KR20130108995A - 서던우드의 추출물 및 아민 화합물을 포함하는 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 서던우드 추출물 및 아민 화합물을 포함하는 조성물, 및 상기 조성물로 피부를 처리하는 방법에 관한 것이다.

Description

서던우드의 추출물 및 아민 화합물을 포함하는 조성물{COMPOSITIONS COMPRISING EXTRACTS OF SOUTHERNWOOD AND AN AMINE COMPOUND}

관련 출원과의 상호 참조

본 출원은 2010년 5월 7일자로 출원된 미국 특허 출원 제12/775,938호의 일부 계속 출원이다. 전술한 출원의 전체 개시 내용은 모든 목적상 본 명세서에 참고로 포함된다.

본 발명은 서던우드(Southernwood)의 추출물 및 아민 화물을 포함하는 조성물과, 이들 조성물의 사용 방법에 관한 것이다. 본 조성물은, 예를 들어 가시적 건성 피부(visibly dry skin)를 처리하는 데 유용하다.

사람 피부의 상층, 즉 각질층(stratum corneum; SC)은 지질 매트릭스 내에 매립된 단백질 풍부 각질세포로 이루어진다. 내부로부터의 수분 및 영양소의 손실을 방지하는 환경에 대한 신체의 보호 장벽으로서의 이 구조의 주요 기능은 SC 지질의 수준, 조성 및 구조에 의해 주로 결정된다. SC 지질은 또한 SC의 기계적 및 낙설(피부 세포 박리) 활동에 영향을 준다. 노화되거나 광손상된 피부와 같은 다양한 상태와 관련하여, 또는 겨울철 동안의 건조증과 같은 건조증(이상 건조 상태)과 관련하여 SC 지질에서의 이상이 일어날 수 있다.

소수성 화합물의 국소 적용에 의해 SC 지질을 보충(replenish)하는 것이 사용되어 온 접근법이며, 이때 성공은 제한적이었다. 더 오래 지속되는 접근법은 이들 지질, 및 특히 세라미드로서 알려진 매우 중요한 SC 지질 부류의 신체의 자연 생성을 상향조절하는 천연 추출물 또는 화합물을 사용하여 생존(viable) 표피의 견고한 표피 지질 생합성 경로를 활용하는 것이다. 예를 들어, 니코틴아미드는 SC의 세포간 공간 내에 라멜라 시트(lamellar sheet)로서 존재하는 지질의 주요 구성성분인 세라미드의 합성을 증가시키는 것으로 보고되어 왔다. 문헌[Br. J. Dermatol. (2000 Sep.) 143(3):524-31]. 게다가, 락트산의 소정 이성체가 세라미드 생합성을 자극하는 것으로 또한 보고되어 있다. 문헌[Arch. Dermatol. Res. (1996) 288: 383-390].

세라미드가 피부의 더욱 깊은 심부층들(즉, 피하조직(hypodermis))에 존재하는 지질과는 기능적으로 그리고 구조적으로 구별된다는 것은 잘 인식되어 있다. 예를 들어, 세라미드는 피부 장벽 기능을 향상시키도록 세포막 구조에서 그 역할을 하는 극성 지질 부류이지만, 더욱 깊은 심부 피하조직 지질은 비극성 지질로 이의 기능은 에너지 저장, 단열, 및 기계적 손상으로부터의 내부 기관의 보호에 관련된다.

서던우드 추출물은, 추측하건대 피하조직의 비극성 지질에 영향을 줌으로써 "지방 재구성(fat restructuring)" 및 지방생성(adipogenesis)의 자극에 적합한 것으로 보고되어 왔다. 미국 특허 공개 제2009/0285868 A1호를 참조하라. 놀랍게도, 본 발명자는 전적으로 상이한 생물학적 경로에 작용하는 서던우드 추출물이 세라미드의 생합성을 향상시키는 데 적합함을 지금에 와서야 알아내게 되었다. 따라서, 본 발명자는 서던우드 추출물이 당업계에 알려진 것과는 완전히 상이한 필요 상태, 및 완전히 상이한 피부를 처리하는 데 현저하게 적합함을 알아내게 되었다. 구체적으로, 본 발명자는 서던우드 추출물이 가시적 건성 피부, 예를 들어 건조증 피부의 국소 처리에 놀라울 정도로 적합함을 알아내게 되었다.

더욱이, 본 발명자는 서던우드 추출물이 특정 아민 화합물과 조합될 때, 세라미드 합성을 향상시키는 데 뿐만 아니라 각질층의 상부층 내에서 수화(수분 수준)를 유지하는 데에도 놀라울 정도로 개선된 능력을 제공함을 지금에 와서야 알아내게 되었다.

본 발명은 서던우드 추출물 및 하기에 나타낸 화학식 I 또는 화학식 II의 아민 화합물, 또는 이의 화장품용으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물에 관한 것이다:

[화학식 I]

[화학식 II]

상기 화학식들에서, R₁, R₂, R₃, R₄, 및 R₅는 독립적으로 수소, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 하이드록시알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 조성물은 가시적 건성 피부를 처리하는 데 사용될 수 있다. 따라서, 다른 태양에서, 본 발명은 가시적 건성 피부의 처리 방법에 관한 것이다. 본 방법은 서던우드 추출물 및 상기에 기재된 아민 화합물을 포함하는 조성물을 상기 피부에 국소 적용하는 단계를 포함한다.

본 발명의 다른 특징 및 이점은 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 및 특허청구범위로부터 명백할 것이다.

