KR20090024648A - Ｌｒｒ 패밀리 단백질간의 융합방법 - Google Patents

Ｌｒｒ 패밀리 단백질간의 융합방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20090024648A
KR20090024648A KR1020080087160A KR20080087160A KR20090024648A KR 20090024648 A KR20090024648 A KR 20090024648A KR 1020080087160 A KR1020080087160 A KR 1020080087160A KR 20080087160 A KR20080087160 A KR 20080087160A KR 20090024648 A KR20090024648 A KR 20090024648A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
leu
ser
asn
ile
thr
Prior art date
Application number
KR1020080087160A
Other languages
English (en)
Inventor
김호민
박범석
진미선
유욱준
이지오
Original Assignee
김호민
박범석
유욱준
한국과학기술원
이지오
진미선
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 김호민, 박범석, 유욱준, 한국과학기술원, 이지오, 진미선 filed Critical 김호민
Priority to PCT/KR2008/005220 priority Critical patent/WO2009031834A2/en
Publication of KR20090024648A publication Critical patent/KR20090024648A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N23/00—Investigating or analysing materials by the use of wave or particle radiation, e.g. X-rays or neutrons, not covered by groups G01N3/00 – G01N17/00, G01N21/00 or G01N22/00
    • G01N23/20—Investigating or analysing materials by the use of wave or particle radiation, e.g. X-rays or neutrons, not covered by groups G01N3/00 – G01N17/00, G01N21/00 or G01N22/00 by using diffraction of the radiation by the materials, e.g. for investigating crystal structure; by using scattering of the radiation by the materials, e.g. for investigating non-crystalline materials; by using reflection of the radiation by the materials
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

본 발명은 단백질의 융합 방법에 관한 것으로서, 'LxxLxxLxLxxN'[여기서, L은 알라딘, 글리신, 패닐알라닌, 티로신, 루이신, 이소루이신, 발린 또는 트립토판; N은 아스파라진, 글루타민, 세린, 시스테인 또는 트레오닌, X는 임의의 아미노산]와 같은 특징적인 공통 서열 위치에서 융합시키는 것을 특징으로 하는 LRR (Leucine Rich Repeats) 패밀리 단백질간의 융합방법에 관한 것이다.
본 발명의 융합 LRR 기술에 의하면, 결정성이 우수한 LRR 단백질과 결정성이 낮은 다른 LRR 단백질을 융합하여 결정성이 우수한 융합단백질을 얻을 수 있게 되므로 결정성이 낮은 단백질의 구조결정에 유용하게 사용할 수 있다. 나아가 단백질의 구조분석으로부터 단백질의 활성영역과 작용기작을 이해할 수 있으므로 상기 단백질의 생체 내 작용을 이해하고 치료약물 개발에 효과적으로 이용할 수 있다.
또한, 본 발명의 융합 LRR 기술에 의하면 각 단백질의 기능이 유지되면서도 결정성이 우수한 융합단백질을 다량으로 생산할 수 있으므로 단백질 의약품의 개발에 유용하다.
LRR 단백질, 톨 유사 수용체(TLR), 융합단백질, 가변 림프구 수용체(VLR), X-선 회절, 구조분석, 단백질 의약

Description

ＬＲＲ 패밀리 단백질간의 융합방법{Hybridization method between leucine rich repeat family proteins}
본 발명은 단백질의 융합 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 LRR 패밀리 단백질에 대해서 대량 생산이 가능하고 결정화가 용이하며 단백질의 구조 및 기능에 변화를 초래하지 않아 단백질의 구조결정 및 단백질 의약품에 이용할 수 있는 LRR 단백질의 특정적 서열과 구조에 기반한 단백질 융합 방법에 관한 것이다.
LRR(루이신 풍부 반복단위, Leucine Rich Repeats) 패밀리 단백질은 다음의 서열 특성을 갖는다;(1) 하나 이상의 LRR 모듈을 갖는다. (2) LRR 모듈이 20~30개의 아미노산으로 이루어져 있다. (3) LRR 모듈은 보존 패턴 (conversed pattern) "LxxLxxLxLxxN"를 갖는다. 여기에서, L은 알라닌, 글리신, 패닐알라닌, 티로신, 루이신, 이소루이신, 발린 및 트립토판과 같은 소수성 아미노산을, N은 아스파라진, 글루타민, 세린, 시스테인 또는 트레오닌을, X는 임의의 아미노산을 의미한다. (4) LRR 군 단백질은 말발굽과 같은(horseshoe-like) 삼차원 구조를 갖는다. LRR 패밀리 단백질은 신호전달(signal transduction), 셀 사이클 조절, 세포사멸(apoptosis) 및 면역반응과 같은 다양한 생리적 과정에 관여하는 것으로 알려져 있다.
우리 몸의 면역체계는 크게 선천성 면역과 적응성 면역으로 분류되는데, 선천성 면역은 날 때부터 이미 갖고 있는 방어기작으로 새로운 종류의 병원균이라 할지라도 빠르고 효과적인 반응을 보인다. 반면 적응성 면역은 백신 주사나 감염을 통해 이미 경험한 병원체에 대해서는 강하고 효과적인 반응을 보이는데 반해 새로운 감염에는 무력하다. 면역이 미약하면 박테리아나 바이러스의 감염에 취약하고, 면역반응이 지나쳐 통제할 수 없어지면 높은 사망률을 보이는 패혈증으로 발전할 확률이 높다.
톨 유사 수용체(Toll-like receptor, TLR)는 LRR 단백질 군의 하나로 선천성 면역의 주역이자 선천성 면역과 적응성 면역을 이어주는 가교 역할을 하는 단백질이다. 이들의 세포외 도메인은, 박테리아, 균 및 바이러스에만 존재하는 광범위하면서도 고도로 보존된 구조적 패턴을 인식하고 결합한다. 지금까지 포유류에서 13개의 TLR 패밀리가 알려져 있으며 6개의 서브패밀리에 대해 그 기능과 서열 특성이 규명되었다.
가변 림프구 수용기(Variable Lymphocyte Receptor, VLR)는 원구류어(jawless fish)의 면역수용체로서 유악류(턱이 있는 척추동물, jawed vertebrates)의 면역수용체와 유사하다. 원구류어의 일종인 바다 먹장어의 림프구 세포는 체액 반응에서 해당 항원을 특이적으로 인식할 수 있는 독특한 VLR 단백 질(VLRB.61)을 발현하는데, 이는 LRR 패밀리 단백질의 일종으로서 결정성이 우수한 성질을 가지고 있다.
VLR과 TLR은 일반적으로 세포외 영역에 시그널 펩타이드, N-말단 cap(LRRNT), LRR 모듈 및 C-말단 cap(LRRCT)으로 구성되는 LRR영역을 포함한다(도 1). 도 1의 A는 VLR 영역의 배열을 나타내는 것으로서, 빨간색은 시그널 펩타이드를, 파란색은 LRRNT를, 녹색은 LRR 모듈(LRR1, LRRV, LRRVe, LRRCP)을, 오렌지색은 LRRCT를, 분홍색은 stalk를 나타낸다. 도 1의 B는 TLR 영역의 배열을 나타내는 것으로서, 빨간색은 시그널 펩타이드를, 파란색은 LRRNT를, 녹색은 LRR 모듈(LRR1~LRR22)을, 오렌지색은 LRRCT를, 회색은 TIR 영역을 나타낸다. LRR 군의 단백질은 말굽모양의 구조적 특성을 갖는데, 오목한 표면은 평행한 β 가닥에 의해 형성되고, 볼록한 표면은 루프, 310 나선, α-나선에 의해 형성된다.
단백질 분자의 미시세계에서 보면, 약물의 치유 효과는 병을 유발하거나 치유하는 특정 단백질에 약물이 '열쇠와 자물쇠'처럼 달라붙어 그 작용 스위치를 켜거나 끄는 과정으로 설명될 수 있다. 따라서 단백질의 3차원 구조는 단백질의 생체 내 작용을 이해하고 치료약물을 개발하는 데 매우 중요하다. 고분자인 단백질을 구성하는 원자의 배열과 3차원 구조를 안다면, 질병과 면역에 관여하는 단백질의 작동 스위치가 어느 부위에 있는지도 확인할 수 있기 때문이다.
낱개의 단백질은 가시광선이 부딪힐 수 없을 정도로 매우 작기 때문에 단백 질의 3차원 구조는 현미경으로는 관측할 수 없다. 따라서 단백질의 구조를 보기 위해서는 자외선보다 파장이 훨씬 짧은 X-선을 이용한다. 또한, 단백질 하나로는 회절되는 X-선의 강도가 미약하여 인식하기가 어렵기 때문에 동일한 단백질이 반복되어 정렬되어 있는 '결정체'로 만들어 분석하여야 한다. X-선 회절 분석은 단백질을 결정체로 만들어 X-선을 조사한 뒤 회절되는 빛의 정보를 분석하는 것으로서, 단백질의 3차원 구조 해석에 가장 유용한 방법이다. 그러나 X-선 회절분석을 위해서는 단백질을 결정체로 얻어야 한다는 제약이 있다.
단백질을 수용성 형태로 다량으로 생산하고 그 결정을 얻는 것은 생물 및 의학 분야에서 공통된 과제이다. 많은 단백질은 여러 개의 도메인이 유동적인 고리(flexible loop)에 의해 연결되어 있으며, 각 단백질 고유의 기능은 전체 길이가 아닌 훨씬 적은 영역의 특성이다. 따라서 단백질 중 필수적이지 않은 영역(non-essential domain)을 제거한다면 단백질의 결정화가 보다 용이하게 될 수 있다. 그러나, LRR 패밀리 단백질의 경우에는, 소수성 코어가 전 분자에 걸쳐 일정게 분포하고 있어 위와 같은 방법을 적용할 수 없다. LRR 모듈은 단백질의 소수성 코어를 덮는 두 개의 모듈인 LRRNT 및 LRRCT를 가지고 있는데, LRR 모듈을 제거하는 경우 LRRNT 또는 LRRCT 모듈이 함께 제거되고, 이에 따라 단백질의 소수성 코어가 외부로 노출되게 되므로 단백질이 매우 불안정하게 되는 문제가 있다.
따라서 종래와는 다른 방법으로, 결정화가 용이한 형태의 LRR 패밀리 단백질을 대량 생산할 수 있는 방법의 개발이 요구된다.
본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로, LRR 패밀리 단백질의 대량 생산이 가능하고 결정화가 용이하며 목적 단백질의 구조 및 기능에 변화를 초래하지 않아 단백질의 구조결정 및 단백질 의약품에 이용할 수 있는 융합단백질의 제조 방법을 제공하고자 하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 다른 목적은 상기 융합단백질의 구조분석을 통해 목적 단백질의 구조를 분석하는 방법을 제공하는 것이다.
전술한 목적을 달성하기 위한 본 발명은, LRR 패밀리에 속하는 두 단백질간의 융합에 의한 융합단백질의 융합 방법에 있어서, 제1LRR 패밀리 단백질과 제2LRR 패밀리 단백질을 특징적인 공통 서열인 ˝LxxLxxLxLxxN˝ 위치에서 융합하는 것을 특징으로 한다. 상기 L은 알라딘, 글리신, 패닐알라닌, 티로신, 루이신, 이소루이신, 발린 또는 트립토판이고, N은 아스파라진, 글루타민, 세린, 시스테인 또는 트레오닌이며, X는 임의의 아미노산을 의미한다. 상기 "아미노산"은 norleucine, 오르니틴 및 호모시스테인을 포함한 자연계에 존재하는 모든 L-α-아미노산을 의미한다. 이하, 본 명세서에서 상기 융합단백질의 융합 방법을 "융합 LRR 기술"이라고 칭한다.
본 발명에서 상기 LRR 패밀리 단백질의 하나는 톨유사수용체(TLR) 단백질 또는 가변 임파구 수용체(VLR) 단백질인 것이 바람직하다. 나아가 상기 LRR 패밀리 단백질 중의 하나는 결정성이 높은 LRR 패밀리 단백질인 것이 좋다.
본 발명은 또한 상기 융합방법에 의해 얻어지는 융합단백질, 상기 융합단백질을 암호화하는 DNA 단편 및 상기 DNA 단편이 내재된 벡터에 관한 것이다.
또한 본 발명은, (A) 제5항의 융합단백질 및 제5항의 융합단백질을 이루는 구성 LRR 패밀리 단백질 중 어느 하나를 각각 결정화하여 구조분석하는 단계; 및 (B) 상기 융합단백질의 구조에서 상기 구성 LRR 단백질 단편의 구조를 제외하여 다른 구성 LRR 단백질의 구조를 얻는 단계;로 이루어지는LRR 단백질의 구조분석 방법을 제공한다.
본 발명은 제1LRR 패밀리 단백질의 단편과 제2LRR 패밀리 단백질의 단편을 융합하는 방법(융합 LRR 기술)에 관한 것이다. 본 발명에 의하면, LRR 단백질의 융합 대상 및 위치를 변화시키는 것에 의해 구조의 변형 없이 융합 LRR 단백질을 실질적으로 무제한으로 만들어 낼 수 있다.
LRR 단백질의 융합은 LRR 단백질의 소수성 코어가 융합위치에 정확하게 일치 하지 않으면 그 결과 생성된 융합단백질이 불안정한 소수성 핵을 갖는 문제가 있다. 한편, 단백질의 구조가 상세히 밝혀졌다고 하더라도 두 개의 소수성 핵을 융합하는 것은 매우 어려운데, 이는 부분적으로는 단백질 잔기의 flexibility에 기인한다.
본 발명자들은, 다양한 테스트 결과, LRR 모듈의 "LxxLxxLxLxxN" 영역이 잘 보전되어 있고 그 구조가 실질적으로 변하지 않아 융합단백질의 구조를 신뢰성 있게 예측할 수 있음을 확인하고, 상기 "LxxLxxLxLxxN" 영역을 최상의 융합위치로 선택하였다. 상기 영역에서 보존 잔기의 상대적 위치는 융합위치에 엄격하게 보존되었다.
본 발명에서는, "융합 LRR 기술"의 유효성을 입증하기 위하여, 제1LRR 패밀리 단백질로 인간 TLR4, 인간 TLR2, 쥐 TLR2, 인간 TLR1을, 제2LRR 패밀리 단백질로 hagfish(먹장어) VLR을 선택하였다.
다음과 같은 과정을 거쳐 융합 LRR 단백질을 수득하였다.
(1) 제1LRR 패밀리 단백질 및 제2LRR 패밀리 단백질 유전자 단편의 추출과 융합
제1LRR 패밀리 단백질 및 제2LRR 패밀리 단백질 유전자를 개념적으로 표시하면, 제1LRR 패밀리 단백질 유전자는 [제1단백질 5'영역~LxxLxxLxLxxN~제1단백질 3'영역]으로, 제2LRR 패밀리 단백질 유전자는 [제2단백질 5'영역~LxxLxxLxLxxN~제2단 백질 3'영역]으로 각각 나타낼 수 있다(도 2의 A).
본 발명에서는 소정의 template와 primer set 및 통상의 PCR법을 포함하는 유전자조작기술을 활용하여 [제1단백질 5'영역~LxxLxxLxLxxN~제2단백질 3'영역] 및 [제2단백질 5'영역~LxxLxxLxLxxN~제1단백질 3'영역]처럼 제1단백질과 제2단백질의 전단과 후단이 교차결합된 융합 유전자(도 2의 B)를 수득한다. 이때 각 단백질에서 융합될 LxxLxxLxLxxN의 위치를 적절히 선택함으로써 다양한 종류의 융합 유전자를 얻을 수 있다.
하기 실시예에서 primer set 및 제한효소 등이 구체적으로 제시되고 있으나, 본 발명에 의한 사상의 실시를 위해 이들 이외에도 다앙한 primer set 및 제한효소 등을 사용할 수 있을 것이다. 다만, 제1LRR 패밀리 단백질 및 제2LRR 패밀리 단백질 유전자의 (내부)절단은, 추후 양 단백질 유전자의 교차결합을 위해, 동일한 제한효소에 의해 이루어지도록 하는 것이 좋다.
(2) 융합단백질의 1차 정제를 위한 tag의 도입
추후 발현될 융합 단백질의 정제를 위한 tag으로, 인간 IgG1의 Fc 영역 유전자를 상기 융합 유전자의 3'-말단에 연결한다. 이때 융합 유전자와 Fc tag 사이에 트롬빈 절단부위를 도입한다.
물론 Fc tag와 상기 융합 유전자의 결합은 상대적 위치가 중요한 것이므로, Fc tag를 하기 벡터에 먼저 결합시킨 후 융합 유전자를 결합시킬 수도 있음은 당연하다.
Fc tag가 연결된 상기 융합유전자의 유전자 단편 구조의 예를 도 3에 예시적으로 도시하였다.
(3) 벡터의 제작, 발현 및 융합 단백질의 분리정제
상기 융합 유전자를 소정의 벡터에 도입하여 발현벡터를 제작한 후 이를 숙주 세포(host-cell)에 도입하여 융합 단백질을 발현시킨다. 하기 실시예에서는 상기 융합 유전자를 벡터에 도입하여 전이벡터(transfer vector)를 제작한 후 이를 곤충세포에서 복제-발현 가능한 baculovirus와 혼합하여 융합 반응에 의해 baculovirus에 상기 융합 유전자가 삽입된 "재조합 baculovirus"를 제작하고 이를 곤충세포에 감염시켜 융합 단백질을 발현시켰다. 그러나 다양한 숙주 시스템과 발현 시스템을 활용하여 상기 융합단백질을 발현시킬 수 있음은 명백하다.
발현된 융합 단백질을 트롬빈으로 처리하여 Fc tag를 제거한 후 최종적으로 [제1단백질 5'영역~LxxLxxLxLxxN~제2단백질 3'영역] 및 [제2단백질 5'영역~LxxLxxLxLxxN~제1단백질 3'영역]으로 이루어진 다양한 종류의 융합 단백질을 정제한다.
본 발명에서 상기 숙주 세포는 E. coli와 같은 박테리아 세포, Pichia pastoris와 같은 효모 세포, Spodoptera frugiperda와 같은 곤충 세포 또는 African Green Monkey의 섬유아세포로부터 유래된 COS나 CHO(Chinese Hamster Ovary)세포와 같은 포유동물의 세포일 수 있다.
상기 융합단백질은 이온교환 크로마토그라피, 친화 크로마토그라피, different sugar chromatograph, hydrophobic interaction 크로마토그라피, 역상 크로마토그라피, 겔 여과 또는 기타 다양한 방법으로 정제가 가능하다.
상기의 방법에 의해 수득된 77개의 융합단백질 중 40개가 수용성임을 확인하였다(표 1-10).
수득된 TLR/VLR의 융합단백질을 결정화하여 구조를 분석한 결과, TLR 모듈과 VLR 모듈은 융합에 의해 그 구조가 변화하지 않았으며, 전체적인 골격뿐만 아니라 구조적인 유연성(flexibility)이 있는 곁가지와 모듈융합부위에서도 그 구조가 엄격히 보존되는 것을 확인할 수 있었다.
따라서 본 발명의 융합 LRR 기술은, 결정화가 어려운 LRR 패밀리의 단백질을, 결정성이 우수한 VLR과 같은 다른 LRR 패밀리 단백질의 융합단백질을 제조함으로써 결정화를 통한 단백질의 구조를 규명하는 데 이용할 수 있음을 알 수 있다.
나아가, 본 발명의 융합단백질의 기능을 분석한 결과, 단백질의 구조 뿐 아니라 융합 전의 단백질의 기능이 융합단백질에서도 유지되므로, 단백질 의약품의 제조와 분석에도 응용할 수 있다.
이상과 같이 본 발명의 융합 LRR 기술에 의하면 각각의 단백질 구조와 기능을 유지하면서 두 LRR 패밀리 단백질을 효과적으로 융합하는 것이 가능이다.
본 발명의 융합 LRR 기술에 의하면, 결정성이 우수한 LRR 단백질과 결정성이 낮은 다른 LRR 단백질을 융합하여 결정성이 우수한 융합단백질을 얻을 수 있게 되므로 결정성이 낮은 단백질의 구조결정에 유용하게 사용할 수 있다. 나아가 단백질의 구조분석으로부터 단백질의 활성영역과 작용기작을 이해할 수 있으므로 상기 단백질의 생체 내 작용을 이해하고 치료약물 개발에 효과적으로 이용할 수 있다.
또한, 본 발명의 융합 LRR 기술에 의하면 각 단백질의 기능이 유지되면서도 결정성이 우수한 융합단백질을 다량으로 생산할 수 있으므로 단백질 의약품의 개발에 유용하다.
이하 실시예를 통하여 본 발명을 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 예시적인 목적일 뿐 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 의한 융합 LRR 기술의 유효성을 증명하기 위하여, 인간 TLR4(hTLR4), 인간 TLR2(hTLR2), 쥐 TLR2(mTLR2), 인간 TLR1(hTLR2) 각각을, hagfish(먹장어) VLR과 융합하였다.
실시예 1 : 융합단백질의 제조
TLR과 hagfish VLRB.61의 단편을 leucines 및 아스파라긴의 상대적인 위치가 엄격히 유지되는 보존된 'LxxLxLxxN' 위치에서 융합하였다. 각 융합단백질 전이벡터는 다음과 같이 제작되었다.
[TLRx 5'영역~LxxLxxLxLxxN~VLR 3'영역]으로 이루어진 융합 단백질을 TxV로, [VLR 5'영역~LxxLxxLxLxxN~TLRx 3'영역]으로 이루어진 융합 단백질을 VTx로 간략하게 표현한다. (여기서 x는 1~4)
(1) hTLR4 / VLR 융합단백질의 제조
hTLR4와 VLR의 전체 아미노산 서열을 각각 서열번호 1과 서열번호 2에 기재하였다.
hTLR4/VLR 융합단백질을 제조하기 위하여 표 1에 기재된 것과 같이 'LxxLxLxxN' 서열을 특징으로 하는 hTLR4와 VLR의 융합위치를 선정하였다.
1)-1 : 전이벡터(transfer vector)의 제작
① hT4V의 제작 : 먼저, 표 2에 도시된 primer set를 이용하고, 293T HEK(Human Embryonic Kidney) 세포의 cDNA library를 주형(template)으로 PCR하여 [Xbal자리~TLR4 5'영역~Nhe1자리] 구조의 유전자 단편을 얻었다. 역시 표 2에 도시된 primer set를 이용하고, 홋카이도 대학교 병리학과 Masanori Kasahara 교수에게서 얻은 VLRB.61 유전자를 주형으로 PCR하여 [Nhe1자리~VLR 3'영역~Notl자리]구조의 유전자 단편을 얻었다. 수득된 두 유전자 단편을 Nhe1 제한 효소자리를 이용하여 연결한 후, pAcGP67A 발현 벡터(BD Biosciences)의 XbaI/NotI 사이에 삽입하였다.
이와는 별도로, 표 2에 기재된 프라이머를 사용하고, 293T HEK 세포의 cDNA library를 주형(template)으로 PCR하여 인간 IgG1의 Fc 영역 유전자 단편(단백질 정제를 위한 tag)을 분리한 후, 이를 상기 pAcGP67A(BD Bioscience사, CAT # : 554756)의 NotI과 BglII의 사이에 삽입하여 전이벡터를 완성하였다. 이때 융합 유전자와 Fc tag 사이에 트롬빈 절단위치가 존재하게 된다.
