KR20080025986A - 경구용 피복 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 경구용 피복 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 탄소수 18개의 지방산 80~92 중량% 및 탄소수 16개의 지방산 8~12 중량 % 함유하는 식물성 유지를 포함하는 경구용 피복 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따른 경구용 피복 조성물을 이용하면 생체 흡수율이 향상될 뿐만 아니라 카테킨의 쓴맛과 위장장애가 저감된 녹차 카테킨을 제공할 수 있고, 또한 난용성 물질인 이소플라본이 지용성으로 물성이 개선되고, 생체내 흡수율을 높인 이소플라본을 제공할 수 있다.

코팅, 녹차, 카테킨, 이소플라본, 식물성 유지, 흡수율

Description

경구용 피복 조성물{Coating Composition for Oral Administration}

도 1. 유지 코팅된 카테킨(실시예 1~3, 비교예 2~7)과 코팅하지 않은 원말(비교예 1)을 섭취한 경우에 녹차 카테킨 EGCG 의 생체 흡수율(AUC) 결과를 나타낸다. (y축 단위: μg min/ml )

도 2. 유지 코팅된 이소플라본(실시예4)과 코팅하지 않은 원말(비교예8)을 섭취한 경우에 다이드제인(daidzein)과 제니스테인(genistein)의 생체흡수율(AUC) 결과를 나타낸다. (y축 단위: ng min/ml )

본 발명은 경구용 피복 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 탄소수 18개의 지방산 80~92 중량% 및 탄소수 16개의 지방산 8~12 중량 % 함유하는 식물성 유지를 포함하는 경구용 피복 조성물에 관한 것이다.

카테킨은 차의 떫은 맛을 내는 성분으로 타닌이라고도 한다. 주로 EC, EGC, ECG, EGCG의 4가지 성분으로 구성되어 있으며 이중 EGCG가 50%를 차지하고 있다.

체내에 흡수된 카테킨은 위에서 장으로 이동한 후 8시간에서 24시간 내에 오줌이나 대변으로 배설되며 일부는 장내 세균에 의해 분해된다. 녹차 카테킨류는 다양한 생리활성효과와 약리학적 효과를 통하여 여러 가지 형태의 기능성 소재 및 식품 소재로서의 이용가능성에 대한 연구가 활발하게 이루어지고 있다. 카테킨은 항암 작용을 나타내며, 구조상 수산기(-OH)를 여러 개 함유하고 있어 중금속이나 독성분, 니코틴 등의 흡착에 의한 해독 효과와 함께 항 산화효과도 강하다. 또한 체내 활성산소를 제거 시켜 성인병과 암의 발생을 억제하고, 피부 미용과 노화 방지에도 좋다. 또한 콜레라균이나 식중독 세균, 위궤양을 일으키는 피로리균 등의 병원성 세균과 충치균, 인플루엔자 바이러스에 대한 살균 작용을 하며, 이외에도 지방을 체외로 배출시켜 다이어트에도 좋으며, 입 냄새 제거 콜레스테롤 감소, 치매 예방 등에도 좋다. 최근에는 카테킨 성분만을 별도로 추출하여 암 치료제나 혈액 순환 촉진제등 의약품으로 사용하기도 한다. 또한 각종 세균 제거를 위한 카테킨 공기 청정기, 유지 성분의 산화를 방지하는 항 산화제, 식품소재, 비누, 샴푸, 입욕제, 화장품, 의류에 이르기 까지 여러 용도로 활용되고 있다.

그러나 카테킨은 히드록시기(-OH)를 다수 포함하는 구조적인 특징으로 인해 온도, 습도, 산소, 광선, pH 등에 민감하게 영향을 받아 쉽게 변성된다. 따라서 안정화를 기술 통해 카테킨 성분의 전달 및 보호를 향상 시키기 위한 향상된 코팅 기술에 대한 필요가 있으며, 유지로 코팅하는 방법을 통해 장내에서 흡수율을 높혀 카테킨의 생체 이용율을 증진 시킬 수 있다.

기존에 생체흡수율 향상 기재로 일반적으로 사용되는 β-CD를 카테킨에 포접하거나 셀룰로오스 등으로 코팅을 하는 방법을 카테킨에 적용한 사례가 있었다. 또한 카테킨류의 수분, 저장온도, pH 등 외부적인 요인들에 대한 안정성을 확보하기 위한 시도들이 있었으나, 음료상에서의 색도와 투명성 대한 안정성을 확보하는 것에 한정되며, 제제를 분말화 한 상태의 경시적 안정화 및 쓴맛에 대한 개선 효과는 기재되어 있지 않다(일본 특허 2002-272373).

비타민C의 단일 피복 처리에 의한 흡수성 개선에 관해서, 일본 특개소 61-141862호 공보에 식품용 서방성 과립의 기술이 게시되어 있다. 그러나, 이 기술은 코어 물질로 비타민C, 한 겹 피복 처리재로 쉘락(shellac) 또는 제인(zein)를 이용하고 있는 단일 피복 입자의 제조 기술이고, 단지 용출성을 검토하고 있지만, 구체적인 체내 흡수성 개선 효과의 기재되어 있지 않다.

