KR20080100095A - Cosmetic composition for improving the acne containing lactobacillus rhamnosus or its culture medium as active ingredient - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 여드름 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 락토바실러스 람노서스 유산균주 또는 이의 배양액을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for improving acne, and more particularly to a cosmetic composition containing Lactobacillus rhamnosus lactic acid strain or its culture solution.
여드름의 발생은 우리의 인체 호르몬 중 남성 호르몬인 테스토스테론의 이상 작용에서부터 시작되는데, 이 테스토스테론은 혈액을 타고 피부에 있는 피지선으로 흘러들어가 기름의 생산을 촉진시켜, 과도하게 분비된 이 기름이 피지 모공 안을 가득 채우게 된다. 이 때 기름의 과도한 생산과 더불어 모공 입구에서는 과각화 현상이 촉진되어 모공의 입구가 더욱 좁혀지거나 막히게 되는데, 이러한 현상으로 인해 모공 안을 가득 채우고 있는 기름들은 밖으로의 흐름을 멈추고 모공 안에 갇혀 정체되는데 이 갇힌 기름 덩어리들과 다른 불순물들이 서로 엉켜 여드름 덩어리(Comedo)를 이루게 된다. 모공 안에 정체되어 있는 기름의 양이 많아지면, 박테 리아들, 특히 프로피오니박테리움 아크네스( Propionibacterium acnes )가 활동하게 되는데, 이 박테리아가 기름 성분들을 탐식하고 난 후 생긴 부산물인 자유지방산이 모공 안을 심하게 자극하면서 염증을 유발시킨다.The development of acne begins with the abnormal action of testosterone, the male hormone of our human hormones, which flows into the sebaceous glands of the skin and promotes the production of oil, which is excreted in the sebum pores. Filled up. At this time, with excessive production of oil, the inlet of pores is accelerated, and the pores of the pores are narrowed or blocked, which causes the oil that fills the pores to stop flowing out and become trapped in the pores. Lumps and other impurities entangle each other to form a pimple. As the amount of oil stagnated in the pores increases, the bacteria, especially Propionibacterium acnes, are active, and free fatty acids, a by-product of the bacteria's devouring of the oil components, enter the pores. Severe irritation causes inflammation.
일반적으로, 세균에 의한 여드름이나 염증과 같은 피부질환의 임상치료에 있어서, 에리스로마이신(erythromycin), 테트라사이클린(tetracycline), 신다마이신(cindamycine)과 같은 항균물질들이 주로 사용되어 왔다. 그러나 이러한 항균물질은 장기간 사용 시 여드름 원인균이 항생물질에 대하여 내성을 가지게 되고, 광과민작용 등의 부작용을 일으키는 등의 많은 문제점을 야기해 왔다. 게다가 여드름 원인균인 프로피오니 박테리움 아크네스는 인공적인 배양이 어렵기 때문에, 적절한 약제를 선정하는 것이 곤란하였다. 게다가 항생물질이 주가 되는 약제는 화장품으로서의 이용이 불가능하다는 문제가 있었다.In general, in the clinical treatment of skin diseases such as acne and inflammation caused by bacteria, antibacterial substances such as erythromycin, tetracycline, and sindamycine have been mainly used. However, these antimicrobial agents have caused many problems such as acne causing bacteria have long-term resistance to antibiotics, causing side effects such as photosensitivity. In addition, propioni bacterium acnes, the cause of acne, was difficult to artificially cultivate, making it difficult to select an appropriate drug. In addition, there was a problem that antibiotics were mainly used as cosmetics.
미생물이 생산하는 항균물질은 광범위한 미생물에 대한 저해능력을 가지면서 고등생물에 대한 선택 독성이 낮다. 따라서 피부질환 치료를 위하여 항균활성을 가진 유산균의 대사산물을 이용하는 방법이 모색되고 있다. 유산균의 대사산물은 인체에 무해하며 인체에서 분비되는 단백질 분해효소에 의해 쉽게 분해 되므로 잔류성이 없는 장점이 있다. 그러나 유산균 대사산물을 얻기 위한 공정에 있어 사용 기질의 단가가 높고, 대사산물의 분리 정제에 높은 비용이 소요되는 단점이 있다.The antimicrobial substances produced by microorganisms have the ability to inhibit a wide range of microorganisms and have low selective toxicity to higher organisms. Therefore, a method of using a metabolite of lactic acid bacteria having antimicrobial activity for the treatment of skin diseases has been sought. Metabolites of lactic acid bacteria are harmless to the human body and are easily decomposed by protease secreted from the human body. However, in the process for obtaining lactic acid bacteria metabolites, there is a disadvantage that the cost of the substrate used is high, and high cost is required for the separation and purification of metabolites.
