KR20110086473A - Composition for preventing or treatment of coronavirus infection and composition for inhibiting the activy of 3c-like protease comprising ecklonia cava - Google Patents

Composition for preventing or treatment of coronavirus infection and composition for inhibiting the activy of 3c-like protease comprising ecklonia cava Download PDF

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KR20110086473A
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노문철
류영배
박수진
장종선
권형준
김하현
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한국생명공학연구원
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Abstract

PURPOSE: A composition containing Ecklonia cava extract or fraction of the extract for preventing or treating coronaviral infection is provided to suppress 3CL protease activity. CONSTITUTION: A composition for preventing or treating coronaviral infection contains Ecklonia cava extract or fraction of the extract as an active ingredient. The extract is isolated using water, alcohol of C1-C4, or mixture solvent thereof. The fraction is a hexane fraction, ethyl acetate fraction, or water fraction. The composition is a pharmaceutical or food composition. The pharmaceutical composition is manufactured in the form of tablet, pill, powder, granule, capsule, suspension, emulsion, syrup, non-aqueous solvent, suspension, or suppository. A composition for suppressing 3CL protease activity contains the extract or fraction of the extract as an active ingredient.

Description

감태 추출물을 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물 및 3CL 프로테아제 활성의 억제용 조성물{Composition for preventing or treatment of coronavirus infection and composition for inhibiting the activy of 3C-like protease comprising ecklonia cava}Composition for preventing or treatment of coronavirus infection and composition for inhibiting the activy of 3C-like protease comprising ecklonia cava}

본 발명은 감태 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방 및 치료용 조성물 및 3CL 프로테아제 활성의 억제용 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to compositions for the prevention and treatment of coronavirus infection and compositions for inhibiting 3CL protease activity, including Ecklonia cava extract or fractions thereof.

코로나 바이러스 (coronavirus)는 1937년 닭에서 처음 발견된 뒤 개, 돼지, 조류 등의 동물을 거쳐 1965년에는 사람에게서도 발견되었다. 개기일식 때 태양의 광구가 달에 가려졌을 때 그 둘레에서 하얗게 빛나는 현상인 코로나 현상과 생김새가 비슷하여 이러한 이름이 붙여졌다.Coronavirus was first discovered in chickens in 1937 and then in humans in 1965 through animals such as dogs, pigs and birds. It is named after the solar eclipse when the solar eclipse is covered by the moon.

지금까지 코로나 바이러스는 사람에게는 거의 감염되지 않고 주로 개, 돼지, 소 등의 동물에 감염되는 병원균으로 인식되어 왔다. 사람에게 감염될 때에도 호흡기 증상을 유발하는 여러 바이러스 가운데 하나로 단순한 감기를 유발하거나, 어린이의 설사 등 장질환을 일으키는 경우가 있기는 하지만 위험성은 그리 높지 않았다. 그러나, 2003년 3월 중순 처음으로 발생하여 세계적으로 100명이 넘는 사망자와 3,000여 명의 환자를 발생시킨 중증급성호흡기증후군 (사스:SARS)의 원인균이 신종 (변종) 코로나 바이러스인 것으로 알려지면서 점차적으로 주목받기 시작하였다.Until now, the corona virus has been recognized as a pathogen that is hardly infected by humans and mainly infects animals such as dogs, pigs, and cattle. Even when infected with humans, one of several viruses that cause respiratory symptoms may cause a simple cold or a bowel disease such as diarrhea in children. However, as the causative agent of Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS: SARS), which occurred for the first time in mid-March 2003 and caused more than 100 deaths and 3,000 patients worldwide, it is becoming increasingly known as the new (variant) coronavirus. I started to receive.

코로나바이러스는 사람과 동물에서 주로 폐렴과 장염을 유발하는 것으로 알려져 있으며, 간혹 신경계 감염과 간염을 유발하는 것으로도 알려져 있다. 코로나바이러스는 코로나바이러스과 (Coronaviridae)에 속하며 구형의 외막을 가지는, 약 100-120 nm 크기의 positive sense RNA 바이러스이다 (Master, 2006). 코로나바이러스는 가장 외각에 있는 spike 단백질 (S), hemagglutinin-esterase (HE) 단백질, transmembrane (M) 단백질, small membrane (E) 단백질 및 nucleocapsid (N) 단백질 등 총 5개의 구조 단백질로 이루어져 있다 (Lai and Homes, 2001. Fields Virology). 이 중 spike 단백질은 세포 수용체와 결합하는 리간드 역할을 하며, 숙주세포와 바이러스간의 융합을 유도하는 단백질로 가장 변이가 심한 단백질로 알려져 있다.Coronaviruses are known to cause pneumonia and enteritis mainly in humans and animals, and sometimes to cause nervous system infections and hepatitis. Coronavirus is a positive sense RNA virus of about 100-120 nm in size, with a spherical outer membrane belonging to the family Coronaviridae (Master, 2006). Coronavirus consists of five structural proteins (Lai), the outermost spike protein (S), hemagglutinin-esterase (HE) protein, transmembrane (M) protein, small membrane (E) protein, and nucleocapsid (N) protein. and Homes, 2001. Fields Virology). Among these, the spike protein acts as a ligand that binds to cellular receptors, and is known as the most mutated protein as a protein that induces fusion between the host cell and the virus.

코로나바이러스는 크게 3가지 혈청형으로 나누어진다. 제 1 혈청형은 돼지의 전염성 장염을 발생시키는 원인체로, 이 질환은 국내에서도 발생하고 있으며, 어린 자돈에 100 % 가까운 발병율과 70 % 이상의 폐사율을 야기하고 있어 국내 양돈업에서 중요하게 다루어지고 있다. 제 2 혈청형으로는 가축에서 중요하게 취급되고 있는 소 코로나바이러스 감염증이 있다. 제 3 혈청형으로는 닭에서 호흡기, 비뇨기 및 산란장애를 유발하는 닭 전염성 기관지염이 있다. 소 코로나바이러스는 다른 혈청형 바이러스와는 달리 바이러스의 외막에 제 2의 spike인 hemaggulitin이 있어서 형태학적, 혈청학적 및 유전학적으로 구별이 된다. 특히, 제 2 혈청형은 2002년 중국을 중심으로 발생하여 전 세계를 공포에 몰아넣었던 사스 코로나바이러스가 속해 있는 혈청형으로 매우 중요하다. WHO 통계에 의하면 사스 코로나바이러스는 총 8500여 명이 감염되었고 이 중 800여 명이 사망한 것으로 보고되었다. 최근 사스 코로나바이러스가 박쥐에서 유래하여 사람에게 전파된 것으로 밝혀져 이종 간의 전파로 인한 코로나바이러스 감염이 큰 문제가 되고 있다.Coronaviruses are largely divided into three serotypes. The first serotype is a causative agent of infectious enteritis in pigs, and this disease is also occurring in Korea, and it is important in domestic pig farming because it causes an incidence of 100% of young piglets and mortality of 70% or more. The second serotype is bovine coronavirus infection, which is important in livestock. The third serotype is chicken infectious bronchitis, which causes respiratory, urinary and spawning disorders in chickens. Bovine coronavirus, unlike other serotype viruses, has a second spike in the outer membrane of the virus, hemaggulitin, which is distinguished morphologically, serologically and genetically. In particular, the second serotype is very important as a serotype belonging to SARS coronavirus, which occurred in 2002 in China and caused fear around the world. According to the WHO statistics, SARS coronavirus has reported a total of 8,500 infections, of which 800 have died. Recently, it has been found that SARS coronavirus has been transmitted to humans from bats, and coronavirus infection due to heterogeneous transmission has become a big problem.

