KR20190048323A - Ginsenoside composition for treating, improving, or preventing inflammatory disease, and method for preparing the same - Google Patents

Ginsenoside composition for treating, improving, or preventing inflammatory disease, and method for preparing the same Download PDF

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KR20190048323A
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Abstract

The present invention relates to a ginsenoside composition for treating, alleviating, or preventing inflammatory diseases containing a ginseng extract, in which 30 to 70 wt% of a total ginsenoside content is contained and 0.01 to 4 wt% of a Rg3 content is contained relative to the total ginsenoside weight. A ginseng extract composition of the present invention has an increased content of ginsenoside by the treatment of ginsenoside glycosidase, consisting of an amino acid sequence of sequence number 1, and has a relatively increased content of minor saponins in ginsenoside, thereby being able to improve antioxidant, anti-inflammatory, and anti-aging functions.

Description

염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물 및 그의 제조방법 {GINSENOSIDE COMPOSITION FOR TREATING, IMPROVING, OR PREVENTING INFLAMMATORY DISEASE, AND METHOD FOR PREPARING THE SAME}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to a ginsenoside composition for the treatment, improvement or prevention of inflammatory diseases and a method for producing the ginsenoside composition,

본 발명은 진세노사이드 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 기존의 인삼 진세노사이드를 대사시켜 생리활성이 이전과는 다른 새로운 조성물들을 얻으며, 이를 통해 염증성 질환에 대한 예방 및 치료에도 효과가 있는 조성물을 얻는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a ginsenoside composition and a method for preparing the same, and more particularly, to a ginsenoside composition which metabolizes ginsenoside of a conventional ginseng to obtain new compositions whose physiological activities are different from those of a previous ginseng, ≪ / RTI > to a method of obtaining an effective composition.

인삼 또는 홍삼의 주요 생리 활성 성분이 포함된 사포닌 성분은 타 식물에서 발견되는 사포닌과 화학 구조가 상이한 바, 이를 특별히 인삼(Ginseng) 배당체 (Glycoside)란 의미로 진세노사이드(ginsenoside)라 명명되고 있다. 이와 같은 진세노사이드는 아글리콘(aglycone)의 구조에 따라 프로토파낙사이다이올계 (Protopanaxadiol-type), 프로토파낙사트라이올계 (Protopanaxatriol-type), 및 올레아놀린산계 (Oleanolic acid-type) 진세노사이드 등 세 가지로 분류될 수 있다. 이러한 세 그룹은 다시, 화합물 구조 중 고리의 C-3, C-6 및 C-20 위치의 글라이코시딕 결합 (glycoside bond)에 의해 부착되는 당 부위 (sugar moieties (aglycones))의 위치 및 수에 따라 분류되는데, 그 중 Rg1, Re, Rb1, Rc 및 Rb2 는 전체 사포닌의 90% 이상을 차지하는 메이저 진세노사이드 (major ginsenoside)이고 (Park, 2004), 이들은 큰 사이즈로 인하여 인체에 경구 투여되는 경우, 직접 흡수되기 어렵다고 알려져 있다. 따라서, 이러한 메이저 진세노사이드들은, 생체 시험(in vivo test)에서 생리적 활성을 효과적으로 나타내기 위하여, 당을 제거 (deglycosylated)하는 전환과정이 요구된다 (Tawab et al., 2003; Akao et al.,1998). 한편, 최근 수십 년간 Rg3, Rh2 및 화합물 K(compound K)등 마이너 형태(minor form)를 갖는 진세노사이드들의 뛰어난 약리효능이 밝혀지고 있다. 이러한 연구결과가 발표됨에 따라 보다 우수한 약리 작용을 갖는 진세노사이드들 F2, Rg3, Rh1, Rh2 및 화합물 K(compound K, C-K), Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1, F2 등 미량의 마이너 진세노사이드들(minor ginsenosides)에 대한 많은 연구가 이루어지고 있으며, 이러한 마이너 형태를 갖는 특정 진세노사이드의 함량 비율을 증가시킬 수 있는 방법이 요구되고 있는 실정이다.The saponin component containing the major physiologically active component of ginseng or red ginseng is different in chemical structure from the saponin found in other plants and it is named ginsenoside in particular as a ginseng glycoside . Such ginsenosides may be classified as protopanaxadiol-type, protopanaxatriol-type, and oleanolic acid-type ginsenosides according to the structure of aglycone. And the like. These three groups are again the positions of the sugar moieties (aglycones) attached by glycoside bonds at the C-3, C-6 and C-20 positions of the ring in the compound structure and the number Rg1, Re, Rb1, Rc and Rb2 are major ginsenosides which account for more than 90% of total saponins (Park, 2004), and they are orally administered to the human body due to its large size , It is known that it is difficult to be directly absorbed. Thus, these major ginsenosides require a conversion process that deglycosylates sugars to effectively represent their physiological activity in in vivo tests (Tawab et al., 2003; Akao et al. 1998). On the other hand, in recent decades, excellent pharmacological effects of ginsenosides having a minor form such as Rg3, Rh2 and compound K have been revealed. As the results of these studies were published, it was found that the ginsenosides F2, Rg3, Rh1, Rh2 and compounds K (compound K, CK), Gyp17, Rg3, C-Mc1, C- Minor ginsenosides have been extensively studied, and a method for increasing the content ratio of certain ginsenosides having such a minor form has been desired.

미량의 사포닌인 마이너 진세노사이드들을 생산하기 위한 방법으로 화학적 분해 방법 (De Mayo 등, canad. J. Chem., 43, 2033, 1965), 효소적 방법 (Kitagawa등, Terahedron Letters, 30, 2283, 1974), 및 배당체 합성을 이용한 방법 (제10-2005-0007250호) 등이 제시되어 왔으나, 상기와 같은 방법들은 1) 제조 공정상 여러 단계를 거쳐야 하거나, 2) 제조과정에서 목적하는 성분이 소실되며, 3) 식용에 부적합한 촉매를 사용하거나, 4) 낮은 수율을 나타내어 여전히 대량생산에 한계가 존재하여 왔다.  (De Mayo et al., Canad. J. Chem., 43, 2033, 1965), an enzymatic method (Kitagawa et al., Terahedron Letters, 30, 2283, 1974), and a method using glycoside synthesis (No. 10-2005-0007250) have been proposed. However, the above-mentioned methods require 1) several steps in the manufacturing process, or 2) 3) the use of an inadequate catalyst for edible purposes, and 4) low yields, which still have limitations in mass production.

