KR20120023653A

KR20120023653A - 푸시드산나트륨을 사용하고 생체중합체를 혼입한 약용 푸시드산 크림 및 이의 제조 방법

Info

Publication number: KR20120023653A
Application number: KR1020117026914A
Authority: KR
Inventors: 술루르 수브라마니암 바난가무디; 마드하반 스리니바산; 닐라칸단 나라야난 츄리엘; 쿠푸사미 센틸쿠마르
Original assignee: 술루르 수브라마니암 바난가무디
Priority date: 2009-04-13
Filing date: 2010-04-12
Publication date: 2012-03-13
Also published as: EP2419087B1; IL215641A0; MX2011010784A; ES2404156T3; EP2419087A1; CA2795611A1; US8895542B2; CY1113885T1; JP2012523451A; US20120040946A1; BRPI1006729A2; JP5205549B2; RU2537023C2; BRPI1006729B1; PT2419087E; CN102159191B; RU2011146230A; IL215641A; PL2419087T3; SI2419087T1

Abstract

본 발명은 세균성 피부 감염 및 관련 상처 및 또한 화상에 의하여 야기되는 것을 비롯한 기타의 피부 상처를 치료하기 위한 의약 조성물에 관한 것이다. 크림은 또한 상피화 과정을 통하여 피부 회춘을 야기한다. 크림은 a) 키토산의 형태의 생체중합체, b) 푸시드 형태의 약학적 활성 성분(API), c) 크림 베이스 및 d) 물을 포함한다. 또한, 본 발명은 푸시드산나트륨을 불활성 기체, 바람직하게는 질소를 사용하여 생성된 무산소 환경하에서 푸시드산으로 전환시켜 그 자리에서 출발 미정제 물질로서 푸시드산나트륨으로부터 푸시드산이 형성되는 약용 크림의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법에 의하여 생성된 크림은 푸시드산을 포함하는 통상의 크림보다 저장 수명 안정성이 더 크며 그리고 API의 입자 크기가 더 미세하며, 시판중인 대체의 크림보다 사람 피부에서 알러지, 소양증, 상처가 있는 피부 감염에 대하여 사용시 놀랍게도 우수한 것으로 밝혀졌다.

Description

푸시드산나트륨을 사용하고 생체중합체를 혼입한 약용 푸시드산 크림 및 이의 제조 방법{A MEDICINAL FUSIDIC ACID CREAM MADE USING SODIUM FUSIDATE AND INCORPORATING A BIOPOLYMER AND A PROCESS TO MAKE IT}

본 발명은 1차 및 2차 세균성 피부 감염 및 화상 상처를 비롯한 상처에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 푸시드산 및 키토산 형태의 생체중합체를 혼입한 크림, 이의 제조 방법 및 이들 감염 및 상처 치료에서의 사용에 관한 것이다. 추가로, 상기 크림에서의 푸시드산은 출발 약학적 활성 성분(API)으로서 푸시드산나트륨을 사용하여 그 자리에서(in situ) 생성된다.

국소 및 전신 모두의 다양한 치료는 그램 양성균, 예컨대 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus), 연쇄상구균(Streptococcus spp) 등에 의하여 야기되는 1차 및 2차 피부 감염에 대하여 이용 가능하다. 국소 및 전신 세균성 감염 치료 조성물은 통상적으로 베이스 성분과 조합된 1종 이상의 약학적 활성 성분(API)을 사용한다. 크림 제형에서, API는 통상적으로 항생제/항균제, 예컨대 푸시드산 등을 포함한다.

시판중인 푸시드산 크림에서, 미세 분말 형태의 푸시드산은 공급원 API로서 사용된다. 작은 입자 크기는 커다란 비표면적 및 투과를 제공하여 피부 접촉을 개선시키며, 피부에 적용시 부드러운 느낌을 제공한다. 그러나, 푸시드산 입자의 미세한 크기의 심각한 단점은 크림의 제조, 취급 및 처리중에 분자 산소와의 접촉 및 반응을 위하여 커다란 표면적을 제공한다는 점이다. 이는 화학적 안정성에 심각한 영향을 미치며, 최종 크림 배합물에서 API(푸시드산)의 효능의 신속한 감소를 초래한다. 산화로 인한 분해는 시판중인 푸시드산 크림의 불안정성의 주요 원인이 된다. 하기 표 1에는 상기의 조건하에서 3개월의 노출 기간에서 분석시 실온 내지 45℃ 범위내의 조건에 대하여 산소에 노출된 API 샘플(푸시드산)에서의 분해가 7.7% 내지 11% 범위내가 된다는 것을 알 수 있다.

미정제 API로서 푸시드산의 산소에 대한 노출 시간이 길수록, 배합물중에서의 푸시드산의 안정화에 대한 제한은 더 커진다는 것을 알 수 있다. 그러나, 시간이 경과함에 따라 푸시드산의 안정성에 대한 데이타는 공개되지 않았다.

푸시드산에 대한 대안으로서, 푸시드산나트륨은 국소 적용예에 대한 더마슈티컬 의약을 생성하는데 사용되었던 것으로 알려져 있다. 그러나, 이는 크림보다는 연고의 형태이다. 크림에 비하여 연고의 단점은 잘 알려져 있으며, 일반적으로 국소 적용의 경우에는 연고보다는 크림을 사용하는 것이 바람직하다.

API로서 푸시드산의 여러 측면은 알려져 있다:

?열불안정하다.

?크림 배합물에 사용 가능하다.

?푸시드산나트륨을 수성상에 용해시키고, 산을 용액에 첨가하여 푸시드산을 침전시켜 푸시드산나트륨으로부터 얻을 수 있다. 그러나, 푸시드산 침전물은 첫째 이의 거칠고 고르지 못한 입자 크기로 인하여 크림 제형으로 가공하는 것이 곤란하며, 그리고 둘째는 젖은 케이크로부터 푸시드산을 회수하는 것은 산소에 대한 노출로 인하여 푸시드산을 악화시키는 건조 및 추가의 취급을 필요로 한다.

?푸시드산 크림에서의 API의 안정성은 푸시드산의 열불안정성 성질로 인하여 신뢰할 수가 없다.

푸시드산을 포함하는 의약의 산화에 대한 안정화는 제조 및 저장중에 다수의 엄격한 예방 절차의 관찰을 필요로 한다. 이는

?약학적 컨테이너중의 산소를 불활성 기체, 예컨대 질소, 이산화탄소, 헬륨 등으로 교체하는 것,

?약제가 산화를 촉매화시키는 중금속 이온과 접촉하는 것을 회피하며,

?가공전 API를 감소된 온도에서 이의 저장 수명 동안 보관하는 것을 포함한다.

실제로, 이는 API의 저장(통상적으로 2℃ 내지 8℃에서 기밀성 컨테이너내에서 저장 수명 동안 저장)뿐 아니라 제조중에 더 엄격한 조절을 의미한다.

그러므로, 푸시드산은 안정성이 통상의 크림중에서, 특히 크림의 제조시 푸시드산의 안정성보다 더 크며, 그리고, 안정성을 저장 수명 동안 허용 가능한 수준으로 유지하는 푸시드산 크림의 제조 방법에 대한 수요가 여전히 존재한다.

그 다음, 피부 질환의 유형 및 이에 사용할 수 있는 치료 방법에 대하여 살펴본다. 피부 질환은 세균 형태 또는 진균으로부터 발생하는 것으로 광범위하게 분류될 수 있는 질환이다. 항진균제 또는 항균제 조성물은 통상적으로 로션, 크림 또는 연고로서 적용된다. 게다가, 다수의 경우에서는 피부 상태가 세균성 병원체 또는 진균으로 인한 것인지를 확인하기는 어렵다.

피부 질환 치료에 대한 한 접근법은 시행착오에 의한 배제를 통한 것이다. 항균제 또는 항진균 조성물을 적용하고, 반응을 모니터하고, 치료를 변형시킨다. 이러한 접근법의 주요 단점은 치료가 치료 기간 동안 1일 수회 적용을 필요로 한다는 점이다. 이는 매우 불편하며, 또한 특히 저개발 국가에서 다수의 인구에 대하여서는 비용면에서 효과적이지 못하다.

세균 또는 진균에 의하여 야기되는 피부 질환을 치료하는데 사용 가능한 치료법에는 여러가지가 있다. 통상적으로, 이러한 조성물은 스테로이드, 항균제 또는 항진균제(또는 이들의 고정된 투약 조합)를 사용하며, 이들 약학적 활성 성분에 촛점을 맞추었다. 이와 같은 배합의 조성물은 예를 들면 물리적/화학적/생체방출 프로파일을 개선시키기 위함이다.

염증 및 세균성 공격으로 야기된 다수의 피부 질환은 소양증 및 차후의 긁음을 초래하며, 다른 원인중에서도 이는 심각한 합병 2차 감염을 초래할 수 있다. 통상적으로 이용 가능한 치료는 피부 치유 또는 회춘에 집중되지 않아서, 통상적으로 이들 2가지 측면은 자연적으로 치유되도록 내버려두게 된다.

저항력이 저하된 피부 상태(벤 상처, 상처, 감염, 염증, 찰과상 등)와 관련하여 용어 치유는 세균 또는 진균과 같은 근본 원인의 방지, 조절, 배제뿐 아니라, 피부를 감염 이전의 상태로 복구시키는 것에 관한 것이다.

피부 치료의 통상의 접근법은 2가지의 단계인 a. 치유, b. 피부의 병 이전의 상태로의 복구로 분류될 수 있다. 치유 부분은 질환의 근원을 가능한한 최대한의 정도로 배제시키는 것을 포함한다. 이는 항균제 또는 항진균제의 적절한 치료를 통하여 감염을 야기하는 세균 또는 진균의 제거 또는, 스테로이드 치료를 통한 염증의 감소가 될 수 있다. 이러한 치료가 진행중일 때, 피부의 진행중인 저항력이 저하된 상태는 심각한 상태가 될 수 있는 2차 감염에 지속적으로 걸리기 쉬워진다. 긁거나 또는 상처가 생긴 피부의 경우, 혈액 응고는 2차 감염의 가능성을 감소시키므로 신속하게 발생하는 것이 중요하다. 크림, 로션, 연고를 통하여 투여되는 이와 같은 치료의 촛점은 약학적 활성 성분의 작용에 있다. 크림 베이스 또는 연고 베이스는 단순히 질환의 부위에 API를 취하기 위한 담체로서 간주된다.

그러나, 피부를 다시 질병 이전의 상태로 복구하는 측면은 거의 완전히 자연에 맡기게 된다. 그러므로, 종래의 피부 치료 접근법의 핵심 단점의 하나는 혈액 응고 및 상처 치유 과정을 지연시키게 되어 2차 감염의 위험을 무릅쓰게 된다는 점이다.

게다가, 종래 기술의 연구로부터 기존의 처방 피부 제품의 여러가지 부족한 측면이 피부 질환의 국소 치료에 사용된다. 이는 크림 베이스 매트릭스 또는 연고 베이스가 임의의 잠재적인 치료 잇점에 대하여 간과하였다는 사실을 분명히 나타낸다. 특히, 입수 가능한 종래 기술 어느 것에서도 하기를 시사하지는 않는다:

- 국소 피부 배합물은 주요 API의 치료적 결과가 개선되도록 주요 API의 활성을 넘어선 피부 치유 또는 재생을 전달할 수 있다.

- 생물학적으로 활성인 중합체(이른바 생체중합체)의 첨가는, 약물 설계 단계 그 자체에서 요법 결과를 개선 및 보충하기 위하여 올바른 생체중합체 또는 자연적으로 상호작용하는 배합물 부형제 또는 과정 변수가 충분히 고려 및 최적화되지 않을 경우 배합물의 안정성을 보충하는 복잡한 과정이다.

- 더마슈티컬 크림의 단일 투약 포맷으로 API의 작용적 안정성을 보유하면서 작용적으로 생체활성인 부형제 중합체를 크림 매트릭스에 혼입하는 것은 크림 매트릭스의 물리적 안정성에 대하여 구체적인 문제점의 해결책을 포함한다.

