KR20080049504A - Functional oil including fucosterol useful for the improvement of blood circulation and control of hyperlipidemia - Google Patents
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Abstract
Description
도 1은 본 발명에 의해 고안된 퓨코스테롤 함유 기능성오일을 고지방식이와 함께 구강 투여한 실험동물(hamster)의 혈중 지질성분 조성을 나타낸 것으로서, 1 is a blood lipid composition of a test animal (hamster) orally administered with a high-fat diet fucosterol-containing functional oil devised by the present invention,
도 1a는 실험동물의 혈중 지질성분 중 트리글리세리드(triglyceride)의 조성을 나타낸 그래프이고, Figure 1a is a graph showing the composition of triglyceride (triglyceride) in the blood lipid component of the experimental animal,
도 1b는 실험동물의 혈중 지질성분 중 총 콜레스테롤(total choleserol)의 조성을 나타낸 그래프이고, Figure 1b is a graph showing the composition of total cholesterol (total choleserol) of blood lipid components of the experimental animal,
도 1c는 실험동물의 혈중 지질성분 중 HDL-콜레스테롤(HDL-choleserol)의 조성을 나타낸 그래프이고, Figure 1c is a graph showing the composition of HDL-cholesterol (HDL-choleserol) in the blood lipid components of the experimental animal,
도 1d는 실험동물의 혈중 지질성분 중 LDH-콜레스테롤(LDH-choleserol)의 조성을 나타낸 그래프이다. Figure 1d is a graph showing the composition of LDH-cholesterol (LDH-choleserol) in blood lipid components of experimental animals.
도 2는 본 발명에 의해 고안된 퓨코스테롤 함유 기능성오일을 고지방식이와 함께 구강 투여한 햄스터(Hamster)의 혈액 유동특성을 나타낸 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the blood flow characteristics of hamsters (Hamster) orally administered with a high fat diet of the fucosterol-containing functional oil devised by the present invention.
본 발명은 혈액의 유동성 증진 및 혈중 지질성분 개선효과가 있는 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일에 관한 것으로 보다 상세하게는 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일과 유지를 포함하여 혈액의 유동성 증진 및 혈중 지질성분 개선에 효과가 있어 혈류개선 및 고지혈증의 예방 및 치료에 사용할 수 있는 혈액의 유동성 증진 및 혈중 지질성분 개선효과가 있는 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일에 관한 것이다.The present invention relates to a functional oil containing fucosterol, which has an effect of improving blood flow and improving blood lipid components, and more specifically, improves blood flow, including fucosterol oil and fats and oils in which fucosterol is solubilized. The present invention relates to a functional oil containing fucosterol having an effect on improving blood lipid components and improving blood flow and improving blood lipid components, which can be used to improve blood flow and prevent and treat hyperlipidemia.
고지혈증(hyperlipidemia, 高脂血症)이란 혈액 중에 지질성분이 이상 수준으로 많아진 상태를 말하며 일반적으로 혈중에 콜레스테롤이나 중성지방이 증가를 의미한다.Hyperlipidemia (hyperlipidemia, 高脂 血症) refers to a condition in which the lipid content in the blood is increased to an abnormal level and generally means an increase in cholesterol or triglycerides in the blood.
혈중 콜레스테롤 농도가 일정 수준 보다 높아지는 고지혈증, 보다 구체적으로는 고콜레스테롤혈증 이나 고중성지방혈증이 되면 혈액의 점성증가 및 죽상동맥경화(Atherosclerosis)현상의 진행에 의해 혈액흐름의 악화, 혈압의 상승 및 말초혈관의 혈액순환 장애는 물론 허혈성 심장질환으로의 발병가능성을 높이는 등 치명적인 위험요인이 되기 때문에 이의 예방 및 치료는 건강장수를 추구하는 현대인들의 최우선적인 건강관리 수단이 되고 있다.Hyperlipidemia, which causes blood cholesterol levels to rise above a certain level, more specifically hypercholesterolemia or hypertriglyceridemia, leads to blood flow deterioration, increased blood pressure, and peripheral disease due to the development of blood viscosity and atherosclerosis. Preventing and treating blood circulation in the blood vessels, as well as increasing the likelihood of developing ischemic heart disease, prevents and treats them as a top priority for the health of modern people.
고지혈증의 치료는 고지혈증의 상태, 환자의 식생활 습관이나 고지혈증의 가족력, 동맥경화증 유무, 나이, 다른 동반질환(위험요인) 등을 고려하여 식이요법, 운동요법 및 약물요법을 각기 단독 또는 복합적으로 시행하여 혈액 중 콜레스테롤을 적어도 240mg/dl 이하 수준, 가능한 한 200mg/dl 이하 수준을 유지하도록 처치하므로서 죽상동맥경화성질환, 관상동맥질환의 예방 및 허혈성 심질환등의 예방을 우선적 목표로 하고 있다. The treatment of hyperlipidemia is carried out individually or in combination with diet, exercise and drug therapy, taking into account the state of hyperlipidemia, the patient's dietary habits or family history of hyperlipidemia, the presence of arteriosclerosis, age, and other comorbidities (risk factors). The main goal is to prevent atherosclerotic disease, coronary artery disease, and ischemic heart disease by treating cholesterol in the blood at least 240 mg / dl or less and 200 mg / dl as much as possible.
체내 콜레스테롤의 80% 이상이 간에서 합성되며 식품으로 부터의 흡수량은 상대적으로 크지 않은 점과 LDL-Cholesterol recepter의 수에 의한 영향이 클 수 밖에 없음을 고려할 때 항 고지혈활성 식품소재로서의 기능성은 콜레스테롤의 생합성 저해활성 및 장에서의 콜레스테롤 흡수억제 효과가 중요한 결정요인이 될 수 있겠다.Considering that more than 80% of the cholesterol in the body is synthesized in the liver and the absorption from food is relatively large and the effect of the number of LDL-Cholesterol recepters is inevitably large, the function as an anti-hyperlipidemic food material is Biosynthesis inhibitory activity and cholesterol absorption inhibitory effect may be important determinants.
콜레스테롤 생합성 과정중 HMG-CoA(3-hydroxy-methyl glutaryl coenzyme A)로 부터 메발로네이트(mevalonate)로 전화시키는 효소인 HMG-Co A reductase는 콜레스테롤 합성속도의 율속효소이며 간장 중 HMG-CoA reductase 활성의 저하는 간장 LDL-recepter의 활성을 증가시켜 혈중 콜레스테롤 농도를 감소시키는 작용기전이 알려져 있어 관련질환의 치료에 널리 이용되고 있다. 혈청 콜레스테롤 강하제로서는 담즙산 결합수지계통과 콜레스테롤 합성 억제제, 니코틴산과 유도체 및 프로부콜(probucol)이 있으며, 이들 중 콜레스테롤 합성억제제인 심바스타틴(simvastatin)이나 로바스타틴(lovastatin) 제제가 HMG-CoA reductase를 억제함과 동시에 LDL 수용체 mRNA 발현을 유발시켜 혈중 콜레스테롤을 낮추는 효과가 있는 것으로 알려지고 있다. 그러나 이러한 콜레스테롤 합성 저해제들은 그 효과가 단기적으로는 유효하나 장기적 사용으로 인한 부작용이 보고 되고 있어, 천연물로 부터 장기 복용에 적합하면서 콜레스테롤 저하기능성이 우수한 천연물질의 개발이 필요하다고 할 수 있다.HMG-Co A reductase, an enzyme that converts HMG-CoA (3-hydroxy-methyl glutaryl coenzyme A) into mevalonate during cholesterol biosynthesis, is a rate-limiting enzyme of cholesterol synthesis rate and HMG-CoA reductase activity in liver Decreased levels of hepatic LDL-recepter increase the activity of the blood cholesterol levels known to reduce the action is widely used in the treatment of related diseases. Serum cholesterol lowering agents include bile acid-binding resins, cholesterol synthesis inhibitors, nicotinic acid derivatives, and probucol. Among these, cholesterol inhibitors such as simvastatin or lovastatin inhibit HMG-CoA reductase. At the same time, it is known to have an effect of lowering blood cholesterol by inducing LDL receptor mRNA expression. However, these cholesterol synthesis inhibitors are effective in the short-term, but side effects due to long-term use has been reported, it can be said that the development of natural substances with excellent cholesterol-lowering properties suitable for long-term use from natural products.