코로나바이러스 제어용 타겟은 세포침입 저해, 사이토카인 (IFN), RNA 복제 억제 그리고 바이러스 프로테아제 저해로 나눌 수 있다. 현재 가장 활발히 연구되고 있는 코로나바이러스 제어용 타겟으로는 바이러스 프로테아제 (viral protease)인 3C-like protease (3CLpro 또는 3CL 프로테아제)와 papain like protease (PLpro)이 있으며, 특히 세계적으로 3CL 프로테아제를 타겟으로 한 연구가 활발히 진행되고 있는 실정이다. 발리노마이신 (valinomycin, IC50 = 0.85 μM), 레제르핀 (reserpine, IC50 = 3.4 μM) 및 TL3은 현재 신약으로 개발되거나 혹은 임상단계에 있다. Coronavirus control targets can be divided into cell invasion inhibition, cytokine (IFN), RNA replication inhibition and viral protease inhibition. Coronavirus control targets that are currently being actively studied include the viral protease 3C-like protease (3CL pro or 3CL protease) and papain like protease (PL pro ). Research is being actively conducted. Valinomycin (IC 50 = 0.85 μM), reserpine (IC 50 = 3.4 μM) and TL3 are currently being developed as new drugs or in clinical stages.

이러한 연구들에 맞춰서 생물소재인 편백나무, 측백나무, 삼나무에서 분리 정제된 테르페노이드 (terpenoid)와 리그노이드 (lignoid) 화합물군이 타겟 프로테아제의 강한 저해활성을 가지는 것을 Wen C. C. (J. Med . Chem. 2007)가 발표하였으며, 녹차와 홍차로부터 분리된 TF3 (theaflavin-3,3'-digallate)가 프로테아제 저해제로 알려져 있다 (Chen, C.-N. et al., eCAM, 2005). 소수의 생물소재로부터의 코로나바이러스 타겟 프로테아제 개발을 제외하고는, 이 외의 모든 저해제들이 합성 펩타이드로 보고되어 지고 있다. 또한, 바이러스의 세포변성 (CPE) 억제 효과를 가진 대표적인 소재로는 약용식물인 감초 (Licorice)로부터 분리된 배당체 화합물인 글라이씨라이진 (glycyrrhizin)과 추출물에서 활성을 나타내는 것을 바탕으로 하여, 이와 관련된 연구가 활발히 진행되고 있다 (Hoever et al., J. Med . Chem. 2005, Cinatl et al., Lancet, 2003).In line with these studies, it was found that the group of terpenoid and lignoid compounds isolated from biomaterials of cypress, cypress and cedar had strong inhibitory activity of the target protease Wen CC ( J. Med . Chem . 2007), TF3 (theaflavin-3,3'-digallate) isolated from green tea and black tea is known as a protease inhibitor (Chen, C.-N. et al., ECAM , 2005). Except for the development of coronavirus target proteases from a few biomaterials, all other inhibitors have been reported as synthetic peptides. In addition, the representative material having a cytopathic (CPE) inhibitory effect of the virus is based on its activity in glycyrrhizin and the glycoside compound, which is isolated from the medicinal plant Licorice , Studies are actively underway (Hoever et al., J. Med . Chem . 2005, Cinatl et al., Lancet , 2003).

현재까지 개발된 항바이러스들은 심한 부작용을 나타내고 있으므로, 그 응용에 있어서 많은 주의가 필요하다. 또한 백신의 개발은 유행하는 바이러스의 형과 백신의 바이러스가 맞지 않으면 효과가 낮다는 문제점이 있기 때문에 감염 억제 효과가 뛰어나고 안정성이 우수한 새로운 코로나 바이러스제의 개발의 필요성이 증가하고 있다. 또한, 사스-코로나바이러스의 3CL 프로테아제는 변이가 적고 구조가 밝혀져 있어 사스-코로나바이러스 뿐만 아니라 같은 혈청형의 소 코로나바이러스, 다른 혈청형의 돼지 코로나바이러스에도 적용할 수 있어 매우 좋은 타겟이라 할 수 있다. Antivirals developed to date have severe side effects, so much care is required in their applications. In addition, the development of a vaccine has a problem that the effect is low if the virus of the virus and the type of the epidemic does not match, there is an increasing need for the development of a new coronavirus agent with excellent infection suppression effect and excellent stability. In addition, the 3CL protease of SARS-Coronavirus is less mutated and its structure is revealed, so it can be applied not only to SARS-Coronavirus but also to bovine coronaviruses of the same serotype and swine coronaviruses of other serotypes. .

이에 본 발명자들은 코로나바이러스의 전사와 복제에 중요한 역할을 하는 3CL 프로테아제 및 다양한 타겟을 선정하여 바이러스를 억제할 수 있는 감태 추출물 및 분획물이 3CL 프로테아제에 대한 억제활성, 바이러스에 대한 살바이러스 억제효과 및 세포변성 억제효과가 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
Therefore, the present inventors selected 3CL protease and various targets that play an important role in the transcription and replication of coronavirus, and the Ecklonia cava extract and fractions capable of inhibiting the virus have the inhibitory activity against 3CL protease, the virus killing effect against virus and cells The present invention was completed by confirming that there is an inhibitory effect on degeneration.

본 발명의 목적은 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료를 위한 약제학적 조성물 및 이를 이용한 치료방법을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of a coronavirus infection and a method of treatment using the same.

본 발명의 다른 목적은 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료를 위한 식품 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a food composition for the prevention or treatment of coronavirus infection.

본 발명의 또 다른 목적은 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료를 위한 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a quasi-drug composition for the prevention or treatment of coronavirus infection.

본 발명의 또 다른 목적은 3CL 프로테아제 활성을 억제하여 그와 관계되는 질환의 치료에 이용할 수 있는 3CL 프로테아제 활성 억제용 조성물 및 이를 이용한 억제방법을 제공하는 것이다.
Still another object of the present invention is to provide a composition for inhibiting 3CL protease activity and a method of inhibiting the same, which can be used to treat 3CL protease activity and to treat diseases related thereto.