일부 기존 환자의 양상은 상기와 같은 사항을 예시한다. 푸시드산은 크림 제형으로 사용되어 왔다. PCT 출원 WO2009/063493에는 2차 세균성 감염과 관련된 염증성 피부증의 치료를 위한 국소 항생제 및 국소 스테로이드의 병용 요법이 개시되어 있다. 특히, 감염된 습진, 예컨대 2차 감염된 접촉 피부염을 비롯한 2차 감염된 피부염, 건선, 알러지성 접촉 피부염 및 피부의 2차 세균성 감염이 있는 아토피 피부염의 치료에 유용한 푸시드산 및 코르티코스테로이드, 예컨대 모메타손 푸로에이트의 병용을 포함하는 국소 약학적 조성물에 관한 것이다. 특히, 피부염, 특히 2차 세균성 감염이 발생할 위험이 있는 아토피 피부염 환자의 경우에서 감염을 예방하는데 유용한 푸시드산 및 코르티코스테로이드, 예컨대 모메타손 푸로에이트의 병용을 포함하는 국소 약학적 조성물에 관한 것으로 주장하고 있다.

상기 출원은 종래 기술이 푸시드산과 코르티코스테로이드, 특히 모메타손 또는 할로베타졸의 병용을 포함하는 조성물을 개시하지 못하였다는 주장에 대한 독창성에서 유래한다고 주장하고 있다. WO2009/063493의 발명자들은 외관상으로는 놀랍게도 푸시드산의 항생 작용 및 코르티코스테로이드, 예컨대 모메타손의 항염증성 효과 모두가 에스. 아우레우스(S. aureus)의 감소 및 환자의 피부 염증성 감염의 증상 및 징후의 개선에서 중요한 역할을 한다는 것을 발견하였다. WO2009/063493의 발명자들은 또한 표면적으로는 놀랍게도 푸시드산의 항생 작용 및 코르티코스테로이드, 예컨대 할로베타졸의 항염증성 효과 모두가 비-감염된 피부증을 갖는 환자에서의 2차 세균성 감염의 예방 및, 2차 감염된 접촉 피부염, 알러지성 접촉 피부염, 아토피 피부염, 건선 및 피부의 2차 세균성 감염을 갖는 기타 코르티코스테로이드 반응성 피부증(CRD)을 비롯한 감염된 스테로이드 반응성 피부증, 예컨대 2차 감염된 피부증의 치료에서 중요한 역할을 한다는 것을 발견하였다.

WO2009/063493에 개시된 발명은 2차 세균성 감염과 관련된 염증성 피부증의 치료를 위한 국소 항생제 및 국소 스테로이드의 병용 요법에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 피부의 2차 세균성 감염을 갖는 아토피 피부염, 알러지성 접촉 피부염, 건선 및 2차 감염된 접촉 피부염을 비롯한 감염된 습진, 예컨대 2차 감염된 피부염의 치료에 유용한 푸시드산 및 코르티코스테로이드, 예컨대 모메타손 푸로에이트의 병용을 포함하는 국소 약학적 조성물에 관한 것이다. 특히, 이 발명은 2차 세균성 감염이 발생할 위험이 있는 피부염, 특히 아토피 피부염 환자의 경우에서 감염의 예방에 유용한 푸시드산 및 코르티코스테로이드, 예컨대 모메타손 푸로에이트의 병용을 포함하는 국소 약학적 조성물에 관한 것이다.

상기의 예 및 기타의 유사한 출처로부터 종래 기술은 하기를 교시 내지는 시사하지 않음이 명백하다:

- 주요 API에 대한 단순한 담체가 아닌 크림의 작용성 요소로서 크림 베이스 매트릭스의 사용.

- 항균제 푸시드산나트륨과 함께 작용성 부형제로서 공지의 생체중합체의 사용.

- 박막 형성, 혈액 응고, 지지 표피 성장, 미생물 정전 고정으로서 훨씬 더 우수한 치유 효과를 제공하는 것은 통상의 단일 약물 요법의 경우에서와 같이 번갈아서라기보다는 동시에 효과가 나타난다.

- 크림 매트릭스에 사용되는 API를 부여하는, 크림의 전체 약용 성질을 개선시킨다.

그러므로, 주요한 API에 의하여 제공되는 것에 보충하는 치료적 가치를 제공하며 그리고 단순한 담체 또는 전달 기전 이상의 목적을 수행하는 크림 베이스중에서 제공될 수 있는 단일 투약 API 국소 치료에 대한 수요가 존재한다.

발명의 목적 및 잇점

그러므로, 본 발명은 활성 API로서 푸시드산을 포함하지만, 세균성 감염에 대한 효과적 치료를 제공하며 그리고 또한 피부 회춘을 적극적으로 돕는 키토산을 포함하는 작용성 크림 베이스를 사용하여 이의 저장 수명을 통하여 기타의 수단을 사용하여 제조되는 푸시드산보다 API의 안정성이 더 큰 약용 크림의 제조 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 화상 상처를 비롯한 상처의 치료에서 효과적인 약용 크림을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은

- 주요 API의 치료적 결과가 개선되도록 푸시드산나트륨의 활성을 넘어선 피부 치유 또는 재생을 전달할 수 있으며,

- 올바른 생체중합체가 선택되지 않을 경우 보충될 수 있는, 배합물의 안정성이 보충되지 않은 생물학적 활성 중합체(이른바 생체중합체)를 포함하며,

- 단일 투약 포맷으로 API의 작용성 안정성을 유지하면서 크림 매트릭스에서의 작용성 생체활성 부형제 중합체를 혼입하는 국소 피부 치료를 위한 처방 약용 배합물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

도 1은 키토산과 비-적합성 부형제, 예컨대 카르보머를 포함하는 크림의 불균질한 성질을 도시한다.
도 2는 키토산을 사용한 막 형성을 도시한다.

발명의 개요

본 발명은 세균성 피부 감염 및 관련 상처 및 또한 화상에 의하여 야기되는 것을 비롯한 기타의 피부 상처를 치료하기 위한 약용 조성물에 관한 것이다. 또한, 이러한 크림은 상피화 과정을 통하여 피부 회춘을 야기한다. 크림은

a) 키토산 형태의 생체중합체,

b) 푸시드산나트륨으로부터 그 자리에서 생성되는 푸시드산의 형태의 약학적 활성 성분(API),

c) 1차 및 2차 유화제, 왁스 물질, 공용매, 산, 보존제, 완충제, 항산화제, 킬레이트화제 및 보습제를 포함하는 크림 베이스,

d) 물을 포함한다.

활성 성분, 이른바 키토산 및 푸시드산은 사람 피부를 상기 확인한 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는 사람 피부에서 알러지 및 소양증, 및 상처를 갖는 세균성 피부 감염의 치료에 사용하기 위하여 크림 베이스에 혼입된다.

또한, 본 발명은 출발 미정제 물질로서 푸시드산나트륨으로부터 그 자리에서 형성되는 푸시드산 및 키토산을 포함하는 약용 크림의 제조 방법에 관한 것이며, 여기서 푸시드산나트륨은 불활성 기체, 바람직하게는 질소를 사용하여 생성된 무산소 환경하에서 푸시드산으로 전환된다. 본 발명의 방법에 의하여 생성된 크림은 푸시드산을 포함하는 통상의 크림에 비하여 저장 안정성이 더 크며, API의 입자 크기가 더 미세하다. 본 발명의 방법에 의하여 생성된 크림은 물, 바람직하게는 정제수와 함께 보존제, 산, 공용매, 유화제 및 왁스 물질을 포함하는 크림 베이스중에서 푸시드산나트륨으로부터 그 자리에서 형성되는 API로서 푸시드산을 포함한다. 본 발명의 방법에 의하여 생성된 크림은 완충제, 항산화제, 킬레이트화제 및 보습제 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 성분을 임의로 추가로 포함한다.

발명의 상세한 설명

본 출원인은 API로서 푸시드산 및 푸시드산나트륨을 갖는 국소 제제의 공지의 측면에 대하여 상기에서 논의한 바 있다. 통상의 지식 수준에서,

- 출발 API로서 푸시드산나트륨을 사용하여 생성된 푸시드산을 포함하는 크림은 입수 가능하지 않다.

- API로서 푸시드산나트륨의 안정성에 대한 공개된 데이타가 존재하지 않는다.

- 푸시드산나트륨은 푸시드산보다 API로서 본래 더 안정할 것으로 간주하지 않는다.

- 푸시드산나트륨으로부터 그 자리에서 생성된 푸시드산 및 키토산을 포함하는 크림은 입수 가능하지 않다라는 것은 자명하다.

이와 같은 사실에서, 놀랍게도 API로서 푸시드산나트륨은 푸시드산보다 상당히 더 안정하며, 푸시드산은 푸시드산나트륨보다 더 신속하게 악화시킨다는 것을 발견하였다.

API로서 푸시드산나트륨의 안정성에 대하여 공개된 데이타는 존재하지 않는다. 본 출원인은 이의 안정성을 평가하기 위하여 푸시드산나트륨에 대한 실험을 실시하였다. 하기 표 2로부터는 실온 내지는 45℃의 온도에 걸쳐 푸시드산나트륨의 분해가 2.45% 내지 6% 범위내라는 것을 알 수 있다.

하기 표 1 및 표 2는 미정제 API로서 푸시드산 및 푸시드산나트륨의 안정성의 비교를 나타낸다. 영국 약전(BP)에서 제안한 적정 방법과는 반대로, 본 출원인이 진정한 안정성-지표 방법인 것으로 판단하는 출원인이 개발한 인-하우스 HPLC 방법을 사용하여 연구를 실시하였다. 이는 BP 방법은 무상해 API와 분해된 형태를 구별하지 않았기 때문이다.

푸시드산의 안정성 분석:

푸시드산나트륨의 안정성 분석:

상기 두 실험에서, *초기는 공급처로부터 API의 수령시 테스트한 샘플의 결과를 나타낸다.

상기 표 1 및 표 2로부터 하기가 고찰된다:

?푸시드산의 경우, 실온에서 3개월(개방 조건)은 감소율이 약 7.7%이고, 45℃에서 3개월(개방 조건)은 감소율이 약 11%이다.

?푸시드산나트륨의 경우, 실온에서 3개월(개방 조건)은 감소율이 약 2.5%이고, 45℃에서 3개월(개방 조건)은 감소율이 약 6%이다.

그래서, 데이타에 의하면, API로서 푸시드산나트륨이 푸시드산보다 더 안정하다는 것을 알 수 있다.

본 출원인은 출발 미정제 물질로서 키토산 및 푸시드산나트륨(푸시드산이 아닌)을 포함하는 크림(연고가 아닌)의 제조 가능성을 연구하였다. 푸시드산나트륨이 더마슈티컬 적용예에 사용되긴 하였으나, 푸시드산나트륨을 사용하여 크림을 생성할 가능성은 없었다. 이는 푸시드산나트륨의 고유한 알칼리성(pH 7.5 내지 9) 때문인데, 크림 제형에 사용될 수 없다는 것을 의미하며, 그래서 출발 물질로서 푸시드산나트륨을 사용하여 제조한 모든 제품은 연고이다. 푸시드산나트륨을 사용하는 더마슈티컬 크림은 푸시드산나트륨이 푸시드산보다 더 안정하다는 사실의 잇점을 이용하였으며, 또한 적용예의 품질면에서 연고보다 훨씬 더 우수한 크림 배합물을 제공한다. 그래서, 푸시드산을 포함하는 시판중인 크림보다 안정성이 더 우수한 크림에 대한 수요가 여전히 존재한다.

그러므로, 본 출원인은 놀랍게도 더마슈티컬 크림에서의 API의 더 큰 안정성을 달성하기 위하여 푸시드산이 아닌 푸시드산나트륨이 크림 제조중에 출발 API로서 사용될 수 있다는 사실을 발견하였다. 출발 물질로서 푸시드산나트륨의 사용은 종래의 푸시드산 크림의 제조 및 저장과 관련된 단점을 배제시킨다.

또한, 본 출원인은 출발 API로서 푸시드산나트륨을 사용하여 생성된 푸시드산 크림이 우수한 화학적 안정성, 효능 및 미생물 민감도를 갖는다는 것을 발견하였다.