지금까지 혈중 콜레스테롤 농도를 낮추며 혈액의 순환개선 효과에 대한 기능성 식품소재 관련 연구는 다양하게 이루어져 왔으며 기능성 소재별로는 식이섬유소, 전통 한약제 등 식물성 추출물, 오메가 3 계열의 EPA 및 DHA 함유 정제어유, 프로스타글란딘의 생합성 전구물질로 사용되는 필수지방산 감마리노레인산(gammalinolenic acid, γ-linolenic acid, GLA), 은행잎이나 홍국의 추출물 들을 대상으로 한 연구가 주로 이루어져 왔으며 해조류 유래 항 고지혈증활성 및 혈류촉진물질에 대한 관심도 점차 높아지고 있다. Until now, there have been various researches on functional food materials for reducing blood cholesterol levels and improving blood circulation.By biosynthesis of functional extracts, dietary fiber such as dietary fiber and traditional Chinese medicine, refined fish oil containing omega-3 series EPA and DHA, and prostaglandin Research has focused on the extracts of the essential fatty acid gammalinolenic acid (γ-linolenic acid, GLA), ginkgo biloba and red ginseng used as precursors, and the interest in anti-hyperlipidemic activity and blood flow promoters derived from algae is gradually increasing. It is rising.
이와 관련하여 해조류 유래 퓨코스테롤(Fucosterol)은 비교적 저분자 물질로서 생체흡수가 용이하며 콜레스테롤 저하기능성이 인정된 식물성스테롤의 일종으로서 유효활용에 대한 기대가 점차 높아지고 있으나 관련 기초 및 응용연구의 제한 등으로 산업적으로 유용한 관련기술 개발은 아직까지 적극적으로 이루어지지 못하고 있는 실정이다.In this regard, Fucosterol derived from seaweed is a relatively low molecular substance and is a type of phytosterol that is easily absorbed and has lowered cholesterol. However, the expectation for effective utilization is gradually increasing due to the limitation of related basic and applied research. Development of industrially useful related technologies has not been actively made yet.
퓨코스테롤(Fucosterol)은 식물성스테롤(Phytosterol)의 하나이나 주로 해조류에 존재하며 분자구조내에 퓨코오스(fucose)를 함유하는 점이 육상식물 유래 식물성스테롤과 다른 점이다.Fucosterol is one of the phytosterols, but it is mainly present in seaweed and differs from land plant-derived phytosterol in that it contains fucose in its molecular structure.
식물성 스테롤들은 지금까지 영양학적으로는 그다지 주목을 받지 못하였으나 1980년대 이후 식물성스테롤의 지방산에스테르 같은 유도체가 담즙산의 존재 하에서 동물의 장 점막에 대한 친화도가 콜레스테롤보다 높기 때문에, 장의 점막을 통 한 콜레스테롤의 흡수를 억제하는 효과가 있으며 혈중 총 콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤의 감소효과가 있다는 사실이 속속 발표되면서 콜레스테롤 관련 성인병들의 예방 및 치료를 위한 기능성 소재로서 각광을 받기 시작하였다. 이와 같은 식물성스테롤의 콜레스테롤 감소효과는 스테롤의 종류와 분자구조에 따라 다르나 대체적으로 스테롤의 지방산에스테르의 효능이 우수하며 1일 1.3g 내외량의 섭취로서 뚜렷한 콜레스테롤 감소효과를 기대할 수 있는 것으로 보고되고 있다. Vegetable sterols have not received much nutritional attention so far, but since the 1980s derivatives such as fatty acid esters of vegetable sterols have higher affinity for animal intestinal mucosa than cholesterol in the presence of bile acids. It has been shown to be effective in inhibiting the absorption of cholesterol and decrease in total cholesterol and LDL-cholesterol in the blood, and has been in the spotlight as a functional material for the prevention and treatment of cholesterol-related adult diseases. Cholesterol-reducing effects of these plant sterols vary depending on the type and molecular structure of sterols. However, it is reported that fatty acid esters of sterols have excellent efficacy. .
식물성 스테롤은 식물성 유지에 0.5-5% 수준 함유되어 있으나 산업적으로는 대두유의 정제부산물이나 펄프폐액으로부터 추출 정제되며 추출회수율은 극히 낮은 특성을 갖고 있다. Vegetable sterols contain 0.5-5% of vegetable fats and oils, but industrially, they are extracted and purified from refined by-products or pulp wastes of soybean oil.
퓨코스테롤은 분자구조 내에 퓨코오스를 함유하고 있어 육상식물 유래 식물성스테롤과는 작용효능에도 차이가 날 수 있으며 추출분리 회수율도 낮은 특성이 있으나 저농도에서도 콜레스테롤의 생합성억제 활성이 우수할 뿐 아니라 혈류개선, 항당뇨, 항암효과 등 다양한 생리활성을 나타내는 것으로 알려지고 있다.Because fucosterol contains fucose in its molecular structure, it may have a different effect on the action from land plant-derived plant sterols, and has a low recovery and extraction rate. However, it is not only excellent in biosynthesis inhibitory activity of cholesterol at low concentrations but also improved blood flow It is known to exhibit various physiological activities such as antidiabetic and anticancer effects.
해조류로부터 퓨코스테롤의 추출 및 분리는 학술적 기초연구가 부분적으로 이루어지고 있으나 대부분 원료 해조류로부터 함량분석 및 추출물의 효능평가를 위한 학술 연구수준에 머물므로서 건강기능식품 소재로서의 산업적 생산조건은 아직까지 정립되지 못하고 있는 실정이다. 기존의 퓨코스테롤 분리는 주로 갈조류를 원료로 하여 클로로포름, 메탄올 등의 비극성 용매를 이용하여 실온에서 지용성분의 추출을 극대화 한 후 알칼리 가수분해, 에틸에테르(Ethyl ether)에 의한 퓨코스테롤의 추출 및 에테르-물 혼합용매에 의한 퓨코스테롤 획분의 분리 등의 일반적 공 정을 거쳐 조 퓨코스테롤을 얻은 방법을 택함으로서 추출 수율도 낮으며 사용된 용매의 독성 때문에 건강기능식품 소재로서의 보편적 사용이 어려운 문제점이 있었다.Although basic research has been conducted on the extraction and separation of fucosterol from seaweeds, most of them remain at the level of academic research for content analysis and efficacy evaluation of raw algae. It is not established. Conventional fucosterol separation mainly uses brown algae as a raw material and maximizes the extraction of fat-soluble components at room temperature using nonpolar solvents such as chloroform and methanol, followed by alkali hydrolysis and extraction of fucosterol by ethyl ether. And the extraction process of crude fucosterol obtained through the general process such as separation of the fucosterol fraction by ether-water mixed solvent, and the extraction yield is low. There was a difficult problem.
해조류 유효성분을 이용한 콜레스테롤 대사개선 효과를 갖는 생리기능성 조성물의 제조에 관한 종래의 기술은 대부분 기능성 다당류나 식이성분을 주성분으로 하는 경우가 많았으며 지용성 기능성분의 유효활용에 관한 기술개발 사례는 많지 않은 실정이었다. Most conventional techniques for the preparation of physiological functional compositions having cholesterol metabolism improving effects using seaweed active ingredients are mostly functional polysaccharides or dietary components, and there are few cases of technology development regarding effective utilization of fat-soluble functional components. It was a situation.
