KR20100013184A

KR20100013184A - 항암활성이 있는 로이코노스톡 메센테로이데스 6-2 균주 및상기 균주를 포함하는 김치

Info

Publication number: KR20100013184A
Application number: KR1020080074742A
Authority: KR
Inventors: 차성관; 안병학; 임성일; 최신양; 김주령
Original assignee: 한국식품연구원
Priority date: 2008-07-30
Filing date: 2008-07-30
Publication date: 2010-02-09
Also published as: KR101041440B1

Abstract

본 발명은 항암활성이 있는 로이코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P) 및 상기 균주를 포함하는 김치에 관한 것으로서 보다 상세하게는 김치로부터 분리하고, 항암활성의 기능을 지닌 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주 및 상기 균주를 포함하는 김치에 관한 것이다.

본 발명의 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주는 항암활성, 특히 대장암 세포에 대한 독성이 있어 대장암 예방의 기능을 지닌다.

로이코노스톡 메센테로이데스 6-2, 항암, 대장암

Description

항암활성이 있는 로이코노스톡 메센테로이데스 6-2 균주 및 상기 균주를 포함하는 김치{Leuconostoc mesenteroides 6-2 bacteria having anti-cancer activity and kimchi comprising thereof}

본 발명은 항암활성이 있는 로이코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P) 및 상기 균주를 포함하는 김치에 관한 것으로서 보다 상세하게는 김치로부터 분리하고, 항암활성의 기능을 지닌 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주 및 상기 균주를 포함하는 김치에 관한 것이다.

최근 여러 가지 사망원인 중에서 암(cancer)에 의한 사망자의 증가가 두드러지고 있다. 특히 최근에는 서구형 암으로 알려진 대장암에 의한 사망률이 급속히 높아지고 있는 실정이다. 이의 가장 큰 원인으로 식이변화를 들고 있으며, 그 중에서도 육식의 비중이 높아지고 상대적으로 채식의 비중이 낮아진 것을 들 수 있다.

고지방, 고단백 식이는 담즙과 콜레스테롤의 대사에 변화를 가져올 뿐만 아니라, 이들의 대사물로부터 발암인자를 생산해내는 박테리아의 대사활동을 강화되는 것으로 알려져 있다. 또한 육류의 섭취가 늘어나면 장내 pH의 변화로 인해 유해 세균들의 생장을 높이게 되고 발암에 관련된 효소인 베타-글루쿠로니다제(β-glucuronidase), 베타-글루코시다제(β-glucosidase), 아조레덕타제(azoreductase), 니트로레덕타제(nitroreductase), 트립토판나제(tryptophanase) 등을 유도하는 것으로도 알려져 있다. 그리고 상대적으로 식이 섬유소의 섭취가 줄어들게 됨으로써 이러한 유해 세균들의 배출이 원활하지 못하게 되어 장내 질병을 유발하고 더 나아가 암과 같은 심각한 상황까지 이르게 한다. 하지만 일부 연구에 따르면 육류의 섭취가 많은 유럽 국가 중 일부 국가에서 대장암의 발생 수치가 현저하게 낮은 국가들이 있었는데, 이들 국가의 공통점을 보면 일반적으로 발효식품들을 많이 먹는 국가들이었으며, 특히 핀란드, 불가리아의 경우 요구르트의 섭취가 많기 때문에 대장암 발생률이 현저하게 낮아진다는 보고가 있다. 이러한 유제품들에는 장내에 유익한 미생물들이 많이 들어 있으며 대표적으로 비피도박테리움(Bifidobacterium), 락토바실러스(Lactobacillus) 등을 들 수 있다.

우리나라의 경우 대표적인 젖산균 발효 식품인 김치에는 로이코노스톡(Leuconostoc), 락토바실러스(Lactobacillus), 스트렙토코커스(Streptococcus), 페디오코커스(Pediococcus) 등과 같은 젖산균이 함유되어 있으며, 이들이 항암, 암예방, 면역 등에 효과가 있다는 연구 결과가 보고되고 있다. 또한 장내 pH를 낮춰 유해 미생물 및 병원성 미생물의 성장을 억제하는 정장 효과를 가지고 있으며, 발 암성 전구물질을 발암성 물질로 전화시키는 효소들의 활성을 억제한다는 효과도 보고되고 있다.