수용성 비타민 류의 체내 흡수성이 개선되는 피복 조립물에 대해서, 일본 특개평 11-308985호 공보에 피복 입상 조성물과 그 제조 방법이 게시되어 있다. 구체적으로는, 비타민 B군이나 엑기스 등을 코어 물질로하고 제인(zein) 등의 난수용성 재료와 융점 40°C이상의 분말 유지를 그 표면에 코팅(coating)하는 이중 피복입자 조성물 및 제조 방법에 관해서 게시되어 있다. 그러나 이 기술에서는 코어 물질의 직경이 5.0 X 10^-2 mm 이하의 미분말에 관해서만 개시되어 있다.

수용성 비타민 류의 체내 흡수성이 개선되는 피복 조립물에 대해서, 일본 특허 2004-123636 공보에 난수용성 재료와 융점 40 °C 이상의 유지를 액상으로서 분무하여 그 표면에 코팅(coating)하는 이중 피복입자 조성물 및 그 제조방법, 흡 수성 개선 효과에 대해 개시되어 있다. 그러나 이 기술에서는, 입경 2mm 이하의 수용성 비타민 류에 대해서만 한정되어 있고, 녹차 카테킨의 경우에 있어서, 기재되어 있지 않다.

이에 본 발명자들은 뛰어난 생리활성을 지니고 있으나 열, 산소 및 습도에 취약하여 짧은 반감기를 지닌 카테킨 등의 문제점을 해결하고, 카테킨 등의 안정성을 높이고, 지용화 시킴으로서 장관내 흡수율을 높이기 위해 다양한 유지 소재를 탐색한 결과 특정 지방산 조성을 포함하는 유지를 포함하는 코팅 소재를 개발하였다. 따라서 본 발명의 일구체예는 유지로 코팅되어 안정성 및 생체이용율을 개선시킨 녹차 카테킨 및 이소플라본 등을 제공하는 것이다. 또한, 본 발명의 일구체예는 경구용 제제의 적용이 가능하고, 취급이 용이한 식품학 및 약제학적 제제를 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명의 일구체예에서는 탄소수 18개의 지방산 80 내지 92중량% 및 탄소수 16개의 지방산 8 내지 12중량%를 함유하는 식물성 유지를 포함하는 경구용 피복 조성물을 제공한다.

또한 본 발명의 다른 구체예에서는 경구용 유효성분을 함유하는 코어층; 및 상기 코어층 위에 형성되는 층으로서, 탄소수 18의 지방산 80 내지 92중량% 및 탄소수 16의 지방산 8 내지 12중량%를 함유하는 식물성 유지를 포함하는 피복층을 포 함하는 경구용 코팅 제제를 제공한다.

본 발명에 있어서, 상기 탄소수 18개의 지방산은 스테아릭 산(stearic acid), 올레익 산(oleic acid), 리놀레익 산(linoleic acid), 리놀레닉 산(linolenic acid) 및 리시놀레익 산(licinoleic acid)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상임을 특징으로 할 수 있고, 상기 탄소수 16개의 지방산은 팔미틱 산(palmitic acid) 및 헥사데세노익 산(hexadecenoid acid)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상임을 특징으로 할 수 있다.

또한, 본 발명에서 상기 식물성 유지는 대두유, 아미인유 및 올리브유로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 사용할 수 있고, 식물성 유지는 수소첨가로 경화시킨 것을 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명에 따른 경구용 피복 조성물은 코어층으로서 이소플라본 또는 녹차 카테킨을 코팅하여 경구용 코팅 제제를 제조하는데 사용될 수 있다.

본 발명에서, 상기 이소플라본은 다이드제인 및 제니스테인으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 녹차 카테킨은, 에피카테킨 (epicatechin, EC), 에피갈로카테킨 (epigallocatechin, EGC), 에피카테킨 겔레이트 (epicatechin gallate, ECG), 에피갈로카테킨 겔레이트(epigallocatechin gallate, EGCG), 카테킨 겔레이트 (catechin gallate, CG) 및 갈로카테킨 겔레이트(gallocatechin gallate, GCG)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상 일 수 있다.

또한, 본 발명에서는 녹차 카테킨을 카페인과 혼합하여 사용함으로써 풍미 밸런스를 향상시킬 수도 있다.

본 발명에서는 상기 경구용 코팅 제제의 총 중량을 기준으로 상기 코어층의 함량은 50~70중량%이고 상기 피복층의 함량은 30~50중량%인 것이 바람직하다.

이하, 본 발명에 대하여 더욱 상세히 설명한다.

본 발명 제제의 생체 이용율은 종래의 카테킨, 이소플라본 등의 생체 이용율의 4~5배 이상이다.

구체적인 예에서, 카테킨은 하기 화학식 1, 이소플라본은 하기 화학식 2의 구조를 갖는다.

다이드제인 제니스테인

이하 본 발명을 보다 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 그러나, 본 발명은 많은 다양한 형태로 구체화 될 수 있고 여기에 나타낸 구체예에 한정된다고 여겨져서는 안된다.

