KR20100061338A - Controlling method for diesease damage on brassicaceous plants - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주(Variovorax sp. CGF4526)를 유효성분으로서 포함하는 제(劑), 및 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 유효성분으로서 포함하는 제를 평지과 식물에 접촉시키는 것을 특징으로 하는, 평지과 식물 병해의 방제방법에 관한 것이다.The present invention provides a bacteriophage bacterium CGF4526 strain (Variovorax sp. CGF4526) as an active ingredient, and 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro- It relates to a method for controlling rapeseed and plant diseases, comprising contacting rapeseed and plants with an agent comprising m-toluenesulfonanilide as an active ingredient.
평지과 식물 병해의 주요 토양 병해인 뿌리혹병(Plasmodiophorabrassicae Woronin)은, 배추, 양배추, 콜리플라워, 브로콜리 등 평지과 식물 대부분의 식물에 발생하는 토양사상균 병해이다. 뿌리혹병은 이들 평지과 작물의 안정된 생산에 지장을 초래하고 있다. 병징(病徵)으로서는, 심고 나서 20일 정도부터 뿌리에 혹이 생성되며, 초기부터 감염된 경우에는 배추나 양배추에서는 결구(結球)되지 않고, 후반 이후에 감염된 경우에도 수확물이 크지 않으며, 전혀 수확을 얻을 수 없는 경우도 보인다.Plasmodiophorabrassicae Woronin, the major soil disease of rapeseed plant diseases, is a soil fungal disease that occurs in most plants of rapeseed plants, such as cabbage, cabbage, cauliflower, and broccoli. Root gall disease is hampering the stable production of these plains and crops. As a symptom, nodules are formed in the roots from about 20 days after planting, and in the early stages of infection, no cabbage or cabbage is formed in the cabbage or cabbage. I can't even see it.
종래, 미생물을 유효성분으로 한 방제제가 개발되어 오고 있어, 지금까지 평지과 식물 뿌리혹병에 대한 생물 방제법으로서, 바실러스속 세균(특허문헌 1), 아 시도보락스속 세균에 의한 보고예(특허문헌 2)가 있다. 본 발명에 관련된 보고예로서 바리오보락스속 세균에 의한 보고예(특허문헌 3)가 있다.Conventionally, a control agent using microorganisms as an active ingredient has been developed, and a report example by Bacillus bacteria (Patent Literature 1) and Aziboractus bacteria (Patent Literature 2) as a biological control method for rapeseed and plant root gall diseases so far. There is). As a report example related to this invention, there exists a report example (patent document 3) by the genus Barrioborax.
한편, 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드 등의 설폰아미드 유도체는, 예부터 제초제나 농업용 살균제로서 알려져 있다. 설폰아미드 유도체의 제초제로서의 종래 기술은, 특허문헌 4나 특허문헌 5에 밭 작농 원예용의 제초제로서, 특허문헌 6이나 특허문헌 7에 수전용 제초제로서 개시되어 있다.On the other hand, sulfonamide derivatives such as 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide have been known as herbicides and agricultural fungicides since ancient times. The prior art as a herbicide of a sulfonamide derivative is disclosed by patent document 4 and patent document 5 as a herbicide for a field crop horticulture as patent herbicide 6 and patent document 7 as a water-soluble herbicide.
2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 사용한 종래예로서, 특허문헌 8에 평지과 작물의 뿌리혹병이나 감자 창가병(瘡痂病) 등에 대해 우수한 방제효과를 나타내는 것이 개시되어 있다. 또한, 특허문헌 9에 정식(定植) 전의 뿌리에 당해 아닐리드의 수화제 등의 관주(灌注)처리, 침지처리를 행함에 의한 평지과 식물의 육묘(育苗)방법이, 특허문헌 10에 당해 아닐리드와 3-히드록시-5-메틸-이소옥사졸을 유효성분으로서 함유하는 토양 병해 방제제가, 그리고 특허문헌 11에 당해 아닐리드와 테트라클로로이소프탈로니트릴을 유효성분으로서 함유하는 토양 병해 방제제가 보고되어 있다.As a prior art example using 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide, Patent Document 8 discloses root gall disease and potato lanceus of rapeseeds and crops. It is disclosed that exhibiting excellent control effect against. In addition, the method of raising seedlings of flat land and plants by performing irrigation treatment, such as hydration of an anilide, and soaking treatment, on the root before formulation in Patent Literature 9 is disclosed in Patent Literature 10. A soil disease control agent containing hydroxy-5-methyl-isoxazole as an active ingredient and a soil disease control agent containing the anilide and tetrachloroisophthalonitrile as active ingredients have been reported in Patent Document 11.
한편, 아릴설폰아미드 유도체의 살충제로서의 사용에 대해 특허문헌 12에 보고가 이루어져 있다.On the other hand, Patent Literature 12 reports on the use of an arylsulfonamide derivative as a pesticide.
[특허문헌 1] 일본국 특허공개 평11-335217호 공보[Patent Document 1] Japanese Patent Application Laid-Open No. 11-335217
[특허문헌 2] 일본국 특허공개 제2003-342109호 공보[Patent Document 2] Japanese Patent Publication No. 2003-342109
[특허문헌 3] 일본국 특허공개 제2005-137330호 공보[Patent Document 3] Japanese Patent Publication No. 2005-137330
[특허문헌 4] 일본국 특허공개 소54-163814호 공보[Patent Document 4] Japanese Patent Application Laid-Open No. 54-163814
[특허문헌 5] 일본국 특허공개 소58-026863호 공보[Patent Document 5] Japanese Patent Application Laid-Open No. 58-026863
[특허문헌 6] 일본국 특허공개 소57-38706호 공보[Patent Document 6] Japanese Patent Application Laid-Open No. 57-38706
[특허문헌 7] 일본국 특허공개 소57-167907호 공보[Patent Document 7] Japanese Patent Application Laid-Open No. 57-167907
[특허문헌 8] 일본국 특허공개 소61-197553호 공보[Patent Document 8] Japanese Patent Application Laid-Open No. 61-197553
[특허문헌 9] 일본국 특허공개 평8-71호 공보[Patent Document 9] Japanese Patent Application Laid-Open No. 8-71
[특허문헌 10] 일본국 특허공개 평8-198713호 공보[Patent Document 10] Japanese Patent Application Laid-Open No. 8-198713
[특허문헌 11] 일본국 특허공개 평11-292713호 공보[Patent Document 11] Japanese Patent Application Laid-Open No. 11-292713
[특허문헌 12] 미국특허 제3034955호 명세서[Patent Document 12] US Patent No. 3034955
본 발명의 과제는, 평지과 식물 병해인 뿌리혹병에 대해, 안정적이고 높은 방제효과, 안전성이 높으며, 또한 환경오염이 없는 평지과 식물 병해의 방제방법을 제공하는 것이다.SUMMARY OF THE INVENTION An object of the present invention is to provide a method for the control of flat and plant diseases, which is stable, has high control effect and high safety, and is free from environmental pollution, against root-knot diseases, which are flat and plant diseases.
