KR20130130711A

KR20130130711A - 개선된 백신 조성물들

Info

Publication number: KR20130130711A
Application number: KR1020137011309A
Authority: KR
Inventors: 울프 슈뢰더; 한스 아르비드손
Original assignee: 유로씨네 백신즈 에이비
Priority date: 2010-09-30
Filing date: 2011-09-30
Publication date: 2013-12-02
Also published as: JP2016222704A; JP2013538841A; WO2012042003A1; CA2810597A1; MX2013003454A; BR112013007355A2; RU2013120034A; RU2592210C2; AU2011310090B2; US20130243817A1; JP6296795B2; CN103298484B; AU2011310090A1; KR101857839B1; CN103298484A; EP2621524A1; NZ607792A

Abstract

본 발명은 예컨대, 조성물들 내 사용을 위한 백신 제제들 및 아쥬반트들, 및 이로써 자연 발생을 넘는 빈도의 벨 마비 현상을 피하는 것에 대한 것이다.

Description

개선된 백신 조성물들{IMPROVED VACCINE COMPOSITIONS}

본 발명은 아쥬반트(adjuvants)의 용도 및 본 발명에 따른 아쥬반트를 포함하는 백신 조성물, 이에 의하여 자연 발생을 넘는 빈도의 벨 마비(Bell's palsy) 현상을 예방하는 것에 대한 것이다.

벨 마비는 뇌신경 Ⅶ(얼굴 신경)의 기능 장애로, 영향을 받는 측의 얼굴 근육을 통제하는 것의 불능을 야기한다. 몇몇의 질환들은 얼굴 마비, 예컨대, 뇌종양, 뇌졸중 및 라임병(Lyme disease)을 일으킬 수 있다. 그러나, 만약 특정한 원인이 확인되지 않는 경우, 질환은 벨 아미로 알려진다. 그것을 처음으로 기재한 스코틀랜드 해부학자 찰스 벨(Charles Bell)의 이름을 딴, 벨 마비는 가장 흔한 급성 단일신경병(acute mononeuropathy)(단 하나의 신경이 관련된 질병)이며, 급성 안면 신경 마비의 가장 흔한 이유이다.

벨 마비는 특발성 일측성 얼굴 신경 마비(unilateral facial nerve paralysis)로, 보통 자기 제한(self- limiting)이며, 매년 약 30-35/100.000의 빈도로 발생한다. 전형적인 특성들은, 보통 하루 만에 부분적 또는 완전한 마비의 급속한 발병이다. 그것은 케이스들의 약 1 %에서 완전한(total) 얼굴신경 마비를 양측으로 야기할 수 있다. 예컨대, 유럽에서 벨 마비의 매년 발생 정도는 100,000 명 당 약 32 케이스이다. 오른쪽이 현대의 63% 영향을 받는다. 당뇨가 있는 사람은 당뇨가 없는 사람보다 벨 마비에 영향을 받을 위험이 29 % 더 높다. 그러므로 벨 마비의 진단 시 혈중 글루코스 레벨을 측정하는 것은 진단되지 않은 당뇨를 발견할 수 있다. 국제적으로 가장 높은 발생 정도는 1986년, 일본의 세코리(Seckori)의 연구에서 발견되었고, 가장 낮은 발생 정도는 1971년 스웨덴에서 발견되었다. 대부분의 인구 조사들은 일반적으로 나이가 많을 수록 발생 정도가 높아지고(100.000 당 60 케이스까지), 나이가 어릴 수록 낮아지는 연령-의존적 발생인, 1년에 100,000 인구 당 30-35 케이스들의 연간 발생 정도를 보인다.

염증성 질환은 얼굴 신경이 붓게 한다고 생각된다. 신경은 귀 밑의 좁은 골 관(narrow bone canal) 내 두개골을 통하여 이동한다. 좁은 골관 내 신경 부종(swelling) 및 압착(compression)은 신경 억제, 손상 및 죽음(death)을 야기하는 것을 생각된다. 벨 마비는 얼굴 근육을 통제하는 얼굴 신경(Ⅶ 뇌신경)의 기능 저하 때문에, 영향받은 반쪽에 얼굴이 처지는 것으로 특징된다. 얼굴 마비는 얼굴 근육 내 움직임을 통제하는 것이 불능인 것이 전형적이다. 마비는 아래 핵(infra nuclear)/더 낮은 운동 신경(lower motor neuron) 타입의 것이다.

열굴 신경들은 눈 깜박임, 눈 감기, 미소, 얼굴 찌푸리기, 눈물 흘리기, 타액 분비와 같은 많은 기능들을 통제한다. 그것들은 또한 중이의 등자(stapedial)(등골(stapes)) 근육에 신경이 통하게 하고, 혀의 앞쪽 3분의 2로부터 맛을 느끼는 것을 수행한다.

해부학상 특이점 때문에, 이마 근육들은 뇌의 양측으로부터 신경 자극 전달을 받는다. 이마는 그러므로, 뇌의 반구들 중 하나의 문제에 의하여 야기된 안면 마비(중추 얼굴 마비(central facial palsy))를 가진 환자도 여전히 주름을 잡을 수 있다. 만약 문제가 얼굴 신경 그 자체에 있다면(말초(peripheral) 마비), 모든 신경 신호들은 이마를 포함하는(반대쪽 이마는 연전히 주름잡힌다), 얼굴의 같은 쪽인 반 쪽(병변(lesion)과 동일한 측)에서 없어진다.

감별 진단에서 배제하기 어려운 하나의 질병은 헤르페스 조스터(herpes zoster) 바이러스 감염된 얼굴 신경의 관련이다. 이 질환의 주된 차이점들은 외이의 잔물질들, 물집 및 난청의 존재이나, 이들 결과들은 가끔 빠져 있을 수 있다(조스터 사인 페르페트(zoster sine herpete)).

라임병은 전형적인 마비를 일으킬 수 있고, 혈중 라임-특이적 항체들을 찾음으로써 쉽게 진단될 수 있다. 풍토병이 있는 지역에서, 라임병은 얼굴 마비의 가장 흔한 원인일 수 있다.

신경 손상의 정도는 하우스-브랙만 스코어(House-Brackmann score)를 이용하여 평가할 수 있다.

비록 (단 하나 신경만이 관련된) 단신경염으로 정의되었지만, 벨 마비로 진단받은 환자들은, "안면 신경 기능장애에 의한 설명할 수 없는" "얼굴의 얼얼함, 중간 정도 또는 극심한 두통/경부통, 기억력 문제들, 균형 문제들, 동일측 팔다리 감각 이상(ipsilateral limb paresthesia)들, 동일측 팔다리 허약(ipsilateral limb weakness), 및 어색한 느낌(sense of clumsines)"을 포함하는 "수많은 신경학적 증상들(myriad neurological symptoms)"을 가질 수 있다. 이것은 이 질환의 불가사의한 측면이다.

본 발명은 자연 발생을 넘는 빈도의 벨 마비 현상을 피하는 것에 대한 것이다.

본 발명은 백신 내 아쥬반트의 용도에 대한 것으로, 상기 아쥬반트는

i) 하나 또는 그 이상의 카르복실산들 또는 하나 또는 그 이상의 아민들

및 선택적으로

b) 하나 또는 그 이상의 모노-글리세라이드들을 포함하고

이로써, 대상자의 벨 마비의 위험을 자연적으로 발생하는 발생 정도로 감소시킨다.

본 발명은 대상자의 벨 마비의 위험을 자연적으로 발생하는 발생 정도로 감소시킨다.

도 1은 각각의 투여량 후 각각의 EMA [유럽피안 메디칼 에이전시(European Medical Agency)) HAI (헤마글루티네이션-억제(hemagglutination-inhibition)) 기준에 도달한 연구 그룹(study group)들의 수를 나타낸다.
도 2는 네거티브 차지된 아쥬반트 제제의 투여량-반응 스코어 조합을 나타낸다(HAI, N-lgA Hl/Bri/Cal, H3/Bris/Cal, S-lgG, S-lgA 및 INF-γ).

백신 조성물들의 임상 실험들 동안, 벨 마비의 높아진 빈도의 발생들이 있었다(Plos One (2009), vol 4 (9), e6999). 벨 마비가 보통 신경 얼굴 능력의 완전한 회복이 되는 일시적인 질환임에도 불구하고, 이것은 높은 받아들일 수 없는 부작용으로 보여지는데, 그 결과, 임상 실험들은 중단되고, 백신은 시장에 나오지 못한다. 본 발명에 따른 아쥬반트를 이용함으로써, 벨 마비의 발생 또는 빈도가 자연 발생과 동일하다는(매년 100.000 명 당 15-30 케이스들) 의미에서, 벨 마비에서 관찰되는 원하지 않는 부작용을 피한다.

본 발명에 따른 아쥬반트는,

i) 하나 또는 그 이상의 카르복실산 또는 하나 또는 그 이상의 아민들

그리고 선택적으로

ii) 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 아쥬반트는 또한 하나의 아민 또는 두 아민들의 혼합물을 포함하는 아쥬반트일 수 있다.

본 발명에 따른 아쥬반트는 또한 하나의 아민 또는 두 아민들의 혼합물을 포함하고 나아가 에컨대 스쿠알렌 또는 대두유와 같은 추가적인 아쥬반트를 포함하는 아쥬반트일 수 있다. 본 발명에 따른 아쥬반트는 또한

i) 하나 또는 그 이상의 카르복실산 및 선택적으로

ii) 하나 또는 그 이상의 모노-글리세라이드들을 포함하는 아쥬반트일 수 있다.

본 발명에 따른 아쥬반트는 또한

i) 하나 또는 그 이상의 카르복실산들 및 선택적으로

ii) 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들을 포함하고,

그리고 나아가 예컨대 스쿠알렌 또는 두유와 같은 추가적인 아쥬반트들을 포함하는 아쥬반트일 수 있다.

본 발명에 따른 아쥬반트는 또한

i) 하나의 카르복실산 또는 두 카르복실산들의 혼합물 및 선택적으로

ii) 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들을 포함하고, 그리고 나아가 예컨대 스쿠알렌 또는 두유와 같은 추가적인 아쥬반트들을 포함하는 아쥬반트일 수 있다.

본 발명은 또한 백신 내 아쥬반트의 용도에 대한 것이고, 상기 아쥬반트는,

i) 하나 또는 그 이상의 카르복실산 및/또는 하나 또는 그 이상의 아민들 및

b) 선택적으로 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들을 포함한고,

이에 의하여 약 자연 발생에 대한 대상자들에게서 벨 마비의 위험을 줄인다.

어떠한 이론에도 엮이지 않고, 본 발명의 카르복실산들(이들의 대응하는 아민들에 더하여) 및 모노글리세라이드들의 내인성-같은 특성 때문에, 최소한의 전신성 변화(systemic perturbation)가 달성되고, 이는 결국 벨 마비의 관찰된 케이스들의 낮은 발생, 즉, 벨 마비의 자연적으로 발생하는 케이스들과 대략 동일한 빈도의 발생을 야기할 수 있다.

게다가, 또한 벨 마비의 가능한 하나의 원인은 백신에서 아쥬반트로서 부재중(i.a.) 콜레라 독소가 사용될 때 관찰된 대로, 후각 신경의 형태적 변화라고 추측되어 왔다.

본 발명에서 아민들은 가지달리거나, 가지달리지 않은, 환상 또는 아크릴, 치환되거나 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐 아민들, 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)을 포함하며, 이는 나아가 4 내지 30 탄소 원자들, 예컨대, 6 내지 24 탄소 원자들, 8부터 20까지의 탄소 원자들 또는 12부터 20까지의 탄소 원자들인 선택적으로 서로 다른 종류일 수 있다. 정의는 또한 예컨대, 부분입체이성질체(시스-트랜스 아이소머들)과 같은, 임의의 조합일 수 있는, 서로 다른 타입의 아이소머들을 커버하는 것을 의도하는 것으로도 이해된다.

본 발명에서 사용된 카르복실산들은 긴 사슬(C4-C30) 알킬, 알케닐 또는 알키닐 카르복실산들을 포함하고, 이는 선택적으로 가지달리거나 가지가 없는, 환형 또는 아크릴, 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)일 수 있고, 이는 나아가 선택적으로 서로 다른 종류일 수 있다.

본 발명에서 사용된 모노글리세라이드들은 글리세린의 카르복실산 에스터들일 수 있고, 이 때 카르복실산들은 긴 사슬(C4-C30) 알킬, 알케닐 또는 알키닐 카르복실산들일 수 있고, 이는 선택적으로 가지달리거나 가지가 없고, 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)일 수 있고, 이는 나아가 선택적으로 서로 다른 종류일 수 있다.

정의들

특허청구범위를 포함하는 본문 전체에서, 하기 용어들은 하기 나타난대로 정의된다.

