KR20100070246A - The method for preparing the pharmacologically-enhanced fraction of magnolia officinalis and the composition comprising thereof showing enhanced anti-cancer activity - Google Patents

The method for preparing the pharmacologically-enhanced fraction of magnolia officinalis and the composition comprising thereof showing enhanced anti-cancer activity Download PDF

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Abstract

PURPOSE: A method for manufacturing Magnolia officinalis fraction and a composition containing the Magnolia officinalis fraction for preventing and treating cancer are provided. CONSTITUTION: A method for producing Magnolia officinalis fraction with enhanced anticancer activity comprises: a step of extracting dried Magnolia officinalis with water, low alcohol of C1-C4 by enfleurage extraction, hot water extraction, ultrasonic wave extraction, reflux extraction, and filtrate heating; a step of collecting Magnolia officinalis crude extract; a step of adding water-saturated sodium chloride, potassium, magnesium, calcium, aluminum or ammonium; a step of filtering and removing supernatant; and a step of drying the extract.

Description

항암활성이 증강된 후박 추출 분획물을 제조하는 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 조성물 {The method for preparing the pharmacologically-enhanced fraction of Magnolia officinalis and the composition comprising thereof showing enhanced anti-cancer activity} The method for preparing the pharmacologically-enhanced fraction of Magnolia officinalis and the composition comprising including enhanced enhanced anti-cancer activity}

본 발명은 항암활성이 탁월하게 향상된 후박 추출분획물의 제조방법 및 그를 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a thick extract extract having excellent anticancer activity and a composition containing the same as an active ingredient.

[문헌 1] 공개특허 10-2008-0009178호, 2008.01.25 공개[Patent 1] Publication 10-2008-0009178, published January 1, 2008

[문헌 2] Shu-Er Yang et al., British Journal of Pharmacology, 138, pp.193-201, 2003Shu-Er Yang et al., British Journal of Pharmacology, 138 , pp. 193-201, 2003

[문헌 3] So Yong Lee et al., European Journal of Pharmacology, 582, pp.17-25, 2008[3] So Yong Lee et al., European Journal of Pharmacology, 582 , pp. 17-25, 2008

[문헌 4] Fei Chen et al., World J Gastroenterol, 10(23), pp.3459-3463, 2004Fei Chen et al., World J Gastroenterol, 10 (23) , pp.3459-3463, 2004

[문헌 5] Xianhe Bai et al., THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 278, No.37, Issue of September 12, pp.35505-35507, 2003[Reference 5] Xianhe Bai et al., THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 278 , No. 37, Issue of September 12, pp. 35505-35507, 2003

[문헌 6] Junichiro Saito et al., Mutation Research, 609, pp.68-73, 2006[6] Junichiro Saito et al., Mutation Research, 609 , pp. 68-73, 2006

[문헌 7] Koji Ikeda et al., Phytother. Res. 17, pp.933-937, 20037 Koji Ikeda et al., Phytother. Res. 17 , pp. 933-937, 2003

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[문헌 9] Se-Jung Lee et al., biochemical pharmacology, 75, pp.2289-2300, 2008[9] Se-Jung Lee et al., Biochemical pharmacology, 75 , pp. 2289-2300, 2008

[문헌 10] Koji IKEDA et al., Biol. Pharm. Bull., 25(12), pp.1546-1549, 2002Document 10 Koji IKEDA et al., Biol. Pharm. Bull., 25 (12) , pp. 1546-1549, 2002

[문헌 11] Wen-Bin Zhong et al., Anti-Cancer Drugs, 14, pp.211-217, 2003[11] Wen-Bin Zhong et al., Anti-Cancer Drugs, 14 , pp. 211-217, 2003

[문헌 12] Daisuke S. et al., Int. J. Urology, 10, pp.160-166, 200312. Daisuke S. et al., Int. J. Urology, 10 , pp. 160-166, 2003

[문헌 13] P J Hu et al., Gut, 53, pp.195-200, 2004PJ Hu et al., Gut, 53 , pp. 195-200, 2004

[문헌 14] 심재영 등, Journal of Korean Association of Cancer Prevention, 9(4), pp.267-273, 2004[14] Shim Jae-young et al., Journal of Korean Association of Cancer Prevention , 9 (4) , pp. 267-273, 2004

[문헌 15] Xiao-Han Tang et al., Clinical Cancer Research, 10, pp.301-13, January 1, 200415. Xiao-Han Tang et al., Clinical Cancer Researc h, 10 , pp. 301-13, January 1, 2004

[문헌 16] Birgit Hotz et al., J Gastrointest Surg, 12, pp.900-906, 2008[16] Birgit Hotz et al., J Gastrointest Surg, 12 , pp. 900-906, 2008

2003년 보건복지부 통계연보에 의하면 2002년 우리나라 사망원인 1위가 암인데, 인구 10만명 당 암으로 인한 사망자가 130명, 이어 뇌혈관질환 77명, 심장질환 37명 및 당뇨병 25명 등의 순으로 나타났다. 암으로 인한 사망률은 매해 증가하였으며, 암은 오랫동안 난치의 병으로 간주되어왔다. 따라서 이러한 암을 치료하기 위한 연구가 지난 수년간 매우 활발히 진행되어 일부의 방법은 어느 정도의 치료효과를 보이기도 하였지만 아직도 획기적인 치료효과를 나타내는 방법은 없는 실정이다.According to the 2003 Statistical Yearbook of the Ministry of Health and Welfare, cancer was the number one cause of death in Korea in 2002, with 130 deaths from cancer per 100,000 population, followed by 77 cerebrovascular diseases, 37 heart diseases and 25 diabetes. appear. The death rate from cancer has increased every year, and cancer has long been regarded as an incurable disease. Therefore, researches for treating such cancers have been very active in the last few years, and some of the methods have shown some therapeutic effects, but there is still no way of showing a dramatic therapeutic effect.

기존의 암 치료법에는 외과적 수술, 방사선요법 및 항암화학요법 등이 있으며, 최근에는 종양을 면역조절방법으로 치료하려는 면역치료요법 등의 바이오치료법이 증가추세에 있다. 그러나 많은 치료방법에도 불구하고 암으로 인한 사망이 매년 계속 증가하고 있는 이유는, 기존의 치료방법들이 외과적 수술로 암을 제거하고 방사선요법과 항암제 투여에 의해 암 성장을 일시적으로 억제할 수는 있지만, 치료 후 잔여 암세포로부터 생기는 침윤(invasion)과 전이과정으로 예측할 수 없는 조직에 새로운 악성종양이 생기고, 결국 이러한 고형암은 항암제에 대한 내성이 매우 증가하여 항암약물요법 등의 이전 치료방법으로는 환자의 생명을 구할 수 없기 때문이다. Existing cancer treatments include surgical surgery, radiation therapy and chemotherapy, and recently, biotherapies such as immunotherapy to treat tumors with immunomodulatory methods are on the rise. However, despite the many treatments, cancer deaths continue to increase every year, although traditional treatments can surgically remove cancer and temporarily inhibit cancer growth by radiotherapy and chemotherapy. After treatment, new malignancies develop in tissues that are unpredictable due to invasion and metastasis from residual cancer cells. Consequently, these solid cancers have increased resistance to anticancer drugs. For life cannot be saved.

한편, 국내에서 현재 사용되고 있는 방광암 치료법으로는 외과적 수술, 방사선치료 및 항암 치료제 등이 있으나, 치료에 따른 부작용과 더불어 상당한 경제적 부담감을 지니는 단점을 지니고 있다(공개특허 10-2008-0009178호, 2008.01.25 공개)On the other hand, currently used bladder cancer treatment in Korea, such as surgical surgery, radiation treatment and anti-cancer treatment, etc., but has the disadvantage of having a significant economic burden along with the side effects of the treatment (Published Patent 10-2008-0009178, 2008.01 .25 public)

국내에서는 부작용은 줄이고 치료효과는 개선한 대체 의약품으로 천연물 치료제가 주목받고 있다. 이는 예로부터 사용되어 인체에 무해함이 입증되어 온 천연물 추출물 및 구성 성분을 이용한 치료제의 경우, 기존 치료제에 의한 내성이나 안전성 문제를 극복할 수 있기 때문이다. 특히 한방에서 약재로 사용되어져 온 천연물을 이용한 한방 기능성 품목들이 인기가 높다.In Korea, natural products are attracting attention as alternative medicines that have reduced side effects and improved therapeutic effects. This is because, in the case of therapeutic agents using natural product extracts and components that have been used for a long time and have been proved to be harmless to humans, resistance or safety problems caused by existing therapeutic agents can be overcome. In particular, herbal functional items using natural products that have been used as herbal medicine are popular.

후박(Magnolia officinalis)에는 리그난(lignan) 계열 성분인 마그놀올(magnolol)과 호노키올(honokiol) 등을 함유하고 있어 항균, 소화관 평활근의 진경, 소염, 암전이 억제 등 다양한 약리효과를 발휘하고 있다. 또한 전통적으로는 성분이 따뜻하고 맛이 쓰며 독이 없고 해가 묵은 냉기와 뱃속의 창만, 뇌명, 숙식불소를 치료하고 위기를 따뜻하게 하며 토사곽란의 전근을 멈추는 등 오장의 모든 기를 설한다고 알려져 있다. Magnolia officinalis contains lignan-based components such as magnool and honokiol, which have various pharmacological effects such as antibacterial, palliation of smooth muscle of the digestive tract, suppression of inflammation and cancer metastasis. It is also traditionally known to have all the five organs, including warm, delicious, non-toxic, old-fashioned chills, stomach swelling, brain storms, hunger, hunger, warming crises, and stopping the transfer of soil.