본 발명은 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일과 유지를 포함하는 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일, 바람직하게는 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일과 EPA와 DHA를 함유한 정제어유 및/또는 γ-linolenic acid 함량이 높은 식물성유지를 포함하여 혈액의 유동성 증진 및 고지혈증 개선을 위한 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일으 제공을 목적으로 한다.The present invention relates to a functional oil containing fucosterol containing solubilized fucosterol and a fat or oil, preferably purified fish oil containing fucosterol solubilized and EPA and DHA. It is intended to provide functional oils containing fucosterol for improving blood flow and improving hyperlipidemia, including vegetable oils with high γ-linolenic acid content.
본 발명은 상기 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일에 사용되는 퓨코스테롤을 해조류로부터 분리방법의 제공을 다른 목적으로 한다.Another object of the present invention is to provide a method for separating fucosterol used in the functional oil containing the fucosterol from seaweeds.
본 발명의 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일은 혈액의 유동성 증진 및 고지혈증 개선의 효과가 있어 혈류개선 및 고지혈증의 예방 및 치료에 사용할 수 있다.The functional oil containing the fucosterol of the present invention has the effect of improving the fluidity of the blood and improving the hyperlipidemia, so that it can be used for improving blood flow and preventing and treating hyperlipidemia.
상기에서 언급한 목적을 달성하기 위한 본 발명은 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일과 유지를 포함하는 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일을 나타낸다. The present invention for achieving the above-mentioned object represents a fucosterol-oil-functional functional oil containing a fucosterol oil and fats and oils solubilized.
상기에서 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일은 퓨코스테롤을 식물유지와 교반하여 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일을 얻을 수 있다. 이때 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일의 기능성 향상을 위해 퓨코스테롤을 식물유지와 교반시 첨가제를 추가로 첨가할 수 있다. 상기의 첨가제의 일예로 토코페롤 또는 티비에치큐(TBHQ)의 항산화물질을 사용할 수 있다.The fucosterol oil solubilized with the fucosterol can be obtained by stirring the fucosterol with the vegetable fat and oil to obtain the fucosterol oil solubilized. At this time, in order to improve the functionality of the fucosterol oil solubilized fucosterol, the additives may be additionally added when the plant is maintained and stirred. As an example of the above additives, an antioxidant of tocopherol or TBH may be used.
본 발명의 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일의 일예로서 퓨코스테롤 분말 1g에 대하여 식물성유지 100∼500ml, 토코페놀 10∼50mg을 첨가하고 교반하여 얻을 수 있다. 이때 퓨코스테롤, 식물성유지 및 토코페놀의 교반시 퓨코스테롤, 식물성유지 및 토코페놀을 첨가하고 40∼80℃에서 5∼30분간 가온 교반한 다음 실온으로 냉각하여 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일을 얻을 수 있다.As an example of the fucosterol oil in which the fucosterol of the present invention is solubilized, it can be obtained by adding and stirring 100 to 500 ml of vegetable oil and 10 to 50 mg of tocophenol to 1 g of fucosterol powder. At the time of fucosterol, vegetable oil and tocophenol, fucosterol, vegetable oil and tocophenol are added and heated and stirred at 40 to 80 ° C for 5 to 30 minutes, and then cooled to room temperature to make fucosterol solubilized. You can get terrol oil.
상기 식물성유지는 액상의 식물성유지를 사용할 수 있다.The vegetable oils and fats may be used as vegetable oils and fats.
상기 식물성유지는 올리브오일, 콩기름, 참기름, 들기름, 유채유, 옥수수기름, 땅콩기름, 고추씨기름, 쌀겨기름 중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.The vegetable oil may use any one or more selected from olive oil, soybean oil, sesame oil, perilla oil, rapeseed oil, corn oil, peanut oil, red pepper seed oil, rice bran oil.
상기에서 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일은 유지와 혼합하여 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일을 얻을 수 있다.The fucosterol oil solubilized in the above can be mixed with fats and oils to obtain a functional oil containing the fucosterol.
상기에서 유지는 정제어유, 식용유지 중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.The fat or oil may be any one or more selected from refined fish oil and edible oils and fats.
상기 정제어유의 일예로 EPA와 DHA를 15∼25%를 함유한 정제어유를 사용할 수 있다.As an example of the refined fish oil, refined fish oil containing 15 to 25% of EPA and DHA may be used.
상기 식용유지는 액상 식용유지, 고상 식용유지를 사용할 수 있다.The edible oil and fat can be used as a liquid edible oil, solid edible oil.
상기 식용유지에서 고상 식용유지는 혼합의 용이성을 위해 액상으로 용해시켜야 하므로 가급적이면 액상의 식용유지를 사용하는 것이 좋다.The solid edible oil in the edible oil and fat should be dissolved in the liquid phase for ease of mixing, preferably using a liquid edible oil.
상기 식용유지의 일예로 올리브유, 달말이꽃종자유, 콩기름, 참기름, 들기름, 유채유, 옥수수기름, 땅콩기름, 고추씨기름, 쌀겨기름 중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.One example of the edible oil and fat may be any one or more selected from olive oil, moonflower seed oil, soybean oil, sesame oil, perilla oil, rapeseed oil, corn oil, peanut oil, red pepper seed oil, rice bran oil.
상기에서 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일과 유지와의 혼합의 일예로서 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일, 정제어유, 올리브오일을 혼합하여 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일을 얻을 수 있다.As an example of the mixing of the fucosterol-solubilized fucosterol oil and fats and oils, the fucosterol-soluble fucosterol oil, refined fish oil, olive oil can be mixed to obtain a functional oil containing fucosterol. have.
상기 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일, 정제어유, 올리브오일은 1∼5 : 5∼10 : 80∼85의 부피비로 혼합하여 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일을 얻을 수 있다.The fucosterol oil, purified fish oil, and olive oil solubilized with the fucosterol may be mixed in a volume ratio of 1 to 5: 5 to 10:80 to 85 to obtain a functional oil containing fucosterol.
상기 정제어유는 EPA와 DHA를 15∼25%를 함유한 것을 사용할 수 있다. 이때 정제어유는 EPA와 DHA를 혼합하여 15∼25%이면 족하므로 정제어유에서의 EPA와 DHA에 대한 함량은 적절한 것을 선택하여 사용할 수 있다.The refined fish oil may be used containing 15 to 25% of EPA and DHA. At this time, the refined fish oil is enough to be 15 to 25% by mixing EPA and DHA, so the content of EPA and DHA in refined fish oil can be selected and used.
상기에서 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일과 유지와의 혼합의 일예로서 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일, 달맞이꽃종자유, 올리브오일을 혼합하여 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일을 얻을 수 있다.As an example of the mixing of the fucosterol-solubilized fucosterol oil and fats and oils, the fucosterol-soluble fucosterol oil, evening primrose oil, olive oil can be mixed to obtain a fucosterol-containing functional oil have.
상기 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일, 달맞이꽃종자유, 올리브오일은 1∼5 : 50∼95 : 5∼45의 부피비로 혼합하여 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일을 얻을 수 있다.The fucosterol oil, evening primrose oil, and olive oil solubilized with the fucosterol may be mixed in a volume ratio of 1 to 5:50 to 95: 5 to 45 to obtain a functional oil containing fucosterol.
본 발명의 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일에서 필수 구성성분인 퓨코스테롤은 시중에서 상품화된 것을 사용하거나 또는 해조류로부터 분리한 것을 사용할 수 있다.The fucosterol which is an essential component in the functional oil containing the fucosterol of the present invention may be commercially available or may be separated from seaweed.
상기 해조류는 갈조류 또는 갈조류에서 수용성 엑기스 성분을 추출하고 남은 열수추출잔사를 사용할 수 있다.The algae may be used to extract the water-soluble extract component from the brown algae or brown algae and the remaining hot water extraction residue.
상기 갈조류의 일예로서 다시마, 미역, 녹미채, 큰실말, 붕어마름, 개다시마, 감태, 대황, 모자반, 톳 중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.As an example of the brown algae, any one or more selected from kelp, seaweed, green radish, large horsetail, crucian carp, gaedamasima, Ecklonia cava, rhubarb, mabanban, and 톳 may be used.
상기에서 퓨코스테롤은 해조류로부터 하기 (1)단계 내지 (5)단계를 이용하여 얻을 수 있다.The fucosterol may be obtained from the algae using the following steps (1) to (5).