지방산은 사슬 모양 모노카르복시산을 말하며, 지방을 가수분해하면 생기기 때문에 이러한 이름이 붙었다. 보통 생체 내에서는 글리세롤이나 고급 알코올과 에스테르를 만들고 있으며, 유리한 지방산으로서 존재하는 양은 극히 적다. 글리세롤과의 에스테르의 결합을 지방, 고급 알코올과의 에스테르를 납(蠟)이라고 한다. 생물에서 발견되는 지방산은 대부분 탄소수가 짝수이고 노말사슬(normal chain) 모양이며, 카르복시기는 끝에 달려 있다. 탄소사슬이 포화되어 있는 것에서는 팔미트산, 스테아르산이 중요한 것이다. 불포화인 것은 올레산이 거의 모든 지방에 함유되어 있고, 또 리놀레산, 리놀렌산은 식물성 기름에서 볼 수 있다. 지방산 종류 중에는 쥐나 어떤 세균에서 생물 자신이 직접 합성할 수 없기 때문에 반드시 필요한 생장소(生長素)가 있다.

생체 내에서 지방산은 지방산회로에 의해서 분해되거나 합성되거나 한다. 이 회로는 탄소 2개씩의 단위로 지방산을 합성하거나 분해하므로, 자연계에 존재하는 지방산은 거의 대부분이 짝수인 탄소수로 되어 있다. 지방산은 에너지원으로서 중요하며, 소화흡수되면 일단 지방의 형태로 피하에 침착했다가, 필요에 따라 간에서 분해된다. 영양소로서는 높은 칼로리를 지니며, 또 직접 장(腸)에서 흡수되므로 이용가치가 크다. 지방산은 세포막이나 신경섬유 등의 기본적인 구성성분의 하나이지만, 각각 미량밖에 함유되어 있지 않으므로, 이들 조직 내에서의 역할에 대해서는 거의 알려진 바가 없다.

본 발명자들은 뛰어난 생리활성을 지니고 있으나 열, 및, 산소, 습도에 취약하여 짧은 반감기를 지닌 카테킨 및 이소플라본의 문제점을 해결하고, 카테킨의 안정성을 높이고, 지용화시킴으로서 장관내 흡수율을 높이기 위해 다양한 유지 소재를 탐색한 결과 특정 지방산 조성을 포함하는 유지로 코팅한 피복조성물을 개발하였다. 따라서 본 발명의 목적은 유지로 코팅되어 안정성 및 생체이용율을 개선시킨 녹차 카테킨 및 폴리페놀류에 대하여 경구용제제의 적용이 가능하고, 취급이 용이한 식품학 및 약제학적 제제를 제공하는 것이다.

본 발명에서는 녹차 카테킨 또는 이소플라본이 함유된 유지 코팅 제제는 코팅된 제제 중량을 기준으로 50~70중량%의 녹차 카테킨을 중심 물질로 하고, 중심 물질을 피막하는 코팅 물질 30~50중량%로 이루어지는 것이 바람직하다. 코팅 물질 함량이 50중량%를 초과하면 유효성분인 카테킨 또는 이소플라본의 함량이 낮아지게 되고, 코팅 물질 함량이 30중량% 미만이면 흡수율 개선 효과가 미미하기 때문이다.

본 발명의 유지 코팅 제제는 (A) 녹차 카테킨 또는 이소플라본과 같은 코어 물질을 포함하는 코어층; 및 (B) 탄소수 18개인 지방산 함량이 80~92%, 탄소수 16개인 지방산 함량이 8~12%인 경화유를 포함하는 피복층을 포함하는 것을 특징으로 한다. 탄소수 18인 지방산의 함량이 92%를 초과하면 흡수율 개선효과가 미미해지는 문제점이 있고, 탄소수 18인 지방산의 함량이 80중량% 미만이면 코팅시 코어물질의 표면에 흡착되는 정도가 낮아져 생산효율을 저하시키는 문제점이 있기 때문이다.

여기에서, 코어 물질이 되는 녹차 카테킨류는, 에피카테킨 (epicatechin, EC), 에피갈로카테킨 (epigallocatechin, EGC), 에피카테킨 겔레이트 (epicatechin gallate, ECG), 에피갈로카테킨 겔레이트(epigallocatechin gallate, EGCG), 카테킨 겔레이트 (catechin gallate, CG), 갈로카테킨 겔레이트(gallocatehcin gallate, GCG)을 들 수 있고, 이소플라본은 다이드제인(daidzein), 제니스테인(genistein)을 들 수 있다. 코어 물질의 순도와 배합비는 특별히 한정하지 않는다.

카테킨에서는 녹차추출물 유래 등의 카페인(caffeine)을 함유해도 좋다. 카페인(caffeine)을 함유하는 경우, 비 중합체 카테킨류와 카페인 중량비는 1: 0.001~2로 하는 것이 바람직 하며, 가장 바람직한 것은 1: 0.01~1 의 범위로 선택하는 것이 바람직하다. 녹차 추출물의 카테킨에 대한 비중합체 카테킨류의 비율이 이 범위라면, 본래의 풍미 밸런스 등의 점에서 바람직하다.

이 때 사용되는 코팅 물질로는 식물성 경화유를 사용하는데 특히 대두, 아 마인, 올리브유에 수소를 첨가하여 경화 처리한 것을 본 발명의 특징으로 한다. 코팅물질인 식물성 경화유지의 지방산 조성, 좀더 구체적으로 탄소수 18의 지방산(스테아릭 산(stearic acid), 올레익 산(oleic acid), 리놀레익 산(linoleic acid), 리놀레닉 산(linolenic acid), 리시놀레익 산(licinoleic acid))의 함량이 80~92%, 탄소수 16의 지방산(팔미틱 산(palmitic acid), 헥사데세노익 산(hexadecenoid acid))의 조성이 8~12% 으로 구성된 유지경화유지의 경우 생체 흡수율에 월등히 높게 나타났다. 그러나 지방산에 수소를 첨가하여 경화시킨 지방으로 코팅하기 때문에 지방산의 불포화도는 생체 흡수율에 영향을 주지 않으므로 배제한다.

