KR20090093604A - 식물체로부터 분리된 정유를 포함하는 살선충제 - Google Patents
식물체로부터 분리된 정유를 포함하는 살선충제Info
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Abstract
본 발명은 소나무에 큰 피해를 주는 해충인 소나무재선충에 대해 살선충 활성을 가지는 살선충제에 관한 것으로서, 보다 자세하게는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대해 살선충력을 가지는 정유로서 아조완(ajowan), 올스파이스(allspice), 릿시아(litsea), 코리안더(coriander), 스티락스(styrax) 및 발레리나(valerina)의 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물체로부터 추출된 정유를 포함하는 살선충제를 나타낸다.
Description
본 발명은 소나무에 큰 피해를 주는 해충인 소나무재선충에 대해 살선충 활성을 가지는 살선충제에 관한 것으로서, 보다 자세하게는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대해 살선충력을 가지는 정유로서 아조완(ajowan), 올스파이스(allspice), 릿시아(litsea), 코리안더(coriander), 스티락스(styrax) 및 발레리나(valerina)의 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물체로부터 추출된 정유를 포함하는 살선충제를 나타낸다.
소나무재선충은 소나무(Pinus densiflora), 해송(P. thunbergii), 마미송(P. massoniana), 유구송(P. luchuensis), 대만이엽송(P. taiwanensis) 등에 병징을 일으켜 소나무를 죽게 한다. 우리나라에서는 부산광역시 동래구 온천2동 금정산 일원의 소나무와 해송에서 1988년 10월에 처음으로 이 선충에 의한 피해 발생이 확인된 이래, 피해가 계속 확산되고 있으며 현재는 울산, 포항, 경주 등 전국 47개 시군구에 발생하여 큰 피해를 주고 있다. 소나무재선충에 감염된 소나무와 해송은 대부분 감염된 지 불과 3개월 이내에 완전히 고사되는데, 매개충인 솔수염하늘소는 고사목이나 쇠약목에 산란을 하고, 부화한 유충이 고사목내에서 발육, 월동한 후에 이듬해 5월부터 성충으로 우화한다.
현재 우리나라의 소나무재선충병 방제는 주로 감염된 소나무를 벌채한 후, 메탐소디움액제로 훈증처리하거나, 소나무재선충을 매개하는 솔수염하늘소 성충의 후식을 방지하기 위하여 메프유제를 항공 살포하고 있다. 유기합성농약의 효과는 우수했지만 계속적인 사용과 무분별한 남용으로 인해 해충 천적의 감소, 저항성 발달, 잠재해충의 대발생 그리고 사람과 가축에 대한 독성을 유발하는 문제점이 발생하고 있다.
따라서 새로운 친환경적인 방제방법이 매우 필요하며, 특히 식물체로부터 살충활성을 지닌 물질에 바탕을 두고 살선충제를 개발하기 위한 전략이 다른 어느 분야보다도 폭넓게 연구되고 있다. 광범위한 생리활성물질을 가지고 있는 자원으로서의 식물체는 선충방제제로 사용되어 현재 부작용 때문에 많은 사회문제를 야기하고 있는 유기합성 살선충제를 대체할 수 있을 대안으로 여겨지고 있어 이들을 이용한 상업적인 선충방제제의 잠재적인 자원 또는 선도화합물로써 식물체에서 유래한 물질들에 관심을 가지고 많은 연구가 이루어지고 있다.
정유(essential oil)는 식물에서 수증기 증류법에 의해 얻어지는 천연물이며, 식물의 광합성에 의해 전환된 성분이 생화학적 반응에 의해 1차 대사산물을 생성하고 축합, 산화, 환원 및 고리화 등의 여러 반응에 의해 생성된 식물 에센스(plant essence)로 정의 할 수 있다. 식물에 따라 잎, 꽃, 껍질, 뿌리, 과피를 이용하거나 식물 전체로부터 추출된 필수 오일은 휘발성이 강한 모노 및 세스퀴테르펜이 다량 함유되어 있다. 아조완(ajowan;Trachyspermum ammi), 올스파이스(allspice;Pimenta dioica), 리트시아(litsea;Litsea cubeba), 코리안다(coriander;Coriandrum sativum), 스티락스(styrax;Liquidamber orientalis) 그리고 발레리나(valerina;Valeriana wallichi) 등에 사용된 정유들은 향신료나 의약용으로도 사용되고 있는 만큼 사람과 가축에는 안전한 식물로써 살선충제 개발을 위한 좋은 식물체 후보군에 속한다.