후박에 함유되어있는 마그놀올 또는 호노키올 및 오보바톨(ovobatol)의 항암효과는 이미 알려져 있으나(Shu-Er Yang et al., British Journal of Pharmacology, 138, pp.193-201, 2003; So Yong Lee et al., European Journal of Pharmacology, 582, pp.17-25, 2008; Fei Chen et al., World J Gastroenterol, 10(23), pp.3459-3463, 2004; Xianhe Bai et al., THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 278, No.37, Issue of September 12, pp.35505-35507, 2003; Junichiro Saito et al., Mutation Research, 609, pp.68-73, 2006; Koji Ikeda et al., Phytother. Res. 17, pp.933-937, 2003; Dong-Yup Lee et al., J. Food Sci. Nutr., 11, pp.191-197, 2006; Se-Jung Lee et al., biochemical pharmacology, 75, pp.2289-2300, 2008; Koji IKEDA et al., Biol. Pharm. Bull., 25(12), pp.1546-1549, 2002; Wen-Bin Zhong et al., Anti-Cancer Drugs, 14, pp.211-217, 2003), 이들은 각각 분리된 화학물질 또는 그 자체의 후박 추출물로서 발휘하는 효과들이다. The anticancer effect of magnols or honokiols and ovobatol contained in groceries is known (Shu-Er Yang et al., British Journal of Pharmacology, 138 , pp. 193-201, 2003; So Yong Lee et al., European Journal of Pharmacology, 582 , pp. 17-25, 2008; Fei Chen et al., World J Gastroenterol, 10 (23) , pp.3459-3463, 2004; Xianhe Bai et al., THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 278 , No. 37, Issue of September 12, pp. 35505-35507, 2003; Junichiro Saito et al., Mutation Research, 609 , pp.68-73, 2006; Koji Ikeda et al., Phytother. Res. 17 , pp . 933-937, 2003; Dong-Yup Lee et al., J. Food Sci. Nutr., 11 , pp. 191-197, 2006; Se-Jung Lee et al., Biochemical pharmacology, 75 , pp. 2289-2300, 2008; Koji IKEDA et al., Biol. Pharm. Bull., 25 (12) , pp. 1546-1549, 2002; Wen-Bin Zhong et al., Anti-Cancer Drugs, 14 , pp. 211-217, 2003), these are the effects exerted as separate chemicals or their own thick extracts.

천연물로부터 활성성분을 분리하는 방법은 다양한 컬럼과 용매를 통하여 이루어지는데, 단일 성분을 분리하기에는 상당한 노력과 시간 및 비용이 많이 들기 때문에 전통적으로는 물 추출물 또는 일정한 유기용매 추출물을 그대로 사용하거나, 고형제제, 산제 또는 과립제로 만들어 사용해왔다.The separation of the active ingredient from the natural product is carried out through various columns and solvents. Since it takes considerable effort, time, and cost to separate a single ingredient, it is traditionally used as a water extract or a constant organic solvent extract or a solid preparation. It has been used in powders or granules.

본 발명자들은 후박 물 추출물이 방광암 및 대장암의 예방 및 치료 활성을 가짐을 개시한 바 있다(한국공개특허 10-2008-0009178호, 2008.01.25 공개). 그러나 물 추출물의 경우, 임상에서 부피 큰 제제를 많이 섭취해야 하며, 탄수화물 또는 단백질 등의 함유가 많아 용출율이나 붕해 등 제제학적 표준화를 달성하지 못하는 단점을 가지고 있다.The inventors of the present invention have disclosed that the vulgaris extract has prophylactic and therapeutic activity of bladder cancer and colorectal cancer (Korean Patent Publication No. 10-2008-0009178, published on January 25, 2008). However, in the case of the water extract, a large amount of bulky preparations should be ingested in the clinic, and the carbohydrate or protein may contain a large amount such that dissolution rate or disintegration cannot achieve pharmaceutical standardization.

이에 본 발명자들은 임상시험에 사용하기 위하여 기존 제조방법의 단점을 개선하고, 항암작용의 활성성분을 간단하게 대량으로 분리하고자 시도한 결과, 후박을 일정한 유기용매로 1차 추출함으로써 제제학적 표준화를 달성할 수 있으며, 2차로 분획하는 간단한 공정에 의해 후박 추출분획물의 마그놀올 또는 호노키올 등 물 에 난용성 물질인 리그난 계열의 성분 함량이 탁월하게 증가됨을 확인하였으며, 이의 제조방법으로 수득한 후박 추출분획물이 암세포 독성시험 및 동물시험을 통하여 탁월한 항암효과가 있음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, the present inventors have improved the disadvantages of the existing manufacturing method for use in clinical trials, and attempted to simply separate the bulk of the anti-cancer active ingredients in large quantities, to achieve pharmaceutical standardization by first extracting the thick husk with a certain organic solvent. It was confirmed that the content of the lignan-based component, which is a poorly soluble substance in water, such as magnool or honokiol of the thick extract fraction, was greatly increased by a simple process of fractionating secondly, and the thick extract fraction obtained by the manufacturing method thereof was By confirming that the cancer cell toxicity test and animal tests have excellent anti-cancer effect, the present invention was completed.

상기 목적을 수행하기 위하여, 본 발명은 항암활성이 향상된 후박 추출 분획물을 제조하는 제조방법을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a preparation method for producing a thick extract fraction improved anticancer activity.

구체적으로, 본 발명은 건조 후박에 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매로 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류추출, 가열추출 및 여과하여 수득된 여액을 회수하여 후박 조추출물을 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계에서 수득한 후박 조추출물에 냉정제수 또는 수포화 염화나트륨, 칼륨, 마그네슘, 칼슘, 알루미늄 또는 암모늄 등의 무기염, 바람직하게는 냉정제수 또는 수포화 염화나트륨을 첨가하여 가온한 후에 현탁물을 수득하는 제 2단계; 상기 현탁물을 냉온에서 방치한 후에 상등액을 여과 및 제거하는 제 3단계; 상기 제 3단계에서 여과하고 남은 잔사를 제 2단계와 동일한 방법으로 1회 내지 3회 반복 추출한 후, 여과하고 얻은 잔사를 감압농축 및 건조함으로서 1차 건조 잔사 정제물을 회수하는 제 4단계; 상기 제 4단계에서 수득한 1차 건조 잔사 정제물에 유기용매를 가하여 현탁 및 추출하고 여과한 후에, 수득된 여액을 감압농축 및 건조하여 유기용매 가용성 2차 정제물을 수득하는 제 5단계의 공정을 포함하는 제조공정으로 항암활성이 증진된 후 박 추출 정제물을 제조하는 제조방법(1)을 제공한다.Specifically, the present invention recovers the filtrate obtained by cold extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, reflux extraction, heating extraction and filtration with water, C 1 to C 4 lower alcohols or a mixed solvent thereof in a dry thick foil. A first step of obtaining an extract; The suspension is warmed by adding cold salt water or inorganic salts such as sodium chloride, potassium, magnesium, calcium, aluminum or ammonium, preferably cold water or saturated sodium chloride, to the thick thin crude extract obtained in the first step. Obtaining a second step; A third step of filtering and removing the supernatant after leaving the suspension at cold temperature; Extracting the residue remaining after filtration in the third step once to three times in the same manner as in the second step, and then recovering the primary dry residue purified product by concentrating and drying the residue obtained by filtration under reduced pressure; After the organic solvent was added to the primary dried residue purified product obtained in the fourth step, suspended, extracted and filtered, the filtrate was concentrated under reduced pressure and dried to obtain an organic solvent-soluble secondary purified product. It provides a manufacturing method (1) for preparing a Park extract purified after the anticancer activity is enhanced by a manufacturing process comprising a.

또한 본 발명은 건조 후박에 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매로 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류추출, 가열추출 및 여과하여 수득된 여액을 회수하여 후박 조추출물을 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계에서 수득한 후박 조추출물을 실리카겔에 흡착시켜 상단을 밀폐하고 CaHbOc(여기서 a는 1 내지 6이며, b와 c는 이 유기용매가 각각 화학적으로 안정한 구조를 나타낼 수 있는 숫자)로 대표할 수 있는 용매를 이용하여 겔 컬럼크로마토그래피법을 수행하는 제조공정으로 항암활성이 증진된 후박 추출분획물을 제조하는 제조방법(2)을 제공한다.In addition, the present invention recovers the filtrate obtained by cold extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, reflux extraction, heating extraction and filtration with water, C 1 to C 4 lower alcohols or a mixed solvent thereof in a dry after foil Obtaining a first step; The thick thin extract obtained in the first step was adsorbed onto silica gel to seal the top, and C a H b O c (where a is 1 to 6, b and c can each exhibit a chemically stable structure). It provides a manufacturing method (2) for producing a thick extract extract with enhanced anticancer activity by a gel column chromatography method using a solvent that can be represented by a number).

보다 구체적으로, 본 발명은 후박 중량의 1 내지 30배, 바람직하게는 5 내지 15배, 더욱 바람직하게는 10배의 정제수를 포함한 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 주정을 가하여 1시간 내지 10시간, 바람직하게는 2시간 내지 5시간동안 60℃ 내지 100℃, 바람직하게는 80℃ 내지 100℃에서 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류추출, 가열추출, 바람직하게는 환류추출한 후에, 이 추출액을 50 내지 100 메쉬로 여과하여 여액을 얻는 제 1단계; More specifically, the present invention provides water containing 1 to 30 times, preferably 5 to 15 times, more preferably 10 times purified water, C 1 to C 4 lower alcohols, or a mixed solvent thereof, preferably of a thick thickness. Preferably, alcohol is added for 1 hour to 10 hours, preferably 2 hours to 5 hours at 60 ° C. to 100 ° C., preferably at 80 ° C. to 100 ° C., cold extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, reflux extraction, heating extraction, Preferably, after the reflux extraction, the first step of filtering the extract to 50 to 100 mesh to obtain a filtrate;

상기 제 1단계에서 여과하고 남은 잔사를 제 1단계와 동일한 방법으로 1회 내지 3회 반복 추출하여 얻은 여액을 상기 제 1단계에서 얻은 여액과 혼합하여 혼합액을 수득한 후, 10℃ 내지 80℃, 바람직하게는 30℃ 내지 60℃에서 감압농축 및 건조하는 제 2단계의 공정을 포함하는, 추출공정을 통하여 후박 조추출물(이하, “ MOE”라 함)을 제조할 수 있다.The filtrate obtained by filtering the residue remaining after filtration in the first step 1 to 3 times in the same manner as the first step was mixed with the filtrate obtained in the first step to obtain a mixed solution, 10 ℃ to 80 ℃, Preferably, the crude thin extract (hereinafter referred to as “MOE”) may be prepared through an extraction process including a second step of concentrating and drying under reduced pressure at 30 ° C. to 60 ° C. FIG.

본 발명은 상기 후박 조추출물에 추가적으로 하기의 호환 또는 조합 가능한 추가의 정제 단계를 수행함으로서 마그놀올 또는 호노키올 등 물에 난용성 물질인 리그난 계열의 성분 함량이 다량 함유된 본 발명의 정제물을 수득할 수 있다. The present invention performs a further purification step of the following compatible or combined in addition to the crude thin extract to obtain a purified product of the present invention containing a large amount of lignan-based component content of water-soluble substances such as magnool or honokiol can do.