상기의 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일 양상으로서, 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물이 제공된다.
In one aspect of the present invention for achieving the above object, there is provided a composition for the prevention or treatment of corona virus infection comprising an Ecklonia cava extract or a fraction thereof as an active ingredient.

본 발명의 또 다른 양상에 따르면, 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 3CL 프로테아제 활성의 억제용 조성물이 제공된다.
According to another aspect of the present invention, there is provided a composition for inhibiting 3CL protease activity comprising an Ecklonia cava extract or a fraction thereof as an active ingredient.

본 발명의 또 다른 양상에 따르면, 상기 조성물을 3CL 프로테아제를 포함하는 시료와 접촉시키는 단계를 포함하는 3CL 프로테아제의 활성을 억제하는 방법이 제공된다.
According to another aspect of the invention, there is provided a method of inhibiting the activity of a 3CL protease comprising contacting the composition with a sample comprising a 3CL protease.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.The present invention provides a composition for preventing or treating coronavirus infection comprising an Ecklonia cava extract or a fraction thereof as an active ingredient.

본 발명의 조성물은 코로나 바이러스 표면에 존재하면서 바이러스 복제에 필수적인 기능을 하는 3CL 프로테아제의 활성을 억제함으로써 코로나 바이러스가 호흡기관 내 다른 세포로 확산되는 것을 차단하기 때문에 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.The composition of the present invention can be used for the prevention or treatment of coronavirus infection because it blocks the spread of coronavirus to other cells in the respiratory tract by inhibiting the activity of the 3CL protease, which is present on the surface of the corona virus and plays an essential function in viral replication. have.

본 발명에서 용어, "예방"이란 조성물의 투여에 의해 코로나바이러스 감염을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다. As used herein, the term "prevention" means any action that inhibits or delays the development of a coronavirus infection by administration of a composition.

본 발명에서 용어, "치료"란 조성물의 투여에 의해 코로나바이러스 감염에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.As used herein, the term "treatment" means any action that improves or advantageously changes the symptoms caused by coronavirus infection by administration of the composition.

상기 코로나 바이러스는 사스(SARS), 돼지(Pocine), 또는 소(Bovine) 코로나 바이러스일 수 있으며, 바람직하게는 사스(SARS) 코로나 바이러스일 수 있다. 또한, 상기 코로나 바이러스는 독감, 감기, 인후염, 기관지염, 및 폐렴의 질환을 야기할 수 있다.
The corona virus may be SARS, Porcine, or Bovine corona virus, and preferably, it may be SARS corona virus. In addition, the corona virus can cause diseases of the flu, cold, sore throat, bronchitis, and pneumonia.

일반적으로 감태 (Ecklonia cava)는 미역과 (Alariaceae)의 여러해살이 해조로서, 점심대 (漸深帶)의 깊은 곳에서 자란다. 길이는 보통 1~2 m이며, 줄기는 원기둥 모양이고 밑동은 뿌리 모양이다.Common Eckloniatic ( Ecklonia cava ) is a perennial seaweed of the seaweed ( Alariaceae ), which grows deep in the luncheon. The length is usually 1-2m, the stem is cylindrical, and the root is root shaped.

본 발명에서 감태는 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 제주도에서 직접 채취한 것을 사용할 수 있다.In the present invention, Ecklonia cava can be used to buy commercially available, or can be used directly collected from Jeju Island.

상기 감태의 추출물을 제조하는 방법은 초음파 추출법, 여과법 및 환류추출법 등 당업계의 통상적인 추출방법을 사용할 수 있다. 바람직하게는 세척 및 건조로 이물질이 제거된 감태를 분쇄하여 얻은 감태 건조물을 물, C1~C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 추출물일 수 있으며, 보다 바람직하게는 C1~C4의 알코올로 추출한 추출물일 수 있고, 가장 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올로 추출한 추출물일 수 있다. 이때, 추출용매는 감태의 건조중량의 2~20 배로 하는 것이 바람직하다. 일례로 감태 건조물을 세절한 후 추출용기에 넣고 C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올을 넣고 일정기간 상온에서 방치한 다음, 여과하여 알코올 추출물을 얻을 수 있다. 이때, 추출은 상온에서 1주 동안 방치하는 것이 바람직하며, 이후에 농축 또는 동결건조 등의 방법을 추가적으로 거칠 수 있다.The method of preparing the extract of Ecklonia cava may be a conventional extraction method in the art, such as ultrasonic extraction, filtration and reflux extraction. Preferably, the dried Ecklonia cava obtained by pulverizing Ecklonia cava from which foreign substances are removed by washing and drying may be an extract extracted with water, an alcohol of C 1 to C 4 , or a mixed solvent thereof, and more preferably, C 1 to C 4 . It may be an extract extracted with alcohol, most preferably may be an extract extracted with methanol or ethanol. At this time, the extraction solvent is preferably 2 to 20 times the dry weight of the Ecklonia cava. For example, after cutting the Ecklonia cava dry, put it in an extraction container and put a lower alcohol of C 1 ~ C 4 or a mixed solvent thereof, preferably methanol or ethanol, and leave it at room temperature for a certain period of time, followed by filtration to obtain an alcohol extract. . At this time, the extraction is preferably left for 1 week at room temperature, after which it may be further subjected to methods such as concentration or lyophilization.

또한, 상기 감태 건조물을 80 ~ 90 ℃의 열수를 환류장치에 연결하여 6 시간 동안 방치한 다음, 이를 여과하여 열수 추출물을 얻을 수 있다. 이후에 농축 또는 동결건조 등의 방법을 추가적으로 거칠 수 있다.In addition, the dried Ecklonia cava was allowed to stand for 6 hours by connecting hot water at 80 to 90 ° C. to a reflux device, and then filtered to obtain a hot water extract. Thereafter, a method such as concentration or lyophilization may be additionally performed.

한편, 본 발명에서 감태 분획물은 상기에서 얻은 감태 추출물로부터 분획하여 얻을 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 감태 분획물은 감태 추출물을 물에 현탁시킨 후 헥산 및 에틸아세테이트로 각각 분획함으로써 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물 및 물 분획물을 얻을 수 있다.
Meanwhile, the Ecklonia cava fraction in the present invention can be obtained by fractionation from the Ecklonia cava extract obtained above. More specifically, the Ecklonia cava fraction can be obtained by suspending the Ecklonia cava extract in water and then fractionating it with hexane and ethyl acetate, respectively, to obtain a hexane fraction, an ethyl acetate fraction and a water fraction.