본 발명자들은 상기 과제를 해결하기 위해 예의 검토를 행한 결과, 평지과인 배추, 양배추 등의 평지과 식물 병해인 뿌리혹병에 대해, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주를 유효성분으로서 포함하는 제, 및 화학식 1로 표시되는 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드As a result of earnestly examining in order to solve the said subject, the present inventors made the agent which contains the strain Barioborax bacterium CGF4526 as an active ingredient against root rot diseases, which are rapeseed plant diseases, such as cabbage and cabbage, which are rape, 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide represented
를 유효성분으로서 포함하는 제를 평지과 식물에 접촉시킴으로써, 높은 방제효과를 갖는 방제방법을 발견하여 본 발명을 완성하였다.By contacting a plant containing a as an active ingredient to the rapeseed and plants, to find a control method having a high control effect was completed the present invention.
즉, 본 발명은, 이하의 [발명 1]-[발명 6]에 기재하는 평지과 식물 병해의 방제방법을 제공한다.That is, this invention provides the control method of the rape and plant disease as described in the following [Invention 1]-[Invention 6].
[발명 1][Invention 1]
평지과 식물 병해의 방제방법으로서, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주(Variovorax sp. CGF4526)를 유효성분으로서 포함하는 제를 평지과 식물에 접촉 시키는 공정, 및 화학식 1로 표시되는 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 유효성분으로서 포함하는 제를, 상기 평지과 식물을 정식하는 토양에 접촉시키는 공정을 포함하는 평지과 식물 병해의 방제방법.A method for controlling rapeseed plant diseases, comprising: contacting a rapeseed plant with an agent comprising Variovorax sp. CGF4526 strain (Variovorax sp. CGF4526) as an active ingredient, and a 2 ', 4-dichloro-α represented by Formula 1 A method for controlling rapeseed and plant diseases, comprising the step of contacting the rapeseed and the plant planting soil with an agent comprising, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide as an active ingredient.
[발명 2][Invention 2]
평지과 식물로의 접촉이, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주를 유효성분으로서 포함하는 제를, 파종시의 육묘 배토(培土)에 혼합 또는 관주, 또는 정식 전의 모(苗)에 침지처리 또는 관주함으로써 행하는 것을 특징으로 하는, 발명 1에 기재된 방법.Contact with rapeseed and plants is carried out by mixing or irrigation of an agent comprising a strain of Barioborax bacterium CGF4526 as an active ingredient in seedling soil at the time of sowing, or immersing or irrigation in seedlings before planting. The method as described in the
[발명 3][Invention 3]
토양으로의 접촉이, 화학식 1로 표시되는 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 유효성분으로서 포함하는 제를, 토양 표면에 살포, 또는 토양 혼화함으로써 행하는 것을 특징으로 하는, 발명 1에 기재된 방법.The contact with the soil was carried out on the soil surface with an agent comprising 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide represented by the formula (1) as an active ingredient. It carries out by spraying or soil-miscible, The method of
[발명 4][Invention 4]
평지과 식물 병해의 방제방법으로서, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주(Variovorax sp. CGF4526)를 유효성분으로서 포함하는 제를 파종시의 육묘 배토에 혼합 또는 관주한 후, 추가적으로 정식 전의 모에 침지처리 또는 관주하는 공정, 및 화학식 1로 표시되는 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 유효성분으로서 포함하는 제를, 상기 평지과 식물을 정식하는 토양에 살포, 또는 토양 혼화하는 공정을 포함하는 평지과 식물 병해의 방제방법.As a method for the control of rapeseed and plant diseases, after mixing or irrigation of a seedling containing Variovorax sp. CGF4526 strain (Variovorax sp. CGF4526) as an active ingredient in seedling soil at the time of sowing, additionally immersing or irrigating the seedlings before planting A process comprising, as an active ingredient, a 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide represented by the formula (1); A method of controlling rape and plant diseases, including a process of spraying or mixing soil.
[발명 5][Invention 5]
평지과 식물 병해가 뿌리혹병인 것을 특징으로 하는, 발명 1 내지 4 중 어느 하나에 기재된 방법.The method according to any one of the
[발명 6][Invention 6]
평지과 식물이 배추, 양배추, 무, 콜리플라워, 브로콜리, 청경채, 또는 소송채(小松菜)인, 발명 1 내지 5 중 어느 하나에 기재된 방법.The method according to any one of
앞서 기술한 바와 같이, 특허문헌 3에 기재된 방법에서는, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주를 단독으로 사용했을 때, 심한 발병정도의 경우에는 방제효과가 약한 경우도 있었다(비교예 참조). 그러나, 의외로 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주, 및 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 조합시킴으로써, 현격히 방제효과가 향상되어, 심한 발생하에서도 높은 방제효과가 안정하게 얻어지는 것을 알 수 있었다. 또한, 여기서 말하는 「조합시키는」것이란, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주, 및 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 혼합시키지 않고, 각각 단독의 제를 「병용하는」 것을 말한다.As described above, in the method described in Patent Literature 3, when the Barioborax bacteria CGF4526 strain was used alone, the control effect was weak in some cases of severe onset (see Comparative Example). However, surprisingly, by combining the Barioborax bacteria CGF4526 strain and 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide, the control effect is significantly improved. It was found that a high control effect was obtained stably even under severe occurrence. In addition, the term "combining" as used herein does not mix Barioborax bacteria CGF4526 strain and 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide. , "Use together" alone agent is said.
예를 들면, 후술하는 비교예에 나타내는 바와 같이, 평지과 식물의 뿌리혹병에 대해, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주, 또는 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 각각 단독으로 작용시킨 경우, 방제효과는 작다. 또한, 2개의 제를 혼합한 경우, 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드 및 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주가, 각각의 방제제로서의 기능이 발생하지 않아, 방제효과는 거의 얻어지지 않는다.For example, as shown in the comparative example mentioned later, about the root gall disease of a rapeseed plant, Barioborax bacteria CGF4526 strain or 2 ', 4-dichloro- (alpha), (alpha), (alpha)-trifluoro-4'- When nitro-m-toluenesulfonanilides were acted alone, the control effect was small. In addition, when the two agents were mixed, 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide and Barioborax bacteria CGF4526 strains were each controlled. No function as a zero occurs, and the control effect is hardly obtained.
한편, 특허문헌 9에 의하면, 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드에 상당하는 「풀설파미드제」를, 육묘 배토에 혼화처리하고 있는 것이 개시되어 있고, 방제효과가 거의 없는 것이 개시되어 있으나, 본 발명에서는 전술한 2개의 제를 조합시킴으로써, 특이적인 향상, 즉 단순히 2개의 제를 단독으로 시용(施用)했을 때 예상되는 효과를 훨씬 뛰어넘는 상승(相乘)효과가 있는 것을 알 수 있었다.On the other hand, according to patent document 9, the "pulse sulfamide agent" corresponded to 2 ', 4- dichloro- (alpha), (alpha), (trifluoro) 4'-nitro-m-toluene sulfonanilide is mixed with seedling soil. It is disclosed that the treatment is performed, and that there is little control effect. However, in the present invention, by combining the two agents described above, specific improvement, that is, expected when only two agents are applied alone is expected. It was found that there was a synergistic effect far exceeding the effect.
