KR20090114905A - 신규한 바실러스 리케니포르미스 균주 및 이를 포함하는돼지 분뇨의 악취 저감 및 액비화를 위한 미생물 제제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 신규한 바실러스 리케니포르미스와 이를 포함하는 돼지 분뇨의 악취 저감 및 액비화를 위한 미생물 제제에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 가축 배설물로 인한 악취와 난분해성 유기물 등을 용이하게 분해시키고, 분뇨 혼합물의 발효를 촉진하여 액비화하는 토양으로부터 분리한 신규한 바실러스 리케니포르미스 및 이를 포함하는 미생물 제제에 관한 것이다.

바실러스 리케니포르미스, 액비, 돼지 분뇨, 미생물 제제

Description

신규한 바실러스 리케니포르미스 균주 및 이를 포함하는 돼지 분뇨의 악취 저감 및 액비화를 위한 미생물 제제{NOVEL BACILLUS LICHENIFORMIS AND MICROORGANISM AGENT COMPRISING THE STRAINS FOR REDUCING A BAD SMELL OF PIG EXCREMENTS AND PRODUCING A LIQUIFIED FERTILIZER THEREFROM}

본 발명은 신규한 바실러스 리케니포르미스 균주와 이를 포함하는 돼지 분뇨의 악취 저감 및 액비화를 위한 미생물 제제에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 가축 배설물로 인한 악취와 난분해성 유기물 등을 용이하게 분해시키고, 분뇨 혼합물의 발효를 촉진하여 액비화하는, 토양으로부터 분리한 신규한 바실러스 리케니포르미스 균주 및 이를 포함하는 미생물 제제에 관한 것이다.

국내 축산업은 기존의 자본과 노동 집약적인 산업형태에서 생산성을 향상시키기 위해 대량 사육형태로 성장을 하고 있으나, 축산에서 기인하는 수질, 토양 및 대기 오염과 같은 환경문제, 가축의 질병증가, 항생제 남용, 해외 축산물 수입 등 국내외적인 문제들로 인해 많은 어려움을 겪고 있는 실정이다.

특히 축산분뇨 처리와 악취문제는 지속가능한 축산발전을 위해서 시급히 해결해야 할 당면과제로 대두되고 있으나, 운영비 및 운영기술이 부족하여 자체적으 로 자원화하기보다는 위탁이나 해양투기에 의존하고 있다.

이러한 문제를 해결하기 위한 한 가지 방법으로 주로 가축의 급여용으로 미생물 사료첨가제를 사용하고 있지만 실제 동물의 장을 통과하여 생존할 수 있는 미생물이 함유된 사료첨가제는 거의 없으며, 배설된 분뇨에서도 악취 저감이나 분뇨 분해효과까지 가지는 우수한 제품은 거의 없는 실정이다. 일부 액비 저장조에 직접 투입하는 발효 또는 분해용 제품들도 있으나 고액분리 및 폭기 시설 등의 물리적인 처리방법 등이 병행되지 않는 경우에는 이 방법 역시 효과가 미미한 것으로 보고되어 있다.

본 발명의 목적은 돼지 분뇨의 액비화를 촉진시키고 유기물에 의해 유발되는 각종 악취의 제거능력이 우수한 활성 미생물 균주를 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 바실러스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis)를 포함하는 것을 특징으로 하는 돼지 분뇨의 악취 저감 및 액비화 촉진 미생물 제제를 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은, 상기 미생물을 포함하는 돼지 분뇨 액비화 촉진 발효제의 가장 적합한 배합비를 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 목적은 돼지 분뇨의 액비화를 촉진시키고 각종 악취의 제거능력이 우수한 바실러스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis) EDS-2를 제공하는 것이다.

본 발명에서는 먼저 다양한 환경으로부터 유기물 분해능이 우수하고, 악취제거능이 효과적인 미생물을 탐색, 확보하였다.

그 결과, 본 발명에서는 대표적인 유기물 구성체인 단백질, 지방, 탄수화물의 분해능과 악취제거능이 우수한 미생물로서 바실러스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis)를 선별하였다.

바실러스 리케니포르미스는 리파아제 활성과 동물성 프로테아제의 활성이 우수하기 때문에, 지질과 동물성 단백질에 대한 분해를 더욱 향상시킬 수 있다. 또 한, 상기 균주 배양액의 기능성 효소활성능이 50 ℃까지 안정화를 보였고, 6개월의 장기간 보관에도 일정량의 균수를 유지한다는 장점이 있다.