그러나 현재까지 ajowan, allspice, litsea, coriander, styrax 그리고 valerina 정유와 이들 정유 성분인 geranial, neral, thymol, carvacrol, eugenol, methyl eugenol, benzaldehyde, trans-cinnamyl alcohol, cis-asarone, octanal, decanal, (2E)-2-decenol, (2E)-2-decenal을 대상으로 하는 소나무재선충에 대한 방제제로서의 이용 및 개발에 대한 연구는 전무하다.
본 발명의 ajowan, allspice, litsea, coriander,styrax 그리고 valerina 정유는 Trachyspermum ammi , Pimenta dioica , Litsea cubeba , Coriandrum sativum , Liquidamber orientalis 그리고 Valeriana wallichi를 추출하기에 적절한 0.5∼3cm 크기로 잘라 정유 추출 용기에 넣고 물을 넣은 다음 용기를 가열시켜서 증기화 시키고 이를 냉각하여 정유를 얻을 수 었었다.
본 발명은 상기한 바와 같은 종래 기술의 문제를 해결하기 위해 제안된 것으로, 본 발명의 목적은 ajowan, allspice, litsea, coriander, styrax 그리고 valerina 정유로 이루어진 식물체 정유의 군에서 선택되어지는 하나 또는 2종 이상의 정유를 포함하는 소나무재선충에 대한 살선충제 조성물을 제공함에 있다.
본 발명의 다른 목적은 인체에 무해하면서 소나무재선충에 대한 살선충력을 가지는 ajowan, allspice, litsea, coriander, styrax 그리고 valerina 정유와 이들 정유 성분인 게라니알, 네랄, 티몰, 카바크롤, 유게놀, 메틸유게놀, 벤즈알데하이드, 트랜스시나밀알코올, 시스아사론, 옥탄알, 디카날, 디세놀, 디센알의 군에서 선택되어지는 하나 또는 2종 이상의 정유성분을 함유하는 살선충제를 제공함에 있다.
본 발명의 정유 및 정유성분은 인체에 무해하면서 소나무재선충에 대한 살선충력을 가지고 있으므로 소나무재선충에 대하여 효과적인 방역이 가능할 것이다.
도 1은 본 발명의 정유 추출장치의 개략도를 나타내는 그림이다.
도 2는 소나무재선충 분리방법을 나타내는 그림이다.
본 발명은 식물체로부터 추출된 정유를 포함하는 살선충제를 나타낸다.
본 발명은 식물체로부터 추출된 정유를 포함하여 소나부재선충에 대하여 살충선 활성을 가지는 살선충제를 나타낸다.
본 발명은 아조완(ajowan), 올스파이스(allspice), 릿시아(litsea), 코리안더(coriander), 스티락스(styrax) 및 발레리나(valerina)의 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물체로부터 추출된 정유를 포함하는 살선충제를 나타낸다.
상기에서 식물체로부터 추출된 정유는 식물을 열수추출법에 의해 추출하여 얻을 수 있다. 이때 식물체의 열수추출법은 상기 식물체를 물에 잠길 정도로 하여 물에 넣은 다음 90∼120%에서 1∼5시간, 바람직하게는 100℃의 온도에서 2∼3시간 가열하는 추출법에 의해 상기 식물체로부터 정유를 추출하여 얻을 수 있다.
상기에서 식물체로부터 추출된 정유는 소나무재선충에 대하여 살선충 활성을 가진다.
상기에서 식물체로부터 추출된 정유는 게라니알(geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal)의 군으로부터 선택된 1종 이상의 화합물을 포함한다.