특히 효소적 방법 중, 사용될 수 있는 효소의 종류로 진세노사이드 글라이코시데이즈 (ginsenoside glycosidase), α-L-아라비노피라노시데이즈 (α-arabinopyranosidase), α-L-아라비노퓨라노시데이즈 (α-L-arabinofuranosidase), α-L-람노시데이즈 (α-L-rhamnosidase)와 같은 효소가 Rb1, Rb2, Rc 및 Re와 같은 메이저 진세노사이드들을 생전환(biotransformation)함이 보고되고 있다. 즉, 인삼으로부터 추출한 사포닌들은 대부분 Rg1, Re, Rb1, Rb2, Rc 및 Rb3 등의 복합 사포닌들로 형성되어 있어 글라이코시딕 결합에 의해 결합되어 있는 당들의 부착 수, 종류와 위치 등이 상이하여 여러 가지 효소들이 다량 요구되고 있는 실정이다.  Among the enzymatic methods, the types of enzymes that can be used include ginsenoside glycosidase,? -L-arabinopyranosidase,? -L-arabinofuranosidez it has been reported that enzymes such as? -L-arabinofuranosidase and? -L-rhamnosidase biotransformation of major ginsenosides such as Rb1, Rb2, Rc and Re . In other words, saponins extracted from ginseng are mostly composed of complex saponins such as Rg1, Re, Rb1, Rb2, Rc and Rb3, so that the number, type and position of sugars bound by glycosidic bonds are different A large amount of various enzymes are required.

한국공개특허공보 제10-2016-0086498호Korean Patent Publication No. 10-2016-0086498 한국등록특허공보 제10-1647631호Korean Patent Registration No. 10-1647631

본 발명의 목적은 자연상태의 인삼에 포함되어 있는 메이저 사포닌인 진세노사이드를 특정 아미노산 서열을 갖는 진세노사이드 글라이코시데이즈로 생물 전환하여 총 진세노사이드 함량이 현저히 높고, 총 진세노사이드 중 생리활성이 높은 마이너 사포닌의 함량이 높은 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물을 제공하는 데 있다.It is an object of the present invention to provide a method for biosynthesizing ginsenoside, which is major saponin contained in ginseng in natural state, into ginsenoside glycosidease having a specific amino acid sequence, so that the total ginsenoside content is remarkably high, The present invention provides a ginsenoside composition for treating, ameliorating or preventing an inflammatory disease comprising an extract of ginseng having a high content of minor saponins having high physiological activity as an active ingredient.

본 발명의 일 측면에 따르면,According to an aspect of the present invention,

총 진세노사이드 함량이 30 ~ 70중량% 함유되고, 상기 총 진세노사이드 중량에 대하여 Rg3 함량이 0.01 ~ 4중량% 함유된 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물이 제공된다.The present invention relates to a ginseng extract containing 30 to 70% by weight of total ginsenoside and 0.01 to 4% by weight of Rg3 relative to the total ginsenoside weight as an active ingredient. Senoside compositions are provided.

상기 진세노사이드 조성물은 총 진세노사이드 중량에 대하여 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2 중에서 선택된 어느 하나가 2 내지 30중량% 함유된 것일 수 있다.The ginsenoside composition may contain 2 to 30% by weight of any one selected from Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 based on the total ginsenoside weight.

상기 진세노사이드 조성물은 총 진세노사이드 중량에 대하여 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2의 중량의 합이 30 내지 80중량%인 것을 특징으로 한다.The ginsenoside composition is characterized in that the sum of the weights of Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 is 30 to 80% by weight based on the total ginsenoside weight.

상기 진세노사이드 조성물은 염증성 치료 또는 예방용 약학 조성물, 또는 염증성 질환 개선 또는 예방용 식품 조성물일 수 있다.The ginsenoside composition may be a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of inflammation, or a food composition for improving or preventing inflammatory diseases.

상기 염증성 질환은 염증성 피부질환, 크론병, 궤양성 대장염, 복막염, 골수염, 봉소염, 뇌막염, 뇌염, 췌장염, 외상 유발 쇼크, 기관지 천식, 알레르기성 비염, 낭포성 섬유증, 뇌졸중, 급성 기관지염, 만성 기관지염, 골관절염, 통풍, 척추관절병증, 강직성 척추염, 장질환 척추염, 연소자성 관절병증, 연소자성 강직성 척추염, 반응성 관절병증, 감염성 관절염, 전신성 홍반성 루푸스, 재귀열, 건선, 후-감염성 관절염, 임균성 관절염, 결핵성 관절염, 바이러스성 관절염, 진균성 관절염, 매독성 관절염, 류마티스성 다발성근육통, 관절 세포 동맥염, 칼슘 결정 침착 관절병증, 비-관절 류마티즘, 점액낭염, 건초염, 및 혈색소증 중에서 선택된 어느 하나일 수 있다.Wherein said inflammatory disease is selected from the group consisting of inflammatory skin diseases, Crohn's disease, ulcerative colitis, peritonitis, osteomyelitis, meningitis, meningitis, encephalitis, pancreatitis, trauma-induced shock, bronchial asthma, allergic rhinitis, cystic fibrosis, stroke, acute bronchitis, Osteoarthritis, gouty arthritis, systemic lupus erythematosus, recurrent fever, psoriasis, post-infectious arthritis, gonococcal arthritis, tuberculosis, osteoarthritis, osteoarthritis, gout, spondyloarthropathies, ankylosing spondylitis, Arthritis, arthritis, arthritis, viral arthritis, fungal arthritis, rheumatoid arthritis, rheumatoid multiple myalgia, arthropathic arthritis, calcium crystalloid arthropathy, non-articular rheumatism, bursitis, hay fever, and hemochromatosis.

본 발명의 다른 하나의 측면에 따르면,According to another aspect of the present invention,

(a) 인삼을 물, 탄소수 1-4의 저급 알코올, 또는 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매로 추출하여 인삼 추출물을 제조하는 단계; 및 (b) 상기 인삼 추출물을 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 진세노사이드 글라이코시데이즈로 효소 처리하는 단계;를 포함하는 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물의 제조방법이 제공된다.(a) preparing ginseng extract by extracting ginseng with water, a lower alcohol having 1-4 carbon atoms, or a mixed solvent of the lower alcohol and water; And (b) enzymatically treating the ginseng extract with ginsenoside glycosidease comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1. A method for making a synobic composition is provided.

상기 효소 처리에 따라 진세노사이드 Re, Rb1, Rc, Rb2, Rb3 및 Rd 중에서 선택된 1종 이상이 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2 중에서 선택된 1종 이상으로 전부 또는 부분적으로 생물전환 될 수 있다.Wherein at least one selected from the group consisting of ginsenosides Re, Rb1, Rc, Rb2, Rb3 and Rd is partially or totally converted into Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 .

본 발명의 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물은 자연상태의 인삼에 포함되어 있는 메이저 사포닌인 진세노사이드를 특정 아미노산 서열을 갖는 진세노사이드 글라이코시데이즈로 생물 전환하여 총 진세노사이드 함량이 현저히 높고, 총 진세노사이드 중 마이너 사포닌 함량을 증가시켜 생리활성을 높여 항산화, 항염증, 항노화 기능성을 향상시킬 수 있다.The ginsenoside composition for treating, ameliorating or preventing an inflammatory disease comprising the ginseng extract of the present invention as an active ingredient can be prepared by mixing ginsenoside, major saponin contained in natural ginseng, with ginsenoside glycoside having a specific amino acid sequence The total ginsenoside content is remarkably high due to biotransformation by sea sate, and the minor saponin content of total ginsenosides is increased to increase the physiological activity, thereby improving antioxidation, anti-inflammation and anti-aging function.

