KR20120072213A - 혈구 응집을 통한 혈장 채취 방법 및 이를 위한 혈장 분리 기기 - Google Patents

혈구 응집을 통한 혈장 채취 방법 및 이를 위한 혈장 분리 기기 Download PDF

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Abstract

본 발명은 대상자의 혈구에 특이적인 항체 및 상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질의 항체 복합체를 이용하여 혈액 내 혈구 응집을 유도하여 혈장 분리 효율을 증진시킨 혈장 채취 방법 및 이를 위한 혈장 분리 기기에 관한 것이다.
본 발명에 따른 혈장 채취 방법은 전혈에서 고효율로 혈장을 분리해낼 수 있으며 신속한 혈장 분리가 가능하여, 적은 양의 혈액으로도 빠른 진단 수행이 가능한 장점이 있다.

Description

혈구 응집을 통한 혈장 채취 방법 및 이를 위한 혈장 분리 기기{Plasma gathering method by agglutination of blood cells, and plasma separating apparatus therefor}
본 발명은 혈구 응집을 통한 혈장 채취 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 혈구에 특이적인 항체 및 상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질의 항체 복합체를 이용하여 혈액 내 혈구 응집을 유도하여 혈장 분리 효율을 증진시킨 혈장 채취 방법 및 이를 위한 혈장 분리 기기에 관한 것이다.
혈액을 대상으로 하는 대부분의 진단은 혈구를 제외한 유체 부분, 즉 혈장에 존재하는 단백질을 동정하는 것이어서 혈구의 제거는 대부분의 혈액 기반 진단에서 선행되는 단계이다. 사람을 기준으로 혈액 1 ㎖ 안에는 약 5 X 109개의 적혈구와 5 X 106개 이상의 백혈구가 있으며, 혈액 부피의 40 % 이상을 차지한다. 혈장에 포함된 여러 가지 바이오마커(biomarker)에 대한 분석을 위해서는 전혈의 40 % 이상을 차지하는 혈구의 제거가 선행되어야 하는 것이다.
대형화된 장비가 구비된 의료기관에서는 원심분리 장치를 이용하여 혈구를 침강시킨 후, 상층의 혈장을 회수하여 진단에 사용한다. 하지만, 이러한 장비의 사용이 용이하지 않거나 현장에서 소량의 혈액을 대상으로 즉시 진단이 이루어져야 하는 경우에는 혈구의 제거를 물리적인 거름장치로 수행하는 경우가 대부분이며, 대부분의 현장진단용 진단칩에서 구현되고 있다. 이러한 장치는 종이나 유리섬유로 구성된 혈장 필터에 혈액을 가하고, 3 차원적인 망상구조(meshwork)에 의하여 혈구의 이송 속도가 혈장에 비해 상대적으로 뒤쳐지기 시작하는 현상을 기반으로 한다. 따라서, 많은 양의 혈장은 여전히 혈구와 섞인 채로 남게 되어 회수율이 저하되므로 다량의 혈액 시료가 요구된다. 또한, 혈장이 혈구로부터 완전히 분리되는 것에도 상당한 시간이 소모된다는 문제가 남는다.
본 발명은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 대상자의 혈구에 특이적인 항체 및 상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질의 항체 복합체를 이용하여 혈액 내 혈구 응집을 유도하여 혈장 분리 효율을 증진시켜 신속하고 정확한 혈장 분리가 가능한 혈장 채취 방법을 제공함을 목적으로 한다.
본 발명의 다른 목적은 상기 혈장 채취를 위한 혈장 분리 기기를 제공하는 것이다.
본 발명의 하나의 관점은 대상자의 혈구에 특이적인 항체를 제조하는 단계; 상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질과 상기 항체를 혼합하여 항체 복합체를 형성시키는 단계; 상기 항체 복합체와 대상자 혈액을 반응시켜 혈구를 응집시키는 단계; 및 상기 반응이 완료된 혈액을 필터로 여과하여 혈장을 분리하는 단계;를 포함하는 혈장 채취 방법에 관한 것이다.
본 발명에서 상기 혈장 채취 방법은 혈장 분리의 간편성을 위해 상기 항체 복합체 형성 단계 이후, 항체 복합체를 혈장 분리를 위한 기기 내에 도포하고, 상기 기기에 대상자 혈액을 주입하여 항체 복합체와 반응시킬 수 있다.
