관 확장, 가려움, 유두상 증식, 결막 부종, 눈꺼풀 부종 및 눈으로부터의 방출을 포함한다. 상기 방출은 밤 수면 후 눈에 걸쳐 크러스트를 형성할 수 있다.

아토피성 각결막염은 종종 시력 손상을 유도하는 알레르기성 결막염의 만성적 심각한 형태이다. 증상은 가려움, 작렬감, 통증, 발적, 이물감, 광민감성 및 흐릿한 시각을 포함한다. 종종 특히 밤 수면으로부터 깨어난 직후에 방출이 있고; 이 방출은 섬유성이고, 끈끈하고 점액성일 수 있다. 상부 결막보다 하부 결막이 종종 더 현저히 침범된다. 결막은 약한, 부종성 및 무특징성으로부터, 유두상 과증식, 상피하 섬유증, 원개 단축, 눈썹 난생증, 내번, 눈썹탈락증을 포함하는 경과된 질환의 특징을 가지는 범위에 걸칠 수 있다. 어떤 환자에서, 점상 상피 침식, 각막 신생혈관형성, 및 시력을 손상시킬 수 있는 각막병의 기타 특징까지 질환이 진행한다. 대표적으로 결막에서 고블렛 세포 증식, 상피 위관 형성 및 상피에서 탈과립 호산구 및 비만 세포의 수 증가가 있다. CD25+T 림프구, 마크로파지, 및 수상 세포 (HLA-DR.sup.+, HLA-CD1+)는 고유질에서 상당히 증가된다.

아토피성 각결막염처럼, 봄철 각결막염은 알레르기성 결막염의 심각한 형태이지만, 하부 결막보다는 상부 결막에 더욱 현저히 침범하는 경향이 있다. 봄철 각결막염은 두가지 형태로 일어난다. 안검 형태에서는, 사각의, 딱딱하고, 평평하고, 촘촘히 패킹된 유두가 존재하고; 안구(각막윤부) 형태에서는 각막주변 결막이 과증식되고 회색으로 된다. 두 형태 모두 종종 점액 방출을 동반한다. 각막 상피 손상은 중앙 각막 플라크 및 트란타스 점(Trantas' dots)과 같이, 통증 및 광공포증을 수반하면서 발생할 수 있다.

포도막염은 포도막의 염증이고, 미국에서 시력 손상의 약 10%의 원인이다. 수정체과민성 안내염은 인간 자가면역 질환이다. 전포도막염은 눈의 전체 포도(혈관)층의 염증을 지칭한다. 후방 포도막염은 일반적으로 맥락 망막염을 지칭하고, 전방 포도막염은 홍채모양체염을 지칭한다. 이들 염증의 염증 생성물(즉, 세포, 피브린, 과다 단백질)은 눈, 즉, 전방, 후방 및 수정체 공간의 유체 공간에서 흔히 발견되고 더불어 염증 반응에 밀접하게 수반되는 조직을 침윤한다. 포도막염은 자가면역 장애, 가령 류마티스성 관절염, 베체트병, 강직성 척추염, 및 유육종증의 구성요소로서; 공지된 병인과 연관되지 않은 분리된 면역 매개 안구 장애, 가령 평면부염, 홍체모양체염, 등으로서; 항체-항원 복합체가 포도 조직에 침착되는 것을 유발하는 특정 전신 질환 이후, 눈에 대한 수술 또는 외상적 손상 이후에 발생할 수 있다. 이들 장애와 함께 비-감염성 포도막염을 나타낸다.

수정체과민증은 원인 항원에 렌즈가 있는 포도막염의 심각한 형태이다. 렌즈 단백질은 출생 이전부터 렌즈 캡슐에 의해 정상적으로는 제거된다. 이들 단백질이 손상에 의해 또는 수술에 의해 또는 종종 백내장 발별 도중 눈 내로 방출될 때, 이들은 강한 항원성이 되어 자가면역 반응을 유발할 수 있다. 만약 반응이 온화한 경우 만성 포도막염으로 보인다. 만약 빠르게 진행하면, 눈은 모든 부분에서 심각하게 염증이 생긴다. 후자인 반응을 수정체과민증이라고 칭한다.

포도막염은 구강 및 생식기 궤양, 피부, 혈관, 관절 및 신경학적 발현을 또한 특징으로 하는 다중-전신 염증성 장애인 베체트병의 현저한 특징이다.