용어 "아민"은 가지달리거나 가지없는, 환상 또는 아크릴, 치환되거나 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐 아민들을 포함하고, 이는 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)을 갖고, 이는 나아가 6부터 24 탄소 원자들, 8부터 20 탄소 원자들 또는 12부터 20까지의 탄소 원자들과 같은 4부터 30 까지의 탄소원자들의 선택적으로 다른 종류일 수 있다. 정의는 또한, 임의의 조합일 수 있는, 서로 다른 타입의 부분입체이성질체(시스-트랜스 아이소머들)을 커버하도록 의도되는 것으로도 이해될 수 있다.

예들은 하기와 같으나 이에 제한되는 것은 아니다; 라우로일 아민(lauryl amine)(C12), 미리스틸 아민(myristyl amine)(C14), 세틸 아민(cetyl amine)(C16), 팔미톨레일 아민(palmitoleyl amine)(C16: 1), 올레일 아민(oleyl amine)(C18: 1), 리놀레일 아민(linoleyl amine)(C18:2) 및 스테아릴 아민(sterayl amine)(C18). 다른 예들은 헥실 아민(hexyl amine), 옥틸 아민(octyl amine), 데실 아민(decyl amine), 운데실 아민(undecyl amine), 도데실 아민(dodecyl amine)이다.

용어 "카르복실산"은 가지달리거나 가지 없는, 환상 또는 아크릴, 치환되거나 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐 카르보ㅗㄱ실산들을 포함하고, 이는 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)을 가지고, 이는 나아가 선택적으로, 예컨대, 6부터 24 탄소 원자들, 8부터 20 탄소 원자들 또는 12부터 20까지 탄소 원자들과 같은 4부터 30까지의 탄소 원자들의 서로 다른 종류(임의의 혼합물 또는 조합의 이중 또는 삼중 결합들)일 수 있다. 정의는 또한 서로 다른 타입의 부분입체이성질체(시스-트랜스 아이소머들)을 커버하고, 이는 임의의 조합일 수 있다는 것을 의미하는 것으로 이해된다.

예들은 하기와 같으나, 이에 제한되는 것은 아니다; 라우로익 액시드(lauric acid)(C12), 미리스틱 액시드(myristic acid)(C14), 팔미틱 액시드(palmitic acid)(C16), 팔미톨레익 액시드(palmitoleic acid)(C16:1), 올레익 액시드(oleic acid) (C18: 1), 리놀레익 액시드(linoleic acid) (C18:2) 및 스테아릭 액시드( stearic acid). 다른 예들은 헥사노익 액시드(hexanoic acid), 카프릴릭 액시드(caprylic acid), 데카노익 액시드(decanoic acid)(카프릭 액시드(capric acid)), 아라키딕 액시드(arachidic acid), 베헤닉 액시드(behenic acid), 리그노세릭 액시드(lignoceric acid), 알파-리놀레닉 액시드(alpha-linolenic acid), 스테아리도닉 액시드(stearidonic acid), 아이코사펜타에노익 액시드(eicosapentaenoic acid), 도코사펙사에노익 액시드(docosahexaenoic acid), 감마-리놀레닉 액시드(gamma-linolenic acid), 디호모-감마-리놀레닉 액시드(dihomo-gamma- linolenic acid), 아라키도닉 액시드(arachidonic acid), 에루시딕 액시드(erucic acid) 및 네르보닉 액시드(nervonic acid).

용어 "모노글리세라이드"는 글리세린(프로판-1,2,3-트리올)의 카르보ㅗㄱ실산 모노-에스터들을 포함하며, 이 때 상기 카르보ㅗㄱ실산은 가지달린 또는 가지없는, 환상 또는 아크릴, 치환되거나 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐 카르복실산들일 수 있고, 이는 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)을 가질 수 있고, 이는 나아가 예컨대 6부터 24까지 탄소 원자들, 8부터 20까지 탄소원자들 또는 12부터 20까지 탄소 원자들인 4부터 30까지 탄소 원자들의 선택적으로 다른 종류일 수 있다. 정의는 또한 서로 다른 타입의 부분입체이성질체(시스-트랜스 아이소머들)을 커버하고, 이는 임의의 조합일 수 있다는 것을 의미하는 것으로 이해된다.

글리세롤의 에스테르화에 사용되는 산들의 예들은 하기와 같으나, 이에 제한되는 것은 아니다, 라우릭 액시드(lauric acid) (C12), 미리스틱 액시드(myristic acid) (C14), 팔미틱 액시드(palmitic acid) (C16), 팔미톨레익 액시드(palmitoleic acid) (C16: 1), 올레익 액시드(oleic acid) (C18: 1), 리놀레익 액시드(linoleic acid) (C18:2) 및 스테아릭 액시드(stearic acid). 다른 예들은 섹사노익 액시드(hexanoic acid), 카프릴릭 액시드(caprylic acid), 데카노익 액시드(decanoic acid)(카프릭 액시드(capric acid)), 아라키딕 액시드(arachidic acid), 베헤닉 액시드(behenic acid), 리그노세릭 액시드(lignoceric acid), 알파-리놀레닉 액시드(alpha-linolenic acid), 스테아리도닉 액시드(stearidonic acid), 아이코사펜타에노익 액시드(eicosapentaenoic acid), 도코사헥사노익 액시드(docosahexaenoic acid), 감마-리놀레닉 액시드(gamma-linolenic acid), 디호모-감마-리놀레닉 액시드(dihomo-gamma-linolenic acid), 아라키도닉 액시드(arachidonic acid), 에루식 액시드(erucic acid) 및 네르보닉 액시드(nervonic acid)이다.

용어 "항원"은 면역 반응의 탄겟으로 작용할 수 있는 임의의 것으로 정의된다. 상기 면역 반응은 세포 또는 체액성 중 하나일 수 있고 전신 및/또는 점막 구획(systemic and/or mucosal compartment)에서 검출될 수 있다.

용어 "백신"은 항원 모이에티들(moieties)의 현탁액 또는 용액으로서 여기에서 정의되며, 일반적으로 감염원들, 또는 감염원들의 일부 부분으로 구성되고, 이는 동물 또는 인체에 도입되어 적극적인 면역력을 생산한다.

여기에 사용되었으며, 교환이 가능한 용어 "아쥬반트" 또는 "아쥬반트 혼합물"은 투여된 면역원과의 그 혼합물이 인간 또는 동물 신체로 도입 시 면역 반응을 증가시키거나 그렇지 않으면 변경시키는 임의의 물질이다.

여기에 사용된 용어 "배지"는 예컨대 버퍼, 염, pH-조절제, 보존제 등을 포함할 수 있는 수성 배지와 같은 생리학적으로 허용가능한 배지를 의미하는 것으로 의도된다.

예컨대, 벨 마비의 발생 정도를 감소시키는 것과 같은 질환의 발생 정도를 감소시키는데 사용되는 용어 "감소시키는"은 발생 정도를 질환의 자연 발생 정도와 거의 동일한 레벨로 감소시키는 것을 의미하는 것으로 의도된다. 벨 마비의 경우, 자연 발생 정도는 매년 100.000 명 당 벨 마비로 고통받는 30-35 명의 사람들이다.

용어인, 질환의 발생 정도를 "피하는" 것은, 대상자가 예컨대, 질환의 자연적으로 생기는 빈도와 대략 동일하게, 벨 마비와 같은 질환을 불러 일으키는 위험을 가질 것이라는 것을 의미하는 것으로 의도된다. 벨 마비에 관해, 대상자는 매년 100.000 명 당 약 30-35 케이스들의 벨 마비를 얻는 위험을 갖게 되며, 그 결과 본 발명에 관하여, 벨 마비의 질환을 피한 대상자는, 상기 대상자가 매년 100.000 명 당 30-35 케이스들의 자연적 발생 정도로 벨 마비를 얻는 대략 동일한 위험을 갖게 된다는 것을 의미한다.

본 발명에 따라 사용된 아쥬반트 혼합물 내 아민 또는 아민들은 가지치거나 가지가 없거나, 환상 또는 아크릴, 치환되거나 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐 아민들이고, 이는 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)을 갖고, 이는 나아가 예컨대, 6에서 24까지 탄소 원자들, 8부터 20까지 탄소 원자들 또는 12부터 20까지 탄소 원자들과 같은 4부터 30까지 탄소 원자들의 선택적으로 다른 종류일 수 있다. 상기 아민들은 또한 서로 다른 타입의 부분입체이성질체, 시스-트랜스일 수 있고, 이는 나아가 (많은 불포화의 경우에) 동일한 분자 내 서로 다른 종류일 수 있다. 상기 부분입체이성질체들은 또한 예컨대, 50% 시스 및 50% 트랜스, 또는 40% 시스 및 60% 트랜스, 또는 30% 시스 및 70% 트랜스, 또는 20% 시스 및 80% 트랜스, 또는 10% 시스 및 90% 트랜스, 또는 5% 시스 및 95% 트랜스, 또는 1 % 시스 및 99% 트랜스, 또는 40% 트랜스 및 60% 시스, 또는 30% 트랜스 및 70% 시스, 또는 20% 트랜스 및 80% 시스, 또는 10% 트랜스 및 90% 시스, 또는 5% 트랜스 및 95% 시스, 또는 1 % 트랜스 및 99% 시스, 또는 100% 시스 및 0% 트랜스, 또는 0% 시스 및 100% 트랜스와 같은 임의의 혼합물 내 존재할 수 있다.

예들은 하기와 같으나, 이에 제한되는 것은 아니다, 라우로일 아민(lauryl amine) (C12), 미리스틸 아민(myristyl amine) (C14), 세틸 아민(cetyl amine) (C16), 팔미톨레일 아민(palmitoleyl amine) (C16: 1), 올레일 아민(oleyl amine)(C18: 1), 리놀레일 아민(linoleyl amine)(C18:2) 및 스테아릴 아민(sterayl amine)(C18). 다른 예들은 헥실 아민(hexyl amine), 옥틸 아민(octyl amine), 데실 아민(decyl amine), 운데실 아민(undecyl amine), 도데실 아민(dodecyl amine)

두 개의 아민들을 포함하는 본 발명에 따른 아쥬반트는 두 개의 아민들 간의 w/w 비율이, 예컨대, 0.25부터 약 9까지, 약 0.5부터 약 8까지, 약 0.75부터 약 7까지, 약 1부터 약 6까지, 약 1부터 약 5까지, 약 1부터 약 4까지, 약 1부터 약 3까지, 약 1부터 약 2까지 또는 약 1부터 약 1까지와 같은, 약 0.1 부터 약 10까지인 것과 같은 것일 수 있다. 그 대신에, 아쥬반트 내 하나 또는 그 이상의 아민들의 총량은, 예컨대, 아쥬반트의 부피의 약 100% 또는 그 미만부터, 약 95% 또는 그 미만, 약 90% 또는 그 미만, 약 85% 또는 그 미만, 약 80% 또는 그 미만, 약 75% 또는 그 미만, 약 70% 또는 그 미만, 약 65% 또는 그 미만, 약 60% 또는 그 미만, 약 55% 또는 그 미만, 약 50% 또는 그 미만, 약 45% 또는 그 미만, 약 40% 또는 그 미만, 약 35% 또는 그 미만, 약 30% 또는 그 미만, 약 25% 또는 그 미만, 약 20% 또는 그 미만, 약 15% 또는 그 미만, 약 10% 또는 그 미만, 약 9% 또는 그 미만, 약 8% 또는 그 미만, 약 7% 또는 그 미만, 약 6% 또는 그 미만, 약 5% 또는 그 미만, 약 4% 또는 그 미만, 약 3% 또는 그 미만, 약 2% 또는 그 미만, 약 1 % 또는 그 미만, 약 0.5% 또는 그 미만, 약 0.25% 또는 그 미만, 약 0.1 % 또는 그 미만, 약 0.05% 또는 그 미만에 이를 수 있다.

두 개의 아민들을 포함하는, 본 발명에 따른 아쥬반트는 올레일 아민 및 라우릴 아민의 혼합물일 수 있다. 올레일 아민의 라우릴 아민에 대한 w/w 비율은 예컨대, 약 0.25부터 약 9까지, 약 0.5부터 약 8까지, 약 0.75부터 약 7까지, 약 1부터 약 6까지, 약 1부터 약 5까지, 약 1부터 약 4까지, 약 1부터 약 3까지, 약 1부터 약 2까지 및 약 1부터 약 1까지와 같은 약 0.1에서 약 10까지일 수 있다.