본 출원은 출발 API로서 푸시드산나트륨을 사용하여 생성된 푸시드산(API)을 포함하는 크림의 제조 방법에 관한 것이며, 여기서 그 자리에서 불활성 기체, 바람직하게는 질소를 사용하여 생성된 완전 무산소 환경하에서 산을 서서히 첨가하여 중간 단계에서 (공용매의 존재로 인하여) 분자 분산물 형태로 푸시드산이 형성되며 그리고, 최종 크림 베이스에 첨가시 매우 미세한 분산물로서 푸시드 산이 재생되며, 그리하여 최종 크림중에서 미세하게 그리고 균일하게 분산된 푸시드산을 생성한다. 이들 모든 조작은 불활성 기체, 바람직하게는 질소를 사용하여 생성된 대기 산소가 없는 환경에서 실시하였다. 본 발명의 방법을 사용하여 생성된 크림은 물, 바람직하게는 정제수와 함께 완충제, 보존제, 산, 공용매, 유화제 및 왁스 물질을 포함하는 크림 베이스중에서 푸시드산나트륨으로부터 그 자리에서 형성되는 API로서 푸시드산을 포함한다.

출발 API로서 본 발명의 방법에 사용될 수 있는 푸시드산나트륨은 세균성 1차 및 2차 감염을 치료하는 분야에서 널리 알려져 있다.

활성 화합물 푸시드산나트륨은 화합물을 사용한 약학적 조성물에 베이스 성분을 사용할 것을 필요로 하는데, 이는 화합물이 단독으로는 이의 거친 성질로 인하여 사람의 피부에 직접 가할 수 없기 때문이다.

베이스 성분은 일반적으로 생체중합체, 1차 및 2차 유화제, 왁스 물질, 공용매, 산, 보존제, 정제수 등을 포함한다.

본 발명의 방법을 사용하여 생성된 크림의 크림 베이스는 임의로 항산화제, 킬레이트화제 및 보습제 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 성분을 추가로 포함한다.

본 발명은 출발 미정제 물질로서 푸시드산나트륨을 사용하여 생성되며 그리고 푸시드산을 포함하는 시판중인 크림보다 일반적으로 화학적 안정성이 더 우수하며, 치료 효능이 높은 푸시드산을 포함하는 신규한 크림의 제조 방법에 관한 것이다.

본 발명의 방법을 사용하여 생성한 푸시드산 크림은 불활성 기체를 사용한 퍼징하에서 완전 무산소 환경에서 그리고 진공을 가하여 생성되며, 불활성 기체는 바람직하게는 질소이다. 이러한 조건하에서 푸시드산나트륨은 그 자리에서 푸시드산으로 전환된다. 본 발명의 크림은 세균성 피부 감염의 치료에 사용된다.

종래 기술의 연구에 의하면 처방 투약 분야에서 기존의 국소 치료 배합물의 여러가지 결여된 측면이 명백하다. 종래 기술에서는 하기와 같은 것을 교시 또는 시사하지 않았다:

- 국소 피부 배합물은 주요 API의 치료 결과가 개선되도록 주요 API의 활성 이상의 피부 치유 또는 재생을 전달할 수 있다.

- 생물학적 활성 중합체(이른바 생체중합체)의 첨가는 올바른 생체중합체가 선택되지 않았을 경우 배합물의 안정성이 보충될 수 있는 복잡한 과정이다.

- 더마슈티컬 크림의 단일 투약 포맷으로 API의 작용성 안정성을 유지하면서 작용성 생체활성 부형제 중합체를 크림 매트릭스에 혼입하는 것은 크림 매트릭스의 물리적 안정성에 대하여 특이적인 문제점의 해결책을 필요로 한다.

사용 가능한 국소 항균제의 적절한 예로는 네오마이신 설페이트, 푸시드산나트륨, 칼슘 무피로신, 겐타마이신, 은 설파디아진, 시프로플록사신, 프라미세틴 설페이트, 퀴인도클로르, 포비돈-요오드, 시소미신, 니트로푸랄 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

사용 가능한 생체중합체의 적절한 예로는 키토산 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

키토산

키토산은 무작위 분포된 β-(1-4)-결합된 D-글루코사민(탈아세틸화된 단위) 및 N-아세틸-D-글루코사민(아세틸화된 단위)로 이루어진 선형 다당류이다. 농업 및 원예, 수처리, 화학 산업, 약학 및 생체의학에서의 다수의 상업적 용도를 갖는 것으로 알려져 있다.

이의 공지된 성질은 가속화된 혈액 응고를 들 수 있다. 그러나, 약학적 활성 성분, 예컨대 항균제 또는 항진균제와 키토산의 양상이 주의하여 처리되어야 된다는 것은 당업자에게 공지되어 있지 않다.

막 형성, 점막점착성 및 점도 증가 성질을 갖는 것으로 알려져 있으며, 정제 배합물에서 결합제 및 붕해제로서 사용되어 왔다.

키토산은 일반적으로 대기/환경으로부터 수분을 흡수하며, 흡수되는 양은 환경의 초기 수분 함유량, 온도 및 상대 습도에 의존한다.

이는 비독성 및 비자극성 물질로 간주한다. 건강한 피부 및 감염된 피부와 생체적합성을 가지며, 새우, 오징어 및 게로부터 유래하기 때문에 생체분해성을 갖는 것으로 밝혀졌다.

키토산은 독특한 물리적 성질로 인하여 상처 치유 및 상처 복구를 가속시킨다. 이는 산성 내지는 중성 용액중에서 양으로 하전되며 그리고 가용성이다. 키토산은 생체접착성이 있으며, 음으로 하전된 표면, 예컨대 점막에 용이하게 결합된다. 키토산은 상피 표면에 걸쳐 극성 약물의 수송을 개선시킨다. 키토산의 성질은 혈액이 용이하게 응고되도록 하며, 최근에는 미국에서 붕대 및 기타의 지혈제에서의 사용에 대하여 승인받았다.

키토산은 비-알러지성이며, 천연 항균 성질을 갖는데, 이 점이 이의 사용을 추가로 뒷받침한다. 미세막 형성 생체물질로서, 키토산은 상처의 폭을 감소시키는 것을 도우며, 부위에서의 산소 투과성을 조절하며, 상처 분비물을 흡수하며, 더 빠른 속도로 치유에 대하여 훨씬 많이 요구되는 조직 효소에 의하여 분해된다. 또한, 진정 효과를 제공하여 소양증을 감소시킨다. 또한, 이는 모이스쳐로서 작용한다. 또한, 통상의 작은 베인 상처 및 상처, 화상, 흉터종, 다이어트성 궤양 및 정맥 궤양의 치료에서 유용하다. 본 발명에서 사용한 키토산은 1 kdal 내지 5,000 kdal 범위내의 각종 분자량을 갖게 된다.

키토산은 미국 약전 포럼에서 이의 작용성 부형제 카테고리에 관하여 논의되었었다. 키토산은 기본적으로 중합체이므로, 분자량에 따라서 다양한 등급으로 입수 가능하다. 다양한 등급의 키토산으로는 키토산 장쇄, 키토산 중쇄 및 키토산 단쇄를 들 수 있다. 등급 장쇄, 중쇄 및 단쇄는 직접 키토산의 분자량에 해당한다.

일반적으로 장쇄 등급은 분자량이 500,000 내지 5,000,000 Da 범위내이며, 중쇄 등급은 분자량이 1,000,000 내지 2,000,000 Da 범위내이고, 단쇄 등급은 분자량이 50,000 내지 1,000,000 Da 범위내이다.

키토산의 분자량은 배합물에서 중요한 역할을 한다. 고분자량 키토산은 시스템에 더 높은 점도를 부여하며, 저분자량 키토산은 시스템에 더 낮은 점도를 부여한다. 그러나, 중쇄 등급의 키토산은 배합물에 최적 수준의 점도를 전달한다. 투약 제형이 크림이므로, 피부에 우수한 퍼짐성을 달성하기 위하여서는 적절한 수준의 점도가 요구된다

본 발명자들은 본 발명에 대하여 키토산 중쇄 등급으로 완성하였는데, 이는 활성 물질, 즉 출발 활성 물질로서 푸시드산나트륨 및 키토산의 치료적 활성을 잃지 않으면서 크림에 필수 유동 성질을 부여하기 때문이다. 키토산 중쇄 등급의 농도는 여러번의 실험실 시험 및 효능에 대한 임상전 동물 실험에 기초하여 주의하여 도달되었다.

국소 항균제

국소 항균제는 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus), 표피 포도상구균(Staphylococcus epidermidis), 메티실린 내성 황색 포도상구균(MRSA) 등에 의하여 야기되는 세균성 감염에 대하여 피부를 표적화시키고자 한다.

항균제는 세균성 리보솜과 조합되고 그리고 mRNA 리보솜 조합을 방해하여 세포벽 합성을 억제함으로써 작용된다.

또다른 가설로는, 항균제가 잘못된 아미노산을 갖는 펩티드쇄를 생성하기 위하여 리보솜을 유발하게 되며, 그리하여 세균 세포를 파괴하는 것으로 판단된다.

푸시드산나트륨

푸시드산나트륨은 항생제로서 공지된 의약의 군에 속한다. 이는 원인이 되는 세균의 성장을 중지 또는 사멸시켜 관절 및 골의 감염과 같은 세균성 감염을 치료하는데 사용된다.

푸시드산나트륨의 분자식은 C₃₁H₄₇이다. 화학식은 3,11,16β-트리히드록시 29-노르-8,9β,13,14β-담마라-17(20)[10,21-시스],24-디엔-21-오산 16-아세테이트, 나트륨 염이다. 이는 20℃에서 물에 부분적으로 가용성인 백색 결정형 분말이다.

작용 기전 및 약리학

푸시드산나트륨은 아미노아실-sRNA로부터 리보솜상의 단백질로 아미노산의 전달을 방해하여 세균성 단백질 합성을 억제한다. 푸시드산나트륨은 접종물 크기에 의존하여 정균작용 또는 살균작용을 지닐 수 있다.

세균성 세포는 시험관내에서 항생제와 접촉후 2 분 이내에 분열이 거의 중지되기는 하나, DNA 및 RNA 합성은 각각 45 분 및 1 내지 2 시간 동안 지속된다. 푸시드산나트륨은 그램 음성균에 대하여 실질적으로 비활성이다. 그램 음성균 및 그램 양성균에 대한 활성의 차이는 세포벽 투과성의 차이로 인한 것으로 판단된다.

포유동물 세포는 민감성 세균성 세포보다 푸시드산나트륨에 의한 단백질 합성의 억제에 대하여 감수성이 훨씬 더 적다. 이러한 차이는 주로 세포벽 투과율의 차이로 인한 것으로 판단된다.

적응증: 푸시드산나트륨은 황색 포도상구균(S. aureus), 연쇄상구균 종 및 씨. 미누티시뭄(C. minutissimum)의 민감성 균주에 의하여 야기되는 1차 및 2차 피부 감염의 치료에 대하여 징후를 나타낸다. 푸시드산나트륨으로 국소 치료에 반응하도록 예상될 수 있는 1차 피부 감염으로는 전염성 농가진, 홍색음선 및 2차 피부 감염, 예컨대 감염된 상처 및 감염된 화상을 들 수 있다.

대부분의 국소 제품은 크림 또는 연고로서 배합된다. 크림은 피부 적용에 사용되는 국소 제제이다. 크림은 API(약학적 활성 성분)가 혼입된 오일 및 물의 혼합물인 반고형 에멀젼이다. 이들은 연속 수성상에 분산된 작은 액적의 오일로 이루어진 수중유(O/W) 크림 및, 연속 유성상에 분산된 작은 액적의 물로 이루어진 유중수(W/O) 크림의 2가지 유형으로 나뉜다. 수중유 크림은 사용하기 쉬워서 덜 미끌거리고 물로 더 쉽게 세정되기 때문에 화장적으로 허용 가능하다. 연고는 다양한 체표면상에 국소 사용되는 API를 포함하는 점성 반고형 제제이다. 연고의 비이클은 연고 베이스로 알려져 있다. 베이스의 선택은 연고의 임상적 징후에 따라 결정되며, 통상적으로 사용되는 다양한 유형의 연고 베이스로는 하기를 들 수 있다:

?탄화수소 베이스, 예를 들면 경질 파라핀, 연질 파라핀

?흡수 베이스, 예를 들면 양모지, 밀랍.

