KR20070110046A

KR20070110046A - 염증 및 탈수초성 질환을 치료하기 위한 화합물

Info

Publication number: KR20070110046A
Application number: KR1020077019667A
Authority: KR
Inventors: 알프레드 엠. 아자미; 마이클 에이. 보스; 제쎄 패터슨
Original assignee: 크산투스 파마슈티컬스, 인코포레이티드
Priority date: 2005-01-28
Filing date: 2006-01-27
Publication date: 2007-11-15
Also published as: WO2006081431A2; WO2006081431A3; US20060189546A1; CA2596144A1; AU2006209225A1; JP2008528616A; EP1871367A2

Abstract

치료학적 유효량의 하기 화학식 (A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하여, 염증 및/또는 탈수초성 질환을 앓는 환자를 치료하는 방법:

상기 식에서, 가변기는 본원에 정의되어 있다.

Description

염증 및 탈수초성 질환을 치료하기 위한 화합물 {COMPOUNDS FOR TREATING INFLAMMATORY AND DEMYELINATING DISEASES}

자가면역 질환, 예를 들어, 다발성 경화증(MS), 전신 홍반성 루푸스(SLE), 류마티스 관절염(RA), 염증성 장질환(IBD), 및 건선은 본래 전신성일 수 있거나, 그 밖에 체내 개개의 기관에 관련될 수 있는 신체 면역계에 의한 손상을 나타낸다. 이들 질병은 면역계가 오류를 일으켜 보호기능을 중재하는 대신에 공격자가 되는 질병인 것으로 보인다.

다발성 경화증(MS)는 중추신경계의 탈수화에 의해 특징되는 소모성, 염증성, 신경 병이다. MS는 서유럽 및 북아메리카에서 여성의 빈도수가 더 높게 나타나는 청년층의 가장 보편적인 후천성 신경 질환이다. 이는 이러한 연령대의 다른 신경 질환에 비해 손실 수입 및 의료적 처치 둘 모두에서 보다 큰 장애 및 재정적 손실의 원인이 된다. 미국에서는 대략 250,000건의 MS가 있다. 이 질병의 증상은 피로, 무감각, 진전, 자통, 이상감각, 시각 장애, 어지러움증, 인지장애, 배뇨장애, 이동성 감소, 및 우울증을 포함한다. 상기 질병의 임상 패턴은 4가지 타입으로 분류된다: 재발-완화성, 2차 진행성, 원발성-진행성, 및 진행-재발성[참조: S.L. Hauser and D.E. Goodkin, Multiple Sclerosis and Other Demyelinating Diseases in Harrison's Principals of Internal Medicine 14^th Edition, vol. 2, Mc Graw-Hill, 1998, pp. 2409-2419].

MS는 중추 신경계에 영향을 미치며, 탈미엘린화 과정을 포함한다. 즉, 수초(myelin sheath)가 손실되는 반면, 축삭돌기가 보존된다. 질병의 후기에는, 축살돌기 또한 손상된다. 미엘린은 신속한 신경 충동 전도를 가능하게 하는 분리 물질을 제공한다. 분명하게도, 탈미엘린화에서는, 이러한 특성이 소실된다. MS의 정확한 병인은 알려지 있지 않은 데, MS의 원인이 되는 병인적 메카니즘은 이해되지 않으나, 몇몇 증거에서는, 탈미엘린화가 환경적 상해, 예를 들어, 바이러스 감염에 의해 유발된 자가면역 반응의 결과로서 질병의 탈미엘린화 특징에 의한 면역병리학적 기전을 가짐을 시사하고 있다. 병소, 즉, 플라크는 마크로파아지 및 활성화된 T 세포와 같은 면역학적 활성 세포의 침윤에 의해 특징된다. 구체적으로, MS는 T 세포 매개된 자가면역 염증성 반응이 원인인 것으로 가정된다. 자가면역 근거는 미엘린 염기성 단백질(MBP)에 특이적인 항체가 MS 환자의 혈청 및 뇌척수액에서 발견되었으며, 이러한 항체는 MBP 및 다른 미엘린 단백지질에 반응성인 T-세포와 함께 질병 활성을 증가시킨다는 사실에 의해 강력하게 지지된다. 추가로, 세포 수준에서, T-세포 증식 및 다른 세포의 이벤트, 예컨대 B 세포 및 마크로파아지의 활성 및 뇌혈관 장벽의 파괴에 의해 동반되는 사이토카인의 분비가 미엘린 및 희소돌기아교세포의 파괴를 초래할 수 있는 것으로 추정된다[참조: R. A. Adams, M.V. Victor and A.H. Ropper eds, Principals of Neurology, Mc Graw-Hill, New York, 1997, pp. 903-921]. 진행성 MS (원발성 및 2차)는 탈미엘린화와 함께 일어나는 신경퇴행성 과정에 기초할 수 있다.

지금까지 MS의 치료법은 아직 없다. 최근 치료법은 질병의 증상을 완화시키고, 가능한 한 진행을 막는 것을 목적으로 한다. 그 유형에 따라, 약물 치료는 보통 질환 변환 약물, 예컨대, 인터페론(인터페론 베타 1-a, 베타 1-b 및 알파), 글라티라머 아세테이트(glatiramer acetate) 또는 코르티코스테로이드, 예컨대, 메틸프레드니솔론 및 프레드니손의 사용을 필요로 한다. 또한, 화학치료제, 예컨대, 미톡산트론(mitoxantrone), 메토트렉세이트(methotrexate), 아자티오프린(azathioprine), 클라드리빈 시클로포스파미드(cladribine cyclophosphamide), 시클로스포린(cyclosporine) 및 티사브리(tysabri)가 사용되어 왔다. 상기 치료법 모두는 부작용 부담이 있고, 피로 및 우울증에 대해 효과가 거의 없거나 전혀 없고, 재발율 및 질병 악화 억제능력에 대해 제한된 효과를 갖는다. 인터페론에 의한 치료는 또한 이러한 치료의 효능성을 궁극적으로는 감소시킬 수 있는 중화 항체의 생성을 유도할 수 있다. 그러므로, MS의 진행 및 증상을 구제하기 위해 다른 약물과 함께 또는 단독으로 사용될 수 있는 신규 약물이 여전히 강력하게 요망되고 있다. 특히 2005년에 도입된 나탈리주마브(natalizumab)로서 공지된 항-인테그린 차단 항체를 사용하여, 면역학적 치료법에서 상당한 진전이 이루어졌지만, 특히 2차 진행성 질병에 만성적으로 사용하기 위한, 일반적으로 허용되거나 광범위하게 입수될 수 있는 신규한 소분자 치료법은 아직 나타나지 않았다.