아쥬반트 혼합물 내 사용되는 카르복실산들은 가지달리거나 가지가 없는, 환상 또는 아크릴, 치환되거나 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐 카르보ㅗㄱ실산들일 수 있고, 이는 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)을 갖고, 이는 나아가 예컨대, 6부터 24까지 탄소 원자들, 8부터 20까지 탄소 원자들 또는 12부터 20까지 탄소 원자들과 같은, 4부터 30까지 탄소 원자들의 선택적으로 서로 다른 종류(임의의 혼합물 또는 조합 내 이중 또는 삼중 결합들)일 수 있다. 카르복실산들은 부분입체이성질체(diastereisomer)들, 시스 또는 트랜스일 수 있고, 이는 나아가 (많은 불포화의 경우에) 동일 분자 내 서로 다른 종류일 수 있다. 상기 부분입체이성질체(diastereomer)들은 또한 예컨대, 50% 시스 및 50% 트랜스, 또는 40% 시스 및 60% 트랜스, 또는 30% 시스 및 70% 트랜스, 또는 20% 시스 및 80% 트랜스, 또는 10% 시스 및 90% 트랜스, 또는 5% 시스 및 95% 트랜스, 또는 1 % 시스 및 99% 트랜스, 또는 40% 트랜스 및 60% 시스, 또는 30% 트랜스 및 70% 시스, 또는 20% 트랜스 및 80% 시스, 또는 10% 트랜스 및 90% 시스, 또는 5% 트랜스 및 95% 시스, 또는 1 % 트랜스 및 99% 시스, 또는 100% 시스 및 0% 트랜스, 또는 0% 시스 및 100% 트랜스로 혼합물 내 존재할 수 있다.

예들은 하기와 같으나, 이에 제한되는 것은 아니다 라우릭 액시드(lauric acid) (C12), 미리스틱 액시드(myristic acid)(C14), 팔미틱 액시드(palmitic acid) (C16), 팔미톨레익 액시드(palmitoleic acid) (C16:1), 올레익 액시드(oleic acid) (C18: 1), 리놀레익 액시드(linoleic acid) (C18:2) 및 스테아릭 액시드(stearic acid). 다른 예들은 헥사노익 액시드(hexanoic acid), 카프릴릭 액시드(caprylic acid), 데카노익 액시드(decanoic acid)(카프릭 액시드(capric acid)), 아라키딕 액시드(arachidic acid), 베헤닉 액시드(behenic acid), 리그노세릭 액시드(lignoceric acid), 알파-리놀레닉 액시드(alpha-linolenic acid), 스테아리도닉 액시드(stearidonic acid), 아이코사펜타에노익 액시드(eicosapentaenoic acid), 도코사헥사에노익 액시드(docosahexaenoic acid), 감마-리놀레닉액시드(gamma-linolenic acid), 디호모-감마-리놀레닉 액시드(dihomo-gamma- linolenic acid), 아라키도닉 액시드(arachidonic acid), 에루식 액시드(erucic acid) 및 네르보닉 액시드(nervonic acid)이다.

본 발명에 따른 모노글리세라이드는 하기 화학식을 갖는다.

이 때, R은 R 그룹들 중 둘이 H라는 단서 하, 4부터 30까지 탄소 원자들을 포함하는 아실 라디칼 및 H로부터 선택된다. 모노글리세라이드에서, 아실 체인들은 일반적으로 글리세롤 백본의 탄소 원자 1 또는 3에 위치하며, 그러나 탄소 원자들 1 및 3의 사이, 그리고 중심 탄소 원자 2에 아실 이동이 자주 있을 수 있는데, 이는 아실 체인들의 거의 90%가 탄소 원자 1 또는 3 상에 위치하게 되고, 약 10%가 중심 탄소 원자 상에 위치하게 되는 결과를 야기한다. 아실 라디칼은 글리세롤의 에스테르화에 사용되는 대응하는 카르복실산들로부터 선택될 수 있으나, 이에 제하노디는 것은 아니고, 가지달리거나 가지가 없거나, 환상 또는 아크릴, 치환되거나 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐 카르복실산들일 수 있고, 이는 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)을 가지며, 이는 나아가 예컨대, 6부터 24까지 탄소 원자들, 8부터 20까지 탄소 원자들 또는 12부터 20까지 탄소 원자들인, 4부터 30까지의 탄소 원자들의 선택적으로 다른 종류일 수 있다. 글리세롤의 에스테르화에 사용되는 카르복실산들은 또한 서로 다른 부분입체이성질체들, 시스 또는 트랜스일 수 있고, 이는 나아가 (많은 불포화의 경우) 동일 분자 내 서로 다른 종류일 수 있다. 상기 부분입체이성질체는 또한 예컨대, 50% 시스 및 50% 트랜스, 또는 40% 시스 및 60% 트랜스, 또는 30% 시스 및 70% 트랜스, 또는 20% 시스 및 80% 트랜스, 또는 10% 시스 및 90% 트랜스, 또는 5% 시스 및 95% 트랜스, 또는 1 % 시스 및 99% 트랜스, 또는 40% 트랜스 및 60% 시스, 또는 30% 트랜스 및 70% 시스, 또는 20% 트랜스 및 80% 시스, 또는 10% 트랜스 및 90% 시스, 또는 5% 트랜스 및 95% 시스 또는 1 % 트랜스 및 99% 시스, 또는 100% 시스 및 0% 트랜스, 또는 0% 시스 및 100% 트랜스와 같은 임의의 혼합물 내 존재할 수 있다.

글리세롤의 모노에스테르화에 사용되는 카르복실산들의 예들은 하기와 같으나, 이에 제한되는 것은 아니다, 라우릭 액시드 (C12), 미리스틱 액시드(C14), 팔미틱 액시드 (C16), 팔미톨레익 액시드 (C16: 1), 올레익 액시드 (C18: 1), 리놀레익 액시드 (C18:2) 및 스테아릭 액시드. 다른 예들은 헥사노익 액시드, 카프릴릭 액시드, 데카노익 액시드(카프릭 액시드), 아라키딕 액시드, 베헤닉 액시드, 리그노세릭 액시드, 알파-리놀레닉 액시드, 스테아리도닉 액시드, 아이코사펜타에노익 액시드, 도코사헥사에노익 액시드, 감마-리놀레닉 액시드, 디호모-감마-리놀레닉 액시드, 아라키도닉 액시드, 에루식 액시드 및 네르보닉 액시드이다.

본 발명에서, 사용되는 증류된 1-모노글리세라이드는 예컨대, 적어도 90% w/w 또는 적어도 95% w/w와 같은 적어도 80% w/w의 순도를 갖는다.

모노글리세라이드의 농도는 예컨대, 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 약 0.1g to about 50g의 범위, 바람직하게는 예컨대, 100 ml 당 약 1 g 내지 20 g 또는 예컨대 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 약 0.5 g 내지 약 30g과 같은, 약 예컨대 0.5g 내지 약 25g과 같은, 예컨대, 1 g 내지 약 20g과 같은, 약 2g 내지 약 15g과 같은, 예컨대 5g 내지 약 10g과 같은, 약 0.5g 내지 약 40g의 범위 내 있을 수 있다.

카르복실산 농도는 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 예컨대 약 0.1-50g의 범위, 바람직하게는 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 1-20g, 또는 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 예컨대 0.5 g 내지 약 30g과 같은, 약 예컨대. 0.5g 내지 약 25g과 같은, 예컨대 1g 내지 약 20g과 같은, 약 2g 내지 약 15g과 같은, 예컨대 5g 내지 약 10g과 같은 약 0.5g 내지 약 40g의 의 범위 내 있을 수 있다.

하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들 및 하나 또는 그 이상의 카르복실산들 간의 아쥬반트 혼합물에서, 카르복실산 내 모노글리세라이드의 퍼센트는 1 내지 99% 사이, 바람직하게는 10-90% 사이로 다양할 수 있고, 또는 예컨대, 아쥬반트 내 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들의 총 량은 예컨대 약 100% 또는 그 미만, 약 95% 또는 그 미만, 약 90% 또는 그 미만, 약 85% 또는 그 미만, 약 80% 또는 그 미만, 약 75% 또는 그 미만, 약 70% 또는 그 미만, 약 65% 또는 그 미만, 약 60% 또는 그 미만, 약 55% 또는 그 미만, 약 50% 또는 그 미만, 약 45% 또는 그 미만, 약 40% 또는 그 미만, 약 35% 또는 그 미만, 약 30% 또는 그 미만, 약 25% 또는 그 미만, 약 20% 또는 그 미만, 약 15% 또는 그 미만, 약 10% 또는 그 미만, 약 9% 또는 그 미만, 약 8% 또는 그 미만, 약 7% 또는 그 미만, 약 6% 또는 그 미만, 약 5% 또는 그 미만, 약 4% 또는 그 미만, 약 3% 또는 그 미만, 약 2% 또는 그 미만, 약 1 % 또는 그 미만, 약 0.5% 또는 그 미만, 약 0.25% 또는 그 미만, 약 0.1 % 또는 그 미만, 약 0.05% 또는 그 미만에 이를 수 있다.

따라서 아쥬반트 내 하나 또는 그 이상의 카르복실산들의 총 량은 예컨대, 아쥬반트의 부피의 약 100% 또는 그 미만부터, 약 95% 또는 그 미만, 약 90% 또는 그 미만, 약 85% 또는 그 미만, 약 80% 또는 그 미만, 약 75% 또는 그 미만, 약 70% 또는 그 미만, 약 65% 또는 그 미만, 약 60% 또는 그 미만, 약 55% 또는 그 미만, 약 50% 또는 그 미만, 약 45% 또는 그 미만, 약 40% 또는 그 미만, 약 35% 또는 그 미만, 약 30% 또는 그 미만, 약 25% 또는 그 미만, 약 20% 또는 그 미만, 약 15% 또는 그 미만, 약 10% 또는 그 미만, 약 9% 또는 그 미만, 약 8% 또는 그 미만, 약 7% 또는 그 미만, 약 6% 또는 그 미만, 약 5% 또는 그 미만, 약 4% 또는 그 미만, 약 3% 또는 그 미만, 약 2% 또는 그 미만, 약 1 % 또는 그 미만, 약 0.5% 또는 그 미만, 약 0.25% 또는 그 미만, 약 0.1 % 또는 그 미만, 약 0.05% 또는 그 미만에 이를 수 있다.

본 발명에 따는 아쥬반트 혼합물은 아쥬반트 성분들을, 즉 하나 또는 그 이상의 카르복실산들을 단독으로, 또는 항원이 첨가될 때 인간 또는 동물에 투여된 항원에 대하여 인간 또는 동물 내 면역 반응을 끌어내는 농도로 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들과 혼합하여 포함한다. 본 발명의 발명자들은 본 발명에 따른 아쥬반트들이 예컨대, 비강의 점막에 투여되는, 코 경로를 통하여 백신 접종이 수행될 때 특히 유용하다는 것을 발견하였다. 본 발명자들은 놀랍게도 코 경로를 통한 백신 접종에서 본 발명에 따른 아쥬반트들의 용도가 백신 접종에 대한 면역 반응을 개선한다는 것을 발견하였다.

전술한 바와 같이, 아쥬반트 혼합물은 하나 또는 그 이상의 카르복실산들 및 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들을 포함할 수 있다. 아쥬반트 혼합물 내 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들과 함께 카르복실산의 총 농도는 아쥬반트의 전체 부피의 기껏해야 75% w/v, 또는 기껏해야 50% w/v, 또는 기껏해야 25% w/v, 또는 기껏해야 20% w/v, 또는 기껏해야 15% w/v, 또는 기껏해야 10% w/v, 또는 기껏해야 5% w/v, 또는 기껏해야 4% w/v, 또는 기껏해야 3% w/v, 또는 기껏해야 2% w/v 또는 기껏해야 1 % w/v 또는 기껏해야 0.5% w/v 또는 기껏해야 0.1 % w/v이다.

게다가, 하나 또는 그 이상의 카르복실산과 함께, 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들을 포함하는 아쥬반트 혼합물은 아쥬반트 혼합물 내 하나 또는 그 이상의 카르복실산들과 함께 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들의 총 량을 예컨대, 아쥬반트 혼합물의 총 부피의 약 0.25% w/v부터 약 9% w/v까지, 약 0.5% w/v부터 약 8% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 7% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 6% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 5% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 4% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 3% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 2% w/v까지 또는 약 0.5% w/v부터 약 4% w/v까지와 같은 약 0.1 % w/v 부터 약 10% w/v까지의 범위로 가질 수 있다.

본 발명에 따른 아쥬반트는 나아가 친수성이고 비활성이며 예컨대 플루로닉 F68(Pluronic F68) 또는 플루로닉-127(Pluronic-127)과 같은, 예컨대 폴록사머들(poloxamers)과 같이 생체적합한, 예컨대, 표면 활성제와 같은 배지를 포함할 수 있다.

상기 배지는 나아가 하나 또는 그 이상의 생리학적으로 허용 가능한 첨가제 또는 예컨대, 트리스(Tris)와 같은 예컨대 완충제와 같은 약학적 부형제들,안정제, 삼투활성제(osmotically active agent), 보존제들 및 pH 조정제들을 포함할 수 있다.