상기 베이스 모두는 그 성질이 유성이며, 미끌거리며, 피부로부터 적용 및 제거가 곤란한 것과 같은 원치않는 효과를 초래한다. 게다가, 이는 또한 의복의 오염을 초래한다. 대부분의 국소 제품은 이의 화장품으로서의 매력으로 인하여 크림 배합물로서 입수 가능하다.

산성 등급의 pH는 1 내지 7이며, 염기 등급의 pH는 7 내지 14이다. 사람 피부의 pH값은 4.5 내지 6이다. 신생아 피부의 pH는 중성(pH 7)에 더 가깝지만, 빠르게 산성으로 변한다. 산성은 세균을 사멸시키므로, 그 성질이 아마도 어린아이의 피부를 보호하기 위하여 설계되었다. 사람이 나이가 듦에 따라, 피부는 점차로 중성이 되어 그 이전만큼의 많은 세균을 사멸시키지 못한다. 이는 피부가 약해지며, 문제를 갖게 되기 때문이다. 사람이 실질적으로 피부 문제가 있거나 피부 질환을 가질 때는 pH값이 6을 넘게 된다. 이는 젊은 사람의 피부에 근접한 pH값을 갖는 국소제를 선택하여야만 한다는 것을 알 수 있다.

알칼리성 pH로의 약간의 이동은 미생물이 자라기에 더 우수한 환경을 제공한다. 대부분의 국소 제품은 크림으로서 입수 가능하다. 크림 배합물중의 활성 화합물은 이온화된 상태로 입수 가능한 반면, 연고의 경우에는 비-이온화된 상태로 존재한다. 일반적으로, 크림 배합물은 국소 투약 제형의 설계 및 개발에서 배합자가 우선 선택해야 하는데, 이는 크림 배합물이 화장품으로서 매력이 있기 때문이며, 또한 활성 화합물이 이온화된 상태로 입수 가능하여야 하며 그리고, 환자에게 매우 편하게 하도록 배합물이 피부층을 신속하게 침투될 수 있어야 하기 때문이다.

본 발명의 항균제인 푸시드산나트륨을 포함하는 키토산 크림의 pH는 약 3 내지 6이다. 반대로, 통상적으로 입수 가능한 연고는 미끌거리며, 화장품으로서 매력이 없다. 게다가, 연고에서의 활성 화합물은 비-이온화된 형태이기 때문에 피부 침투가 느리다.

활성 약물이 최적의 생체-피부 효능을 위하여 피부를 투과하는 것이 필수적이다. 여기서 활성 약물의 입자 크기는 중요한 역할을 한다. 활성 약물은 매우 효과적인 제형이 되는 제품에 대하여 콜로이드성 또는 분자 분산된 상태로 입수 가능한 것이 필요하다. 또한, 이는 피부의 안전한 pH 적합성 환경(4.0 내지 6.0)에서 달성되어야 한다. 이를 달성하기 위하여, 약물의 용해 또는 분산을 위하여 적절한 비이클 또는 공용매를 선택하는 것이 필수적이다. 본 발명의 생성물은 피부 침투를 향상시키는 초미세크기의 콜로이드성 형태로 입수 가능한 활성 성분의 뚜렷한 항균 및 상처 치유 활성으로 인하여 매우 효과적이다.

푸시드산나트륨으로부터 생성된 푸시드산 및 키토산의 병용을 위한 이론적 근거

다양한 국소 치료는 통상적으로 세균성 감염의 치료에 사용된다. 그러나, 피부를 보호하고, 표층 출혈, 상처 및 화상을 조절하기 위한 효과적인 단일 투약 요법은 존재하지 않는다. 이와 같은 수요를 충족하고 모든 국가/사회에서 분산된 인구에 제공 가능하며 그리고 안전한 요법이 되도록 하기 위하여, 피부 회춘 성질을 갖는 생체중합체인 키토산과 푸시드산나트륨의 독특한 병용을 사용한 요법이 신규한 크림으로서 제안되었다.

국소 푸시드산나트륨은 이의 항균제 성질로 인하여 다양한 병인론을 갖는 1차 및 2차 세균성 피부 감염에서의 상당한 효능을 갖는다. 임의의 국소 항균제를 사용한 단일요법의 단점은 효능의 개시가 비교적 느리다는 점이다.

배합물중에서 푸시드산나트륨 및 키토산을 사용함으로써, 항균제 및 키토산 모두의 성질이 최적화된다. 키토산은 막 형성, 생체적합성, 비-알러지성 물질이므로, 차단체로서 작용하여 피부를 보호하는 것을 돕는다. 이는 긁어서 생긴 표층 출혈을 추가로 조절하며, 또한 이의 양이온 하전으로 인하여 병원체의 이동성을 정지시킨다.

푸시드산나트륨 및 키토산의 피부 재생 측면의 성질은 본 발명에 잘 이용되며, 최대 치료 효능은 환자에게 전해져 더 빠른 치유를 돕는다. 이는 환자가 세균성 감염이 있는 화상, 피부 상처의 치료에 이롭다는 것을 확신한다.

배합물에서 키토산의 포함은 피부 병의 치료에서 매우 필수적인 것으로 간주되는 많은 속성을 다룬다. 키토산과 푸시드산나트륨의 병용은 독특하며 그리고 신규한데, 이는 세계적으로 이용 가능하지 않기 때문이다.

병용의 개념은 푸시드산나트륨으로부터 그 자리에서 생성되는 푸시드산과의 병용에 사용되는 키토산의 물리적, 화학적 및 치료적 성질을 고려하여 증명된다.

본 발명의 기타의 진보성 측면

본 발명의 또다른 독창적인 측면은 작용성 부형제를 크림 베이스에 첨가하는 것이 단순한 첨가의 직접적인 과정이 아니라는 점이다. 본 발명자는 크림중에서 작용성 부형제, 예컨대 키토산과 기타의 제제와의 적합성이 중요하다는 것을 발견하였다. 이는 최종 생성물의 안정성을 위태롭게 하는 부적합성 때문이다. 예로서, 본 발명자들은 안정화제로서 다양하게 사용되어온 공지의 부형제, 예컨대 크산탄껌 및 카르보머가 작용성 생체중합체, 예컨대 키토산과의 병용에 사용될 수 없다는 것을 발견하였다.

국소 투약 제형을 위한 부형제로는 중합체, 계면활성제, 왁스 물질 및 유화제 등을 들 수 있다. 중합체는 겔화제, 현탁제, 점도 증강제, 방출 조절제, 희석제 등으로서 사용된다. 계면활성제는 습윤화제, 유화제, 가용화제, 방출 개선제 등으로서 사용된다.

일반적으로 중합체 및 계면활성제는 이온성 하전을 포함할 수 있거나 또는 포함하지 않을 수 있다. 이들은 음이온성, 양이온성 또는 비이온성 성질을 가질 수 있다. 음이온성 부형제가 배합물에 포함되는 경우, 이들은 양이온성 배합 부형제와 상호작용하며, 균질하지 않으며, 미적인 호소력이 없으며, 부적합성으로 인하여 원치않는 부산물, 가능한 알러지항원, 불순물, 독성 물질 등을 야기하는 생성물을 생성한다.

투약은 병을 앓고 있는 환자의 치료를 위한 것이므로, 생성물에서의 이와 같은 부적합성은 받아들여지지 않으며, 이들은 환자에게 더 많은 합병증을 추가하게 된다.

본 발명자들은 배합물을 개발하기 위하여 중합체 및 계면활성제를 비롯한 부형제를 주의하여 분류하였다. 일부의 제시된 부형제를 분류한 후 철저한 연구를 실시하였다. 부형제간의 가능한 상호작용은 많은 병소에 제공하여 구체적인 실험을 실시하였다.

크림 투약 제형에서의 음이온-양이온 상호작용에 관한 일부의 예를 인용하기 위하여, 본 발명자들은 크산탄껌과 키토산, 아크릴산 중합체와 키토산, 라우릴 황산나트륨과 키토산, 도큐세이트 나트륨과 키토산 및 아라비아껌과 키토산을 포함하는 푸시드산나트륨의 일부 배합물을 생성하였다(하기 표 3 내지 표 7 참조). 결과에 의하면, 매우 가시적이며 그리고 전체 계로의 덩어리로서 보이는 상호작용의 발생을 명확하게 나타낸다. 또한, 최종 생성물은 균질성 없이는 미적 호소력이 없다. 첨부한 도 1은 키토산과 부적절한 음이온성 부형제 사이의 상호작용을 명확하게 설명한다. 부형제에 관한 이와 같은 고찰 및 철저한 지식에 기초하여, 본 발명자들은 임의의 가능한 상호작용이 없는 강력한 처방에 도달하였다.

상기 생성물(표 3 내지 7)은 균질한 크림을 생성하지는 않지만, 도 1에 예시한 바와 같은 유형의 불균질한 크림을 생성하는 예이다. 여전히, 이러한 예에서 제시한 비율은 당업자가 통용되는 지식에 기초하여 사용할 수 있는 것이다. 철저하며 그리고 광범위한 시행착오후에만 부형제의 정확한 유형 및 비율에 도달할 수 있다.

상기에서 논의한 바와 같이, 요법에서, 푸시드산은 세균성 감염에 대한 이완을 제공한다. 그러나, 예컨대 피부 보호, 부위에서의 출혈, 한 부위로부터 다른 부위로의 병원체의 이동 등과 같은 측면은 현재까지 푸시드산나트륨으로부터 그 자리에서 생성된 푸시드산을 포함하는 단일 투약 요법에서는 논의되지 않았다.

단일 투약 적용을 사용한 본 발명은 키토산을 혼입하고, (막 형성 성질에 의하여) 피부 보호의 요구되는 잇점을 이용하고, (혈액 응고 성질에 의하여) 출혈을 중지시키고, (이의 양이온성 정전 성질로 인하여) 병원성 미생물의 부동화에 의하여 이러한 부족을 채운다.

크림 매트릭스중의 생체중합체인 키토산의 형태로 작용성 부형제를 혼입한 치료적 가치의 추가는 생체중합체의 하기와 같은 작용적 속성의 통합된 서브세트가 된다:

- 피부 표면상에서의 미세막의 형성;

- 막 형성 생체중합체를 포함하지 않는 크림에 비하여 가속화된 혈액 응고;

- 생체중합체의 양이온 하전으로 인한 표면 미생물의 정전 부동화;

- 심각한 감염에 의한 피부 손상뿐 아니라 상처 및 화상에서의 특정한 도움이 되는 피부 상피화 또는 재생의 상당한 향상.

처방 더마슈티컬 제품에서의 작용성 생체중합체의 혼입으로 인한 플랫폼 기술을 개발시키는 것에 연관된 본 발명의 노력은 하기와 같다:

- 혼입이 전하는 보충 치료적 가치의 확인;

- 생체중합체의 혼입으로부터 발생하는 제품의 물리-화학적 안정성과 관련된 문제점의 확인;

- 세균성 감염이 확인된 곳에 단일 투약 포맷의 제공.

단일 투약 치료의 중요성은 특히 저개발 국가에서 아무리 강조하여도 지나치지 않다. 남아시아 또는 아프리카의 대부분의 지역에서는 피부과 전문의는 커녕 일반의에게의 접근이 없으므로, 단일 투약 배합물은 피부가 재생되도록 하면서 피부 질환의 근본 원인을 배제시킬 기회를 크게 증가시킨다.

피부과 증상중, 현재 이용 가능한 요법은 피부를 보호하고, 출혈을 중지시키는 등의 문제를 논의하지 않는다. 본 발명의 독특하고 획기적인 배합물은 해당 부위에서의 표층 출혈을 조절하면서 치료하여 피부 상태를 관리한다. 표층 출혈이 치료되지 않은채 방치될 경우, 2차 미생물 감염을 초래하는 것으로 알려져 있다. 본 발명은 이러한 충족되지 않은 요구에 대한 해결책을 제공한다.