천연 유지의 지방산 조성(%)은 아래 표 1과 같다. 표 1은 천연 유지에 대한 지방산 조성을 나타내는 표이다 (표준식품화학, 채수규, 2003).

다음에 본 발명의 유지 코팅 녹차 카테킨의 제조 방법에 관해서 나타낸다.본 발명의 피복 조립물의 제조 방법은 다음의 공정을 순서대로 따른다.

공정1: 코팅제로 사용할 식물성 유지는 수소를 첨가하여 포화되도록 하여, 경화유를 형성한다.

공정2: 코어 물질에 해당하는 녹차 카테킨에, 식물성 경화유를 코어 물질에 분무하여 표면에 표면에 골고루 부착되도록 한다.

공정3: 유지 코팅된 녹차 카테킨을 열을 가하지 않고 건조한다.

이 공정에서 사용하는 기계로서 유동층 과립기가 바람직하고, 과립 조건은 특별히 한정되지 않고 기존에 공시된 조건으로 행할 수 있다.

상기의 공정2 로 얻어진 코팅된 녹차 카테킨은 바람직하게는 약 5~50%의 식물성 경화유 분말을 함유한다.

또한 본 발명의 상기 공정에 이용하는 경화유 분말은 탄소수가 18인 지방산의 함량이 80~92%, 탄소수 16인 지방산 함량이 8~12%인 유지가 생체 흡수율을 증가시키는 데에 바람직 한다.

공정 2에서 코어 물질에 해당하는 녹차 카테킨에 식물성 경화유를 분무하여 표면에 부착하는 것은, 유동층 과립기와 같은 공지의 기기 장치를 활용할 수 있다. 부착 조건으로는 경화유 분말이 용융되지 않는 온도에서 접촉·충돌에 의해 경화유 분말의 표면이 녹고, 코어 물질인 녹차 카테킨의 표면에 부착·고정되는 조건이라면 특별히 한정되지 않는다.

상기 공정 2 에 있어서, 코어 물질인 녹차 카테킨에 유지를 액상 분무 하기위해서는 가온 용융한 액상의 유지를 노즐(nozzle), 분무기(atomizer) 등을 사용하고 분무하는 공지의 방법 등을 사용할 수 있다.

또한 공정 2 이후 건조 단계에서는 특별히 한정되지는 않지만 용융된 유지가 냉각 고화되면 좋고, 냉풍에 의해 냉각할 수 있다.

녹차 카테킨의 생체 흡수율을 측정하기 위한 지표로 사용된 것은 생체 이용율이다. 여기에 사용된 생체 이용율은 곡선하 면적(AUC, area under curve)으로 정의된다. AUC(area under curve)는 질량-시간/부피의 단위로서 시간에 따른 약물의 전신 농도의 적분값이다. 일정량의 약물을 투여한 후에, 투여 시간으로부터 약물이 체내에 남아있지 않을 때 까지 환자에게 노출된 약물의 양을 측정한 것이다.

본 발명의 대두 경화유, 아마인유, 올리브유로 코팅된 카테킨을 투여한 경우와 그밖의 경화유지로 코팅된 카테킨을 투여한 경우, 그리고 가공되지 않은 카테킨의 투여 후 시간에 따른 총 전신 약물 농도를 측정함으로써 생체흡수율을 비교하였다. 탄소수 18인 지방산 함량이 80~92%, 탄소수 16인 지방산 함량이 8~12%인 대두유, 아마인유, 올리브유를 경화시킨 유지를 사용한 경우에 다른 유지를 사용한 경우 보다 생체 흡수율이 증가하였다.

또한 녹차 카테킨이 보유하고 있는 다수의 히드록시기 (hydroxyl group, -OH)는 반응성이 매우 커서 변성되는 성질이 있다. 그러나 녹차 카테킨의 표면을 코팅하여 온도, pH 등과 같은 외부환경과의 화학적 상호작용을 감소시킴으로서 종래의 카테킨에 비해 안정화 될 수 있다. 이로 인해 코팅된 녹차 카테킨을 섭취할 때 종래의 카테킨에 비해 높은 생체 이용율을 나타내었다.

녹차카테킨은 다수의 히드록시기 (hydroxyl group, -OH)을 포함하고 있어 다량 섭취시 입안에서 쓴맛을 내고 위장관 내에서는 속쓰림이나 메스꺼움등을 유발하여 불쾌감을 줄 수 있다. 이에 대해서도 본 발명의 식물성 유지 경화유로 녹차 카테킨의 표면을 코팅하는 것은 쓴 맛을 마스킹하고 위장관 내에서 속쓰림이나 메스꺼움 등 위장 장애를 감소시키는 효과를 나타내었다.

난용성 물질의 경우에 표면을 코팅 하게 되면 난용성이던 기존의 물성이 코팅 기재의 물성을 따라가게 되는데, 본 발명의 경우에 이소플라본과 같은 난용성 물질의 개질이 개선 되는 효과를 얻을 수 있었다.