본 발명은 항암활성이 있는 젖산균 및 상기 항암활성이 있는 젖산균을 포함하는 김치를 제공하고자 한다.

본 발명은 김치로부터 항암활성이 있는 로이코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P) 및 상기 균주를 포함하는 김치를 제공하고자 한다.

본 발명은 김치로부터 항암활성이 있는 새로운 균주로써 로이코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P)를 분리, 동정하여 항암활성을 지닌 새로운 균주를 얻을 수 있다.

본 발명은 상기 김치로부터 항암활성이 있는 새로운 균주로써 로이코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주를 포함하는 김치를 제공할 수 있어, 항암활성, 특히 대장암을 예방할 수 있는 김치를 제공할 수 있다.

본 발명은 항암활성이 있는 로이코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P)를 나타낸다.

상기에서 로이코노스톡 메센테로이데스 6-2 균주(KACC 91352P)는 항암활성이 있으며, 특히 대장암에 대한 항암활성이 있어 대장암을 예방할 수 있다.

본 발명은 항암활성이 있는 로이코노스톡 메센테로이데스 6-2 균주(KACC91352P)를 포함하는 김치를 포함한다.

본 발명은 항암활성이 있는 로이코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P)를 포함하는 김치에 있어서, 상기 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P)는 김치 중량 대비 1∼10％를 포함될 수 있다.

상기에서 로이코노스톡 메센테로이데스 6-2 균주(KACC 91352P)는 항암활성이 있으며, 특히 대장암에 대한 항암활성이 있어 상기 로이코노스톡 메센테로이데스 6-2 균주(KACC 91352P)를 포함하는 김치는 대장암의 예방에 기여할 수 있다.

이하 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다.

본 발명을 위하여 75종의 김치시료로부터 단백질 분해활성, 전분분해 활성 및 슬라임(slime) 형성능이 있는 약 200개의 균주를 분리하였고, 이들 각각 균주의 효소생성 활성능 및 슬라임 형성능을 조사한 후, 효소생성 활성능 및 슬라임 형성능이 우수한 18 균주를 이용하여 항암관련 인 비트로(in vitro) 실험 수행한 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

항암관련 in vitro 실험은 사람 대장암 세포주인 SNU-C4와 생쥐 정상 세포주인 CHO-K1의 세포독성을 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromid(MTT) assay으로 실시하였으며, 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다.

하기 표 1에서 볼 수 있는 것과 같이 표 1에 기재된 균주는 전체적으로 암 세포주나 정상 세포주 모두에서 생장 억제율이 30％ 내외로 크게 나타나지 않았다. 그러나 균주 중에서 6-2 균주, 7-3 균주, 60-4 균주의 경우 상대적으로 암세포주에서의 생장억제율이 정상 세포에 비해 높은 것으로 나타나 이들이 항암에 있어 우수한 효과가 있음을 알 수 있다.

표 1. 김치에서 분리한 미생물에 의한 대장암세포주(SNU-C4) 및 정상세포주(CHO-K1)의 성장억제율

균주번호	사람 대장암 세포(SNU-C4) 생장억제율(％)	생쥐 정상세포(CHO-K1) 생장억제율(％)
6-2	24.9±4.2*	7.9±2.6
6-3	30.5±4.1	14.4±3.5
7-3	33.8±5.9	15.4±4.5
8-3	19.0±9.8	12.0±3.7
9-2	26.5±9.9	12.5±0.5
9-3	26.3±7.0	13.9±5.5
9-4	20.6±10.7	19.9±2.6
9-6	27.8±7.8	27.0±1.8
60-4	32.9±2.0	12.8±8.9
60-6	30.8±6.7	23.8±5.3
60-7	28.2±4.0	20.5±7.5
61-4	27.5±0.6	13.1±8.2
61-6	25.2±5.6	16.9±0.4
62-1	31.9±0.7	28.2±1.9
64-4	32.0±0.6	21.0±9.7
67-2	28.7±0.8	12.8±6.5
69-1	27.7±0.7	20.9±2.5
69-3	29.5±5.7	20.6±1.6

* 각 실험군마다 세 번의 반복실험을 통한 평균값임(Values are mean±SD of 3 times test per group)

6-2 균주, 7-3 균주, 60-4 균주를 이용해 생쥐 간암 세포주(Hepa1c1c7)에서 의 퀴논 환원효소(quinone reductase, QR) 활성을 조사한 결과는 하기 표 2와 같다.