(1)해조류 또는 해조류에서 수용성 엑기스 성분을 추출하고 남은 열수추출잔사의 건조물의 해조류원료를 식용주정에 첨가한 다음 마쇄처리하여 해조류 주정처리액을 얻는 단계,(1) extracting the water-soluble extract component from seaweed or seaweed, adding the seaweed raw material of the dried residue of the hot water extraction residue to edible alcohol and then grinding to obtain a seaweed alcohol treatment solution;
(2)해조류주정처리액에 식용주정을 추가로 가한 후 고온에서 초음파처리에 의해 환류 교반 추출하여 해조류원료로부터 비극성 물질을 추출하는 단계, (2) adding edible alcohol to the algae liquor treatment solution and then extracting a non-polar substance from the seaweed raw material by extracting reflux with stirring at high temperature by sonication,
(3)해조류원료의 비극성 물질이 추출된 해조류주정처리액을 여과하여 여과액을 얻은 후 주정을 제거하여 해조류원료의 비극성 추출액을 얻는 단계,(3) filtering the algae liquor treatment solution from which the non-polar substance of the algae material is extracted to obtain a filtrate, and then removing the alcohol to obtain a non-polar extract of the algae raw material,
(4)해조류원료의 비극성 추출액에 식품첨가물급 수산화칼륨-에탄올용액을 첨 가하고 혼합하 후 고온에서 가수분해하여 비누화물질을 제거한 다음 냉각하여 해조류 가수분해액을 얻는 단계,(4) adding a food additive-grade potassium hydroxide-ethanol solution to the non-polar extract of seaweed raw materials, mixing and hydrolyzing at a high temperature to remove saponified substances, and then cooling to obtain a seaweed hydrolysis solution,
(5)해조류 가수분해액을 진탕추출용 액-액 분리장치에 옮긴 후 해조류 가수분해액 중의 비극성 물질과 극성도가 다른 용매를 가하여 진탕 추출한 다음 정치시켜 극성획분과 비극성획분을 액-액 분리하고 공존하는 수분을 제거한 후 여과하여 불순물을 제거한 다음 비극성 물질과 극성도가 다른 용매를 제거한 다음 건조하여 퓨코스테롤을 얻는 단계.(5) Transfer the seaweed hydrolyzate to the shake-liquid separator for shaking extract, add the non-polar substance and the solvent with different polarity in the seaweed hydrolyzate, extract the mixture, and let it stand to separate the polar fraction and the nonpolar fraction from the liquid-liquid. Removing coexisting water, filtering to remove impurities, and then removing a solvent having a different polarity from that of the nonpolar material, followed by drying to obtain fucosterol.
상기의 (1)단계 내지 (5)단계를 이용하여 해조류로부터 퓨코스테롤의 분리는 크게 (가)해조류로부터 비극성 유기성분의 추출, 분리하는 단계와, (나)상기 해조류로부터 분리한 비극성 유기성분으로부터 퓨코스테롤을 추출, 분리하여 얻을 수 있다.Separation of the fucosterol from the algae using the steps (1) to (5) above is (a) extracting and separating the non-polar organic component from the algae, and (b) the non-polar organic component separated from the algae From the fucosterol can be obtained by extraction.
이하 해조류로부터 퓨코스테롤의 분리의 일예를 보다 상세히 나타내면 다음과 같다.Hereinafter, an example of separation of the fucosterol from the seaweed will be described in more detail.
(가) 갈조류로부터 비극성 유기성분의 추출 분리공정(A) Extraction and Separation of Nonpolar Organic Components from Brown Algae
해조류나 상기 해조류에서 수용성 엑기스성분을 추출하고 남은 열수추출잔사 건조물을 입도 50∼100메쉬로 분쇄한 다음 상기 분쇄한 해조류 또는 해조류에서 수용성 엑기스성분을 추출하고 남은 열수추출잔사 건조물에 상기 분쇄한 해조류 또는 해조류에서 수용성 엑기스성분을 추출하고 남은 열수추출잔사 건조물 중량 대비 2∼5배량의 식용주정을 가한 다음 습식 콜로이드밀(colloid mill)이나 또는 5,000rpm 이상, 바람직하게는 5000∼10,000rpm의 고속 믹서(high speed blender)를 사용하여 2∼5분간 실온, 바람직하게는 20∼25℃의 온도에서 마쇄처리하여 해조류주정처리액을 조제한다.Extracting the water-soluble extract component from the seaweed or the seaweed and grinding the remaining hot water extraction residue dried to a particle size of 50 to 100 mesh and then extracting the water-soluble extract component from the ground algae or algae and the ground seawater extraction residue dried After extracting the water-soluble extract from the seaweed, add 2-5 times the edible alcohol to the weight of the dried residue, and then use a wet colloid mill or a high-speed mixer of 5,000 rpm or more, preferably 5000-10,000 rpm. A speed blender was used to grind the algae brewing solution at a temperature of 2 to 5 minutes at room temperature, preferably 20 to 25 ° C.
상기에서 해조류는 다시마, 미역, 녹미채, 큰실말, 붕어마름, 개다시마, 감태, 대황, 모자반, 톳 중에서 선택된 어느 하나 이상의 갈조류를 사용할 수 있다.The seaweed may be any one or more brown algae selected from kelp, seaweed, green seaweed, large horsetail, crucian carp, Gaedamashima, Ecklonia cava, rhubarb, maban, 톳.
마쇄처리한 해조류주정처리액을 교반기능과 가온기능 및 초음파발생기능이 있는 추출조에 옮기고 나서 해조류주정처리액 중량 대비 3∼10배량의 식용주정을 추가로 가한 후 실온∼60℃, 바람직하게는 20∼60℃의 온도에서 20∼50kHz의 초음파를 10∼20분/시간 비율로 발사하면서 1∼3시간 1∼3회 환류 교반추출하여 해조류에 함유된 비극성 물질을 최대한 추출한다. The algae brewing liquor treated with grinding is transferred to an extraction tank having a stirring function, a heating function, and an ultrasonic wave generating function, and then 3-10 times more edible alcohol is added to the algae brewing solution weight, and then room temperature to 60 ° C, preferably 20 At a temperature of ˜60 ° C., 20 to 50 kHz ultrasonic waves are emitted at a rate of 10 to 20 minutes / hour, and reflux stirring is performed for 1 to 3 hours 1 to 3 times to extract the nonpolar substance contained in the seaweed as much as possible.
상기의 비극성물질을 추출된 추출액은 여과포 또는 프레스필터 등의 방법으로 여과하여 여과액을 얻은 다음 50∼70℃에서 감압 농축하여 주정을 제거하여 비극성 물질이 함유된 추출액을 얻는다.The extract obtained by extracting the non-polar substance is filtered by a filter cloth or a press filter or the like to obtain a filtrate, and then concentrated under reduced pressure at 50 to 70 ° C. to remove the alcohol to obtain an extract containing the non-polar substance.
상기에서 식용주정은 에탄올농도 90% 이상, 바람직하게는 에탄올농도 90∼99.9%인 것을 사용할 수 있다.In the above, the edible alcohol may be an ethanol concentration of 90% or more, preferably an ethanol concentration of 90 to 99.9%.