본 발명에 있어서는, 돼지 분뇨의 악취 저감능을 가지는 동시에 액비화를 촉진할 수 있는 발효능을 가진 균주를 선별하기 위해 축산농가 주변의 토양을 채취하여 일반배지인 영양 한천(Nutrient agar) 배지를 사용해서 배양하고, 유기물 분해능을 생화학적 특성을 비교하는 배지를 만들어 다른 미생물들과 특성을 비교하여 새로운 균주를 분리하였다. 다음 표 1에는 효소별 생화학적 배지 조성을 기재하였다.

효소별 생화학적 배지 조성

효 소	생화학적 효소 배지
α-아밀라제	- LB - 0.5% 가용성 전분 - 검출시약 : 5mg/ml I2, 50mg/ml KI
셀룰라제	- 1% CMC(low) - 0.5% NaCl - 0.5% 효모 추출물 - 0.3% 폴리펩톤 - 0.2% (NH4)2SO4 - 0.05% MgSO47H2O - 0.2% K2HPO4 (pH 6.5) - 검출시약 : 0.1% 콩고 레드, 1M NaCl
리파제	- 0.5% 펩톤 - 0.3% 효모 추출물 - 1% 한천 (pH 6.5) - 1% 트리부티린 (0.2um filtration) - 검출 : clear zone
동물성 프로테아제	- 2% 스킴 밀크 - 검출 : clear zone
식물성 프로테아제	- 2% ISP - 검출 : clear zone
파이테이즈 (Phytase)	- LB - 1% Na-phytate - 검출시약 : Ammonium molybdate /Ammonium vanadate staining or Ascorbic acid staining

본 발명은 또한 상기의 선택된 균주로부터 생산되는 아밀라제, 셀룰라제, 리파제, 프로테아제 및 파이테이즈 효소의 특성을 조사하였으며, 온도 및 pH 안정성을 측정하였다. 상기 균주는 30 내지 50 ℃의 온도 범위에서 열안정성 및 pH 6 내지 7 범위에서 안정성을 가지고 있다.

선별된 균주를 바실러스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis) EDS-2로 명명하고, 2008년 3월 27일자로 한국생명공학연구원에 기탁하였다(기탁번호 KCTC18128P).

상기한 바와 같이 선별된, 본 발명의 액비화 및 악취제거용 미생물 제제를 제조하기 위한 우수한 균주를 고온고압 살균한 영양배지(글루코스 60g, 효모추출물 90g, K₂HPO₄ 3g, (NH₄)₂SO₄ 12g, MgSO₄ 3g, MnSO₄4H₂O 0.21g, CaCl₂ 0.3g, pH 7.0)에서 33 내지 37 ℃, 180 내지 200 rpm 조건으로 12 내지 24시간 동안 진탕 배양한다. 상기 진탕배양한 배양액을 영양배지에 접종하여 생물반응기에서 교반 배양한다. 생물반응기에서의 교반 배양은 25 내지 35 ℃, pH 5.5 내지 7.5, 200 내지 900 rpm, 공기공급량 0.5 내지 1 vvm의 조건으로 12 내지 36시간 동안 실시한다.

본 발명의 돼지 분뇨 악취 저감 및 액비화 촉진용 미생물 제제는 유기물 분해능 및 악취 감소능이 우수한 미생물 균주들을 각각 분리, 선별하고, 상기에서 분리한 균주를 생물반응기에서 배양하여 상기 각 배양액과 생물학적으로 부합하는 부형제를 첨가하여서 제조된다.

본 발명의 액비화 미생물 제제는 상기에서 제조된 바실러스 리케니포르미스를 포함하는 배양액과 대두박, 옥수수 등의 곡물 부형제와 혼합 및 건조한 미생물 기재를 제조하고, 여기에 미생물 기재 100중량부에 대하여 황산제일철 10 내지 30중량부 및 유카 5 내지 15중량부를 교반하여 제조한다.

상기 곡물 부형제를 포함하는 미생물 기재는 본 발명에 따른 바실러스 리케니포르미스를 포함하는 배양액을 전체 기재 중량에 대하여 최대 20중량%를 첨가하여 제조한다.

황산제일철과 유카는 이미 돼지 분뇨 악취 저감과 액비화 촉진제제로 단일 및 혼합원료로 사용되고 있다.

따라서, 본 발명에서는 자연계에서 분리한 미생물 균주와 효과가 이미 검증된 재료들을 이용하여 가장 적절한 배합비로 구성된다.