메커니즘에 대해서는 상세한 것은 분명하지 않으나, 2개의 제가 갖는 뿌리혹병균에 대한 항균성이 관련되어 있는 것이 예상된다.The details of the mechanism are not clear, but it is expected that the antimicrobial activity of the two root roots of bacteria is related.
2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드, 및 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주가, 평지과 식물의 뿌리혹병에 대한 방제효과를 갖는 것은 종래부터 널리 알려져 있다. 그러나, 심한 발병정도의 경우에는 방제효과가 약한 경우도 있었던 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주에 대해, 추가적으로 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 조합시킴으로써, 심한 발병정도의 경우에도 현격히 높은 방제효과를 갖는 것은 알려져 있지 않았다.2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide, and Barioborax bacteria CGF4526 strains have a control effect against the root gall diseases of rape and plants It is known widely from the past. However, 2 ', 4-dichloro-α, α, α-trifluoro-4'-nitro-m- was added to the strain of Barioborax bacteria CGF4526, which had a weak control effect in case of severe onset. By combining toluenesulfonanilide, it is not known to have a markedly high control effect even in the case of severe onset.
본 발명에 있어서의 평지과 식물의 뿌리혹병의 방제방법은, 뿌리혹병에 대한 발병을 종래에 비해 발병정도가 높은 경우에도 강하게 억제할 수 있고, 또한 단독의 균주 또는 단독의 제에 비해 현격히 높은 방제효과를 갖는다는 효과를 나타낸다.In the present invention, the method of controlling the root gall disease of rapeseed and plants can strongly inhibit the onset of root gall disease even when the incidence of the disease is higher than in the prior art, and is significantly higher than the single strain or the agent alone. Has an effect.
또한, 본 발명의 방제방법은, 환경오염을 초래하지 않고, 또한 평지과 식물에 대한 약해(藥害)도 없어, 매우 유용한 방제방법이다.In addition, the control method of the present invention is very useful control method because it does not cause environmental pollution and does not cause damage to flat land and plants.
이하에 본 발명을 상세하게 설명한다.The present invention will be described in detail below.
본 발명의 대상은 평지과 식물 병해의 방제방법으로서, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주(Variovorax sp. CGF4526)를 유효성분으로서 포함하는 제, 및 화학식 1로 표시되는 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드를 유효성분으로서 포함하는 제(이하, 본 명세서에 있어서 「화학약제 N」이라 칭한다)를 평지과 식물에 접촉시키는 것을 특징으로 하는, 평지과 식물 병해의 방제방법이다.An object of the present invention is a method for controlling rapeseed and plant diseases, comprising a baculobarax bacterium CGF4526 strain (Variovorax sp. CGF4526) as an active ingredient, and 2 ', 4-dichloro-α, α represented by the formula (1). The agent containing (alpha)-trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide as an active ingredient (henceforth a "chemical agent N" in this specification) is made to contact a flat plant, It is a method of controlling rape and plant diseases.
먼저, CGF4526 균주에 대해 설명한다.First, the CGF4526 strain is described.
CGF4526 균주는 벼나 야채로부터 분리·수집한 약 7000 균주의 세균으로부터, 사상균인 토마토 위조병균(Fusarium oxysporum) 및 배추 황화병균(Verticillium daliae)에 대한 항균활성, 또한 배추묘를 사용한 포트 검정시험에 의한 선발 결과 얻어진 균주이다. 그 균주는, 독립행정법인 산업기술종합연구소 특허생물기탁센터에 기탁되어, 이하의 수탁번호를 얻어, 특허문헌 3에 개시되어 있다.The CGF4526 strain was selected from about 7000 bacteria isolated and collected from rice or vegetables, and was selected for antibacterial activity against Fusarium oxysporum and Verticillium daliae, which are filamentous bacteria, and by pot assay tests using Chinese cabbage seedlings. The resulting strain. The strain is deposited in the Patent Biotechnology Depository Center of the Industrial Technology Research Institute, an independent administrative corporation, and obtains the following accession number and is disclosed in Patent Document 3.
바리오보락스속 세균 CGF4526 균주(Variovorax sp. CGF4526): FERM BP-10160Variovorax bacterium CGF4526 strain (Variovorax sp. CGF4526): FERM BP-10160
다음으로, 화학약제 N에 대해서 설명한다. 화학약제 N은 상기 특허문헌에 예시된 바와 같이, 농업용 살균제로서 이미 공지된 물질이다. 화학약제 N은 각종 식 물의 병원균에 대해 항균능력을 갖고, 평지과 식물의 뿌리혹병, 감자의 분상(粉狀) 창가병 등에 높은 방제능을 갖는다. 또한, 세균 등에 대해서는 그람양성균에 대해 항균활성을 나타낸다.Next, the chemical agent N is demonstrated. Chemical agent N is a substance already known as an agricultural bactericide, as exemplified in the above patent document. The chemical agent N has antimicrobial ability against various plant pathogens, and has high control ability against root flat diseases of plants, plant stems, etc. In addition, bacteria and the like exhibit antimicrobial activity against Gram-positive bacteria.
화학약제 N에 대해, 예를 들면 특허문헌 8-11에 개시된 방법으로 제조하거나, 또는 시판되고 있는 것을 사용하는 것이 가능하다.With respect to the chemical agent N, for example, it is possible to use a product produced by the method disclosed in Patent Documents 8-11 or commercially available.
본 발명에 있어서의 식물 병해의 대상이 되는 식물은, 배추, 양배추, 무, 콜리플라워, 브로콜리, 청경채, 소송채 등의 평지과 식물이지만, 이들에 한정되지 않는다. 또한, 대상으로 하는 평지과 식물 병해로서는 뿌리혹병이지만, 그 이외에도, 위조병, 황화병 등도 대상 병해이다.The plant which is the object of the plant disease in this invention is flat plants, such as a cabbage, cabbage, a radish, a cauliflower, broccoli, a bok choy, and a litter, but is not limited to these. In addition, as a target of the flat and plant diseases, root-knoll disease, but counterfeit disease, sulphide disease, etc. are also the target disease.
CGF4526 균주의 균의 배양방법, 고정화, 제제화, 조제방법은 특허문헌 3에 개시되어 있는 공지의 수법으로 행할 수 있으나, 이하에 구체예를 들어 설명한다.Although the culture method, immobilization, formulation, and preparation method of the bacteria of the CGF4526 strain can be carried out by a known method disclosed in Patent Document 3, specific examples will be described below.