결함의 진행이 다발성 경화증(MS)을 앓고 있는 환자의 주요 관심사이지만, 진행을 늦추는 대부분의 시도는 지금까지는 실망스러웠다. 면역조절제에 의한 최근 승인된 치료법은 2차 진행성 MS에 있어서 약간의 이점을 제공하거나 전혀 제공하지 않는다[참조: Lancet 1998, 54, 2352; Neurology 2000, 54, 2352; Neurology 2001, 56, 1496; Neurology 2002, 59, 679]. 최근 특이적인 면역억제 치료법(단일클론성 항체)는 진행 상의 악화는 근절할 수 있지만 임의의 상당한 이점은 없는 것으로 밝혀졌다[참조: Neurology 1999, 53, 751].

일반적인 면역억제법이 수십년 동안 진행성 MS에 사용되어 왔으나, 그 효능은 여전히 논쟁 중이다. 그러나, 임상 매개변수(3개월째에 확인된 1 EDSS 포인트의 증가)로서 치료 실패(TF) 및 굿킨(Goodkin) 등에 의해 정의된 "임상적으로 의미있는 이점"(플라세보 그룹에 대해 처리된 그룹에서 TF 율이 50% 감소)를 사용하면, 시클로스포린 A(Ann Neurol 1990, 27, 591), 메토트렉세이트(methotrexate) (Ann Neurol 1995, 37, 30) 및 아자티오프린(azathioprine) (Neurology 1989, 39, 1018) 은 임상적으로 의미있는 이점에 도달하지 않는 것으로 나타난다. 보다 효능있는 면역억제 치료법은 1년을 초과하지 않는 일시적인 이점을 제공한다. 이는 단기간(2개월) 전신 임파선 방사선 요법(Lancet 1986, 8495, 1405) 뿐만 아니라 2년간의 시클로포스파미드(CY)의 매달 투여(Arch Neurol 1987, 44, 823) 후에 관찰되었다.

따라서, 염증성 세포 손상에 의해 유발되는 것을 포함하여 신경퇴행 과정을 정지시키면서, 중대한 부작용 없이 오래 지속적인 임상적 이점을 제공하는 높은 임상 효능을 갖는 약제학적으로 허용되는 면역조절 치료법이 필요한 실정이다.

발명의 요약

본 발명은 다발성 경화증을 포함하는 염증성 및 탈수초성 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 이미다조아크리딘의 유도체를 투여함으로써 특정 염증성 및 탈수초성 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다.

일 구체예에서, 본 발명은 염증성 질환을 앓고 있는 환자를 치료하는 방법으로서, 이러한 환자에게 치료학적 유효량의 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 탈수초성 질병을 앓고 있는 환자를 치료하는 방법으로서, 이러한 환자에게 치료학적 유효량의 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 필요로 하는 환자에게서 신경 세포의 재미엘린화를 촉진시키는 방법으로서, 이러한 환자에게 치료학적 유효량의 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 치료학적 유효량의 하기 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 항염증제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 탈수초성 질환으로부터 초래되는 환자의 마비를 반전시키는 방법으로서, 척수내 신경 세포의 재미엘린화를 촉진시키기 위해 이러한 환자에게 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 척수내 면역 세포의 림프구 침윤을 억제시키에 충분한 양으로 투여하고, 이로써 환자의 마비를 치료하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

본 발명에 사용되는 이미다조아크리딘은 하기 화학식(A)로 기재된다:

(A)

상기 식에서,

R은 -H, 치환되거나 비치환된 알킬, 히드록실, 알콕시기, 할로겐, 화학식

로 표현되는 기이거나,

R 및 R⁵는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하거나, R 및 R⁴는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하고,

R²는 -H, 치환되거나 비치환된 C₁-C₁₀ 알킬 또는 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고,

R₃는 -(CH₂)_n-NR^aR^b(여기에서, n = 1-5이고, R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이거나, -NR^aR^b는 하나 이상의 치환가능상 탄소에서 메틸, 히드록실 또는 메톡시에 의해 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이고, N-피라지닐은 C1-C4알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환되고,

R⁴, R⁵ 및 R⁶은 각각 독립적으로 -H, -OH, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시이거나,

R⁵ 및 R⁶는 이들이 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성한다.

도 1a는 시마덱스(Symadex)™ 후 리포폴리사카라이드(LPS)로의 자극에 의한 B-세포 증식 억제를 도시한 막대 플롯이다.

도 1b는 시마덱스™ 후 콘카바날린(concavanalin) A(Con AP)로의 자극에 의한 T-세포 증식 억제를 도시한 막대 플롯이다.

도 2a는 시마덱스™ 후 콘카바날린 A(Con A)로의 자극에 의한 IL-4 방출 억제를 도시한 막대 플롯이다.

도 2b는 시마덱스™ 후 콘카바날린 A(Con A)로의 자극에 의한 IL-10 방출 억제를 도시한 막대 플롯이다.

도 3은 비히클 대조군에 대한 20 및 40mg/kg의 시마덱스™로 처리된 후 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 평균 임상적 등급의 막대 플롯이다.

도 4는 비히클 대조군에 대한 시마덱스™로 처리된 후 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 평균 임상적 등급(수행능 등급)을 보여주는 시간 의존성 챠트이다.

도 5는 비히클 대조군에 대한 20mg/kg으로 4주 투여된 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 평균 임상적 등급(수행능 등급)을 보여주는 시간 의존성 챠트이다.

도 6은 비히클 대조군에 대한 20mg/kg으로 6주 투여된 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 평균 임상적 등급(수행능 등급)을 보여주는 시간 의존성 챠트이다.

도 7는 비히클 대조군에 대한 20mg/kg으로 8주 투여된 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 평균 임상적 등급(수행능 등급)을 보여주는 시간 의존성 챠트이다.

도 8a는 비히클 대조군에 대한 20mg/kg으로 4주, 6주 및 8주 투여 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 시간 경과에 따른 T-세포 계수를 보여주는 막대 챠트이다.

도 8b는 비히클 대조군에 대한 20mg/kg으로 4주, 6주 및 8주 투여 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 시간 경과에 따른 CD-4 세포 계수를 보여주는 막대 챠트이다.

도 8c는 비히클 대조군에 대한 20mg/kg으로 4주, 6주 및 8주 투여 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 시간 경과에 따른 CD-8 세포 계수를 보여주는 막대 챠트이다.