*최근, 일본특개 2003-259860호는 락토코카스 락티스 및 이를 이용한 항균 배양액이 함유된 화장료 조성물을 기재하고 있고, 대한민국 특허 제 0536522 호는 엔테로코커스 파시에움 및 이를 이용한 박테리오신이 함유된 화장료 조성물을 기재하고 있어 유산균 및 이의 배양액을 화장료 조성물로 개발하고 있는 실정이다.* Recently, Japanese Patent Laid-Open No. 2003-259860 describes a cosmetic composition containing Lactococcus lactis and an antimicrobial culture solution using the same, and Korean Patent No. 0536522 discloses a cosmetic composition containing Enterococcus fascium and a bacteriocin using the same. It is described that the situation is developing lactic acid bacteria and its culture solution as a cosmetic composition.
이에 본 발명자들은 종래의 여드름용 화장료 조성물의 문제점을 극복하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 락토바실러스 람노서스 스트레인 또는 이의 배양액을 함유하는 조성물이 여드름과 같은 염증성 피부질환 화장료로서 효능이 우수하고, 피부자극이 없고, 보습효과가 탁월한 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, the present inventors have made intensive studies to overcome the problems of conventional cosmetic compositions for acne, and as a result, the composition containing Lactobacillus rhamnosus strain or its culture solution is excellent as an inflammatory skin disease cosmetic such as acne, and skin irritation is The present invention was completed by confirming that the moisturizing effect was excellent.
따라서, 본 발명의 목적은 락토바실러스 람노서스 유산균주 또는 이의 배양액을 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.Accordingly, an object of the present invention to provide a cosmetic composition for improving acne containing Lactobacillus rhamnosus lactic acid strain or a culture thereof.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위 의해 명확하게 된다.Other objects and advantages of the invention will be apparent from the following examples and claims.
본 발명은 락토바실러스 람노서스 유산균주 또는 이의 배양액을 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition for improving acne containing Lactobacillus rhamnosus lactic acid strain or a culture thereof.
이하 본 발명을 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
상기의 목적을 달성하기 위해 본 발명의 화장료 조성물은 유효성분으로서 락토바실러스 람노서스 유산균주 또는 락토바실러스 람노서스 유산균주를 배양한 배양액을 화장료 조성물에 첨가한다.In order to achieve the above object, the cosmetic composition of the present invention is added to the cosmetic composition culture medium cultured Lactobacillus rhamnosus lactic acid strain or Lactobacillus rhamnosus lactic acid strain as an active ingredient.
상기 배양액은 일반적인 미생물 균주 배양배지에서 락토바실러스 람노서스 유산균주를 배양하여 얻을 수 있다. 또한 상기 배양액은 락토바실러스 람노서스 유산균주를 배양한 배양액을 원심분리하여 유산균주를 제거한 배양액 또는 유산균주를 포함한 배양액을 모두 사용할 수 있다.The culture solution can be obtained by culturing Lactobacillus rhamnosus lactic acid strain in a general microbial strain culture medium. In addition, the culture medium may be used for all culture medium including the culture medium or the lactic acid bacteria cultured to remove the lactic acid strain by centrifuging the culture medium cultured Lactobacillus rhamnosus lactic acid strain.