본 발명의 구체예에서 상기 항체는 IgG 이고, 상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질은 단백질 A, 단백질 G 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
또한, 상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질이 단백질 G인 경우 1개 단백질 G 당 2개 IgG가 결합된 형태로 항체 복합체를 형성하고, 단백질 A인 경우 1개 단백질 A 당 4개 IgG가 결합된 형태로 항체 복합체를 형성할 수 있다.
본 발명의 다른 관점은 대상자의 혈액이 주입되는 시료 주입부; 상기 대상자의 혈구에 특이적인 항체, 및 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질로 구성된 항체 복합체가 도포되어 혈구의 응집을 유도하는 반응부; 및 상기 혈액을 필터링하여 혈장을 분리하기 위한 필터부;가 구비된 유체 채널을 포함하는 혈장 분리 기기에 관한 것이다.
구체예에서 상기 시료 주입부, 반응부 및 필터부가 구비된 유체 채널은 플라스틱, 유리, 실리콘 또는 고무 소재로 이루어질 수 있다.
상기 필터부는 응집된 혈구를 포집하고 혈장만을 통과시키기 위한 필터가 단층 또는 다층으로 장착되며, 상기 필터는 종이, 유리 섬유, 세라믹, 강철 또는 고분자로 형성되는 다공성 매트릭스 형태일 수 있다.
또한, 상기 다공성 매트릭스의 체구멍 크기는 10 내지 100 ㎛ 일 수 있다.
본 발명의 구체예에서 상기 혈장 분리 기기는 말단에 혈장 내 바이오마커 분석을 위한 장치를 추가로 포함할 수 있다.
구체예에서 상기 혈장 분리 기기는 혈장 분리 칩 형태일 수 있다.
본 발명에 따른 혈장 채취 방법은 혈액 내 혈구 응집이 유도되어 거대한 혈구 응집체가 형성되어 필터링이 용이하므로 전혈에서 고효율로 혈장을 분리해낼 수 있으며 신속한 혈장 분리가 가능하여, 적은 양의 혈액으로도 빠른 진단 수행이 가능한 장점이 있다.
따라서, 상기 혈장 채취 방법 및 이를 위한 혈장 분리 기기는 소량의 혈액으로 신속한 진단을 위해 혈장 분리가 필요한 경우 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 혈장 채취 방법에서 혈장 분리 기기의 구성을 보여주는 도면이다.
도 2a는 본 발명의 실시예에 사용되는 항체의 구조를 설명한다.
도 2b는 본 발명의 실시예에 따른 1개 단백질 G와 2개 IgG가 결합된 형태의 항체 복합체를 도시한 것이다.
도 2c는 본 발명의 실시예에 따른 1개 단백질 A와 4개 IgG가 결합된 항태의 항체 복합체를 도시한 것이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 혈구 응집 반응을 나타낸 도면이다.
이하, 본 발명의 구체예를 상세히 설명하기로 한다. 다만, 이는 예시로서 제시되는 것으로, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않으며 본 발명은 후술할 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다. 또한, 명세서에 기재된 "…부" 등의 용어는 적어도 하나의 기능이나 동작을 처리하는 단위를 의미한다.
본 발명의 한 구체예에 따른 혈장 채취 방법은 대상자의 혈구에 특이적인 항체를 제조하는 단계; 상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질과 상기 항체를 혼합하여 항체 복합체를 형성시키는 단계; 상기 항체 복합체와 대상자 혈액을 반응시켜 혈구를 응집시키는 단계; 및 상기 반응이 완료된 혈액을 필터로 여과하여 혈장을 분리하는 단계;를 포함함을 특징으로 한다.
이하, 본 발명의 구성을 단계별로 설명한다.
항체 제조 단계
상기 단계는 진단을 필요로 하는 대상자의 혈구에 특이적으로 결합하는 항체를 제조하기 위한 단계이다.
상기 대상자는 인간을 포함한 동물일 수 있으며, 바람직하게는 인간이다.
상기 특정 혈구에 대한 항체 제조방법은 당업계에 공지된 통상의 항체 제조방법을 사용할 수 있다. 예를 들면, 대상자 혈구를 생쥐 복강에 접종하고, 일정 기간이 지난 후 생쥐 피를 회수하여 대상자 혈구에 특이적인 항체를 면역친화법(immunoaffinity)으로 분리하여 사용할 수 있다. 이때 접종되는 대상자의 혈구는 혈장 단백질이 제거된 상태로 사용되는 것이 바람직하며, 접종 횟수는 충분한 항체 형성을 위해 2~3주 간격으로 4회 이상 접종하는 것이 바람직하다.