따라서, 본 발명은 상기 통상적인 조추출물 제조공정에 추가적인 정제 단계의 일례로서, Therefore, the present invention is an example of an additional purification step to the conventional crude extract manufacturing process,

본 발명은 상기에서 수득한 건조 상태의 후박 조추출물 중량의 1 내지 30배, 바람직하게는 5 내지 15배, 더욱 바람직하게는 약 9배의 냉정제수 또는 수포화 염화나트륨, 칼륨, 마그네슘, 칼슘, 알루미늄 또는 암모늄 등의 무기염, 바람직하게는 냉정제수 또는 수포화 염화나트륨을 상기 조추출물에 첨가하여 40℃ 내지 100℃, 바람직하게는 50℃ 내지 70℃, 더욱 바람직하게는 약 60℃로 가온하여 현탁물을 수득하는 제 1단계; 상기 현탁물을 -10℃ 내지 10℃, 바람직하게는 -4℃ 내지 4℃의 냉온에서 약 1시간 내지 48시간, 바람직하게는 10시간 내지 30시간, 더욱 바람직하게는 약 24시간 동안 방치한 후에 상등액을 여과 및 제거하는 제 2단계; 상기 제 2단계에서 여과하고 남은 잔사를 제 1단계와 동일한 방법으로 1회 내지 3회 반복 추출한 후, 여과하고 얻은 잔사를 감압농축 및 건조함으로서 1차 건조 잔사 정제물을 회수하는 제 3단계; 상기 제 3단계에서 수득한 1차 건조 잔사 정제물 중량의 1 내지 30배, 바람직하게는 5 내지 15배, 더욱 바람직하게는 약 10배의 정제수, 메탄올, 에탄올, 디에칠에테르, 초산에칠, 헥산, 클로로포름, 메틸렌클로라이 드, 글리세린 또는 부틸렌글리콜 등의 유기용매, 바람직하게는 에탄올, 디에칠에테르 또는 초산 에칠을 상기 1차 건조 잔사 정제물에 가하여 현탁 및 추출하고 여과한 후에, 수득된 여액을 감압농축 및 건조하여 유기용매 가용성 2차 정제물을 수득하는 제 4단계의 공정을 포함하는 제조공정으로 항암활성이 증진된 후박 추출 정제물을 제조하는 제조방법(1)을 제공한다.The present invention is 1 to 30 times, preferably 5 to 15 times, more preferably about 9 times the weight of the cold thick extract obtained in the dry state obtained above, or saturated sodium chloride, potassium, magnesium, calcium, aluminum Or an inorganic salt such as ammonium, preferably cold water or saturated sodium chloride, is added to the crude extract, and the suspension is heated to 40 ° C to 100 ° C, preferably 50 ° C to 70 ° C, more preferably about 60 ° C. A first step of obtaining; After the suspension is left for about 1 to 48 hours, preferably 10 to 30 hours, more preferably about 24 hours at a cold temperature of -10 ° C to 10 ° C, preferably -4 ° C to 4 ° C Filtering and removing the supernatant; A third step of recovering the first dry residue purified product by concentrating and drying the residue obtained by filtering the residue remaining after filtration in the second step in the same manner as in the first step, after filtration and drying the residue obtained; 1 to 30 times, preferably 5 to 15 times, more preferably about 10 times the purified water, methanol, ethanol, ethyl ether, ethyl acetate, 1 to 30 times the weight of the first dry residue purified product obtained in the third step, Organic solvents such as hexane, chloroform, methylene chloride, glycerin or butylene glycol, preferably ethanol, diethether or ethyl acetate, are added to the above-mentioned first dry residue purified, suspended, extracted and filtered. The manufacturing method (1) which manufactures the thick extract extract which improved anticancer activity by the manufacturing process containing the 4th process of concentrating and drying a filtrate under reduced pressure and obtaining an organic solvent soluble secondary refined | purified product is provided.

또한, 본 발명은 상기 통상적인 조추출물 제조공정에 추가적인 호환 가능한 정제 단계의 일례로서, In addition, the present invention is an example of a purification step further compatible with the conventional crude extract manufacturing process,

상기에서 수득한 건조 상태의 후박 조추출물 중량의 1 내지 30배, 바람직하게는 5 내지 15배, 더욱 바람직하게는 10배의 80 내지 95% 에탄올을 상기 후박 조추출물에 가하여 현탁한 현탁액에 1 내지 5 중량부, 바람직하게는 1 내지 3중량부의 60 내지 100 메쉬(mesh)실리카겔을 추가로 가하여 현탁액을 실리카겔에 흡착시켜 겔 컬럼크로마토그래피법의 로딩용(loading) 시료 준비액을 준비하는 제 1단계; 1 to 30 times, preferably 5 to 15 times, and more preferably 10 times 80 to 95% ethanol of the dried thick extract obtained in the above-mentioned state, which is suspended in the suspension after adding to the crude extract. 5 parts by weight, preferably 1 to 3 parts by weight of 60 to 100 mesh silica gel is further added to adsorb the suspension to silica gel to prepare a sample preparation solution for loading by gel column chromatography ;

상기 제 1단계에서 상기 로딩용 시료 준비액을 디아이온 HP 수지 컬럼 등의 흡착 기전 컬럼, 분배 기전 컬럼 또는 이온교환 기전 컬럼 등의 겔 컬럼 상단에 적재한 후에 여지로 상단을 밀폐하고 CaHbOc(여기서 a는 1 내지 6이며, b와 c는 이 유기용매가 각각 화학적으로 안정한 구조를 나타낼 수 있는 숫자)로 대표할 수 있는 용매, 바람직하게는 1차로 정제수, 2차로 5 내지 20 w/w% 에탄올 용액, 3차로 주정을 유출시키는 단계를 통하여 후박 물 용출 분획물, 에탄올 용액 용출 분획물 및 주정 용출 분획물을 각각 수득하는 제 2단계의 공정을 포함하는 제조공정으로 항암활성이 증진된 후박 추출 분획물을 제조하는 제조방법(2)을 제공한다.Once in the first stage loading the sample preparation liquid for the loading at the top of the gel column of the adsorption mechanism of the column, the distribution mechanism of the column or ion exchange mechanism columns such as Dia-ion HP resin column closed at the top to the room, and C a H b A solvent represented by O c (where a is 1 to 6, b and c are numbers in which each of these organic solvents can represent a chemically stable structure), preferably purified water firstly, 5 to 20 w secondly / w% ethanol solution, the second step of obtaining the ethanol solution eluted fraction, the ethanol solution eluted fraction and the alcohol eluted fraction through the step of distilling the alcohol in the third step Takhu extract with enhanced anticancer activity It provides a preparation method (2) for preparing a fraction.

상기 제조방법으로 수득되는 후박 추출 분획물은 후박의 물 추출물보다 활성성분인 마그놀올 또는 호노키올의 함량이 60배 내지 100배 다량 함유하게 제조됨으로써 1 회 사용량이 적어 용법이 쉽고 효과가 선택적이며 항암활성이 증진됨을 특징으로 한다.The extract obtained from the hupar extract is prepared by containing 60 to 100 times the amount of the active ingredient magnool or honokiol than the extract of the huhu extract, so that the usage amount is small and the effect is easy and the effect is selective. It is characterized by enhanced.

본원에서 정의되는 상기 후박 추출분획물은 후박나무의 뿌리, 줄기, 수피, 잎, 꽃 또는 열매, 바람직하게는 수피(cortex)로부터 수득됨을 특징으로 한다.The thick extract extract as defined herein is characterized in that it is obtained from the root, stem, bark, leaf, flower or fruit, preferably of the cortex, of the pepper bark.

본원에서 정의되는 상기 후박은 당후박나무(Magnolia officinalis Rehd. et Wils) 또는 일본후박나무(Magnolia obovata Thunb)이며, 바람직하게는 당후박나무임을 특징으로 한다.The thick pepper as defined herein is Magnolia officinalis Rehd. Et Wils or Magnolia obovata Thunb, and is characterized in that it is preferably sugar tree.

또한, 본 발명은 상기 제조방법으로 수득된 후박 추출분획물을 유효성분으로 함유하는 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of cancer diseases containing the thick extract extract obtained by the above production method as an active ingredient.

본원에서 정의되는 암 질환은 구체적으로는 방광암, 위암, 대장암, 식도암, 췌장암, 폐암, 유방암, 난소암, 간암, 기관지암, 비인두암, 후두암, 결장암, 뇌암, 전립선암 또는 자궁경부암 등을 포함하는 질환으로, 바람직하게는 방광암, 위암, 대장암, 식도암 또는 췌장암, 보다 바람직하게는 방광암 또는 대장암을 포함한다.Cancer diseases as defined herein specifically include bladder cancer, stomach cancer, colon cancer, esophageal cancer, pancreatic cancer, lung cancer, breast cancer, ovarian cancer, liver cancer, bronchial cancer, nasopharyngeal cancer, laryngeal cancer, colon cancer, brain cancer, prostate cancer or cervical cancer, and the like. Diseases to be preferred include bladder cancer, stomach cancer, colon cancer, esophageal cancer or pancreatic cancer, more preferably bladder cancer or colon cancer.

본 발명의 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 후박 추출분획물을 0.1 내지 50 중량%로 포함한다.The pharmaceutical composition for preventing and treating cancer diseases of the present invention contains the thick extract fraction in an amount of 0.1 to 50% by weight based on the total weight of the composition.

그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.However, the composition as described above is not necessarily limited thereto, and may vary according to the condition of the patient and the type and extent of the disease.

본 발명의 추출분획물 자체는 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다. The extract fraction itself of the present invention is a drug that can be used with confidence even when taken for a long time for the purpose of prevention because there is little toxicity and side effects.

본 발명의 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.The compositions of the present invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents conventionally used in the manufacture of pharmaceutical compositions.

본 발명의 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 추출분획물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출분획물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부 형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.The compositions of the present invention can be used in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral formulations, external preparations, suppositories, and sterile injectable solutions, respectively, according to conventional methods. Carriers, excipients and diluents which may be included in the composition comprising the extract fractions include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium Silicates, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. When formulated, diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and the solid preparations include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose ( It is prepared by mixing sucrose or lactose and gelatin. In addition to simple brothers, lubricants such as magnesium styrate talc are also used. Examples of the liquid preparation for oral use include suspensions, solutions, emulsions, and syrups. In addition to water and liquid paraffin, simple diluents commonly used, various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives and the like may be included . Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. As the non-aqueous solvent and suspending agent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like can be used. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.

본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 추출분획물은 1일 0.5 g/kg 내지 5 g/kg으로, 바람직하게는 1 g/kg 내지 3 g/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.The preferred dosage of the composition of the present invention varies depending on the condition and the weight of the patient, the degree of disease, the type of drug, the route of administration and the period of time, but can be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, the extract fraction of the present invention is preferably administered at 0.5 g / kg to 5 g / kg, preferably 1 g / kg to 3 g / kg per day. The administration may be carried out once a day or divided into several doses. Therefore, the above dosage does not limit the scope of the present invention in any aspect.