도 8d는 비히클 대조군에 대한 20mg/kg으로 4주, 6주 및 8주 투여 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 시간 경과에 따른 B-세포 계수를 보여주는 막대 챠트이다.

도 9는 비히클 대조군에 대한 72시간의 간격을 두고 20mg/kg으로 2회 연속 투여된 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 만성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 평균 임상적 등급(수행능 등급)을 보여주는 시간 의존성 챠트이다.

도 10은 6mg/kg으로 15회 연속 매일 투여된 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 급성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 평균 임상적 등급을 보여주는 시간 의존성 챠트이다.

도 11은 6mg/kg으로 15회 연속 매일 투여된 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 급성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 체중 증가 기록을 보여주는 시간 의존성 챠트이다.

도 12는 6mg/kg으로 15회 연속 매일 투여된 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 급성 단계의 자가면역성 뇌척수염(EAE)을 앓고 있는 동물의 부검에 대한 평균 병리 등급을 보여주는 막대 챠트이다.

도 13은 30mg/kg으로 3회 연속 매일 투여된 후 시마덱스™로 처리후의 표시된 날에서의 급성 단계의 콜라겐 모노클로날 항체(mAB) 유도된 관절염을 앓고 있는 동물의 평균 수행능을 보여주는 시간 의존성 막대 챠트이다.

도 14는 본 발명에서 기술된 화합물과 동시 투여될 수 있는 약제학적 활성제의 화학식을 기재한 것이다.

이미다조아크리딘의 특정 유도체를 첨가하여 여러 염증성 질환 및 탈미엘린화 관련 질환의 증상을 치료하고/하거나 경감시킬 수 있다는 것이 밝혀졌다.

구체적으로, 여러 염증성 질환 및 탈수화 관련 질환이 이러한 질환을 앓고 있는 환자에게 치료학적 유효량의 하기 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하므로써 치료될 수 있다는 것이 밝혀졌다:

(A).

상기 화학식(A)에서, 치환기는 각각 독립적으로 하기와 같이 정의된다:

R은 -H, 치환되거나 비치환된 알킬, 히드록실, 알콕시기, 할로겐이거나, R 및 R⁵, 또는 다르게는 R 및 R⁴는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬, 또는 하나 이상의 산소, 황 또는 치환되거나 비치환된 질소를 함유하는 비방향족 헤테로사이클을 형성한다.

바람직하게는, R은 -H; -OH, -SH, 할로겐, 시아노, 니트로, C1-C3 알킬, C1 -C3 할로알킬, C1-C3 알콕시, C1-C3 할로알콕시 또는 C1-C3 알킬 설파닐에 의해 치환되거나 비치환된 C1-C4 알킬, 아민; C1-C2 알킬아민; 또는 C1-C2 디알킬아민이거나; R 및 R⁵, 또는 다르게는, R 및 R⁴는 이들이 개입되는 탄소 원자와 함께 5-6원 시클로알킬, 하나 또는 두개의 산소 원자를 함유하고, 메틸 또는 히드록시에 의해 치환되거나 비치환된 5-6원 비방향족 헤테로사이클을 형성한다.

일 구체예에서, R은 하기 화학식에 의해 표현된다:

.

보다 바람직하게는, R은 -H, -OH, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시기, -F이거나, R⁴ 또는, 다르게는 R⁵와 함께 메틸렌디옥시기를 형성된다. 보다 바람직하게는, R 은 -H 또는 C1-C6 알콕시기이다. 다르게는, R은 -OH 또는 -OCH₃이다.

R²는 수소, 치환되거나 비치환된 Cl-ClO 알킬 또는 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이다. 바람직하게는, R²는 -H, C1-C8 알킬, 또는 하나 이상의 C1-C4 알킬, C1-C4 알콕시, C1-C4 할로알콕시 또는 시아노기로 치환되거나 비치환된 페닐이다. 보다 바람직하게는, R²는 -H 또는 C1-C4 알킬이다.

R³는 -(CH₂)_n-NR^aR^b(여기에서, n은 1 내지 5의 정수이고, R^a 및 R^b는 동일하거나 상이할 수 있으며, 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이다)을 나타낸다. 이러한 알킬에 대한 치환기의 예로는 히드록실, Cl-C4 히드록시알킬, 아미노, N-알킬-아미노 또는 N,N-디알킬아미노기가 포함된다.

추가로, -NR^aR^b는 각각 하나 이상의 치환가능한 탄소에서 메틸, 히드록실, 또는 메톡시로 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이고, N-피라지닐은 C1-C4 알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환된다.

바람직하게는, n은 2 내지 3의 정수이고, R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 -H, 또는 Cl-C4 알킬이다.

R⁴ 및 R⁶는 독립적으로 각각 -H, -OH, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시이다. 몇몇 구체예에서, R 및 R⁴는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성된다. R 및 R⁴는 이들이 개입되는 탄소 원자와 함께 5-6원 시클로알킬 또는 하나 또는 두개의 산소 원자를 함유하고, 메틸 또는 히드록실에 의해 치환되거나 비치환되는 5-6원 비방향족 헤테로사이클을 형성하고, 보다 바람직하게는, R⁴는 -H, -OH, C1-C3 알콕시이거나, R과 함께 메틸렌디옥시기를 형성하고, R⁶은 -H, -OH, 또는 C1-C3 알콕시이다.

보다 바람직하게는, R⁴ 및 R⁶는 독립적으로 각각 -H, -OH, 또는 -OCH₃이다.

R⁵는 -H, -OH, 할로겐, C1-C6 알콕시이다. 몇몇 구체예에서, R 및 R⁵는, 이들이 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성한다. R⁵ 및 R, 또는 다르게는 R⁵ 및 R⁶는 개입되는 탄소 원자와 함께, 바람직하게는 5-6원 시클로알킬, 또는 하나 또는 두개의 산소 원자 및 메틸 또는 히드록시에 의해 치환되거나 비치환된 5-6원 비방향족 헤테로사이클을 형성하고; 보다 바람직하게는, R⁵는 -H, -OH, C1-C3 알콕시이거나, R, 또는 다르게는 R⁶와 함께 메틸렌디옥시기를 형성한다.