제조된 본 발명의 액비화 미생물 제제를 가축 분뇨에서 발생되는 악취의 저감에 적용할 때에는 가축 분뇨 1 L에 대하여 본 발명에 따른 미생물 제제 0.2 g을 투입하고, 하루 30분씩 12시간 간격으로 교반을 제공하면서 3개월간 운전한다.

악취의 경우, 각각의 악취물질들은 인간이 감지할 수 있는 농도가 각각 다르기 때문에 각각의 악취물질들이 악취 발생에 어느 정도 기여를 하는지를 나타낼 수 있는 방법이 필요하다. 본 발명에서는 바실러스 리케니포르미스를 포함하는 미생물 제제를 첨가하여 돼지 분뇨로부터 발생되는 악취물질의 기여도를 Odor Index(OI)를 이용하여 평가한 결과, 악취의 상당한 저감을 확인하였다.

본 발명에서는 토양에 존재하는 미생물들과 후보소재들을 각각 생화학적 분 석을 통하여 바실러스 리케니포르미스 균주를 최종 선발하였으며, 선발된 균주를 배양하여 곡물배지와 혼합하고 선발된 발효 촉진원료 후보소재들(유카, 황산제일철 등)과 적절히 배합해서 돼지 분뇨 액비화 실험을 수행하여 돼지 분뇨의 악취 저감 및 액비화를 촉진할 수 있는 미생물 제제를 제조하였다.

따라서, 본 발명에 따르면 최적의 배합비로 설정된 효과적인 돼지 분뇨 악취 저감 및 액비화 촉진 발효를 위한 미생물 제제를 제공할 수 있다.

이하 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되는 것은 아니다.

실시예 1 선별균주의 기능성 효소 활성 측정

분리된 균주에서 생산되는 아밀라제(amylase), 셀룰라제(cellulase), 리파아제(lipase), 프로테아제(protease) 및 파이테이즈(phytase) 효소의 특성을 조사하기 위해서 상기의 액상 배양액을 원심분리(5,000 rpm, 30분)하여 얻은 상등액에 단백질 분해효소 저해제인 PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride)와 EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid)를 각각 0.1 mM과 0.05 mM씩 첨가하였다.

분리된 상등액은 암모늄설페이트 80%로 단백질 침전을 유도하였다. 침전이 완료된 시료액을 4에서 12,000rpm으로 30분간 원심분리하여 침전물을 취하고 10mM 포타슘포스페이트 완충용액(pH 6.5)에 용해시킨 후, 동일한 완충용액으로 4 내지 24시간동안 투석(분자량 5,000)하였다. 투석이 완료된 시료액을 4에서 3,000rpm으로 10분간 원심분리한 후, 상등액을 취하여 조효소액으로 사용하였다. 조효소액 아래와 같이 각 효소별 분석방법을 통하여 특성을 분석하였다:

1) 아밀라제 역가측정

기질(전분 0.5 g을 0.1 M 아세트산나트륨-HCl 완충액 (pH 5.0) 100 ml에 용해)에 조효소액 0.05㎖을 첨가한 다음, 30℃에서 10분간 반응하였다. 상기 반응액에 DNS 시약(16g NaOH, 300g NaKtartrate, 10g 3,5-디니트로살리실산을 증류수 1000ml에 용해) 1㎖을 첨가하여 100℃에서 5분간 가열하였다. 증류수 8ml을 첨가하고 2500rpm에서 10분간 원심분리 후에 540nm에서 흡광도를 측정하였으며 글루코스를 표준물질로 사용하여 농도를 정량하였다. 대조구로는 sigma A6814(α-amylase from Bacillis species)를 사용하였다.

2) 셀룰라제 역가측정

조효소액 0.3㎖에 기질 0.7㎖(1% CMC in 0.02M citrate-phosphate buffer (pH 6.5))을 첨가하여 50℃에서 10분 반응하였다. DNS(16g NaOH, 300g NaKtartrate, 10g 3,5-디니트로살리실산 증류수 1000ml에 용해) 1㎖를 첨가하여 100℃에서 5분간 가열하였다. 상기 반응액에 증류수를 5㎖을 첨가한 다음 510㎚에서 흡광도 측정하였다. 셀룰라제의 정량은 글루코스를 표준물질로 사용하였으며 대조구로는 sigma C1186 (Aspergillus niger 유래) 사용하였다.