② hVT4의 제작 : 위 ①과 동일한 방법으로 [Xbal자리~VLR 5'영역~Nhe1자리] 및 [Nhe1자리~TLR4 3'영역~NotI자리] 구조의 유전자 단편을 각각 얻고 같은 방법으로 전이벡터를 제작하였다.
1)-2 : 융합 단백질의 발현 및 정제
상기 방법에 의해 제작된 전이벡터를 baculogold DNA (linear baculovirus genome, BD Biosciences)와 함께 1:1 비율로 혼합하고 Sf9 곤충세포에 감염시켜 Grace's insect medium에서 27℃, 5일 동안 배양하여 상기 융합 유전자가 삽입된 "재조합 baculovirus"를 제작하였다. 배양된 재조합 baculovirus를 새로운 Sf9 곤충세포에 접종하여 2일간 증폭 배양하였다. 배양된 재조합 baculovirus를 4℃에서 보관하고 실험에 사용하였다.
Hi5 곤충 세포(Invitrogen)를 이용하여 TLR4 / VLR 융합단백질을 발현시켰다. 이를 위해서 Sf900 II SFM (GIBCO) 배지로 키운 Hi5 세포(Invitrogen)를 배양용기에 60×104/mL농도로 담고 16시간 경과 후에 상기 준비된 재조합 baculovirus를 Hi5 1L 당 40mL 접종하여 27℃, 100rpm으로 3일 동안 배양하여 융합 단백질을 발현시켰다.
배양이 완료된 배양액을 Protein A Sepharose(GE Healthcare) 친화성 크로마토그래피로 정제하여 hTLR4 / VLR ~ Fc 융합단백질을 정제하였다. 이어서 4℃에서 12시간 동안 트롬빈(Haematologic Technologies)을 처리하여 Fc tag를 절단한 후, 이온교환(Q sepharose) 및 Superdex-200 젤 여과 크로마토그래피(GE Healthcare)로 다시 정제하였다. 정제 과정동안 20mM Tris pH8.0, 200mM NaCl 용액으로 pH를 유지하였다. 발현된 15개의 융합단백질 중 7개의 수용성 융합단백질을 수득하였다(표 1). 수득된 7개의 융합단백질의 서열을 서열번호 35~41에 각각 나타내었다.
Figure 112008062941699-PAT00001
Figure 112008062941699-PAT00002
(2) mTLR2 / VLR 융합단백질의 제조
mTLR2의 전체 아미노산 서열을 서열목록에서 서열번호 42에 기재하였다.
mTLR2/VLR 융합단백질을 제조하기 위하여 표 3에 기재된 것과 같이 'LxxLxLxxN' 서열을 특징으로 하는 mTLR2와 VLR의 융합위치를 선정하였다.
hTLR4 대신 mTLR2를, 표 2의 primer set 대신 표 4의 primer set를, pAcGP67A 대신 pVL1393(BD Biosciences, CAT # : 554745)을 사용한 것을 제외하고는 전술한 1)과 동일한 방법에 의해 전이벡터를 완성하고, 융합 단백질을 분리정제 하였다(도 4). 단, mTLR2/VLR 융합단백질에 대해서는 정제 시 Q sepharose 대신 HiTrapQ를 사용하였다. 수득된 융합단백질의 서열을 서열번호 53~59에 각각 나타내었다.
Figure 112008062941699-PAT00003
Figure 112008062941699-PAT00004
(3) hTLR2 / VLR 융합단백질의 제조
hTLR2의 전체 아미노산 서열을 서열목록에서 서열번호 60에 기재하였다.
hTLR2/VLR 융합단백질을 제조하기 위하여 표 5에 기재된 것과 같이 'LxxLxLxxN' 서열을 특징으로 하는 hTLR2와 VLR의 융합위치를 선정하였다.
hTLR4 대신 hTLR2를, 표 2의 primer set 대신 표 6의 primer set를 사용한 것을 제외하고는 전술한 1)과 동일한 방법에 의해 전이벡터를 완성하고, 융합 단백질을 분리정제 하였다(도 4). 수득된 융합단백질의 서열을 서열번호 75~85에 각각 나타내었다.
Figure 112008062941699-PAT00005
Figure 112008062941699-PAT00006
(4) mTLR1 / VLR 융합단백질의 제조
mTLR1의 전체 아미노산 서열을 서열목록에서 서열번호 86에 기재하였다.
mTLR1/VLR 융합단백질을 제조하기 위하여 표 7에 기재된 것과 같이 'LxxLxLxxN' 서열을 특징으로 하는 mTLR1와 VLR의 융합위치를 선정하였다.
mTLR2 대신 mTLR1을, 표 4의 primer set 대신 표 8의 primer set를 사용한 것을 제외하고는 전술한 2)와 동일한 방법에 의해 전이벡터를 완성하고, 융합 단백질을 분리정제 하였다(도 5). 단, mTLR1/VLR 융합단백질에 대해서는 정제 시 HiTrapQ 대신 HiTrapSP(GE Healthcare)를 사용하였다. 수득된 융합단백질의 서열을 서열번호 96~101에 각각 나타내었다.
Figure 112008062941699-PAT00007
Figure 112008062941699-PAT00008
(5) hTLR1 / VLR 융합단백질의 제조
hTLR1의 전체 아미노산 서열을 서열목록에서 서열번호 102에 기재하였다.
hTLR1/VLR 융합단백질을 제조하기 위하여 표 9에 기재된 것과 같이 'LxxLxLxxN' 서열을 특징으로 하는 hTLR1와 VLR의 융합위치를 선정하였다.
hTLR4 대신 hTLR1을, 표 2의 primer set 대신 표 10의 primer set를 사용한 것을 제외하고는 전술한 1)과 동일한 방법에 의해 전이벡터를 완성하고, 융합 단백질을 분리정제 하였다(도 5). 수득된 융합단백질의 서열을 서열번호 112~118에 각각 나타내었다.
Figure 112008062941699-PAT00009
Figure 112008062941699-PAT00010
실시예 2 : 융합단백질의 구조분석
단백질의 융합에 의해 TLR 모듈 또는 VLR 모듈의 구조가 변화하는 지 확인하기 위하여 실시예 1에서 제조한 융합단백질을 결정화하고 X-선 회절분석법을 이용하여 구조를 결정하였다.
(1) 결정화
실시예 1에서 제조한 융합단밸질 중 표 11에 기재된 융합단백질을 부유 방울 증기 확산법(hanging-drop vapor diffusion method)을 사용하여 결정화하였다. 각 융합단백질의 최적화된 결정화 조건을 표 11에 기재하였다. 표 11에서, TLR/VLR 융합단백질과 다른 단백질과의 복합체는 하기 실시예 3에 의해 얻어진 단백질 복합체의 결정화 조건을 의미한다. 보다 구체적으로, 1㎕ 단백질 용액과 1㎕ 결정화 완충액을 혼합하여 부유 방울 증기 확산법에 의해 1 주간 결정을 성장시켰다. 얻어진 결정에 표 11에 기재한 냉동 완충액을 가하고 -170℃에서 보관하였다.
Figure 112008062941699-PAT00011
(2) X-선 회절 분석
포항 가속 실험실의 4A 빔라인, SPring-8의 BL41XU 빔라인, ESRF의 ID14-2 빔라인 또는 ALS의 BL5.0.1을 사용하여 회절 데이터를 얻었다. HKL2000 패키지(Otwinowski and Minor, Macromolecular Crystallography, part A, 28 : 307-326, 1997)와 MOSFLM/SCALA(WinnJ.SynchrotronRadiat. 10: 23-25, 2003) 프로그램을 회절 데이터 분석에 사용하였다.
초기 위상(initial phase)은 프로그램 PHASER을 사용한 분자 치환에 의해 계산하였다.(McCoy AJ, et al., Acta Crystallogr. D Biol. Crystallogr. 61 : 458-464, 2005). 원자 모델은 프로그램O와 CNS을 사용하여 반복 모델링 및 세부 개량 (iterative modeling and refinement)으로 구축하였다(Brunger AT, et al., Acta Crystallogr. D Biol. Crystallogr. 54 : 905-921, 1998; Jones TA, et al., Acta Crystallogr. A 47 (Pt 2) : 110-119, 1991). 최종 모델은 프로그램 REFMAC을 사용하여 (Murshudov GN 등, ActaCrystallogr. D Biol. Crystallogr. 54: 905-921, 1998; Jones TA 등, Acta Crystallogr. 53, 240-255, 1997) TLSMD 서버에 의해 생성된 TLS 프로그램 변수(Painter J and Merritt EA, Acta Crystallogr. 62, 439-450, 2006)로 세부 조절하였다.
상기 방법에 의해 1)에서 결정화한 융합단백질 중 hT4V_3, hT4V_8, hVT4_3, hT2V_2, hT1V_8-hT2V_9-Pam3CSK4, mT2V_6-Pam3CSK4 및 mT2V_6-Pam2CSK4의 결정 구조를 해석하였으며, 이를 도 6과 도 7에 도시하였다.
도 6은 TLR4/VLR 융합단백질의 구조로 파란색은 TLR4 단편을, 회색은 VLRB.61 단편을 나타낸다.
도 7은 hTLR1/VLR 융합단백질과 hTLR2/VLR 융합단백질의 전체적인 구조를 나타낸다. 도 7에서 hTLR1 단편, hTLR2 단편 및 VLR 단편은 녹색, 파란색 및 회색으로 각각 나타내었다. 중심 영역은 연두 및 하늘색으로 표시하였으며, Pam3CSK4 지단백은 빨간색으로, 디설파이드(Disulfide) 브릿지는 노란선으로 나타내었다. TLR1/VLR 융합단백질에 속하는 영역은 별표(*)로 표시하였다.
(3) VLR 모듈 구조의 변형여부 분석
전술한 (2)와 동일 방법에 의해 얻은 VLR의 구조를 전술한 (2)에서 얻은 융합단백질의 구조 중 VLR 모듈의 부위에 중첩시키고 그 결과를 도 8 및 도 9에 도시하였다. 도 8은 TLR4/VLR 융합단백질의 VLR 모듈과, 도 9는 TLR1/VLR 및 TLR2/VLR 융합단백질의 VLR 모듈과 VLRB.61 구조의 중첩을 보여준다.
VLRB.61 및 상기 융합단백질들 VLR 모듈의 골격 원자들은 기본적으로 동일한 구조를 가지고 있으며 중첩후 평균 Cα rms 차이는 0.3~0.9Å로, 단백질 융합 후에도 VLR 모듈의 구조는 실질적으로 변화하지 않았음을 확인할 수 있었다. 골격 원자뿐만 아니라 곁사슬(side chain)의 구조 역시 융합 경계에서 조차도 크게 변화하지 않아 원래 VLRB.61과 동일한 구조를 나타내었다.
(4) TLR 모듈 구조의 변형여부 분석
전장 인간 TLR4 및 TLR2는 그 구조를 모르기 때문에, 융합단백질의 TLR4 및 TLR2 단편의 구조를 hTLR4 및 hTLR2와 직접적으로 비교하는 것은 불가능하였다. 대신, TLR4의 전체 구조를 유추하기 위하여 도 6의 TLR4/VLR 융합단백질 세 개의 중첩부분의 구조를 비교하여 도 10에 나타내었다.
상기 표 1에서 확인할 수 있듯이 hT4V_3 융합단백질에 포함된 TLR4의 27~227번 아미노산 단편은 hT4V_8 융합단백질에 포함되어 있으며, TLR4의 383~527번 아미노산의 145개 잔기가 hVT4_3 및 hT4V_8 융합단백질에 공통된다. 도 10에서 확인할 수 있듯이, 중첩 영역은 평균 Cα rms 거리가 각각 0.39, 0.28Å으로 서로 동일한 골격구조를 가지고 있었다. 2)의 VLR 모듈에서와 마찬가지로 구조의 상동성은 골격구조에만 제한되는 것이 아니라, 멀리 떨어져 있고 유연한(flexible) 곁가지의 융합위치에서도 확인할 수 있었다.
TLR2 단편의 경우에는, 표 5에서 확인할 수 있듯이 hT2V_3 융합단백질에 포함된 TLR2의 1~234번 아미노산 단편이 hT2V_9 융합단백질에 포함되어 있다. 도 11에 도시한 바와 같이 hT2V_2과 hT2V_9 융합물의 중첩 영역은 구조적으로 hT2V_2의 융합 경계에서조차 실질적으로 동일하였다.
따라서, TLR4 및 TLR2 단편은 VLR 단편과 융합되더라도 구조의 변화가 무시할 수 있을 정도로 작음을 알 수 있다.
전술한 3)과 4)의 결과로부터, LRR 영역의 융합에 의해 생성된 융합단백질에 있어서, VLR 또는 TLR 단편의 어느 쪽도 융합에 의해 유의한 구조적인 변화를 유발되지 않은 것을 확인할 수 있다.
실시예 3 : 융합단백질의 기능분석
(1) hTLR4/VLR 융합단백질의 기능유지 확인
TLR4와 MD-2는 그람 음성 박테리아의 LPS를 인식하는 이종이합체를 형성한다. TLR4의 융합단백질이 MD-2와 복합체를 형성하고, 복합체가 LPS 또는 LPS의 길항제인 Eritoran과도 결합하는지 시험하여 융합단백질에서 TLR4의 기능이 유지되는지를 확인하였다.
1) MD-2와의 결합
단백질 A tag이 융합된 MD-2(293T HEK 세포의 cDNA로부터 획득)를 hTLR4 또는 융합단백질 hT4V_3, hT4V_4, hT4V_5, hT4V_8 또는 hT4V_9과 함께 Hi5 세포에서 발현시키고 MD-2 및 MD-2와 결합한 단백질만을 정제하기 위하여 IgG Sepharose (GE Healthcare) 친화 크로마토그라피로 정제하였다. 정제된 단백질 중 단백질 A tag를 트롬빈을 사용하여 제거한 후 이온 교환 (S Sepharose) 및 겔 여과 크라마토그라피를 이용하여 다시 정제하였다. 단백질을 12% SDS PAGE로 분리하였다.
도 12에서 확인할 수 있듯이, 전장 TLR4 뿐 아니라 MD-2 결합 위치를 가지는 융합단백질 hT4V_3, hT4V_4, hT4V_5, hT4V_8 및 hT4V_9 역시 MD-2와 결합하여 본 발명에 의한 TLR4의 융합단백질에서도 전장 TLR4의 기능이 유지됨을 확인할 수 있었다.
2) TLR4-MD-2 복합물과 LPS 또는 Eritoran의 결합
E.coli LPS Ra (Sigma, L9641) 또는 Eritoran(Eisai Inc.)을 10분간 소니케이션(sonication)하고 전술한 1)에서 얻은 TLR4-MD-2 복합체 또는 hT4V_8-MD2 복합체 1 mg/ml와 37℃에서 3시간 동안 배양하였다. LPS 또는 Eritoran의 단백질에 대한 무게 비율은 10:1로 유지하였다. 단백질 복합체에 대한 LPA RA 또는 Eritoran의 결합을 8% native 및 SDS PAGE와 Superdex 200 겔 여과 크로마토그라피(GE Healthcare)로 관측하였으며 그 결과를 도 13에 도시하였다.
도 14의 왼쪽 그림은 겔 여과 크로마토그라피로 분석한 후 분자량을 보정한 결과를 보여주는 그래프이다. 검은색은 TLR4-MD-2 복합체 또는 hT4V_8-MD2 복합체 단독, 빨간색은 LPS와의 배양액, 하늘색은 Eritoran과의 배양액의 겔 여과 크로마토그램으로 용리 부피(elution volume)로부터 계산한 복합체의 표면 분자량을 괄호속의 단량체의 기대 분자량과 함께 나타내었다. 도 13의 오른쪽 그림은 native PAGE와 SDS PAGE 분석결과를 나타낸다. 이량체 복합체는 단량체 복합체보다 서서히 이동하였으며 *로 표시하였다.
도 13에서 확인할 수 있듯이 hTLR4-MD-2와 hT4V_8-MD2에 대한 Eritoran의 결합은 겔 여과 크로마토그라피의 용리 부피를 변화시키지 않았으며 native 겔 전기영동에서 이동 속도에 약간의 차이만을 유발하였다. Eritoran/hTLR4 결합 단백질 복합체는 리간드의 - 전하로 인하여 단량체 복합체보다 약간 빠르게 이동하였다.
이에 반하여, LPS의 결합은 TLR4-MD-2와 hT4V_8-MD2 복합물의 응집(aggregation) 상태에 큰 변화를 일으킨다. LPS가 결합된 TLR4-MD-2와 hT4V_8-MD2 모두 겔 여과 크로마토그라피에서 빠르게 용리되었으며 음성 겔 전기영동에서도 더 위로 이동하였다. 겔 여과 크로마토그라피에서 LPS-결합 단백질의 용리 부피는 각각 그 heterotetramer의 예상 용리 부피와 일치하였다.
위 결과로부터 융합단백질과 MD-2의 복합체인 hT4V_8-MD2는 TLR4-MD-2와 LPS 및 Eritoran에 대한 반응이 서로 동일하여 LRR 부위의 융합에 의해 그 구조가 유지될 뿐 아니라 기능 또한 보존되는 것을 확인할 수 있었다.
(2) 융합단백질의 리간드 결합기능 보존여부의 확인
융합단백질이 기능을 보존하는 것을 시험하기 위하여, TLR1 융합물과 TLR2 융합물의 리간드 결합 테스트를 실시하였다.
복합물 형성을 위하여, ligand인 Pam3CSK4(GmbH EMC Microcollections)의 합성 R-이성질체를 정제된 hT2V_9 5mg/ml와 함께 20mM Tris HCl(pH 8.0)과 200mM NaCl을 포함하는 완충용액에서 3 시간 동안 상온 반응시켰다. native-PAGE에서 리간드의 결합 여부를 관찰하였다. hT2V_9와 Pam3CSK4가 결합하면 native-PAGE 상에서 밴드가 약간 위로 이동하는 것을 확인할 수 있다(도 14).
hT1V_8과 hT2V_9의 단계적인 결합에 의해 hT1V_8-hT2V_9-Pam3CSK4 복합체가 제조되었다. 먼저, hT2V_9과 Pam3CSK4를 20mM Tris HCl (pH 8.0)과 200mM NaCl을 포함하는 완충용액에서 상온에서 2시간 동안 반응한 후 다시 hT1V_8을 섞고 37℃에서 2시간 동안 추가로 반응시켰다. hT1V_8과 hT2V_9의 농도는 각각 2.5mg/ml이었으며 Pam3CSK4의 단백질에 대한 몰 비율은 5:1로 유지되었다. 결합하지 않은 TLR 단백질과 과량의 Pam3CSK4를 제거하기 위해서 Superdex-200 겔 여과 크로마토그라피로 정제하였다(도 15). 겔 여과 크로마토그라피는 단백질의 크기 차이를 이용하여 분리, 정제하기 때문에 Pam3CSK4가 결합된 hT1V_8-hT2V_9 복합체는 겔 여과 크로마토그라피에서 빠르게 용리되었으며 음성 겔 전기영동에서도 더 위로 이동하였다(도 14, 도 15). 겔 여과 크로마토그라피에서 hT1V_8-hT2V_9-Pam3CSK4 복합체의 용리 부피는 예상한 heterodimer 용리 부피와 일치하였다.
Pam2CSK4(EMC Microcollections GmbH)의 R-이성질체와 mT2V_6 복합체 역시 상기와 동일한 방법으로 제조하였다. mT2V_6과 Pam2CSK4를 20mM Tris HCl (pH 8.0)과 200mM NaCl을 포함하는 완충용액에서 상온에서 2시간 동안 반응하였고 Pam3CSK4의 단백질에 대한 몰 비율은 3:1로 유지하였다.
이상에서 확인한 바와 같이, 본 발명에 의한 융합단백질들이 native 단백질과 동일한 리간드 결합특성을 나타냄을 확인하였다. 따라서 이들 융합단백질들도 native 단백질과 같은 기능 보존하고 있음을 유추할 수 있다.
도 1은 원구류어의 VLR과, TLR4의 분자구조를 나타내는 모식도.
도 2는 제1LRR 패밀리 단백질 및 제2LRR 패밀리 단백질 유전자 및 본 발명에 의한 융합 단백질 유전자의 구조를 보여주는 개념도.
도 3은 TLR/VLR 융합단백질의 클로닝을 나타내는 모식도.
도 4는 mTLR2/VLR 융합단백질의 정제 과정을 보여주는 사진.
도 5는 mTLR1/VLR 융합단백질의 정제 과정을 보여주는 사진.
도 6은 hTLR4/VLR 융합단백질의 구조를 보여주는 X-ray 회절 분석 결과.
도 7은 hTLR1/VLR 및 hTLR2/VLR, mTLR2/VLR 구조를 보여주는 X-ray 회절 분석 결과.
도 8은 TLR4-VLR 융합단백질의 VLR 단편 영역과 전체 VLRB.61의 X-ray 회절 분석 결과를 중첩시킨 그림.
도 9는 hTLR2-VLR 및 mTLR2-VLR, hTLR1-VLR 융합단백질의 VLR 단편 영역과 전체 VLRB.61의 X-ray 회절 분석 결과를 중첩시킨 그림.
도 10은 TLR4-VLR 융합단백질의 중첩 영역에서의 superimposition(중첩)을 보여주는 그림.
도 11은 hT2V_2와 hT2V_9 융합단백질의 hT2V_2와 hT2V_9 Cα trace의 중첩 영역에서의 superimposition(중첩)을 보여주는 그림.
도 12는 TLR4-VLR 융합단백질 또는 TLR4와 MD-2의 Co-expression 후 SDS PAGE를 사용하여 전기영동한 사진.
도 13은 TLR4 또는 TLR4/VLR 융합단백질과 MD-2 복합체의 겔크로마토그라피 결과를 보여주는 그래프 및 전기영동 사진.
도 14는 TLR1-TLR2-Pam3CSK4 복합체가 형성될 때 Native-PAGE에서의 이동 변화를 보여주는 전기영동 사진.
도 15는 TLR1-TLR2-Pam3CSK4 복합체가 형성될 때 Superdex-200 겔 여과 크로마토그라피(GE Healthcare) 상에서 peak가 앞 쪽으로 이동하는 것을 보여주는 크로마토그램.