본 발명에서 사용한 락토바실러스 람노서스 유산균주는 락토바실러스 람노서스 스트레인 모두를 포함하며, 바람직하게는, 락토바실러스 람노서스 스트레인 PL60(L. rhamnosus Strain PL6O)이다. 또한 락토바실러스 람노서스 유산균주는 생균, 건조균 또는 사균 모두 사용할 수 있다.Lactobacillus rhamnosus strains used in the present invention include all of the Lactobacillus rhamnosus strain, preferably, Lactobacillus rhamnosus strain PL60 (L. rhamnosus Strain PL6O). In addition, Lactobacillus rhamnosus lactic acid strains can be used both live, dry or dead bacteria.
본 발명의 화장료 조성물은 여드름 원인균의 생육을 저해하여 여드름발생을 억제할 수 있으며, 여드름 원인균에 대한 항균기능을 가진다. 상기에서 여드름 원인균은 예컨대, 프로피오니박테리움 아크네스를 포함한다.The cosmetic composition of the present invention may inhibit the growth of acne causing bacteria and inhibit the occurrence of acne, and has an antibacterial function against acne causing bacteria. Acne causing bacteria in the above include, for example, Propionibacterium acnes.
상기 유산균주 락토바실러스 람노서스 스트레인 PL6O(L. rhamnosus Strain PL6O)은 2005년 5월 12일자로 한국미생물보존센터에 KCCM-10654P로 국제기탁 되었다.The Lactobacillus Lactobacillus rhamnosus strain PL6O (L. rhamnosus Strain PL6O) was internationally deposited as KCCM-10654P at the Korea Microbiological Conservation Center on May 12, 2005.
본 발명의 락토바실러스 람노서스 유산균주 또는 이의 배양액의 함량은 화장료 조성물의 총중량에 대하여 0.00001 중량 % 내지 50 중량%이며, 바람직하게는 0.001 내지 10 중량%이다.The content of Lactobacillus rhamnosus lactic acid strain or culture medium thereof of the present invention is 0.00001% to 50% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition, preferably 0.001 to 10% by weight.
본 발명의 화장료 조성물이 락토바실러스 람노서스 유산균주를 유효성분으로 포함할 경우는, 건조중량 1× 104 - 1× 1011 CFU/g의 유산균주를 화장료 조성물 총중량에 대하여 0.00001 내지 50.0중량%로 포함하며, 바람직하게는 상기 건조중량의 유산균주를 0.001 내지 10 중량%로 포함한다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물이 락토바실러스 람노서스 유산균주의 배양액을 유효성분으로 포함할 경우는, 상기 유산균주를 컨플루트하게 배양한 상태에서의 배양액을 0.00001 내지 50.0 중량%로 포함하며, 바람직하게는 0.001 내지 10 중량%로 포함한다.When the cosmetic composition of the present invention contains Lactobacillus rhamnosus lactic acid strain as an active ingredient, lactic acid strain of dry weight of 1 × 10 4-1 × 10 11 CFU / g to 0.00001 to 50.0% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition It includes, preferably contains the dry weight of the lactic acid strain 0.001 to 10% by weight. In addition, when the cosmetic composition of the present invention comprises a culture solution of Lactobacillus rhamnosus lactobacillus as an active ingredient, the culture solution in a state in which the lactic acid strain is incubated in a confluence state, preferably 0.00001 to 50.0% by weight, 0.001 to 10% by weight.
이때 화장료 조성물에 유산균주 또는 배양액이 상기 최소 함량 미만일 경우에는 뚜렷한 효과를 기대할 수 없고, 상기 최대함량을 초과하는 경우에는 여드름 피부 개선 효과가 더 이상 증가하지 않고 피부에 자극을 유발할 가능성이 높으며 제형의 안정화에도 큰 영향을 미친다.At this time, when the lactic acid strain or culture medium in the cosmetic composition is less than the minimum content, no obvious effect can be expected, and when the maximum content is exceeded, the acne skin improvement effect does not increase any more and is likely to cause irritation to the skin. It also has a big impact on stabilization.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 피부 여드름 생성을 억제하고, 화장료 자체의 안정성이 우수하고, 생합성에 의한 제조물이므로 피부자극이나 기타 부작용도 없어 안전하며 보습효과가 우수한 장점 등이 있으며, 특정 성분에 한정되지 않는다. 또한, 상기 성분들 이외에도 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.Ingredients contained in the cosmetic composition of the present invention inhibits the formation of skin acne, excellent stability of the cosmetic itself, and is a product by biosynthesis, there is no skin irritation or other side effects, it is safe and has an excellent moisturizing effect, etc. It is not limited to. In addition to the above components, it may also include components conventionally used in cosmetic compositions, and include conventional auxiliaries such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavors, and carriers.