(나)갈조류의 비극성성분으로부터 퓨코스테롤의 추출.분리 공정(B) Extraction and separation process of fucosterol from nonpolar components of brown algae
상기 (가)공정에서 주정을 제거한 비극성 물질이 함유된 추출액에 식품첨가물급 수산화칼륨-에탄올용액(KOH 농도 : 5∼20%)을 비극성 물질이 함유된 추출액 중량 대비 0.5배∼4배량 되도록 가하고 혼합한 후 90∼120℃의 가온조건에서 2∼6시간 가수분해하여 공존하는 비누화물질을 제거한 후 실온, 바람직하게는 20∼25℃의 온도로 냉각하여 해조류 가수분해액을 얻는다. 이어서 상기 해조류 가수분해액 을 진탕추출용 액-액 분리장치에 옮긴 후 해조류 가수분해액에 함유된 비극성 물질과 다른 극성도를 가지는 용매를 해조류 가수분해액의 체적 대비 1∼2배량을 해조류 가수분해액에 첨가하고 상온, 바람직하게는 20∼25℃의 온도에서 1∼5분간 진탕 추출한 다음 정치시켜 극성획분과 비극성획분을 액-액 분리한다. 이어서 무수황산나트륨(Sodium sulfate, anhydrous)을 가하여 공존하는 수분을 제거한 후 필터패드(filter pad)나 마이크로필터(micro filtration) 등의 방법으로 여과하여 공존하는 불순물을 제거한 다음 30∼60℃에서 감압 농축하여 비극성용매를 단시간에 휘발 제거시키고 나서 질소가스 기류하에서 건조하거나 진공 건조하여 퓨코스테롤을 얻는다.To the extract containing the non-polar substance from which alcohol was removed in step (A), add a food additive-grade potassium hydroxide-ethanol solution (KOH concentration: 5 to 20%) to 0.5 to 4 times the weight of the extract containing the non-polar substance and mix. After hydrolysis at 90 to 120 ° C. for 2 to 6 hours to remove coexisting saponified substances, the mixture is cooled to room temperature, preferably 20 to 25 ° C. to obtain an algae hydrolysis solution. Subsequently, the algae hydrolysate was transferred to a shake-liquid separation device, and then a solvent having a polarity different from that of the non-polar substance contained in the algae hydrolysate was subjected to 1 to 2 times the volume of the algae hydrolysate. The mixture is added to the liquid, shaken and extracted for 1 to 5 minutes at room temperature, preferably at a temperature of 20 to 25 ° C, and then left to separate the liquid and liquid fractions from the polar fractions. Subsequently, anhydrous sodium sulfate (anhydrous) was added to remove the coexisting water, and then filtered by a filter pad or micro filtration to remove the coexisting impurities, and then concentrated under reduced pressure at 30 to 60 ° C. The nonpolar solvent is removed by volatilization in a short time and then dried under a gas stream of nitrogen gas or vacuum dried to obtain fucosterol.
상기에서 해조류 가수분해액에 함유된 비극성 물질과 다른 극성도를 가지는 용매는 물, 핵산 또는 물과 핵산이 혼합된 혼합용매를 사용할 수 있으며, 이때 혼합용매는 물과 핵산이 1∼9 : 9∼1의 부피비로 혼합된 혼합용매를 사용할 수 있다.The solvent having a different polarity from the non-polar substance contained in the seaweed hydrolyzate may be water, nucleic acid, or a mixed solvent in which water and nucleic acid are mixed, wherein the mixed solvent is water and nucleic acid 1-9: 9-9. Mixed solvents mixed in a volume ratio of 1 can be used.
본 발명은 상기에서 언급한 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일을 포함하는 혈류개선, 고지혈증의 예방용 조성물을 포함한다. The present invention includes a composition for improving blood flow and preventing hyperlipidemia, including the functional oil containing the aforementioned fucosterol.
본 발명은 상기에서 언급한 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일을 포함하는 혈류개선, 고지혈증의 치료용 조성물을 포함한다. The present invention includes a composition for treating blood flow improvement and hyperlipidemia including the functional oil containing the above-mentioned fucosterol.
본 발명은 상기에서 언급한 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일을 포함하는 혈류개선, 고지혈증의 예방 및 치료용 조성물을 포함한다. The present invention includes a composition for improving blood flow, preventing and treating hyperlipidemia, including the functional oil containing the aforementioned fucosterol.
본 발명은 (1)해조류로부터 비극성 유기성분의 추출, 분리하는 단계와, (2) 상기 해조류로부터 분리한 비극성 유기성분으로부터 퓨코스테롤을 추출, 분리하는 단계를 포함하는 해조류로부터 퓨코스테롤의 분리방법 제공을 포함한다.The present invention comprises the steps of: (1) extracting and separating nonpolar organic components from seaweeds, and (2) extracting and separating fucosterols from seaweeds, which comprises the steps of extracting and separating fucosterols from the nonpolar organic components separated from the seaweeds. It includes providing a method.
이하 본 발명의 내용을 실시예 및 시험예를 통하여 구체적으로 설명한다. 그러나, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the content of the present invention will be described in detail through examples and test examples. However, these are intended to explain the present invention in more detail, and the scope of the present invention is not limited thereto.
<실시예 1> 갈조류로부터 비극성 유기성분의 추출 분리공정Example 1 Extraction and Separation Process of Nonpolar Organic Components from Brown Algae
다시마에서 수용성 엑기스 성분을 추출하고 남은 열수추출잔사 건조물을 원료로 하고, 상기 원료 5kg을 입도 80메쉬로 조분쇄한 다음 원료 중량에 대하여 3배량의 식용주정을 가한 후 습식 콜로이드밀을 이용하여 3회 마쇄처리를 하여 주정처리 다시마분말액을 얻었다. 이어서 가온 및 초음파처리를 할 수 있는 추출조에 다시마분말주정처리액을 옮긴 다음 다시마분말주정처리액 중량 대비 5배량의 식용주정을 가하고 20kHz의 초음파를 10분/시간 비율로 발사하면서 50℃에서 1차 2시간, 2차 1시간씩 환류교반 추출한 다음 여과포로 여과하여 얻은 여과액을 70℃에서 감압 농축하여 주정을 제거한 후 비극성 추출액 850g을 얻었다.Extract the water-soluble extract from kelp and use the remaining hot water extract residue as a raw material, coarsely crush 5 kg of the raw material into a particle size of 80 mesh, add three times the edible alcohol based on the weight of the raw material, and then use the wet colloid mill three times. Grinding treatment was performed to obtain alcohol treatment kelp powder. Subsequently, the kelp powder drinking liquid is transferred to an extraction tank that can be heated and sonicated. Then, 5 times of edible alcohol is added to the weight of the kelp powder drinking liquid, and 20 kHz ultrasonic wave is fired at a rate of 10 minutes / hour. The mixture was refluxed under stirring for 2 hours and then 1 hour, and the filtrate obtained by filtration with a filter cloth was concentrated under reduced pressure at 70 ° C. to remove alcohol, and then 850 g of a non-polar extract was obtained.
<실시예 2> 갈조류의 비극성성분으로부터 퓨코스테롤의 추출.분리 공정Example 2 Extraction and Separation of Fucosterol from Nonpolar Components of Brown Algae
상기 실시예 1의 방법을 이용하여 다시마로부터 얻은 비극성 추출액 1.2kg에 수산화칼륨-에탄올용액(KOH 농도 : 10%)을 1리터 가하여 혼합한 후 97℃의 스팀 배쓰(steam bath)에서 5시간 가수분해하여 분액용플라스크에 옮기고 물과 핵산이 1:1의 부피로 혼합된 혼합용액 2리터를 4회로 나누어 가한 후 각각 1분간 진탕 추출하여 가수분해액으로 부터 퓨코스테롤 함유 비극성성분을 추출한 다음 상온에서 30분간 정치하여 비극성 추출성분이 비극성용매인 핵산층으로 분리되도록 한 후 핵산층을 분획하고, 무수황산나트륨(Sodium sulfate, anhydrous)을 가하여 공존하는 수분을 제거한 후 필터패드로 여과하고 60℃에서 감압 농축하여 핵산을 제거시킨 후 40℃에서 진공건조하여 조 퓨코스테롤 약 4.5g을 얻었다.1 liter of potassium hydroxide-ethanol solution (KOH concentration: 10%) was added to 1.2 kg of the non-polar extract obtained from kelp using the method of Example 1, followed by hydrolysis in a steam bath at 97 ° C. for 5 hours. Transfer the flask to a separating flask, add 2 liters of the mixed solution mixed with water and nucleic acid in a volume of 1: 1, and add it to shake for 1 minute. Then, extract the non-polar component containing the fucosterol from the hydrolysis solution. After standing for 30 minutes, the non-polar extract component is separated into the nucleic acid layer which is a non-polar solvent, and then the nucleic acid layer is fractionated, and anhydrous sodium sulfate (anhydrous) is added to remove the coexisting water, and then filtered with a filter pad and concentrated under reduced pressure at 60 ° C. The resulting nucleic acid was removed, and then dried in vacuo at 40 ° C. to obtain about 4.5 g of crude fucosterol.