<110> Korea Advanced Institute of Science and Technology <120> Hybridization method between leucine rich repeat family proteins <150> US60969911 <151> 2007-09-04 <160> 118 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 839 <212> PRT <213> human TLR4 <400> 1 Met Met Ser Ala Ser Arg Leu Ala Gly Thr Leu Ile Pro Ala Met Ala 1 5 10 15 Phe Leu Ser Cys Val Arg Pro Glu Ser Trp Glu Pro Cys Val Glu Val 20 25 30 Val Pro Asn Ile Thr Tyr Gln Cys Met Glu Leu Asn Phe Tyr Lys Ile 35 40 45 Pro Asp Asn Leu Pro Phe Ser Thr Lys Asn Leu Asp Leu Ser Phe Asn 50 55 60 Pro Leu Arg His Leu Gly Ser Tyr Ser Phe Phe Ser Phe Pro Glu Leu 65 70 75 80 Gln Val Leu Asp Leu Ser Arg Cys Glu Ile Gln Thr Ile Glu Asp Gly 85 90 95 Ala Tyr Gln Ser Leu Ser His Leu Ser Thr Leu Ile Leu Thr Gly Asn 100 105 110 Pro Ile Gln Ser Leu Ala Leu Gly Ala Phe Ser Gly Leu Ser Ser Leu 115 120 125 Gln Lys Leu Val Ala Val Glu Thr Asn Leu Ala Ser Leu Glu Asn Phe 130 135 140 Pro Ile Gly His Leu Lys Thr Leu Lys Glu Leu Asn Val Ala His Asn 145 150 155 160 Leu Ile Gln Ser Phe Lys Leu Pro Glu Tyr Phe Ser Asn Leu Thr Asn 165 170 175 Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Ser Asn Lys Ile Gln Ser Ile Tyr Cys 180 185 190 Thr Asp Leu Arg Val Leu His Gln Met Pro Leu Leu Asn Leu Ser Leu 195 200 205 Asp Leu Ser Leu Asn Pro Met Asn Phe Ile Gln Pro Gly Ala Phe Lys 210 215 220 Glu Ile Arg Leu His Lys Leu Thr Leu Arg Asn Asn Phe Asp Ser Leu 225 230 235 240 Asn Val Met Lys Thr Cys Ile Gln Gly Leu Ala Gly Leu Glu Val His 245 250 255 Arg Leu Val Leu Gly Glu Phe Arg Asn Glu Gly Asn Leu Glu Lys Phe 260 265 270 Asp Lys Ser Ala Leu Glu Gly Leu Cys Asn Leu Thr Ile Glu Glu Phe 275 280 285 Arg Leu Ala Tyr Leu Asp Tyr Tyr Leu Asp Asp Ile Ile Asp Leu Phe 290 295 300 Asn Cys Leu Thr Asn Val Ser Ser Phe Ser Leu Val Ser Val Thr Ile 305 310 315 320 Glu Arg Val Lys Asp Phe Ser Tyr Asn Phe Gly Trp Gln His Leu Glu 325 330 335 Leu Val Asn Cys Lys Phe Gly Gln Phe Pro Thr Leu Lys Leu Lys Ser 340 345 350 Leu Lys Arg Leu Thr Phe Thr Ser Asn Lys Gly Gly Asn Ala Phe Ser 355 360 365 Glu Val Asp Leu Pro Ser Leu Glu Phe Leu Asp Leu Ser Arg Asn Gly 370 375 380 Leu Ser Phe Lys Gly Cys Cys Ser Gln Ser Asp Phe Gly Thr Thr Ser 385 390 395 400 Leu Lys Tyr Leu Asp Leu Ser Phe Asn Gly Val Ile Thr Met Ser Ser 405 410 415 Asn Phe Leu Gly Leu Glu Gln Leu Glu His Leu Asp Phe Gln His Ser 420 425 430 Asn Leu Lys Gln Met Ser Glu Phe Ser Val Phe Leu Ser Leu Arg Asn 435 440 445 Leu Ile Tyr Leu Asp Ile Ser His Thr His Thr Arg Val Ala Phe Asn 450 455 460 Gly Ile Phe Asn Gly Leu Ser Ser Leu Glu Val Leu Lys Met Ala Gly 465 470 475 480 Asn Ser Phe Gln Glu Asn Phe Leu Pro Asp Ile Phe Thr Glu Leu Arg 485 490 495 Asn Leu Thr Phe Leu Asp Leu Ser Gln Cys Gln Leu Glu Gln Leu Ser 500 505 510 Pro Thr Ala Phe Asn Ser Leu Ser Ser Leu Gln Val Leu Asn Met Ser 515 520 525 His Asn Asn Phe Phe Ser Leu Asp Thr Phe Pro Tyr Lys Cys Leu Asn 530 535 540 Ser Leu Gln Val Leu Asp Tyr Ser Leu Asn His Ile Met Thr Ser Lys 545 550 555 560 Lys Gln Glu Leu Gln His Phe Pro Ser Ser Leu Ala Phe Leu Asn Leu 565 570 575 Thr Gln Asn Asp Phe Ala Cys Thr Cys Glu His Gln Ser Phe Leu Gln 580 585 590 Trp Ile Lys Asp Gln Arg Gln Leu Leu Val Glu Val Glu Arg Met Glu 595 600 605 Cys Ala Thr Pro Ser Asp Lys Gln Gly Met Pro Val Leu Ser Leu Asn 610 615 620 Ile Thr Cys Gln Met Asn Lys Thr Ile Ile Gly Val Ser Val Leu Ser 625 630 635 640 Val Leu Val Val Ser Val Val Ala Val Leu Val Tyr Lys Phe Tyr Phe 645 650 655 His Leu Met Leu Leu Ala Gly Cys Ile Lys Tyr Gly Arg Gly Glu Asn 660 665 670 Ile Tyr Asp Ala Phe Val Ile Tyr Ser Ser Gln Asp Glu Asp Trp Val 675 680 685 Arg Asn Glu Leu Val Lys Asn Leu Glu Glu Gly Val Pro Pro Phe Gln 690 695 700 Leu Cys Leu His Tyr Arg Asp Phe Ile Pro Gly Val Ala Ile Ala Ala 705 710 715 720 Asn Ile Ile His Glu Gly Phe His Lys Ser Arg Lys Val Ile Val Val 725 730 735 Val Ser Gln His Phe Ile Gln Ser Arg Trp Cys Ile Phe Glu Tyr Glu 740 745 750 Ile Ala Gln Thr Trp Gln Phe Leu Ser Ser Arg Ala Gly Ile Ile Phe 755 760 765 Ile Val Leu Gln Lys Val Glu Lys Thr Leu Leu Arg Gln Gln Val Glu 770 775 780 Leu Tyr Arg Leu Leu Ser Arg Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Glu Asp Ser 785 790 795 800 Val Leu Gly Arg His Ile Phe Trp Arg Arg Leu Arg Lys Ala Leu Leu 805 810 815 Asp Gly Lys Ser Trp Asn Pro Glu Gly Thr Val Gly Thr Gly Cys Asn 820 825 830 Trp Gln Glu Ala Thr Ser Ile 835 <210> 2 <211> 273 <212> PRT <213> Variable lymphocyte receptor <400> 2 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Thr Lys Leu 65 70 75 80 Ser Leu Ser Gln Asn Gln Ile Gln Ser Leu Pro Asp Gly Val Phe Asp 85 90 95 Lys Leu Thr Lys Leu Thr Ile Leu Tyr Leu His Glu Asn Lys Leu Gln 100 105 110 Ser Leu Pro Asn Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Lys Glu Leu 115 120 125 Ala Leu Asp Thr Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp 130 135 140 Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp 145 150 155 160 Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn 165 170 175 Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro 180 185 190 Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr Thr 195 200 205 Thr Met Pro Thr Thr Thr Thr Leu Pro Thr Thr Thr Lys Met Ser Met 210 215 220 Val Lys Val Pro Leu Val Pro Pro Glu Ala Phe Gly Arg Val Met Asn 225 230 235 240 Ala Cys Ala Tyr Phe Pro Ser Tyr Ile Phe Leu His Leu Val His Gly 245 250 255 Leu Ala Ala Val Pro Leu Val Tyr Leu Ile Cys His Ala Ser Gln Leu 260 265 270 Leu <210> 3 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for hTLR4 <400> 3 actacggatc ccgagccctg cgtggaggtg gtt 33 <210> 4 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 4 atccagcggc cgctgccata cagaaccact tctct 35 <210> 5 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 5 catctcaaaa ctctcaaaga gctcgccctg gac 33 <210> 6 <211> 40 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for VLR <400> 6 actacgcggc cgcagtaggg cagatgatac ttcggacggg 40 <210> 7 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4] <400> 7 gagctctttg agagttttga gatgtccaat ggg 33 <210> 8 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 8 gagctctttg agattggtca gattagaaaa ata 33 <210> 9 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 9 aatctgacca atctcaaaga gctcgccctg gac 33 <210> 10 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 10 gagctctttg aggctggttg tcccaaaatc ac 32 <210> 11 <211> 39 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 11 gattttggga caaccagcct caaagagctc gccctggac 39 <210> 12 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 12 gagctctttg agactggaca agccattgaa ga 32 <210> 13 <211> 39 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 13 ttcaatggct tgtccagtct caaagagctc gccctggac 39 <210> 14 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 14 gagctctttg agggagttca gacacttata agg 33 <210> 15 <211> 39 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 15 tataagtgtc tgaactccct caaagagctc gccctggac 39 <210> 16 <211> 34 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 16 atccagctag ccattttcaa gacttcgaga ctgg 34 <210> 17 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 17 actacgctag caaccagctg aagtctgttc ct 32 <210> 18 <211> 34 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 18 atccagctag ccatatttag tacctgaaga ctgg 34 <210> 19 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 19 gagctctttg agggagttca gacacttata agg 33 <210> 20 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for hTLR4 <400> 20 actacggatc catgaagttc gcactgagag gaacct 36 <210> 21 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 21 ttcaagactt cgagttgggt tagtttatca aacac 35 <210> 22 <211> 37 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 22 ttgataaact aacccaactc gaagtcttga aaatggc 37 <210> 23 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for VLR <400> 23 atccagcggc cgctcttatt catctgacag gtgat 35 <210> 24 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 24 tctaaatact ttagttgggt tagtttatca aacac 35 <210> 25 <211> 37 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 25 ttgataaact aacccaacta aagtatttag atctgag 37 <210> 26 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 26 actactctag acagactcag ctttgtgagt tg 32 <210> 27 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 27 actacgctag caatggcttg agtttcaaag gttgct 36 <210> 28 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 28 actacgctag caacaaaggt gggaatgctt tttcag 36 <210> 29 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 29 gtaagccttt tgagttgggt tagtttatca aacac 35 <210> 30 <211> 37 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 30 ttgataaact aacccaactc aaaaggctta ctttcac 37 <210> 31 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 31 gtcagcttat gaagttgggt tagtttatca aacac 35 <210> 32 <211> 38 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 32 ttgataaact aacccaactt cataagctga ctttaaga 38 <210> 33 <211> 49 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for hTLR4 <400> 33 actacgcggc cgcctggttc cgcgtggttc cgagcccaaa tcttgtgac 49 <210> 34 <211> 50 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR4 <400> 34 atccaagatc ttcagtgatg atgatgatga tgtttacccg gagacaggga 50 <210> 35 <211> 277 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hydrid protein for hT4V_3 <400> 35 Glu Pro Cys Val Glu Val Val Pro Asn Ile Thr Tyr Gln Cys Met Glu 1 5 10 15 Leu Asn Phe Tyr Lys Ile Pro Asp Asn Leu Pro Phe Ser Thr Lys Asn 20 25 30 Leu Asp Leu Ser Phe Asn Pro Leu Arg His Leu Gly Ser Tyr Ser Phe 35 40 45 Phe Ser Phe Pro Glu Leu Gln Val Leu Asp Leu Ser Arg Cys Glu Ile 50 55 60 Gln Thr Ile Glu Asp Gly Ala Tyr Gln Ser Leu Ser His Leu Ser Thr 65 70 75 80 Leu Ile Leu Thr Gly Asn Pro Ile Gln Ser Leu Ala Leu Gly Ala Phe 85 90 95 Ser Gly Leu Ser Ser Leu Gln Lys Leu Val Ala Val Glu Thr Asn Leu 100 105 110 Ala Ser Leu Glu Asn Phe Pro Ile Gly His Leu Lys Thr Leu Lys Glu 115 120 125 Leu Asn Val Ala His Asn Leu Ile Gln Ser Phe Lys Leu Pro Glu Tyr 130 135 140 Phe Ser Asn Leu Thr Asn Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Ser Asn Lys 145 150 155 160 Ile Gln Ser Ile Tyr Cys Thr Asp Leu Arg Val Leu His Gln Met Pro 165 170 175 Leu Leu Asn Leu Ser Leu Asp Leu Ser Leu Asn Pro Met Asn Phe Ile 180 185 190 Gln Pro Gly Ala Phe Lys Glu Ile Arg Leu Lys Glu Leu Ala Leu Asp 195 200 205 Thr Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr 210 215 220 Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys 225 230 235 240 Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys 245 250 255 Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser 260 265 270 Ile Ile Cys Pro Thr 275 <210> 36 <211> 402 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT4V_4 <400> 36 Glu Pro Cys Val Glu Val Val Pro Asn Ile Thr Tyr Gln Cys Met Glu 1 5 10 15 Leu Asn Phe Tyr Lys Ile Pro Asp Asn Leu Pro Phe Ser Thr Lys Asn 20 25 30 Leu Asp Leu Ser Phe Asn Pro Leu Arg His Leu Gly Ser Tyr Ser Phe 35 40 45 Phe Ser Phe Pro Glu Leu Gln Val Leu Asp Leu Ser Arg Cys Glu Ile 50 55 60 Gln Thr Ile Glu Asp Gly Ala Tyr Gln Ser Leu Ser His Leu Ser Thr 65 70 75 80 Leu Ile Leu Thr Gly Asn Pro Ile Gln Ser Leu Ala Leu Gly Ala Phe 85 90 95 Ser Gly Leu Ser Ser Leu Gln Lys Leu Val Ala Val Glu Thr Asn Leu 100 105 110 Ala Ser Leu Glu Asn Phe Pro Ile Gly His Leu Lys Thr Leu Lys Glu 115 120 125 Leu Asn Val Ala His Asn Leu Ile Gln Ser Phe Lys Leu Pro Glu Tyr 130 135 140 Phe Ser Asn Leu Thr Asn Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Ser Asn Lys 145 150 155 160 Ile Gln Ser Ile Tyr Cys Thr Asp Leu Arg Val Leu His Gln Met Pro 165 170 175 Leu Leu Asn Leu Ser Leu Asp Leu Ser Leu Asn Pro Met Asn Phe Ile 180 185 190 Gln Pro Gly Ala Phe Lys Glu Ile Arg Leu His Lys Leu Thr Leu Arg 195 200 205 Asn Asn Phe Asp Ser Leu Asn Val Met Lys Thr Cys Ile Gln Gly Leu 210 215 220 Ala Gly Leu Glu Val His Arg Leu Val Leu Gly Glu Phe Arg Asn Glu 225 230 235 240 Gly Asn Leu Glu Lys Phe Asp Lys Ser Ala Leu Glu Gly Leu Cys Asn 245 250 255 Leu Thr Ile Glu Glu Phe Arg Leu Ala Tyr Leu Asp Tyr Tyr Leu Asp 260 265 270 Asp Ile Ile Asp Leu Phe Asn Cys Leu Thr Asn Val Ser Ser Phe Ser 275 280 285 Leu Val Ser Val Thr Ile Glu Arg Val Lys Asp Phe Ser Tyr Asn Phe 290 295 300 Gly Trp Gln His Leu Glu Leu Val Asn Cys Lys Phe Gly Gln Phe Pro 305 310 315 320 Thr Leu Lys Leu Lys Ser Leu Lys Glu Leu Ala Leu Asp Thr Asn Gln 325 330 335 Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln 340 345 350 Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile 355 360 365 Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly 370 375 380 Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys 385 390 395 400 Pro Thr <210> 37 <211> 450 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT4V_5 <400> 37 Glu Pro Cys Val Glu Val Val Pro Asn Ile Thr Tyr Gln Cys Met Glu 1 5 10 15 Leu Asn Phe Tyr Lys Ile Pro Asp Asn Leu Pro Phe Ser Thr Lys Asn 20 25 30 Leu Asp Leu Ser Phe Asn Pro Leu Arg His Leu Gly Ser Tyr Ser Phe 35 40 45 Phe Ser Phe Pro Glu Leu Gln Val Leu Asp Leu Ser Arg Cys Glu Ile 50 55 60 Gln Thr Ile Glu Asp Gly Ala Tyr Gln Ser Leu Ser His Leu Ser Thr 65 70 75 80 Leu Ile Leu Thr Gly Asn Pro Ile Gln Ser Leu Ala Leu Gly Ala Phe 85 90 95 Ser Gly Leu Ser Ser Leu Gln Lys Leu Val Ala Val Glu Thr Asn Leu 100 105 110 Ala Ser Leu Glu Asn Phe Pro Ile Gly His Leu Lys Thr Leu Lys Glu 115 120 125 Leu Asn Val Ala His Asn Leu Ile Gln Ser Phe Lys Leu Pro Glu Tyr 130 135 140 Phe Ser Asn Leu Thr Asn Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Ser Asn Lys 145 150 155 160 Ile Gln Ser Ile Tyr Cys Thr Asp Leu Arg Val Leu His Gln Met Pro 165 170 175 Leu Leu Asn Leu Ser Leu Asp Leu Ser Leu Asn Pro Met Asn Phe Ile 180 185 190 Gln Pro Gly Ala Phe Lys Glu Ile Arg Leu His Lys Leu Thr Leu Arg 195 200 205 Asn Asn Phe Asp Ser Leu Asn Val Met Lys Thr Cys Ile Gln Gly Leu 210 215 220 Ala Gly Leu Glu Val His Arg Leu Val Leu Gly Glu Phe Arg Asn Glu 225 230 235 240 Gly Asn Leu Glu Lys Phe Asp Lys Ser Ala Leu Glu Gly Leu Cys Asn 245 250 255 Leu Thr Ile Glu Glu Phe Arg Leu Ala Tyr Leu Asp Tyr Tyr Leu Asp 260 265 270 Asp Ile Ile Asp Leu Phe Asn Cys Leu Thr Asn Val Ser Ser Phe Ser 275 280 285 Leu Val Ser Val Thr Ile Glu Arg Val Lys Asp Phe Ser Tyr Asn Phe 290 295 300 Gly Trp Gln His Leu Glu Leu Val Asn Cys Lys Phe Gly Gln Phe Pro 305 310 315 320 Thr Leu Lys Leu Lys Ser Leu Lys Arg Leu Thr Phe Thr Ser Asn Lys 325 330 335 Gly Gly Asn Ala Phe Ser Glu Val Asp Leu Pro Ser Leu Glu Phe Leu 340 345 350 Asp Leu Ser Arg Asn Gly Leu Ser Phe Lys Gly Cys Cys Ser Gln Ser 355 360 365 Asp Phe Gly Thr Thr Ser Leu Lys Glu Leu Ala Leu Asp Thr Asn Gln 370 375 380 Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln 385 390 395 400 Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile 405 410 415 Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly 420 425 430 Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys 435 440 445 Pro Thr 450 <210> 38 <211> 571 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT4V_8 <400> 38 Glu Pro Cys Val Glu Val Val Pro Asn Ile Thr Tyr Gln Cys Met Glu 1 5 10 15 Leu Asn Phe Tyr Lys Ile Pro Asp Asn Leu Pro Phe Ser Thr Lys Asn 20 25 30 Leu Asp Leu Ser Phe Asn Pro Leu Arg His Leu Gly Ser Tyr Ser Phe 35 40 45 Phe Ser Phe Pro Glu Leu Gln Val Leu Asp Leu Ser Arg Cys Glu Ile 50 55 60 Gln Thr Ile Glu Asp Gly Ala Tyr Gln Ser Leu Ser His Leu Ser Thr 65 70 75 80 Leu Ile Leu Thr Gly Asn Pro Ile Gln Ser Leu Ala Leu Gly Ala Phe 85 90 95 Ser Gly Leu Ser Ser Leu Gln Lys Leu Val Ala Val Glu Thr Asn Leu 100 105 110 Ala Ser Leu Glu Asn Phe Pro Ile Gly His Leu Lys Thr Leu Lys Glu 115 120 125 Leu Asn Val Ala His Asn Leu Ile Gln Ser Phe Lys Leu Pro Glu Tyr 130 135 140 Phe Ser Asn Leu Thr Asn Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Ser Asn Lys 145 150 155 160 Ile Gln Ser Ile Tyr Cys Thr Asp Leu Arg Val Leu His Gln Met Pro 165 170 175 Leu Leu Asn Leu Ser Leu Asp Leu Ser Leu Asn Pro Met Asn Phe Ile 180 185 190 Gln Pro Gly Ala Phe Lys Glu Ile Arg Leu His Lys Leu Thr Leu Arg 195 200 205 Asn Asn Phe Asp Ser Leu Asn Val Met Lys Thr Cys Ile Gln Gly Leu 210 215 220 Ala Gly Leu Glu Val His Arg Leu Val Leu Gly Glu Phe Arg Asn Glu 225 230 235 240 Gly Asn Leu Glu Lys Phe Asp Lys Ser Ala Leu Glu Gly Leu Cys Asn 245 250 255 Leu Thr Ile Glu Glu Phe Arg Leu Ala Tyr Leu Asp Tyr Tyr Leu Asp 260 265 270 Asp Ile Ile Asp Leu Phe Asn Cys Leu Thr Asn Val Ser Ser Phe Ser 275 280 285 Leu Val Ser Val Thr Ile Glu Arg Val Lys Asp Phe Ser Tyr Asn Phe 290 295 300 Gly Trp Gln His Leu Glu Leu Val Asn Cys Lys Phe Gly Gln Phe Pro 305 310 315 320 Thr Leu Lys Leu Lys Ser Leu Lys Arg Leu Thr Phe Thr Ser Asn Lys 325 330 335 Gly Gly Asn Ala Phe Ser Glu Val Asp Leu Pro Ser Leu Glu Phe Leu 340 345 350 Asp Leu Ser Arg Asn Gly Leu Ser Phe Lys Gly Cys Cys Ser Gln Ser 355 360 365 Asp Phe Gly Thr Thr Ser Leu Lys Tyr Leu Asp Leu Ser Phe Asn Gly 370 375 380 Val Ile Thr Met Ser Ser Asn Phe Leu Gly Leu Glu Gln Leu Glu His 385 390 395 400 Leu Asp Phe Gln His Ser Asn Leu Lys Gln Met Ser Glu Phe Ser Val 405 410 415 Phe Leu Ser Leu Arg Asn Leu Ile Tyr Leu Asp Ile Ser His Thr His 420 425 430 Thr Arg Val Ala Phe Asn Gly Ile Phe Asn Gly Leu Ser Ser Leu Glu 435 440 445 Val Leu Lys Met Ala Gly Asn Ser Phe Gln Glu Asn Phe Leu Pro Asp 450 455 460 Ile Phe Thr Glu Leu Arg Asn Leu Thr Phe Leu Asp Leu Ser Gln Cys 465 470 475 480 Gln Leu Glu Gln Leu Ser Pro Thr Ala Phe Asn Ser Leu Ser Ser Leu 485 490 495 Gln Val Leu Asn Met Ala Ser Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly 500 505 510 Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn 515 520 525 Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu 530 535 540 Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser 545 550 555 560 Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 565 570 <210> 39 <211> 595 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT4V_9 <400> 39 Glu Pro Cys Val Glu Val Val Pro Asn Ile Thr Tyr Gln Cys Met Glu 1 5 10 15 Leu Asn Phe Tyr Lys Ile Pro Asp Asn Leu Pro Phe Ser Thr Lys Asn 20 25 30 Leu Asp Leu Ser Phe Asn Pro Leu Arg His Leu Gly Ser Tyr Ser Phe 35 40 45 Phe Ser Phe Pro Glu Leu Gln Val Leu Asp Leu Ser Arg Cys Glu Ile 50 55 60 Gln Thr Ile Glu Asp Gly Ala Tyr Gln Ser Leu Ser His Leu Ser Thr 65 70 75 80 Leu Ile Leu Thr Gly Asn Pro Ile Gln Ser Leu Ala Leu Gly Ala Phe 85 90 95 Ser Gly Leu Ser Ser Leu Gln Lys Leu Val Ala Val Glu Thr Asn Leu 100 105 110 Ala Ser Leu Glu Asn Phe Pro Ile Gly His Leu Lys Thr Leu Lys Glu 115 120 125 Leu Asn Val Ala His Asn Leu Ile Gln Ser Phe Lys Leu Pro Glu Tyr 130 135 140 Phe Ser Asn Leu Thr Asn Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Ser Asn Lys 145 150 155 160 Ile Gln Ser Ile Tyr Cys Thr Asp Leu Arg Val Leu His Gln Met Pro 165 170 175 Leu Leu Asn Leu Ser Leu Asp Leu Ser Leu Asn Pro Met Asn Phe Ile 180 185 190 Gln Pro Gly Ala Phe Lys Glu Ile Arg Leu His Lys Leu Thr Leu Arg 195 200 205 Asn Asn Phe Asp Ser Leu Asn Val Met Lys Thr Cys Ile Gln Gly Leu 210 215 220 Ala Gly Leu Glu Val His Arg Leu Val Leu Gly Glu Phe Arg Asn Glu 225 230 235 240 Gly Asn Leu Glu Lys Phe Asp Lys Ser Ala Leu Glu Gly