한편, 본 발명의 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물은 약제학적 조성물일 수 있다.Meanwhile, the composition for preventing or treating coronavirus infection of the present invention may be a pharmaceutical composition.

상기 본 발명의 조성물이 약제학적 조성물인 경우 상기 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스 (sucrose) 또는 락토오스 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.When the composition of the present invention is a pharmaceutical composition, the composition may include a pharmaceutically acceptable carrier. The composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier may be in various oral or parenteral formulations. When formulated, diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used. Solid form preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules and the like, which form at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose or lactose ( lactose) and gelatin. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate, talc and the like are also used. Liquid preparations for oral administration include suspensions, liquid solutions, emulsions, and syrups. In addition to the commonly used simple diluents, water and liquid paraffin, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives may be included. have. Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories. As the non-aqueous solvent and the suspension solvent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like can be used. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.

상기 약제학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.The pharmaceutical composition is any one selected from the group consisting of tablets, pills, powders, granules, capsules, suspensions, liquid solutions, emulsions, syrups, sterile aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, lyophilized preparations and suppositories. It can have one formulation.

상기 본 발명의 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. The composition of the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount.

본 발명에서 용어 "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 감염된 바이러스 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
As used herein, the term "pharmaceutically effective amount" refers to an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level refers to the individual type and severity, age, sex, type of virus infected. , The activity of the drug, the sensitivity to the drug, the time of administration, the route of administration and the rate of release, the duration of treatment, factors including the drug used concurrently, and other factors well known in the medical arts. The compositions of the present invention may be administered as individual therapeutic agents or in combination with other therapeutic agents and may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents. And single or multiple administrations. Taking all of the above factors into consideration, it is important to administer an amount that can obtain the maximum effect in a minimum amount without side effects, and can be easily determined by those skilled in the art.

본 발명의 조성물은 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
The composition of the present invention can be used alone or in combination with methods using surgery, hormonal therapy, drug therapy and biological response modifiers for the prevention or treatment of coronavirus infection.

한편, 본 발명은 상기 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물을 약제학적으로 유효한 양으로 코로나 바이러스 감염의 발명 또는 발병 가능성이 있는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는 코로나 바이러스 감염 질환의 치료방법을 제공한다. 상기 코로나 바이러스는 사스 (SARS), 돼지 (Pocine), 또는 소 (Bovine) 코로나 바이러스일 수 있으며, 바람직하게는 사스 (SARS) 코로나 바이러스일 수 있다. 또한, 상기 코로나 바이러스 감염 질환은 독감, 감기, 인후염, 기관지염, 및 폐렴일 수 있다.On the other hand, the present invention provides a method for treating a coronavirus infection disease comprising administering the composition for the prevention or treatment of coronavirus infection in a pharmaceutically effective amount to a subject having the possibility of the invention or onset of coronavirus infection. . The corona virus may be SARS, Porcine, or Bovine corona virus, and preferably the SARS corona virus. In addition, the corona virus infection disease may be flu, cold, sore throat, bronchitis, and pneumonia.

본 발명에서 용어, "개체"란 코로나바이러스에 이미 감염되었거나 감염될 수 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미하고 본 발명의 추출물 또는 분획물을 포함하는 조성물을 개체에게 투여함으로써, 상기 질환을 효과적으로 예방 및 치료할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물로 다양한 코로나바이러스 아형 또는 변이형의 인간 코로나바이러스로 감염된 인간을 치료할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물로 다양한 코로나바이러스 아형 또는 변이형의 코로나바이러스로 감염된 인간을 치료할 수 있다. 또한, 다양한 코로나바이러스 아형 또는 변이형의 코로나바이러스로 감염된 돼지 또는 소를 치료할 수 있다. 본 발명의 조성물은 기존의 코로나바이러스 감염 질환의 치료제와 병행하여 투여할 수 있다.As used herein, the term "individual" means all animals, including humans already infected with or capable of being infected with a coronavirus, and by effectively administering to a subject a composition comprising an extract or fraction of the present invention, thereby effectively preventing and treating the disease. Can be. For example, the compositions of the present invention can treat humans infected with various coronavirus subtypes or variants of human coronavirus. In addition, the compositions of the present invention can treat humans infected with various coronavirus subtypes or variants of coronavirus. It is also possible to treat pigs or cattle infected with various coronavirus subtypes or variants of coronaviruses. The composition of the present invention can be administered in parallel with a therapeutic agent for existing coronavirus infection disease.

상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물은 목적하는 바에 따라 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 또한 상기 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다.
The route of administration of the composition may be administered via any general route as long as it can reach the desired tissue. The composition of the present invention may be administered as desired, but is not limited to intraperitoneal administration, intravenous administration, intramuscular administration, subcutaneous administration, intradermal administration, oral administration, intranasal administration, pulmonary administration, rectal administration. The composition may also be administered by any device in which the active agent may migrate to the target cell.

아울러, 본 발명은 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 식품 조성물을 제공한다.
In addition, the present invention provides a food composition for the prevention or treatment of corona virus infection comprising an Ecklonia cava extract or a fraction thereof as an active ingredient.

즉, 본 발명의 감태 추출물 또는 이의 분획물은 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 식품 조성물에 첨가될 수 있다. 본 발명의 감태 추출물 또는 이의 분획물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 추출물 또는 분획물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에는 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 0.01 ~ 10 중량%, 바람직하게는 0.05 ~ 1 중량%의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.That is, the Ecklonia cava extract of the present invention or a fraction thereof may be added to a food composition for preventing or treating corona virus infection. When the Ecklonia cava extract of the present invention or a fraction thereof is used as a food additive, the extract or fraction may be added as it is or used with other food or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The mixed amount of the active ingredient can be determined suitably according to the purpose of use (prevention, health or therapeutic treatment). In general, in the manufacture of food or beverages, the composition of the present invention is added in an amount of 0.01 to 10% by weight, preferably 0.05 to 1% by weight based on the raw materials. However, in the case of prolonged ingestion for health and hygiene purposes or for health control purposes, the amount may be used below the above range.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.There is no particular limitation on the kind of food. Examples of the food to which the above substances can be added include dairy products including meat, sausage, bread, chocolate, candy, snack, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, various soups, drinks, tea, Alcoholic beverages, and vitamin complexes, all of which include healthy foods in a conventional sense.

본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.The health beverage composition of the present invention may contain various flavors or natural carbohydrates as an additional ingredient such as ordinary beverages. Such natural carbohydrates are monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, and polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. Examples of sweeteners include natural sweeteners such as tau martin and stevia extract, synthetic sweeteners such as saccharin and aspartame, and the like. The proportion of the natural carbohydrate is generally about 0.01 to 0.04 g, preferably about 0.02 to 0.03 g per 100 ml of the composition of the present invention.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다. 이들 성분들은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
In addition to the above, the composition of the present invention includes various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, coloring agents, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, And a carbonation agent used for the carbonated beverage. In addition, the composition of the present invention may contain a flesh for preparing natural fruit juice, fruit juice beverage and vegetable beverage. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not critical but is usually selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention. These components can be used independently or in combination.