<실시예 3> 퓨코스테롤 가용화 및 항산화처리 공정Example 3 Fusterol Solubilization and Antioxidation Process
상기 실시예 2에서 얻은 조 퓨코스테롤 1g 및 토코페롤아세테이트 50mg을 올리브유 100ml에 첨가한 다음 60℃로 가온하면서 5분간 교반하여 고형물을 용해시킨 다음 실온에서 냉각하여 올리브오일과 색택 및 향미에서 차별화되지 않으면서 퓨코스테롤이 가용화된 퓨코스테롤오일을 얻었다. 1 g of crude fucosterol and 50 mg of tocopherol acetate obtained in Example 2 were added to 100 ml of olive oil, and then stirred at a temperature of 60 ° C. for 5 minutes to dissolve the solids, and then cooled at room temperature to not differentiate in olive oil, color and flavor. Fucosterol oil was solubilized.
<실시예 4> 퓨코스테롤과 식물성유지를 혼합한 기능성강화오일 캡슐의 제조Example 4 Preparation of Functional Enhancement Oil Capsules Blended with Fucosterol and Vegetable Oil
상기 실시예 3에서 얻은 퓨코스테롤 0.1% 함유하고 가용화된 퓨코스테롤오일 200ml와 달맞이꽃종자유 500ml 및 올리브오일 300ml를 30℃에서 균일하게 교반 혼합하고 실온까지 냉각함으로써 색택과 향미가 올리브오일과 비교하여 관능적인 차이가 없으면서 in vitro HMG CoA reductase 저해활성이 53% 이상 강화된 기능성강화 혼합오일을 얻었다. 이어서 젤라틴을 피복물질로 하는 의약용 연질캡슐의 일 반적인 제조공정에 의해 HMG CoA reductase 저해활성이 강화된 퓨코스테롤 함유 기능성강화 오일캡슐을 제조하였다.Color and flavor were compared with olive oil by uniformly stirring and mixing 200% of fucosterol oil and 500ml of evening primrose oil and 500 ml of olive oil and 300 ml of olive oil, which were obtained in Example 3, and solubilized. A functionally enhanced mixed oil with more than 53% enhanced in vitro HMG CoA reductase inhibitory activity was obtained without any sensory differences. Subsequently, a fucosterol-containing functional strengthening oil capsule, in which HMG CoA reductase inhibitory activity was enhanced, was prepared by a general manufacturing process of a pharmaceutical soft capsule containing gelatin as a coating material.
<실시예 5 > 퓨코스테롤과 정제어유를 혼합한 기능성강화오일의 제조<Example 5> Preparation of functional fortified oil mixed with fucosterol and refined fish oil
상기 실시예 3에서 얻은 퓨코스테롤 0.1% 함유하고 가용화된 퓨코스테롤오일 200ml와 EPA 12% 및 DHA 3% 함유 정제어유 200ml 및 올리브오일 600ml와 천연토코페롤 3g을 30℃에서 균일하게 교반 혼합하고 실온까지 냉각함으로써 색택과 향미가 올리브오일과 비교하여 관능적인 차이가 없으면서 in vitro HMG CoA reductase 저해활성이 38% 이상 강화된 기능성강화 혼합오일을 얻었다.200 ml of solubilized fucosterol oil containing 0.1% and solubilized fucosterol oil obtained in Example 3, 200 ml of
<실험예 1> 다시마의 열수추출 잔사로부터 에탄올 가용성 물질의 추출 수율Experimental Example 1 Extraction Yield of Ethanol Soluble Substance from Hot Water Extract Residue of Kelp
수용성 엑기스 성분을 추출하고 남은 다시마 엑기스 추출잔사를 원료로 하여 추출 조건에 따른 에탄올 가용성물질의 추출수율을 비교한 결과 결과 에탄올마쇄처리 + 초음파 가온추출 방법이 단순 가온추출법에 비해 34.9% 이상 높은 추출수율을 나타내었다(표 1 참조).The extraction yields of ethanol-soluble substances according to the extraction conditions were compared with the extracted kelp extract residue from water-soluble extracts as a raw material.The extraction yield of ethanol grinding treatment + ultrasonic heating extraction method was 34.9% higher than that of the simple heating extraction method. (See Table 1).
표 1. 추출조건에 따른 다시마 분말의 에탄올가용성 물질 추출수율 비교Table 1. Comparison of Extraction Yields of Ethanol-soluble Compounds of Sea Tangle Powder by Different Extraction Conditions
1) 추출조건 : 동일한 추출용매, 온도 및 추출시간 조건에서 추출전처리, 추출보조처리의 적용여부로 구분 1) Extraction condition: Whether to apply pre-extraction or subsidiary extraction under the same extraction solvent, temperature and extraction time
2) 추출수율 : 원료분말의 중량 기준 에탄올추출물의 건조고형물 중량비 2) Extraction yield: Weight ratio of dry solids of ethanol extract based on the weight of raw material powder
<실험예 2> 퓨코스테롤과 올리브오일 및 오메가-3 지방산 함유 정제어유 혼합조성물의 기호성 및 생리활성Experimental Example 2 Palatability and Physiological Activity of Fucosterol, Olive Oil, and Omega-3 Fatty Acid-Containing Refined Fish Oil
본 발명에 의해 고안된 기능성 혼합조성물 중 올리브오일을 기질로 한 퓨코스테롤 0.1% 함유오일과 올리브오일 및 EPA 12% 및 DHA 3% 함유 정제어유의 혼합조성물의 색택과 향미에 대한 관능적 기호성 및 콜레스테롤생합성 관련 효소인 HMG CoA reductase 저해활성을 실험 조사한 결과 퓨코스테롤 0.1% 함유오일 200ml와 올리브오일 400ml, 정제어유 400ml 및 천연토코페롤 3ml 혼합조성물의 관능적 기호성이 올리브오일과 비교하여 관능적인 차이가 없으면서 in vitro HMG CoA reductase 저해활성이 0.1% 퓨코스테롤오일에 비하여 49% 이상 강화된 76.7% 수준을 나타내었다.(표 2 참조)Sensory Palatability and Cholesterol Synthesis for Coloration and Flavor of the Mixture Composition of 0.1% Fucosterol Oil Based on Olive Oil and Olive Oil and Refined Fish Oil Containing 12% EPA and 3% DHA in Functional Functional Composition Proposed by the Present Invention After a review test for the related enzyme HMG CoA reductase inhibitory activity, fucose 0.1% cholesterol-containing oil and olive oil 200ml 400ml, 400ml purified fish oil and natural tocopherol 3ml sensory preference of a mixed composition eopeumyeonseo the sensual differences as compared to olive oil in In vitro HMG CoA reductase inhibitory activity showed a level of 76.7% enhanced by at least 49% compared to 0.1% fucosterol oil (see Table 2).