Leu Cys Asn 245 250 255 Leu Thr Ile Glu Glu Phe Arg Leu Ala Tyr Leu Asp Tyr Tyr Leu Asp 260 265 270 Asp Ile Ile Asp Leu Phe Asn Cys Leu Thr Asn Val Ser Ser Phe Ser 275 280 285 Leu Val Ser Val Thr Ile Glu Arg Val Lys Asp Phe Ser Tyr Asn Phe 290 295 300 Gly Trp Gln His Leu Glu Leu Val Asn Cys Lys Phe Gly Gln Phe Pro 305 310 315 320 Thr Leu Lys Leu Lys Ser Leu Lys Arg Leu Thr Phe Thr Ser Asn Lys 325 330 335 Gly Gly Asn Ala Phe Ser Glu Val Asp Leu Pro Ser Leu Glu Phe Leu 340 345 350 Asp Leu Ser Arg Asn Gly Leu Ser Phe Lys Gly Cys Cys Ser Gln Ser 355 360 365 Asp Phe Gly Thr Thr Ser Leu Lys Tyr Leu Asp Leu Ser Phe Asn Gly 370 375 380 Val Ile Thr Met Ser Ser Asn Phe Leu Gly Leu Glu Gln Leu Glu His 385 390 395 400 Leu Asp Phe Gln His Ser Asn Leu Lys Gln Met Ser Glu Phe Ser Val 405 410 415 Phe Leu Ser Leu Arg Asn Leu Ile Tyr Leu Asp Ile Ser His Thr His 420 425 430 Thr Arg Val Ala Phe Asn Gly Ile Phe Asn Gly Leu Ser Ser Leu Glu 435 440 445 Val Leu Lys Met Ala Gly Asn Ser Phe Gln Glu Asn Phe Leu Pro Asp 450 455 460 Ile Phe Thr Glu Leu Arg Asn Leu Thr Phe Leu Asp Leu Ser Gln Cys 465 470 475 480 Gln Leu Glu Gln Leu Ser Pro Thr Ala Phe Asn Ser Leu Ser Ser Leu 485 490 495 Gln Val Leu Asn Met Ser His Asn Asn Phe Phe Ser Leu Asp Thr Phe 500 505 510 Pro Tyr Lys Cys Leu Asn Ser Leu Lys Glu Leu Ala Leu Asp Thr Asn 515 520 525 Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu 530 535 540 Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg 545 550 555 560 Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln 565 570 575 Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile 580 585 590 Cys Pro Thr 595 <210> 40 <211> 235 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hVT4_1 <400> 40 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Glu Val Leu 65 70 75 80 Lys Met Ala Gly Asn Ser Phe Gln Glu Asn Phe Leu Pro Asp Ile Phe 85 90 95 Thr Glu Leu Arg Asn Leu Thr Phe Leu Asp Leu Ser Gln Cys Gln Leu 100 105 110 Glu Gln Leu Ser Pro Thr Ala Phe Asn Ser Leu Ser Ser Leu Gln Val 115 120 125 Leu Asn Met Ser His Asn Asn Phe Phe Ser Leu Asp Thr Phe Pro Tyr 130 135 140 Lys Cys Leu Asn Ser Leu Gln Val Leu Asp Tyr Ser Leu Asn His Ile 145 150 155 160 Met Thr Ser Lys Lys Gln Glu Leu Gln His Phe Pro Ser Ser Leu Ala 165 170 175 Phe Leu Asn Leu Thr Gln Asn Asp Phe Ala Cys Thr Cys Glu His Gln 180 185 190 Ser Phe Leu Gln Trp Ile Lys Asp Gln Arg Gln Leu Leu Val Glu Val 195 200 205 Glu Arg Met Glu Cys Ala Thr Pro Ser Asp Lys Gln Gly Met Pro Val 210 215 220 Leu Ser Leu Asn Ile Thr Cys Gln Met Asn Lys 225 230 235 <210> 41 <211> 334 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hVT4_3 <400> 41 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Thr Lys Leu 65 70 75 80 Ser Leu Ser Ser Ser Asn Gly Leu Ser Phe Lys Gly Cys Cys Ser Gln 85 90 95 Ser Asp Phe Gly Thr Thr Ser Leu Lys Tyr Leu Asp Leu Ser Phe Asn 100 105 110 Gly Val Ile Thr Met Ser Ser Asn Phe Leu Gly Leu Glu Gln Leu Glu 115 120 125 His Leu Asp Phe Gln His Ser Asn Leu Lys Gln Met Ser Glu Phe Ser 130 135 140 Val Phe Leu Ser Leu Arg Asn Leu Ile Tyr Leu Asp Ile Ser His Thr 145 150 155 160 His Thr Arg Val Ala Phe Asn Gly Ile Phe Asn Gly Leu Ser Ser Leu 165 170 175 Glu Val Leu Lys Met Ala Gly Asn Ser Phe Gln Glu Asn Phe Leu Pro 180 185 190 Asp Ile Phe Thr Glu Leu Arg Asn Leu Thr Phe Leu Asp Leu Ser Gln 195 200 205 Cys Gln Leu Glu Gln Leu Ser Pro Thr Ala Phe Asn Ser Leu Ser Ser 210 215 220 Leu Gln Val Leu Asn Met Ser His Asn Asn Phe Phe Ser Leu Asp Thr 225 230 235 240 Phe Pro Tyr Lys Cys Leu Asn Ser Leu Gln Val Leu Asp Tyr Ser Leu 245 250 255 Asn His Ile Met Thr Ser Lys Lys Gln Glu Leu Gln His Phe Pro Ser 260 265 270 Ser Leu Ala Phe Leu Asn Leu Thr Gln Asn Asp Phe Ala Cys Thr Cys 275 280 285 Glu His Gln Ser Phe Leu Gln Trp Ile Lys Asp Gln Arg Gln Leu Leu 290 295 300 Val Glu Val Glu Arg Met Glu Cys Ala Thr Pro Ser Asp Lys Gln Gly 305 310 315 320 Met Pro Val Leu Ser Leu Asn Ile Thr Cys Gln Met Asn Lys 325 330 <210> 42 <211> 784 <212> PRT <213> mouse TLR2 <400> 42 Met Leu Arg Ala Leu Trp Leu Phe Trp Ile Leu Val Ala Ile Thr Val 1 5 10 15 Leu Phe Ser Lys Arg Cys Ser Ala Gln Glu Ser Leu Ser Cys Asp Ala 20 25 30 Ser Gly Val Cys Asp Gly Arg Ser Arg Ser Phe Thr Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Ala Ala Met Lys Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asn Lys Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Gly His Gly Asp Leu Arg Ala Cys Ala Asn Leu Gln Val 65 70 75 80 Leu Ile Leu Lys Ser Ser Arg Ile Asn Thr Ile Glu Gly Asp Ala Phe 85 90 95 Tyr Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Asp Asn His Leu 100 105 110 Ser Ser Leu Ser Ser Ser Trp Phe Gly Pro Leu Ser Ser Leu Lys Tyr 115 120 125 Leu Asn Leu Met Gly Asn Pro Tyr Gln Thr Leu Gly Val Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Pro Asn Leu Thr Asn Leu Gln Thr Leu Arg Ile Gly Asn Val Glu 145 150 155 160 Thr Phe Ser Glu Ile Arg Arg Ile Asp Phe Ala Gly Leu Thr Ser Leu 165 170 175 Asn Glu Leu Glu Ile Lys Ala Leu Ser Leu Arg Asn Tyr Gln Ser Gln 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Arg Asp Ile His His Leu Thr Leu His Leu Ser 195 200 205 Glu Ser Ala Phe Leu Leu Glu Ile Phe Ala Asp Ile Leu Ser Ser Val 210 215 220 Arg Tyr Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asn Leu Ala Arg Phe Gln Phe Ser 225 230 235 240 Pro Leu Pro Val Asp Glu Val Ser Ser Pro Met Lys Lys Leu Ala Phe 245 250 255 Arg Gly Ser Val Leu Thr Asp Glu Ser Phe Asn Glu Leu Leu Lys Leu 260 265 270 Leu Arg Tyr Ile Leu Glu Leu Ser Glu Val Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Leu Gly Asp Phe Asn Pro Ser Glu Ser Asp Val Val Ser 290 295 300 Glu Leu Gly Lys Val Glu Thr Val Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Gln Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Val Tyr Ser Leu Leu Glu 325 330 335 Lys Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Ser Phe Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Phe Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Lys Gly 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Val Leu Ser Gln Asn His Leu Arg 385 390 395 400 Ser Met Gln Lys Thr Gly Glu Ile Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Ser Leu Asp Ile Ser Arg Asn Thr Phe His Pro Met Pro Asp Ser Cys 420 425 430 Gln Trp Pro Glu Lys Met Arg Phe Leu Asn Leu Ser Ser Thr Gly Ile 435 440 445 Arg Val Val Lys Thr Cys Ile Pro Gln Thr Leu Glu Val Leu Asp Val 450 455 460 Ser Asn Asn Asn Leu Asp Ser Phe Ser Leu Phe Leu Pro Arg Leu Gln 465 470 475 480 Glu Leu Tyr Ile Ser Arg Asn Lys Leu Lys Thr Leu Pro Asp Ala Ser 485 490 495 Leu Phe Pro Val Leu Leu Val Met Lys Ile Arg Glu Asn Ala Val Ser 500 505 510 Thr Phe Ser Lys Asp Gln Leu Gly Ser Phe Pro Lys Leu Glu Thr Leu 515 520 525 Glu Ala Gly Asp Asn His Phe Val Cys Ser Cys Glu Leu Leu Ser Phe 530 535 540 Thr Met Glu Thr Pro Ala Leu Ala Gln Ile Leu Val Asp Trp Pro Asp 545 550 555 560 Ser Tyr Leu Cys Asp Ser Pro Pro Arg Leu His Gly His Arg Leu Gln 565 570 575 Asp Ala Arg Pro Ser Val Leu Glu Cys His Gln Ala Ala Leu Val Ser 580 585 590 Gly Val Cys Cys Ala Leu Leu Leu Leu Ile Leu Leu Val Gly Ala Leu 595 600 605 Cys His His Phe His Gly Leu Trp Tyr Leu Arg Met Met Trp Ala Trp 610 615 620 Leu Gln Ala Lys Arg Lys Pro Lys Lys Ala Pro Cys Arg Asp Val Cys 625 630 635 640 Tyr Asp Ala Phe Val Ser Tyr Ser Glu Gln Asp Ser His Trp Val Glu 645 650 655 Asn Leu Met Val Gln Gln Leu Glu Asn Ser Asp Pro Pro Phe Lys Leu 660 665 670 Cys Leu His Lys Arg Asp Phe Val Pro Gly Lys Trp Ile Ile Asp Asn 675 680 685 Ile Ile Asp Ser Ile Glu Lys Ser His Lys Thr Val Phe Val Leu Ser 690 695 700 Glu Asn Phe Val Arg Ser Glu Trp Cys Lys Tyr Glu Leu Asp Phe Ser 705 710 715 720 His Phe Arg Leu Phe Asp Glu Asn Asn Asp Ala Ala Ile Leu Val Leu 725 730 735 Leu Glu Pro Ile Glu Arg Lys Ala Ile Pro Gln Arg Phe Cys Lys Leu 740 745 750 Arg Lys Ile Met Asn Thr Lys Thr Tyr Leu Glu Trp Pro Leu Asp Glu 755 760 765 Gly Gln Gln Glu Val Phe Trp Val Asn Leu Arg Thr Ala Ile Lys Ser 770 775 780 <210> 43 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for mTLR2 <400> 43 actactctag aatgctacga gctctttggc t 31 <210> 44 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for mTLR2 <400> 44 actacgctag ccaaaactaa ggtttgtaga g 31 <210> 45 <211> 42 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for VLR <400> 45 actacgcggc cgctcaagta gggcagatga tacttcggac gg 42 <210> 46 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for mTLR2 <400> 46 actacgctag cgatgtcaag ggaggtcagg t 31 <210> 47 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for mTLR2 <400> 47 actacgctag caacatccaa cacctccagc g 31 <210> 48 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for mTLR2 <400> 48 actacgctag caatatagag ctcttgcagc cg 32 <210> 49 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for mTLR2 <400> 49 actacgctag cgattttcat gaccagcaac a 31 <210> 50 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 50 actactctag aagcagaatc aatacaatag a 31 <210> 51 <211> 34 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for VLR <400> 51 atccagcggc cgctctggtg acattccaag acgg 34 <210> 52 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 52 actactctag aagcgagtct gctttcctgc t 31 <210> 53 <211> 464 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mT2V_1 <400> 53 Met Leu Arg Ala Leu Trp Leu Phe Trp Ile Leu Val Ala Ile Thr Val 1 5 10 15 Leu Phe Ser Lys Arg Cys Ser Ala Gln Glu Ser Leu Ser Cys Asp Ala 20 25 30 Ser Gly Val Cys Asp Gly Arg Ser Arg Ser Phe Thr Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Ala Ala Met Lys Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asn Lys Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Gly His Gly Asp Leu Arg Ala Cys Ala Asn Leu Gln Val 65 70 75 80 Leu Ile Leu Lys Ser Ser Arg Ile Asn Thr Ile Glu Gly Asp Ala Phe 85 90 95 Tyr Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Asp Asn His Leu 100 105 110 Ser Ser Leu Ser Ser Ser Trp Phe Gly Pro Leu Ser Ser Leu Lys Tyr 115 120 125 Leu Asn Leu Met Gly Asn Pro Tyr Gln Thr Leu Gly Val Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Pro Asn Leu Thr Asn Leu Gln Thr Leu Arg Ile Gly Asn Val Glu 145 150 155 160 Thr Phe Ser Glu Ile Arg Arg Ile Asp Phe Ala Gly Leu Thr Ser Leu 165 170 175 Asn Glu Leu Glu Ile Lys Ala Leu Ser Leu Arg Asn Tyr Gln Ser Gln 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Arg Asp Ile His His Leu Thr Leu His Leu Ser 195 200 205 Glu Ser Ala Phe Leu Leu Glu Ile Phe Ala Asp Ile Leu Ser Ser Val 210 215 220 Arg Tyr Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asn Leu Ala Arg Phe Gln Phe Ser 225 230 235 240 Pro Leu Pro Val Asp Glu Val Ser Ser Pro Met Lys Lys Leu Ala Phe 245 250 255 Arg Gly Ser Val Leu Thr Asp Glu Ser Phe Asn Glu Leu Leu Lys Leu 260 265 270 Leu Arg Tyr Ile Leu Glu Leu Ser Glu Val Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Leu Gly Asp Phe Asn Pro Ser Glu Ser Asp Val Val Ser 290 295 300 Glu Leu Gly Lys Val Glu Thr Val Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Gln Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Val Tyr Ser Leu Leu Glu 325 330 335 Lys Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Ser Phe Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Phe Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Lys Gly 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Val Leu Ala Ser Asn Gln Leu Lys 385 390 395 400 Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile 405 410 415 Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr 420 425 430 Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala 435 440 445 Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 450 455 460 <210> 54 <211> 490 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mT2V_2 <400> 54 Met Leu Arg Ala Leu Trp Leu Phe Trp Ile Leu Val Ala Ile Thr Val 1 5 10 15 Leu Phe Ser Lys Arg Cys Ser Ala Gln Glu Ser Leu Ser Cys Asp Ala 20 25 30 Ser Gly Val Cys Asp Gly Arg Ser Arg Ser Phe Thr Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Ala Ala Met Lys Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asn Lys Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Gly His Gly Asp Leu Arg Ala Cys Ala Asn Leu Gln Val 65 70 75 80 Leu Ile Leu Lys Ser Ser Arg Ile Asn Thr Ile Glu Gly Asp Ala Phe 85 90 95 Tyr Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Asp Asn His Leu 100 105 110 Ser Ser Leu Ser Ser Ser Trp Phe Gly Pro Leu Ser Ser Leu Lys Tyr 115 120 125 Leu Asn Leu Met Gly Asn Pro Tyr Gln Thr Leu Gly Val Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Pro Asn Leu Thr Asn Leu Gln Thr Leu Arg Ile Gly Asn Val Glu 145 150 155 160 Thr Phe Ser Glu Ile Arg Arg Ile Asp Phe Ala Gly Leu Thr Ser Leu 165 170 175 Asn Glu Leu Glu Ile Lys Ala Leu Ser Leu Arg Asn Tyr Gln Ser Gln 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Arg Asp Ile His His Leu Thr Leu His Leu Ser 195 200 205 Glu Ser Ala Phe Leu Leu Glu Ile Phe Ala Asp Ile Leu Ser Ser Val 210 215 220 Arg Tyr Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asn Leu Ala Arg Phe Gln Phe Ser 225 230 235 240 Pro Leu Pro Val Asp Glu Val Ser Ser Pro Met Lys Lys Leu Ala Phe 245 250 255 Arg Gly Ser Val Leu Thr Asp Glu Ser Phe Asn Glu Leu Leu Lys Leu 260 265 270 Leu Arg Tyr Ile Leu Glu Leu Ser Glu Val Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Leu Gly Asp Phe Asn Pro Ser Glu Ser Asp Val Val Ser 290 295 300 Glu Leu Gly Lys Val Glu Thr Val Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Gln Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Val Tyr Ser Leu Leu Glu 325 330 335 Lys Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Ser Phe Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Phe Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Lys Gly 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Val Leu Ser Gln Asn His Leu Arg 385 390 395 400 Ser Met Gln Lys Thr Gly Glu Ile Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Ser Leu Asp Ile Ala Ser Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile 420 425 430 Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro 435 440 445 Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn 450 455 460 Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly 465 470 475 480 Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 485 490 <210> 55 <211> 534 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mT2V_4 <400> 55 Met Leu Arg Ala Leu Trp Leu Phe Trp Ile Leu Val Ala Ile Thr Val 1 5 10 15 Leu Phe Ser Lys Arg Cys Ser Ala Gln Glu Ser Leu Ser Cys Asp Ala 20 25 30 Ser Gly Val Cys Asp Gly Arg Ser Arg Ser Phe Thr Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Ala Ala Met Lys Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asn Lys Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Gly His Gly Asp Leu Arg Ala Cys Ala Asn Leu Gln Val 65 70 75 80 Leu Ile Leu Lys Ser Ser Arg Ile Asn Thr Ile Glu Gly Asp Ala Phe 85 90 95 Tyr Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Asp Asn His Leu 100 105 110 Ser Ser Leu Ser Ser Ser Trp Phe Gly Pro Leu Ser Ser Leu Lys Tyr 115 120 125 Leu Asn Leu Met Gly Asn Pro Tyr Gln Thr Leu Gly Val Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Pro Asn Leu Thr Asn Leu Gln Thr Leu Arg Ile Gly Asn Val Glu 145 150 155 160 Thr Phe Ser Glu Ile Arg Arg Ile Asp Phe Ala Gly Leu Thr Ser Leu 165 170 175 Asn Glu Leu Glu Ile Lys Ala Leu Ser Leu Arg Asn Tyr Gln Ser Gln 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Arg Asp Ile His His Leu Thr Leu His Leu Ser 195 200 205 Glu Ser Ala Phe Leu Leu Glu Ile Phe Ala Asp Ile Leu Ser Ser Val 210 215 220 Arg Tyr Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asn Leu Ala Arg Phe Gln Phe Ser 225 230 235 240 Pro Leu Pro Val Asp Glu Val Ser Ser Pro Met Lys Lys Leu Ala Phe 245 250 255 Arg Gly Ser Val Leu Thr Asp Glu Ser Phe Asn Glu Leu Leu Lys Leu 260 265 270 Leu Arg Tyr Ile Leu Glu Leu Ser Glu Val Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Leu Gly Asp Phe Asn Pro Ser Glu Ser Asp Val Val Ser 290 295 300 Glu Leu Gly Lys Val Glu Thr Val Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Gln Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Val Tyr Ser Leu Leu Glu 325 330 335 Lys Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Ser Phe Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Phe Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Lys Gly 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Val Leu Ser Gln Asn His Leu Arg 385 390 395 400 Ser Met Gln Lys Thr Gly Glu Ile Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Ser Leu Asp Ile Ser Arg Asn Thr Phe His Pro Met Pro Asp Ser Cys 420 425 430 Gln Trp Pro Glu Lys Met Arg Phe Leu Asn Leu Ser Ser Thr Gly Ile 435 440 445 Arg Val Val Lys Thr Cys Ile Pro Gln Thr Leu Glu Val Leu Asp Val 450 455 460 Ala Ser Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu 465 470 475 480 Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser 485 490 495 Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln 500 505 510 Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg 515 520 525 Ser Ile Ile Cys Pro Thr 530 <210> 56 <211> 554 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mT2V_5 <400> 56 Met Leu Arg Ala Leu Trp Leu Phe Trp Ile Leu Val Ala Ile Thr Val 1 5 10 15 Leu Phe Ser Lys Arg Cys Ser Ala Gln Glu Ser Leu Ser Cys Asp Ala 20 25 30 Ser Gly Val Cys Asp Gly Arg Ser Arg Ser Phe Thr Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Ala Ala Met Lys Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asn Lys Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Gly His Gly Asp Leu Arg Ala Cys Ala Asn Leu Gln Val 65 70 75 80 Leu Ile Leu Lys Ser Ser Arg Ile Asn Thr Ile Glu Gly Asp Ala Phe 85 90 95 Tyr Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Asp Asn His Leu 100 105 110 Ser Ser Leu Ser Ser Ser Trp Phe Gly Pro Leu Ser Ser Leu Lys Tyr 115 120 125 Leu Asn Leu Met Gly Asn Pro Tyr Gln Thr Leu Gly Val Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Pro Asn Leu Thr Asn Leu Gln Thr Leu Arg Ile Gly Asn Val Glu 145 150 155 160 Thr Phe Ser Glu Ile Arg Arg Ile Asp Phe Ala Gly Leu Thr Ser Leu 165 170 175 Asn Glu Leu Glu Ile Lys Ala Leu Ser Leu Arg Asn Tyr Gln Ser Gln 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Arg Asp Ile His His Leu Thr Leu His Leu Ser 195 200 205 Glu Ser Ala Phe Leu Leu Glu Ile Phe Ala Asp Ile Leu Ser Ser Val 210 215 220 Arg Tyr Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asn Leu Ala Arg Phe Gln Phe Ser 225 230 235 240 Pro Leu Pro Val Asp Glu Val Ser Ser Pro Met Lys Lys Leu Ala Phe 245 250 255 Arg Gly Ser Val Leu Thr Asp Glu Ser Phe Asn Glu Leu Leu Lys Leu 260 265 270 Leu Arg Tyr Ile Leu Glu Leu Ser Glu Val Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Leu Gly Asp Phe Asn Pro Ser Glu Ser Asp Val Val Ser 290 295 300 Glu Leu Gly Lys Val Glu Thr Val Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Gln Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Val Tyr Ser Leu Leu Glu 325 330 335 Lys Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Ser Phe Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Phe Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Lys