달리 정의되지 않으면, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 숙련자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 또한, 본 명세서에서 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허, 및 기타 참고 문헌이 참고로 포함된다. 달리 표시되지 않으면, 백분율은 중량 기준 백분율(즉, %(W/W))을 말한다. 달리 언급되지 않는다면, 모든 범위는 종점을 포함하며, 예를 들어, "4 내지 9"는 종점 4 및 9를 포함한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "가시적 건성 피부"는 박편화(flaking)의 가시적 징후를 나타내는 건조하거나 탈수된 피부를 말한다. 본 발명의 소정 실시 형태에서, 가시적 건성 피부는 문헌[Rawlings et al., J. Soc. Cosmet. Chem. 45: 203-220 July/August 1994]에 따라 하기 방식들 중 하나 이상으로 임상적으로 특징지워진다: 건조한 피부의 작은 박편을 갖고 피문학적 삼각형(dermatoglyphic triangle)의 백화를 갖는 피부(경도 건조증); 가벼운 분말상 외양을 주는 작은 건성 박편을 갖는 피부 - 피문학적 삼각형의 코너가 융기되기 시작하였음(중등도 건조증); 또는 전체 길이의 다수의 피문학적 삼각형이 융기되어 큰 건조한 피부 박편이 생성된 피부 - 거칠음(roughness)이 매우 명백함(명확한 건조증). 본 발명의 소정의 다른 실시 형태에서, 가시적 건성 피부는 각질층 내에 불충분한 수준의 세라미드를 갖는다.

소정 실시 형태에서, 가시적 건성 피부는 손상된 장벽 특성을 갖는 피부, 또는 습진성 피부, 건선성 피부와 같은 소정 질환 상태를 특징으로 하는 피부, 또는 아토피성 피부염을 특징으로 하는 피부로서 분류될 수 있지만 반드시 그러한 것은 아니다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "습진"은 표피의 염증을 수반하고 흔히 인설성 및 소양성 발진으로서 나타나는 만성 피부 장애를 말한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "아토피성 피부염"은 일종의 만성 재발성, 비전염성의 그리고 소양증성의 습진 형태를 말한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "건선"은 흔히 무릎 및 팔꿈치와 같은 신근면 상에 존재하는, 과도한 염증 또는 과도한 피부 생성의 붉은 인설성 패치 또는 플라크로서 나타나는 만성 비감염성 질환을 말한다.

가시적 건성 피부는 신체의 다른 영역들 중에서도 특히 손, 발, 두피, 팔꿈치, 무릎, 발목, 목덜미를 비롯한 신체 또는 얼굴에 존재할 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "처리하는"은 소정 상태 또는 질환의 존재 또는 출현을 완화, 감소, 방지, 개선, 또는 제거하는 것을 말한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "화장품"은 특히 조직 또는 피부의 외양에 관련될 때 신체의 아름다움의 외양을 보존하거나, 회복시키거나, 부여하거나, 시뮬레이팅하거나, 향상시키거나, 또는 아름다움 또는 젊음을 향상시키는 것으로 보이는 아름답게 하는 물질 또는 제제를 말한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "화장품용으로 허용가능한"은 합리적인 효과/위험 비에 비례하여, 과도한 독성, 불상용성, 불안정성, 자극, 알러지 반응 등이 없이, (사람) 조직(예를 들어, 피부)과 접촉하여 사용하기에 적합함을 의미한다.

당업자는 본 명세서의 설명에 기초하여, 본 발명을 그의 가장 완전한 범위까지 이용할 수 있을 것으로 여겨진다. 하기의 구체적인 실시 형태는 어떤 방식으로도 본 발명의 나머지 부분을 제한하는 것이 아니라 단지 예시적인 것으로 해석되어야 한다.

서던우드 추출물

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "서던우드"는 아르테메시아 아르브로타움(Artemesia arbrotaum) 속/종의 식물을 말한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "서던우드의 추출물" 또는 "서던우드 추출물"은 서던우드 식물의 하나 이상의 부분들(예를 들어, 꽃, 종자, 뿌리, 근경, 줄기, 열매 및/또는 잎) - 이들은 선택적으로 단리될 수 있음 - 로부터 얻어진 추출물을 말한다. 서던우드 추출물은, 예를 들어 수확한 식물 또는 이의 부분들을 미분화함으로써, 예를 들어 미분화된 고형물 또는 분말로 파쇄하거나, 분쇄하거나 또는 밀링함으로써 제조될 수 있다. 식물 또는 이의 부분들은 바람직하게는 용매, 예를 들어 증기, 물(가열될 수 있거나 가열되지 않을 수 있음), 또는 다른 용매와 접촉시켜 이의 일부를 추출한다.

본 발명의 소정 실시 형태에서, 서던우드 추출물은 올리고당류들의 혼합물을 포함한다. 소정 실시 형태에서, 서던우드 추출물은 중합도가 1 내지 4인 올리고당류, 및 폴리페놀을 포함한다. 다른 실시 형태에서, 서던우드 추출물은 중합도가 1 내지 4인 올리고당류, 단백질, 및 폴리페놀을 포함한다. 예를 들어, 서던우드 추출물은 약 1%의 폴리페놀, 약 16%의 단백질, 및 중합도가 1 내지 4인 약 83%의 당류를 포함하는 활성제 함량(즉, 추출 공정에 이용된 모든 용매를 제외한 부분)을 가질 수 있다. 당류는 단당류, 삼당류, 및 사당류를 포함할 수 있다. 일 실시 형태에서, 당류는 단당류(예를 들어, 약 54%), 삼당류(약 12%), 및 사당류(예를 들어, 약 34%)를 포함할 수 있다.

조성물 내의 서던우드 추출물의 양은 조성물의 중량을 기준으로 약 0.5% 내지 약 10%, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%, 더욱 바람직하게는 약 0.75% 내지 약 5%, 더욱 더 바람직하게는 약 1% 내지 약 4%, 그리고 가장 바람직하게는 약 2% 내지 약 3%일 수 있다.

특히 적합한 한 가지의 서던우드 추출물은 프랑스 소재의 실랩(Silab)으로부터 풀팍틸(PULPACTYL)로서 구매가능한데, 이는 서던우드의 물-글리콜 추출물이며 물 및 부틸렌 글리콜을 포함한다.

적합한 추출 공정은 서던우드 식물의 하나 이상의 부분들을 물 및/또는 부틸렌 글리콜을 포함하는 용매 시스템과 접촉시키는 것을 포함할 수 있다.

예를 들어, 이 식물은 분말화되고 물/부틸렌 글리콜 혼합물 중에서 혼합되고, 상분리되고, 여과되고, 살균될 수 있다. 예를 들어, 프랑스 특허 제2890312 A1호를 참조하라.