또한, 상기 항체 제조를 위한 동물은 생쥐 외에도 토끼, 염소, 말, 소 등을 사용할 수 있다.
본 발명에서 상기 항체는 IgG, IgM, IgA, IgD 및 IgE의 면역글로불린일 수 있으며, 바람직하게는 IgG이다. 상기 항체는 도 2a에 도시된 형태를 가질 수 있으며, 항원과 작용하는 Fab(210) 부위 및 여러 조절 과정에 작용하는 Fc(220) 부위를 가짐을 특징으로 한다. 또한, 상기 항체는 단일클론(monoclonal) 또는 다중클론(polyclonal) 형태일 수 있다.
항체 복합체 형성 단계
상기 단계는 상기 항체 제조 단계에서 수득된 항체의 Fc 부위와 결합능을 갖는 단백질을 이용하여 단백질과 항체가 결합된 형태의 항체 복합체를 형성하는 단계이다.
상기 항체는 상술한 바와 같이 항원과 작용하는 Fab 부위 및 다른 조절 과정에 작용하는 Fc 부위를 가지므로, 추후 혈구(항원) 응집을 유도하는 항체의 Fab 부위를 노출시킨 상태로 항체의 Fc 부위와 결합할 수 있는 단백질을 처리하여 단백질-항체 복합체를 형성시킬 수 있다.
상기 항체의 Fc 부위와 결합능을 갖는 단백질은 단백질 A, 단백질 G 또는 이들의 혼합물을 이용할 수 있다. 상기 단백질 G는 연쇄상구균(Streptococci)의 세포벽에서 유래한 단백질로서 1 분자당 2개의 Fc 결합 부위를 가진다. 도 2b를 참조하면, 1개 단백질 G(230) 당 2개 항체가 결합된 형태의 단백질-항체 복합체를 형성할 수 있다. 또한, 상기 단백질 A는 포도상구균(Staphylococcus aureus)의 세포벽에서 유래한 단백질로서 1 분자당 4개의 Fc 결합 부위를 가진다. 도 2c를 참조하면, 1개 단백질 A(240) 당 4개 항체가 결합된 형태의 단백질-항체 복합체를 형성할 수 있다. 상기 단백질 A 및 단백질 G는 시판되는 것을 이용할 수 있다.
이러한 단백질-항체 복합체는 항체의 Fab(항원부착기) 부위가 노출된 형태로 존재하므로, 특정 항원과의 항원항체반응을 전혀 방해하지 않는 특징이 있다. 또한, 단백질-항체 복합체는 단일 항체에 비해 입자 크기가 커지므로, 이후 혈액 내 혈구(항원)와 접촉시 형성되는 항원-항체 복합체의 크기가 커져 혈구 포집 및 혈장 분리가 용이하게 된다.
혈구 응집 단계
상기 단계는 상기 항체 복합체와 대상자 혈액을 반응시켜 혈구를 응집시키는 단계이다.
본 발명의 혈장 채취 방법은 상기 단계에서 혈장 분리의 간편성을 위해 상기 항체 복합체 형성 단계 이후, 항체 복합체를 혈장 분리를 위한 기기 내에 도포하고, 상기 기기에 대상자 혈액을 주입하여 항체 복합체와 반응시킬 수 있다.
상기 항체 복합체를 기기 내에 도포시켜 이용하는 경우, 항체 복합체의 도포량은 주입하려는 혈액의 양에 따라 달라질 수 있으며, 혈구와 항체 복합체 간에 일정 비율을 유지하도록 하는 것이 바람직하며, 예를 들면, 1 개의 혈구 당 1~10 개의 항체 복합체가 작용하도록 조절할 수 있다. 일 실시예로서 10 ㎖의 혈액을 처리하기 위해서는 통상적인 혈구 농도 5×107/㎖를 감안하여 약 5×108 개의 혈구를 처리하는 것으로 계산하여, 5×108 내지 5 ×109 개의 항체 복합체를 도포할 수 있다.