본 발명은 아조완(ajowan), 올스파이스(allspice), 릿시아(litsea), 코리안더(coriander), 스티락스(styrax) 및 발레리나(valerina)의 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물체로부터 추출된 정유와; 게라니알, 네랄, 티몰, 카바크롤, 유게놀, 메틸유게놀, 벤즈알데하이드, 트랜스시나밀알코올, 시스아사론, 옥탄알, 디카날, 디세놀 및 디센알의 군으로부터 선택된 어느 1종 이상의 화합물을 포함하는 살선충제를 나타낸다.
상기에서 식물체로부터 추출된 정유와 화합물은 1:9∼9:1의 중량비로 혼합된 혼합물을 포함하는 살선충제를 나타낸다.
상기에서 식물체로부터 추출된 정유는 식물을 열수추출법에 의해 추출하여 얻을 수 있다. 이때 식물체의 열수추출법은 상기 식물체를 물에 잠길 정도로 하여 물에 넣은 다음 90∼120%에서 1∼5시간, 바람직하게는 100℃의 온도에서 2∼3시간 가열하는 추출법에 의해 상기 식물체로부터 정유를 추출하여 얻을 수 있다.
상기에서 식물체로부터 추출된 정유와 화합물이 포함된 살선충제는 소나무재선충에 대하여 살선충 활성을 가진다.
본 발명에서 상기의 살선충제는 살선충 활성을 가진 성분 이외에 본원발명에서 통상적으로 사용하는 부형제를 적용하여 살선충제를 수화제, 입제, 분제, 유제, 스프레이상, 연막제, 캡슐제 및 젤상의 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 제제화 할 수 있다.
본 발명에서 상기의 살선충제는 살선충 활성을 가진 성분 이외에 본원발명에서 통상적으로 사용하는 부형제를 적용하여 살선충제를 도넛형태의 모양으로 형상화 할 수 있다.
이하 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다.
본 발명은 ajowan, allspice, litsea, coriander, styrax 그리고 valerina 정유의 군에서 선택되어지는 하나 또는 2종 이상의 정유를 포함하는 살선충제를 포함한다. 또한 본 발명은 이들 6종의 정유와 이들 정유 성분인 게라니알 (geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal)의 군에서 선택되어지는 하나 또는 2종 이상의 정유성분을 유효성분으로 포함하는 살선충제 조성물을 포함한다.
본 발명에서 살선충제의 유효성분으로 사용되는 ajowan, allspice, litsea , coriander, styrax 그리고 valerina 정유는 열수 추출법을 이용하여 추출할 수 있다. 본 발명의 일실시예에서 사용된 이들 6종의 정유 추출물은 Trachyspermum ammi, Pimenta dioica, Litsea cubeba, Coriandrum sativum, Liquidamber orientalis 그리고 Valeriana wallichi를 열수 추출법을 이용하여 수득한 정유 추출물이 바람직하다.
본 발명에서 ajowan, allspice, litsea, coriander, styrax 그리고 valerina 정유 추출물 및 그 유래 물질들의 소나무재선충에 대한 살선충성을 조사하여 소나무재선충 방제제로서의 정유 추출물 및 정유성분의 이용 가능성을 검증하였다.
본 발명에서 살선충제의 유효성분으로 사용되는 ajowan, allspice, litsea , coriander, styrax 그리고 valerina 정유와 이들 정유 성분인 게라니알 (geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal)로 가스크로마토그라피-질량분석기를 이용하여 분리, 구조를 동정하였으며, 표준물질을 구입하거나 직접 합성하여 살선충활성을 검정하였다.
본 발명에 사용된 선충은 소나무에 기생하는 소나무재선충으로 길이 1mm 내외로 소나무재선충을 지니고 있는 솔수염하늘소가 소나무 신초를 가해할 때 나무 조직내부로 침입하여 번식하면서 소나무를 고사시킨다.