표 2. 퓨코스테롤(A)과 올리브오일(B) 및 정제어유(C)의 혼합비율에 따른 기호성과 콜레스테롤의 생합성 저해활성Table 2. Inhibitory activity of palatability and cholesterol biosynthesis according to the mixing ratio of fucosterol (A), olive oil (B) and refined fish oil (C)
1)A : 올리브오일을 기질로 하는 Fucosterol 0.1% 함유오일, B : 올리브오일, C : 정제어유(EPA 12%, DHA 3%함유) D : 천연토코페롤1) A: Oil containing Fucosterol 0.1% based on olive oil, B: Olive oil, C: Refined fish oil (containing 12% EPA, 3% DHA) D: Natural tocopherol
2) 관능적 기호도(색,향미에 대한 종합적 기호도) : - 극히 불량, ± : 불량 , + : 보통, ++ : 우수, +++ : 극히 우수2) Sensory preference (combination of color and flavor):-Extremely poor, ±: Poor, +: Normal, ++: Excellent, +++: Extremely good
3) HMG-CoA reductase 저해활성( in vitro) : 콜레스테롤 생합성 저해 활성 3) HMG-CoA reductase inhibitory activity ( in vitro ): cholesterol biosynthesis inhibitory activity
<실험예 3> 퓨코스테롤과 식물성유지 혼합 조성물의 기호성 및 생리활성Experimental Example 3 Palatability and Physiological Activity of the Fucosterol and Vegetable Oil-Containing Composition
본 발명에 의해 고안된 기능성 혼합조성물 중 올리브오일을 기질로 한 퓨코스테롤 0.1% 함유오일 200ml과 올리브오일 200ml 및 달맞이꽃종자유 600ml를 배합한 혼합조성물의 색택과 향미에 대한 관능적 기호성이 올리브오일과 비교하여 관능적인 차이가 없으면서 in vitro HMG CoA reductase 저해활성이 0.1% 퓨코스테롤오일에 비하여 58% 이상 강화된 81.3% 수준을 나타내었다.(표 3 참조)The organoleptic palatability of color and flavor of the mixed composition containing 200 ml of olive oil-based fucosterol 0.1%, 200 ml of olive oil and 600 ml of evening primrose oil in the functional mixture composition devised by the present invention were compared with olive oil. In Vitro HMG CoA reductase inhibitory activity was enhanced by 58% or more compared to 0.1% fucosterol oil without any sensory difference (see Table 3).
표 3. 퓨코스테롤(A)과 올리브오일(B) 및 달맞이꼴종자유(C)의 혼합비율에 따른 기호성과 콜레스테롤의 생합성 저해활성( HMG-CoA reductase 저해활성) Table 3. Inhibitory activity of palatability and cholesterol biosynthesis according to the mixing ratio of fucosterol (A), olive oil (B) and evening primrose oil (C) (HMG-CoA reductase inhibitory activity)
1) A : 올리브오일을 기질로 하는 Fucosterol 0.1% 함유오일, B : 올리브오일, C : 달맞이꽃 종자유1) A: Oil containing Fucosterol 0.1% based on olive oil, B: Olive oil, C: Evening primrose oil
2) 관능적 기호도(색,향미에 대한 종합적 기호도) : - 극히 불량, ± : 불량 , + : 보통, ++ : 우수, +++ : 극히 우수2) Sensory preference (combination of color and flavor):-Extremely poor, ±: Poor, +: Normal, ++: Excellent, +++: Extremely good
3) HMG-CoA reductase 저해활성(in vitro) : 콜레스테롤 생합성 저해 활성 3) HMG-CoA reductase inhibitory activity ( in vitro ): cholesterol biosynthesis inhibitory activity
- HMG-CoA reductase 저해활성:1 mg 마이크로좀단백질이 1분간 생성한 mevalonate의 pmole수 -HMG-CoA reductase inhibitory activity: pmole number of mevalonate produced by 1 mg microsomal protein for 1 minute
- HMG-CoA reductase 저해활성(%): 100-(시료 활성×100/대조구 활성), 측정농도 :50㎍/mL -HMG-CoA reductase inhibitory activity (%): 100- (sample activity x 100 / control activity), measurement concentration: 50 ㎍ / mL
<실험예 4> 동물실험에 의한 혼합조성물의 항고지혈증 활성Experimental Example 4 Antihyperlipidemic Activity of Mixed Composition by Animal Experiment
본 발명에 의해 고안된 퓨코스테롤 함유 혼합조성물의 항 고지혈증활성을 동물실험으로 조사하기 위해 Lipoprotein 및 bile acid 대사가 인간과 유사한 Hamster(수컷 5주령)를 대상으로 하여 1% cholesterol, 2% corn oil, 10% lard 를 혼합한 고지방식이로 2주일 간사육하여 고지혈증을 유도한 다음 실험동물 8미씩으로 실험군을 구분하여 표준식이실험군(Negative control), 고지방시이대조군(Positive control : 고지방식이), Fucosterol투여 대조군(FC : 고지방식이 + 올리브오일 8ml/kg.bw 구강투여), Fucosterol 고농도투여군(FH : 고지방식이 + fucosterol 10mg 함유 올리브오일/kg.bw 구강투여), Fucosterol 저농도투여군(FL: 고지방식이 + fucosterol 1mg 및 감마리노렌산 0.6mg 함유 올리브오일/kg.bw 구강투여)로 구분하여 2주간 사육한 후 채혈하여 혈중콜레스테롤, 중성지방, 저밀도콜레스테롤(LDL 콜레스테롤) 및 고밀도콜레스테롤(HDL 콜레스테롤), 동맥경화 지수(AI : Atherogenic Index) 등을 분석 조사하였다.In order to investigate the antihyperlipidemic activity of the fucosterol-containing mixed composition devised by the present invention in animal experiments, 1% cholesterol, 2% corn oil, Induced hyperlipidemia by incubating for 2 weeks in a high-fat diet mixed with 10% lard, and then divided into 8 groups of experimental animals and divided into 8 dietary groups (Negative control), positive control group (high-fat diet), Fucosterol Control group (FC: high fat diet + olive oil 8ml / kg.bw oral administration), Fucosterol high concentration group (FH: high fat diet + fucosterol 10mg olive oil / kg.bw oral administration), Fucosterol low concentration group (FL: high fat The diet was divided into + fucosterol 1mg and 0.6mg of gamarinorenic acid containing olive oil / kg.bw oral) and bred for 2 weeks, and then collected by blood cholesterol, triglyceride, and low density cholesterol (LDL cholesterol). Terrol), high density cholesterol (HDL cholesterol) and atherosclerosis (AI) were analyzed.
2주간의 고지방식이에 의해 고지혈증(hyperlipidemia)을 유발시킨 후 2주일간 고지방식이와 fucosterol 혼합유를 투여한 후 실험동물의 혈청 지질농도를 실험분석한 결과는 표 4에 제시한 바와 같다. Hyperlipidemia was induced by high-fat diet for 2 weeks, and then high-fat diet and fucosterol mixed milk were administered for 2 weeks, and the results of experimental analysis on serum lipid concentrations of the experimental animals are shown in Table 4.
고지혈증 유발 후 실험식이에 따른 Total-cholesterol의 함량에는 큰 차이가 나타나지 않았으나 혈중 중성지질 농도를 나타내는 triglyceride(TG) 함량에 있어서는 퓨코스테롤 투여 실험군(FL, FH군)이 고지혈증을 유발한 양성대조군(positive control) 보다 14.6%(FL군) 및 12.4%(FH군) 낮은 값을 나타내었다. 고지혈증 유발 악성 콜레스테롤인 LDL-cholesterol의 경우, fucosterol 투여군은 양성대조군에 비해 15.0%(FL군) 및 10.5%(FH군) 낮은 값을 보였으며, 콜레스테롤을 말초조직으로부터 간으로 역수송하여 세포에서 LDL-cholesterol의 흡수를 억제시켜 동맥경화 및 혈관장애 개선에 유익한 생리작용을 하는 HDL-cholesterol의 함량에 있어서도 FL군과 FH군은 실험대조군(positive control)에 비하여 18.7(FL군) 및 30.3%(FH군) 수준의 높은 값을 나타내었다. 또한 동맥경화지수인 AI지수 또한 저농도 및 고농도 fucosterol 투여군인 FL 및 FH 군이 양성 실험대조군(positive control) 보다 약 20%씩 감소된 값을 보임으로서 fucosterol의 섭취가 동맥경화증의 유발위험성을 현저히 감소시킬 수 있음을 알 수 있다. 위와 같은 결과로 미루어 판단할 때 고지방식이에 의해 고지혈증이 유발된 경우에도 매일 fucosterol을 1mg/kg.bw 이상 함유한 유지를 매일 섭취함으로써 유의한 혈중 지질농도의 개선효과를 기대할 수 있을 것으로 사료되었다(도 1a, 도 1b, 도 1c, 도 1d 참조).There was no significant difference in total-cholesterol content according to the experimental diet after hyperlipidemia. However, in the triglyceride (TG) content, which indicates the triglyceride concentration in blood, the experimental group (FL, FH) in the control group of hyperlipidemia induced hyperlipidemia ( 14.6% (FL group) and 12.4% (FH group) were lower than the positive control. In the case of LDL-cholesterol, a hyperlipidemic malignant cholesterol, the fucosterol group showed lower values of 15.0% (FL group) and 10.5% (FH group) than the positive control group. In the HDL-cholesterol content, which inhibits the absorption of cholesterol and has a beneficial physiological effect in improving arteriosclerosis and vascular disorders, the FL and FH groups are 18.7 (FL group) and 30.3% (FH group) compared to the positive control group. ) High level. In addition, the AI index, which is the arteriosclerosis index, was also reduced by about 20% in the FL and FH groups of the low and high concentrations of the fucosterol-administered group, compared to the positive control, so that fucosterol intake significantly reduced the risk of atherosclerosis. It can be seen that. Based on the above results, even if hyperlipidemia was induced by high fat diet, we could expect significant improvement of blood lipid level by ingesting fat containing fucosterol more than 1mg / kg.bw daily. (See FIGS. 1A, 1B, 1C, 1D).