아민 화합물

본 발명의 조성물은 하기 화학식 I 또는 화학식 II의 아민 화합물, 또는 이의 화장품용으로 허용가능한 염을 포함한다:

[화학식 I]

[화학식 II]

상기 화학식들에서, R₁, R₂, R₃, R₄, 및 R₅는 독립적으로 수소, C1-C6 알킬, 및 C1-C6 하이드록시알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.

화학식 I의 바람직한 아민 화합물의 예에는 그 구조가 하기에 개시되어 있는, N,N,N',N'-테트라키스(2-하이드록시프로필)에틸렌 다이아민 (THPED), N,N,N',N'-테트라키스(2-하이드록시에틸)에틸렌 다이아민 (THEED) 및 N,N,N',N'-테트라메틸에틸렌 다이아민 (TEMED), 이들의 거울상 이성체, 이들의 부분입체 이성체, 및 이들의 화장품용으로 허용가능한 염이 포함되지만 이에 한정되지 않는다.

(THPED)

(THEED)

(TEMED)

바람직한 실시 형태에서, 아민 화합물은 THPED이다. THPED는 바스프(BASF)로부터 뉴트롤(NEUTROL) TE로서 구매가능하다.

조성물 중의 아민 화합물의 양은 조성물의 중량을 기준으로 약 0.1% 내지 약 10%, 바람직하게는 약 0.2% 내지 약 5%, 더욱 바람직하게는 약 0.25% 내지 약 2.5%, 그리고 가장 바람직하게는 조성물의 중량을 기준으로 약 0.5% 내지 약 2%일 수 있다.

본 발명의 소정 실시 형태에서, 조성물 중의 서던우드 추출물 대 아민 화합물의 중량비는 약 0.3 내지 약 10, 바람직하게는 약 0.5 내지 약 5, 더욱 바람직하게는 약 1 내지 약 4, 그리고 가장 바람직하게는 약 2 내지 약 3이다.

국소 조성물

서던우드 추출물은 하나 이상의 화장품용으로 허용가능한 담체와 조합되어 가시적 건성 피부 상에 사용하기에 적합한 조성물(예를 들어, 제형)을 형성할 수 있다.

본 발명의 적합한 담체는 1,2-프로판다이올, 글리세린, 프로필렌 글리콜, 부틸렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 및 이들의 조합을 포함하는, 습윤(humectancy) 특성을 갖는 것들과 같은 다이올 또는 폴리올뿐만 아니라 물도 포함하지만 이에 한정되지 않는다. 소정 실시 형태에서는 에탄올 및 아이소프로판올과 같은 저급 알코올이 포함될 수 있지만, 다른 실시 형태에서는 피부 건조의 가능성을 감소시키기 위하여, 이들 알코올은 조성물로부터 제외된다(예를 들어, 0.5% 미만으로 존재한다).

가시적 건성 피부의 처리를 촉진시키기 위하여, 본 발명의 소정 실시 형태에서, 화장품용으로 허용가능한 담체는 휴멕턴트(humectant)와, 연화제 둘 모두를 포함한다. 연화제는, 물에서 일반적으로 불용성이고 피부를 위한 "리브온(leave on)" 응용에 적합한 화장품 성분을 의미한다.

연화제는 다음 3가지 기준 중 하나 이상을 충족시키는 소수성 부분을 포함할 수 있다: (a) 6개의 탄소 중 어느 것도 카르보닐 탄소가 아니거나 또는 6개의 탄소 중 어느 것에도 친수성 부분(하기에 정의됨)이 직접적으로 결합되지 않은 적어도 6개의 탄소의 탄소 사슬을 가짐; (b) 둘 이상의 알킬 실록시 기를 가짐; 또는 (c) 둘 이상의 옥시프로필렌 기를 차례로 가짐. 소수성 부분은 선형, 환형, 방향족, 포화 또는 불포화 기를 포함할 수 있다. 당업자는 연화제가 양친매성 분자, 예를 들어 유화제, 계면활성제 및 기타 표면 활성 화합물을 포함하지 않음을 인식할 것이다. 연화제로부터 제외될 것으로 이해되는 양친매성 분자는 (a) 상기 정의된 소수성 부분 및 (b) 설페이트, 설포네이트, 카르복실레이트, 포스페이트, 포스포네이트, 모노-, 다이-, 및 트라이알킬암모늄 화학종을 포함하는 암모늄, 피리디늄, 이미다졸리늄, 아미디늄, 폴리(에틸렌이미늄), 암모니오알킬설포네이트, 암모니오알킬카르복실레이트, 암포아세테이트, 하이드록실, 및 폴리(에틸렌옥시)설포닐을 비롯하여 극성인 친수성 부분, 예를 들어 음이온성, 양이온성, 쯔비터이온성, 또는 비이온성 기 둘 모두를 포함하는 화합물들을 포함한다. 유화제, 계면활성제 및 기타 표면 활성 화합물은 보통 필름-형성, 펴바름(spreading) 등에 사용되기보다는 오히려 유화 및 습윤에 사용된다.

연화제의 예에는 바셀린을 포함한 광유/광랍; 식물성 오일(지방산의 글리세릴 에스테르, 트라이글리세라이드), 왁스, 기타 지방 에스테르가 포함된다. 구체적인 비제한적인 예에는 한정됨이 없이 아이소프로필 팔미테이트, 아이소프로필 미리스테이트, 다이메티콘, 시어 버터, 바셀린, C12-C15 알킬 벤조에이트, 카프릴릭/카프릭 트라이글리세라이드, 다양한 식물성 왁스, 및 광유가 포함된다.

다양한 화합물이 화장품용으로 허용가능한 담체 내에 포함되어 오스몰 농도(osmolarity) 및/또는 pH를 허용가능한 수준으로 변경시킬 수 있다. 이들에는 염화나트륨, 제1인산나트륨, 제2인산나트륨, 수산화나트륨, 및 시트르산이 포함되지만 이에 한정되지 않는다.