상기 배지의 pH는 예컨대, pH 4 내지 약 pH 9, 예컨대 약 pH 5부터 약 pH 7까지와 같이, 예컨대 약 pH 7 내지 약 pH 9와 같이, 예컨대 약 7.5 내지 약 pH 8.5와 같이 또한 예컨대 약 pH 5.5부터 약 pH 6.5까지와 같이, 또한 예컨대 약 pH 6와 같이 또는 약 pH 5 또는 약 pH 8과 같은 생리학적으로 허용 가능한 범위 내 있어야 한다.

본 발명에 따른 아쥬반트는 또한 나아가 추가적인 아쥬반트들을 포함할 수 있다. 추가적인 아쥬반트들은 예컨대, 스쿠알렌, 예컨대, 알루미늄 하이드록사이드, 알루미늄 포스페이트, 알루미늄 하이드록시포스페이트 설페이트, 알루미늄 포타슘 설페이트와 같은 알루미늄 염, 대두유 도는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 추가적인 아쥬반트들의 양은 예컨대 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 약 0.1 -50g의 범위 내, 바람직하게는 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 1-20g 의 범위 내 또는 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 예컨대 0.5 g 내지 약 30g과 같은, 약 예컨대 0.5g 내지 약 25g과 같은, 예컨대 1 g 내지 약 20g과 같은, 약 2g 내지 약 15g과 같은, 예컨대 5g 내지 약 10g과 같은 약 0.5g 내지 약 40g일 수 있다.

선택적으로 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들과 함께 하나 또는 그 이상의 카르복실산들의 최종 농도는 예컨대 최종 아쥬반트 또는 백신 조성물의, 예컨대 약 8%까지와 같은, 예컨대 약 7%까지와 같은, 예컨대 약 5%까지와 같은, 예컨대 약 3%까지와 같은, 예컨대 약 1 %까지와 같은, 예컨대 약 0.1 %까지와 같은 최종 아쥬반트 또는 백신 조성물의 약 10%까지 될 수 있다.

하나 또는 그 이상의 아민들의 최종 농도는 최종 아쥬반트 또는 백신 조성물의 예컨대 약 8%까지와 같은, 예컨대 약 7%까지와 같은, 예컨대 약 5%까지와 같은, 예컨대 약 3%까지와 같은, 예컨대 약 1 %까지와 같은, 예컨대 약 0.1 %까지와 같은 최종 아쥬반트 또는 백신 조성물의 약 10%까지일 수 있다.

백신들

본 발명에 따른 아쥬반트 혼합물은 백신의 제조에 사용되도록 의도된다. 이러한 백신은 면역원성 양의 항원 요소(component)와 함께 아쥬반트를 포함하고, 그리고 수성 배지와 같은 배지 내 선택적으로 분포된다.

따라서 본 발명에 따른 백신 조성물은 하기를 포함할 수 있다

i) 하나 또는 그 이상의 카르복실산들 또는 하나 또는 그 이상의 아민들 및 선택적으로

ii) 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들

iii) 하나 또는 그 이상의 항원들

예를 들어 본 발명에 따른 백신 조성물은 최종 백신 조성물 100 g 당 하기를 포함할 수 있다

i) 약 0.1 g부터 약 90 g까지 또는 하나 또는 두 개의 카르복실산들

ii) 약 0.01 g부터 약 90g까지의 항원.

더욱 명확하게는 그렇게, 본 발명의 백신 조성물은 최종 백신 조성물 100 g 당 하기를 포함할 수 있다

i) 단일 카르복실산 또는 두 산들의 혼합물 중 하나로서, 약 0.1g부터 약 90 g까지의 카르복실산

ii) 약 0.1 g부터 약 90g까지의 모노글리세라이드

iii) 약 0.001 g부터 약 90g까지의 항원.

상기 백신 조성물이 나아가 예컨대, 스쿠알렌 또는 예컨대 대두유와 같은 오일과 같은, 하나 또는 그 이상의 추가적인 아쥬반트들을 포함할 수 있다는 것이 명확하게 이해된다.

따라서 본 발명의 백신 조성물은 최종 백신 조성물 100 g 당 하기를 포함할 수 있다

i) 단일 카르복실산 또는 두 산들의 혼합물로서 약 0.1 g부터 약 90 g까지의 카르복실산

ii) 약 0.1 g부터 약 90g까지의 모노글리세라이드

iii) 예컨대 스쿠알렌 또는 대두유와 같은, 약 0.1g부터 약 90 g까지의 추가적인 아쥬반트

iv) 약 0.001 g부터 약 90g까지의 항원.

i) 약 0.1 g부터 약 90 g까지의 카르복실산

ii) 약 0.1 g부터 약 90g까지의 모노글리세라이드

iii) 약 0.01 g부터 약 90g까지의 항원.

게다가 백신 조성물은 최종 백신 조성물 100 g 당 예컨대 하기를 포함할 수 있다

i) 약 0.1g부터 약 90 g까지의 하나 또는 둘 또는 그 이상의 아민들

ii) 약 0.01 g부터 약 90g까지의 항원.

백신 조성물은 나아가 스쿠알렌 또는 예컨대 대두유와 같은 오일과 같은 추가적인 아쥬반트들을 포함할 수 있다.

상기 항원들은 예컨대 전 불활성화 바이러스들(whole inactivated viruse)과 같은, 예컨대 전 불활성화 항원들일 수 있다. 항원은 또한 예컨대 불활성화 바이러스의 일부와 같은 병원체의 일부일 수 있다. 사용될 수 있는 상기 항원 요소는 하기와 같으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 예컨대, 바이러스, 박테리아, 마이코박테리아(mycobaterial) 또는 기생충(parasitic) 항원이다. 바이러스 병원체들은 예컨대, 헤파티티스 바이러스(hepatitis viruses) A, B, C, D 및 E3, HIV, 헤르페스 바이러스(herpes viruses) 1,2, 6 & 7, 사이토메갈로바이러스(cytomegalovirus), 박리셀라 조스터(varicella zoster), 파필로마 바이러스(papilloma virus), 엡슈타인 바 바이러스(Epstein Barr virus), 인플루엔자 바이러스(influenza viruses), 파라-인플루엔자 바이러스(para-influenza viruses), 아데노바이러스(adenoviruses), 분야 바이러스(bunya viruses) (예컨대 한타 바이러스(hanta virus)), 콕사키 바이러스(coxsakie viruses), 피코르나바이러스(picorna viruses), 로타바이러스(rotaviruses), 레스피라토리 신크셜 바이러스(respiratory syncytial viruses), 팍스 바이러스(pox viruses), 리노바이러스(rhinoviruses), 루벨라 바이러스(rubella virus), 파포바바이러스(papovavirus), 멈프스 바이러스(mumps virus) 및 메아슬레스 바이러스(measles virus)이다.

박테리아 병원체들은 예컨대 결핵 및 한센병을 일으키는 마이코박테리아, 뉴모코사이(eumocci), 호기성 그람 네거티브 또는 그람-퍼저티브 바실리(bacilli), 마이코플라즈마(mycoplasma), 스타필로코컬 감염들(staphyloccocal infections), 스트렙토코컬 감염들(streptococcal infections), 헬리코박터 파일로리(Helicobacter pylori), 살모넬라(salmonellae) 및 클라미디아(chlamydiae)일 수 있다.

하나 또는 그 이상의 항원들의 양은 예컨대, 약 300 μg부터 또는 그 미만, 약 200 μg 또는 그 미만, 약 100 μg 또는 그 미만, 약 95 μg 또는 그 미만, 약 90 μg 또는 그 미만, 약 85 μg 또는 그 미만, 약 80 μg 또는 그 미만, 약 75 μg 또는 그 미만, 약 70 μg 또는 그 미만, 약 65 μg 또는 그 미만, 약 60 μg 또는 그 미만, 약 55 μg 또는 그 미만, 약 50 μg 또는 그 미만, 약 45 μg 또는 그 미만, 약 40 μg 또는 그 미만, 약 35 μg 또는 그 미만, 약 30 μg 또는 그 미만, 약 25 μg 또는 그 미만, 약 20 μg 또는 그 미만, 약 15 μg 또는 그 미만, 약 10 μg 또는 그 미만, 약 9 μg 또는 그 미만, 약 8 μg 또는 그 미만, 약 7 μg 또는 그 미만, 약 6 μg 또는 그 미만, 약 5 μg 또는 그 미만, 약 4 μg 또는 그 미만, 약 3 μg 또는 그 미만, 약 2 μg 또는 그 미만, 약 1 μg 또는 그 미만, 약 0.5 μg 또는 그 미만, 약 0.25 μg 또는 그 미만, 약 0.1 μg 또는 그 미만, 또는 약 0.05 μg 또는 그 미만의 범위 내일 수 있다. 항원은 또한 대상자에게서 면역 반응을 끌어내기에 충분한 임의의 양일 수 있다.

본 발명에 따른 백신 제제는 예컨대, 바이러스, 박테리아 또는 기생충에 의한 감염들, 암, 알레르기 및 자가면역질환과 같은 다양한 질병 상태들에 대하여 동물들 및 인간들의 보호 및 치료용으로 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 방법들 및 조성물을 이용하여 보호되거나 치료될 수 있는 장애들 및 질환 상태들의 일부 특정 예들은 헤파티티스 바이러스 A, B, C, D & E3, HIV, 헤르페스 바이러스 1 ,2, 6 & 7, 사이토메갈로바이러스, 바리셀라 조스터, 파필로마 바이러스, 엡슈타인 바 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 파라-인플루엔자 바이러스, 아데노바이러스, 분야 바이러스(bunya viruses)(예컨대 한타 바이러스), 콕사키 바이러스(coxsakie viruses), 피코르나 바이러스(picorna viruses), 로타바이러스, 레스피레토리 신크셜 바이러스(respiratory syncytial viruses), 팍스 바이러스(pox viruses), 리노바이러스(rhinoviruses), 루벨라 바이러스(rubella virus), 파포바바이러스(papovavirus), 멈프스 바이러스(mumps virus) 및 메아슬레스 바이러스(measles virus)에 의하여 야기되는 바이러스 감염들이다.

상기 질병들은 또한 결핵 및 한센병을 야기하는 마이코박테리아, 뉴모코사이(pneumocci), 호기성 그램 네거티브 바실리(bacilli), 마이코플라즈마(mycoplasma), 스타필로코컬 감염들(staphyloccocal infections), 스트렙토코컬 감염들(streptococcal infections), 헬리코박터 파일로리(Helicobacter pylori), 살모넬라(salmonellae), 디프테리아(diphtheria) 및 클라미디아(chlamydiae)에 의한 감염들과 같은 박테리아 감염들일 수 있다.

상기 질병들은 또한 기생충에 의한 말라리아(parasitic malaria), 레슈마니어증(leishmaniasis), 트리파노소마증(trypanosomiasis), 톡소플라즈마증(toxoplasmosis), 주혈흡충병(schistosomiasis), 필라리아병(filariasis) 또는 예컨대, 유방암, 위암, 결장암(colon cancer), 직장암(rectal cancer), 머리 및 목의 암, 신장암, 악성 흑색종, 후두암, 난소암, 자궁경부암, 전립선암과 같은 다양한 종류의 암일 수 있다.

상기 질병들은 또한 집먼지 진드기, 꽃가루 및 다른 환경적인 알레르겐(allergens)들에 의한 알레르기들 및, 예컨대, 전신성 홍반성 낭창과 같은 자가면역질환일 수 있다.

백신 조성물 내 항원은 예컨대 전 불활성화 바이러스들과 같은 전 불활성화 항원들일 수 있다. 불활성화 공정들은 열 불활성화, UV-빛에 의한 조사(irradiation) 불활성화 또는 포르말린 불활성화에 의한 불활성화 내 또는 베타-프로피오락톤(propiolactone) 치료와 같은 업계에서 잘 알려져 있다.

본 발명에 따른 백신 조성물은, 예컨대, 나아가 예컨대 플로로닉(Pluronic) F68 또한 플루로닉(Pluronic) 127과 같은 예컨대 폴리옥사머들과 같은, 친수성이고 비활성이며(inert) 생체적합성일 수 있는 표면 활성제를 포함하는 수성 배지일 수 있는 배지와 같은 약학적으로 허용 가능한 부형제를 더 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 백신은 따라서, 나아가 아쥬반트들, 항박테리아제, 항산화제, 바이러스 불활성화제, 보존제, 염료들, 안정화제들, 소포제들(anti-foaming agents), 계면활성제들(비이온성, 음이온성 또는 양이온성) 또는 이들의 임의의 조합을 더 포함할 수 있다.