표 2에서 볼 수 있는 것과 같이 6-2 균주, 7-3 균주, 60-4 균주의 세 가지 균주 모두에서 QR 활성을 보여 주었으며, 활성값은 각각 87.81±0.45, 86.14±6.74, 79.10±4.22로 나타났다. QR 활성은 인체내에 유입되는 외부 독성 물질을 무독화하는 효소 활성중의 하나로써 유해한 퀴논(quinone)을 무독화한 하이드로퀴논(hydroquinone)으로 환원시켜서 우리 몸에서 쉽게 배출시켜 암예방의 효과를 가지는 것으로 알려져 있다. 따라서 실험 결과는 3가지 균주 모두가 암예방 효과를 가지는 것으로 나타났으며, 그 중에서도 6-2의 경우 대조구에 비해 1.4배 활성이 높은 것으로 나타나 효과가 가장 클 것으로 보인다.

표 2. 김치균의 quinone reductase (QR) 활성의 측정

균주	QR 활성(nmoles/min/mg protein)
Control*	64.33±1.86**
6-2	87.81±0.45
7-3	86.14±6.74
60-4	79.10±4.22

* 어떤 시약이나 균주를 처리하지 않고 세포만을 키운 것

** 각 실험군마다 세 번의 반복실험을 통한 평균값임(Values are mean±SD of 3 times test per group)

상기에서 언급한 바와 같이 김치에서 분리하고 항암활성이 우수한 균주로서 6-2 균주를 선발하였으며, 6-2 균주를 16S rRNA 염기서열 분석방법에 의한 균주 동정 결과 Leuconostoc mesenteroides와 99％ 정도의 상동성을 나타내어, Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주로 명명하였으며, 상기 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주는 농업생명공학연구원에 2008년 3월 6일 미생물 수탁번호 KACC 91352P으로 기탁을 하였다.

이하 본 발명의 내용을 실시예 및 시험예를 통하여 구체적으로 설명한다. 그러나, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1>

Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)는 그램염색 결과 양성결과를 보여주었고, 광학현미경 관찰결과 구균이었으며, 카탈라아제 테스트(catalase test) 음성, 옥시데이즈 테스트(oxidase test) 음성과 같은 전형적인 젖산균의 형태적 특성과 생리, 생화학적인 특성을 보여주었다. 또한 16S rRNA 염기서열 분석을 이용하여 Leuconostoc mesenteroides 균종으로 밝혀졌으며 16S rRNA 염기서열 분석 결과는 아래의 표 3에서 보여주는 것과 같다.