본 발명에서 정유 추출물을 얻기 위하여, ajowan(Trachyspermum ammi), allspice(Pimenta dioica), litsea(Litsea cubeba), coriander(Coriandrum sativum), styrax(Liquidamber orientalis) 그리고 valerina(Valeriana wallichi) 정유는 Trachyspermum ammi, Pimenta dioica, Litsea cubeba, Coriandrum sativum, Liquidamber orientalis 그리고 Valeriana wallichi를 추출하기에 적절한 크기, 일예로 0.5∼3cm 크기로 잘라 정유 추출 용기에 넣고 물을 넣은 다음 용기를 가열시켜서 증기화 시키고 이를 냉각하여 정유를 얻을 수 있었다.
본 발명에서 살선충활성 검정에 사용된 선충은 소나무재선충으로 경상남도 함안 지역에서 채집하여 베르만방법(Baermann funnel method)을 이용하여 추출하였다. 분리된 소나무재선충은 보트리스균(Botrytis cinerea)을 먹이로 온도 28±1℃, 상대습도 55±5%, 암조건하에서 사육하고 살선충제 도태를 하지 않은 실험실내 감수성 계통을 대상으로 하였다.
각각의 정유의 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 조사하기위해, 각 웰마다 100㎕의 증류수로 채워진 있는 96 마이크로웰플레이트의 각 웰(well)마다 50-150마리씩의 선충이 혼합된 소나무재선충을 넣었다. 살선충에 사용된 정유 및 정유 성분들은 증류수와 트리톤 X-100(5000ppm)이 혼합된 용액에 각 농도별로 녹인 후 마이크로피펫으로 각 웰마다 처리하였다. 처리 24시간 후 실체현미경하에서 살선충율을 조사하였다. 총 4회 반복 처리한 후, 살선충율 평균을 측정하여 이를 표 1에 나타내었다. 한편 소나무재선충의 들어있는 웰에 증류수와 트리톤 X-100(5000ppm) 혼합액만 처리한 웰을 대조구(control)로 하였다. 각각의 정유의 소나무재선충에 대한 살선충 활성은 표1에 나타내었다.
표 1에 나타난 바와 같이 소나무재선충에 대해 6종의 정유가 강한 활성을 보였다. Ajowan 정유는 1000ppm에서 94.8, 600ppm에서는 70.2%의 살선충율을 보였으나, 400ppm 농도에서는 24.4%로 살선충 활성이 낮아졌다. All spice의 경우 1000ppm에서 100, 600ppm에서는 80.7 그리고 400ppm 농도에서는 4.6%의 살선충 활성을 보였다. Litsea 정유는 1000ppm에서 71.5%의 활성을 보였다. Coriander 정유는 400ppm 농도에서도 89.6%의 높은 살선충 활성을 나타내었다. Styrax 정유는 2000ppm 농도에서 높은 활성을 나타내었으나, 1000pp에서는 48%의 살선충활성을 보였다. Valerina 정유는 600ppm 농도에서 98%의 높은 살선충활성을 나타내었다.
살선충 활성이 우수하였던 6종 정유의 성분을 분석하기 위하여 가스크로마토그라피(HP6890)-질량분석기(JMS-600W, JEOL)를 이용하여 분석하였다(표 2-3). 사용된 칼럼은 DB-5MS column (30m×0.25mm i.d., 0.25um film thickness, J&W Scientific, Folsom, CA, USA)이며, 가스크로마토그라피의 분석조건은 다음과 같다. 오븐오도는 처음 40℃에서 1분간 유지한 후, 분당 6℃씩 250℃까지 올렸다. 운반기체는 헬륨가스를 사용하였고, 분당 1.5㎖씩 흘려주었다. 가스크로마토그라피에서 기화된 정유 성분들은 바로 질량분석기로 들어가서 질량분석기의 이온발생장치에 전달, 전하를 띠는 쪼개진 이온의 질량과 전하량의 비(m/z)를 측정하였다. 구조동정은 표준물질을 구입한 후, 가스크로마토그라피상의 머무름 시간과, 질량분석기에서 분석된 질량 스펙트럼으로 라이브러리(library)를 탐색하여 물질의 구조를 동정하였다.