추가로, 의료 지원 시스템 및 수행 인원 부족/고비용에 대한 압력이 증가함에 따라, 전세계적으로 이러한 경우에서의 하기의 문제점이 역설되고 있다:

- 환자가 치료받기까지의 대기 시간이 너무 긴 점,

- 병원에 도착하였을 때 불필요하게 오래 체류하는 점,

- 환자가 필요한 것보다 더 자주 내원하게 되는 점.

체류 시간을 감소시키는 것은 대부분의 경우에서 맞붙게 되는 핵심 기본 문제이다. 단일 투약 요법을 사용하는 본 발명은 심각한 피부 질환의 총 치료 시간을 크게 단축시킨다.

본 발명의 약용 크림의 세부 사항 및 이의 제조 방법

본 발명의 생성물 및 이의 제조 방법을 설명하는 다양한 실시양태의 형태가 제공된다.

바람직한 실시양태 번호 1: 크림이 크림 베이스에 제공된 항균제, 푸시드산나트륨 및 생체중합체를 포함하며, 상기 크림 베이스는 각각 보존제, 1차 및 2차 유화제, 왁스 물질, 공용매, 산 및 물, 바람직하게는 정제수 중 1종 이상을 포함하는 세균성 피부 감염의 국소 치료 및 관련된 상처 치유를 위한 약용 크림.

실시양태 번호 1: 크림이 완충제, 항산화제, 킬레이트화제, 보습제 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군 중 임의의 것을 더 포함하는 바람직한 실시양태 번호 1에 개시된 바와 같은 약용 크림.

실시양태 번호 2:

- 상기 푸시드산이 약 0.1% w/w 내지 약 25% w/w, 바람직하게는 약 0.5% w/w 내지 약 5% w/w, 더욱 바람직하게는 약 2.00% w/w의 양으로 존재하며, 상기 푸시드산을 그 자리에서 형성하는데 사용되는 상기 푸시드산나트륨의 양이 약 0.1% w/w 내지 약 25% w/w, 바람직하게는 약 0.5% w/w 내지 약 5% w/w, 더욱 바람직하게는 약 2.08% w/w이며,

- 상기 생체중합체는 키토산의 형태로 약 0.01 내지 약 1 중량%, 바람직하게는 약 0.01% w/w 내지 약 0.5% w/w, 가장 바람직하게는 약 0.25% w/w의 양으로 첨가되며,

- 상기 1차 및 2차 유화제는 세토스테아릴 알콜, 세토마크로골-1000, 폴리소르베이트-80, Span-80 등을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 1% w/w 내지 20% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 왁스 물질은 화이트 연질 파라핀, 액체 파라핀, 경질 파라핀 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 5% w/w 내지 30% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 공용매는 프로필렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜-400, 이소프로필 미리스테이트 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 5% w/w 내지 50% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 산은 HCl, H₂SO₄, HNO₃, 락트산 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.005% w/w 내지 0.5% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 보존제는 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로로크레졸, 칼륨 소르베이트, 벤조산 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.05% w/w 내지 0.5% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 물은 20% w/w 내지 75% w/w, 바람직하게는 30% w/w 내지 50% w/w, 더욱 바람직하게는 35% w/w 내지 45% w/w 범위내의 양으로 첨가되며, 바람직하게는 정제수인 바람직한 실시양태 번호 1 및 실시양태 번호 1에서 개시한 바와 같은 신규한 더마슈티컬 크림.

실시양태 번호 3: 오르토인산수소2나트륨, 오르토인산수소나트륨 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.001% w/w 내지 1.00% w/w의 양으로 첨가되는 완충제를 더 포함하는 바람직한 실시양태 번호 1 및 실시양태 2에서 개시한 바와 같은 신규한 약용 크림.

실시양태 번호 4: 부틸화 히드록시 아니솔, 부틸화 히드록시 톨루엔 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.001% w/w 내지 1% w/w의 양으로 첨가된 항산화제를 더 포함하는 바람직한 실시양태 번호 1 및 실시양태 2 및 3에서 개시한 바와 같은 신규한 약용 크림.

실시양태 번호 5: 2나트륨 EDTA 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.05% w/w 내지 1% w/w의 양으로 첨가되는 킬레이트화제를 더 포함하는 바람직한 실시양태 번호 1 및 실시양태 2 내지 4에서 개시한 바와 같은 신규한 약용 크림.

실시양태 번호 6: 글리세린, 소르비톨, 프로필렌 글리콜 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 5% w/w 내지 50% w/w의 양으로 첨가되는 보습제를 더 포함하는 바람직한 실시양태 번호 1 및 실시양태 번호 2 내지 5에서 개시한 바와 같은 신규한 약용 크림.

바람직한 실시양태 2: 본 발명의 바람직한 실시양태는 미정제 API로서 푸시드산나트륨을 사용하고 그리고 푸시드산나트륨을 그 자리에서 푸시드산으로 무산소 환경하에서 크림 베이스중에서 전환시키는 단계를 포함하는 푸시드산 크림의 제조 방법을 개시한다.

실시양태 번호 7: 본 발명의 실시양태에서, 본 발명의 조성물의 제조 방법은 바람직한 실시양태 번호 2의 푸시드산나트륨을 그 자리에서 푸시드산으로 전환시키는 단계가 하기 단계를 포함한다:

a. 정제수를 20% w/w 내지 75% w/w, 바람직하게는 30% w/w 내지 50% w/w, 더욱 바람직하게는 35% w/w 내지 45% w/w 범위내로 수성상 용기중에서 70℃ 내지 80℃로 가열하는 단계;

b. 수성상 용기에 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로로크레졸, 칼륨 소르베이트, 벤조산 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 보존제, 더욱 바람직하게는 벤조산을 0.05% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.2% w/w의 양으로 첨가하는 단계;

c. 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합물의 온도를 70℃ 내지 80℃에서 유지하면서 혼합물을 혼합하는 단계;

d. 화이트 연질 파라핀, 액체 파라핀, 경질 파라핀 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 왁스 물질을 5% w/w 내지 20% w/w, 바람직하게는 15% w/w, 더욱 바람직하게는 12.5% w/w의 양으로 유성상 용기에 첨가하고 그리고 상기 왁스를 70℃ 내지 80℃로 가열하여 용융시키는 단계;

e. 1% w/w 내지 15% w/w, 바람직하게는 15% w/w, 더욱 바람직하게는 12.5% w/w의 양으로 세토스테아릴 알콜, 세토마크로골-1000의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 세토스테아릴 알콜인 바람직하게는 비이온성 계면활성제의 형태의 1차 유화제 그리고 임의로 1 내지 5% w/w, 더욱 바람직하게는 2% w/w의 양으로 폴리소르베이트-80, Span-80 등을 포함하는 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 폴리소르베이트-80인 2차 유화제를 상기 유성상 용기에 첨가하고 그리고, 혼합물을 완전하게, 바람직하게는 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합물의 온도를 70℃ 내지 80℃에서 유지하면서 혼합하는 단계;

f. -1,000 내지 -300 mmHg 범위내의 진공하에서, 70℃ 내지 80℃에서 수성상 및 유성상 용기의 내용물을 혼합 용기로 옮기고, 혼합물 완전하게, 바람직하게는 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합하여 에멀젼을 형성하는 단계;

g. 혼합 용기의 잭킷내에서 냉각탑으로부터 냉각수를 바람직하게는 8℃ 내지 15℃에서 순환시켜 상기 에멀젼을 45℃로 냉각시키는 단계;

h. API-용기내에서 프로필렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜-400 등을 포함하는 군으로부터 선택된. 단독 또는 이의 임의의 조합의 공용매, 바람직하게는 프로필렌 글리콜을 5% w/w 내지 40% w/w, 바람직하게는 30% w/w, 더욱 바람직하게는 25% w/w의 양으로 첨가하고, 상기 API-용기의 내용물을 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하고, 푸시드산나트륨을 0.1% w/w 내지 약 25% w/w, 바람직하게는 약 0.5% w/w 내지 약 5% w/w, 더욱 바람직하게는 약 2.08% w/w의 양으로 첨가하고, 상기 푸시드산나트륨을 혼합물에 용해시키는 단계;

i. 산, 예컨대 HCl, H₂SO₄, HN0₃, 락트산 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 산, 바람직하게는 질산을 약 0.005% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.25% w/w의 양으로 사용하여 단계 h의 API-용기내의 혼합물의 pH를 2 미만으로 조절하는 단계;

j. 단계 i의 API-용기내의 내용물을 10 내지 50 RPM에서 연속 교반하면서 단계 g의 혼합 용기로 옮기고, 혼합물을 1,000 내지 3,000 RPM에서 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하에 -1,000 내지 -300 mmHg의 진공하에서 균질화시키는 단계;

k. 별도의 용기내에서 약 0.005% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.1% w/w의 양으로 산, 예컨대 HCl, H₂SO₄, HNO₃, 락트산 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 산, 바람직하게는 락트산 및 약 0.1% w/w 내지 10% w/w, 바람직하게는 8% w/w, 더욱 바람직하게는 5% w/w의 정제수를 첨가하여 혼합물을 형성하고, 상기 생체중합체인 키토산을 약 0.01% w/w 내지 약 1% w/w, 바람직하게는 약 0.01% w/w 내지 약 0.5% w/w, 가장 바람직하게는 약 0.25% w/w의 양으로 용해시키는 단계;

l. 단계 k의 생체중합체 혼합물의 내용물을 10 내지 50 RPM에서 연속 교반하면서 단계 g의 혼합 용기로 옮기고, 혼합물을 1,000 내지 3,000 RPM에서 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하에 -1,000 내지 -300 mmHg의 진공하에서 균질화시키는 단계;

m. 냉각탑으로부터의 냉각수를 8℃ 내지 15℃에서 혼합 용기의 잭킷으로 순환을 사용하여 혼합 용기의 내용물을 30℃ 내지 37℃로 냉각시키는 단계;

n. 교반기 및 균질화기를 끄고, 단계 m의 혼합 용기의 혼합물을 저장 컨테이너로 꺼내는 단계.

실시양태 번호 8: 본 발명의 실시양태에서, 상기 실시양태 번호 7의 단계 h의 공용매는 또한 보습제로서도 작용한다. 그러나, 본 발명의 또다른 실시양태에서, 글리세린, 소르비톨, 프로필렌 글리콜 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 추가의 보습제를 약 5% w/w 내지 40% w/w, 바람직하게는 30% w/w, 더욱 바람직하게는 25% w/w를 형성하도록 첨가될 수 있다.

실시양태 번호 9: 본 발명의 또다른 실시양태에서, 실시양태 번호 8에 기재된 방법은 추가로 2나트륨 EDTA 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 킬레이트화제를 약 0.01% w/w 내지 1% w/w, 바람직하게는 0.5% w/w, 더욱 바람직하게는 0.1% w/w를 형성하도록 첨가하는 것을 포함한다.

실시양태 번호 10: 본 발명의 또다른 실시양태에서, 실시양태 번호 8 및 9에 기재된 방법은 추가로 오르토인산수소2나트륨, 오르토인산수소나트륨 등을 포함하는 군으로부터 선택된 완충제를 약 0.001% w/w 내지 1.00% w/w, 바람직하게는 0.05% w/w, 더욱 바람직하게는 0.5% w/w로 첨가한다.

실시양태 번호 11: 본 발명의 추가의 실시양태에서, 실시양태 번호 8 내지 10에 기재된 방법은 추가로 부틸화 히드록시 아니솔, 부틸화 히드록시 톨루엔 등을 포함하는 군으로부터 선택되는 항산화제를 약 0.001% w/w 내지 5% w/w, 바람직하게는 0.1% w/w, 더욱 바람직하게는 0.01% w/w로 첨가한다.