적합한 화장품용으로 허용가능한 담체의 제형을 용이하게 하기 위하여, 다양한 기능성 성분들 중 임의의 성분을 조성물 내에 포함시킬 수 있다. 예를 들어, 다수의 금속 이온 봉쇄제(sequesterant), 유화제, 증점제, 중합체, 방부제, 착색제, 방향제, 산화방지제, 및 개인 케어 및 화장품에서 통상적으로 사용되는 다른 성분들 중 임의의 것을 포함시킬 수 있다. 적합한 유화제에는, 예를 들어, 폴리에톡실화 지방 알코올, 글리세롤의 에스테르를 포함하는 지방 알코올과 같은 비이온성 유화제; 알킬 포스페이트와 같은 음이온성 유화제; 알킬 4차 암모늄 화합물과 같은 양이온성 유화제가 포함된다. 적합한 증점제에는 소수성으로 개질된 아크릴 중합체, 셀룰로오스 중합체 및 점토(clay)가 포함된다.

(생성물이 클렌저 형태인) 소정 실시 형태에서는 습윤 및 거품 발생에 전형적으로 이용되는 다른 습윤제 중에서도 특히 베타인, 설페이트, 설포네이트, 폴리글리코사이드와 같은 세정용 계면활성제가 포함될 수 있지만, 다른 실시 형태에서는 피부 건조의 가능성을 감소시키고 "리브온" 응용에 적합한 생성물을 제조하기 위하여, 세정용 계면활성제가 조성물로부터 제외된다.

선택된 pH는 결정적인 것이 아니라, 예를 들어 약 4 내지 약 8, 예를 들어 약 5 내지 약 7인 범위일 수 있다.

국소 조성물 내의 화장품용으로 허용가능한 담체는 조성물의 중량을 기준으로 약 40% 내지 약 99.99%, 더욱 바람직하게는 조성물의 중량을 기준으로 약 80% 내지 약 95%를 구성할 수 있다. 특히 바람직한 실시 형태에서, 조성물은 약 25 중량% 이상의 물, 더욱 바람직하게는 약 50 중량% 이상의 물을 포함한다. 다른 실시 형태에서, 담체(및 조성물)는 무수물이다. 그러한 무수 조성물은, 예를 들어 립 트리트먼트(lip treatment) 제품 또는 컬러 화장품(예컨대, 파운데이션)에 적합할 수 있다.

일 실시 형태에서, 본 발명에 따른 조성물은 전술된 성분뿐만 아니라 하나 이상의 추가의 화장품용 활성제(들)를 추가로 포함할 수 있다. "화장품용 활성제"가 의미하는 것은 항효모제, 항진균제, 및 항균제와 같은 항미생물제, 항염증제, 노화방지제, 탈색소제(depigmentaion agent), 항기생충제, 산화방지제, 항여드름제, 각질용해제, 영양소, 비타민, 미네랄, 에너지 향상제, 선스크린, 피지 조절제, 항셀룰라이트제 등이 포함되지만 이에 한정되지 않는, 조직에 대해 미용 또는 치료 효과를 갖는 화합물들의 혼합물을 함유하는 천연 추출물, 천연 공급원으로부터 추출, 단리, 정제 또는 농축된 화합물, 또는 합성 화합물일 수 있는 화합물이다.

본 발명의 조성물의 구성성분일 수 있는 비타민의 예에는 비타민 A, 비타민 B, 예를 들어 비타민 B3, 비타민 B5, 비타민 B7 및 비타민 B12, 비타민 C, 비타민 K, 비타민 E, 예를 들어 알파, 감마 또는 델타-토코페롤, 및 그의 유도체(예를 들어, 염 및 에스테르) 및 이들의 혼합물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다.

본 발명의 조성물과 방법에 사용될 수 있는 산화방지제의 예에는 수용성 산화방지제, 예를 들어 설프하이드릴 화합물 및 그의 유도체(예를 들어, 소듐 메타바이설파이트 및 N-아세틸-시스테인), 리포산 및 다이하이드로리포산, 레스베라트롤, 락토페린, 및 아스코르브산 및 아스코르브산 유도체(예를 들어, 아스코르빌 팔미테이트 및 아스코르빌 폴리펩티드)가 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용하기에 적합한 유용성 산화방지제에는 부틸화 하이드록시톨루엔, 레티노이드(예를 들어, 레티놀 및 레티닐 팔미테이트), 상이한 유형의 토코페롤(예를 들어, 알파-, 감마-, 및 델타-토코페롤 및 그의 에스테르, 예를 들어 아세테이트) 및 그의 혼합물, 토코트라이에놀, 및 유비퀴논이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용하기에 적합한 산화방지제를 함유하는 천연 추출물에는 플라비노이드, 아이소플라비노이드, 및 그의 유도체, 예를 들어 제니스테인 및 다이아드제인을 함유하는 추출물(예를 들어, 대두 및 클로버 추출물), 레스베라트롤을 함유하는 추출물 등이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 하나 이상의 추가의 화장품용 활성제(들)는, 예를 들어 약 0.01 중량% 내지 약 10 중량%와 같은 임의의 적합한 농도로 존재할 수 있다.

본 발명의 조성물 및 방법에 이용될 수 있는 노화방지제의 예에는 레티노이드(예를 들어, 레티놀 및 레시틸 팔미테이트)가 포함되지만 이에 한정되지 않는다.

노화방지 활성제의 다른 예에는 구리 함유 펩티드; 비타민, 예를 들어 비타민 E, 비타민 C, 비타민 B, 및 이들의 유도체, 예를 들어 비타민 E 아세테이트, 비타민 C 팔미테이트 등; 베타 카로틴, 알파 하이드록시산, 예를 들어 글리콜산, 시트르산, 락트산, 말산, 만델산, 아스코르브산, 알파-하이드록시부티르산, 피루브산을 포함하는 산화방지제; 베타 하이드록시산, 예를 들어 베타-하이드록시부티르산, 베타-페닐-락트산, 베타-페닐피루브산; 폴리페놀계 화합물; 식물 추출물, 예를 들어 녹차, 대두 생성물, 큰엉겅퀴(milk thistle), 조류, 알로에, 안젤리카, 광귤(bitter orange), 커피, 황련, 그레이프프루트(grapefruit), 횔른(hoellen), 인동덩굴, 율무, 자근(lithospermum), 오디, 작약, 푸에라리아(puerarua), 나이스(nice), 잇꽃, 및 이들의 혼합물이 포함된다.