Gly 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Val Leu Ser Gln Asn His Leu Arg 385 390 395 400 Ser Met Gln Lys Thr Gly Glu Ile Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Ser Leu Asp Ile Ser Arg Asn Thr Phe His Pro Met Pro Asp Ser Cys 420 425 430 Gln Trp Pro Glu Lys Met Arg Phe Leu Asn Leu Ser Ser Thr Gly Ile 435 440 445 Arg Val Val Lys Thr Cys Ile Pro Gln Thr Leu Glu Val Leu Asp Val 450 455 460 Ser Asn Asn Asn Leu Asp Ser Phe Ser Leu Phe Leu Pro Arg Leu Gln 465 470 475 480 Glu Leu Tyr Ile Ala Ser Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile 485 490 495 Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro 500 505 510 Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn 515 520 525 Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly 530 535 540 Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 545 550 <210> 57 <211> 576 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mT2V_6 <400> 57 Met Leu Arg Ala Leu Trp Leu Phe Trp Ile Leu Val Ala Ile Thr Val 1 5 10 15 Leu Phe Ser Lys Arg Cys Ser Ala Gln Glu Ser Leu Ser Cys Asp Ala 20 25 30 Ser Gly Val Cys Asp Gly Arg Ser Arg Ser Phe Thr Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Ala Ala Met Lys Ser Leu Asp Leu Ser Phe Asn Lys Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Gly His Gly Asp Leu Arg Ala Cys Ala Asn Leu Gln Val 65 70 75 80 Leu Ile Leu Lys Ser Ser Arg Ile Asn Thr Ile Glu Gly Asp Ala Phe 85 90 95 Tyr Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Asp Asn His Leu 100 105 110 Ser Ser Leu Ser Ser Ser Trp Phe Gly Pro Leu Ser Ser Leu Lys Tyr 115 120 125 Leu Asn Leu Met Gly Asn Pro Tyr Gln Thr Leu Gly Val Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Pro Asn Leu Thr Asn Leu Gln Thr Leu Arg Ile Gly Asn Val Glu 145 150 155 160 Thr Phe Ser Glu Ile Arg Arg Ile Asp Phe Ala Gly Leu Thr Ser Leu 165 170 175 Asn Glu Leu Glu Ile Lys Ala Leu Ser Leu Arg Asn Tyr Gln Ser Gln 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Arg Asp Ile His His Leu Thr Leu His Leu Ser 195 200 205 Glu Ser Ala Phe Leu Leu Glu Ile Phe Ala Asp Ile Leu Ser Ser Val 210 215 220 Arg Tyr Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asn Leu Ala Arg Phe Gln Phe Ser 225 230 235 240 Pro Leu Pro Val Asp Glu Val Ser Ser Pro Met Lys Lys Leu Ala Phe 245 250 255 Arg Gly Ser Val Leu Thr Asp Glu Ser Phe Asn Glu Leu Leu Lys Leu 260 265 270 Leu Arg Tyr Ile Leu Glu Leu Ser Glu Val Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Leu Gly Asp Phe Asn Pro Ser Glu Ser Asp Val Val Ser 290 295 300 Glu Leu Gly Lys Val Glu Thr Val Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Gln Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Val Tyr Ser Leu Leu Glu 325 330 335 Lys Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Ser Phe Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Phe Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Lys Gly 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Val Leu Ser Gln Asn His Leu Arg 385 390 395 400 Ser Met Gln Lys Thr Gly Glu Ile Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Ser Leu Asp Ile Ser Arg Asn Thr Phe His Pro Met Pro Asp Ser Cys 420 425 430 Gln Trp Pro Glu Lys Met Arg Phe Leu Asn Leu Ser Ser Thr Gly Ile 435 440 445 Arg Val Val Lys Thr Cys Ile Pro Gln Thr Leu Glu Val Leu Asp Val 450 455 460 Ser Asn Asn Asn Leu Asp Ser Phe Ser Leu Phe Leu Pro Arg Leu Gln 465 470 475 480 Glu Leu Tyr Ile Ser Arg Asn Lys Leu Lys Thr Leu Pro Asp Ala Ser 485 490 495 Leu Phe Pro Val Leu Leu Val Met Lys Ile Ala Ser Asn Gln Leu Lys 500 505 510 Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile 515 520 525 Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr 530 535 540 Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala 545 550 555 560 Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 565 570 575 <210> 58 <211> 586 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mVT2_2 <400> 58 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Thr Lys Leu 65 70 75 80 Ser Leu Ser Arg Ser Arg Ile Asn Thr Ile Glu Gly Asp Ala Phe Tyr 85 90 95 Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Asp Asn His Leu Ser 100 105 110 Ser Leu Ser Ser Ser Trp Phe Gly Pro Leu Ser Ser Leu Lys Tyr Leu 115 120 125 Asn Leu Met Gly Asn Pro Tyr Gln Thr Leu Gly Val Thr Ser Leu Phe 130 135 140 Pro Asn Leu Thr Asn Leu Gln Thr Leu Arg Ile Gly Asn Val Glu Thr 145 150 155 160 Phe Ser Glu Ile Arg Arg Ile Asp Phe Ala Gly Leu Thr Ser Leu Asn 165 170 175 Glu Leu Glu Ile Lys Ala Leu Ser Leu Arg Asn Tyr Gln Ser Gln Ser 180 185 190 Leu Lys Ser Ile Arg Asp Ile His His Leu Thr Leu His Leu Ser Glu 195 200 205 Ser Ala Phe Leu Leu Glu Ile Phe Ala Asp Ile Leu Ser Ser Val Arg 210 215 220 Tyr Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asn Leu Ala Arg Phe Gln Phe Ser Pro 225 230 235 240 Leu Pro Val Asp Glu Val Ser Ser Pro Met Lys Lys Leu Ala Phe Arg 245 250 255 Gly Ser Val Leu Thr Asp Glu Ser Phe Asn Glu Leu Leu Lys Leu Leu 260 265 270 Arg Tyr Ile Leu Glu Leu Ser Glu Val Glu Phe Asp Asp Cys Thr Leu 275 280 285 Asn Gly Leu Gly Asp Phe Asn Pro Ser Glu Ser Asp Val Val Ser Glu 290 295 300 Leu Gly Lys Val Glu Thr Val Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro Gln 305 310 315 320 Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Val Tyr Ser Leu Leu Glu Lys 325 330 335 Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro Cys 340 345 350 Ser Phe Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Phe Leu Asp Leu Ser Glu 355 360 365 Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Lys Gly Ala 370 375 380 Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Val Leu Ser Gln Asn His Leu Arg Ser 385 390 395 400 Met Gln Lys Thr Gly Glu Ile Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr Ser 405 410 415 Leu Asp Ile Ser Arg Asn Thr Phe His Pro Met Pro Asp Ser Cys Gln 420 425 430 Trp Pro Glu Lys Met Arg Phe Leu Asn Leu Ser Ser Thr Gly Ile Arg 435 440 445 Val Val Lys Thr Cys Ile Pro Gln Thr Leu Glu Val Leu Asp Val Ser 450 455 460 Asn Asn Asn Leu Asp Ser Phe Ser Leu Phe Leu Pro Arg Leu Gln Glu 465 470 475 480 Leu Tyr Ile Ser Arg Asn Lys Leu Lys Thr Leu Pro Asp Ala Ser Leu 485 490 495 Phe Pro Val Leu Leu Val Met Lys Ile Arg Glu Asn Ala Val Ser Thr 500 505 510 Phe Ser Lys Asp Gln Leu Gly Ser Phe Pro Lys Leu Glu Thr Leu Glu 515 520 525 Ala Gly Asp Asn His Phe Val Cys Ser Cys Glu Leu Leu Ser Phe Thr 530 535 540 Met Glu Thr Pro Ala Leu Ala Gln Ile Leu Val Asp Trp Pro Asp Ser 545 550 555 560 Tyr Leu Cys Asp Ser Pro Pro Arg Leu His Gly His Arg Leu Gln Asp 565 570 575 Ala Arg Pro Ser Val Leu Glu Cys His Gln 580 585 <210> 59 <211> 464 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mVT2_6 <400> 59 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Thr Lys Leu 65 70 75 80 Ser Leu Ser Arg Ser Glu Ser Ala Phe Leu Leu Glu Ile Phe Ala Asp 85 90 95 Ile Leu Ser Ser Val Arg Tyr Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asn Leu Ala 100 105 110 Arg Phe Gln Phe Ser Pro Leu Pro Val Asp Glu Val Ser Ser Pro Met 115 120 125 Lys Lys Leu Ala Phe Arg Gly Ser Val Leu Thr Asp Glu Ser Phe Asn 130 135 140 Glu Leu Leu Lys Leu Leu Arg Tyr Ile Leu Glu Leu Ser Glu Val Glu 145 150 155 160 Phe Asp Asp Cys Thr Leu Asn Gly Leu Gly Asp Phe Asn Pro Ser Glu 165 170 175 Ser Asp Val Val Ser Glu Leu Gly Lys Val Glu Thr Val Thr Ile Arg 180 185 190 Arg Leu His Ile Pro Gln Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Val 195 200 205 Tyr Ser Leu Leu Glu Lys Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys 210 215 220 Val Phe Leu Val Pro Cys Ser Phe Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu 225 230 235 240 Phe Leu Asp Leu Ser Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn 245 250 255 Ser Ala Cys Lys Gly Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Val Leu Ser 260 265 270 Gln Asn His Leu Arg Ser Met Gln Lys Thr Gly Glu Ile Leu Leu Thr 275 280 285 Leu Lys Asn Leu Thr Ser Leu Asp Ile Ser Arg Asn Thr Phe His Pro 290 295 300 Met Pro Asp Ser Cys Gln Trp Pro Glu Lys Met Arg Phe Leu Asn Leu 305 310 315 320 Ser Ser Thr Gly Ile Arg Val Val Lys Thr Cys Ile Pro Gln Thr Leu 325 330 335 Glu Val Leu Asp Val Ser Asn Asn Asn Leu Asp Ser Phe Ser Leu Phe 340 345 350 Leu Pro Arg Leu Gln Glu Leu Tyr Ile Ser Arg Asn Lys Leu Lys Thr 355 360 365 Leu Pro Asp Ala Ser Leu Phe Pro Val Leu Leu Val Met Lys Ile Arg 370 375 380 Glu Asn Ala Val Ser Thr Phe Ser Lys Asp Gln Leu Gly Ser Phe Pro 385 390 395 400 Lys Leu Glu Thr Leu Glu Ala Gly Asp Asn His Phe Val Cys Ser Cys 405 410 415 Glu Leu Leu Ser Phe Thr Met Glu Thr Pro Ala Leu Ala Gln Ile Leu 420 425 430 Val Asp Trp Pro Asp Ser Tyr Leu Cys Asp Ser Pro Pro Arg Leu His 435 440 445 Gly His Arg Leu Gln Asp Ala Arg Pro Ser Val Leu Glu Cys His Gln 450 455 460 <210> 60 <211> 784 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> human TLR2 <400> 60 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser 225 230 235 240 Glu Leu Ser Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe 245 250 255 Arg Asn Val Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu 260 265 270 Leu Asn Gln Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile 290 295 300 Asp Pro Gly Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Arg Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Leu Tyr Ser Leu Thr Glu 325 330 335 Arg Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Leu Leu Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Glu Asp 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Ile Leu Arg Gln Asn His Leu Ala 385 390 395 400 Ser Leu Glu Lys Thr Gly Glu Thr Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Asn Ile Asp Ile Ser Lys Asn Ser Phe His Ser Met Pro Glu Thr Cys 420 425 430 Gln Trp Pro Glu Lys Met Lys Tyr Leu Asn Leu Ser Ser Thr Arg Ile 435 440 445 His Ser Val Thr Gly Cys Ile Pro Lys Thr Leu Glu Ile Leu Asp Val 450 455 460 Ser Asn Asn Asn Leu Asn Leu Phe Ser Leu Asn Leu Pro Gln Leu Lys 465 470 475 480 Glu Leu Tyr Ile Ser Arg Asn Lys Leu Met Thr Leu Pro Asp Ala Ser 485 490 495 Leu Leu Pro Met Leu Leu Val Leu Lys Ile Ser Arg Asn Ala Ile Thr 500 505 510 Thr Phe Ser Lys Glu Gln Leu Asp Ser Phe His Thr Leu Lys Thr Leu 515 520 525 Glu Ala Gly Gly Asn Asn Phe Ile Cys Ser Cys Glu Phe Leu Ser Phe 530 535 540 Thr Gln Glu Gln Gln Ala Leu Ala Lys Val Leu Ile Asp Trp Pro Ala 545 550 555 560 Asn Tyr Leu Cys Asp Ser Pro Ser His Val Arg Gly Gln Gln Val Gln 565 570 575 Asp Val Arg Leu Ser Val Ser Glu Cys His Arg Thr Ala Leu Val Ser 580 585 590 Gly Met Cys Cys Ala Leu Phe Leu Leu Ile Leu Leu Thr Gly Val Leu 595 600 605 Cys His Arg Phe His Gly Leu Trp Tyr Met Lys Met Met Trp Ala Trp 610 615 620 Leu Gln Ala Lys Arg Lys Pro Arg Lys Ala Pro Ser Arg Asn Ile Cys 625 630 635 640 Tyr Asp Ala Phe Val Ser Tyr Ser Glu Arg Asp Ala Tyr Trp Val Glu 645 650 655 Asn Leu Met Val Gln Glu Leu Glu Asn Phe Asn Pro Pro Phe Lys Leu 660 665 670 Cys Leu His Lys Arg Asp Phe Ile Pro Gly Lys Trp Ile Ile Asp Asn 675 680 685 Ile Ile Asp Ser Ile Glu Lys Ser His Lys Thr Val Phe Val Leu Ser 690 695 700 Glu Asn Phe Val Lys Ser Glu Trp Cys Lys Tyr Glu Leu Asp Phe Ser 705 710 715 720 His Phe Arg Leu Phe Asp Glu Asn Asn Asp Ala Ala Ile Leu Ile Leu 725 730 735 Leu Glu Pro Ile Glu Lys Lys Ala Ile Pro Gln Arg Phe Cys Lys Leu 740 745 750 Arg Lys Ile Met Asn Thr Lys Thr Tyr Leu Glu Trp Pro Met Asp Glu 755 760 765 Ala Gln Arg Glu Gly Phe Trp Val Asn Leu Arg Ala Ala Ile Lys Ser 770 775 780 <210> 61 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for hTLR2 <400> 61 actacgcgga tccatgccac atactttgtg gat 33 <210> 62 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR2 <400> 62 actactctag acagttccaa acattccacg g 31 <210> 63 <211> 42 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for VLR <400> 63 actacgcggc cgctcaagta gggcagatga tacttcggac gg 42 <210> 64 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR2 <400> 64 actactctag aaaactctaa ttctaacaat c 31 <210> 65 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR2 <400> 65 actactctag agattgttaa cgtttccact t 31 <210> 66 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR2 <400> 66 actactctag atactgtgat tcttttaact c 31 <210> 67 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR2 <400> 67 actactctag agatatcaat gttagtcaag t 31 <210> 68 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR2 <400> 68 gactactcta gataagttca aatatttcat ctt 33 <210> 69 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR2 <400> 69 actactctag aaacatctaa aatttccagt g 31 <210> 70 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR2 <400> 70 actactctag aaatataaag ttctttgagt t 31 <210> 71 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR2 <400> 71 actactctag agattttcaa tactagtaac atg 33 <210> 72 <211> 34 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for VLR <400> 72 atccagcggc cgcttgctgt cctgtgacat tccg 34 <210> 73 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 73 actactctag atcagatcta cagagctatg a 31 <210> 74 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 74 actactctag aactgatttg gacactttcc a 31 <210> 75 <211> 299 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT2V_1 <400> 75 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Ser Arg Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly 225 230 235 240 Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn 245 250 255 Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu 260 265 270 Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser 275 280 285 Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 290 295 <210> 76 <211> 354 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT2V_2 <400> 76 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser 225 230 235 240 Glu Leu Ser Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe 245 250 255 Arg Asn Val Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu 260 265 270 Leu Asn Gln Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Ser Arg Asn Gln 275 280 285 Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln 290 295 300 Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile 305 310 315 320 Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly 325 330 335 Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys 340 345 350 Pro Thr <210> 77 <211> 384 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT2V_3 <400> 77 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser 225 230 235 240 Glu Leu Ser Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe 245 250 255 Arg Asn Val Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu 260 265 270 Leu Asn Gln Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile 290 295 300 Asp Pro Gly Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Ser Arg Asn Gln Leu Lys 305 310 315 320 Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile 325 330 335 Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr 340 345 350 Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala 355 360 365 Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 370 375 380 <210> 78 <211> 413 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT2V_4 <400> 78 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser 225 230 235 240 Glu Leu Ser Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe 245 250 255 Arg Asn Val Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu 260 265 270 Leu Asn Gln Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile 290 295 300 Asp Pro Gly Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Arg Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Leu Tyr Ser Leu Thr Glu 325 330 335 Arg Val Lys Arg Ile Thr Val Ser Arg Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro 340 345 350 Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His 355 360 365 Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg 370 375 380 Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser 385 390 395 400 Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 405 410 <210> 79 <211> 490 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT2V_5 <400> 79 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser 225 230 235 240 Glu Leu Ser Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe 245 250 255 Arg Asn Val Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu 260 265 270 Leu Asn Gln Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile 290 295 300 Asp Pro Gly Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Arg Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Leu Tyr Ser Leu Thr Glu 325 330 335 Arg Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Leu Leu Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Glu Asp 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Ile Leu Arg Gln Asn His Leu Ala 385 390 395 400 Ser Leu Glu Lys Thr Gly Glu Thr Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Asn Ile Asp Ile Ser Arg Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile 420 425 430 Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro 435 440 445 Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn 450 455 460 Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly 465 470 475 480 Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 485 490 <210> 80 <211> 513 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT2V_6 <400> 80 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser 225 230 235 240 Glu Leu Ser Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe 245 250 255 Arg Asn Val Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu 260 265 270 Leu Asn Gln Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile 290 295 300 Asp Pro Gly Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Arg Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Leu Tyr Ser Leu Thr Glu 325 330 335 Arg Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Leu Leu Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Glu Asp 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Ile Leu Arg Gln Asn His Leu Ala 385 390 395 400 Ser Leu Glu Lys Thr Gly Glu Thr Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Asn Ile Asp Ile Ser Lys Asn Ser Phe His Ser Met Pro Glu Thr Cys 420 425 430 Gln Trp Pro Glu Lys Met Lys Tyr Leu Asn Leu Ser Arg Asn Gln Leu 435 440 445 Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys 450 455 460 Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp 465 470 475 480 Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser 485 490 495 Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro 500 505 510 Thr <210> 81 <211> 534 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT2V_7 <400> 81 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser 225 230 235 240 Glu Leu Ser Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe 245 250 255 Arg Asn Val Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu 260 265 270 Leu Asn Gln Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile 290 295 300 Asp Pro Gly Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Arg Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Leu Tyr Ser Leu Thr Glu 