본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으 로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 사용될 때에는 화장수, 에멀젼, 크림, 에센스, 젤, 팩 및 클렌징크림으로부터 선택되는 기초 화장료; 화운데이션 등의 메이크업 화장료로 구성되는 군으로부터 선택되는 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing It may be formulated as, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray, but is not limited thereto. More specifically, when the composition of the present invention is used as a cosmetic composition, a basic cosmetic selected from lotion, emulsion, cream, essence, gel, pack and cleansing cream; It may be prepared in a formulation selected from the group consisting of makeup cosmetics such as foundation.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oils, vegetable oils, waxes, paraffins, starches, trachants, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc oxide may be used as carrier components. Can be.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, in particular in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane Propellant such as butane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 Fatty acid esters of, 3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로 필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, liquid carrier diluents such as water, ethanol or propylene glycol, suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters, Crystalline cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, the carrier component is aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide. Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only for illustrating the present invention in more detail, it will be apparent to those skilled in the art that the scope of the present invention is not limited by these examples in accordance with the gist of the present invention. .
실험예Experimental Example 1: One: 락토바실러스Lactobacillus 람노서스Rhamnosus 균체 및 이의 배양액 준비 Cells and Culture Media Preparation
현미 10.0중량%, 트립톤 1.0중량%, 효모추출물 0.2중량%, 트윈80 0.1중량% 및 증류수로 제조한 배양 배지 1ℓ에 락토바실러스 람노서스 스트레인 PL60(KCCM- 10654P) 균주 각각 1× 106 cfu/㎖를 접종하여 24시간 배양하여 배양액을 얻었다. 얻어진 락토바실러스 람노서스 균주 배양액을 5,000 × g에서 30분간 원심 분리하여 균체 및 배양액을 분리하고, 균체는 동결건조하여 분말화하였다.1 × 10 6 cfu / l each of Lactobacillus rhamnosus strain PL60 (KCCM-10654P) strains in 1 L of culture medium prepared with 10.0 wt% brown rice, 1.0 wt% tryptone, 0.2 wt% yeast extract, 0.1 wt% Tween 80 and distilled water Inoculated with ㎖ incubated for 24 hours to obtain a culture. The obtained Lactobacillus rhamnosus strain culture solution was centrifuged at 5,000 x g for 30 minutes to separate cells and culture medium, and the cells were lyophilized and powdered.
실험예 2: 락토바실러스 람노서스 PL60 및 이의 배양액의 함량에 따른 여드름 균주의 생장저해효과 Experimental Example 2: Lactobacillus Rhamnosus Growth Inhibition Effect of Acne Strains According to the Content of PL60 and Its Culture Solution
실험예 1에서 얻은 락토바실러스 람노서스 PL60 균주의 균체분말 및 배양액 을 이용하여 함량에 따른 여드름균주에 대한 생장저해효과를 실험하였다.Growth inhibitory effect on the acne strains was tested using the cell powder and culture medium of the Lactobacillus rhamnosus PL60 strain obtained in Experimental Example 1.