도 1은 진세노사이드 사이즈 마커들을 나타낸 것이다.
도 2는 반응 전 진세노사이드 성분을 나타낸 HPLC 분석결과이다.
도 3은 진세노사이드 글라이코시데이즈와 반응 후 진세노사이드 성분을 나타낸 HPLC 분석결과이다.
도 4는 실시예 1의 진세노사이드 조성물에 대한 세포 독성 시험 결과이다.
도 5는 실시예 1의 진세노사이드 조성물에 대한 TNF-α 발현 측정 시험 결과이다.
도 6은 실시예 1의 진세노사이드 조성물에 대한 IL-6 발현 측정 시험 결과이다.
도 7은 실시예 1의 진세노사이드 조성물에 대한 산화질소(nitric oxide, NO)의 생성 억제 측정 시험 결과이다.
도 8은 본 발명에 사용된 진세노사이드 글라이코시데이즈의 아미노산 서열이다.
Figure 1 shows ginsenoside size markers.
2 shows the results of HPLC analysis showing the ginsenoside component before the reaction.
Figure 3 shows the results of HPLC analysis of ginsenoside components after reaction with ginsenoside glycosides.
4 is a cytotoxicity test result of the ginsenoside composition of Example 1. Fig.
Fig. 5 shows the results of TNF-a expression measurement test on the ginsenoside composition of Example 1. Fig.
Fig. 6 shows the results of the measurement of IL-6 expression in the ginsenoside composition of Example 1. Fig.
Fig. 7 is a test result of inhibition of formation of nitric oxide (NO) on the ginsenoside composition of Example 1. Fig.
Figure 8 is the amino acid sequence of the ginsenoside glycosidease used in the present invention.

본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.
BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS The present invention is capable of various modifications and various embodiments, and specific embodiments are illustrated in the drawings and described in detail in the detailed description. It is to be understood, however, that the invention is not to be limited to the specific embodiments, but includes all modifications, equivalents, and alternatives falling within the spirit and scope of the invention. DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

이하, 본 발명의 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물에 대해 설명하도록 한다.Hereinafter, the ginsenoside composition for the treatment, improvement or prevention of the inflammatory disease of the present invention will be described.

본 발명의 진세노사이드 조성물은 총 진세노사이드 함량이 30 ~ 70중량% 함유되고, 상기 총 진세노사이드 중량에 대하여 Rg3 함량이 0.01 ~ 4중량% 함유된 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 한다.The ginsenoside composition of the present invention is characterized in that the total ginsenoside content is 30 to 70% by weight, and the ginseng extract having an Rg3 content of 0.01 to 4% by weight based on the total ginsenoside weight is included as an active ingredient .

상기 진세노사이드 조성물은 총 진세노사이드 중량에 대하여 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2 중에서 선택된 어느 하나가 2 내지 30중량% 함유된 것이 바람직하다.It is preferable that the ginsenoside composition contains 2 to 30% by weight of any one selected from Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 based on the total ginsenoside weight.

상기 진세노사이드 조성물은 총 진세노사이드 중량에 대하여 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2의 중량의 합이 30 내지 80중량%인 것이 바람직하다.It is preferable that the ginsenoside composition has a total weight of Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 of 30 to 80% by weight based on the total ginsenoside weight.

상기 진세노사이드 조성물은 염증성 질환 치료 또는 예방용 약학 조성물, 또는 염증성 질환 개선 또는 예방용 식품 조성물일 수 있다.The ginsenoside composition may be a pharmaceutical composition for treating or preventing an inflammatory disease, or a food composition for improving or preventing an inflammatory disease.

상기 염증성 질환은 염증성 피부질환, 크론병, 궤양성 대장염, 복막염, 골수염, 봉소염, 뇌막염, 뇌염, 췌장염, 외상 유발 쇼크, 기관지 천식, 알레르기성 비염, 낭포성 섬유증, 뇌졸중, 급성 기관지염, 만성 기관지염, 골관절염, 통풍, 척추관절병증, 강직성 척추염, 장질환 척추염, 연소자성 관절병증, 연소자성 강직성 척추염, 반응성 관절병증, 감염성 관절염, 전신성 홍반성 루푸스, 재귀열, 건선, 후-감염성 관절염, 임균성 관절염, 결핵성 관절염, 바이러스성 관절염, 진균성 관절염, 매독성 관절염, 류마티스성 다발성근육통, 관절 세포 동맥염, 칼슘 결정 침착 관절병증, 비-관절 류마티즘, 점액낭염, 건초염, 혈색소증 등일 수 있으나, 본 발명의 범위가 여기에 한정되지 않는다.
Wherein said inflammatory disease is selected from the group consisting of inflammatory skin diseases, Crohn's disease, ulcerative colitis, peritonitis, osteomyelitis, meningitis, meningitis, encephalitis, pancreatitis, trauma-induced shock, bronchial asthma, allergic rhinitis, cystic fibrosis, stroke, acute bronchitis, Osteoarthritis, gouty arthritis, systemic lupus erythematosus, recurrent fever, psoriasis, post-infectious arthritis, gonococcal arthritis, tuberculosis, osteoarthritis, osteoarthritis, gout, spondyloarthropathies, ankylosing spondylitis, Arthritis, arthritis, arthritis, viral arthritis, fungal arthritis, rheumatoid arthritis, rheumatoid multiple myalgia, arthropathic arthritis, calcium crystalloid arthropathy, non-articular rheumatism, bursitis, hay fever, hemochromatosis etc., It is not limited.

이하, 본 발명의 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물의 제조방법에 대래 설명하도록 한다.Hereinafter, a method for producing a ginsenoside composition for the treatment, improvement or prevention of the inflammatory disease of the present invention will be described.

먼저, 인삼을 물, First, 탄소수Carbon number 1-4의 저급 알코올, 또는 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매로 추출하여 인삼 추출물을 제조한다(단계 a). 1-4, or a mixed solvent of the lower alcohol and water to prepare a ginseng extract (step a).

본 발명에서 이용되는 추출용매는 물, 탄소수 1-4의 저급 알코올, 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매를 사용하는 것이 바람직하나, 본 발명의 범위가 여기에 한정되지 않으며, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌글리콜, 헥산, 디에틸에테르 등을 사용할 수도 있다.The extraction solvent used in the present invention is preferably water, a lower alcohol having from 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent of the lower alcohol and water. However, the scope of the present invention is not limited thereto, and acetone, ethyl acetate, Chloroform, butyl acetate, 1,3-butylene glycol, hexane, diethyl ether and the like may be used.

본 명세서에서 사용되는 용어 ‘추출물’은 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함할 수 있다. 또한, 감압 증류 및 동결 건조, 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.As used herein, the term 'extract' has the meaning of being used as a crude extract in the art, but broadly it can also include fractions in which the extract is further fractionated. It may also be prepared in powder form by further processes such as vacuum distillation and lyophilization, or spray drying.