아울러, 본 발명은 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공한다.
In addition, the present invention provides a quasi-drug composition for the prevention or treatment of corona virus infection comprising an Ecklonia cava extract or a fraction thereof as an active ingredient.

즉, 본 발명의 조성물은 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료를 목적으로 의약외품 조성물에 첨가될 수 있다. 본 발명의 감태 추출물 또는 이의 분획물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 추출물 또는 분획물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.That is, the composition of the present invention may be added to the quasi-drug composition for the purpose of preventing or treating coronavirus infection. When the Ecklonia cava extract of the present invention or a fraction thereof is used as an quasi-drug additive, the extract or fraction may be added as it is or used together with other quasi-drug components, and may be appropriately used according to a conventional method. The mixed amount of the active ingredient may be appropriately determined depending on the purpose of use (prevention, health or therapeutic treatment).

바람직하게는, 상기 의약외품 조성물은 소독청경제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터충진제일 수 있다.
Preferably, the quasi-drug composition may be an antiseptic agent, a shower foam, a gagreen, a wet tissue, a detergent soap, a hand wash, a humidifier filler, a mask, an ointment, or a filter filler.

또한, 본 발명은 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 3CL 프로테아제 활성의 억제용 조성물을 제공한다.
The present invention also provides a composition for inhibiting 3CL protease activity comprising an Ecklonia cava extract or a fraction thereof as an active ingredient.

이때, 상기 3CL 프로테아제 활성의 억제용 조성물은 사스 (SARS), 돼지 (Pocine), 또는 소 (Bovine) 코로나 바이러스의 예방 또는 치료용으로 사용될 수 있으며, 바람직하게는 사스 코로나 바이러스의 예방 또는 치료용으로 사용될 수 있다.At this time, the composition for inhibiting the 3CL protease activity may be used for the prevention or treatment of SARS, Porcine, or Bovine coronavirus, preferably for the prevention or treatment of SARS coronavirus. Can be used.

상기 사스 (SARS), 돼지 (Pocine), 또는 소 (Bovine) 코로나 바이러스는 독감, 감기, 인후염, 기관지염, 및 폐렴의 질환을 야기할 수 있다. The SARS, Porcine, or Bovine corona virus can cause diseases of the flu, cold, sore throat, bronchitis, and pneumonia.

또한, 본 발명은 상기 3CL 프로테아제 활성의 억제용 조성물을 3CL 프로테아제를 포함하는 시료와 접촉시키는 단계를 포함하는 3CL 프로테아제의 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 이때, 상기 접촉은 통상적인 방법으로 이루어지고, 3CL 프로테아제를 포함하는 시료는 살아있는 유기체, 조직 또는 세포 배양체, 생물학적 물질 시료 (혈액, 혈청, 뇨, 뇌척수액, 눈물, 가래, 타액, 조직 시료 등) 등이 포함되며, 3CL 프로테아제를 생성시키는 유기체, 대개 바이러스와 같은 병인성 유기체를 함유할 수 있다. 이러한 시료들은 물 및 유기 용매/물 혼합물을 포함하는 어떠한 배지 내에 담길 수 있다.The present invention also provides a method of inhibiting the activity of the 3CL protease comprising the step of contacting the composition for inhibiting the 3CL protease activity with a sample containing the 3CL protease. At this time, the contact is made in a conventional manner, the sample containing the 3CL protease is a living organism, tissue or cell culture, biological material samples (blood, serum, urine, cerebrospinal fluid, tears, sputum, saliva, tissue samples, etc.) This may include organisms that produce 3CL proteases, usually pathogenic organisms such as viruses. Such samples can be contained in any medium containing water and an organic solvent / water mixture.

또한, 본 발명의 조성물을 투여한 후에 3CL 프로테아제의 활성은 3CL 프로테아제 활성을 진단하는 직접 또는 간접 방법을 포함한 어떠한 방법에 의해서도 관찰될 수 있다. 3CL 프로테아제의 활성을 진단하는 정량적인, 정성적인 또는 세미-정량적인 방법들 모두가 사용 가능하며, 살아있는 유기체의 생리학적인 특성을 관찰하는 등 다른 어떠한 방법도 적용될 수 있다.
In addition, the activity of the 3CL protease after administration of the composition of the present invention can be observed by any method including a direct or indirect method of diagnosing 3CL protease activity. Either quantitative, qualitative or semi-quantitative methods of diagnosing the activity of the 3CL protease may be used, and any other method may be applied, such as observing the physiological properties of living organisms.

본 발명에 따른 감태 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물들은 3CL 프로테아제의 활성을 억제하는 효과를 나타내고, 다양한 코로나 바이러스에 대해 살바이러스 및 세포변성 억제 효과를 동시에 나타내므로 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
Compositions comprising Ecklonia cava extracts or fractions thereof according to the present invention exhibit the effect of inhibiting the activity of the 3CL protease, and at the same time exhibits the effect of inhibiting virucidal and cytopathic effects on various coronaviruses, which is useful for the prevention or treatment of coronavirus infection. Can be used.

이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 보다 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Experimental Examples. However, the following examples are merely to illustrate the present invention is not limited to the contents of the present invention.

실시예Example 1 :  One : 감태Ecklonia 추출물의 제조 Preparation of Extract

본 발명의 사용한 감태는 일반적으로 자연에서 쉽게 채집할 수 있는 것으로 본 발명의 추출물을 효율적으로 얻기 위하여 파우더 형태로 분쇄하여 사용하였다.The Ecklonia cava used in the present invention is generally easily collected in nature, and was used by pulverizing in powder form in order to efficiently obtain the extract of the present invention.

감태 2 kg에 95 %의 에탄올 (EtOH) 20 ℓ를 가하여 실온에서 7일 동안 방치하고, 여과지로 여과한 후 농축하여 감태의 에탄올 추출물 (182 g)을 수득하였다.
20 L of 95% ethanol (EtOH) was added to 2 kg of Ecklonia cava, and allowed to stand at room temperature for 7 days, filtered through a filter paper, and concentrated to give an ethanol extract (182 g) of Ecklonia cava.