여드름균주에 대한 생장저해 실험은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acne, ATCC 6919)를 여드름 원인균으로 사용하고, 락토바실러스 람노서스 균체 및 배양액은 0.001%, 0.01% 및 0.1%로 각각 희석하여 페이퍼 디스크 방법(Paper disk method)으로 실험을 수행하였다. 이를 상세히 기술하면, 우선, 2%의 RCM 배지(Reinforced clostridial medium, Difco)를 만들어 87 X 15 mm 페트리디쉬(녹십자)에 넣어 고체배지를 만들고, 프로피오니박테리움 아크네스 1× 106 세포를 도말한 후 페이퍼 디스크(8mm)를 올려놓고, 디스크에 락토바실러스 균체 및 배양액 희석액 을 50μl씩 접종하였다. 접종한 고체배지를 혐기성 배양기에 넣고 37℃에서 4일간 배양한 후 투명 저지환(clear zone)을 관찰하였으며, 그 결과를 표 1에 나타내었다.Growth inhibition experiment on acne strains was performed using Propionibacterium acne (ATCC 6919) as the cause of acne, and Lactobacillus rhamnosus cells and cultures were diluted to 0.001%, 0.01% and 0.1%, respectively. The experiment was carried out by the paper disk method. To describe this in detail, first, 2% RCM medium (Reinforced clostridial medium, Difco) was prepared and placed in 87 x 15 mm Petri dish (green cross) to make a solid medium, and propionibacterium acnes 1 × 10 6 cells were smeared. After that, the paper disk (8mm) was put on, and the disk was inoculated with 50 μl of Lactobacillus cells and dilutions of the culture solution. The inoculated solid medium was placed in an anaerobic incubator and incubated at 37 ° C. for 4 days, and then the clear zone was observed. The results are shown in Table 1.
상기 표 1의 결과에서 알 수 있듯이, 락토바실러스 람노서스 PL60 균체분말 및 배양액 모두 여드름 원인균에 대해 생장 억제 효과가 나타났으며, 균체 분말의 효과가 더 높게 나타났으며, 균체 분말 및 배양액 모두에서 농도 의존적으로 생장저해 효과를 나타내었다.As can be seen from the results of Table 1, both Lactobacillus rhamnosus PL60 cell powder and culture medium showed growth inhibition effect against the acne-causing bacteria, the effect of the cell powder was higher, the concentration in both the cell powder and culture medium Dependent on the growth inhibition effect.
실험예 3: 락토바실러스 람노서스 균체 및 배양액을 함유하는 화장료 제형의 온도변화 안정성 시험 Experimental Example 3: Lactobacillus Temperature Change Stability Test of Cosmetic Formulations Containing Rhamnosus Cells and Cultures
본 발명의 화장료 제형의 온도 변화에 따른 안정성을 시험하기 위하여 동종업계에서 보편적으로 사용되는 조성을 이용하여 표 2의 조성에 따라, 실험예 1의 락토바실러스 람노서스 스트레인 PL60 균체분말 또는 배양액을 함유한 제형들을 제조하였다.Formulation containing Lactobacillus rhamnosus strain PL60 cell powder or culture medium of Experimental Example 1 according to the composition of Table 2 using the composition commonly used in the industry to test the stability according to the temperature change of the cosmetic formulation of the present invention Were prepared.
본 발명의 락토바실러스 람노서스 균체를 함유한 제형예 1, 2, 3 및 락토바실러스 람노서스 균주배양액을 함유한 제형예 4, 5, 6을 대조예 1 및 비교예1와 함께 초자 용기에 각각 담아 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 1주 동안 보관하고, 또한 불투명 초자 용기에 담아 4℃로 일정하게 유지되고 완전히 차광된 냉장고 내에서 1주 동안 보관한 후 변색 정도를 표 3에 따라 비교 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.Formulation Examples 1, 2, and 3 containing Lactobacillus rhamnosus cells of the present invention, and Formulation Examples 4, 5, and 6, containing Lactobacillus rhamnosus strain culture solution, together with Control Example 1 and Comparative Example 1, were placed in a vial container. After storage for 1 week in a constant temperature bath at 45 ℃, also kept in an opaque glass jar at a constant 4 ℃ and stored in a completely shaded refrigerator for 1 week, the degree of discoloration was measured according to Table 3 The results are shown in Table 4 below.
상기 표 4의 결과에서 알 수 있듯이, 락토바실러스 람노서스 균체를 50.0% 함유한 제형예 3를 제외한 제형예 1, 2 및 제형예 4, 5, 6에서 제형이 변색되지 않아 락토바실러스를 균체를 50.0% 미만으로 함유한 제형의 안정성이 우수함을 알 수 있었다.As can be seen from the results of Table 4, the formulations did not discolor in Formulations 1 and 2 and Formulation Examples 4, 5 and 6, except for Formulation Example 3 containing 50.0% of the Lactobacillus rhamnosus bacteria cells 50.0 Lactobacillus cells 50.0 It was found that the stability of the formulation containing less than% is excellent.