본 발명의 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.The composition of the present invention may be administered to mammals such as rats, mice, livestock, humans, and the like in various routes. All modes of administration can be expected, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or intracerebroventricular injection.

또한, 본 발명은 상기의 제조방법으로 수득된 후박 추출분획물을 유효성분으로 함유하는 암 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다. The present invention also provides a health functional food for the prevention and improvement of cancer diseases containing the thick extract extract obtained by the above production method as an active ingredient.

본 발명의 추출분획물을 포함하는 조성물은 암 질환의 예방 및 개선을 위한 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 건조물 또는 그 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.The composition comprising the extract fraction of the present invention can be used in a variety of drugs, foods and beverages for the prevention and improvement of cancer diseases. Examples of the food to which the dried product or the extract of the present invention may be added include various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, health supplements, and the like, and are powders, granules, tablets, capsules, or beverages. Can be used as

본 발명의 추출분획물은 암 질환의 예방 및 개선을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출분획물의 양은 일반적으로 본 발명의 건강식품 조성물은 전체 식품 중량의 1 내지 5 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 10 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다. Extract fractions of the present invention can be added to food or beverages for the purpose of preventing and ameliorating cancer diseases. At this time, the amount of the extract fraction in the food or beverage is generally added to the health food composition of the present invention 1 to 5% by weight of the total food weight, the health beverage composition is 0.02 to 10 g based on 100 ml, preferably Preferably at a ratio of 0.3 to 1 g.

본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 후박 추출분획물을 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스 파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.The health beverage composition of the present invention, in addition to containing the thick extract extract fraction as an essential ingredient in the indicated ratio, there is no particular limitation on the liquid component, and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients, such as ordinary drinks. have. Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as disaccharides such as glucose and fructose such as maltose, sucrose and the like and polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like Sugar, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those described above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (e.g., Rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The proportion of said natural carbohydrates is generally about 1-20 g, preferably about 5-12 g per 100 mL of the composition of the present invention.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above-mentioned composition, the composition of the present invention can be used as a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, coloring agents and intermediates (cheese, chocolate etc.), pectic acid and its salts, Salts, organic acids, protective colloid thickening agents, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated beverages and the like. In addition, the compositions of the present invention may contain flesh for the production of natural fruit juices and vegetable beverages. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical, but is generally selected in the range of 0 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.

본 발명은 항암활성이 향상된 후박 추출분획물의 제조방법 및 그를 함유하는 암 질환의 예방 및 치료를 위한 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 본 발명의 제조방법에 의해 수득된 후박 추출분획물은 유효성분인 마그놀올 또는 호노키올의 함량이 증강되어 암 질환의 예방 및 치료에 유용하게 이용될 수 있다.The present invention relates to a method for preparing a thick extract extract having improved anticancer activity and a composition for preventing and treating a cancer disease containing the same. Specifically, the extract of the thick extract obtained by the method of the present invention is an active ingredient The content of nool or honokiol is enhanced to be useful for the prevention and treatment of cancer diseases.

이하, 본 발명을 비교예, 실시예, 참고예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail by comparative examples, examples, reference examples and experimental examples.

단, 하기 비교예, 실시예, 참고예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 비교예, 실시예, 참고예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.However, the following Comparative Examples, Examples, Reference Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following Comparative Examples, Examples, Reference Examples and Experimental Examples.

비교예 1. 후박 조추출물의 제조Comparative Example 1. Preparation of thick thin crude extract

경동시장에서 구입한 당후박나무의 수피 100g을 건조 및 세절하여 환류추출기에 넣고 1000ml의 주정을 가하여 수욕상에서 3시간동안 환류추출한 후, 이를 100 메쉬(mesh)로 여과하여 여액을 얻었다. 다시, 잔사를 상기와 같은 방법으로 1회 반복추출한 후, 얻은 여액을 상기 여액과 혼합하여 혼합액 약 1600ml을 수득하였고, 60℃ 이하의 온도에서 감압농축 및 건조하여 후박 조추출물 약 10g(5~15g)을 수득하여, 하기 실험예의 시료로 사용하였다(이하, 'MOE'라 명명함).100 g of bark of Danghu-Pak, purchased from Gyeongdong Market, was dried and shredded, put in a reflux extractor, and reflux extracted for 3 hours in a water bath, followed by filtration with 100 mesh to obtain a filtrate. Again, the residue was repeatedly extracted in the same manner as described above, and the filtrate was mixed with the filtrate to obtain about 1600 ml of the mixed solution, and concentrated and dried under reduced pressure at a temperature of 60 ° C. or lower, to about 10 g (5 to 15 g) of a thin crude extract. ) Was obtained and used as a sample of the following experimental example (hereinafter referred to as 'MOE').

실시예 1. 후박 추출분획물의 제조Example 1 Preparation of Thick Extract Extract

1-1. 후박 물 추출분획물의 제조(MOE-WI)1-1. Preparation of Thick Water Extract Fraction (MOE-WI)

상기 비교예에서 수득한 MOE 10g에 냉정제수 90ml을 가하여 60℃로 1 시간동안 가온하여 현탁하고, -4℃ 내지 4℃의 냉온에서 그대로 24시간 동안 방치한 후, 상징액을 여과하여 버리고 얻은 잔사를 상기와 같은 방법으로 2회 반복추출한 후, 여과하여 얻은 잔사를 감압농축 및 건조하여 후박 물 추출분획 건조물 약 0.5~1.5g(평균 1g)을 수득하여, 하기 실험예의 시료로 사용하였다(이하, 'MOE-WI'라 명명함). 90 ml of cold purified water was added to 10 g of the MOE obtained in the comparative example, and the mixture was heated and suspended at 60 ° C. for 1 hour, left at −4 ° C. to 4 ° C. for 24 hours, and the supernatant was filtered off. After repeated extracting twice in the same manner as above, the residue obtained by filtration was concentrated and dried under reduced pressure to obtain about 0.5-1.5 g (1 g average) of the dried thin water extract fraction, which was used as a sample of the following experimental example (' MOE-WI ').

1-2. 후박 염화나트륨-에탄올 추출분획물의 제조(MOE-NaCl-E)1-2. Preparation of Thick Sodium Chloride-Ethanol Extract (MOE-NaCl-E)

상기 비교예에서 수득한 MOE 10g에 물에 포화시킨 염화나트륨을 90ml을 가하여 2회 반복 추출하는 점만 제외하고, 실시예 1-1과 동일한 공정을 수행하여 후박 염화나트륨 추출분획 건조물 1.5g(이하, 'MOE-NaCl'이라 명명함)을 수득한 후, 이 건조물에 15ml의 95 v/v% 에탄올을 가하여 현탁하고 여과한 후, 여액을 다시 감압농축 및 건조하여 후박 염화나트륨-에탄올 추출분획 건조물 0.5~1.5g(평균 1g)을 수득하여, 하기 실험예의 시료로 사용하였다(이하, 'MOE-NaCl-E'라 명명함). The same procedure as in Example 1-1 was performed except that 90 ml of saturated sodium chloride in water was added twice to 10 g of the MOE obtained in the comparative example, followed by 1.5 g of a thin sodium chloride extract fraction (hereinafter, 'MOE 15 ml of 95 v / v% ethanol was added to the dried product, suspended and filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure and dried again to give 0.5 g of 1.5 g of sodium chloride-ethanol extract fraction. (Average 1 g) was obtained and used as a sample for the following experimental example (hereinafter referred to as 'MOE-NaCl-E').

1-3. 후박 염화나트륨-디에칠에테르 추출분획물의 제조(MOE-NaCl-DE)1-3. Preparation of Thickened Sodium Chloride-Diethyl Ether Extract Fraction (MOE-NaCl-DE)

상기 실시예 1-2에서 수득한 MOE-NaCl 10g에 100ml의 디에칠에테르를 가하여 현탁하고 여과한 후, 여액을 다시 감압농축 및 건조하여 후박 염화나트륨-디에칠에테르 추출분획 건조물 0.5~1.5g(평균 1g)을 수득하여, 하기 실험예의 시료로 사용하였다(이하, 'MOE-NaCl-DE'라 명명함).100 g of dieth ether was added to 10 g of MOE-NaCl obtained in Example 1-2, suspended, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure and dried again to give 0.5 g of 1.5 g of sodium chloride-dimethyl ether extract fraction (average). 1 g) was obtained and used as a sample for the following experimental example (hereinafter referred to as 'MOE-NaCl-DE').

1-4. 후박 염화나트륨-초산에칠 추출분획물의 제조(MOE-NaCl-EA)1-4. Preparation of Thickened Sodium Chloride-Ethyl Acetate Extract (MOE-NaCl-EA)

상기 실시예 1-2에서 수득한 MOE-NaCl 10g에 100ml의 초산에칠을 가하는 점만 제외하고, 실시예 1-3과 동일한 공정을 수행하여 후박 염화나트륨-초산에칠 추출분획 건조물 0.5~1.5g(평균 1g)을 수득하여, 하기 실험예의 시료로 사용하였다(이하, 'MOE-NaCl-EA'라 명명함).Except that 100 ml of ethyl acetate was added to 10 g of MOE-NaCl obtained in Example 1-2, 0.5-1.5 g of a dried sodium chloride-ethyl acetate extracted fraction was dried in the same manner as in Example 1-3. An average of 1 g) was obtained and used as a sample of the following experimental example (hereinafter referred to as 'MOE-NaCl-EA').

1-5. 후박 디아이온 분획물의 제조1-5. Preparation of Thick Diion Fractions

디아이온 HP-20(미쓰비시케미칼, 일본) 약 500g에 정제수 500g을 가하여 상온에서 24시간 동안 방치한 후, 이 전체량을 내경 5cm, 길이 100cm의 컬럼에 충진하여 컬럼을 준비하였다.About 500 g of DIION HP-20 (Mitsubishi Chemical, Japan) was added to 500 g of purified water and left at room temperature for 24 hours, after which the entire amount was filled in a column having an inner diameter of 5 cm and a length of 100 cm to prepare a column.