백신 혼합물 내 pH는 예컨대, 약 pH 4부터 약 pH 9까지와 같은, 예컨대 약 pH 5부터 약 pH 7까지와 같은, 예컨대 약 pH 7 내지 약 pH 9와 같은, 예컨대 약 7.5 내지 약 pH 8.5와 같은, 또는 예컨대 약 pH 5.5부터 약 pH 6.5까지와 같은, 또한 예컨대 약 pH 6과 같은 또는 약 pH 5 또는 약 pH 8과 같은 생리학적으로 허용 가능한 범위 내에 있을 수 있다. 아민들이 사용되는 경우 아쥬반트 또는 백신 조성물의 pH는 예컨대, 약 pH 5 내지 약 pH 7, 약 pH 5.5와 같은 범위 내에 있을 것으로 예상된다. 아쥬반트 또는 백신 조성물들이 카르복실산들에 기초하는 경우에, pH 범위는 예컨대 약 pH 7.5 내지 약 pH 8.5일 수 있다.

추가적인 아쥬반트들은 예컨대, 스쿠알렌 또는 대두유와 같은 오일들, 알루미늄 하이드록사이드, 알류미늄 포스페이트, 알루미늄 하이드록시포스페이트 설페이트, 알루미늄 포타슘 설페이트와 같은 알루미늄 염 또는 이들의 임의의 조합과 같은 것일 수 있다.

상기 항박테리아제는 예컨대, 암포테리신(amphotericin) 또는 이의 임의의 유도체, 클로로테트라사이클린(chlorotetracyclin), 포름알데하이드(formaldehyde) 또는 포르말린(formalin), 젠타미신(gentamicin), 네오마이신(neomycin), 폴리믹신 B(polymyxin B) 또는 이의 임의의 유도체, 스트렙토마이신(streptomycin) 또는 이의 임의의 유도체일 수 있다.

상기 항산화제들은 예컨대, 아스코르브산 또는 포코페롤 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다.

상기 바이러스 불활성화제들은 예컨대 포르말린(formalin), 베타-프로피오락톤(beta-propiolactone), UV-조사(radiation), 가열 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다.

상기 보존제들은 예컨대, 벤제토늄 클로라이드(benzethonium chloride), EDTA, 페놀, 2-페녹시에탄올(2-phenoxyethanol) 또는 티메로살(thimerosal) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다.

상기 염료들은 예컨대 임의의 (예컨대 페놀 레드(phenol red)와 같은) 임의의 지표들(indicators) 또는 브릴리언트 그린(brilliant green) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다.

상기 소포제들은 예컨대 폴리디메틸실로존(polydimethylsilozone)일 수 있다.

상기 계면활성제들은 예컨대, 음이온성, 양이온성 또는 비이온성 또는 예컨대 폴리옥시에틸렌 및 이들의 유도체들과 같은 즈비터이온성(zwitterionic), (예컨대 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80과 같은) 폴리소르베이트(polysorbates), 트윈(Tween) 80, (플루로닉(Pluronic) F68과 같은) 폴리옥사머들 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다.

본 발명은 또한 여기에 기재된 대로 임의의 감염성 질병의 예방(prophylaxis) 및/또는 치료를 가능하게 하거나 이와 관련된다.

일반적으로, 상기 백신들은 예컨대, 코(nasal), 구강(oral), 직장(rectal), 질(vaginal), 폐(lung), 귀(aural), 또는 국소적 투여(topical administration)와 같은 비경구(parenteral) 또는 점막(mucosal) 투여에 의하는 것과 같은, 또는 크림, 연고 또는 경피성 팻치들(trandermal pathches)에 의한 경피성 적용들에 의한 국소적 루트 또는 이들의 임의의 조합에 의한 임의의 일반적인 방식으로 투여될 수 있다.

코는, 그것이 쉽게 받아들여질 수 있고, 고도로 혈관이 발달되고(vascularized) 넓은 흡수 표면을 포함한다는 사실 때문에 점막 투여를 통한 면역화를 위한 매우 매력적인 루트이다. 점막, 전신성 및 세포성 면역 반응들 모두 유도될 수 있으며, 면역 반응은 질 및 직장과 같은 먼 점막 위치들(sites)에서 유도될 수 있다. 게다가 많은 인구가(populations) 감염의 위험이 적게 하여 쉽게 면역될 수 있다.

코에 대한 투여가 타겟인 경우, 투여 모드(mode)는 예컨대, 비강 내로 백신을 분무하거나 또는 비강 내 또는 코 점막 벽으로 백신을 떨어뜨림으로써 피펫(pipette)을 통하여 백신을 투여하는 것에 의할 수 있다.

비경구 투여는 정맥내(intravenous), 동맥내(intraarterial), 근육내(intramuscular), 뇌내(intracerebral), 뇌실재(intracerebroventricular), 심장내(intracardiac), 피하(subcutaneous), 골내(intraosseous), 피내(intradermal), 척추강내(intrathecal), 복강내(intraperitoneal), 방광내(intravesical) 또는 ㅇ음경해면체내(tracavernosal) 주사로 예상된다.

따라서 본 발명은 인간 또는 동물에 투여된 항원에 대한 인간 또는 동물 내 면역 반응을 증강시키는 방법에 대한 것이며, 상기 방법은 인간 또는 동물에 본 발명에 따른 아쥬반트를 포함하는, 면역 반응을 증강시키기에 효과적인 양의 백신을 투여하는 단계를 포함한다. 상기 방법은 나아가 코, 정맥내, 피하 또는 근육내 투여를 통하여 본 발명에 따른 백신 조성물을 대상자에 투여하는 단계를 포함할 수 있다.

하기 실험예들은 어떠한 식으로든 제한하는 것 없이 본 발명을 보여주도록 의도된다.

실험예들

실험예 1

아쥬반트 제조

포지티브 차지된 아쥬반트 제조는 올레일 아민(oleyl amine) 및 라우릴 아민(lauryl amine)을 1 : 1 (w/w)의 비율로 혼합함으로써 수득되었다. 그 결과로 된 혼합물은 그 후 pH 6.5에서 50 mM 아세테이트 버퍼에서 유화시켜, 올레일 아민/라우릴 아민의 최종 농도가 2% w/v였다.

그렇지 않으면, 포지티브 차지된 아쥬반트 제조는 올레일 아민, 라우릴 아민 및 스쿠알렌을 1 : 1 :1 (w/w)의 비율로 혼합함으로써 수득되었다. 그 결과로 된 혼합물은 그 후 pH 6.5에서 50 mM 아세테이트 버퍼 내에서 유화시켜, 올레일 아민/라우릴 아민/스쿠알렌의 최종 농도가 2% w/v였다.

그렇지 않으면, 올레일 아민을 pH 6.5에서 50 mM 아세테이트 버퍼에서 유화시켜 올레일 아민의 최종 농도가 2% w/v였다.

그렇지 않으면, 스쿠알렌과 같은 오일은 올레일 아민에 1 : 1 비율 (w/w)로 첨가되어, 따라서 유액 내 2%의 올레일아민과 스쿠알렌의 최종 농도를 제공할 수 있었다.

버퍼로써 아세테이트의 용도를 고려할 때, 포지티브 차지된 제제용 최종 제제의 pH는 pH 5-7.5의 간격 내 있을 수 있다.

상기 포지티브 차지된 유액(emulsions)은 고압 균질화 또는 초음파 프로브 처리(ultrasound probe sonication)에 의하여 생산되었다. 그 결과인 모액(stock-solution)은 선택적으로 물 또는 아세테이트 버퍼 용액으로 2, 4, 8, 16, 및 32 희석도로 선택적으로 희석되었다.

네거티브 차지된 유액은 올레익 액시드 및 모노올레인(mono-olein)을 1 : 1 비율로 혼합함으로써 생산되고, 그 후 상기 혼합물은 8.0의 pH를 갖는 0.1 M 트리스(Tris)-버퍼에서 유화되었다.

그렇지 않으면, 네거티브 차지된 유액은 올레익 액시드 및 라우릭 액시드를 1 : 1 비율로 혼합함으로써 생산되고, 그 후 상기 혼합물을 8.0의 pH를 갖는 0.1 M 트리스-버퍼 내 유화되었다.

모노글리세라이드와 함께 카르복실산들의 최종 농도는 최종 아쥬반트 또는 백신 조성물의 10%까지 될 수 있다.

상기 네거피브로 차지된 유액들은 고압 균질화 또는 초음파 프로브 처리에 의하여 생산되었다. 그 결과인 모액들은 물 또는 트리스 버퍼 용액으로 2, 4, 8, 16, 및 32의 희석도로 선택적으로 희석되었다.

네거티브 차지된 아쥬반트는 올레익 액시드(0.46 g) 및 라우릭 액시드(0.34 g)를 혼합함으로써 제조되고, 그 후 0.1 M 트리스-버퍼(pH 8.0) 9.2 ml로 초음파 처리되었다. 최종 용액의 pH는 5 M NaOH로 pH 8.0으로 조정된다. 최종 농도는 액체 제제의 8%이다. 조성물은 이후로, 아쥬반트 A(Adjuvant A)로 약칭된다.

게다가, 나아가 네거티브 차지된 아쥬반트는 모노-올레인(mono-olein)(0.45 g) 및 올레익 액시드(0.35 g)를 혼합하여 제조되며, 그 후 9.2 ml의 0.1 M 트리스-버퍼 (pH 8.0)로 초음파 처리된다. 최종 제제는 5M NaOH로 pH 8로 조정된다. 최종 농도는 액체 제제의 8%이다. 상기 조성물은 이후로, 아쥬반트 B로 약칭된다.

이제, 추가의 아쥬반트가 모노-올레인(0.15 g), 올레익 액시드(0.12 g) 및 대두유(0.53 g)를 혼합하여 제조된다. 상기 혼합물은 그 후 0.2 ml의 0.1 M 트리스 버퍼(pH 8.0)로 초음파 처리된다. 최종 제제는 5M NaOH로 pH 8로 조정된다. 최종 농도는 액체 제제의 8%이다. 조성물을 이후로, 아쥬반트 C로 약칭된다.

아쥬반트의 백신 제제들은 각각의 제제 내 4%의 최종 액체 농도를 갖도록 적절한 항원 및 8% 액체 아쥬반트 제제를 1 : 1 비율로 혼합하여 제조된다.

상기 8% 액체 아쥬반트 제제들은 물론 추가로 버퍼 용액들의 첨가에 의하여 원하는대로 1 %, 2%, 4% 또는 6% 용액으로 희석될 수 있다.

실시예 1.1

2% 농도를 갖는 올레일 아민을 갖는 포지티브 차지된 제제는 1+1 비율(v/v)로 불활성화된 인플루엔자 바이러스 입자들의 현탁액과 혼합되었다(균주 H1N1/캘리포니아). 상기 혼합물은 그 후 각각의 콧구멍으로 5 μl 부피로 마우스에 비강 내 투여되었다. 인플루엔자 바이러스 입자들의 투여량은 1,5 μg 헤마글루티닌 (hemeagglutinin) (HA)에 상당하였다. 상기 마우스들은 3 주로 나누어, 3 경우로 면역화하였다. 마지막 면역화 후 3 주 후 마우스들을 죽이고, 혈액 샘플들로 면역 반응을 분석하였다.

그 결과들은 아쥬반트가 없는(non-adjuvanted) 항원을 받은 마우스로부터의 HAI 역가(titer)가 HAI 역가 47로 증가하는(상승 평균(geometrical mean), N=8) 반면, 포지티브 차지된 제제는 HAI 역가 1140로 상승하는 것(상승 평균, N=8)을 보여주었다. 따라서 HAI 역가의 24배의 증가가 얻어졌다.

NP 자극 후 INF-γ의 pg/ml로써 T-세포 반응의 시험을 수행하였고, 이는 포지티브 차지된 아쥬반트가 비-아쥬반트된 제제보다 28-배 반응을 증강시키는 것으로 나타났다.

아민들의 최종 농도는 최종 아쥬반트 또는 백신 조성물의 10%까지일 수 있다.

실시예 1.2

2% 농도를 갖고, 올레일아민(oleylamine) 및 스쿠알렌과 함께 포지티브 차지된 제제를 불활성화된 인플루엔자 바이러스 입자들의 현탁액과 1+1 비율(v/v)로 혼합하였다(균주 H1N1/캘리포니아). 상기 혼합물을 그 후 각각의 콧구멍으로 5 μl로 마우스에 비강내 투여하였다. 불활성화된 인플루엔자 바이러스 입자들의 투여량은 1.5 μg의 헤메아글루티닌(hemeagglutinin)(HA)에 상당하였다. 마우스들은 3 주로 나누어, 3 경우로 면역화되었다. 마지막 면역화 후 3 주 후 상기 마우스들을 죽이고 혈액 샘플들로 면역의 T-세포 반응을 시험하였다.

NP 자극 후 INF-γ의 pg/ml로써 T-세포 반응의 시험을 수행한 것은, 포지티브 차지된 아쥬반트가 비-아쥬반트인 제제보다 60-배 반응을 증강시킨다는 것을 보였다.

