KR20140018890A - 탈필링을 위한 셀룰라제 효소 혼합물 및 그것의 이용 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 패밀리 45 셀룰라제 효소 성분 그리고 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 포함하는 효소 혼합물을 포함하는 탈필링 조성물과 관련된다. 효소 혼합물은 패밀리 45 및 패밀리 5 셀룰라제 효소 성분 또는 패밀리 45 및 패밀리 6 셀룰라제 효소 성분이 특이적 탈필링 활성을 측정하는 어세이에서 상승효과를 나타내는 중량 비율로 존재하는 것을 특징으로 할 수 있다. 효소 혼합물은 상기 셀룰라제 효소 성분을 과발현하는 유전적으로 변형된 미생물에 의해 분비될 수 있다. 또한 셀룰로스-함유 물품을 탈필링 조성물과 접촉하는 단계를 포함하는 탈필링 방법이 제공된다.
Description
본 발명은 셀룰라제 효소 혼합물 및 그것의 이용, 특히 셀룰로스-함유 물품을 처리하는데 사용하기 위한 셀룰라제 효소 혼합물에 관한 것이다.
셀룰라제 효소는 셀룰로스-함유 직물의 외관 및 유연성을 개선하기 위해 널리 사용된다. 셀룰라제 효소의 널리 퍼진 용도는 직물 안에 또는 위에 코튼 퍼즈(cotton fuzz) 및 풀린 표면 섬유를 제거하는 것이다. 이 공정은 "탈필링", "바이오폴리싱(biopolishing)" 및 "바이오마무리(biofinishing)"로서 언급되고 직물의 표면을 매끄럽게 하여, 차례로 그것의 유연성 및 외관을 개선한다. 셀룰라제 처리는 의복이 마모되어 보이게 하는 섬유 필의 후속 형성을 방지하는데 또한 도움을 준다. 탈필링 동안 셀룰라제의 가수분해 작용으로 인하여 직물의 강도 손실을 최소화하는 것이 바람직하다.
셀룰라제 효소의 다른 산업 용도는 데님(denim) 직물에 "스톤워시된(stone-washed)" 외관을 부여하기 위해 그것을 처리하는 것이다. 이러한 공정은 산업에서 "바이오-스토닝(bio-stoning)"으로서 알려져 있다. 용어 바이오-스토닝은 직물을 처리하기 위해 부석이 전통적으로 사용되기 때문에 채택되었다. 그러나, 최근에 셀룰라제가 부석을 크게 대체하였다. 바이오-스토닝은 탈필링과 상당히 다르다: 바이오-스토닝은 색을 데님으로부터 제거하고 직물 상에 그것의 재부착을 조절하는 것을 목표로 하는 한편 탈필링은 탈필링에서처럼 단지 유연성 및 외관을 개선하는 것을 목표로 한다.
셀룰라제 효소는 셀룰로스 중합체에서 베타-1,4 글리코시드 연결의 가수분해를 촉매작용하고 셀룰로스 결합 도메인(CBD) 및 촉매 도메인을 종종 포함하는 글리코시드 히드롤라제 효소들의 군이다. "링커" 또는 "링커 펩티드"로 알려진 이들 두 도메인 사이의 영역은 CBD와 촉매 도메인 사이에서 유연한 스페이서의 역할을 한다. 개별 셀룰라제 성분의 촉매 도메인은 효소 위원회(EC) 및 글리코시드 히드롤라제(GH) 패밀리 시스템 둘 다에 의해 분류된다. 효소 위원회는 내부 베타-1,4 연결의 절단(엔도글루카나제 또는 "EG", EC 3.2.1.4)을 위한 그것들의 선호도 또는 셀룰로스 중합체의 감소 또는 비-감소 단부로부터의 셀로비오스(셀로비오히드롤라제 또는 "CBH", EC 3.2.1. 91, 때때로 엑소글루카나제로서도 언급됨)의 방출에 기초하여 두 부류의 셀룰라제를 구별한다. 반면, GH 패밀리 시스템은 촉매 반응의 입체화학뿐만 아니라 일차 및 이차 구조의 보존에 기초하여 셀룰라제 성분의 촉매 도메인을 구별한다. 모든 알려진 셀룰라제 촉매 및 결합 도메인을 위한 GH 패밀리 지정이 제공되고 URL: cazy.org에서 이용가능한 Carbohydrate-Active EnZymes(CAZy) 데이터베이스(Cantarel et al., 2009, Nucleic Acids Res 37:D233-238)를 통해 계속해서 갱신된다. 셀룰라제 효소는 패밀리 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 16, 18, 19, 26, 44, 45, 48, 51, 61 및 74를 포함하나 이에 제한되지 않는 수많은 GH 패밀리에서 발견될 수 있다. 게다가, 더 큰 GH 패밀리의 일부에서 셀룰라제는 하위패밀리로 분류될 수 있다.
GH 시스템 하에서, CBH이든 또는 EG 효소이든, 모든 셀룰라제 촉매 도메인은 "Cel" 이어서 GH 패밀리 수에 의해 지칭된다. 예를 들어, GH 패밀리, 5, 6 및 7에 속하는 촉매 도메인을 포함하는 셀룰라제는 Cel5, Cel6 및 Cel7 셀룰라제, 셀로비오히드롤라제 또는 엔도글루카나제로서 혹은 패밀리 5, 패밀리 6, 및 패밀리 7 셀룰라제, 셀로비오히드롤라제 또는 엔도글루카나제로서 언급될 수 있다. Cel5, Cel6 및 Cel7과 같은 지정은 대문자 A, B, C 등에 의해 이어질 수 있는데, 이것은 같은 패밀리의 효소가 공급원 유기체로부터 확인된 순서를 표시한다. 게다가, Cel 지정은 트리코더마 레세이(Trichoderma reesei)에 대한 "Tr"과 같은 속, 종 식별자의 뒤에 위치될 수 있다.
트리코더마와 같은 균류는 성분으로서 개별적으로 알려진 수많은 다른 셀룰라제 효소(본원에 "효소 혼합물", "셀룰라제 혼합물" 또는 "셀룰라제 효소 혼합물"로서 또한 언급됨)를 분비한다. 더 널리퍼진 이들 효소 성분은 엑소-1,4-베타-D-글루카나제로 또한 불리는 셀로비오히드롤라제(CBH), 엔도글루카나제(EG), 또는 엔도-1,4-베타-D-글루카나제, 및 베타-글루코시다제 효소를 포함한다. 이 분류는 효소의 기질 특이성, 즉 쇄단부(엑소), 글루코스 쇄의 내부(엔도), 또는 용해성 셀로올리고당과 셀로비오스(베타-글루코시다제)의 글리코시드 결합을 향한 친화도에 기초한다.
트리코더마 레세이는 셀룰라제의 생산에 대해 널리 연구되고 산업적으로 중요한 균이다. 이것은 적어도 6개의 유전적으로 다른 셀룰라제: Cel6A(SEQ ID NO:3) 및 Cel7A(SEQ ID NO:5)로서 언급된, 또한 CBHII 및 CBHI로서 알려진 2개의 셀로비오히드롤라제, 그리고 각각 EGII, EGI, EGIII 및 EGV로서 또한 알려진, 적어도 4개의 엔도글루카나제 Cel5A(SEQ ID NO:2), Cel7B(SEQ ID NO:6), Cel12A 및 Cel45A(SEQ ID NO:4)를 생성한다. 이들 셀룰라제 성분 중 일부는 탈필링의 개선에 기여하는 것으로 확인된 한편, 다른 것들은 그것들이 아래 논의되는 직물 강도 손실을 야기할 수 있는 만큼 해로워 보인다.
천연 혼합물에 대해 분비된 효소 혼합물에서 엔도글루카나제 성분의 부분을 증가시킴으로써 텍스타일 탈필링을 위한 셀룰라제 혼합물의 성질을 개선시키려는 노력이 행해졌다. 예를 들어, WO 92/17574는 EG의 CBH I 타입 성분에 대한 단백질 중량 비율이 5:1보다 높도록 CBH I 타입 성분(Cel7A)에 대한 EG 타입 성분의 양을 조정하는 단계를 포함하는 접근 방법을 개시한다. 이러한 조성물로 처리된 코튼-함유 직물은 더 많은 양의 CBH I 타입(Cel7A) 성분을 함유하는 직물과 비교해 탈필링 처리 동안 감소된 강도 손실을 나타내었다. 게다가, EP 866 165는 탈필링 효율의 개선 및 감소된 강도 손실을 나타내는, EG II(Cel5A)에 농축된 효소 조성물을 개시한다. 구체예에서, 효소 조성물은 적어도 95% EG II의 셀룰라제 단백질 함량을 함유한다.
미국 특허 제6,162,782호는 코튼 직물의 감소된 강도 손실이 하나 또는 그 이상의 엔도글루카나제 성분 및 감소된 수준(5 wt% 미만)의 CBH I(Cel7A)을 함유한 셀룰라제 세제 조성물로 달성될 수 있다는 것을 개시한다. 이들 연구에서, CBH I 및 특정 정도의 CBH II는 강도 손실에 역할을 하는 것이 발견되었다. EG-농축 세제 조성물은 연화, 세척 및 색상 복원에 개선을 부여하는 것으로 보고되었다. 마찬가지로, Miettinen-Oinonen et al.(Applied and Environmental Microbiology, 2002, 68(8):3956-3964)은 CBH I 및 CBH II가 없는 EG II-농축 셀룰라제 제조로 육안 외관의 개선 및 필링 경향의 감소를 보고하였다. Miettinen-Oinonen et al.(VTT Publications 550, 2004, Trichoderma reesei strains for production of cellurases for the textile industry)은 EG II-농축 셀룰라제 제조를 갖는 양호한 탈필링 결과를 또한 보고한다. 텍스타일 용도에서 엔도글루카나제의 사용은 WO 2004/053039, EP 495 258 및 미국 특허 제6,001,639호, 제5,958,082호 및 제5,948,672호에서 또한 논의된다.
게다가, 수많은 군은 탈필링에서 Cel45 셀룰라제의 사용을 고려하였다. WO 97/14804는 텍스타일 및 세제 산업에서 사용하기 위해 멜라노카르푸스(Melanocarpus) 기원으로부터 중성 Cel45A 셀룰라제(20 K 셀룰라제)를 개시한다. WO 2010/076388은 데님 세척 및 탈필링에서 지오미세스(Geomyces) 또는 푸사리움(Fusarium) Cel45 엔도글루카나제의 생산 및 사용을 개시한다. 미국 공개 제2007/0111278호는 셀룰로스-함유 직물의 세척 또는 탈필링에서 스타필로트리쿰(Staphylotrichum)으로부터 유도된 STCE1. Cel45 엔도글루카나제의 사용을 개시한다. 미국 특허 제7,741,093호는 바이오-스토닝 및 바이오마무리를 위해 트리코더마 레세이 CBH I과 셀룰로스 결합 도메인의 링커 펩티드에 대한 멜라노카르푸스 Cel45 엔도글루카나제의 융합체를 개시한다. 이러한 융합체 단백질을 구축하는 목적은 멜라노카르푸스 Cel45A 효소의 크기를 증가시켜, 이로써 효소가 직물을 침투하는 능력을 감소시키고, 차례로 강도 손실을 감소시키는 것이었다. Cel45 엔도글루카나제 및 다른 셀룰라제 효소로의 유사한 접근 방법이 WO 2007/118935 및 미국 특허 제7,256,032호에 개시되었다.
다른 군은 셀룰라제 효소 성분이 서로 상승작용하는지 아닌지를 설명하는데 중점을 두었다. 개선된 탈필링을 위해 제공한 효소 성분의 상승작용 조합의 확인은 공정 경제성을 개선하는 것에 대하여 진보된 단계일 수 있다. 이러한 개선은 값비싼 효소 단백질이 원하는 탈필링 효과를 부여하는데 더 적게 필요하기 때문에 달성될 수 있다.
Heikinheimo 및 Buchert(Textile Research Journal, 2001, 71(8):672-677)는 트리코더마 레세이 EG I 및 II 그리고 CBH I 및 II 셀룰라제 성분의 탈필링 성질을 단독으로 및 조합하여 조사하였다. CBH I 또는 CBH II와의 EG II-기반 조합으로 코튼 인터록 직물의 처리는 유리한 탈필링 성질을 가져왔다. 그러나, 조사관들은 2개의 엔도글루카나제, EG I 및 EG II의 조합을 위해 감소된 탈필링 활성을 또한 보고하였다. 즉, 셀룰라제 성분들 사이의 엔도-엔도 상승효과는 관찰되지 않았다.
Cavaco-Paulo 및 Almeida(Textile Chemist and Colorist, 1996, 28(6):28-32)는 코튼 셀룰로스 상에서 EG I 및 II-결실 트리코더마 레세이 셀룰라제 혼합물의 높은 활성을 관찰하였다. 저자들은 2개의 CBH 성분들 사이 또는 CBH 성분과 남은 EG III 또는 EG V 사이의 상승효과로 인하여 효과가 가능하게 있을 수 있다는 것을 거기에 언급한다. Cavaco-Paulo, Carbohydrate Polymers, 1998, 37:273-277에서, 소량의 EG 성분은 코튼을 충분히 가수분해기 위해 상승작용의 방식으로 CBH와 협력한 것 같다고 언급되었다. 그러나, 특정 성분이 서로 상승작용을 나타내는지를 조사하기 위한 시험은 수행되지 않았다.
미국 특허 제5,958,083호는 바이오-스토닝에 사용하기 위한 2개 성분의 셀룰라제 효소 혼합물을 개시한다. 제 1성분은 바실루스(Bacillus) 또는 클로스트리디움(Clostridium)으로부터 유도된 패밀리 5 엔도글루카나제, 또는 휴미콜라 인솔렌스(Humicola insolens)로부터 유도된 패밀리 7 엔도글루카나제이다. 제 2성분은 셀룰로스 결합 도메인을 갖는 패밀리 12 또는 패밀리 45 셀룰라제일 수 있는 기계 연마제 및/또는 연마 셀룰라제이다(색상 밀도에서 편재된 변동을 형성하기 위함). 낮은 백스테이닝을 갖는 개선된 바이오-스토닝이 얻어지지만, 탈필링 어세이에서 이들 조성물의 성질은 조사되지 않았다.
Miettinen-Oinonen et al.(Enzyme and Microbial Technology, 2004, 34:332-341)은 바이오-스토닝에서 패밀리 45 효소의 효과를 단독으로 또는 엔도글루카나제를 포함하는 다른 셀룰라제 성분과 조합하여 조사하였다. 그러나, 이들 효소 조성물의 탈필링 성질은 이들 연구에서 시험되지 않았다.
셀룰라제 성분들 사이의 상승효과는 셀룰로스의 기질의 가수분해, 또는 셀룰로스의 궁극적으로 글루코스로의 완전한 분해 및 전환의 문헌에서 보고되었다(Gusakov et al., Biotechnology and Bioengineering, 2007, 97(5):1028-1038; Andersen et al, Enzyme and Microbial Technology, 2008, 42(4):362-370; Boisset al., Biotechnology and Bioengineering, 2001, 72(3):339-345; Igarashi et al., Applied and Environmental Microbiology, 2008, 74:5628-5634; 및 Zhang et al., Biotechnology and Bioengineering, 2004, 7(88):797-824). 그러나, 연장된 가수분해는 그것이 직물의 파괴 또는 심각한 강도 손실을 가져올 수 있기 때문에, 일반적으로 탈필링에서 원하는 효과가 아니다. 더욱이, Ramos et al.(Biocatalysis and Biotransformation, 2007, 25(1):35-42)에 의해 보고된 바와 같이 가수분해는 바이오폴리싱 효과와 상관되지 않을 수 있다.
이들 효과에도 불구하고, 셀룰로스-함유 물품의 탈필링에 더 효과적인 셀룰라제 효소와 그것의 조성물의 개선된 조합이 필요하다. 특히, 공정 경제성을 개선하기 위해 더 효율적인 셀룰라제 효소 혼합물이 연속적으로 필요하다. 본 발명은 이들 요구를 충족시키는 것을 목표로 한다.
본 발명의 목적은 셀룰로스-함유 물품을 처리하는데 사용하기 위한 개선된 셀룰라제 효소 혼합물을 제공하는 것이다.
본 발명의 제 2양태에 따르면, 효소 혼합물을 포함하는 탈필링 조성물이 제공되는데, 이 효소 혼합물은 패밀리 45 셀룰라제 효소 성분 그리고 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 포함한다. 효소 혼합물은 (i) 상기 패밀리 45 셀룰라제 효소를 코드화하는 패밀리 45 셀룰라제 유전자; 및 (ii) 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 코드화하는 유전자 또는 유전자들을 과발현하는 유전적으로 변형된 미생물에 의해 분비되고, 상기 패밀리 45 셀룰라제는 SEQ ID NO:7(HiCel45)의 아미노산 1-213과 적어도 75% 서열 동일성 또는 SEQ ID NO:4(TrCel45)의 아미노산 1-166과 적어도 20% 서열 동일성을 갖는다.
본 발명의 한 구체예에 따르면, 탈필링 조성물은 패밀리 45 셀룰라제 및 패밀리 5 셀룰라제를 둘 다 포함한다. 본 발명의 추가 구체예에서, 탈필링 조성물은 패밀리 6 셀룰라제를 더 포함한다. 본 발명의 다른 구체예에서, 탈필링 조성물은 패밀리 7 셀룰라제를 더 포함한다. 대안으로, 탈필링 조성물은 패밀리 7 셀룰라제가 없다.
패밀리 5 셀룰라제는 363 위치에서 아미노산의 비천연 알라닌, 세린 또는 트레오닌으로의 치환을 포함할 수 있는데, 이 위치는 SEQ ID NO:2에 제시된 야생형 트리코더마 레세이 Cel5A 아미노산 서열과 함께 변형된 패밀리 5 셀룰라제의 배열로부터 결정된다.
본 발명은 셀룰로스-함유 물품을 위에 제시된 탈필링 조성물과 접촉하는 단계를 포함하는 탈필링을 위한 공정을 또한 제공한다.
본 발명의 추가 양태에 따르면, (i) 패밀리 45 셀룰라제 효소를 코드화하는 패밀리 45 셀룰라제 유전자; 및 (ii) 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 코드화하는 유전자 또는 유전자들을 과발현하는 유전적으로 변형된 미생물이 제공되며, 패밀리 45 셀룰라제는 SEQ ID NO:7(HiCel45)의 아미노산 1-213과 적어도 75% 서열 동일성 또는 SEQ ID NO:4(TrCel45)의 아미노산 1-166과 적어도 20% 서열 동일성을 가진다.
본 발명의 한 구체예에 따르면, 유전적으로 변형된 미생물은 적어도 패밀리 45 셀룰라제 및 패밀리 5 셀룰라제를 과발현한다. 대안으로, 유전적으로 변형된 미생물은 패밀리 6 셀룰라제를 과발현한다.
본 발명의 추가 구체예에 따르면, 유전적으로 변형된 미생물은 패밀리 7 셀룰라제를 발현한다. 대안으로, 유전적으로 변형된 미생물은 패밀리 7 셀룰라제를 발현하지 않는다.
유전적으로 변형된 미생물은 363 위치에서 아미노산의 비천연 알라닌, 세린 또는 트레오닌으로의 치환을 포함하는 패밀리 5 셀룰라제를 발현할 수 있는데, 이 위치는 SEQ ID NO:2에서 제시된 야생형 트리코더마 레세이 Cel5A 아미노산 서열과 함께 변형된 패밀리 5 셀룰라제의 배열로부터 결정된다.
패밀리 45 셀룰라제 그리고 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분은 미생물에 내인성 또는 이종성인 상기 유전적으로 변형된 미생물의 코드화 서열로부터 발현될 수 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 효소 혼합물을 포함하는 탈필링 조성물이 제공되는데, 이 효소 혼합물은 (i) 패밀리 45 셀룰라제 효소 성분; 및 (ii) 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 포함하고, 상기 효소 혼합물은 패밀리 45 및 패밀리 5 셀룰라제 효소 성분 또는 패밀리 45 및 패밀리 6 셀룰라제 효소 성분이 특이적 탈필링 활성을 측정하는 어세이에서 상승효과를 나타내는 중량 비율을 가지는 것을 특징으로 한다.
코튼-함유 물품의 탈필링에 특히 효과적인 셀룰라제 효소의 조합이 본원에 개시된다. 출원인들은 개별 효소 성분의 조합된 탈필링 효과에 대해 코튼-함유 물품의 개선된 탈필링을 위해 제공하는 셀룰라제 효소 성분의 조합을 확인하였다. 이러한 효소 조합의 이용은 공정 경제성을 개선하는 것에 대하여 진보된 단계일 수 있다. 이러한 개선은 값비싼 효소 단백질이 원하는 탈필링 효과를 부여하는데 더 적게 필요하기 때문에 달성될 수 있다.
도 1은 TrCel45A(SEQ ID NO:4)로 약기된 야생형 트리코더마 레세이 패밀리 45 셀룰라제의 아미노산 1-166에 대한 8개의 선택된 글리코시드 히드롤라제(GH) 패밀리 45 셀룰라제의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. 패밀리 45 셀룰라제를 특징으로한 보존된 아미노산 모티프가 밑줄쳐있다.
도 2는 HiCel45A(SEQ ID NO:7)로 약기된 휴미콜라 인솔렌스 패밀리 45 셀룰라제의 아미노산 1-213에 대한 49개의 선택된 글리코시드 히드롤라제(GH) 패밀리 45 셀룰라제의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. 패밀리 45 셀룰라제를 특징으로한 보존된 아미노산 모티프가 밑줄쳐있다.
도 3은 TrCel5A(SEQ ID NO:2)로 약기된 트리코더마 레세이 패밀리 5 셀룰라제의 아미노산 71-397에 대한 14개의 선택된 글리코시드 히드롤라제(GH) 패밀리 5 셀룰라제 사이의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. TrCel5A에서 218 및 329 해당 위치에서의 촉매 아미노산은 화살표로 표시된다. TrCel5A에서 130, 174, 217, 288, 및 290 해당 위치에서의 보존된 아미노산은 별표로 표시된다. 셀룰로스-결합 도메인을 갖는 셀룰라제를 위해, 단지 촉매 코어 서열이 제공된다.
도 4는 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 pP7a-TrCel45A-hph-TV의 맵이다.
도 5는 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 pP7a-xyn2ss-Cel45A-hph-TV의 맵이다.
도 6은 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 pP6a-6Ass-Cel45A-ble-TV의 맵이다.
도 7은 TrCel45A 및 변형된 TrCel5A를 과발현하는 트리코더마 레세이 형질전환체에 의해, 그리고 최종 발효 샘플에서 성분 특정 항체를 사용하는 ELISA에 의해 평가된 모균주(parental strain) P998A에 의해 생산된 셀룰라제 혼합물에서 TrCel7A, TrCel6A, TrCel45A 및 TrCel5A의 상대 풍도를 묘사한다. 균주 이름은 각 막대 아래에 표시되고 시험된 각 셀룰라제의 상대 풍도는 해당 막대 상에 표시된다.
도 8은 TrCel45A 및 변형된 TrCel5A를 과발현하는 트리코더마 레세이 형질전환체에 의해, 그리고 모균주 BTR213 및 P998A에 의해 생산된 셀룰라제 효소 혼합물의 상대 탈필링 활성을 나타낸다. 균주 이름은 각 막대 아래에 표시되고 상대 탈필링 활성은 해당 막대 상에 표시된다.
도 9는 TrCel6A(SEQ ID NO:3)로 약기된 트리코더마 레세이 패밀리 6 셀룰라제의 아미노산 83-477에 대한 35개의 선택된 글리코시드 히드롤라제(GH) 패밀리 6 셀룰라제의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. 패밀리 6 셀룰라제는 표 4에 제공된 것들에 해당하고 표에 제공된 순서로 나타낸다.
도 10은 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 pChHiCel5A-pyr4-TV의 맵이다.
도 11은 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 Pc/x-TrHiCel45a-ble-TV의 맵이다.
도 12는 HiCel45A(P1622A 및 P1622F)를 발현하는 모균주 P579A의 트리코더마 레세이 형질전환체의 배양 여과액의 웨스턴 블롯이다.
도 13은 모균주 BTR213에 의해 생산된 것에 대해, HiCMC3(균주 P579A)을 과발현하거나 또는 HiCMC3 및 HiCel45A(균주 P1622A)를 둘 다 과발현하는 트리코더마 레세이 형질전환체에 의해 생산된 셀룰라제 효소 혼합물의 상대 탈필링 활성을 나타낸다. 균주 이름은 각 막대 아래에 표시되고 상대 탈필링 활성은 해당 막대 상에 표시된다.
도 14는 정제된 TrCel45A, 정제된 TrCel5A-G363A, 또는 TrCel45A + TrCel5A-G363A의 배합물의 증가하는 용량에 의한 탈필링 활성(직물 샘플로부터 방출된 미세분의 백분율에 관함)을 나타낸다.
도 15는 정제된 TrCel45A, TrCel6A+TrCel5A-G363A+TrCel5A의 배합물 또는 TrCel45A+TrCel6A+TrCel5A-G363A+TrCel5A의 배합물의 증가하는 용량에 의한 탈필링 활성(직물 샘플로부터 방출된 미세분의 백분율에 관함)을 나타낸다.
도 2는 HiCel45A(SEQ ID NO:7)로 약기된 휴미콜라 인솔렌스 패밀리 45 셀룰라제의 아미노산 1-213에 대한 49개의 선택된 글리코시드 히드롤라제(GH) 패밀리 45 셀룰라제의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. 패밀리 45 셀룰라제를 특징으로한 보존된 아미노산 모티프가 밑줄쳐있다.
도 3은 TrCel5A(SEQ ID NO:2)로 약기된 트리코더마 레세이 패밀리 5 셀룰라제의 아미노산 71-397에 대한 14개의 선택된 글리코시드 히드롤라제(GH) 패밀리 5 셀룰라제 사이의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. TrCel5A에서 218 및 329 해당 위치에서의 촉매 아미노산은 화살표로 표시된다. TrCel5A에서 130, 174, 217, 288, 및 290 해당 위치에서의 보존된 아미노산은 별표로 표시된다. 셀룰로스-결합 도메인을 갖는 셀룰라제를 위해, 단지 촉매 코어 서열이 제공된다.
도 4는 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 pP7a-TrCel45A-hph-TV의 맵이다.
도 5는 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 pP7a-xyn2ss-Cel45A-hph-TV의 맵이다.
도 6은 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 pP6a-6Ass-Cel45A-ble-TV의 맵이다.
도 7은 TrCel45A 및 변형된 TrCel5A를 과발현하는 트리코더마 레세이 형질전환체에 의해, 그리고 최종 발효 샘플에서 성분 특정 항체를 사용하는 ELISA에 의해 평가된 모균주(parental strain) P998A에 의해 생산된 셀룰라제 혼합물에서 TrCel7A, TrCel6A, TrCel45A 및 TrCel5A의 상대 풍도를 묘사한다. 균주 이름은 각 막대 아래에 표시되고 시험된 각 셀룰라제의 상대 풍도는 해당 막대 상에 표시된다.
도 8은 TrCel45A 및 변형된 TrCel5A를 과발현하는 트리코더마 레세이 형질전환체에 의해, 그리고 모균주 BTR213 및 P998A에 의해 생산된 셀룰라제 효소 혼합물의 상대 탈필링 활성을 나타낸다. 균주 이름은 각 막대 아래에 표시되고 상대 탈필링 활성은 해당 막대 상에 표시된다.
도 9는 TrCel6A(SEQ ID NO:3)로 약기된 트리코더마 레세이 패밀리 6 셀룰라제의 아미노산 83-477에 대한 35개의 선택된 글리코시드 히드롤라제(GH) 패밀리 6 셀룰라제의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. 패밀리 6 셀룰라제는 표 4에 제공된 것들에 해당하고 표에 제공된 순서로 나타낸다.
도 10은 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 pChHiCel5A-pyr4-TV의 맵이다.
도 11은 트리코더마 레세이 형질전환 벡터 Pc/x-TrHiCel45a-ble-TV의 맵이다.
도 12는 HiCel45A(P1622A 및 P1622F)를 발현하는 모균주 P579A의 트리코더마 레세이 형질전환체의 배양 여과액의 웨스턴 블롯이다.
도 13은 모균주 BTR213에 의해 생산된 것에 대해, HiCMC3(균주 P579A)을 과발현하거나 또는 HiCMC3 및 HiCel45A(균주 P1622A)를 둘 다 과발현하는 트리코더마 레세이 형질전환체에 의해 생산된 셀룰라제 효소 혼합물의 상대 탈필링 활성을 나타낸다. 균주 이름은 각 막대 아래에 표시되고 상대 탈필링 활성은 해당 막대 상에 표시된다.
도 14는 정제된 TrCel45A, 정제된 TrCel5A-G363A, 또는 TrCel45A + TrCel5A-G363A의 배합물의 증가하는 용량에 의한 탈필링 활성(직물 샘플로부터 방출된 미세분의 백분율에 관함)을 나타낸다.
도 15는 정제된 TrCel45A, TrCel6A+TrCel5A-G363A+TrCel5A의 배합물 또는 TrCel45A+TrCel6A+TrCel5A-G363A+TrCel5A의 배합물의 증가하는 용량에 의한 탈필링 활성(직물 샘플로부터 방출된 미세분의 백분율에 관함)을 나타낸다.
하기 설명은 단지 실시예에 의한 바람직한 구체예이고 본 발명을 효과적으로 실시하기 위해 필요한 특징부의 조합을 제한하지 않는다. 제공된 제목은 본 발명의 여러 가지 구체예를 제한하는 것으로 의미되지 않는다. "포함한다" 및 "포함하는"과 같은 용어는 제한을 의미하지 않는다. 게다가, 단수의 사용은 복수를 포함하고, "또는"은 달리 언급되지 않는 한 "및/또는"을 의미한다. 달리 본원에서 한정되지 않은 한, 본원에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 당업자에 의해 흔히 이해된 것과 같은 의미를 가진다.
패밀리 45
셀룰라제
글리코시드 히드롤라제(GH)는 큰 다당류 분자에서 개별 탄수화물 단량체들 사이의 글리코시드 결합을 절단하는 큰 군의 효소이다. 셀룰라제는 셀룰로스 중합체에서 글루코스 단량체들 사이의 베타 1-4 결합을 절단한다. GH 효소 모두는 글리코시드 결합에 물 분자를 도입하고 따라서 다당류를 절단하기 위해, 반전 및 보유라는 2개의 공통 메커니즘 중 하나를 공유한다.
GH 패밀리 45 셀룰라제 효소(이전에 패밀리 K)는 아노머 구조의 반전으로 작용하여 생성물로서 올리고당의 α-D 아노머를 생성한다. 활성 부위에서, 하나의 아스파르트산 아미노산은 일반 산으로서 그리고 다른 것은 일반 염기로서 작용한다고 설명되었다.
패밀리 45 효소의 3차원 구조가 설명되었다(예를 들어, Davies et al., 1996, Acta Crystallographica Section D-Biological Crystallography 52:7-17 Part 1의 휴미콜라 인솔렌스의 구조 참고). 효소는 7번째 스트랜드가 첨부된 곳에 6-스트랜드 베타-배럴을 함유한다. 구조는 평행 및 역-평행 베타-스트랜드를 둘 다 함유한다. 활성 중심은 개방 기질-결합 홈에 위치된다.
본원에 사용된 용어 "패밀리 45 셀룰라제" 또는 "Cel45"는 EC 3.2.1.4하에서 분류된 글리코시드 히드롤라제 패밀리 45 촉매 도메인을 함유한 탄수화물 활성 셀룰라제 효소를 의미한다. 용어는 셀룰로스 및 셀로-올리고당을 반전 메커니즘을 사용하여 가수분해하는 탄수화물 활성 효소를 망라하고, 촉매 아스파르트산 아미노산의 부근에 하기의 2개의 특징 서열 중 하나를 가진다: (i) A/S/T - T - R/N/T - Y/F/T - X - D - X - X - X - X - X - C/A - A/G/S - W/C의 제 1보존 특징 서열 및 H/Q/D/N - F/L - D - I/L/F의 제 2보존 특징 서열 둘 다; 또는 (ii) H/Q/D/N - F/L - D - I/L/F의 제 2보존 특징 서열을 가지나 상기 제 1보존 서열이 없다. 한 구체예에서, 제 2보존 특징 서열은 H-F-D-I이다. 이러한 보존 특징 서열은 예를 들어 SEQ ID NO:의 아미노산 6-19 및 115-118에서 발견될 수 있다.
패밀리 45 셀룰라제 효소는 "A" 및 "B"로서 언급된 적어도 2가지 하위패밀리로 분할되었다(Igarashi et al., Applied and Environmental Microbiology, 2008, 74(18):5628-5634). 본 발명의 한 구체예에 따르면, 패밀리 45 셀룰라제 효소는 하위패밀리 A 구성원이다. 본 발명의 다른 구체예에 따르면, 패밀리 45 셀룰라제 효소는 하위패밀리 B 구성원이다. 이것은 아래 표에 열거된 하위패밀리 A 및 하위패밀리 B 효소를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 본원에 개시된 Cel45A 서열의 아미노산 번호 붙이기는 성숙한, 분비된 단백질 - 즉, 분비 신호 펩티드 및/또는 선도 펩티드가 없는 단백질의 서열에 기초한다는 것이 이해되어야 한다.
아래 표 1 및 표 2는 각각 하위패밀리 "B" 및 "A"로부터의 패밀리 구성원의 대표적인 목록을 제공한다. 기준 하위패밀리 A 또는 B 패밀리 구성원을 갖는 각 아미노산 서열을 위한 서열 동일성이 각 표에 또한 제공된다. 표 1에서 하위패밀리 B 서열을 위해, 서열 동일성은 트리코더마 레세이 Cel45A(TrCel45A; SEQ ID NO:4)의 아미노산 1-166과의 배열에 의해 결정되고, 표 2에서 하위패밀리 A 서열을 위해, 서열 동일성은 휴미콜라 인솔렌스 Cel45A(HiCel45A; SEQ ID NO:7)의 아미노산 1-213과의 배열에 의해 결정되었다. 도 1 및 2는 아래 각각 표 1 및 2에서 제공된 패밀리 45 셀룰라제의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. 약기된 이름 후에 나타난 글자는 어떤 특정 하위패밀리에서 패밀리 45의 포함을 나타내지 않는다는 것이 주목되어야 한다. 예를 들어, T. 레세이 패밀리 45 셀룰라제는 이것이 T. 레세이에서 분리된 제 1패밀리 45 셀룰라제이기 때문에 하위패밀리 B에 속하지만 TrCel45A로 약기된다.
| 유기체 |
단축된
이름 |
유전자은행
가입 번호 |
SEQ ID NO : |
SEQ
ID
NO
:4의
TrCel45A
아미노산 1-166과의 퍼센트 동일성 |
| 트리코더마 레세이 (Trichoderma reesei) |
TrCel45A | CAA83846.1 | 4 | 100.0 |
| 트리코더마 비리데 (Trichoderma viride) |
TvEGV | AAQ21385.1 | 8 | 100.0 |
| 페니실리움 데쿰벤스 (Penicillium decumbens) |
PdCel45A | ACF33814.1 | 9 | 84.0 |
| 아스페르질루스 니둘란스 (Aspergillus nidulans) |
AnAN6786.2 | EAA58604.1 | 10 | 49.4 |
| 할리오티스 디스쿠스 디스쿠스 (Haliotis discus discus) |
HddEG1 | ABO26608.1 | 11 | 36.1 |
| 암풀라리아 크로세안 (Ampullaria crossean) |
AcEG27I | ABR92637.1 | 12 | 34.6 |
| 암풀라리아 크로세안 | AcEG27II | ABR92638.1 | 13 | 33.5 |
| 미틸루스 에둘리스 (Mytilus edulis) |
MeEg | CAC59695.1 | 14 | 30.3 |
| 파네로카에테 크리소스포리움 (phanerochaete chrysosporium)* |
PcCel45A | BAG68300.1 | 15 | 26.2 |
* 이 명세서의 목적을 위해, PcCel45A는 하위패밀리 B 구성원으로서 분류된다. Igarashi et al.(supra)은 하위패밀리 "C" 패밀리 45 셀룰라제를 정의하고 PcCel45A가 이 패밀리의 구성원이라고 표시하지만, 그들은 효소가 하위패밀리 B와 일부 유사성을 나타낸다고 보고한다.
| 유기체 |
단축된
이름 |
유전자은행
가입 번호 |
SEQ ID NO : |
SEQ
ID
NO
:7의
HiCel45A 아미노산 1-213과의 퍼센트 동일성 |
| 휴미콜라 인솔렌스 | HiCel45A | AAE16508.1 | 7 | 100.0 |
| 휴미콜라 그리세아 바르. 테르모이데아 (Humicola grisea var. thermoidea) |
HgEgl3 | BAA74956.1 | 16 | 98.5 |
| 휴미콜라 니그레스센스 (Humicola nigrescens) |
HnCel45A | CAB42308.1 | 17 | 85.4 |
| 스타필로트리쿰 코코스포룸 (Staphylotrichum coccosporum) |
ScSTCE1 | BAG69187.1 | 18 | 80.7 |
| 멜라노카르푸스 알보미세스 (Melanocarpus albomyces) |
MaCel45A | CAD56665.1 | 19 | 77.9 |
| 포도스포라 안세리나 (Podospora anserina) |
PaCel45A | CAP61565.1 | 20 | 74.1 |
| 아크레모니움 테르모필룸 (Acremonium thermophilum) |
AtSEQ6 | ACE10216.1 | 21 | 73.7 |
| 티엘라비아 테레스트리스 (Thielavia terrestris) |
TtCel45A | CAH03187.1 | 22 | 73.7 |
| 트리코테시움 로세움 (Trichothecium roseum) |
TroCel45A | CAB42312.1 | 23 | 73.3 |
| 아크레모니움 테르모필룸 | AtSEQ2 | ABW41463.1 | 24 | 73.2 |
| 푸사리움 안구이오이데스 (Fusarium anguioides) |
FaCel45A | CAB42310.1 | 25 | 72.8 |
| 클로노스타치스 로세아 f. 카테눌라타 (Clonostachys rosea f. catenulata) |
CrCel45A | CAB42311.1 | 26 | 72.3 |
| 뉴로스포라 크라사 (Neurospora crassa) |
NcCel45A | CAD70529.1 | 27 | 69.4 |
| 볼루텔라 콜레토트리초이데스 (Volutella colletotrichoides) |
VcSEQ22 | AAY00854.1 | 28 | 64.4 |
| 지베렐라 제애 (Gibberella zeae) |
GzCel45A | AAR02399.1 | 29 | 62.6 |
| 푸사리움 옥시스포룸 (Fusarium oxysporum) |
FoCel45A | AAA65589.1 | 30 | 62.1 |
| 아크레모니움 종 (Acremonium sp.) |
AsSEQ10 | AAY00848.1 | 31 | 60.8 |
| 아크레모니움 종 | AsSEQ8 | AAY00847.1 | 32 | 59.3 |
| 크리소스포리움 룩크노웬스 (Chrysosporium lucknowense) |
ClCel45A | AAQ38150.1 | 33 | 57.3 |
| 티엘라비아 헤테로탈리카 (Thielavia heterothallica) |
ThSEQ2 | AAY00844.1 | 34 | 57.3 |
| 무코르 시르시넬로이데스 (Mucor circinelloides) |
McMce1 | BAD95808.1 | 35 | 56.8 |
| 레티쿨리테르메스 스페라투스 힌드구트 프로티스트(Reticulitermes speratus hindgut protist) | RshpCel45A | BAA98037.1 | 36 | 56.8 |
| 부르사펠렌추스 크실로필루스 (Bursaphelenchus xylophilus) |
BxEng1 | BAD34546.1 | 37 | 55.9 |
| 보트리오티니아 푹켈리아나 (Botryotinia fuckeliana) |
BfCel45A | XP_001547700.1 | 38 | 55.8 |
| 아크레모니움 테르모필룸 | AtSEQ4 | ABW41464.1 | 39 | 55.3 |
| 스코풀라리옵시스 브레비카울리스 (Scopulariopsis brevicaulis) |
SbEgI | Q7M4T4* | 40 | 55.0 |
| 신세팔라스트룸 라세모숨 (Syncephalastrum racemosum) |
SrCBHI | ABU49185.2 | 41 | 55.0 |
| 리조퍼스 오리재 (Rhizopus oryzae) |
RoRce1 | BAC53956.1 | 42 | 54.7 |
| 크리니펠리스 스카벨라 (Crinipellis scabella) |
CsSEQ16 | AAY00851.1 | 43 | 53.9 |
| 마크로포미나 파세올리나 (Macrophomina phaseolina) |
MpSEQ14 | AAY00850.1 | 44 | 53.9 |
| 포도스포라 안세리나 | PaCel45B | CAP69443.1 | 45 | 53.9 |
| 리조퍼스 오리재 | RoRce3 | BAC53988.1 | 46 | 53.8 |
| 부르사펠렌추스 크실로필루스 | BxEng2 | BAD34544.1 | 47 | 53.6 |
| 부르사펠렌추스 크실로필루스 | BxEng3 | BAD34548.1 | 48 | 53.6 |
| 휴미콜라 그리세아 바르. 테르모이데아 | HgEgl4 | BAA74957.1 | 49 | 53.4 |
| 피코미세스 니텐스(Phycomyces nitens) | PnPce1 | BAD77808.1 | 50 | 53.2 |
| 리조퍼스 오리재 | RoRce2 | BAC53987.1 | 51 | 52.9 |
| 마스토테르메스 다르위니엔시스 힌드구트 심비온트 종(Mastotermes darwiniensis hindgut symbiont sp.) | MdhsFm4 | CAD39200.1 | 52 | 52.7 |
| 마그나포르테 그리세아 (Magnaporthe grisea) |
MgCel45A | XP_363402.1 | 53 | 51.8 |
| 마스토테르메스 다르위니엔시스 힌드구트 심비온트 종 | MdhsFm3 | CAD39199.1 | 54 | 51.8 |
| 마스토테르메스 다르위니엔시스 힌드구트 심비온트 종 | MdhsFm1 | CAD39197.1 | 55 | 51.3 |
| 마스토테르메스 다르위니엔시스 힌드구트 심비온트 종 | MdhsFm2 | CAD39198.1 | 56 | 51.3 |
| 피치아 파스토리스 GS115 (Pichia pastoris GS115) |
PpCel45A | CAY71902.1 | 57 | 51.3 |
| 피로미세스 에퀴 (Piromyces equi) |
PeCel45A | CAB92325.1 | 58 | 48.2 |
| 아프리오나 게르마리 (Apriona germari) |
AgCelI | AAN78326.1 | 59 | 43.8 |
| 아프리오나 게르마리 | AgCelII | AAR22385.1 | 60 | 43.6 |
| 알테르나리아 알테르나타 (Alternaria alternata) |
AaK1 | AAF05700.1 | 61 | 41.4 |
| 파에돈 코클레아리아에 (Phaedon cochleariae) |
PcEg | CAA76931.1 | 62 | 40.4 |
| 탈라로미세스 에메르소니이 (Talaromyces emersonii) |
TeCel45A | CAJ75963.1 | 63 | 37.6 |
| 우스틸라고 마이디스 (Ustilago maydis) |
UmEgl1 | AAB36147.1 | 64 | 33.6 |
* Uniprot 엔트리
상기 표 1 및 2에 보고된 패밀리 45 셀룰라제의 서열 동일성은 하기와 같이 결정된다. 각 효소의 전체 서열(존재하면 CBM 및 신호 펩티드 포함)은 BioEdit 소프트웨어 버전 7.0.9.0(2007년 6월 27일)에서 발견된 디폴트 설정을 갖는 ClustalW Multiple Alignment 도구(Thompson et al., Nucleic Acids Research, 1994, 22(22):4673-4680)를 사용하여, 기준 서열 HiCel45A(SEQ ID NO:7)의 아미노산 1 내지 213으로 또는 기준 서열 TrCel45A(SEQ ID NO:4)의 아미노산 1 내지 166으로 배열된다. 기준 효소의 처음 또는 마지막 아미노산 전에 또는 후에 발견된 모든 아미노산은 배열로부터 재배된다. 배열은 재배된 서열을 사용하여 두 번째로 수행되고 다시, 기준 효소의 처음 또는 마지막 아미노산 전에 또는 후에 발견된 모든 아미노산은 배열로부터 재배된다. 그 다음 기준 서열의 선택된 아미노산과의 퍼센트 동일성이 계산된다.
BLAST 알고리즘(BLAST and BLAST 2.0; Altschul et al., Nuc. Acids Res., 1997, 25:3389-3402; 및 Altschul et al., J. Mol. Biol., 1990, 215:403-410); Smith and Waterman, Adv. Appl. Math., 1981, 2:482-489에 의해, Needleman and Wunsch, J. Mol. Biol., 1970, 48:443-453의 상동성 배열 알고리즘에 의해, Pearson and Lipman, J. Proc Natl Acad Sci., 1988, 85(8):2444-8의 유사성 방법을 위한 검색에 의해, 이들 알고리즘(Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, Wis.의 GAP, BESTFIT, FASTA, 및 TFASTA)의 전산화 시행에 의해, 또는 수동 배열 및 육안 검사(예를 들어, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Ausubel et al., eds. 1995 부록 참고)에 의해 개시된 알고리즘을 포함하는, 다른 서열 배열 알고리즘이 당업자에게 알려져 있다. 셀룰라제 효소를 위해 BLAST 배열 및 서열 동일성을 결정할 때, 촉매 도메인 및 CBD를 포함하는 아미노산 서열이 별도로 또는 하나의 인접 서열로서 생각될 수 있다.
한 구체예에 따르면, 패밀리 45 셀룰라제는 하위패밀리 B 셀룰라제이고 SEQ ID NO:4 (TrCel45A)의 아미노산 1-166과 20% 내지 100% 아미노산 서열 동일성, 또는 더 바람직하게는 SEQ ID NO:4의 아미노산 1-166과 30% 내지 100% 아미노산 서열 동일성을 가진다. 예를 들어, 패밀리 45 셀룰라제는 SEQ ID NO:4의 아미노산 1-166과 20, 30, 40, 50, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
추가 구체예에 따르면, 패밀리 45 셀룰라제는 하위패밀리 A 셀룰라제이고 SEQ ID NO:7 (HiCel45A)의 아미노산 1-213과 30% 내지 100% 아미노산 서열 동일성, 또는 더 바람직하게는 SEQ ID NO:7의 아미노산과 40% 내지 100% 아미노산 서열 동일성을 가진다. 예를 들어, 패밀리 45 셀룰라제는 SEQ ID NO:7의 아미노산 1-213과 30, 40, 50, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
패밀리 45 셀룰라제는 자연 발생 또는 야생형 패밀리 45 셀룰라제 또는 변형된 패밀리 45 셀룰라제일 수 있다. "변형된 패밀리 45 셀룰라제"는 효소의 구조 및 기능을 상당히 포함하지 않은 유전자 가공 기술에 의해 도입된, 하나 또는 그 이상의 유전자 변경을 함유한 패밀리 45 셀룰라제를 의미한다. 이러한 기술은 분리된 DNA상에서 수행된 것을 포함하는 또는 UV광과 같은 돌연변이원에 미생물을 노출함으로써, 부위-관련 돌연변이유발, 카세트 돌연변이유발, 랜덤 돌연변이유발, 합성 올리고뉴클레오티드 구조, 복제, 하부-복제, PCR에 의한 증폭, 시험관내 합성 및 다른 유전자 가공 기술을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 어떤 방법에서 제한하지 않고 당업자에 의해 평가된 바와 같이, 패밀리 45 셀룰라제들 사이에 낮은 서열 보존의 영역에 도입된 돌연변이는 효소의 촉매 활성을 감소시키거나 또는 변경하는 더 낮은 확률을 가지는 것이 기대된다.
변형된 패밀리 45 셀룰라제는 어떤 적합한 패밀리 45 셀룰라제로부터 유도될 수 있다는 것이 이해될 것이다. 즉, 이것은 자연 발생 또는 "야생형" 패밀리 45 셀룰라제로부터 또는 이미 다른 아미노산 치환, 결실 또는 삽입을 함유한 패밀리 45 셀룰라제로부터 유도될 수 있다. 용어 "야생형 패밀리 45 셀룰라제"는 분자 생물학 기술에 의해 도입된 어떤 유전자 변경(들)을 함유하지 않은 패밀리 45 셀룰라제를 의미한다.
패밀리
5
셀룰라제
균류 및 박테리아 기원의 3,000개 이상의 자연 발생 패밀리 5 셀룰라제를 위한 아미노산 서열이 설명되었다. 패밀리 5 셀룰라제의 영역은 대부분의 패밀리 5 셀룰라제 효소에서 잘 보존되고 이것은 패밀리 구성원의 촉매 도메인의 일부의 배열을 허용하였다.
아래 표 3은 14개의 알려진 패밀리 5 셀룰라제의 대표적인 목록을 포함하고 도 3은 표에서 제공된 셀룰라제들 사이의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. 표 3의 패밀리 5 셀룰라제의 퍼센트 서열 동일성은 패밀리 45 셀룰라제를 위해 이전에 설명된 과정을 사용하여 결정된다.
| 유기체 |
약기된
이름 |
유전자은행
가입 번호 |
SEQ ID NO : |
SEQ
ID
NO
:2의
TrCel5A
아미노산 71-397과의 퍼센트 동일성 |
| 트리코더마 레세이 | TrCel5A | AAA34213.1 | 2 | 100.0 |
| 페니실리움 잔티넬룸 (Penicillium janthinellum) |
PjEgl2 | CAA61740.1 | 65 | 62.0 |
| 마크로포미나 파세올리나 | MpEgl2 | AAB03889.1 | 66 | 58.1 |
| 크립토코쿠스 플라부스 (Cryptococcus flavus) |
CfEgl1 | AAC60541.1 | 67 | 43.2 |
| 아스페르질루스 니둘란스 | AnEglA | EAA65878.1 | 68 | 28.8 |
| 아스페르질루스 가와치 (Aspergillus kawachii) |
AkCel5A | BAB62317.1 | 69 | 27.1 |
| 마크로포미나 파세올리나 | MpEgl1 | AAB51451.1 | 70 | 27.8 |
| 볼바리엘라 볼바세아 (Volvariella volvacea) |
VvEG1 | AAG59832.1 | 71 | 27.6 |
| 테르모아스쿠스 오란티아쿠스 (Thermoascus aurantiacus) |
TaEg1 | AAL88714.2 | 72 | 27.5 |
| 아스페르질루스 아쿨레아투스 (Aspergillus aculeatus) |
AaCel1 | AAC08587.1 | 73 | 26.3 |
| 휴미콜라 인솔렌스 | HiCMC3 | CAA53631.1 | 74 | 26.6 |
| 오르피노미세스 조이오니이 (Orpinomyces joyonii) |
OjCelB29 | AAB69347.1 | 75 | 14.4 |
| 아시도테르무스 셀룰로이티쿠스 (Acidothermus cellulolyticus) |
AcCel5A | AAA75477.1 | 76 | 16.0 |
| 바실루스 서브틸리스 (Bacillus subtilis) |
BsCel5A | ACI15227.1 | 77 | 14.6 |
| 바실루스 셀룰로이티쿠스 (Bacillus cellulolyticus) |
BcNK1 | AAA22299.1 | 78 | 14.5 |
본원에 사용된 용어 "패밀리 5 셀룰라제" 또는 "Cel5A"는 EC 3.2.1.4하에서 분류된 글리코히드롤라제(GH) 패밀리 5 촉매 도메인을 함유한 탄수화물 활성 셀룰라제 효소를 망라한다. 용어는 (트리코더마 레세이 패밀리 5 셀룰라제, SEQ ID NO:2와의 배열에 의해 결정된) 보존 R130, H174, E217, E218, H288, Y290 및 E329 아미노산을 갖는 효소를 포함하는, 보유 메커니즘을 사용하는 (1→4)-베타-D-글루코시드 연결의 적어도 가수분해를 나타낸 어떤 탄수화물 활성 효소를 망라한다.