이후, 상기 인삼 추출물을 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 Thereafter, the ginseng extract is treated with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 진세노사이드Gin Senocide 글라이코시데이즈로By Glicosy Days 효소 처리한다(단계 b). Enzyme treatment (step b).

상기 진세노사이드 글라이코시데이즈의 아미노산 서열은 도 7에 나타낸 바와 같다.The amino acid sequence of the ginsenoside glycosides is shown in Fig.

상기 효소 처리에 따라 진세노사이드 Re, Rb1, Rc, Rb2, Rb3 및 Rd 중에서 선택된 1종 이상이 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2 중에서 선택된 1종 이상으로 전부 또는 부분적으로 생물전환 될 수 있다.Wherein at least one selected from the group consisting of ginsenosides Re, Rb1, Rc, Rb2, Rb3 and Rd is partially or totally converted into Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 .

이에 따라 인삼 추출물 내의 진세노사이드 함량이 3 내지 7배로 현저히 높아질 뿐 아니라, 총 진세노사이드 중 생리활성이 높은 마이너형 사포닌 즉 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2이 생성됨으로써 항산화, 항염증, 항노화 기능성을 현저히 향상시킬 수 있다.
As a result, the ginsenoside content in the ginseng extract is remarkably increased to 3 to 7 times, and the minor saponins, Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 having high physiological activity among total ginsenosides are produced, Anti-inflammatory, anti-aging function can be remarkably improved.

한편, 본 명세서에서 용어 ‘유효성분으로 포함하는’이란 진세노사이드 조성물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명의 한 구체예에서, 본 발명의 조성물 내에서 진세노사이드 조성물은 예를 들어, 0.001 mg/kg 이상, 바람직하게는 0.1 mg/kg 이상, 보다 바람직하게는 1 mg/kg 이상, 보다 더 바람직하게는 10 mg/kg 이상 포함된다. 진세노사이드 조성물은 천연물로서 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 본 발명의 조성물 내에 포함되는 진세노사이드 조성물의 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.In the present specification, the term 'comprising as an active ingredient' means an amount sufficient to achieve the efficacy or activity of the ginsenoside composition. In one embodiment of the invention, the ginsenoside composition in the composition of the present invention is administered in an amount of, for example, 0.001 mg / kg or more, preferably 0.1 mg / kg or more, more preferably 1 mg / Preferably 10 mg / kg or more. Since the ginsenoside composition has no adverse effect on the human body even when it is administered in an excessive amount as a natural product, the quantitative upper limit of the ginsenoside composition contained in the composition of the present invention can be selected by a person skilled in the art within a suitable range.

본 발명의 약학 조성물은 상기 유효 성분 이외에 약학으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may be prepared by using pharmaceutically acceptable and physiologically acceptable adjuvants in addition to the above-mentioned active ingredients. Examples of the adjuvants include excipients, disintegrants, sweeteners, binders, coating agents, swelling agents, lubricants, Or a flavoring agent may be used.

상기 약학 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효 성분 이외에 추가로 약학으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 약학 조성물로 바람직하게 제제화할 수 있다.The pharmaceutical composition may be formulated into a pharmaceutical composition containing at least one pharmaceutically acceptable carrier in addition to the above-described active ingredients for administration.

상기 약학 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효 성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약학으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함한다.The pharmaceutical form of the pharmaceutical composition may be a granule, a powder, a tablet, a coated tablet, a capsule, a suppository, a liquid, a syrup, a juice, a suspension, an emulsion, a drip agent or an injectable liquid agent. For example, for formulation into tablets or capsules, the active ingredient may be combined with an oral, non-toxic pharmaceutically acceptable inert carrier such as ethanol, glycerol, water, and the like. Also, if desired or necessary, suitable binders, lubricants, disintegrants and coloring agents may also be included as a mixture. Suitable binders include, but are not limited to, natural sugars such as starch, gelatin, glucose or beta-lactose, natural and synthetic gums such as corn sweeteners, acacia, tracker candles or sodium oleate, sodium stearate, magnesium stearate, sodium Benzoate, sodium acetate, sodium chloride, and the like. Disintegrants include, but are not limited to, starch, methyl cellulose, agar, bentonite, xanthan gum and the like.

액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약학 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다.Acceptable pharmaceutical carriers for compositions that are formulated into a liquid solution include sterile water and sterile water suitable for the living body such as saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, albumin injection solution, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, And other conventional additives such as an antioxidant, a buffer, and a bacteriostatic agent may be added as needed. In addition, diluents, dispersants, surfactants, binders, and lubricants may be additionally added to formulate into injectable solutions, pills, capsules, granules or tablets such as aqueous solutions, suspensions, emulsions and the like.

본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥 내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여이다.The pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally. In the case of parenteral administration, it can be administered by intravenous injection, subcutaneous injection, muscle injection, intraperitoneal injection, transdermal administration, etc., preferably oral administration.

본 발명의 약학 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 본 발명의 약학 조성물의 1일 투여량은 0.0001-10 g/㎏이다.The appropriate dosage of the pharmaceutical composition of the present invention varies depending on factors such as the formulation method, administration method, age, body weight, sex, pathological condition, food, administration time, route of administration, excretion rate and responsiveness of the patient, , A skilled physician can readily determine and prescribe dosages effective for the desired treatment or prophylaxis. According to a preferred embodiment of the present invention, the daily dose of the pharmaceutical composition of the present invention is 0.0001-10 g / kg.

본 발명의 약학 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화 함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
The pharmaceutical composition of the present invention may be prepared in a unit dose form by formulating it using a pharmaceutically acceptable carrier and / or excipient according to a method which can be easily carried out by a person having ordinary skill in the art to which the present invention belongs Into a multi-dose container. The formulations may be in the form of solutions, suspensions or emulsions in oils or aqueous media, or in the form of excipients, powders, granules, tablets or capsules, and may additionally contain dispersing or stabilizing agents.

본 발명에 따른 식품 조성물은 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 알코올 음료류, 과자류, 다이어트바, 유제품, 육류, 초코렛, 피자, 빵류 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류, 비타민 복합제, 건강보조식품류 등이 있다.The food composition according to the present invention can be used as a functional food or added to various foods. Foods to which the composition of the present invention can be added include, for example, beverages, alcoholic beverages, confectionery, diet bars, dairy products, meats, chocolates, pizza, breads, noodles, gums, ice creams, And food.

본 발명의 식품 조성물은 유효성분으로서 진세노사이드 조성물 뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제와 음료류로 제조되는 경우에는 진세노사이드 조성물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 및 각종 식물 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.The food composition of the present invention may contain not only the ginsenoside composition as an active ingredient, but also ingredients normally added in the course of food production, including, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients, flavoring agents and flavoring agents do. Examples of the above-mentioned carbohydrates are monosaccharides such as glucose, fructose, and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like; And polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. Natural flavorings such as tau martin and stevia extract (e.g., rebaudioside A and glycyrrhizin) and synthetic flavorings (saccharine, aspartame, etc.) can be used as flavorings. For example, when the food composition of the present invention is prepared from a drink and a beverage, citric acid, liquid fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, juice, various plant extracts and the like may be further added in addition to the ginsenoside composition.