배지로서는 CGF4526 균주가 증식하는 것이라면 특별히 제한은 없고, 생육 가능한 탄소원, 질소원, 무기물을 적당히 함유하고 있는 배지라면, 천연 배지, 합성 배지 모두 사용할 수 있다. 배지로서는 802 배지, 부용 배지(bouillon medium), 킹스 B 배지(King's B medium), PS 배지, PDB 배지 등을 예시할 수 있다. 이상과 같은 배지로 15~42℃, 바람직하게는 28℃~35℃에서 10~35시간 배양하여 증식시킨 후, 원심분리기 또는 막 농축기에 의해 농축해서 집균을 행하고, 배지성분을 제거한다. 이 조작에 의해 각각의 균체의 농도는 통상 1~50×1010 cfu/㎖ 정도로 농축된다. 이어서, 습(濕)균체에 당류와 글루타민산나트륨, 인산나트륨 완충액으로 되는 보호제 를 첨가하고, 진공건조하는 것이다. 진공건조하기 전에 보호제와 혼합한 균체를 예비 동결하고, 동결한 상태로 진공건조하는 것이 균의 생존율을 유지하기 위해서는 바람직하다. 또한, 보호제는 수용액의 상태로 균체와 혼합해도 되고, 고체인 상태로 혼합해도 된다.There is no restriction | limiting in particular as long as CGF4526 strain propagates as a medium, As long as the medium contains a suitable carbon source, nitrogen source, and inorganic substance, both a natural medium and a synthetic medium can be used. Examples of the medium include 802 medium, bouillon medium, King's B medium, PS medium, PDB medium, and the like. After culturing at 15-42 ° C., preferably at 28 ° C.-35 ° C. for 10 to 35 hours, the cells are grown and concentrated by centrifugation or a membrane concentrator to remove bacteria. By this operation, the concentration of each cell is usually concentrated at about 1 to 50 x 10 10 cfu / ml. Subsequently, a protective agent comprising a saccharide, sodium glutamate, and sodium phosphate buffer is added to the wet cells, followed by vacuum drying. It is preferable to pre-freeze the cells mixed with the protective agent before vacuum drying and to vacuum-dry the cells in the frozen state in order to maintain the viability of the bacteria. In addition, the protective agent may be mixed with the cells in the state of an aqueous solution, or may be mixed in a solid state.
다음으로, 고정화에 대해서 설명한다. 고정화란, 전술한 배양한 균에 대해 보호제를 첨가하여 진공건조하는 조작을 말한다. 고정화에 대해서도 특별히 제한은 없고, 고정화시에 사용하는 보호제로서는, 수크로오스, 프록토오스, 글루코오스 및 소르비톨의 1종 또는 2종 이상으로 되는 당류를 사용하고, 균체와 혼합하여, 진공건조 또는 동결 진공 등의 방법으로 건조함으로써 행할 수 있다.Next, immobilization is demonstrated. Immobilization means the operation of vacuum-drying by adding a protective agent to the cultured bacteria described above. There is no restriction | limiting in particular also about immobilization, As a protective agent used at the time of immobilization, the saccharide which becomes 1 type (s) or 2 or more types of sucrose, fructose, glucose, and sorbitol is used, it mixes with a cell, and vacuum-drying or freeze-vacuum etc. It can carry out by drying by the method of.
다음으로, 제제화에 대해서 설명한다. 제제화란, 전술한 고정화한 배양균체에 대해 담체를 혼합하여 제제로 하는 조작을 말한다.Next, formulation is demonstrated. Formulation means the operation which mixes a carrier with respect to the immobilized cultured cell mentioned above, and uses it as a formulation.
CGF4526 균주는 배양 후의 생균을 그대로 사용해도 되지만, 균체를 고정화한 후에 고체(분제(粉劑) 또는 입제(粒劑), 수화제), 또는 액체의 담체와 혼합하여 제제로서 조제해도 되기에, 당 업자가 적절히 조정할 수 있다.The CGF4526 strain may be used as it is after the incubation of the live cells, but since the cells are immobilized, the CGF4526 strain may be mixed with a solid (powder, granules, hydrates), or a liquid carrier to prepare as a preparation. It can adjust suitably.
제제의 조제시에 사용하는 담체로서는, 탈크, 클레이, 탄산칼슘, 규조토 등의 광물성 분말이나, 피트모스(peat moss), 그리고 폴리비닐알코올 등의 고분자화합물, 크산탄 고무나 알긴산 등의 천연 고분자 화합물 등이 있다.Examples of the carrier used in the preparation of the preparation include mineral powders such as talc, clay, calcium carbonate and diatomaceous earth, high molecular compounds such as peat moss and polyvinyl alcohol, and natural high molecular compounds such as xanthan rubber and alginic acid. There is this.
다음으로, CGF4526 균주에 있어서의 구체적인 균농도에 대해서 설명한다. 균농도는, 그 자체의 평지과 식물로의 방제방법에 따라 변동한다. 예를 들면, 그대로 파종시의 육묘 배토에 접촉하는 경우, 균농도는 각각의 균주에 대해 통상 105 cfu/g~1011 cfu/g이지만, 바람직하게는 106 cfu/g~109 cfu/g, 보다 바람직하게는 107 cfu/g~109 cfu/g이다.Next, the specific bacterial concentration in the CGF4526 strain will be described. The bacterium concentration fluctuates according to its own flat land and plant control method. For example, in the case of contact with seedling soil at the time of sowing, the bacterium concentration is usually 10 5 cfu / g to 10 11 cfu / g for each strain, but preferably 10 6 cfu / g to 10 9 cfu / g, more preferably 10 7 cfu / g to 10 9 cfu / g.
또한, CGF4526 균주를 그대로 육묘 배토에 대해 물로 희석하여 관주시킬 수 있다. 이 경우, 균농도는 각각의 균주에 대해 통상 105 cfu/㎖~1011 cfu/㎖이지만, 바람직하게는 106 cfu/㎖~109 cfu/㎖, 보다 바람직하게는 107 cfu/㎖~109 cfu/㎖이다.In addition, the CGF4526 strain can be irrigated by diluting with water to seedling soil as it is. In this case, the bacterium concentration is usually 10 5 cfu / ㎖ ~ 10 11 cfu / ㎖ for each strain, preferably 10 6 cfu / ㎖ ~ 10 9 cfu / ㎖, more preferably 10 7 cfu / ㎖ ~ 10 9 cfu / ml.
한편, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주를 전술한 고체(분제 또는 입제, 수화제) 또는 액체의 제제로 한 후에, 파종시의 육묘 배토에 접촉하는 것도 가능하다. 이 경우, 균농도를 각각의 세균에 대해, 고체의 제제(분제 또는 입제)인 경우는, 통상 105 cfu/g~1011 cfu/g이지만, 바람직하게는 106 cfu/g~109 cfu/g, 보다 바람직하게는 107 cfu/g~109 cfu/g이다.On the other hand, it is also possible to make varioborax bacteria CGF4526 strain into a solid (powder, granulated, hydrated) or liquid formulation, and then contact with seedling soil upon sowing. In this case, the bacterium concentration is usually 10 5 cfu / g to 10 11 cfu / g in the case of a solid preparation (powder or granules) for each bacterium, but preferably 10 6 cfu / g to 10 9 cfu. / g, more preferably 10 7 cfu / g ~ 10 9 cfu / g.
또한, 고체의 제제(수화제)인 경우, 통상 107 cfu/g~1012 cfu/g이지만, 바람직하게는 108 cfu/g~1011 cfu/g, 보다 바람직하게는 109 cfu/g~1011 cfu/g이다.In addition, in the case of a solid preparation (hydrating agent), it is usually 10 7 cfu / g to 10 12 cfu / g, but preferably 10 8 cfu / g to 10 11 cfu / g, more preferably 10 9 cfu / g to 10 11 cfu / g.