패밀리 5의 효소는 아노머 당 형태의 순 유지를 가져오는 공통의 (베타/알파)8-배럴 접힘 및 촉매 메커니즘을 공유한다. 글리코시드 히드롤라제 촉매작용은 아스파르트산 및/또는 글루탐산의 측쇄상에 발견된 2개의 카르복시산에 의해 구동된다. 이들 2개의 아미노산은 패밀리 구성원들 사이에서 잘 보존된다.
본 발명의 패밀리 5 셀룰라제는 363 위치에서 알라닌, 세린 또는 트레오닌 예를 들어 Cel5A-G363A(SEQ ID NO:1)에 대한 적어도 돌연변이를 포함하는 변형된 패밀리 5 셀룰라제일 수 있다. 일반적으로, 363 위치에 도입된 아미노산은 그것이 유도된 야생형 패밀리 5 셀룰라제 서열의 해당 위치에서 자연 발생하는 것이 아닌 것을 의미하는, "비천연"이다.
"변형된 패밀리 5 셀룰라제"는 효소의 구조 및 기능을 상당히 포함하지 않은 유전자 가공 기술에 의해 도입된 하나 또는 그 이상의 유전자 변경을 함유한 패밀리 5 셀룰라제를 의미한다. 이러한 기술은 분리된 DNA상에서 수행된 것을 포함하는 또는 UV광과 같은 돌연변이원에 미생물을 노출함으로써, 부위-관련 돌연변이유발, 카세트 돌연변이유발, 랜덤 돌연변이유발, 합성 올리고뉴클레오티드 구조, 복제, 하부-복제, PCR에 의한 증폭, 시험관내 합성 및 다른 유전자 가공 기술을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 변형된 패밀리 5 셀룰라제는 어떤 적합한 패밀리 5 셀룰라제로부터 유도될 수 있다는 것이 이해될 것이다. 즉, 이것은 자연 발생 또는 "야생형" 패밀리 5 셀룰라제로부터 또는 이미 다른 아미노산 치환, 결실 또는 삽입을 함유한 패밀리 5 셀룰라제로부터 유도될 수 있다.
용어 "야생형 패밀리 5 셀룰라제"는 분자 생물학 기술에 의해 도입된 어떤 유전자 변경(들)을 함유하지 않은 자연에서 발견된 패밀리 5 셀룰라제를 의미한다.
363 돌연변이의 위치는 야생형 트리코더마 레세이 패밀리 5 효소와의 배열, 또한 "TrCel5A"로서 본원에 언급된, SEQ ID NO:2에서 제공된 아미노산 서열에 의해 결정된다. 셀룰라제 효소의 패밀리 5 촉매 도메인들 사이에 서열 유사성을 최적화하도록 아미노산을 배열함으로써, 그리고 번호 붙이기를 위한 기저로서 TrCel5A의 아미노산 번호 붙이기(또한 본원에서 "TrCel5A 번호 붙이기"로서 언급됨)를 사용함으로써, 다른 패밀리 5 셀룰라제 내에서 아미노산의 위치는 TrCel5A에 대해 결정될 수 있다. 아미노산 번호 붙이기는 성숙한, 분비된 단백질의 서열, 즉 분비 신호 펩티드 또는 선도 펩티드의 제거 후의 단백질 서열에 기초한다.
추가 돌연변이는 이러한 돌연변이가 효소의 구조 및 기능을 상당히 포함하지 않으면, 변형된 패밀리 5 셀룰라제에 도입될 수 있다. 어떤 방법으로 제한하지 않고 당업자에 의해 평가된 바와 같이, 추가 돌연변이는 패밀리 5 셀룰라제들 사이에 낮은 서열 보존의 영역에 도입될 수 있다.
본 발명의 변형된 패밀리 5 셀룰라제는 "363 위치에서 아미노산 치환으로 본질적으로 구성되는" 아미노산 변형을 함유할 수 있다. 이것은 변형된 패밀리 5 셀룰라제가 그것의 서열에서 해당 야생형 패밀리 5 셀룰라제에 대해 20개 이하의 다른 아미노산 변형을 함유한다는 것을 의미한다. 본 발명의 다른 실시예에서, 변형된 패밀리 5 셀룰라제는 그것의 서열에서 15개 이하의 다른 아미노산 변형, 10개 이하의 다른 아미노산 변형 또는 5개 이하의 다른 아미노산 변형을 함유한다. 이전에 언급된 바와 같이, 이러한 추가 아미노산 변형은 아미노산 서열에서 비-보존된 위치에서 도입될 수 있다. 어떤 방법을 제한하지 않으면서, 이러한 변형은 전형적으로 아미노산 치환이다.
아미노산 치환을 포함하나 이에 제한되지 않는 추가 아미노산 변형(들)은 랜덤 돌연변이유발, 부위-관련 돌연변이유발 또는 관련 진화와 같은 표준 분자 생물학 기술에 의해 도입될 수 있다.
야생형 서열(TrCel5A 번호 붙이기)의 363 위치에서 알라닌을 함유하지 않고 본 발명에 따라서 변형될 수 있는 패밀리 5 셀룰라제의 대표적인 예는 트리코더마, 히포크레아(Hypocrea), 페니실리움, 보트리오티니아, 마크로포미나, 아스페르질루스, 오르피노미세스, 아시도테르무스, 페스탈로티옵시스(Pestalotiopsis) 및 크실렐라(Xylella)의 속으로부터의 효소 종을 포함한다. 본 발명의 한 실시예에서, 변형된 패밀리 5 셀룰라제는 트리코더마 레세이(SEQ ID NO:2), 트리코더마 비리데, 히포크레아 제코리나(Hypocrea jecorina), 페니실리움 데쿰벤스, 페니실리움 잔티넬룸, 보트리오티니아 푹켈리아나, 크실렐라 파스티디오사(Xylella fastidiosa), 마크로포미나 파세올리나, 아스페르질루스 가와치, 아스페르질루스 아쿨레아투스, 오르피노미세스 조이오니이 및 아시도테르무스 셀룰로이티쿠스로 구성된 군으로부터 선택된 종으로부터 유도된다. 표 3은 이들 유기체로부터 야생형, 천연 패밀리 5 셀룰라제의 아미노산 서열을 위한 SEQ ID NO: 및 데이터베이스 가입 번호를 제공한다.
본 발명의 변형된 패밀리 5 셀룰라제는 보존 R130, H174, E217, E218, H288, Y290 및 E329 아미노산을 가지고 TrCel5A 촉매 도메인(SEQ ID NO:2의 아미노산 71-397)과 약 20%보다 높은 또는 약 30%보다 높은 서열 동일성을 나타낼 수 있다.
본 발명의 다른 구체예에서, 변형된 패밀리 5 셀룰라제는 TrCel5A 촉매 도메인(SEQ ID NO:2의 아미노산 71-397)과 약 30%보다 높은 서열 동일성, 약 40%보다 높은 서열 동일성, 약 50%보다 높은 서열 동일성 또는 약 60%보다 높은 서열 동일성을 가진다.
패밀리
6
셀룰라제
패밀리 6 셀룰라제는 촉매 아미노산의 역할을 하는 2개의 아스파르트산(D) 아미노산을 포함한다. 이들 아스파르트산 아미노산은 야생형 트리코더마 레세이 효소와의 배열에 의해 결정된 바와 같이, 175 및 221 위치에서 발견된다. 따라서 이제까지 확인된 대부분의 패밀리 6 셀룰라제는 중온성(mesophilic)이다; 그러나, 이 패밀리는 테르모비피다 푸스카(Thermobifida fusca)(TfCel6A 및 TfCel6B)로부터 내열성 셀룰라제 및 휴미콜라 인솔렌스(HiCel6A 및 HiCel6B)로부터 호염기성 셀룰라제를 또한 포함한다. 패밀리 6 셀룰라제는 유사한 3차원 구조: 5개의 알파-헬릭스에 의해 연결된 7개의 평행한 베타-스트랜드를 함유하는 중심 베타-배럴을 갖는 알파/베타-배럴을 또한 공유한다. TrCel6A, 테르모비피다 푸스카 엔도-베타-1,4-글루카나제 Cel6A, 휴미콜라 인솔렌스 셀로비오히드롤라제 Cel6A, 휴미콜라 인솔렌스 엔도-베타-1,4-글루카나제 Cel6B 및 미코박테리움 투베르쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis) H37Rv Cel6A와 같은, 몇 가지 패밀리 6 셀룰라제의 3차원 구조가 알려져 있다.
본원에 사용된 용어 "패밀리 6 셀룰라제" 또는 "Cel6"은 EC 3.2.1.91 또는 EC 3.2.1.4하에서 분류된 글리코히드롤라제(GH) 패밀리 6 촉매 도메인을 함유한 탄수화물 활성 셀룰라제 효소를 망라한다. 용어는 175 및 221 위치에서 발견된 보존 아스파르트산 아미노산(트리코더마 레세이 Cel6A 아미노산 번호 붙이기를 갖는 배열에 기초함; SEQ ID NO:3)을 갖는 효소를 포함하는. 반전 메커니즘을 사용한 셀룰로스 연결에서 (1→4)-베타-D-글루코시드 연결의 적어도 가수분해를 나타내는 어떤 탄수화물 활성 효소를 망라한다.
한 구체예에 따르면, 패밀리 6 셀룰라제는 SEQ ID NO:3(트리코더마 레세이 패밀리 6 셀룰라제)의 아미노산 83-447과 60% 내지 100% 아미노산 서열 동일성, 또는 추가 구체예에서, SEQ ID NO:3의 아미노산 83-447과 65% 내지 100% 아미노산 서열 동일성을 가진다. 예를 들어, 패밀리 6 셀룰라제는 SEQ ID NO:3의 아미노산 83-447과 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
아래 표 4는 알려진 패밀리 6 셀룰라제의 대표적인 목록을 제공하고 도 9는 표에서 제공된 셀룰라제들 사이의 아미노산 서열 배열을 나타낸다. 표 4의 패밀리 6 셀룰라제의 퍼센트 서열 동일성은 패밀리 45 셀룰라제에 대해 이전에 설명된 과정을 사용하여 결정된다.
| 유기체 |
유전자은행
가입 번호 |
SEQ ID NO : |
TrCel6A
(( SEQ ID NO :3)의 아미노산 83-447과의 퍼센트 동일성 |
| 트리코더마 레세이 | AAA34210.1 | 3 | 100.0 |
| 히포크레아 코닌지(Hypocrea koningii) | AAK01367.1 | 79 | 98.9 |
| 트리코더마 비리데 CICC 13038 | AAQ76094.1 | 80 | 98.9 |
| 히포크레아 코닌지 3.2774 | ABF56208.1 | 81 | 98.1 |
| 히포크레아 코닌지 AS3.2774 | ABG48766.1 | 82 | 97.8 |
| 트리코더마 파르세라모숨 (Trichoderma parceramosum) |
AAU05379.2 | 83 | 97.8 |
| 아스페르질루스 니둘란스 FGSC A4 | ABF50873.1 | 84 | 72.4 |
| 아스페르질루스 니게르(Aspergillus niger) CBS 513.88 |
CAK41068.1 | 85 | 72.4 |
| 아스페르질루스 오리재(Aspergillus oryzae) RIB 40 | BAE64227.1 | 86 | 67.8 |
| 아스페르질루스 니게르 CBS 513.88 | CAK39856.1 | 87 | 67.7 |
| 아크레모니움 셀룰로이티쿠스 Y-94 | AAE50824.1 | 88 | 67.3 |
| 탈라로미세스 에메르소니이 | AAL78165.2 | 89 | 66.8 |
| 지베렐라 제애 K59 | AAQ72468.1 | 90 | 66.1 |
| 푸사리움 옥시스포룸 | AAA65585.1 | 91 | 66.1 |
| 뉴로스포라 크라사 OR74A | CAD70733.1 | 92 | 65.9 |
| 아스페르질루스 니둘란스 FGSC A4 | EAA65866.1 | 93 | 65.5 |
| 아스페르질루스 투빈젠시스 (Aspergillus tubingensis) |
CAH05675.1 | 94 | 65.5 |
| 마그나포르테 그리세아 70-15 | XP_360146.1 | 95 | 65.4 |
| 채토미움 테르모필룸 (Chaetomium thermophilum) |
CAH05669.1 | 96 | 65.1 |
| 채토미움 테르모필룸 CT2 | AAW64927.1 | 97 | 65.0 |
| 스틸벨라 안눌라타(Stilbella annulata) | CAH05678.1 | 98 | 64.9 |
| 휴미콜라 인솔렌스 | BAB39154.1 | 99 | 63.7 |
| 스틸벨라 안눌라타 | 1BVW* | 100 | 63.1 |
| 코츨리오볼루스 헤테로스트로푸스 (Cochliobolus heterostrophus) C4 | AAM76664.1 | 101 | 59.6 |
| 아가리쿠스 비스포루스(Agaricus bisporus) D649 | AAA50607.1 | 102 | 57.7 |
| 폴리포루스 아르쿨라리우스(Polyporus arcularius) 69B-8 | BAF80327.1 | 103 | 57.1 |
| 렌티눌라 에도데스 스타메츠(Lentinula edodes Stamets) CS-2 | AAK95564.1 | 104 | 56.3 |
| 렌티눌라 에도데스 L54 | AAK28357.1 | 105 | 56.0 |
| 말브란체아 신나모메아 (Malbranchea cinnamomea) |
CAH05679.1 | 106 | 54.9 |
| 파네로카에테 크리소스포리움 | AAB32942.1 | 107 | 54.9 |
| 볼바리엘라 볼바세아 | AAT64008.1 | 108 | 53.8 |
| 크리소스포리움 룩크노웬스 | AAQ38151.1 | 109 | 49.5 |
| 플류로투스 사조르-카쥬 (Pleurotus sajor-caju) |
AAL15037.1 | 110 | 47.2 |
| 트라메테스 베르시콜로르 (Trametes versicolor) |
AAF35251.1 | 111 | 47.0 |
| 뉴로스포라 크라사 OR74A | XP_323315.1 | 112 | 46.8 |
| 마그나포르테 그리세아 70-15 | XP_362054.1 | 113 | 45.1 |
*단백질 데이터은행 엔트리
패밀리 6 셀룰라제는 자연 발생 또는 야생형 패밀리 6 셀룰라제 또는 변형된 패밀리 6 셀룰라제일 수 있다. "변형된 패밀리 6 셀룰라제"는 효소의 구조 및 기능을 상당히 포함하지 않는 분자 생물학 기술에 의해 도입된, 하나 또는 그 이상의 유전자 변경을 함유한 패밀리 6 셀룰라제를 의미한다. 이러한 기술은 분리된 DNA상에서 수행된 것을 포함하는 또는 UV광과 같은 돌연변이원에 미생물을 노출함으로써, 부위-관련 돌연변이유발, 카세트 돌연변이유발, 랜덤 돌연변이유발, 합성 올리고뉴클레오티드 구조, 복제, 하부-복제, PCR에 의한 증폭, 시험관내 합성 및 다른 유전자 가공 기술을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 어떤 방법에서 제한하지 않고 당업자에 의해 평가된 바와 같이, 패밀리 6 셀룰라제들 사이에 낮은 서열 보존의 영역에 도입된 돌연변이는 효소의 촉매 활성을 감소시키거나 또는 변경하는 낮은 확률을 가지는 것으로 기대된다.
변형된 패밀리 6 셀룰라제는 어떤 적합한 패밀리 6 셀룰라제로부터 유도될 수 있다는 것이 이해될 것이다. 즉, 이것은 자연 발생 또는 "야생형" 패밀리 6 셀룰라제로부터 또는 이미 다른 아미노산 치환, 결실 또는 삽입을 함유한 패밀리 6 셀룰라제로부터 유도될 수 있다. 용어 "야생형 패밀리 46 셀룰라제"는 분자 생물학 기술에 의해 도입된 어떤 유전자 변경(들)을 함유하지 않은 패밀리 6 셀룰라제를 의미한다.
효소 혼합물의 특이적
탈필링
활성의 측정
본 발명의 탈필링 조성물은 (i) 패밀리 45 셀룰라제 효소 성분; 및 (ii) 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제, 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 포함하는 효소 혼합물을 포함하며, 상기 효소 혼합물은 기준 효소 혼합물에 대해 패밀리 45 셀룰라제 및 패밀리 5 및/또는 패밀리 6 셀룰라제 성분에서 농축된다.
"농축됨"은 패밀리 45 및 패밀리 5 및/또는 패밀리 6 셀룰라제의 양이 기준 또는 모효소 혼합물에 존재하는 것들에 대해 효소 혼합물에 존재하는 모든 다른 셀룰라제 성분에 대해 증가되는 것을 의미한다. 이것은 효소 혼합물에 존재하는 패밀리 45 및 패밀리 5 및/또는 패밀리 6 셀룰라제의 양을 증가시키거나 및/또는 기준 효소 혼합물에 존재하는 하나 또는 그 이상의 다른 셀룰라제 성분을 감소시킴으로써 달성될 수 있다.
"기준 효소 혼합물"은 탈필링 조성물의 그러나 자연 발생 양의 효소 혼합물과 같은 패밀리 45 셀룰라제 성분 및 같은 패밀리 5 및/또는 패밀리 6 셀룰라제 성분(들)을 포함하는 효소 혼합물을 의미한다. "자연 발생 양"은 유전적으로 변형된 미생물로부터 탈필링 조성물의 효소 혼합물을 생산하기 위해 사용된 것과 본질적으로 같은 배양 조건하에서 모미생물에 의해 생산된 패밀리 45 및 패밀리 5 및/또는 패밀리 6 셀룰라제 성분의 양을 의미한다.
예를 들어, 패밀리 45 셀룰라제 및 패밀리 5 또는 패밀리 6 셀룰라제 성분에 농축된 이러한 효소 혼합물은 해당 기준 효소 혼합물에 의해 나타난 것보다 높은 특이적 탈필링 활성을 나타낸다.
분리 및 조합에서 셀룰라제 성분의 특이적 탈필링 활성을 측정하기 위해, 그것들은 알려진 기술을 사용하여 전형적으로 정제된다. 이용할 수 있는 정제 기술의 예는 친화도 기반 정제 기술을 포함한다. 이러한 기술은 본 분야에 잘 알려져 있고 항원과 항체 사이 또는 효소와 기질 사이의 상호작용과 같은 매우 특이적 생물학적 상호작용에 기초한 고체 지지체에 생물학적 혼합물의 성분을 선택적으로 결합하는 어떤 적합한 방법을 포함한다. 게다가, 정제는 황산암모늄 침전, 등전 침전, 선택적인 열변성 또는 선택적으로 셀룰라제 성분을 침전시키는 어떤 다른 적합한 방법와 같은 선택적인 침전을 포함하는 분별 방법을 포함할 수 있다. 다른 예에서, 정제 방법론은 겔 여과, 크기 배제, 음이온 교환, 양이온 교환, 겔 전기영동, 또는 단백질을 물리적으로 분리하기 위해 본 분야에 알려진 다른 색 분리 방법을 포함하는 크로마토그래피 방법을 포함할 수 있다.
본원에 사용된 "특이적 탈필링 활성"은 실시예 1.6에 제시된 바와 같이 측정된다. 직물로부터 필로서 언급된 작은 볼의 퍼즈를 제거하는데 패밀리 45 셀룰라제의 패밀리 5 셀룰라제 또는 패밀리 6 셀룰라제 및 각각의 개별 셀룰라제 성분과 조합하는 효과는 방출된 비용해성 셀룰로스를 직접 칭량함으로써 측정된다. 탈필링은 단백질의 유닛당 탈필링 활성(즉, 특이적 탈필링 활성)으로서 표현된다.
본 발명의 한 구체예에 따르면, (i) 패밀리 45 셀룰라제 효소 성분 및 패밀리 5 셀룰라제; 또는 (ii) 패밀리 45 셀룰라제 및 패밀리 6 셀룰라제 효소 성분은 특이적 탈필링 활성을 측정하는 어세이에서 상승효과를 나타내는 중량 비율로 효소 혼합물에 존재한다.
"상승효과를 나타내는 중량 비율"은 셀룰라제 효소 성분이 분리에서 어세이된 상기 셀룰라제 효소 성분들 각각의 특이적 탈필링 활성의 합보다 높은 특이적 탈필링 활성을 가져오는 중량 비율로 존재하는 것을 의미한다. 중량 비율은 효소 혼합에서 2개의 셀룰라제 효소 성분에 대해 측정된다.
예를 들어, 패밀리 45 및 패밀리 5 셀룰라제 성분이 모균주에 의해 분비된 효소 혼합물에 존재하는 것과 다른 중량 비율로 효소 혼합물에 포함된 구체예에서, 효소 혼합물은 패밀리 45 및 패밀리 5 셀룰라제 성분이 조합하여 분리에서 개별적으로 어세이된 패밀리 45 및 패밀리 5 셀룰라제 성분의 합보다 높은 특이적 탈필링 활성을 나타내는 것을 특징으로 할 것이다.
일부 구체예에서, 패밀리 45 셀룰라제 성분의 패밀리 5 셀룰라제 효소 성분에 대한 중량 비율은 0.20:1 내지 9:1(wt:wt) 또는 그사이의 어떤 값이다. 예를 들어, 패밀리 45 셀룰라제 성분의 패밀리 5 셀룰라제 효소 성분에 대한 중량 비율은 0.20:1 내지 5:1 또는 0.25:1 내지 4:1 또는 0.25:1 내지 3:1 또는 0.25 내지 2:1 또는 0.25:1 내지 1.5:1 또는 0.25 내지 1.25:1 또는 0.25 내지 1.0:1(wt:wt), 또는 그사이의 어떤 값일 수 있다. 일부 구체예에서, 패밀리 45 셀룰라제 성분의 패밀리 6 셀룰라제 효소 성분에 대한 중량 비율은 5:1 내지 1:1(wt:wt) 또는 그사이의 어떤 값이다. 예를 들어, 패밀리 45 셀룰라제 성분의 패밀리 6 셀룰라제 효소 성분에 대한 중량 비율은 4:1 내지 1:1 또는 3:1 내지 1:1 또는 2.7:1 내지 1:1 또는 2.7:1 내지 1.25:1(wt:wt) 또는 그사이의 어떤 값일 수 있다.
숙주 미생물에서
셀룰라제
혼합물의 발현
본 발명은 패밀리 45 셀룰라제 그리고 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 발현하는 유전적으로 변형된 미생물을 제공한다.
숙주 미생물은 필룸 아스코미코타(phylum Ascomycota)의 구성원인 미생물과 같은, 어떤 적합한 효모 또는 사상균일 수 있다. 본 발명의 효소 혼합물의 발현을 위해 숙주 미생물로서 유용한 효모의 속은 사카로미세스 종(Saccharomyces spp), 피치아 종(Pichia spp), 한세눌라 종(Hansenula spp), 클루이베로미세스 종(Kluyveromyces spp), 야로위아 종(Yarrowia spp), 및 아르쿨라 종(Arxula spp)을 포함한다. 본 발명의 셀룰라제의 발현을 위한 미생물로서 유용한 균류의 속은 트리코더마 종, 히포크레아 종, 아스페르질루스 종, 푸사리움 종, 휴미콜라 종, 뉴로스포라 종, 미셀리옵토라(Myceliopthora) 종, 크리소스포리움 종, 및 페니실리움 종을 포함한다. 가장 바람직한 구체예에서, 숙주 미생물은 트리코더마 레세이의 산업용 균주이다.
모숙주 미생물은 셀룰라제 효소의 생산 및 분비가 가능한 미생물이지만, 유전적으로 변형된 미생물의 복제수 또는 발현이 증가되는 확인된 유전자의 야생형 또는 천연 복제수 또는 발현을 나타낸다. 이종성 셀룰라제의 발현의 경우에서, 모숙주 미생물은 셀룰라제 효소의 생산 및 분비가 가능한 균주이지만, 유전자 코드화의 복제를 함유하거나 또는 이종성 셀룰라제를 발현하지 않는다.
과발현
셀룰라제 효소의 과발현은 셀룰라제 효소가 (a) 숙주 미생물에 의해 동일한 셀룰라제 효소의 내인성 발현 속도 또는 수준 혹은 (b) 숙주 미생물에 의해 생산되고 분비된 하나 또는 그 이상의 다른 효소의 발현 속도 또는 수준과 비교해 상승된 속도 또는 수준에서 발현되도록 야기되는 어떤 상태를 의미한다. 이런 이유로, 셀룰라제 효소의 과발현은 관심의 셀룰라제 효소를 코드화하는 유전자의 과발현 그뿐만 아니라 숙주 미생물에 의해 생산되고 분비된 하나 또는 그 이상의 다른 효소를 코드화하는 하나 또는 그 이상의 유전자의 발현의 감소에 기인할 수 있다.
패밀리 45, 패밀리 5 또는 패밀리 6 셀룰라제 효소를 코드화하는 유전자의 과발현은 이러한 유전자가 모숙주 미생물에서 그 유전자를 위한 내인성 발현 속도 또는 수준과 비교해 숙주 미생물에서 상승된 속도 또는 수준에서 발현되도록 야기되는 어떤 상태를 의미한다. 일부 예에서, 과발현은 그 유전자를 위한 내인성 번역 속도 또는 수준과 비교해 내인성 유전자의 상승된 전사 속도 또는 수준을 의미한다. 다른 예에서, 과발현은 유전자가 숙주 세포로 도입되는 다른 유기체로부터 이종성 셀룰라제를 코드화하는 유전자의 전사를 의미한다.
패밀리 45, 패밀리 5 또는 패밀리 6 셀룰라제 효소를 코드화하는 유전자의 과발현은 숙주 미생물에 의해 생산되고 분비된 하나 또는 그 이상의 다른 (셀룰라제) 효소를 코드화하는 유전자(들)의 속도 또는 수준이 모숙주 미생물에서 동일한 유전자(들)의 속도 또는 수준에 대해 감소되는 어떤 상태를 또한 의미할 수 있다.
패밀리 45, 패밀리 5 또는 패밀리 6 셀룰라제가 본질적으로 동일한 발효 조건에서 모숙주 미생물에 의한 것보다 변형된 미생물에 의해 더 높은 수준으로 생산된다면 패밀리 45, 패밀리 5 또는 패밀리 6 셀룰라제는 변형된 미생물에 의해 과발현되는 것으로 생각될 것이다. 예를 들어, 패밀리 45, 패밀리 5 또는 패밀리 6 셀룰라제는 본질적으로 동일한 발효 조건에서 모숙주에 의해 생산된 것보다 약 1.1-배 내지 약 50-배 높은 양, 또는 그사이의 어떤 양으로 생산될 수 있다. 예를 들어, 패밀리 45 셀룰라제는 본질적으로 동일한 발효 조건에서 모숙주 미생물에 의해 생산된 양보다 1.1-, 1.5-, 2-, 5-, 10-, 20-, 30-, 40- 또는 50-배 높은 양, 또는 그사이의 어떤 양으로 생산될 수 있다. 바람직하게는, 패밀리 45 셀룰라제는 동일한 발효 조건에서 모숙주보다 적어도 1.1-배 이상인 양으로 생산된다.
본 발명의 적어도 일부의 구체예에서, 유전자의 복제수 또는 발현의 증가 또는 감소는 여러 가지 유전자 가공 기술 중 어떤 것에 의해 생산될 수 있다. 본원에 사용된 용어 유전자 가공 기술은 유기체 유전자의 직접 조작을 위한 몇 가지 잘-알려진 기술 중 어떤 것을 의미한다. 예를 들어, 유전자 노크아웃(종종 내인성 작동 서열을 치환하는, 비작동 DNA 서열의 유기체 염색체로의 삽입), 유전자 노크-인(단백질-코드화 DNA 서열의 유기체 염색체로의 삽입), 및 유전자 노크다운(안티센스 RNA 또는 작은 간섭 RNA, 즉 RNA 간섭(RNAi)을 코드화하는 DNA 서열의 삽입) 기술이 본 분야에 잘 알려져 있다. 유전자의 발현을 감소시키는 방법은 유전자의 전사가 크게 감소되거나 또는 심지어 억제되도록 유전자의 부분적인 또는 완전한 결실, 및 유전자의 촉진제의 파열 또는 치환을 또한 포함한다. 예를 들어, 유전자의 촉진제는 미국 특허 제6,933,133호에 의해 예시된 약한 촉진제로 치환될 수 있으며, 이것은 그 전체가 본원에 참고자료로 포함된다. 본원에 사용된 바와 같이, 유전자 결실 또는 결실 돌연변이는 유전자를 구성하는 폴리뉴클레오티드 서열의 부분이 결여된 돌연변이이다. 따라서, 결실은 유전자를 구성하는 DNA의 서열의 완전한 또는 부분적인 방해를 가져오는 유전자 재료의 손실 또는 치환이다.
본 발명의 한 구체예에 따르면, 패밀리 45, 패밀리 5 및/또는 패밀리 6 셀룰라제 효소를 코드화하는 유전자의 과발현은 과발현된 셀룰라제 효소(들)를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 서열(들)을 포함하는 하나 또는 그 이상의 유전자 구조체(들)를 숙주 미생물에 도입함으로써 달성된다. 셀룰라제 효소(들)를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 서열(들)은 셀룰라제 효소(들)의 발현 및 분비에 관련한 조절 서열에 작동 가능하게 연결될 수 있으며; (i) 숙주 세포에 내인성 또는 이종성일 수 있는 분비된 단백질로부터 분비 신호 펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 서열; 및 (ii) 산업용 발효 조건하에서 숙주 미생물에 많이 발현된 유전자로부터 유도된 구성 또는 조절 촉진제를 포함한다. 게다가, 번역 향상제는 단백질 번역을 증가시키도록 첨가될 수 있다. 이들 조절 서열은 (이들 조절 서열이 숙주 세포에 기능하면) 발현된 셀룰라제 효소를 코드화하는 유전자를 포함하나 이에 제한되지 않는, 하나 또는 그 이상의 유전자로부터 유도될 수 있다. 게다가, 셀룰라제 효소(들)를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 서열(들)을 포함하는 유전자 구조체(들)의 다중 복제는 미생물에 도입되어, 이로써 발현 수준을 증가시킬 수 있다. 발현의 변화는 원하는 발현 수준을 갖는 균주의 돌연변이유발 및 선택에 의해 또한 달성될 수 있다.
유전자 구조체는 그것이 숙주 게놈으로 통합하도록 숙주 미생물의 게놈의 서열로 그것을 재조합하도록 허용하는 다른 폴리뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 대안으로, 유전자 구조체는 숙주 게놈으로의 서열-특이적 재조합에 관련한 어떤 폴리뉴클레오티드 서열을 함유하지 않을 수 있다. 이러한 경우에서, 구조체는 비-상동성 단부-결합 및 재조합을 통한 랜덤 삽입에 의해 통합시킬 수 있다. 대안으로, 구조체는 비-통합된 숙주로 있을 수 있는데, 이 경우에서 그것은 숙주 미생물의 게놈으로부터 독립적으로 복제한다.
유전자 구조체(들)는 당업자에게 흔히 알려진 구조체로 형질전환된 유전적으로 변형된 미생물의 분리가 가능한 선택가능 마커 유전자를 더 포함할 수 있다. 선택가능 마커 유전자는 이들 조건하에서 달리 성장시킬 수 없는 숙주 유기체에 특이적 영양소가 없는 배지에서 항생제에 저항성 또는 성장하는 능력을 수반할 수 있다. 본 발명은 선택가능 마커 유전자의 선택에 의해 제한되지 않고, 당업자는 적당한 유전자를 쉽게 결정할 수 있다. 예를 들어, 선택가능 마커 유전자는 하이그로마이신, 플레오마이신, 카나마이신, 게네티신, 또는 G418에 저항성을 수반하거나, 또는 trp, arg, leu, pyr4, pyr, ura3, ura5, his, 또는 ade 유전자 중 하나에서 숙주 미생물의 결핍을 보완하거나 또는 유일한 질소 공급원으로서의 아세트아미드에서 성장하는 능력을 수반할 수 있다.
유전자 구조체는 당업자에게 흔히 알려진 다른 핵산 서열, 예를 들어 전사 종결제, 펩티드 태그를 코드화하는 핵산 서열, 여러 가지 다른 핵산 서열을 함께 연결하는 합성 서열, 복제의 기원 등을 더 포함할 수 있다. 본 발명의 실시는 이들 다른 핵산 서열 중 어떤 하나 또는 그 이상의 존재에 의해 제한되지 않는다.
유전자 구조체는 세포의 CaCl2로의 처리, 전기천공, 생물학적 충격, 원형질의 PEG-매개 융합체(예를 들어 White et al., WO 2005/093072, 이것은 참고자료로 본원에 포함됨)를 포함하나 이에 제한되지 않는, 당업자에 의해 알려진 많은 방법에 의해 숙주 미생물에 도입될 수 있다. 재조합 균주를 선택한 후, 이러한 균주는 패밀리 45, 패밀리 5 및/또는 패밀리 6 셀룰라제 효소의 발현이 가능한 조건하에서 침수된 액체 발효에서 배양될 수 있다.
유전자 구조체에 존재하는 숙주 균주 및 조절 서열에 의존하면서, 발현 수준은 탄소 공급원, 발효의 온도, 또는 발효의 pH를 포함하나 이에 제한되지 않는, 숙주 미생물로부터 셀룰라제 효소를 생산하기 위해 사용된 발효 공정의 하나 또는 그 이상의 파라미터를 조정함으로써 조절될 수 있다. 그러나 셀룰라제의 발현 수준을 조정하기 위한 다른 수단은 셀룰라제 분비 경로의 변형 또는 셀룰라제 전사 및/또는 번역 조절 시스템의 변형 및/또는 번역후 단백질 발육 기계(예를 들어 전사 인자, 단백질 셰프론)를 포함한다.
상동성
및
이종성
발현
일부 구체예에서, 효소 혼합물에서 패밀리 45, 패밀리 6 및/또는 패밀리 5 셀룰라제 성분(들)은 숙주 세포에 내인성이다. 다른 구체예에서, 패밀리 45, 패밀리 6 및/또는 패밀리 5 셀룰라제 성분은 숙주 세포에 이종성 또는 외인성이다.
본원의 목적을 위해, 이종성 또는 외인성 셀룰라제 효소는 숙주 미생물과는 별개인 종으로부터 유도된 유전자에 의해 코드화된 효소를 의미한다. 내인성 또는 상동성 셀룰라제 효소는 숙주 미생물과 같은 서열로부터 유도된 유전자에 의해 코드화된 효소를 의미한다. 따라서, 일부 예에서, 상동성 또는 이종성 셀룰라제 효소는 숙주 미생물의 인식된 무성세대형, 완전세대형 또는 분류 등가물뿐만 아니라, 셀룰라제 효소를 발현하는 숙주 미생물의 종과 각각 같거나 또는 다른 종으로부터 유도된 폴리뉴클레오티드 서열에 의해 코드화된다. 당업자에 의해 평가된 바와 같이, 상동성 또는 이종성 셀룰라제 효소의 아미노산 서열은 자연-발생이거나(즉, 이것은 공급원 유기체에 의해 생산될 때 자연에서 발견되기 때문에) 또는 상기 이종성 셀룰라제 효소를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 서열의 변화를 야기하는 유전자 조작, 적응 또는 고전 돌연변이유발의 결과로서 자연 발생 아미노산 서열에 대해 하나 또는 그 이상의 아미노산 삽입, 결실 또는 치환을 함유할 수 있다.
단일 숙주 미생물로부터의 발현이 기술되었지만, 패밀리 45, 패밀리 6 및/또는 패밀리 5 셀룰라제는 하나 또는 그 이상의 숙주 미생물의 다른 균주로부터 개별적으로 또는 하부-군으로 발현될 수 있다. 예를 들어, 패밀리 45, 패밀리 6 및/또는 패밀리 5 셀룰라제는 단일 숙주 미생물의 다른 균주로부터 개별적으로 또는 하부-군으로 발현될 수 있다는 것이 고려된다.
패밀리 45, 패밀리 6 및/또는 패밀리 5 유전자를 과발현하는 재조합 숙주 균주를 선택한 후, 그것들은 아래 논의된 바와 같이, 셀룰라제의 발현을 유도하는 조건하에서 침수된 액체 발효에서 배양될 수 있다.
셀룰라제
효소 혼합물의 숙주 미생물로부터의 생산
미생물의 침수된 액체 발효는 배치, 이송-배치 또는 연속 공정로서 전형적으로 수행된다. 배치 공정에서, 호기성 공정을 위해 산소를 제외한 모든 필요한 재료는 작동의 시작에서 반응기에 위치하고 발효는 생성물이 수확되는 지점인 완료까지 진행하는 것이 허용된다. 본 발명의 효소 혼합물을 생산하기 위한 배치 공정은 진탕-플라스크 또는 생물반응기에서 수행될 수 있다.
이송-배치 공정에서, 배양은 배양액을 제거하지 않고 하나 또는 그 이상의 배지 성분과 연속적으로 또는 순차적으로 이송된다. 연속 공정에서, 새로운 배지가 공급되고 배양액은 부피로 동일한 속도에서 연속적으로 제거되어 일정 성장 속도에서 배양을 유지시킨다.
발효 배지는 숙주 세포의 성장 및 효소 생산을 개선하기 위해 발효 배지에 첨가될 수 있는 탄소 공급원, 질소 공급원 및 다른 영양소, 비타민 및 미네랄을 전형적으로 포함한다. 여러 가지 배지 성분은 숙주 세포를 갖는 배양의 접종에 앞서, 동시에 또는 후에 첨가될 수 있다.
본 발명의 셀룰라제 효소 혼합물을 생산할 때, 탄소 공급원은 유전적으로 변형된 미생물로부터 셀룰라제 효소 혼합물의 발현을 유도할 탄수화물을 포함할 수 있다. 예를 들어, 탄소 공급원은 셀룰로스, 셀로비오스, 소포로스, 및 셀룰라제의 발현을 유도하는 것으로 알려진 관련 올리고-당류 또는 다당류 중 하나 또는 그 이상을 포함할 수 있다.
배치 발효의 경우에서, 탄소 공급원은 접종에 앞서 또는 동시에 발효 배지에 첨가될 수 있다. 이송-배치 또는 연속 작동의 경우에서, 탄소 공급원은 발효 공정 동안 연속적으로 또는 간헐적으로 공급될 수 있다. 예를 들어, 탄소 공급물 속도는 0.2 내지 4.0 g 탄소/L의 배양/시간, 또는 그사이의 어떤 양일 수 있다.
발효 후에, 셀룰라제 효소 혼합물을 함유하는 발효 부용이 직접 사용되거나, 또는 셀룰라제 효소 혼합물이 예를 들어 여과 또는 원심분리에 의해 숙주 세포로부터 분리될 수 있다. 발효 배지의 소비되지 않은 성분과 같은 저분자 용질은 한외-여과에 의해 제거될 수 있다. 효소 혼합물은 예를 들어 증발, 침전, 침강 또는 여과에 의해 농축될 수 있다. 글리세롤, 수크로스, 소르비톨 등과 같은 화학물질이 셀룰라제 효소를 안정화하기 위해 첨가될 수 있다. 벤조산나트륨 또는 소르빈산칼륨과 같은 다른 화학물질이 미생물 오염의 성장을 방지하기 위해 셀룰라제 효소에 첨가될 수 있다.
효소 혼합물을 사용한
셀룰로스
-함유 물품의 처리
본 발명의 효소 혼합물이 "셀룰로스-함유 물품"의 탈필링에 사용된다.
용어 "셀룰로스-함유 물품"은 코튼 또는 비-코튼 함유 섬유를 포함하는, 가먼트 또는 얀으로 봉합된 조각 물품 또는 물품으로서의 직물을 의미한다. 셀룰로스-함유 물품은 염색 전에 또는 후에 그리고 수지 마무리가 있거나 또는 없이 본 발명의 효소 혼합물로 처리될 수 있다. 용어는 천연 셀룰로스 및 인공 셀룰로스를 망라한다. 인공 셀룰로스 함유 직물은 본 분야에 잘 알려진 레이온과 같은 재생 직물을 포함한다. 용어는 데님 직물과 같은, 필링이 일어나기 쉽지 않은 직물은 제외한다.
본원에 사용된 용어 "탈필링"은 퍼징을 감소시킴으로써 표면 구조를 분명하게 하는 방법으로 코튼 물품의 표면을 변형시키기 위해 셀룰로스 섬유의 제어된 가수분해에서 본 발명의 효소 혼합물의 사용을 의미한다. 이러한 처리는 필링을 방지하거나, 또는 유연성 및 매끄러움 같은 직물 취급을 개선할 수 있는데, 이것은 색상의 명료화를 가져오거나 및/또는 수분 흡착성 및 가염성을 개선할 수 있다.
탈필링 처리는 제조 공정 동안 또는 후속 세탁에서 수행될 수 있다. 이들 중 어떤 경우에서, 처리는 풀린 피브릴을 포함하는 직물에 교반 및 전단을 제공하면서, 회전하는 수평 또는 수직 드럼 제트 건조기, 세척기, 또는 직물, 물, 완충액 및 셀룰라제 효소를 함유한 다른 장치에 코튼 물품을 첨가함으로써 전형적으로 수행된다. 세제 및 계면활성제가 탈필링 처리 동안 또한 첨가될 수 있다. 처리 후, 직물은 기계로부터 제거되고 건조된다.
탈필링이 전형적인 제조 공정에서 일어날 때, 처리 시간은 약 15 내지 약 120분이고; 처리 온도는 약 35℃ 내지 약 60℃이고; 침지액의 직물에 대한 중량 비율은 약 2.5:1 내지 약 10:1이고; pH는 약 4.0 내지 약 6.0일 수 있다. 탈필링이 전형적인 세탁에서 일어날 때, 처리 시간은 약 10 내지 약 60분이고, 처리 온도는 약 20℃ 내지 약 70℃이고, 침지액의 직물에 대한 중량 비율은 약 2.5:1 내지 약 10:1이고, pH는 약 4.0 내지 약 9.5 또는 약 4.0 내지 약 6.0이다.
탈필링하기 위해 사용된 셀룰라제 혼합물의 양은 셀룰라제 혼합물 중 활성 단백질의 농도, 처리되는 코튼 물품의 양, 탈필링의 원하는 정도, 처리의 원하는 시간, 그리고 당업자에게 잘 알려진 다른 파라미터에 의존한다. 전형적인 제조 공정에서 탈필링을 위해 사용될 때, 1회분의 셀룰라제의 예는 직물의 킬로그램당 약 0.1 내지 약 7 g의 효소 단백질, 더 바람직하게는 직물의 킬로그램당 약 0.5 g 내지 약 4 g의 효소 단백질이다. 전형적인 세탁에서 탈필링을 위해 사용될 때, 셀룰라제의 바람직한 양은 일반적으로 직물의 킬로그램당 약 0.01 g 내지 약 3 g의 효소 단백질, 더 바람직하게는 직물의 킬로그램당 약 0.05 g 및 약 2.5 g의 효소 단백질이다.
효소의 작용을 제어하기 위한 한가지 선택은 용액을 가열하거나, 효소 활성을 파괴하는 화학물질을 첨가하거나 또는 코튼 물품을 건조시킴으로써 처리 후에 효소를 파괴하는 것이다.
본 발명의 세제 조성물은 본 분야에 알려진 어떤 형태일 수 있다. 이것은 액체 희석제로서 과립, 에멀션, 겔, 또는 페이스트에 포함한다. 고체 세제 조성물이 사용될 때, 효소 혼합물은 과립으로서 전형적으로 조제된다.
실시예
실시예
1:
Cel45A
과발현 균주의 생성 및
특징화
실시예
1.1:
Cel45A
셀룰라제의
과발현을 위한 숙주
트리코더마
레세이
균주
TrCel45A 셀룰라제의 과발현을 위해 사용된 모 트리코더마 레세이 균주는 P998A이다(함께 출원중이고 함께 소유된 미국 특허 출원 제61/312,864호에 기재됨). 균주 P998A는 높은 수준의 Cel5A-G363A(SEQ ID NO:1) 효소를 발현하고 우리딘의 부재에서 원영양체 성장을 복원하도록 설계된 형질전환 벡터(Pc/x-cel5A-G363A-pyr4-TV)로 BTR213 우리딘 영양요구체 균주의 형질전환에 의해 생성되었다(미국 특허 출원 제61/312,864, supra 참고). 균주 BTR213은 전구 균주 QM6A의 높은 셀룰라제 생산 유도체로서 분리된 균주 RutC30(ATCC #56765)의 유도체이다(Montencourt et al., Proc. 3rd Annual Symp. On Fuels from Biomass, Golden Colorado, 1979, pp. 85-89). 추가 셀룰라제 고생산성 균주는 랜덤 돌연변이 및/또는 선택에 의해 RutC30으로부터 생성되었다. 균주 M2C38(ATCC 74252)은 1% 산 팽윤 셀룰로스 및 4 g L-1 2-데옥시글루코스를 함유하는 최소 배지 아가 상에 RutC30보다 큰 청정 구역을 생산하는 그것의 능력에 기초하여 분리되었다. 이어서, M2C38을 추가 랜덤 돌연변이유발을 받게 하고 균주 BTR213을 0.2 ㎍/㎖ 카르벤다짐을 함유하는 락토스 배지 상에서 선택 분리하였다. BTR213, BTR213aux의 우리딘 영양요구체는 0.15% w/v 5-플루오로오로트산(FOA)에 자발적 저항성인 돌연변이체의 선택을 통해 얻어졌다. 원영양성은 균주 P998A를 생성하는 선택 마커로서 사용된 오로티딘-5'-1인산 디카르복실라제를 코드화하는 이종성 뉴로스포라 크라사 유전자 pyr4로의 형질전환에 의해 복원되었다.
실시예
1.2:
TrCel45A
의 과발현을 위한 T.
레세이
형질전환 벡터
3개의 TrCel45A 발현 벡터를 T. 레세이 형질전환을 위해 사용하였다. 모든 벡터는 천연 Trcel7a 로커스를 표적화하도록 설계되었다. 표적화를 용이하게 하기 위해, BTR213 게놈 DNA로부터 증폭된 천연 Trcel7a 유전자의 5' 및 3' 단부에 인접한 서열은 발현 및 선택 카세트를 측면에 배치하기 위해 형질전환 벡터에 삽입되었다(도 4-6).
형질전환 벡터, pP7a-TrCel45A-hph-TV(도 4)는 선택가능 마커로서 E. 콜라이 하이그로마이신 인산전달효소 유전자(hph)를 함유한다. 전사 hph 유전자는 T. 레세이 포포글리세레이트 키나제 촉진제(Ppgk)에 의해 구동되고 N. 크라사 오로티딘-5'-1인산 디카르복실라제(pyr4) 유전자(Tpyr4)의 종결제 서열에 의해 종결된다. 발현 카세트는 도 4에 나타낸 바와 같이 Trcel7a 표적 단편의 5'측면의 부분으로서 T. 레세이 cel7a 촉진제(Pcel7a), T. 레세이 조기 Cel45A 코드화 서열(TrCel45A 분비 신호 포함) 및 T. 레세이 cel6a 종결제(TCel6a)를 함유한다. 벡터 pP7a-TrCel45A-hph-TV를 형질전환 전에 PsiI로 선형화하였다.
형질전환 벡터, pP7a-xyn2ss-Cel45A-hph-TV(도 5)는 선택가능 마커로서 E. 콜라이 하이그로마이신 인산전달효소 유전자(hph)를 또한 함유한다. hph 유전자의 전사는 포포글리세레이트 키나제 촉진제에 의해 구동되고 pyr4(N. 크라사 오로티딘-5'-1인산 디카르복실라제) 종결제에 의해 종결된다. 발현 카세트는 도 5에 나타낸 바와 같이 cel7a 표적 단편의 5'측면의 부분으로서 T. 레세이 cel7a 촉진제(Pcel7a), T. 레세이 크실라나제 2 분비 신호 코드화 서열(Xyn2ss), T. 레세이 성숙 Cel45A 코드화 서열 및 T. 레세이 cel6a 종결제(TCel6a)를 함유한다. 벡터, pP7a-xyn2ss-Cel45A-hph-TV는 형질전환 전에 PsiI로 선형화된다.
형질전환 벡터, pP6a-6Ass-Cel45A-ble-TV(도 6)는 선택가능 마커로서 Sh ble 블레오마이신 저항성 유전자를 함유한다. Sh ble 유전자는 블레오마이신, 제오신 및 플레오마이신에 저항성을 수반하는, 스트렙토알로세이추스 힌두스타누스(Streptoalloteichus hindustanus) 블레오마이신 저항성 단백질, ShBle를 코드화한다. ShBle 유전자의 선택 카세트로부터의 전사는 tef1(번역 연장 인자 1) 촉진제(Ptef1)에 의해 구동되고 cel7a 종결제(Tcel7a)에 의해 종결된다. 발현 카세트는 도 6에 나타낸 바와 같이 T. 레세이 cel6a 촉진제(Pcel6a), T. 레세이 Cel6A 분비 신호 코드화 서열(Cel6ASS), T. 레세이 성숙 Cel45A 코드화 서열 및 T. 레세이 cel45a(Tcel45a) 종결제를 함유한다. 벡터, pP6a-6Ass-Cel45A-ble-TV는 형질전환 전에 PacI로 선형화된다.
실시예
1.3: T.
레세이
균주를 과발현하는
TrCel45A
의 생성
TrCel45A를 단일 통합 전이유전자 복제로부터 과발현하는 균주는 높은 수준의 천연 T. 레세이 Cel45A를 발현하고 천연 Trcel7a 로커스를 표적화 하도록 설계된 형질전환 벡터, pP7a-xyn2ss-Cel45A-hph-TV 또는 pP7a-TrCel45A-hph-TV로 모P998A 균주의 형질전환에 의해 생성되었다. 형질전환 벡터는 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 매개 형질전환에 의해 도입되었다. P998A 균주(5 × 106 개의 포자)를 포테이토 덱스트로스 아가(PDA) 위에 놓인 멸균 셀로판 상에 플레이트하고, 플레이트를 포자 발아 및 균사 성장을 용이하게 하도록 30℃에서 20시간 동안 배양하였다. 균사를 갖는 셀로판 디스크를 0.6 M 황산암모늄을 함유하는 50 mM 인산칼륨 완충액, pH 6.5(완충액 P)에 7.5 g/L 드리셀라제 및 4 g/L 베타-글루카나제(InterSpex Products Inc., Cat. No. 각각 0465-1 및 0439-2)를 함유하는 10 ㎖의 원형질화 용액으로 이동하였다. 균사개를 60 rpm의 부드러운 교반에 의해 5시간 동안 소화시켰다. 원형질은 멸균 No. 30 MIRACLOTH™를 통한 여과에 의해 소화되지 않은 균사와 분리되고 멸균 50 ㎖ 둥근바닥 원심분리기관으로 수집되고 실온에서 10분 동안 1000-1500 x g에서 원심분리에 의해 회수되었다. 원형질을 5 ㎖의 완충액 P로 세척하고 실온에서 10분 동안 1000-1500 x g에서 다시 원심분리하였다. 원형질을 1 ㎖의 STC 완충액(1.2 M 소르비톨, 10 mM CaCl2, 10 mM Tris-HCl, pH 7.5)에 재현탁하였다.
형질전환을 위해, 0.1 ㎖의 재현탁된 원형질을 PsiI 제한 효소 및 0.025 ㎖의 PEG 용액(25% PEG 3350, 50 mM CaCl2, 10 mM Tris-HCl, pH 7.5)으로 선형화된 0.01 mg의 형질전환 벡터와 조합하였다. 얼음물욕에서 30분 동안 배양 후, 1 ㎖의 PEG 용액을 첨가하고 혼합물을 실온에서 5분 동안 배양하였다. 결과되는 형질전환 혼합을 2 ㎖의 STC 완충액으로 희석하고 전체 혼합을 약 47℃로 식힌 50 ㎖의 녹은 MMSS 아가 배지(아래 표 5)에 첨가하고 큰 플레이트에 부었다. 플레이트를 30℃에서 밤새도록 배양하고, 60 U/㎖의 하이그로마이신으로 보충된 MMSS 배지의 덧층을 형질전환된 세포의 선택을 위해 첨가하였다. 플레이트를 군체 성장이 보일 때까지 30℃에서 더 배양하였다. 형질전환체를 하이그로마이신으로 보충된 PDA 아가를 함유하는 개별 플레이트로 이동하고 포자형성 하도록 허용하였다. 포자를 수집하고 호모카리온 형질전환체를 분리하도록 PDA-하이그로마이신 배지 상에 높은 희석으로 플레이트한 다음, 성장 및 아래 설명된 스크리닝 배양을 접종시키기에 충분한 포자형성을 위해 허용하도록 PDA 상에 플레이트하였다. P998A 게놈에 이소성으로 통합된 단일 pP7a-xyn2ss-Cel45A-hph-TV 벡터를 함유하는 한가지 형질전환체를 추가 형질전환을 위해 선택하였다.