실험예 1: 카테킨류의 생체 흡수율 평가

카테킨 제제의 생체 흡수율을 랫트를 이용하여 관찰하였다. 카테킨 량으로 300mg에 해당하는 량의 제제 300mg 을 1ml up에 현탁시켜 랫트에 존대를 이용하여 경구 투여한 후 10, 20, 30, 60, 120, 180, 240, 300, 360 min 마다 미정맥에서 혈액 400㎕를 취하여, 그 혈액 중 EGCG를 지표물질로 선정하여 측정하였다.

보다 구체적으로, ㈜ 샘타코로부터 스프래그-다우리(Sprague-Dawley, SD)계 흰쥐를 구입하여 충남대학교 약학대학 동물 사육실에서 사료와 물을 자유로이 섭취할 수 있는 환경(20~25℃, 50~60% RH) 하에서 1주일 이상 적응시킨 후 300~350g 이 되었을 때 사용하였다. 단 실험하기 14시간 정도 절식시킨 후에 사용하였다.

실험 전 14 시간 정도 SD 계 흰쥐를 절식시킨 후, 실험당일 에테르로 호흡마취시켰다. 카테킨 량으로 300mg을 1ml up에 녹여 존대를 이용하여 경구 투여한 후 10, 20, 30, 60, 120, 180, 240, 300 min 마다 미정맥에서 혈액 400㎕를 취했다. 취한 혈액은 바로 원심분리하여 혈장(plasma) 100㎕를 취하고 여기에 0.1% EDTA 를 함유한 20% vitamin C 20㎕를 첨가하여 분석시까지 -20℃에 보관하였다. 혈장샘플 중의 EGCG의 정량은 1.1.3에서 설명한 것과 동일한 방법으로 실행하였다.

녹차 카테킨 투여 후 혈장 중 EGCG 농도를 측정하기 위하여 혈장 중의 EGCG를 다음과 같은 방법으로 추출하였다. 즉 혈장 100㎕에 EGCG의 분해를 방지하기 위해 20% vitamin-C 용액(0.1% EDTA 함유)을 20㎕ 가한 후, 메탄올 200㎕와 메틸렌 클로라이드 200㎕를 첨가하고 2분 동안 보텍싱(vortexing) 한 후 5분 동안 10,000rpm 에서 원심분리하여 상청 300㎕을 취했다. 취한 상청을 질소 가스 하 실온에서 증발 건조시킨 후, 잔사에 이동상 100㎕ 를 가하여 재용해 한 후 50㎕를 HPLC에 주입하였다. 이때 HPLC의 분석조건은 다음과 같았다. 이동상(Mobile phase)은 이동상 A(NaH₂PO₄·2H₂O 4.68g + THF 1.2ml + ACN 23.7ml + UP 975.1ml)와 이동상 B(NaH₂PO₄·2H₂O 4.68g + THF 66.5ml + ACN 400ml + UP 533.5ml)를 6:4의 비율로 혼합한 것을 사용하였으며, 유속은 1ml/min, 컬럼은 agilent Hypersil ODS(5㎕, 4.6×250mm)를 사용하였고, 컬럼 온도는 35℃에서 분석하였다. 측정파장은 270nm 이었다.

Sigma에서 구입한 EGCG 표준품을 0.1% vitamin C 용액으로 희석하여 5mg/ml의 스톡 솔루션(stock solution)을 만들고, 이 용액을 블랭크 랫트 혈장(blank rat plasma)으로 계열 희석하여 EGCG의 혈장 중 농도가 10, 5, 1㎕/ml가 되도록 하였다. 이 검량선 샘플들을 위에서 설명한 샘플추출과정과 동일한 방법으로 추출하여 HPLC 컬럼에 주입하였다. EGCG의 농도범위 1~10㎕/ml에서 양호한 직선성(r=0.999)이 관찰되었으며, 검량선의 최소 농도인 1㎕/ml를 검출한계(detection limit)로 설정하여 분석하였다.

실험예 2

이소플라본 함유 제제의 생체 흡수율을 랫트를 이용하여 관찰하였다. 투여량은 이소플라본량을 기준으로 36mg에 해당하는 량을 1ml에 현탁시켜 랫트에 존대를 이용하여 경구 투여한 후 10, 30, 60, 120, 180, 240, 300 min 마다 미정맥에서 blood 400㎕를 취하여, 그 혈액 중 다이드제인(didzein)과 제니스테인(genistein)을 지표물질로 선정하여 측정하였다.

보다 구체적으로, ㈜ 샘타코로부터 스프래그-다우리(Sprague-Dawley)계 흰쥐를 구입하여 충남대학교 약학대학 동물 사육실에서 사료와 물을 자유로이 섭취할 수 있는 환경(20~25℃, 50~60%RH) 하에서 1주일 이상 적응시킨 후 300~350g 이 되었을 때 사용하였다. 단 실험하기 14시간 정도 절식시킨 후에 사용하였다.

실험 전 14 시간 정도 SD 계 흰쥐를 절식시킨 후, 실험당일 에테르로 호흡마취시켰다. 다이드제인량으로 36mg에 해당하는 량을 1ml up에 녹여 존대를 이용하여 경구 투여한 후 10, 20, 30, 60, 120, 180, 240, 300, 360 min 마다 미정맥에서 혈액 400㎕를 취했다. 취한 혈액은 바로 원심분리하여 혈장 100㎕를 취하여 마이크로튜브에 옮겨 닮아 분석시까지 -20℃에 보관하였다.