3) 리파제 역가측정

기질(A 시약 : 30mg p-nitrophenyl palmitate (pNPP)를 10ml 이소프로판올에 용해. B 시약 : 207mg 데옥시콜산나트륨 (Na-DOC)과 아라비아 고무 100mg을 90 ml 25mM Tris.Cl (pH 7.0) 용해. A 시약과 B 시약을 혼합) 2ml에 조효소액 0.1 ml를 첨가하여 37 ℃에서 15분간 반응시켰다. 상기 반응액에 0.9 ml의 2M Na₂CO₃를 첨가하여 410nm에서 흡광도를 측정하였다. 리파제의 정량은 p-니트로페놀(PNP)을 표준물질로 사용하였으며 대조구로는 sigma L1754(Lipase from Candida rugosa)를 사용하였다.

4) 프로테아제 역가측정

조효소액 0.1 ml에 기질(6.05 g 트리스(히드록시메틸)아미노메탄올을 증류수 500 ml 및 1N HCl 8 ml를 첨가하여 완전용해 후 카제인 7 g을 가하여 용해. 0.2N HCl로 pH를 7.0으로 조정 후 증류수를 첨가하여 전체 1L로 제조) 1 ml를 첨가한 후 37 ℃의 수조에서 30분 동안 반응시켰다. 각각의 시험관에 TCA 용액(18g 트리클로로아세트산, 19 g 아세트산나트륨3수화물, 빙초산 20 ml, 증류수를 첨가하여 전체 1L 제조)을 1 ml 첨가하여 37 ℃에서 30분 동안 반응시킨 다음, 원심분리하여 상등액을 분리하였다. 티로신을 표준물질로 사용하였으며 275nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구로는 sigma P6141(Protease from Bacillus polymyxa)을 사용하였다.

5) 파이테이즈 ( Phytase ) 역가측정

조효소액 0.1ml, 0.4ml 0.2M 시트르산염 완충액(pH 5.5) 및 0.5ml 기질(1% sodium phytate(sigma P-3168) in 0.2M 시트르산염 완충액(pH 5.5))을 첨가한 후에 37 ℃에서 15분간 반응하였다. 1ml stop solution(15% TCA 용액)을 첨가하여 반응을 중지시킨 후, 상기 반응액 0.2 ml에 1.8 ml 증류수 및 2 ml 발색시약(10% 아스코르브산 : 2.5% ammonium molybdate : 1M sulfuric acid = 1 : 1 : 3)을 첨가하고 50℃에서 20분간 반응한 다음 820nm에서 흡광도를 측정하였다. 파이테이즈 정량은 9mM 인산칼륨을 표준물질로 사용하였으며 대조구로는 sigma P9792(Phytase from Aspergillus ficuum)를 사용하였다.

6) 효소반응 최적 온도 및 pH 설정

효소반응의 최적 온도를 조사하기 위해, 50mM 인산칼륨 완충용액(pH 6.5)에서 효소별로 특정한 기질을 사용하여 30℃, 40℃, 50℃, 60℃, 70℃, 80℃까지 각 온도별로 반응시킨 후, 상기 서술한 효소활성 측정법들로 효소활성을 비교하였다.

또한, 최적 pH를 조사하기 위해서 조효소액을 아래의 각 pH별 완충용액에 넣고 반응시킨 후, 기 서술한 효소활성 측정법으로 효소활성을 비교하였다. 사용한 완충용액으로서, pH 3.0은 50mM 글리신-HCl 완충용액, pH 4.0 내지 pH 5.0은 50mM 아세트산나트륨 완충용액, pH 6.0은 50mM 인산칼륨 완충용액, pH 7.0 내지 pH 9.0은 50mM Tris-HCl 완충용액, pH 10.0은 50mM 탄산나트륨 완충용액을 각각 사용하였다.

7) 온도 및 pH 안정성 측정

효소의 온도 안정성을 검토하기 위해, 50mM 인산칼륨 완충용액(pH 6.5)에 효소액을 첨가하여 20 ℃에서 80 ℃까지의 각 온도에서 30분간 처리한 후, 효소의 잔존 활성을 측정하였다. 효소의 pH 안정성을 조사하기 위해서는, pH 2.0에서 pH 12.0까지의 각 완충액에 정제된 효소액을 첨가하여 4℃에서 24시간동안 보관한 후, 잔존 활성을 측정하였다.

8) 스컴 분해능 및 악취 저감능 측정

선택된 균주의 스컴(scum) 분해능 및 악취 저감능을 알아보기 위해 돼지 분뇨 액상 슬러리를 이용하여, 1주일 간격으로 4주간 관찰하였다. 처리구들의 효과를 상대 비교하여 분해능이 우수한 미생물을 선별하였다.