시험예 2에서 동정된 각각의 정유성분인 게라니알 (geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal)의 살선충 활성은 시험예 1과 같은 방법을 사용하여 검정하였다.
본 발명에서 식물체 정유성분의 살선충 활성을 검정한 바, 총62종의 정유성분 중에서 활성 검정하여 그 중에서 효과가 좋은 아래의 15종은 1,000ppm에서 70%이상의 살성충 활성을 나타낸 것만 한정하였다. 게라니알 (geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal)은 1,000-60ppm 까지 다양한 농도에서 40-100%의 살선충활성을 보였다(표 4).
본 발명에 따른 상기 각 정유들은 상기 각 정유성분들과 혼합하여 적용하여도 무방하다. 본 발명에 따른 살선충제 조성물은 수화제, 입제, 분제, 유제, 스프레이상, 연막제, 캡슐형 및 젤상의 제형이 바람직하고, 살선충성 조성물의 부력을 위해 도넛형과 같은 제형을 통한 접촉제로서 제공되는 것이 바람직하다.
이하, 본 발명을 다음의 실시예 및 시험예에 의해 설명하고자 한다. 그러나 이들은 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 정유 추출물
길이 약 0.5∼3cm 정도로 잘게 자른 ajowan (Trachyspermum ammi), allspice (Pimenta dioica), litsea (Litsea cubeba), coriander (Coriandrum sativum), styrax (Liquidamber orientalis) 그리고 valerina (Valeriana wallichi)는 도 1과 같은 구성의 정유추출장치의 증류조(1) 내부 금속망(2)에 넣고 시료가 잠기지 않을 정도로 물을 넣었다.
냉각기(7)의 냉각수유입구(10)와 냉각수유출구(11)에 호스를 연결하고 냉각수를 채운 다음 가열하여 증류조 내부온도가 100℃ 정도에 달한 후부터 약 2∼3시간 가열하였다.
증류조에서 수증기와 함께 휘산된 혼합수증기는 수증기연결관(6)을 거쳐 냉각기(7) 내의 냉각파이프(8)에 도달하는 과정에서 응축되어 정유수집기(9)에 모이게 되며, 이때 응축수보다 가벼운 정유는 정유수집기의 상층부에 뜨게 되므로 이것을 회수하여 ajowan (Trachyspermum ammi), allspice (Pimenta dioica), litsea (Litsea cubeba), coriander (Coriandrum sativum), styrax (Liquidamber orientalis) 그리고 valerina (Valeriana wallichi) 정유를 얻었다.
한편, 도 1의 정유추출장치에 있어서, 도면부호 3은 압력게이지, 4는 온도계, 5는 안전밸브, 12는 개폐도어이다.
<실시예 2> 활성 검정에 사용된 선충 준비
살선충활성 검정에 사용된 선충은 소나무재선충으로 경상남도 함안 지역에서 채집하여 베르만방법(Baermann funnel method)을 이용하여 추출하였다(도 2 참조). 분리된 소나무재선충은 보트리스균(Botrytis cinerea)을 먹이로 온도 28±1℃, 상대습도 55±5%, 암조건하에서 사육하고 살선충제 도태를 하지 않은 실험실내 감수성 계통을 대상으로 하였다.
<시험예 1> 소나무재선충의 살선충활성 검정
소나무재선충에 대한 ajowan (Trachyspermum ammi), allspice (Pimenta dioica), litsea (Litsea cubeba), coriander (Coriandrum sativum), styrax (Liquidamber orientalis) 그리고 valerina (Valeriana wallichi) 정유와 이들 정유 성분인 게라니알 (geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal)의 살선충활성을 검정하기 위해 웰마다 100㎕의 증류수로 채워진 있는 96 마이크로웰플레이트의 각 웰마다 50-150마리씩의 소나무재선충을 넣었다. 살선충에 사용된 정유 및 정유성분들은 증류수와 트리톤 X-100(5000ppm)이 혼합된 용액에 각 농도별로 녹인 후 마이크로피펫으로 각 웰마다 처리하였다. 처리 24시간 후 실체현미경하에서 살선충율을 조사하였다. 총 4회 반복 처리한 후, 살선충율 평균을 측정하여 이를 표 1과 2에 나타내었다. 한편 소나무재선충의 들어있는 웰에 증류수와 트리톤 X-100(5000ppm) 혼합액만 처리한 웰을 대조구(control)로 하였다. 각각의 정유의 소나무재선충에 대한 살선충활성은 표1에 나타내었다.