실시예Example 2 :  2 : 감태Ecklonia 추출물로부터  From extract 분획물Fraction 및 화합물의 분리 및 정제 And purification of compounds

상기 실시예 1에서 수득한 감태의 에탄올 추출물 182 g에 물 2ℓ를 넣어 현탁시켰다. 이를 분별 깔대기에 넣고, 헥산 가용추출물 (48 g), 에틸아세이트 가용추출물 (90 g) 및 물 가용추출물 (20 g)을 수득하였다.2 L of water was added to 182 g of the ethanol extract of Ecklonia cava obtained in Example 1 and suspended. This was put in a separatory funnel to obtain hexane soluble extract (48 g), ethyl acetate soluble extract (90 g) and water soluble extract (20 g).

상기에서 수득한 에틸아세테이트 가용추출물 90 g을 클로로포름, 메탄올 및 이들의 혼합용매 (30:1 ~ 1:1)를 이동상으로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 [실리카겔 700 g, 70 ~ 230 메쉬 (mesh)]를 실시하여 12 개의 분획물 (Fr.1 ~ 12)로 분리하였다. 이들 중 두 번째 분획물 (Fr.2, 1.2 g)은 헥산:에틸아세테이트의 혼합용매를 이동상으로 하여, TLC 전개용매 헥산:에틸아세테이트 (1:2) 조건하에 다시 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (100 g, 230 ~ 400 메쉬)를 실시하여 3 개의 분획물 (Fr. 2-1 ~ 2-3)로 분리하였다. 이중 첫 번째 분획물 (Fr. 2-1, 230 mg)에 대하여 메탄올에 충진된 Sephadex (LH-20) 컬럼크로마토그래피를 실시하여 순수한 화합물 1 (21 mg)을 수득하였다. 두 번째 분획물 (Fr. 2-2, 330 mg)에 대하여 메탄올:물의 혼합용매 (30/70, v/v)를 사용하여 역상크로마토그래피(RP-18)를 이용하여 순수한 화합물 2 (21 mg) 수득하였다. 또한 세 번째 분획물 (Fr. 2-3, 560 mg)은 헥산:에틸아세테이트의 혼합용매를 이동상으로 TLC 전개용매 헥산:에틸아세테이트 (1:2) 조건하여 다시 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (50 g, 230 ~ 400 메쉬)를 수행하고 메탄올:물의 혼합용매 (30/70, v/v)를 사용하여 역상크로마토그래피 (RP-18)를 이용하여 순수한 화합물 3 (30 mg)을 수득하였다.
90 g of the ethyl acetate soluble extract obtained above was subjected to silica gel column chromatography [silica gel 700 g, 70 to 230 mesh] using chloroform, methanol, and a mixed solvent thereof (30: 1 to 1: 1) as a mobile phase. And separated into 12 fractions (Fr. 1-12). The second of these fractions (Fr. 2, 1.2 g) Using a mixed solvent of hexane: ethyl acetate as a mobile phase, silica gel column chromatography (100 g, 230-400 mesh) was carried out again under TLC developing solvent hexane: ethyl acetate (1: 2) to obtain three fractions (Fr. 2). -1 to 2-3). Sephadex (LH-20) column chromatography with methanol was performed on the first fraction (Fr. 2-1, 230 mg) to obtain pure Compound 1 (21 mg). Pure compound 2 (21 mg) using reverse phase chromatography (RP-18) using a methanol: water mixed solvent (30/70, v / v) for the second fraction (Fr. 2-2, 330 mg) Obtained. In addition, the third fraction (Fr. 2-3, 560 mg) was subjected to silica gel column chromatography (50 g, 230 ~) under conditions of TLC developing solvent hexane: ethyl acetate (1: 2) using a mixed solvent of hexane: ethyl acetate as a mobile phase. 400 mesh) and pure compound 3 (30 mg) was obtained using reverse phase chromatography (RP-18) using a methanol: water mixed solvent (30/70, v / v).

실시예Example 3: 수득한 화합물의 구조 분석 3: structural analysis of the obtained compound

상기 실시예 2에서 얻은 화합물들의 분자량 및 분자식을 핵자기공명 (NMR) 분석 (Bruker AM 300, 500)을 통하여 1H NMR, 13C NMR 및 2D NMR 분광학 자료, 융점 (melting point) 및 적외선 분광학 (IR) 자료를 이용하여 분자구조를 결정하였다.
Molecular weight and molecular formula of the compounds obtained in Example 2 were analyzed by 1 N NMR, 13 C NMR and 2D NMR spectroscopy data, melting point and infrared spectroscopy through nuclear magnetic resonance (NMR) analysis (Bruker AM 300, 500). IR) data were used to determine the molecular structure.

실험예Experimental Example 1 :  One : 감태Ecklonia 추출물 및  Extract and 분획물의Fraction 3 3 CLCL 프로테아제 ( Protease ( SARSSARS CoVCoV 3 3 CLCL 프로테아제) 저해 활성 측정 Protease) inhibitory activity measurement

본 발명의 실시예 1과 2의 감태 추출물 및 분획물의 3CL 프로테아제에 대한 저해 활성을 측정하기 위하여, 사스 (SARS) 코로나 바이러스의 재조합 3CL 프로테아제 (LifeSensor 사)를 구입하여 사용하였다. 기질은 FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) assay를 위한 Dacyl-KTSAVLQSGFKME-Edans를 구입하여 사용하였다. In order to measure the inhibitory activity of the Ecklonia cava extracts and fractions of Examples 1 and 2 on 3CL protease, a recombinant 3CL protease (LifeSensor) of SARS coronavirus was purchased and used. The substrate was used to purchase Dacyl-KTSAVLQSGFKME-Edans for Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) assay.

실시예 1과 2의 감태 추출물 및 분획물을 메탄올에 녹여 각각 20 μL씩 첨가하고 기질 Dacyl-KTSAVLQSGFKME-Edans (최종농도, 2.5 μM)를 50 μL 넣었으며, 20 mM Bis-Tris 완충용액 (pH 7.5) 80 μL와 혼합하고, 효소원인 3CL 프로테아제 (효소 최종농도, 2.5 μg/mL) 50 μL를 첨가하여 상온에서 60분 동안 반응시켰으며, 형광 분광기로 360/40 ㎚에서의 여기 (excitation) 및 590/20 nm에서의 방출 (emission) 값을 측정함으로써 3CL 프로테아제의 저해 활성을 측정하였다.Ecklonia cava extracts and fractions of Examples 1 and 2 were dissolved in methanol, added 20 μL each, 50 μL of substrate Dacyl-KTSAVLQSGFKME-Edans (final concentration, 2.5 μM) was added, and 20 mM Bis-Tris buffer (pH 7.5). 80 μL was mixed and reacted for 60 minutes at room temperature by adding 50 μL of the enzyme source 3CL protease (enzyme final concentration, 2.5 μg / mL), excitation at 360/40 nm and 590 / Inhibitory activity of 3CL protease was measured by measuring the emission value at 20 nm.

측정 결과는 하기 표 1에 나타내었다.
The measurement results are shown in Table 1 below.