또한, 액체의 제제를 파종시의 육묘 배토에 접촉하는 경우에 대해서는, 상기 고체의 제제(분제 또는 입제)와 동일한 농도범위에서 조정할 수 있다.In addition, about the case where a liquid formulation is contacted with the seedling and the seed | soil at the time of sowing, it can adjust in the same concentration range as the said solid formulation (powder or granules).
또한, CGF4526 균주를 고체(수화제, 분제 또는 입제) 또는 액체의 제제로 한 후, 파종시의 육묘 배토에 대해 물로 희석하여 관주시킬때, 균농도는 고체의 제제(분제 또는 입제)인 경우, 통상 105 cfu/㎖~1011 cfu/㎖이지만, 바람직하게는 106 cfu/㎖~109 cfu/㎖, 보다 바람직하게는 107 cfu/㎖~109 cfu/㎖이다.In addition, when the CGF4526 strain is prepared as a solid (hydrated, powdered or granulated) or liquid formulation, and then irrigated by diluting with water to seedling soil at the time of sowing, the concentration of the bacteria is usually a solid formulation (powdered or granulated). 10 5 cfu / ml-10 11 cfu / ml, but preferably 10 6 cfu / ml-10 9 cfu / ml, more preferably 10 7 cfu / ml-10 9 cfu / ml.
또한, 고체의 제제(수화제)인 경우, 통상 107 cfu/㎖~1012 cfu/㎖이지만, 바람직하게는 108 cfu/㎖~1011 cfu/㎖, 보다 바람직하게는 109 cfu/㎖~1011 cfu/㎖이다.In the case of a solid preparation (hydrating agent), it is usually 10 7 cfu / ml-10 12 cfu / ml, but preferably 10 8 cfu / ml-10 11 cfu / ml, more preferably 10 9 cfu / ml- 10 11 cfu / ml.
또한, 액체의 제제를 파종시의 육묘 배토에 대해 물로 희석하여 관주시키는 경우에 대해서는, 상기 고체의 제제(분제 또는 입제)와 동일한 농도범위에서 조정할 수 있다.In addition, about the case where a liquid formulation is diluted with water and irrigation with the seedling soil at the time of sowing, it can adjust in the same concentration range as the said solid formulation (powder or granules).
다음으로, CGF4526 균주 농도의 조정방법에 대해 설명한다.Next, the adjustment method of the CGF4526 strain concentration is demonstrated.
먼저, CGF4526 균주를 그대로 파종시의 육묘 배토에 접촉시키는 경우, 전술한 농도범위가 되도록 육묘 배토에 접촉시켜서 조정한다.First, when the CGF4526 strain is brought into contact with seedling soil at the time of sowing, it is adjusted by contacting the seedling soil with the above-mentioned concentration range.
다음으로, CGF4526 균주를 그대로 파종시의 육묘 배토에 물로 희석하여 관주시키는 경우는, 먼저, CGF4526 균주의 농도를 전술한 농도범위가 되도록 물로 희석한다. 그 후에, 파종시의 육묘 배토에 관주한다.Next, when the CGF4526 strain is diluted with water in seedling soil at the time of sowing and irrigated, first, the concentration of the CGF4526 strain is diluted with water so as to have the above-mentioned concentration range. After that, the seedlings are irrigated at the time of sowing.
한편, CGF4526 균주를 고체 또는 액체의 제제로 하는 경우는, 전술한 농도범위가 되도록 제제를 첨가하여 조정한 후에, 파종시의 육묘 배토에 접촉시키거나, 또는 물로 희석하여 파종시의 육묘 배토에 관주한다.On the other hand, when the CGF4526 strain is prepared as a solid or liquid formulation, the formulation is added and adjusted so as to be in the concentration range described above, and then contacted with the seedling soil at the time of sowing, or diluted with water, and then irrigated with the seedling soil at the time of sowing. do.
화학약제 N을 시용하는 경우의 시용량에 대해 설명한다. 화학약제 N의 시용량에 대해서는, 대상 병해의 종류, 토양조건(수분, pH), 유기물 함량, 그리고 기상조건에 따라 상이하다. 화학약제 N을 토양처리제로서 시용하는 경우, 통상 유효성분량으로서 50 g~500 g/10 a로 행하고, 바람직하게는 50 g~400 g/10 a, 보다 바람직하게는 70 g~200 g/10 a이다.The dosage when the chemical agent N is used is explained. The dosage of chemical N depends on the type of pest, soil conditions (moisture, pH), organic matter content, and weather conditions. When chemical agent N is applied as a soil treatment agent, it is usually carried out at 50 g to 500 g / 10 a as an effective amount, preferably 50 g to 400 g / 10 a, more preferably 70 g to 200 g / 10 a. to be.
또한, 여기서 말하는 「유효성분량」이란, 화학약제 N 중, 2',4-디클로로-α,α,α-트리플루오로-4'-니트로-m-톨루엔설폰아닐리드만의 성분량을 가리킨다. 예를 들면, 시용량은 시용형태(제제)에 따라 크게 상이하다. 그때는, 전술한 유효성분량의 범위가 되도록 당업자가 적절히 조정할 수 있다.In addition, the "active ingredient amount" referred to here means the component amount of 2 ', 4- dichloro- (alpha), (alpha), (alpha)-(trifluoro-4'-nitro-m-toluenesulfonanilide only in chemical agent N). For example, the dosage varies greatly depending on the application form (formulation). In that case, those skilled in the art can adjust suitably to become the range of the above-mentioned effective amount.
다음으로, 평지과 식물 병해로의 방제방법에 대해 설명한다.Next, the control method to the rape and plant disease is demonstrated.
일반적으로, 배추 등의 평지과 식물의 생산은 육묘 트레이에 육묘 배토를 채워 넣고 파종한다. 3~5주간 육묘한 후에, 포장(圃場)(밭)에 정식을 행한다. 여기서 말하는 정식이란, 식물을 묘상(苗床)에서 밭으로 옮겨, 본식(本式)으로 심는 것을 말한다.In general, the production of rapeseed and other plants such as Chinese cabbage is seeded by filling the seedlings in the seedling tray. After raising it for 3-5 weeks, it is formalized in a pavement. The formality here means moving a plant from a nursery to a field, and planting it in this way.
본 발명의 방제방법으로서는, 이하의 방제방법As a control method of this invention, the following control methods
i) CGF4526 균주를 평지과 식물에 접촉시킨다i) contacting the CGF4526 strain to rapeseed and plants
ii) 화학약제 N을, 평지과 식물을 정식하는 토양에 접촉시킨다ii) contact chemical N with the soil that setstles the plant
을 들 수 있다.Can be mentioned.
먼저, i)에 대해서 설명한다. 처리방법으로서는, CGF4526 균주를 파종시의 육묘 배토에 혼합 또는 관주를 행하거나, 파종 전후의 종자에 관주함으로써 처리할 수 있다. 또한 물로 희석하여 정식 전의 모의 뿌리를 그 희석액에 침지 또는 관주하거나, 또는 육묘 중 또는 정식하기 직전의 모에 관주하는 방법도 가능하다.First, i) will be described. As a treatment method, the CGF4526 strain can be treated by mixing or irrigation to seedling soil at the time of sowing, or by irrigation to seeds before and after sowing. It is also possible to dilute with water to immerse or irrigate the mock roots before planting in the diluting solution, or to irrigate the seedlings during seedling or just before planting.