표 1에 나타난 바와 같이 소나무재선충에 대해 6종의 정유가 강한 활성을 보였다. Ajowan 정유는 1000ppm에서 94.8, 600ppm에서는 70.2%의 살선충율을 보였으나, 400ppm 농도에서는 24.4%로 살선충 활성이 낮아졌다. All spice의 경우 1000ppm에서 100, 600ppm에서는 80.7 그리고 400ppm 농도에서는 4.6%의 살선충 활성을 보였다. Litsea 정유는 1000ppm에서 71.5%의 활성을 보였다. Coriander 정유는 400ppm 농도에서도 89.6%의 높은 살선충 활성을 나타내었다. Styrax 정유는 2000ppm 농도에서 높은 활성을 나타내었으나, 1000pp에서는 48%의 살선충활성을 보였다. Valerina 정유는 600ppm 농도에서 98%의 높은 살선충활성을 나타내었다.
<시험예 2> 정유의 성분분석
살선충 활성이 우수하였던 6종 정유의 성분을 분석하기 위하여 가스크로마토그라피(HP6890)-질량분석기(JMS-600W, JEOL)를 이용하여 분석하였다(표 2-3). 사용된 칼럼은 DB-5MS column (30m×0.25mm i.d., 0.25um film thickness, J&W Scientific, Folsom, CA, USA)이며, 가스크로마토그라피의 분석조건은 다음과 같다. 오븐오도는 처음 40℃에서 1분간 유지한 후, 분당 6℃씩 250℃까지 올렸다. 운반기체는 헬륨가스를 사용하였고, 분당 1.5㎖씩 흘려주었다. 가스크로마토그라피에서 기화된 정유 성분들은 바로 질량분석기로 들어가서 질량분석기의 이온발생장치에 전달, 전하를 띠는 쪼개진 이온의 질량과 전하량의 비(m/z)를 측정하였다. 구조동정은 표준물질을 구입한 후, 가스크로마토그라피상의 머무름 시간과, 질량분석기에서 분석된 질량 스펙트럼으로 라이브러리(library)를 탐색하여 물질의 구조를 동정하였다. 가스크로마토그라피상의 머무름 시간은 DB-1 and FFAP 칼럼을 사용하였으며, van Den Dool and Kratz retention index를 이용하여 RI 값을 구하였다. 분석조건은 GC-MS에서 사용한 조건과 동일 조건을 이용하였다.
<표 1> 정유의 살선충 효과
<시험예 3> 정유성분의 살선충 활성
시험예 2에서 동정된 각각의 정유성분 들 중 활성이 우수한 게라니알 (geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal)의 살선충 활성은 시험예 1과 같은 방법을 사용하여 검정하였고, 결과는 표4에 나타내었다. 식물체 정유성분의 살선충활성 검정 결과, 게라니알 (geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal)은 1000-60ppm 까지 다양한 농도에서 40-100%의 살선충활성을 보였다(표 4).
<표 2> Ajowan, allspice 그리고 litsea 정유 성분 분석
1Retention indices = van Den Dool and Kratz retention index (van Den Dool and Kratz, 1963) on DB-1 and FFAP columns, according to n-alkanes (C9 - C16; DB-1, C7-C20; FFAP). Components were identified by co-injection with authentic standard on two columns.
<표 3> Coriander, styrax 그리고 valerina 정유 성분 분석
1Retention indices = van Den Dool and Kratz retention index (van Den Dool and Kratz, 1963) on DB-1 and FFAP columns, according to n-alkanes (C9 - C16; DB-1, C7-C20; FFAP). Components were identified by co-injection with authentic standard on two columns.