2개의 통합된 전이유전자 복제로부터 TrCel45A를 과발현하는 균주를 모균주로서 P1498Se를 사용하여 생성하였다. 이 균주는 높은 수준의 천연 T. 레세이 Cel45A를 발현하고 cel7a 로커스를 표적화하도록 설계된 형질전환 벡터, pP6a-6Ass-Cel45A-ble-TV로 형질전환되었다. 이 벡터는 상기 설명된 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 매개 형질전환에 의해 또한 도입되었다. 형질전환체는 100 ㎍/㎖의 플레오마이신을 함유하는 PDA 배지 상에서 선택되었다.
| 성분* | L당 양 |
| KH2PO4 | 10 g |
| (NH4)2SO4 | 6 g |
| Na3Citrate·2H2O | 3 g |
| FeSO4·7H2O | 5 mg |
| MnSO4·H2O | 1.6 mg |
| ZnSO4·7H2O | 1.4 mg |
| CaCl2·2H2O | 2 mg |
| 아가 | 20 g |
| 20% 글루코스 f.s. | 50 ㎖ |
| 1 M MgSO4·7H2O | 4 ㎖ |
| pH 5.5로 |
MMSS 아가는 MM 아가 더하기 1.2 M 소르비톨, 6.6 g/L YNB(DIFCO로부터의 아미노산 없는 효모 질소 베이스 Cat. No.291940) 및 1.92 g/L 아미노산(Sigma로부터의 -Ura DO 보충제 Cat. No. Y1501-20G)과 같은 성분을 함유한다.
실시예
1.4: T.
레세이
균주를 과발현하는
TrCel45A
의
특징화
TrCel45A, TrCel5A 및 TrCel7A 단백질의 생산을 시험하기 위해, PDA 플레이트 상에서 성장된 트리코더마 형질전환체의 포자 및 모균주를 멸균수에 현탁시키고 ㎖당 약 104-106개의 포자를 24-딥웰 플레이트에 각 미량-배양을 접종시키기 위해 사용하였다. 미량-배양 배지에 존재하는 성분을 표 6에 제공한다.
| 성분* | g/L |
| KH2PO4 | 8 |
| (NH4)2SO4 | 12.7 |
| MgSO4·7H2O | 4 |
| CaCl2·2H2O | 1.02 |
| 옥수수 침지액 | 5 |
| CaCO3 | 20 |
| 탄소 공급원** | 35 |
| 미량 원소* | 2 ㎖/L |
* 미량원소 용액은 5 g/L FeSO4·7H2O; 1.6 g/L MnSO4 ·H2O; 및 1.4 g/L ZnSO4 ·7H2O를 함유한다. ** 글루코스, 솔카 플록, 락토스, 셀로비오스, 소포로스, 옥수수 시럽, 또는 아비셀. 탄소 공급원은 pH 2 내지 7의 수용액으로서 별도로 멸균되고 먼저 또는 발효의 과정을 통해 나머지 배지에 첨가될 수 있다.
배양은 250 rpm에서 진탕하면서 30℃에서 6일 동안 성장되었다. 바이오매스는 12,000 rpm에서 원심분리에 의해 분비된 단백질을 함유하는 성장 배지로부터 분리되었다. 단백질 농도를 Bio-Rad Protein Assay(Cat. No. 500-0001)를 사용하여 측정하였다. TrCel45A, TrCel5A 및 TrCel7A의 상대 풍도를 (총 분비된 단백질의 무게%로) ELISA에 의해 측정하였다. ELISA 측정을 위해 효소를 제조사 설명에 따라 Biospin 컬럼(Biorad)을 사용하여 먼저 탈염시키고 총 단백질 농도는 소혈청알부민(Sigma) 대조를 갖는 BCA 키트(Sigma)를 사용하여 측정되었다. 동일한 어세이가 정제된 단백질 표준의 농도를 측정하기 위해 사용되었다. 배양 상청액 및 정제된 성분 표준을 인산-완충 식염수, pH 7.2(PBS)에 0.01-10 ㎍/㎖로 희석하고 마이크로티터 플레이트(Costar EIA #9018)에서 4℃에서 밤새도록 배양하였다. 이들 플레이트를 0.1% Tween-20(PBS/Tween)을 함유하는 PBS로 세척한 다음, 실온에서 1시간 동안 1% 소혈청알부민을 함유하는 PBS(PBS/BSA)에서 배양하였다. 차단된 마이크로티터 웰을 PBS/Tween으로 세척하였다. TrCel45A, TrCel5A 또는 TrCel7A에 특이적인 래빗 다클론성 항혈청을 PBS/BSA에 희석하고, 마이크로티터 플레이트를 분리하도록 첨가하고 실온에서 2시간 동안 배양하였다. 플레이트를 세척하고 실온에서 1시간 동안 PBS/BSA에서 1/2000 희석된 호스라디시 페록시다제(Sigma #A6154)와 결합된 고트 항-래빗 항체로 배양하였다. 세척 후, 테트라메틸벤지딘을 각 플레이트에 첨가하고 실온에서 30분 동안 배양하였다. 360 nm에서의 흡광도를 각 웰에서 측정하고 각 성분에 대한 표준 곡선을 사용하여 단백질 농도로 변환하였다. TrCel45A, TrCel5A 및 TrCel7A의 풍도를 총 분비된 단백질의 분획으로서 각 성분의 질량 퍼센트로서 표현하였다(데이터는 나타내지 않음).
P1467Ve, P1498Se, P1489Ct, P1489Et, P1554ABt, P1554Te 및 P1554Le 균주는 그것들이 BTR213 및/또는 P998A 모균주 및 유지된 높은 수준의 TrCel5A-G363A 효소보다 높은 수준의 TrCel45A 효소를 생산하기 때문에 14 L 소규모 발효에서 추가 분석을 위해 선택되었다. TrCel45A 및 TrCel5A-G363A의 증가된 발현에 더하여, P1489Ct, P1489Et 및 P1554ABt 균주는 천연 TrCel7A 셀룰라제의 생산에서 또한 결핍된다. 선택된 균주로 도입된 변형을 표 7에 나타낸다.
| 균주 | 모균주 | TrCel5A - G363A | TrCel7A | TrCel45A 분비 신호 | 선택 마커 | ||
| 제 1복제 | 제 2복제 | 제 1복제 | 제 2복제 | ||||
| P1467Ve | P998A | OE | + | Cel45A | N/A | hph | N/A |
| P1498Se | P998A | OE | + | Xyn2 | N/A | hph | N/A |
| P1489Ct | P998A | OE | Δ | Xyn2 | N/A | hph | N/A |
| P1489Et | P998A | OE | Δ | Xyn2 | N/A | hph | N/A |
| P1554ABt | P1498Se | OE | Δ | Xyn2 | Cel6A | hph | Sh ble |
| P1554Te | P1498Se | OE | + | Xyn2 | Cel6A | hph | Sh ble |
| P1554Le | P1498Se | OE | + | Xyn2 | Cel6A | hph | Sh ble |
OE - 과발현, Δ - 결실, N/A - 적용 불가능
실시예
1.5: 14 L 소규모 발효에서의 효소 생산
PDA 배지 상에서 성장한 BTR213, P998A, P1467Ve, P1498Se, P1489Ct, P1489Et, P1554ABt, P1554Te 및 P1554Le 균주의 트리코더마 포자를 멸균수에 현탁하고 5.1 g/L의 옥수수 침지액 분말 및 10 g/L 글루코스로 보충된 750 ㎖의 액체 버클리 배지(pH 5.5)(표 8)를 함유하는 2 L 배플 삼각플라스크로 이동시켰다. 플라스크를 100 rpm에서 가동하는 오비탈 교반기(Model G-52 New Brunswick Scientific Co.)를 사용하여 28℃에서 3일 동안 배양하였다.
| 성분 | g/L |
| (NH4)2SO4 | 10.4 |
| KH2PO4 | 2.0 |
| MgSO4·7H2O | 0.31 |
| CaCl2·2H2O | 0.53 |
| 건식 옥수수 침지액 | 5.1 |
| 글루코스 | 10 |
| 미량 원소* | 1 ㎖/L |
*미량원소 용액은 5 g/L FeSO4 ·7H2O, 1.6 g/L MnSO4·H2O 및 1.4 g/L ZnSO4 ·7H2O를 함유한다.
각 접종원 플라스크의 내용물을 5.5의 pH를 갖는 10 L의 초기 소규모 배지(표 9)를 함유하는 14 L 소규모 스케일 발효 용기(Model MF114 New Brunswick Scientific Co.)로 이동하였다. 용기를 배지의 글루코스가 감소될 때까지 배치 모드로 가동하였다. 이 지점에서, 셀룰라제 유도 탄수화물을 함유하는 탄소 공급원이 연속 기저 상에서 물에 용해된 35.5% w/v의 고체인 저장액으로부터 첨가되었다. 연동 펌프는 시간당 리터 배양당 0.4 그램의 탄소의 공급물 속도로 탄소 공급원을 전달하기 위해 사용되었다. 가동의 배치 및 이송-배치 부분 둘 다 동안의 작동 파라미터는: 500 rpm의 임펠러 교반에 의한 혼합, 분당 8 표준 리터의 공기 살포, 그리고 28℃의 온도였다. 배양 pH는 10% 수산화암모늄 용액의 첨가가 가능한 온라인 pH 프로브 및 펌프에 연결된 자동화 제어기를 사용하여 배치 성장 동안 4.0-4.5로 그리고 셀룰라제 생산 동안 pH 4.0으로 유지되었다. 주기적으로, 100 ㎖ 샘플의 부용을 바이오매스 및 단백질 분석을 위해 취하였다.
| 성분 | g/L |
| (NH4)2SO4 | 2.20 |
| KH2PO4 | 1.39 |
| MgSO4·7H2O | 0.70 |
| CaCl2·2H2O | 0.185 |
| 건식 옥수수 침지액 | 6.00 |
| 글루코스 | 13.00 |
| 미량 원소* | 0.38 ㎖/L |
*미량원소 용액은 5 g/L FeSO4·7H2O, 1.6 g/L MnSO4·H2O 및 1.4 g/L ZnSO4·7H2O을 함유한다.
배양 부용의 바이오매스 함량은, 칭량되고 유리 극세사 필터를 통해 진공 여과되고 100℃에서 4 내지 24시간 동안 오븐 건조된, 5-10 ㎖의 부용의 분취량를 사용하여 측정되었다. 바이오매스의 농도를 하기 식에 따라 결정하였다.
배양 여과액의 단백질 농도를 Bradford 어세이를 사용하여 측정하였다. 이 어세이의 기저를 형성하는, 쿠마시 브릴리언트 블루 G-250 염색에서의 색도 변화를 분광광도계로 595 nm에서의 흡광도 측정으로 정량하였다. 사용된 표준 어세이 대조는 알려진 조성물 및 농도의 셀룰라제 혼합물이었다. 효소 분석을 위한 최종 여과액을 162-170시간 후에 수집하였다.
4개의 셀룰라제 성분(TrCel7A, TrCel6A, TrCel45A, TrCel5A)의 상대 농도를 (총 분비된 단백질의 무게 퍼센트로) 상기(실시예 1.4) 설명된 바와 같이 성분 특이적 항체를 사용하여 ELISA에 의해 측정하였다. TrCel6A 셀룰라제의 풍도는 모든 형질전환체 및 모균주에서 유사하다. TrCel7A 셀룰라제는 Trcel7a가 결실된 형질전환체에서는 검출되지 않았다. 이소성으로 통합된 Trcel45a 유전자 구조체를 갖는 형질전환체는 그것들의 모균주와 유사한 TrCel7A 수준을 가진다. Trcel7a 결실된 형질전환체에서 TrCel5A의 상대 풍도는 천연 TrCel7A 효소를 계속 생산하는 모균주 또는 형질전환체와 비교해 증가하였다. TrCel45A의 풍도는 단일 또는 두배 통합된 Trcel45a 전이유전자 복제를 지니는 모든 형질전환체에서 증가하였다(도 7).
실시예
1.6: T.
레세이
형질전환체에 의해 생산된 효소의
탈필링
활성
탈필링 활성을 시험하기 위해, 원형의 100% 코튼 플란넬렛 직물을 약 4.5" 직경 및 ~1.0-2.0 g의 무게로 절단하였다. 직물 각 조각의 초기 무게를 측정하고 기록하였다. 직물 원형을 병에 퍼지 면을 세워 위치시키고 90 g의 강구(steel ball) 베어링 및 50 mM 시트레이트 완충액, pH 5.0을 각 병에 첨가하였다. 효소를 병당 1 - 10 mg의 총 단백질을 얻도록 희석하였다. 희석된 효소는 각 병의 총 액체가 약 15 g으로 동일하도록 병에 첨가되었다. 병을 ~180 rpm으로 진탕하면서 50℃에서 2시간 동안 배양하였다. 배양 후, 3 방울의 10 N NaOH를 병에 첨가하여 탈필링 반응을 멈추었다. 이어서, 병의 내용물을 여과하고 직물을 병에 다시 넣었다. 약 200 ㎖의 탈이온수의 첨가 후, "미세분"을 직물로부터 방출시키도록 병을 약 15초 동안 격렬하게 진탕하고 직물을 폐기하였다. 액체를 여과하고, 100℃ 오븐에서 적어도 2시간 동안 건조시키고 여과지 및 방출된 섬유의 총 무게를 기록하였다. 직물 무게의 손실을 하기 식을 사용하여 계산하였다:
탈필링 활성을 균주 BTR213로부터 생산되고 pH 5.0에서 어세이된 효소 혼합물(1.0의 탈필링 활성으로 설정)과 비교하였다.
도 8에 나타낸 바와 같이, TrCel45A의 과발현 및 변형된 TrCel5A-G363A 단백질의 과발현에 의해 생산된 효소 혼합물은 P998A 모균주에 의해 생산된 효소에 대해 증가된 탈필링 활성을 가져왔다.
실시예
2:
HiCMC3
및
HiCel45A
과발현 균주의 생성 및
특징화
실시예
2.1: T.
레세이에서
HiCel5A
셀룰라제의
발현
HiCel5 과발현 균주 P579A는 Hicel5a 유전자(SEQ ID NO:114)를 발현하고, Trcel7a 로커스를 표적화하고 우리딘의 부재에서 원영양체 성장을 복원하도록 설계된 pChHiCel5A-pyr4-TV 형질전환 벡터로 M2C38 우리딘 영양요구체 균주의 형질전환에 의해 생성되었다(도 9). Hicel5a 유전자(SEQ ID NO:114)는 SEQ ID NO: 74(HiCMC3)의 아미노산 서열을 갖는 패밀리 5 셀룰라제를 코드화한다. M2C38, M2C38aux의 우리딘 영양요구체는 0.15% w/v 5-플루오로오로트산(FOA)에 자발적 저항성인 돌연변이체의 선택을 통해 얻어졌다. N. 크라사 유전자 pyr4의 선택 카세트로부터의 전사는 그것의 천연 촉진제(Ppyr4) 및 종결제(Tpyr4)에 의해 구동된다. 발현 카세트는 (cel7a 표적 단편의 5'측면의 부분으로서) T. 레세이 cel7a 촉진제(Pcel7A) 및 분비 신호, H. 인솔렌스 성숙 Cel5A 코드화 서열(Hicel5a; SEQ ID NO:114) 및 T. 레세이 cel6a 종결제를 함유한다. 벡터, pChHICel5A-pyr4-TV는 형질전환 전에 EcoRI로 선형화되고 실시예 1.3에 설명된 바와 같이 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 매개된 형질전환에 의해 도입된다. 통합된 벡터 pChHiCel5A-pyr4-TV의 적어도 하나의 복제를 함유하는 형질전환체는 T. 레세이 cel7a 촉진제 및 T. 레세이 cel6a 종결제에 대해 특이적인 프라이머를 사용하여 게놈 DNA로부터 1.7 kb 생성물의 증폭에 의해 확인되고 이어서 Hicel5a 코드화 영역에 대해 특이적인 프로브를 사용하는 게놈 DNA의 서전 블롯(Southern blot) 분석에 의해 확인되었다(데이터는 나타내지 않음). 벡터의 Trcel7a 로커스로의 통합은 셀룰라제-유도 배지에서 성장한 형질전환체의 미량 배양으로부터 여과액의 웨스턴 블롯 분석에 의해 확인되었다(데이터는 나타내지 않음). 균주 P579A는 Trcel7a 로커스로 통합된 pChHiCel5A-pyr4-TV의 한 복제를 갖는 것으로 확인되었다.
실시예
2.2:
HiCel45A
의 과발현을 위한 T.
레세이
형질전환 벡터
형질전환 벡터, Pc/x-TrHicel45a-ble-TV(도 10)를 H. 인솔렌스 Cel45A 유전자(Hicel45A; SEQ ID NO:115)의 발현을 위해 사용하였다. 이것은 선택가능 마커로서 Sh ble 블레오마이신 저항성 유전자를 함유한다. Sh ble 유전자는 블레오마이신, 제오신 및 플레오마이신에 저항성을 수반하는, 스트렙토알로세이추스 힌두스타누스 블레오마이신 저항성 단백질, ShBle를 코드화한다. S. 힌두스타누스 ShBle 단백질의 선택 카세트로부터의 전사는 tef1(번역 연장 인자 1) 촉진제(Ptef1)에 의해 구동되고 cel7a 종결제(Tcel7a)에 의해 종결된다. 발현 카세트는 도 10에 나타낸 바와 같이 하이브리드 T. 레세이 cel7a/xyn2 촉진제(Pc/x; cel7a 촉진제 5448-6643 뉴클레오티드 및 xyn2 촉진제 664-6817 뉴클레오티드), 크실라나제 2 분비 신호(x2ss), T. 레세이 서열 최적화된 H. 인솔렌스 Cel45A 코드화 서열(Hicel45a;(SEQ ID NO:115)) 및 T. 레세이 cel7b 종결제(Tcel7b)를 함유한다.
실시예
2.3:
HiCel45A
및
HiCel5A
를 과발현하는 T.
레세이
균주의 생성
HiCel45A를 단일 통합된 전이유전자 복제로부터 과발현하는 균주는 형질전환 벡터, Pc/x-TrHicel45a-ble-TV로 HiCel5A 과발현 균주 P579A의 형질전환에 의해 생성되었다. 형질전환 벡터는 실시예 1.3에 설명된 바와 같이 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 매개된 형질전환에 의해 도입되었다.
실시예
2.4: T.
레세이
균주를 과발현하는
HiCel45A
+
HiCel5A
의
특징화
HiCel45A의 생산을 시험하기 위해, 트리코더마 형질전환체의 포자 및 모균주를 실시예 1.4에 설명된 바와 같이 미량 배양에서 성장시켰다. 배양을 250 rpm에서 진탕하면서 30℃에서 6일 동안 성장시켰다. 바이오매스를 분비된 단백질을 함유하는 성장 배지에서 12,000 rpm에서 원심분리에 의해 분리시켰다. 단백질 농도는 Bio-Rad Protein Assay(Cat. No. 500-0001)를 사용하여 측정하였다.
HiCel45A의 존재를 면역블롯팅(immunoblotting)에 의해 측정하였다. 미량 배양 여과액으로부터의 약 2 ㎍의 총 단백질은 Cel45A 항체와의 웨스턴 혼성화에 앞서 10% SDS-PAGE 프리캐스트 겔(BioRad) 상에서 분별되었다(데이터는 나타내지 않음). 샘플은 2% w/v SDS, 10% v/v 글리세롤, 50 mM Tris-HCl pH 6.8, 100 mM DTT, 0.05% 브로모페놀 불루 및 1.25% v/v β-멜캡토에탄올의 최종 농도를 위해 샘플 완충액과 혼합하였다. 샘플은 미량 배양 부용으로부터의 2 ㎍ 단백질 또는 HiCel45A를 발현하는 피치아 파스토리스 균주의 14 L 발효로부터 정제된 400 ng의 PpHiCel45A를 포함하였다. 샘플은 10% 프리캐스트 TrisHCl 겔(Biorad) 상에 로딩하기에 앞서 5분 동안 비등되었다. 100 V에서 10분 및 120V에서 1시간 동안 전기영동 후, 겔은 웨스턴 혼성화를 위해 PVDF 막으로 이동되었다. 이동은 얼음팩을 갖는 실온에서 1.5시간 동안 100V에서 수행되었다. 그 다음 막을 실온에서 하기와 같이 린스하였다: 5분 Milli-Q H2O, 20분 TTBS. 그 다음 막을 4℃에서 HiCel45A 프로빙 래빗 높인 다클론성 항혈청의 HST 용액 중에 20 ㎖의 1:5000 희석에 밤새도록 배양하였다. 1차 항체로 밤새도록 배양 후, 막을 실온에서 하기와 같이 린스하였다: TTBS에서 2 × 5분, HST에서 1 × 5분, TTBS에서 2 × 5분. (고트 높인 항-래빗 HRP 접합된) 2차 항체를 HST 중에 1:2000 희석하였다. 20 ㎖의 희석된 용액을 막에 첨가하고 실온에서 1시간동안 배양하였다. 2차 항체로 배양 후, 막을 실온에서 하기와 같이 린스하였다: 3회 TTBS에서 5분, HST에서 10분, 3회 TTBS에서 5분, TBS에서 5분. 웨스턴 블롯은 제조사의 권고에 따라 SuperSignal West Dura 연장된 기간 기질 키트(Thermo Scientific)를 사용하여 개발되었다. 이미지를 빛 없이, 화학발광 및 백색광 신호 없이, 분자량 마커를 위한 EtBr/UV 필터를 갖는 이미지기로 포착하였다. ~48 kDa 밴드가 모균주 P579A가 아닌 모든 형질전환체에서 검출되었다. 2개의 균주, P1622A 및 P1622F를 14 L 용기의 발효를 위해 선택하였다.
| 균주 | 모균주 | HiCel5A | TrCel7A | HiCel45A 분비 신호 | 선택 마커 |
| P1622A | P579A | OE | Δ | Xyn2 | ble |
| P1622F | P579A | OE | Δ | Xyn2 | ble |
OE - 과발현, Δ - 결실
실시예
2.5: 14 L 소규모 발효에서
HiCel5A
및
HiCel45A
+
HiCel5A
에 농축된 셀룰라제 혼합물의 생산
셀룰라제 혼합물은 실시예 1.5에 설명된 바와 같이 14 L 발효에서 P579A, P1622A 및 P1622F 균주로부터 생산되었다. HiCel45A의 발현은 상기(실시예 2.4) 설명된 바와 같이 Cel45A 하위패밀리 A 특이적 항체를 사용하는 면역블롯팅에 의해 측정되었다. ~48 kDa 밴드가 두 형질전환체에서 검출되었지만 모균주 P579A에서는 부재이다. HiCel45A의 풍도는 두 형질전환체에서 유사하다(도 11).
실시예
2.6:
HiCel5A
및
HiCel45A
+
HiCel5A
에 농축된
셀룰라제
혼합물의
탈
필링 활성
14 L 발효에서 BTR213, P579A 및 P1622A 균주로부터 생산된 효소 혼합물의 탈필링 활성은, 탈필링 반응이 50 mM 인산, 50 mM 시트르산 완충액, pH 6.5에서 수행되고 병은 "미세분"을 직물로부터 방출하도록 2.54 cm 폭 진탕 테이블에서 750 rpm으로 약 60초 동안 수직으로 진탕된 것을 제외하고, 실시예 1.6에서와 같이 측정되었다. 탈필링 활성을 균주 BTR213으로부터 생산되고 pH 5.0에서 어세이된 효소 혼합물(1.0의 탈필링 활성으로 설정)과 비교하였다.
도 12에서 나타낸 바와 같이, (균주 P1622A로부터) HiCel45A 및 HiCel5A에 농축된 효소 혼합물은 HiCel5A(모균주 P579A로부터의 셀룰라제 혼합물)에서만 농축된 효소 혼합물 또는 어떤 성분에 농축되지 않은 효소 혼합물(즉, 균주 BTR213으로부터의 셀룰라제 혼합물)에 대해 증가된 탈필링 활성을 나타낸다.
실시예
3:
TrCel45A
,
TrCel5A
-
G363A
,
TrCel5A
및
TrCel6A
의 정제
실시예
3.1
트리코더마
레세이
TrCel5A
및
TrCel6A
의 정제
TrCel5A 및 TrCel6A를 미국 특허 제88,071373호에 기재된 바와 같이 T. 레세이 균주 BTR213에 의해 생산된 완전한 셀룰라제 혼합물로부터 정제하였다.
실시예
3.2
트리코더마
레세이
Cel45A
의 정제
TrCel7A, TrCel6A 및 TrCel5A(WO2010/096931A1에 기재된, 균주 P297J)를 코드화하는 유전자가 결실된 트리코더마 레세이의 균주를 실시예 1.5에 설명된 것과 유사하게 침수된 액체 발효에서 성장시켰다. 균류 세포는 Harborlite 필터 베드를 함유하는 유리 극세사 필터를 통한 여과에 의해 발효 부용으로부터 제거되었다. TrCel45A는 아래 설명되는 바와 같이 음이온 교환 및 크기 배제 크로마토그래피를 사용하여 다른 분비된 단백질로부터 분리되었다.
60 ㎖ 컬럼의 DEAE-세파로스를 10 mM Tris/10 mM Bis-Tris, pH 7.5(완충액 1)에서 평형화시켰다. 약 260 mg의 총 단백질과 동등한 세포-없는 발효 부용을 완충액 1 조건으로 조정하고 컬럼에 5 ㎖/분으로 적용하였다. 컬럼을 600 ㎖의 완충액 1, 이어서 300 ㎖의 10 mM Tris/10 mM Bis-Tris, pH 6.5(완충액 2)로 세척하였다. 이들 두 단계는 컬럼으로부터 비-TrCel45A 단백질의 상당한 부분을 용리시킨다. 0-150 mM NaCl의 900 ㎖ 선형 구배를 컬럼에 완충액 2 바탕으로 적용하였다. 2개의 주요 피크가 이 구배 동안 용리한다. 피크 2는 TrCel45A 및 어떤 다른 단백질을 함유한다. 피크 2에 해당하는 분획을 수집하고 교반 한외여과 셀(Amicon) 및 10 kDa NMWL 폴리에테르술폰 막을 사용하여 농축시켰다.
피크 2의 농축된 제조를 50 mM 시트르산나트륨, pH 5.0(완충액 3)에 평형화된 170 ㎖ 컬럼의 Biogel P60에 적용하였다. 로드를 0.2 ㎖/분으로 적용하고 4 ㎖ 분획을 수집하였다. 로드를 0.2 ㎖/분에서 2 베드 부피의 완충액 3으로 용리시켰다. 2개의 주요 피크가 존재하고 웰은 280 nm의 흡광도에 의해 측정된 용리 프로파일에서 분리되었다. 제 2피크는 SDS-PAGE에 의해 평가된 TrCel45A였다. 이 단백질의 동일성을 질량분석에 의해 확인하였다. 제 2 피크에 해당하는 분획을 Biogel P60 컬럼으로부터 수집하고 상기 설명한 바와 같이 농축하였다. 농축된 분획에서 TrCel45의 순도를 SDS-PAGE 분석에 의해 확인하였다.
실시예
3.3
트리코더마
레세이
TrCel5A
-
G363A
의 정제
그것이 야생형 TrCel5A(WO2011/109905A1에 기재된 균주 P976M)가 아닌 Cel5A(G363A) 변종을 분비하도록 유전적으로 변경된, 트리코더마 레세이의 균주는 당업자에게 알려진 셀룰라제 생산을 유도하는 조건하의 침수된 액체 발효에서 성장하였다. 균류 세포는 Harborlite 필터 베드를 함유하는 유리 극세사 필터를 통한 여과에 의해 발효 부용으로부터 제거되었다.
그 다음 TrCel5A-G363A는 다른 분비된 트리코더마 단백질을 실질적으로 침전시키는 조건하에서 효소 혼합물을 배양함으로써 세포-없는 발효 부용에 농축되었다. 세포-없는 부용을 50 mM 시트르산나트륨, pH 3.5로 조정하고 55℃에서 17시간 동안 배양하였다. 이 배양의 종료에서, 효소 혼합물을 Sorvall Legend RT 상부-밴치 원심분리기에서 2000 rpm으로 5분 동안 원심분리하였다. TrCel5A-G363A를 함유하는 상청액을 추가 분석 및 정제를 위해 저장하는 한편, 다른 트리코더마 단백질을 함유하는 펠릿은 폐기되었다.
그 다음 TrCel5A-G363A를 함유하는 상청액은 상기 TrCel45A에 대해 설명된 동일한 과정을 사용하여 음이온 교환 크로마토그래피에 의해 분리되었다. TrCel5A-G363A는 완충액 1로 SDS-PAGE에 의해 측정된 실질적으로 순수한 형태로 용리되었다. 이 방법을 사용하여 정제된 TrCel5A-G363A는 활성을 위해 당업자에게 알려진 방법을 사용하여 카르복시메틸 셀룰로스 상에서 시험되었고 야생형 TrCel5A로서 유사한 활성(IU/mg 단백질)을 갖는 것이 발견되었다.
실시예
4: 패밀리 45 및 패밀리 5 및/또는 패밀리 6
셀룰라제에
농축된
셀룰라제
혼합물의
탈필링
활성
정제된 TrCel45A 및 TrCel5A-G363A 셀룰라제의 배합을 20:80의 TrCel45:TrCel5A의 중량 비율로 제조하였다. 그 다음 개별 정제된 성분뿐만 아니라 성분의 배합을 탈필링 활성을 위해 직물의 g당 1 내지 6 mg 총 단백질의 범위의 용량에서 어세이하였다. 탈필링 활성 측정을 실시예 1.6에 설명된 바와 같이 수행하였다. 도 14에 나타낸 바와 같이, TrCel45A 및 TrCel5A의 20:80 배합은 분리에서 정제된 성분의 어떤 것보다 직물로부터 더 많은 미세분을 방출한다.
20:80의 TrCel45A:(6:5:5 비율의 TrCel6A+TrCel5A+TrCel5A-G363A)의 중량 비율을 갖는 정제된 TrCel45A, TrCel6A, 야생형 TrCel5A 및 TrCel5A-G363A의 배합을 제조하였다. 그 다음 6:5:5의 TrCel6A:TrCel5A:TrCel5A-G363A 배합 및 정제된 TrCel45A뿐만 아니라 이 배합을 탈필링 활성을 위해 직물의 g당 0.7 내지 7 mg 총 단백질의 범위의 용량에서 어세이하였다. 탈필링 활성 측정을 실시예 1.6에 설명된 바와 같이 수행하였다. 도 15에 나타낸 바와 같이, 모든 3가지 타입의 셀룰라제를 함유하는 배합은 모든 용량에 대해 TrCel6A+TrCel5A+TrCel5A-G363 배합 또는 정제된 TrCel45A보다 높은 탈필링 활성(즉, 미세분 방출)을 일관되게 나타내었다.
SEQUENCE LISTING
<110> Iogen Bio-Products Corporation
Hill, Christopher
Tomashek, John J.
Gudynaite-Savitch, Loreta
Therrien, Guylaine
Calixte, Sophie
<120> Cellulase Enzyme Mixtures for Depilling and Uses Thereof
<130> V84651WO
<150> US 61/440,985
<151> 2011-02-09
<160> 115
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 397
<212> PRT
<213> Trichoderma reesei
<400> 1
Gln Gln Thr Val Trp Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly Trp Ser Gly Pro
1 5 10 15
Thr Asn Cys Ala Pro Gly Ser Ala Cys Ser Thr Leu Asn Pro Tyr Tyr
20 25 30
Ala Gln Cys Ile Pro Gly Ala Thr Thr Ile Thr Thr Ser Thr Arg Pro
35 40 45
Pro Ser Gly Pro Thr Thr Thr Thr Arg Ala Thr Ser Thr Ser Ser Ser
50 55 60
Thr Pro Pro Thr Ser Ser Gly Val Arg Phe Ala Gly Val Asn Ile Ala
65 70 75 80
Gly Phe Asp Phe Gly Cys Thr Thr Asp Gly Thr Cys Val Thr Ser Lys
85 90 95
Val Tyr Pro Pro Leu Lys Asn Phe Thr Gly Ser Asn Asn Tyr Pro Asp
100 105 110
Gly Ile Gly Gln Met Gln His Phe Val Asn Asp Asp Gly Met Thr Ile
115 120 125
Phe Arg Leu Pro Val Gly Trp Gln Tyr Leu Val Asn Asn Asn Leu Gly
130 135 140
Gly Asn Leu Asp Ser Thr Ser Ile Ser Lys Tyr Asp Gln Leu Val Gln
145 150 155 160
Gly Cys Leu Ser Leu Gly Ala Tyr Cys Ile Val Asp Ile His Asn Tyr
165 170 175
Ala Arg Trp Asn Gly Gly Ile Ile Gly Gln Gly Gly Pro Thr Asn Ala
180 185 190
Gln Phe Thr Ser Leu Trp Ser Gln Leu Ala Ser Lys Tyr Ala Ser Gln
195 200 205
Ser Arg Val Trp Phe Gly Ile Met Asn Glu Pro His Asp Val Asn Ile
210 215 220
Asn Thr Trp Ala Ala Thr Val Gln Glu Val Val Thr Ala Ile Arg Asn
225 230 235 240
Ala Gly Ala Thr Ser Gln Phe Ile Ser Leu Pro Gly Asn Asp Trp Gln
245 250 255
Ser Ala Gly Ala Phe Ile Ser Asp Gly Ser Ala Ala Ala Leu Ser Gln
260 265 270
Val Thr Asn Pro Asp Gly Ser Thr Thr Asn Leu Ile Phe Asp Val His
275 280 285
Lys Tyr Leu Asp Ser Asp Asn Ser Gly Thr His Ala Glu Cys Thr Thr
290 295 300
Asn Asn Ile Asp Gly Ala Phe Ser Pro Leu Ala Thr Trp Leu Arg Gln
305 310 315 320
Asn Asn Arg Gln Ala Ile Leu Thr Glu Thr Gly Gly Gly Asn Val Gln
325 330 335
Ser Cys Ile Gln Asp Met Cys Gln Gln Ile Gln Tyr Leu Asn Gln Asn
340 345 350
Ser Asp Val Tyr Leu Gly Tyr Val Gly Trp Ala Ala Gly Ser Phe Asp
355 360 365
Ser Thr Tyr Val Leu Thr Glu Thr Pro Thr Gly Ser Gly Asn Ser Trp
370 375 380
Thr Asp Thr Ser Leu Val Ser Ser Cys Leu Ala Arg Lys
385 390 395
<210> 2
<211> 397
<212> PRT
<213> Trichoderma reesei
<400> 2
Gln Gln Thr Val Trp Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly Trp Ser Gly Pro
1 5 10 15
Thr Asn Cys Ala Pro Gly Ser Ala Cys Ser Thr Leu Asn Pro Tyr Tyr
20 25 30
Ala Gln Cys Ile Pro Gly Ala Thr Thr Ile Thr Thr Ser Thr Arg Pro
35 40 45
Pro Ser Gly Pro Thr Thr Thr Thr Arg Ala Thr Ser Thr Ser Ser Ser
50 55 60
Thr Pro Pro Thr Ser Ser Gly Val Arg Phe Ala Gly Val Asn Ile Ala
65 70 75 80
Gly Phe Asp Phe Gly Cys Thr Thr Asp Gly Thr Cys Val Thr Ser Lys
85 90 95
Val Tyr Pro Pro Leu Lys Asn Phe Thr Gly Ser Asn Asn Tyr Pro Asp
100 105 110
Gly Ile Gly Gln Met Gln His Phe Val Asn Asp Asp Gly Met Thr Ile
115 120 125
Phe Arg Leu Pro Val Gly Trp Gln Tyr Leu Val Asn Asn Asn Leu Gly
130 135 140
Gly Asn Leu Asp Ser Thr Ser Ile Ser Lys Tyr Asp Gln Leu Val Gln
145 150 155 160
Gly Cys Leu Ser Leu Gly Ala Tyr Cys Ile Val Asp Ile His Asn Tyr
165 170 175
Ala Arg Trp Asn Gly Gly Ile Ile Gly Gln Gly Gly Pro Thr Asn Ala
180 185 190
Gln Phe Thr Ser Leu Trp Ser Gln Leu Ala Ser Lys Tyr Ala Ser Gln
195 200 205
Ser Arg Val Trp Phe Gly Ile Met Asn Glu Pro His Asp Val Asn Ile
210 215 220
Asn Thr Trp Ala Ala Thr Val Gln Glu Val Val Thr Ala Ile Arg Asn
225 230 235 240
Ala Gly Ala Thr Ser Gln Phe Ile Ser Leu Pro Gly Asn Asp Trp Gln
245 250 255
Ser Ala Gly Ala Phe Ile Ser Asp Gly Ser Ala Ala Ala Leu Ser Gln
260 265 270
Val Thr Asn Pro Asp Gly Ser Thr Thr Asn Leu Ile Phe Asp Val His
275 280 285
Lys Tyr Leu Asp Ser Asp Asn Ser Gly Thr His Ala Glu Cys Thr Thr
290 295 300
Asn Asn Ile Asp Gly Ala Phe Ser Pro Leu Ala Thr Trp Leu Arg Gln
305 310 315 320
Asn Asn Arg Gln Ala Ile Leu Thr Glu Thr Gly Gly Gly Asn Val Gln
325 330 335
Ser Cys Ile Gln Asp Met Cys Gln Gln Ile Gln Tyr Leu Asn Gln Asn
340 345 350
Ser Asp Val Tyr Leu Gly Tyr Val Gly Trp Gly Ala Gly Ser Phe Asp
355 360 365
Ser Thr Tyr Val Leu Thr Glu Thr Pro Thr Gly Ser Gly Asn Ser Trp
370 375 380
Thr Asp Thr Ser Leu Val Ser Ser Cys Leu Ala Arg Lys
385 390 395
<210> 3
<211> 447
<212> PRT
<213> Trichoderma reesei
<400> 3
Gln Ala Cys Ser Ser Val Trp Gly Gln Cys Gly Gly Gln Asn Trp Ser
1 5 10 15
Gly Pro Thr Cys Cys Ala Ser Gly Ser Thr Cys Val Tyr Ser Asn Asp
20 25 30
Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Gly Ala Ala Ser Ser Ser Ser Ser Thr
35 40 45
Arg Ala Ala Ser Thr Thr Ser Arg Val Ser Pro Thr Thr Ser Arg Ser
50 55 60
Ser Ser Ala Thr Pro Pro Pro Gly Ser Thr Thr Thr Arg Val Pro Pro
65 70 75 80
Val Gly Ser Gly Thr Ala Thr Tyr Ser Gly Asn Pro Phe Val Gly Val
85 90 95
Thr Pro Trp Ala Asn Ala Tyr Tyr Ala Ser Glu Val Ser Ser Leu Ala
100 105 110
Ile Pro Ser Leu Thr Gly Ala Met Ala Thr Ala Ala Ala Ala Val Ala
115 120 125
Lys Val Pro Ser Phe Met Trp Leu Asp Thr Leu Asp Lys Thr Pro Leu
130 135 140
Met Glu Gln Thr Leu Ala Asp Ile Arg Thr Ala Asn Lys Asn Gly Gly
145 150 155 160
Asn Tyr Ala Gly Gln Phe Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys
165 170 175
Ala Ala Leu Ala Ser Asn Gly Glu Tyr Ser Ile Ala Asp Gly Gly Val
180 185 190
Ala Lys Tyr Lys Asn Tyr Ile Asp Thr Ile Arg Gln Ile Val Val Glu
195 200 205
Tyr Ser Asp Ile Arg Thr Leu Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala
210 215 220
Asn Leu Val Thr Asn Leu Gly Thr Pro Lys Cys Ala Asn Ala Gln Ser
225 230 235 240
Ala Tyr Leu Glu Cys Ile Asn Tyr Ala Val Thr Gln Leu Asn Leu Pro
245 250 255
Asn Val Ala Met Tyr Leu Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp
260 265 270
Pro Ala Asn Gln Asp Pro Ala Ala Gln Leu Phe Ala Asn Val Tyr Lys
275 280 285
Asn Ala Ser Ser Pro Arg Ala Leu Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala
290 295 300
Asn Tyr Asn Gly Trp Asn Ile Thr Ser Pro Pro Ser Tyr Thr Gln Gly
305 310 315 320
Asn Ala Val Tyr Asn Glu Lys Leu Tyr Ile His Ala Ile Gly Pro Leu
325 330 335
Leu Ala Asn His Gly Trp Ser Asn Ala Phe Phe Ile Thr Asp Gln Gly
340 345 350
Arg Ser Gly Lys Gln Pro Thr Gly Gln Gln Gln Trp Gly Asp Trp Cys
355 360 365
Asn Val Ile Gly Thr Gly Phe Gly Ile Arg Pro Ser Ala Asn Thr Gly
370 375 380
Asp Ser Leu Leu Asp Ser Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Cys
385 390 395 400
Asp Gly Thr Ser Asp Ser Ser Ala Pro Arg Phe Asp Ser His Cys Ala
405 410 415
Leu Pro Asp Ala Leu Gln Pro Ala Pro Gln Ala Gly Ala Trp Phe Gln
420 425 430
Ala Tyr Phe Val Gln Leu Leu Thr Asn Ala Asn Pro Ser Phe Leu
435 440 445
<210> 4
<211> 225
<212> PRT
<213> Trichoderma reesei
<400> 4
Tyr Lys Ala Thr Thr Thr Arg Tyr Tyr Asp Gly Gln Glu Gly Ala Cys
1 5 10 15
Gly Cys Gly Ser Ser Ser Gly Ala Phe Pro Trp Gln Leu Gly Ile Gly
20 25 30
Asn Gly Val Tyr Thr Ala Ala Gly Ser Gln Ala Leu Phe Asp Thr Ala
35 40 45
Gly Ala Ser Trp Cys Gly Ala Gly Cys Gly Lys Cys Tyr Gln Leu Thr
50 55 60
Ser Thr Gly Gln Ala Pro Cys Ser Ser Cys Gly Thr Gly Gly Ala Ala
65 70 75 80
Gly Gln Ser Ile Ile Val Met Val Thr Asn Leu Cys Pro Asn Asn Gly
85 90 95
Asn Ala Gln Trp Cys Pro Val Val Gly Gly Thr Asn Gln Tyr Gly Tyr
100 105 110
Ser Tyr His Phe Asp Ile Met Ala Gln Asn Glu Ile Phe Gly Asp Asn
115 120 125
Val Val Val Asp Phe Glu Pro Ile Ala Cys Pro Gly Gln Ala Ala Ser
130 135 140
Asp Trp Gly Thr Cys Leu Cys Val Gly Gln Gln Glu Thr Asp Pro Thr
145 150 155 160
Pro Val Leu Gly Asn Asp Thr Gly Ser Thr Pro Pro Gly Ser Ser Pro
165 170 175
Pro Ala Thr Ser Ser Ser Pro Pro Ser Gly Gly Gly Gln Gln Thr Leu
180 185 190
Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Ala Gly Trp Thr Gly Pro Thr Thr Cys Gln
195 200 205
Ala Pro Gly Thr Cys Lys Val Gln Asn Gln Trp Tyr Ser Gln Cys Leu
210 215 220
Pro
225
<210> 5
<211> 497
<212> PRT
<213> Trichoderma reesei
<400> 5
Gln Ser Ala Cys Thr Leu Gln Ser Glu Thr His Pro Pro Leu Thr Trp
1 5 10 15
Gln Lys Cys Ser Ser Gly Gly Thr Cys Thr Gln Gln Thr Gly Ser Val
20 25 30
Val Ile Asp Ala Asn Trp Arg Trp Thr His Ala Thr Asn Ser Ser Thr
35 40 45
Asn Cys Tyr Asp Gly Asn Thr Trp Ser Ser Thr Leu Cys Pro Asp Asn
50 55 60
Glu Thr Cys Ala Lys Asn Cys Cys Leu Asp Gly Ala Ala Tyr Ala Ser
65 70 75 80
Thr Tyr Gly Val Thr Thr Ser Gly Asn Ser Leu Ser Ile Gly Phe Val
85 90 95
Thr Gln Ser Ala Gln Lys Asn Val Gly Ala Arg Leu Tyr Leu Met Ala
100 105 110
Ser Asp Thr Thr Tyr Gln Glu Phe Thr Leu Leu Gly Asn Glu Phe Ser
115 120 125
Phe Asp Val Asp Val Ser Gln Leu Pro Cys Gly Leu Asn Gly Ala Leu
130 135 140
Tyr Phe Val Ser Met Asp Ala Asp Gly Gly Val Ser Lys Tyr Pro Thr
145 150 155 160
Asn Thr Ala Gly Ala Lys Tyr Gly Thr Gly Tyr Cys Asp Ser Gln Cys
165 170 175
Pro Arg Asp Leu Lys Phe Ile Asn Gly Gln Ala Asn Val Glu Gly Trp
180 185 190
Glu Pro Ser Ser Asn Asn Ala Asn Thr Gly Ile Gly Gly His Gly Ser
195 200 205
Cys Cys Ser Glu Met Asp Ile Trp Glu Ala Asn Ser Ile Ser Glu Ala
210 215 220
Leu Thr Pro His Pro Cys Thr Thr Val Gly Gln Glu Ile Cys Glu Gly
225 230 235 240
Asp Gly Cys Gly Gly Thr Tyr Ser Asp Asn Arg Tyr Gly Gly Thr Cys
245 250 255
Asp Pro Asp Gly Cys Asp Trp Asn Pro Tyr Arg Leu Gly Asn Thr Ser
260 265 270
Phe Tyr Gly Pro Gly Ser Ser Phe Thr Leu Asp Thr Thr Lys Lys Leu
275 280 285
Thr Val Val Thr Gln Phe Glu Thr Ser Gly Ala Ile Asn Arg Tyr Tyr
290 295 300
Val Gln Asn Gly Val Thr Phe Gln Gln Pro Asn Ala Glu Leu Gly Ser
305 310 315 320
Tyr Ser Gly Asn Glu Leu Asn Asp Asp Tyr Cys Thr Ala Glu Glu Ala
325 330 335
Glu Phe Gly Gly Ser Ser Phe Ser Asp Lys Gly Gly Leu Thr Gln Phe
340 345 350
Lys Lys Ala Thr Ser Gly Gly Met Val Leu Val Met Ser Leu Trp Asp
355 360 365
Asp Tyr Tyr Ala Asn Met Leu Trp Leu Asp Ser Thr Tyr Pro Thr Asn
370 375 380
Glu Thr Ser Ser Thr Pro Gly Ala Val Arg Gly Ser Cys Ser Thr Ser
385 390 395 400
Ser Gly Val Pro Ala Gln Val Glu Ser Gln Ser Pro Asn Ala Lys Val
405 410 415
Thr Phe Ser Asn Ile Lys Phe Gly Pro Ile Gly Ser Thr Gly Asn Pro
420 425 430
Ser Gly Gly Asn Pro Pro Gly Gly Asn Pro Pro Gly Thr Thr Thr Thr
435 440 445
Arg Arg Pro Ala Thr Thr Thr Gly Ser Ser Pro Gly Pro Thr Gln Ser
450 455 460
His Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly Tyr Ser Gly Pro Thr Val Cys
465 470 475 480
Ala Ser Gly Thr Thr Cys Gln Val Leu Asn Pro Tyr Tyr Ser Gln Cys
485 490 495
Leu
<210> 6
<211> 437
<212> PRT
<213> Trichoderma reesei
<400> 6
Gln Gln Pro Gly Thr Ser Thr Pro Glu Val His Pro Lys Leu Thr Thr
1 5 10 15
Tyr Lys Cys Thr Lys Ser Gly Gly Cys Val Ala Gln Asp Thr Ser Val
20 25 30
Val Leu Asp Trp Asn Tyr Arg Trp Met His Asp Ala Asn Tyr Asn Ser
35 40 45
Cys Thr Val Asn Gly Gly Val Asn Thr Thr Leu Cys Pro Asp Glu Ala
50 55 60
Thr Cys Gly Lys Asn Cys Phe Ile Glu Gly Val Asp Tyr Ala Ala Ser
65 70 75 80
Gly Val Thr Thr Ser Gly Ser Ser Leu Thr Met Asn Gln Tyr Met Pro
85 90 95
Ser Ser Ser Gly Gly Tyr Ser Ser Val Ser Pro Arg Leu Tyr Leu Leu
100 105 110
Asp Ser Asp Gly Glu Tyr Val Met Leu Lys Leu Asn Gly Gln Glu Leu
115 120 125
Ser Phe Asp Val Asp Leu Ser Ala Leu Pro Cys Gly Glu Asn Gly Ser
130 135 140
Leu Tyr Leu Ser Gln Met Asp Glu Asn Gly Gly Ala Asn Gln Tyr Asn
145 150 155 160
Thr Ala Gly Ala Asn Tyr Gly Ser Gly Tyr Cys Asp Ala Gln Cys Pro
165 170 175
Val Gln Thr Trp Arg Asn Gly Thr Leu Asn Thr Ser His Gln Gly Phe
180 185 190
Cys Cys Asn Glu Met Asp Ile Leu Glu Gly Asn Ser Arg Ala Asn Ala
195 200 205
Leu Thr Pro His Ser Cys Thr Ala Thr Ala Cys Asp Ser Ala Gly Cys
210 215 220
Gly Phe Asn Pro Tyr Gly Ser Gly Tyr Lys Ser Tyr Tyr Gly Pro Gly
225 230 235 240
Asp Thr Val Asp Thr Ser Lys Thr Phe Thr Ile Ile Thr Gln Phe Asn
245 250 255
Thr Asp Asn Gly Ser Pro Ser Gly Asn Leu Val Ser Ile Thr Arg Lys
260 265 270
Tyr Gln Gln Asn Gly Val Asp Ile Pro Ser Ala Gln Pro Gly Gly Asp
275 280 285
Thr Ile Ser Ser Cys Pro Ser Ala Ser Ala Tyr Gly Gly Leu Ala Thr
290 295 300
Met Gly Lys Ala Leu Ser Ser Gly Met Val Leu Val Phe Ser Ile Trp
305 310 315 320
Asn Asp Asn Ser Gln Tyr Met Asn Trp Leu Asp Ser Gly Asn Ala Gly
325 330 335
Pro Cys Ser Ser Thr Glu Gly Asn Pro Ser Asn Ile Leu Ala Asn Asn
340 345 350
Pro Asn Thr His Val Val Phe Ser Asn Ile Arg Trp Gly Asp Ile Gly
355 360 365
Ser Thr Thr Asn Ser Thr Ala Pro Pro Pro Pro Pro Ala Ser Ser Thr
370 375 380
Thr Phe Ser Thr Thr Arg Arg Ser Ser Thr Thr Ser Ser Ser Pro Ser
385 390 395 400
Cys Thr Gln Thr His Trp Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly Tyr Ser Gly
405 410 415
Cys Lys Thr Cys Thr Ser Gly Thr Thr Cys Gln Tyr Ser Asn Asp Tyr
420 425 430
Tyr Ser Gln Cys Leu
435
<210> 7
<211> 284
<212> PRT
<213> Humicola insolens
<400> 7
Ala Asp Gly Arg Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys
1 5 10 15
Gly Trp Ala Lys Lys Ala Pro Val Asn Gln Pro Val Phe Ser Cys Asn
20 25 30
Ala Asn Phe Gln Arg Ile Thr Asp Phe Asp Ala Lys Ser Gly Cys Glu
35 40 45
Pro Gly Gly Val Ala Tyr Ser Cys Ala Asp Gln Thr Pro Trp Ala Val
50 55 60
Asn Asp Asp Phe Ala Leu Gly Phe Ala Ala Thr Ser Ile Ala Gly Ser
65 70 75 80
Asn Glu Ala Gly Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Ser
85 90 95
Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Met Val Val Gln Ser Thr Ser Thr Gly
100 105 110
Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu Asn Ile Pro Gly Gly Gly
115 120 125
Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Pro Gln Phe Gly Gly Leu Pro Gly
130 135 140
Gln Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Asn Glu Cys Asp Arg Phe Pro
145 150 155 160
Asp Ala Leu Lys Pro Gly Cys Tyr Trp Arg Phe Asp Trp Phe Lys Asn
165 170 175
Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser Phe Arg Gln Val Gln Cys Pro Ala Glu
180 185 190
Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg Asn Asp Asp Gly Asn Phe Pro
195 200 205
Ala Val Gln Ile Pro Ser Ser Ser Thr Ser Ser Pro Val Asn Gln Pro
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Ser Pro Pro Val
225 230 235 240
Gln Pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys Thr Ala Glu Arg Trp Ala Gln Cys
245 250 255
Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys Thr Thr Cys Val Ala Gly Ser Thr
260 265 270
Cys Thr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr His Gln Cys Leu
275 280
<210> 8
<211> 247
<212> PRT
<213> Trichoderma viride
<400> 8
Met Lys Ala Thr Leu Val Leu Gly Ser Leu Ile Val Gly Ala Val Ser
1 5 10 15
Ala Tyr Lys Ala Thr Thr Thr Arg Tyr Tyr Asp Gly Gln Glu Gly Ala
20 25 30
Cys Gly Cys Gly Ser Ser Ser Gly Ala Phe Pro Trp Gln Leu Gly Ile
35 40 45
Gly Asn Gly Val Tyr Thr Ala Ala Gly Ser Gln Ala Leu Phe Asp Thr
50 55 60
Ala Gly Ala Ser Trp Cys Gly Ala Gly Cys Gly Lys Cys Tyr Gln Leu
65 70 75 80
Thr Ser Thr Gly Gln Ala Pro Cys Ser Ser Cys Gly Thr Gly Gly Ala
85 90 95
Ala Gly Gln Ser Ile Ile Val Met Val Thr Asn Leu Cys Pro Asn Asn
100 105 110
Gly Asn Ala Gln Trp Cys Pro Val Val Gly Gly Thr Asn Gln Tyr Gly
115 120 125
Tyr Ser Tyr His Phe Asp Ile Met Ala Gln Asn Glu Ile Phe Gly Asp
130 135 140
Asn Val Val Val Asp Phe Glu Pro Ile Ala Cys Pro Gly Gln Ala Ala
145 150 155 160
Ser Asp Trp Gly Thr Cys Leu Cys Val Gly Gln Gln Glu Thr Asp Pro
165 170 175
Thr Pro Val Leu Gly Asn Asp Thr Gly Ser Thr Pro Pro Gly Ser Ser
180 185 190
Pro Pro Ala Thr Ser Ser Ser Pro Pro Ser Gly Gly Gly Gln Gln Thr
195 200 205
Leu Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Ala Gly Trp Thr Gly Pro Thr Thr Cys
210 215 220
Gln Ala Pro Gly Thr Cys Lys Val Gln Asn Gln Trp Tyr Ser Gln Cys
225 230 235 240
Leu Pro Trp Glu Gly Pro Arg
245
<210> 9
<211> 266
<212> PRT
<213> Penicillium decumbens
<400> 9
Met Lys Gly Lys Val Ala Phe Leu Leu Leu Asp Leu Leu Ala Ser Ala
1 5 10 15
Ala Ala Tyr Lys Ala Thr Thr Thr Arg Tyr Tyr Asp Gly Gln Glu Gly
20 25 30
Ala Cys Gly Cys Gly Ser Ser Ser Gly Leu Phe Pro Trp Gln Leu Gly
35 40 45
Ile Gly Asn Gly Val Tyr Thr Ala Ala Gly Ser Gln Ala Leu Phe Asp
50 55 60
Thr Ala Gly Ala Asp Trp Cys Gly Ala Gly Cys Gly Lys Cys Tyr Lys
65 70 75 80
Leu Thr Ser Thr Gly Glu Pro Pro Cys Lys Asp Cys Gly Thr Gly Gly
85 90 95
Val Ala Gly Gln Ser Ile Ile Val Met Val Thr Asn Leu Cys Pro Tyr
100 105 110
Asn Gly Asn Gln Gln Trp Cys Pro Asn Pro Gly Ser Thr Asn Gln Tyr
115 120 125
Gly Tyr Ser Tyr His Phe Asp Ile Met Ala Gln Asn Glu Ile Phe Gly
130 135 140
Asp Asn Val Val Val Asp Phe Glu Pro Ile Ala Cys Pro Gly Gln Ala
145 150 155 160
Asn Ser Asp Trp Gln Ser Cys Val Cys Tyr Gly Lys Thr Glu Thr Asp
165 170 175
Thr Thr Pro Val Gly Leu Thr Ala Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ser Ser
180 185 190
Gln Ser Ser Thr Thr Ser Gln Gly Ser Thr Thr Thr Arg Thr Thr Leu
195 200 205
Thr Ala Thr Thr Thr Ala Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser
210 215 220
Gly Ser Ser Ser Gly Thr Gln Ser Val Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Ser
225 230 235 240
Gly Trp Thr Gly Pro Thr Asn Cys Ala Ser Gly Ser Lys Cys Thr Ala
245 250 255
Gln Asn Gln Trp Tyr Ser Gln Cys Leu Pro
260 265
<210> 10
<211> 247
<212> PRT
<213> Aspergillus nidulans
<400> 10
Met Gln Arg Ile Pro Asp Arg Leu Ser Asp Ser Thr Arg Ile Thr Arg
1 5 10 15
Pro His Arg Ser Leu Cys Cys Asn Thr Gly Gly Ala Ser Ser Ser Cys
20 25 30
Pro Gly Tyr His Asn Cys Ala Cys Gly Cys Gly Asn Lys Ile Gly Thr
35 40 45
Tyr Asp Trp Ser Tyr Gly Ile Ala Asn Lys Val Tyr Thr Ala Ala Ala
50 55 60
Asn Gln Ala Leu Phe Asp Ser Gly Pro Asn Asp Ala Thr His Trp Cys
65 70 75 80
Gly Asn Gly Cys Gly Lys Cys Tyr Arg Leu Thr Ser Thr Gly Val Ser
85 90 95
Thr Cys Glu Thr Cys Gly Ala Gly Gly Glu Gln Gly Lys Ser Ile Val
100 105 110
Val Met Val Thr Asn Leu Cys Pro Phe Lys Gly Asn Glu Arg Trp Cys
115 120 125
Pro Asn Pro Gly Gln Leu Asn Pro His Gly Tyr Ala Tyr His Phe Asp
130 135 140
Ile Met Gly Gly Ala Gly Val Phe Gly Asp Asn Val Val Val Glu Phe
145 150 155 160
Glu Glu Val Pro Cys Pro Gly Asp Ala Ala Phe Lys Trp Ala Ala Cys
165 170 175
Glu Cys His Pro Asn Leu Arg Asn Lys Asp Leu Thr Leu Asn Ala Gly
180 185 190
Ala His Ala Ala Gly Ser Lys Ile Val Gly Pro Ala Gln Ala Ala Ile
195 200 205
Ile Ser Val Asn Gly Leu Pro Ala Pro Ala Ala Met Ala Val Gln Pro
210 215 220
Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Ala Pro Ala Arg Pro Ala Ile Glu Ile
225 230 235 240
Pro Pro Pro Pro Ala Pro Val
245
<210> 11
<211> 194
<212> PRT
<213> Haliotis discus discus
<400> 11
Met Lys Thr Ala Val Ser Ile Leu Leu Leu Phe Ala Ala Ser Ala Trp
1 5 10 15
Ala Asn Gln Lys Cys Gln Met His Asn Gly Ile Arg Met Tyr Asn Gly
20 25 30
Lys His Cys Ala Ser Thr Thr Arg Tyr Asn Asp Gly His Lys Gly Ala