실험예 4: 락토바실러스 람노서스 균체 또는 배양액을 함유하는 제형의 인체 안전성 시험 Experimental Example 4: Lactobacillus Human safety testing of formulations containing Rhamnosus cells or cultures
과거력상 피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며, 현재 피부병 내지 피부 알레르기 증상이 없는 20-30대 여성 40명을 대상으로 상기 실험예 3(표 2 참조)의 락토바실러스 람노서스 균체를 5.0 중량%로 함유한 제형예 1 및 락토바실러스 람노서스 배양액을 5.0 중량%로 함유한 제형예 4의 화장료의 피부 안전성을 인체 피부 첩포시험을 통하여 확인하였다. 비교를 위하여 에리스로마이신 0.2 중량%로 함유한 비교예 1 및 아무것도 넣지 않은 대조예 1을 함께 시험을 실시하였다.The Lactobacillus rhamnosus bacterium of Experimental Example 3 (see Table 2) was 5.0 wt% in 40 women in their 20s and 30s who had no hypersensitivity to skin irritation due to past history and had no skin disease or skin allergy symptoms. The skin safety of the cosmetic formulation of Formulation Example 1 containing Formulation Example 4 containing 5.0% by weight of Lactobacillus rhamnosus culture solution was confirmed by a human skin patch test. For comparison, Comparative Example 1 containing 0.2% by weight of erythromycin and Control Example 1 containing nothing were tested together.
우선 시험부위를 70% 에탄올로 닦아낸 뒤 건조시킨 뒤, 준비된 시험물질을 15 ㎍씩 핀 쳄버 (Finn chamber, 100×10, EPITEST, 핀란드국) 내에 적하시킨 후 시험대상자의 전박 (forearm) 안쪽 부위에 밀폐첩포하였다. 24시간 동안 첩포하고 첩포를 제거한 후 표시펜으로 시험부위를 표시하였다. 각각 1시간 그리고 24시간 후(첩포 제거 후 1시간, 24시간 후 = 첩포 부착 포함 24시간, 48시간)에 확대경 (8MC-150, DAZOR, 미합중국)을 이용하여 시험 부위를 관찰하여 홍반 및 부종 유무를 관찰하였다.First, wipe the test area with 70% ethanol and dry it. Then, drop the prepared test substance into 15 μg of Fin chamber (Finn chamber, 100 × 10, EPITEST, Finland), and then inside the forearm of the subject. Airtightly wrapped. The patch was applied for 24 hours, the patch was removed, and the test site was marked with a marker pen. 1 hour and 24 hours after each removal (1 hour after removal, 24 hours = 24 hours, 48 hours including patch attachment) using a magnifying glass (8MC-150, DAZOR, United States) to observe the test site for erythema and edema Was observed.
피부반응은 국제접촉피부염연구회 (ICDRG: International Contact Dermatitis Research Group )의 규정(표 5 참조)에 따라 판정하였으며, 하기 수학식 1에 의하여 평균피부반응도를 계산하고 그 결과를 표 6에 나타내었다.The skin reaction was determined according to the regulations of the International Contact Dermatitis Research Group (ICDRG) (see Table 5), and the average skin reactivity was calculated by Equation 1 below and the results are shown in Table 6.
상기 표 6의 결과에서 알 수 있듯이, 0.2%의 에리스로마이신을 함유하는 비교예 1의 제형은 피부 안전성이 낮은 반면, 락토바실러스 람노서스 균체를 5.0 중량%를 함유하는 제형예 1 및 락토바실러스 람노서스 배양액을 5.0 중량%를 함유하는 제형예 4는 아무것도 넣지 않은 대조예 1의 결과와 동일한 정도의 피부반응도 값을 얻음으로써, 락토바실러스 람노서스 균체 및 배양액 5.0 중량%를 함유하는 모든 제형에서 피부 안전성이 매우 우수함을 알 수 있었다.As can be seen from the results of Table 6, the formulation of Comparative Example 1 containing 0.2% of erythromycin has low skin safety, while Formulation Example 1 and Lactobacillus rhamnosus containing 5.0% by weight of Lactobacillus rhamnosus cells Formulation Example 4 containing 5.0% by weight of the culture medium obtained the same skin reactivity value as that of Control Example 1, which contained nothing, thereby reducing skin safety in all formulations containing 5.0% by weight of Lactobacillus rhamnosus cells and culture medium. It was found to be very good.
