KR20140023193A - Skin whitening and anti-oxidative composition containing boesenbergia rotunda extract - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a skin whitening and anti-oxidative composition containing a Boesenbergia rotunda extract as an effective component. The Boesenbergia rotunda extract of the present invention inhibits the generation of melanin, has an anti-oxidative action, and has no cytotoxicity to be used as a skin whitening and anti-oxidative composition.

Description

보센벌지아 로툰다 추출물을 함유하는 피부 미백 및 항산화 조성물{Skin Whitening and Anti―oxidative Composition Containing Boesenbergia rotunda Extract}Skin Whitening and Anti-oxidative Composition Containing Boesenbergia rotunda Extract

본 발명은 보센벌지아 로툰다(Boesenbergia rotunda) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백 및 항산화용 조성물에 관한 것이다.
The invention beam senbeol Jia rotunda (Boesenbergia rotunda ) relates to a composition for skin whitening and antioxidant comprising the extract as an active ingredient.

사람의 피부색을 결정하는 데는 여러 요인들이 관여하는데, 그 중에서도 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께, 카로티노이드 및 빌리루빈 등의 인체 내외의 색소 함유 유무 등의 요인들이 중요하다. 특히, 가장 중요한 요인은 인체내의 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌(melanin)이라는 흑색색소이다. 이 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비 및 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인 등이 영향을 미친다.Many factors are involved in determining the skin color of humans, including the activity of melanocytes that make melanin, the distribution of blood vessels, the thickness of the skin, and the presence or absence of pigments in the body, such as carotenoids and bilirubin. It is important. In particular, the most important factor is the black pigment called melanin (melanin) produced by the action of various enzymes such as tyrosinase in melanocytes in the human body. The formation of this melanin pigment is influenced by genetic factors, physiological factors related to hormone secretion and stress, and environmental factors such as ultraviolet irradiation.

이러한, 멜라닌은 피부 기저층에 존재하는 멜라노사이트 내에서 합성되며, 이 경로에서 가장 중요한 효소는 티로시네이즈(tyrosinase)이다. 생성된 멜라닌은 멜라노좀(melanosome) 상태로 주위의 케라티노사이트(keratinocyte)로 이동되며 각질화에 의해 제거된다. 하지만, 이런 과정이 호르몬이나 외적 환경으로 인해 원활히 진행되지 못할 경우 기미 등 색소침착이 생기게 된다.This melanin is synthesized in melanocytes present in the basal layer of the skin, and the most important enzyme in this pathway is tyrosinase. The resulting melanin is transferred to the surrounding keratinocytes in the melanosome state and removed by keratinization. However, if this process is not progressed smoothly due to hormones or external environment, pigmentation such as blemishes may occur.

특히, 기미, 주근깨 및 색소침착 등과 같은 피부색소 이상 침착 증상과 자외선 노출 등에 의해 발생된 과도한 멜라닌 색소 침착을 치료 또는 경감시켜주기 위해서 이전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체 및 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합사용하여 왔는데, 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안정성 문제, 화장료 배합시 제형 및 안정성 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.In particular, ascorbic acid, kojic acid, arbutin, hydroquinone, glutathione, or the like in order to treat or alleviate excessive melanin pigmentation caused by skin pigment abnormality symptoms such as blemishes, freckles and pigmentation, and UV exposure, etc. Derivatives and substances having tyrosinase inhibitory activity have been used in cosmetics and pharmaceuticals, but their use is limited due to insufficient whitening effects, stability problems on the skin, formulation and stability problems when formulating cosmetics, and the like.

한편, 현재 이들 기존 미백 효능 물질들 이외에 천연물 중에서 미백활성성분을 찾기 위한 연구가 계속 이루어지고 있는데, 그 중 상백피(일본공개특허 소55-44375, 소64-26507, 소64-83009, 평1-25687, 평5-139950, 한국공개특허 제1992-002109호, 제1997-021273호) 및 감초(일본공개특허 소60-214721, 소63-23809, 소64-63506, 평1-149706, 한국공개특허 제1992-002109호, 제1997-025601호) 등 다수의 식물추출물이 타이로시나제에 작용하여 멜라닌 생성을 억제한다는 사실이 밝혀졌으나(한국공개특허 제2011-0220069호, 제2011-0120030, 일본공개특허 제2007-22253호, 제2010-240422호), 이들 역시 안전성, 안정성 및 변색 가능성 등의 측면에서 화장품이나 의약품에 유효농도 이상으로 사용하는 데는 많은 문제점이 있으며, 만족할 만한 효과를 내지 못하는 실정이다.Meanwhile, in addition to these existing whitening efficacy substances, research is being conducted to find whitening active ingredients in natural products. Among them, Sangbaekpi (Japanese Patent Publication No. 55-44375, So64-26507, So64-83009, Pyeong1- 1) 25687, Hei 5-139950, Korean Laid-Open Patent Nos. 1992-002109, 1997-021273) and Licorice (Japanese Laid-Open Patent Nos. 60-214721, Small 63-23809, Small 64-63506, Flat 1-49706, Korean Publication Patent No. 1992-002109, No. 1997-025601) and many plant extracts have been found to act on tyrosinase to inhibit melanin production (Korean Patent Publication No. 2011-0220069, 2011-0120030, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2007-22253, 2010-240422), and these also have many problems in using above the effective concentration in cosmetics and pharmaceuticals in terms of safety, stability and discoloration, and do not produce satisfactory effects. It is true.