상기한 시험 결과를 다음 표 2에 기재하였다.

선별 균주의 기능성 효소활성능, 스컴 분해능과 악취 저감능

균주 번호	분 리 기 원	효 소 분 해 능						스컴 분해	악취 저감
		아밀라아제	셀룰라아제	리파아제	동물성 프로테아제	식물성 프로테아제	파이테이즈
EDS2	토양	+	++++	+	+++	+	-	++	+/-

실시예 2 분리된 균주의 동정

본 발명에 의해 분리된 균주의 동정은 분리균의 형태학적 및 생화학적인 성상시험을 거친 후, BigDyeTM-터미네이터 시퀀싱 키트와 ABI PRISM377 시퀀서로 동정하였다.

분리균주의 16S rDNA를 분석하기 위해 Pavlova 등(J. Appl. Microbilo., 2002)의 방법을 이용하였다. 게놈 DNA 추출 키트를 이용하여 분리균주로부터 게놈 DNA를 추출한 다음, 표 2의 프라이머(primer)를 사용하여 PCR을 수행하였다. PCR 산물을 pSTBlue-1 벡터에 클로닝한 다음, BigDyeTM-터미네이터 시퀀싱 키트와 ABI PRISM377 시퀀서로 염기서열을 분석하였다.

분리한 균주의 형태학적인 특성을 전자현미경으로 관찰하였으며, 그 전자현미경 사진을 도 1에 나타내었다.

또한, 생화학적 특성을 조사하기 위해 API 키트를 이용하였으며 각 균주의 동정결과를 바탕으로 대상 균주가 바실러스에 가장 유사함을 알 수 있었다.

API 키트에 의한 균주의 동정 결과는 도 2에 나타내었고, 그 서열 결과는 도 3에 나타내었다.

선별 균주의 동정에 사용된 프라이머

프라이머*	염기서열 (5’-3’)	Target site**
F1	AGAGTTTGATCCTGGCTCAG	27
F2	GTGCCAGCAGCCGCGG	530
F3	AAACTCAAAGGAATTGACGG	926
R1	TCTACGCATTCCACCGCTAC	685
R2	GGGTTGCGCTCGTTG	1,100
R3	AAGGAGGTGATCCAGCC	1,525

실시예 3 분리된 균주의 배양

상기 실시예 1 및 2에서 분리, 동정한 균주를 배양하기 위한 배양배지의 조성은 글루코스 60g, 효모추출물 90g, K₂HPO₄ 3g, (NH₄)₂SO₄ 12g, MgSO₄ 3g, MnSO₄4H₂O 0.21g CaCl₂ 0.3g, pH 7.0 을 3L에 용해시킨 후, 37℃에서 24시간 호기적 조건으로 진탕배양하였다.

배양액을 대두박 및 옥수수 등의 곡물 부형제와 혼합하여 돼지 분뇨의 악취 저감 및 액비화 촉진 미생물 제제로 사용하였다.

실시예 4 제조된 액비화 촉진제제의 효능시험

상기 실시예 3에서 제조된 미생물제제에 의한 돼지 분뇨에서 발생되는 악취 저감능을 평가하기 위하여 80L 용량의 용기에 돼지 분뇨 60L를 주입한 후, 12 g의 미생물 제제를 주입하였다. 이후 12시간 간격으로 30분씩 혼합을 하면서 약 3개월(1월부터 4월까지)간 돼지 분뇨가 주입된 저장 용기에서 발생되는 악취물질을 분석하였다.

3개월의 실험기간 동안 돼지 분뇨의 온도는 0.8 내지 1 ℃에서 9 내지 12 ℃로 증가한 반면에 산화환원전위(ORP)는 -280 내지 -297 mV에서 -328 내지 -392 mV로 감소되었다. pH의 경우, 8.0에서 9.1로 증가하였다.

첨가제시에 발생되는 악취물질의 기여도를 평가하기 위하여 Odor Index(OI)를 이용하였다. 본 발명의 악취 저감제를 투입한 경우, 실험시작 3개월 후에 OI가 약 73% 감소되었다.

악취 샘플 채취시 돼지 분뇨에 존재하는 대장균을 함께 분석한 결과, 첨가제가 투입된 돼지 분뇨에서는 3개월간 대장균의 수가 크게 감소한 반면(10⁵ CFU/mL 에서 0 CFU/mL로 측정), 첨가제가 투입되지 않은 돼지 분뇨는 크게 변화하지 않았다(10⁵ CFU/mL에서 10⁴ CFU/mL로 측정).