적합한 탈색소제의 예에는 대두 생성물, 레티노이드, 예를 들어 레티놀; 코직산(Kojic acid) 및 그의 유도체, 예를 들어 코직 다이팔미테이트; 하이드로퀴논 및 그의 유도체, 예를 들어 아르뷰틴; 트란섹삼산; 비타민, 예를 들어 나이아신, 비타민 C 및 그의 유도체; 아젤라산; 플라세르티아; 감초; 카모마일 및 녹차와 같은 추출물, 및 이들의 혼합물이 포함되지만 이에 한정되지 않으며, 레티노이드, 코직산, 대두 생성물, 및 하이드로퀴논이 특히 적합한 예이다.

피지 억제제의 예에는, 예를 들어 감초 뿌리 추출물, 아연 염, 예를 들어 글루콘산아연, 데하이드로아세트산, 및 글라이신 유도체가 포함된다. 항셀룰라이트제의 예에는, 예를 들어 녹차 및 카페인과 같은 혈관 확장제가 포함된다.

서던우드 추출물, 아민 화합물 및 화장품용으로 허용가능한 국소용 담체 및 선택적인 추가의 화장품용 활성제는 임의의 비율로 조합되어 국소 사용에 적합한 조성물을 형성할 수 있다.

조성물은 용액, 현탁액, 에멀젼, 예를 들어 마이크로에멀젼 및 나노에멀젼, 겔, 고체 및 리포좀을 포함하지만 이에 한정되지 않는 다양한 제품 유형 중 임의의 것으로 제형화될 수 있다. 조성물은 얼굴 및 피부 마스크뿐만 아니라 로션, 크림, 겔, 스틱, 스프레이, 연고, 세정용 액체 워시 및 고체 바아(solid bar), 페이스트, 폼, 파우더, 무스, 와이프, 스트립, 패치, 창상용 드레싱 및 접착 붕대, 하이드로겔, 필름-형성 제품도 포함하지만 이에 한정되지 않는 매우 다양한 화장 용품으로 제조될 수 있다. 다른 형태들이 당업자에 의해 제형화될 수 있다.

조성물은 포유류 피부, 바람직하게는 사람 피부에 국소 적용될 수 있다. 소정 실시 형태에서 피부는 피부의 다른 부위 중에서도 특히 손, 발, 두피, 팔꿈치, 무릎, 발목, 목덜미를 포함하는 얼굴 또는 신체 상에 존재하는 건조증을 감소시키기 위하여 가시적 건성 또는 건조증 포유류 피부일 수 있다.

일 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 경도 건조증 피부를 치료하기 위해 사용된다. 다른 실시 형태에서, 조성물은 중등도 건조증 피부를 치료하기 위해 사용된다. 다른 실시 형태에서, 조성물은 명확환 건조증을 갖는 피부를 치료하기 위해 사용된다.

소정의 다른 실시 형태에서, 서던우드 추출물을 포함하는 국소 조성물이 손상된 장벽 특성을 갖는 피부, 또는 습진성 피부, 건선성 피부와 같은 소정 질환 상태를 특징으로 하는 피부, 또는 아토피성 피부염을 특징으로 하는 피부에 국소 적용된다.

조성물은 적합한 치료 요법, 예를 들어 매달, 매주, 격일로, 매일, 하루에 2회 등에 따라 치료를 필요로 하는 피부에 적용될 수 있다.

본 발명에 따르면, 조성물은 가시적 건성 피부를, 특히 그러한 피부에서 세라미드 수준을 증가시킴으로써 치료한다.

본 발명의 소정 실시 형태에서, 조성물은 본 명세서의 실시예 3에 기재된 바와 같은 유전자 발현 시험(Gene Expression Test)에 따라 시험될 때, 가시적 건성 피부에서 글루코실 세라미드 신타아제의 발현을 증가시키기에 충분한 방식으로 그러한 피부에 적용된다. 일 실시 형태에서, 조성물은 5일의 치료 후에 그러한 치료 전의 피부에 비하여 10% 이상, 바람직하게는 15% 이상, 더욱 바람직하게는 20% 이상, 그리고 가장 바람직하게는 30% 이상만큼 글루코실 세라미드 신타아제의 발현을 증가시키기에 충분한 방식으로 적용된다.

다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은, 예를 들어 피부 노화의 징후를 처리하기 위한 것과 같은 다른 필요 상태를 갖는 피부에 적용된다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 노화의 징후"는 주름살(line) 및 주름(wrinkle)의 존재, 탄력 손실, 고르지 못한 피부(uneven skin), 및 얼룩덜룩함(blotchiness)을 포함한다. 특히 바람직한 실시 형태에서, 노화 징후는 주름살 및 주름의 존재 및/또는 탄력 손실이다.

다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 피부에서의 외부 침범(external aggression)을 처리하기 위하여 피부에 적용된다. 외부 침범의 예에는 세정제(예를 들어, 계면활성제를 함유하는 국소 세정제)의 사용, 화장, 면도로 인한 피부에의 손상, 뿐만 아니라 UV 광으로부터의 것과 같은 환경적 손상(예를 들어, 태양광으로부터의 일광손상 또는 UV 램프 및 태양 시뮬레이터와 같은 비-천연 공급원으로부터의 손상), 오존, 배기가스, 공해, 염소 및 염소 함유 화합물, 및 담배 연기로부터의 손상이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 피부에 대한 외부 침범의 영향에는 지질, 탄수화물, 펩티드, 단백질, 핵산, 및 비타민에 대한 변형 및 이에 대한 산화적 및/또는 질산화적(nitrosative) 손상이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 피부에 대한 외부 침범의 영향에는 또한 세포 생존성의 손실, 세포 기능의 손실 또는 변경, 및 유전자 및/또는 단백질 발현의 변화가 포함되지만 이에 한정되지 않는다.