35 40 45
Cys Gly Cys Gly Gln Asn Asp Thr Pro Phe Pro Trp Asn Asn Asn Gln
50 55 60
Tyr Val Ala Ala Ala Asn Gln Lys Leu Phe Ser Asn Ser Gly Ser Thr
65 70 75 80
Trp Cys Gly Asp Ser Cys Gly Lys Cys Val Lys Leu Thr Thr Thr Gly
85 90 95
Gly Ser Ile Pro Gly Ala Gly Thr Gly Ala His Ala Gly Gln Ser His
100 105 110
Val Phe Met Ile Thr Asn Asp Cys Pro Asp Val Ala Pro Asn Leu Glu
115 120 125
Trp Cys Ala Gln Lys Gly Ala Pro Gly Ser Gly His Gly Asn Thr His
130 135 140
Gly Tyr Glu Val His Phe Asp Leu Glu Asn Asn Gly Asn Gln Ile Ser
145 150 155 160
Lys Leu Gly Trp Asp Asn Pro Glu Val Thr Trp Glu Trp Ser Ser Cys
165 170 175
His Gly Ser Asn Thr Pro Thr Asp Gln Met Trp His Thr Cys Glu Cys
180 185 190
Ser His
<210> 12
<211> 195
<212> PRT
<213> Ampullaria crossean
<400> 12
Met Lys Leu Phe Tyr Leu Leu Cys Leu Ala Val Pro Leu Leu Glu Ala
1 5 10 15
Ala Gln Leu Cys Gln Pro Asp Ser Arg Gly Val Arg Arg Phe Asn Gly
20 25 30
Lys Pro Cys Ala Ser Thr Thr Arg Tyr Val Asp Gly His Lys Gly Ala
35 40 45
Cys Gly Cys Gly Gln Lys Gly Ser Asp Thr Pro Phe Pro Trp Asn Ile
50 55 60
Gln Lys His Val Thr Ala Pro Ser Glu Arg Tyr Phe Asp Gly Gly Gly
65 70 75 80
Ser Ser Leu Trp Cys Gly Arg Asn Cys Gly Lys Cys Val Lys Leu Thr
85 90 95
Pro Thr Gly Gly Phe Val Pro Gly Lys Gly Asn Ala Pro Pro Asn His
100 105 110
Asn Pro Val Val Phe Gln Val Thr Asn Ala Cys Pro Ile Asn Gly Asn
115 120 125
Glu Glu Trp Cys Gly Ile Ser Gly Ala Pro Gly Thr Gly His Val Asn
130 135 140
Ser His Gly Tyr Glu Val His Phe Asp Leu Gln Asp Gln Val Gly Gln
145 150 155 160
Val Glu Ala Leu His Trp Asp Asn Pro Glu Val Thr Trp Glu Glu Thr
165 170 175
Ser Cys Pro Gly Asp Leu Gln Ser Asn Tyr Gln Gln Cys Glu Cys His
180 185 190
Asn Ser Gly
195
<210> 13
<211> 195
<212> PRT
<213> Ampullaria crossean
<400> 13
Met Lys Leu Phe Tyr Leu Leu Cys Leu Ala Val Pro Val Leu Glu Ala
1 5 10 15
Ala Gln Leu Cys Gln Pro Asp Ala His Gly Val Arg Arg Phe Asn Gly
20 25 30
Arg Pro Cys Ala Ser Thr Thr Arg Tyr Val Asp Gly His Lys Gly Ala
35 40 45
Cys Gly Cys Gly Gln Lys Gly Ser Asp Thr Pro Phe Pro Trp Asn Leu
50 55 60
Gln Lys His Val Thr Ala Pro Ser Glu Arg Tyr Phe Asp Asp Gly Gly
65 70 75 80
Ser Asn Leu Trp Cys Gly Lys Asn Cys Gly Lys Cys Val Arg Leu Thr
85 90 95
Pro Thr Gly Gly Phe Val Pro Gly Lys Gly Gly Ala Pro Pro Asn His
100 105 110
Asn Pro Val Val Phe Met Val Thr Asn Ala Cys Pro Ile Asn Gly Asn
115 120 125
Glu Glu Trp Cys Gly Ile Ser Gly Lys Pro Gly Thr Asn His Val Asn
130 135 140
Ser His Gly Tyr Glu Val His Phe Asp Leu Gln Asp Gln Val Gly Gln
145 150 155 160
Val Glu Ala Leu His Trp Asp Asn Pro Glu Val Thr Trp Glu Glu Val
165 170 175
Pro Cys Pro Gly Asp Leu Gln Ala Asn Tyr Gln Gln Cys Glu Cys His
180 185 190
Asn Ser Asp
195
<210> 14
<211> 211
<212> PRT
<213> Mytilus edulis
<400> 14
Met Lys Tyr Leu Val Leu Ser Leu Leu Val Leu Val Tyr Ser Val Ser
1 5 10 15
Ala Asn Gln Lys Cys Ser Gly Asn Pro Arg Arg Tyr Asn Gly Lys Ser
20 25 30
Cys Ala Ser Thr Thr Asn Tyr His Asp Ser His Lys Gly Ala Cys Gly
35 40 45
Cys Gly Pro Ala Ser Gly Asp Ala Gln Phe Gly Trp Asn Ala Gly Ser
50 55 60
Phe Val Ala Ala Ala Ser Gln Met Tyr Phe Asp Ser Gly Asn Lys Gly
65 70 75 80
Trp Cys Gly Gln His Cys Gly Gln Cys Ile Lys Leu Thr Thr Thr Gly
85 90 95
Gly Tyr Val Pro Gly Gln Gly Gly Pro Val Arg Glu Gly Leu Ser Lys
100 105 110
Thr Phe Met Ile Thr Asn Leu Cys Pro Asn Ile Tyr Pro Asn Gln Asp
115 120 125
Trp Cys Asn Gln Gly Ser Gln Tyr Gly Gly His Asn Lys Tyr Gly Tyr
130 135 140
Glu Leu His Leu Asp Leu Glu Asn Gly Arg Ser Gln Val Thr Gly Met
145 150 155 160
Gly Trp Asn Asn Pro Glu Thr Thr Trp Glu Val Val Asn Cys Asp Ser
165 170 175
Glu His Asn His Asp His Arg Thr Pro Ser Asn Ser Met Tyr Gly Gln
180 185 190
Cys Gln Cys Ala His Gln Gly Lys Arg Gly Leu Asn Glu Thr Ser Asn
195 200 205
Glu Ser Leu
210
<210> 15
<211> 206
<212> PRT
<213> Phanerochaete chrysosporium
<400> 15
Met Ala Lys Leu Ser Met Phe Leu Gly Phe Val Ala Val Ala Thr Leu
1 5 10 15
Ala Ser Ala Leu Thr Val Ser Glu Lys Arg Ala Thr Gly Gly Tyr Val
20 25 30
Gln Gln Ala Thr Gly Gln Ala Ser Phe Thr Met Tyr Ser Gly Cys Gly
35 40 45
Ser Pro Ala Cys Gly Lys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Ala Ala Ile Asn
50 55 60
Gln Leu Ala Phe Gly Ser Ala Pro Gly Leu Gly Ala Gly Asp Ala Cys
65 70 75 80
Gly Arg Cys Phe Ala Leu Thr Gly Asn His Asp Pro Tyr Ser Pro Asn
85 90 95
Tyr Thr Gly Pro Phe Gly Gln Thr Ile Val Val Lys Val Thr Asp Leu
100 105 110
Cys Pro Val Gln Gly Asn Gln Glu Phe Cys Gly Gln Thr Thr Ser Asn
115 120 125
Pro Thr Asn Gln His Gly Met Pro Phe His Phe Asp Ile Cys Glu Asp
130 135 140
Thr Gly Gly Ser Ala Lys Phe Phe Pro Ser Gly His Gly Ala Leu Thr
145 150 155 160
Gly Thr Phe Thr Glu Val Ser Cys Ser Gln Trp Ser Gly Ser Asp Gly
165 170 175
Gly Gln Leu Trp Asn Gly Ala Cys Leu Ser Gly Glu Thr Ala Pro Asn
180 185 190
Trp Pro Ser Thr Ala Cys Gly Asn Lys Gly Thr Ala Pro Ser
195 200 205
<210> 16
<211> 305
<212> PRT
<213> Humicola grisea var. thermoidea
<400> 16
Met Arg Ser Ser Pro Leu Leu Pro Ser Asp Val Val Ala Ala Leu Pro
1 5 10 15
Val Leu Ala Leu Ala Ala Asp Gly Lys Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Ala Lys Lys Ala Pro Val Asn Gln Pro
35 40 45
Val Phe Ser Cys Asn Ala Asn Phe Gln Arg Leu Thr Asp Phe Asp Ala
50 55 60
Lys Ser Gly Cys Glu Pro Gly Gly Val Ala Tyr Ser Cys Ala Asp Gln
65 70 75 80
Thr Pro Trp Ala Val Asn Asp Asp Phe Ala Phe Gly Phe Ala Ala Thr
85 90 95
Ser Ile Ala Gly Ser Asn Glu Ala Gly Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Glu
100 105 110
Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Met Val Val Gln
115 120 125
Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu Asn
130 135 140
Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Pro Gln Phe
145 150 155 160
Gly Gly Leu Pro Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Asn Glu
165 170 175
Cys Asp Arg Phe Pro Asp Ala Leu Lys Pro Gly Cys Tyr Trp Arg Phe
180 185 190
Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser Phe Arg Gln Val
195 200 205
Gln Cys Pro Ala Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg Asn Asp
210 215 220
Asp Gly Asn Phe Pro Ala Val Gln Ile Pro Ser Ser Ser Thr Ser Ser
225 230 235 240
Pro Val Gly Gln Pro Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Thr Ser Thr Thr
245 250 255
Ser Ser Pro Pro Val Gln Pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys Thr Ala Glu
260 265 270
Arg Trp Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys Thr Thr Cys
275 280 285
Val Ala Gly Ser Thr Cys Thr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr His Gln Cys
290 295 300
Leu
305
<210> 17
<211> 306
<212> PRT
<213> Humicola nigrescens
<400> 17
Pro Phe Met Met Val Ala Trp Trp Ser Leu Phe Leu Tyr Gly Leu Gln
1 5 10 15
Val Ala Ala Pro Ala Phe Ala Ala Asp Gly Arg Ser Thr Arg Tyr Trp
20 25 30
Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser Trp Pro Gly Lys Ala Leu Val Asn
35 40 45
Gln Pro Val Tyr Ala Arg Asn Ala Asn Phe Gln Arg Ile Thr Asp Pro
50 55 60
Asn Ala Lys Ser Gly Cys Asp Gly Gly Ser Ala Phe Ser Cys Ala Asp
65 70 75 80
Gln Thr Pro Trp Ala Val Ser Asp Asp Phe Ala Tyr Gly Phe Ala Ala
85 90 95
Thr Ala Leu Ala Gly Gln Ser Glu Ser Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr
100 105 110
Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Met Ala Val
115 120 125
Gln Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu
130 135 140
Asn Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Ser Pro Gln
145 150 155 160
Val Gly Gly Leu Ala Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Val Ser Ser Arg Ser
165 170 175
Glu Cys Asp Ser Phe Pro Ala Ala Leu Lys Pro Gly Cys Tyr Trp Arg
180 185 190
Tyr Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser Phe Arg Gln
195 200 205
Val Gln Cys Pro Ala Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg Asn
210 215 220
Asp Asp Gly Asn Phe Pro Ala Val Gln Ile Pro Ser Ser Ser Thr Ser
225 230 235 240
Ser Pro Val Asn Gln Pro Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Thr Ser Thr
245 250 255
Thr Ser Ser Pro Pro Val Gln Pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys Thr Ala
260 265 270
Glu Arg Trp Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys Thr Thr
275 280 285
Cys Val Ala Gly Ser Thr Cys Thr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr His Gln
290 295 300
Cys Leu
305
<210> 18
<211> 316
<212> PRT
<213> Staphylotrichum coccosporum
<400> 18
Met Arg Ser Ser Pro Val Leu Arg Thr Ala Leu Ala Ala Ala Leu Pro
1 5 10 15
Leu Ala Ala Leu Ala Ala Asp Gly Lys Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Ser Trp Pro Gly Lys Ala Ser Val Asn Gln Pro
35 40 45
Val Phe Ala Cys Ser Ala Asn Phe Gln Arg Ile Ser Asp Pro Asn Val
50 55 60
Lys Ser Gly Cys Asp Gly Gly Ser Ala Tyr Ala Cys Ala Asp Gln Thr
65 70 75 80
Pro Trp Ala Val Asn Asp Asn Phe Ser Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Ser
85 90 95
Ile Ser Gly Gly Asn Glu Ala Ser Trp Cys Cys Gly Cys Tyr Glu Leu
100 105 110
Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Thr Met Val Val Gln Ser
115 120 125
Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Thr Asn His Phe Asp Leu Ala Met
130 135 140
Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Ser Pro Gln Phe Gly
145 150 155 160
Gly Leu Ala Gly Asp Arg Tyr Gly Gly Val Ser Ser Arg Ser Gln Cys
165 170 175
Asp Ser Phe Pro Ala Ala Leu Lys Pro Gly Cys Tyr Trp Arg Phe Asp
180 185 190
Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Thr Phe Thr Phe Arg Gln Val Gln
195 200 205
Cys Pro Ser Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg Asn Asp Asp
210 215 220
Gly Asn Phe Pro Val Phe Thr Pro Pro Ser Gly Gly Gln Ser Ser Ser
225 230 235 240
Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ala Lys Pro Thr Ser Thr Ser Thr Ser Thr
245 250 255
Thr Ser Thr Lys Ala Thr Ser Thr Thr Ser Thr Ala Ser Ser Gln Thr
260 265 270
Ser Ser Ser Thr Gly Gly Gly Cys Ala Ala Gln Arg Trp Ala Gln Cys
275 280 285
Gly Gly Ile Gly Phe Ser Gly Cys Thr Thr Cys Val Ser Gly Thr Thr
290 295 300
Cys Asn Lys Gln Asn Asp Trp Tyr Ser Gln Cys Leu
305 310 315
<210> 19
<211> 235
<212> PRT
<213> Melanocarpus albomyces
<400> 19
Met Arg Ser Thr Pro Val Leu Arg Ala Leu Leu Ala Ala Ala Leu Pro
1 5 10 15
Leu Gly Ala Leu Ala Ala Asn Gly Gln Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Arg Gly Lys Gly Pro Val Asn Gln Pro
35 40 45
Val Tyr Ser Cys Asp Ala Asn Phe Gln Arg Ile His Asp Phe Asp Ala
50 55 60
Val Ser Gly Cys Glu Gly Gly Pro Ala Phe Ser Cys Ala Asp His Ser
65 70 75 80
Pro Trp Ala Ile Asn Asp Asn Leu Ser Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Ala
85 90 95
Leu Ser Gly Gln Thr Glu Glu Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala Leu
100 105 110
Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Thr Met Val Val Gln Ser
115 120 125
Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu Asn Ile
130 135 140
Pro Gly Gly Gly Val Gly Leu Phe Asp Gly Cys Thr Pro Gln Phe Gly
145 150 155 160
Gly Leu Pro Gly Ala Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Gln Glu Cys
165 170 175
Asp Ser Phe Pro Glu Pro Leu Lys Pro Gly Cys Gln Trp Arg Phe Asp
180 185 190
Trp Phe Gln Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Thr Phe Glu Arg Val Gln
195 200 205
Cys Pro Glu Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg His Asp Asp
210 215 220
Gly Gly Phe Ala Val Phe Lys Ala Pro Ser Ala
225 230 235
<210> 20
<211> 302
<212> PRT
<213> Podospora anserina
<400> 20
Met Arg Ser Ser Thr Val Leu Gln Thr Ser Leu Leu Ala Val Leu Pro
1 5 10 15
Leu Ala Val Gln Ala Gln Gly Ala Ser Gly Ser Gly Lys Ser Thr Arg
20 25 30
Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp Pro Gly Lys Ala Ala
35 40 45
Val Asn Arg Pro Val Phe Ala Cys Asp Ala Asn Phe Gln Arg Ile Ser
50 55 60
Asp Ser Gly Val Ala Ser Gly Cys Asn Gly Gly Ser Ala Tyr Ser Cys
65 70 75 80
Ala Asp His Ser Ala Trp Ala Ile Asn Asp Asn Leu Ser Tyr Gly Phe
85 90 95
Ala Ala Thr Ala Leu Ser Gly Gly Ser Glu Ala Ser Trp Cys Cys Ala
100 105 110
Cys Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Asp Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Met
115 120 125
Val Val Gln Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe
130 135 140
Asp Leu Asn Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Leu Phe Asp Gly Cys Lys
145 150 155 160
Pro Gln Phe Gly Gly Leu Pro Gly Ala Thr Tyr Gly Gly Ile Ser Asp
165 170 175
Arg Ser Gln Cys Ala Ser Phe Pro Asp Ala Leu Lys Pro Gly Cys Asn
180 185 190
Trp Arg Phe Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Thr Phe
195 200 205
Arg Gln Val Gln Cys Pro Ser Glu Leu Thr Ala Arg Ser Gly Cys Lys
210 215 220
Arg Asp Asp Asp Ser Arg Phe Pro Val Phe Ser Pro Pro Gly Gly Gly
225 230 235 240
Ser Gln Pro Gln Pro Gln Pro Thr Ser Ser Ala Ala Gln Asn Pro Asn
245 250 255
Pro Thr Pro Ser Ala Ala Pro Gly Gly Cys Arg Ala Ala Lys Tyr Ala
260 265 270
Gln Cys Gly Gly Gln Gly Phe Thr Gly Cys Thr Thr Cys Glu Ala Gly
275 280 285
Ser Thr Cys Thr Ala Ser Asn Gln Trp Tyr Ser Gln Cys Leu
290 295 300
<210> 21
<211> 315
<212> PRT
<213> Acremonium thermophilum
<400> 21
Met Arg Ser Ser Pro Phe Leu Arg Ala Ala Leu Ala Ala Ala Leu Pro
1 5 10 15
Leu Ser Ala His Ala Leu Asp Gly Lys Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Ala Gly Lys Ala Ser Val Asn Gln Pro
35 40 45
Val Phe Ser Cys Ser Ala Asp Trp Gln Arg Ile Ser Asp Phe Asn Ala
50 55 60
Lys Ser Gly Cys Asp Gly Gly Ser Ala Tyr Ser Cys Ala Asp Gln Thr
65 70 75 80
Pro Trp Ala Val Asn Asp Asn Phe Ser Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Ala
85 90 95
Ile Ala Gly Gly Ser Glu Ser Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala Leu
100 105 110
Thr Phe Asn Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Thr Met Val Val Gln Ser
115 120 125
Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn Gln Phe Asp Leu Ala Ile
130 135 140
Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Ala Ser Gln Phe Gly
145 150 155 160
Gly Leu Pro Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Ile Ser Asp Arg Ser Gln Cys
165 170 175
Ser Ser Phe Pro Ala Pro Leu Gln Pro Gly Cys Gln Trp Arg Phe Asp
180 185 190
Trp Phe Gln Asn Ala Asp Asn Pro Thr Phe Thr Phe Gln Arg Val Gln
195 200 205
Cys Pro Ser Glu Leu Thr Ser Arg Thr Gly Cys Lys Arg Asp Asp Asp
210 215 220
Ala Ser Tyr Pro Val Phe Asn Pro Pro Ser Val Pro Gly Leu Asp Gly
225 230 235 240
Ser Asn Pro Gly Asn Pro Thr Thr Thr Val Val Pro Pro Ala Ser Thr
245 250 255
Ser Thr Ser Arg Pro Thr Ser Ser Thr Ser Ser Pro Val Ser Thr Pro
260 265 270
Thr Gly Gln Pro Gly Gly Cys Thr Thr Gln Lys Trp Gly Gln Cys Gly
275 280 285
Gly Ile Gly Tyr Thr Gly Cys Thr Asn Cys Val Ala Gly Thr Thr Cys
290 295 300
Thr Gln Leu Asn Pro Trp Tyr Ser Gln Cys Leu
305 310 315
<210> 22
<211> 299
<212> PRT
<213> Thielavia terrestris
<400> 22
Met Arg Ser Thr Pro Val Leu Arg Thr Thr Leu Ala Ala Ala Leu Pro
1 5 10 15
Leu Val Ala Ser Ala Ala Ser Gly Ser Gly Gln Ser Thr Arg Tyr Trp
20 25 30
Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp Pro Gly Lys Ala Ala Val Ser
35 40 45
Gln Pro Val Tyr Ala Cys Asp Ala Asn Phe Gln Arg Leu Ser Asp Phe
50 55 60
Asn Val Gln Ser Gly Cys Asn Gly Gly Ser Ala Tyr Ser Cys Ala Asp
65 70 75 80
Gln Thr Pro Trp Ala Val Asn Asp Asn Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala
85 90 95
Thr Ser Ile Ala Gly Gly Ser Glu Ser Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr
100 105 110
Ala Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Thr Met Val Val
115 120 125
Gln Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn Gln Phe Asp Ile
130 135 140
Ala Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Ser Ser Gln
145 150 155 160
Phe Gly Gly Leu Pro Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Asp
165 170 175
Gln Cys Asp Ser Phe Pro Ala Pro Leu Lys Pro Gly Cys Gln Trp Arg
180 185 190
Phe Asp Trp Phe Gln Asn Ala Asp Asn Pro Thr Phe Thr Phe Gln Gln
195 200 205
Val Gln Cys Pro Ala Glu Ile Val Ala Arg Ser Gly Cys Lys Arg Asn
210 215 220
Asp Asp Ser Ser Phe Pro Val Phe Thr Pro Pro Ser Gly Gly Asn Gly
225 230 235 240
Gly Thr Gly Thr Pro Thr Ser Thr Ala Pro Gly Ser Gly Gln Thr Ser
245 250 255
Pro Gly Gly Gly Ser Gly Cys Thr Ser Gln Lys Trp Ala Gln Cys Gly
260 265 270
Gly Ile Gly Phe Ser Gly Cys Thr Thr Cys Val Ser Gly Thr Thr Cys
275 280 285
Gln Lys Leu Asn Asp Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu
290 295
<210> 23
<211> 307
<212> PRT
<213> Trichothecium roseum
<400> 23
Pro Phe Met Met Val Ala Trp Trp Ser Leu Phe Leu Tyr Gly Leu Gln
1 5 10 15
Val Ala Ala Pro Ala Phe Ala Ala Asp Gly Arg Ser Thr Arg Tyr Trp
20 25 30
Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser Trp Pro Asp Lys Ala Pro Val Gly
35 40 45
Ser Pro Val Gly Thr Cys Asp Ala Gly Asn Ser Pro Leu Gly Asp Pro
50 55 60
Leu Ala Lys Ser Gly Cys Glu Gly Gly Pro Ser Tyr Thr Cys Ala Asn
65 70 75 80
Tyr Gln Pro Trp Ala Val Asn Asp Gln Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala
85 90 95
Thr Ala Ile Asn Gly Gly Thr Glu Asp Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr
100 105 110
Lys Leu Thr Phe Thr Asp Gly Pro Ala Ser Gly Lys Thr Met Ile Val
115 120 125
Gln Ser Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Ser Asp Asn His Phe Asp Leu
130 135 140
Leu Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Ser Gln
145 150 155 160
Tyr Gly Gln Ala Leu Pro Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Val Ser Ser Arg
165 170 175
Ala Glu Cys Asp Gln Met Pro Glu Ala Ile Lys Ala Gly Cys Gln Trp
180 185 190
Arg Tyr Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser Phe Arg
195 200 205
Gln Val Gln Cys Pro Ala Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg
210 215 220
Asn Asp Asp Gly Asn Phe Pro Ala Val Gln Ile Pro Ser Ser Ser Thr
225 230 235 240
Ser Ser Pro Val Asn Gln Pro Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Thr Ser
245 250 255
Thr Thr Ser Ser Pro Pro Val Gln Pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys Thr
260 265 270
Ala Glu Arg Trp Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys Thr
275 280 285
Thr Cys Val Ala Gly Ser Thr Cys Thr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr His
290 295 300
Gln Cys Leu
305
<210> 24
<211> 297
<212> PRT
<213> Acremonium thermophilum
<400> 24
Met Arg Ser Ser Pro Phe Leu Arg Ala Ala Leu Ala Ala Ala Leu Pro
1 5 10 15
Leu Ser Ala His Ala Leu Asp Gly Lys Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Pro Gly Lys Ala Ser Val Asn Gln Pro
35 40 45
Val Phe Ser Cys Ser Ala Asp Trp Gln Arg Ile Ser Asp Phe Asn Ala
50 55 60
Lys Ser Gly Cys Asp Gly Gly Ser Ala Tyr Ser Cys Ala Asp Gln Thr
65 70 75 80
Pro Trp Ala Val Asn Asp Asn Phe Ser Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Ala
85 90 95
Ile Ala Gly Gly Ser Glu Ser Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala Leu
100 105 110
Thr Phe Asn Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Thr Met Val Val Gln Ser
115 120 125
Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn Gln Phe Asp Leu Ala Ile
130 135 140
Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Ala Ser Gln Phe Gly
145 150 155 160
Gly Leu Pro Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Ile Ser Asp Arg Ser Gln Cys
165 170 175
Ser Ser Phe Pro Ala Pro Leu Gln Pro Gly Cys Gln Trp Arg Phe Asp
180 185 190
Trp Phe Gln Asn Ala Asp Asn Pro Thr Phe Thr Phe Gln Arg Val Gln
195 200 205
Cys Pro Ser Glu Leu Thr Ser Arg Thr Gly Cys Lys Arg Asp Asp Asp
210 215 220
Ala Ser Tyr Pro Val Phe Asn Pro Pro Ser Gly Gly Ser Pro Ser Thr
225 230 235 240
Thr Ser Thr Thr Thr Ser Ser Pro Ser Gly Pro Thr Gly Asn Pro Pro
245 250 255
Gly Gly Gly Gly Cys Thr Ala Gln Lys Trp Ala Gln Cys Gly Gly Thr
260 265 270
Gly Phe Thr Gly Cys Thr Thr Cys Val Ser Gly Thr Thr Cys Gln Val
275 280 285
Gln Asn Gln Trp Tyr Ser Gln Cys Leu
290 295
<210> 25
<211> 308
<212> PRT
<213> Fusarium anguioides
<400> 25
Pro Phe Met Met Val Ala Trp Trp Ser Leu Phe Leu Tyr Gly Leu Gln
1 5 10 15
Val Ala Ala Pro Ala Phe Ala Ala Asp Gly Arg Ser Thr Arg Tyr Trp
20 25 30
Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser Trp Gly Gly Lys Ala Ala Val Ser
35 40 45
Ala Pro Ala Leu Thr Cys Asp Lys Lys Asp Asn Pro Ile Ser Asn Leu
50 55 60
Asn Ala Val Asn Gly Cys Glu Gly Gly Gly Ser Ala Phe Ala Cys Thr
65 70 75 80
Asn Tyr Ser Pro Trp Ala Val Asn Asp Asn Leu Ala Tyr Gly Phe Ala
85 90 95
Ala Thr Lys Leu Ala Gly Gly Ser Glu Gly Ser Trp Cys Cys Ala Cys
100 105 110
Tyr Ala Leu Thr Phe Thr Thr Gly Pro Val Lys Gly Lys Thr Met Val
115 120 125
Val Gln Ser Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asp Asn His Phe Asp
130 135 140
Leu Met Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Ser
145 150 155 160
Gln Phe Gly Lys Ala Leu Gly Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Ile Ser Ser
165 170 175
Arg Ser Glu Cys Asp Ser Phe Pro Glu Thr Leu Lys Asp Gly Cys His
180 185 190
Trp Arg Phe Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser Phe
195 200 205
Arg Gln Val Gln Cys Pro Ala Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg
210 215 220
Arg Asn Asp Asp Gly Asn Phe Pro Ala Val Gln Ile Pro Ser Ser Ser
225 230 235 240
Thr Ser Ser Pro Val Asn Gln Pro Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Thr
245 250 255
Ser Thr Thr Ser Ser Pro Pro Val Gln Pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys
260 265 270
Thr Ala Glu Arg Trp Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys
275 280 285
Thr Thr Cys Val Ala Gly Ser Thr Cys Thr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr
290 295 300
His Gln Cys Leu
305
<210> 26
<211> 304
<212> PRT
<213> Clonostachys rosea f. catenulata
<400> 26
Met Met Val Ala Trp Trp Ser Leu Phe Leu Tyr Gly Leu Gln Val Ala
1 5 10 15
Ala Pro Ala Phe Ala Ala Asp Gly Arg Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp Ser Gly Lys Ala Ser Val Ser Ser Pro
35 40 45
Val Arg Thr Cys Asp Ala Asn Asn Ser Pro Leu Ser Asp Val Asp Ala
50 55 60
Lys Ser Ala Cys Asp Gly Gly Val Ala Tyr Thr Cys Ser Asn Asn Ala
65 70 75 80
Pro Trp Ala Val Asn Asp Asn Leu Ser Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Ala
85 90 95
Ile Asn Gly Gly Ser Glu Ser Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Lys Leu
100 105 110
Thr Phe Thr Ser Gly Pro Ala Ser Gly Lys Val Met Val Val Gln Ser
115 120 125
Thr Asn Thr Gly Tyr Asp Leu Ser Asn Asn His Phe Asp Ile Leu Met
130 135 140
Pro Gly Gly Gly Val Gly Ala Phe Asp Gly Cys Ser Arg Gln Tyr Gly
145 150 155 160
Ser Ile Pro Gly Glu Arg Tyr Gly Gly Val Thr Ser Arg Asp Gln Cys
165 170 175
Asp Gln Met Pro Ser Ala Leu Lys Gln Gly Cys Tyr Trp Arg Phe Asp
180 185 190
Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser Phe Arg Gln Val Gln
195 200 205
Cys Pro Ala Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg Asn Asp Asp
210 215 220
Gly Asn Phe Pro Ala Val Gln Ile Pro Ser Ser Ser Thr Ser Ser Pro
225 230 235 240
Val Asn Gln Pro Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser
245 250 255
Ser Pro Pro Val Gln Pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys Thr Ala Glu Arg
260 265 270
Trp Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys Thr Thr Cys Val
275 280 285
Ala Gly Ser Thr Cys Thr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr His Gln Cys Leu
290 295 300
<210> 27
<211> 293
<212> PRT
<213> Neurospora crassa
<400> 27
Met Arg Ser Ser Thr Ile Leu Gln Thr Gly Leu Val Ala Ala Leu Pro
1 5 10 15
Phe Ala Val Gln Ala Ala Ser Gly Ser Gly Gln Ser Thr Arg Tyr Trp
20 25 30
Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser Trp Ser Gly Lys Ala Pro Val Asn
35 40 45
Arg Pro Val Leu Ala Cys Asp Ala Asn Asn Asn Pro Leu Ser Asp Ala
50 55 60
Ser Val Lys Ser Gly Cys Asp Gly Gly Ser Ala Tyr Thr Cys Ala Asn
65 70 75 80
Asn Ser Pro Trp Ala Val Asn Asp Gln Leu Ser Tyr Gly Phe Ala Ala
85 90 95
Thr Lys Leu Ser Gly Gly Thr Glu Ser Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr
100 105 110
Ala Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Thr Leu Val Val
115 120 125
Gln Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Ile
130 135 140
Asn Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Leu Phe Asp Gly Cys Lys Arg Gln
145 150 155 160
Phe Gly Gly Leu Pro Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Ser
165 170 175
Gln Cys Asp Ser Phe Pro Ala Ala Leu Lys Pro Gly Cys Gln Trp Arg
180 185 190
Phe Asp Trp Phe Gln Asn Ala Asp Asn Pro Asn Phe Thr Phe Lys Gln
195 200 205
Val Gln Cys Pro Ser Glu Leu Thr Ser Arg Thr Gly Cys Lys Arg Asn
210 215 220
Asp Asp Ser Gln Phe Pro Val Phe Thr Pro Pro Ser Gly Gly Gly Ser
225 230 235 240
Asn Pro Ser Thr Pro Thr Thr Pro Pro Ser Ser Gly Gly Gly Ser Gly
245 250 255
Cys Thr Ala Asp Lys Tyr Ala Gln Cys Gly Gly Ser Gly Trp Ser Gly
260 265 270
Cys Thr Asn Cys Pro Ser Gly Ser Thr Cys Lys Thr Ile Asn Asp Tyr
275 280 285
Tyr His Gln Cys Ala
290
<210> 28
<211> 310
<212> PRT
<213> Volutella colletotrichoides
<400> 28
Met Arg Ser Ser Ala Val Leu Ile Gly Leu Val Ala Gly Val Ala Ala
1 5 10 15
Gln Ser Ser Gly Thr Gly Arg Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys
20 25 30
Pro Ser Cys Gly Trp Asp Glu Lys Ala Ser Val Ser Gln Pro Val Lys
35 40 45
Thr Cys Asp Arg Asn Asn Asn Pro Leu Ala Ser Thr Ala Arg Ser Gly
50 55 60
Cys Asp Ser Asn Gly Val Ala Tyr Thr Cys Asn Asp Asn Gln Pro Trp
65 70 75 80
Ala Val Asn Asp Asn Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Ala Phe Ser
85 90 95
Gly Gly Ser Glu Ala Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala Leu Gln Phe
100 105 110
Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Thr Met Val Val Gln Ser Thr Asn
115 120 125
Thr Gly Gly Asp Leu Ser Gly Asn His Phe Asp Ile Leu Met Pro Gly
130 135 140
Gly Gly Leu Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Pro Gln Trp Gly Val Ser
145 150 155 160
Phe Pro Gly Asn Arg Tyr Gly Gly Thr Thr Ser Arg Ser Gln Cys Ser
165 170 175
Gln Ile Pro Ser Ala Leu Gln Pro Gly Cys Asn Trp Arg Tyr Asp Trp
180 185 190
Phe Asn Asp Ala Asp Asn Pro Asp Val Ser Trp Arg Arg Val Gln Cys
195 200 205
Pro Ala Ala Leu Thr Asp Arg Thr Gly Cys Arg Arg Ser Asp Asp Gly
210 215 220
Asn Tyr Pro Val Phe Gln Pro Gly Pro Pro Pro Ala Thr Thr Ile Arg
225 230 235 240
Thr Ser Thr Thr Ile Thr Ala Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser
245 250 255
Ser Thr Thr Ala Gly Ser Pro Pro Val Pro Thr Gly Gly Gly Ser Gly
260 265 270
Pro Thr Ser Pro Val Trp Gly Gln Cys Gly Gly Gln Gly Trp Ser Gly
275 280 285
Pro Thr Arg Cys Val Ala Gly Ser Thr Cys Ser Val Val Asn Pro Trp
290 295 300
Tyr Ser Gln Cys Phe Pro
305 310
<210> 29
<211> 355
<212> PRT
<213> Gibberella zeae
<400> 29
Met Arg Ser Phe Ala Leu Leu Ala Leu Phe Gly Pro Leu Ala Val Ser
1 5 10 15
Ala Ala Ser Gly Ser Gly His Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys
20 25 30
Pro Ser Cys Ser Trp Ser Gly Lys Ala Lys Val Ser Ala Pro Ala Leu
35 40 45
Thr Cys Asp Lys Lys Asp Asn Pro Ile Thr Asn Leu Asn Ala Val Asn
50 55 60
Gly Cys Glu Ser Gly Gly Ser Ala Phe Ala Cys Thr Asn Tyr Ser Pro
65 70 75 80
Trp Ala Val Asn Asp Asp Leu Ala Tyr Gly Phe Thr Ala Thr Lys Leu
85 90 95
Ala Gly Gly Thr Glu Ala Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala Leu Thr
100 105 110
Phe Thr Thr Gly Pro Val Lys Gly Lys Lys Met Ile Val Gln Ser Thr
115 120 125
Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asp Asn His Phe Asp Leu Met Met Pro
130 135 140
Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Ser Glu Phe Gly Lys
145 150 155 160
Pro Leu Gly Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Ser Gln Cys
165 170 175
Asp Ser Phe Pro Glu Leu Leu Lys Asp Gly Cys His Trp Arg Phe Asp
180 185 190
Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Asp Phe Thr Phe Glu Gln Val Gln
195 200 205
Cys Pro Lys Glu Leu Leu Ala Ile Ser Gly Cys Lys Arg Asp Asp Asp
210 215 220
Ser Ser Phe Pro Ala Phe Lys Gly Asn Thr Thr Pro Ser Asn Ala Lys
225 230 235 240
Pro Ser Gly Glu Lys Ser Ala Ala Ala Ala Gln Pro Gln Lys Pro Ser
245 250 255
Thr Lys Ala Ala Thr Glu Pro Ile Ala Thr Lys Pro Ala Thr Val Lys
260 265 270
Pro Ala Pro Val Lys Pro Thr Lys Val Val Asn Lys Pro Lys Thr Ala
275 280 285
Ser Lys Val Gly Gly Thr Lys Thr Arg Gly Lys Cys Pro Ala Thr Lys
290 295 300
Pro Thr Lys Pro Ala Ala Pro Gln Lys Ser Ala Val Ala Ile Tyr His
305 310 315 320
Gln Cys Gly Gly Ser Lys Ser Ala Tyr Pro Asp Gly Ser Leu Ser Cys
325 330 335
Ala Ser Gly Ser Lys Cys Val Lys Met Asn Asp Tyr Tyr Ser Gln Cys
340 345 350
Val Pro Asn
355
<210> 30
<211> 376
<212> PRT
<213> Fusarium oxysporum
<400> 30
Met Arg Ser Tyr Thr Leu Leu Ala Leu Ala Gly Pro Leu Ala Val Ser
1 5 10 15
Ala Ala Ser Gly Ser Gly His Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys
20 25 30
Pro Ser Cys Ser Trp Ser Gly Lys Ala Ala Val Asn Ala Pro Ala Leu
35 40 45
Thr Cys Asp Lys Asn Asp Asn Pro Ile Ser Asn Thr Asn Ala Val Asn
50 55 60
Gly Cys Glu Gly Gly Gly Ser Ala Tyr Ala Cys Thr Asn Tyr Ser Pro
65 70 75 80
Trp Ala Val Asn Asp Glu Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Lys Ile
85 90 95
Ser Gly Gly Ser Glu Ala Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala Leu Thr
100 105 110
Phe Thr Thr Gly Pro Val Lys Gly Lys Lys Met Ile Val Gln Ser Thr
115 120 125
Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asp Asn His Phe Asp Leu Met Met Pro
130 135 140
Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Ser Glu Phe Gly Lys
145 150 155 160
Ala Leu Gly Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Ser Glu Cys
165 170 175
Asp Ser Tyr Pro Glu Leu Leu Lys Asp Gly Cys His Trp Arg Phe Asp
180 185 190
Trp Phe Glu Asn Ala Asp Asn Pro Asp Phe Thr Phe Glu Gln Val Gln
195 200 205
Cys Pro Lys Ala Leu Leu Asp Ile Ser Gly Cys Lys Arg Asp Asp Asp
210 215 220
Ser Ser Phe Pro Ala Phe Lys Gly Asp Thr Ser Ala Ser Lys Pro Gln
225 230 235 240
Pro Ser Ser Ser Ala Lys Lys Thr Thr Ser Ala Ala Ala Ala Ala Gln
245 250 255
Pro Gln Lys Thr Lys Asp Ser Ala Pro Val Val Gln Lys Ser Ser Thr
260 265 270
Lys Pro Ala Ala Gln Pro Glu Pro Thr Lys Pro Ala Asp Lys Pro Gln
275 280 285
Thr Asp Lys Pro Val Ala Thr Lys Pro Ala Ala Thr Lys Pro Ala Gln
290 295 300
Pro Val Asn Lys Pro Lys Thr Thr Gln Lys Val Arg Gly Thr Lys Thr
305 310 315 320
Arg Gly Ser Cys Pro Ala Lys Thr Asp Ala Thr Ala Lys Ala Ser Val
325 330 335
Val Pro Ala Tyr Tyr Gln Cys Gly Gly Ser Lys Ser Ala Tyr Pro Asn
340 345 350
Gly Asn Leu Ala Cys Ala Thr Gly Ser Lys Cys Val Lys Gln Asn Glu
355 360 365
Tyr Tyr Ser Gln Cys Val Pro Asn
370 375
<210> 31
<211> 349
<212> PRT
<213> Acremonium sp.
<400> 31
Met Ile Ser Ala Trp Ile Leu Leu Gly Leu Val Gly Ala Val Pro Ser
1 5 10 15
Ser Val Met Ala Ala Ser Gly Lys Gly His Thr Thr Arg Tyr Trp Asp
20 25 30
Cys Cys Lys Thr Ser Cys Ala Trp Glu Gly Lys Ala Ser Val Ser Glu
35 40 45
Pro Val Leu Thr Cys Asn Lys Gln Asp Asn Pro Ile Val Asp Ala Asn
50 55 60
Ala Arg Ser Gly Cys Asp Gly Gly Gly Ala Phe Ala Cys Thr Asn Asn
65 70 75 80
Ser Pro Trp Ala Val Ser Glu Asp Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala Thr
85 90 95
Ala Leu Ser Gly Gly Thr Glu Gly Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala
100 105 110
Ile Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Met Val Val Gln
115 120 125
Ser Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Ser Asn Asn His Phe Asp Leu Met
130 135 140
Ile Pro Gly Gly Gly Leu Gly Ile Phe Asp Gly Cys Ser Ala Gln Phe
145 150 155 160
Gly Gln Leu Leu Pro Gly Glu Arg Tyr Gly Gly Val Ser Ser Arg Ser
165 170 175
Gln Cys Asp Gly Met Pro Glu Leu Leu Lys Asp Gly Cys Gln Trp Arg
180 185 190
Phe Asp Trp Phe Lys Asn Ser Asp Asn Pro Asp Ile Glu Phe Glu Gln
195 200 205
Val Gln Cys Pro Lys Glu Leu Ile Ala Val Ser Gly Cys Val Arg Asp
210 215 220
Asp Asp Ser Ser Phe Pro Val Phe Gln Gly Ser Gly Ser Gly Asp Val
225 230 235 240
Asn Pro Pro Pro Lys Pro Thr Thr Thr Thr Thr Ser Ser Lys Pro Lys
245 250 255
Thr Thr Ser Ala Pro Ser Thr Leu Ser Asn Pro Ser Ala Pro Gln Gln
260 265 270
Pro Gly Asn Thr Asp Arg Pro Ala Glu Thr Thr Thr Thr Lys Leu Pro
275 280 285
Ala Leu Pro Ala Thr Thr Ser Ser Pro Ala Val Ser Val Pro Ser Ser
290 295 300
Ser Ala Arg Val Pro Leu Trp Gly Gln Cys Asp Ser Glu Ala Ser Trp
305 310 315 320
Asp Ala Pro Lys Lys Cys Ala Lys Gly Thr Lys Cys Val Tyr Val Asn
325 330 335
Asp Trp Tyr Ser Gln Cys Gln Pro Lys Asn Ser Cys Ala
340 345
<210> 32
<211> 295
<212> PRT
<213> Acremonium sp.