상기 비교예에서 수득한 MOE 10g에 95% 에탄올 100ml를 가하여 용해시킨 액체에 실리카겔(60~100메쉬) 10g를 가하여 현탁한 후, 이를 감압농축 및 건조하여 수득한 건조물 10g을 상기에서 준비한 컬럼 상단에 부은 후, 여지로 상단을 밀폐하고 정제수 1L를 조심스럽게 부어 유출시켜 후박 물 분획물을 수득하였고, 다시 10%(w/w) 에탄올 1L를 유출시켜 후박 10%(w/w) 에탄올 분획물을 수득하였으며, 계속해서 주정 2L를 유출시켜 주정 분획물을 수득하였다. 각각의 분획물을 감압농축 및 건조하여 후박 디아이온 물 분획 건조물 1~4g, 후박 디아이온 10%(w/w) 에탄올 분획 건조물 1~4g 및 후박 디아이온 주정 분획 건조물 2~8g을 수득하여, 하기 실험예의 시료로 사용하였다(이하, 후박 디아이온 물 분획 건조물은 ‘MOE-HP-W’, 후박 디아이온 10%(w/w) 에탄올 분획 건조물은 ‘MOE-HP-E’및 후박 디아이온 주정 분획 건조물은 ‘MOE-HP-주정’이라 명명함). 10 g of silica gel (60-100 mesh) was added to the liquid dissolved by adding 100 ml of 95% ethanol to 10 g of the MOE obtained in the comparative example, and then suspended and concentrated under reduced pressure and dried to 10 g of the dried product obtained above. After pouring, the top was closed and filtered and carefully poured 1 L of purified water to obtain a thick thin water fraction, and again, 1 liter of 10% (w / w) ethanol was spilled to obtain a thick 10% (w / w) ethanol fraction. Then, 2L of alcohol was distilled off to obtain a alcohol fraction. Each fraction was concentrated under reduced pressure and dried to obtain 1-4 g of thick Dion water fraction dried product, 1-4 g of Thick thin diion 10% (w / w) ethanol fraction dried product, and 2-8 g of Thick thin diion alcohol fraction dried product. It was used as a sample of the experimental example (hereinafter, the thick thin diion water fraction dried 'MOE-HP-W', the thick thin diion 10% (w / w) ethanol fraction dried 'MOE-HP-E' and thick thin diion alcohol Fraction dry matter is named 'MOE-HP- alcohol'.

참고예 1. 암세포주 준비Reference Example 1. Preparation of Cancer Cell Line

방광암세포주(5637, KCLB 30009), 위암세포주(MKN-74, KCLB 80104), 대장암세포주(HCT 116, KCLB 10247), 식도암세포(HET-1A, ATCC ; CRL-2692) 및 췌장암세 포주(PANC-1, KCLB 21469)를 하기 실험에 사용하였다.Bladder cancer cell line (5637, KCLB 30009), gastric cancer cell line (MKN-74, KCLB 80104), colon cancer cell line (HCT 116, KCLB 10247), esophageal cancer cell (HET-1A, ATCC; CRL-2692) and pancreatic cancer cell line (PANC -1, KCLB 21469) was used for the following experiment.

실험예 1. 후박 추출분획물의 유효성분 함량 측정Experimental Example 1. Determination of the active ingredient content of the thick extract fraction

상기 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출분획물의 에탄올 검액(1→100)을 멤브레인필터로 여과하여 하기의 고속액체크로마토그래피 조건에 따라 유효성분의 함량을 측정하였으며, 실험결과를 도 1 내지 도 7 및 표 1에 나타내었다.The ethanol sample solution (1 → 100) of the thick extract fraction obtained in Comparative Examples and Examples was filtered through a membrane filter, and the content of the active ingredient was measured according to the following high performance liquid chromatography conditions. 7 and Table 1 are shown.

<고속액체크로마토그래피 조건><High Speed Liquid Chromatography Conditions>

컬럼: Agilent C18, 4.6mm id × 150mmColumn: Agilent C18, 4.6 mm id × 150 mm

이동상: 아세토니트릴:물:초산 = 50:50:1(유속 1.0 ml/min)Mobile phase: acetonitrile: water: acetic acid = 50: 50: 1 (flow rate 1.0 ml / min)

검출기: 289nm 흡광도 검출기 Detector: 289nm Absorbance Detector

실험결과, 표 1에 나타난 바와 같이, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-W 및 MOE-HP-E를 제외한 모든 실험군에서 비교예에서 수득한 MOE보다 마그놀올 및 호노키올 함량이 유효성있게 증가하였으며, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-주정에서 마그놀올 및 호노키올 함량이 가장 많음을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in Table 1, in all experimental groups except MOE-HP-W and MOE-HP-E obtained in Example 1-5, the magolol and honokiol content was more effective than the MOE obtained in the comparative example. In the MOE-HP- alcohol obtained in Example 1-5, it was confirmed that the highest content of magnool and honokiol.

실험군Experimental group 마그놀올(mg/g)Magnol (mg / g) 호노키올(mg/g)Honokiol (mg / g) 합계(%)b) Total (%) b) 비교예 후박 에탄올 조추출물 MOEComparative Example Thick ethanol crude extract MOE 4.8 ± 1.2a) 4.8 ± 1.2 a) 2.3 ± 0.8  2.3 ± 0.8 3.9 ~ 8.23.9 to 8.2 실시예 1-1 후박 물 추출분획물 MOE-WIExample 1-1 Thick Water Extract Fraction MOE-WI 312.6 ± 13.4 312.6 ± 13.4 212.3 ± 10.9212.3 ± 10.9 50.2 ~ 63.250.2 ~ 63.2 실시예 1-2 후박 염화나트륨-에탄올 추출분획물 MOE-NaCl-EExample 1-2 Thickening Sodium Chloride-Ethanol Extract Fraction MOE-NaCl-E 314.3 ± 14.1 314.3 ± 14.1 232.3 ± 21.3232.3 ± 21.3 51.3 ~ 59.451.3 to 59.4 실시예 1-3 후박 염화나트륨-디에칠에테르 추출분획물 MOE-NaCl-DEExample 1-3 Thick Sodium Chloride-Diethyl Ether Extract Fraction MOE-NaCl-DE 315.8 ± 11.8 315.8 ± 11.8 242.3 ± 24.5242.3 ± 24.5 52.6 ~ 60.152.6 to 60.1 실시예 1-4 후박 염화나트륨-초산에칠 추출분획물 MOE-NaCl-EAExample 1-4 Thickening Sodium Chloride-Ethyl Acetate Extract Fraction MOE-NaCl-EA 354.8 ± 14.7 354.8 ± 14.7 232.3 ± 15.1232.3 ± 15.1 48.9 ~ 62.348.9 to 62.3 실시예 1-5 후박 디아이온 물 분획물 MOE-HP-WExample 1-5 Thick Diion Water Fraction MOE-HP-W 00 00 0.1 이하0.1 or less 실시예 1-5 후박 디아이온 10%(w/w) 에탄올 분획물 MOE-HP-EExample 1-5 Thick Diion 10% (w / w) Ethanol Fraction MOE-HP-E 3.8 ± 0.2   3.8 ± 0.2 0.5 ± 0.10.5 ± 0.1 3.9 ~ 4.83.9 to 4.8 실시예 1-5 후박 디아이온 주정 분획물 MOE-HP-주정 Example 1-5 Thick Diion Alcohol Fraction MOE-HP-Liquor 534.8 ± 31.2 534.8 ± 31.2 322.3 ± 23.8322.3 ± 23.8 79.6 ~ 90.379.6 to 90.3 a) 각 분획물 중 호노키올과 마그놀올의 함량은 각 군당 3개의 시료에 대한 평균 ± 표준편차 값으로 나타내었다.
b) 건조물 중 마그놀올 및 호노키올의 합산 함량
a) The content of honokiol and magnool in each fraction is expressed as mean ± standard deviation value for three samples in each group.
b) the combined content of magnool and honokiol in the dry matter

실험예 2. 후박 추출분획물의 세포독성 시험(MTT 분석)Experimental Example 2. Cytotoxicity test (MTT assay) of thick extract fraction

상기 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출분획물들을 문헌(Fei Chen et al., World J Gastroenterol, 10(23), pp.3459-3463, 2004)에 기재된 방법에 따라, MTT assay로 세포독성을 측정하였다.The thick extract fractions obtained in Comparative Examples and Examples were subjected to MTT assay according to the method described in Fei Chen et al., World J Gastroenterol, 10 (23) , pp.3459-3463, 2004. Measured.

측정 결과, 도 8 및 표 2에 나타난 바와 같이, 모든 암세포주에 대하여 평균 저해량(IC50(㎍/ml)을 산출하여 표시하였으며, 비교예에서 수득한 MOE, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-W 및 MOE-HP-E를 제외한 모든 군에서 순수화합물 호노키올 또는 마그놀올보다 IC50이 2배 가량 적게 나타나, 분획물 중 함유하는 호노키올과 마그놀올의 상승 효과로 기대되는 암세포독성을 나타내어 세포독성 효과가 상승되었음을 확인하였다.As a result of the measurement, as shown in FIG. 8 and Table 2, the average inhibitory amount (IC50 (μg / ml)) was calculated and displayed for all cancer cell lines, and the MOE obtained in the comparative example and the MOE obtained in Examples 1-5. In all groups except -HP-W and MOE-HP-E, IC50 was twice as low as that of pure compound Honokiol or Magnool, showing the anticancer toxicity expected by synergistic effects of Honokiol and Magnool in fractions. It was confirmed that the cytotoxic effect was elevated.

IC50(㎍/ml)IC50 (μg / ml) 방광암세포Bladder cancer cells 위암세포Stomach cancer cell 대장암세포Colorectal cancer cells 식도암세포Esophageal Cancer Cells 췌장암세포Pancreatic cancer cell 비교예 MOEComparative Example MOE 100100 50.050.0 50.050.0 50.050.0 100100 실시예 1-1 MOE-WIExample 1-1 MOE-WI 2.52.5 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 2.52.5 실시예 1-2 MOE-NaCl-EExample 1-2 MOE-NaCl-E 2.52.5 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 2.52.5 실시예 1-3 MOE-NaCl-DEExample 1-3 MOE-NaCl-DE 2.52.5 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 2.52.5 실시예 1-4 MOE-NaCl-EAExample 1-4 MOE-NaCl-EA 2.52.5 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 2.52.5 실시예 1-5 MOE-HP-WExample 1-5 MOE-HP-W > 100.0> 100.0 > 100.0> 100.0 > 100.0> 100.0 > 100.0> 100.0 > 100.0> 100.0 실시예 1-5 MOE-HP-EExample 1-5 MOE-HP-E > 100.0> 100.0 > 100.0> 100.0 > 100.0> 100.0 > 100.0> 100.0 > 100.0> 100.0 실시예 1-5 MOE-HP-주정 Example 1-5 MOE-HP-Alcohol 1.01.0 0.50.5 0.50.5 0.50.5 1.01.0 호노키올Honokiol 10.010.0 25.025.0 25.025.0 25.025.0 10.010.0 마그놀올Magnool 10.010.0 20.020.0 20.020.0 20.020.0 10.010.0 호노키올+마그놀올
혼합물(2:1)
Honokiol + Magnool
Mixture (2: 1)
5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0

실험예 3. 후박 추출분획물의 방광암 발생 억제 실험Experimental Example 3 Inhibition of Bladder Cancer Production of Thick Extract

상기 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출분획물들의 방광암 발생 억제 효과를 알아보기 위하여 문헌에 기재되어 있는 방법(Daisuke S. et al., Int. J. Urology, 10, pp.160-166, 2003)을 이용하여 하기와 같은 실험을 하였다.Method described in the literature to investigate the inhibitory effect of bladder cancer development of the thick extract fractions obtained in Comparative Examples and Examples (Daisuke S. et al., Int. J. Urology, 10 , pp . 160-166, 2003 ) Was performed as follows.