주사(Rosacea)는 확인된 원인이나 치료법이 없는 만성적이고 흔한 피부 장애이다. 주사의 병인은 여러 원인이라고 생각된다. 가능한 원인은 모낭진드기(demodex folliculorum mite)에의 노출, 위장관질환 또는 혈관확장 장애, 및 다이어트 또는 일광과 같은 다른 유발원인을 포함한다. 환자는 염증성 구진, 부종, 모세혈관확장증, 딸기코, 및 안구 증상을 포함하는 다양한 증상을 나타낼 수 있다. 주사의 안구 징후는 전방 안검염을 포함하는 안검염, 결막염, 홍체염, 홍체모양체염, 각막염, 마이봄샘 기능부전, 말초혈관확장증, 홍진, 선립종안검맥립종, 맥립종, 안검간 충혈, 결막 충혈, 모양체 기저 충혈, 안구 충혈, 크러스트, 슬리브(sleeves), 및 표층점모양각막염을 포함한다. 안구 증상은 비특이적이고 작렬감, 눈물흘림, 눈물 분비 감소, 충혈, 및 이물 또는 모래 같은 또는 건조한 느낌, 자극, 가려움, 흐린 시각, 광감수성, 눈물어린 눈, 충혈된 눈, 작렬감, 말초혈관확장증, 안검연의 불규칙성, 및 마이봄샘 기능부전을 포함할 수 있다.

검열반은 결막 상에 형성하는 양성, 황색을 띤 갈색의 증식성 성장이다. 검열반은 눈의 자극 및 긁힘, 안구건조증, 결막의 염증 및 눈의 효과 출현을 초래할 수 있다. 염증에 걸린 검열반은 안구 자극을 유발하거나 보기 흉하게 되고, 수술적 제거를 필요로 할 수 있다. 그러나, 수술 후 반흔은 검열반으로서 미용적으로 불쾌할 수 있고 검열반 재성장은 수술 제거 이후에 발생할 수 있다.

동종이계 골수 이식(Allogeneic bone marrow transplantation, BMT)은 악성 및 비-악성 혈액학적 질환에 대해 널리-확립된 치료법이고, 매년 수만명의 환자에서 수행된다. 줄기 세포 이식편 내 성숙한 도너 T 세포가 유리한 면역 효과의 주요 매개자이지만, 이들은 BMT에서의 이환과 사망의 주요 원인인 이식편-대-호스트 질환 (GVHD)의 유도의 원인이다. GVHD는 이식된 도너-유래 T 세포가 수령자 항원-제시 세포에 의해 발현되는 단백질을 인식할 때 일어난다. 따라서, 이러한 인식은 도너 T-세포 활성화, 증식 및 분화를 유도하여, 수령자 표적 조직에 대한 세포 및 염증 공격을 유도한다. 급성 또는 만성 GVHD는 BMT 후 100일 이내에 발생하고 피부염, 장염 및 간염을 유도한다. 안구 증상은 흐린 시각, 이물감, 작렬감, 심한 광감수성, 만성 결막염, 안구건조증, 및 눈 통증을 포함한다.

약제학적 조성물

본 발명은 또한 일반식 (I)의 적어도 하나의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이고, 상기 화합물은 단독이거나 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제와 조합하여 존재한다. "약제학적으로 허용가능한 부형제"은 상기 조성물의 활성 성분과 적합성이고 상기 약제학적 조성물을 투여받은 사람에게 유해하지 않은 것이다. 그러한 적합한 부형제의 두개 이상의 혼합물이 사용될 수 있다.

외용 안구 적용을 위해, 활성 성분으로서의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료적으로 유효한 양을, 종래 안과적으로 허용가능한 약제학적 부형제과 조합하고, 외용 안과 용도에 적합한 단위 투여 형태를 제조함에 의해 제조될 수 있다. 치료적으로 유효한 양은 대표적으로 액체 제제 내에서 약 0.0001 및 약 5% (w/v) 사이, 바람직하게는 약 0.001 내지 약 1.0% (w/v)이다. 본발명의 활성 화합물의 실제 투여량은 특정 화합물, 치료될 병태에 의존하고; 적절한 투여량은 본업계에서의 통상의 지식을 가진 자의 지식의 충분한 범위 이내이다.