예를 들면, 파종시 및 정식 전에 처리를 행하는, 즉 파종시의 육묘 배토에 혼합 또는 관주, 또는 정식 전의 모에 침지처리 또는 관주하는 것은, 본균의 뿌리 정착이 보다 효율적으로 이루어지기 때문에 본 발명의 바람직한 태양의 하나이다.For example, the treatment at the time of planting and before planting, that is, mixing or irrigation to seedlings at the time of planting, or immersing or irrigation at the seedlings before planting, is preferred because the root fixation of the bacterium is more efficient. It is one of the suns.
여기서 육묘 배토로의 혼합처리를 행하는 경우는, 토양 1 L당 1 g 이상 혼합하고, 균일해질 때까지 교반하면 된다.What is necessary is just to mix 1g or more per 1L of soil, and to stir until it becomes uniform, when mixing-processing by seedlings is carried out here.
한편, CGF4526 균주를 고체 또는 액체의 제제로 한 후에 전술한 처리방법으로 처리하는 것도 가능하다.On the other hand, it is also possible to treat the CGF4526 strain as a solid or liquid formulation and then to treat it by the above-described treatment method.
다음으로 ii)의 처리방법에 대해 설명한다. 화학약제 N을, i)처리 후, 정식의 대상이 되는 토양(포장 등)에 대해 접촉시킨다. 즉, 토양 표면에 살포하거나, 또는 토양 혼화(전면 토양 혼화, 작조(作條) 토양 혼화)함으로써 행할 수 있다.Next, the processing method of ii) is demonstrated. The chemical agent N is brought into contact with the soil (packing, etc.) subject to formality after i) treatment. That is, it can carry out by spraying on the soil surface, or by mixing with soil (front soil mixing, cropping soil mixing).
상기 i) 및 ii)의 처리방법에 대해서는, 처리의 횟수에 커다란 제한은 없으나, 예를 들면, i)의 처리방법을 복수회 행하는 것은, 방제효과를 더욱 높이는 것이 가능해지기 때문에 바람직한 처리방법의 하나이다. 예를 들면, 후술하는 실시예에 나타내는 바와 같이, CGF4526 균주를 파종시의 육묘 배토에 관주한 후, 추가적으로 정식 전의 모에 관주하는 것은, 복수회 처리를 행함으로써, 본균의 뿌리 정착이 보다 효율적으로 이루어지는 측면에서 특히 바람직한 태양의 하나로서 들 수 있다.The treatment method of i) and ii) is not particularly limited in the number of times of treatment. For example, performing the treatment method of i) a plurality of times is one of the preferred treatment methods because the control effect can be further enhanced. . For example, as shown in Examples described later, after irrigation of CGF4526 strains to seedlings at the time of sowing, additional fertilization to the seedlings before planting is performed a plurality of times, whereby root settlement of the main bacteria is more efficiently achieved. It is mentioned as one of the especially preferable aspect from the side.
이와 같이 본 발명에서는, CGF4526 균주를 유효성분으로서 포함하는 제 및 화학약제 N을 유효성분으로서 포함하는 제를 사용함으로써, 발병정도가 높은 토양에 있어서도 높은 방제효과를 발휘할 수 있다.As described above, in the present invention, by using the agent containing the CGF4526 strain as an active ingredient and the agent containing the chemical agent N as an active ingredient, high control effects can be exhibited even in soils with high incidence.
다음으로 실시예를 나타내나, 본 발명은 이하의 실시예에 의해 한정되지 않는다.Next, although an Example is shown, this invention is not limited by the following example.
또한, 실시예에 사용한 배지의 조성을 다음에 나타낸다.In addition, the composition of the medium used in the Example is shown below.
부용 배지: 육즙 3 g, 펩톤 10 g, NaCl 15 g, 물 1 L, pH 7.0Bouillon medium: 3 g broth, 10 g peptone, 15 g NaCl, 1 L water, pH 7.0
또한, 화학약제 N에 대해서는, 일반적으로 시판되고 있는 것을 사용하였다.In addition, about chemical agent N, the thing commercially available was used.
[실시예 1]Example 1
배추 뿌리혹병으로의 방제시험(포트시험)Control test with Chinese cabbage root disease (pot test)
CGF4526 균주의 제제를 사용하여, 배추 뿌리혹병에 대한 발병 억제효과에 대해 검토를 행하였다. 제제의 제작은 전술한 방법으로 배양, 건조한 균체를 담체(증량제)로 적절히 희석하여, 균농도가 2×1010 cfu/g이 되도록 조정한 것을 사용하였다.Using the preparation of the CGF4526 strain, the effect of inhibiting the onset of Chinese cabbage root-knot disease was examined. The preparation of the formulation was prepared by diluting the cultured and dried cells with a carrier (extender) appropriately by the method described above and adjusting the cells to have a bacterial concentration of 2 x 10 10 cfu / g.
제제를 200배로 희석하고, 배추 종자(품종: 금추(錦秋))를 파종한 토양(128웰 육묘 트레이, 60 cm×30 cm)에 관주하였다. 그 후, 약 3주간 육묘한 후, 오염토양에 심었다. 한편, 정식 전날, 즉 정식 전에도 재차 동일한 관주처리를 행하고 오염토양에 심은 경우에 대해서도 실시하였다.The formulation was diluted 200-fold and irrigated in soil (128 well seedling trays, 60 cm x 30 cm) sown with Chinese cabbage seeds (variety: kumquat). After that, they were seeded for about three weeks and then planted in contaminated soil. On the other hand, the same irrigation treatment was carried out the day before planting, that is, before planting, and also when planted in contaminated soil.
한편, 화학약제 N은 배추 정식 직전에 오염토양에 30 ㎏/10 a의 비율로 혼합하였다.On the other hand, the chemical agent N was mixed with contaminated soil at a rate of 30 kg / 10a immediately before the cabbage formulation.
오염토양은 배추 뿌리혹균으로 병에 걸린 배추 뿌리(뿌리혹 부착)를 호모지나이즈하여 혼화한 밭 토양을 사용하였다. 28일간 후에 발병의 유무를 조사하여, 방제효과의 판정을 행하였다. 그 결과를 표 1에 나타낸다.The contaminated soil was cabbage root fungus and used field soil mixed with homogenized diseased cabbage roots. After 28 days, the presence or absence of outbreak was examined and the control effect was judged. The results are shown in Table 1.
뿌리혹병의 발병정도는 뿌리부의 뿌리혹 상태로부터 발병주율, 발병도, 그리고 방제가를 산출하여 평가하였다.The incidence of root gall disease was evaluated by calculating the incidence rate, incidence, and control value from the root nodule condition of the root.
뿌리부 발병지수 0; 건전, 1; 뿌리의 지근(支根)에 약간 뿌리혹의 부착 확인, 2; 지근에 많은 뿌리혹의 부착 확인, 또는 주근(主根)에 뿌리혹의 부착 확인, 3; 주근에 커다란 뿌리혹의 부착 확인 또는 고사(枯死).Root incidence index 0; Sound, 1; Confirmation of the attachment of root nodules to roots of roots, 2; Confirmation of attachment of many root nodules to the roots, or attachment of root nodules to the main roots, 3; Confirmation or death of large root nodules on the roots.