상기 항체 복합체와 대상자 혈액을 반응시키면 항체의 Fab(항원부착기) 부위에 혈구(항원)가 결합하게 되어 항원-항체 복합체가 형성되어 혈구들의 응집을 유도하게 된다. 이때 반응 시간은 주입하는 혈액의 양에 따라 달라질 수 있으며, 바람직하게는 3~30분, 더욱 바람직하게는 5~10분 동안 반응시킬 수 있다. 상기 혈구 응집 과정을 도 3을 참조하여 구체적으로 설명하면, 대상자 혈액 내 성분 중 항원이 존재하는 혈구(310)는 항체 복합체(320)의 Fab 부위와 결합하여 항원-항체 복합체를 형성하게 되어 결국 거대한 혈구 응집체(330)가 형성되게 된다.
혈장 분리 단계
상기 단계는 상기 혈구 응집체가 형성된 상태의 혈액을 필터로 여과하여 혈장만을 분리해내는 단계이다.
상기 필터로는 혈장 분리시 사용되는 당업계에 공지된 다양한 소재 및 형태의 필터를 사용할 수 있다. 이러한 필터는 구체적으로 종이, 유리 섬유, 세라믹, 강철 또는 고분자로 형성되는 다공성 매트릭스 형태일 수 있다.
또한, 상기 다공성 매트릭스의 체구멍 크기는 단일 혈구에 비해 거대한 크기의 혈구 응집체가 통과하지 않을 정도의 체구멍 크기를 가지는 것이면, 특별히 제한되지 않으며, 바람직하게는 10 내지 100 ㎛일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 20 내지 50 ㎛일 수 있다. 상기 범위에서 정확하고 신속한 필터링이 가능하여 혈장 분리 효율이 높은 장점이 있다.
본 발명의 한 구체예에 따른 혈장 분리 기기는 상기 혈장 채취 방법을 용이하게 수행하기 위한 기기이며, 구체적으로, 대상자의 혈액이 주입되는 시료 주입부; 상기 대상자의 혈구에 특이적인 항체, 및 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질로 구성된 항체 복합체가 도포되어 혈구의 응집을 유도하는 반응부; 및 상기 혈액을 필터링하여 혈장을 분리하기 위한 필터부;가 구비된 유체 채널을 포함함을 특징으로 한다.
상기 혈장 분리 기기의 구성을 도면과 함께 설명하면, 도 1에서 보듯이, 상기 혈장 분리 기기는 혈액이 주입되는 시료 주입부(110), 혈구 응집을 유도하는 반응부(120) 및 혈액 필터링을 위한 필터부(130)를 포함하며, 상기 각 기능부는 각 부위를 연결하는 채널부(140)를 통해 연결되며, 전체적으로 유체가 통과하는 긴 채널을 형성하게 된다.
상기 시료 주입부(110)는 대상자의 혈액이 주입되는 곳이다. 혈액 주입은 주사기, 실린더, 파이펫, 튜브 등을 통해 주입할 수 있으며, 이러한 주입이 용이하도록 주입부의 크기를 조절할 수 있다.
상기 반응부(120)는 대상자의 혈구에 특이적인 항체, 및 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질로 구성된 항체 복합체가 도포되어 대상자의 혈구 응집을 유도하는 곳이다. 도포되는 항체 복합체의 양은 처리하려는 혈액의 양에 따라 결정될 수 있으며, 특별히 한정되지 않는다. 상기 항체 복합체는 반응부(120) 외에 시료 주입부(110)에도 도포될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서 상기 대상자의 혈구에 특이적인 항체는 IgG이고, 상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질은 단백질 A, 단백질 G 또는 이들의 혼합물인 것이 바람직하다. 이때, 상기 IgG와 단백질 A 또는 단백질 G 간의 항체 복합체 형태는 상기 혈장 채취 방법에서 상술한 바와 같다.
상기 시료 주입부(110)를 통해 대상자의 혈액이 주입되면, 상기 반응부(120)에서 혈구 응집이 유도되게 된다. 상기 항체 복합체와 혈액을 반응시키면 혈액 내 혈구(항원)가 상기 항체 복합체를 매개로 하여 응집되게 된다. 즉, 혈구가 항체 복합체에 존재하는 항체의 Fab 부위에 결합하여 항원-항체반응이 일어나게 되어 결국 거대한 크기의 혈구 응집체가 형성되게 된다. 구체적 설명은 상기 혈장 채취 방법에서 상술한 바와 같다.
상기 필터부(130)는 혈구 응집체가 형성된 혈액을 필터링하여 혈장만을 분리해내는 곳이다. 이때 상기 필터부(130)는 응집된 혈구를 포집하고 혈장만을 통과시키기 위한 필터가 단층 또는 다층으로 장착될 수 있다. 또한, 상기 필터는 종이, 유리 섬유, 세라믹, 강철 또는 고분자로 형성되는 다공성 매트릭스 형태일 수 있다. 상기 다공성 매트릭스의 체구멍 크기는 10 내지 100 ㎛일 수 있다.