<표 4> 정유 성분의 살선충효과
상기 실시예의 결과에서 나타난 것과 같이 ajowan (Trachyspermum ammi), allspice (Pimenta dioica), litsea (Litsea cubeba), coriander (Coriandrum sativum), styrax (Liquidamber orientalis) 그리고 valerina (Valeriana wallichi) 정유는 소나무재선충에 대해 우수한 살선충력을 가지고 있음을 알 수 있다.
또한 이들 6종 정유에서 분리한 화합물들인 게라니알 (geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal) 역시 소나무재선충에 대해 살충력이 있음을 알 수 있다.
따라서 ajowan (Trachyspermum ammi), allspice (Pimenta dioica), litsea (Litsea cubeba), coriander (Coriandrum sativum), styrax (Liquidamber orientalis) 그리고 valerina (Valeriana wallichi) 정유와 이들 6종 정유에서 분리한 화합물들인 게라니알 (geranial), 네랄(neral), 티몰(thymol), 카바크롤(carvacrol), 유게놀(eugenol), 메틸유게놀(methyl eugenol), 벤즈알데하이드(benzaldehyde), 트랜스시나밀알코올(trans-cinnamyl alcohol), 시스아사론(cis-asarone), 옥탄알(octanal), 디카날(decanal), 디세놀((2E)-2-decenol), 디센알((2E)-2-decenal) 중에서 선택되는 적어도 1종 이상의 정유 혹은 정유에서 분리한 화합물은 소나무재선충에 살선충력을 가지고 있어 소나무재선충에 대한 살선충성 모핵화합물로 제공할 수 있어 친환경적인 선충 방제제로 사용될 수 있다.
Claims (9)
- 아조완(ajowan), 올스파이스(allspice), 릿시아(litsea), 코리안더(coriander), 스티락스(styrax) 및 발레리나(valerina)의 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물체로부터 추출된 정유를 포함하는 살선충제.
- 제1항에 있어서, 상기 식물체로부터 추출된 정유는 식물을 열수추출법에 의해 추출한 정유임을 특징으로 하는 살선충제.
- 제1항에 있어서, 상기 식물체로부터 추출된 정유는 소나무재선충에 대하여 살선충 활성을 가지는 것을 특징으로 하는 살선충제.
- 제1항에 있어서, 상기 식물체로부터 추출된 정유는 게라니알, 네랄, 티몰, 카바크롤, 유게놀, 메틸유게놀, 벤즈알데하이드, 트랜스시나밀알코올, 시스아사론, 옥탄알, 디카날, 디세놀 및 디센알의 군으로부터 선택된 1종 이상의 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 살선충제
- 아조완(ajowan), 올스파이스(allspice), 릿시아(litsea), 코리안더(coriander), 스티락스(styrax) 및 발레리나(valerina)의 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 식물체로부터 추출된 정유와; 게라니알, 네랄, 티몰, 카바크롤, 유게놀, 메틸유게놀, 벤즈알데하이드, 트랜스시나밀알코올, 시스아사론, 옥탄알, 디카날, 디세놀 및 디센알의 군으로부터 선택된 어느 1종 이상의 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 살선충제.
- 제5항에 있어서, 상기 식물체로부터 추출된 정유는 식물을 열수추출법에 의해 추출한 정유임을 특징으로 하는 살선충제.
- 제5항에 있어서, 상기 식물체로부터 추출된 정유와 화합물이 포함된 살선충제는 소나무재선충에 대하여 살선충 활성을 가지는 것을 특징으로 하는 살선충제.
- 제1항 또는 제5항에 있어서, 살선충제는 수화제, 입제, 분제, 유제, 스프레이상, 연막제, 캡슐제 및 젤상의 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 제제화 되는 것을 특징으로 하는 살선충제.
- 제1항 또는 제5항에 있어서, 살선충제는 도넛형태의 모양으로 형상화 되는 것을 특징으로 하는 살선충제.
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