본 발명은 진세노사이드 조성물을 유효성분으로 포함하는 건강기능식품을 제공한다. 건강기능식품이란, 진세노사이드 조성물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다. 이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 건강기능식품은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 매우 유용하다. 이와 같은 건강기능식품에 있어서의 진세노사이드 조성물의 첨가량은, 대상인 건강기능식품의 종류에 따라 달라 일률적으로 규정할 수 없지만, 식품 본래의 맛을 손상시키지 않는 범위에서 첨가하면 되며, 대상 식품에 대하여 통상 0.01 내지 50 중량%, 바람직하기로는 0.1 내지 20 중량%의 범위이다. 또한, 환제, 과립제, 정제 또는 캡슐제 형태의 건강기능식품의 경우에는 통상 0.1 내지 100 중량% 바람직하기로는 0.5 내지 80 중량%의 범위에서 첨가하면 된다. 한 구체예에서, 본 발명의 건강기능식품은 환제, 정제, 캡슐제 또는 음료의 형태일 수 있다.
The present invention provides a health functional food comprising the ginsenoside composition as an active ingredient. A health functional food is a food prepared by adding a ginsenoside composition to a food material such as a beverage, a tea, a spice, a gum, or a confection, or encapsulated, powdered, or suspended therein. However, unlike general medicine, there is an advantage that there is no side effect that can occur when a long-term use of the medicine is performed using the food as a raw material. The health functional food of the present invention thus obtained is very useful because it can be ingested routinely. The amount of the ginsenoside composition to be added to such a health functional food can not be uniformly determined depending on the kind of the health functional food to which it is added but may be added within a range that does not deteriorate the original taste of the food, And usually ranges from 0.01 to 50% by weight, preferably from 0.1 to 20% by weight. In the case of health functional foods in the form of pills, granules, tablets or capsules, they may be added usually in the range of 0.1 to 100% by weight, preferably 0.5 to 80% by weight. In one embodiment, the health functional food of the present invention may be in the form of a pill, tablet, capsule or beverage.

[실시예][Example]

실시예Example 1:  One: 진세노사이드Gin Senocide 생물전환 Biotransformation

인삼은 홍미삼을 구입(대동고려삼, 대한민국)하여 에탄올을 이용하여 사포닌을 추출하였다. 추출한 사포닌은 3차 정제수를 이용하여 용해하였으며, 반응은 50 mM 포스페이트 버퍼 (phosphate buffer, pH 7.0) 용액 속에 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 진세노사이드 글라이코시데이즈:기질 = 1:4,000 (몰비, Molar Ratio) 비로 첨가하여 37 ℃ 쉐이킹 인큐베이터(shaking incubator)에서 하루 동안 실시하였다. 반응 완료 후 로타리 이베퍼레이터(rotary evaporator, R300, BUCHI)를 이용하여 최초 반응 용량 대비 30~50 %로 농축하였다. 농축물은 다시 동량의 n-부탄올을 첨가하여 혼합하고 원심분리기를 이용하여 원심 분리하고, 상청액만을 별도 분리하여 저온 진공상태에서 원심분리에 의해 용매를 기화시켰다 (Speed Vac. Drying). 건조된 반응물들은 믹서기(Mixer)를 이용하여 분말화하였으며 분말화 후 60℃ 건조기에서 48시간 동안 별도로 건조하였다.
Ginseng was purchased as red ginseng (Daedong KOREA, Korea), and saponin was extracted using ethanol. The extracted saponin was dissolved by using tertiary purified water. The reaction was carried out in a solution of 50 mM phosphate buffer (pH 7.0) containing ginsenoside glycosidase: substrate = 1: 4,000 (mole ratio , And Molar Ratio), and the reaction was carried out in a shaking incubator at 37 ° C for one day. After completion of the reaction, the mixture was concentrated to 30 to 50% of the initial reaction volume using a rotary evaporator (R300, BUCHI). The concentrate was again mixed with the same amount of n-butanol, and the mixture was centrifuged using a centrifuge. The supernatant was separately separated and the solvent was evaporated by centrifugation under low-temperature vacuum (Speed Vac. Drying). The dried reactants were pulverized using a mixer and powdered and dried separately in a dryer at 60 ° C for 48 hours.

[시험예][Test Example]

시험예Test Example 1: 생물전환 확인 1: Biological conversion confirmation

실시예 1에 따라 별도로 건조한 반응물은 HPLC (High Performance Liquid Chromatography)를 이용하여 조성물 분석하였다. 도 1은 진세노사이드 사이즈 마커들을 나타낸 것이다. 또한, 상기 진세노사이드 글라이코시데이즈와 반응 전의 진세노사이드 성분을 아래의 표 1과 도 2에 나타내었으며, 진세노사이드 글라이코시데이즈와 반응 후의 진세노사이드 성분을 아래의 표 2와 도 3에 나타내었다.Separately dried reactants according to Example 1 were subjected to composition analysis using HPLC (High Performance Liquid Chromatography). Figure 1 shows ginsenoside size markers. The ginsenoside components before and after the reaction with the ginsenoside glycosides were shown in the following Tables 1 and 2, and the ginsenoside components after the reaction with the ginsenoside glycosides were shown in Table 2 below Respectively.

진세노사이드 글라이코시데이즈 반응 전 인삼추출물 조성Ginsenoside Glycoxidase Reaction Ginseng Extract Composition TitleTitle Retention Time (min.)Retention Time (min.) Area Ratio (%)Area Ratio (%) Content (%)Content (%) 성분비 (%)Component Ratio (%) Area Ratio (%)Area Ratio (%) ComponentsComponents CH 1CH 1 1.2333 1.2333 43.67 43.67 52.36 52.36 77.41 77.41   Carbohydrates (CH)Carbohydrates (CH) CH 2CH 2 1.7000 1.7000 4.88 4.88 5.85 5.85   CH 3CH 3 1.8500 1.8500 16.01 16.01 19.20 19.20   ReRe 4.4000 4.4000 0.67 0.67 0.80 0.80 11.65 11.65 6.89 6.89 GinsenosidesGinsenosides Rb1Rb1 4.8800 4.8800 3.56 3.56 4.27 4.27 36.63 36.63 RcRc 5.1667 5.1667 2.48 2.48 2.97 2.97 25.51 25.51 Rb2/3Rb2 / 3 5.4333 5.4333 2.09 2.09 2.51 2.51 21.50 21.50 RdRd 6.0333 6.0333 0.92 0.92 1.10 1.10 9.47 9.47 Gyp17Gyp17     0.00 0.00 0.00 0.00 C-C- Mc1Mc1     0.00 0.00 0.00 0.00 C-C- Mx1Mx1     0.00 0.00 0.00 0.00 F2F2     0.00 0.00 0.00 0.00 Rg3Rg3     0.00 0.00 0.00 0.00 Unknown1Unknown1 12.9833 12.9833 0.58 0.58 0.70 0.70 10.94 10.94   Lipid Lipid Unknown2Unknown2 13.9167 13.9167 1.74 1.74 2.09 2.09   Unknown3Unknown3 15.6167 15.6167 6.80 6.80 8.15 8.15   SumSum   83.40 83.40 100.00 100.00 100.00 100.00    