몇몇 구체예에서, 화학식(A)의 치환기는 하기와 같이 정의된다:

R은 -H; -OH, -SH, 할로겐, 시아노, 니트로, C1-C3 알킬, C1-C3 할로알킬, C1-C3 알콕시, C1-C3 할로알콕시 또는 C1-C3 알킬 설파닐로 치환되거나 비치환된 C1-C4 알킬, 아민, C1-C2 알킬아민 또는 C1-C2 디알킬아민이거나; R 및 R⁵는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 5-6원 시클로알킬 또는 하나 또는 두개의 산소 원자를 함유하고 메틸 또는 히드록실로 치환되거나 비치환된 5-6 원 비방향족 헤테로사이클을 형성하고;

R²는 -H, C1-C8 알킬, 하나 이상의 Cl-C4 알킬, C1-C4 알콕시, C1-C4 할로알콕시 또는 시아노기로 치환되거나 비치환된 페닐이고;

R³는 -(CH₂)_n-NR^aR^b이고, n은 2 내지 3의 정수이고, R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이거나, -NR^aR^b는 하나 이상의 치환가능한 탄소에서 메틸, 히드록실, 또는 메톡시기로 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이며, N-피라지닐은 C1-C4 알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환되며;

R⁴, R⁵ 및 R⁶는 각각 독립적으로 -H, -OH, 또는 C1-C3 알콕시이거나, R⁴, 또는 다르게는 R⁵는 R과 함께 메틸렌디옥시기를 형성한다.

바람직하게는, 화학식(A)의 화합물은 화학식(I)에 의해 표현된다:

(I)

상기 화학식(I)에서, 변수 R, R², n, R^a 및 R^b는 화학식(A)에 대해 상기 정의된 바와 같은 정의 또는 바람직한 정의를 지닌다. 화학식(I)의 변수에 대한 바람직한 정의는 하기에 기재된다:

R은 히드록시 또는 알콕시기, 예를 들어, C1-C6 알콕시기를 나타낸다. 다르게는, R은 -OH 또는 -OCH₃이고;

R^a 및 R^b는 동일하거나 상이할 수 있고, 수소, 또는 치환되거나 비치환된 알킬이다. 바람직하게는, R^a 및 R^b는 C1-C3 알킬이다. 보다 바람직하게는, R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 에틸이다. 다르게는 R^a 및 R^b는 각각 메틸이다. 다른 구체예에서, R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이다.

R^a 또는 R^b가 치환된 알킬인 경우, 알킬 상의 적합한 치환기는 히드록실, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, N-알킬-아미노 또는 N,N-디알킬아미노기를 포함할 수 있으며, 바람직하게는 1-4개의 탄소 원자를 함유한다. 이러한 치환기의 예는 히드록시에틸, 아미노에틸, N-알킬아미노에틸 및 N,N-디알킬아미노에틸이 있다.

화학식(I)의 다른 구체예에서, -NR^aR^b는 하나 이상의 치환가능한 탄소에서 메틸, 히드록시 또는 메톡시로 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이고, N-피라지닐은 C1-C4 알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환된다.

바람직하게는, 화학식(I)에서 n은 2 또는 3이다.

화학식(I)에서, R²는 수소 또는 C1-C6 알킬이다. 바람직하게는, R²는 수소 또는 C1-C4 알킬이다. 보다 바람직하게는, R²는 -H이다.

화학식(I)의 화합물의 몇몇 바람직한 구체예에서, R은 -OH 또는 -OCH₃이고, R^a 및 R^b는 동일하고, C1-C6 알킬기, 바람직하게는, 메틸 또는 에틸을 나타내고, n 은 2 또는 3이며; R²는 수소 또는 직쇄 C1-C4 알킬을 나타낸다. 바람직하게는, R²는 -H이다.

화학식(I)의 화합물의 예로는 하기 화합물(IIA) 내지 (IIH)가 포함된다:

매우 바람직한 구체예에서, 화학식(I)의 화합물은 5-[[(디에틸아미노)에틸]아미노]-8-히드록시이미다조[4,5,1-데]-아크리딘-6-온이며, 이의 구조식은 하기 화학식(III)으로 표현된다:

(III)

또 다른 구체예에서, 화학식(A)의 화합물은 하기 화학식(IV)에 의해 표현된다:

(IV)

본원에서 사용되는 용어 "알킬"은 다르게 명시되지 않는 한, 일반적으로 C1-C10, 바람직하게는 C1-C6의 직쇄 또는 분지쇄 포화된 일가 탄화수소 라디칼을 포함한다. 알킬기의 예로는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 및 t-부틸이 포함되나, 이로 제한되는 것은 아니다. 치환된 알킬에 대해 적합한 치환기는 -OH, -SH, 할로겐, 시아노, 니트로, C1-C3 알킬, C1-C3 할로알킬, C1-C3 알콕시, C1-C3 할로알콕시 또는 C1-C3 알킬 설파닐을 포함한다.

본원에서 사용되는 용어 "시클로알킬"은 비방향족 포화된 카보시클릭 부분이다. 시클로알킬의 예로는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 및 시클로헵틸이 포함되나, 이로 제한되는 것은 아니다. 시클로알킬에 대해 적합한 치환기는 알킬에 대해 정의된 바와 같다.

본원에서 사용되는 용어 "할로알킬"은 하나 이상의 F, Cl, Br, 또는 I로 치환된 알킬을 포함하며, 알킬은 상기 정의된 바와 같다.

본원에서 사용되는 용어 "알콕시"는 "알킬-O"기를 의미하며, 알킬은 상기 정의된 바와 같다.

본원에서 사용되는 용어 "할로알콕시"는 "할로알킬-O-"을 의미하며, 할로알킬은 상기 정의된 바와 같다.

본원에서 사용되는 아미노기는 일차(-NH₂), 2차 (-NHR_x), 또는 3차 (-NR_xR_y)일 수 있으며, 여기에서, R_x 및 R_y는 임의의 치환되거나 비치환된 알킬일 수 있으며, 알킬은 상기 정의된 바와 같다.

본원에서 사용되는 용어 "아릴"은 카보시클릭 방향족기를 나타낸다. 아릴기의 예로는 페닐 및 나프틸이 포함되나, 이로 제한되는 것은 아니다.