<400> 32
Met Arg Ser Thr Ser Ile Leu Ile Gly Leu Val Ala Gly Val Ala Ala
1 5 10 15
Gln Ser Ser Gly Ser Gly His Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys
20 25 30
Pro Ser Cys Ala Trp Asp Glu Lys Ala Ala Val Ser Arg Pro Val Thr
35 40 45
Thr Cys Asp Arg Asn Asn Ser Pro Leu Ser Pro Gly Ala Val Ser Gly
50 55 60
Cys Asp Pro Asn Gly Val Ala Phe Thr Cys Asn Asp Asn Gln Pro Trp
65 70 75 80
Ala Val Asn Asn Asn Val Ala Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Ala Phe Pro
85 90 95
Gly Gly Asn Glu Ala Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala Leu Gln Phe
100 105 110
Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Thr Met Val Val Gln Ser Thr Asn
115 120 125
Thr Gly Gly Asp Leu Ser Gly Thr His Phe Asp Ile Gln Met Pro Gly
130 135 140
Gly Gly Leu Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Pro Gln Phe Gly Phe Thr
145 150 155 160
Phe Pro Gly Asn Arg Tyr Gly Gly Thr Thr Ser Arg Ser Gln Cys Ala
165 170 175
Glu Leu Pro Ser Val Leu Arg Asp Gly Cys His Trp Arg Tyr Asp Trp
180 185 190
Phe Asn Asp Ala Asp Asn Pro Asn Val Asn Trp Arg Arg Val Arg Cys
195 200 205
Pro Ala Ala Leu Thr Asn Arg Ser Gly Cys Val Arg Asn Asp Asp Asn
210 215 220
Ser Tyr Pro Val Phe Glu Pro Gly Thr Gly Thr Pro Pro Thr Pro Thr
225 230 235 240
Thr Thr Thr Thr Ser Ser Pro Pro Gln Pro Thr Asn Gly Gly Gly Gly
245 250 255
Gly Thr Ser Pro His Trp Gly Gln Cys Gly Gly Gln Gly Trp Ser Gly
260 265 270
Pro Thr Ala Cys Ala Gly Gly Ser Thr Cys Asn Leu Ile Asn Pro Trp
275 280 285
Tyr Ser Gln Cys Ile Pro Asn
290 295
<210> 33
<211> 225
<212> PRT
<213> Chrysosporium lucknowense
<400> 33
Met His Leu Ser Ala Thr Thr Gly Phe Leu Ala Leu Pro Ala Leu Ala
1 5 10 15
Leu Ala Gln Leu Ser Gly Ser Gly Gln Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp Pro Gly Lys Gly Pro Ser Ser Pro Val
35 40 45
Gln Ala Cys Asp Lys Asn Asp Asn Pro Leu Asn Asp Gly Gly Ser Thr
50 55 60
Arg Ser Gly Cys Asp Ala Gly Gly Ser Ala Tyr Met Cys Ser Ser Gln
65 70 75 80
Ser Pro Trp Ala Val Ser Asp Glu Leu Ser Tyr Gly Trp Ala Ala Val
85 90 95
Lys Leu Ala Gly Ser Ser Glu Ser Gln Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Glu
100 105 110
Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Met Ile Val Gln
115 120 125
Ala Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asp Asn His Phe Asp Leu Ala
130 135 140
Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Ala Cys Thr Asp Gln Tyr
145 150 155 160
Gly Ala Pro Pro Asn Gly Trp Gly Asp Arg Tyr Gly Gly Ile His Ser
165 170 175
Lys Glu Glu Cys Glu Ser Phe Pro Glu Ala Leu Lys Pro Gly Cys Asn
180 185 190
Trp Arg Phe Asp Trp Phe Gln Asn Ala Asp Asn Pro Ser Val Thr Phe
195 200 205
Gln Glu Val Ala Cys Pro Ser Glu Leu Thr Ser Lys Ser Gly Cys Ser
210 215 220
Arg
225
<210> 34
<211> 225
<212> PRT
<213> Thielavia heterothallica
<400> 34
Met His Leu Ser Ala Thr Thr Gly Phe Leu Ala Leu Pro Val Leu Ala
1 5 10 15
Leu Asp Gln Leu Ser Gly Ile Gly Gln Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp Pro Gly Lys Gly Pro Ser Ser Pro Val
35 40 45
Gln Ala Cys Asp Lys Asn Asp Asn Pro Leu Asn Asp Gly Gly Ser Thr
50 55 60
Arg Ser Gly Cys Asp Ala Gly Gly Ser Ala Tyr Met Cys Ser Ser Gln
65 70 75 80
Ser Pro Trp Ala Val Ser Asp Glu Leu Ser Tyr Gly Trp Ala Ala Val
85 90 95
Lys Leu Ala Gly Ser Ser Glu Ser Gln Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Glu
100 105 110
Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Met Ile Val Gln
115 120 125
Ala Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asp Asn His Phe Asp Leu Ala
130 135 140
Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Ala Cys Thr Asp Gln Tyr
145 150 155 160
Gly Ala Pro Pro Asn Gly Trp Gly Asp Arg Tyr Gly Gly Ile His Ser
165 170 175
Lys Glu Glu Cys Glu Ser Phe Pro Glu Ala Leu Lys Pro Gly Cys Asn
180 185 190
Trp Arg Phe Asp Trp Phe Gln Asn Ala Asp Asn Pro Ser Val Thr Phe
195 200 205
Gln Glu Val Ala Cys Pro Ser Glu Leu Thr Ser Lys Ser Gly Cys Ser
210 215 220
Arg
225
<210> 35
<211> 338
<212> PRT
<213> Mucor circinelloides
<400> 35
Met Lys Phe Thr Val Ala Ile Thr Ser Ile Ala Val Ala Leu Ala Leu
1 5 10 15
Ser Ser Ser Ala Glu Ala Ala Ser Cys Ser Ser Val Tyr Gly Gln Cys
20 25 30
Gly Gly Ile Gly Trp Ser Gly Pro Thr Cys Cys Glu Ser Gly Ser Thr
35 40 45
Cys Val Ala Gln Glu Gly Asn Lys Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Gly
50 55 60
Ser His Ser Asn Asn Ala Gly Asn Ala Ser Ser Thr Lys Lys Thr Ser
65 70 75 80
Thr Lys Thr Ser Thr Thr Thr Ala Lys Ala Thr Ala Thr Val Thr Thr
85 90 95
Lys Thr Val Thr Lys Thr Thr Thr Lys Thr Thr Thr Lys Thr Ser Thr
100 105 110
Thr Ala Ala Ala Ser Thr Ser Thr Ser Ser Ser Ala Gly Tyr Lys Val
115 120 125
Ile Ser Gly Gly Lys Ser Gly Ser Gly Ser Thr Thr Arg Tyr Trp Asp
130 135 140
Cys Cys Lys Ala Ser Cys Ser Trp Pro Gly Lys Ala Ser Val Thr Gly
145 150 155 160
Pro Val Asp Thr Cys Ala Ser Asn Gly Ile Ser Leu Leu Asp Ala Asn
165 170 175
Ala Gln Ser Gly Cys Asn Gly Gly Asn Gly Phe Met Cys Asn Asn Asn
180 185 190
Gln Pro Trp Ala Val Asn Asp Glu Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala Ala
195 200 205
Ser Ile Ala Gly Ser Asn Glu Ala Gly Trp Cys Cys Gly Cys Tyr Glu
210 215 220
Leu Thr Phe Thr Ser Gly Ala Ala Ser Gly Lys Lys Met Val Val Gln
225 230 235 240
Val Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu Gln
245 250 255
Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Ala Ala Gln Trp
260 265 270
Gly Ala Pro Asn Asp Gly Trp Gly Ala Arg Tyr Gly Gly Val Ser Ser
275 280 285
Val Ser Asp Cys Ala Ser Leu Pro Ser Ala Leu Gln Ala Gly Cys Lys
290 295 300
Trp Arg Phe Asn Trp Phe Lys Asn Ser Asp Asn Pro Thr Met Thr Phe
305 310 315 320
Lys Glu Val Thr Cys Pro Ala Glu Leu Thr Thr Arg Ser Gly Cys Glu
325 330 335
Arg Lys
<210> 36
<211> 220
<212> PRT
<213> Reticulitermes speratus hindgut protist
<400> 36
Met Leu Val Phe Val Phe Ser Leu Leu Ala Ser Val Leu Phe Gly Asp
1 5 10 15
Ser Gly Lys Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Gly Ser Cys Gly
20 25 30
Trp Glu Ala Lys Ala Asp Val Ser Lys Pro Ile Asp Thr Cys Ala Lys
35 40 45
Asp Gly Thr Thr Arg Val Ala Ser Asn Asp Thr Val Lys Ser Gly Cys
50 55 60
Asp Gly Gly Asp Gly Tyr Met Cys Tyr Asp Gln Thr Pro Trp Gly Val
65 70 75 80
Asn Asp Ser Tyr Ala Leu Gly Phe Ala Ala Ala Ala Ile Ser Gly Gly
85 90 95
Glu Lys Ala Ala Cys Cys Asn Cys Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly
100 105 110
Pro Val Asn Gly Lys Lys Met Thr Val Gln Val Thr Asn Thr Gly Gly
115 120 125
Asp Leu Gly Ser Asn Gln Phe Asp Leu Ala Ile Pro Gly Gly Gly Val
130 135 140
Gly Ile Tyr Asn Gly Cys Thr Ala Gln Ser Gly Ala Pro Ala Asp Gly
145 150 155 160
Trp Gly Ser Arg Tyr Gly Gly Val Ser Ser Arg Ser Glu Cys Ser Gln
165 170 175
Leu Pro Ser Gly Leu Gln Ala Gly Cys Gln Trp Arg Phe Asp Trp Phe
180 185 190
Gln Asn Ala Asp Asn Pro Ser Met Asn Phe Asn Val Val Ser Cys Pro
195 200 205
Ser Glu Leu Ile Ala Lys Thr Asn Cys Arg Arg Asn
210 215 220
<210> 37
<211> 224
<212> PRT
<213> Bursaphelenchus xylophilus
<400> 37
Met Lys Ser Leu Val Phe Leu Ala Val Leu Gly Leu Ala Val Ala Gln
1 5 10 15
Asp Thr Gly Lys Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys
20 25 30
Ser Trp Pro Gly Lys Ala Gln Leu Lys Gln Gly Pro Ser Lys Thr Cys
35 40 45
Asp Val Asn Asp Lys Pro Leu Ser Asp Gly Asn Ile Gln Ser Gly Cys
50 55 60
Asn Gly Gly Ser Ala Tyr Ala Cys Ser Thr Asp Gln Pro Trp Ala Val
65 70 75 80
Asp Asp Asn Leu Ser Tyr Gly Phe Ala Ala Val Lys Leu Ala Gly Lys
85 90 95
Gln Glu Ser Asp Trp Cys Cys Ser Cys Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Asp
100 105 110
Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Phe Val Val Gln Ala Thr Asn Thr Gly
115 120 125
Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu Met Ile Pro Gly Gly Gly
130 135 140
Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Gln Ala Gln Trp Lys Ser Pro Ala Glu
145 150 155 160
Gly Trp Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Val Ser Ser Lys Ala Asp Cys Ala
165 170 175
Thr Leu Pro Thr Ala Leu Gln Pro Gly Cys Asn Trp Arg Phe Asp Trp
180 185 190
Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Gly Met Thr Phe Lys Arg Val Lys Cys
195 200 205
Pro Ala Glu Ile Thr Ala Lys Ser Gly Cys Ile Arg Ser Asp Asp Ala
210 215 220
<210> 38
<211> 355
<212> PRT
<213> Botryotinia fuckeliana
<400> 38
Met Gln Val Pro Met Lys Ser Leu Val Ala Leu Leu Pro Phe Phe Leu
1 5 10 15
Gln Val Ser Ala Gln Ala Ser Gly Ser Gly Thr Thr Thr Arg Tyr Trp
20 25 30
Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp Ser Gly Lys Ala Thr Leu Glu
35 40 45
Ser Gly Ser Gly Pro Val Gly Thr Cys Asp Ile Asn Asp Ser Pro Leu
50 55 60
Ser Asp Pro Thr Ala Ile Ala Val Ser Gly Cys Asp Gly Gly Asn Ser
65 70 75 80
Tyr Met Cys Ser Asp Gln Ser Pro Trp Ala Val Ser Asp Asp Leu Ala
85 90 95
Tyr Gly Tyr Ala Ala Val Asn Ile Ala Gly Gly Ser Glu Ala Ser Trp
100 105 110
Cys Cys Ala Cys Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Ser Thr Ala Leu Ala Gly
115 120 125
Lys Lys Met Ile Val Gln Ala Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser
130 135 140
Asn Gln Phe Asp Leu Ala Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn
145 150 155 160
Gly Cys Thr Lys Glu Phe Gly Ala Pro Ser Ser Gly Trp Gly Ala Gln
165 170 175
Tyr Gly Gly Val Ala Ala Val Ser Ser Cys Ala Ala Phe Pro Glu Ala
180 185 190
Leu Lys Pro Gly Cys Ser Phe Arg Phe Asp Trp Phe Glu Gly Ala Asp
195 200 205
Asn Pro Thr Val Asn Phe Lys Gln Val Asn Cys Pro Ala Glu Leu Thr
210 215 220
Lys Ser Thr Gly Cys Lys Arg Ala Asp Asp Ser Ser Met Pro Ala Pro
225 230 235 240
Asp Ala Ser Gly Ser Ala Ser Ala Ser Pro Val Ala Ser Thr Ser Ala
245 250 255
Lys Thr Ser Ser Val Ala Pro Thr Ser Val Ser Ser Ser Ser Val Val
260 265 270
Val Ala Pro Ser Ser Ala Thr Ser Ser Pro Val Val Val Val Pro Thr
275 280 285
Ser Ala Ala Ser Ser Lys Ala Ser Ser Ala Ala Val Val Ser His Pro
290 295 300
Val Val Pro Ser Ser Glu Ala Ser Ser Ala Pro Ala Val Thr Ser His
305 310 315 320
Ser Ser Ala Thr Lys Ser Ala Lys Thr Ser Val Ala Ala Pro His Ser
325 330 335
Thr Ser Ala Ser Thr Gly Tyr Gly Ser Gly Asp Asp Asp Asp Thr Cys
340 345 350
Asp Ala Glu
355
<210> 39
<211> 251
<212> PRT
<213> Acremonium thermophilum
<400> 39
Met Arg Leu Pro Leu Pro Thr Leu Leu Ala Leu Leu Pro Tyr Tyr Leu
1 5 10 15
Glu Val Ser Ala Gln Gly Ala Ser Gly Thr Gly Thr Thr Thr Arg Tyr
20 25 30
Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp Pro Leu Lys Gly Asn Ser
35 40 45
Pro Ser Pro Val Gln Thr Cys Asp Lys Asn Asp Arg Pro Leu Asn Asp
50 55 60
Gly Gly Asn Thr Lys Ser Gly Cys Asp Asn Gly Gly Gly Ala Phe Met
65 70 75 80
Cys Ser Ser Gln Ser Pro Trp Ala Val Asn Glu Thr Thr Ser Tyr Gly
85 90 95
Trp Ala Ala Val Arg Ile Ala Gly Ser Thr Glu Ser Ala Trp Cys Cys
100 105 110
Ala Cys Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ser Gly Lys Lys
115 120 125
Leu Ile Val Gln Ala Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His
130 135 140
Phe Asp Leu Ala Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Gln Ser Asn Ala Cys
145 150 155 160
Thr Asn Gln Tyr Gly Ala Pro Pro Asn Gly Trp Gly Asp Arg Tyr Gly
165 170 175
Gly Val His Ser Arg Ser Asp Cys Asp Ser Phe Pro Ala Ala Leu Lys
180 185 190
Ala Gly Cys Tyr Trp Arg Phe Asp Trp Phe Gln Gly Ala Asp Asn Pro
195 200 205
Ser Val Ser Phe Lys Gln Val Ala Cys Pro Ala Ala Ile Thr Ala Lys
210 215 220
Ser Gly Cys Thr Arg Gln Asn Asp Ala Ile Asn Glu Thr Pro Thr Gly
225 230 235 240
Pro Ser Thr Val Pro Thr Tyr Thr Ala Ser Gly
245 250
<210> 40
<211> 229
<212> PRT
<213> Scopulariopsis brevicaulis
<400> 40
Met His Val Leu Pro Thr Leu Leu Ala Leu Thr Pro Leu Val Leu Pro
1 5 10 15
Ala Ala Ser Gln Ala Ser Gly Thr Gly Thr Thr Thr Arg Tyr Trp Asp
20 25 30
Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser Trp Pro Asp Lys Ala Pro Leu Ser Gln
35 40 45
Gly Pro Pro Met Thr Cys Asp Ile Asn Asp Asn Pro Leu Asp Asp Gly
50 55 60
Gly Leu Thr Glu Ser Gly Cys Glu Pro Gly Gly Gly Ala Tyr Met Cys
65 70 75 80
Ser Ser His Ser Pro Trp Ala Val Asp Asp Glu Leu Ala Tyr Gly Trp
85 90 95
Ala Ala Val Asn Ile Gly Gly Gln Thr Glu Ser Asp Trp Cys Cys Ala
100 105 110
Cys Tyr Glu Leu Glu Phe Thr Thr Gly Ala Val Ser Gly Lys Lys Met
115 120 125
Ile Val Gln Ala Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asn Asn His Phe
130 135 140
Asp Ile Ala Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Thr
145 150 155 160
Asp Gln Trp Gly Ser Pro Pro Asn Gly Trp Gly Asp Arg Tyr Gly Gly
165 170 175
Val His Thr Arg Ala Asp Cys Asp Ser Phe Pro Glu Ala Leu Lys Ala
180 185 190
Gly Cys Glu Trp Arg Phe Asp Trp Phe Gly Gly Thr Asp Asn Pro Asp
195 200 205
Val Ser Phe Arg Glu Val Glu Cys Pro Ala Glu Leu Val Gln Lys Ser
210 215 220
Gln Cys Gln Arg Ser
225
<210> 41
<211> 340
<212> PRT
<213> Syncephalastrum racemosum
<400> 41
Met Ile Leu His Arg Thr Glu Lys Asn Asn Asp Met Arg Leu Ser Phe
1 5 10 15
Ala Ala Ser Leu Leu Leu Ala Thr Val Gly Met Gln Leu Val Ser Ala
20 25 30
Ala Asp Cys Ser Asn Lys Ala Tyr Ser Gln Cys Gly Gly Gln Asn Trp
35 40 45
Ser Gly Glu Ser Cys Cys Val Ser Gly Tyr Glu Cys Lys Gln Leu Asn
50 55 60
Asp Tyr Tyr His Gln Cys Val Pro Gln Asn Ser Gly Ser Phe Ser Gly
65 70 75 80
Ser Ser Ser Ala Ala Ala Pro Ser His Met Ala Thr Ser Ser Ala Pro
85 90 95
Ser Ser Ser Lys Ala Pro Ser Ser Pro Ala Ser Ser Ser Lys Thr Pro
100 105 110
Ser Ser Pro Ala Ala Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Ser Gly Tyr Lys
115 120 125
Pro Ile Ser Gly Gly Ala Ser Gly Asp Gly Thr Thr Thr Arg Tyr Trp
130 135 140
Asp Cys Cys Lys Ala Ser Cys Ser Trp Pro Gly Lys Ala Pro Val Thr
145 150 155 160
Asn Pro Val Gly Thr Cys Ala Lys Asp Gly Val Lys Leu Val Asp Ala
165 170 175
Asn Val Gln Ser Gly Cys Asn Gly Gly Glu Gly Tyr Met Cys Asn Asp
180 185 190
Asn Gln Pro Trp Ala Ile Asp Asp Asn Leu Ser Tyr Gly Phe Ala Ala
195 200 205
Ala Ser Ile Ser Gly Lys Ser Glu Ser Asp Phe Cys Cys Ser Cys Tyr
210 215 220
Glu Leu Thr Phe Ser Ser Gly Glu Ile Glu Gly Lys Lys Met Val Val
225 230 235 240
Gln Val Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Ser Asn Asn His Phe Asp Leu
245 250 255
Gln Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Gln Thr Gln
260 265 270
Trp Asp Ala Pro Ser Asp Gly Trp Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Ile Ser
275 280 285
Ser Ala Ser Glu Cys Ser Gln Leu Pro Lys Gln Leu Gln Asp Gly Cys
290 295 300
Lys Trp Arg Phe Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Asn Val Ser
305 310 315 320
Phe Lys Gln Val Ser Cys Pro Ala Glu Leu Val Lys Lys Thr Gly Cys
325 330 335
Glu Arg Thr Ser
340
<210> 42
<211> 338
<212> PRT
<213> Rhizopus oryzae
<400> 42
Met Lys Phe Ile Thr Ile Ala Ser Ser Ala Leu Leu Ala Leu Ala Leu
1 5 10 15
Gly Thr Glu Met Ala Ser Ala Ala Glu Cys Ser Lys Leu Tyr Gly Gln
20 25 30
Cys Gly Gly Lys Asn Trp Asn Gly Pro Thr Cys Cys Glu Ser Gly Ser
35 40 45
Thr Cys Lys Val Ser Asn Asp Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Ser Gly
50 55 60
Ser Ser Gly Asn Lys Ser Ser Glu Ser Ala His Lys Lys Thr Thr Thr
65 70 75 80
Ala Ala His Lys Lys Thr Thr Thr Ala Ala His Lys Lys Thr Thr Thr
85 90 95
Ala Pro Ala Lys Lys Thr Thr Thr Val Ala Lys Ala Ser Thr Pro Ser
100 105 110
Asn Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Lys Tyr Ser Ala Val Ser Gly Gly
115 120 125
Ala Ser Gly Asn Gly Val Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Ala
130 135 140
Ser Cys Ser Trp Pro Gly Lys Ala Asn Val Ser Ser Pro Val Lys Ser
145 150 155 160
Cys Asn Lys Asp Gly Val Thr Ala Leu Ser Asp Ser Asn Ala Gln Ser
165 170 175
Gly Cys Asn Gly Gly Asn Ser Tyr Met Cys Asn Asp Asn Gln Pro Trp
180 185 190
Ala Val Asn Asp Asn Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala Ala Ala Ile Ser
195 200 205
Gly Gly Gly Glu Ser Arg Trp Cys Cys Ser Cys Phe Glu Leu Thr Phe
210 215 220
Thr Ser Thr Ser Val Ala Gly Lys Lys Met Val Val Gln Val Thr Asn
225 230 235 240
Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Ser Thr Gly Ala His Phe Asp Leu Gln
245 250 255
Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Ser Ser Gln Trp
260 265 270
Gly Ala Pro Asn Asp Gly Trp Gly Ser Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser
275 280 285
Ala Ser Asp Cys Ser Ser Leu Pro Ser Ala Leu Gln Ala Gly Cys Lys
290 295 300
Trp Arg Phe Asn Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Met Thr Tyr
305 310 315 320
Lys Glu Val Thr Cys Pro Lys Glu Ile Thr Ala Lys Thr Gly Cys Ser
325 330 335
Arg Lys
<210> 43
<211> 226
<212> PRT
<213> Crinipellis scabella
<400> 43
Met Val His Pro Asn Met Leu Lys Thr Leu Ala Pro Leu Ile Ile Leu
1 5 10 15
Ala Ala Ser Val Thr Ala Gln Thr Ala Gly Val Thr Thr Arg Tyr Trp
20 25 30
Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Ser Gly Lys Ala Ser Val Ser
35 40 45
Ala Pro Val Arg Thr Cys Asp Arg Asn Gly Asn Thr Leu Gly Pro Asp
50 55 60
Val Lys Ser Gly Cys Asp Ser Gly Gly Thr Ser Phe Thr Cys Ala Asn
65 70 75 80
Asn Gly Pro Phe Ala Ile Asp Asn Asn Thr Ala Tyr Gly Phe Ala Ala
85 90 95
Ala His Leu Ala Gly Ser Ser Glu Ala Ala Trp Cys Cys Gln Cys Tyr
100 105 110
Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Val Gly Lys Lys Leu Thr Val
115 120 125
Gln Val Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asn Asn His Phe Asp Leu
130 135 140
Met Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Leu Phe Thr Gln Gly Cys Pro Ala
145 150 155 160
Gln Phe Gly Ser Trp Asn Gly Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Val Ser Ser
165 170 175
Arg Asp Gln Cys Ser Gln Leu Pro Ala Ala Val Gln Ala Gly Cys Gln
180 185 190
Phe Arg Phe Asp Trp Met Gly Gly Ala Asp Asn Pro Asn Val Thr Phe
195 200 205
Arg Pro Val Thr Cys Pro Ala Gln Leu Thr Asn Ile Ser Gly Cys Val
210 215 220
Arg Lys
225
<210> 44
<211> 222
<212> PRT
<213> Macrophomina phaseolina
<400> 44
Met Phe Ser Pro Leu Trp Ala Leu Ser Ala Leu Leu Leu Phe Pro Ala
1 5 10 15
Thr Glu Ala Thr Ser Gly Val Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys
20 25 30
Pro Ser Cys Ala Trp Thr Gly Lys Ala Ser Val Ser Lys Pro Val Gly
35 40 45
Thr Cys Asp Ile Asn Asp Asn Ala Gln Thr Pro Ser Asp Leu Leu Lys
50 55 60
Ser Ser Cys Asp Gly Gly Ser Ala Tyr Tyr Cys Ser Asn Gln Gly Pro
65 70 75 80
Trp Ala Val Asn Asp Ser Leu Ser Tyr Gly Phe Ala Ala Ala Lys Leu
85 90 95
Ser Gly Lys Gln Glu Thr Asp Trp Cys Cys Gly Cys Tyr Lys Leu Thr
100 105 110
Phe Thr Ser Thr Ala Val Ser Gly Lys Gln Met Ile Val Gln Ile Thr
115 120 125
Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asn Asn His Phe Asp Ile Ala Met Pro
130 135 140
Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Ser Lys Gln Trp Asn Gly
145 150 155 160
Ile Asn Leu Gly Asn Gln Tyr Gly Gly Phe Thr Asp Arg Ser Gln Cys
165 170 175
Ala Thr Leu Pro Ser Lys Trp Gln Ala Ser Cys Asn Trp Arg Phe Asp
180 185 190
Trp Phe Glu Asn Ala Asp Asn Pro Thr Val Asp Trp Glu Pro Val Thr
195 200 205
Cys Pro Gln Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Ser Arg Thr
210 215 220
<210> 45
<211> 245
<212> PRT
<213> Podospora anserina
<400> 45
Met Gln Leu Ala Leu Thr Ile Leu Ala Phe Gly Gly Phe Ala Ser Ala
1 5 10 15
Gln Gly Ala Gln Gly Ala Gly Lys Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys
20 25 30
Lys Pro Ser Cys Ala Trp Pro Gly Lys Ser Thr Ala Ser Thr Pro Val
35 40 45
Leu Thr Cys Asp Arg Asn Asp Asn Pro Leu Asn Asp Arg Gly Ser Thr
50 55 60
Arg Ser Gly Cys Asp Ser Gly Gly Ser Ala Phe Met Cys Ser Asn Gln
65 70 75 80
Ser Pro Trp Ala Val Asn Glu Thr Val Ala Tyr Gly Trp Ala Ala Val
85 90 95
Asn Ile Ala Gly Ser Asn Glu Ala Ser Trp Cys Cys Ser Cys Tyr Glu
100 105 110
Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ser Gly Lys Lys Met Ile Val Gln
115 120 125
Ala Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asn Asn His Phe Asp Ile Ala
130 135 140
Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Ala Cys Thr Gln Gln Tyr
145 150 155 160
Gly Ala Pro Pro Asn Gly Trp Gly Glu Arg Tyr Gly Gly Val Gly Ser
165 170 175
Lys Ser Ala Cys Glu Ser Phe Pro Asp Lys Leu Lys Ala Gly Cys Asn
180 185 190
Trp Arg Phe Asp Trp Phe Met Gly Ala Asp Asn Pro Asp Val Arg Phe
195 200 205
Arg Gln Val Ala Cys Pro Ala Ala Ile Thr Ala Lys Ser Gln Cys Val
210 215 220
Arg Gln Arg Asp Val Ile Asp Gln Thr Pro Thr Gly Pro Ser Thr Val
225 230 235 240
Pro Thr Trp Thr Pro
245
<210> 46
<211> 366
<212> PRT
<213> Rhizopus oryzae
<400> 46
Met Lys Phe Ile Thr Ile Thr Ser Ser Ala Leu Leu Ala Leu Ala Leu
1 5 10 15
Gly Thr Glu Met Ala Ser Ala Ala Lys Cys Ser Lys Leu Tyr Gly Gln
20 25 30
Cys Gly Gly Lys Asp Trp Asn Gly Pro Thr Cys Cys Glu Ser Gly Ser
35 40 45
Thr Cys Lys Val Ser Asn Asp Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Ala Pro Glu
50 55 60
Ser Asn Gly Asn Lys Ser Ser Glu Cys Ser Lys Leu Tyr Gly Gln Cys
65 70 75 80
Gly Gly Lys Asp Trp Asn Gly Pro Thr Cys Cys Glu Ser Gly Ser Thr
85 90 95
Cys Lys Val Ser Asn Asp Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Ala Pro Glu Ser
100 105 110
Asn Gly Asn Lys Thr Ser Glu Ser Ala His Lys Thr Thr Thr Thr Thr
115 120 125
Ala Pro Ala Lys Glu Ile Thr Thr Thr Ala Lys Ala Ser Asn Ser Ser
130 135 140
Asn Ser Ser Gly Lys Tyr Ser Ile Val Ser Gly Gly Ala Ser Gly Asn
145 150 155 160
Gly Val Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Ala Ser Cys Ser Trp
165 170 175
Pro Gly Lys Ala Asn Val Ser Ser Pro Val Lys Ser Cys Asn Lys Asp
180 185 190
Gly Val Thr Ala Leu Ser Asp Ser Asn Val Gln Ser Gly Cys Asn Gly
195 200 205
Gly Asn Ser Tyr Met Cys Asn Asp Asn Gln Pro Trp Ala Val Asn Asp
210 215 220
Asn Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala Ala Ala Ile Ser Gly Gly Gly Glu
225 230 235 240
Ser Arg Trp Cys Cys Ser Cys Phe Glu Leu Thr Phe Thr Ser Thr Ser
245 250 255
Val Ala Gly Lys Lys Met Val Ile Gln Val Thr Asn Thr Gly Gly Asp
260 265 270
Leu Gly Ser Ser Thr Gly Ala His Phe Asp Leu Gln Met Pro Gly Gly
275 280 285
Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Ser Lys Gln Trp Gly Ala Pro Asn
290 295 300
Asp Gly Trp Gly Ser Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Ala Ser Asp Cys
305 310 315 320
Ser Ser Leu Pro Ser Ala Leu Gln Ala Gly Cys Lys Trp Arg Phe Asn
325 330 335
Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Met Thr Tyr Lys Glu Val Thr
340 345 350
Cys Pro Lys Glu Ile Thr Ala Lys Thr Gly Cys Ser Arg Lys
355 360 365
<210> 47
<211> 286
<212> PRT
<213> Bursaphelenchus xylophilus
<400> 47
Met Ala Lys Leu Phe Val Ser Val Leu Val Val Ala Leu Leu Leu Glu
1 5 10 15
Val Val Val Glu Cys Lys Ser Ser Lys Thr Lys Lys Thr Lys Ala Thr
20 25 30
Thr Val Lys Ser Thr Lys Ala Thr Ala Ala Pro Thr Lys Ala Thr Ala
35 40 45
Ala Pro Thr Lys Ala Thr Thr Ala Ala Ser Ser Ser Ala Gly Gly Asn
50 55 60
Ser Ala Asp Tyr Ser Tyr Ser Tyr Val Ser Gly Gly Thr Ser Gly Thr
65 70 75 80
Gly Val Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Ser Ser Cys Ala Trp
85 90 95
Pro Gly Lys Ala Ser Leu Lys Ser Gly Pro Ile Gln Thr Cys Asp Val
100 105 110
His Asp Gln Pro Leu Asn Asp Gly Gly Asn Thr Gln Ser Gly Cys Asn
115 120 125
Gly Gly Ser Ala Tyr Ser Cys Ser Thr Glu Gln Pro Tyr Ala Val Asn
130 135 140
Asp Thr Leu Ser Phe Gly Phe Ala Ala Val Lys Leu Ala Gly Gly Ser
145 150 155 160
Glu Ser Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly
165 170 175
Ser Val Asn Gly Lys Lys Phe Val Ile Gln Ala Thr Asn Thr Gly Gly
180 185 190
Asp Leu Gly Asp Asn His Phe Asp Leu Ala Ile Pro Gly Gly Gly Val
195 200 205
Gly Ile Phe Asn Gly Cys Thr Ala Gln Trp Gly Ala Pro Ser Ser Gly
210 215 220
Trp Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Val Ser Ser Arg Ser Asp Cys Ser Gln
225 230 235 240
Leu Pro Ala Lys Leu Gln Pro Gly Cys Asp Trp Arg Phe Asp Trp Phe
245 250 255
Gly Asn Ser Asp Asn Pro Gly Val Thr Phe Lys Gln Val Thr Cys Pro
260 265 270
Lys Thr Leu Thr Asp Lys Ser Lys Cys Ile Arg Ala Asp Asp
275 280 285
<210> 48
<211> 359
<212> PRT
<213> Bursaphelenchus xylophilus
<400> 48
Met Asn Lys Leu Leu Val Ser Val Leu Val Leu Ala Leu Leu Phe Glu
1 5 10 15
Asn Val Val Glu Gly Lys Thr Cys Gly Pro Leu Thr Thr Ala Ala Gly
20 25 30
Ala Thr Gln Thr Ala Pro Pro Ala Ser Ala Ala Ser Thr Thr Lys Gly
35 40 45
Gln Thr Ala Ala Ser Gly Ser Pro Ala Thr Thr Ala Ser Ala Ala Pro
50 55 60
Thr Lys Ala Ser Ala Ala Pro Ser Thr Ala Ser Ala Ala Pro Ser Lys
65 70 75 80
Ala Ser Ala Ala Pro Ser Thr Ala Ser Ala Ala Pro Ser Thr Ala Ser
85 90 95
Ala Ala Pro Ser Lys Ala Ser Ala Ala Pro Ser Thr Ala Ser Ser Thr
100 105 110
Ala Ser Ser Thr Thr Pro Thr Thr Thr Thr Lys Ala Ser Ser Thr Ala
115 120 125
Ala Ala Thr Thr Gln Ala Ser Gly Asn Ser Ala Asp Tyr Ser Tyr Ser
130 135 140
Tyr Ile Ser Gly Gly Thr Ser Gly Thr Gly Val Thr Thr Arg Tyr Trp
145 150 155 160
Asp Cys Cys Lys Ser Ser Cys Ala Trp Pro Gly Lys Ala Thr Leu Lys
165 170 175
Ser Gly Pro Ile Gln Thr Cys Asp Val His Asp Gln Pro Leu Asn Asp
180 185 190
Gly Gly Asn Thr Gln Ser Gly Cys Asn Gly Gly Ser Ala Tyr Ser Cys
195 200 205
Ser Thr Glu Gln Pro Tyr Ala Val Asn Asp Thr Leu Ser Phe Gly Phe
210 215 220
Ala Ala Val Lys Leu Ala Gly Gly Ser Glu Ser Thr Trp Cys Cys Ala
225 230 235 240
Cys Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly Ser Val Ala Gly Lys Lys Phe
245 250 255
Val Ile Gln Ala Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asp Asn His Phe
260 265 270
Asp Leu Ala Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Thr
275 280 285
Ala Gln Trp Gly Ala Pro Ser Ser Gly Trp Gly Ser Gln Tyr Gly Gly
290 295 300
Val Ser Ser Arg Ser Asp Cys Ser Gln Leu Pro Ala Thr Leu Gln Pro
305 310 315 320
Gly Cys Asp Trp Arg Phe Asp Trp Phe Gly Asn Ser Asp Asn Pro Gly
325 330 335
Val Thr Phe Lys Gln Val Thr Cys Pro Lys Thr Ile Thr Asp Lys Ser
340 345 350
Lys Cys Ile Arg Ala Asp Asp
355
<210> 49
<211> 227
<212> PRT
<213> Humicola grisea var. thermoidea
<400> 49
Met Gln Leu Pro Leu Thr Thr Leu Leu Thr Leu Leu Pro Ala Leu Ala
1 5 10 15
Ala Ala Gln Ser Gly Ser Gly Arg Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys
20 25 30
Lys Pro Ser Cys Ala Trp Pro Gly Lys Gly Pro Ala Pro Val Arg Thr
35 40 45
Cys Asp Arg Trp Asp Asn Pro Leu Phe Asp Gly Gly Asn Thr Arg Ser
50 55 60
Gly Cys Asp Ala Gly Gly Gly Ala Tyr Met Cys Ser Asp Gln Ser Pro
65 70 75 80
Trp Ala Val Ser Asp Asp Leu Ala Tyr Gly Trp Ala Ala Val Asn Ile
85 90 95
Ala Gly Ser Asn Glu Arg Gln Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Glu Leu Thr
100 105 110
Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Arg Met Ile Val Gln Ala Ser
115 120 125
Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asn Asn His Phe Asp Ile Ala Met Pro
130 135 140
Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Ala Cys Thr Asp Gln Tyr Gly Ala
145 150 155 160
Pro Pro Asn Gly Trp Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Gln Arg His
165 170 175
Glu Cys Asp Ala Phe Pro Glu Lys Leu Lys Pro Gly Cys Tyr Trp Arg
180 185 190
Phe Asp Trp Cys Val Ser Leu Phe Pro Pro Leu Ser Leu Ser Leu Pro
195 200 205
Pro Gly Thr Gly Gln Thr Met Gly Arg Ser Cys Val Phe Phe Pro Leu
210 215 220
Ser Ala Asn
225
<210> 50
<211> 346
<212> PRT
<213> Phycomyces nitens
<400> 50
Met Lys Phe Ser Ile Ile Ala Ser Ala Leu Leu Leu Ala Ala Ser Ser
1 5 10 15
Thr Tyr Ala Ala Glu Cys Ser Gln Gly Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Lys
20 25 30
Met Trp Thr Gly Pro Thr Cys Cys Thr Ser Gly Phe Thr Cys Val Gly
35 40 45
Ala Glu Asn Asn Glu Trp Tyr Ser Gln Cys Ile Pro Asn Asp Gln Val
50 55 60
Gln Gly Asn Pro Lys Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Lys Ala Ala Thr
65 70 75 80
Thr Thr Lys Ala Pro Val Thr Thr Thr Lys Ala Thr Thr Thr Thr Thr
85 90 95
Thr Lys Ala Pro Val Thr Thr Thr Lys Ala Thr Thr Thr Thr Thr Thr
100 105 110
Lys Thr Thr Thr Lys Thr Thr Thr Thr Lys Ala Ala Thr Thr Thr Ser
115 120 125
Ser Ser Asn Thr Gly Tyr Ser Pro Ile Ser Gly Gly Phe Ser Gly Asn
130 135 140
Gly Arg Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp
145 150 155 160
Asp Gly Lys Ala Ser Val Thr Lys Pro Val Leu Thr Cys Ala Lys Asp
165 170 175
Gly Val Ser Arg Leu Gly Ser Asp Val Gln Ser Gly Cys Val Gly Gly
180 185 190
Gln Ala Tyr Met Cys Asn Asp Asn Gln Pro Trp Val Val Asn Asp Asp
195 200 205
Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala Ala Ser Leu Gly Ser Ala Gly Ala Ser
210 215 220
Ala Phe Cys Cys Gly Cys Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Asn Thr Ala Val
225 230 235 240
Ala Gly Lys Lys Phe Val Val Gln Val Thr Asn Thr Gly Asp Asp Leu
245 250 255
Ser Thr Asn His Phe Asp Leu Gln Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Tyr
260 265 270
Phe Asn Gly Cys Gln Ser Gln Trp Asn Thr Asn Thr Asp Gly Trp Gly
275 280 285
Ala Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Ile Ser Glu Cys Asp Lys Leu Pro
290 295 300
Thr Gln Leu Gln Ala Gly Cys Lys Trp Arg Phe Gly Trp Phe Lys Asn
305 310 315 320
Ala Asp Asn Pro Glu Val Thr Phe Lys Ala Val Thr Cys Pro Ala Glu
325 330 335
Ile Ile Ala Lys Thr Gly Cys Glu Arg Lys
340 345
<210> 51
<211> 360
<212> PRT
<213> Rhizopus oryzae
<400> 51
Met Lys Phe Leu Thr Ile Ala Ser Ser Ala Ile Leu Ala Leu Ala Val
1 5 10 15
Gly Thr Glu Met Ala His Ala Ala Glu Cys Ser Lys Ala Tyr Tyr Gln
20 25 30
Cys Gly Gly Lys Asn Trp Asp Gly Pro Thr Cys Cys Glu Ser Gly Ser
35 40 45
Thr Cys Val Asp Tyr Pro Asp Asn Pro Phe Tyr Ser Gln Cys Val Pro
50 55 60
Asn Glu Asn Leu Thr Ser Thr Asn Lys Ser Ser His Lys Thr Thr Thr
65 70 75 80
Thr Glu Ser Ala Lys Lys Thr Thr Thr Thr Lys Gly Ser Lys Lys Thr
85 90 95
Thr Thr Thr Glu Ala Ser Lys Lys Thr Thr Thr Thr Glu Ala Ser Lys
100 105 110
Lys Thr Thr Thr Thr Glu Ala Ser Lys Lys Thr Thr Thr Thr Thr Lys
115 120 125
Lys Ala Ser Thr Ser Thr Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ala Ser Thr Asn
130 135 140
Tyr Ser Ala Val Ser Gly Gly Ala Ser Gly Asn Gly Glu Thr Thr Arg
145 150 155 160
Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser Trp Pro Gly Lys Ala Asp
165 170 175
Val Thr Ser Pro Val Gly Ser Cys Asn Lys Asp Gly Lys Thr Leu Ala
180 185 190
Asp Asn Asn Thr Gln Asn Gly Cys Val Gly Gly Ser Ser Tyr Thr Cys
195 200 205
Asn Asp Asn Gln Pro Trp Val Val Ser Asp Asp Leu Ala Tyr Gly Phe
210 215 220
Ala Ala Ala Ser Ile Ser Gly Gly Ser Glu Ala Thr Trp Cys Cys Ala
225 230 235 240
Cys Phe Glu Leu Thr Phe Thr Ser Thr Ala Val Lys Gly Lys Lys Met
245 250 255
Val Val Gln Val Thr Asn Thr Gly Ser Asp Leu Gly Ser Asn Thr Gly
260 265 270
Ala His Phe Asp Leu Gln Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Tyr Asn
275 280 285
Gly Cys Ala Thr Gln Trp Gly Ala Pro Thr Asp Gly Trp Gly Ala Arg
290 295 300
Tyr Gly Gly Val Ser Ser Ala Ser Asp Cys Ser Asn Leu Pro Ser Ala
305 310 315 320
Leu Gln Ala Gly Cys Lys Trp Arg Phe Gly Trp Phe Lys Asn Ala Asp
325 330 335
Asn Pro Thr Met Thr Tyr Lys Gln Val Thr Cys Pro Lys Ala Ile Thr
340 345 350
Ala Lys Ser Gly Cys Ser Arg Lys
355 360
<210> 52
<211> 219
<212> PRT
<213> Mastotermes darwiniensis hindgut symbiont sp.
<400> 52
Met Phe Val Ala Phe Val Ile Gly Ala Leu Cys Lys Asp Phe Ser Gly
1 5 10 15
Asn Gly Gln Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser
20 25 30
Trp Ser Lys Lys Ala Gln Val Ser His Val Val Asn Ser Cys Asn Ala
35 40 45
Asn Asn Gln His Asp Ser Thr Val Asp Leu Lys Ser Gly Cys Asp Gly
50 55 60
Gly Pro Ser Tyr Ala Cys Ala Asp Gln Ala Pro Trp Ala Val Asn Ser
65 70 75 80
Ser Tyr Phe Met Gly Thr Ala Ala Ala Ala Leu Ser Gly Ala Ser Glu
85 90 95
Ala Asp Leu Cys Cys Lys Cys Phe Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly Thr
100 105 110
Pro Asn Gly Lys Lys Met Leu Val Gln Ile Thr Asn Thr Gly Ser Asp
115 120 125
Leu Ser Gly Asn Gln Phe Asp Leu Leu Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly
130 135 140
Ile Phe Asp Gly Cys Thr Arg Gln Tyr Pro Gly Ser Tyr Asp Trp Gly
145 150 155 160
Gln Arg Tyr Gly Gly Val Thr Ser Arg Asp Gly Cys Ser Lys Leu Pro
165 170 175
Ser Thr Leu Gln Thr Gly Cys Gln Phe Arg Phe Asp Tyr Ile Gly Asp
180 185 190
Asn Pro Ser Val Ser Phe Lys Ser Thr His Cys Pro Asp Ser Ile Val
195 200 205
Gly Lys Thr Asn Ser Arg Arg Asn Asp Asp Ala
210 215
<210> 53
<211> 218
<212> PRT
<213> Magnaporthe grisea
<400> 53
Met Lys Ile Thr Thr Ser Ala Val Leu Ala Cys Leu Thr Ala Ala Val
1 5 10 15
Ser Ala Gln Val Gln Gly Thr Gly Ala Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Pro Gly Lys Ala Asn Leu Ala Ser Gly
35 40 45
Pro Leu Arg Thr Cys Asp Lys Ala Asp Asn Pro Leu Asn Asp Gly Gly
50 55 60
Asn Thr Lys Ser Gly Cys Asp Asn Gly Gly Gly Ala Phe Met Cys Ser
65 70 75 80
Ser Gln Glu Pro Leu Ala Val Asp Asp Ser Leu Ala Tyr Gly Phe Ala
85 90 95
Ala Val Arg Ile Ser Gly Gln Arg Glu Ser Asp Trp Cys Cys Ala Cys
100 105 110
Tyr Glu Leu Thr Phe Thr Asn Leu Leu Arg Asn Thr Gly Gly Asp Leu
115 120 125
Gly Gln Asn His Phe Asp Ile Ala Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile
130 135 140
Phe Asn Ala Cys Thr Glu Gln Tyr Gly Ala Pro Ala Asn Gly Trp Gly
145 150 155 160
Glu Arg Tyr Gly Gly Val Arg Ser Arg Ser Glu Cys Asp Ala Phe Pro
165 170 175
Glu Lys Leu Lys Lys Gly Cys Tyr Trp Arg Phe Asp Trp Phe Lys Gly
180 185 190
Ala Asp Asn Pro Ser Val Ser Phe Lys Gln Val Thr Cys Pro Ser Glu
195 200 205
Leu Thr Ser Lys Ser Gly Cys Val Arg Ala
210 215
<210> 54
<211> 219
<212> PRT
<213> Mastotermes darwiniensis hindgut symbiont sp.
<400> 54
Met Phe Val Ala Phe Val Ile Gly Ala Leu Cys Lys Asp Tyr Ser Gly
1 5 10 15
Asn Gly Gln Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser
20 25 30
Trp Ser Lys Lys Ala Gln Val Ser His Val Val Asn Ser Cys Asn Ala
35 40 45
Asn Gly Gln His Asp Ser Thr Val Asp Leu Lys Ser Gly Cys Asp Gly
50 55 60
Gly Pro Ser Tyr Ala Cys Thr Asp Gln Ala Pro Trp Ala Val Asn Ser
65 70 75 80
Ser Tyr Phe Met Gly Thr Ala Ala Ala Ala Leu Ser Gly Gly Ser Glu
85 90 95
Ser Asp Leu Cys Cys Lys Cys Phe Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly Thr
100 105 110
Pro Asn Gly Lys Lys Met Leu Val Gln Ile Thr Asn Thr Gly Ser Asp
115 120 125
Leu Ser Gly Asn Gln Phe Asp Leu Leu Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly
130 135 140
Ile Phe Asp Gly Cys Thr Arg Gln Tyr Pro Gly Ser Tyr Asp Trp Gly
145 150 155 160
Gln Arg Tyr Gly Gly Val Thr Ser Arg Asp Gly Cys Ser Lys Leu Pro
165 170 175
Ser Ala Leu Gln Ser Gly Phe Gln Phe Arg Phe Asp Tyr Ile Ala Asp
180 185 190
Asn Pro Ser Val Ser Phe Lys Ser Thr His Cys Pro Asp Thr Ile Val
195 200 205
Ser Lys Pro Thr Cys Arg Arg Asn Asp Asp Ser
210 215
<210> 55
<211> 220
<212> PRT
<213> Mastotermes darwiniensis hindgut symbiont sp.
<400> 55
Met Ile Val Val Phe Val Ile Gly Ala Leu Cys Lys Asp Tyr Ser Gly
1 5 10 15
Asn Gly Gln Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser
20 25 30
Trp Ser Lys Lys Ala Gln Val Ser His Val Val Asn Ser Cys Thr Ala
35 40 45
Thr Gly Ser His Asp Thr Thr Val Asp Leu Lys Ser Gly Cys Asp Gly
50 55 60
Gly Pro Ser Tyr Val Cys Val Asp Gln Ala Pro Trp Ala Val Asn Ser
65 70 75 80
Ser Tyr Phe Met Gly Thr Ala Ala Ala Ala Leu Ser Gly Gly Ser Glu
85 90 95
Ser Asp Leu Cys Cys Arg Cys Phe Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly Gln
100 105 110
Pro Asn Gly Lys Lys Met Leu Val Gln Val Thr Asn Thr Gly Ser Asp
115 120 125
Leu Ser Gly Asn Gln Phe Asp Leu Leu Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly
130 135 140
Ile Phe Asp Gly Cys Ser Arg Gln Tyr Pro Gly Gly Asn Tyr Asp Trp
145 150 155 160
Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Val Thr Ser Lys Ala Gly Cys Ala Lys Ile
165 170 175
Pro Ala Glu Leu Lys Ala Gly Cys Glu Phe Arg Phe Asp Tyr Ile Gly
180 185 190
Asp Asn Pro Ser Val Ser Phe Lys Ser Val His Cys Pro Asp Thr Ile
195 200 205
Thr Ser Lys Thr Asn Cys Arg Arg Asn Asp Asp Asn
210 215 220
<210> 56
<211> 220
<212> PRT
<213> Mastotermes darwiniensis hindgut symbiont sp.