진세노사이드 글라이코시데이즈 반응 후 인삼추출물 조성Ginsenosides Ginseng Extract Composition after Glucosidase Reaction TitleTitle Retention Time (min.)Retention Time (min.) Area Ratio (%)Area Ratio (%) Content (%)Content (%) 성분비 (%)Component Ratio (%) Area Ratio (%)Area Ratio (%) ComponentsComponents CH 1CH 1 1.2833 1.2833 6.78 6.78 9.23 9.23 34.61 34.61   Carbohydrates (CH)Carbohydrates (CH) CH 2CH 2 1.6833 1.6833 9.91 9.91 13.49 13.49   CH 3CH 3 1.8500 1.8500 8.73 8.73 11.89 11.89   ReRe 4.3667 4.3667 1.09 1.09 1.48 1.48 47.96 47.96 3.09 3.09 GinsenosidesGinsenosides Rb1Rb1 4.8667 4.8667 3.56 3.56 4.85 4.85 10.11 10.11 RcRc 5.2333 5.2333 3.63 3.63 4.94 4.94 10.31 10.31 Rb2/3Rb2 / 3 5.5500 5.5500 4.17 4.17 5.68 5.68 11.84 11.84 RdRd 6.1833 6.1833 2.59 2.59 3.53 3.53 7.35 7.35 Gyp17Gyp17 6.6167 6.6167 6.76 6.76 9.20 9.20 19.19 19.19 C-C- Mc1Mc1 7.0167 7.0167 2.99 2.99 4.07 4.07 8.49 8.49 C-C- Mx1Mx1 7.2667 7.2667 4.12 4.12 5.61 5.61 11.70 11.70 F2F2 8.2167 8.2167 5.53 5.53 7.53 7.53 15.70 15.70 Rg3Rg3 9.9333 9.9333 0.78 0.78 1.06 1.06 2.21 2.21 Unknown1Unknown1 12.8333 12.8333 1.78 1.78 2.42 2.42 17.43 17.43 LipidLipid Unknown2Unknown2 13.7833 13.7833 2.31 2.31 3.15 3.15   Unknown3Unknown3 15.5167 15.5167 8.71 8.71 11.86 11.86   SumSum   73.44 73.44 100.00 100.00 100.00 100.00    

이에 따르면, 인삼 추출물 내의 진세노사이드 함량이 11.65%에서 47.96%로 4배 이상 증가하였을 뿐 아니라, 진세노사이드의 조성을 살펴보면, 메이저 사포닌으로부터 마이너 사포닌인 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2로 생물전환이 이루어져 진세노사이드의 성분이 크게 변화하였음을 확인할 수 있다.
The ginsenoside content in the ginseng extract was increased from 11.65% to 47.96% more than 4 times. In addition, the composition of ginsenoside showed minor saponins Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1, The biosynthesis of F2 resulted in a significant change in the components of senosides.

시험예Test Example 2:  2: 진세노사이드Gin Senocide 효능 시험 Efficacy test

실시예 2에 따라 제조된 사포닌 시료를 이용하여 항산화, 항염증 및 항노화 효능에 관한 시험관 내(in vitro) 실험을 진행하였다.Example 2 in using the saponin samples prepared according to the test tube on the antioxidant, anti-inflammatory and anti-aging effect (in vitro experiments were conducted.

(1) 세포 독성(Cytotoxicity) 시험(1) Cytotoxicity test

대식세포 RAW264.7에 LPS(lipopolysaccharide)를 1㎍/㎖ 처리한 것과 처리하지 않은 것을 각각 96-웰 플레이트에 1×104개 세포/웰이 되도록 분주하여 8시간 동안 배양하였다. 배양 후 새로운 배양액(10% FBS(fetal bovine serum)와 1% 페니실린(penicillin)이 함유되어 있는 DMEM(Eagle's minimal essential medium) 배지)으로 교체하고, 실시예 1의 진세노사이드 조성물을 각각 1.3, 2.5, 5, 10㎍/㎖로 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 각 웰에 10㎕의 WST 용액을 첨가한 후 세포 배양기에서 30분간 반응 시킨 후 450㎚에서 흡광도의 변화를 측정하여 대조군에 대한 세포 생존율을 백분율로 표시하였고, 그 결과를 도 4에 나타내었다. 이에 따르면, 실시예 1의 진세노사이드 복합체의 처리에 의해 세포 생존율이 높아지므로 세포 독성은 없는 것으로 확인되었다.Macrophage RAW264.7 was treated with 1 μg / ml of LPS (lipopolysaccharide) and the untreated cells were divided into 96-well plates at 1 × 10 4 cells / well and cultured for 8 hours. After the incubation, the medium was replaced with a new culture medium (DMEM (Eagle's minimal essential medium) medium containing 10% fetal bovine serum and 1% penicillin), and the ginsenoside composition of Example 1 was replaced with 1.3, 2.5 , 5, 10 / / ml and cultured for 24 hours. After incubation, 10 占 퐇 of WST solution was added to each well, followed by reaction in a cell incubator for 30 minutes. Then, the absorbance at 450 nm was measured to show the cell survival rate as a percentage in the control group. The results are shown in FIG. . According to this, it was confirmed that the cell survival rate was increased by the treatment of the ginsenoside complex of Example 1, and therefore, no cytotoxicity was observed.

(2) TNF-α 발현 측정(2) Measurement of TNF-α expression

상기 방법과 동일하게 LPS를 처리 또는 무처리한 RAW264.7 세포를 배양하고, 배양액과 세포를 1㎖ 튜브에 넣고 원심 분리한 후, 상청액을 수득하고 루미넥스(luminex) 키트를 통해 TNF-α의 양을 측정하고 그 결과를 도 5에 나타내었다. 이에 따르면, 진세노사이드 복합체의 처리량이 증가할수록 TNF-α의 생성이 감소하는 것으로 나타났다.RAW264.7 cells treated or not treated with LPS were cultured in the same manner as described above, and the culture medium and cells were placed in a 1 ml tube and centrifuged. After that, supernatant was obtained, and the amount of TNF-α was measured with a luminex kit The amount was measured and the result is shown in Fig. It has been shown that as the throughput of the ginsenoside complex increases, the production of TNF-a decreases.

(3) IL-6 발현 측정(3) Measurement of IL-6 expression

TNF-α 발현 측정과 동일한 방법으로 IL-6 발현을 측정하여 그 결과를 도 6에 나타내었다. 이에 따르면, 진세노사이드 복합체의 처리량이 1.3 ㎍/㎖인 것부터 IL-6의 생성이 크게 감소하는 것으로 나타났다.The expression of IL-6 was measured in the same manner as in the measurement of TNF-α expression, and the results are shown in FIG. It was shown that the production of IL-6 was greatly reduced since the throughput of the ginsenoside complex was 1.3 占 퐂 / ml.