다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 피부 염증 감소를 필요로 하는 피부를 치료하기 위하여 피부에 적용된다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 염증 감소를 필요로 하는 피부"는 발적 또는 홍반, 부종을 나타내는 피부를 의미한다. 소정의 다른 실시 형태에서, "피부 염증 감소를 필요로 하는 피부"는 외부 요소에 대하여 특별히 반응성이거나 민감성인 피부를 말한다. 외부 요소에는 태양광선(UV, 가시광선, IR), 미생물, 대기 오염물질, 예를 들어 오존, 배기가스 오염물질, 염소 및 염소 발생 화합물, 담배 연기, 저온, 열이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물의 사용에 의해 치료 또는 예방될 수 있는 염증성 장애 및 관련 병태에는 하기가 포함되지만 이에 한정되지 않는다: 관절염, 기관지염, 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 건선, 지루성 피부염, 습진, 알러지성 피부염, 다형 광발진, 염증성 피부병, 모낭염, 탈모증, 옻, 곤충 교상, 여드름 염증, 화학물질, 외상, 오염물질(예를 들어, 담배 연기) 및 일광 노출을 포함하지만 이에 한정되지 않는 외인성 요인에 의해 유도되는 자극, 건조증, 과각화증, 소양증, 염증후 색소과다침착, 흉터 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는 염증으로부터 발생된 이차 병태. 바람직하게는, 본 발명의 방법을 이용하여 치료 또는 예방될 수 있는 염증성 장애 및 관련 병태는 관절염, 염증성 피부병, 접촉성 피부염, 알러지성 피부염, 아토피성 피부염, 다형 광발진, 외인성 요인에 의해 유도되는 홍반을 포함한 자극, 여드름 염증, 건선, 지루성 피부염, 습진, 옻, 곤충 교상, 모낭염, 탈모증, 및 이차 병태 등이다.

당업자는 본 명세서의 설명에 기초하여, 본 발명을 그의 가장 완전한 범위까지 이용할 수 있을 것으로 여겨진다. 하기의 구체적인 실시 형태는 어떤 방식으로도 본 발명의 나머지 부분을 제한하는 것이 아니라 단지 예시적인 것으로 해석되어야 한다. 하기 비제한적인 실시예는 추가로 본 발명을 예시한다.

실시예 I: 서던우드의 추출물 및 THPED를 포함하는 본 발명의 조성물은 상승적 보습(synergistic moisturization)을 나타낸다.

본 발명에 따른 조성물 1을 표 1에 나타낸 성분들을 사용하여 제조하였다.

물(항목 번호 1)을 비커에 첨가함으로써 조성물 1을 제조하였으며, 용기를 55 내지 60C로 가열하였다. 버센 및 울트레즈 10을 첨가하고, 온도를 55 내지 60C에서 유지하는 한편 그것을 15분 동안 또는 균질해질 때까지 혼합하였다. 별도의 용기에서, 오일상 성분들을 혼합하고 55 내지 65C에서 유지하였다. 오일상을 수상에 서서히 첨가하였다. 상들을 완전히 혼합한 후, 혼합물을 냉각시켰다. 온도가 50C 미만일 때, 다이메티콘을 첨가하였다. 온도가 40C 미만일 때, 페노닙을 첨가하였다. 이 혼합물을 10분 동안 혼합시켰다. 수산화나트륨 및/또는 시트르산을 5.4의 목표 pH가 되도록 첨가하였다. 이 혼합물을 10분 동안 혼합시켰다. 풀팍틸(서던우드 추출물) 및 THPED를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 다시 혼합시켰다.

풀팍틸이 없는 것을 제외하고는 조성물 1과 동일하게 비교 조성물 A를 제조하였다. 풀팍틸의 결여를 보상하기 위해 추가의 물을 포함시켰다. THPED가 없는 것을 제외하고는 비교 조성물 B를 유사하게 제조하였다. 풀팍틸 또는 THPED가 없는 것을 제외하고는 동일한 방법으로 비교 조성물 C(플라세보(placebo))를 또한 제조하였다.

조성물 1 및 비교 조성물 A, B 및 C를, 하기와 같이 각질층의 상부층에서 피부 수화를 유지하는 그들의 능력에 대하여 시험하였다.

각질층 수준의 상부층에서 고주파 전도도를 측정하는 피부 전도도계(skin conductance meter)인, MT-8C 프로브를 갖춘 스키콘(SKICON) 200EX(일본 소재의 아이.비.에스. 컴퍼니 리미티드(I.B.S. Co. Ltd)로부터 입수가능함)를 수화도에 대한 지시자로서 사용하였다.

25세 내지 45세의 30명의 여성 대상들을 스키콘 장치를 사용하여 발목뼈로부터 수직으로 그들의 다리에서 피부 수화에 대하여 평가하였다. 생성물의 적용 전에 기저선 측정을 수행하였다.

핸드헬드(hand-held) 프로브를 2군데의 피부 표면 위치 각각에 두어 측정을 행하였다. 프로브는 각각의 표면 위치에서 전도도를 샘플링하였으며, 측정을 삼중으로 행하였다.

대상들은 이 연구의 전체 기간 동안뿐만 아니라 이 연구의 시작 전 1주일 동안 매일 그들의 다리를 존슨즈 헤드 투 토 베이비 워시(JOHNSON'S HEAD TO TOE BABY WASH)로 세척하였다. 각각의 대상은 조성물 1을 한쪽 다리에, 그리고 비교 조성물 A를 다른 한쪽 다리에 적용하거나, 비교 조성물 B를 한쪽 다리에, 그리고 비교 조성물 C를 다른 한쪽 다리에 적용하였다. 시험 물질들을 4주 동안 일일 2회 적용하였다. 처리한지 3주 후 및 4주 후에, 스키콘 측정을 다시 행하였다.

4주의 생성물 사용 후 1주의 생성물 무사용(즉, 1주의 회귀(regression)) 동안의 고주파 전도도와 기저선에서의 고주파 전도도 사이의 차이를 각각의 대상에 대해 계산하였다. 1주의 회귀 후에 고주파 전도도(표면 수화 참조)의 10% 이상의 증가를 나타낸 대상의 백분율이 하기 표 2에 나타나 있다.