표 3. Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주의 염기서열 분석결과

1 ATGAACGCTG GCGGCGTGCC TAATACATGC AAGTCGAACG CACAGCGAAA GGTGCTTGCA 61 CCTTTCAAGT GAGTGGCGAA CGGGTGAGTA ACACGTGGAC AACCTGCCTC AAGGCTGGGG 121 ATAACATTTG GAAACAGATG CTAATACCGA ATAAAACTTA GTGTCGCATG ACAAAAAGTT 181 AAAAGGCGCT TCGGCGTCAC CTAGAGATGG ATCCGCGGTG CATTAGTTAG TTGGTGGGGT 241 AAAGGCCTAC CAAGACAATG ATGCATAGCC GAGTTGAGAG ACTGATCGGC CACATTGGGA 301 CTGAGACACG GCCCAAACTC CTACGGGAGG CTGCAGTAGG GAATCTTCCA CAATGGGCGA 361 AAGCCTGATG GAGCAACGCC GCGTGTGTGA TGAAGGCTTT CGGGTCGTAA AGCACTGTTG 421 TATGGGAAGA ACAGCTAGAA TAGGAAATGA TTTTAGTTTG ACGGTACCAT ACCAGAAAGG 481 GACGGCTAAA TACGTGCCAG CAGCCGCGGT AATACGTATG TCCCGAGCGT TATCCGGATT 541 TATTGGGCGT AAAGCGAGCG CAGACGGTTT ATTAAGTCTG ATGTGAAAGC CCGGAGCTCA 601 ACTCCGGAAT GGCATTGGAA ACTGGTTAAC TTGAGTGCAG TAGAGGTAAG ATGGAACTCC 661 ATGTGTAGCG GTGGAATGCG TAGATATATG GAAGAACACC AGTGGCGAAG GCGGCTTACT 721 GGACTGCAAC TGACGTTGAG GCTCGAAAGT GTGGGTAGCA AACAGGATTA GATACCCTGG 781 TAGTCCACAC CGTAAACGAT GAACACTAGG TGTTAGGAGG TTTCCGCCTC TTAGTGCCGA 841 AGCTAACGCA TTAAGTGTTC CGCCTGGGGA GTACGACCGC AAGGTTGAAA CTCAAAGGAA 901 TTGACGGGGA CCCGCACAAG CGGTGGAGCA TGTGGTTTAA TTCGAAGCAA CGCGAAGAAC 961 CTTACCAGGT CTTGACATCC TTTGAAGCTT TTAGAGATAG AAGTGTTCTC TTCGGAGACA 1021 AAGTGACAGG TGGTGCATGG TCGTCGTCAG CTCGTGTCGT GAGATGTTGG GTTAAGTCCC 1081 GCAACGAGCG CAACCCTTAT TGTTAGTTGC CAGCATTCAG ATGGGCACTC TAGCGAGACT 1141 GCCGGTGACA AACCGGAGGA AGGCGGGGAC GACGTCAGAT CATCATGCCC CTTATGACCT 1201 GGGCTACACA CGTGCTACAA TGGCGTATAC AACGAGTTGC CAACCCGCGA GGGTGAGCTA 1261 ATCTCTTAAA GTACGTCTCA GTTCGGATTG TAGTCTGCAA CTCGACTACA TGAAGTCGGA 1321 ATCGCTAGTA ATCGCGGATC AGCACGCCGC GGTGGATACG TTCCCCGGGT

<실시예 2>

항암과 관련된 in vitro 실험(MTT 및 QR)을 통하여 최종적으로 선발된 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 이용하여 대장암의 암화 표지 인자로 알려진 전암병변인 이상선와소(aberrant crypt foci, ACF)의 형성에 미치는 영향을 조사하는 인 비보(in vivo) 동물실험을 수행하였다.

동물실험에 사용된 실험동물은 4주령의 F344 숫컷 래트(RAT)를 사용하였으며, 실험에 사용된 실험동물 사료의 식이조성은 AIN-93G를 기본으로 하고 대두유 4％와 돈지 4％를 더하여 지방의 함량이 총 15％가 되게 조정하였다. ACF의 발생을 위해 사용된 발암물질 아조옥시메탄(azoxymethane, AOM)은 격주로 2회 15mg/kg body weight씩 총 30mg/kg body weight를 복강투여 하였고, Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)는 2×10⁹cfu/ml의 양을 일주일에 3회 경구투여 하였다.

(1) 상기에서 언급한 조건으로 12주 동안의 동물실험 후 각 실험군별로 측정한 체중증가와 일일 식이섭취량은 표 4와 같다. 표 4와 같이 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 투여한 실험군에서 투여하지 않은 실험군에 비해서 체중이 늘어난 것을 확인할 수 있었고, 대조구와 발암물질 AOM 만을 투여한 군은 체중이 비슷하나 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)만을 투여하거나 AOM과 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)을 같이 투여한 실험군에서는 체중이 증가한 것을 알 수 있었다. 사료 섭취량의 경우 전군에서 섭취량의 차이는 나타나지 않았다(표 4 참조).