(4) 산화질소(nitric oxide, NO)의 생성 억제 측정(4) Inhibition of the production of nitric oxide (NO)

상기 방법과 동일하게 얻은 배양액을 NO 검출 키트(Nitric oxide detection kit, Intron Biotechnology, Korea)를 이용하여 산화질소 생성을 측정하여 그 결과를 도 7에 나타내었다. 이에 따르면, 실시예 1의 진세노사이드 조성물의 처리량에 의존적으로 산화질소의 생성량이 감소하였으므로 항염증 효능이 우수함을 확인할 수 있었다.
Nitric oxide production was measured using a NO detection kit (Intron Biotechnology, Korea) in the same manner as described above, and the results are shown in FIG. It was confirmed that the anti-inflammatory effect was excellent because the amount of produced nitric oxide was decreased depending on the treatment amount of the ginsenoside composition of Example 1.

이상, 본 발명의 실시예들에 대하여 설명하였으나, 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서, 구성 요소의 부가, 변경, 삭제 또는 추가 등에 의해 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있을 것이며, 이 또한 본 발명의 권리범위 내에 포함된다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, many modifications and changes may be made by those skilled in the art without departing from the spirit and scope of the invention as defined in the appended claims. The present invention can be variously modified and changed by those skilled in the art, and it is also within the scope of the present invention.

<110> BEESEN Bio. Co., Ltd. <120> GINSENOSIDE COMPOSITION FOR TREATING, IMPROVING, OR PREVENTING INFLAMMATORY DISEASE, AND METHOD FOR PREPARING THE SAME <130> HPC-7597 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 421 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 6MT BGL167 <400> 1 Thr Pro Met Thr Asn Pro Phe Pro Gln Asp Phe Leu Trp Gly Val Ala 1 5 10 15 Thr Ala Gly His Gln Val Glu Gly Asn Asn Val Asn Ser Asp Val Trp 20 25 30 Phe Leu Glu His Leu Pro Gly Thr Ile Phe Ala Glu Pro Ser Gly Asp 35 40 45 Ala Val Asp His Tyr His Arg Tyr Arg Glu Asp Ile Ala Leu Ile Ala 50 55 60 Gly Leu Gly Phe Thr Ser Tyr Arg Phe Ser Val Glu Trp Ala Arg Ile 65 70 75 80 Glu Pro Glu Glu Gly His Phe Ser Val Ala Ala Leu Asp His Tyr Lys 85 90 95 Arg Val Leu Glu Ala Cys Arg Glu His Gly Leu Thr Pro Val Val Thr 100 105 110 Phe His His Phe Ala Ser Pro Leu Trp Leu Leu Arg Ser Gly Gly Trp 115 120 125 Glu Gly Glu Arg Thr Pro Glu Leu Phe Ala Arg Tyr Cys Gly Arg Val 130 135 140 Met Ala His Leu Gly Asp Leu Ile Gly Val Ala Cys Thr Leu Asn Glu 145 150 155 160 Pro Asn Leu Pro Trp Leu Leu Glu Ser Phe Gly Ala Gly Gly Glu Ala 165 170 175 Pro Glu Asn Arg Gly Lys Val Pro Met Trp Ala Ala Ala Ala Gln Arg 180 185 190 Leu Gly Val Asp Ala Ser Thr Val Ala Pro Phe Trp Phe Cys Ser Thr 195 200 205 Glu Ala Gly Phe Asn Val Lys Leu Ala Ala His Lys Ala Ala Thr Glu 210 215 220 Ala Ile Lys Ala Trp Arg Pro Asp Leu Arg Val Gly Trp Thr Leu Ala 225 230 235 240 Asn Ser Asp Ile Gln Ser Val Pro Gly Gly Glu Glu Ile Ala Ala Gln 245 250 255 Val Arg Arg Asp Val Asn Glu Arg Phe Leu Glu Ala Ser Arg Gly Asp 260 265 270 Asp Phe Val Gly Ile Gln Thr Tyr Gly Arg Thr Val Tyr Gly Pro Asp 275 280 285 Gly His Ala Pro Ala Pro Glu Gly Val Ala Val Asn Gln Met Gly Trp 290 295 300 Glu Ile Tyr Pro Gln Ala Leu Glu Ala Thr Ile Arg Glu Ala Trp Arg 305 310 315 320 Val Ala Gly Ile Pro Val Met Val Thr Glu Asn Gly Leu Ala Thr Glu 325 330 335 Asp Asp Thr Gln Arg Val Ala Tyr Leu Arg Thr Ala Val Asp Gly Val 340 345 350 Ala Ser Cys Leu Ala Asp Gly Ile Asp Val Arg Gly Tyr Ile Ala Trp 355 360 365 Thr Ala Phe Asp Asn Phe Glu Trp Ala Ala Gly Tyr Gly Pro Lys Phe 370 375 380 Gly Leu Ile Ala Val Asp Arg Ser Thr Gln Glu Arg Thr Pro Lys Glu 385 390 395 400 Ser Ala Arg Trp Leu Gly Asn Phe Ala Arg Gln Gln Ala Pro Ala Glu 405 410 415 Ala Pro Gln Pro Ala 420 <110> BEESEN Bio. Co., Ltd. <120> GINSENOSIDE COMPOSITION FOR TREATING, IMPROVING, OR PREVENTING          INFLAMMATORY DISEASE, AND METHOD FOR PREPARING THE SAME <130> HPC-7597 <160> 1 <170> KoPatentin 3.0 <210> 1 <211> 421 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 6MT BGL167 <400> 1 Thr Pro Met Thr Asn Pro Phe Pro Gln Asp Phe Leu Trp Gly Val Ala   1 5 10 15 Thr Ala Gly His Gln Val Glu Gly Asn Asn Val Asn Ser Asp Val Trp              20 25 30 Phe Leu Glu His Leu Pro Gly Thr Ile Phe Ala Glu Pro Ser Gly Asp          35 40 45 Ala Val Asp His Tyr His Arg Tyr Arg Glu Asp Ile Ala Leu Ile Ala      50 55 60 Gly Leu Gly Phe Thr Ser Tyr Arg Phe Ser Val Glu Trp Ala Arg Ile  65 70 75 80 Glu Pro Glu Glu Gly His Phe Ser Val Ala Leu Asp His Tyr Lys                  85 90 95 Arg Val Leu Glu Ala Cys Arg Glu His Gly Leu Thr Pro Val Val Thr             100 105 110 Phe His His Phe Ala Ser Pro Leu Trp Leu Leu Arg Ser Gly Gly Trp         115 120 125 Glu Gly Glu Arg Thr Pro Glu Leu Phe Ala Arg Tyr Cys Gly Arg Val     130 135 140 Met Ala His Leu Gly Asp Leu Ile Gly Val Ala Cys Thr Leu Asn Glu 145 150 155 160 Pro Asn Leu Pro Trp Leu Leu Glu Ser Phe Gly Ala Gly Gly Glu Ala                 165 170 175 Pro Glu Asn Arg Gly Lys Val Pro Met Trp Ala Ala Ala Ala Gln Arg             180 185 190 Leu Gly Val Asp Ala Ser Thr Val Ala Pro Phe Trp Phe Cys Ser Thr         195 200 205 Glu Ala Gly Phe Asn Val Lys Leu Ala Ala His Lys Ala Ala Thr Glu     210 215 220 Ala Ile Lys Ala Trp Arg Pro Asp Leu Arg Val Gly Trp Thr Leu Ala 225 230 235 240 Asn Ser Asp Ile Gln Ser Val Pro Gly Gly Glu Glu Ile Ala Ala Gln                 245 250 255 Val Arg Arg Asp Val Asn Glu Arg Phe Leu Glu Ala Ser Arg Gly Asp             260 265 270 Asp Phe Val Gly Ile Gln Thr Tyr Gly Arg Thr Val Tyr Gly Pro Asp         275 280 285 Gly His Ala Pro Ala Pro Glu Gly Val Ala Val Asn Gln Met Gly Trp     290 295 300 Glu Ile Tyr Pro Gln Ala Leu Glu Ala Thr Ile Arg Glu Ala Trp Arg 305 310 315 320 Val Ala Gly Ile Pro Val Met Val Thr Glu Asn Gly Leu Ala Thr Glu                 325 330 335 Asp Asp Thr Gln Arg Val Ala Tyr Leu Arg Thr Ala Val Asp Gly Val             340 345 350 Ala Ser Cys Leu Ala Asp Gly Ile Asp Val Gly Tyr Ile Ala Trp         355 360 365 Thr Ala Phe Asp Asn Phe Glu Trp Ala Ala Gly Tyr Gly Pro Lys Phe     370 375 380 Gly Leu Ile Ala Val Asp Arg Ser Thr Gln Glu Arg Thr Pro Lys Glu 385 390 395 400 Ser Ala Arg Trp Leu Gly Asn Phe Ala Arg Gln Gln Ala Pro Ala Glu                 405 410 415 Ala Pro Gln Pro Ala             420