이용한 통계학적 분석 방법은 임계 p 값이 0.10인 t-검정이었다. 조성물 1은 또한 조성물 C에 비하여 유의하게 더 우수하였다(t-검정 p=0.09).

상기 결과는 서던우드의 추출물과 THPED 둘 모두를 함께 조합한 것은 놀랍게도, 4주의 처리 및 1주의 생성물 무사용 후에 다른 시험 조성물들보다 유의하게 더 우수한 피부 표면 수화를 제공하였음을 시사한다. 본 출원인은 서던우드 추출물이 피부 장벽 기능을 개선하고 세라미드를 생성함을 이전에 보여주었다. 그러나, 서던우드 추출물과 아민 화합물의 조합은 추가의 예기치 않은 수화 효과를 제공한다.

실시예 II: 서던우드의 추출물 및 THPED를 포함하는 본 발명의 조성물은 생체 내에서 세라미드를 생성하는 향상된 능력을 나타낸다.

3%라기보다는 오히려 0%의 글리세린, 2%라기보다는 오히려 5%의 다이메티콘, 0.5%라기보다는 오히려 0.75%의 스테아레쓰-2, 및 1.0%라기보다는 오히려 1.5%의 스테아레쓰-21을 포함하는 것을 제외하고는, 실시예 1의 조성물들과 유사한 방법으로 조성물 2 및 비교 조성물 D, E 및 F를 제조하였다.

조성물 2를 본 발명에 따라 제조하였으며, 이는 1%의 THPED 및 2%의 풀팍틸을 함유하였다. 비교 조성물 D는 2%의 풀팍틸을 함유하지만, THPED는 함유하지 않았다. 비교 조성물 E는 5%의 풀팍틸을 함유하지만, THPED는 함유하지 않았다. 비교 조성물 F(플라세보)는 풀팍틸도 함유하지 않고 THPED도 함유하지 않았다. 상기 실시예 I에서와 같이, 필요할 경우 풀팍틸 또는 THPED의 결여를 보상하기 위해 추가의 물을 포함시켰다.

25세 내지 45세의 여성 대상들을 세라미드 생성에 대해 평가하였다. 대상들은 이 연구의 전체 기간 동안뿐만 아니라 이 연구의 시작 전 1주일 동안 매일 그들의 다리를 존슨즈 헤드 투 토 클렌저로 세척하였다. 각각의 대상은 다리 당 하나의 시험 생성물을 적용하였다. 2가지의 시험 물질들을 3주 동안 일일 2회 적용하였다. 조성물 2 및 비교 조성물 D 및 E를 5명의 대상이 사용하였다. 비교 조성물 F를 8명의 대상이 사용하였다. 시험 조성물들을 발목뼈로부터 수직으로 대상의 다리에 적용하였다.

처리한지 1주 및 3주 후,대상들의 처리된 피부를 통상적인 테이프 스트리핑 절차에 처하여 세라미드 함량에 대해 분석하였다. 테이프 스트립을 8 mL의 메탄올:에틸 아세테이트 혼합물(80:20)을 사용하여 실온에서 1시간 동안 추출하였다. 추출 후, 테이프 스트립을 버리고, 용매를 실온에서 아르곤 하에서 증발 건조시켰다. 이후에, 샘플을 추가의 분석시까지 -20℃에서 보관하였다.

테이프 스트립 농축(condensation) 단계 후에 남아 있는 각각의 샘플 잔류물을 200 uL의 클로로포름:메탄올 혼합물(2:1) 중에 용해시켰다. 20 마이크로리터 및 40 uL의 샘플 용액을 자동 샘플러(씨에이엠에이지(CAMAG) 자동 TLC 샘플러 4, 미국 노스캐롤라이나주 윌밍턴 소재의 씨에이엠에이지 사이언티픽 인크.(CAMAG Scientific Inc.)로부터 입수가능함)를 사용하여 고성능 박층 크로마토그래피(high performance thin layer chromatography; HPTLC) 플레이트(미국 뉴저지주 피스카타웨이 소재의 지이 헬스케어(GE Healthcare)의 와트만 파티실(Whatman Partisil)로 입수가능함)에 적용하고 하기의 순차적인 발색 시스템(development system)을 사용하여 분리하였다: (1) 다이클로로메탄:에틸 아세테이트:아세톤(80:16:4), (2) 클로로포름:메탄올:아세톤(76:16:8), (3) 헥산:클로로포름:아세트산:아세톤:메탄올 (6:80:0.1:10:4). 플레이트를 8% 인산 중 3% 아세트산구리로 염색하고 160℃에서 탄화시켰다(char).

샘플을 위치 보정을 위해 병렬로 적용하였으며, 유사하게 제조한 블랭크 추출물(피부 지질에 대한 노출이 없는 테이프 스트립)과 비교하였다. 밀도측정법(densitometry)에 의해 공지된 양의 세라미드 III 표준물(코스모펌(Cosmoferm))에 대해 정량화를 수행하였다. 보정 곡선은 세라미드 III의 6개의 농도, 즉 1 ug, 2 ug, 4 ug, 8 ug, 12 ug, 및 16 ug을 함유하였다.

각각의 HPTLC 플레이트를 스캐닝하고(미국 텍사스주 휴스턴 소재의 휴렛-팩커드(Hewlett-Packard)로부터의 휴렛-팩커드 스캔젯(Scanjet) 8250), 영상 획득 소프트웨어(미국 매릴랜드주 실버 스프링 소재의 메디아 사이버네틱스(MEDIA CYBERNETICS)로부터의 이미지 프로(Image Pro) 6.3)를 사용하여 정량화하였다. 각각의 세라미드 밴드의 광학 밀도를 측정하고 표준 보정 곡선에 대해 정량화하였다. 샘플 수준 20 uL 및 40 uL 둘 모두가 보정 곡선의 선형 파라미터 안쪽에 있을 경우, 이들 두 값의 평균을 기록하였다. 표준 선형 파라미터 바깥쪽의 모든 결과는 실격시켰다. 당업자가 인식하는 바와 같이, 생성된 광학 밀도는 생성된 세라미드의 양과 상관될 것이다.