실시양태 번호 12: 바람직한 실시양태에 관하여 조성물의 또다른 제조 방법에서, 상기 방법은

a. 20% w/w 내지 75% w/w, 바람직하게는 30% w/w 내지 50% w/w, 더욱 바람직하게는 35% w/w 내지 45% w/w 범위내의 정제수를 수성상 용기중에서 70℃ 내지 80℃로 가열하는 단계;

b. 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로로크레졸, 칼륨 소르베이트, 벤조산 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 보존제, 더욱 바람직하게는 벤조산을 0.05% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.2% w/w의 양으로 상기 수성상 용기에 첨가하는 단계;

c. 2나트륨 EDTA 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 킬레이트화제를 0.01% w/w 내지 1% w/w, 바람직하게는 0.5% w/w, 더욱 바람직하게는 0.1% w/w의 양으로 단계 b의 수성상 용기에 첨가하는 단계;

d. 오르토인산수소2나트륨, 오르토인산수소나트륨 등을 포함하는 군으로부터 선택된 완충제를 0.001% w/w 내지 1.00% w/w, 바람직하게는 0.05% w/w, 더욱 바람직하게는 0.5% w/w의 양으로 단계 c의 수성상 용기에 첨가하는 단계;

e. 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합물의 온도를 70℃ 내지 80℃에서 유지하면서 단계 d의 혼합물을 혼합하는 단계;

f. 화이트 연질 파라핀, 액체 파라핀, 경질 파라핀 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 왁스 물질을 5% w/w 내지 20% w/w, 바람직하게는 15% w/w, 더욱 바람직하게는 12.5% w/w의 양으로 유성상 용기에 첨가하고, 상기 왁스를 70℃ 내지 80℃로 가열하여 용융시키는 단계;

g. 1% w/w 내지 15% w/w, 바람직하게는 15% w/w, 더욱 바람직하게는 12.5% w/w의 양으로 세토스테아릴 알콜, 세토마크로골-1000의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 세토스테아릴 알콜이며, 바람직하게는 비이온성 계면활성제의 형태의 1차 유화제 및 임의로 1 내지 5% w/w, 더욱 바람직하게는 2% w/w의 양으로 폴리소르베이트-80, Span-80 등을 포함하는 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 폴리소르베이트-80인 2차 유화제를 단계 f의 상기 유성상 용기에 첨가하고 그리고, 혼합물의 온도를 75℃±5℃에서 유지하면서 혼합물을 완전하게, 바람직하게는 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합하는 단계;

h. -1,000 내지 -300 mmHg 범위내의 진공하에서, 75℃±5℃에서 상기 수성상 및 유성상 용기의 내용물을 혼합 용기로 옮기고 그리고, 혼합물을 완전하게, 바람직하게는 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합하여 에멀젼을 형성하는 단계;

i. 바람직하게는 냉각수를 사용하여, 바람직하게는 혼합 용기의 잭킷내의 냉각탑으로부터 8℃ 내지 15℃에서 순환시켜 상기 에멀젼을 45℃로 냉각시키는 단계,

j. API-용기내에서 프로필렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜-400 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 공용매, 바람직하게는 프로필렌 글리콜을 5% w/w 내지 40% w/w, 바람직하게는 30% w/w, 더욱 바람직하게는 25% w/w의 양으로 첨가하고, 부틸화 히드록시 아니솔, 부틸화 히드록시 톨루엔 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 항산화제, 바람직하게는 부틸화 히드록시 톨루엔을 0.001% w/w 내지 5% w/w, 바람직하게는 0.1% w/w, 더욱 바람직하게는 0.01% w/w의 양으로 상기 글리콜에 연속 혼합에 의하여 용해시키는 단계;

k. 상기 API-용기의 내용물을 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하고, 푸시드산나트륨을 0.1% w/w 내지 약 25% w/w, 바람직하게는 약 0.5% w/w 내지 약 5% w/w, 더욱 바람직하게는 약 2.08% w/w의 양으로 첨가하고, 상기 푸시드산나트륨을 혼합물에 용해시키는 단계;

l. 산, 예컨대 HCl, H₂SO₄, HNO₃, 락트산 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 산, 바람직하게는 질산을 0.005% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.25% w/w의 양으로 사용하여 단계 k의 API-용기내의 혼합물의 pH를 2 미만으로 조절하는 단계;

m. 단계 l의 API-용기의 내용물을 단계 i의 혼합 용기로 10 내지 50 RPM에서 연속 교반하면서 옮기고, 혼합물을 1,000 내지 3,000 RPM에서 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하에 -1,000 내지 -300 mmHg의 진공하에서 균질화시키는 단계;

n. 별도의 용기내에서 약 0.005% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.1% w/w을 형성하도록 산, 예컨대 HCl, H₂SO₄, HNO₃, 락트산 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택된 산, 바람직하게는 락트산 및, 약 0.1% w/w 내지 10% w/w, 바람직하게는 8% w/w, 더욱 바람직하게는 5% w/w의 정제수를 첨가하여 혼합물을 형성하고, 상기 생체중합체인 키토산을 약 0.01% 내지 약 1 중량%, 바람직하게는 약 0.01% w/w 내지 약 0.5% w/w, 가장 바람직하게는 약 0.25% w/w의 양으로 용해시키는 단계;

o. 단계 n의 생체중합체 혼합물의 내용물을 단계 i의 혼합 용기로 10 내지 50 RPM에서 연속 교반하면서 옮기고, 혼합물을 1,000 내지 3,000 RPM에서 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하에 -1,000 내지 -300 mmHg의 진공하에서 균질화시키는 단계;

p. 냉각탑으로부터의 냉각수를 8℃ 내지 15℃에서 혼합 용기의 잭킷으로의 순환을 사용하여 단계 o의 혼합 용기의 내용물을 30℃ 내지 37℃로 냉각시키는 단계;

q. 교반기 및 균질화기를 끄고, 단계 n의 혼합 용기의 혼합물을 저장 컨테이너로 꺼내는 단계를 포함한다.

단계 j의 공용매는 또한 보습제로도 작용한다. 그러나, 본 발명의 실시양태에서, 추가의 보습제는 글리세린, 소르비톨, 프로필렌 글리콜 등의 단독 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되어 약 5% w/w 내지 40% w/w, 바람직하게는 30% w/w, 더욱 바람직하게는 25% w/w를 형성하도록 첨가될 수 있다.

본 발명의 방법을 사용하여 얻은 크림은 균질하며, 색상은 백색 내지는 회백색이며, 점조도는 점성이다. 본 발명의 방법을 사용하여 생성된 생성물의 pH는 약 3 내지 6이다. 반면, 시판중인 푸시드산나트륨 연고는 미끌거리며, 미용적으로 훌륭하지 않다.

활성 약물은 최적의 생체피부 효능을 위하여 피부를 투과하는 것이 필수적이다. 여기서 활성 약물의 입자 크기는 중요한 역할을 한다. 활성 약물은 효과적인 생성물에 대하여 미세 분산된 형태로 입수 가능한 것이 필수적이다. 또한, 피부의 안전한 pH 적합성 환경(4.0 내지 6.0)에서 달성되도록 하고자 한다. 이들 모두를 달성하기 위하여, 약물의 용해 또는 분산을 위하여 적절한 비이클 또는 공용매를 선택하는 것이 필수적이다.

입자 크기 분석은 본 발명의 방법을 사용하여 생성된 크림 및 일부 시판중인 제품 샘플(샘플 A, C, D, F, G 및 K)에 실시하였다. 최대 및 최소 입자 크기, 평균 입자 크기 및 표준 편차 및 변동 계수를 평가하였다.

표 8에 기재한 입자 크기 분포 분석 결과는 본 발명의 생성물에서의 미세 입자 크기를 갖는 푸시드산의 존재를 명백하게 나타내며, 이의 크기는 통상의 제품에 비하여 훨씬 감소된 것이 이롭다. 이는 본 발명의 생성물이 푸시드산나트륨을 사용하여 푸시드산나트륨을 푸시드산으로 미세 분산된 형태로 그 자리에서 전환시키는 것을 이용하여 생성된다는 사실에 기인한 것이다. 측정된 변수 모두는 푸시드산을 포함하는 시판중인 크림에서 발견되는 것보다 더 우수하다. 이는 시판중인 제품에 비하여 본 명세서에서 개시된 생성물의 또다른 뚜렷한 잇점이 된다.

본 발명의 생성물은 통상의 제품보다 입자 크기가 감소되고 그리고 미세 분산된 형태로 얻을 수 있는 재생된 푸시드산의 뚜렷한 항균 활성으로 인하여 효과적이다.

본 발명자들은 각종 공용매, 예컨대 프로필렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 폴리에틸렌글리콜-400 등을 분류하였으며, 약 5% w/w 내지 40% w/w에서 변경되는 상기 공용매중 하나에서 불활성 기체 퍼징 하에서 진공하에서 푸시드산나트륨을 용해시키고, 산, 예컨대 HCl, H₂SO₄, HNO₃, 락트산 등을 약 0.005% w/w 내지 약 0.5% w/w로 교반하에 첨가하여 푸시드산으로 그 자리에서 전환시키고, 더욱 안정화된 용액의 형태로 푸시드산을 얻으며, 이는 크림 베이스중의 최종 생성물이 피부를 용이하게 그리고 매우 효과적으로 투과하며, 또한 약 3.0 내지 약 6.0의 pH에 의하여 피부 적합성이 크도록 한다.

생성물의 안정성은 ICH 가이드라인 및, 인-하우스(in-house) 생성물에 대하여 실시한 스트레스 실험과 시판중인 필적하는 생성물의 샘플의 비교에 의하여 6 개월 동인 실시한 안정성 실험에 의하여 확인하였다.

실험 데이타:

API-안정성 실험은 본 발명의 생성물 및 시판중인 제품을 사용하여 실시하였다(하기 표 10 내지 표 15 참조). 제품의 물리적 외관, pH 값 및 API의 분석을 시간 경과에 대하여 관찰(또는 적절하게는 측정)하여 테스트를 실시하였다. 또한, 테스트는 생성물을 오토클레이브 테스트 및 산화 분해 테스트와 같은 스트레스 실험을 실시하여 안정성을 평가하도록 실시하였다. 추가로, 혈액 응고 실험 및 화상 상처 치유 실험과 같은 및 임상전 실험 및 억제 실험의 시험관내 항균 구역은 시간 경과에 따라 실시하였다. 테스트에 사용한 본 발명의 생성물 각각의 g은 최종 생성물중 약 2% w/w 푸시드산을 생성하는데 필요한 양으로 출발 미정제 물질로서 푸시드산나트륨을 포함한다.

안정성 실험, 오토클레이브 및 산화 분해 테스트에 사용된 생성물은 약 10% 여분의 API(과다량)를 포함한다. 실험에 사용된 본 발명의 생성물은 출발 물질로서 푸시드산나트륨을 사용하여 생성된 푸시드산 크림을 포함한다. 이는 알루미늄 압출 튜브에 포장하였으며, 생성물 각 1 g은 20 ㎎의 푸시드산(BP에 따름)에 해당하는 20.8 ㎎의 푸시드산나트륨(BP에 따름)을 포함한다. 시판중인 제품(푸시드산 크림)에 대한 분석의 세부 사항은 적절하게는 하기 표 14 및 표 15에 제시한다.

하기 표 10 내지 표 12로부터는 pH 값, 물리적 외관 및 안정성의 모든 점에서 본 발명의 생성물은 매우 우수하다는 것이 명백하다.

하기 표 13에는 푸시드산의 시판중인 크림으로부터 취하고 분석에 사용한 샘플 A 내지 샘플 I에 대한 기준일자를 제시한다.

본 발명은 조성 및 안정성 실험 데이타를 포함하는 하기의 실시예를 참조하여 추가로 설명될 것이지만, 이는 어떠한 방식으로도 본 발명을 한정하여서는 안된다. 최종 크림의 조성은 하기 표 9에 제시한다.

실시예

제품: 푸시드산나트륨 크림

포장: 알루미늄 압출 튜브

조성: 각각의 g에 대하여: 푸시드산 BP 2%에 해당하는 푸시드산나트륨 BP

표 14로부터의 추론: 오토클레이브 분석(121℃, 15 분 동안 적용함)의 분석 결과는 푸시드산 크림의 시판중인 샘플(샘플 번호 2-10)의 API 함유량의 감소율이 본 발명의 생성물(샘플 번호 1)보다 더 크다는 것을 알 수 있다.

표 15로부터의 추론: 산화 분해 분석(12 시간에 걸친 30% 과산화수소 용액)의 상기 분석 결과에 의하면, 푸시드산 크림의 다양한 시판 샘플(샘플 번호 2-10)의 API 분해율이 본 발명의 생성물(샘플 번호 1)보다 더 크다는 것을 알 수 있다.