표 4. Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)을 급여한 동물실험에서 각 실험군별 실험동물의 체중증가 및 일일 식이섭취량

실험군	체중증가(g)	식이섭취량(g/day)
대조구*	209.07±15.95**	12.94±0.97
6-2 균주만 공급한 군	218.38±17.46	13.39±1.12
발암물질(AOM) 투여군	210.05±13.07	13.19±1.34
6-2 균주 + 발암물질 투여군	213.62±12.80	13.33±1.33

* 대조구는 발암물질을 투여하지 않고 6-2 균주도 공급하지 않은 실험군

** 각 실험군 당 15마리의 측정값의 평균과 편차를 나타냄(Values are the mean±SD for 15 animals in each group)

(2) 상기에서 언급한 조건으로 12주 동안의 동물실험 후 실험동물의 장기별 무게 및 대장의 길이를 측정한 결과는 표 5와 같다. 표 5에서 볼 수 있는 것과 같이 간과 소장에서 실험군 간의 차이를 볼 수 있었는데, 간의 경우 발암물질 AOM을 처리한 실험군에서 무게가 줄어들었으며, 소장의 경우에는 AOM과 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 같이 처리한 실험군에서 무게가 줄어든 것으로 나타났다.

표 5. 동물실험 후 실험동물의 실험군별 장기무게 및 대장 길이의 측정결과

실험군	간(g)	지라(g)	신장(g)	소장(g)	대장(cm)
대조구*	9.04±0.70^a**	0.62±0.06***	1.83 ±0.12	6.20 ±0.59^a	17.34 ±1.29
6-2 균주만 공급한 군	9.23±0.63^a	0.63±0.04	1.91±0.13	6.22±0.74^a	17.41±1.93
발암물질(AOM) 투여군	8.09±0.49^b	0.63±0.05	1.82±0.09	6.30±0.35^a	16.49±1.49
6-2 균주 + 발암물질 투여군	8.19±0.56^b	0.65±0.04	1.86±0.09	5.65±0.34^b	16.60±1.64

** 같은 열에서 같은 값을 보이지 않는 경우 5％ 수준에서 유의적인 차이가 있음을 나타냄(Values in the same row that do not share a common superscript are significantly different at p＜0.05)

*** 각 실험군 당 15마리의 측정값의 평균과 편차를 나타냄(Values are the mean±SD for 15 animals in each group)

(3) 상기에서 언급한 조건으로 12주 동안의 동물실험 후 실험동물의 혈액성분의 검사 결과는 표 6과 같다. 표 6에서 볼 수 있는 것과 같이 적혈구 및 백혈구 의 수에 있어서는 실험군간의 차이가 나타나지 않았으나, 혈청 지오티(GOT)의 경우 발암물질과 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 함께 먹인 실험군에서 유의적으로 낮은 수치를 보여주었으며, 혈청 지피티(GPT)의 경우 발암물질과 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 단독으로 투여한 실험군에서 대조구에 비하여 유의적으로 높은 수치를 보여주었다(표 6).

표 6. 실험동물의 혈액성분 분석 결과

실험군	혈청 지오티 (U/L)	혈청 지피티 (U/L)	적혈구수 (10⁶/ul)	백혈구수 (10³/ul)
대조구*	95.38±12.47^a**	55.54±5.62^a	10.34±0.27***	8.33±1.29
6-2 균주만 공급한 군	90.00±9.90^ab	58.85±7.61^ab	10.41±0.23	8.10±1.67
발암물질(AOM) 투여군	89.08±11.25^ab	61.23±4.71^b	10.21±0.39	7.35±1.39
6-2 균주 + 발암물질 투여군	83.23±6.50^b	56.31±5.38^a	10.23±0.28	7.84±0.92

(4) 상기에서 언급한 조건으로 12주 동안의 동물실험 후 실험동물에 발암물질 AOM을 투입하였을 때 실험동물의 대장에 형성된 aberrant crypt foci(ACF) 및 aberrant crypt(AC)의 생성결과는 표 7에서 보여주는 것과 같다.