실시예 2

4% 농도를 갖는 올레익 액시드 및 모노-올레인과 함께 네거티브 차지된 제제를 불활성화된 인플루엔자 바이러스 입자들의 현탁액과 1+1 비율 (v/v)로 혼합하였다(균주 H1N1/캘리포니아). 상기 혼합물을 그 후 각각의 콧구멍을 통하여 5 μl 부피로 마우스에 비강내 투여하였다. 인플루엔자 바이러스 입자들의 투여량은 헤마글루티닌(hemagglutinin)(HA) 1.5 μg에 상당하였다. 상기 마우스들을 3 주로 나누어, 3 경우로 면역화하였다. 마지막 면역화 후 3 주 후, 마우스들을 죽이고 혈액 샘플로 면역 반응을 시험하였다.

그 결과는 비-아쥬반트된 항원을 받은 마우스로부터의 HAI 역가가 HAI 역가 47로 증가한 반면(상승 평균, N=8), 네거티브 차지된 제제는 HAI 역가 147로 증가하였다(상승 평균, N=8)는 것을 보여주었다. 따라서 HAI 역가의 4 배의 증가가 얻어졌다.

NP 자극 후 INF-γ의 pg /ml로써 T-세포 반응 시험을 수행한 것은 네거티브 차지된 아쥬반트가 비-아쥬반트된 제제보다 7-배 반응을 증강시켰다는 것을 보였다.

실시예 3

4% 농도를 갖고, 올레익 액시드 및 모노-올레인과 함께 네거티브 차지된 제제를 불활성화된 인플루엔자 바이러스 입자들의 현탁액과 1+1 비율(v/v)로 혼합하였다(균주 H1N1/브리스번(Brisbane)). 상기 혼합물을 그 후 각각의 콧구멍을 통하여 적점약(drops)으로써 150 μl 부피로 인간에 비강내 투여하였다. 인플루엔자 바이러스 입자들의 투여량은 5, 15 또는 30 μg의 헤메아글루티닌(hemeagglutinin)(HA)에 상당하며, 이는 서로 다른 그룹들 내 다양한 조합들 내 네거티브 차지된 아쥬반트 제제의 0.5, 1 또는 2%의 농도로 조합되었다. 104 명의 인간 대상자들 모두를, 항원 및 아쥬반트 모두를 포함하는 제제로 3 주로 나누어 3 경우로 면역화하였다. 120명의 대상자들 모두가, 아쥬반트만 포함하고 항원은 없는 참고 제제를 포함하는 아쥬반트 제제를 비강내로 받았다. 마지막 면역화 후 3 주 후 혈액 샘플들로 면역 반응을 시험하였다.

그 결과들은 하기를 보였다:

상기 백신과 관련된 심각한 부작용(adverse event)들은 이들 인간 대상자들 중 누구에게서도 나타나지 않았다. 아쥬반트를 받은 대상자들 중 누구에게서도 벨 마비의 경우는 보고되지 않았다. 보고된 부작용들은 비강 내 미세한 일시적인 불편을 포함하였는데, 이는 상기 제제의 투여 후 2 시간 내 사라졌다. 표 1에서, 보고된 부작용들(Adverse Events), AE는 15 μg 항원 및 2% 네거티브 차지된 아쥬반트를 받은 그룹으로부터 나타났다.

인간에 대한 임상 시험에서 15 μg 항원 및 2% 네거티브 차지된 아쥬반트를 받은 그룹으로부터 보고된 부작용들, AE.

계절적인 인플루엔자 백신의 승인을 얻기 위하여, 적어도 하나의 하기 기준들이 만족되어야 한다(유러피안 메디칼 에이전시, EMA에 의하여 결정된 대로). 이들은 하기를 포함한다:

혈청전환(Seroconversion): HAI에서의 큰 증가가 달성된 대상자들의 비율, 즉, 역가에서 적어도 4-배의 증가(요구 >40%).

GMT. HAI 역가들 내 상승 평균(Geometric mean) 배수(fold) 증가(요구 >2.5)

항체방어(Seroprotection): HAI 역가 ≥40을 달성한 대상자들의 비율(요구 >70%)

도 1에서 볼 수 있는 바와 같이, 이들 기준들은 한 번의 투여 후 하나의 대상자 그룹에서, 2 주여 후 5 그룹들에 의하여 그리고 3 투여들 후 모든 그룹들에 의하여 만족된다.

인간 대상자들에 시험한 제제들의 총 면역원성을 평가하기 위하여, 조합 점수(combination score)들을 계산하였다. 예컨대, 대상자가 역가에서 적어도 4-배의 증가를 얻을 때, 그는 1(일)의 점수를 받았다. 상기 점수는 그 후 하기 시험들을 위하여 결정되었다: HAI, H1N1/브리스번에 대한 코의 IgA, H1N1/캘리포니아에 대한 코의 IgA, H3N2/브리스번에 대한 코의 IgA, IFN-γ 및 H1N1/캘리포니아 에 대한 코의 IgA. 대상자들은 따라서 최대 8 점을 얻을 수 있었다.

도 2에서 볼 수 있는 바와 같이, 네거티브 차지된 아쥬반트의 농도와 관련하여 투여량-반응이 얻어졌다.

실시예 4

본 발명에 따른 아쥬반트들 및 디프테리아 톡소이드 ( diphtheria toxoid ) (DT) 을 이용할 때 부작용의 조사

이 연구는 무작위로, 이중 맹검으로, 평행 그룹 디자인(parallel group design)을 가졌다. 총 40 명의 건강한 지원자들이 포함되었으며, 4 중 1로 무작위로 치료군들로 하였다. 첫 번째 그룹은 표준 애플리케이터(applicator)로 투여된 아쥬반트 B)/DT(디프테리아 톡소이드) 1 %를 받았다. 일단 첫 번째 그룹의 안전성이 확립되고, 하기 두 그룹들이 4% 아쥬반트 B/DT 또는 참고로서 DT 단독으로 치료되었으며, 양쪽 다 표준 애플리케이터로 투여되었다. 네 번째 그룹에서, 4% 아쥬반트 B/DT가 코 애플리케이터로 투여되었다. 1일에 코 점막을 통하여 자격이 있는 대상자들이 면역되었다. 14번째 날 후 백신에 대한 안티-디프테리아 면역 반응이 평가되었다. 부작용들은 연구 기간을 걸쳐 평가되었다.

아쥬반트 B/DT 백신: 표준 또는 코 에어로졸 스프레이를 통하여 1 % 또는 4% 아쥬반트 B 및 75 Lf/ml DT, 2 × 100 μl가 투여되었다.

40 명이 대상자들 중 38명(38)이 총 107개의 부작용들(AEs)을 보고하였다. 부작용들에서 가장 흔한 타입은 모두 가벼웠으며, 코 점막의 일부에 대한 짜증과 관련된 것이었고, 코에 따끔거리는(stinging) 느낌, 콧물, 재채기, 코막힘, 코피 및 비강 내 민감함(tenderness)으로 나타났다. 부작용에 의한 조사 산물의 죽음, 심각한 부작용 또는 중단은 연구 동안 보고되지 않았다.

4.1 부작용들을 보여주고 분석함

총 40 명의 포함된 대상자들 중 38명이 107 건들을 보고하였다. 이들 건들 중 2 건은, 서브젝트 No. 117 내 아트로스코피(artroscopi) 및 서브젝트 No. 106 내 마이그레인(migraine)은 심각한 것으로 보고되었고, 12 건은 중간으로(moderate), 93 건은 가벼운 것으로 보고되었다. 대상자 당 보고된 건들의 수는, 평균 2.8 건들로, 1부터 8까지의 범위였다. 보고된 부작용들AEs 중 대부분은(107 중 63) 치료와 인과관계를 가졌다;예컨대, 가능하거나, 아마 그러하거나 또는 확실한 관계. 어떠한 부작용도 보고하지 않은 두 대상자들은 참고 치료 그룹 및 1% 아쥬반트 B/DT 치료 그룹 내 포함되었다. 모든 부작용들은 표 6 내 치료에 대한 관계로 요약된다.

107 건들 중 9건은 수반되는 약의 투여를 이끌었고, 모든 대상자들은 후유증 없이 회복되었다. 가장 흔한 부작용들은 코에 따끔거리는 느낌(26 경우들)과 두통(15 경우들)이었다.

표 2 내지 표 5는 각각 DT 단독 투여 후 , 1 % 아쥬반트 B/DT, 표준 애플리케이터로 4% 아쥬반트 B/DT 및 코 애플리케이터로 4% 아쥬반트 B/DT 투여 후 치료에 대한 관계에 의한 부작용들의 수를 나타낸다.

1= 확실, 2=아마도 그럴 것, 3=가능함 4=그럴 것 같지 않음 5=관련없음

DT 단독 투여 후 치료에 대한 관계로 부작용(참고)

1% 아쥬반트 B/DT의 투여 후 치료에 대한 관계로 부작용

4% 아쥬반트 B/DT의 투여 후 치료에 대한 관계로 부작용

코 애플리케이터를 이용하여 4% 아쥬반트 B/DT의 투여 후 치료에 대한 관계로 부작용

부작용 때문에 사망, 다른 심각한 부작용들, 또는 중단은 시험 동안 일어나지 않았다. 게다가, 벨 아미의 관찰 또는 이에 대한 징후는 관찰되지 않았다.

치료, 모든 치료에 대한 관계로 부작용

실시예 5

시험된 품목(items)들은 0.1 μg/μl의 항원 농도로, 서로 다른 농도(0.5, 및 2%)의 아쥬반트 A 및 2% 아쥬반트 B였다. 대조군 아이템으로 비히클, 0.1 M 트리스 버퍼가 사용되었다. 연구는 양 성(30 마리 수컷 및 30 마리 암컷들)의 60 마리의 SD 래트들로 수행되었다. 상기 동물들은 5 개 그룹들로 나뉘었다(6마리의 암컷 및 6 마리의 수컷 래트/그룹) 모든 동물들은 카테터에 의하여 (각각의 콧구멍에 약 25 μl) 50 μl의 부피로 비히클, 아쥬반트 또는 아쥬반트+바이러스 항원을 코 투여로 치료하였다. 투여 후 동물들을 5분간 마취 상태를 유지시켜, 유체가 흡수되게 하고, 비강으로부터 용액이 흘러나오는 위험을 최소화하였다. 투여는 중간에 9-10일 4 회 수행되었다. 동물들은 하기와 같이 처리되었다:

그룹 1 : 비히클; 그룹 2: 낮은 투여량 (0.5 %) 아쥬반트; 그룹 3: 높은 투여량 (2 %) 아쥬반트;그룹 4: 높은 투여량 (2 %) 아쥬반트 + 바이러스 항원 혈청형(serotype) H1N1 (5 μg); 그룹 5: 높은 투여량 (2 %) 아쥬반트 + 바이러스 항원 혈청형 H1N1 (5 μg), 회복 동물들의 무게는 도착하자마자, 훈련 후, 그리고 매주 3 회, 그리고 최종적으로 연구의 마지막에 기록되었다. 처리 그룹들 간 무게에서 통계적으로 큰 차이는 발견되지 않았다. 동물들은, 일반적인 건강 상태 변화의 신호로서 음식 섭취량, 활동 등에서 변화를 매일 체크하였다. 건강 상태에서 비정상은 기록되지 않았다. 마지막 투여 후 하루 후 그룹 1, 2, 3 및 4의 첫 번째 세 마리 동물들, 및 마지막 투여 후 2일 후 그룹 1, 2, 3 및 4의 남은 동물들을 마취시키고, 혈액학, 임상 화학 및 면역학 분석을 위하여 혈액 및 혈청을 수득하였다. 마지막 처리 후 한 주 후 그룹 5의 동물들로 상기 혈액 샘플링하였다. 시험된 혈액학적 파라미터(parameter)들과 관련하여 그룹들 간에 통계적으로 큰 차이들은 없었다. 임상 화학은 암컷들 그룹들 간 통계적으로 큰 차이를 보이지 않았다. 수컷들 중에서, 비히클 처리한 동물들의 LDH는 높은 투여량 아쥬반트 + 바이러스 항원으로 처리된 동물보다 통계적으로 상당히 높았다. 비히클 처리된 수컷들의 관찰된 LDH가 스프라그-다울리 랫트에서 일반적으로 관찰되는 것보다 높았으므로, 이 관찰은 아마도 실질적 의미는 없다.