보센벌지아 로툰다(Boesenbergia rotunda)는 생강과에 속하는 식물로 보센벌지아 로툰다 추출물은 항염작용(Tuchinda et al., Phytochemistry , 59:169, 2002), 항균작용(Rukayadi et al., Bio . Pharm . Bull ., 33:1489, 2010) 및 항궤양작용(Abdelwahab et al., J. Ethnopharm ., 137(2):963, 2011) 등에 효과가 있다고 알려져 있으나, 보센벌지아 로툰다 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물에 대한 개시가 없었다. Boesenbergia rotunda is a plant belonging to the family Ginger. Bosenenbergia rotunda extract has anti-inflammatory activity (Tuchinda et al., Phytochemistry , 59: 169, 2002), antimicrobial activity (Rukayadi et al., Bio . Pharm . Bull . , 33: 1489, 2010) and anti-ulcer activity (Abdelwahab et al., J. Ethnopharm . , 137 (2): 963, 2011), but are known to be effective in skin whitening containing Bosenbulgia Rotunda extract. There is no disclosure of the composition.

이에, 본 발명자들은 이제까지 알려지지 않은 여러 천연물 추출물 중 피부 미백 및 항산화 효능을 가지는 천연물 추출물을 개발하고자 예의 노력한 결과, 보센벌지아 로툰다 추출물이 피부 미백 및 항산화효과를 가진다는 것을 확인하고, 본 발명의 완성하게 되었다.
Accordingly, the present inventors have made diligent efforts to develop natural extracts having skin whitening and antioxidant effects among various natural extracts that have not been known so far, and confirmed that Bosenbulgia Rotunda extract has skin whitening and antioxidant effects, and completed the present invention. Was done.

본 발명의 목적은 피부 미백 및 항산화 효과가 뛰어난 보센벌지아 로툰다 추출물을 포함하는 피부 미백 또는 항산화 조성물을 제공하는데 있다.
An object of the present invention is to provide a skin whitening or antioxidant composition comprising Bosenbulgia Rotunda extract excellent in skin whitening and antioxidant effect.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 보센벌지아 로툰다(Boesenbergia rotunda) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention provides a composition for skin whitening comprising Boesenbergia rotunda extract as an active ingredient.

본 발명은 또한, 보센벌지아 로툰다(Boesenbergia rotunda) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물을 제공한다. The invention further beam senbeol Jia rotunda (Boesenbergia rotunda ) provides an antioxidant composition comprising the extract as an active ingredient.

본 발명은 또한, 보센벌지아 로툰다(Boesenbergia rotunda) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백 또는 항산화능을 가지는 화장료 조성물을 제공한다.
The present invention also provides beams senbeol Jia rotunda (Boesenbergia rotunda ) provides a cosmetic composition having skin whitening or antioxidant ability, including the extract as an active ingredient.

본 발명의 보센벌지아 로툰다 (Boesenbergia rotunda)추출물은 멜라닌 생성을 저해하고, 항산화 작용이 있으며 세포 독성이 없으므로, 피부 미백 및 항산화 조성물로 유용하게 사용할 수 있다.
Beams of the present invention senbeol Jia rotunda (Boesenbergia rotunda ) extract inhibits melanin production, has antioxidant activity and no cytotoxicity, so it can be usefully used as skin whitening and antioxidant composition.

도1은 보센벌지아 로툰다 추출물 처리시 멜라닌 생성도를 나타내는 그래프이다.
도2는 보센벌지아 로툰다 추출물 처리시 세포 생존율을 나타내는 그래프이다.
Figure 1 is a graph showing the melanin production when treated with Bosenbulgia Rotunda extract.
Figure 2 is a graph showing cell viability upon treatment with Bosenbulgia Rotunda extract.

다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술 분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.Unless otherwise defined, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. In general, the nomenclature used herein is well known and commonly used in the art.

본 발명의 일 관점에서, 본 발명은 보센벌지아 로툰다 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물에 관한 것이다.In one aspect of the present invention, the present invention relates to a composition for skin whitening comprising Bosenbulgia Rotunda extract as an active ingredient.

본 발명에 있어서, 보센벌지아 로툰다 추출물은 보센벌지아 로툰다를 물, 탄소수 1~3개의 무수 또는 함수 저급 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 것을 용매로 사용하여 추출된 것임을 특징으로 할 수 있으며, 상기 추출 용매의 양은 생약 건조 중량의 2 내지 20 배로 할 수 있다.In the present invention, the Bosenbulzia rotunda extract may be characterized in that it is extracted by using Bosenbulgia Rotunda selected from the group consisting of water, anhydrous or hydrous lower alcohols having 1 to 3 carbon atoms, and a mixed solvent thereof. In addition, the amount of the extraction solvent may be 2 to 20 times the dry weight of the herbal medicine.