시료명Sample Name 3CL 프로테아제 저해율 (IC50, μg/mL)3CL protease inhibition rate (IC 50 , μg / mL) 감태의 에탄올 추출물Ethanol Extract of Ecklonia cava 7.57.5 감태의 열수 추출물Hydrothermal Extract of Ecklonia cava 28.028.0 감태의 헥산 분획물Hexane fraction of Ecklonia cava 12.312.3 감태의 에틸아세테이트 분획물Ethyl Acetate Fraction of Ecklonia cava 5.35.3

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 감태 추출물 및 분획물의 3CL 프로테아제에 대한 저해 활성을 측정한 결과, 감태의 에탄올 추출물, 열수 추출물, 헥산, 에틸아세테이트 및 물 분획물에서 7.5, 28.0, 12.3, 및 5.3 μg/mL의 IC50 값을 나타내었다. 따라서, 감태 에틸아세테이트 분획물에서 가장 높은 저해활성을 가짐을 확인할 수 있었다.
As shown in Table 1, as a result of measuring the inhibitory activity of the Ecklonia cava extract and fractions according to the present invention on the 3CL protease, 7.5, 28.0, 12.3, in the ethanol extract, hydrothermal extract, hexane, ethyl acetate and water fractions of Ecklonia cava And an IC 50 value of 5.3 μg / mL. Therefore, it was confirmed that Ecklonia cava ethyl acetate fraction had the highest inhibitory activity.

이하, 감태 추출물 및 분획물을 함유한 약학적 제제 또는 건강식품의 예를 설명한다.
Hereinafter, examples of pharmaceutical preparations or health foods containing Ecklonia cava extract and fractions will be described.

제조예Manufacturing example 1 : 약학적 제제의 제조 1: Preparation of pharmaceutical preparation

1-1. 1-1. 산제의Powder 제조 Produce

감태 추출물 또는 이의 분획물 2 gEcklonia cava extract or fractions thereof 2 g

유당 1 g1 g lactose

상기의 성분을 혼합한 후, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
After mixing the above components, the airtight cloth was filled to prepare a powder.

1-2. 정제의 제조1-2. Manufacture of tablets

감태 추출물 또는 이의 분획물 100 ㎎Ecklonia cava extract or its fractions 100 mg

옥수수 전분 100 ㎎100 mg corn starch

유당 100 ㎎Lactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg magnesium stearate

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
After mixing the above components, tablets were prepared by tableting according to a conventional method for producing tablets.

1-3. 캡슐제의 제조1-3. Preparation of Capsules

감태 추출물 또는 이의 분획물 100 ㎎Ecklonia cava extract or its fractions 100 mg

옥수수 전분 100 ㎎100 mg corn starch

유당 100 ㎎Lactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg magnesium stearate

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
After mixing the above components, the capsule was prepared by filling in gelatin capsules according to the conventional method for producing a capsule.

1-4. 주사액제의 제조1-4. Preparation of Injection

감태 추출물 또는 이의 분획물 10 ㎍/㎖Ecklonia cava extract or fractions thereof 10 ㎍ / ml

묽은 염산 BP pH 3.5로 될 때까지Dilute hydrochloric acid BP until pH 3.5

주사용 염화나트륨 BP 최대 1 ㎖Injectable sodium chloride BP up to 1 ml

적당한 용적의 주사용 염화나트륨 BP 중에 감태 추출물 또는 이의 분획물을 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은 염산 BP를 사용하여 pH 3.5로 조절하고, 주사용 염화나트륨 BP를 사용하여 용적을 조절하고 충분히 혼합하였다. 용액을 투명 유리로 된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120 ℃에서 15분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.
Ecklonia cava extract or fractions thereof were dissolved in an appropriate volume of sodium chloride BP for injection, and the pH of the resulting solution was adjusted to pH 3.5 with dilute hydrochloric acid BP, and the volume was adjusted with sodium chloride BP for injection and thoroughly mixed. The solution was filled into a 5 ml Type I ampoule made of clear glass, encapsulated under an upper grid of air by dissolving the glass, and sterilized by autoclaving at 120 ° C. for at least 15 minutes to prepare an injection solution.

제조예Manufacturing example 2: 건강식품의 제조 2: manufacture of health food

2-1. 조리용 양념의 제조2-1. Preparation of Cooking Seasonings

감태 추출물 또는 이의 분획물 0.2 ~ 10 중량%로 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다.
Ecklonia cava extract or fractions thereof prepared from 0.2 to 10% by weight for health promotion cooking seasoning.

2-2. 토마토 2-2. tomato 케찹ketchup 및 소스의 제조 And preparation of sauces

감태 추출물 또는 이의 분획물 0.2 ~ 1.0 중량%를 토마토 케찹 또는 소스에 첨가하여 건강 증진용 토마토 케찹 또는 소스를 제조하였다.
Health promotion tomato ketchup or sauce was prepared by adding 0.2 ~ 1.0% by weight of Ecklonia cava extract or fractions thereof to tomato ketchup or sauce.

2-3. 밀가루 식품의 제조2-3. Manufacture of flour food products

감태 추출물 또는 이의 분획물 0.1 ~ 5.0 중량%를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
Ecklonia cava extract or fractions thereof from 0.1 to 5.0% by weight was added to the flour, using the mixture to prepare bread, cakes, cookies, crackers and noodles to prepare health foods.

2-4. 2-4. 스프soup 및 육즙 ( And juicy ( graviesgravies )의 제조Manufacturing

감태 추출물 또는 이의 분획물 0.1 ~ 1.0 중량%를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
Ecklonia cava extract or fractions thereof from 0.1 to 1.0% by weight was added to the soup and gravy to prepare health products, health soup and soup.

2-5. 그라운드 2-5. ground 비프Beef ( ( ground beef)의ground beef) 제조 Produce

감태 추출물 또는 이의 분획물 10 중량%를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
10% by weight of Ecklonia cava extract or fractions thereof was added to the ground beef to prepare ground beef for health promotion.

2-6. 유제품 (2-6. dairy product ( dairydairy productsproducts )의 제조Manufacturing

감태 추출물 또는 이의 분획물 0.1 ~ 1.0 중량%를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
Ecklonia cava extract or fractions thereof from 0.1 to 1.0% by weight was added to the milk, using the milk to prepare a variety of dairy products such as butter and ice cream.

2-7. 2-7. 선식의Solar 제조 Produce

현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.Brown rice, barley, glutinous rice, and yulmu were dried by a known method and dried, and the mixture was granulated to a powder having a particle size of 60 mesh.

검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.Black soybeans, black sesame seeds, and perilla seeds were steamed and dried by a conventional method, and then they were prepared into powder having a particle size of 60 mesh by a pulverizer.