발병주율(%)=100×{(발병한 주 수)÷(총 조사 주 수)}Incidence rate (%) = 100 × {(weeks onset) ÷ (total weeks)}
발병도=100×{∑(지수의 값)×(각 지수에 해당하는 개체수)}÷{3×(조사 모 수)})Incidence = 100 × {∑ (value of exponent) × (number of individuals corresponding to each exponent)} ÷ {3 × (parameter of survey)})
방제가=100×{(무처리구에서의 발병도)―(처리구에서의 발병도)}÷(무처리구에서의 발병도)Control value = 100 × {(degree of incidence in untreated)-(degree of indigestion)} ÷ (degree of untreated)
결과, 발병정도가 심한 구에 있어서, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주, 및 화학약제 N을 조합시켜서 사용한 경우, 후술하는 비교예 1 및 비교예 2와 비교하여 높은 방제가가 얻어졌다.As a result, in the case of severe onset, when used in combination with the bacteriobacterium bacterium CGF4526 strain and the chemical | medical agent N, the high control value was obtained compared with the comparative example 1 and the comparative example 2 mentioned later.
[비교예 1] 배추 뿌리혹병으로의 방제시험(포트시험)[Comparative Example 1] Control Test for Chinese Cabbage Root Kick Disease (Port Test)
바리오보락스속 세균 CGF4526 균주를 단독으로 사용한 것 이외에는, 실시예 1과 동일하게 행하였다. 현탁액의 균농도도 동일하게 1×108 cfu/㎖로 행하였다.The same procedure as in Example 1 was carried out except that the strain Varioborax bacteria CGF4526 was used alone. The homogeneity of the suspension was also performed at 1 × 10 8 cfu / ml.
뿌리혹병의 발병정도는 실시예 1과 동일하게, 뿌리부의 뿌리혹 상태로부터 발병주율, 발병도, 그리고 방제가를 산출하여 평가하였다.The incidence of root gall disease was evaluated in the same manner as in Example 1 by calculating the incidence rate, the incidence rate, and the control value from the root gum state of the root portion.
[비교예 2] 배추 뿌리혹병으로의 방제시험(포트시험)Comparative Example 2 Test for Controlling Chinese Cabbage Root Gland Disease (Port Test)
화학약제 N을 단독으로 사용한 예를 나타내었다. 오염토양으로 시용한 비율도 동일하게 30 ㎏/10 a로 행하였다.An example of using the chemical agent N alone is shown. The ratio applied to contaminated soil was also performed at 30 kg / 10 a.
뿌리혹병의 발병정도는 실시예 1과 동일하게, 뿌리부의 뿌리혹 상태로부터 발병주율, 발병도, 그리고 방제가를 산출하여 평가하였다.The incidence of root gall disease was evaluated in the same manner as in Example 1 by calculating the incidence rate, the incidence rate, and the control value from the root gum state of the root portion.
이상, 표 2 및 표 3에 나타내는 바와 같이, 각각 CGF4526 균주 및 화학약제 N을 단독으로 사용한 경우, 실시예 1과 비교하여 방제효과가 약한 것을 알 수 있다.As described above, as shown in Tables 2 and 3, it can be seen that when the CGF4526 strain and the chemical agent N are used alone, the control effect is weak as compared with Example 1.
[실시예 2][Example 2]
배추 뿌리혹병으로의 방제시험(포트시험)Control test with Chinese cabbage root disease (pot test)
CGF4526 균주의 제제를 사용하여, 배추 뿌리혹병에 대한 발병 억제효과에 대해 검토를 행하였다. 제제의 제작은 전술한 방법으로 배양, 건조한 균체를 담체(증량제)로 적절히 희석하여, 균농도가 2×1010 cfu/g이 되도록 조정한 것을 사용하였다. 제제는 200배로 희석하고, 배추 종자(품종: 금추)를 파종한 토양에 관주하였다. 그 후, 약 3주간 육묘한 후, 오염토양에 심었다. 또한, 정식 전날, 즉 정식 전에도 동일한 관주처리를 행하고 오염토양에 심은 경우도 실시하였다. 오염토양은, 배추 뿌리혹균으로 병에 걸린 배추 뿌리(뿌리혹 부착)를 호모지나이즈하여 혼화한 밭 토양을 사용하였다. 한편, 화학약제 N은 배추 정식 직전에 오염토양에 30 ㎏/10 a의 비율로 혼합하였다. 27일간 후에 발병의 유무를 조사하여, 방제효과의 판정을 행하였다. 그 결과를 표 4에 나타낸다.Using the preparation of the CGF4526 strain, the effect of inhibiting the onset of Chinese cabbage root-knot disease was examined. The preparation of the formulation was prepared by diluting the cultured and dried cells with a carrier (extender) appropriately by the method described above and adjusting the cells to have a bacterial concentration of 2 x 10 10 cfu / g. The formulation was diluted 200-fold and irrigated to the soil sown cabbage seeds (breed: kumquat). After that, they were seeded for about three weeks and then planted in contaminated soil. The same irrigation treatment was also carried out the day before planting, that is, before planting and planting in contaminated soil. The contaminated soil was a field soil mixed with homogenized cabbage roots (attached to the roots), which were diseased as cabbage root fungi. On the other hand, the chemical agent N was mixed with contaminated soil at a rate of 30 kg / 10a immediately before the cabbage formulation. After 27 days, the presence or absence of outbreak was examined and the control effect was judged. The results are shown in Table 4.
뿌리혹병의 발병정도는 실시예 1과 동일하게, 뿌리부의 뿌리혹 상태로부터 발병주율, 발병도, 그리고 방제가를 산출하여 평가하였다.The incidence of root gall disease was evaluated in the same manner as in Example 1 by calculating the incidence rate, the incidence rate, and the control value from the root gum state of the root portion.
결과, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주 및 화학약제 N을 조합시켜서 접종한 경우, 후술하는 비교예 3 및 비교예 4와 비교하여, 매우 높은 방제가가 얻어졌다.As a result, when inoculating by combining the strain of Barioborax bacteria CGF4526 and the chemical agent N, a very high control value was obtained in comparison with Comparative Examples 3 and 4 described later.
[비교예 3] 배추 뿌리혹병으로의 방제시험(포트시험)Comparative Example 3 Control Test on Chinese Cabbage Root Kick Disease (Port Test)
바리오보락스속 세균 CGF4526 균주를 단독으로 사용한 것 이외에는, 실시예 2와 동일하게 행하였다. 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주의 현탁액의 균농도도 동일하게 1×108 cfu/㎖로 행하였다.The same procedure as in Example 2 was conducted except that the strain Varioborax bacteria CGF4526 was used alone. The bacterium concentration of the suspension of the strain Varioborax bacteria CGF4526 was also performed at 1 × 10 8 cfu / ml.