혈청의 면역학적 분석은 모든 그룹들의 동물들이, 또한 바이러스 항원으로 의도적으로 처리되지 않은 그룹 내의 동물들도, 인플루엔자 A(H1N1/PR8)에 대한 항체들을 갖고 있다는 것을 보여주었다. 그러나, 그룹 5의 12/12 동물들 및 그룹 4의 9/12 동물들은 혈청 반응 양성을 보였는데, 이는 상기 항원이 2% 아쥬반트와 함께 조합하여 인플루엔자 A(Influenza A)에 대한 항체 생산을 자극시키는데 효과적이라는 것을 보여준다. 인플루엔자 A로 의도적으로 처리되지 않은 동물들의 그룹 내 항체들의 존재는 이들 동물들이 언젠가 인플루엔자 A에 노출되었다는 것을 가리키며, 이는 격리-케이지(isolator-cage) 환경에서 사육되지 않은 동물들에서는 드문 관찰은 아니다. 마지막으로 투여한 후 1일 후 그룹 1, 2, 3 및 4 내 첫 번째 3 마리 동물들및 마지막으로 투여한 후 2일 후 그룹 1, 2, 3 및 4의 나머지 동물들을 안락사시키고, 폐, 심장, 간, 비장, 췌장, 신장, 생식샘(gonads), 회장(ileum), 장간막림프절(mesenteric lymph nodes), 액와부 림프절(axillary lymph nodes), 하악 림프절( mandibular lymph nodes), 흉선(thymus), 골수 및 두개골을 절개하였다. 마지막 처리 후 1 주 후 그룹 5의 모든 동물들로 상기와 같이 기관 샘플링을 하였다. 고정 및 파라핀 포매 후 조직들을 절개(section)하고, 그 후 병리학적 변화를 조사하였다. 조직병리학은 코 점막에서만 병변을 보였으며, 다른 절개된 기관들은 모두 정상이었다. 아쥬반트 및 바이러스 항원이 비강을 통하여 투여되고, 면역 반응을 일으켰으므로, 코 점막 내 염증 반응의 징후를 발견할 것으로 예상이 되기도 하였다. 병변들은, 그러나, 비히클 처리된 동물들에서도 발견되었는데, 이는, 비히클이 이러한 영향들을 야기하지 않기 때문에, 병리조직학적 발견들의 해석을 어렵게 만든다. 본 연구에서 사용된 동물들이 외관상 인플루엔자 A에 노출되었다는 사실은 관찰된 병변들의 하나의 원인일 수 있으나, 다른 감염원들을 배제할 수는 없다. 아쥬반트 자체가 병변을 야기했을 것 같지는 않은데, 이는 높은 투여량의 아쥬반트로 처리된 동물들의 그룹에서 0/6 수컷들이 병변을 가졌기 때문이다. 따라서 낮은 투여량의 아쥬반트로 처리된 수컷 동물들의 그룹에서 관찰된 병변들의 빈도는 이 동물 그룹에서 코 병변의 높은 정상적인 빈도를 나타낼 수 있다.그러므로, 아쥬반트 및 바이러스 항원으로 처리된 동물들의 그룹에서 병변의 빈도는 다른 그룹 동물들의 것보다 높지 않다고 결론이 될 수 있다. 사실, 카이-제곱(Chi-Square) 분석은 처리된 그룹들 간 병변 빈도에서 통계적으로 큰 차이를 보이지 않았다. 이 연구에서 사용된 H1N1 항원은 면역 반응을 유발하였고,이는 H1N1 바이러스에 대한 항체 생산을 촉진한 것으로 결론이 내려진다. 아쥬반트 또는 아쥬반트 + 바이러스 항원 처리된 동물들에서 병변의 심각성 및 빈도는 비히클 처리된 동물들에서 발견된 병변의 빈도와 유사하였다. 이는 아쥬반트 또는 아쥬반트 + 바이러스 항원이 코 병변들을 생산하지 않았다는 것을 가리킨다. 건강기록 혈액학(Health records haematology), 임상 화학 및 조직병리학 분석들은 백신이, 반복된 투여 후, 래트에서 일반적인 독성 반응들을 야기하지 않았다는 것을 가리킨다.

코 점막의 병변들에 대한 병리조직학적 발견들에 대한 요약

표 7은 4개 절개된 레벨들(L1 - L4)에서 코 점막에서 관찰된 병변들의 요약을 보여준다. 레벨 L4b는 후 신경구(olfactory bulb)(OB) 또한 존재하는 레벨을 나타낸다. X는 병변이 발견되었다는 것을 가리키며, W/OAR (언급 없음(With Out Any Remarks))는 조직의 상황(status)에 대하여 언급이 된 것이 없다는 것을 가리킨다. 병변들은 비강 내 혈액, 코 점막의 상피의 짓무름, 부종 또는 염증의 형태였다. "병변"으로 표시된 칼럼은 그룹들 간의 병변의 빈도를 통계학적으로 분석하는데 사용되었다.

5.1 처리된 그룹들 간 병변의 존재 빈도

표 8a-c는 코 점막에 병변을 갖는 것으로 관찰된(병변 = 1) 처리된 각각의 그룹의 동물들 및 병변이 없는(병변 = 0) 동물들의 수를 보여준다.

<표 8a-c>

실시예 6

테스트 아이템들은 아쥬반트 B, 항원(5 μg) 및 0.1 μg/μl의 항원 농도와 함께 0.5 또는 2% 아쥬반트의 서로 다른 농도들(0.5, 및 2%)일 것이다. 테스트 아이템들이 각각의 래트에 50 μl의 총 부피로 투여될 것이기 때문에, H1N1을 포함하는 시험 아이템들은 0.5 또는 2 % 아쥬반트 + 5 μg 항원으로써 지정되었다.

대조 아이템

비히클, 0.1 M 트리스 버퍼

재료 및 방법들

동물들:

연구는 양성의 (42 수컷들 및 42 암컷들) 84 마리의 SD 래트들을 이용하여 수행될 것이며, 이들은 도착 시 약 200 g의 무게였다((ID 2244-8 내지 2285-8 수컷들 및 ID 2287-8 내지 2328-8 암컷들). 동물들은 스캔버 BK, 솔렌튜나, 스웨덴(Scanbur BK, Sollentuna, Sweden)으로부터 수득될 것이다. 동물들은 (각각 3 마리 씩) M4 케이지들에서 보관될 것이다. 그것들은 물 및 락타민 AB, 스웨덴(Lactamin AB, Sweden)으로부터 상업적 사료 R34에 자유롭게 접근하도록 제공될 것이다. 모든 동물들은 실험 개시에 앞서 최소 7일 간 적응될 것이다. 실험은 웁살라(Uppsala)의 지역 동물 실험 윤리 위원회(regional animal experimental ethics committee)에 의하여 승인되었다(C25/7). 래트들은 이러한 종류의 연구에서 다루기 쉽기 때문에 선택된다.

시험 및 대조 아이템들의 투여:

동물들은 7개 그룹으로 나뉠 것이다(6마리 암컷 및 6마리 수컷 래트들/그룹). 모든 동물들은 비히클, 아쥬반트, 항원 또는 아쥬반트 + 바이러스 항원과 함께, 피펫으로 50 μl의 부피로(각각의 콧구멍에 대략 25 μl) 코에 투여(가벼운 아이소플루레인 마취(Isoflurane anaesthesia) 하)함으로써 처리될 것이다. 투여 후 동물들은 몇 분 간 마취를 유지시켜, 유동체가 흡수되도록 하고 비강으로부터 용액이 흘러나올 위험을 최소화할 것이다. 투여는 간격을 두고 14일 동안 4 회 수행될 것이다. 동물들은 하기와 같이 처리될 것이다:

그룹 1: 비히클

그룹 2: 낮은 투여량 (0.5%) 아쥬반트

그룹 3: 높은 투여량 (2%) 아쥬반트

그룹 4: 바이러스 항원 (단독) 혈청형(serotype) H1N1 (5 μg)

그룹 5: 낮은 투여량 아쥬반트 0.5% + 바이러스 항원 (5 μg)

그룹 6: 높은 투여량 아쥬반트 2% + 바이러스 항원 (5 μg)

그룹 7: 높은 투여량 아쥬반트 2% + 바이러스 항원 (5 μg)

기술적 주

조직들은 하기와 같이 라벨링된 몇몇의 카세트들로(cassettes) 세분되었다:

K1 : 스컬(scull), 레벨 1

K2: 스컬, 레벨 2

K3: 스컬, 레벨 3

K4: 스컬, 레벨 4.

표에 다르게 명시되지 않는다면, 조직 블록(tissue block) 당 하나의 슬라이드가 있다. 새로운 절개(new sections)를 갖는 슬라이드들(즉, 재절개(re-sectioning)된 조직 블록들(tissue block))은 n.s.("새 절개(new section")로 라벨링되었다. "niv8..."(레벨)로 라벨링된 슬라이드들은 절개들이 하나 이상의 레벨로부터 가져왔다는 것을 반영한다.

그룹 1 :

그룹 2 :

그룹 3 :

그룹 4 :

그룹 5 :

그룹 6 :

그룹 7 :

그 결과, 미세형태적인 변화들의 빈도는 상기 표들에 보인 바와 같이 모든 그룹에서 매우 낮았다. 이러한 비강 또는 후 신경구의 형태학적 변화들과 벨 마비의 발생 간의 직설적인 관련성(indicative link)이 있기 때문에, 이러한 결과들은 본 발명에 따른 아쥬반트의 이용에 의하여 벨 마비의 발생이 정상적으로 관찰되는 빈도(즉, 100.000 명 당 약 30-40 명들)와 동일하게 될 것으로 기대될 수 있다는 것을 명백하게 보여준다.