Claims (7)

총 진세노사이드 함량이 30 ~ 70중량% 함유되고, 상기 총 진세노사이드 중량에 대하여 Rg3 함량이 0.01 ~ 4 중량% 함유된 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물.The present invention relates to a ginseng extract containing 30 to 70% by weight of total ginsenoside and 0.01 to 4% by weight of Rg3 relative to the total ginsenoside weight as an active ingredient. &Lt; / RTI &gt; 제1항에 있어서,
상기 진세노사이드 조성물은 총 진세노사이드 중량에 대하여 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2 중에서 선택된 어느 하나가 2 내지 30중량% 함유된 것을 특징으로 하는 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the ginsenoside composition comprises 2 to 30% by weight of any one selected from Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 based on the total ginsenoside weight. A ginsenoside composition for the treatment, improvement or prevention of inflammatory diseases.
제1항에 있어서,
상기 진세노사이드 조성물은 총 진세노사이드 중량에 대하여 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2의 중량의 합이 30 내지 80중량%인 것을 특징으로 하는 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물.
The method according to claim 1,
The ginsenoside composition according to claim 1, wherein the sum of the weights of Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 is 30 to 80% by weight based on the total ginsenoside weight. A ginsenoside composition for the treatment, improvement or prevention of diseases.
제1항에 있어서,
상기 진세노사이드 조성물은 염증성 질환 치료 또는 예방용 약학 조성물, 또는 염증성 질환 개선 또는 예방용 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the ginsenoside composition is a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of an inflammatory disease or a food composition for improving or preventing an inflammatory disease, the ginsenoside composition for the treatment, improvement or prevention of inflammatory diseases comprising the ginseng extract as an active ingredient .
제1항에 있어서,
상기 염증성 질환은 염증성 피부질환, 크론병, 궤양성 대장염, 복막염, 골수염, 봉소염, 뇌막염, 뇌염, 췌장염, 외상 유발 쇼크, 기관지 천식, 알레르기성 비염, 낭포성 섬유증, 뇌졸중, 급성 기관지염, 만성 기관지염, 골관절염, 통풍, 척추관절병증, 강직성 척추염, 장질환 척추염, 연소자성 관절병증, 연소자성 강직성 척추염, 반응성 관절병증, 감염성 관절염, 전신성 홍반성 루푸스, 재귀열, 건선, 후-감염성 관절염, 임균성 관절염, 결핵성 관절염, 바이러스성 관절염, 진균성 관절염, 매독성 관절염, 류마티스성 다발성근육통, 관절 세포 동맥염, 칼슘 결정 침착 관절병증, 비-관절 류마티즘, 점액낭염, 건초염, 및 혈색소증 중에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein said inflammatory disease is selected from the group consisting of inflammatory skin diseases, Crohn's disease, ulcerative colitis, peritonitis, osteomyelitis, meningitis, meningitis, encephalitis, pancreatitis, trauma-induced shock, bronchial asthma, allergic rhinitis, cystic fibrosis, stroke, acute bronchitis, Osteoarthritis, gouty arthritis, systemic lupus erythematosus, recurrent fever, psoriasis, post-infectious arthritis, gonococcal arthritis, tuberculosis, osteoarthritis, osteoarthritis, gout, spondyloarthropathies, ankylosing spondylitis, Wherein the composition is any one selected from the group consisting of arthritis, viral arthritis, fungal arthritis, rheumatoid arthritis, rheumatoid multiple myalgia, arthropathic arthritis, calcium crystalloid arthropathy, non-articular rheumatism, bursitis, For the Treatment, Improvement or Prevention of Inflammatory Diseases Containing Extracts as Active Ingredients Side composition.
(a) 인삼을 물, 탄소수 1-4의 저급 알코올, 또는 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매로 추출하여 인산 추출물을 제조하는 단계; 및
(b) 상기 인산 추출물을 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 진세노사이드 글라이코시데이즈로 효소 처리하는 단계;를 포함하는 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물의 제조방법.
(a) extracting ginseng with water, a lower alcohol having 1-4 carbon atoms, or a mixed solvent of the lower alcohol and water to prepare a phosphoric acid extract; And
(b) enzymatically treating the phosphoric acid extract with ginsenoside glycosidease comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1; and (c) treating the ginseng extract with an effective ingredient. &Lt; / RTI &gt;
제6항에 있어서,
상기 효소 처리에 따라 진세노사이드 Re, Rb1, Rc, Rb2, Rb3 및 Rd 중에서 선택된 1종 이상이 Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 및 F2 중에서 선택된 1종 이상으로 부분적으로 생물전환 되는 것을 특징으로 하는 염증성 질환의 치료, 개선 또는 예방용 진세노사이드 조성물의 제조방법.
The method according to claim 6,
One or more selected from the group consisting of ginsenosides Re, Rb1, Rc, Rb2, Rb3 and Rd is partially biotransformed into at least one selected from Gyp17, Rg3, C-Mc1, C-Mx1 and F2 &Lt; / RTI &gt; A method for the preparation of a ginsenoside composition for the treatment, amelioration or prevention of an inflammatory disease.
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