본 발명에 있어서, 보센벌지아 로툰다 추출물은 온탕 추출, 열 추출, 환류 냉각 추출, 초음파 추출 및 침지 추출 등에서 선택된 방법을 사용하여 추출된 것임을 특징으로 할 수 있다.In the present invention, Bosenbulzia rotunda extract may be characterized in that it is extracted using a method selected from hot water extraction, heat extraction, reflux cooling extraction, ultrasonic extraction and immersion extraction.

상기 추출방법은 30℃~70℃의 온탕 추출방법이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 40℃~60℃이며, 더욱 바람직하게는 40℃로 유지하는 것이 부패, 변색 및 변취의 예방에 가장 효과적이고, 상기 추출시간은 5~30시간이며, 바람직하게는 24시간이다. The extraction method is preferably a hot water extraction method of 30 ℃ ~ 70 ℃, more preferably 40 ℃ ~ 60 ℃, more preferably maintaining at 40 ℃ is most effective in the prevention of rot, discoloration and odor, The extraction time is 5 to 30 hours, preferably 24 hours.

상기 보센벌지아 로툰다 추출물을 수득한 후, 거름종이 등을 이용하여 고형분을 제거하고, 현탁액을 원심분리하여 상층액을 감압여과 할 수 있으며, 여과된 추출물은 가열건조, 감압건조, 분무건조 및 동결건조 등의 방법을 이용하는 것을 특징으로 할 수 있다.After obtaining the Bosenbulgia Rotunda extract, the solids are removed using a filter paper, and the suspension is centrifuged to filter the supernatant under reduced pressure, and the filtered extract is heated to dryness, reduced pressure drying, spray drying and freezing. It can be characterized by using a method such as drying.

본 발명의 일 실시예에서 건조된 보센벌지아 로툰다 뿌리 10g을 잘게 분쇄한 후 물 200㎖을 넣고 40℃ 수욕조에서 24시간 온탕 추출하여 얻어진 추출액을 실온에서 냉각 시키고, 거름종이로 여과하여 여과액을 수득하였다. 수득된 여과액을 감압 및 동결건조로 농축하여 1.07g의 보센벌지아 로툰다 추출물을 얻었다. In one embodiment of the present invention, finely pulverized 10 g of dried Bosenbulgia Rotunda root, and then, 200 ml of water was added, and the extract obtained by hot water extraction in a 40 ° C. water bath for 24 hours was cooled at room temperature, filtered with a filter paper, and filtered. Obtained. The filtrate obtained was concentrated under reduced pressure and lyophilization to obtain 1.07 g of Bosenbulzia rotunda extract.

본 발명의 보센벌지아 로툰다 추출물의 피부 미백효과를 검정하기 위해서 B16F1세포에서 멜라닌 생합성 억제효과 측정 시험을 수행하였다. 그 결과, 멜라닌 생성억제 물질로 알려진 알부틴의 경우 무처리구와 비교했을 때, 200㎍/㎖의 농도에서 멜라닌의 생성도는 67.5%였으며, 보센벌지아 로툰다 추출물은 0.6㎎/㎖에서 66.6%, 1㎎/㎖에서 52.8%의 멜라닌 생성도를 보여 알부틴과 거의 유사하거나 뛰어난 멜라닌 생성억제 효과를 보이는 것을 확인하였으며, 보센벌지아 추출물의 세포 독성을 확인하기 위해 B16F1세포에서 생존율 측정 시험을 수행한 결과, 보센벌지아 로툰다 추출물을 처리하지 않은 무처리구와 비교하였을 때, 0.6㎎/㎖에서 90.8%, 1㎎/㎖에서 76.4%의 생존율을 보여 독성이 없으면서 뛰어난 멜라닌 생성억제 효과를 확인할 수 있었다. In order to assay the skin whitening effect of Bosenbulzia rotunda extract of the present invention, a test for measuring melanin biosynthesis inhibition effect in B16F1 cells was performed. As a result, in the case of arbutin, known as a melanogenesis inhibitor, melanin production was 67.5% at the concentration of 200 µg / ml, and bosenbulgia rotunda extract was 66.6% and 1mg at 0.6mg / ml. 52.8% melanin production in / ml showed a similar or superior melanin inhibitory effect of arbutin, and the survival rate test in B16F1 cells to confirm the cytotoxicity of Bosenbulgia extract, Compared with the untreated treatment, the extracts of Sverggia rotunda showed 90.8% survival at 0.6mg / ml and 76.4% at 1mg / ml.

본 발명의 다른 관점에서, 본 발명은 보센벌지아 로툰다 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물에 관한 것이다. In another aspect of the present invention, the present invention relates to an antioxidant composition comprising Bosenbulzia rotunda extract as an active ingredient.