본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴"은 하나 이상의 헤테로원자(O, S, 또는 N)를 함유하는 방향족기를 나타낸다. 헤테로아릴기는 모노시클릭 또는 폴리시클릭, 즉 하나 이상의 카보시클릭 방향족기 또는 다른 모노시클릭 헤테로아릴기에 융합된 모노시클릭 헤테로아릴 고리일 수 있다. 본 발명의 헤테로아릴기는 하나 이상의 옥소 부분으로 치환된 고리 시스템을 포함할 수 있다. 헤테로아릴기의 예로는 피리디닐, 피리다지닐, 이미다졸릴, 피리미디닐, 피라졸릴, 트리아졸릴, 피라지닐, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴, 테트라졸릴, 푸릴, 티에닐, 이속사졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 이소티아졸릴, 피롤릴, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 인돌릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조푸라닐, 신놀리닐, 인다졸릴, 인돌리지닐, 프탈라지닐, 피리다지닐, 트리아지닐, 이소인돌릴, 푸리닐, 옥사디아졸릴, 티아졸릴, 티아디아졸릴, 푸라자닐, 벤조푸라자닐, 벤조티오페닐, 벤조트리아졸릴, 벤조티아졸릴, 벤족사졸릴, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 나프티리디닐, 디히드로퀴놀릴, 테트라히드로퀴놀릴, 디히드로이소퀴놀릴, 테트라히드로이소퀴놀릴, 벤조푸릴, 푸로피리디닐, 피롤로피리미디닐, 및 아자인돌릴이 포함되나, 이로 제한되는 것은 아니다.

용어 "비방향족 헤테로사이클"은 하나 이상의 고리 탄소, 바람직하게는 1 내지 4개의 고리 탄소가 각각 N, O 또는 S과 같은 헤테로원자에 의해 치환된, 일반적으로 4 내지 8원, 바람직하게는 5 내지 6원 비방향족 카보시클릭 고리 시스템을 나타낸다. 비방향족 헤테로시클릭 고리의 예로는 3-테트라히드로푸라닐, 2-테트라히드로피라닐, 3-테트라히드로피라닐, 4-테트라히드로피라닐, [1,3]-디옥살라닐, [1,3]-디티올라닐, [1,3]-디옥사닐, 2-테트라히드로티오페닐, 3-테트라히드로티오페닐, 2-모르폴리닐, 3-모르폴리닐, 4-모르폴리닐, 2-티오모르폴리닐, 3-티오모르폴리닐, 4-티오모르폴리닐, 1-피롤리디닐, 2-피롤리디닐, 3-피롤리디닐, 1-피페라지닐, 2-피페라지닐, 1-피페리디닐, 2-피페리디닐, 3-피페리디닐, 4-피페리디닐, 4-티아졸리디닐, 디아졸로닐, N-치환된 디아졸로닐, 및 1-프탈리미디닐이 포함된다.

헤테로아릴 또는 비방향족 헤테로시클릭기는 C-결합되거나 N-결합(가능한 경우)될 수 있다. 예를 들어, 피롤로부터 유래된 기는 피롤-1-일(N-결합) 또는 피롤-3-일(C-결합)일 수 있다.

아릴, 헤테로아릴, 또는 비방향족 헤테로시클릭기의 적합한 치환기는 기술된 화합물의 약제학적 활성을 사실상 간섭하지 않는 것들이다. 하나 이상의 치환기가 존재할 수 있으며, 이들은 동일하거나 상이할 수 있다. 비방향족 헤테로시클릭기내 치환가능한 탄소 원자에 대해 적합한 치환기의 예로는 -OH, 할로겐 (-F, -Cl, -Br, 및 -I), -R', -OR', -CH₂R', -CH₂OR', -CH₂CH₂OR', -CH₂OC(O)R', -O-COR', -COR', -SR', -SCH₂R', - CH₂SR', -SOR', -SO₂R', -CN, -NO₂, -COOH, -SO₃H, -NH₂, -NHR', -N(R')₂, -COOR', -CH₂COOR', -CH₂CH₂COOR', -CHO, -CONH₂, -CONHR', -C0N(R')₂, -NHCOR', -NR'COR', -NHCONH₂, -NHCONR'H, -NHC0N(R')₂, -NR'CONH₂, -NR'CONR'H, -NR'C0N(R')₂, -C(=NH)-NH₂, -C(=NH)-NHR', -C(=NH)-N(R')₂, -C(=NR')-NH₂, -C(=NR')-NHR', -C(=NR')-N(R')₂, -NH-C(=NH)-NH₂, -NH-C(=NH)-NHR', -NH-C(=NH)-N(R')₂, -NH-C(=NR')-NH₂, -NH-C(=NR')-NHR', -NH-C(=NR')-N(R')₂, -NR'H-C(=NH)-NH₂, -NR'-C(=NH)-NHR', -NR'-C(=NH)-N(R')₂, -NR'-C(=NR')-NH₂, -NR'-C(=NR')-NHR', -NR'-C(=NR')-N(R')₂, -SO₂NH₂, -SO₂NHR', -SO₂NR'₂, -SH, -SO_kR' (k 는 O, 1 또는 2이다) 및 -NH-C(=NH)-NH₂가 포함된다. 각각의 R'는 독립적으로 알킬기이다.

비방향족 헤테로시클릭기 또는 헤테로아릴기의 질소에 대한 적합한 치환기로는 -R", -N(R")₂, -C(O)R", -CO₂R", -C(O)C(O)R", -C(O)CH₂C(O)R", -SO₂R", -SO₂N(R")₂, -C(=S)N(R")₂, -C(=NH)-N(R")₂, 및 -NR"SO₂R"가 포함된다. R"는 수소, 알킬 또는 알콕시기이다.

화합물(IIA) 내지 (IIH) 및 (III)은 본원에 그 전부가 참고 문헌으로 인용되는 미국 특허 제 5,231,100호 및 제 6,229,015호에 기술된 여러 반응식에 따라 합성될 수 있다. 이러한 반응식의 일례는 하기와 같다:

(반응식 I)

화학식(III)의 화합물은 상표명 시마덱스™로 공지되어 있다. 이제, 시마덱스™가 LPS로 자극하여 B-세포 증식을 억제하고, Con A로 자극하여 T-세포 증식을 억제할 뿐만 아니라, 시마덱스™가 IL-4 및 IL-10과 같은 시토킨의 방출을 억제하는 것으로 밝혀졌다(실시예 1). 추가로, 마이크로어레이(microarray) 실험에서, 시마덱스™ 처리가 염증 및 증식 상태에 영향을 미치는 주요 조절성 경로, 특히 침입성 세포의 집합 및 응집 능력, 세포 증식의 하향조절 및 세포-세포 신호화에 관여하는 여러 유전자의 변형된 발현을 초래하는 것으로 밝혀졌다(실시예 3). 이러한 분자 약학 연구는 시마덱스™가 자가면역 질환과 관련된 염증성 병인학의 홀마크(hallmark)인 세포 응집화 및 증식화 메커니즘에 관련된 유전자 및 침입성 세포 성장과 관련된 과정에 하향조절 효과를 나타낸다는 것을 보여준다. 취합해 보면, 이러한 결과는 시마덱스™가 자가 면역 질환을 포함하는 염증성 요소를 갖는 장애를 치료하는 데 사용될 수 있음을 시사한다.