상기 데이타로부터, 본 발명의 생성물은 주위 조건하에서 그리고 또한 저장의 고온 그리고 습한 조건에서 꽤 안정하다는 것이 명백하다. 또한, 오토클레이브 실험 및 산화 분해 실험은 생성물의 안정성을 추가로 확인하였다. 이는 시판중인 푸시드산 크림보다 잇점이 더 크다. 생성물의 안정성은 Nova-LIMS 소프트웨어를 사용한 분해의 아레니우스 도표를 사용하여 배합물의 저장 수명 예측에 의하여 추가로 확인된다.

생성물의 항미생물/항균 활성은 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus)에 대한 생성물의 억제 실험의 시험관내 항균 구역 실험에 의하여 확인하였다. 실험의 세부사항은 하기 표 16에 제시하였다.

상기 데이타로부터, 생성물은 1차 및 2차 세균성 감염을 치료하기 위하여 적절한 항미생물/항균 활성을 갖는다는 것이 명백하다.

표 9와 표 3 내지 표 7의 비교는 생성물에서의 차이가 통상의 약물 설계 및 본 발명에서 채택한 혁신적인 접근법에 기초한 것이라는 것을 입증할 것이다.

크림의 적용 방법

크림은 병소 부위를 완전하게 세정 및 건조시킨 후 적용하였다. 충분한 크림을 적용하여 병소가 생긴 피부 및 그 주위 부위에 적용되도록 하여야 한다. 크림은 징후가 개선되더라도 전체 치료 기간 동안 피부 상태에 따라 1일 2-4회 적용하여야 한다.

실험:

실험은 절제 상처가 있는 적절한 동물 모델을 사용할 뿐 아니라 실험실에서 크림을 사용하여 실시하였다. 4가지의 측면-상처 수축, 상피화, 혈액 응고 시간 및 막 형성-에 대하여 테스트하였다. 이들 측면은 함께 미생물이 부동화되어 효과적인 상처 치유를 초래한다는 것을 시사한다.

A. 상처 수축:

본 발명의 크림의 절제 상처 치유 활성은 동물 테스트로 측정하였다. 피부의 전체 두께를 절단해 내어 직경이 2.5 ㎝인 절제 상처가 생기도록 하였다. 일정 시간에 걸쳐 관찰된 상처의 수축량은 본 발명의 크림이 종래의 크림의 적용에 의하여 얻은 상처 수축보다 크게 개선된 것으로 관찰되었다.

B. 상피화 시간:

상처의 상피화는 종래의 크림을 사용한 상피화에 소요되는 일수에 비하여 본 발명의 크림을 사용한 일수가 더 짧게 발생하였다. 그러므로, 본 발명의 크림의 한 잇점은 종래의 크림의 사용에 의하여서보다 피부의 상피화가 더 빠르게 촉진되었다는 점이다.

C. 혈액 응고:

혈액 응고 시간은 미처치 대조군 및 본 발명의 생성물로 처치한 동물의 테스트군인 2가지 군에서 관찰하였다. 대조군 동물과 비교시 처치한 동물군에서의 혈액 응고 시간에서의 통계학상 유의적인 감소가 관찰되었다. 본 발명의 생성물을 사용한 혈액 응고 시간에 대하여 35-45%의 평균 감소율이 관찰되었다.

막 형성 성질:

도 1에 의하면, 키토산은 본 발명의 크림 제제에 사용된 부형제의 존재하에서 막 형성 성질을 상실하지 않음이 명백하다.

결과 및 토의

본 발명에 사용된 부형제를 포함하는 배합물에 사용될 경우 키토산의 성질은 어떠한 방식으로도 손실되지 않음이 명백하다. 이는 부형제를 주의하여 선택하여 달성된다. 예를 들면, 본 발명자의 실험에 의하면, 광범위하게 사용된 부형제, 예컨대 크산탄껌 또는 카르보머는 양이온성, 음이온성 상호작용으로 인하여 키토산과 병용시 침전되는 것으로 밝혀졌다.

동물 테스트로부터 관찰되는 바와 같이, 키토산을 푸시드산나트륨 항균제에 첨가한 치료적 효과는 손상된 피부 상태의 치료적 치유의 다양한 측면을 고려하여 하기 표에 제시하였다.

상처 치유 실험은 본 발명의 크림을 사용하여 동물에 실시하였다. 결과를 표 18에 제시하였다.

크림에 혼입된 키토산의 막 형성 능력은 감염된 부위에 항균제인 푸시드산나트륨의 더 우수한 접근을 가능케 하며, 그리하여 API가 더 우수하게 작용한다는 것이 명백하다.

본 발명의 국소 적용된 크림의 치료적 효능은 피부 감염의 원인인 균에 대한 푸시드산나트륨의 상당한 항균 활성, 무상해 피부를 투과하는 활성 물질의 독특한 성질 및 키토산의 상처 치유 및 진정 성질로 인한 것이다.

표 18로부터는 본 발명의 크림의 통계적으로 유의적인 수준의 상피화를 달성하는 성질뿐 아니라, 상처 수축이 종래의 요법에 비하여 놀랍게도 더 크다는 것이 명백하다.

상기의 논의로부터, 본 발명은 피부의 세균성 감염 및 상처 치유에 대하여 종래의 더마슈티컬 조성물에 비하여 하기와 같은 잇점 및 독특한 측면을 제공함이 명백하다.

1. 본 발명의 크림은 피부 친화적인 생체중합체를 키토산 형태로 혼입시켜 개선된 치료적 결과를 제공한다. 이는 감소된 혈액 응고 시간, 증가된 상피 효과 및 감염 및 염증 및 상처 수축으로부터의 더 신속한 이완으로부터 명백하다.

2. 본 발명의 크림은 크림 매트릭스의 안정화를 상실하지 않으면서 그리고 공지의 약학적 활성 성분의 작용에 유해한 영향을 미치지 않으면서 생체중합체를 혼입한다. 이는 물리-화학적 적합성/안정성 및 생체방출의 바람직하지 못한 측면을 피하도록 작용성 부형제를 주의하여 선택하여 달성된다.

3. 본 발명의 크림은 처방 더마슈티컬 배합물에서 이제까지 얻을 수 없었던 통합된 단일 투여 또는 단일-투약 요법을 제공한다.

4. 본 발명의 신규한 크림은 주위 조건하에서 적절하게 안정하며/효과적이고, 수송/저장중에 특수한 온도 조절을 필요로 하지 않으므로, 이와 같은 사회적 목적에 도움이 된다.

본 발명의 또다른 실시양태에 의하면, 사람 피부를 상기 개시한 조성물과 접촉시키는 것을 포함하여 세균성 피부 감염의 치료 및 상처 치유 방법을 제공한다.

상기 설명이 다수의 구체성을 포함하기는 하나, 이는 본 발명의 범위에서의 한정으로서 이해하여서는 아니되며, 그보다는 본 발명의 바람직한 실시양태의 예시로서 이해하여야 한다. 상기 제시된 개시에 기초하여 변형예 및 수정예는 본 발명의 정신 및 범위로부터 벗어남이 없이 가능한 것으로 인식하여야 한다. 따라서, 본 발명은 예시된 실시양태에 의하여서가 아니라 하기 첨부한 특허청구범위 및 이의 법적 등가물에 의하여 결정되어야한다.