본 발명에 있어서, 보센벌지아 로툰다 추출물은 보센벌지아 로툰다를 물, 탄소수 1~3개의 무수 또는 함수 저급 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 것을 용매로 사용하여 추출된 것임을 특징으로 할 수 있으며, 상기 추출 용매의 양은 생약 건조 중량의 2 내지 20 배로 할 수 있다.In the present invention, the Bosenbulzia rotunda extract may be characterized in that it is extracted by using Bosenbulgia Rotunda selected from the group consisting of water, anhydrous or hydrous lower alcohols having 1 to 3 carbon atoms, and a mixed solvent thereof. In addition, the amount of the extraction solvent may be 2 to 20 times the dry weight of the herbal medicine.

본 발명에 있어서, 보센벌지아 로툰다 추출물은 온탕 추출, 열 추출, 환류 냉각 추출, 초음파 추출 및 침지 추출 등에서 선택된 방법을 사용하여 추출된 것임을 특징으로 할 수 있다.In the present invention, Bosenbulzia rotunda extract may be characterized in that it is extracted using a method selected from hot water extraction, heat extraction, reflux cooling extraction, ultrasonic extraction and immersion extraction.

상기 추출방법은 30℃~70℃의 온탕 추출방법이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 40℃~60℃이며, 더욱 바람직하게는 40℃로 유지하는 것이 부패, 변색 및 변취의 예방에 가장 효과적이며, 상기 추출시간은 5~30시간이며, 바람직하게는 24시간이다. The extraction method is preferably a hot water extraction method of 30 ℃ ~ 70 ℃, more preferably 40 ℃ ~ 60 ℃, more preferably maintaining at 40 ℃ is most effective in the prevention of decay, discoloration and odor, The extraction time is 5 to 30 hours, preferably 24 hours.

상기 보센벌지아 로툰다 추출물을 수득한 후, 거름종이 등을 이용하여 고형분을 제거하고, 현탁액을 원심분리하여 상층액을 감압여과 할 수 있으며, 여과된 추출물은 가열건조, 감압건조, 분무건조 및 동결건조 등의 방법을 이용하는 것을 특징으로 할 수 있다.After obtaining the Bosenbulgia Rotunda extract, the solids are removed using a filter paper, and the suspension is centrifuged to filter the supernatant under reduced pressure, and the filtered extract is heated to dryness, reduced pressure drying, spray drying and freezing. It can be characterized by using a method such as drying.

본 발명의 보센벌지아 로툰다 추출물의 항산화 효과를 측정하기 위해서 보센벌지아 로툰다 추출물에서 항산화 효과를 가지는 페놀함량을 측정한 결과, 총 페놀 함량은 29.8㎎/g인 것을 확인하였다. 또한, 항산화 활성측정에 일반적으로 사용되는 DPPH법을 이용하여 보센벌지아 로툰다 추출물의 항산화 활성을 측정한 결과, 보센벌지아 로툰다 추출물의 IC50 값은 21.2㎎/㎖로 보센벌지아 로툰다 추출물의 항산화 효과를 확인할 수 있었다. In order to measure the antioxidant effect of the Bosenbulgia Rotunda extract of the present invention, the phenol content having an antioxidant effect was measured in the Bosenbulgia Rotunda extract, and it was confirmed that the total phenol content was 29.8 mg / g. In addition, the antioxidant activity by the DPPH method generally used is used as a measurement result of measuring the antioxidant activity of a beam senbeol Jia rotunda extract, beam senbeol IC 50 of Jia rotunda extract The value of 21.2 mg / mL was confirmed that the antioxidant effect of Bosenbulgia Rotunda extract.

상기 피부 미백 및 항산화 조성물은 총 중량에 대하여 0.005 내지 50 중량%의 보센벌지아 로툰다 추출물이 함유되는 것이 바람직하지만, 미백 및 항산화 효과가 있고 독성이 나타나지 않는 범위에서 사용 용도에 따라서 상기 범위 이상 또는 이하로도 사용될 수 있다.The skin whitening and antioxidant composition preferably contains 0.005 to 50% by weight of Bosenbulzia rotunda extract based on the total weight, but above or below the range according to the use purpose in the range of whitening and antioxidant effects and no toxicity appears It can also be used as.

상기 피부 미백 및 항산화 조성물은 보센벌지아 로툰다 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.The skin whitening and antioxidant composition may contain one or more active ingredients exhibiting the same or similar function in addition to Bosenbulzia rotunda extract.

본 발명의 또 다른 관점에서, 본 발명은 보센벌지아 로툰다 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백 또는 항산화능을 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다. In another aspect of the present invention, the present invention relates to a cosmetic composition having a skin whitening or antioxidant capacity comprising the Bosenbulgia Rotunda extract as an active ingredient.