감태 추출물 또는 이의 분획물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.Ecklonia cava extract or fractions thereof were concentrated under reduced pressure in a vacuum concentrator and dried by spraying and drying with a hot air dryer to pulverize the dried product to a particle size of 60 mesh to obtain a dry powder.

상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 감태 추출물 또는 이의 분획물의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
Cereals, seeds and Ecklonia cava extract or its dried powder prepared in the above ratio was prepared by combining the following ratio.

곡물류 (현미 30 중량%, 율무 15 중량%, 보리 20 중량%),Cereals (30% brown rice, 15% barley, 20% barley),

종실류 (들깨 7 중량%, 검정콩 8 중량%, 검정깨 7 중량%),Seeds (7% by weight perilla, 8% by weight black beans, 7% by weight black sesame seeds),

감태 추출물 또는 이의 분획물의 건조분말 (1 중량%),Dry powder of Ecklonia cava extract or fractions thereof (1% by weight),

영지 (0.5 중량%),Ganoderma lucidum (0.5% by weight),

지황 (0.5 중량%)
Foxglove (0.5 wt%)

2-8. 탄산음료의 제조2-8. Preparation of Carbonated Drinks

설탕 5 ~ 10 %, 구연산 0.05 ~ 0.3 %, 카라멜 0.005 ~ 0.02 %, 비타민 C 0.1 ~ 1 %의 첨가물을 혼합하고, 여기에 79 ~ 94 %의 정제수를 섞어서 시럽을 만들고, 상기 시럽을 85 ~ 98 ℃에서 20 ~ 180 초간 살균하여 냉각수와 1:4의 비율로 혼합한 다음 탄산가스를 0.5 ~ 0.82 % 주입하여 감태 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 탄산음료를 제조하였다.
5-10% of sugar, 0.05-0.3% citric acid, 0.005-0.02% caramel, 0.1-1% of vitamin C are mixed, and 79-94% purified water is added to make syrup, and the syrup is 85-98 Sterilizing at 20 ℃ for 180 seconds, mixed with cooling water in a ratio of 1: 4, and then injected with carbon dioxide gas 0.5 ~ 0.82% to prepare a carbonated beverage containing Ecklonia cava extract or a fraction thereof.

2-9. 2-9. 건강음료의Health drink 제조 Produce

액상과당 (0.5 %), 올리고당 (2 %), 설탕 (2 %), 식염 (0.5 %), 물 (75 %)과 같은 부재료와 감태 추출물 또는 이의 분획물을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다.
Instant sterilization by homogeneous mixing of subsidiary materials such as liquid fructose (0.5%), oligosaccharide (2%), sugar (2%), salt (0.5%), water (75%) and Ecklonia cava extract or fractions thereof. Healthy drinks were prepared by packaging in small packaging containers such as glass bottles and plastic bottles.

2-10. 야채 주스의 제조2-10. Preparation of Vegetable Juice

감태 추출물 또는 이의 분획물 0.5g을 토마토 또는 당근 주스 1,000 ㎖에 가하여 건강 증진용 야채 주스를 제조하였다.
0.5 g of Ecklonia cava extract or a fraction thereof was added to 1,000 ml of tomato or carrot juice to prepare a vegetable juice for health promotion.

2-11. 과일 주스의 제조2-11. Manufacture of fruit juice

감태 추출물 또는 이의 분획물 0.1 g을 사과 또는 포도 주스 1,000 ㎖에 가하여 건강 증진용 과일 주스를 제조하였다.0.1 g of Ecklonia cava extract or a fraction thereof was added to 1,000 ml of apple or grape juice to prepare a fruit juice for health promotion.

Claims (11)

감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.Composition for the prevention or treatment of corona virus infection comprising an Ecklonia cava extract or a fraction thereof as an active ingredient. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 3CL 프로테아제 (3C-like protease)의 활성을 억제하는 것을 특징으로 하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.According to claim 1, wherein the composition is a composition for preventing or treating corona virus infection, characterized in that to inhibit the activity of 3CL protease (3C-like protease). 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1~C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로부터 추출한 것을 특징으로 하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.The method of claim 1, wherein the extract is a composition for preventing or treating corona virus infection, characterized in that extracted from water, C 1 ~ C 4 alcohol or a mixed solvent thereof. 제1항에 있어서, 상기 분획물은 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물 또는 물 분획물인 것을 특징으로 하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.The method of claim 1, wherein the fraction is a hexane fraction, ethyl acetate fraction or water fraction, characterized in that the composition for preventing or treating corona virus infection. 제1항에 있어서, 상기 코로나 바이러스는 사스(SARS), 돼지(Pocine), 또는 소(Bovine) 코로나 바이러스인 것을 특징으로 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.The method of claim 1, wherein the corona virus is SARS, Porcine, or Bovine corona virus, characterized in that the composition for the prevention or treatment of corona virus infection. 제1항에 있어서, 상기 코로나 바이러스는 독감, 감기, 인후염, 기관지염, 및 폐렴의 질환을 야기시키는 것을 특징으로 하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.The composition for preventing or treating coronavirus infection according to claim 1, wherein the corona virus causes diseases of flu, cold, sore throat, bronchitis, and pneumonia. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 약제학적 조성물, 식품 조성물 또는 의약외품 조성물인 것을 특징으로 하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.The method of claim 1, wherein the composition is a pharmaceutical composition, a food composition or a quasi-drug composition for the prevention or treatment of corona virus infection, characterized in that. 제7항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가지는 것을 특징으로 하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.The method of claim 7, wherein the pharmaceutical composition is a tablet, pill, powder, granules, capsules, suspensions, liquid solutions, emulsions, syrups, sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations and suppositories A composition for preventing or treating coronavirus infection, characterized in that it has any one formulation selected from the group consisting of. 제7항에 있어서, 상기 식품 조성물은 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 껌류, 아이스크림류, 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나임을 특징으로 하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.The method of claim 7, wherein the food composition is from the group consisting of meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, gum, ice cream, soups, beverages, tea, drinks, alcoholic beverages and vitamin complexes A composition for preventing or treating coronavirus infection, characterized in that any one selected. 제7항에 있어서, 상기 의약외품 조성물은 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 및 필터충진제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제조에 사용되는 것을 특징으로 하는 코로나 바이러스 감염의 예방 또는 치료용 조성물.According to claim 7, wherein the quasi-drug composition is used for the production of any one selected from the group consisting of disinfecting detergent, shower foam, gagreen, wet tissue, detergent soap, hand wash, humidifier filler, mask, ointment and filter filler. A composition for preventing or treating coronavirus infection. 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 3CL 프로테아제 (3C-like protease) 활성의 억제용 조성물.Composition for inhibition of 3CL protease activity comprising Ecklonia cava extract or a fraction thereof as an active ingredient.
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