미국 특허 제 5,474,979호는 그 전체가 본명세서에 참고로 포함되고, 안과적으로 허용가능한 약제학적 부형제의 예시를 제공한다. 상기 특허는 Allergan, Inc에 의해 제조되는 Restasis®, 사이클로스포린 A 0.05%에서 사용되는 비히클을 개시한다.

Claims

식 (I)의 화합물:
(I)

A는
-CH=CHR, -CH=CH-CH=CHR, 또는 -CH₂CH₂R을 나타내고, 여기서 R는 -CH₃ _, -CH₂SH; -CH₂S-C_n, 여기서 n=1-6; -CH₂-카르복실, 카르복실;

여기서 R=C₁-C₆ 알킬;
또는

여기서 R=C₁-C₆ 알킬을 나타내고;
B는 -CH₂CH₃ _, 1-히드록시에틸, 이소프로필 또는 n-프로필을 나타내고;
C는 이소부틸, 2-히드록시이소부틸 또는 1-메틸프로필을 나타내고;
D는 -CH₃ 또는 -CH₂OH을 나타내고;
R₁ 및 R₂은 같거나 또는 서로 다르고 독립적으로 C₁-C₆ 알킬 또는 모노, 디, 또는 트리불소화 알킬을 나타내고;
R₁ 및 R₂는 자신들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께, 산소로부터 선택된 하나의 다른 헤테로원자를 함유하는 포화된 또는 부분적으로 불포화된 3-7 원 헤테로시클로알킬;
S(O)_n, 여기서 n=0,1,2;
및 C1-C6 알킬 또는 플루오로알킬로 임의로 치환되는 질소를 형성할 수 있음.
제 1항에 있어서, 다음으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 화합물:
[(R)-(3-모르폴린-4-일-프로필티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A;
[(R)-(3-에틸이소프로필아미노-프로필티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A;
[(R)-(3-(4-메틸-피페라진-1-일)-프로필티오)-Sar]³ 사이클로스포린 A;
및 상기 화합물 중 어느 것의 약제학적으로 허용가능한 염.
제 1항에 있어서, A는 -CH=CHCH₃ _,B는 -CH₂CH₃, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₃인화합물.
제 1항에 있어서, A는 -CH=CHCH₃ _,B는 1-히드록시에틸, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₃인 화합물.
제 1항에 있어서, A는 -CH=CHCH₃ _,B는 이소프로필, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₃인 화합물.
제 1항에 있어서, A는 -CH=CHCH₃ _,B는 n-프로필, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₃인 화합물.
제 1항에 있어서, A는 -CH=CHCH₃ _,B는 CH₂CH₃, C는 1-메틸프로필, 및 D는 -CH₃인 화합물.
제 1항에 있어서, A는 -CH=CHCH₃ _,B는 -CH₂CH₃, C는 이소부틸, 및 D는 -CH₂OH인 화합물.
제 1항에 있어서, A는 -CH=CHCH₃, B는 -CH₂CH₃, C는 2-히드록시 이소부틸, 및 D는 -CH₃인 화합물.
제 1항에 따른 적어도 하나의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물이되, 상기 화합물은 단독이거나 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제와 조합하여 존재하는 약제학적 조성물.
제 1항에 따른 적어도 하나의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물이되, 상기 화합물은 단독이거나 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제와 조합하여 존재하고, 여기서 상기 조성물 내 상기 화합물의 농도는 약 0.01 내지 약 0.05 중량%인 약제학적 조성물.
안구건조증, 안검염, 마이봄샘 질환, 알레르기성 결막염, 아토피성 및 봄철 각결막염, 익상편(ptyregia), 이식편 대 호스트 질환의 안구 증상, 안구 알레르기, 아토피성 각결막염, 봄철 각결막염, 포도막염, 전방 포도막염, 베체트병, 스티브 존슨 증후군, 안구 반흔성 유천포창, 만성 안구 표면 염증 바이러스성 감염에 의해 야기된, 단순포진성 각막염, 안구 주사(ocular rosacea), 검열반으로부터 선택되는 병태를 치료하고, 각막 이식 거부를 예방하고, 및 상기 각막 또는 눈의 기타 표면 상의 수술로 인해 손상된 각막 감수성을 회복하기 위한 방법이되, 상기 방법은 제 1-11항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 투여하는 것을 포함하는 방법.
제 12항에 있어서, 포유동물은 인간인 방법.