본 발명의 보센벌지아 로툰다 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 항산화용 화장료 조성물로 제조되는 화장품은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. Cosmetics prepared with the skin whitening and antioxidant cosmetic composition containing the Bosenbulgia Rotunda extract of the present invention as an active ingredient may be prepared in the form of a general emulsion formulation and solubilized formulation. Cosmetics of emulsified form include nutrition lotion, cream, essence, etc., and cosmetics of solubilized form have softening longevity.

본 발명의 보센벌지아 로툰다 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 항산화용 화장료 조성물의 제형으로는 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더, 아이섀도 등의 제형으로 제조될 수 있고, 통상적인 화장료 제조법에 적용시킬 수 있다. 구제척으로 액상, 크림상, 페이스트상 및 고체상등 다양한 성상으로 적용이 가능하며, 이들 각 제형에 적합하고 당업계에 주지된 각종의 통상적인 보조제와 담체를 포함할 수 있다.
As a formulation of the skin whitening and antioxidant cosmetic composition containing Bosenbulzia rotunda extract of the present invention as an active ingredient, skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizing lotion, nutrition lotion, massage cream, Formulated with nutrition cream, moisture cream, hand cream, essence, nutrition essence, pack, soap, shampoo, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, latex, press powder, loose powder, eye shadow It may be applied to a conventional cosmetic preparation method. Relief can be applied in various forms such as liquid, cream, paste and solid, and may include various conventional auxiliaries and carriers suitable for each of these formulations and well known in the art.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these examples are for illustrative purposes only and that the scope of the present invention is not construed as being limited by these examples.

실시예Example 1:  One: 보센벌지아Bossenbulgia 로툰다Rotunda 추출물의 제조 Preparation of extract

본 실시예의 보센벌지아 로툰다는 말레이시아에서 채취한 것을 사용하였다.The Bossenbulzia rotunda of the present example used what was collected from Malaysia.

채취한 식물을 물에 씻어 이물질을 제거한 후 건조한 후, 보센벌지아 로툰다 뿌리 10g을 잘게 분쇄한 후 물 200㎖을 넣고 40℃ 수욕조에서 24시간 동안 온탕 하였다. 얻어진 추출액을 실온으로 냉각시키고 거름종이로 여과하여 여과액을 수득하였다. 이후 여과액을 감압 및 농축하여 1.07g의 보센벌지아 로툰다 추출물을 제조하였다
The collected plants were washed with water to remove foreign substances, dried, and finely pulverized 10 g of Rosenda Rosunda root, and 200 ml of water was added thereto and warmed in a 40 ° C. water bath for 24 hours. The obtained extract was cooled to room temperature and filtered through a filter paper to obtain a filtrate. The filtrate was then depressurized and concentrated to prepare 1.07 g of Bossenbulzia rotunda extract.

시험예Test Example 1:  One: 보센벌지아Bossenbulgia 로툰다의Rotunda 미백효과 측정 Whitening effect measurement

1-1: B16F1O 멜라노마 세포배양1-1: B16F1O Melanoma Cell Culture

B16F10세포(ATCC No. CRL-6475)는 ATCC[(American Type Cell Collection)에서 분양받아 사용한 것으로, 상기 B16F10멜라노마 세포는 멜라닌을 생산하는 세포주로서 일반적으로 미백물질 효능검증에 사용된다. 상기 세포를 배양하기 위한 배지는 10% FBS, 1% 페니실린/스트렙토마이신을 함유하는 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)을 사용하였고, 세포는 37℃, 5% CO2의 인큐베이터에서 배양하였다. B16F1O세포는 100mm 패트리 디쉬가 90% 정도 찼을 때 계대하였다.
B16F10 cells (ATCC No. CRL-6475) are used as a product from the American Type Cell Collection (ATCC), and the B16F10 melanoma cells are generally used for the validation of whitening substances as cell lines producing melanin. The medium for culturing the cells was Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) containing 10% FBS, 1% penicillin / streptomycin, and the cells were cultured in an incubator at 37 ° C., 5% CO 2 . B16F10 cells were passaged when the 100 mm Petri dishes were about 90% full.

1-2: 흡광도 측정을 통한 멜라닌 저해효과 측정1-2: Determination of melanin inhibitory effect by measuring absorbance

보센벌지아 로툰다 추출물의 미백효과 측정을 위하여 B16F1O세포에 보센벌지아 로툰다 추출물 또는 알부틴을 처리하여 생성된 멜라닌 양의 변화를 측정하였다. 6웰 플레이트에 상기 세포를 접종(seeding)하고, 실시예 1에서 얻어신 보센벌지아 로툰다 추출물 또는 일반 시중에서 판매하는 알부틴을 일정한 농도로 처리하여 사흘간 배양한 다음, 트립신-EDTA를 이용하여 세포를 회수하였다. 회수한 상기 세포에 10% DMSO(Dimethylsulfoxide)를 포함하는 1N NaOH를 가해 80℃에서 1 시간동안 반응시켜 멜라닌이 충분히 녹아나오도록 한 다음, ELISA 리더(reader)를 이용하여 파장 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 멜라닌 생성도는 하기 수학식 1을 이용하여 계산하였다. In order to measure the whitening effect of Bosenbulgia Rotunda extract, the change of melanin produced by treatment of Bosenbulgia Rotunda extract or arbutin on B16F10 cells was measured. The cells were seeded in 6-well plates, treated with Bosenbulzia rotunda extract obtained in Example 1 or arbutin commercially available at a constant concentration for 3 days, followed by incubation with trypsin-EDTA. Was recovered. 1N NaOH containing 10% DMSO (dimethylsulfoxide) was added to the recovered cells to react at 80 ° C. for 1 hour to allow melanin to be sufficiently dissolved, and then absorbance was measured at a wavelength of 405 nm using an ELISA reader. . Melanin production was calculated using Equation 1 below.