대장균은 돼지 분뇨의 숙성도와 안정화도를 나타내는 인자로서, 대장균수의 큰 감소를 보인 첨가제가 투입된 돼지 분뇨의 경우에는 3개월 만에 완전한 안정화가 이루어졌다고 판단할 수 있다.

도 1은 본 발명에서 단리된 바실러스 리케니포르미스 EDS-2의 전자현미경 사진이다.

도 2는 API 키트에 의해 동정된 바실러스 리케니포르미스 EDS-2의 균학적 성질을 나타낸 표이다.

도 3은 본 발명에서 단리된 바실러스 리케니포르미스 EDS-2의 염기서열을 나타낸 것이다.

도 4는 본 발명에 따른 액비화 촉진 발효제에 의한 E. coli 개체군의 제거효율 시험 결과를 나타낸 그래프이다.

도 5는 본 발명에 따른 액비화 촉진 발효제에 의한 Order Index 저감효율 시험 결과를 나타낸 그래프이다.

<110> EASY BIO System, Inc. KIM, HYUN NOOK <120> NOVEL BACILLUS LICHENIFORMIS AND MICROORGANISM AGENT COMPRISING THE STRAINS FOR REDUCING A BAD SMELL OF PIG EXCREMENTS AND PRODUCING A LIQUIFIED FERTILIZER THEREFROM <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1253 <212> DNA <213> Bacillus licheniformis <400> 1 cacgtgggta acctgcctgt aagactggga taactccggg aaaccggggc taataccgga 60 tgcttgattg aaccgcatgg ttcaattata aaaggtggct tttagctacc acttacagat 120 ggacccgcgg cgcattagct agttggtgag gtaacggctc accaaggcaa cgatgcgtag 180 ccgacctgag agggtgatcg gccacactgg gactganaca cggcccanac tcctacggga 240 ggcagcagta gggaatcttc cgcaatggac gaaagtctga cggagcaacg ccgcgtgagt 300 gatgaaggtt ttcggatcgt aaaactctgt tgttagggaa gaacaagtac cgttcgaata 360 gggcggtacc ttgacggtac ctaaccanaa agccacggct aactacgtgc cagcagccgc 420 ggtaatacgt aggtggcaag cgttgtccgg aattattggg cgtaaagcgc gcgcaggcgg 480 tttcttaagt ctgatgtgaa agcccccggc tcaaccgggg agggtcattg gaaactgggg 540 aacttgagtg cagaagagga gagtggaatt ccacgtgtag cggtgaaatg cgtagagatg 600 tggaggaaca ccagtggcga aggcgactct ctggtctgta ccgcggcatg ctgatccgcg 660 attactagcg attccagctt cacgcagtcg agttgcagac tgcgatccga actgagaaca 720 gatttgtggg attggcttag cctcgcggct tcgctgccct ttgttctgcc cattgtagca 780 cgtgtgtagc ccaggtcata aggggcatga tgatttgacg tcatccccac cttcctccgg 840 tttgtcaccg gcagtcacct tagagtgccc aactgaatgc tggcaactaa gatcaagggt 900 tgcgctcgtt gcgggactta acccaacatc tcacgacacg agctgacgac aaccatgcac 960 cacctgtcac tctgcccccg aaggggaagc cctatctcta gggttgtcag aggatgtcaa 1020 gacctggtaa ggttcttcgc gttgcttcga attaaaccac atgctccacc gcttgtgcgg 1080 gcccccgtca attcctttga gtttcagtct tgcgaccgta ctccccaggc ggagtgctta 1140 atgcgtttgc tgcagcacta aagggcggaa accctctaac acttagcact catcgtttac 1200 ggcgtggact accagggtat ctaatcctgt tcgctcccca cgctttcgcg cct 1253

Claims (4)

1. 토양에서 분리한 바실러스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis) EDS-2(KCTC18128P).
2. 제 1항에 있어서, 서열목록 1로 표시되는 염기서열을 가지는 것인 바실러스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis) EDS-2(KCTC18128P).
3. 제 1항 또는 제 2항에 따른 바실러스 리케니포르미스 EDS-2(KCTC18128P)를 포함하는 미생물 제제.
4. 제 3항에 있어서, 상기 미생물 제제는 돼지 분뇨의 악취를 저감하고 액비화를 촉진하는 용도의 바실러스 리케니포르미스 EDS-2(KCTC18128P)를 포함하는 미생물 제제.

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