추가로, 시마덱스™은 만성 진행성 MS에 대해 전통적인 동물 모델인 암컷 하틀리 기니아 피크(Hartly guinea pig) 자가면역성 뇌척수염(EAE) 모델에서의 활성을 입증한 것으로 밝혀졌다(실시예 2). 실시예 3의 결과와 취합해 보면, 이 결과는 시마덱스™가 탈수초성 뿐만 아니라 염증성 요소를 지닌 장애를 치료하는 데 사용될 수 있음을 시사한다.

따라서, 일 구체예에서, 본 발명은 염증성 질병을 앓고 있는 환자를 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 질병은 전신 루푸스, 염증성 장질환, 건선, 크론병, 류마티스 관절염, 사이코이드증, 알츠하이머병, 만성 염증성 탈수초성 신경병증, 인슐린 의존성 당뇨병, 아테롬성동맥경화증, 천식, 척수 손상 또는 뇌졸중일 수 있다.

만성 염증성 탈수초성 신경병증의 예는 하기를 포함한다: 만성 면역 탈수초성 다발신경병증(CIDP); 다초점 CIDP; 다초점 운동 신경병증(MMN); 안티-MAG 증후군(미엘린 결합된 글리코단백질에 결합되는 IgM을 갖는 신경병증); GALOP 증후군(보행 장애 자가항체 후기발병 다발신경병증); 안티-설파티드 항체 증후군; 항티-GM2 강글리오시드 항체 증후군; POEMS 증후군(다발신경병증 장기비대 내분비질환 또는 부종 M-단백질 피부 변화); 신경주위염 및 IgM 안티-GD1b 강글리오시드 항체 증후군.

상기 방법은 환자에게 치료학적 유효량의 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 화학식(IIA) 내지 (IIH)이 사용될 수 있다. 바람직하게는, 화학식 (III)의 화합물이 사용된다. 다르게는, 화학식(IV)의 화합물이 사용된다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 탈수초성 질병을 앓고 있는 환자를 치료하는 방법에 관한 것이다. 본원에서 사용되는 "탈수초성 질병"은 수초(myelin sheath)의 완결성을 파괴, 분해하거나, 수초를 손상시키는 질병이다. 본원에서 사용되는 "수초"는 척추동물 말초 신경을 둘러싸고 있는 절연층이며, 전달 속도를 증가시키고, 말초내 슈반 세포(Schwann cell)에 의해, 또는 중추신경계의 희소돌기아교세포에 의해 형성된다. 이러한 질병은 다발성 경화증, 선천성 대사 장애, 비정상 미엘린화에 의한 신경병증, 약물 유래된 탈미엘린화, 방사선 유도된 탈미엘린화, 유전적 탈미엘린화 질병, 프리온(prion) 유래된 탈미엘린화, 뇌염 유도된 탈미엘린화, 척수 손상, 알츠하이머병 뿐만 아니라, 만성 염증성 탈수초성 신경병증(예는 상기에 기술됨)일 수 있다. 일 구체예에서, 질병은 다발성 경화증이다. 상기 방법은 환자에게 치료학적 유효량의 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 화학식(IIA) 내지 (IIH)의 화합물이 사용될 수 있다. 바람직하게는, 화학식 (III)의 화합물이 사용된다. 다르게는, 화학식(IV)의 화합물이 사용된다.

용어 "환자"는 온혈 동물, 예를 들어, 래트, 마우스, 개, 고양이, 기니아 피크 및 사람과 같은 영장류를 의미한다. 용어 "치료하다" 또는 "치료하는"은 증상을 완화시키거나, 일시적이거나 영구적인 증상의 원인을 제거하거나, 증상의 출현 및 명명된 질환 또는 질병의 진행을 방지하거나 지연시키는 것을 포함하는 임의의 치료를 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다. 용어 "치료학적 유효량"은 명명된 질환 또는 질병을 치료하는 데 효과적인 화합물의 양을 의미한다. 특정 구체예에서, 치료학적 유효량은 환자에게서 신경 세포의 재미엘린화에 영향을 미치기에 충분한 양을 의미한다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 환자에게서 신경 세포의 재미엘린화를 촉진시키는 방법으로서, 이를 필요로 하는 환자에게 치료학적 유효량의 화학식(I), 화학식(IIA)-(IIH), 화학식(III) 또는 화학식(IV), 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다. 환자는 상기 기재된 임의의 탈수초성 질병을 앓고 있을 수 있다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 필요로 하는 환자에게서 탈미엘린화를 억제하고, 재미엘린화를 촉진시키는 방법으로서, 치료학적 유효량의 화학식(I), 화학식(IIA)-(IIH), 화학식(III) 또는 화학식(IV), 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 염 및 하기 기술되는 항염증제의 조합물을 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 탈수초성 질병을 앓고 있는 치료가 필요한 대상에게서 마비를 역전시키는 방법으로서, 척수내 신경 세포의 재미엘린화를 촉진시키고, 이로써 환자의 마비를 치료하기 위해 환자에게 척수내 면역 세포의 림프구 침윤을 억제하기에 충분한 양으로 화학식(I), 화학식(IIA)-(IIH), 화학식(III) 또는 화학식(IV), 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

화학식(IIA)-(IIH), 화학식(III) 또는 화학식(IV)의 화합물을 포함하는 화학식(A)의 기술된 화합물이 치료학적 활성능을 나타내는 용량 범위는 질병의 중증도, 환자, 제형, 환자가 앓고 있는 그 밖의 하위 질병 상태, 및 환자에게 동시 투여될 수 있는 다른 의약에 따라 달라질 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 화합물은 약 0.001mg/환자 체중 kg/일 내지 약 100mg/환자 체중 kg/일의 용량에서 치료학적 활성을 나타낸다. 예를 들어, 용량은 매일, 이틀마다, 또는 매주 0.1-100mg/kg, 1-100mg/kg, 10-100 mg/kg, 1-50 mg/kg, 10-50 mg/kg 또는 10-30 mg/kg일 수 있다.

다른 구체예에서, 화합물은 하기 기술되는 임의의 경로에 의해 투여될 수 있다. 바람직하게는 1mg/kg 체중 내지 20mg/kg 체중의 양으로 정맥내 투여될 수 있다. 화합물은 매일, 72시간 마다 한번, 또는 매주 투여될 수 있다.