325 330 335 Arg Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Leu Leu Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Glu Asp 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Ile Leu Arg Gln Asn His Leu Ala 385 390 395 400 Ser Leu Glu Lys Thr Gly Glu Thr Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Asn Ile Asp Ile Ser Lys Asn Ser Phe His Ser Met Pro Glu Thr Cys 420 425 430 Gln Trp Pro Glu Lys Met Lys Tyr Leu Asn Leu Ser Ser Thr Arg Ile 435 440 445 His Ser Val Thr Gly Cys Ile Pro Lys Thr Leu Glu Ile Leu Asp Val 450 455 460 Ser Arg Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu 465 470 475 480 Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser 485 490 495 Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln 500 505 510 Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg 515 520 525 Ser Ile Ile Cys Pro Thr 530 <210> 82 <211> 554 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT2V_9 <400> 82 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser 225 230 235 240 Glu Leu Ser Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe 245 250 255 Arg Asn Val Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu 260 265 270 Leu Asn Gln Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile 290 295 300 Asp Pro Gly Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Arg Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Leu Tyr Ser Leu Thr Glu 325 330 335 Arg Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Leu Leu Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Glu Asp 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Ile Leu Arg Gln Asn His Leu Ala 385 390 395 400 Ser Leu Glu Lys Thr Gly Glu Thr Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Asn Ile Asp Ile Ser Lys Asn Ser Phe His Ser Met Pro Glu Thr Cys 420 425 430 Gln Trp Pro Glu Lys Met Lys Tyr Leu Asn Leu Ser Ser Thr Arg Ile 435 440 445 His Ser Val Thr Gly Cys Ile Pro Lys Thr Leu Glu Ile Leu Asp Val 450 455 460 Ser Asn Asn Asn Leu Asn Leu Phe Ser Leu Asn Leu Pro Gln Leu Lys 465 470 475 480 Glu Leu Tyr Ile Ser Arg Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile 485 490 495 Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro 500 505 510 Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn 515 520 525 Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly 530 535 540 Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 545 550 <210> 83 <211> 576 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT2V_9 <400> 83 Met Pro His Thr Leu Trp Met Val Trp Val Leu Gly Val Ile Ile Ser 1 5 10 15 Leu Ser Lys Glu Glu Ser Ser Asn Gln Ala Ser Leu Ser Cys Asp Arg 20 25 30 Asn Gly Ile Cys Lys Gly Ser Ser Gly Ser Leu Asn Ser Ile Pro Ser 35 40 45 Gly Leu Thr Glu Ala Val Lys Ser Leu Asp Leu Ser Asn Asn Arg Ile 50 55 60 Thr Tyr Ile Ser Asn Ser Asp Leu Gln Arg Cys Val Asn Leu Gln Ala 65 70 75 80 Leu Val Leu Thr Ser Asn Gly Ile Asn Thr Ile Glu Glu Asp Ser Phe 85 90 95 Ser Ser Leu Gly Ser Leu Glu His Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Tyr Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Ser Ser Ser Trp Phe Lys Pro Leu Ser Ser Leu Thr Phe 115 120 125 Leu Asn Leu Leu Gly Asn Pro Tyr Lys Thr Leu Gly Glu Thr Ser Leu 130 135 140 Phe Ser His Leu Thr Lys Leu Gln Ile Leu Arg Val Gly Asn Met Asp 145 150 155 160 Thr Phe Thr Lys Ile Gln Arg Lys Asp Phe Ala Gly Leu Thr Phe Leu 165 170 175 Glu Glu Leu Glu Ile Asp Ala Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys 180 185 190 Ser Leu Lys Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys 195 200 205 Gln His Ile Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val 210 215 220 Glu Cys Leu Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser 225 230 235 240 Glu Leu Ser Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe 245 250 255 Arg Asn Val Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu 260 265 270 Leu Asn Gln Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr 275 280 285 Leu Asn Gly Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile 290 295 300 Asp Pro Gly Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro 305 310 315 320 Arg Phe Tyr Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Leu Tyr Ser Leu Thr Glu 325 330 335 Arg Val Lys Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro 340 345 350 Cys Leu Leu Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser 355 360 365 Glu Asn Leu Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Glu Asp 370 375 380 Ala Trp Pro Ser Leu Gln Thr Leu Ile Leu Arg Gln Asn His Leu Ala 385 390 395 400 Ser Leu Glu Lys Thr Gly Glu Thr Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr 405 410 415 Asn Ile Asp Ile Ser Lys Asn Ser Phe His Ser Met Pro Glu Thr Cys 420 425 430 Gln Trp Pro Glu Lys Met Lys Tyr Leu Asn Leu Ser Ser Thr Arg Ile 435 440 445 His Ser Val Thr Gly Cys Ile Pro Lys Thr Leu Glu Ile Leu Asp Val 450 455 460 Ser Asn Asn Asn Leu Asn Leu Phe Ser Leu Asn Leu Pro Gln Leu Lys 465 470 475 480 Glu Leu Tyr Ile Ser Arg Asn Lys Leu Met Thr Leu Pro Asp Ala Ser 485 490 495 Leu Leu Pro Met Leu Leu Val Leu Lys Ile Ser Arg Asn Gln Leu Lys 500 505 510 Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile 515 520 525 Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr 530 535 540 Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala 545 550 555 560 Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 565 570 575 <210> 84 <211> 490 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hVT2_6 <400> 84 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Thr Lys Leu 65 70 75 80 Ser Leu Ser Arg Ser Asp Leu Gln Ser Tyr Glu Pro Lys Ser Leu Lys 85 90 95 Ser Ile Gln Asn Val Ser His Leu Ile Leu His Met Lys Gln His Ile 100 105 110 Leu Leu Leu Glu Ile Phe Val Asp Val Thr Ser Ser Val Glu Cys Leu 115 120 125 Glu Leu Arg Asp Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser Glu Leu Ser 130 135 140 Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe Arg Asn Val 145 150 155 160 Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu Leu Asn Gln 165 170 175 Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr Leu Asn Gly 180 185 190 Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile Asp Pro Gly 195 200 205 Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro Arg Phe Tyr 210 215 220 Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Leu Tyr Ser Leu Thr Glu Arg Val Lys 225 230 235 240 Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro Cys Leu Leu 245 250 255 Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser Glu Asn Leu 260 265 270 Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Glu Asp Ala Trp Pro 275 280 285 Ser Leu Gln Thr Leu Ile Leu Arg Gln Asn His Leu Ala Ser Leu Glu 290 295 300 Lys Thr Gly Glu Thr Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr Asn Ile Asp 305 310 315 320 Ile Ser Lys Asn Ser Phe His Ser Met Pro Glu Thr Cys Gln Trp Pro 325 330 335 Glu Lys Met Lys Tyr Leu Asn Leu Ser Ser Thr Arg Ile His Ser Val 340 345 350 Thr Gly Cys Ile Pro Lys Thr Leu Glu Ile Leu Asp Val Ser Asn Asn 355 360 365 Asn Leu Asn Leu Phe Ser Leu Asn Leu Pro Gln Leu Lys Glu Leu Tyr 370 375 380 Ile Ser Arg Asn Lys Leu Met Thr Leu Pro Asp Ala Ser Leu Leu Pro 385 390 395 400 Met Leu Leu Val Leu Lys Ile Ser Arg Asn Ala Ile Thr Thr Phe Ser 405 410 415 Lys Glu Gln Leu Asp Ser Phe His Thr Leu Lys Thr Leu Glu Ala Gly 420 425 430 Gly Asn Asn Phe Ile Cys Ser Cys Glu Phe Leu Ser Phe Thr Gln Glu 435 440 445 Gln Gln Ala Leu Ala Lys Val Leu Ile Asp Trp Pro Ala Asn Tyr Leu 450 455 460 Cys Asp Ser Pro Ser His Val Arg Gly Gln Gln Val Gln Asp Val Arg 465 470 475 480 Leu Ser Val Ser Glu Cys His Arg Thr Ala 485 490 <210> 85 <211> 442 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hVT2_7 <400> 85 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Thr Lys Leu 65 70 75 80 Ser Leu Ser Arg Thr Asp Leu Asp Thr Phe His Phe Ser Glu Leu Ser 85 90 95 Thr Gly Glu Thr Asn Ser Leu Ile Lys Lys Phe Thr Phe Arg Asn Val 100 105 110 Lys Ile Thr Asp Glu Ser Leu Phe Gln Val Met Lys Leu Leu Asn Gln 115 120 125 Ile Ser Gly Leu Leu Glu Leu Glu Phe Asp Asp Cys Thr Leu Asn Gly 130 135 140 Val Gly Asn Phe Arg Ala Ser Asp Asn Asp Arg Val Ile Asp Pro Gly 145 150 155 160 Lys Val Glu Thr Leu Thr Ile Arg Arg Leu His Ile Pro Arg Phe Tyr 165 170 175 Leu Phe Tyr Asp Leu Ser Thr Leu Tyr Ser Leu Thr Glu Arg Val Lys 180 185 190 Arg Ile Thr Val Glu Asn Ser Lys Val Phe Leu Val Pro Cys Leu Leu 195 200 205 Ser Gln His Leu Lys Ser Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser Glu Asn Leu 210 215 220 Met Val Glu Glu Tyr Leu Lys Asn Ser Ala Cys Glu Asp Ala Trp Pro 225 230 235 240 Ser Leu Gln Thr Leu Ile Leu Arg Gln Asn His Leu Ala Ser Leu Glu 245 250 255 Lys Thr Gly Glu Thr Leu Leu Thr Leu Lys Asn Leu Thr Asn Ile Asp 260 265 270 Ile Ser Lys Asn Ser Phe His Ser Met Pro Glu Thr Cys Gln Trp Pro 275 280 285 Glu Lys Met Lys Tyr Leu Asn Leu Ser Ser Thr Arg Ile His Ser Val 290 295 300 Thr Gly Cys Ile Pro Lys Thr Leu Glu Ile Leu Asp Val Ser Asn Asn 305 310 315 320 Asn Leu Asn Leu Phe Ser Leu Asn Leu Pro Gln Leu Lys Glu Leu Tyr 325 330 335 Ile Ser Arg Asn Lys Leu Met Thr Leu Pro Asp Ala Ser Leu Leu Pro 340 345 350 Met Leu Leu Val Leu Lys Ile Ser Arg Asn Ala Ile Thr Thr Phe Ser 355 360 365 Lys Glu Gln Leu Asp Ser Phe His Thr Leu Lys Thr Leu Glu Ala Gly 370 375 380 Gly Asn Asn Phe Ile Cys Ser Cys Glu Phe Leu Ser Phe Thr Gln Glu 385 390 395 400 Gln Gln Ala Leu Ala Lys Val Leu Ile Asp Trp Pro Ala Asn Tyr Leu 405 410 415 Cys Asp Ser Pro Ser His Val Arg Gly Gln Gln Val Gln Asp Val Arg 420 425 430 Leu Ser Val Ser Glu Cys His Arg Thr Ala 435 440 <210> 86 <211> 795 <212> PRT <213> mouse TLR1 <400> 86 Met Thr Lys Pro Asn Ser Leu Ile Phe Tyr Cys Ile Ile Val Leu Gly 1 5 10 15 Leu Thr Leu Met Lys Ile Gln Leu Ser Glu Glu Cys Glu Leu Ile Ile 20 25 30 Lys Arg Pro Asn Ala Asn Leu Thr Arg Val Pro Lys Asp Leu Pro Leu 35 40 45 Gln Thr Thr Thr Leu Asp Leu Ser Gln Asn Asn Ile Ser Glu Leu Gln 50 55 60 Thr Ser Asp Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Val Leu Ile Met Ser 65 70 75 80 Tyr Asn Arg Leu Gln Tyr Leu Asn Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Thr 85 90 95 Glu Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Glu Leu Lys Val Ile Leu 100 105 110 Cys His Pro Thr Val Ser Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala 115 120 125 Phe Asp Ala Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu 130 135 140 Gln Phe Leu Gly Leu Ser Gly Ser Arg Val Gln Ser Ser Ser Val Gln 145 150 155 160 Leu Ile Ala His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Asp 165 170 175 Ala Tyr Gly Glu Lys Glu Asp Pro Glu Ser Leu Arg His Val Ser Thr 180 185 190 Glu Thr Leu His Ile Val Phe Pro Ser Lys Arg Glu Phe Arg Phe Leu 195 200 205 Leu Asp Val Ser Val Ser Thr Thr Ile Gly Leu Glu Leu Ser Asn Ile 210 215 220 Lys Cys Val Leu Glu Asp Gln Gly Cys Ser Tyr Phe Leu Arg Ala Leu 225 230 235 240 Ser Lys Leu Gly Lys Asn Leu Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn 245 250 255 Val Glu Thr Thr Trp Asn Ser Phe Ile Asn Ile Leu Gln Ile Val Trp 260 265 270 His Thr Pro Val Lys Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly 275 280 285 Gln Leu Ala Phe Arg Met Phe Asn Tyr Ser Asp Thr Ser Leu Lys Ala 290 295 300 Leu Ser Ile His Gln Val Val Thr Asp Val Phe Ser Phe Pro Gln Ser 305 310 315 320 Tyr Ile Tyr Ser Ile Phe Ala Asn Met Asn Ile Gln Asn Phe Thr Met 325 330 335 Ser Gly Thr His Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Gln Val Ser Pro 340 345 350 Phe Leu His Val Asp Phe Thr Asp Asn Leu Leu Thr Asp Met Val Phe 355 360 365 Lys Asp Cys Arg Asn Leu Val Arg Leu Lys Thr Leu Ser Leu Gln Lys 370 375 380 Asn Gln Leu Lys Asn Leu Glu Asn Ile Ile Leu Thr Ser Ala Lys Met 385 390 395 400 Thr Ser Leu Gln Lys Leu Asp Ile Ser Gln Asn Ser Leu Arg Tyr Ser 405 410 415 Asp Gly Gly Ile Pro Cys Ala Trp Thr Gln Ser Leu Leu Val Leu Asn 420 425 430 Leu Ser Ser Asn Met Leu Thr Gly Ser Val Phe Arg Cys Leu Pro Pro 435 440 445 Lys Val Lys Val Leu Asp Leu His Asn Asn Arg Ile Met Ser Ile Pro 450 455 460 Lys Asp Val Thr His Leu Gln Ala Leu Gln Glu Leu Asn Val Ala Ser 465 470 475 480 Asn Ser Leu Thr Asp Leu Pro Gly Cys Gly Ala Phe Ser Ser Leu Ser 485 490 495 Val Leu Val Ile Asp His Asn Ser Val Ser His Pro Ser Glu Asp Phe 500 505 510 Phe Gln Ser Cys Gln Asn Ile Arg Ser Leu Thr Ala Gly Asn Asn Pro 515 520 525 Phe Gln Cys Thr Cys Glu Leu Arg Asp Phe Val Lys Asn Ile Gly Trp 530 535 540 Val Ala Arg Glu Val Val Glu Gly Trp Pro Asp Ser Tyr Arg Cys Asp 545 550 555 560 Tyr Pro Glu Ser Ser Arg Gly Thr Ala Leu Arg Asp Phe His Met Ser 565 570 575 Pro Leu Ser Cys Asp Thr Val Leu Leu Thr Val Thr Ile Gly Ala Thr 580 585 590 Met Leu Val Leu Ala Val Thr Gly Ala Phe Leu Cys Leu Tyr Phe Asp 595 600 605 Leu Pro Trp Tyr Val Arg Met Leu Cys Gln Trp Thr Gln Thr Arg His 610 615 620 Arg Ala Arg His Ile Pro Leu Glu Glu Leu Gln Arg Asn Leu Gln Phe 625 630 635 640 His Ala Phe Val Ser Tyr Ser Gly His Asp Ser Ala Trp Val Lys Asn 645 650 655 Glu Leu Leu Pro Asn Leu Glu Lys Asp Asp Ile Gln Ile Cys Leu His 660 665 670 Glu Arg Asn Phe Val Pro Gly Lys Ser Ile Val Glu Asn Ile Ile Asn 675 680 685 Phe Ile Glu Lys Ser Tyr Lys Ser Ile Phe Val Leu Ser Pro His Phe 690 695 700 Ile Gln Ser Glu Trp Cys His Tyr Glu Leu Tyr Phe Ala His His Asn 705 710 715 720 Leu Phe His Glu Gly Ser Asp Asn Leu Ile Leu Ile Leu Leu Ala Pro 725 730 735 Ile Pro Gln Tyr Ser Ile Pro Thr Asn Tyr His Lys Leu Lys Thr Leu 740 745 750 Met Ser Arg Arg Thr Tyr Leu Glu Trp Pro Thr Glu Lys Asn Lys His 755 760 765 Gly Leu Phe Trp Ala Asn Leu Arg Ala Ser Ile Asn Val Lys Leu Val 770 775 780 Asn Gln Ala Glu Gly Thr Cys Tyr Thr Gln Gln 785 790 795 <210> 87 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for mTLR1 <400> 87 acggtggatc catgactaaa ccaaattccc tc 32 <210> 88 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for mTLR1 <400> 88 actggtctag aaatgtctag tttttgtagg ga 32 <210> 89 <211> 43 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for VLR <400> 89 actacgcggc cgctcaagta gggcagatga tacttcggac ggg 43 <210> 90 <211> 34 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for mTLR1 <400> 90 actggtctag aaaggtcaag gaccttgact ttgg 34 <210> 91 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for mTLR1 <400> 91 actggtctag agatgaccag cacagaaagg ctg 33 <210> 92 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 92 actactctag aaacagactc cagtatctta at 32 <210> 93 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for VLR <400> 93 atccagcggc cgctaacagt atcacaggat agtgg 35 <210> 94 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 94 actactctag aaatgagcta aaggtgatct tg 32 <210> 95 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 95 actactctag atctaacatc aagtgtgtgc tt 32 <210> 96 <211> 478 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mT1V_2 <400> 96 Met Thr Lys Pro Asn Ser Leu Ile Phe Tyr Cys Ile Ile Val Leu Gly 1 5 10 15 Leu Thr Leu Met Lys Ile Gln Leu Ser Glu Glu Cys Glu Leu Ile Ile 20 25 30 Lys Arg Pro Asn Ala Asn Leu Thr Arg Val Pro Lys Asp Leu Pro Leu 35 40 45 Gln Thr Thr Thr Leu Asp Leu Ser Gln Asn Asn Ile Ser Glu Leu Gln 50 55 60 Thr Ser Asp Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Val Leu Ile Met Ser 65 70 75 80 Tyr Asn Arg Leu Gln Tyr Leu Asn Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Thr 85 90 95 Glu Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Glu Leu Lys Val Ile Leu 100 105 110 Cys His Pro Thr Val Ser Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala 115 120 125 Phe Asp Ala Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu 130 135 140 Gln Phe Leu Gly Leu Ser Gly Ser Arg Val Gln Ser Ser Ser Val Gln 145 150 155 160 Leu Ile Ala His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Asp 165 170 175 Ala Tyr Gly Glu Lys Glu Asp Pro Glu Ser Leu Arg His Val Ser Thr 180 185 190 Glu Thr Leu His Ile Val Phe Pro Ser Lys Arg Glu Phe Arg Phe Leu 195 200 205 Leu Asp Val Ser Val Ser Thr Thr Ile Gly Leu Glu Leu Ser Asn Ile 210 215 220 Lys Cys Val Leu Glu Asp Gln Gly Cys Ser Tyr Phe Leu Arg Ala Leu 225 230 235 240 Ser Lys Leu Gly Lys Asn Leu Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn 245 250 255 Val Glu Thr Thr Trp Asn Ser Phe Ile Asn Ile Leu Gln Ile Val Trp 260 265 270 His Thr Pro Val Lys Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly 275 280 285 Gln Leu Ala Phe Arg Met Phe Asn Tyr Ser Asp Thr Ser Leu Lys Ala 290 295 300 Leu Ser Ile His Gln Val Val Thr Asp Val Phe Ser Phe Pro Gln Ser 305 310 315 320 Tyr Ile Tyr Ser Ile Phe Ala Asn Met Asn Ile Gln Asn Phe Thr Met 325 330 335 Ser Gly Thr His Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Gln Val Ser Pro 340 345 350 Phe Leu His Val Asp Phe Thr Asp Asn Leu Leu Thr Asp Met Val Phe 355 360 365 Lys Asp Cys Arg Asn Leu Val Arg Leu Lys Thr Leu Ser Leu Gln Lys 370 375 380 Asn Gln Leu Lys Asn Leu Glu Asn Ile Ile Leu Thr Ser Ala Lys Met 385 390 395 400 Thr Ser Leu Gln Lys Leu Asp Ile Ser Arg Asn Gln Leu Lys Ser Val 405 410 415 Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu 420 425 430 His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser 435 440 445 Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys 450 455 460 Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 465 470 475 <210> 97 <211> 525 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mT1V_4 <400> 97 Met Thr Lys Pro Asn Ser Leu Ile Phe Tyr Cys Ile Ile Val Leu Gly 1 5 10 15 Leu Thr Leu Met Lys Ile Gln Leu Ser Glu Glu Cys Glu Leu Ile Ile 20 25 30 Lys Arg Pro Asn Ala Asn Leu Thr Arg Val Pro Lys Asp Leu Pro Leu 35 40 45 Gln Thr Thr Thr Leu Asp Leu Ser Gln Asn Asn Ile Ser Glu Leu Gln 50 55 60 Thr Ser Asp Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Val Leu Ile Met Ser 65 70 75 80 Tyr Asn Arg Leu Gln Tyr Leu Asn Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Thr 85 90 95 Glu Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Glu Leu Lys Val Ile Leu 100 105 110 Cys His Pro Thr Val Ser Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala 115 120 125 Phe Asp Ala Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu 130 135 140 Gln Phe Leu Gly Leu Ser Gly Ser Arg Val Gln Ser Ser Ser Val Gln 145 150 155 160 Leu Ile Ala His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Asp 165 170 175 Ala Tyr Gly Glu Lys Glu Asp Pro Glu Ser Leu Arg His Val Ser Thr 180 185 190 Glu Thr Leu His Ile Val Phe Pro Ser Lys Arg Glu Phe Arg Phe Leu 195 200 205 Leu Asp Val Ser Val Ser Thr Thr Ile Gly Leu Glu Leu Ser Asn Ile 210 215 220 Lys Cys Val Leu Glu Asp Gln Gly Cys Ser Tyr Phe Leu Arg Ala Leu 225 230 235 240 Ser Lys Leu Gly Lys Asn Leu Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn 245 250 255 Val Glu Thr Thr Trp Asn Ser Phe Ile Asn Ile Leu Gln Ile Val Trp 260 265 270 His Thr Pro Val Lys Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly 275 280 285 Gln Leu Ala Phe Arg Met Phe Asn Tyr Ser Asp Thr Ser Leu Lys Ala 290 295 300 Leu Ser Ile His Gln Val Val Thr Asp Val Phe Ser Phe Pro Gln Ser 305 310 315 320 Tyr Ile Tyr Ser Ile Phe Ala Asn Met Asn Ile Gln Asn Phe Thr Met 