혈장 샘플과 검량선 샘플에 존재하는 다이드제인(daidzein) 및 제니스테인(genistein)을 daidzein과 genistin으로 변환시켜주기 위해 1M NH4Ac 로 10배 희석한 β-glucuronidase 50ul을 넣고 섞어준 다음 37℃ 인큐베이터(incubator)에서 3시간 동안 인큐베이션(incubation)하였다. 인큐베이션이 끝난 후 분석 시까지 냉동 보관하였다.

혈장 시료에 내부 표준물질로 4- 히드록시벤조페논(hydroxybenzophenone, 50ng/ml in 50% 메탄올 수용액)을 50 ㎕씩 가해 10초간 보텍싱 하였다. 여기에 디에틸 에테르 1ml씩 가하고 2분간 보텍싱하고 10,000 rpm에서 5분간 원심분리하였다. 유기용매층을 깨끗한 튜부에 옮긴후 EYELA vacuum concentorator (CVE-200D)를 이용하여 증발 건조 시켰다. 50% 메탄올 수용액 100 ㎕를 넣고 재용해하여 10,000 rpm에서 5분간 원심분리하였다. 갈색 바이얼에 옮겨 담고 HPLC 칼럼에 주입하였다. 이때 HPLC의 분석조건은 다음과 같았다. 이동상(Mobile phase)은 이동상 A(15% acetonitrile 용액; acetomitrile : 물 : 초산 =15: 85: 0.1(v/v/v))와 이동상 B(35% acetomitrile 용액; acetonitrile : 물 : 초산 = 35:65:0.1)를 사용하였으며, 유속은 1ml/min, 컬럼은 ODS column( 예; YMC-Pack, ODS-AM-303, Size 4.6×250mm)를 사용하였고, 칼럼 온도는 35℃에서 분석하였다. 측정파장은 254nm 이었다.

Indofine chemical에서 구입한 다이드제인(didzein)과 제니스테인(genistain) 표준품을 희석하여 5mg/ml의 스톡 솔류션(stock solution)을 만들고, 이 용액을 블랭크 랫트 혈장(blank rat plasma)으로 계열 희석하여 다이드제인(deidzein)과 제니스테인(genistein)의 혈장 중 농도가 10, 5, 1㎕/ml가 되도록 하였다. 이 검량선 샘플들을 위에서 설명한 샘플추출과정과 동일한 방법으로 추출하여 HPLC column에 주입하였다. 다이드제인(deidzein)과 제니스테인(genistein)의 농도범위 1~10㎕/ml에서 양호한 직선성(r=0.999)이 관찰되었으며, 검량선의 최소 농도인 1㎕/ml를 검출한계(detection limit)로 설정하여 분석하였다.

비교예1 : 녹차 카테킨 대조군 실험

코팅되지 않은 녹차 카테킨 400mg을 래트에 경구 투여하고, 상기 실험예1의 방법과 동일한 방법으로 채혈하고 생체내에 흡수된 카테킨량을 분석하였다. 그 결과를 표 2와 도 1에 나타내었다. 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛이 강하게 나타났으며, 속쓰림과 메스꺼움과 같은 위장장애가 발생하였다.

실시예1

녹차 카테킨(태양화학㈜) 300g 을 유동층 과립기(상품명: "Glatt Fluidized Bed Dryer" , Glatt(社)제조)에 넣고 대두 경화 유지 분말(C18 지방산 함량: 85.6중량%, C16 지방산 함량: 11.6중량%)을 300g 을 분무하여 코팅하였다. 코팅 조건은 유입 기체 온도를 25 ℃, 제품 온도를 60~70 ℃가 되도록 급기량과, 송액량을 조절하였으며, 질소 가스를 유입하여 주축 회전수 1000 rpm, 부축 회전수 2000 rpm의 조건으로 30분간 교반하여 코팅 카테킨을 제조하였다. 이 제조된 녹차 카테킨 제제를 실험예1의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 비교예1 보다 5.03배 높은 것으로 나타났다. 또한 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛의 개선효과가 있었으며, 속쓰림과 메스꺼움이 개선되어 위장장애가 감소되었다. 이 결과는 표 2와 도 1에 나타내었다.

실시예 2

현재 시판중인 녹차 카테킨 분말(300g, ㈜태양화학)을 아마인유(C18 지방산 함량: 91.3중량%, C16 지방산 함량: 8.2중량%)를 이용해 실시예1과 같은 방법을 이용해 피복 조성물을 제조하였다. 이 제조된 녹차 카테킨 제제를 실험예1의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 비교예1 보다 4.19배 높은 것으로 나타났다. 또한 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛의 개선효과가 있었으며, 속쓰림과 메스꺼움이 개선되어 위장장애가 감소되었다. 이 결과는 표 2와 도 1에 나타내었다.

실시예 3

현재 시판중인 녹차 카테킨 분말(300g, ㈜태양화학)을 올리브유(C18 지방산 함량: 81.6중량%, C16 지방산 함량: 17.2중량%)를 이용해 실시예1과 같은 방법을 이용해 피복 조성물을 제조하였다. 이 제조된 녹차 카테킨 제제를 실험예1의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 비교예1 보다 4.04배 높은 것으로 나타났다. 또한 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛의 개선효과가 있었으며, 속쓰림과 메스꺼움이 개선되어 위장장애를 감소시켰다. 이 결과는 표 2와 도 1에 나타내었다.