실험예Experimental Example 7: 7: 락토바실러스Lactobacillus 균체를 함유하는 제형의 보습 효과 시험 Moisturizing effect test of formulation containing cells
건강한 20-30대 여성 80명을 대상으로, 상기 실험예 3(표 2)의 대조예 1, 비교예 1 및 본원발명인 락토바실러스 람노서스 균체 및 배양액을 각각 5.0 중량%로 함유한 제형예 1 및 제형예 4의 보습 효과를 측정하였다.Formulation Example 1 containing Comparative Example 1, Comparative Example 1 of the Experimental Example 3 (Table 2) and Lactobacillus rhamnosus cells and the culture medium of the present invention in a healthy 20-30-30 women in 5.0 wt% The moisturizing effect of Formulation Example 4 was measured.
각 조당 40명 씩 2개조로 나누어 각각 대조예 1, 비교예 1 및 제형예 1, 제형예 2의 제형을 주고, 매일 2회씩 1개월간 얼굴 및 전박부에 도포하게 하였다. 상기 화장료를 도포하기 바로 전에 항온, 항습 조건(21도, 습도 55%)에서 코네오미터 (corneometer; CM820 courage Khazaka electronic GmbH, Germany)를 이용하여 피부 전도도를 미리 측정하여 기본 값(0)을 삼고, 1주, 2주, 4주 경과 후 및 도포중지 후 2주 경과(6주 경과)후의 피부 수분양의 변화를 측정하여 객관적인 효과를 평가하였으며, 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.Each group was divided into two groups of 40 people, and the formulations of Comparative Example 1, Comparative Example 1, Formulation Example 1, and Formulation Example 2 were given, respectively, and applied to the face and forearm twice a day for 1 month. Immediately before applying the cosmetics, skin conductivity was measured in advance using a corneometer (CM820 courage Khazaka electronic GmbH, Germany) at constant temperature and humidity conditions (21 degrees, 55% humidity), and the default value (0) was used. The objective effect was evaluated by measuring the change in skin moisture after 1 week, 2 weeks, 4 weeks and 2 weeks after application stoppage (after 6 weeks), and the results are shown in Table 7 below.
상기 표 7의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 락토바실러스 람노서스 균체 및 배양액을 각각 5.0 중량%를 함유하는 제형예 1 및 제형예 4는 아무것도 넣지 않은 대조예 1 및 에리스로마이신 0.2%를 함유한 비교예 1에 비해 피부 피부보습효과가 훨씬 우수함을 알 수 있었다.As can be seen from the results of Table 7, Formulation Example 1 and Formulation Example 4 containing 5.0% by weight of the Lactobacillus rhamnosus cells and the culture medium of the present invention, respectively, containing Comparative Example 1 and erythromycin containing 0.2% Compared with Comparative Example 1, it was found that the skin skin moisturizing effect is much superior.
본 발명에 의한 락토바실러스 균체 또는 이의 배양액을 함유하는 화장료는, 피부에 상재하여 여드름 유발에 관여하는 미생물 프로피오니박테리움 아크네스 및 세균의 생장을 억제함으로써 여드름 생성을 억제할 뿐만 아니라, 제형의 안정성이 우수하고, 피부 자극이 없으며, 뛰어난 보습효과를 나타낸다.The cosmetics containing the Lactobacillus cells or the culture medium thereof according to the present invention not only inhibit acne production by inhibiting the growth of microorganisms propionibacterium acnes and bacteria that are involved in acne causing skin, but also inhibit the stability of the formulation. It is excellent, has no skin irritation, and shows an excellent moisturizing effect.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.Having described the specific part of the present invention in detail, it is apparent to those skilled in the art that such a specific technology is only a preferred embodiment, and the scope of the present invention is not limited thereto. Therefore, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and equivalents thereof.
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