Claims

세균성 감염의 국소 치료 및 상처 치유를 위한 약용 크림으로서, 상기 크림은 푸시드산 및 생체중합체, 바람직하게는 키토산을 포함하며, 상기 푸시드산은 푸시드산나트륨을 사용하여 무산소 환경하에서 그 자리에서(in situ) 생성되며, 상기 크림은 푸시드산나트륨의 전환에 의하여 그 자리에서 생성된 푸시드산 및 크림 베이스에 제공된 생체중합체를 포함하며, 상기 크림 베이스는 각각 1차 및 2차 유화제, 왁스 물질, 공용매, 산 및 물 중 1종 이상을 포함하는 약용 크림.
제1항에 있어서, 상기 크림 베이스가 물, 바람직하게는 정제수와 함께 보존제, 산, 공용매, 유화제 및 왁스 물질을 포함하는 약용 크림.
제1항에 있어서,
- 상기 푸시드산이 약 0.1% w/w 내지 약 25% w/w, 바람직하게는 약 0.5% w/w 내지 약 5% w/w, 더욱 바람직하게는 약 2.00% w/w의 양으로 존재하며, 상기 푸시드산을 그 자리에서 형성하는데 사용되는 상기 푸시드산나트륨의 양이 약 0.1% w/w 내지 약 25% w/w, 바람직하게는 약 0.5% w/w 내지 약 5% w/w, 더욱 바람직하게는 약 2.08% w/w이며,
- 상기 생체중합체는 키토산의 형태이며, 약 0.01% w/w 내지 약 1% w/w, 바람직하게는 약 0.01% w/w 내지 약 0.5% w/w, 가장 바람직하게는 약 0.25% w/w의 양으로 첨가되며,
- 상기 1차 및 2차 유화제는 세토스테아릴 알콜, 세토마크로골-1000, 폴리소르베이트-80, Span-80 등을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 1% w/w 내지 20% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 왁스 물질은 화이트 연질 파라핀, 액체 파라핀, 경질 파라핀 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 5% w/w 내지 30% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 공용매는 프로필렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜-400, 이소프로필 미리스테이트 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 5% w/w 내지 50% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 산은 HCl, H₂SO₄, HNO₃, 락트산 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.005% w/w 내지 0.5% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 보존제는 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로로크레졸, 칼륨 소르베이트, 벤조산 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.05% w/w 내지 0.5% w/w의 양으로 첨가되며; 상기 물은 20% w/w 내지 75% w/w, 바람직하게는 30% w/w 내지 50% w/w, 더욱 바람직하게는 35% w/w 내지 45% w/w 범위내의 양으로 첨가되며, 바람직하게는 정제수인 신규한 더마슈티컬 크림.
제1항 또는 제3항에 있어서, 오르토인산수소2나트륨, 오르토인산수소나트륨 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.001% w/w 내지 1.00% w/w의 양으로 첨가되는 완충제를 더 포함하는 신규한 약용 크림.
제1항, 제3항 또는 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 부틸화 히드록시 아니솔, 부틸화 히드록시 톨루엔 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.001% w/w 내지 1% w/w의 양으로 첨가되는 항산화제를 더 포함하는 신규한 약용 크림.
제1항 또는 제3항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 2나트륨 EDTA 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 0.05% w/w 내지 1% w/w의 양으로 첨가되는 킬레이트화제를 더 포함하는 신규한 약용 크림.
제1항 또는 제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 글리세린, 소르비톨, 프로필렌 글리콜 등 또는 이의 임의의 조합을 포함하는 군으로부터 선택되며, 약 5% w/w 내지 50% w/w의 양으로 첨가되는 보습제를 더 포함하는 신규한 약용 크림.
미정제 약학적 활성 성분으로서 푸시드산나트륨을 사용하고, 크림 베이스중에서 무산소 환경하에 상기 푸시드산나트륨을 그 자리에서 푸시드산으로 전환시키는 단계를 포함하는 푸시드산 크림의 제조 방법.
제8항에 있어서, 미정제 약학적 활성 성분으로서 푸시드산나트륨을 사용하고, 크림 베이스중에서 무산소 환경하에 상기 푸시드산나트륨을 그 자리에서 푸시드산으로 전환시키는 단계는
a. 수성상 용기 내에서 20% w/w 내지 75% w/w, 바람직하게는 30% w/w 내지 50% w/w, 더욱 바람직하게는 35% w/w 내지 45% w/w 범위의 정제수를 70℃ 내지 80℃로 가열하는 단계;
b. 상기 수성상 용기에, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로로크레졸, 칼륨 소르베이트, 벤조산 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 보존제, 더욱 바람직하게는 벤조산을 0.05% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.2% w/w의 양으로 첨가하는 단계;
c. 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합물의 온도를 70℃ 내지 80℃에서 유지하면서 혼합물을 혼합하는 단계;
d. 유성상 용기에, 화이트 연질 파라핀, 액체 파라핀, 경질 파라핀 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 왁스 물질을 5% w/w 내지 20% w/w, 바람직하게는 15% w/w, 더욱 바람직하게는 12.5% w/w의 양으로 첨가하고, 상기 왁스를 70℃ 내지 80℃로 가열하여 용융시키는 단계;
e. 상기 유성상 용기에, 1% w/w 내지 15% w/w, 바람직하게는 15% w/w, 더욱 바람직하게는 12.5% w/w의 양으로 세토스테아릴 알콜, 세토마크로골-1000을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 1차 유화제, 바람직하게는 비이온성 계면활성제 형태의 1차 유화제, 바람직하게는 세토스테아릴 알콜과, 임의로 1 내지 5% w/w, 더욱 바람직하게는 2% w/w의 양으로 폴리소르베이트-80, Span-80 등을 포함하는 군으로부터 선택된 2차 유화제, 바람직하게는 폴리소르베이트-80을 첨가하고, 혼합물을 완전하게, 바람직하게는 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합물의 온도를 70℃ 내지 80℃에서 유지하면서 혼합하는 단계;
f. -1,000 내지 -300 mmHg 범위내의 진공하에, 70℃ 내지 80℃에서 수성상 및 유성상 용기의 내용물을 혼합 용기로 옮기고, 혼합물 완전하게, 바람직하게는 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합하여 에멀젼을 형성하는 단계;
g. 바람직하게는 혼합 용기의 잭킷내에서 냉각탑으로부터 냉각수를 바람직하게는 8℃ 내지 15℃에서 순환시켜 상기 에멀젼을 45℃로 냉각시키는 단계;
h. API-용기내에서, 프로필렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜-400 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 공용매, 바람직하게는 프로필렌 글리콜을 5% w/w 내지 40% w/w, 바람직하게는 30% w/w, 더욱 바람직하게는 25% w/w의 양으로 첨가하고, 상기 API-용기의 내용물을 불활성 기체 플러싱하고, 상기 불활성 기체는 바람직하게는 질소이고; 푸시드산나트륨을 0.1% w/w 내지 약 25% w/w, 바람직하게는 약 0.5% w/w 내지 약 5% w/w, 더욱 바람직하게는 약 2.08% w/w의 양으로 첨가하고, 상기 푸시드산나트륨을 혼합물에 용해시키는 단계;
i. HCl, H₂SO₄, HN0₃, 락트산 등과 같은 산을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 산, 바람직하게는 질산을 약 0.005% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.25% w/w의 양으로 사용하여 단계 h의 API-용기내의 혼합물의 pH를 2 미만으로 조절하는 단계;
j. 단계 i의 API-용기내의 내용물을 10 내지 50 RPM에서 연속 교반하면서 단계 g의 혼합 용기로 옮기고, 혼합물을 1,000 내지 3,000 RPM에서 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하에 -1,000 내지 -300 mmHg의 진공하에서 균질화시키는 단계;
k. 별도의 용기내에서, 약 0.005% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.1% w/w의 HCl, H₂SO₄, HNO₃, 락트산 등과 같은 산을 포함하는 군에서 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 산, 바람직하게는 락트산 및 약 0.1% w/w 내지 10% w/w, 바람직하게는 8% w/w, 더욱 바람직하게는 5% w/w의 정제수를 첨가하여 혼합물을 형성하고, 상기 생체중합체인 키토산을 약 0.01% w/w 내지 약 1% w/w, 바람직하게는 약 0.01% w/w 내지 약 0.5% w/w, 가장 바람직하게는 약 0.25% w/w의 양으로 용해시키는 단계;
l. 단계 k의 생체중합체 혼합물의 내용물을 10 내지 50 RPM에서 연속 교반하면서 단계 g의 혼합 용기로 옮기고, 혼합물을 1,000 내지 3,000 RPM에서 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하에 -1,000 내지 -300 mmHg의 진공하에서 균질화시키는 단계;
m. 8℃ 내지 15℃에서 냉각탑으로부터 혼합 용기의 잭킷으로 냉각수의 순환을 사용하여 단계 j의 혼합 용기의 내용물을 30℃ 내지 37℃로 냉각시키는 단계;
n. 교반기 및 균질화기를 끄고, 단계 m의 혼합 용기의 혼합물을 저장 컨테이너로 분리하는 단계를 포함하는 제조 방법.
제9항에 있어서, 추가로 글리세린, 소르비톨, 프로필렌 글리콜 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 보습제를 제9항의 단계 a의 혼합 용기에 약 5% w/w 내지 40% w/w, 바람직하게는 30% w/w, 더욱 바람직하게는 25% w/w를 형성하도록 첨가하는 제조 방법.
제9항 또는 제10항에 있어서, 추가로 2나트륨 EDTA 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 킬레이트화제를 제10항의 단계 a에 약 0.01% w/w 내지 1% w/w, 바람직하게는 0.5% w/w, 더욱 바람직하게는 0.1% w/w를 형성하도록 첨가하는 제조 방법.
제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 추가로 오르토인산수소2나트륨, 오르토인산수소나트륨 등을 포함하는 군으로부터 선택된 완충제를 제10항의 단계 a에 약 0.001% w/w 내지 1.00% w/w, 바람직하게는 0.05% w/w, 더욱 바람직하게는 0.5% w/w로 첨가하는 제조 방법.
제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 추가로 부틸화 히드록시 아니솔, 부틸화 히드록시 톨루엔 등을 포함하는 군으로부터 선택되는 항산화제를 제10항의 단계 h에 약 0.001% w/w 내지 5% w/w, 바람직하게는 0.1% w/w, 더욱 바람직하게는 0.01% w/w로 첨가하는 제조 방법.
제8항에 있어서, 미정제 약학적 활성 성분으로서 푸시드산나트륨을 사용하고, 크림 베이스중에서 무산소 환경하에 상기 푸시드산나트륨을 그 자리에서 푸시드산으로 전환시키는 단계는
a. 수성상 용기 내에서 20% w/w 내지 75% w/w, 바람직하게는 30% w/w 내지 50% w/w, 더욱 바람직하게는 35% w/w 내지 45% w/w 범위의 정제수를 70℃ 내지 80℃로 가열하는 단계;
b. 상기 수성상 용기에, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로로크레졸, 칼륨 소르베이트, 벤조산 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 보존제, 더욱 바람직하게는 벤조산을 0.05% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.2% w/w의 양으로 첨가하는 단계;
c. 상기 단계 b의 수성상 용기에, 2나트륨 EDTA 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 킬레이트화제를 0.01% w/w 내지 1% w/w, 바람직하게는 0.5% w/w, 더욱 바람직하게는 0.1% w/w의 양으로 첨가하는 단계;
d. 상기 단계 c의 수성상 용기에, 오르토인산수소2나트륨, 오르토인산수소나트륨 등을 포함하는 군으로부터 선택된 완충제를 0.001% w/w 내지 1.00% w/w, 바람직하게는 0.05% w/w, 더욱 바람직하게는 0.5% w/w의 양으로 첨가하는 단계;
e. 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합물의 온도를 70℃ 내지 80℃에서 유지하면서 단계 d의 혼합물을 혼합하는 단계;
f. 유성상 용기에, 화이트 연질 파라핀, 액체 파라핀, 경질 파라핀 등을 포함하는 군에서 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 왁스 물질을 5% w/w 내지 20% w/w, 바람직하게는 15% w/w, 더욱 바람직하게는 12.5% w/w의 양으로 첨가하고, 상기 왁스를 70℃ 내지 80℃로 가열하여 용융시키는 단계;
g. 단계 f의 상기 유성상 용기에, 세토스테아릴 알콜, 세토마크로골-1000을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 1차 유화제, 바람직하게는 비이온성 계면활성제 형태의 1차 유화제, 바람직하게는 세토스테아릴 알콜을 1% w/w 내지 15% w/w, 바람직하게는 15% w/w, 더욱 바람직하게는 12.5% w/w의 양과, 임의로 폴리소르베이트-80, Span-80 등을 포함하는 군으로부터 선택된 2차 유화제, 바람직하게는 폴리소르베이트-80을 1 내지 5% w/w, 더욱 바람직하게는 2% w/w의 양으로 첨가하고, 혼합물의 온도를 75℃±5℃에서 유지하면서 혼합물을 완전하게, 바람직하게는 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합하는 단계;
h. -1,000 내지 -300 mmHg 범위내의 진공하에서, 70℃ 내지 80℃에서 상기 수성상 및 유성상 용기의 내용물을 혼합 용기로 옮기고, 혼합물을 완전하게, 바람직하게는 교반기를 사용하여 10 내지 50 RPM에서 혼합하여 에멀젼을 형성하는 단계;
i. 바람직하게는 혼합 용기의 잭킷내에서 냉각탑으로부터 냉각수를 바람직하게는 8℃ 내지 15℃에서 순환시켜 상기 에멀젼을 45℃로 냉각시키는 단계;
j. API-용기내에서, 프로필렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜-400 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 공용매, 바람직하게는 프로필렌 글리콜을 5% w/w 내지 40% w/w, 바람직하게는 30% w/w, 더욱 바람직하게는 25% w/w의 양으로 첨가하고, 연속 혼합하여 부틸화 히드록시 아니솔, 부틸화 히드록시 톨루엔 등을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 항산화제, 바람직하게는 부틸화 히드록시 톨루엔을 약 0.001% w/w 내지 5% w/w, 바람직하게는 0.1% w/w, 더욱 바람직하게는 0.01% w/w로 상기 프로필렌 글리콜 중에 용해시키는 단계 ;
k. 상기 API-용기의 내용물을 불활성 기체 플러싱하고, 상기 불활성 기체는 바람직하게는 질소이며; 푸시드산나트륨을 0.1% w/w 내지 약 25% w/w, 바람직하게는 약 0.5% w/w 내지 약 5% w/w, 더욱 바람직하게는 약 2.08% w/w의 양으로 첨가하고, 상기 푸시드산나트륨을 혼합물에 용해시키는 단계;
l. HCl, H₂SO₄, HN0₃, 락트산 등과 같은 산을 포함하는 군으로부터 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 산, 바람직하게는 질산을 약 0.005% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.25% w/w의 양으로 사용하여 단계 k의 API-용기내의 혼합물의 pH를 2 미만으로 조절하는 단계;
m. 단계 l의 API-용기내의 내용물을 10 내지 50 RPM에서 연속 교반하면서 단계 i의 혼합 용기로 옮기고, 혼합물을 1,000 내지 3,000 RPM에서 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하에 -1,000 내지 -300 mmHg의 진공하에서 균질화시키는 단계;
n. 별도의 용기내에서, 약 0.005% w/w 내지 0.5% w/w, 바람직하게는 0.3% w/w, 더욱 바람직하게는 0.1% w/w의 HCl, H₂SO₄, HNO₃, 락트산 등과 같은 산을 포함하는 군에서 선택된, 단독 또는 이의 임의의 조합의 산, 바람직하게는 락트산 및 약 0.1% w/w 내지 10% w/w, 바람직하게는 8% w/w, 더욱 바람직하게는 5% w/w의 정제수를 첨가하여 혼합물을 형성하고, 상기 생체중합체인 키토산을 약 0.01% w/w 내지 약 1% w/w, 바람직하게는 약 0.01% w/w 내지 약 0.5% w/w, 가장 바람직하게는 약 0.25% w/w의 양으로 용해시키는 단계;
o. 단계 n의 생체중합체 혼합물의 내용물을 10 내지 50 RPM에서 연속 교반하면서 단계 i의 혼합 용기로 옮기고, 혼합물을 1,000 내지 3,000 RPM에서 바람직하게는 질소인 불활성 기체의 플러싱하에 -1,000 내지 -300 mmHg의 진공하에서 균질화시키는 단계;
p. 8℃ 내지 15℃에서 냉각탑으로부터 혼합 용기의 잭킷으로 냉각수의 순환을 사용하여 단계 o의 혼합 용기의 내용물을 30℃ 내지 37℃로 냉각시키는 단계;
n. 교반기 및 균질화기를 끄고, 단계 n의 혼합 용기의 혼합물을 저장 컨테이너로 분리하는 단계를 포함하는 제조 방법.