세라미드의 상대적 정량화의 결과가 표 3에 나타나 있다.

2%의 서던우드의 추출물을 포함하는 조성물의 적용이 플라세보에 비하여 세라미드 생성에서 약간의 개선(83.5 A.U. 대 64.3 A.U. 또는 약 30%)을 제공하지만, 2%의 서던우드의 추출물을 1%의 THPED와 함께 사용했을 때, 생성된 세라미드의 양은 훨씬 더 극적으로 증가하였다(플라세보에 비하여 77%). 서던우드 추출물과 THPED의 조합을 사용하여 생성된 세라미드의 양은 (THPED 없이) 2.5배의 양의 서던우드 추출물을 함유하는 조성물을 사용하여 생성된 수준과 비견되거나 또는 더 우수하였다.

실시예 III : 본 발명의 조성물

본 발명에 따른 하기의 조성물을 제조하였다.

물을 공정 용기에 첨가하고 이 용기를 80 내지 85C로 가열함으로써 이 조성물을 제조하였다. 나트로솔 플러스 CS330 및 글리세린을 사전혼합하고 그 배치(batch)에 첨가하였다. 엘레스타브 울트라 퓨어(Elestab Ultra Pure) CPN을 첨가하고, 혼합물을 상형성(phasing)을 위해 유지하였다. 별도의 용기에서, 바리소프트 TA 100, 세틸 알코올, 빈트리, 세라필 ICA, 아이소프로필 팔미테이트, 다이메티콘, 브리즈 721, 및 아이소폴 28을 함께 첨가하였다. 이들을 혼합하고 80 내지 85C로 가열하였다. 두 상 모두가 80 내지 85C에 있을 때, 오일상을 수상에 첨가하고, 생성된 조합물을 80 내지 85C에서 10분 동안 혼합하였다. 이어서, 이 혼합물을 열로부터 옮기고 40C로 냉각시켰다. 별도의 컨테이너에서, 뉴트롤 TE 및 1% 물을 용해될 때까지 혼합하였다. 다른 컨테이너에서, 시트르산 및 물을 용해될 때까지 혼합하고, 이어서 뉴트롤 TE 프리믹스(premix)에 첨가하고 용해될 때까지 다시 혼합하였다. 45C 이하에서, 생성된 뉴트롤 TE 프리믹스를 그 배치에 첨가하였다. 40C 이하에서, NAB 머쉬룸, 풀팍틸, 및 벤질 알코올을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 혼합하고 30 내지 35C로 냉각시켰다. 물을 스트럭처 XL의 양을 뺀 적당량(QS)으로 첨가하였다. 이 조합물을 5분 이상 동안 혼합하고, 스트럭처 XL을 첨가하고, 생성된 생성물을 균일해질 때까지 혼합하였다.

본 발명이 구체적인 설명과 함께 기술되었지만, 전술한 설명은 예시하고자 하는 것이고, 첨부된 특허청구범위의 범주에 의해 규정되는 본 발명의 범주를 제한하는 것이 아님이 이해된다. 다른 태양, 이점, 및 변형이 특허청구범위 내에 있다.

Claims (15)

1. 서던우드(Southernwood) 추출물, 및 하기에 나타낸 화학식 I 또는 화학식 II의 아민 화합물 또는 이의 화장품용으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물:
   [화학식 I]
   

   

   
   [화학식 II]
   

   

   
   (상기 화학식들에서, R₁, R₂, R₃, R₄ 및 R₅는 독립적으로 수소, C_{1 -}C₆ 알킬, 및 C_1-C₆ 하이드록시알킬로 이루어진 군으로부터 선택됨).
2. 제1항에 있어서, 상기 아민 화합물은 상기 화학식 I의 아민 화합물인, 조성물.
3. 제1항에 있어서, 상기 아민 화합물은 N,N,N',N'-테트라키스(2-하이드록시프로필)에틸렌 다이아민(THPED)인, 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 약 0.5% 내지 약 10%의 상기 서던우드 추출물을 포함하는, 조성물.
5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 약 0.25% 내지 약 2.5%의 상기 아민 화합물을 포함하는, 조성물.
6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 약 0.25% 내지 약 2%의 상기 아민 화합물을 포함하는, 조성물.
7. 제3항에 있어서, 상기 조성물은 약 0.5% 내지 약 10%의 상기 서던우드 추출물 및 약 0.25% 내지 약 2%의 THPED를 포함하는, 조성물.
8. 제3항에 있어서, 상기 조성물은 약 0.5% 내지 약 5%의 상기 서던우드 추출물 및 약 0.25% 내지 약 2%의 THPED를 포함하는, 조성물.
9. 제3항에 있어서, 상기 서던우드 추출물 및 상기 THPED는 약 0.5 내지 약 5의 중량비로 존재하는 조성물.
10. 서던우드 추출물 및 하기에 나타낸 화학식 I 또는 화학식 II의 아민 화합물 또는 이의 화장품용으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물을 가시적 건성 피부(visibly dry skin)에 국소 도포하는 단계를 포함하는, 가시적 건성 피부를 처리하는 방법:
    [화학식 I]
    

    

    
    [화학식 II]
    

    

    
    (상기 화학식들에서, R₁, R₂, R₃, R₄ 및 R₅는 독립적으로 수소, C_{1 -}C₆ 알킬, 및 C_1-C₆ 하이드록시알킬로 이루어진 군으로부터 선택됨).
11. 제10항에 있어서, 상기 가시적 건성 피부는 건조증 피부(xerotic skin)인, 가시적 건성 피부를 처리하는 방법.
12. 제10항에 있어서, 상기 피부는 습진성 질환 상태를 특징으로 하는, 가시적 건성 피부를 처리하는 방법.
13. 제10항에 있어서, 상기 피부는 건선성 질환 상태를 특징으로 하는, 가시적 건성 피부를 처리하는 방법.
14. 제10항에 있어서, 상기 조성물은 약 0.5% 내지 약 10%의 상기 서던우드 추출물을 포함하는, 가시적 건성 피부를 처리하는 방법.
15. 제10항에 있어서, 상기 아민 화합물은 THPED인, 가시적 건성 피부를 처리하는 방법.