비교예 2

현재 시판중인 녹차 카테킨 분말(300g, ㈜태양화학)을 피마자유(C18 지방산 함량: 95.6중량%, C16 지방산 함량: 1.2중량%)를 이용해 실시예1과 같은 방법을 이용해 피복 조성물을 제조하였다. 이 제조된 녹차 카테킨 제제를 실험예1의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 비교예1 보다 1.74배 차이가 났으나 유의적이지 않았다. 또한 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛에 있어서도 그다지 개선효과가 보이지 없었으며, 속쓰림과 메스꺼움에 있어서도 개선 효과가 없었다. 이 결과는 표 2와 도 1에 나타내었다.

비교예 3

현재 시판중인 녹차 카테킨 분말(300g, ㈜태양화학)을 체지(C18 지방산 함량: 65.5중량%, C16 지방산 함량: 26중량%)를 이용해 실시예1과 같은 방법을 이용해 피복 조성물을 제조하였다. 이 제조된 녹차 카테킨 제제를 실험예1의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 비교예1 보다 1.57배 차이가 났으나 유의적이지 않았다. 또한 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛에 있어서도 그다지 개선효과가 보이지 없었으며, 속쓰림과 메스꺼움에 있어서도 개선 효과가 없었다. 이 결과는 표 2와 도 1에 나타내었다.

비교예 4

현재 시판중인 녹차 카테킨 분말(300g, ㈜태양화학)을 버터기름(C18 지방산 함량: 46.7중량%, C16 지방산 함량: 30.1중량%)을 이용해 실시예1과 같은 방법을 이용해 피복 조성물을 제조하였다. 이 제조된 녹차 카테킨 제제를 실험예1의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 비교예1 보다 1.52배 차이가 났으나 유의적이지 않았다. 또한 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛에 있어서도 그다지 개선효과가 보이지 없었으며, 속쓰림과 메스꺼움에 있어서도 개선 효과가 없었다. 이 결과는 표 2와 도 1에 나타내었다.

비교예 5

현재 시판중인 녹차 카테킨 분말(300g, ㈜태양화학)을 고래기름(C18 지방산 함량: 37.8중량%, C16 지방산 함량: 30중량%)을 이용해 실시예1과 같은 방법을 이용해 피복 조성물을 제조하였다. 이 제조된 녹차 카테킨 제제를 실험예1의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 비교예1 보다 1.41배 차이가 났으나 유의적이지 않았다. 또한 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛에 있어서도 그다지 개선효과가 보이지 없었으며, 속쓰림과 메스꺼움에 있어서도 개선 효과가 없었다. 이 결과는 표 2와 도 1에 나타내었다.

비교예 6

현재 시판중인 녹차 카테킨 분말(300g, ㈜태양화학)을 채종유(C18 지방산 함량: 40.3중량%, C16 지방산 함량: 3.4중량%)를 이용해 실시예1과 같은 방법을 이용해 피복 조성물을 제조하였다. 이 제조된 녹차 카테킨 제제를 실험예1의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 비교예1 보다 1.23배 차이가 났으나 유의적이지 않았다. 또한 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛에 있어서도 그다지 개선효과가 보이지 없었으며, 속쓰림과 메스꺼움에 있어서도 개선 효과가 없었다. 이 결과는 표 2와 도 1에 나타내었다.

비교예 7

현재 시판중인 녹차 카테킨 분말(300g, ㈜태양화학)을 정어리유(C18 지방산 함량: 26중량%, C16 지방산 함량: 23중량%)를 이용해 실시예1과 같은 방법을 이용해 피복 조성물을 제조하였다. 이 제조된 녹차 카테킨을 실험예1의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 비교예1 보다 1.20배 차이가 났으나 유의적이지 않았다. 또한 고농도 섭취시 쓴맛과 끝맛에 있어서도 그다지 개선효과가 보이지 없었으며, 속쓰림과 메스꺼움에 있어서도 개선 효과가 없었다. 이 결과는 표 2와 도 1에 나타내었다.

하기 표 2는 유지 코팅된 카테킨(실시예 1~3, 비교예 2~7)과 코팅하지 않은 원말(비교예 1)을 섭취한 경우에 녹차 카테킨 EGCG 의 시간경과에 따른 혈중량의 측정 결과와 이들에 대한 쓴맛·끝맛, 속쓰림과 메스꺼움을 평가한 결과이다.

비교예 8: 이소플라본 대조군 실험

시판중인 이소플라본 분말(P40, FUSICCO㈜, 이소플라본 함량 40%) 90mg을 래트에 경구 투여하고, 상기 실험예2의 방법과 동일한 방법으로 채혈하고 생체내에 흡수된 이소플라본량 분석하였다. 그 결과를 표 3과 도 2에 나타내었다.

실시예4

시판중인 이소플라본 분말(P40, FUSICCO㈜, 이소플라본 함량 40%)을 대두유(C18 지방산 함량: 85.6중량%, C16 지방산 함량: 11.6중량%)를 이용하여 실시예1과 같은 방법을 이용해 피복 조성물을 제조하였다. 이 제조된 이소플라본 제제를 실험예2의 방법을 통해 생체흡수율을 평가하였더니 블랭크 시험인 비교예8 보다 다이드제인과 제니스테인을 합산한 량의 비율이 3.21 배 정도 높은 것으로 나타났다. 그 결과는 표 3과 도 2에 나타내었다.