그 결과, 멜라닌 생성억제 물질로 알려진 알부틴의 경우 무처리구와 비교했을 때, 200㎍/㎖의 농도에서 멜라닌의 생성도는 67.5%였으며, 보센벌지아 로툰다 추출물은 0.6㎎/㎖에서 66.6%, 1㎎/㎖에서 52.8%로 알부틴과 거의 유사하거나 뛰어난 멜라닌 생성억제 효과를 확인하였다 (도 1, 표 1).
As a result, in the case of arbutin, known as a melanogenesis inhibitor, melanin production was 67.5% at the concentration of 200 µg / ml, and bosenbulgia rotunda extract was 66.6% and 1mg at 0.6mg / ml. It was confirmed that melanin production inhibitory effect similar or superior to arbutin at 52.8% at / ml (Fig. 1, Table 1).

[수학식 1][Equation 1]

멜라닌생성도(%)= 처리구 흡광도/무처리구 흡광도×100
Melanogenicity (%) = treatment absorbance / no treatment absorbance × 100

보센벌지아 로툰다 추출물의 멜라닌 생성 억제효과Inhibitory Effect of Bosenbulzia Rotunda Extract on Melanin Production 시료명Name of sample 멜라닌 생성도(%)Melanin Production (%) 무처리구Non-treatment 100100 알부틴(200ug/㎖)Arbutin (200 ug / ml) 67.567.5 보센벌지아 로툰다 추출물(0.6㎎/㎖)Bossenbulgia Rotunda Extract (0.6mg / ml) 66.666.6 보센벌지아 로툰다 추출물(1㎎/㎖)Bossenbulgia Rotunda Extract (1mg / ml) 52.852.8

시험예Test Example 2:  2: 보센벌지아Bossenbulgia 로툰다Rotunda 추출물의 독성시험 Toxicity Test of Extracts

보센벌지아 로툰다의 추출물을 미백 화장료 조성물로 사용할 수 있는지 여부를 판단하기 위하여, 세포 독성 실험을 실시하였다. 96웰 플레이트에 B16F10세포를 접종하고 실시예 1에서 얻어진 보센벌지아 로툰다 추출물을 각각 0.2㎎/㎖, 0.4㎎/㎖, 0.6㎎/㎖, 1㎎/㎖을 처리하여 3일 동안 37℃, 10% CO2의 인큐베이터에서 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고, MTT(3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliu, bromide) 용액 100㎕을 첨가하여 37℃에서 4시간 반응시켰다. 반응이 끝난 다음, 용액을 제거하고, DMSO 100㎕를 첨가하여 염색된 세포를 녹인 후에 ELISA 리더(reader)를 이용하여 파장 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포 생존율은 하기 수학식 2를 이용하여 계산하였다.To determine whether the extract of Bosenbulzia rotunda can be used as a whitening cosmetic composition, a cytotoxicity experiment was conducted. B16F10 cells were inoculated into 96 well plates, and Bosenbulgia Rotunda extract obtained in Example 1 was treated with 0.2 mg / ml, 0.4 mg / ml, 0.6 mg / ml and 1 mg / ml, respectively, at 37 ° C. for 10 days. Incubated in an incubator of% CO 2 . After incubation, the medium was removed, and 100 μl of a solution of MTT (3- (4,5-dimethythiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazoliu, bromide) was added thereto and reacted at 37 ° C. for 4 hours. After the reaction, the solution was removed, and 100 μl of DMSO was added to dissolve the stained cells, and then the absorbance was measured at a wavelength of 540 nm using an ELISA reader. Cell viability was calculated using Equation 2 below.

그 결과, 보센벌지아 로툰다 추출물을 처리하지 않은 무처리구와 비교하였을 때, 0.6㎎/㎖에서 90.8%, 1㎎/㎖에서 76.4%의 생존율을 보여 독성이 없으면서 높은 멜라닌 생성억제작용을 확인하였다 (도 2, 표 2).
As a result, when compared to the untreated treatment with Bosenbulzia rotunda extract, 90.8% at 0.6mg / ㎖, 76.4% at 1mg / ㎖ showed a high melanin production inhibitory effect without toxicity (Fig. 2, Table 2).