표 7에서 볼 수 있는 것과 같이 발암물질 AOM 만 투여한 실험군에 비해 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)와 함께 투여한 실험군은 ACF 및 AC의 발생율이 감소된 것을 관찰할 수 있었다. 대조구와 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)만 투여한 실험군에서는 ACF 및 AC의 발생이 전혀 나타나지 않았다. AOM 만을 투여한 경우 118±34.33개의 ACF가 발생하였지만 AOM과 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 함께 투여한 경우 93.63±30.23 개로 약 19％가 감소한 것을 볼 수 있었고, AC의 경우도 AOM만 투여한 경우 290.13±81.29에서 AOM과 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 투여했을 때 226.00±65.79개로 약 22％가 감소한 것을 알 수 있었다(표 7).

표 7. 발암물질 AOM의 투입에 따른 대장에서의 aberrant crypt foci(ACF) 및aberrant crypt(AC)의 생성 결과

실험군	ACF/colon	AC/colon
대조구	0	0
6-2 균주만 공급한 군	0	0
발암물질(AOM) 투여군	118.75±34.38^ab	290.13±81.29^ab
6-2 균주 + 발암물질 투여군	93.63±30.23^b	226.00±65.79^b

* 각 실험군 당 10마리의 측정값의 평균과 편차를 나타냄(Values are the mean±SD for 10 animals in each group)

<실시예 3>

Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)의 항산화능을 ORAC assay를 이용해 측정하고 그 결과를 도 1에 나타내었다.

도 1에 나타낸 바와 같이 퍼옥실 라디칼(peroxyl radical) 소거활성에 의한 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)의 항산화능은 대조구에 비하여 높은 것으로 측정되었다.

<실시예 4>

Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 김치에 첨가하여 이들에 대해 SUN-C4 세포주를 이용해 세포의 생장억제율을 MTT assay를 이용해 측정하고 그 결과를 도 2에 나타내었다.

도 2에서 볼 수 있는 것과 같이 김치 자체에도 암세포의 생장억제 능력이 있지만 김치에 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 첨가한 경우가 생장억제능이 더 큰 것으로 나타났다. 그리고 저장 기간이 오래됨에 따라 생장 억제능이 더 향상되는 것을 알 수 있었다.

<실시예 5>

Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 첨가한 김치의 항염증 활성능을 알아보기 위해 RAW 264.7 세포주를 이용해 전염증 인자인 나이트릭 옥사 이드 (Nitric oxide, NO)를 리포폴리사카라이드(Lipopolysaccharide, LPS)로 유도하고 여기에 시료를 첨가함으로써 이들의 NO 생성억제능을 측정하였다. NO의 함량은 이의 대사물인 아질산염 (Nitrite)의 농도로 측정하였으며, 소디움 나이트라이트(Sodium nitrite)를 이용함 검량선으로부터 산출하였다. 그 결과를 도 3에 나타내었다.

도 3과 같이 Leuconostoc mesenteroides 6-2 균주(KACC 91352P)를 김치에 첨가 하였을 때 김치 단독 보다는 아질산염(Nitrite)의 생성이 저해되는 것을 알 수 있었으며, 농도 의존적으로 저장기간 의존적으로 아질산염의 생성이 더 많이 억제되는 것을 알 수 있었다.

상술한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.

본 발명은 김치로부터 항암활성이 있는 새로운 균주로써 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P)를 분리, 동정하여 항암활성을 지닌 새로운 균주를 얻을 수 있어 항암제에 대한 새로운 제제를 제공할 수 있다.

본 발명은 상기 김치로부터 항암활성이 있는 특히 대장암을 예방할 수 있는 새로운 균주로써 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주를 포함하는 김치를 제공할 수 있어 김치관련 시장의 확대에 기여할 수 있으며, 상기 김치를 섭취하는 소비자의 암예방에 기여할 수 있다.

도 1은 Peroxyl radical 소거활성에 의한 김치균 (6-2)의 항산화능 측정결과를 나타낸 그래프로서, 도 1에서 대조구는 6-2배양에 쓰인 MRS 배지의 활성을 본 것이고, 이때 농도는 6-2 배양액 자체를 100％로 봤을 때 실험에 사용된 농도를 의미한다.