ICR 마우스(웅성, 25~30g)를 군당 5마리씩으로 하여 0.05% N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) Nitrosamine(BBN) 수용액 0.5ml을 매일 1회씩 8주간 경구투여(Daisuke S. et al., Int. J. Urology, 10, pp.160-166, 2003)한 후, 각 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출 분획물을 BBN 투여 12시간 후에 매일 1회씩 주정추출물로서 100mg/kg에 해당하는 양을 각각 8주간 경구투여하여 그 생존율을 조사하였다. 대조군으로는 BBN만 투여하여 실험하였다.ICR mice (male, 25-30 g) were used in groups of 5 per group and 0.5 ml of 0.05% N-butyl-N- (4-hydroxybutyl) Nitrosamine (BBN) aqueous solution was orally administered once daily for 8 weeks (Daisuke S. et al. , Int. J. Urology, 10 , pp . 160-166, 2003), and the thick extract fractions obtained in each of the comparative examples and examples correspond to 100 mg / kg once as a spirit extract once daily after 12 hours of BBN administration. Sheep were orally administered for 8 weeks each to check their survival. As a control group, only BBN was administered.

실험결과, 표 3에 나타난 바와 같이, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-W 및 MOE-HP-E를 제외한 모든 군에서 대조군과 비교하여 생존율이 증가하였으며, 특히, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-주정은 BBN를 투여하지 않은 정상군과 비슷한 수준의 생존율을 나타냄을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in Table 3, in all groups except MOE-HP-W and MOE-HP-E obtained in Example 1-5, the survival rate was increased compared to the control, in particular, Example 1-5 MOE-HP-alk obtained at was able to confirm that the survival rate similar to the normal group was not administered BBN.

시간(주)                             Time (week) 00 1One 22 33 44 55 66 77 88 정상군Normal 55 55 55 55 55 55 55 55 55 BBN
투여군
BBN
Administration group
대조군Control 55 55 55 44 44 33 22 00 00
비교예 MOEComparative Example MOE 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-1 MOE-WIExample 1-1 MOE-WI 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-2 MOE-NaCl-EExample 1-2 MOE-NaCl-E 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-3 MOE-NaCl-DEExample 1-3 MOE-NaCl-DE 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-4 MOE-NaCl-EAExample 1-4 MOE-NaCl-EA 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-5 MOE-HP-WExample 1-5 MOE-HP-W 55 55 55 44 44 33 22 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-EExample 1-5 MOE-HP-E 55 55 55 44 44 33 22 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-주정 Example 1-5 MOE-HP-Alcohol 55 55 55 55 55 55 55 55 55 호노키올Honokiol 55 55 55 55 44 44 44 44 33 마그놀올Magnool 55 55 55 55 44 44 44 44 33 호노키올+마그놀올 혼합물(2:1)Honokiol + magnool mixture (2: 1) 55 55 55 55 44 44 44 44 33

실험예 4. 후박 추출분획물의 위암 발생 억제 실험Experimental Example 4. Suppression of Gastric Cancer Development of Thick Extract Fraction

상기 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출분획물들의 위암 발생 억제 효과를 알아보기 위하여 문헌에 기재되어 있는 방법(P J Hu et al., Gut, 53, pp.195-200, 2004)을 이용하여 하기와 같은 실험을 하였다.In order to determine the effect of inhibiting gastric cancer development of the thick extract fractions obtained in Comparative Examples and Examples, PJ Hu et al., Gut, 53 , pp.195-200, 2004 The same experiment was performed.

Wistar 랫트(웅성, 250~300g)를 군당 5마리씩으로 하여 N-methyl-N-9-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG, 100 ug/ml)을 녹인 3% 염화나트륨수용액 1ml을 매일 1회씩 8주간 경구투여한 후, 각 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출 분획물을 MNNG 투여 12시간 후에 매일 1회씩 주정추출물로서 100mg/kg(랫트체중)에 해당하는 양을 각각 8주간 경구투여하여 그 생존율을 조사하였다. 대조군으로는 MNNG만 투여하여 실험하였다.Oral Wistar rats (Woong, 250-300g) of 5 rats per group for 8 weeks with 1 ml of 3% sodium chloride solution dissolved in N-methyl-N-9-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG, 100 ug / ml) once daily. After administration, the thick extract fractions obtained in each Comparative Example and Example were administered orally at a dose of 100 mg / kg (weight of the rat) for 8 weeks, once every 12 hours after MNNG administration for 8 weeks to examine their survival rate. It was. As a control group, only MNNG was administered.

실험결과, 표 4에 나타난 바와 같이, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-W 및 MOE-HP-E를 제외한 모든 군에서 대조군과 비교하여 생존율이 증가하였으며, 특히, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-주정은 MNNG를 투여하지 않은 정상군과 비슷한 수준의 생존율을 나타냄을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in Table 4, in all groups except MOE-HP-W and MOE-HP-E obtained in Example 1-5, the survival rate was increased compared to the control, in particular, Example 1-5 MOE-HP-alk obtained at was able to confirm that the survival rate similar to the normal group was not administered MNNG.

시간(주)                             Time (week) 00 1One 22 33 44 55 66 77 88 정상군Normal 55 55 55 55 55 55 55 55 55 MNNG
투여군
MNNG
Administration group
대조군Control 55 55 55 44 44 33 22 00 00
비교예 MOEComparative Example MOE 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-1 MOE-WIExample 1-1 MOE-WI 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-2 MOE-NaCl-EExample 1-2 MOE-NaCl-E 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-3 MOE-NaCl-DEExample 1-3 MOE-NaCl-DE 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-4 MOE-NaCl-EAExample 1-4 MOE-NaCl-EA 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-5 MOE-HP-WExample 1-5 MOE-HP-W 55 55 55 44 44 33 22 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-EExample 1-5 MOE-HP-E 55 55 55 44 44 33 22 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-주정 Example 1-5 MOE-HP-Alcohol 55 55 55 55 55 55 55 55 55 호노키올Honokiol 55 55 55 55 44 44 44 44 33 마그놀올Magnool 55 55 55 55 44 44 44 44 33 호노키올+마그놀올 혼합물(2:1)Honokiol + magnool mixture (2: 1) 55 55 55 55 44 44 44 44 33

실험예 5. 후박 추출분획물의 대장암 발생 억제 실험Experimental Example 5. Experiment to inhibit colon cancer development

상기 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출분획물들의 대장암 발생 억제 효과를 알아보기 위하여 문헌에 기재되어 있는 방법(심재영 등, Journal of Korean Association of Cancer Prevention, 9(4), pp.267-273, 2004)을 이용하여 하기와 같은 실험을 하였다.The method described in the literature to investigate the inhibitory effect of colorectal cancer development of the thick extract fractions obtained in Comparative Examples and Examples (Jae Jae Young et al., Journal of Korean Association of Cancer Prevention , 9 (4) , pp.267-273 , 2004).

위스타 랫트(웅성, 250~300g)를 군당 5마리씩으로 하여 1,2-Dimethylhydrazine(DMH) 수용액 20mg/kg을 매일 1회씩 8주간 피하주사한 후, 각 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출 분획물을 DMH 투여 12시간 후에 매일 1회씩 주정추출물로서 100mg/kg(랫트체중)에 해당하는 양을 각각 8주간 경구투여하여 그 생존율을 조사하였다. 대조군으로는 DMH만 투여하여 실험하였다. Wistar rats (Woongseong, 250-300g) were used in 5 rats per group, and 20 mg / kg of 1,2-dimethylhydrazine (DMH) aqueous solution was injected subcutaneously once every 8 weeks for 8 weeks, followed by the extraction of the pepper paste obtained in each Comparative Example and Example. Fractions were administered orally at a dose of 100 mg / kg (weight of the rat) for 8 weeks, once daily, 12 hours after DMH administration, and their viability was examined. Experiment was performed by administration of only DMH as a control.

실험결과, 표 5에 나타난 바와 같이, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-W 및 MOE-HP-E를 제외한 모든 군에서 대조군과 비교하여 생존율이 증가하였으며, 특히, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-주정은 DMH를 투여하지 않은 정상군과 비슷한 수준의 생존율을 나타냄을 확인할 수 있었다.As a result, as shown in Table 5, in all groups except MOE-HP-W and MOE-HP-E obtained in Example 1-5, the survival rate was increased compared to the control, in particular, Example 1-5 MOE-HP-alk obtained at was able to confirm that the survival rate similar to the normal group did not receive DMH.

시간(주)                             Time (week) 00 1One 22 33 44 55 66 77 88 정상군Normal 55 55 55 55 55 55 55 55 55 DMH
투여군
DMH
Administration group
대조군Control 55 55 55 44 44 33 22 00 00
비교예 MOEComparative Example MOE 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-1 MOE-WIExample 1-1 MOE-WI 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-2 MOE-NaCl-EExample 1-2 MOE-NaCl-E 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-3 MOE-NaCl-DEExample 1-3 MOE-NaCl-DE 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-4 MOE-NaCl-EAExample 1-4 MOE-NaCl-EA 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-5 MOE-HP-WExample 1-5 MOE-HP-W 55 55 55 44 44 33 22 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-EExample 1-5 MOE-HP-E 55 55 55 44 44 33 22 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-주정 Example 1-5 MOE-HP-Alcohol 55 55 55 55 55 55 55 55 55 호노키올Honokiol 55 55 55 55 44 44 44 44 33 마그놀올Magnool 55 55 55 55 44 44 44 44 33 호노키올+마그놀올 혼합물(2:1)Honokiol + magnool mixture (2: 1) 55 55 55 55 44 44 44 44 33

실험예 6. 후박 추출분획물의 식도암 발생 억제 실험Experimental Example 6. Inhibition test of esophageal cancer in the extract of hubac extract

상기 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출분획물들의 식도암 발생 억제 효과를 알아보기 위하여 문헌에 기재되어 있는 방법(Xiao-Han Tang et al., Clinical Cancer Research, 10, pp.301-13, January 1, 2004)을 이용하여 하기와 같은 실험을 하였다.The method described in the literature to investigate the inhibitory effect of esophageal cancer development of the thick extract fractions obtained in the comparative examples and examples (Xiao-Han Tang et al., Clinical Cancer Researc h, 10 , pp.301-13, January 1, 2004) was performed as follows.