[수학식 2]&Quot; (2) "

세포생존율(%)=(처리구 흡광도/무처리구 흡광도)×100
Cell survival rate (%) = (treatment absorbance / non-treatment absorbance) × 100

보센벌지아 로툰다 추출물의 세포 생존도Cell Viability of Bosenbulzia Rotunda Extract 시료명Name of sample 세포 생존도(%)Cell viability (%) 무처리구Non-treatment 100100 알부틴(200ug/㎖)Arbutin (200 ug / ml) 108.9108.9 보센벌지아 로툰다 추출물(0.6㎎/㎖)Bossenbulgia Rotunda Extract (0.6mg / ml) 90.890.8 보센벌지아 로툰다 추출물(1㎎/㎖)Bossenbulgia Rotunda Extract (1mg / ml) 76.476.4

시험예Test Example 3:  3: 보센벌지아Bossenbulgia 로툰다Rotunda 추출물의 총 페놀 함량과 항산화 효과 측정 Determination of Total Phenolic Content and Antioxidant Effect of Extracts

보센벌지아 로툰다 추출물의 항산화 효과를 측정하기 위해 실시예 1에서 추출한 보센벌지아 로툰다 추출물의 총 페놀 함량은 Folin-Denis 방법으로 측정하였으며(G. Miliauskas et al ., 2004), 페놀성 물질은 생체고분자와 결합하여 항산화 효과를 나타내는 기능을 가지는 것으로 알려져 있다. 컬큐마 제도리아 추출물 1㎖에 시료 1N Folin-ciocalteu 용액을 섞어준 다음, 5분간 방치한 후, 7.5% Na2CO3를 가하고 765nm에서 흡광도를 측정하였다. 갈릭산으로 작성한 표준곡선을 이용하여 함량을 계산한 결과, 총 페놀 함량은 29.8㎎/g인 것으로 확인되었다. The total phenolic content of Bosenbulzia rotunda extract extracted in Example 1 was measured by Folin-Denis method (G. Miliauskas et. al . , 2004), Phenolic substances are known to have a function of binding to biopolymers to exhibit an antioxidant effect. After mixing the sample 1N Folin-ciocalteu solution in 1 ml of Culcuma islandia extract, and left for 5 minutes, 7.5% Na 2 CO 3 was added and the absorbance was measured at 765 nm. The content was calculated using a standard curve made of gallic acid, and the total phenol content was found to be 29.8 mg / g.

또한, 항산화 활성측정에 일반적으로 사용되는 DPPH법을 이용하여 보센벌지아 로툰다 추출물의 항산화 활성을 측정하였다 (Chang et al ., 2002). 보센벌지아 로툰다 추출물 50u㎕와 0.004% DPPH 용액 950㎕을 혼합하여 37에서 10분간 반응시킨 후 ELISA 리더(reader)를 이용하여 파장 515nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과 보센벌지아 로툰다 추출물의 IC50 값은 21.2㎎/㎖인 것을 확인하였다.
In addition, the antioxidant activity of Bosenbulzia rotunda extract was measured using DPPH method, which is commonly used for measuring antioxidant activity (Chang et al . , 2002). 50 μl of Bosenbulzia rotunda extract and 950 μl of 0.004% DPPH solution were mixed and reacted at 37 ° C. for 10 minutes, and the absorbance was measured at an wavelength of 515 nm using an ELISA reader. As a result, IC 50 of Bosenbulzia rotunda extract The value was confirmed to be 21.2 mg / mL.

제제예Formulation example 1:  One: 보센벌지아Bossenbulgia 로툰다Rotunda 추출물을 유효성분으로 함유하는  Containing extract as an active ingredient 미백화장료의Of whitening cosmetics 제조 Produce

1-1: 유연화장수의 제조1-1: Manufacturing Flexible Softener

실시예 1에서 수득된 보센벌지아 로툰다 추출물을 유효성분으로 함유하는 유연 화장수의 제제예는 다음 표 3과 같이 제조하였다.
Formulation example of the flexible lotion containing Bosenbulzia rotunda extract obtained in Example 1 as an active ingredient was prepared as shown in Table 3.

보센벌지아 로툰다 추출물을 포함하는 유연화장수의 구성성분Constituents of Softened Longevity Containing Bosenbulgia Rotunda Extract 원료Raw material 함량(중량부)Content (parts by weight) 보센벌지아 로툰다 추출물Bosenbulgia Rotunda Extract 0.0020.002 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 1.001.00 디소듐이디티에이Disodium iodide 0.050.05 알란토인Allantoin 0.100.10 디포타슘글리시리제이트Dipotassium glycyrrhizate 0.050.05 시트릭애씨드Citric acid 0.010.01 소듐시트레이트Sodium citrate 0.020.02 글리세레스-26Glycereth-26 1.001.00 알부틴Arbutin 2.002.00 하이드로제네이티드캐스터오일Hydrogenated castor oil 1.001.00 에탄올ethanol 30.0030.00 보존제Preservative 미량a very small amount 착색제coloring agent 미량a very small amount 착향제Flavoring agent 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance

1-2: 영양크림의 제조1-2: Preparation of Nutritional Cream

실시예 1에서 정제된 보센벌지아 로툰다 추출물을 함유한 영양크림의 제제예는 다음 표 4의 조성과 같이 제조하였다. Formulation example of the nutrition cream containing Bosenbulzia rotunda extract purified in Example 1 was prepared as shown in Table 4.