화합물이 류마티스 관절염에 사용되는 일 구체예에서, 화합물은 매일, 이틀마다, 또는 매주 1-50 mg/kg, 10-40 mg/kg, 20-30 mg/kg 또는 30 mg/kg 체중의 양으로 경구적으로 투여될 수 있다.

일 구체예에서, 본 발명의 화합물은 필요로 하는 환자에게 장기간 투여된다. 예를 들어, 화합물의 장기 투여는 1년 이상, 2년 이상, 3년 이상 또는 그 이상의 기간 동안에 매일, 매주, 이주마다, 또는 매달 이루어진다.

일 구체예에서, 화학식(IIA)-(IIH), 화학식(III) 또는 화학식(IV)의 화합물을 포함하는 화학식(A)의 화합물은 1.5-30 mg/kg의 양으로 1회씩 1-3개월의 간격으로 정맥내 투여된다. 또 다른 구체예에서, 화합물은 상기와 동일한 스케쥴로 5-100 mg/kg의 양으로 경구 투여된다. 다르게는, 화학식(A)의 화합물은 3개월 이하의 기간 동안, 그리고 1.5 내지 30mg/kg의 누적 용량까지 수회 투여된다. 또 다른 구체예에서, 누적 용량은 5 내지 100 mg/kg이다.

또 다른 구체예에서, 화학식(A)의 화합물은 8 내지 24주 동안 매주 2.5-10 mg/kg의 양으로 정맥내 투여되며, 필요에 따라 6-18주 약물을 중단한 후 반복된다. 다르게는, 화학식(A)의 화합물은 20 mg/kg 내지 240 mg/kg의 누적 용량을 달성하도록 14주 내지 42주의 기간 동안 수회 투여된다. 투여는 14-42주의 기간이 1회 이상 반복될 수 있다.

또 다른 구체예에서, 화학식(A)의 화합물은 1 내지 2 주동안 72시간의 간격으로 2.5-10 mg/kg의 양으로 2회씩 매달 반복적으로 정맥내 투여된다. 다르게는, 화학식(A)의 화합물은 11 mg/kg 내지 47 mg/kg의 누적 용량까지 2주 이하의 기간 동안 수회 투여된다. 투여는 매달 반복될 수 있다.

또 다른 구체예에서, 화학식(A)의 화합물은 10 내지 15일 동안 1 내지 3 mg/kg의 양으로 매일 30 내지 45일마다 반복적으로 경구적으로 투여된다. 다르게는, 화학식(A)의 화합물은 10 mg/kg 내지 45 mg/kg의 누적 용량까지 40 내지 60일 이하의 기간 동안 수회 투여된다. 투여는 40 내지 60일 이하의 기간이 1회 이상 반복될 수 있다.

또 다른 구체예에서, 본 발명의 화합물은 주당 3일 동안 2 내지 6 mg/kg의 양으로 매일 15 내지 30일마다 반복적으로 경구적으로 투여된다. 다르게는, 화학식(A)의 화합물은 6-18 mg/kg의 누적 용량까지 30일 이하의 기간 동안 수회 투여된다. 투여는 30일 이하의 기간이 1회 이상 반복될 수 있다.

바람직하게는, 본원에 기재된 화합물 또는 화합물의 조합 투여는 10ng/ml 이상의 환자내 화합물의 효과적인 혈액 수준을 초래한다. 예를 들어, 화합물은 환자 체중 kg당 20 내지 약 500㎍의 양으로 정맥내 투여될 수 있다.

만성 (재발-완화성) 다발성 경화증(MS)에 대한 바람직한 사람 용량은 0.1 mg/kg 내지 10 mg/kg, 1-10 mg/kg, 1-5 mg/kg, 2-7 mg/kg, 2-5 mg/kg이다. 스케쥴은 1개월에 한번, 1개월에 두번, 1개월에 세번, 또는 3개월, 6개월, 12개월 이상 동안 1주일에 1회 또는 2회일 수 있다.

급성 MS를 치료하기 위한 바람직한 사람 용량은 1일 3회, 1일 2회, 1일 1회, 또는 매주, 2주마다 또는 매달 기준으로 0.1 mg/kg 내지 10 mg/kg, 0.1-5 mg/kg, 0.1-2 mg/kg, 0.5-2 mg/kg 또는 0.5-1 mg/kg이다.

류마티스 관절염을 치료하기 위한 바람직한 사람 용량은 1일 3회, 1일 2회, 1일 1회, 또는 매주, 2주마다 또는 매달 기준으로 0.1 mg/kg 내지 10 mg/kg, 1-10 mg/kg, 1-5 mg/kg, 2-7 mg/kg, 2-5 mg/kg이다.

상기 기술된 질병을 앓고 있는 환자를 치료함에 있어서, 기술된 화합물은 모두 화합물을 치료학적으로 효과적인 양으로 생체이용가능하도록 하는 임의의 형태 또는 모드(mode)로 투여될 수 있다. 예를 들어, 화학식(A)의 화합물은 약제학적으로 허용되는 염의 형태로 투여될 수 있다. 용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 본 발명의 화합물로 형성될 수 있는 것이라면 어떠한 것이라도 가능한 산 부가염 또는 염기 부가염을 의미한다. "약제학적으로 허용되는 산 부가염"은 화학식(A)에 의해 표현되는 기본 화합물의 임의의 비독성 유기 또는 무기 산 부가 염이다. 적합한 염을 형성하는 무기 산의 예로는, 염산, 브롬화수소산, 황산 및 인산 및 산 금속 염, 예를 들어, 소듐 모노하이드로겐 오로쏘포스페이트 및 황산수소칼륨이 포함된다. 적합한 염을 형성하는 유기산의 예로는 모노-, 디-, 트리카르복실산이 포함된다. 이러한 산의 예는, 예를 들어, 아세트산, 글리콜산, 락트산, 피루브산, 말론산, 석신산, 글루타르산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 말레산, 히드록시말레산, 벤조산, 히드록시벤조산, 페닐아세트산, 신남산, 살리실산, 2-페녹시벤조산, p-톨루엔설폰산 및 설폰산(예컨대, 메탄설폰산 및 2-히드록시에탄설폰산)이 있다. 일- 또는 이산 염이 형성될 수 있으며, 이러한 염은 수화되거나 실질적으로 무수 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 이러한 화합물의 산부가염은 물 및 여러 친수성 유기 용매에 보다 용해성이며, 이들의 유리 염기 형태와 비교하여 일반적으로 보다 높은 융점을 나타낸다. "약제학적으로 허용되는 염기 부가염"은 화학식(IIA)-(IIH), (III) 및 (IV)를 포함하여 화학식(A)의 화합물의 비독성 유기 또는 무기 염기 부가염을 의미한다. 예를 들면, 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 수산화물, 예컨대, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화칼슘, 수산화마그네슘 또는 수산화바륨; 암모니아, 및 지방족, 지방족고리, 또는 방향족 유기 아민, 예컨대, 메틸아민, 트리메틸아민 및 피콜린이 있다. 에스테르가 가수분해되지 않도록 적합한 염을 선택하는 것이 중요할 수 있다. 적합한 염의 선택 기준은 당업자들에게 공지되어 있다.