ICR 마우스(웅성, 25~30g)를 군당 5마리씩으로 하여 4-nitroquinoline 1-oxide(NQO)를 폴리에칠렌글리콜 400에 10 w/w %가 되게 녹인 다음, 다시 물로 희석하여 5 mg/ml으로 만든 수용액을 8주간 음수대용으로 투여한 후, 각 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출 분획물을 매일 1회씩 주정추출물로서 100mg/kg(마우스체중)에 해당하는 양을 각각 8주간 경구투여하여 그 생존율을 조사하였다. 대조군으로는 NQO만 투여하여 실험하였다. Dissolve 4-nitroquinoline 1-oxide (NQO) in polyethylene glycol 400 to 10 w / w% with 5 ICR mice (male, 25-30 g) per group, and then dilute with water to make 5 mg / ml. Was administered as a negative substitute for 8 weeks, and the thick extract fractions obtained in each Comparative Example and Example were orally administered at a dose of 100 mg / kg (mouse body weight) for 8 weeks each as an alcoholic extract once daily to improve the survival rate. Investigate. As a control group, only NQO was administered.

실험결과, 표 6에 나타난 바와 같이, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-W 및 MOE-HP-E를 제외한 모든 군에서 대조군과 비교하여 생존율이 증가하였으며, 특히, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-주정은 NQO를 투여하지 않은 정상군과 비슷한 수준의 생존율을 나타냄을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in Table 6, in all groups except MOE-HP-W and MOE-HP-E obtained in Example 1-5, the survival rate was increased compared to the control, in particular, Example 1-5 MOE-HP-alk obtained at was found to have a similar survival rate as the normal group was not administered NQO.

시간(주)                             Time (week) 00 1One 22 33 44 55 66 77 88 정상군Normal 55 55 55 55 55 55 55 55 55 NQO
투여군
NQO
Administration group
대조군Control 55 55 55 44 44 33 22 00 00
비교예 MOEComparative Example MOE 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-1 MOE-WIExample 1-1 MOE-WI 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-2 MOE-NaCl-EExample 1-2 MOE-NaCl-E 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-3 MOE-NaCl-DEExample 1-3 MOE-NaCl-DE 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-4 MOE-NaCl-EAExample 1-4 MOE-NaCl-EA 55 55 55 55 44 44 44 44 33 실시예 1-5 MOE-HP-WExample 1-5 MOE-HP-W 55 55 55 44 44 33 22 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-EExample 1-5 MOE-HP-E 55 55 55 44 44 33 22 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-주정 Example 1-5 MOE-HP-Alcohol 55 55 55 55 55 55 55 55 55 호노키올Honokiol 55 55 55 55 44 44 44 44 33 마그놀올Magnool 55 55 55 55 44 44 44 44 33 호노키올+마그놀올 혼합물(2:1)Honokiol + magnool mixture (2: 1) 55 55 55 55 44 44 44 44 33

실험예 7. 후박 추출분획물의 췌장암 발생 억제 실험Experimental Example 7. Inhibition test of pancreatic cancer development

상기 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출분획물들의 췌장암 발생 억제 효과를 알아보기 위하여 문헌에 기재되어 있는 방법(Birgit Hotz et al., J Gastrointest Surg, 12, pp.900-906, 2008)을 이용하여 하기와 같은 실험을 하였다.In order to determine the effect of inhibiting pancreatic cancer development of the thick extract fractions obtained in Comparative Examples and Examples, the method described in the literature (Birgit Hotz et al., J Gastrointest Surg, 12 , pp.900-906, 2008) was used. The experiment was as follows.

ICR 마우스(웅성, 25-30g)를 군당 5마리씩으로 하여 췌장암세포주(PANC-1, KCLB 21469)를 인산염등장액에 현탁하여 개체 당 107개의 세포를 측부에 복강주사하였으며, 각 비교예 및 실시예에서 수득한 후박 추출 분획물을 매일 1회씩 주정추출물로서 100mg/kg(마우스체중)에 해당하는 양을 각각 8주간 경구투여하여 그 생존율을 조사하였다. 대조군으로는 암세포만 이식하여 실험하였다.Pancreatic cancer cell lines (PANC-1, KCLB 21469) were suspended in phosphate isoform using 5 ICR mice (male, 25-30 g) per group, and 10 7 cells per subject were intraperitoneally injected into the flanks, Comparative Examples and Examples. The vitreous extract fractions obtained at were administered once daily to oral doses of 100 mg / kg (mouse body weight) for 8 weeks, and their viability was examined. As a control, only cancer cells were transplanted and tested.

실험결과, 표 7에 나타난 바와 같이, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-W 및 MOE-HP-E를 제외한 모든 군에서 대조군과 비교하여 생존율이 증가하였으며, 특히, 실시예 1-5에서 수득한 MOE-HP-주정은 췌장암세포를 이식하지 않은 정상군과 비슷한 수준의 생존율을 나타냄을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in Table 7, in all groups except MOE-HP-W and MOE-HP-E obtained in Example 1-5, the survival rate was increased compared to the control, in particular, Example 1-5 The MOE-HP- alcohol obtained in the experiment showed a similar survival rate as that of the normal group without transplanting pancreatic cancer cells.

시간(주)                             Time (week) 00 1One 22 33 44 55 66 77 88 정상군Normal 55 55 55 55 55 55 55 55 55 암세포
이식군
Cancer cell
Transplant group
대조군Control 55 55 55 44 44 33 22 00 00
비교예 MOEComparative Example MOE 55 55 55 55 44 33 33 33 22 실시예 1-1 MOE-WIExample 1-1 MOE-WI 55 55 55 55 44 33 33 33 22 실시예 1-2 MOE-NaCl-EExample 1-2 MOE-NaCl-E 55 55 55 55 44 33 33 33 22 실시예 1-3 MOE-NaCl-DEExample 1-3 MOE-NaCl-DE 55 55 55 55 44 33 33 33 22 실시예 1-4 MOE-NaCl-EAExample 1-4 MOE-NaCl-EA 55 55 55 55 44 33 33 33 22 실시예 1-5 MOE-HP-WExample 1-5 MOE-HP-W 55 55 55 44 44 33 22 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-EExample 1-5 MOE-HP-E 55 55 55 44 33 33 1One 00 00 실시예 1-5 MOE-HP-주정 Example 1-5 MOE-HP-Alcohol 55 55 55 55 55 55 55 55 55 호노키올Honokiol 55 55 55 55 44 33 33 33 22 마그놀올Magnool 55 55 55 55 44 33 33 33 22 호노키올+마그놀올 혼합물(2:1)Honokiol + magnool mixture (2: 1) 55 55 55 55 44 33 33 33 33

하기에 본 발명의 후박 추출분획물을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, an example of the formulation of a composition including the thick extract fraction of the present invention will be described, but the present invention is not intended to limit the present invention, but is only intended to be described in detail.

제제예 1. 산제의 제조Formulation Example 1 Preparation of Powder

MOE-HP-주정 20 mgMOE-HP-Alcohol 20 mg

유당 100 mgLactose 100 mg

탈크 10 mgTalc 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.The above ingredients are mixed and filled in an airtight cloth to prepare a powder.

제제예 2. 정제의 제조Formulation Example 2 Preparation of Tablet

MOE-HP-주정 10 mgMOE-HP-Alcohol 10 mg

옥수수전분 100 mgCorn starch 100 mg

유당 100 mgLactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg2 mg magnesium stearate

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.After mixing the above components, tablets are prepared by tableting according to a conventional method for preparing tablets.

제제예 3. 캅셀제의 제조 Formulation Example 3 Preparation of Capsule

MOE-HP-주정 10 mgMOE-HP-Alcohol 10 mg

결정성 셀룰로오스 3 mg3 mg of crystalline cellulose

락토오스 14.8 mgLactose 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mgMagnesium Stearate 0.2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.According to a conventional capsule preparation method, the above ingredients are mixed and filled into gelatin capsules to prepare capsules.

제제예 4. 주사제의 제조Formulation Example 4 Preparation of Injection

MOE-HP-주정 10 mgMOE-HP-Alcohol 10 mg

만니톨 180 mgMannitol 180 mg

주사용 멸균 증류수 2974 mgSterile sterilized water for injection 2974 mg

Na2HPO4,12H2O 26 mgNa2HPO4,12H2O 26 mg

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.According to the conventional method for preparing an injection, the amount of the above ingredient is prepared per ampoule (2 ml).

제제예 5. 액제의 제조Formulation Example 5 Preparation of Liquid

MOE-HP-주정 20 mgMOE-HP-Alcohol 20 mg

이성화당 10 g10 g of isomerized sugar

만니톨 5 g5 g of mannitol

정제수 적량Purified water

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.After dissolving each component in purified water according to the usual method of preparing a liquid solution, adding lemon flavor appropriately, mixing the above components, adding purified water, adjusting the whole to 100 ml by adding purified water, and then filling into a brown bottle. The solution is prepared by sterilization.

제제예 6. 건강 식품의 제조Formulation Example 6 Preparation of Healthy Food

MOE-HP-주정 1000 ㎎MOE-HP-Alcohol 1000 mg

비타민 혼합물 적량Vitamin mixture proper amount

비타민 A 아세테이트 70 ㎍70 μg of Vitamin A Acetate

비타민 E 1.0 ㎎Vitamin E 1.0 mg

비타민 B1 0.13 ㎎Vitamin B1 0.13 mg

비타민 B2 0.15 ㎎Vitamin B2 0.15 mg

비타민 B6 0.5 ㎎Vitamin B6 0.5 mg

비타민 B12 0.2 ㎍0.2 μg of vitamin B12

비타민 C 10 ㎎Vitamin C 10 mg

비오틴 10 ㎍10 μg biotin

니코틴산아미드 1.7 ㎎Nicotinic Acid 1.7 mg

엽산 50 ㎍50 μg folic acid

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎Calcium Pantothenate 0.5mg

무기질 혼합물 적량Mineral mixture quantity

황산제1철 1.75 ㎎Ferrous Sulfate 1.75 mg

산화아연 0.82 ㎎0.82 mg of zinc oxide

탄산마그네슘 25.3 ㎎Magnesium carbonate 25.3 mg

제1인산칼륨 15 ㎎15 mg of potassium phosphate monobasic

제2인산칼슘 55 ㎎Secondary calcium phosphate 55 mg

구연산칼륨 90 ㎎Potassium citrate 90 mg

탄산칼슘 100 ㎎100 mg of calcium carbonate

염화마그네슘 24.8 ㎎Magnesium chloride 24.8 mg

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.Although the composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixture is comparatively mixed with a composition suitable for health food as a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional method for producing healthy foods , Granules can be prepared and used in the manufacture of health food compositions according to conventional methods.