325 330 335 Ser Gly Thr His Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Gln Val Ser Pro 340 345 350 Phe Leu His Val Asp Phe Thr Asp Asn Leu Leu Thr Asp Met Val Phe 355 360 365 Lys Asp Cys Arg Asn Leu Val Arg Leu Lys Thr Leu Ser Leu Gln Lys 370 375 380 Asn Gln Leu Lys Asn Leu Glu Asn Ile Ile Leu Thr Ser Ala Lys Met 385 390 395 400 Thr Ser Leu Gln Lys Leu Asp Ile Ser Gln Asn Ser Leu Arg Tyr Ser 405 410 415 Asp Gly Gly Ile Pro Cys Ala Trp Thr Gln Ser Leu Leu Val Leu Asn 420 425 430 Leu Ser Ser Asn Met Leu Thr Gly Ser Val Phe Arg Cys Leu Pro Pro 435 440 445 Lys Val Lys Val Leu Asp Leu Ser Arg Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro 450 455 460 Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His 465 470 475 480 Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg 485 490 495 Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser 500 505 510 Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 515 520 525 <210> 98 <211> 570 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mT1V_6 <400> 98 Met Thr Lys Pro Asn Ser Leu Ile Phe Tyr Cys Ile Ile Val Leu Gly 1 5 10 15 Leu Thr Leu Met Lys Ile Gln Leu Ser Glu Glu Cys Glu Leu Ile Ile 20 25 30 Lys Arg Pro Asn Ala Asn Leu Thr Arg Val Pro Lys Asp Leu Pro Leu 35 40 45 Gln Thr Thr Thr Leu Asp Leu Ser Gln Asn Asn Ile Ser Glu Leu Gln 50 55 60 Thr Ser Asp Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Val Leu Ile Met Ser 65 70 75 80 Tyr Asn Arg Leu Gln Tyr Leu Asn Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Thr 85 90 95 Glu Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Glu Leu Lys Val Ile Leu 100 105 110 Cys His Pro Thr Val Ser Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala 115 120 125 Phe Asp Ala Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu 130 135 140 Gln Phe Leu Gly Leu Ser Gly Ser Arg Val Gln Ser Ser Ser Val Gln 145 150 155 160 Leu Ile Ala His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Asp 165 170 175 Ala Tyr Gly Glu Lys Glu Asp Pro Glu Ser Leu Arg His Val Ser Thr 180 185 190 Glu Thr Leu His Ile Val Phe Pro Ser Lys Arg Glu Phe Arg Phe Leu 195 200 205 Leu Asp Val Ser Val Ser Thr Thr Ile Gly Leu Glu Leu Ser Asn Ile 210 215 220 Lys Cys Val Leu Glu Asp Gln Gly Cys Ser Tyr Phe Leu Arg Ala Leu 225 230 235 240 Ser Lys Leu Gly Lys Asn Leu Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn 245 250 255 Val Glu Thr Thr Trp Asn Ser Phe Ile Asn Ile Leu Gln Ile Val Trp 260 265 270 His Thr Pro Val Lys Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly 275 280 285 Gln Leu Ala Phe Arg Met Phe Asn Tyr Ser Asp Thr Ser Leu Lys Ala 290 295 300 Leu Ser Ile His Gln Val Val Thr Asp Val Phe Ser Phe Pro Gln Ser 305 310 315 320 Tyr Ile Tyr Ser Ile Phe Ala Asn Met Asn Ile Gln Asn Phe Thr Met 325 330 335 Ser Gly Thr His Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Gln Val Ser Pro 340 345 350 Phe Leu His Val Asp Phe Thr Asp Asn Leu Leu Thr Asp Met Val Phe 355 360 365 Lys Asp Cys Arg Asn Leu Val Arg Leu Lys Thr Leu Ser Leu Gln Lys 370 375 380 Asn Gln Leu Lys Asn Leu Glu Asn Ile Ile Leu Thr Ser Ala Lys Met 385 390 395 400 Thr Ser Leu Gln Lys Leu Asp Ile Ser Gln Asn Ser Leu Arg Tyr Ser 405 410 415 Asp Gly Gly Ile Pro Cys Ala Trp Thr Gln Ser Leu Leu Val Leu Asn 420 425 430 Leu Ser Ser Asn Met Leu Thr Gly Ser Val Phe Arg Cys Leu Pro Pro 435 440 445 Lys Val Lys Val Leu Asp Leu His Asn Asn Arg Ile Met Ser Ile Pro 450 455 460 Lys Asp Val Thr His Leu Gln Ala Leu Gln Glu Leu Asn Val Ala Ser 465 470 475 480 Asn Ser Leu Thr Asp Leu Pro Gly Cys Gly Ala Phe Ser Ser Leu Ser 485 490 495 Val Leu Val Ile Ser Arg Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile 500 505 510 Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro 515 520 525 Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn 530 535 540 Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly 545 550 555 560 Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 565 570 <210> 99 <211> 586 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mVT1_1 <400> 99 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Thr Lys Leu 65 70 75 80 Ser Leu Ser Arg Asn Arg Leu Gln Tyr Leu Asn Ile Ser Val Phe Lys 85 90 95 Phe Asn Thr Glu Leu Glu Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Glu Leu Lys 100 105 110 Val Ile Leu Cys His Pro Thr Val Ser Leu Lys His Leu Asp Leu Ser 115 120 125 Phe Asn Ala Phe Asp Ala Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met 130 135 140 Ser Gln Leu Gln Phe Leu Gly Leu Ser Gly Ser Arg Val Gln Ser Ser 145 150 155 160 Ser Val Gln Leu Ile Ala His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val 165 170 175 Leu Gly Asp Ala Tyr Gly Glu Lys Glu Asp Pro Glu Ser Leu Arg His 180 185 190 Val Ser Thr Glu Thr Leu His Ile Val Phe Pro Ser Lys Arg Glu Phe 195 200 205 Arg Phe Leu Leu Asp Val Ser Val Ser Thr Thr Ile Gly Leu Glu Leu 210 215 220 Ser Asn Ile Lys Cys Val Leu Glu Asp Gln Gly Cys Ser Tyr Phe Leu 225 230 235 240 Arg Ala Leu Ser Lys Leu Gly Lys Asn Leu Lys Leu Ser Asn Leu Thr 245 250 255 Leu Asn Asn Val Glu Thr Thr Trp Asn Ser Phe Ile Asn Ile Leu Gln 260 265 270 Ile Val Trp His Thr Pro Val Lys Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys 275 280 285 Leu Gln Gly Gln Leu Ala Phe Arg Met Phe Asn Tyr Ser Asp Thr Ser 290 295 300 Leu Lys Ala Leu Ser Ile His Gln Val Val Thr Asp Val Phe Ser Phe 305 310 315 320 Pro Gln Ser Tyr Ile Tyr Ser Ile Phe Ala Asn Met Asn Ile Gln Asn 325 330 335 Phe Thr Met Ser Gly Thr His Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Gln 340 345 350 Val Ser Pro Phe Leu His Val Asp Phe Thr Asp Asn Leu Leu Thr Asp 355 360 365 Met Val Phe Lys Asp Cys Arg Asn Leu Val Arg Leu Lys Thr Leu Ser 370 375 380 Leu Gln Lys Asn Gln Leu Lys Asn Leu Glu Asn Ile Ile Leu Thr Ser 385 390 395 400 Ala Lys Met Thr Ser Leu Gln Lys Leu Asp Ile Ser Gln Asn Ser Leu 405 410 415 Arg Tyr Ser Asp Gly Gly Ile Pro Cys Ala Trp Thr Gln Ser Leu Leu 420 425 430 Val Leu Asn Leu Ser Ser Asn Met Leu Thr Gly Ser Val Phe Arg Cys 435 440 445 Leu Pro Pro Lys Val Lys Val Leu Asp Leu His Asn Asn Arg Ile Met 450 455 460 Ser Ile Pro Lys Asp Val Thr His Leu Gln Ala Leu Gln Glu Leu Asn 465 470 475 480 Val Ala Ser Asn Ser Leu Thr Asp Leu Pro Gly Cys Gly Ala Phe Ser 485 490 495 Ser Leu Ser Val Leu Val Ile Asp His Asn Ser Val Ser His Pro Ser 500 505 510 Glu Asp Phe Phe Gln Ser Cys Gln Asn Ile Arg Ser Leu Thr Ala Gly 515 520 525 Asn Asn Pro Phe Gln Cys Thr Cys Glu Leu Arg Asp Phe Val Lys Asn 530 535 540 Ile Gly Trp Val Ala Arg Glu Val Val Glu Gly Trp Pro Asp Ser Tyr 545 550 555 560 Arg Cys Asp Tyr Pro Glu Ser Ser Arg Gly Thr Ala Leu Arg Asp Phe 565 570 575 His Met Ser Pro Leu Ser Cys Asp Thr Val 580 585 <210> 100 <211> 562 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mVT1_2 <400> 100 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Thr Lys Leu 65 70 75 80 Ser Leu Ser Arg Asn Glu Leu Lys Val Ile Leu Cys His Pro Thr Val 85 90 95 Ser Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala Phe Asp Ala Leu Pro 100 105 110 Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu Gln Phe Leu Gly Leu 115 120 125 Ser Gly Ser Arg Val Gln Ser Ser Ser Val Gln Leu Ile Ala His Leu 130 135 140 Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Asp Ala Tyr Gly Glu Lys 145 150 155 160 Glu Asp Pro Glu Ser Leu Arg His Val Ser Thr Glu Thr Leu His Ile 165 170 175 Val Phe Pro Ser Lys Arg Glu Phe Arg Phe Leu Leu Asp Val Ser Val 180 185 190 Ser Thr Thr Ile Gly Leu Glu Leu Ser Asn Ile Lys Cys Val Leu Glu 195 200 205 Asp Gln Gly Cys Ser Tyr Phe Leu Arg Ala Leu Ser Lys Leu Gly Lys 210 215 220 Asn Leu Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn Val Glu Thr Thr Trp 225 230 235 240 Asn Ser Phe Ile Asn Ile Leu Gln Ile Val Trp His Thr Pro Val Lys 245 250 255 Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly Gln Leu Ala Phe Arg 260 265 270 Met Phe Asn Tyr Ser Asp Thr Ser Leu Lys Ala Leu Ser Ile His Gln 275 280 285 Val Val Thr Asp Val Phe Ser Phe Pro Gln Ser Tyr Ile Tyr Ser Ile 290 295 300 Phe Ala Asn Met Asn Ile Gln Asn Phe Thr Met Ser Gly Thr His Met 305 310 315 320 Val His Met Leu Cys Pro Ser Gln Val Ser Pro Phe Leu His Val Asp 325 330 335 Phe Thr Asp Asn Leu Leu Thr Asp Met Val Phe Lys Asp Cys Arg Asn 340 345 350 Leu Val Arg Leu Lys Thr Leu Ser Leu Gln Lys Asn Gln Leu Lys Asn 355 360 365 Leu Glu Asn Ile Ile Leu Thr Ser Ala Lys Met Thr Ser Leu Gln Lys 370 375 380 Leu Asp Ile Ser Gln Asn Ser Leu Arg Tyr Ser Asp Gly Gly Ile Pro 385 390 395 400 Cys Ala Trp Thr Gln Ser Leu Leu Val Leu Asn Leu Ser Ser Asn Met 405 410 415 Leu Thr Gly Ser Val Phe Arg Cys Leu Pro Pro Lys Val Lys Val Leu 420 425 430 Asp Leu His Asn Asn Arg Ile Met Ser Ile Pro Lys Asp Val Thr His 435 440 445 Leu Gln Ala Leu Gln Glu Leu Asn Val Ala Ser Asn Ser Leu Thr Asp 450 455 460 Leu Pro Gly Cys Gly Ala Phe Ser Ser Leu Ser Val Leu Val Ile Asp 465 470 475 480 His Asn Ser Val Ser His Pro Ser Glu Asp Phe Phe Gln Ser Cys Gln 485 490 495 Asn Ile Arg Ser Leu Thr Ala Gly Asn Asn Pro Phe Gln Cys Thr Cys 500 505 510 Glu Leu Arg Asp Phe Val Lys Asn Ile Gly Trp Val Ala Arg Glu Val 515 520 525 Val Glu Gly Trp Pro Asp Ser Tyr Arg Cys Asp Tyr Pro Glu Ser Ser 530 535 540 Arg Gly Thr Ala Leu Arg Asp Phe His Met Ser Pro Leu Ser Cys Asp 545 550 555 560 Thr Val <210> 101 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for mVT1_7 <400> 101 Met Lys Phe Ala Leu Arg Gly Thr Cys Val Leu Leu Ala Leu Leu Leu 1 5 10 15 Cys Cys Arg Asn Gly Lys Ala Cys Pro Ser Arg Cys Ser Cys Ser Gly 20 25 30 Thr Glu Ile Arg Cys Asn Ser Lys Gly Leu Thr Ser Val Pro Thr Gly 35 40 45 Ile Pro Ser Ser Ala Thr Arg Leu Glu Leu Glu Ser Asn Lys Leu Gln 50 55 60 Ser Leu Pro His Gly Val Phe Asp Lys Leu Thr Gln Leu Thr Lys Leu 65 70 75 80 Ser Leu Ser Arg Ser Asn Ile Lys Cys Val Leu Glu Asp Gln Gly Cys 85 90 95 Ser Tyr Phe Leu Arg Ala Leu Ser Lys Leu Gly Lys Asn Leu Lys Leu 100 105 110 Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn Val Glu Thr Thr Trp Asn Ser Phe Ile 115 120 125 Asn Ile Leu Gln Ile Val Trp His Thr Pro Val Lys Tyr Phe Ser Ile 130 135 140 Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly Gln Leu Ala Phe Arg Met Phe Asn Tyr 145 150 155 160 Ser Asp Thr Ser Leu Lys Ala Leu Ser Ile His Gln Val Val Thr Asp 165 170 175 Val Phe Ser Phe Pro Gln Ser Tyr Ile Tyr Ser Ile Phe Ala Asn Met 180 185 190 Asn Ile Gln Asn Phe Thr Met Ser Gly Thr His Met Val His Met Leu 195 200 205 Cys Pro Ser Gln Val Ser Pro Phe Leu His Val Asp Phe Thr Asp Asn 210 215 220 Leu Leu Thr Asp Met Val Phe Lys Asp Cys Arg Asn Leu Val Arg Leu 225 230 235 240 Lys Thr Leu Ser Leu Gln Lys Asn Gln Leu Lys Asn Leu Glu Asn Ile 245 250 255 Ile Leu Thr Ser Ala Lys Met Thr Ser Leu Gln Lys Leu Asp Ile Ser 260 265 270 Gln Asn Ser Leu Arg Tyr Ser Asp Gly Gly Ile Pro Cys Ala Trp Thr 275 280 285 Gln Ser Leu Leu Val Leu Asn Leu Ser Ser Asn Met Leu Thr Gly Ser 290 295 300 Val Phe Arg Cys Leu Pro Pro Lys Val Lys Val Leu Asp Leu His Asn 305 310 315 320 Asn Arg Ile Met Ser Ile Pro Lys Asp Val Thr His Leu Gln Ala Leu 325 330 335 Gln Glu Leu Asn Val Ala Ser Asn Ser Leu Thr Asp Leu Pro Gly Cys 340 345 350 Gly Ala Phe Ser Ser Leu Ser Val Leu Val Ile Asp His Asn Ser Val 355 360 365 Ser His Pro Ser Glu Asp Phe Phe Gln Ser Cys Gln Asn Ile Arg Ser 370 375 380 Leu Thr Ala Gly Asn Asn Pro Phe Gln Cys Thr Cys Glu Leu Arg Asp 385 390 395 400 Phe Val Lys Asn Ile Gly Trp Val Ala Arg Glu Val Val Glu Gly Trp 405 410 415 Pro Asp Ser Tyr Arg Cys Asp Tyr Pro Glu Ser Ser Arg Gly Thr Ala 420 425 430 Leu Arg Asp Phe His Met Ser Pro Leu Ser Cys Asp Thr Val 435 440 445 <210> 102 <211> 786 <212> PRT <213> human TLR1 <400> 102 Met Thr Ser Ile Phe His Phe Ala Ile Ile Phe Met Leu Ile Leu Gln 1 5 10 15 Ile Arg Ile Gln Leu Ser Glu Glu Ser Glu Phe Leu Val Asp Arg Ser 20 25 30 Lys Asn Gly Leu Ile His Val Pro Lys Asp Leu Ser Gln Lys Thr Thr 35 40 45 Ile Leu Asn Ile Ser Gln Asn Tyr Ile Ser Glu Leu Trp Thr Ser Asp 50 55 60 Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Ile Leu Ile Ile Ser His Asn Arg 65 70 75 80 Ile Gln Tyr Leu Asp Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Gln Glu Leu Glu 85 90 95 Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Lys Leu Val Lys Ile Ser Cys His Pro 100 105 110 Thr Val Asn Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala Phe Asp Ala 115 120 125 Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu Lys Phe Leu 130 135 140 Gly Leu Ser Thr Thr His Leu Glu Lys Ser Ser Val Leu Pro Ile Ala 145 150 155 160 His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Glu Thr Tyr Gly 165 170 175 Glu Lys Glu Asp Pro Glu Gly Leu Gln Asp Phe Asn Thr Glu Ser Leu 180 185 190 His Ile Val Phe Pro Thr Asn Lys Glu Phe His Phe Ile Leu Asp Val 195 200 205 Ser Val Lys Thr Val Ala Asn Leu Glu Leu Ser Asn Ile Lys Cys Val 210 215 220 Leu Glu Asp Asn Lys Cys Ser Tyr Phe Leu Ser Ile Leu Ala Lys Leu 225 230 235 240 Gln Thr Asn Pro Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn Ile Glu Thr 245 250 255 Thr Trp Asn Ser Phe Ile Arg Ile Leu Gln Leu Val Trp His Thr Thr 260 265 270 Val Trp Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly Gln Leu Asp 275 280 285 Phe Arg Asp Phe Asp Tyr Ser Gly Thr Ser Leu Lys Ala Leu Ser Ile 290 295 300 His Gln Val Val Ser Asp Val Phe Gly Phe Pro Gln Ser Tyr Ile Tyr 305 310 315 320 Glu Ile Phe Ser Asn Met Asn Ile Lys Asn Phe Thr Val Ser Gly Thr 325 330 335 Arg Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Lys Ile Ser Pro Phe Leu His 340 345 350 Leu Asp Phe Ser Asn Asn Leu Leu Thr Asp Thr Val Phe Glu Asn Cys 355 360 365 Gly His Leu Thr Glu Leu Glu Thr Leu Ile Leu Gln Met Asn Gln Leu 370 375 380 Lys Glu Leu Ser Lys Ile Ala Glu Met Thr Thr Gln Met Lys Ser Leu 385 390 395 400 Gln Gln Leu Asp Ile Ser Gln Asn Ser Val Ser Tyr Asp Glu Lys Lys 405 410 415 Gly Asp Cys Ser Trp Thr Lys Ser Leu Leu Ser Leu Asn Met Ser Ser 420 425 430 Asn Ile Leu Thr Asp Thr Ile Phe Arg Cys Leu Pro Pro Arg Ile Lys 435 440 445 Val Leu Asp Leu His Ser Asn Lys Ile Lys Ser Ile Pro Lys Gln Val 450 455 460 Val Lys Leu Glu Ala Leu Gln Glu Leu Asn Val Ala Phe Asn Ser Leu 465 470 475 480 Thr Asp Leu Pro Gly Cys Gly Ser Phe Ser Ser Leu Ser Val Leu Ile 485 490 495 Ile Asp His Asn Ser Val Ser His Pro Ser Ala Asp Phe Phe Gln Ser 500 505 510 Cys Gln Lys Met Arg Ser Ile Lys Ala Gly Asp Asn Pro Phe Gln Cys 515 520 525 Thr Cys Glu Leu Gly Glu Phe Val Lys Asn Ile Asp Gln Val Ser Ser 530 535 540 Glu Val Leu Glu Gly Trp Pro Asp Ser Tyr Lys Cys Asp Tyr Pro Glu 545 550 555 560 Ser Tyr Arg Gly Thr Leu Leu Lys Asp Phe His Met Ser Glu Leu Ser 565 570 575 Cys Asn Ile Thr Leu Leu Ile Val Thr Ile Val Ala Thr Met Leu Val 580 585 590 Leu Ala Val Thr Val Thr Ser Leu Cys Ser Tyr Leu Asp Leu Pro Trp 595 600 605 Tyr Leu Arg Met Val Cys Gln Trp Thr Gln Thr Arg Arg Arg Ala Arg 610 615 620 Asn Ile Pro Leu Glu Glu Leu Gln Arg Asn Leu Gln Phe His Ala Phe 625 630 635 640 Ile Ser Tyr Ser Gly His Asp Ser Phe Trp Val Lys Asn Glu Leu Leu 645 650 655 Pro Asn Leu Glu Lys Glu Gly Met Gln Ile Cys Leu His Glu Arg Asn 660 665 670 Phe Val Pro Gly Lys Ser Ile Val Glu Asn Ile Ile Thr Cys Ile Glu 675 680 685 Lys Ser Tyr Lys Ser Ile Phe Val Leu Ser Pro Asn Phe Val Gln Ser 690 695 700 Glu Trp Cys His Tyr Glu Leu Tyr Phe Ala His His Asn Leu Phe His 705 710 715 720 Glu Gly Ser Asn Ser Leu Ile Leu Ile Leu Leu Glu Pro Ile Pro Gln 725 730 735 Tyr Ser Ile Pro Ser Ser Tyr His Lys Leu Lys Ser Leu Met Ala Arg 740 745 750 Arg Thr Tyr Leu Glu Trp Pro Lys Glu Lys Ser Lys Arg Gly Leu Phe 755 760 765 Trp Ala Asn Leu Arg Ala Ala Ile Asn Ile Lys Leu Thr Glu Gln Ala 770 775 780 Lys Lys 785 <210> 103 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR1 <400> 103 actacgctag ctaaggtaag acttgataac tttgg 35 <210> 104 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer for VLR <400> 104 actactctag aaatagaatc cagtatcttg at 32 <210> 105 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for VLR <400> 105 atccagcggc cgctagttat gttgcaggat aattc 35 <210> 106 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR1 <400> 106 actacgctag ctatagacaa ggccttcaag gaagt 35 <210> 107 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR1 <400> 107 actacgctag ctaaaataag tgtctccaac tc 32 <210> 108 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR1 <400> 108 actacgctag caatatccaa ttgttgcaga ga 32 <210> 109 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR1 <400> 109 actacgctag caagatcaag taccttgatc ctggg 35 <210> 110 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR1 <400> 110 gcgacgctag caacattgag ttcttgcaaa gc 32 <210> 111 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer for hTLR1 <400> 111 gcgacgctag caatgatcaa tacagaaagg ct 32 <210> 112 <211> 321 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT1V_1 <400> 112 Met Thr Ser Ile Phe His Phe Ala Ile Ile Phe Met Leu Ile Leu Gln 1 5 10 15 Ile Arg Ile Gln Leu Ser Glu Glu Ser Glu Phe Leu Val Asp Arg Ser 20 25 30 Lys Asn Gly Leu Ile His Val Pro Lys Asp Leu Ser Gln Lys Thr Thr 35 40 45 Ile Leu Asn Ile Ser Gln Asn Tyr Ile Ser Glu Leu Trp Thr Ser Asp 50 55 60 Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Ile Leu Ile Ile Ser His Asn Arg 65 70 75 80 Ile Gln Tyr Leu Asp Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Gln Glu Leu Glu 85 90 95 Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Lys Leu Val Lys Ile Ser Cys His Pro 100 105 110 Thr Val Asn Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala Phe Asp Ala 115 120 125 Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu Lys Phe Leu 130 135 140 Gly Leu Ser Thr Thr His Leu Glu Lys Ser Ser Val Leu Pro Ile Ala 145 150 155 160 His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Glu Thr Tyr Gly 165 170 175 Glu Lys Glu Asp Pro Glu Gly Leu Gln Asp Phe Asn Thr Glu Ser Leu 180 185 190 His Ile Val Phe Pro Thr Asn Lys Glu Phe His Phe Ile Leu Asp Val 195 200 205 Ser Val Lys Thr Val Ala Asn Leu Glu Leu Ser Asn Ile Lys Cys Val 210 215 220 Leu Glu Asp Asn Lys Cys Ser Tyr Phe Leu Ser Ile Leu Ala Lys Leu 225 230 235 240 Gln Thr Asn Pro Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Ala Ser Asn Gln Leu 245 250 255 Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys 260 265 270 Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp 275 280 285 Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser 290 295 300 Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro 305 310 315 320 Thr <210> 113 <211> 374 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT1V_3 <400> 113 Met Thr Ser Ile Phe His Phe Ala Ile Ile Phe Met Leu Ile Leu Gln 1 5 10 15 Ile Arg Ile Gln Leu Ser Glu Glu Ser Glu Phe Leu Val Asp Arg Ser 20 25 30 Lys Asn Gly Leu Ile His Val Pro Lys Asp Leu Ser Gln Lys Thr Thr 35 40 45 Ile Leu Asn Ile Ser Gln Asn Tyr Ile Ser Glu Leu Trp Thr Ser Asp 50 55 60 Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Ile Leu Ile Ile Ser His Asn Arg 65 70 75 80 Ile Gln Tyr Leu Asp Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Gln Glu Leu Glu 85 90 95 Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Lys Leu Val Lys Ile Ser Cys His Pro 100 105 110 Thr Val