본 발명의 시료 주입부, 반응부 및 필터부가 구비된 유체 채널은 플라스틱, 유리, 실리콘 또는 고무 소재로 이루어질 수 있으며, 간편하고 용이한 처리를 위해 플라스틱인 것이 바람직하다. 이러한 플라스틱 소재로는 예컨대, 폴리디메틸실로세인(poly-dimethyl siloxane, PDMS), 폴리메틸메타크릴레이트(polymethylmethacrylate, PMMA), 폴리카보네이트(polycarbonate, PC), 사이클로올레핀 코폴리머(cycloolefin copolymer, COC), 폴리아미드(polyamide, PA), 폴리에틸렌(polyethylene, PE), 폴리프로필렌(polypropylene, PP), 폴리페닐렌 에테르(polyphenylene ether, PPE), 폴리스티렌(polystyrene, PS), 폴리옥시메틸렌(polyoxymethylene, POM), 폴리에테르에테르케톤(polyetheretherketone, PEEK), 폴리테트라플루오로에틸렌(polytetrafluoroethylene, PTFE), 폴리비닐클로라이드(polyvinylchloride, PVC), 폴리비닐리덴 플로라이드(polyvinylidene fluoride, PVDF), 폴리부틸렌테레프탈레이트(polybutyleneterephthalate, PBT), 불소화 에틸렌프로필렌(fluorinated ethylenepropylene, FEP) 및 퍼플로로알콕시알칸(perfluoralkoxyalkane, PFA) 등이 가능하다.
본 발명의 상기 혈장 분리 기기는 말단에 혈장 내 바이오마커 분석을 위한 장치를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 경우 혈장 분리 및 진단이 원 스텝으로 이루어져 더욱 신속한 진단이 가능한 장점이 있다.
또한, 상기 혈장 분리 기기는 소량의 혈액으로 신속한 진단 수행을 위한 혈장 분리 칩 형태일 수 있다.
[ 실시예 ]
이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 통해 본 발명의 구성 및 작용을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되지는 않는다. 여기에 기재되지 않은 내용은 이 기술 분야에서 숙련된 자이면 충분히 기술적으로 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략하기로 한다.
실시예 . 혈장 분리 기기를 이용한 혈장 채취
대상자(인간) 혈구에 특이적인 항체를 제조하기 위해, 혈구를 생쥐 복강에 접종한 후, 생쥐 혈청으로부터 인간 혈구에 특이적인 항체 IgG를 면역친화법으로 분리하였다.
구체적으로, 20 ㎖의 인간 혈액을 채취하고 생리식염수로 3 회 이상 세척하여 혈장 단백질을 제거하였다. 혈장 단백질이 제거된 혈구 1×107 개를 약 100 ㎖의 생리식염수에 희석시켜 생쥐의 복강에 접종하는데, 3 주간의 간격으로 4 회 이상 접종하여 충분한 항체가 생쥐 내에 형성되도록 하였다. 최종 접종 후 7일 후 생쥐의 피를 회수한 후, 혈액을 응고시키고 원심분리하여 상층의 혈청을 분리하였다.
상기 혈청 중에서 인간 혈구에 대한 항체만을 분리하기 위해 200 ㎖의 인간 혈액을 생리식염수로 3 회 세척한 후, 생쥐에서 얻어진 혈청 50 ㎖를 섞었다. 상온에서 약 2 시간 배양 후, PBS로 5 회 원심분리 및 세척을 수행하여 비특이적 항체들을 제거하였다. 붙어있는 항체의 회수는 low pH 기법을 사용하였다. 최종 세척을 마친 혈구 침전물에 200 ㎖의 추출버퍼 (100 mM glycine (pH 2.5), 0.15 M NaCl)를 첨가하고 섞었다. 이를 상온에서 약 2 분간 두었다가 원심분리한 후에 상층액을 거두어 20 ㎖의 중화용액 (1 M phosphate buffer (pH 8.0))를 혼합하고 중화시켜 최종적으로 인간 혈구에 특이적인 항체를 분리하였다.
이렇게 얻어진 IgG 항체에 단백질 A를 혼합하여 1개 단백질 A 당 4개 IgG가 결합된 형태의 항체 복합체를 형성시켰다. 상기 단백질 A는 Thermo Fisher Scientific Inc.로부터 구입하여 사용하였다.