<400> 56
Met Ile Val Val Phe Val Ile Gly Ala Leu Cys Lys Asp Tyr Ser Gly
1 5 10 15
Ser Gly Lys Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser
20 25 30
Trp Ser Lys Lys Ala Gln Val Ser His Val Val Asn Ser Cys Thr Ala
35 40 45
Ser Gly Gln His Asp Thr Thr Val Asp Leu Lys Ser Gly Cys Asp Gly
50 55 60
Gly Pro Ser Tyr Val Cys Val Asp Gln Ala Pro Trp Ala Val Asn Ser
65 70 75 80
Ser Tyr Phe Met Gly Thr Ala Ala Ala Ala Leu Ser Gly Gly Ser Glu
85 90 95
Ser Asp Leu Cys Cys Arg Cys Phe Glu Leu Thr Phe Thr Ser Gly Gln
100 105 110
Ser Asn Gly Lys Lys Met Leu Val Gln Ile Thr Asn Thr Gly Ser Asp
115 120 125
Leu Ser Gly Asn Gln Phe Asp Leu Leu Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly
130 135 140
Ile Phe Asp Gly Cys Ser Arg Gln Tyr Pro Gly Gly Asn Tyr Asp Trp
145 150 155 160
Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Val Thr Ser Lys Ala Gly Cys Ala Lys Ile
165 170 175
Pro Ala Glu Leu Lys Ala Gly Cys Glu Phe Arg Phe Asp Tyr Ile Gly
180 185 190
Asp Asn Pro Ser Val Ser Phe Lys Ser Val His Cys Pro Asp Thr Ile
195 200 205
Thr Ser Lys Thr Asn Cys Arg Arg Asn Asp Asp Gln
210 215 220
<210> 57
<211> 614
<212> PRT
<213> Pichia pastoris
<400> 57
Met Ser Thr Leu Thr Leu Leu Ala Val Leu Leu Ser Leu Gln Asn Ser
1 5 10 15
Ala Leu Ala Ala Gln Ala Glu Thr Ala Ser Leu Tyr His Gln Cys Gly
20 25 30
Gly Ala Asn Trp Glu Gly Ala Thr Gln Cys Ile Ser Gly Ala Tyr Cys
35 40 45
Gln Ser Gln Asn Pro Tyr Tyr Tyr Gln Cys Val Ala Thr Ser Trp Gly
50 55 60
Tyr Tyr Thr Asn Thr Ser Ile Ser Ser Thr Ala Thr Leu Pro Ser Ser
65 70 75 80
Ser Thr Thr Val Ser Pro Thr Ser Ser Val Val Pro Thr Gly Leu Val
85 90 95
Ser Pro Leu Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Gln Asn Trp Asn Gly Ala Thr
100 105 110
Ser Cys Ala Gln Gly Ser Tyr Cys Lys Tyr Met Asn Asn Tyr Tyr Phe
115 120 125
Gln Cys Val Pro Glu Ala Asp Gly Asn Pro Ala Glu Ile Ser Thr Phe
130 135 140
Ser Glu Asn Gly Glu Ile Ile Val Thr Ala Ile Glu Ala Pro Thr Trp
145 150 155 160
Ala Gln Cys Gly Gly His Gly Tyr Tyr Gly Pro Thr Lys Cys Gln Val
165 170 175
Gly Thr Ser Cys Arg Glu Leu Asn Ala Trp Tyr Tyr Gln Cys Ile Pro
180 185 190
Asp Asp His Thr Asp Ala Ser Thr Thr Thr Leu Asp Pro Thr Ser Ser
195 200 205
Phe Val Ser Thr Thr Ser Leu Ser Thr Leu Pro Ala Ser Ser Glu Thr
210 215 220
Thr Ile Val Thr Pro Thr Ser Ile Ala Ala Glu Gln Val Pro Leu Trp
225 230 235 240
Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly Tyr Thr Gly Ser Thr Ile Cys Glu Gln
245 250 255
Gly Ser Cys Val Tyr Leu Asn Asp Trp Tyr Tyr Gln Cys Leu Ile Ser
260 265 270
Asp Gln Gly Thr Ala Ser Thr Thr Ser Ala Thr Thr Ser Ile Thr Ser
275 280 285
Phe Asn Val Ser Ser Ser Ser Glu Thr Thr Val Ile Ala Pro Thr Ser
290 295 300
Ile Ser Thr Glu Asp Val Pro Leu Trp Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly
305 310 315 320
Tyr Thr Gly Ser Thr Thr Cys Ser Gln Gly Ser Cys Val Tyr Leu Asn
325 330 335
Asp Trp Tyr Phe Gln Cys Leu Pro Glu Glu Glu Thr Thr Ser Ser Thr
340 345 350
Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ser Ser Ala Ser Ser
355 360 365
Thr Ser Ser Thr Ser Ser Thr Ser Ser Thr Ser Ser Thr Ser Ser Ser
370 375 380
Thr Ser Ser Ser Ser Ile Pro Thr Ser Thr Ser Ser Ser Gly Asp Phe
385 390 395 400
Glu Thr Ile Pro Asn Gly Phe Ser Gly Thr Gly Arg Thr Thr Arg Tyr
405 410 415
Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser Trp Pro Gly Lys Ser Asn Ser
420 425 430
Val Thr Gly Pro Val Arg Ser Cys Gly Val Ser Gly Asn Val Leu Asp
435 440 445
Ala Asn Ala Gln Ser Gly Cys Ile Gly Gly Glu Ala Phe Thr Cys Asp
450 455 460
Glu Gln Gln Pro Trp Ser Ile Asn Asp Asp Leu Ala Tyr Gly Phe Ala
465 470 475 480
Ala Ala Ser Leu Ala Gly Gly Ser Glu Asp Ser Ser Cys Cys Thr Cys
485 490 495
Met Lys Leu Thr Phe Thr Ser Ser Ser Ile Ala Gly Lys Thr Met Ile
500 505 510
Val Gln Leu Thr Asn Thr Gly Ala Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp
515 520 525
Ile Ala Leu Pro Gly Gly Gly Leu Gly Ile Phe Thr Glu Gly Cys Ser
530 535 540
Ser Gln Phe Gly Ser Gly Tyr Gln Trp Gly Asn Gln Tyr Gly Gly Ile
545 550 555 560
Ser Ser Leu Ala Glu Cys Asp Gly Leu Pro Ser Glu Leu Gln Pro Gly
565 570 575
Cys Gln Phe Arg Phe Gly Trp Phe Glu Asn Ala Asp Asn Pro Ser Val
580 585 590
Glu Phe Glu Gln Val Ser Cys Pro Pro Glu Ile Thr Ser Ile Thr Gly
595 600 605
Cys Ala Arg Thr Asp Glu
610
<210> 58
<211> 410
<212> PRT
<213> Piromyces equi
<400> 58
Met Arg Leu Ala Leu Thr Ser Cys Ile Ala Leu Ala Ala Ser Ile Ala
1 5 10 15
Lys Val Ser Ala Ala Cys Trp Ala Gln Ser Gln Gly Tyr Asn Cys Cys
20 25 30
Asn Asn Pro Ser Ser Thr Lys Val Glu Tyr Thr Asp Ala Ser Gly Gln
35 40 45
Trp Gly Val Gln Asn Gly Gln Trp Cys Gly Ile Asp Tyr Ser Tyr Gly
50 55 60
Gln Asn Gln Gly Asn Glu Ser Cys Thr Gly Asn Gly Ser Tyr Pro Cys
65 70 75 80
Cys Asn Thr Cys Gln Ala Thr Tyr Thr Asp Gly Asp Gly Asp Trp Ala
85 90 95
Phe Glu Asn Gly Asn Trp Cys Gly Ile Lys Asn Ser Cys Lys Gln Gln
100 105 110
Pro Gln Asn Asn Asn Gln Cys Thr Gly Asn Gly Ala Tyr Arg Cys Cys
115 120 125
Asn Thr Cys Gln Ala Thr Tyr Thr Asp Asn Glu Gly Lys Trp Ala Phe
130 135 140
Glu Asn Gly Asp Trp Cys Gly Ile Lys Tyr Ser Cys Pro Ser Gln Gln
145 150 155 160
Val Thr Thr Thr Thr Thr Arg Arg Thr Thr Thr Thr Thr Gln Gln Gln
165 170 175
Gln Pro Thr Gly Ser Gly Gly Asn Ser Asn Val Pro Leu Asn Pro Pro
180 185 190
Asp Phe Ser Gly Gln Thr Gly Lys Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys
195 200 205
Leu Ala Ser Cys Ser Trp Gln Glu Asn Cys Lys Asn Asp Gly Ala Gln
210 215 220
Gly Val Val Arg Ser Cys Asn Val Asp Gly Ile Thr Pro Phe Thr Asp
225 230 235 240
Leu Ser Asn Leu Trp Arg Val Lys Ser Gly Cys Asn Gly Gly Ser Val
245 250 255
Tyr Met Cys Asn Asp Gln Gln Pro Trp Ala Ile Asn Asp Asn Val Ala
260 265 270
Tyr Gly Phe Val Ala Ser His Glu Lys Cys Cys Thr Cys Gln Arg Leu
275 280 285
Lys Phe Thr Ser Gly Pro Ile Ala Gly Lys Gln Met Ile Val Gln Thr
290 295 300
Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Ser Ser Asn His Phe Asp Ile Gln Met
305 310 315 320
Pro Gly Gly Gly Phe Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Ser Gln Phe Gly
325 330 335
Gly Ser Tyr Gln Trp Gly Glu Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Ala Ser
340 345 350
Gln Cys Ala Asn Leu Pro Pro Gln Leu Lys Ala Gly Cys Glu Trp Arg
355 360 365
Phe Asn Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ala Val Val Phe Glu Arg
370 375 380
Val Gln Cys Pro Lys Glu Leu Thr Glu Ile Thr Gly Cys Val Pro Gly
385 390 395 400
Asp Asp Ala Ser Ala Lys Lys Leu Pro Trp
405 410
<210> 59
<211> 237
<212> PRT
<213> Apriona germari
<400> 59
Met Lys Val Phe Val Ala Ile Leu Ala Val Phe Cys Thr Phe Glu Val
1 5 10 15
Ser Leu Ser Lys Val Tyr Asn Leu Asn Lys Val Pro Tyr Gly Ile Ser
20 25 30
Gly Ser Gly Thr Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys
35 40 45
Gly Trp Val Glu Asn Leu Ala Lys Glu Gly Thr Pro Val Ala Thr Cys
50 55 60
Ser Ala Asp Gly Ser Thr Thr Val Ala Ala Ser Val Lys Ser Ser Cys
65 70 75 80
Val Gly Gly Thr Ser Tyr Met Cys Ser Asn Gln Gln Pro Lys Ser Val
85 90 95
Asn Ser Thr Phe Ala Leu Gly Phe Val Ala Ala Ser Phe Thr Gly Gly
100 105 110
Ala Asp Thr Asn Tyr Cys Cys Ala Cys Ile Lys Leu Thr Phe Gln Asp
115 120 125
Ala Leu Gln Gly Lys Thr Met Val Val Gln Val Thr Asn Thr Gly Gly
130 135 140
Asp Leu Gly Ser Asn Gln Phe Asp Ile Ala Ile Pro Gly Gly Gly Val
145 150 155 160
Gly Ile Phe Thr Asp Gly Cys Ser Ser Gln Trp Gly Thr Pro Ser Asn
165 170 175
Gly Trp Gly Asp Gln Tyr Trp Trp Val Trp Gly Ser Glu Ala Asp Cys
180 185 190
Ala Gln Leu Pro Ser Asp Leu Gln Glu Gly Cys Lys Phe Arg Phe Glu
195 200 205
Phe Met Glu Gly Ala Ser Asn Pro Gly Val Thr Phe Glu Gln Val Asp
210 215 220
Cys Pro Ser Glu Leu Val Ser Ile Thr Gly Cys Asn Tyr
225 230 235
<210> 60
<211> 239
<212> PRT
<213> Apriona germari
<400> 60
Met Lys Val Leu Leu Ala Val Val Ala Val Leu Cys Thr Phe Glu Ala
1 5 10 15
Ser Leu Ser Gln Asp Tyr His Val Thr Pro Leu Val Gly Gly Val Ser
20 25 30
Gly Thr Gly Lys Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys
35 40 45
Ser Trp Lys Ala Asn Leu Lys Ser Lys Ser Gly Lys Pro Val Glu Ala
50 55 60
Cys Ala Ala Asp Gly Lys Thr Val Val Lys Glu Ser Thr Lys Ser Ala
65 70 75 80
Cys Glu Glu Gly Ala Gly Ala Tyr Met Cys Ser Asp Gln Gln Pro Lys
85 90 95
Val Val Asn Ser Thr Phe Ala Leu Gly Tyr Val Ala Ala Ser Phe Thr
100 105 110
Gly Gly Ile Asp Val Asn Met Cys Cys Ala Cys Leu Arg Leu Lys Phe
115 120 125
Gln Gly Asp Leu Ser Gly Lys Gln Met Ile Val Gln Val Thr Asn Thr
130 135 140
Gly Ser Asp Leu Gly Ser Asn Gln Phe Asp Ile Ala Ile Pro Gly Gly
145 150 155 160
Gly Val Gly Ile Phe Thr Lys Gly Cys Ser Ser Gln Trp Gly Thr Pro
165 170 175
Ser Asn Gly Trp Gly Asp Gln Tyr Gly Gly Val Ser Ser Glu Ser Gln
180 185 190
Cys Ser Gln Leu Pro Ser Ser Leu Arg Glu Gly Cys Lys Phe Arg Phe
195 200 205
Thr Phe Met Lys Ser Val Ser Asn Pro Ala Val Thr Phe Glu Gln Val
210 215 220
Ser Cys Pro Ser Glu Ile Val Ser Ala Ser Gly Cys Asn Tyr Ser
225 230 235
<210> 61
<211> 271
<212> PRT
<213> Alternaria alternata
<400> 61
Met Pro Gln His Leu Arg Asn Ile Ala Leu Thr Ile Glu Phe Phe Ala
1 5 10 15
Val Leu Ala Arg Cys Ala His Leu Asn Tyr Thr Gly Glu Ala Val Thr
20 25 30
Thr Arg Phe Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Asn Gly Lys
35 40 45
Ala Gln Phe Ser Arg Pro Val Glu Ser Cys Thr Ala Asp Asp Lys Pro
50 55 60
Thr Asp Ile Ala Ala Gly Thr Gly Cys Asn Ser Gly Ser Ala Phe Gln
65 70 75 80
Cys Ser Asn Gln Gln Pro Trp Ala Ile Asn Asp Thr Leu Ser Tyr Gly
85 90 95
Tyr Ala Gly Val Tyr Ile Thr Pro Asp Leu Thr His Gly Gly Ile Glu
100 105 110
Asp Ala Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Gln Leu Asn Phe Thr Ser Glu Pro
115 120 125
Leu Ile Gly Lys Ser Met Ile Val Gln Ala Ser Asn Thr Ala Tyr Asp
130 135 140
Val Thr Asn Ala Asn Arg Phe Ser Leu Ala Val Pro Gly Gly Asn Thr
145 150 155 160
Thr Ser Thr Asn Ala Cys Ala Gln Gln Tyr Gly Val Ser Gln Ser Val
165 170 175
Phe Gly Glu Asn Met Ala Gly Val Lys Ser Ile Asp Asp Cys Gln Asn
180 185 190
Leu Pro Glu Asn Leu Arg Ala Gly Cys Glu Trp Arg Phe Asp Trp Phe
195 200 205
Lys Asn Ala Ser Phe Pro Ser Ala Asn Phe Lys Arg Val Val Cys Pro
210 215 220
Ser Glu Ile Thr Ala Lys Thr Asn Cys Ile Arg Asn Asp Asp Lys Val
225 230 235 240
Leu Ala Gly Glu Ala Ser Ser Ala Gln Ser Leu Thr Pro Ser Ser Ser
245 250 255
Thr Met Ala Phe Phe Ala Val Ile Ile Leu Gly Leu Ile Ser Ile
260 265 270
<210> 62
<211> 242
<212> PRT
<213> Phaedon cochleariae
<400> 62
Met Gln Val Ile Val Leu Pro Leu Val Phe Leu Ala Thr Phe Ala Thr
1 5 10 15
Ser Gly Ser Leu Ala Ala Pro Asp Ala Ser Pro Glu Ile Val Pro Val
20 25 30
Asp Gly Gly Leu Ser Gly Tyr Gly Thr Thr Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
35 40 45
Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp Lys Glu Asn Ile Asn Thr Pro Thr Met
50 55 60
Thr Pro Val Gln Thr Cys Ala Ile Asp Gly Asn Thr Val Val Asn Ala
65 70 75 80
Ser Val Gln Ser Gly Cys Ile Gly Gly Ser Ser Tyr Met Cys Ser Asn
85 90 95
Gln Gln Ala Phe Val Val Asn Ser Thr Leu Ala Phe Gly Phe Ala Ala
100 105 110
Gly Ser Phe Thr Gly Gly Val Asp Asn Asn Leu Cys Cys Ser Cys Met
115 120 125
Leu Leu Thr Phe Gln Gly Gln Leu Ala Gly Lys Gln Phe Leu Val Gln
130 135 140
Ile Thr Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Thr Ser Ser Ile Trp Pro
145 150 155 160
Phe Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Thr Gln Gly Cys His Asp Gln
165 170 175
Trp Thr Pro Arg Gly Ala Ala Gly Gly Asp Gln Tyr Gly Gly Val Tyr
180 185 190
Ser Val Glu Gln Cys Ser Asp Leu Pro Glu Val Leu Gln Pro Gly Cys
195 200 205
Arg Phe Arg Phe Glu Phe Leu Glu Asn Val Ser Asn Pro Gln Val Ser
210 215 220
Phe Gln Gln Val Gln Cys Pro Ala Glu Ile Val Ala Ile Ser Asn Cys
225 230 235 240
Ala Leu
<210> 63
<211> 222
<212> PRT
<213> Talaromyces emersonii
<400> 63
Met Asn Val Arg Ala Val Val Ser Val Ser Ala Phe Leu Leu Thr Pro
1 5 10 15
Leu Ala Ser Ala Leu Thr Gly Thr Thr Thr Thr Thr Trp Asp Cys Cys
20 25 30
Lys Pro Ala Cys Ser Trp Thr Gln Asn Ala Gln Ala Gly Gly Ala Ser
35 40 45
Gly Thr Val Ala Thr Cys Asn Ile Asn Asn Gln Val Leu Ser Asn Gly
50 55 60
Ala Ser Ala Pro Ser Ala Cys Gln Gly Gly Asp Ala Tyr Ser Cys Ser
65 70 75 80
Asp Phe Gln Pro Ile Ile Ile Ser Asp Thr Leu Ser Tyr Gly Phe Ala
85 90 95
Gly Asn Trp Glu Thr Ser Asn Cys Cys Lys Cys Phe Gln Phe Thr Trp
100 105 110
Thr Ser Gly Ala Gly Ala Gly Lys Ser Met Ile Val Gln Val Val Asn
115 120 125
Ser Gly Gly Val Ser Thr Gly Asp Phe Asp Ile Tyr Thr Pro Gly Gly
130 135 140
Gly Val Gly Asp Tyr Asn Ala Cys Thr Ser Gln Tyr Gly Ala Pro Pro
145 150 155 160
Gln Gly Trp Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Val Ser Ser Asp Ala Glu Cys
165 170 175
Asp Gln Leu Pro Ser Ile Leu Gln Pro Gly Cys His Trp Arg Phe Glu
180 185 190
Trp Ala Gly Gly Gly Ile Asn Gly Trp Thr Thr Glu Tyr Glu Glu Val
195 200 205
Asp Cys Pro Ser Gln Leu Thr Ser Ile Ser Gly Cys Tyr Pro
210 215 220
<210> 64
<211> 393
<212> PRT
<213> Ustilago maydis
<400> 64
Met Ala Phe Lys Leu Asn Ile Gly Leu Leu Ala Leu Ser Leu Ser Leu
1 5 10 15
Ser Leu Val His Leu Asp Gly Val Arg Ala Gly Met Ala Thr Arg Tyr
20 25 30
Trp Asp Cys Cys Leu Ala Ser Ala Ser Trp Glu Gly Lys Ala Pro Val
35 40 45
Tyr Ala Pro Val Asp Ala Cys Lys Ala Asp Gly Val Thr Leu Ile Asp
50 55 60
Ser Lys Lys Asp Pro Ser Gly Gln Ser Gly Cys Asn Gly Gly Asn Lys
65 70 75 80
Phe Met Cys Ser Cys Met Gln Pro Phe Asp Asp Glu Thr Asp Pro Thr
85 90 95
Leu Ala Phe Gly Phe Gly Ala Phe Thr Thr Gly Gln Glu Ser Asp Thr
100 105 110
Asp Cys Ala Cys Phe Tyr Ala Glu Phe Glu His Asp Ala Gln Gly Lys
115 120 125
Ala Met Lys Arg Asn Lys Leu Ile Phe Gln Val Thr Asn Val Gly Gly
130 135 140
Asp Val Gln Ser Gln Asn Phe Asp Phe Gln Ile Pro Gly Gly Gly Leu
145 150 155 160
Gly Ala Phe Pro Lys Gly Cys Pro Ala Gln Trp Gly Val Glu Ala Ser
165 170 175
Leu Trp Gly Asp Gln Tyr Gly Gly Val Lys Ser Ala Thr Glu Cys Ser
180 185 190
Lys Leu Pro Lys Pro Leu Gln Glu Gly Cys Lys Trp Arg Phe Ser Glu
195 200 205
Trp Gly Asp Asn Pro Val Leu Lys Gly Ser Pro Lys Arg Val Lys Cys
210 215 220
Pro Lys Ser Leu Ile Asp Arg Ser Gly Cys Gln Arg Lys Asp Asp Asn
225 230 235 240
Thr Ile Ser Pro Tyr Ser Gly Lys Val Asp Ser Ala Asn Thr Ala Ala
245 250 255
Pro Ala Gln Tyr Lys Arg Asp Arg Ser Val Cys Leu Ala Gly Gly Lys
260 265 270
Lys Gly Lys Ser Ala Ala Gly Gly Val Asp Gly Ser Gly Asp Ala Ser
275 280 285
Gly Gly Ala Asp Ala Ser Gly Ala Gly Gly Ala Ala Glu Gly Ser Gln
290 295 300
Gly Gln Pro Glu Gly Tyr Gly Gln Pro Ser Gly Gly Asn Asp Gln Gly
305 310 315 320
Ser Ser Asn Gly Asp Ala Thr Thr Gly Ala Gly Ser Gly Ser Gly Ser
325 330 335
Asp Ser Gly Ser Thr Ala Asn Gly Ser Gly Ser Gly Ala Pro Thr Ser
340 345 350
Gly Ser Asp Gly Ser Ala Val Ala Pro Pro Ser Gly Gly Ser Asn Pro
355 360 365
Gly Ala Ala Gln Gly Gly Gln Gly Gly Ala Gln Pro Gly Pro Ser Gly
370 375 380
Gly His Lys Lys Cys His Lys Lys His
385 390
<210> 65
<211> 410
<212> PRT
<213> Penicillium janthinellum
<400> 65
Met Met Ala Gln Asp Lys Arg Thr Leu Leu Ala Leu Leu Ala Leu Gly
1 5 10 15
Gly Ser Ala Leu Gly Gln Gln Thr Ala Trp Gly Gln Cys Gly Gly Gln
20 25 30
Gly Trp Thr Gly Ala Thr Thr Cys Val Ser Gly Tyr Tyr Cys Ser Phe
35 40 45
Gln Asn Asn Trp Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Gly Ala Ala Ser Thr Thr
50 55 60
Ser Thr Ser Thr Thr Thr Thr Thr Val Tyr Ser Thr Thr Leu Lys Thr
65 70 75 80
Thr Thr Thr Ser Ser Thr Ser Ser Ala Pro Thr Gly Lys Val Arg Phe
85 90 95
Ala Gly Val Asn Ile Ala Gly Phe Asp Phe Gly Val Val Thr Ser Gly
100 105 110
Thr Gln Asp Leu Ser Gln Val Val Asp Glu Ser Val Asp Gly Val Asn
115 120 125
Gln Met Ser His Phe Val Asn Ala Asp Thr Phe Asn Ile Phe Arg Leu
130 135 140
Pro Thr Gly Trp Gln Phe Ile Val Asn Asn Asn Leu Gly Gly Ser Leu
145 150 155 160
Asp Ser Asn Asn Phe Gly Lys Tyr Glu Gln Val Gly Ser Gly Leu Ser
165 170 175
Leu Ser Gly Ala Tyr Cys Ile Val Asp Ile His Asn Tyr Ala Arg Trp
180 185 190
Asn Gly Gly Val Ile Gly Gln Gly Gly Pro Thr Asp Asp Gln Phe Ile
195 200 205
Ser Leu Trp Thr Gln Leu Ala Thr His Tyr Lys Ser Asn Ser Arg Val
210 215 220
Ile Phe Gly Ile Met Asn Glu Pro His Asp Leu Asn Ile Ala Thr Trp
225 230 235 240
Ala Ala Thr Val Gln Lys Thr Val Thr Ala Ile Arg Asn Thr Gly Ala
245 250 255
Thr Ser Gln Met Ile Leu Leu Pro Gly Thr Asp Tyr Thr Ser Ala Ala
260 265 270
Asn Phe Ile Glu Asn Gly Ser Gly Ala Ala Leu Leu Pro Val Thr Asn
275 280 285
Pro Asp Gly Ser Thr Thr Asn Leu Ile Phe Asp Val His Lys Tyr Leu
290 295 300
Asp Ser Asp Asn Ser Gly Thr His Ala Glu Cys Val Thr Asn Asn Ala
305 310 315 320
Asp Ala Phe Asn Asn Leu Ala Thr Trp Leu Arg Ser Asn Lys Arg Gln
325 330 335
Ala Leu Leu Ser Glu Thr Gly Gly Gly Asn Val Gln Ser Cys Ala Thr
340 345 350
Tyr Met Cys Gln Gln Leu Asp Ile Leu Asn Ala Asn Ser Asp Val Tyr
355 360 365
Leu Gly Trp Thr Ser Trp Ser Ala Gly Gly Phe Gln Ala Ser Trp Asn
370 375 380
Tyr Val Leu Thr Glu Val Pro Val Asn Gly Val Asp Gln Tyr Leu Val
385 390 395 400
Gln Gln Cys Phe Val Pro Lys Trp Lys Asn
405 410
<210> 66
<211> 368
<212> PRT
<213> Macrophomina phaseolina
<400> 66
Met Lys Thr Ala Thr Leu Ala Ala Ala Ala Ser Leu Phe Thr Ser Ala
1 5 10 15
Ala Leu Ala Ala Pro Thr Ser Thr Leu Lys Ala Ala Ala Ala Ser Lys
20 25 30
Val Lys Phe Ala Gly Val Asn Ile Ala Gly Phe Asp Phe Gly Cys Gly
35 40 45
Thr Asp Gly Thr Cys Thr Gln Thr Ala Ser Thr Ala Thr Asp Pro Leu
50 55 60
Thr Asp Ser Asp Gly Gln Gly Gln Met Asp His Phe Val Lys Asp Asp
65 70 75 80
Lys Leu Asn Ala Phe Arg Leu Pro Val Gly Trp Gln Tyr Leu Val Ala
85 90 95
Asn Lys Leu Gly Gly Asp Leu Asp Ser Ala Asn Ala Gly Lys Tyr Asp
100 105 110
Asn Leu Val Gln Gly Cys Leu Lys Ser Gly Ala Glu Leu Cys Ile Ile
115 120 125
Asp Ile His Asn Tyr Ala Leu Leu Glu Arg Pro Asp His Arg Gln Gly
130 135 140
Gly Pro Thr Asn Asp Gln Phe Val Ser Leu Trp Lys Gln Leu Ala Thr
145 150 155 160
Lys Tyr Lys Asp Asn Thr Lys Val Ala Phe Gly Val Met Asn Glu Pro
165 170 175
His Asp Val Pro Asp Ile Asn Lys Trp Ala Asp Thr Val Gln Gln Val
180 185 190
Val Thr Ala Ile Arg Asn Arg Gly Ala Thr Thr Gln Tyr Val Leu Leu
195 200 205
Pro Gly Asn Asp Trp Thr Ser Ala Ala Ala Phe Ile Asp Asn Gly Ser
210 215 220
Ala Ala Ala Leu Lys Lys Val Thr Asn Pro Asp Gly Ser Thr Asp Asn
225 230 235 240
Leu Ile Phe Asp Val His Lys Tyr Leu Asp Ser Asp Asn Ser Gly Thr
245 250 255
His Thr Glu Cys Val Thr Asn Asn Ile Asp Asp Ala Phe Lys Pro Leu
260 265 270
Ala Asp Trp Leu Arg Gln Asn Lys Arg Met Ala Ile Asn Thr Glu Ser
275 280 285
Gly Gly Gly Asn Thr Asp Ser Cys Glu Lys Tyr Phe Cys Glu Gln Ile
290 295 300
Gln Tyr Leu Asn Gln Asn Ala Asp Val Phe Leu Gly Tyr Thr Ala Trp
305 310 315 320
Ser Ala Gly Gly Phe Asp Gln Thr Tyr Glu Leu Val Gln Thr Pro Ile
325 330 335
Ser Ser Pro Met Ala Arg Thr Lys Ile Leu His Ser Arg Arg Ser Ala
340 345 350
Leu Leu Val Leu Gly Arg Met Leu Glu Gly Arg His Glu Phe Met Tyr
355 360 365
<210> 67
<211> 341
<212> PRT
<213> Cryptococcus flavus
<400> 67
Met Lys Thr Ala Thr Leu Leu Ala Ala Leu Ser Val Leu Ala Gly Ala
1 5 10 15
Leu Ala Ala Pro Leu Ala Gly Asp Ser Ala Leu His Arg Arg Ser Leu
20 25 30
Pro Arg Leu Gly Gly Val Asn Leu Ala Gly Cys Asp Phe Gly Ile Asp
35 40 45
Ile Tyr Gly Asn Ser Gly Thr Pro Ala Cys Pro Gly Thr Glu Gln Val
50 55 60
Gly His Phe Ile Ala Asp Gly Ala Asn Leu Phe Arg Leu Pro Ala Gly
65 70 75 80
Trp Gln Tyr Leu Val Gly Asn Asn Gln Ala Ser Thr Ser Leu Ala Pro
85 90 95
Asp Phe Phe Ala Gln Tyr Asp Ala Leu Val Gln Ala Val Ile Ser Lys
100 105 110
Gly Ala Tyr Ala Ile Ile Asp Val His Asn Tyr Ala Arg Trp Asn Gly
115 120 125
Ala Ile Ile Gly Gln Gly Gly Pro Ser Asn Gln Asp Phe Ala Asn Leu
130 135 140
Trp Thr Leu Leu Ala Thr Lys Val Thr Ser Asn Asp Pro Asn Val Ile
145 150 155 160
Phe Gly Leu Met Asn Glu Pro His Asp Leu Asp Val Ser Thr Trp Ala
165 170 175
Gly Ser Val Gln Ala Ala Val Asn Ala Ile Arg Ala Ala Gly Ala Thr
180 185 190
Ser Gln Tyr Ile Leu Ile Pro Gly Thr Gly Phe Thr Asn Ala Asn Ala
195 200 205
Trp Phe Gln Gly Gln Asp Asn Ala Leu Leu Gly Val Thr Asp Pro Val
210 215 220
Gly Gly Thr Asp Lys Leu Leu Leu Asp Val His Arg Tyr Asn Asp Val
225 230 235 240
Asp Phe Ser Gly Thr His Ala Glu Cys Thr Thr Asn Ser Leu Asp Val
245 250 255
Leu Ser Ser Leu Asp Ser Trp Leu Lys Gly Asn Gly Arg Lys Ala Ile
260 265 270
Val Ser Glu Thr Gly Gly Gly His Thr Thr Ser Cys Glu Thr Asp Leu
275 280 285
Gly Glu Phe Leu Asn Gly Ile Lys Glu Asp Tyr Pro Ser Val Leu Gly
290 295 300
Phe Ala Val Trp Ala Ala Gly Ser Phe Asp Pro Ser Tyr Val Leu Ser
305 310 315 320
Ile Thr Pro Thr Asn Gly Val Asp Asn Gln Leu Phe Asp Ile Ala Val
325 330 335
Lys Pro Asn Leu Pro
340
<210> 68
<211> 326
<212> PRT
<213> Aspergillus nidulans
<400> 68
Met Arg Ser Leu Val Leu Leu Ser Ser Val Leu Ala Leu Val Ala Pro
1 5 10 15
Ser Lys Gly Ala Phe Thr Trp Leu Gly Thr Asn Glu Ala Gly Ala Glu
20 25 30
Phe Gly Glu Gly Ser Tyr Pro Gly Glu Leu Gly Thr Glu Tyr Ile Trp
35 40 45
Pro Asp Leu Gly Thr Ile Gly Thr Leu Arg Asn Glu Gly Met Asn Ile
50 55 60
Phe Arg Val Ala Phe Ser Met Glu Arg Leu Val Pro Asp Ser Leu Ala
65 70 75 80
Gly Pro Val Ala Asp Glu Tyr Phe Gln Asp Leu Val Glu Thr Val Asn
85 90 95
Gly Ile Thr Ala Leu Gly Ala Tyr Ala Val Leu Asp Pro His Asn Tyr
100 105 110
Gly Arg Tyr Tyr Gly Asn Ile Ile Thr Ser Thr Asp Asp Phe Ala Ala
115 120 125
Phe Trp Thr Ile Leu Ala Thr Glu Phe Ala Ser Asn Glu Leu Val Ile
130 135 140
Phe Asp Thr Asn Asn Glu Tyr His Thr Met Asp Gln Ser Leu Val Leu
145 150 155 160
Asn Leu Asn Gln Ala Ala Ile Asp Ala Ile Arg Ala Ser Gly Ala Thr
165 170 175
Ser Gln Tyr Ile Phe Ala Glu Gly Asn Ser Trp Thr Gly Ala Trp Thr
180 185 190
Trp Val Asp Val Asn Asp Asn Met Lys Ala Leu Thr Asp Pro Gln Asp
195 200 205
Lys Leu Ile Tyr Glu Met His Gln Tyr Leu Asp Ser Asp Gly Ser Gly
210 215 220
Thr Asn Thr Ala Cys Val Ser Ser Thr Ile Gly Ser Glu Arg Val Thr
225 230 235 240
Ala Ala Thr Asn Trp Leu Arg Glu Asn Gly Lys Leu Gly Val Leu Gly
245 250 255
Glu Phe Ala Gly Ala Asn Asn Gln Val Cys Lys Asp Ala Val Ala Asp
260 265 270
Leu Leu Glu Tyr Leu Glu Glu Asn Ser Asp Val Trp Leu Gly Ala Leu
275 280 285
Trp Trp Ala Ala Gly Pro Trp Trp Gly Asp Tyr Met Phe Asn Met Glu
290 295 300
Pro Thr Ser Gly Ile Ala Tyr Gln Glu Tyr Ser Glu Ile Leu Gln Pro
305 310 315 320
Tyr Phe Val Gly Ser Gln
325
<210> 69
<211> 521
<212> PRT
<213> Aspergillus kawachii
<400> 69
Met Arg Ile Ser Asn Leu Ile Val Ala Ala Ser Ala Ala Thr Met Val
1 5 10 15
Ser Ala Leu Pro Ser Arg Gln Met Lys Lys Arg Asp Ser Gly Phe Lys
20 25 30
Trp Val Gly Thr Ser Glu Ser Gly Ala Glu Phe Gly Ser Ala Leu Pro
35 40 45
Gly Thr Leu Gly Thr Asp Tyr Thr Trp Pro Glu Thr Ser Lys Ile Gln
50 55 60
Val Leu Arg Asn Lys Gly Met Asn Ile Phe Arg Ile Pro Phe Leu Met
65 70 75 80
Glu Arg Leu Thr Pro Asp Gly Leu Thr Gly Ser Phe Ala Ser Thr Tyr
85 90 95
Leu Ser Asp Leu Lys Ser Thr Val Glu Phe Val Thr Asn Ser Gly Ala
100 105 110
Tyr Ala Val Leu Asp Pro His Asn Tyr Gly Arg Phe Asp Gly Ser Ile
115 120 125
Ile Glu Ser Thr Ser Asp Phe Lys Thr Trp Trp Lys Asn Val Ala Thr
130 135 140
Glu Phe Ala Asp Asn Asp Lys Val Ile Phe Asp Thr Asn Asn Glu Tyr
145 150 155 160
His Asp Met Glu Gln Ser Leu Val Leu Asn Leu Asn Gln Ala Ala Ile
165 170 175
Asn Gly Ile Arg Ala Ala Gly Ala Thr Thr Gln Tyr Ile Phe Val Glu
180 185 190
Gly Asn Ala Tyr Thr Gly Ala Trp Asp Trp Thr Thr Tyr Asn Asp Asp
195 200 205
Leu Ser Gly Leu Thr Asp Ser Glu Asp Lys Ile Ile Tyr Glu Met His
210 215 220
Gln Tyr Leu Asp Ser Asp Ser Ser Gly Thr Ser Glu Thr Cys Val Ser
225 230 235 240
Ser Thr Ile Gly Lys Glu Arg Ile Glu Lys Ala Thr Glu Trp Leu Lys
245 250 255
Thr Asn Asn Lys Gln Gly Ile Ile Gly Glu Phe Ala Gly Gly Val Asn
260 265 270
Ser Val Cys Glu Glu Ala Val Glu Gly Met Leu Ala Tyr Met Ser Glu
275 280 285
Asn Ser Asp Val Trp Val Gly Ala Ser Trp Trp Ser Ala Gly Pro Trp
290 295 300
Trp Gly Thr Tyr Met Tyr Ser Leu Glu Pro Thr Asp Gly Thr Ala Tyr
305 310 315 320
Ser Thr Tyr Leu Pro Ile Leu Glu Lys Tyr Phe Pro Ser Gly Asp Ala
325 330 335
Ser Ser Ser Ser Ser Ala Ser Ala Ser Val Ala Ala Ala Thr Ser Ala
340 345 350
Val Ser Thr Thr Thr Thr Ala Ala Phe Glu Gln Thr Thr Thr Pro Ala
355 360 365
Thr Gln Val Glu Ile Ala Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ala Val Ala
370 375 380
Ala Ser Gln Thr Thr Leu Ser Lys Val Lys Ser Lys Ser Lys Ser Pro
385 390 395 400
Cys Lys Leu Ser Ser Ala Thr Ser Ser Ala Val Ser Ser Ala Ala Ala
405 410 415
Val Thr Thr Pro Ala Val Ala Ala Thr Thr Pro Ala Ala Ala Pro Thr
420 425 430
Ser Ser Ser Val Ala Phe Ala Thr Thr Ser Val Tyr Val Pro Thr Thr
435 440 445
Thr Ala Ala Ala Pro Ser Gln Val Ser Ser Ser Ala Ala Ala Ser Ser
450 455 460
Ser Gly Val Val Gly Val Ser Asp Pro Gln Gly Pro Ser Ala Thr Asn
465 470 475 480
Ser Ala Gly Glu Val Asn Gln Tyr Tyr Gln Cys Gly Gly Ile Asn Trp
485 490 495
Thr Gly Pro Thr Val Cys Ala Ser Pro Tyr Thr Cys Lys Val Gln Asn
500 505 510
Asp Tyr Tyr Tyr Gln Cys Val Ala Glu
515 520
<210> 70
<211> 333
<212> PRT
<213> Macrophomina phaseolina
<400> 70
Met Arg Leu Ser Thr Leu Leu Ile Ala Gly Ser Ala Ser Leu Ala Leu
1 5 10 15
Ala Ala Pro Val Gln Lys Glu Glu Lys Arg Ala Ser Asn Phe Gln Phe
20 25 30
Phe Gly Val Asn Glu Ser Gly Pro Glu Phe Gly Glu Thr Lys Leu Pro
35 40 45
Gly Thr Lys Asn Thr Asp Tyr Val Trp Pro Thr Leu Ser Thr Ile Asp
50 55 60
Thr Phe Val Gly Lys Gly Met Asn Thr Phe Arg Val Asn Ile Leu Met
65 70 75 80
Glu Arg Leu Thr His Asn Ser Leu Thr Ala Ser Leu Asp Ser Gln Tyr
85 90 95
Leu Ala Asp Leu Lys Thr Thr Val Asn Tyr Ile Thr Gly Lys Gly Ala
100 105 110
Tyr Ala Met Ile Val Pro His Asn Tyr Gly Arg Phe Asn Ser Gln Ile
115 120 125
Ile Thr Asp Thr Ala Gly Phe Lys Thr Trp Trp Thr Asn Val Ala Lys
130 135 140
Glu Phe Ala Gly Asn Ser Lys Val Ile Phe Asp Ile Asn Asn Glu Phe
145 150 155 160
His Asp Met Asp Gln Thr Leu Val Val Asn Leu Asn Gln Ala Gly Ile
165 170 175
Asp Gly Ile Arg Ala Ala Gly Ala Thr Ser Gln Tyr Ile Thr Ala Glu
180 185 190
Gly Asn Ser Trp Thr Gly Ala Trp Thr Trp Thr Thr Ser Glu Asn Gly
195 200 205
Lys Thr Met Ala Ala Leu Lys Asp Pro Gln Asn Lys Leu Ile Tyr Gln
210 215 220
Met His Gln Tyr Leu Asp Ser Asp Gly Ser Gly Thr Asn Glu Ala Cys
225 230 235 240
Val Ser Ser Thr Ile Gly Lys Glu Arg Ile Thr Ala Ala Thr Lys Trp
245 250 255
Leu Lys Asp Asn Gly Lys Lys Gly Leu Ile Gly Glu Phe Ala Gly Gly
260 265 270
Asn Asn Ser Gln Cys Lys Thr Ala Val Glu Gly Met Leu Thr Tyr Met
275 280 285
Gln Glu Asn Lys Asp Val Trp Thr Gly Ala Leu Trp Trp Ala Ala Gly
290 295 300
Pro Trp Trp Ala Ser Tyr Met Phe Ser Met Glu Pro Lys Thr Gly Thr
305 310 315 320
Ala Tyr Thr Ala Tyr Leu Asp Leu Ile Ser Lys Phe Lys
325 330
<210> 71
<211> 389
<212> PRT
<213> Volvariella volvacea
<400> 71
Met Arg Ser Leu Leu Ser Ser Val Ala Ser Leu Ala Val Leu Phe Ala
1 5 10 15
Val Ala Lys Pro Ala Leu Ala Ala Val Pro Val Trp Gly Gln Cys Gly
20 25 30
Gly Asn Gly Trp Ser Gly Glu Thr Thr Cys Ala Ser Gly Ser Thr Cys
35 40 45
Val Val Val Asn Glu Trp Tyr His Gln Cys Gln Pro Gly Ala Gly Pro
50 55 60
Thr Thr Thr Ser Ser Ala Pro Asn Pro Thr Ser Ser Gly Cys Pro Asn
65 70 75 80
Ala Thr Lys Phe Arg Phe Phe Gly Val Asn Gln Ala Gly Ala Glu Phe
85 90 95
Gly Glu Asn Val Ile Pro Gly Glu Leu Gly Thr His Tyr Thr Trp Pro
100 105 110
Ser Pro Ser Ser Ile Asp Tyr Phe Val Asn Gln Gly Phe Asn Thr Phe
115 120 125
Arg Val Ala Phe Lys Ile Glu Arg Leu Ser Pro Pro Gly Thr Gly Leu
130 135 140
Thr Gly Pro Phe Asp Gln Ala Tyr Leu Asn Gly Leu Lys Thr Ile Val
145 150 155 160
Asn Tyr Ile Thr Gly Lys Asn Ala Tyr Ala Val Leu Asp Pro His Asn
165 170 175
Tyr Met Arg Tyr Asn Gly Asn Val Ile Thr Ser Thr Ser Asn Phe Gln
180 185 190
Thr Trp Trp Asn Lys Leu Ala Thr Glu Phe Arg Ser Asn Thr Arg Val
195 200 205
Ile Phe Asp Val Met Asn Glu Pro Tyr Gln Ile Asp Ala Ser Val Val
210 215 220
Phe Asn Leu Asn Gln Ala Ala Ile Asn Gly Ile Arg Ala Ser Gly Ala
225 230 235 240
Thr Ser Gln Leu Ile Leu Val Glu Gly Thr Ala Trp Thr Gly Ala Trp
245 250 255
Ser Trp Glu Ser Ser Gly Asn Gly Ala Val Phe Gly Ala Ile Arg Asp
260 265 270
Pro Asn Asn Asn Thr Ala Ile Glu Met His Gln Tyr Leu Asp Ser Asp
275 280 285
Ser Ser Gly Thr Ser Ala Thr Cys Val Ser Ser Thr Val Gly Val Glu
290 295 300
Arg Leu Arg Val Ala Thr Asp Trp Leu Arg Arg Asn Asn Leu Lys Gly
305 310 315 320
Phe Leu Gly Glu Met Gly Ala Gly Ser Asn Asp Val Cys Ile Ala Ala
325 330 335
Val Lys Gly Ala Leu Cys Ala Met Gln Gln Ser Gly Val Trp Ile Gly
340 345 350
Tyr Leu Trp Trp Ala Ala Gly Pro Trp Trp Gly Thr Tyr Phe Gln Ser
355 360 365
Ile Glu Pro Pro Asn Gly Ala Ser Ile Ala Arg Ile Leu Pro Glu Ala
370 375 380
Leu Lys Pro Phe Val
385
<210> 72
<211> 335
<212> PRT
<213> Thermoascus aurantiacus
<400> 72
Met Lys Leu Gly Ser Leu Val Leu Ala Leu Ser Ala Ala Arg Leu Thr
1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Leu Ala Asp Arg Lys Gln Glu Thr Lys Arg Ala Lys
20 25 30
Val Phe Gln Trp Phe Gly Ser Asn Glu Ser Gly Ala Glu Phe Gly Ser
35 40 45
Gln Asn Leu Pro Gly Val Glu Gly Lys Asp Tyr Ile Trp Pro Asp Pro
50 55 60
Asn Thr Ile Asp Thr Leu Ile Ser Lys Gly Met Asn Ile Phe Arg Val
65 70 75 80
Pro Phe Met Met Glu Arg Leu Val Pro Asn Ser Met Thr Gly Ser Pro
85 90 95
Asp Pro Asn Tyr Leu Ala Asp Leu Ile Ala Thr Val Asn Ala Ile Thr
100 105 110
Gln Lys Gly Ala Tyr Ala Val Val Asp Pro His Asn Tyr Gly Arg Tyr
115 120 125
Tyr Asn Ser Ile Ile Ser Ser Pro Ser Asp Phe Gln Thr Phe Trp Lys
130 135 140
Thr Val Ala Ser Gln Phe Ala Ser Asn Pro Leu Val Ile Phe Asp Thr
145 150 155 160
Asn Asn Glu Tyr His Asp Met Asp Gln Thr Leu Val Leu Asn Leu Asn
165 170 175
Gln Ala Ala Ile Asp Gly Ile Arg Ser Ala Gly Ala Thr Ser Gln Tyr
180 185 190
Ile Phe Val Glu Gly Asn Ser Trp Thr Gly Ala Trp Thr Trp Thr Asn
195 200 205
Val Asn Asp Asn Met Lys Ser Leu Thr Asp Pro Ser Asp Lys Ile Ile
210 215 220
Tyr Glu Met His Gln Tyr Leu Asp Ser Asp Gly Ser Gly Thr Ser Ala
225 230 235 240
Thr Cys Val Ser Ser Thr Ile Gly Gln Glu Arg Ile Thr Ser Ala Thr
245 250 255
Gln Trp Leu Arg Ala Asn Gly Lys Lys Gly Ile Ile Gly Glu Phe Ala
260 265 270
Gly Gly Ala Asn Asp Val Cys Glu Thr Ala Ile Thr Gly Met Leu Asp
275 280 285
Tyr Met Ala Gln Asn Thr Asp Val Trp Thr Gly Ala Ile Trp Trp Ala
290 295 300
Ala Gly Pro Trp Trp Gly Asp Tyr Ile Phe Ser Met Glu Pro Asp Asn
305 310 315 320
Gly Ile Ala Tyr Gln Gln Ile Leu Pro Ile Leu Thr Pro Tyr Leu
325 330 335
<210> 73
<211> 332
<212> PRT
<213> Aspergillus aculeatus
<400> 73
Met Lys Leu Leu Asn Leu Leu Val Ala Ala Ala Ala Ala Gly Ser Ala
1 5 10 15
Val Ala Ala Pro Thr His Glu His Thr Lys Arg Ala Ser Val Phe Glu
20 25 30
Trp Ile Gly Ser Asn Glu Ser Asp Ala Glu Phe Gly Thr Ala Ile Pro
35 40 45
Gly Thr Trp Gly Ile Asp Tyr Ile Phe Pro Asp Thr Ser Ala Ile Ala
50 55 60
Thr Leu Val Ser Lys Gly Met Asn Ile Phe Arg Val Gln Phe Met Met
65 70 75 80
Glu Arg Leu Val Pro Asn Ser Met Thr Gly Ser Tyr Asp Asp Ala Tyr
85 90 95
Leu Asn Asn Leu Thr Thr Val Val Asn Ala Ile Ala Ala Ala Gly Val
100 105 110
His Ala Ile Val Asp Pro His Asn Tyr Gly Arg Tyr Asn Asn Glu Ile
115 120 125
Ile Ser Ser Thr Ala Asp Phe Gln Thr Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly
130 135 140
Gln Phe Lys Asp Asn Asp Leu Val Ile Phe Asp Thr Asn Asn Glu Tyr
145 150 155 160
Asn Thr Met Asp Gln Thr Leu Val Leu Asp Leu Asn Gln Ala Ala Ile
165 170 175
Asp Gly Ile Arg Ala Ala Gly Ala Thr Ser Gln Tyr Ile Phe Ala Glu
180 185 190
Gly Asn Ser Trp Ser Gly Ala Trp Thr Trp Ala Asp Ile Asn Asp Asn
195 200 205
Met Lys Ala Leu Thr Asp Pro Gln Asp Lys Leu Val Tyr Glu Met His
210 215 220
Gln Tyr Leu Asp Ser Asp Gly Ser Gly Thr Ser Gly Val Cys Val Ser
225 230 235 240
Glu Thr Ile Gly Ala Glu Arg Leu Gln Ala Ala Thr Gln Trp Leu Lys
245 250 255
Asp Asn Gly Lys Val Asp Ile Leu Gly Glu Tyr Ala Gly Gly Ala Asn
260 265 270
Asp Val Cys Arg Thr Ala Ile Ala Gly Met Leu Glu Tyr Met Ala Asn
275 280 285
Asn Thr Asp Val Trp Lys Gly Ala Val Trp Trp Thr Ala Gly Pro Trp
290 295 300
Trp Ala Asp Tyr Met Phe Ser Met Glu Pro Pro Ser Gly Pro Ala Tyr
305 310 315 320
Ser Gly Met Leu Asp Val Leu Glu Pro Tyr Leu Gly
325 330
<210> 74
<211> 388
<212> PRT
<213> Humicola insolens
<400> 74
Met Lys His Ser Val Leu Ala Gly Leu Phe Ala Thr Gly Ala Leu Ala
1 5 10 15
Gln Gly Gly Ala Trp Gln Gln Cys Gly Gly Val Gly Phe Ser Gly Ser
20 25 30
Thr Ser Cys Val Ser Gly Tyr Thr Cys Val Tyr Leu Asn Asp Trp Tyr
35 40 45
Ser Gln Cys Gln Pro Gln Pro Thr Thr Leu Arg Thr Thr Thr Thr Pro
50 55 60
Gly Ala Thr Ser Thr Thr Arg Ser Ala Pro Ala Ala Thr Ser Thr Thr
65 70 75 80
Pro Ala Lys Gly Lys Phe Lys Trp Phe Gly Ile Asn Gln Ser Cys Ala
85 90 95
Glu Phe Gly Lys Gly Glu Tyr Pro Gly Leu Trp Gly Lys His Phe Thr
100 105 110
Phe Pro Ser Thr Ser Ser Ile Gln Thr His Ile Asn Asp Gly Phe Asn
115 120 125
Met Phe Arg Val Ala Phe Ser Met Glu Arg Leu Ala Pro Asn Gln Leu
130 135 140
Asn Ala Ala Phe Asp Ala Asn Tyr Leu Arg Asn Leu Thr Glu Thr Val
145 150 155 160
Asn Phe Ile Thr Gly Lys Gly Lys Tyr Ala Met Leu Asp Pro His Asn
165 170 175
Phe Gly Arg Tyr Tyr Glu Arg Ile Ile Thr Asp Lys Ala Ala Phe Ala
180 185 190
Ser Phe Phe Thr Lys Leu Ala Thr His Phe Ala Ser Asn Pro Leu Val
195 200 205
Val Phe Asp Thr Asn Asn Glu Tyr His Asp Met Asp Gln Gln Leu Val
210 215 220
Phe Asp Leu Asn Gln Ala Ala Ile Asp Ala Ile Arg Ala Ala Gly Ala
225 230 235 240
Thr Ser Gln Tyr Ile Met Val Glu Gly Asn Ser Trp Thr Gly Ala Trp
245 250 255
Thr Trp Asn Val Thr Asn Asn Asn Leu Ala Ala Leu Arg Asp Pro Glu
260 265 270
Asn Lys Leu Val Tyr Gln Met His Gln Tyr Leu Asp Ser Asp Gly Ser
275 280 285
Gly Thr Ser Thr Ala Cys Val Ser Thr Gln Val Gly Leu Gln Arg Val
290 295 300
Ile Gly Ala Thr Asn Trp Leu Arg Gln Asn Gly Lys Val Gly Leu Leu
305 310 315 320
Gly Glu Phe Ala Gly Gly Ala Asn Ser Val Cys Gln Gln Ala Ile Glu
325 330 335
Gly Met Leu Thr His Leu Gln Glu Asn Ser Asp Val Trp Thr Gly Ala
340 345 350
Leu Trp Trp Ala Gly Gly Pro Trp Trp Gly Asp Tyr Ile Tyr Ser Phe
355 360 365
Glu Pro Pro Ser Gly Ile Gly Tyr Thr Tyr Tyr Asn Ser Leu Leu Lys
370 375 380
Lys Tyr Val Pro
385
<210> 75
<211> 477
<212> PRT
<213> Orpinomyces joyonii
<400> 75
Met Lys Phe Phe Lys Asn Thr Leu Ala Leu Leu Thr Pro Val Ile Ala
1 5 10 15
Gly Ser Asn Ala Met Arg Asn Ile Pro Ser Lys Asp Leu Val Lys Glu
20 25 30
Leu Asn Ile Gly Trp Asn Leu Gly Asn Ala Leu Asp Ala His Cys Leu
35 40 45
Asp Lys Leu Asp Tyr Asn Lys Asp Gln Leu Ala Ser Glu Thr Cys Trp
50 55 60
Ala Asn Pro Lys Ala Thr Pro Gly Leu Phe Ser Ala Leu Lys Asn Gln
65 70 75 80
Gly Phe Asn Val Phe Arg Ile Pro Thr Thr Trp Thr Gly His Phe Gly
85 90 95
Asn Gly Pro Asp Tyr Lys Ile Ser Asp Val Trp Met Arg Arg Val His
100 105 110
Glu Val Val Asp Tyr Ala Leu Asn Thr Gly Ser Tyr Val Ile Leu Asn
115 120 125
Ile His His Glu Asn Trp Asn Tyr Ala Phe Ser Asn Asn Leu Gln Lys
130 135 140
Ala Lys Pro Ile Leu Ala Ala Ile Trp Lys Gln Ile Ala Ala Glu Phe
145 150 155 160
Ala Asn Tyr Asp Glu His Leu Ile Phe Glu Gly Met Asn Glu Pro Arg
165 170 175
Lys Val Asp His Pro Asn Glu Trp Asn Gly Gly Asp Gln Lys Gly Trp
180 185 190
Asp Phe Val Asn Glu Met Asn Ala Val Phe Leu Gln Thr Val Arg Ala
195 200 205
Ser Gly Gly Asn Asn Ala Ile Arg His Leu Met Ile Pro Thr Tyr Ala
210 215 220
Ala Cys Val Asn Asn Gly Ala Leu Glu Ser Tyr Phe Lys Lys Ser Pro
225 230 235 240
Thr Asn Asp Asn Lys Val Ile Ala Ser Val His Ser Tyr Val Pro Tyr
245 250 255
Asn Phe Ala Leu Asn Thr Gly Ala Gly Ala Glu Lys Thr Phe Gly Ser
260 265 270