Asn Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala Phe Asp Ala 115 120 125 Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu Lys Phe Leu 130 135 140 Gly Leu Ser Thr Thr His Leu Glu Lys Ser Ser Val Leu Pro Ile Ala 145 150 155 160 His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Glu Thr Tyr Gly 165 170 175 Glu Lys Glu Asp Pro Glu Gly Leu Gln Asp Phe Asn Thr Glu Ser Leu 180 185 190 His Ile Val Phe Pro Thr Asn Lys Glu Phe His Phe Ile Leu Asp Val 195 200 205 Ser Val Lys Thr Val Ala Asn Leu Glu Leu Ser Asn Ile Lys Cys Val 210 215 220 Leu Glu Asp Asn Lys Cys Ser Tyr Phe Leu Ser Ile Leu Ala Lys Leu 225 230 235 240 Gln Thr Asn Pro Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn Ile Glu Thr 245 250 255 Thr Trp Asn Ser Phe Ile Arg Ile Leu Gln Leu Val Trp His Thr Thr 260 265 270 Val Trp Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly Gln Leu Asp 275 280 285 Phe Arg Asp Phe Asp Tyr Ser Gly Thr Ser Leu Lys Ala Leu Ser Ile 290 295 300 Ala Ser Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu 305 310 315 320 Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser 325 330 335 Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln 340 345 350 Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg 355 360 365 Ser Ile Ile Cys Pro Thr 370 <210> 114 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT1V_4 <400> 114 Met Thr Ser Ile Phe His Phe Ala Ile Ile Phe Met Leu Ile Leu Gln 1 5 10 15 Ile Arg Ile Gln Leu Ser Glu Glu Ser Glu Phe Leu Val Asp Arg Ser 20 25 30 Lys Asn Gly Leu Ile His Val Pro Lys Asp Leu Ser Gln Lys Thr Thr 35 40 45 Ile Leu Asn Ile Ser Gln Asn Tyr Ile Ser Glu Leu Trp Thr Ser Asp 50 55 60 Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Ile Leu Ile Ile Ser His Asn Arg 65 70 75 80 Ile Gln Tyr Leu Asp Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Gln Glu Leu Glu 85 90 95 Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Lys Leu Val Lys Ile Ser Cys His Pro 100 105 110 Thr Val Asn Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala Phe Asp Ala 115 120 125 Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu Lys Phe Leu 130 135 140 Gly Leu Ser Thr Thr His Leu Glu Lys Ser Ser Val Leu Pro Ile Ala 145 150 155 160 His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Glu Thr Tyr Gly 165 170 175 Glu Lys Glu Asp Pro Glu Gly Leu Gln Asp Phe Asn Thr Glu Ser Leu 180 185 190 His Ile Val Phe Pro Thr Asn Lys Glu Phe His Phe Ile Leu Asp Val 195 200 205 Ser Val Lys Thr Val Ala Asn Leu Glu Leu Ser Asn Ile Lys Cys Val 210 215 220 Leu Glu Asp Asn Lys Cys Ser Tyr Phe Leu Ser Ile Leu Ala Lys Leu 225 230 235 240 Gln Thr Asn Pro Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn Ile Glu Thr 245 250 255 Thr Trp Asn Ser Phe Ile Arg Ile Leu Gln Leu Val Trp His Thr Thr 260 265 270 Val Trp Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly Gln Leu Asp 275 280 285 Phe Arg Asp Phe Asp Tyr Ser Gly Thr Ser Leu Lys Ala Leu Ser Ile 290 295 300 His Gln Val Val Ser Asp Val Phe Gly Phe Pro Gln Ser Tyr Ile Tyr 305 310 315 320 Glu Ile Phe Ser Asn Met Asn Ile Lys Asn Phe Thr Val Ser Gly Thr 325 330 335 Arg Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Lys Ile Ser Pro Phe Leu His 340 345 350 Leu Asp Phe Ser Asn Asn Leu Leu Thr Asp Thr Val Phe Glu Asn Cys 355 360 365 Gly His Leu Thr Glu Leu Glu Thr Leu Ile Leu Ala Ser Asn Gln Leu 370 375 380 Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys 385 390 395 400 Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp 405 410 415 Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser 420 425 430 Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro 435 440 445 Thr <210> 115 <211> 475 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT1V_5 <400> 115 Met Thr Ser Ile Phe His Phe Ala Ile Ile Phe Met Leu Ile Leu Gln 1 5 10 15 Ile Arg Ile Gln Leu Ser Glu Glu Ser Glu Phe Leu Val Asp Arg Ser 20 25 30 Lys Asn Gly Leu Ile His Val Pro Lys Asp Leu Ser Gln Lys Thr Thr 35 40 45 Ile Leu Asn Ile Ser Gln Asn Tyr Ile Ser Glu Leu Trp Thr Ser Asp 50 55 60 Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Ile Leu Ile Ile Ser His Asn Arg 65 70 75 80 Ile Gln Tyr Leu Asp Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Gln Glu Leu Glu 85 90 95 Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Lys Leu Val Lys Ile Ser Cys His Pro 100 105 110 Thr Val Asn Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala Phe Asp Ala 115 120 125 Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu Lys Phe Leu 130 135 140 Gly Leu Ser Thr Thr His Leu Glu Lys Ser Ser Val Leu Pro Ile Ala 145 150 155 160 His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Glu Thr Tyr Gly 165 170 175 Glu Lys Glu Asp Pro Glu Gly Leu Gln Asp Phe Asn Thr Glu Ser Leu 180 185 190 His Ile Val Phe Pro Thr Asn Lys Glu Phe His Phe Ile Leu Asp Val 195 200 205 Ser Val Lys Thr Val Ala Asn Leu Glu Leu Ser Asn Ile Lys Cys Val 210 215 220 Leu Glu Asp Asn Lys Cys Ser Tyr Phe Leu Ser Ile Leu Ala Lys Leu 225 230 235 240 Gln Thr Asn Pro Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn Ile Glu Thr 245 250 255 Thr Trp Asn Ser Phe Ile Arg Ile Leu Gln Leu Val Trp His Thr Thr 260 265 270 Val Trp Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly Gln Leu Asp 275 280 285 Phe Arg Asp Phe Asp Tyr Ser Gly Thr Ser Leu Lys Ala Leu Ser Ile 290 295 300 His Gln Val Val Ser Asp Val Phe Gly Phe Pro Gln Ser Tyr Ile Tyr 305 310 315 320 Glu Ile Phe Ser Asn Met Asn Ile Lys Asn Phe Thr Val Ser Gly Thr 325 330 335 Arg Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Lys Ile Ser Pro Phe Leu His 340 345 350 Leu Asp Phe Ser Asn Asn Leu Leu Thr Asp Thr Val Phe Glu Asn Cys 355 360 365 Gly His Leu Thr Glu Leu Glu Thr Leu Ile Leu Gln Met Asn Gln Leu 370 375 380 Lys Glu Leu Ser Lys Ile Ala Glu Met Thr Thr Gln Met Lys Ser Leu 385 390 395 400 Gln Gln Leu Asp Ile Ala Ser Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly 405 410 415 Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn 420 425 430 Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu 435 440 445 Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser 450 455 460 Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 465 470 475 <210> 116 <211> 522 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT1V_7 <400> 116 Met Thr Ser Ile Phe His Phe Ala Ile Ile Phe Met Leu Ile Leu Gln 1 5 10 15 Ile Arg Ile Gln Leu Ser Glu Glu Ser Glu Phe Leu Val Asp Arg Ser 20 25 30 Lys Asn Gly Leu Ile His Val Pro Lys Asp Leu Ser Gln Lys Thr Thr 35 40 45 Ile Leu Asn Ile Ser Gln Asn Tyr Ile Ser Glu Leu Trp Thr Ser Asp 50 55 60 Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Ile Leu Ile Ile Ser His Asn Arg 65 70 75 80 Ile Gln Tyr Leu Asp Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Gln Glu Leu Glu 85 90 95 Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Lys Leu Val Lys Ile Ser Cys His Pro 100 105 110 Thr Val Asn Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala Phe Asp Ala 115 120 125 Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu Lys Phe Leu 130 135 140 Gly Leu Ser Thr Thr His Leu Glu Lys Ser Ser Val Leu Pro Ile Ala 145 150 155 160 His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Glu Thr Tyr Gly 165 170 175 Glu Lys Glu Asp Pro Glu Gly Leu Gln Asp Phe Asn Thr Glu Ser Leu 180 185 190 His Ile Val Phe Pro Thr Asn Lys Glu Phe His Phe Ile Leu Asp Val 195 200 205 Ser Val Lys Thr Val Ala Asn Leu Glu Leu Ser Asn Ile Lys Cys Val 210 215 220 Leu Glu Asp Asn Lys Cys Ser Tyr Phe Leu Ser Ile Leu Ala Lys Leu 225 230 235 240 Gln Thr Asn Pro Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn Ile Glu Thr 245 250 255 Thr Trp Asn Ser Phe Ile Arg Ile Leu Gln Leu Val Trp His Thr Thr 260 265 270 Val Trp Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly Gln Leu Asp 275 280 285 Phe Arg Asp Phe Asp Tyr Ser Gly Thr Ser Leu Lys Ala Leu Ser Ile 290 295 300 His Gln Val Val Ser Asp Val Phe Gly Phe Pro Gln Ser Tyr Ile Tyr 305 310 315 320 Glu Ile Phe Ser Asn Met Asn Ile Lys Asn Phe Thr Val Ser Gly Thr 325 330 335 Arg Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Lys Ile Ser Pro Phe Leu His 340 345 350 Leu Asp Phe Ser Asn Asn Leu Leu Thr Asp Thr Val Phe Glu Asn Cys 355 360 365 Gly His Leu Thr Glu Leu Glu Thr Leu Ile Leu Gln Met Asn Gln Leu 370 375 380 Lys Glu Leu Ser Lys Ile Ala Glu Met Thr Thr Gln Met Lys Ser Leu 385 390 395 400 Gln Gln Leu Asp Ile Ser Gln Asn Ser Val Ser Tyr Asp Glu Lys Lys 405 410 415 Gly Asp Cys Ser Trp Thr Lys Ser Leu Leu Ser Leu Asn Met Ser Ser 420 425 430 Asn Ile Leu Thr Asp Thr Ile Phe Arg Cys Leu Pro Pro Arg Ile Lys 435 440 445 Val Leu Asp Leu Ala Ser Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile 450 455 460 Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro 465 470 475 480 Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn 485 490 495 Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly 500 505 510 Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 515 520 <210> 117 <211> 545 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT1V_8 <400> 117 Met Thr Ser Ile Phe His Phe Ala Ile Ile Phe Met Leu Ile Leu Gln 1 5 10 15 Ile Arg Ile Gln Leu Ser Glu Glu Ser Glu Phe Leu Val Asp Arg Ser 20 25 30 Lys Asn Gly Leu Ile His Val Pro Lys Asp Leu Ser Gln Lys Thr Thr 35 40 45 Ile Leu Asn Ile Ser Gln Asn Tyr Ile Ser Glu Leu Trp Thr Ser Asp 50 55 60 Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Ile Leu Ile Ile Ser His Asn Arg 65 70 75 80 Ile Gln Tyr Leu Asp Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Gln Glu Leu Glu 85 90 95 Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Lys Leu Val Lys Ile Ser Cys His Pro 100 105 110 Thr Val Asn Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala Phe Asp Ala 115 120 125 Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu Lys Phe Leu 130 135 140 Gly Leu Ser Thr Thr His Leu Glu Lys Ser Ser Val Leu Pro Ile Ala 145 150 155 160 His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Glu Thr Tyr Gly 165 170 175 Glu Lys Glu Asp Pro Glu Gly Leu Gln Asp Phe Asn Thr Glu Ser Leu 180 185 190 His Ile Val Phe Pro Thr Asn Lys Glu Phe His Phe Ile Leu Asp Val 195 200 205 Ser Val Lys Thr Val Ala Asn Leu Glu Leu Ser Asn Ile Lys Cys Val 210 215 220 Leu Glu Asp Asn Lys Cys Ser Tyr Phe Leu Ser Ile Leu Ala Lys Leu 225 230 235 240 Gln Thr Asn Pro Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn Ile Glu Thr 245 250 255 Thr Trp Asn Ser Phe Ile Arg Ile Leu Gln Leu Val Trp His Thr Thr 260 265 270 Val Trp Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly Gln Leu Asp 275 280 285 Phe Arg Asp Phe Asp Tyr Ser Gly Thr Ser Leu Lys Ala Leu Ser Ile 290 295 300 His Gln Val Val Ser Asp Val Phe Gly Phe Pro Gln Ser Tyr Ile Tyr 305 310 315 320 Glu Ile Phe Ser Asn Met Asn Ile Lys Asn Phe Thr Val Ser Gly Thr 325 330 335 Arg Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Lys Ile Ser Pro Phe Leu His 340 345 350 Leu Asp Phe Ser Asn Asn Leu Leu Thr Asp Thr Val Phe Glu Asn Cys 355 360 365 Gly His Leu Thr Glu Leu Glu Thr Leu Ile Leu Gln Met Asn Gln Leu 370 375 380 Lys Glu Leu Ser Lys Ile Ala Glu Met Thr Thr Gln Met Lys Ser Leu 385 390 395 400 Gln Gln Leu Asp Ile Ser Gln Asn Ser Val Ser Tyr Asp Glu Lys Lys 405 410 415 Gly Asp Cys Ser Trp Thr Lys Ser Leu Leu Ser Leu Asn Met Ser Ser 420 425 430 Asn Ile Leu Thr Asp Thr Ile Phe Arg Cys Leu Pro Pro Arg Ile Lys 435 440 445 Val Leu Asp Leu His Ser Asn Lys Ile Lys Ser Ile Pro Lys Gln Val 450 455 460 Val Lys Leu Glu Ala Leu Gln Glu Leu Asn Val Ala Ser Asn Gln Leu 465 470 475 480 Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg Leu Thr Ser Leu Gln Lys 485 490 495 Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys Ser Cys Pro Arg Ile Asp 500 505 510 Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser Gln Lys Glu Gln Gly Ser 515 520 525 Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val Arg Ser Ile Ile Cys Pro 530 535 540 Thr 545 <210> 118 <211> 567 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> hybrid protein for hT1V_9 <400> 118 Met Thr Ser Ile Phe His Phe Ala Ile Ile Phe Met Leu Ile Leu Gln 1 5 10 15 Ile Arg Ile Gln Leu Ser Glu Glu Ser Glu Phe Leu Val Asp Arg Ser 20 25 30 Lys Asn Gly Leu Ile His Val Pro Lys Asp Leu Ser Gln Lys Thr Thr 35 40 45 Ile Leu Asn Ile Ser Gln Asn Tyr Ile Ser Glu Leu Trp Thr Ser Asp 50 55 60 Ile Leu Ser Leu Ser Lys Leu Arg Ile Leu Ile Ile Ser His Asn Arg 65 70 75 80 Ile Gln Tyr Leu Asp Ile Ser Val Phe Lys Phe Asn Gln Glu Leu Glu 85 90 95 Tyr Leu Asp Leu Ser His Asn Lys Leu Val Lys Ile Ser Cys His Pro 100 105 110 Thr Val Asn Leu Lys His Leu Asp Leu Ser Phe Asn Ala Phe Asp Ala 115 120 125 Leu Pro Ile Cys Lys Glu Phe Gly Asn Met Ser Gln Leu Lys Phe Leu 130 135 140 Gly Leu Ser Thr Thr His Leu Glu Lys Ser Ser Val Leu Pro Ile Ala 145 150 155 160 His Leu Asn Ile Ser Lys Val Leu Leu Val Leu Gly Glu Thr Tyr Gly 165 170 175 Glu Lys Glu Asp Pro Glu Gly Leu Gln Asp Phe Asn Thr Glu Ser Leu 180 185 190 His Ile Val Phe Pro Thr Asn Lys Glu Phe His Phe Ile Leu Asp Val 195 200 205 Ser Val Lys Thr Val Ala Asn Leu Glu Leu Ser Asn Ile Lys Cys Val 210 215 220 Leu Glu Asp Asn Lys Cys Ser Tyr Phe Leu Ser Ile Leu Ala Lys Leu 225 230 235 240 Gln Thr Asn Pro Lys Leu Ser Asn Leu Thr Leu Asn Asn Ile Glu Thr 245 250 255 Thr Trp Asn Ser Phe Ile Arg Ile Leu Gln Leu Val Trp His Thr Thr 260 265 270 Val Trp Tyr Phe Ser Ile Ser Asn Val Lys Leu Gln Gly Gln Leu Asp 275 280 285 Phe Arg Asp Phe Asp Tyr Ser Gly Thr Ser Leu Lys Ala Leu Ser Ile 290 295 300 His Gln Val Val Ser Asp Val Phe Gly Phe Pro Gln Ser Tyr Ile Tyr 305 310 315 320 Glu Ile Phe Ser Asn Met Asn Ile Lys Asn Phe Thr Val Ser Gly Thr 325 330 335 Arg Met Val His Met Leu Cys Pro Ser Lys Ile Ser Pro Phe Leu His 340 345 350 Leu Asp Phe Ser Asn Asn Leu Leu Thr Asp Thr Val Phe Glu Asn Cys 355 360 365 Gly His Leu Thr Glu Leu Glu Thr Leu Ile Leu Gln Met Asn Gln Leu 370 375 380 Lys Glu Leu Ser Lys Ile Ala Glu Met Thr Thr Gln Met Lys Ser Leu 385 390 395 400 Gln Gln Leu Asp Ile Ser Gln Asn Ser Val Ser Tyr Asp Glu Lys Lys 405 410 415 Gly Asp Cys Ser Trp Thr Lys Ser Leu Leu Ser Leu Asn Met Ser Ser 420 425 430 Asn Ile Leu Thr Asp Thr Ile Phe Arg Cys Leu Pro Pro Arg Ile Lys 435 440 445 Val Leu Asp Leu His Ser Asn Lys Ile Lys Ser Ile Pro Lys Gln Val 450 455 460 Val Lys Leu Glu Ala Leu Gln Glu Leu Asn Val Ala Phe Asn Ser Leu 465 470 475 480 Thr Asp Leu Pro Gly Cys Gly Ser Phe Ser Ser Leu Ser Val Leu Ile 485 490 495 Ile Ala Ser Asn Gln Leu Lys Ser Val Pro Asp Gly Ile Phe Asp Arg 500 505 510 Leu Thr Ser Leu Gln Lys Ile Trp Leu His Thr Asn Pro Trp Asp Cys 515 520 525 Ser Cys Pro Arg Ile Asp Tyr Leu Ser Arg Trp Leu Asn Lys Asn Ser 530 535 540 Gln Lys Glu Gln Gly Ser Ala Lys Cys Ser Gly Ser Gly Lys Pro Val 545 550 555 560 Arg Ser Ile Ile Cys Pro Thr 565

Claims (9)

  1. 하기와 같은 특징적인 공통 서열 위치에서 융합시키는 것을 특징으로 하는 LRR (Leucine Rich Repeats) 패밀리 단백질간의 융합방법.
    LxxLxxLxLxxN
    [여기서, L은 알라딘, 글리신, 패닐알라닌, 티로신, 루이신, 이소루이신, 발린 또는 트립토판; N은 아스파라진, 글루타민, 세린, 시스테인 또는 트레오닌, X는 임의의 아미노산]
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 LRR 패밀리 단백질은 톨유사수용체(TLR) 단백질에서 선택되는 것을 특징으로 하는 LRR 패밀리 단백질간의 융합방법.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 LRR 패밀리 단백질은 결정성이 높은 LRR 패밀리 단백질인 것을 특징으로 하는 LRR 패밀리 단백질간의 융합방법.
  4. 제 3 항에 있어서,
    상기 LRR 패밀리 단백질은 가변 임파구 수용체(VLR) 단백질에서 선택되는 것을 특징으로 하는 LRR 패밀리 단백질간의 융합방법.
  5. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항의 융합방법에 의한 융합단백질.
  6. 제 6 항의 융합단백질을 암호화하는 핵산 분자.
  7. (A) 제5항의 융합단백질 및 제5항의 융합단백질을 이루는 구성 LRR 패밀리 단백질 중 어느 하나를 각각 결정화하여 구조분석하는 단계; 및
    (B) 상기 융합단백질의 구조에서 상기 구성 LRR 단백질 단편의 구조를 제외하여 다른 구성 LRR 단백질의 구조를 얻는 단계;
    로 이루어지는 것을 특징으로 하는 LRR 단백질의 구조분석 방법.
  8. 제 7 항에 있어서,
    상기 구조분석은 X-선 회절 분석에 의해 이루어지는 것을 특징으로 하는 LRR 단백질의 구조분석 방법.
  9. 제 5 항의 융합단백질을 암호화하는 유전자 단편을 포함하는 벡터.
KR1020080087160A 2007-09-04 2008-09-04 Ｌｒｒ 패밀리 단백질간의 융합방법 KR20090024648A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/KR2008/005220 WO2009031834A2 (en) 2007-09-04 2008-09-04 Hybridization method between leucine rich repeat family proteins

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US96991107P 2007-09-04 2007-09-04
USUS60969911 2007-09-04

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20090024648A true KR20090024648A (ko) 2009-03-09

Family

ID=40693443

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020080087160A KR20090024648A (ko) 2007-09-04 2008-09-04 Ｌｒｒ 패밀리 단백질간의 융합방법

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20090024648A (ko)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kim et al. Crystal structure of the TLR4-MD-2 complex with bound endotoxin antagonist Eritoran
Jin et al. Crystal structure of the TLR1-TLR2 heterodimer induced by binding of a tri-acylated lipopeptide
Kemler Classical cadherins
Kim et al. Crystal Structure of CD14 and Its Implications for Lipopolysaccharide Signaling*♦
Krzywda et al. The crystal structure of the AAA domain of the ATP-dependent protease FtsH of Escherichia coli at 1.5 Å resolution
Toth et al. Crystal structure of an ephrin ectodomain
Cosmanescu et al. Neuron-subtype-specific expression, interaction affinities, and specificity determinants of DIP/Dpr cell recognition proteins
Barak et al. Structural principles in Robo activation and auto-inhibition
Haynes et al. The Drosophila fsh locus, a maternal effect homeotic gene, encodes apparent membrane proteins
Bitra et al. Crystal structures of the human 4-1BB receptor bound to its ligand 4-1BBL reveal covalent receptor dimerization as a potential signaling amplifier
Kusano et al. Structural basis of interleukin‐5 dimer recognition by its α receptor
Wang et al. Structure determination of Cucumber green mottle mosaic virus by X-ray fiber diffraction: significance for the evolution of tobamoviruses
JPH05508308A (ja) 血小板細胞付着分子とその変種
Li et al. Structurally distinct recognition motifs in lymphotoxin-β receptor and CD40 for tumor necrosis factor receptor-associated factor (TRAF)-mediated signaling
Kelker et al. Crystal structure of mouse triggering receptor expressed on myeloid cells 1 (TREM-1) at 1.76 Å
Bonchuk et al. Structural insights into highly similar spatial organization of zinc-finger associated domains with a very low sequence similarity
CN109627316A (zh) 草鱼IFN-γ2基因及其编码的重组蛋白和应用
KR20090024648A (ko) Ｌｒｒ 패밀리 단백질간의 융합방법
Jasti et al. Crystal structure of echicetin from Echis carinatus (Indian saw-scaled viper) at 2.4 Å resolution
WO2009031834A2 (en) Hybridization method between leucine rich repeat family proteins
US20030027258A1 (en) Methods and compositions for pearl oyster cultivation
Morlot et al. Production of Slit2 LRR domains in mammalian cells for structural studies and the structure of human Slit2 domain 3
US9403893B2 (en) Avian colony stimulating factor 1 receptor binding proteins
Tarnawski et al. Structure of the RuBisCO chaperone RbcX from the thermophilic cyanobacterium Thermosynechococcus elongatus
Nagae et al. Structure of the F-spondin reeler domain reveals a unique β-sandwich fold with a deformable disulfide-bonded loop

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application