보센벌지아 로툰다 추출물을 포함하는 영양크림의 구성성분Constituents of Nutritional Cream Containing Bosenbulgia Rotunda Extract 원료Raw material 함량(중량부)Content (parts by weight) 보센벌지아 로툰다 추출물Bosenbulgia Rotunda Extract 0.0020.002 1,3-부틸렌 글리콜1,3-butylene glycol 7.07.0 글리세린glycerin 1.01.0 D-판테놀D-Panthenol 0.10.1 식물 추출물Plant extract 3.23.2 마그네슘알루미늄실리케이트Magnesium aluminum silicate 0.30.3 PEG-40 스테아레이트PEG-40 stearate 1.21.2 스테아릭애씨드Stearic acid 2.02.0 폴리소르베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 친유형글리세릴스테아레이트Chin type glyceryl stearate 2.02.0 소르비탄세스퀴올리에이트Sorbitan sesquioleate 1.51.5 세테아릴알코올Cetearyl alcohol 3.03.0 미네랄오일Mineral oil 4.04.0 스쿠알란Squalane 3.83.8 카르릴릭/카프릭트리글리세라이드Carlyric / capric triglyceride 2.82.8 식물성 오일vegetable oil 1.81.8 디메치콘Dimethicone 0.40.4 디포타슘글리시리제이트Dipotassium glycyrrhizate 미량a very small amount 알란토인Allantoin 미량a very small amount 소듐 히아루로네이트Sodium hyaruronate 미량a very small amount 토코페릴아세테이트Tocopheryl acetate 적량Suitable amount 트리에탄올아민Triethanolamine 적량Suitable amount 보존제Preservative 적량Suitable amount 착향제Flavoring agent 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다. While the present invention has been particularly shown and described with reference to specific embodiments thereof, those skilled in the art will appreciate that such specific embodiments are merely preferred embodiments and that the scope of the present invention is not limited thereby. something to do. It is therefore intended that the scope of the invention be defined by the claims appended hereto and their equivalents.

Claims (7)

보센벌지아 로툰다(Boesenbergia rotunda) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물.
Senbeol Jia Bo Rotunda (Boesenbergia rotunda ) Skin whitening composition comprising the extract as an active ingredient.
제1항에 있어서, 보센벌지아 로툰다 추출물은 보센벌지아 로툰다를 물, 탄소수 1~3개의 무수 또는 함수 저급 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 것을 용매로 사용하여 추출된 것임을 특징으로 하는 조성물.
The method of claim 1, wherein the Bosenbulgia Rotunda extract is extracted by using Bosenbulgia Rotunda selected from the group consisting of water, an anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 3 carbon atoms, and a mixed solvent thereof as a solvent. Composition.
제1항에 있어서, 보센벌지아 로툰다 추출물은 온탕 추출, 열 추출, 환류 냉각 추출, 초음파 추출 및 침지 추출에서 선택되는 방법으로 추출된 것임을 특징으로 하는 조성물.
The composition of claim 1, wherein the Bosenbulzia rotunda extract is extracted by a method selected from hot water extraction, heat extraction, reflux cooling extraction, ultrasonic extraction, and immersion extraction.
보센벌지아 로툰다(Boesenbergia rotunda) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물.
Senbeol Jia Bo Rotunda (Boesenbergia rotunda ) Antioxidant composition comprising the extract as an active ingredient.
제4항에 있어서, 보센벌지아 로툰다 추출물은 보센벌지아 로툰다를 물, 탄소수 1~3개의 무수 또는 함수 저급 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 것을 용매로 사용하여 추출된 것임을 특징으로 하는 조성물.
The method of claim 4, wherein the Bosenbulgia Rotunda extract is extracted by using Bosenbulgia Rotunda selected from the group consisting of water, anhydrous or hydrous lower alcohols having 1 to 3 carbon atoms, and a mixed solvent thereof as a solvent. Composition.
제4항에 있어서, 보센벌지아 로툰다 추출물은 온탕 추출, 열 추출, 환류 냉각 추출, 초음파 추출 및 침지 추출에서 선택되는 방법으로 추출된 것임을 특징으로 하는 조성물.
The composition of claim 4, wherein the Bosenbulgia Rotunda extract is extracted by a method selected from hot water extraction, heat extraction, reflux cooling extraction, ultrasonic extraction, and immersion extraction.
보센벌지아 로툰다(Boesenbergia rotunda) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백 또는 항산화능을 가지는 화장료 조성물.


Senbeol Jia Bo Rotunda (Boesenbergia rotunda ) A cosmetic composition having skin whitening or antioxidant ability, comprising an extract as an active ingredient.


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