뿌리혹병의 발병정도는 실시예 1과 동일하게, 뿌리부의 뿌리혹 상태로부터 발병주율, 발병도, 그리고 방제가를 산출하여 평가하였다.The incidence of root gall disease was evaluated in the same manner as in Example 1 by calculating the incidence rate, the incidence rate, and the control value from the root gum state of the root portion.
[비교예 4] 배추 뿌리혹병으로의 방제시험(포트시험)Comparative Example 4 Control Test for Chinese Cabbage Root Gland Disease (Port Test)
화학약제 N을 단독으로 사용한 것 이외에는, 실시예 2와 동일하게 행하였다. 오염토양으로 시용한 비율도 동일하게 30 ㎏/10 a로 행하였다.It carried out similarly to Example 2 except having used chemical agent N independently. The ratio applied to contaminated soil was also performed at 30 kg / 10 a.
뿌리혹병의 발병정도는 실시예 1과 동일하게, 뿌리부의 부리혹 상태로부터 발병주율, 발병도, 그리고 방제가를 산출하여 평가하였다.The incidence of root gall disease was evaluated in the same manner as in Example 1 by calculating the incidence rate, the incidence rate, and the control value from the root beak condition.
이상, 표 5 및 표 6에 나타내는 바와 같이, 각각 단독으로 사용한 경우는 실시예 2와 비교하여 방제효과가 약한 것을 알 수 있다.As mentioned above, as shown in Table 5 and Table 6, when used alone, it turns out that a control effect is weak compared with Example 2.
[실시예 3]Example 3
배추 뿌리혹병으로의 방제시험(포장시험)Control test to cabbage root gall disease (packaging test)
CGF4526 균주의 제제를 사용하여, 배추 뿌리혹병에 대한 발병 억제효과에 대해 검토를 행하였다. 제제의 제작은, 전술한 방법으로 배양, 건조한 균체를 담체(증량제)로 적절히 희석하여, 균농도가 2×1010 cfu/g이 되도록 조정한 것을 사용하였다. 제제는 200배로 희석하고, 배추 종자(품종: 금추)를 파종한 토양에 관주하였다. 그 후, 약 3주간 육묘한 후, 배추 뿌리혹균으로 병에 걸린 배추 뿌리(뿌리혹 부착)를 호모지나이즈하여 혼화한 밭에 이식하였다. 또한, 정식 전날, 즉 정식 전에도 동일한 관주처리를 행하고 나서, 오염 포장에 심은 경우도 실시하였다. 한편, 화학약제 N은 배추 정식 직전에 오염토양에 30 ㎏/10 a의 비율로 혼합하였다. 70일간 후에 발병의 유무를 조사하여, 방제효과의 판정을 행하였다. 그 결과를 표 7에 나타낸다.Using the preparation of the CGF4526 strain, the effect of inhibiting the onset of Chinese cabbage root-knot disease was examined. The preparation of the formulation was prepared by diluting the cultured and dried cells with a carrier (extender) appropriately by the method described above, and adjusting the cells to have a concentration of 2 x 10 10 cfu / g. The formulation was diluted 200-fold and irrigated to the soil sown cabbage seeds (breed: kumquat). Then, after seeding for about three weeks, the cabbage roots (attached to the roots) affected by the cabbage root fungus were homogenized and transplanted into the mixed field. In addition, the same irrigation treatment was carried out the day before the establishment, that is, before the establishment, and then the case was planted in contaminated packaging. On the other hand, the chemical agent N was mixed with contaminated soil at a rate of 30 kg / 10a immediately before the cabbage formulation. After 70 days, the presence or absence of outbreak was examined and the control effect was judged. The results are shown in Table 7.
뿌리혹병의 발병정도는 실시예 1과 동일하게, 뿌리부의 뿌리혹 상태로부터 발병주율, 발병도, 그리고 방제가를 산출하여 평가하였다.The incidence of root gall disease was evaluated in the same manner as in Example 1 by calculating the incidence rate, the incidence rate, and the control value from the root gum state of the root portion.
결과, 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주 및 화학약제 N을 조합시켜 접종한 경우, 후술하는 비교예 5 및 비교예 6과 비교하여 높은 방제가가 얻어졌다.As a result, when the inoculation was inoculated with a strain of Barioborax bacteria CGF4526 and the chemical agent N, a high control value was obtained in comparison with Comparative Examples 5 and 6 described later.
[비교예 5] 배추 뿌리혹병으로의 방제시험(포장시험)Comparative Example 5 Control Test on Chinese Cabbage Root Gland Disease (Packaging Test)
바리오보락스속 세균 CGF4526 균주를 단독으로 사용한 것 이외에는, 실시예 2와 동일하게 행하였다. 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주의 현탁액의 균농도도 동일하게 1×108 cfu/㎖로 행하였다. 70일간 후에 발병의 유무를 조사하여, 방제효과의 판정을 행하였다. 그 결과를 표 8에 나타낸다.The same procedure as in Example 2 was conducted except that the strain Varioborax bacteria CGF4526 was used alone. The bacterium concentration of the suspension of the strain Varioborax bacteria CGF4526 was also performed at 1 × 10 8 cfu / ml. After 70 days, the presence or absence of outbreak was examined and the control effect was judged. The results are shown in Table 8.
뿌리혹병의 발병정도는 실시예 1과 동일하게, 뿌리부의 뿌리혹 상태로부터 발병주율, 발병도, 그리고 방제가를 산출하여 평가하였다.The incidence of root gall disease was evaluated in the same manner as in Example 1 by calculating the incidence rate, the incidence rate, and the control value from the root gum state of the root portion.
[비교예 6] 배추 뿌리혹병으로의 방제시험(포장시험)Comparative Example 6 Control Test for Chinese Cabbage Root Gland Disease (Packaging Test)
화학약제 N을 단독으로 사용한 것 이외에는, 실시예 2와 동일하게 행하였다. 오염토양으로 시용한 비율도 동일하게 30 ㎏/10 a로 행하였다. 70일간 후에 발병의 유무를 조사하여, 방제효과의 판정을 행하였다. 그 결과를 표 9에 나타낸다.It carried out similarly to Example 2 except having used chemical agent N independently. The ratio applied to contaminated soil was also performed at 30 kg / 10 a. After 70 days, the presence or absence of outbreak was examined and the control effect was judged. The results are shown in Table 9.
뿌리혹병의 발병정도는 실시예 1과 동일하게, 뿌리부의 뿌리혹 상태로부터 발병주율, 발병도, 그리고 방제가를 산출하여 평가하였다.The incidence of root gall disease was evaluated in the same manner as in Example 1 by calculating the incidence rate, the incidence rate, and the control value from the root gum state of the root portion.
이상, 표 8 및 표 9에 나타내는 바와 같이, 각각 단독으로 사용한 경우는 실시예 3과 비교하여 방제효과가 약한 것을 알 수 있다.As mentioned above, as shown in Table 8 and Table 9, when used alone, it turns out that the control effect is weak compared with Example 3.
도 1은 실시예, 비교예에 있어서의 방제가를 비교한 것이다. 여기서, A는 바리오보락스속 세균 CGF4526 균주를, B는 화학약제 N을 나타낸다.1 compares the control values in Examples and Comparative Examples. Here, A represents a strain of Barioborax bacteria CGF4526, B represents a chemical agent N.
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