하기 표 3은 유지 코팅된 이소플라본(실시예4)과 코팅하지 않은 원말(비교예8)을 섭취한 경우에 다이드제인(daidzein) 과 제니스테인(genistein)의 시간 경과에 따른 혈중량의 측정 결과를 나타낸다.

본 발명에 따르면, 녹차 카테킨을 탄소수 18의 지방산 함량이 80~92%, 탄소수 16의 지방산 조성이 8~12% 으로 구성된 대두유, 아미인유, 올리브유 등의 식물성 경화유지로 코팅하면 생체 흡수율이 향상될 뿐만 아니라 카테킨의 쓴맛과 위장장애가 저감된 녹차 카테킨을 제공할 수 있다.

또한 난용성 물질인 이소플라본을 동일한 방법을 이용해 대두경화유지로 코팅하면 지용성으로 물성이 개선되고, 생체내흡수율을 높힌 이소플라본을 제공할 수 있다.

Claims (16)

1. 탄소수 18개의 지방산 80 내지 92중량% 및 탄소수 16개의 지방산 8 내지 12중량%를 함유하는 식물성 유지를 포함하는 경구용 피복 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 탄소수 18개의 지방산은 스테아릭 산(stearic acid), 올레익 산(oleic acid), 리놀레익 산(linoleic acid), 리놀레닉 산(linolenic acid) 및 리시놀레익 산(licinoleic acid)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상임을 특징으로 하는 경구용 피복 조성물.
3. 제1항에 있어서, 상기 탄소수 16개의 지방산은 팔미틱 산(palmitic acid) 및 헥사데세노익 산(hexadecenoid acid)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상임을 특징으로 하는 경구용 피복 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 식물성 유지는 대두유, 아미인유 및 올리브유로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상임을 특징으로 하는 경구용 피복 조성물.
5. 제1항에 있어서, 상기 식물성 유지는 수소첨가로 경화시킨 것임을 특징으로 하는 경구용 피복 조성물.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 피복 조성물은 이소플라본 또는 녹차 카테킨의 코팅에 사용되기 위한 것임을 특징으로 하는 경구용 피복 조성물.
7. 제6항에 있어서, 상기 이소플라본은 다이드제인 및 제니스테인으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상이고, 상기 녹차 카테킨은, 에피카테킨 (epicatechin, EC), 에피갈로카테킨 (epigallocatechin, EGC), 에피카테킨 겔레이트 (epicatechin gallate, ECG), 에피갈로카테킨 겔레이트(epigallocatechin gallate, EGCG), 카테킨 겔레이트 (catechin gallate, CG) 및 갈로카테킨 겔레이트(gallocatechin gallate, GCG)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상임을 특징으로 하는 경구용 피복 조성물.
8. 경구용 유효성분을 함유하는 코어층; 및

   상기 코어층 위에 형성되는 층으로서, 탄소수 18의 지방산 80 내지 92중량% 및 탄소수 16의 지방산 8 내지 12중량%를 함유하는 식물성 유지를 포함하는 피복층을 포함하는 경구용 코팅 제제.
9. 제8항에 있어서, 상기 탄소수 18개의 지방산은 스테아릭 산(stearic acid), 올레익 산(oleic acid), 리놀레익 산(linoleic acid), 리놀레닉 산(linolenic acid) 및 리시놀레익 산(licinoleic acid)로 이루어진 군으로부터 선 택되는 1종 이상임을 특징으로 하는 경구용 코팅 제제.
10. 제8항에 있어서, 상기 탄소수 16개의 지방산은 팔미틱 산(palmitic acid) 및 헥사데세노익 산(hexadecenoid acid)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상임을 특징으로 하는 경구용 코팅 제제.
11. 제8항에 있어서, 상기 식물성 유지는 대두유, 아미인유 및 올리브유로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상임을 특징으로 하는 경구용 코팅 제제.
12. 제8항에 있어서, 상기 식물성 유지는 수소첨가로 경화시킨 것임을 특징으로 하는 경구용 코팅 제제.
13. 제8항에 있어서, 상기 코어층은 이소플라본 또는 녹차 카테킨을 포함하는 것을 특징으로 하는 경구용 코팅 제제.
14. 제13항에 있어서, 상기 이소플라본은 다이드제인 및 제니스테인으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 녹차 카테킨은, 에피카테킨 (epicatechin, EC), 에피갈로카테킨 (epigallocatechin, EGC), 에피카테킨 겔레이트 (epicatechin gallate, ECG), 에피갈로카테킨 겔레이트(epigallocatechin gallate, EGCG), 카테킨 겔레이트 (catechin gallate, CG) 및 갈로카테킨 겔레이 트(gallocatechin gallate, GCG)으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상임을 특징으로 하는 경구용 코팅 제제.
15. 제13항 또는 제14항에 있어서, 상기 녹차 카테킨은 카페인과 혼합하여 사용하는 것을 특징으로 하는 경구용 코팅 제제.
16. 제8항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 경구용 코팅 제제의 총 중량을 기준으로 상기 코어층의 함량은 50~70중량%이고 상기 피복층의 함량은 30~50중량%인 것을 특징으로 하는 경구용 코팅 제제.

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