Claims

백신 내 아쥬반트의 용도로, 상기 아쥬반트는
i) 하나 또는 그 이상의 카르복실산들 또는 하나 또는 그 이상의 아민들
및 선택적으로
b) 하나 또는 그 이상의 모노-글리세라이드들을 포함하고
이로써, 대상자의 벨 마비의 위험을 자연적으로 발생하는 발생 정도로 감소시킨다.
제 1항에 있어서,
상기 하나 또는 그 이상의 아민들은 가지달리거나 가지 없는, 환상(cyclic) 또는 아크릴, 치환되거나 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐 아민들이고, 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)을 갖고, 이는 나아가 예컨대, 6부터 24까지 탄소 원자들, 8부터 20까지 탄소 원자들 또는 12부터 20까지 탄소 원자들과 같은, 4부터 30까지 탄소 원자들의 선택적으로 서로 다른 종류일 수 있는 용도.
제 1항 내지 제 2항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 하나 또는 그 이상의 아민들은 라우릴 아민(lauryl amine) (C12), 미리스틸 아민(myristyl amine) (C14), 세틸 아민(cetyl amine)(C16), 팔미톨레일 아민(palmitoleyl amine) (C16:1), 올레일 아민(oleyl amine) (C18: 1), 리놀레일 아민(linoleyl amine) (C18:2) 및 스테아릴 아민(sterayl amine) (C18)인 용도. 다른 예들은 헥실 아민(hexyl amine), 옥틸 아민(octyl amine), 데실 아민(decyl amine), 운데실 아민(undecyl amine), 도데실 아민(dodecyl amine) 단독 또는 임의의 조합들이다.
제 1항에 있어서,
상기 하나 또는 그 이상의 카르복실산들은 가지없는, 환상 또는 아크릴, 치환되거나 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐 카르복실산들로부터 선택되고, 이는 선택적으로 많은 불포화(이중 또는 삼중 결합)을 갖고, 이는 나아가 동일한 분자 내 선택적으로 서로 다른 종류이고, 4부터 30까지 탄소 원자들, 또는 6부터 24까지 탄소 원자들, 또는 8부터 20까지 탄소 원자들, 또는 12부터 20까지 탄소 원자들로부터 선택될 수 있는 용도.
제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 카르복실산은 라우릭 액시드(lauric acid), 미리스틱 액시드(myristic acid), 팔미틱 액시드(palmitic acid), 팔미톨레익 액시드(palmitoleic acid), 올레익 액시드(oleic acid), 리놀레익 액시드(linoleic acid), 스테아릭 액시드(stearic acid), 헥사노익 액시드(hexanoic acid), 카프릴릭 액시드(caprylic acid), 데카노익 액시드(decanoic acid)(카프릭 액시드(capric acid)), 아라키딕 액시드(arachidic acid), 베헤닉 액시드(behenic acid), 리그노세릭 액시드(lignoceric acid), 알파-리놀레닉 액시드(alpha-linolenic acid), 스테아리도닉 액시드(stearidonic acid), 아이코사펜타에노익 액시드(eicosapentaenoic acid), 도코사헥사에노익 액시드(docosahexaenoic acid), 감마-리놀레닉 액시드(gamma-linolenic acid), 디호모-감마-리놀레닉 액시드(dihomo-gamma-linolenic acid), 아라키도닉 액시드(arachidonic acid), 에루식 액시드(erucic acid) 및 네르보닉 액시드(nervonic acid)로부터 선택되는 하나 또는 그 이상인 용도.
제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 모노글리세라이드들은 예컨대, 라우릭 액시드(lauric acid) (C12), 미리스틱 액시드(myristic acid) (C14), 팔미틱 액시드(palmitic acid) (C16), 팔미톨레익 액시드(palmitoleic acid) (C16: 1), 올레익 액시드(oleic acid) (C18: 1), 리놀레익 액시드(linoleic acid) (C18:2), 스테아릭 액시드(stearic acid), 헥사노익 액시드(hexanoic acid), 카프릴릭 액시드(caprylic acid), 데카노익 액시드(decanoic acid) (카프릭 액시드(capric acid)), 아라키딕 액시드(arachidic acid), 베헤닉 액시드(behenic acid), 리그노세릭 액시드(lignoceric acid), 알파-리놀레닉 액시드(alpha-linolenic acid), 스테아리도닉 액시드(stearidonic acid), 아이코사펜타에노익 액시드(eicosapentaenoic acid), 도코사헥사에노익 액시드(docosahexaenoic acid), 감마-리놀레닉 액시드(gamma-linolenic acid), 디호모-감마-리놀레닉 액시드(dihomo-gamma-linolenic acid), 아라키도닉 액시드(arachidonic acid), 에루식 액시드(erucic acid), 네르보닉 액시드(nervonic acid) 또는 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 카르복실산들로 모노-에스테르화된 글리세라이드들인 용도.
제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 모노글리세라이드의 농도는 예컨대, 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 약 0.1 g 내지 약 50g의 범위 내이고, 또는, 예컨대 100 ml 당 약 1g 내지 약 20g, 또는 아쥬반트 100 ml 당 예컨대 0.5 g 내지 약 30g과 같은, 약 예컨대 0.5g 내지 약 25g과 같은, 예컨대 1 g 내지 약 20 g과 같은, 약 2 g 내지 약 15 g과 같은, 예컨대 5 g 내지 약 10 g과 같은 예컨대 약 0.5g 내지 약 40g의 범위 내인 용도.
제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 카르복실산 농도는 예컨대, 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 약 0.1g부터 약 -50g까지의 범위 내, 또는 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 약 1 g 내지 약 20 g 또는, 아쥬반트 혼합물 100 ml 당 예컨대 0.5 g 내지 약 30g과 같은, 약 예컨대 0.5g 내지 약 25 g과 같은, 예컨대 1 g 내지 약 20g과 같은, 약 2 g 내지 약 15 g과 같은, 예컨대 5 g 내지 약 10 g과 같은, 약 0.5 g 내지 약 40 g의 범위 내일 수 있는 용도.
제 1항 내지 제 8항 중 어느 한 항에 있어서,
아쥬반트 혼합물 내 하나 또는 그 이상의 카르복실산들과 함께 하나 또는 그 이상의 모노글리세라이드들은 기껏해야 75% w/v, 또는 기껏해야 50% w/v, 또는 기껏해야 25% w/v, 또는 기껏해야 20% w/v, 또는 기껏해야 15% w/v, 또는 기껏해야 10% w/v, 또는 기껏해야 5% w/v, 또는 기껏해야 4% w/v, 또는 기껏해야 3% w/v, 또는 기껏해야 2% w/v 또는 기껏해야 1 % w/v 또는 기껏해야 0.5% w/v 또는 기껏해야 0.1 % w/v인 용도.
제 1항 내지 제 9항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 모노글리세라이드는 모노-올레인(mono-olein)이고, 카르복실산은 올레익 액시드 및/또는 라우릭 액시드인 용도.
제 1항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 아쥬반트는 두 개의 아민을 포함하여, 두 개의 아민들 간의 w/w 비율이 예컨대 약 0.25부터 약 9까지, 약 0.5부터 약 8까지, 약 0.75부터 약 7까지, 약 1부터 약 6까지, 약 1부터 약 5까지, 약 1부터 약 4까지, 약 1부터 약 3까지, 약 1부터 약 2까지 또는 약 1부터 약 1까지와 같은, 약 0.1부터 약 10까지인 용도.
제 1항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 하나의 아민은 올레일 아민 또는 라우릴 아민인 용도.
제 1항 내지 제 12항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 두 개의 아민들은 올레일 아민 및 라우릴 아민의 혼합물인 용도.
제 1항 내지 제 13항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 올레일 아민의 라우릴 아민에 대한 w/w 비율은, 예컨대 약 0.25부터 약 9까지, 약 0.5부터 약 8까지, 약 0.75부터 약 7까지, 약 1부터 약 6까지, 약 1부터 약 5까지, 약 1부터 약 4까지, 약 1부터 약 3까지, 약 1부터 약 2까지 및 약 1부터 약 1까지와 같은, 약 0.1부터 약 10까지일 수 있는 용도.
제 1항 내지 제 14항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 아쥬반트는 예컨대 2 또는 그 이상의 아민들과 같은, 예컨대 3 또는 그 이상의 아민들과 같은, 예컨대 4 또는 그 이상의 아민들과 같은 하나 또는 그 이상의 아민들을 포함하고, 모노글리세라이드들은 포함하지 않는 용도.
제 15항에 있어서,
상기 하나의 아민은 올레일 아민 또는 라우릴 아민인 용도.
제 15항에 있어서,
상기 둘 또는 그 이상의 아민들은 올레일 아민 및 라우릴 아민의 혼합물인 용도.
제 1항 내지 제 17항 중 어느 한 항에 있어서,
아쥬반트-포함하는 배지 내 아민의 총 양은 예컨대 약 0.25% w/v부터 약 12.5% w/v까지, 약 0.5% w/v부터 약 10% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 7.5% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 5% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 4% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 3% w/v까지, 약 1 % w/v부터 약 2% w/v까지 또는 약 0.5% w/v부터 약 4% w/v까지와 같은, 약 0.1 % w/v부터 약 15% w/v까지인 용도.
제 1항 내지 제 18항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 아쥬반트는 배지를 더 포함하는 용도.
제 1항 내지 제 19항에 있어서,
상기 배지는 수성인 용도.
제 1항 내지 제 20항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 배지는, 예컨대 약 pH 4부터 약 pH 9까지와 같은, 예컨대 약 pH 5부터 약 pH 7까지와 같은, 예컨대 약 pH 5.5부터 약 pH 6.5까지와 같은,또는 예컨대 약 pH 6 또는 약 pH 5 또는 약 pH 8 또는 예컨대 약 pH 7.5 내지 약 pH 8.5와 같은 약 pH 7 내지 약 pH 9,와 같은 생리학적으로 허용 가능한 범위 내 pH를 갖는 용도.
제 1항 내지 제 21항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 배지는 계면활성제(surface-active agent)를 더 포함하는 용도.
제 1항 내지 제 22항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 계면활성제는 친수성이고, 비활성이며, 예컨대 플루로닉 F68 또는 플루로닉-127과 같이 생체 적합한 것인 용도.
제 1항 내지 제 23항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 아쥬반트는 예컨대 스쿠알렌, 대두유 또는 예컨대 알루미늄 하이드록사이드, 알루미늄 포스페이트, 알루미늄 하이드록시포스페이트 설페이트, 알루미늄 포타슘 설페이트 과 같은 알루미늄 염 또는 이들의 임의의 조합과 같은 추가적인 아쥬반트를 더 포함하는 용도.
제 1항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 배지는 하나 또는 그 이상의 생리학적으로 허용 가능한 첨가제들 또는 예컨대, 완충화제, 안정화제, 삼투 활성제, 보존제들 및 pH 조정제와 같은 약학적 부형제들 또는 이들의 임의의 조합을 더 포함하는 용도.
백신 및 이로써 자연적으로 발생하는 발생 정도인 약 40/100.000보다 높은 빈도로 대상자에서 벨 마비를 피하는 용도로, 상기 백신은 하기를 포함한다:
i) 청구항 1-25 중 하나에서 정의한 대로의 아쥬반트
ii) 항원
제 26항에 있어서,
상기 항원은 예컨대, 박테리아, 바이러스, 기생충(parasite), 알레르기, 암 항원 또는 이들의 조합으로부터 선택되는 용도.
제 26-27항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항원은 예컨대 헤파티티스 바이러스(hepatitis viruses) A, B, C, D & E3, HIV, 헤르페스 바이러스(herpes viruses) 1 ,2, 6 & 7, 사이토메갈로바이러스(cytomegalovirus), 바리셀라 조스터(varicella zoster), 파필로마 바이러스(papilloma virus), 엡슈타인 바 바이러스(Epstein Barr virus), 인플루엔자 바이러스(influenza viruses), 파라-인플루엔자 바이러스(para-influenza viruses), 아데노바이러스(adenoviruses), 번약 바이러스(bunya viruses)(한타 바이러스((hanta virus)), 콕사키 바이러스(coxsakie viruses), 피코르나 바이러스(picorna viruses), 로타바이러스(rotaviruses), 레스피레토리 신크셜 바이러스(respiratory syncytial viruses), 팍스 바이러스(pox viruses), 리노바이러스(rhinoviruses), 루벨라 바이러스(rubella virus), 파포바바이러스(papovavirus), 멈프스 바이러스(mumps virus) 및 메아슬레스 바이러스(measles virus), 결핵 및 한센병을 야기하는 마이코박테리아(mycobacteria), 뉴모사이(pneumocci), 호기성 그램 네거티브 바실리(aerobic gram negative bacilli), 마이코플라즈마(mycoplasma), 스타필로코컬 감염들(staphyloccocal infections), 스트렙토코컬 감염들(streptococcal infections), 살모넬라(salmonellae) 및 클라미디아(chlamydiae), 헬리코박터 파일로리(helicobacter pylori), 말라리아(malaria), 레슈마니아시스(leishmaniasis), 트리파노소미아시스(trypanosomiasis), 톡소플라즈모시스(toxoplasmosis), 쉬스토소미아시스(schistosomiasis), 필라리아시스( filariasis)와 같은 하나 또는 그 이상의 바이러스 또는 박테리아 또는 기생충(parasitic) 항원들로부터 선택되는 용도.
제 26-27항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항원은 예컨대 결핵 및 한센병을 야기하는 마이코박테리아, 뉴모사이, 호기성 그람 네거티브 바실리, 마이코플라즈마, 스타필로코컬 감염들, 스트렙토코컬 감염들, 살모넬라 및 클라미디아와 같은 감염을 야기하는 하나 또는 그 이상의 항원으로부터 선택되는 용도.
제 26-27항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항원은 기생 말라리아(parasitic malaria), 레슈마이어증(leishmaniasis), 트리파노소마증(trypanosomiasis), 톡소플라즈마증(toxoplasmosis), 주혈흡충병(schistosomiasis), 필라리아병(filariasis)을 야기하는 하나 또는 그 이상의 항원들로부터 선택되는 용도.
제 26-27항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항원은 예컨대, 유방암, 위암, 결장암(colon cancer), 직장암(rectal cancer), 머리 및 목의 암, 신장암, 악성 흑색종, 후두암, 난소암, 자궁경부암, 전립선암과 같은 많은 종류의 암을 야기하는 하나 또는 그 이상의 항원들로부터 선택되는 용도.
제 26-27항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항원은 집먼지 진드기, 화분 또는 다른 환경적인 알레르겐들 때문인 알레르기 및 예컨대 전신성 홍반성 낭창과 같은 자가면역질환을 야기하는 하나 또는 그 이상의 항원들로부터 선택되는 용도.
제 26-32항 중 어느 한 항에 있어서,
면역 반응을 끌어내기에 충분한 양의 항원 및 아쥬반트를 포함하는 용도.
제 26-33 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 백신은 수성 배지를 더 포함하는 용도.
제 26-34항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 백신은 비경구 또는 점막 투여에 적합한 형태인 용도.
제 26-35 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 백신은 코, 입, 질, 직장 또는 창자(intestin)의 점막에 투여하기에 적합한 형태인 용도.
제 36항에 있어서,
상기 백신은 비강의 점막에 투여하는 것인 용도.
제 37항에 있어서,
백신을 비강에 분무하거나 또는 비강의 점막에 피펫을 통하여 백신을 방울방울 떨어뜨려 백신을 투여함으로써 비강의 점막에 상기 백신을 투여하는 것인 용도.
제 26-38 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 백신은 하기를 포함하는 용도:
최종 백신 조성물 100 g 당
i) 약 0.1 g부터 약 90 g까지의 카르복실산
ii) 약 0.1 g부터 약 90g까지의 모노글리세라이드
iii) 약 0.001부터 약 0.01 g까지 약 90g까지의 항원.
제 39항에 있어서,
상기 카르복실산은 올레익 액시드 및/또는 라우릭 액시드이고, 상기 모노글리세라이드는 모노-올레인인 용도.
제 26-38항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 백신 조성물은 올레일 아민 및 스쿠알렌 또는 대두유를 포함하는 용도.
제 41항에 있어서,
상기 백신 조성물은 스쿠알렌 또는 대두유 또는 이들의 혼합물로부터 선택되는 추가적인 아쥬반트를 더 포함하는 용도.
제 26-38항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 백신 조성물은 올레일 아민 및 라우릴 아민을 포함하는 용도.
제 43항에 있어서,
상기 백신 조성물은 스쿠알렌, 대두유 또는 이들의 혼합물로부터 선택되는 추가적인 아쥬반트를 더 포함하는 용도.