Thr Ser Asp Ile Glu Trp Ala Met Asn Asn Ile Lys Arg Phe Leu Val
275 280 285
Asp Arg Asn Ile Pro Val Ile Ile Gly Glu Phe Gly Ala Met Asn Arg
290 295 300
Asp Asn Glu Ser Glu Arg Ala Arg Trp Ala Glu Tyr Tyr Ile Lys Ser
305 310 315 320
Ala Thr Ala Met Gly Val Pro Cys Val Leu Trp Asp Asn Gly Tyr Thr
325 330 335
Gln Gly Thr Gly Glu Leu Phe Gly Val Ile Asp Arg Asn Phe Tyr Arg
340 345 350
Ile Ile Phe Gln Gln Phe Ile Asn Gly Leu Met Lys Gly Leu Gly Gly
355 360 365
Lys Lys Thr Val Ala Pro Ala Pro Thr Thr Thr Ile Thr Thr Thr Thr
370 375 380
Thr Val Lys Val Gln Pro Thr Asn Asn Asn Glu Cys Phe Ser Thr Arg
385 390 395 400
Leu Gly Tyr Asn Cys Cys Asn Gly Cys Asp Val Phe Tyr Thr Asp Asn
405 410 415
Asp Gly Lys Trp Gly Val Glu Asn Gly Asn Trp Cys Gly Ile Lys Ser
420 425 430
Ser Cys Asp Asn Asn Gln Arg Tyr Cys Trp Ser Glu Arg Leu Gly Tyr
435 440 445
Pro Cys Cys Gln Tyr Thr Thr Asn Val Glu Tyr Thr Asp Asn Asp Gly
450 455 460
Arg Trp Gly Val Glu Asn Gly Asn Trp Cys Gly Ile Tyr
465 470 475
<210> 76
<211> 562
<212> PRT
<213> Acidothermus cellulolyticus
<400> 76
Met Pro Arg Ala Leu Arg Arg Val Pro Gly Ser Arg Val Met Leu Arg
1 5 10 15
Val Gly Val Val Val Ala Val Leu Ala Leu Val Ala Ala Leu Ala Asn
20 25 30
Leu Ala Val Pro Arg Pro Ala Arg Ala Ala Gly Gly Gly Tyr Trp His
35 40 45
Thr Ser Gly Arg Glu Ile Leu Asp Ala Asn Asn Val Pro Val Arg Ile
50 55 60
Ala Gly Ile Asn Trp Phe Gly Phe Glu Thr Cys Asn Tyr Val Val His
65 70 75 80
Gly Leu Trp Ser Arg Asp Tyr Arg Ser Met Leu Asp Gln Ile Lys Ser
85 90 95
Leu Gly Tyr Asn Thr Ile Arg Leu Pro Tyr Ser Asp Asp Ile Leu Lys
100 105 110
Pro Gly Thr Met Pro Asn Ser Ile Asn Phe Tyr Gln Met Asn Gln Asp
115 120 125
Leu Gln Gly Leu Thr Ser Leu Gln Val Met Asp Lys Ile Val Ala Tyr
130 135 140
Ala Gly Gln Ile Gly Leu Arg Ile Ile Leu Asp Arg His Arg Pro Asp
145 150 155 160
Cys Ser Gly Gln Ser Ala Leu Trp Tyr Thr Ser Ser Val Ser Glu Ala
165 170 175
Thr Trp Ile Ser Asp Leu Gln Ala Leu Ala Gln Arg Tyr Lys Gly Asn
180 185 190
Pro Thr Val Val Gly Phe Asp Leu His Asn Glu Pro His Asp Pro Ala
195 200 205
Cys Trp Gly Cys Gly Asp Pro Ser Ile Asp Trp Arg Leu Ala Ala Glu
210 215 220
Arg Ala Gly Asn Ala Val Leu Ser Val Asn Pro Asn Leu Leu Ile Phe
225 230 235 240
Val Glu Gly Val Gln Ser Tyr Asn Gly Asp Ser Tyr Trp Trp Gly Gly
245 250 255
Asn Leu Gln Gly Ala Gly Gln Tyr Pro Val Val Leu Asn Val Pro Asn
260 265 270
Arg Leu Val Tyr Ser Ala His Asp Tyr Ala Thr Ser Val Tyr Pro Gln
275 280 285
Thr Trp Phe Ser Asp Pro Thr Phe Pro Asn Asn Met Pro Gly Ile Trp
290 295 300
Asn Lys Asn Trp Gly Tyr Leu Phe Asn Gln Asn Ile Ala Pro Val Trp
305 310 315 320
Leu Gly Glu Phe Gly Thr Thr Leu Gln Ser Thr Thr Asp Gln Thr Trp
325 330 335
Leu Lys Thr Leu Val Gln Tyr Leu Arg Pro Thr Ala Gln Tyr Gly Ala
340 345 350
Asp Ser Phe Gln Trp Thr Phe Trp Ser Trp Asn Pro Asp Ser Gly Asp
355 360 365
Thr Gly Gly Ile Leu Lys Asp Asp Trp Gln Thr Val Asp Thr Val Lys
370 375 380
Asp Gly Tyr Leu Ala Pro Ile Lys Ser Ser Ile Phe Asp Pro Val Gly
385 390 395 400
Ala Ser Ala Ser Pro Ser Ser Gln Pro Ser Pro Ser Val Ser Pro Ser
405 410 415
Pro Ser Pro Ser Pro Ser Ala Ser Arg Thr Pro Thr Pro Thr Pro Thr
420 425 430
Pro Thr Ala Ser Pro Thr Pro Thr Leu Thr Pro Thr Ala Thr Pro Thr
435 440 445
Pro Thr Ala Ser Pro Thr Pro Ser Pro Thr Ala Ala Ser Gly Ala Arg
450 455 460
Cys Thr Ala Ser Tyr Gln Val Asn Ser Asp Trp Gly Asn Gly Phe Thr
465 470 475 480
Val Thr Val Ala Val Thr Asn Ser Gly Ser Val Ala Thr Lys Thr Trp
485 490 495
Thr Val Ser Trp Thr Phe Gly Gly Asn Gln Thr Ile Thr Asn Ser Trp
500 505 510
Asn Ala Ala Val Thr Gln Asn Gly Gln Ser Val Thr Ala Arg Asn Met
515 520 525
Ser Tyr Asn Asn Val Ile Gln Pro Gly Gln Asn Thr Thr Phe Gly Phe
530 535 540
Gln Ala Ser Tyr Thr Gly Ser Asn Ala Ala Pro Thr Val Ala Cys Ala
545 550 555 560
Ala Ser
<210> 77
<211> 499
<212> PRT
<213> Bacillus subtilis
<400> 77
Met Lys Arg Ser Ile Ser Ile Phe Ile Thr Cys Leu Leu Ile Thr Leu
1 5 10 15
Leu Thr Met Gly Gly Met Ile Ala Ser Pro Ala Ser Ala Ala Gly Thr
20 25 30
Lys Thr Pro Val Ala Lys Asn Gly Gln Leu Ser Ile Lys Gly Thr Gln
35 40 45
Leu Val Asn Arg Asp Gly Lys Ala Val Gln Leu Lys Gly Ile Ser Ser
50 55 60
His Gly Leu Gln Trp Tyr Gly Glu Phe Val Asn Lys Asp Ser Leu Lys
65 70 75 80
Trp Leu Arg Asp Asp Trp Gly Ile Thr Val Phe Arg Ala Ala Met Tyr
85 90 95
Thr Ala Asp Gly Gly Tyr Ile Asp Asn Pro Ser Val Lys Asn Lys Val
100 105 110
Lys Glu Ala Val Glu Ala Ala Lys Glu Leu Gly Ile Tyr Val Ile Ile
115 120 125
Asp Trp His Ile Leu Asn Asp Gly Asn Pro Asn Gln Asn Lys Glu Lys
130 135 140
Ala Lys Glu Phe Phe Lys Glu Met Ser Ser Leu Tyr Gly Asn Thr Pro
145 150 155 160
Asn Val Ile Tyr Glu Ile Ala Asn Glu Pro Asn Gly Asp Val Asn Trp
165 170 175
Lys Arg Asp Ile Lys Pro Tyr Ala Glu Glu Val Ile Ser Val Ile Arg
180 185 190
Lys Asn Asp Pro Asp Asn Ile Ile Ile Val Gly Thr Gly Thr Trp Ser
195 200 205
Gln Asp Val Asn Asp Ala Ala Asp Asp Gln Leu Lys Asp Ala Asn Val
210 215 220
Met Tyr Ala Leu His Phe Tyr Ala Gly Thr His Gly Gln Phe Leu Arg
225 230 235 240
Asp Lys Ala Asn Tyr Ala Leu Ser Lys Gly Ala Pro Val Phe Val Thr
245 250 255
Glu Trp Gly Thr Ser Asp Ala Ser Gly Asn Gly Gly Val Phe Leu Asp
260 265 270
Gln Ser Arg Glu Trp Leu Asn Tyr Leu Asp Ser Lys Thr Ile Ser Trp
275 280 285
Val Asn Trp Asn Leu Ser Asp Lys Gln Glu Ser Ser Ser Ala Leu Lys
290 295 300
Pro Gly Ala Ser Lys Thr Gly Gly Trp Arg Leu Ser Asp Leu Ser Ala
305 310 315 320
Ser Gly Thr Phe Val Arg Glu Asn Ile Leu Gly Thr Lys Asp Ser Thr
325 330 335
Lys Asp Ile Pro Glu Thr Pro Ala Lys Asp Lys Pro Thr Gln Glu Asn
340 345 350
Gly Ile Ser Val Gln Tyr Arg Ala Gly Asp Gly Ser Met Asn Ser Asn
355 360 365
Gln Ile Arg Pro Gln Leu Gln Ile Lys Asn Asn Gly Asn Thr Thr Val
370 375 380
Asp Leu Lys Asp Val Thr Ala Arg Tyr Trp Tyr Asn Ala Lys Asn Lys
385 390 395 400
Gly Gln Asn Val Asp Cys Asp Tyr Ala Gln Leu Gly Cys Gly Asn Met
405 410 415
Thr His Lys Phe Val Thr Leu His Lys Pro Lys Gln Gly Ala Asp Thr
420 425 430
Tyr Leu Glu Leu Gly Phe Lys Asn Gly Thr Leu Ala Pro Gly Ala Ser
435 440 445
Thr Gly Asn Ile Gln Leu Arg Leu His Asn Asp Asp Trp Ser Asn Tyr
450 455 460
Ala Gln Ser Gly Asp Tyr Ser Phe Phe Lys Ser Asn Thr Phe Lys Thr
465 470 475 480
Thr Lys Lys Ile Thr Leu Tyr Asp Gln Gly Lys Leu Ile Trp Gly Thr
485 490 495
Glu Pro Asn
<210> 78
<211> 409
<212> PRT
<213> Bacillus cellulosilyticus
<400> 78
Met Lys Lys Ile Thr Thr Ile Phe Val Val Leu Leu Met Thr Leu Ala
1 5 10 15
Leu Phe Ile Ile Gly Asn Thr Thr Ala Ala Asp Asp Tyr Ser Val Val
20 25 30
Glu Glu His Gly Gln Leu Ser Ile Ser Asn Gly Glu Leu Val Asn Asp
35 40 45
Arg Gly Glu Pro Val Gln Leu Lys Gly Met Ser Ser His Gly Leu Gln
50 55 60
Trp Tyr Gly Gln Phe Val Asn Tyr Glu Ser Met Lys Trp Leu Arg Asp
65 70 75 80
Asp Trp Gly Ile Thr Val Phe Arg Ala Ala Met Tyr Thr Ser Ser Gly
85 90 95
Gly Tyr Ile Glu Asp Pro Ser Val Lys Glu Lys Val Lys Glu Ala Val
100 105 110
Glu Ala Ala Ile Asp Leu Gly Ile Tyr Val Ile Ile Asp Trp His Ile
115 120 125
Leu Ser Asp Asn Asp Pro Asn Ile Tyr Lys Glu Glu Ala Lys Asp Phe
130 135 140
Phe Asp Glu Met Ser Glu Leu Tyr Gly Asp Tyr Pro Asn Val Ile Tyr
145 150 155 160
Glu Ile Ala Asn Glu Pro Asn Gly Ser Asp Val Thr Trp Asp Asn Gln
165 170 175
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180 185 190
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Gln Leu Phe Ala Asn Val Tyr Lys Asn Ala Ser Ser Pro Arg Ala Leu
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<213> Aspergillus niger
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Ser Asp Ser Ser Ala Thr Arg Tyr Asp Ala His Cys Gly Tyr Ser Asp
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Val Gln Leu Leu Thr Asn Ala Asn Pro Ala Phe
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<210> 86
<211> 494
<212> PRT
<213> Aspergillus oryzae
<400> 86
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1 5 10 15
Cys Arg Asn Tyr Ser Ala Ser Trp His His Leu Thr Asp Ser Ser Phe
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Gln Leu His Thr Gln Val Thr Asp Arg Val Cys Leu Asn Ile Cys Ile
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50 55 60
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Lys Asn Ala Ser Ser Pro Ala Ala Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val
340 345 350
Ala Asn Tyr Asn Ala Phe Ser Ile Asp Ser Cys Pro Ser Tyr Thr Gln
355 360 365
Gly Ser Thr Val Cys Asp Glu Lys Thr Tyr Ile Asn Asn Phe Ala Pro
370 375 380
Gln Leu Lys Ser Ala Gly Phe Asp Ala His Phe Ile Val Asp Thr Gly
385 390 395 400
Arg Asn Gly Asn Gln Pro Thr Gly Gln Ser Gln Trp Gly Asp Trp Cys
405 410 415
Asn Val Lys Asn Thr Gly Phe Gly Val Arg Pro Thr Thr Asp Thr Gly
420 425 430
Asp Glu Leu Val Asp Ala Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser
435 440 445
Asp Gly Thr Ser Asp Thr Ser Ala Glu Arg Tyr Asp Ala His Cys Gly
450 455 460
Tyr Ala Asp Ala Leu Thr Pro Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln
465 470 475 480
Ala Tyr Phe Glu Gln Leu Val Glu Asn Ala Asn Pro Ser Leu
485 490
<210> 87
<211> 400
<212> PRT
<213> Aspergillus niger
<400> 87
Met Arg Ala Ile Trp Pro Leu Val Ser Leu Phe Ser Ala Val Lys Ala
1 5 10 15
Leu Pro Ala Ala Ser Ala Thr Ala Ser Ala Ser Val Ala Ala Ser Ser
20 25 30
Ser Pro Ala Pro Thr Ala Ser Ala Thr Gly Asn Pro Phe Glu Gly Tyr
35 40 45
Gln Leu Tyr Ala Asn Pro Tyr Tyr Lys Ser Gln Val Glu Ser Ser Ala
50 55 60
Ile Pro Ser Leu Ser Ala Ser Ser Leu Val Ala Gln Ala Ser Ala Ala
65 70 75 80
Ala Asp Val Pro Ser Phe Tyr Trp Leu Asp Thr Ala Asp Lys Val Pro
85 90 95
Thr Met Gly Glu Tyr Leu Glu Asp Ile Gln Thr Gln Asn Ala Ala Gly
100 105 110
Ala Ser Pro Pro Ile Ala Gly Ile Phe Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp
115 120 125
Arg Asp Cys Ser Ala Leu Ala Ser Asn Gly Glu Tyr Ser Ile Ser Asp
130 135 140
Gly Gly Val Glu Lys Tyr Lys Ala Tyr Ile Asp Ser Ile Arg Glu Gln
145 150 155 160
Val Glu Thr Tyr Ser Asp Val Gln Thr Ile Leu Ile Ile Glu Pro Asp
165 170 175
Ser Leu Ala Asn Leu Val Thr Asn Leu Asp Val Ala Lys Cys Ala Asn
180 185 190
Ala Glu Ser Ala Tyr Leu Glu Cys Thr Asn Tyr Ala Leu Glu Gln Leu
195 200 205
Asn Leu Pro Asn Val Ala Met Tyr Leu Asp Ala Gly His Ala Gly Trp
210 215 220
Leu Gly Trp Pro Ala Asn Ile Gly Pro Ala Ala Gln Leu Tyr Ala Ser
225 230 235 240
Val Tyr Lys Asn Ala Ser Ser Pro Ala Ala Val Arg Gly Leu Ala Thr
245 250 255
Asn Val Ala Asn Phe Asn Ala Trp Ser Ile Asp Ser Cys Pro Ser Tyr
260 265 270
Thr Ser Gly Asn Asp Val Cys Asp Glu Lys Ser Tyr Ile Asn Ala Ile
275 280 285
Ala Pro Glu Leu Ser Ser Ala Gly Phe Asp Ala His Phe Ile Thr Asp
290 295 300
Thr Gly Arg Asn Gly Lys Gln Pro Thr Gly Gln Ser Ala Trp Gly Asp
305 310 315 320
Trp Cys Asn Val Lys Asp Thr Gly Phe Gly Ala Gln Pro Thr Thr Asp
325 330 335
Thr Gly Asp Glu Leu Ala Asp Ala Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly
340 345 350
Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asp Thr Ser Ser Ser Arg Tyr Asp Ala His
355 360 365
Cys Gly Tyr Ser Asp Ala Leu Gln Pro Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp
370 375 380
Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Gln Leu Leu Thr Asn Ala Asn Pro Ser Leu
385 390 395 400
<210> 88
<211> 457
<212> PRT
<213> Acremonium cellulolyticus
<400> 88
Met Leu Arg Tyr Leu Ser Ile Val Ala Ala Thr Ala Ile Leu Thr Gly
1 5 10 15
Val Glu Ala Gln Gln Ser Val Trp Gly Gln Cys Gly Gly Gln Gly Trp
20 25 30
Ser Gly Ala Thr Ser Cys Ala Ala Gly Ser Thr Cys Ser Thr Leu Asn
35 40 45
Pro Tyr Tyr Ala Gln Cys Ile Pro Gly Thr Ala Thr Ser Thr Thr Leu
50 55 60
Val Lys Thr Thr Ser Ser Thr Ser Val Gly Thr Thr Ser Pro Pro Thr
65 70 75 80
Thr Thr Thr Thr Lys Ala Ser Thr Thr Ala Thr Thr Thr Ala Ala Ala
85 90 95
Ser Gly Asn Pro Phe Ser Gly Tyr Gln Leu Tyr Ala Asn Pro Tyr Tyr
100 105 110
Ser Ser Glu Val His Thr Leu Ala Ile Pro Ser Leu Thr Gly Ser Leu
115 120 125
Ala Ala Ala Ala Thr Lys Ala Ala Glu Ile Pro Ser Phe Val Trp Leu
130 135 140
Asp Thr Ala Ala Lys Val Pro Thr Met Gly Thr Tyr Leu Ala Asn Ile
145 150 155 160
Glu Ala Ala Asn Lys Ala Gly Ala Ser Pro Pro Ile Ala Gly Ile Phe
165 170 175
Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Ala Ala Ser Asn
180 185 190
Gly Glu Tyr Thr Val Ala Asn Asn Gly Val Ala Asn Tyr Lys Ala Tyr
195 200 205
Ile Asp Ser Ile Val Ala Gln Leu Lys Ala Tyr Pro Asp Val His Thr
210 215 220
Ile Leu Ile Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Met Val Thr Asn Leu
225 230 235 240
Ser Thr Ala Lys Cys Ala Glu Ala Gln Ser Ala Tyr Tyr Glu Cys Val
245 250 255
Asn Tyr Ala Leu Ile Asn Leu Asn Leu Ala Asn Val Ala Met Tyr Ile
260 265 270
Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Ser Ala Asn Leu Ser Pro
275 280 285
Ala Ala Gln Leu Phe Ala Thr Val Tyr Lys Asn Ala Ser Ala Pro Ala
290 295 300
Ser Leu Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala Asn Tyr Asn Ala Trp Ser
305 310 315 320
Ile Ser Ser Pro Pro Ser Tyr Thr Ser Gly Asp Ser Asn Tyr Asp Glu
325 330 335
Lys Leu Tyr Ile Asn Ala Leu Ser Pro Leu Leu Thr Ser Asn Gly Trp
340 345 350
Pro Asn Ala His Phe Ile Met Asp Thr Ser Arg Asn Gly Val Gln Pro
355 360 365
Thr Lys Gln Gln Ala Trp Gly Asp Trp Cys Asn Val Ile Gly Thr Gly
370 375 380
Phe Gly Val Gln Pro Thr Thr Asn Thr Gly Asp Pro Leu Glu Asp Ala
385 390 395 400
Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asn Ser
405 410 415
Ser Ala Thr Arg Tyr Asp Phe His Cys Gly Tyr Ser Asp Ala Leu Gln
420 425 430
Pro Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Val Gln Leu
435 440 445
Leu Thr Asn Ala Asn Pro Ala Leu Val
450 455
<210> 89
<211> 459
<212> PRT
<213> Talaromyces emersonii
<400> 89
Met Arg Asn Leu Leu Ala Leu Ala Pro Ala Ala Leu Leu Val Gly Ala
1 5 10 15
Ala Glu Ala Gln Gln Ser Leu Trp Gly Gln Cys Gly Gly Ser Ser Trp
20 25 30
Thr Gly Ala Thr Ser Cys Ala Ala Gly Ala Thr Cys Ser Thr Ile Asn
35 40 45
Pro Tyr Tyr Ala Gln Cys Val Pro Ala Thr Ala Thr Pro Thr Thr Leu
50 55 60
Thr Thr Thr Thr Lys Pro Thr Ser Thr Gly Gly Ala Ala Pro Thr Thr
65 70 75 80
Pro Pro Pro Thr Thr Thr Gly Thr Thr Thr Ser Pro Val Val Thr Arg
85 90 95
Pro Ala Ser Ala Ser Gly Asn Pro Phe Glu Gly Tyr Gln Leu Tyr Ala
100 105 110
Asn Pro Tyr Tyr Ala Ser Glu Val Ile Ser Leu Ala Ile Pro Ser Leu
115 120 125
Ser Ser Glu Leu Val Pro Lys Ala Ser Glu Val Ala Lys Val Pro Ser
130 135 140
Phe Val Trp Leu Asp Gln Ala Ala Lys Val Pro Ser Met Gly Asp Tyr
145 150 155 160
Leu Lys Asp Ile Gln Ser Gln Asn Ala Ala Gly Ala Asp Pro Pro Ile
165 170 175
Ala Gly Ile Phe Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala
180 185 190
Ala Ala Ser Asn Gly Glu Phe Ser Ile Ala Asn Asn Gly Val Ala Leu
195 200 205
Tyr Lys Gln Tyr Ile Asp Ser Ile Arg Glu Gln Leu Thr Thr Tyr Ser
210 215 220
Asp Val His Thr Ile Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Val
225 230 235 240
Val Thr Asn Leu Asn Val Pro Lys Cys Ala Asn Ala Gln Asp Ala Tyr
245 250 255
Leu Glu Cys Ile Asn Tyr Ala Ile Thr Gln Leu Asp Leu Pro Asn Val
260 265 270
Ala Met Tyr Leu Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Gln Ala
275 280 285
Asn Leu Ala Pro Ala Ala Gln Leu Phe Ala Ser Val Tyr Lys Asn Ala
290 295 300
Ser Ser Pro Ala Ser Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala Asn Tyr
305 310 315 320
Asn Ala Trp Ser Ile Ser Arg Cys Pro Ser Tyr Thr Gln Gly Asp Ala
325 330 335
Asn Cys Asp Glu Glu Asp Tyr Val Asn Ala Leu Gly Pro Leu Phe Gln
340 345 350
Glu Gln Gly Phe Pro Ala Tyr Phe Ile Ile Asp Thr Ser Arg Asn Gly
355 360 365
Val Arg Pro Thr Lys Gln Ser Gln Trp Gly Asp Trp Cys Asn Val Ile
370 375 380
Gly Thr Gly Phe Gly Val Arg Pro Thr Thr Asp Thr Gly Asn Pro Leu
385 390 395 400
Glu Asp Ala Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr
405 410 415
Ser Asn Thr Thr Ser Pro Arg Tyr Asp Tyr His Cys Gly Leu Ser Asp
420 425 430
Ala Leu Gln Pro Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr Phe
435 440 445
Glu Gln Leu Leu Thr Asn Ala Asn Pro Leu Phe
450 455
<210> 90
<211> 457
<212> PRT
<213> Gibberella zeae
<400> 90
Met Thr Ala Tyr Lys Leu Phe Leu Ala Ala Ala Phe Ala Ala Thr Ala
1 5 10 15
Leu Ala Ala Pro Val Glu Glu Arg Gln Ser Cys Ser Asn Gly Val Trp
20 25 30
Ser Gln Cys Gly Gly Gln Asn Trp Ser Gly Thr Pro Cys Cys Thr Ser
35 40 45
Gly Asn Lys Cys Val Lys Val Asn Asp Phe Tyr Ser Gln Cys Gln Pro
50 55 60
Gly Ser Ala Asp Pro Ser Pro Thr Ser Thr Ile Val Ser Ala Thr Thr
65 70 75 80
Thr Lys Ala Thr Thr Thr Gly Ser Gly Gly Ser Val Thr Ser Pro Pro
85 90 95
Pro Val Ala Thr Asn Asn Pro Phe Ser Gly Val Asp Leu Trp Ala Asn
100 105 110
Asn Tyr Tyr Arg Ser Glu Val Ser Thr Leu Ala Ile Pro Lys Leu Ser
115 120 125
Gly Ala Met Ala Thr Ala Ala Ala Lys Val Ala Asp Val Pro Ser Phe
130 135 140
Gln Trp Met Asp Thr Tyr Asp His Ile Ser Phe Met Glu Asp Ser Leu
145 150 155 160
Ala Asp Ile Arg Lys Ala Asn Lys Ala Gly Gly Asn Tyr Ala Gly Gln
165 170 175
Phe Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Ala Ala Ser
180 185 190
Asn Gly Glu Tyr Ser Leu Asp Lys Asp Gly Lys Asn Lys Tyr Lys Ala
195 200 205
Tyr Ile Ala Asp Gln Gly Ile Leu Gln Asp Tyr Ser Asp Thr Arg Ile
210 215 220
Ile Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Met Val Thr Asn Met
225 230 235 240
Asn Val Pro Lys Cys Ala Asn Ala Ala Ser Ala Tyr Lys Glu Leu Thr
245 250 255
Ile His Ala Leu Lys Glu Leu Asn Leu Pro Asn Val Ser Met Tyr Ile
260 265 270
Asp Ala Gly His Gly Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Leu Pro Pro
275 280 285
Ala Ala Gln Leu Tyr Gly Gln Leu Tyr Lys Asp Ala Gly Lys Pro Ser
290 295 300
Arg Leu Arg Gly Leu Val Thr Asn Val Ser Asn Tyr Asn Ala Trp Lys
305 310 315 320
Leu Ser Ser Lys Pro Asp Tyr Thr Glu Ser Asn Pro Asn Tyr Asp Glu
325 330 335
Gln Lys Tyr Ile His Ala Leu Ser Pro Leu Leu Glu Gln Glu Gly Trp
340 345 350
Pro Gly Ala Lys Phe Ile Val Asp Gln Gly Arg Ser Gly Lys Gln Pro
355 360 365
Thr Gly Gln Lys Ala Trp Gly Asp Trp Cys Asn Ala Pro Gly Thr Gly
370 375 380
Phe Gly Leu Arg Pro Ser Ala Asn Thr Gly Asp Ala Leu Val Asp Ala
385 390 395 400
Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asp Thr
405 410 415
Ser Ala Ala Arg Tyr Asp Tyr His Cys Gly Ile Asp Gly Ala Val Lys
420 425 430
Pro Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Gln Leu
435 440 445
Leu Lys Asn Ala Asn Pro Ser Phe Leu
450 455
<210> 91
<211> 462
<212> PRT
<213> Fusarium oxysporum
<400> 91
Met Ala Tyr Lys Leu Ile Leu Ala Ala Phe Ala Ala Thr Ala Leu Ala
1 5 10 15
Ala Pro Val Glu Glu Arg Gln Ser Cys Ser Asn Gly Val Trp Ala Gln
20 25 30
Cys Gly Gly Gln Asn Trp Ser Gly Thr Pro Cys Cys Thr Ser Gly Asn
35 40 45
Lys Cys Val Lys Leu Asn Asp Phe Tyr Ser Gln Cys Gln Pro Gly Ser
50 55 60
Ala Glu Pro Ser Ser Thr Ala Ala Gly Pro Ser Ser Thr Thr Ala Thr
65 70 75 80
Lys Thr Thr Ala Thr Gly Gly Ser Ser Thr Thr Ala Gly Gly Ser Val
85 90 95
Thr Ser Ala Pro Pro Ala Ala Ser Asp Asn Pro Tyr Ala Gly Val Asp
100 105 110
Leu Trp Ala Asn Asn Tyr Tyr Arg Ser Glu Val Met Asn Leu Ala Val
115 120 125
Pro Lys Leu Ser Gly Ala Lys Ala Thr Ala Ala Ala Lys Val Ala Asp
130 135 140
Val Pro Ser Phe Gln Trp Met Asp Thr Tyr Asp His Ile Ser Leu Met
145 150 155 160
Glu Asp Thr Leu Ala Asp Ile Arg Lys Ala Asn Lys Ala Gly Gly Lys
165 170 175
Tyr Ala Gly Gln Phe Val Val Tyr Asp Leu Pro Asn Arg Asp Cys Ala
180 185 190
Ala Ala Ala Ser Asn Gly Glu Tyr Ser Leu Asp Lys Asp Gly Ala Asn
195 200 205
Lys Tyr Lys Ala Tyr Ile Ala Lys Ile Lys Gly Ile Leu Gln Asn Tyr
210 215 220
Ser Asp Thr Lys Val Ile Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn
225 230 235 240
Leu Val Thr Asn Leu Asn Val Asp Lys Cys Ala Lys Ala Glu Ser Ala
245 250 255
Tyr Lys Glu Leu Thr Val Tyr Ala Ile Lys Glu Leu Asn Leu Pro Asn
260 265 270
Val Ser Met Tyr Leu Asp Ala Gly His Gly Gly Trp Leu Gly Trp Pro
275 280 285
Ala Asn Ile Gly Pro Ala Ala Lys Leu Tyr Ala Gln Ile Tyr Lys Asp
290 295 300
Ala Gly Lys Pro Ser Arg Val Arg Gly Leu Val Thr Asn Val Ser Asn
305 310 315 320
Tyr Asn Gly Trp Lys Leu Ser Thr Lys Pro Asp Tyr Thr Glu Ser Asn
325 330 335
Pro Asn Tyr Asp Glu Gln Arg Tyr Ile Asn Ala Phe Ala Pro Leu Leu
340 345 350
Ala Gln Glu Gly Trp Ser Asn Val Lys Phe Ile Val Asp Gln Gly Arg
355 360 365
Ser Gly Lys Gln Pro Thr Gly Gln Lys Ala Gln Gly Asp Trp Cys Asn
370 375 380
Ala Lys Gly Thr Gly Phe Gly Leu Arg Pro Ser Thr Asn Thr Gly Asp
385 390 395 400
Ala Leu Ala Asp Ala Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp
405 410 415
Gly Thr Ser Asp Thr Ser Ala Ala Arg Tyr Asp Tyr His Cys Gly Leu
420 425 430
Asp Asp Ala Leu Lys Pro Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala
435 440 445
Tyr Phe Glu Gln Leu Leu Asp Asn Ala Asn Pro Ser Phe Leu
450 455 460
<210> 92
<211> 484
<212> PRT
<213> Neurospora crassa
<400> 92
Met Ala Ala Lys Lys Leu Leu Leu Ala Ala Ala Leu Thr Ala Ser Ala
1 5 10 15
Leu Ala Ala Pro Val Leu Glu Asp Arg Gln Asn Cys Gly Ser Ala Trp
20 25 30
Ser Gln Cys Gly Gly Ile Gly Trp Ser Gly Ala Thr Cys Cys Ser Ser
35 40 45
Gly Asn Ser Cys Val Glu Ile Asn Ser Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Pro
50 55 60
Gly Ala Gln Val Thr Thr Thr Ala Gly Ala Ser Ser Thr Ser Pro Thr
65 70 75 80
Ser Thr Ser Lys Val Ser Ser Thr Thr Ser Lys Val Thr Ser Ser Ser
85 90 95
Ala Ala Gln Pro Ile Thr Thr Thr Thr Ala Pro Ser Val Pro Thr Thr
100 105 110
Thr Ile Ala Gly Gly Ala Ser Ser Thr Ala Ser Phe Thr Gly Asn Pro
115 120 125
Phe Leu Gly Val Gln Gly Trp Ala Asn Ser Tyr Tyr Ser Ser Glu Ile
130 135 140
Tyr Asn His Ala Ile Pro Ser Met Thr Gly Ser Leu Ala Ala Gln Ala
145 150 155 160
Ser Ala Val Ala Lys Val Pro Thr Phe Gln Trp Leu Asp Arg Asn Val
165 170 175
Thr Val Asp Thr Leu Met Lys Ser Thr Leu Glu Glu Ile Arg Ala Ala
180 185 190
Asn Lys Ala Gly Ala Asn Pro Pro Tyr Ala Ala His Phe Val Val Tyr
195 200 205
Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Ala Ala Ser Asn Gly Glu Phe
210 215 220
Ser Ile Ala Asn Gly Gly Val Ala Asn Tyr Lys Thr Tyr Ile Asn Ala
225 230 235 240
Ile Arg Lys Leu Leu Ile Glu Tyr Ser Asp Ile Arg Thr Ile Leu Val
245 250 255
Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Leu Val Thr Asn Thr Asn Val Ala
260 265 270
Lys Cys Ala Asn Ala Ala Ser Ala Tyr Arg Glu Cys Thr Asn Tyr Ala
275 280 285
Ile Thr Gln Leu Asp Leu Pro His Val Ala Gln Tyr Leu Asp Ala Gly
290 295 300
His Gly Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Ile Gln Pro Ala Ala Thr
305 310 315 320
Leu Phe Ala Asp Ile Tyr Lys Ala Ala Gly Lys Pro Lys Ser Val Arg
325 330 335
Gly Leu Val Thr Asn Val Ser Asn Tyr Asn Gly Trp Ser Leu Ser Ser
340 345 350
Ala Pro Ser Tyr Thr Thr Pro Asn Pro Asn Tyr Asp Glu Lys Lys Tyr
355 360 365
Ile Glu Ala Phe Ser Pro Leu Leu Asn Ala Ala Gly Phe Pro Ala Gln
370 375 380
Phe Ile Val Asp Thr Gly Arg Ser Gly Lys Gln Pro Thr Gly Gln Ile
385 390 395 400
Glu Gln Gly Asp Trp Cys Asn Ala Ile Gly Thr Gly Phe Gly Val Arg
405 410 415
Pro Thr Thr Asn Thr Gly Ser Ser Leu Ala Asp Ala Phe Val Trp Val
420 425 430
Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asp Thr Ser Ala Thr Arg
435 440 445
Tyr Asp Tyr His Cys Gly Leu Ser Asp Ala Leu Lys Pro Ala Pro Glu
450 455 460
Ala Gly Gln Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Gln Leu Leu Lys Asn Ala
465 470 475 480
Asn Pro Ala Phe
<210> 93
<211> 435
<212> PRT
<213> Aspergillus nidulans
<400> 93
Met Gln Ile Glu Phe Tyr Gln Gly Arg Arg Arg His Cys Ser Ala Trp
1 5 10 15
Ala Phe Leu Asp Arg Phe Gly Ile Gly Val Pro Gly Arg Asp Ser Ile
20 25 30
Leu Ser Ile Ser Met Arg Ala Leu Ala Thr Met Leu Thr Leu Gly Ala
35 40 45
Val Ser Val Asn Ala Leu Pro Gln Ala Thr Ser Thr Pro Ala Gly Thr
50 55 60
Pro Ser Ser Ser Gly Ile Pro Val Gln Ala Thr Gly Asn Pro Phe Glu
65 70 75 80
Gly Tyr Gln Leu Tyr Ala Asn Pro Tyr Tyr Ser Ser Glu Val Met Thr
85 90 95
Leu Ala Val Pro Ser Met Thr Gly Ser Leu Ala Glu Gln Ala Thr His
100 105 110
Ala Ala Glu Ile Pro Ser Phe His Trp Leu Asp Thr Thr Ala Lys Val
115 120 125
Pro Thr Met Gly Glu Tyr Leu Ala Asp Ile Lys Glu Gln Asn Asp Ala
130 135 140
Gly Ala Asn Pro Pro Ile Ala Gly Ile Phe Val Val Tyr Asn Leu Pro
145 150 155 160
Asp Arg Asp Cys Ala Ala Leu Ala Ser Asn Gly Glu Leu Ser Ile Ala
165 170 175
Asp Gly Gly Val Glu Lys Tyr Lys Glu Tyr Ile Asp Ala Ile Arg Ala
180 185 190
His Ala Val Glu Tyr Ser Asp Thr Asn Ile Ile Leu Ile Ile Glu Pro
195 200 205
Asp Ser Leu Ala Asn Leu Val Thr Asn Leu Asn Val Glu Lys Cys Ala
210 215 220
Asn Ala Gln Asp Ala Tyr Leu Glu Cys Thr Asn Tyr Ala Ile Thr Gln
225 230 235 240
Leu Asp Leu Pro Asn Val Ser Met Tyr Leu Asp Ala Gly His Ala Gly
245 250 255
Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Ile Gly Pro Ala Ala Gln Leu Phe Ala
260 265 270
Gly Val Tyr Gln Asp Ala Gly Ala Pro Ala Ala Leu Arg Gly Leu Ala
275 280 285
Thr Asn Val Ala Asn Tyr Asn Ala Phe Ser Ile Asp Thr Cys Pro Ser
290 295 300
Tyr Thr Ser Gln Asn Ala Val Cys Asp Glu Lys Gly Tyr Ile Asn Ser
305 310 315 320
Phe Ala Pro Glu Leu Ser Ala Ala Gly Trp Asp Ala His Phe Ile Val
325 330 335
Asp Thr Gly Arg Asn Gly Lys Gln Pro Thr Gly Gln Ile Glu Trp Gly
340 345 350
Asp Trp Cys Asn Val Lys Gly Thr Gly Phe Gly Val Arg Pro Thr Thr
355 360 365
Asp Thr Gly Asp Glu Leu Val Asp Ala Phe Val Trp Val Lys Pro Gly
370 375 380
Gly Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asp Gln Ser Ala Glu Arg Tyr Asp Ala
385 390 395 400
His Cys Gly Ala Ala Ala Ala Leu Gln Pro Ala Pro Glu Ala Gly Thr
405 410 415
Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Gln Leu Val Ala Asn Ala Asn Pro Pro
420 425 430
Leu Ser Ser
435
<210> 94
<211> 407
<212> PRT
<213> Aspergillus tubingensis
<220>
<221> misc_feature
<222> (301)..(301)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (339)..(339)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<220>
<221> misc_feature
<222> (355)..(355)
<223> Xaa can be any naturally occurring amino acid
<400> 94
Met Asn Met His Ser Ile Asn Met Arg Ala Ile Trp Pro Leu Val Ser
1 5 10 15
Leu Phe Ser Ala Val Lys Ala Leu Pro Ala Ala Ser Ala Thr Ala Ser
20 25 30
Ala Ser Val Ala Ala Ser Ser Ser Pro Ala Pro Thr Ala Ser Ala Thr
35 40 45
Gly Asn Pro Phe Glu Gly Tyr Gln Leu Tyr Val Asn Pro Tyr Tyr Lys
50 55 60
Ser Gln Val Glu Ser Ser Ala Ile Pro Ser Leu Ser Ala Ser Ser Leu
65 70 75 80
Val Ala Gln Ala Ser Ala Ala Ala Asp Val Pro Ser Phe Tyr Trp Leu
85 90 95
Asp Thr Ala Asp Lys Val Pro Thr Met Gly Glu Tyr Leu Asp Asp Ile
100 105 110
Gln Thr Gln Asn Ala Ala Gly Ala Asn Pro Pro Ile Ala Gly Ile Phe
115 120 125
Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Leu Ala Ser Asn
130 135 140
Gly Glu Tyr Ala Ile Ser Asp Gly Gly Val Glu Lys Tyr Lys Ala Tyr
145 150 155 160
Ile Asp Ser Ile Arg Glu Gln Val Glu Thr Tyr Ser Asp Val Gln Thr
165 170 175
Ile Leu Ile Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Leu Val Thr Asn Leu
180 185 190
Asp Val Ala Lys Cys Ala Asn Ala Gln Ser Ala Tyr Leu Glu Cys Thr
195 200 205
Asn Tyr Ala Leu Glu Gln Leu Asn Leu Pro Asn Val Ala Met Tyr Leu
210 215 220
Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Ile Gly Pro
225 230 235 240
Ala Ala Glu Leu Tyr Ala Ser Val Tyr Lys Asn Ala Ser Ser Pro Ala
245 250 255
Ala Val Arg Gly Leu Ala Thr Asx Val Ala Asn Phe Asn Ala Trp Ser
260 265 270
Ile Asp Thr Cys Pro Ser Tyr Thr Ser Gly Asn Asp Val Cys Asp Glu
275 280 285
Lys Ser Tyr Ile Asn Ala Phe Ala Pro Glu Leu Ser Xaa Ala Gly Phe
290 295 300
Asp Ala His Phe Ile Thr Asp Thr Gly Arg Asn Gly Lys Gln Pro Thr
305 310 315 320
Gly Gln Ser Ala Trp Gly Asp Trp Gly Asn Val Lys Asp Thr Gly Phe
325 330 335
Gly Ala Xaa Pro Thr Thr Asp Thr Gly Asn Glu Leu Ala Asp Ala Phe
340 345 350
Val Trp Xaa Asn Pro Gly Gly Lys Ser Asp Gly Thr Ser Asp Thr Ser
355 360 365
Ser Ser Arg Tyr Asp Ala His Cys Gly Tyr Ser Asp Ala Leu Gln Pro
370 375 380
Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Gln Leu Leu
385 390 395 400
Thr Asn Ala Asn Pro Ser Leu
405
<210> 95
<211> 487
<212> PRT
<213> Magnaporthe grisea
<400> 95
Met Ala Ser Lys Leu Phe Leu Ala Ala Ala Leu Leu Gln Gly Ala Leu
1 5 10 15
Ser Ser Pro Leu Ala Val Glu Glu Arg Gln Ala Cys Ala Ala Gln Trp
20 25 30
Gly Gln Cys Gly Gly Gln Asp Tyr Thr Gly Pro Thr Cys Cys Gln Ser
35 40 45
Gly Ser Thr Cys Val Val Ser Asn Gln Trp Tyr Ser Gln Cys Leu Pro
50 55 60
Gly Ser Ser Asn Pro Thr Thr Thr Ser Arg Thr Ser Thr Ser Ser Ser
65 70 75 80
Ser Ser Thr Ser Arg Thr Ser Ser Ser Thr Ser Arg Pro Pro Ser Ser
85 90 95
Val Pro Thr Thr Pro Thr Ser Val Pro Pro Thr Ile Thr Thr Thr Pro
100 105 110
Thr Thr Thr Pro Thr Gly Gly Ser Gly Pro Gly Thr Thr Ala Ser Phe
115 120 125
Thr Gly Asn Pro Phe Ala Gly Val Asn Leu Phe Pro Asn Lys Phe Tyr
130 135 140
Ser Ser Glu Val His Thr Leu Ala Ile Pro Ser Leu Thr Gly Ser Leu
145 150 155 160
Val Ala Lys Ala Ser Ala Val Ala Gln Val Pro Ser Phe Gln Trp Leu
165 170 175
Asp Ile Ala Ala Lys Val Glu Thr Leu Met Pro Gly Ala Leu Ala Asp
180 185 190
Val Arg Ala Ala Asn Ala Ala Gly Gly Asn Tyr Ala Ala Gln Leu Val
195 200 205
Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Ala Ala Ser Asn Gly
210 215 220
Glu Phe Ser Ile Ala Asp Gly Gly Val Val Lys Tyr Lys Ala Tyr Ile
225 230 235 240
Asp Ala Ile Arg Lys Gln Leu Leu Ala Tyr Ser Asp Val Arg Thr Ile
245 250 255
Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Met Val Thr Asn Met Gly
260 265 270
Val Pro Lys Cys Ala Gly Ala Lys Asp Ala Tyr Leu Glu Cys Thr Ile
275 280 285
Tyr Ala Val Lys Gln Leu Asn Leu Pro His Val Ala Met Tyr Leu Asp
290 295 300
Gly Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Leu Gln Pro Ala
305 310 315 320
Ala Asp Leu Phe Gly Lys Leu Tyr Ala Asp Ala Gly Lys Pro Ser Gln
325 330 335
Leu Arg Gly Met Ala Thr Asn Val Ala Asn Tyr Asn Ala Trp Asp Leu
340 345 350
Thr Thr Ala Pro Ser Tyr Thr Thr Pro Asn Pro Asn Phe Asp Glu Lys
355 360 365
Lys Tyr Ile Ser Ala Phe Ala Pro Leu Leu Ala Ala Lys Gly Trp Ser
370 375 380
Ala His Phe Ile Ile Asp Gln Gly Arg Ser Gly Lys Gln Pro Thr Gly
385 390 395 400
Gln Lys Glu Trp Gly His Trp Cys Asn Gln Gln Gly Val Gly Phe Gly
405 410 415
Arg Arg Pro Ser Ala Asn Thr Gly Ser Glu Leu Ala Asp Ala Phe Val
420 425 430
Trp Ile Lys Pro Gly Gly Glu Cys Asp Gly Val Ser Asp Pro Thr Ala
435 440 445
Pro Arg Phe Asp His Phe Cys Gly Thr Asp Tyr Gly Ala Met Ser Asp
450 455 460
Ala Pro Gln Ala Gly Gln Trp Phe Gln Lys Tyr Phe Glu Met Leu Leu
465 470 475 480
Thr Asn Ala Asn Pro Pro Leu
485
<210> 96
<211> 477
<212> PRT
<213> Chaetomium thermophilum
<400> 96
Met Ala Lys Gln Leu Leu Leu Thr Ala Ala Leu Ala Ala Thr Ser Leu
1 5 10 15
Ala Ala Pro Leu Leu Glu Glu Arg Gln Ser Cys Ser Ser Val Trp Gly
20 25 30
Gln Cys Gly Gly Ile Asn Tyr Asn Gly Pro Thr Cys Cys Gln Ser Gly
35 40 45
Ser Val Cys Thr Tyr Leu Asn Asp Trp Tyr Ser Gln Cys Ile Pro Gly
50 55 60
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65 70 75 80
Ser Thr Thr Ser Thr Ser Ser Val Arg Pro Thr Thr Ser Asn Thr Pro
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100 105 110
Thr Ala Ser Tyr Asn Gly Asn Pro Phe Ser Gly Val Gln Leu Trp Ala
115 120 125
Asn Thr Tyr Tyr Ser Ser Glu Val His Thr Leu Ala Ile Pro Ser Leu
130 135 140
Ser Pro Glu Leu Ala Ala Lys Ala Ala Lys Val Ala Glu Val Pro Ser
145 150 155 160
Phe Gln Trp Leu Asp Arg Asn Val Thr Val Asp Thr Leu Phe Ser Gly
165 170 175
Thr Leu Ala Glu Ile Arg Ala Ala Asn Gln Arg Gly Ala Asn Pro Pro
180 185 190
Tyr Ala Gly Ile Phe Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala
195 200 205
Ala Ala Ala Ser Asn Gly Glu Trp Ser Ile Ala Asn Asn Gly Ala Asn
210 215 220
Asn Tyr Lys Arg Tyr Ile Asp Arg Ile Arg Glu Leu Leu Ile Gln Tyr
225 230 235 240
Ser Asp Ile Arg Thr Ile Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn
245 250 255
Met Val Thr Asn Met Asn Val Gln Lys Cys Ser Asn Ala Ala Ser Thr
260 265 270
Tyr Lys Glu Leu Thr Val Tyr Ala Leu Lys Gln Leu Asn Leu Pro His
275 280 285
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290 295 300
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305 310 315 320
Ala Gly Arg Pro Ala Ala Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala Asn
325 330 335
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340 345 350
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370 375 380
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435 440 445
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450 455 460
Tyr Phe Glu Gln Leu Leu Ile Asn Ala Asn Pro Pro Leu
465 470 475
<210> 97
<211> 476
<212> PRT
<213> Chaetomium thermophilum
<400> 97
Met Ala Lys Gln Leu Leu Leu Thr Ala Ala Leu Ala Ala Ile Ser Leu
1 5 10 15
Ala Ala Pro Leu Leu Glu Glu Arg Gln Ser Cys Ser Ser Val Trp Gly
20 25 30
Gln Cys Gly Gly Ile Asn Tyr Asn Gly Pro Thr Cys Cys Gln Ser Gly
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Ser Val Cys Ala Tyr Leu Asn Asp Trp Tyr Ser Gln Cys Ile Pro Gly
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Asn Thr Tyr Tyr Ser Ser Glu Val His Thr Leu Ala Ile Pro Ser Leu
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<212> PRT
<213> Stilbella annulata
<400> 98
Met Ala Gly Arg Phe Phe Leu Ser Ala Ala Phe Leu Ala Ser Ala Ala
1 5 10 15
Leu Ala Val Pro Leu Glu Glu Arg Gln Asn Cys Ser Pro Gln Trp Ala
20 25 30
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130 135 140
Thr Phe Gln Trp Ile Asp Lys Met Asp Lys Leu Pro Leu Ile Asp Glu
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165 170 175
Ser Ile Leu Val Val Tyr Asn Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Ala
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<212> PRT
<213> Humicola insolens
<400> 99
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1 5 10 15
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Asn Tyr Lys Gly Tyr Ile Asn Arg Ile Arg Glu Ile Leu Ile Ser Phe
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Ser Asp Val Arg Thr Ile Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn
245 250 255
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260 265 270
Tyr Arg Glu Leu Thr Ile Tyr Ala Leu Lys Gln Leu Asp Leu Pro His
275 280 285
Val Ala Met Tyr Met Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro
290 295 300
Ala Asn Ile Gln Pro Ala Ala Glu Leu Phe Ala Lys Ile Tyr Glu Asp
305 310 315 320
Ala Gly Lys Pro Arg Ala Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala Asn
325 330 335
Tyr Asn Ala Trp Ser Ile Ser Ser Pro Pro Pro Tyr Thr Ser Pro Asn
340 345 350
Pro Asn Tyr Asp Glu Lys His Tyr Ile Glu Ala Phe Arg Pro Leu Leu
355 360 365
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370 375 380
Gly Lys Gln Pro Thr Gly Gln Lys Glu Trp Gly His Trp Cys Asn Ala
385 390 395 400
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420 425 430
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Asp Ala Leu Lys Pro Ala Pro Glu Ala Gly Gln Trp Phe Gln Ala Tyr
450 455 460
Phe Glu Gln Leu Leu Arg Asn Ala Asn Pro Pro Phe
465 470 475
<210> 100
<211> 360
<212> PRT
<213> Humicola insolens
<400> 100
Gly Asn Pro Phe Glu Gly Val Gln Leu Trp Ala Asn Asn Tyr Tyr Arg
1 5 10 15
Ser Glu Val His Thr Leu Ala Ile Pro Gln Ile Thr Asp Pro Ala Leu
20 25 30
Arg Ala Ala Ala Ser Ala Val Ala Glu Val Pro Ser Phe Gln Trp Leu
35 40 45
Asp Arg Asn Val Thr Val Asp Thr Leu Leu Val Gln Thr Leu Ser Glu
50 55 60
Ile Arg Glu Ala Asn Gln Ala Gly Ala Asn Pro Gln Tyr Ala Ala Gln
65 70 75 80
Ile Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Ala Ala Ser
85 90 95