시료주입부, 반응부 및 필터부가 구비된 유체채널을 포함하는 혈장 분리를 위한 기기를 이용하여 혈장을 분리하기 위해, 상기에서 제조된 항체 복합체를 상기 반응부에 도포하였다. 이때 도포량 10 ㎖의 혈액을 처리하기 위해 통상적인 혈구 농도 5×107/㎖를 감안하여 약 5×108 개의 혈구를 처리하는 것으로 계산하여, 혈구 및 항체 복합체 간에 1:5 비율로 결합하도록 2.5×109 개 정도의 항체 복합체를 도포하였다.
이후, 대상자 혈액 10 ㎖를 상기 항체 복합체가 도포된 기기의 시료주입부로 주입한 후 반응부에서 혈액 응고가 일어나도록 5 분간 상온에 방치하였다. 이후, 상기 반응이 완료된 혈액을 필터부에 장착된 필터로 여과시켜 혈장만을 분리하였다.
상기 채취된 혈장 상태를 확인한 결과, 본 발명에 따른 혈장 분리 방법은 혈구 누출이나 용혈 현상 없이 신속하고 정확하게 혈장 분리가 가능한 것을 확인할 수 있었다.
110 : 시료 주입부 120 : 반응부
130 : 필터부 140 : 채널부
210 : 항체의 Fab 부위 220 : 항체의 Fc 부위
230 : 단백질 G 240 : 단백질 A
310 : 혈구 320 : 항체 복합체
330 : 혈구 응집체

Claims (11)

  1. 대상자의 혈구에 특이적인 항체를 제조하는 단계;
    상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질과 상기 항체를 혼합하여 항체 복합체를 형성시키는 단계;
    상기 항체 복합체와 대상자 혈액을 반응시켜 혈구를 응집시키는 단계; 및
    상기 반응이 완료된 혈액을 필터로 여과하여 혈장을 분리하는 단계;
    를 포함하는 혈장 채취 방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 항체는 IgG 이고,
    상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질은 단백질 A, 단백질 G 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 혈장 채취 방법.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질이 단백질 A인 경우 1개 단백질 A 당 4개 IgG가 결합된 형태로 항체 복합체를 형성하고,
    단백질 G인 경우 1개 단백질 G 당 2개 IgG가 결합된 형태로 항체 복합체를 형성하는 것을 특징으로 하는 혈장 채취 방법.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 항체 복합체 형성 단계 이후, 항체 복합체를 혈장 분리를 위한 기기 내에 도포하고, 상기 기기에 대상자 혈액을 주입하여 항체 복합체와 반응시키는 것을 특징으로 하는, 혈장 채취 방법.
  5. 대상자의 혈액이 주입되는 시료 주입부;
    상기 대상자의 혈구에 특이적인 항체, 및 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질로 구성된 항체 복합체가 도포되어 혈구의 응집을 유도하는 반응부; 및
    상기 혈액을 필터링하여 혈장을 분리하기 위한 필터부;가 구비된 유체 채널을 포함하는 혈장 분리 기기.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 항체는 IgG이고,
    상기 항체의 Fc 부위와 결합력을 갖는 단백질은 단백질 A, 단백질 G 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 혈장 분리 기기.
  7. 제5항에 있어서,
    상기 시료 주입부, 반응부 및 필터부가 구비된 유체 채널은 플라스틱, 유리, 실리콘 또는 고무 소재로 이루어진 것을 특징으로 하는 혈장 분리 기기.
  8. 제5항에 있어서,
    상기 필터부는 응집된 혈구를 포집하고 혈장만을 통과시키기 위한 필터가 단층 또는 다층으로 장착되며,
    상기 필터는 종이, 유리 섬유, 세라믹, 강철 또는 고분자로 형성되는 다공성 매트릭스 형태인 것을 특징으로 하는 혈장 분리 기기.
  9. 제8항에 있어서,
    상기 다공성 매트릭스의 체구멍 크기는 10 내지 100 ㎛ 인 것을 특징으로 하는, 혈장 분리 기기.
  10. 제5항에 있어서,
    상기 혈장 분리 기기는 말단에 혈장 내 바이오마커 분석을 위한 장치를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 혈장 분리 기기.
  11. 제5항에 있어서,
    상기 혈장 분리 기기는 혈장 분리 칩 형태인 것을 특징으로 하는 혈장 분리 기기.
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