도 2는 김치균 첨가 김치의 SNU-C4 세포주를 이용한 생장 억제율 측정결과를 나타낸 그래프로서, 김치 대조구는 아무처리하지 않은 김치, 김치 실험구는 김치균을 첨가한 김치를 의미하고, 실험에 사용된 농도는 시료를 수집했을 때의 농도를 100％로 봤을 때 실험에 사용된 농도를 나타내는 것 이다.

도 3은 김치균 첨가 김치의 RAW 264.7 세포주를 이용한 항염증 작용의 측정결과를 나타낸 그래프로서, 김치 대조구는 아무처리하지 않은 김치, 김치 실험구는 김치균을 첨가한 김치를 의미하고, 실험에 사용된 농도는 시료를 수집했을 때의 농도를 100％로 봤을 때 실험에 사용된 농도를 나타내는 것 이다.

<110> KOREA FOOD RESEARCH INSTITUTE <120> Leuconostoc mesenteroides 6-2 bacteria having anti-cancer activity and kimchi comprising thereof <130> 7012 <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1370 <212> DNA <213> Leuconostoc mesenteroides 6-2 <400> 1 atgaacgctg gcggcgtgcc taatacatgc aagtcgaacg cacagcgaaa ggtgcttgca 60 cctttcaagt gagtggcgaa cgggtgagta acacgtggac aacctgcctc aaggctgggg 120 ataacatttg gaaacagatg ctaataccga ataaaactta gtgtcgcatg acaaaaagtt 180 aaaaggcgct tcggcgtcac ctagagatgg atccgcggtg cattagttag ttggtggggt 240 aaaggcctac caagacaatg atgcatagcc gagttgagag actgatcggc cacattggga 300 ctgagacacg gcccaaactc ctacgggagg ctgcagtagg gaatcttcca caatgggcga 360 aagcctgatg gagcaacgcc gcgtgtgtga tgaaggcttt cgggtcgtaa agcactgttg 420 tatgggaaga acagctagaa taggaaatga ttttagtttg acggtaccat accagaaagg 480 gacggctaaa tacgtgccag cagccgcggt aatacgtatg tcccgagcgt tatccggatt 540 tattgggcgt aaagcgagcg cagacggttt attaagtctg atgtgaaagc ccggagctca 600 actccggaat ggcattggaa actggttaac ttgagtgcag tagaggtaag atggaactcc 660 atgtgtagcg gtggaatgcg tagatatatg gaagaacacc agtggcgaag gcggcttact 720 ggactgcaac tgacgttgag gctcgaaagt gtgggtagca aacaggatta gataccctgg 780 tagtccacac cgtaaacgat gaacactagg tgttaggagg tttccgcctc ttagtgccga 840 agctaacgca ttaagtgttc cgcctgggga gtacgaccgc aaggttgaaa ctcaaaggaa 900 ttgacgggga cccgcacaag cggtggagca tgtggtttaa ttcgaagcaa cgcgaagaac 960 cttaccaggt cttgacatcc tttgaagctt ttagagatag aagtgttctc ttcggagaca 1020 aagtgacagg tggtgcatgg tcgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg gttaagtccc 1080 gcaacgagcg caacccttat tgttagttgc cagcattcag atgggcactc tagcgagact 1140 gccggtgaca aaccggagga aggcggggac gacgtcagat catcatgccc cttatgacct 1200 gggctacaca cgtgctacaa tggcgtatac aacgagttgc caacccgcga gggtgagcta 1260 atctcttaaa gtacgtctca gttcggattg tagtctgcaa ctcgactaca tgaagtcgga 1320 atcgctagta atcgcggatc agcacgccgc ggtggatacg ttccccgggt 1370

Claims

항암활성이 있는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P).
제1항에 있어서, 대장암에 대한 항암활성이 있는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P).
항암활성이 있는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P)를 포함하는 김치.
제3항에 있어서, 대장암에 대한 항암활성이 있는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P)를 포함하는 김치.
제3항에 있어서, 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 6-2 균주(KACC 91352P)는 김치 중량 대비 1∼10％를 포함되는 김치.