제제예 7. 건강 음료의 제조Formulation Example 7 Preparation of Healthy Drink

MOE-HP-주정 1000 ㎎MOE-HP-Alcohol 1000 mg

구연산 1000 ㎎Citric acid 1000 mg

올리고당 100 g100 g of oligosaccharide

매실농축액 2 gPlum concentrate 2 g

타우린 1 gTaurine 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖Purified water was added to a total of 900 ml

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다. The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was heated at 85 DEG C for about 1 hour with stirring, and the solution thus prepared was filtered to obtain a sterilized 2-liter container, which was sealed and sterilized, &Lt; / RTI &gt;

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.Although the composition ratio is a mixture of the components suitable for the preferred beverage as a preferred embodiment, the blending ratio may be arbitrarily varied according to the regional and national preferences such as the demand level, the demanding country, and the intended use.

[이 발명을 지원한 국가연구개발사업][National R & D project supporting this invention]

[과제고유번호][Task unique number]

1001832710018327

[부처명][Name of Buddha]

지식경제부Ministry of Knowledge Economy

[연구사업명][Name of research project]

지역산업중점기술개발과제의 천연물을 이용한 난치병 치료제 개발Development of treatment for intractable diseases using natural products of regional industrial technology development task

[연구과제명][Name of Research Project]

천연물 마그놀리아를 이용한 고형암 치료제의 개발 및 제품화Development and Commercialization of Solid Cancer Treatment Using Natural Magnolia

[주관기관][Host]

한서제약Hanseo Pharmaceutical

[연구기간][Research period]

2004년 10월 01일 ~ 2008년 9월 30일October 01, 2004 to September 30, 2008

도 1은 호노키올 및 마그놀올의 고속액체크로마토그램 결과도이고,1 is a high-performance liquid chromatogram results of the honokiol and magnool,

도 2는 비교예에서 수득한 후박 조추출물(MOE)의 고속액체크로마토그램 결과도이며, Figure 2 is a high-performance liquid chromatogram results of the thick thin crude extract (MOE) obtained in the comparative example,

도 3은 실시예 1-1에서 수득한 후박 물 추출분획물(MOE-WI)의 고속액체크로마토그램 결과도이고, 3 is a high-performance liquid chromatogram of the thick extract water extract (MOE-WI) obtained in Example 1-1,

도 4는 실시예 1-1, 1-2, 1-3 및 1-4에서 수득한 추출분획물의 대표 고속액체크로마토그램 결과도이며,4 is a representative high performance liquid chromatogram results of the extract fractions obtained in Examples 1-1, 1-2, 1-3 and 1-4,

도 5는 실시예 1-5에서 수득한 후박 디아이온 물 분획물(MOE-HP-W)의 고속액체크로마토그램 결과도이고,5 is a high performance liquid chromatogram of the thick-walled diion water fraction (MOE-HP-W) obtained in Example 1-5,

도 6은 실시예 1-5에서 수득한 후박 디아이온 10%(w/w) 에탄올 분획물(MOE-HP-E)의 고속액체크로마토그램 결과도이며,6 is a high-performance liquid chromatogram of the thick hydroxyaion 10% (w / w) ethanol fraction (MOE-HP-E) obtained in Example 1-5,

도 7은 실시예 1-5에서 수득한 후박 디아이온 주정 분획물(MOE-HP-주정)의 고속액체크로마토그램 결과도이고,7 is a high-performance liquid chromatogram of the thick-walled diion alcohol fraction (MOE-HP- alcohol) obtained in Example 1-5,

도 8은 후박 조추출물(MOE)(O), 호노키올 순품(◇), 마그놀올 순품(△), 호노키올과 마그놀올의 혼합물(2:1, □), 후박 물 추출분획물(MOE-WI)(◆), 후박 디아이온 물 분획물(MOE-HP-W)(●), 후박 디아이온 10%(w/w) 에탄올 분획물(MOE-HP-E)(▲) 및 후박 디아이온 주정 분획물(MOE-HP-주정)(■)을 농도별로 위암세포(MKN-74, KCLB 80104)액에 가하여 실시한 MTT 분석 결과도이다(여기서 실시예 1-2, 1-3 및 1-4에서 수득한 추출분획물의 분석 결과는 실시예 1-1에서 수득 한 추출분획물과 유사하므로 따로 표시하지 않음). Fig. 8 shows the crude thin extract (MOE) (O), pure Honokiol pure (◇), pure Magnool pure (△), a mixture of Honochiol and Magnool (2: 1, □), thick extract water extract (MOE-WI ) (◆), Thick thin diion water fraction (MOE-HP-W) (●), Thick thin diion 10% (w / w) ethanol fraction (MOE-HP-E) (▲) and Thick thin diion alcohol fraction ( The result of MTT analysis by adding MOE-HP-alcohol (■) to gastric cancer cells (MKN-74, KCLB 80104) solution by concentration (extract obtained in Examples 1-2, 1-3 and 1-4) The analysis results of the fractions are similar to the extract fractions obtained in Example 1-1 and are not separately indicated).

Claims (7)

건조 후박에 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매로 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류추출, 가열추출 및 여과하여 수득된 여액을 회수하여 후박 조추출물을 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계에서 수득한 후박 조추출물에 냉정제수 또는 수포화 염화나트륨, 칼륨, 마그네슘, 칼슘, 알루미늄 또는 암모늄 등의 무기염을 첨가하여 가온한 후에 현탁물을 수득하는 제 2단계; 상기 현탁물을 냉온에서 방치한 후에 상등액을 여과 및 제거하는 제 3단계; 상기 제 3단계에서 여과하고 남은 잔사를 제 2단계와 동일한 방법으로 1회 내지 3회 반복 추출한 후, 여과하고 얻은 잔사를 감압농축 및 건조함으로서 1차 건조 잔사 정제물을 회수하는 제 4단계; 상기 제 4단계에서 수득한 1차 건조 잔사 정제물에 유기용매를 가하여 현탁 및 추출하고 여과한 후에, 수득된 여액을 감압농축 및 건조하여 유기용매 가용성 2차 정제물을 수득하는 제 5단계의 공정을 포함하는 제조공정으로 항암활성이 증진된 후박 추출 정제물을 제조하는 제조방법.The first to obtain a thick thin crude extract by recovering the filtrate obtained by cold extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, reflux extraction, heat extraction and filtration with water, a lower alcohol of C 1 to C 4 or a mixed solvent thereof in the dried after foil step; A second step of obtaining a suspension after warming by adding cold water or an inorganic salt such as saturated sodium chloride, potassium, magnesium, calcium, aluminum or ammonium to the thick extract obtained in the first step; A third step of filtering and removing the supernatant after leaving the suspension at cold temperature; Extracting the residue remaining after filtration in the third step once to three times in the same manner as in the second step, and then recovering the primary dry residue purified product by concentrating and drying the residue obtained by filtration under reduced pressure; After the organic solvent was added to the primary dried residue purified product obtained in the fourth step, suspended, extracted and filtered, the filtrate was concentrated under reduced pressure and dried to obtain an organic solvent-soluble secondary purified product. Manufacturing method for producing a thick extract extract purified by the anticancer activity in a manufacturing process comprising a. 건조 후박에 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매로 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류추출, 가열추출 및 여과하여 수득된 여액을 회수하여 후박 조추출물을 수득하는 제 1단계; 상기 제 1단계에서 수득한 후박 조추출물을 실리카겔에 흡착시켜 상단을 밀폐하고 CaHbOc(여기서 a는 1 내지 6이며, b와 c는 이 유기용매가 각각 화학적으로 안정한 구조를 나타낼 수 있는 숫자)로 대표할 수 있는 용매를 이용하여 컬럼 크로마토그래피법을 수행하여 제조공정으로 항암활성이 증진된 후박 추출분획물을 제조하는 제조방법.The first to obtain a thick thin crude extract by recovering the filtrate obtained by cold extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, reflux extraction, heat extraction and filtration with water, a lower alcohol of C 1 to C 4 or a mixed solvent thereof in the dried after foil step; The thick thin extract obtained in the first step was adsorbed onto silica gel to seal the top, and C a H b O c (where a is 1 to 6, b and c can each exhibit a chemically stable structure). A method for producing a thick extract fraction having anticancer activity enhanced by a manufacturing process by performing column chromatography using a solvent that can be represented by a number represented by). 제 1항 또는 제 2항에 있어서, The method according to claim 1 or 2, 상기 후박 추출분획물은 후박나무의 뿌리, 줄기, 수피, 잎, 꽃 또는 열매로부터 수득됨을 특징으로 하는 제조방법.The thick extract extract fraction is obtained from the roots, stems, bark, leaves, flowers or fruits of the rear bark. 제 1항 또는 제 2항에 있어서,The method according to claim 1 or 2, 상기 후박은 당후박나무(Magnolia officinalis Rehd. et Wils) 또는 일본후박나무(Magnolia obovata Thunb)임을 특징으로 하는 제조방법.The thick gourd is a manufacturing method characterized in that the Magnolia officinalis Rehd. Et Wils or Magnolia obovata Thunb. 상기 제 1항 또는 제 2항의 제조방법으로 수득한 후박 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 암 질환의 예방 및 치료용 약학조성물.A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of cancer diseases, comprising as an active ingredient the thick extract extract obtained by the method of claim 1 or 2. 제 5항에 있어서, The method of claim 5, 상기 암 질환은 구체적으로는 방광암, 위암, 대장암, 식도암, 췌장암, 폐암, 유방암, 난소암, 간암, 기관지암, 비인두암, 후두암, 결장암, 뇌암, 전립선암 또는 자궁경부암 등을 포함하는 질환인 약학조성물.Specifically, the cancer disease may include bladder cancer, stomach cancer, colon cancer, esophageal cancer, pancreatic cancer, lung cancer, breast cancer, ovarian cancer, liver cancer, bronchial cancer, nasopharyngeal cancer, laryngeal cancer, colon cancer, brain cancer, prostate cancer, or cervical cancer. Pharmaceutic composition. 상기 제 1항 또는 제 2항의 제조방법으로 수득한 후박 추출분획물을 유효성분으로 함유하는 암 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품.A health functional food for the prevention and improvement of cancer diseases containing the thick extract fraction obtained by the method of claim 1 or 2 as an active ingredient.
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KR101418059B1 (en) * 2011-08-22 2014-07-10 포항공과대학교 산학협력단 Composition for anti cancer comprising extract from hoo bak

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