Asn Gly Glu Trp Ala Ile Ala Asn Asn Gly Val Asn Asn Tyr Lys Ala
100 105 110
Tyr Ile Asn Arg Ile Arg Glu Ile Leu Ile Ser Phe Ser Asp Val Arg
115 120 125
Thr Ile Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Met Val Thr Asn
130 135 140
Met Asn Val Pro Lys Cys Ser Gly Ala Ala Ser Thr Tyr Arg Glu Leu
145 150 155 160
Thr Ile Tyr Ala Leu Lys Gln Leu Asp Leu Pro His Val Ala Met Tyr
165 170 175
Met Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Ile Gln
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245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
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Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Cys Asp Gly Thr Ser Asp Thr
305 310 315 320
Thr Ala Ala Arg Tyr Asp Tyr His Cys Gly Leu Glu Asp Ala Leu Lys
325 330 335
Pro Ala Pro Glu Ala Gly Gln Trp Phe Asn Glu Tyr Phe Ile Gln Leu
340 345 350
Leu Arg Asn Ala Asn Pro Pro Phe
355 360
<210> 101
<211> 389
<212> PRT
<213> Cochliobolus heterostrophus
<400> 101
Met Leu Ser Asn Val Phe Leu Thr Ala Ala Leu Ala Ala Gly Leu Ala
1 5 10 15
Gln Ala Leu Pro Gln Ala Thr Pro Thr Pro Thr Ala Ala Pro Ser Gly
20 25 30
Asn Pro Phe Ala Gly Lys Asn Phe Tyr Ala Asn Pro Tyr Tyr Ser Ser
35 40 45
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50 55 60
Ala Ala Thr Ala Val Ala Lys Val Gly Ser Phe Val Trp Met Asp Thr
65 70 75 80
Met Ala Lys Val Pro Leu Met Asp Thr Tyr Leu Ala Asp Ile Lys Ala
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Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Leu Ala Ser Asn Gly Glu Leu Lys
115 120 125
Ile Asp Glu Gly Gly Val Glu Lys Tyr Lys Thr Gln Tyr Ile Asp Lys
130 135 140
Ile Ala Ala Ile Ile Lys Lys Tyr Pro Asp Val Lys Ile Asn Leu Ala
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165 170 175
Lys Cys Ser Arg Ala Ala Pro Tyr Tyr Lys Glu Leu Thr Ala Tyr Ala
180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
Leu Phe Ala Glu Val Tyr Lys Ala Ala Gly Ser Pro Arg Gly Val Arg
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Gly Ile Val Thr Asn Val Ser Asn Tyr Asn Ala Leu Arg Val Ser Ser
245 250 255
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260 265 270
Ile Asn Ala Leu Ala Pro Leu Leu Lys Asn Glu Gly Phe Pro Ala His
275 280 285
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Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asp Thr Ser Ala Ala Arg
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Tyr Asp Ala His Cys Gly Arg Asn Ser Ala Phe Lys Pro Ala Pro Glu
355 360 365
Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Met Leu Leu Lys Asn Ala
370 375 380
Asn Pro Ala Leu Ala
385
<210> 102
<211> 438
<212> PRT
<213> Agaricus bisporus
<400> 102
Met Phe Lys Phe Ala Ala Leu Leu Ala Leu Ala Ser Leu Val Pro Gly
1 5 10 15
Phe Val Gln Ala Gln Ser Pro Val Trp Gly Gln Cys Gly Gly Asn Gly
20 25 30
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65 70 75 80
Gly Thr Gly Pro Thr Ser Gly Ala Gly Asn Pro Tyr Thr Gly Lys Thr
85 90 95
Val Trp Leu Ser Pro Phe Tyr Ala Asp Glu Val Ala Gln Ala Ala Ala
100 105 110
Asp Ile Ser Asn Pro Ser Leu Ala Thr Lys Ala Ala Ser Val Ala Lys
115 120 125
Ile Pro Thr Phe Val Trp Phe Asp Thr Val Ala Lys Val Pro Asp Leu
130 135 140
Gly Gly Tyr Leu Ala Asp Ala Arg Ser Lys Asn Gln Leu Val Gln Ile
145 150 155 160
Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Leu Ala Ser Asn
165 170 175
Gly Glu Phe Ser Leu Ala Asn Asp Gly Leu Asn Lys Tyr Lys Asn Tyr
180 185 190
Val Asp Gln Ile Ala Ala Gln Ile Lys Gln Phe Pro Asp Val Ser Val
195 200 205
Val Ala Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Leu Val Thr Asn Leu
210 215 220
Asn Val Gln Lys Cys Ala Asn Ala Gln Ser Ala Tyr Lys Glu Gly Val
225 230 235 240
Ile Tyr Ala Val Gln Lys Leu Asn Ala Val Gly Val Thr Met Tyr Ile
245 250 255
Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Leu Ser Pro
260 265 270
Ala Ala Gln Leu Phe Ala Gln Ile Tyr Arg Asp Ala Gly Ser Pro Arg
275 280 285
Asn Leu Arg Gly Ile Ala Thr Asn Val Ala Asn Phe Asn Ala Leu Arg
290 295 300
Ala Ser Ser Pro Asp Pro Ile Thr Gln Gly Asn Ser Asn Tyr Asp Glu
305 310 315 320
Ile His Tyr Ile Glu Ala Leu Ala Pro Met Leu Ser Asn Ala Gly Phe
325 330 335
Pro Ala His Phe Ile Val Asp Gln Gly Arg Ser Gly Val Gln Asn Ile
340 345 350
Arg Asp Gln Trp Gly Asp Trp Cys Asn Val Lys Gly Ala Gly Phe Gly
355 360 365
Gln Arg Pro Thr Thr Asn Thr Gly Ser Ser Leu Ile Asp Ala Ile Val
370 375 380
Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Cys Asp Gly Thr Ser Asp Asn Ser Ser
385 390 395 400
Pro Arg Phe Asp Ser His Cys Ser Leu Ser Asp Ala His Gln Pro Ala
405 410 415
Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Thr Leu Val Ala
420 425 430
Asn Ala Asn Pro Ala Leu
435
<210> 103
<211> 454
<212> PRT
<213> Polyporus arcularius
<400> 103
Met Ser Lys Phe Ala Ser Leu Leu Ala Leu Leu Ala Ile Val Pro Ser
1 5 10 15
Leu Ala Tyr Ala Gln Ala Pro Val Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly
20 25 30
Trp Ser Gly Ala Thr Thr Cys Val Ser Gly Ser Val Cys Thr Lys Gln
35 40 45
Asn Asp Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Gly Ala Ala Ser Ser Ala Pro
50 55 60
Thr Ser Pro Pro Thr Thr Ser Ala Pro Ser Ser Thr Pro Val Ser Thr
65 70 75 80
Pro Pro Thr Gly Thr Thr Thr Gly Gly Ser Ala Pro Ser Ser Thr Pro
85 90 95
Ala Ala Gly Asn Pro Phe Val Gly Val Thr Pro Phe Leu Ser Pro Tyr
100 105 110
Tyr Ala Ala Glu Val Ala Ala Ala Ala Asp Ala Ile Thr Asp Ser Thr
115 120 125
Leu Lys Ala Lys Ala Ala Ser Val Ala Lys Ile Pro Thr Phe Thr Trp
130 135 140
Leu Asp Ser Val Ala Lys Val Pro Asp Leu Gly Thr Tyr Leu Ala Asp
145 150 155 160
Ala Ser Ala Leu Gln Lys Ser Ser Gly Gln Pro Gln Val Val Gln Ile
165 170 175
Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Lys Ala Ser Asn
180 185 190
Gly Glu Phe Ser Ile Ala Asp Gly Gly Gln Ala Lys Tyr Tyr Asp Tyr
195 200 205
Ile Asp Gln Ile Val Ala Gln Ile Lys Lys Phe Pro Asp Val Arg Val
210 215 220
Ile Ala Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Leu Val Thr Asn Leu
225 230 235 240
Asn Val Gln Lys Cys Ala Asn Ala Gln Thr Thr Tyr Lys Ala Cys Val
245 250 255
Thr Tyr Ala Leu Asn Gln Leu Ala Ser Val Gly Val Tyr Gln Tyr Met
260 265 270
Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Ile Gln Pro
275 280 285
Ala Ala Gln Leu Phe Ala Asp Met Phe Lys Ser Ala Asn Ser Ser Lys
290 295 300
Phe Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala Asn Tyr Asn Ala Leu Ser
305 310 315 320
Ala Ala Ser Pro Asp Pro Ile Thr Gln Gly Asp Pro Asn Tyr Asp Glu
325 330 335
Leu His Tyr Ile Asn Ala Leu Gly Pro Met Leu Ala Gln Gln Gly Phe
340 345 350
Pro Ala Gln Phe Val Val Asp Gln Gly Arg Ser Gly Gln Gln Asn Leu
355 360 365
Arg Gln Gln Trp Gly Asp Trp Cys Asn Ile Lys Gly Ala Gly Phe Gly
370 375 380
Thr Arg Pro Thr Thr Asn Thr Gly Ser Ser Leu Ile Asp Ala Ile Val
385 390 395 400
Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asn Ser Ser Ser
405 410 415
Pro Arg Phe Asp Ser Thr Cys Ser Leu Ser Asp Ala Thr Gln Pro Ala
420 425 430
Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Thr Tyr Phe Glu Thr Leu Val Ser
435 440 445
Lys Ala Asn Pro Pro Leu
450
<210> 104
<211> 444
<212> PRT
<213> Lentinula edodes Stamets
<400> 104
Met Lys Ile Thr Ser Thr Gly Leu Leu Ala Leu Ser Ser Leu Leu Pro
1 5 10 15
Phe Ala Leu Gly Gln Ser Gln Leu Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly
20 25 30
Trp Ser Gly Ala Thr Thr Cys Val Ser Gly Ala Thr Cys Thr Val Val
35 40 45
Asn Ala Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Gly Ser Ala Ser Ala Pro Pro
50 55 60
Thr Ser Thr Ser Ser Ile Gly Thr Gly Thr Thr Thr Ser Ser Ala Pro
65 70 75 80
Gly Ser Thr Gly Thr Thr Thr Pro Ala Ala Gly Asn Pro Phe Thr Gly
85 90 95
Tyr Glu Ile Tyr Leu Ser Pro Tyr Tyr Ala Asn Glu Ile Ala Ala Ala
100 105 110
Val Thr Gln Ile Ser Asp Pro Thr Thr Ala Ala Ala Ala Ala Lys Val
115 120 125
Ala Asn Ile Pro Thr Phe Ile Trp Leu Asp Gln Val Ala Lys Val Pro
130 135 140
Asp Leu Gly Thr Tyr Leu Ala Asp Ala Ser Ala Lys Gln Lys Ser Glu
145 150 155 160
Gly Lys Asn Tyr Leu Val Gln Ile Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg
165 170 175
Asp Cys Ala Ala Leu Ala Ser Asn Gly Glu Phe Thr Ile Ala Asp Asn
180 185 190
Gly Glu Ala Asn Tyr His Asp Tyr Ile Asp Gln Ile Val Ala Gln Ile
195 200 205
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210 215 220
Leu Ala Asn Leu Val Thr Asn Leu Ser Val Ala Lys Cys Ala Asn Ala
225 230 235 240
Gln Thr Thr Tyr Leu Glu Cys Val Thr Tyr Ala Met Gln Gln Leu Ser
245 250 255
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260 265 270
Gly Trp Pro Ala Asn Leu Ser Pro Ala Ala Gln Leu Phe Thr Ser Leu
275 280 285
Tyr Ser Asn Ala Gly Ser Pro Ser Gly Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn
290 295 300
Val Ala Asn Tyr Asn Ala Leu Val Ala Thr Thr Pro Asp Pro Ile Thr
305 310 315 320
Gln Gly Asp Pro Asn Tyr Asp Glu Met Leu Tyr Ile Glu Ala Leu Ala
325 330 335
Pro Leu Leu Gly Ser Phe Pro Ala His Phe Ile Val Asp Gln Gly Arg
340 345 350
Ser Gly Val Gln Asp Ile Arg Gln Gln Trp Gly Asp Trp Cys Asn Val
355 360 365
Leu Gly Ala Gly Phe Gly Thr Gln Pro Thr Thr Asn Thr Gly Ser Ser
370 375 380
Leu Ile Asp Ser Ile Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Cys Asp Gly
385 390 395 400
Thr Ser Asn Thr Ser Ser Pro Arg Tyr Asp Ala His Cys Gly Leu Pro
405 410 415
Asp Ala Thr Pro Asn Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr
420 425 430
Phe Glu Thr Leu Val Glu Lys Ala Asn Pro Pro Leu
435 440
<210> 105
<211> 443
<212> PRT
<213> Lentinula edodes
<400> 105
Met Lys Ile Thr Ser Thr Gly Leu Leu Ala Leu Ser Ser Leu Leu Pro
1 5 10 15
Phe Ala Leu Gly Gln Ser Gln Leu Tyr Ala Gln Cys Gly Gly Ile Gly
20 25 30
Trp Ser Gly Ala Thr Thr Cys Val Ser Gly Ala Thr Cys Thr Val Val
35 40 45
Asn Ala Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Gly Ser Ala Ser Ala Pro Pro
50 55 60
Thr Ser Thr Ser Ser Ile Gly Thr Gly Thr Thr Thr Ser Ser Ala Pro
65 70 75 80
Gly Ser Thr Gly Thr Thr Thr Pro Ala Ala Gly Asn Pro Phe Thr Glu
85 90 95
Gln Ile Tyr Leu Ser Pro Tyr Tyr Ala Asn Glu Ile Ala Ala Ala Val
100 105 110
Thr Gln Ile Ser Asp Pro Thr Thr Ala Ala Ala Ala Ala Lys Val Ala
115 120 125
Asn Ile Pro Thr Phe Ile Trp Leu Asp Gln Val Ala Lys Val Pro Asp
130 135 140
Leu Gly Thr Tyr Leu Ala Asp Ala Ser Ala Lys Gln Lys Ser Glu Gly
145 150 155 160
Lys Asn Tyr Leu Val Gln Ile Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp
165 170 175
Cys Ala Ala Leu Ala Ser Asn Gly Glu Phe Thr Ile Ala Asp Asn Gly
180 185 190
Glu Ala Asn Tyr His Asp Tyr Ile Asp Gln Ile Val Ala Gln Ile Lys
195 200 205
Gln Tyr Pro Asp Val His Val Val Ala Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu
210 215 220
Ala Asn Leu Val Thr Asn Leu Ser Val Ala Lys Cys Ala Asn Ala Gln
225 230 235 240
Thr Thr Tyr Leu Glu Cys Val Thr Tyr Ala Met Gln Gln Leu Ser Ala
245 250 255
Val Gly Val Thr Met Tyr Leu Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly
260 265 270
Trp Pro Ala Asn Leu Ser Pro Ala Ala Gln Leu Phe Thr Ser Leu Tyr
275 280 285
Ser Asn Ala Gly Ser Pro Ser Gly Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val
290 295 300
Ala Asn Tyr Asn Ala Leu Val Ala Thr Thr Pro Asp Pro Ile Thr Gln
305 310 315 320
Gly Asp Pro Asn Tyr Asp Glu Met Leu Tyr Ile Glu Ala Leu Ala Pro
325 330 335
Leu Leu Gly Ser Phe Pro Ala His Phe Ile Val Asp Gln Gly Arg Ser
340 345 350
Gly Val Gln Asp Ile Arg Gln Gln Trp Gly Asp Trp Cys Asn Val Leu
355 360 365
Gly Ala Gly Phe Gly Thr Gln Pro Thr Thr Asn Thr Gly Ser Ser Leu
370 375 380
Ile Asp Ser Ile Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Cys Asp Gly Thr
385 390 395 400
Ser Asn Thr Ser Ser Pro Arg Tyr Asp Ala His Cys Gly Leu Pro Asp
405 410 415
Ala Thr Pro Asn Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr Phe
420 425 430
Glu Thr Leu Val Glu Lys Ala Asn Pro Pro Leu
435 440
<210> 106
<211> 390
<212> PRT
<213> Malbranchea cinnamomea
<400> 106
Met Arg Asp Ser Leu Phe Thr Leu Leu Ser Leu Ala Leu Gly Ser Ala
1 5 10 15
Ser Ala Ser Pro Phe Leu Leu Pro Arg Gln Ala Asn Ser Ser Asn Pro
20 25 30
Phe Ala Gly His Thr Ile Tyr Pro Asn Pro Tyr Tyr Ser Asn Glu Ile
35 40 45
Asp Glu Phe Ala Ile Pro Ala Leu Gln Glu Thr Asp Pro Ala Leu Val
50 55 60
Glu Lys Ala Ala Leu Val Lys Glu Val Gly Thr Phe Phe Trp Ile Asp
65 70 75 80
Val Val Ala Lys Val Pro Asp Ile Gly Pro Tyr Leu Gln Gly Ile Gln
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Glu Ala Asn Ala Ala Gly Gln Asn Pro Pro Tyr Ile Gly Ala Ile Val
100 105 110
Val Tyr Asp Leu Pro Asn Arg Asp Cys Ala Ala Ala Ala Ser Asn Gly
115 120 125
Glu Phe Ser Leu Glu Asp Gly Gly Glu Glu Lys Tyr Arg Gly Tyr Ile
130 135 140
Asp Gly Ile Arg Glu Gln Ile Glu Lys Tyr Pro Asp Val Arg Val Ala
145 150 155 160
Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Met Val Thr Asn Leu Asn
165 170 175
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180 185 190
Tyr Ala Leu Lys Gln Leu Asp Leu Pro Asn Val Trp Thr Tyr Ile Asp
195 200 205
Ala Gly His Ser Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Ile Glu Pro Ala
210 215 220
Ala Glu Ile Phe Val Glu Val Trp Asn Ala Ala Gly Arg Pro Lys Ser
225 230 235 240
Thr Arg Gly Phe Ala Thr Asn Val Ser Asn Tyr Asn Gly Tyr Ser Leu
245 250 255
Ser Thr Ala Pro Pro Tyr Thr Glu Pro Asn Pro Asn Phe Asp Glu Val
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275 280 285
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305 310 315 320
Thr Arg Pro Thr Thr Asp Thr Gly Asn Glu Tyr Val Asp Ser Ile Val
325 330 335
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340 345 350
Glu Arg Tyr Asp Tyr His Cys Gly Leu Glu Asp Ala Leu Lys Pro Ala
355 360 365
Pro Glu Ala Gly Gln Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Gln Leu Leu Arg
370 375 380
Asn Ala Asn Pro Pro Phe
385 390
<210> 107
<211> 460
<212> PRT
<213> Phanerochaete chrysosporium
<400> 107
Met Lys Ser Thr Ala Phe Phe Ala Ala Leu Val Thr Leu Leu Pro Ala
1 5 10 15
Tyr Val Ala Gly Gln Ala Ser Glu Trp Gly Gln Cys Gly Gly Ile Gly
20 25 30
Trp Thr Gly Pro Thr Thr Cys Val Ser Gly Thr Thr Cys Thr Val Leu
35 40 45
Asn Pro Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu Pro Gly Ser Ala Val Thr Thr Thr
50 55 60
Ser Val Ile Thr Ser His Ser Ser Ser Val Ser Ser Val Ser Ser His
65 70 75 80
Ser Gly Ser Ser Thr Ser Thr Ser Ser Pro Thr Gly Pro Thr Gly Thr
85 90 95
Asn Pro Pro Pro Pro Pro Ser Ala Asn Asn Pro Trp Thr Gly Phe Gln
100 105 110
Ile Phe Leu Ser Pro Tyr Tyr Ala Asn Glu Val Ala Ala Ala Ala Lys
115 120 125
Gln Ile Thr Asp Pro Thr Leu Ser Ser Lys Ala Ala Ser Val Ala Asn
130 135 140
Ile Pro Thr Phe Thr Trp Leu Asp Ser Val Ala Lys Ile Pro Asp Leu
145 150 155 160
Gly Thr Tyr Leu Ala Ser Ala Ser Ala Leu Gly Lys Ser Thr Gly Thr
165 170 175
Lys Gln Leu Val Gln Ile Val Ile Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys
180 185 190
Ala Ala Lys Ala Ser Asn Gly Glu Phe Ser Ile Ala Asn Asn Gly Gln
195 200 205
Ala Asn Tyr Glu Asn Tyr Ile Asp Gln Ile Val Ala Gln Ile Gln Gln
210 215 220
Phe Pro Asp Val Arg Val Val Ala Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala
225 230 235 240
Asn Leu Val Thr Asn Leu Asn Val Gln Lys Cys Ala Asn Ala Lys Thr
245 250 255
Thr Tyr Leu Ala Cys Val Asn Tyr Ala Leu Thr Asn Leu Ala Lys Val
260 265 270
Gly Val Tyr Met Tyr Met Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp
275 280 285
Pro Ala Asn Leu Ser Pro Ala Ala Gln Leu Phe Thr Gln Val Trp Gln
290 295 300
Asn Ala Gly Lys Ser Pro Phe Ile Lys Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala
305 310 315 320
Asn Tyr Asn Ala Leu Gln Ala Ala Ser Pro Asp Pro Ile Thr Gln Gly
325 330 335
Asn Pro Asn Tyr Asp Glu Ile His Tyr Ile Asn Ala Leu Ala Pro Leu
340 345 350
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355 360 365
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370 375 380
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385 390 395 400
Phe Ile Asp Ser Ile Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Cys Asp Gly
405 410 415
Thr Ser Asn Ser Ser Ser Pro Arg Tyr Asp Ser Thr Cys Ser Leu Pro
420 425 430
Asp Ala Ala Gln Pro Ala Pro Glu Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr
435 440 445
Phe Gln Thr Leu Val Ser Ala Ala Asn Pro Pro Leu
450 455 460
<210> 108
<211> 442
<212> PRT
<213> Volvariella volvacea
<400> 108
Met Ser Arg Phe Ser Ala Leu Thr Ala Leu Leu Leu Ser Leu Pro Leu
1 5 10 15
Leu Ala Ile Ala Gln Ser Pro Leu Tyr Gly Gln Cys Gly Gly Asn Gly
20 25 30
Trp Thr Gly Pro Lys Thr Cys Val Ser Gly Ala Thr Cys Thr Val Ile
35 40 45
Asn Asp Trp Tyr Trp Gln Cys Leu Pro Gly Asn Gly Pro Thr Ser Ser
50 55 60
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65 70 75 80
Pro Thr Val Pro Ala Ala Gly Asn Pro Tyr Thr Gly Tyr Glu Ile Tyr
85 90 95
Leu Ser Pro Tyr Tyr Ala Ala Glu Ala Gln Ala Ala Ala Ala Gln Ile
100 105 110
Ser Asp Ala Thr Gln Lys Ala Lys Ala Leu Lys Val Ala Gln Ile Pro
115 120 125
Thr Phe Thr Trp Phe Asp Val Ile Ala Lys Thr Ser Thr Leu Gly Asp
130 135 140
Tyr Leu Ala Glu Ala Ser Ala Leu Gly Lys Ser Ser Gly Lys Lys Tyr
145 150 155 160
Leu Val Gln Ile Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala
165 170 175
Leu Ala Ser Asn Gly Glu Phe Ser Ile Ala Asn Asn Gly Leu Asn Asn
180 185 190
Tyr Lys Gly Tyr Ile Asp Gln Leu Val Ala Gln Ile Lys Lys Tyr Pro
195 200 205
Asp Val Arg Val Val Ala Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Leu
210 215 220
Val Thr Asn Leu Asn Val Ser Lys Cys Ala Asn Ala Gln Thr Ala Tyr
225 230 235 240
Lys Ala Gly Val Thr Tyr Ala Leu Gln Gln Leu Asn Ser Val Gly Val
245 250 255
Tyr Met Tyr Leu Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala
260 265 270
Asn Leu Asn Pro Ala Ala Gln Leu Phe Ser Gln Leu Tyr Arg Asp Ala
275 280 285
Gly Ser Pro Gln Tyr Val Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala Asn Tyr
290 295 300
Asn Ala Leu Ser Ala Ser Ser Pro Asp Pro Val Thr Gln Gly Asn Pro
305 310 315 320
Asn Tyr Asp Glu Leu His Tyr Ile Asn Ala Leu Ala Pro Ala Leu Gln
325 330 335
Ser Gly Gly Phe Pro Ala His Phe Ile Val Asp Gln Gly Arg Ser Gly
340 345 350
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355 360 365
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370 375 380
Asp Ala Ile Val Trp Ile Lys Pro Gly Gly Glu Cys Asp Gly Thr Thr
385 390 395 400
Asn Thr Ser Ser Pro Arg Tyr Asp Ser His Cys Gly Leu Ser Asp Ala
405 410 415
Thr Pro Asn Ala Pro Glu Ala Gly Gln Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu
420 425 430
Thr Leu Val Arg Asn Ala Ser Pro Pro Leu
435 440
<210> 109
<211> 395
<212> PRT
<213> Chrysosporium lucknowense
<400> 109
Met Lys Phe Val Gln Ser Ala Thr Leu Ala Phe Ala Ala Thr Ala Leu
1 5 10 15
Ala Ala Pro Ser Arg Thr Thr Pro Gln Lys Pro Arg Gln Ala Ser Ala
20 25 30
Gly Cys Ala Ser Ala Val Thr Leu Asp Ala Ser Thr Asn Val Phe Gln
35 40 45
Gln Tyr Thr Leu His Pro Asn Asn Phe Tyr Arg Ala Glu Val Glu Ala
50 55 60
Ala Ala Glu Ala Ile Ser Asp Ser Ala Leu Ala Glu Lys Ala Arg Lys
65 70 75 80
Val Ala Asp Val Gly Thr Phe Leu Trp Leu Asp Thr Ile Glu Asn Ile
85 90 95
Gly Arg Leu Glu Pro Ala Leu Glu Asp Val Pro Cys Glu Asn Ile Val
100 105 110
Gly Leu Val Ile Tyr Asp Leu Pro Gly Arg Asp Cys Ala Ala Lys Ala
115 120 125
Ser Asn Gly Glu Leu Lys Val Gly Glu Leu Asp Arg Tyr Lys Thr Glu
130 135 140
Tyr Ile Asp Lys Ile Ala Glu Ile Leu Lys Ala His Ser Asn Thr Ala
145 150 155 160
Phe Ala Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Pro Asn Leu Val Thr Asn
165 170 175
Ser Asp Leu Gln Thr Cys Gln Gln Ser Ala Ser Gly Tyr Arg Glu Gly
180 185 190
Val Ala Tyr Ala Leu Lys Gln Leu Asn Leu Pro Asn Val Val Met Tyr
195 200 205
Ile Asp Ala Gly His Gly Gly Trp Leu Gly Trp Asp Ala Asn Leu Lys
210 215 220
Pro Gly Ala Gln Glu Leu Ala Ser Val Tyr Lys Ser Ala Gly Ser Pro
225 230 235 240
Ser Gln Val Arg Gly Ile Ser Thr Asn Val Ala Gly Trp Asn Ala Trp
245 250 255
Asp Gln Glu Pro Gly Glu Phe Ser Asp Ala Ser Asp Ala Gln Tyr Asn
260 265 270
Lys Cys Gln Asn Glu Lys Ile Tyr Ile Asn Thr Phe Gly Ala Glu Leu
275 280 285
Lys Ser Ala Gly Met Pro Asn His Ala Ile Ile Asp Thr Gly Arg Asn
290 295 300
Gly Val Thr Gly Leu Arg Asp Glu Trp Gly Asp Trp Cys Asn Val Asn
305 310 315 320
Gly Ala Gly Phe Gly Val Arg Pro Thr Ala Asn Thr Gly Asp Glu Leu
325 330 335
Ala Asp Ala Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr
340 345 350
Ser Asp Ser Ser Ala Ala Arg Tyr Asp Ser Phe Cys Gly Lys Pro Asp
355 360 365
Ala Phe Lys Pro Ser Pro Glu Ala Gly Thr Trp Asn Gln Ala Tyr Phe
370 375 380
Glu Met Leu Leu Lys Asn Ala Asn Pro Ser Phe
385 390 395
<210> 110
<211> 465
<212> PRT
<213> Pleurotus sajor-caju
<400> 110
Met Phe Lys Phe Ser Thr Leu Leu Gly Leu Val Ala Leu Val Pro Ala
1 5 10 15
Phe Thr Leu Ala Val Gly Glu Trp Gly Gln Cys Gly Gly Ile Asn Tyr
20 25 30
Thr Gly Ser Thr Thr Cys Asp Ala Gly Leu Val Cys Asn Val Ile Asn
35 40 45
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50 55 60
Ile Gly Tyr Asp Val Ser His Val Leu Trp Cys Gln Ile Tyr Leu Ser
65 70 75 80
Pro Tyr Tyr Ala Asp Glu Val Ala Ala Ala Val Ser Ala Ile Ser Asn
85 90 95
Pro Ala Leu Ala Ala Lys Ala Ala Ser Val Ala Asn Ile Pro Thr Phe
100 105 110
Ile Trp Phe Asp Val Val Ala Lys Val Pro Thr Leu Gly Thr Tyr Leu
115 120 125
Ala Asp Ala Leu Ser Ile Gln Gln Ser Thr Gly Arg Asn Gln Leu Val
130 135 140
Gln Ile Val Val Tyr Asp Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Leu Ala
145 150 155 160
Ser Asn Gly Glu Phe Ser Ile Ala Asn Asn Gly Leu Ala Asn Tyr Lys
165 170 175
Asn Tyr Val Asp Gln Ile Val Ala Gln Ile Ala Arg Thr Cys Cys Pro
180 185 190
Leu Val Thr Ser Ala Ile Thr Asp Leu Ala Cys Leu Ser Glu Tyr Pro
195 200 205
Gln Ile Arg Val Val Ala Val Val Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Met
210 215 220
Val Thr Asn Leu Asn Val Pro Lys Cys Ala Gly Ala Gln Ala Ala Tyr
225 230 235 240
Thr Glu Gly Val Thr Tyr Ala Leu Gln Lys Leu Asn Thr Val Gly Val
245 250 255
Tyr Ser Tyr Val Asp Ala Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala
260 265 270
Asn Leu Gly Pro Ala Ala Gln Leu Phe Ala Asn Leu Tyr Thr Asn Ala
275 280 285
Gly Ser Pro Ser Phe Phe Arg Gly Leu Ala Thr Asn Val Ala Asn Tyr
290 295 300
Asn Leu Leu Asn Ala Pro Ser Pro Asp Pro Val Thr Ser Pro Asn Ala
305 310 315 320
Asn Tyr Asp Glu Ile His Tyr Ile Asn Val Ser Asp Cys Phe Val Leu
325 330 335
Ile Trp Thr Ser Leu Thr Ile Cys Ile Ile Ala Leu Ala Pro Glu Leu
340 345 350
Ser Ser Arg Gly Phe Pro Ala His Phe Ile Val Asp Gln Gly Arg Ser
355 360 365
Ala Val Gln Gly Ile Arg Gly Ala Trp Gly Asp Trp Cys Asn Val Asp
370 375 380
Asn Ala Gly Phe Gly Thr Arg Pro Thr Thr Ser Thr Gly Ser Ser Leu
385 390 395 400
Ile Asp Ala Ile Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr
405 410 415
Ser Asp Thr Ser Ala Val Arg Tyr Asp Gly His Cys Gly Leu Ala Ser
420 425 430
Ala Lys Lys Pro Ala Pro Glu Ala Met Ala Ser Val Tyr Ser His Ser
435 440 445
Ser Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Met Leu Val Ala Asn Ala Val Pro Ala
450 455 460
Leu
465
<210> 111
<211> 436
<212> PRT
<213> Trametes versicolor
<400> 111
Met Phe Lys Phe Ala Ala Ala Gly Gln Cys Gly Gly Val Gly Trp Thr
1 5 10 15
Gly Arg Thr Thr Cys Val Ser Gly Ser Val Cys Ser Lys Gln Asn Asp
20 25 30
Tyr Tyr Ser Gln Cys Ile Ser Gly Ala Gly Ala Pro Gly Thr Thr Val
35 40 45
Ala Pro Thr Thr Ala Pro Thr Ala Pro Ala Thr Ser Ala Pro Gly Gly
50 55 60
Ser Pro Thr Thr Val Ser Ala Pro Ser Thr Pro Ser Ser Thr Pro Ala
65 70 75 80
Ala Gly Asn Pro Phe Thr Gly Phe Gln Val Tyr Leu Ser Pro Tyr Tyr
85 90 95
Ser Ala Glu Ile Ala Ser Ala Ala Ala Ala Val Thr Asp Ser Ser Leu
100 105 110
Lys Ala Lys Ala Ala Ser Val Ala Asn Ile Pro Thr Phe Thr Trp Leu
115 120 125
Asp Ser Val Ala Lys Val Pro Asp Leu Gly Thr Tyr Leu Ala Asp Ala
130 135 140
Ser Ser Ile Gln Thr Lys Thr Gly Gln Lys Gln Leu Val Pro Ile Val
145 150 155 160
Val Tyr Glu Leu Pro Asp Arg Asp Cys Ala Ala Lys Ala Ser Asn Gly
165 170 175
Glu Phe Ser Ile Ala Asp Ala Gly Ala Glu Asn Tyr Lys Asp Tyr Ile
180 185 190
Asp Gln Ile Val Pro Gln Ile Lys Gln Phe Pro Asp Val Arg Val Val
195 200 205
Ala Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Ala Asn Leu Val Thr Asn Leu Asn
210 215 220
Val Gln Lys Cys Ala Asn Gly Gly Thr Tyr Lys Ala Ser Val Thr Tyr
225 230 235 240
Ala Leu Gln Gln Leu Ser Ser Val Gly Val Thr Met Tyr Met Asp Ala
245 250 255
Gly His Ala Gly Trp Leu Gly Trp Pro Ala Asn Ile Gln Pro Gly Ser
260 265 270
Glu Val Phe Ala Glu Met Phe Lys Ser Ala Asp Phe Val Ala Phe Val
275 280 285
Arg Ala Phe Ala Thr Asn Val Arg Glu Tyr Asn Ala Leu Thr Ala Ala
290 295 300
Phe Pro Arg Pro Ile Thr Gln Gly Asn Pro Asn Tyr Asp Glu Phe Pro
305 310 315 320
Tyr Ile Gln Arg Val Arg Pro Met Leu Lys Ser Pro Gly Phe Pro Ala
325 330 335
Gln Phe Val Val Asp Gln Gly Arg Ala Gly Gln Gln Asn Phe Arg Gln
340 345 350
Gln Trp Gly Asp Trp Cys Asn Ile Lys Gly Ala Gly Phe Gly Thr Arg
355 360 365
Pro Thr Thr Ser Thr Gly Asn Pro Leu Ile Asp Ala Ile Ile Trp Val
370 375 380
Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr Ser Asn Ser Ser Ser Pro Arg
385 390 395 400
Tyr Asp Ser Thr Leu Leu Ser Val Arg Arg Asp Asp Pro Ala Pro Glu
405 410 415
Ala Gly Thr Trp Phe Gln Ala Tyr Phe Glu Thr Leu Val Ser Lys Pro
420 425 430
Thr Arg Pro Leu
435
<210> 112
<211> 396
<212> PRT
<213> Neurospora crassa
<400> 112
Met Lys Phe Ser Asn Ser Ala Ala Leu Ala Phe Ala Ala Thr Ala Ile
1 5 10 15
Ala Ala Pro Ser Thr Pro Thr Leu Gln Glu Lys Pro Arg Glu Val Gln
20 25 30
Ala Gly Cys Ala Ser Ala Val Thr Leu Asp Ala Ser Thr Asn Val Trp
35 40 45
Lys Lys Tyr Thr Leu His Ala Asn Lys Phe Tyr Arg Thr Glu Val Glu
50 55 60
Ala Ala Val Ala Ala Ile Ser Asp Ser Ser Leu Ala Ala Lys Ala Ala
65 70 75 80
Lys Val Ala Asn Val Gly Ser Phe Leu Trp Leu Asp Ser Ile Glu Asn
85 90 95
Ile Gly Lys Leu Glu Pro Ala Leu Glu Asp Val Pro Cys Asp His Ile
100 105 110
Leu Gly Leu Val Ile Tyr Asp Leu Pro Gly Arg Asp Cys Ala Ala Lys
115 120 125
Ala Ser Asn Gly Glu Leu Ala Val Gly Glu Leu Ser Arg Tyr Lys Thr
130 135 140
Glu Tyr Ile Asp Ala Ile Val Lys Ile Leu Lys Ala His Pro Lys Thr
145 150 155 160
Ala Phe Ala Leu Val Ile Glu Pro Asp Ser Leu Pro Asn Leu Val Thr
165 170 175
Asn Ser Asp Leu Gln Thr Cys Lys Asp Ser Ala Ser Gly Tyr Arg Asp
180 185 190
Gly Val Ala Tyr Ala Leu Arg Asn Leu Asn Leu Pro Asn Val Val Met
195 200 205
Tyr Ile Asp Ala Gly His Gly Gly Trp Leu Gly Trp Asp Ala Asn Leu
210 215 220
Lys Pro Gly Ala Gln Glu Leu Ala Lys Ala Tyr Lys Ala Ala Gly Ser
225 230 235 240
Pro Lys Gln Val Arg Gly Ile Ala Thr Asn Val Ala Gly Trp Asn Gln
245 250 255
Trp Asp Leu Thr Pro Gly Glu Phe Ser Lys Ala Ser Asp Ala Lys Tyr
260 265 270
Asn Lys Cys Gln Asn Glu Lys Leu Tyr Leu Asp Asn Phe Gly Pro Ala
275 280 285
Leu Lys Ser Ala Gly Met Pro Asn His Ala Ile Val Asp Thr Gly Arg
290 295 300
Asn Gly Val Ser Gly Leu Arg Gln Glu Trp Gly Asn Trp Cys Asn Val
305 310 315 320
Asn Gly Ala Gly Phe Gly Val Arg Pro Thr Ser Ser Thr Gly His Asp
325 330 335
Leu Ala Asp Ala Phe Val Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly
340 345 350
Thr Ser Asp Ser Ser Ala Thr Arg Tyr Asp Ser Phe Cys Gly Lys Ser
355 360 365
Asp Ala Tyr Gln Pro Ser Pro Glu Ala Gly Ser Trp Asn Gln Asp Tyr
370 375 380
Phe Glu Met Leu Val Lys Asn Ala Lys Pro Ser Phe
385 390 395
<210> 113
<211> 395
<212> PRT
<213> Magnaporthe grisea
<400> 113
Met Lys Phe Cys His Ser Ala Leu Leu Ala Leu Val Gly Thr Ala Leu
1 5 10 15
Ala Ser Pro Ser Arg Thr Val Lys Ser Gln Pro Gly Gln Ala Ala Ala
20 25 30
Gly Cys Ser Ser Ala Val Thr Leu Asp Ala Ser Thr Asn Val Phe Ser
35 40 45
Lys Tyr Thr Leu His Pro Asn Ser Phe Tyr Arg Ala Glu Val Glu Ala
50 55 60
Ala Ala Glu Ala Ile Ser Asp Ser Thr Leu Lys Ala Gln Ala Leu Lys
65 70 75 80
Val Ala Asp Val Gly Ser Phe Leu Trp Ile Asp Thr Ile Ser Ala Ile
85 90 95
Ser Arg Ile Glu Pro Gly Val Ser Asp Gln Pro Cys Asp His Ile Leu
100 105 110
Gly Leu Val Ile Tyr Asp Leu Pro Gly Arg Asp Cys Ala Ala Lys Ala
115 120 125
Ser Asn Gly Glu Leu Lys Val Gly Glu Leu Ala Lys Tyr Lys Ser Gln
130 135 140
Tyr Ile Asp Pro Ile Ala Ala Leu Leu Lys Lys Tyr Asn Asn His Ala
145 150 155 160
Phe Ala Leu Leu Ile Glu Pro Asp Ser Leu Pro Asn Leu Val Thr Asn
165 170 175
Ser Asp Leu Ser Ala Cys Gln Gln Ser Ala Ala Gly Tyr Arg Asp Gly
180 185 190
Val Ala Tyr Ala Leu Lys Thr Leu Asn Leu Pro Asn Val Val Met Tyr
195 200 205
Ile Asp Ala Gly His Gly Gly Trp Leu Gly Trp Asn Asp Asn Leu Lys
210 215 220
Pro Gly Ala Glu Glu Leu Ala Lys Ala Tyr Lys Ala Ala Gly Ser Pro
225 230 235 240
Lys Gln Phe Arg Gly Phe Ala Thr Asn Val Ala Gly Trp Asn Ala Trp
245 250 255
Asp Leu Thr Pro Gly Glu Phe Ser Ser Ala Ser Asp Ala Gln Trp Asn
260 265 270
Lys Cys Gln Asn Glu Lys Ile Tyr Val Glu Thr Phe Gly Pro Leu Leu
275 280 285
Lys Asn Ala Gly Met Pro Asn His Ala Ile Val Asp Val Gly Arg Asn
290 295 300
Ala Val Gln Gly Leu Arg Glu Glu Trp Gly His Trp Cys Asn Val Asn
305 310 315 320
Gly Ala Gly Phe Gly Val Arg Pro Thr Thr Ser Thr Gly Ser Ser Leu
325 330 335
Thr Asp Ala Leu Leu Trp Val Lys Pro Gly Gly Glu Ser Asp Gly Thr
340 345 350
Ser Asp Thr Ser Ala Thr Arg Tyr Asp Ser Phe Cys Gly Met Ser Asp
355 360 365
Ala Tyr Lys Pro Ser Pro Glu Ala Gly Gln Trp Asn Gln Asp Tyr Phe
370 375 380
Glu Met Leu Leu Arg Asn Ala Lys Pro Gln Phe
385 390 395
<210> 114
<211> 1116
<212> DNA
<213> Artificial
<220>
<223> DNA coding sequemce
<400> 114
cagggcggtg catggcagca gtgtggtggc gttggcttct cgggctctac gtcctgtgtg 60
tccggttaca cgtgcgtgta cttgaacgac tggtacagcc aatgccagcc gcagccgacg 120
acgttacgga caacaacaac gccaggggca acatcgacaa caaggtcagc cccggctgcc 180
acttcaacca ctccggccaa gggcaagttc aagtggtttg gcatcaacca gtcctgcgct 240
gagttcggca agggagagta tcccgggcta tggggcaagc actttacctt cccctcgacg 300
tcgtcgattc agacgcacat caatgacggc ttcaacatgt tccgcgtggc cttctcaatg 360
gagcggctgg cacccaacca gctgaacgcc gcgttcgatg ccaactacct ccgaaacctg 420
actgagaccg tcaatttcat cacgggcaag ggaaagtatg cgatgcttga cccccacaac 480
ttcggccgct attatgagag aatcatcacg gacaaggccg ccttcgccag cttcttcacc 540
aagctggcca cgcacttcgc gtcgaaccct cttgtcgtct ttgacaccaa caacgagtac 600
cacgacatgg accagcagct cgtcttcgat ctcaaccagg ctgccatcga cgccatccgc 660
gccgcgggtg ctacgtcgca gtacatcatg gtcgagggca actcgtggac cggggcgtgg 720
acgtggaacg tgaccaacaa caacttggcg gcgctacgcg acccggagaa caagctggtg 780
taccagatgc atcagtacct cgactcggac gggtccggca cgagcacggc ctgcgtcagc 840
acccaggtcg gccttcagcg cgtcattggc gcgaccaact ggctcaggca aaacggcaag 900
gttggactgc tcggcgagtt cgccggcggc gccaactcgg tttgccagca ggccattgag 960
ggcatgctca cccacctcca ggagaatagc gatgtctgga caggtgcgct ctggtgggcg 1020
ggaggcccgt ggtggggtga ctatatctac tcgtttgaac ctccttcggg tattggctac 1080
acctactaca attcccttct caagaaatac gtgcca 1116
<210> 115
<211> 852
<212> DNA
<213> Artificial
<220>
<223> DNA coding sequemce
<400> 115
gccgacggtc gcagtacccg ctactgggac tgctgcaagc ccagttgcgg ttgggccaag 60
aaggcccccg tcaaccagcc cgtcttcagt tgcaacgcca acttccagcg catcaccgac 120
ttcgacgcca agagtggttg cgagcccggt ggtgtcgcct acagttgcgc cgaccagacc 180
ccctgggccg tcaacgacga cttcgccctc ggtttcgccg ccaccagtat cgccggtagt 240
aacgaggccg gttggtgctg cgcctgctac gagctgacct tcaccagtgg tcccgtcgcc 300
ggtaagaaga tggtcgtcca gagtaccagt acgggtggtg acctcggtag taaccacttc 360
gacctcaaca tccccggtgg tggtgtcggt atcttcgacg gttgcacccc ccagttcggt 420
ggtctccccg gtcagcgata cggtggtatc agtagtcgca acgagtgcga ccgcttcccc 480
gacgccctca agcccggttg ctactggcgc ttcgactggt tcaagaacgc cgacaacccc 540
agtttcagtt tccgccaggt ccagtgcccc gccgagctgg tcgcccgcac gggttgccgc 600
cgcaacgacg acggtaactt ccccgccgtc cagatcccca gtagtagtac cagtagtccc 660
gtcaaccagc ccaccagtac cagtaccacc agtaccagta ccaccagtag tccccccgtc 720
cagcccacca cccccagtgg ttgcaccgcc gagcggtggg ctcagtgcgg tggtaacggt 780
tggagtggtt gcaccacctg cgtcgccggt agtacctgca ccaagatcaa cgactggtat 840
caccagtgcc tc 852
Claims (23)
- 패밀리 45 셀룰라제 효소 성분 그리고 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 포함하는 효소 혼합물을 포함하는 탈필링 조성물로서, 상기 효소 혼합물은 (i) 상기 패밀리 45 셀룰라제 효소를 코드화하는 패밀리 45 셀룰라제 유전자; 및 (ii) 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 코드화하는 유전자 또는 유전자들을 과발현하는 유전적으로 변형된 미생물에 의해 분비되고, 상기 패밀리 45 셀룰라제는 SEQ ID NO:7(HiCel45)의 아미노산 1-213과 적어도 75% 서열 동일성 또는 SEQ ID NO:4(TrCel45)의 아미노산 1-166과 적어도 20% 서열 동일성을 갖는 탈필링 조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 효소 혼합물은 패밀리 45 및 패밀리 5 셀룰라제 효소 성분 또는 패밀리 45 및 패밀리 6 셀룰라제 효소 성분이 특이적 탈필링 활성을 측정하는 어세이에서 상승효과를 나타내는 중량 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는 탈필링 조성물.
- 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 패밀리 45 셀룰라제 및 패밀리 5 셀룰라제를 둘 다 포함하는 것을 특징으로 하는 탈필링 조성물.
- 제 4항에 있어서, 상기 패밀리 45 셀룰라제는 SEQ ID NO: 4 또는 SEQ ID NO: 7을 포함하고, 상기 패밀리 5 셀룰라제는 SEQ ID NO: 2 또는 SEQ ID NO: 74를 포함하는 것을 특징으로 하는 탈필링 조성물.
- 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 패밀리 5 셀룰라제는 363 위치에서 아미노산의 비천연 알라닌, 세린 또는 트레오닌으로의 치환을 포함하며, 상기 위치는 SEQ ID NO:2에서 제시된 야생형 트리코더마 레세이 Cel5A 아미노산 서열과 함께 변형된 패밀리 5 셀룰라제의 배열로부터 결정되는 것을 특징으로 하는 탈필링 조성물.
- 제 5항에 있어서, 상기 패밀리 5 셀룰라제는 SEQ ID NO: 1(TrCel3A-G363A)을 포함하는 것을 특징으로 하는 탈필링 조성물.
- 제 3항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, 패밀리 6 셀룰라제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 탈필링 조성물.
- 제 6항에 있어서, 상기 패밀리 6 셀룰라제는 SEQ ID NO: 3을 포함하는 것을 특징으로 하는 탈필링 조성물.
- 제 1항 내지 제 8항 중 어느 한 항에 있어서, 효소 혼합물은 패밀리 7 셀룰라제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 탈필링 조성물.
- 제 1항 내지 제 8항 중 어느 한 항에 있어서, 효소 혼합물은 패밀리 7 셀룰라제가 없는 것을 특징으로 하는 탈필링 조성물.
- 셀룰로스-함유 물품을 제 1항 내지 제 10항 중 어느 한 항의 탈필링 조성물과 접촉하는 단계를 포함하는 탈필링 방법.
- (i) SEQ ID NO:7(HiCel45)의 아미노산 1-213과 적어도 약 75% 서열 동일성 또는 SEQ ID NO:4(TrCel45)의 아미노산 1-166과 적어도 약 20% 서열 동일성을 나타내는 패밀리 45 셀룰라제 효소를 코드화하는 패밀리 45 셀룰라제 유전자; 및 (ii) 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분을 코드화하는 유전자 또는 유전자들을 과발현하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 12항에 있어서, 유전적으로 변형된 미생물은 적어도 패밀리 45 셀룰라제 및 패밀리 5 셀룰라제를 과발현하는 것을 특징으로 하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 12항 또는 제 13항에 있어서, 패밀리 45 셀룰라제는 SEQ ID NO: 4 또는 SEQ ID NO: 7을 포함하고, 패밀리 5 셀룰라제는 SEQ ID NO: 2 또는 SEQ ID NO: 74를 포함하는 것을 특징으로 하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 12항 또는 제 13항에 있어서, 상기 패밀리 5 셀룰라제는 363 위치에서 아미노산의 비천연 알라닌, 세린 또는 트레오닌으로의 치환을 포함하며, 상기 위치는 SEQ ID NO:2에 제시된 야생형 트리코더마 레세이 Cel5A 아미노산 서열과 함께 변형된 패밀리 5 셀룰라제의 배열로부터 결정되는 것을 특징으로 하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 15항에 있어서, 패밀리 5 셀룰라제는 SEQ ID NO:1(TrCel5A-G363A)을 포함하는 것을 특징으로 하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 12항 내지 제 16항 중 어느 한 항에 있어서, 유전적으로 변형된 미생물은 패밀리 6 셀룰라제를 과발현하는 것을 특징으로 하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 17항에 있어서, 상기 패밀리 6 셀룰라제는 SEQ ID NO: 3을 포함하는 것을 특징으로 하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 12항 내지 제 18항 중 어느 한 항에 있어서, 유전적으로 변형된 미생물은 패밀리 7 셀룰라제를 발현하는 것을 특징으로 하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 12항 내지 제 18항 중 어느 한 항에 있어서, 유전적으로 변형된 미생물은 패밀리 7 셀룰라제를 발현하지 않는 것을 특징으로 하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 12항 내지 제 20항 중 어느 한 항에 있어서, 패밀리 45 셀룰라제 그리고 패밀리 5 셀룰라제, 패밀리 6 셀룰라제 또는 이들의 조합으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 추가 셀룰라제 효소 성분은 상기 미생물에 내인성 또는 이종성인 코드화 서열로부터 발현되는 것을 특징으로 하는 유전적으로 변형된 미생물.
- 제 12항 내지 제 21항 중 어느 한 항의 유전적으로 변형된 미생물에 의해 제조된 효소 혼합물을 포함하는 탈필링 조성물.
- 셀룰로스-함유 물품을 제 22항의 탈필링 조성물과 접촉하는 단계를 포함하는 탈필링 방법.
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