표 4. Fucosterol이 고지혈증이 유도된 hamster의 혈중 지질농도에 미치는 영향Table 4. Effect of Fucosterol on Blood Lipid Levels in Hyperlipidemia-induced Hamster
<실험예 5> Experimental Example 5
본 발명에 의해 고안된 퓨코스테롤 함유 혼합조성물의 혈류개선효과를 동물실험으로 조사하기 위해 실험예 4에서와 같은 실험군으로 구분하여 2주간 고지방식이에 의한 고지혈증 유발 후 2주간 고지방식이와 함께 퓨코스테롤 구강투여 실험을 행한 후 실험동물의 혈액을 취하여 혈류의 흐름에 미치는 fucosterol의 영향을 검 토하였다.In order to investigate the blood flow improvement effect of the fucosterol-containing mixed composition devised by the present invention in the experimental group as in Experiment 4, two weeks after high fat diet induced by hyperlipidemia, After the oral administration of costolol, the blood of experimental animals was taken to examine the effects of fucosterol on the flow of blood.
Micro channel array flow analyzer KH-6을 이용하여 혈액을 25㎕, 50㎕, 75㎕ 및 100㎕ 용량으로 구분하여 인공모세혈관에 주입한 후 모세관의 통과소요 시간을 측정하는 방법으로 실험식이의 혈류개선에 미치는 영향을 검토하였다. 혈액의 주입용량에 따라 모든 실험군에서 퓨코스테롤 투여는 양성실험대조군 보다 월등한 혈류개선 효과를 나타내었다. 특히 혈류실험용량 50㎕ 수준 까지는 고지방식이와 함께 퓨코스테롤을 구강투여한 실험군(FL, FH)의 모세관 통과소요시간이 일반식이를 하는 정상대조군(Normal)과도 큰 차이를 보이지 않을 만큼 우수한 혈류개선 효과를 나타내었다. 혈류실험 용량 75uL 수준에서는 고지방식이와 함께 식물성유지만을 구강 투여한 퓨코스테롤 대조실험군(FC)의 경우 양성대조군과 거의 동일한 수준으로 혈류가 악화되었으며 100uL 수준에서는 모세관의 폐쇄로 인해 혈류자체가 중단되는 양상을 보였으나 고지방식이와 함께 퓨코스테롤 함유 유지를 구강투여한 FL 실험군의 경우 양성대조군 대비 각각 27.7%(75uL) 및 14.0%(100uL), FH군은 40.5%(75uL) 및 22.7%(100uL) 수준의 유의한 혈류개선 효과를 나타내었다.(표 5, 도 2 참조)Improving blood flow in the experimental diet by measuring the time required for capillary passage after injecting blood into artificial capillaries by dividing the blood into 25 μl, 50 μl, 75 μl and 100 μl volumes using the KH-6 Micro channel array flow analyzer. The impact on the system was reviewed. According to the infusion dose of blood, fusterol administration showed better blood flow improvement effect than the positive control group. In particular, the blood flow time of the capillary tube of the experimental group (FL, FH) administered orally with fucosterol up to 50 μl of the blood flow test volume was not significantly different from that of the normal control group (Normal). The improvement effect was shown. At the 75uL level, the blood flow deteriorated to about the same level as the positive control group in the FC group, which was orally administered only vegetable oil with high fat diet. At 100uL level, the blood flow stopped due to capillary obstruction. However, in the FL experimental group administered oral administration of fucosterol-containing fat with high fat diet, 27.7% (75uL) and 14.0% (100uL), respectively, compared to the positive control group, and 40.5% (75uL) and 22.7% in the FH group, respectively. (100 uL) level showed a significant blood flow improvement effect (see Table 5, Figure 2).
표 5. 고지혈증이 유도된 hamster의 혈류흐름에 미치는 fucosterol의 영향Table 5. Effect of fucosterol on blood flow in hamster induced hyperlipidemia
1) sec of blood flow, 2) Not applicable 1) sec of blood flow, 2) Not applicable
상술한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. As described above, although described with reference to a preferred embodiment of the present invention, those skilled in the art will be variously modified and modified within the scope of the present invention without departing from the spirit and scope of the present invention described in the claims below. It will be appreciated that it can be changed.
상기의 실험예의 결과에처럼 본 발명의 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일은 산업기술로 적절히 활용될 경우 1차적으로는 콜레스테롤 생합성억제, 혈중콜레스테롤 저하 등 강력한 콜레스테롤 대사개선 기능성과 혈액순환개선 기능성을 동시에 보유한 건강기능식품 소재로 유용하게 활용될 수 있을 것이다. As the results of the above experimental example, the functional oil containing the fucosterol of the present invention, when properly used as an industrial technology, at the same time, the primary function of improving cholesterol metabolism and blood circulation improvement, such as inhibiting cholesterol biosynthesis and lowering blood cholesterol, It can be usefully used as a health functional food material.
또한, 본 발멸에 의한 퓨코스테롤이 함유된 기능성오일은 저 농도 에서도 다양하고 강력한 기능활성 발현특성을 갖는 퓨코스테롤을 유효성분으로 하고 콜레스테롤대사 및 혈액순화개선, 항암, 면역활성 증진, 항노화, 항엘러지 등의 다양한 생리 기능활성을 나타내는 감마리노렌산(Gamma linolenic acid, GLA) 함유 달맞이꽃종자유와 EPA 및 DHA 함유 정제어유를 기능성 항진용 배합소재로 적절히 활용함에 따라 고기능성 식용유지나 유지성분을 주원료로 하는 건강식품 등 원부재료 구성성분들이 갖는 생리 기능활성 발현특성을 기대할 수 있는 각종 기능성 식품소재나 그 응용제품을 용이하게 생산할 수 있으며, 이로 인한 해조류자원의 유효활용에 의한 고부가가치의 창출과 대체의학 소재로서의 유효활용 기술기반 구축에 크게 기 여할 수 있을 것으로 기대된다.In addition, the functional oil containing fucosterol by this firing is an active ingredient with fucosterol which has various and strong functional activity expression characteristics even at low concentrations, and improves cholesterol metabolism and blood purification, anticancer, immune activity enhancement, anti-aging As a raw material of evening primrose seed oil containing gamma linolenic acid (GLA) and refined fish oil containing EPA and DHA, which show various physiological functions such as anti-allergy and anti-allergic, It is possible to easily produce various functional food materials and their application products that can expect the physiological functional activity expression characteristics of raw ingredients such as health foods, and to create and replace high added value by effective utilization of seaweed resources. It is expected to be able to contribute greatly to the establishment of effective utilization technology base as medical material. All.
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