본 발명의 화합물은 경구적, 설하, 구강, 피하, 근육내, 정맥내, 경피적, 비강내, 직장내, 국소적 투여 등을 포함하는 다수의 경로에 의해 투여될 수 있다. 제형을 제조하는 당업자들은 치료되는 질병 또는 질환에 대해 선택된 화합물의 특정 특징, 질병의 단계, 환자의 질병 및 기타 관련 상황에 따라 적합한 투여 형태 및 모드를 결정할 수 있다. 예를 들어, 본원에 참조로 인용되는 문헌(Remington's Pharmaceutical Sciences, 18^th Edition, Mack Publishing Co. (1990))을 참조하라.

본 발명의 화학식(A)의 화합물은 또한 국소적으로 투여될 수 있으며, 이 경우, 담체는 적합하게는 용액, 연고 또는 젤 기재를 포함할 수 있다. 기재는, 예를 들어 하나 이상의 와세린(petrolatum), 라놀린, 폴리에틸렌 글리콜, 밀랍, 광유, 희석제(예컨대, 물 및 알코올), 및 유화제 및 안정화제를 포함할 수 있다.

또한, 용액 또는 현탁액은 하나 이상의 하기 애쥬번트를 포함할 수 있다: 무균 희석제, 예컨대, 주사용 물, 염수 용액, 고정화 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 그 밖의 합성 용매; 항균제, 예컨대, 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대, 아스코르브산 또는 중아황산나트륨; 킬레이트화제, 예컨대, 에틸렌 디아민테트라아세트산; 완충제, 예컨대 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트 및 긴장성(tonicity) 조절제, 예컨대, 염화나트륨 또는 덱스트로스. 비경구 제제는 앰푸울, 1회용 주사기 또는 다용량 바이알로 밀봉될 수 있다.

본 발명에 사용되는 화합물은 단독으로 투여되거나 치료받는 염증성 질병 및/또는 탈수초성 장애에 대해 효과적인 하나 이상의 그 밖의 약제학적 활성제와 조합하여 투여될 수 있다.

본원에서 사용되는, 약제학적 활성제와 관련되는 용어 "조합" 및 용어 "동시 투여하는" 및 "동시-투여"는 1회 치료 사이클 동안에 하나 초과의 약제학적 활성제를 환자에게 투여하는 것을 나타내나, 반드시 동시 또는 혼합물로 투여될 필요는 없다.

일 구체예에서, 본 발명의 화합물은 항염증제와 조합하여 투여된다. 항염증제는 아드레노코르티코트로프(adrenocorticotropic) 호르몬, 코르티코스테로이드, 인터페론, 글라티라머 아세테이트, 또는 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID)일 수 있다.

적합한 항염증제의 예로는 코스티코스페로이드, 예컨대, 프레드니손(prednisone), 메틸프레드니솔론(methylprednisolone), 덱사메타손 코르티솔(dexamethasone Cortisol), 코르티손(cortisone), 플루드로코르티손(fludrocortisone), 프레드니솔론(prednisolone), 6α-메틸프레드니솔론(6α-methylprednisolone), 트리암시놀론(triamcinolone), 또는 베타메타손(betamethasone)이 포함된다.

적합한 항염증제의 다른 예로는 NSAID, 예컨대, 아미노아릴카르복실산 유도체(예를 들어, 엔페남산(Enfenamic Acid), 에토페나메이트(Etofenamate), 플루페남산(Flufenamic Acid), 이소닉신(Isonixin), 메클로페남산(Meclofenamic Acid), 니플룸산(Niflumic Acid), 탈니플루메이트(Talniflumate), 테로페나메이트(Terofenamate) 및 톨페남산(and Tolfenamic Acid)), 아릴아세트산 유도체(예를 들어, 아세마티신(Acematicin), 알클로페낙(Alclofenac), 암페낙(Amfenac), 부펙사막(Bufexamac), 카프로펜(Caprofen), 신메타신(Cinmetacin), 클로피락(Clopirac), 디클로페낙(Diclofenac), 디클로페낙 소듐(Diclofenac Sodium), 에토돌락(Etodolac), 펠비낙(Felbinac), 펜클로페낙(Fenclofenac), 펜클락(Fenclorac), 펜글로즈산(Fenclozic Acid), 페노프로펜(Fenoprofen), 펜티아작(Fentiazac), 플루비프로펜(Flubiprofen), 글루카메타신(Glucametacin), 이부페낙(Ibufenac), 이부프로펜(Ibuprofen), 인도메타신(Indomethacin), 이소페졸락(Isofezolac), 이속세팍(Isoxepac), 케토프로펜(Ketoprofen), 로나졸락(Lonazolac), 메티아진산(Metiazinic Acid), 나프록센(Naproxen), 옥사메타신(Oxametacine), 프로글룸르타신(Proglumrtacin), 설린닥(Sulindac), 테니다프(Tenidap), 티라미드(Tiramide), 톨렉틴(Tolectin), 톨메틴(Tolmetin), 조막스(Zomax) 및 조메피락(Zomepirac)), 아릴부티르산 유도체(예를 들어, 부마디존(Bumadizon), 부티부펜(Butibufen), 펜부펜(Fenbufen) 및 크센부신(Xenbucin)) 아릴카르복실산(예를 들어, 글리다낙(Clidanac), 케토롤락(Ketorolac) 및 티노리딘(Tinoridine)), 아릴프로피온산 유도체(예를 들어, 아미노프로펜(Alminoprofen), 베녹사프로펜(Benoxaprofen), 부클록스산(Bucloxic Acid), 카르프로펜(Carprofen), 페노프로펜(Fenoprofen), 플루녹사프로펜(Flunoxaprofen), 플르비프로펜(Flurbiprofen), 이부프로펜(Ibuprofen), 이부프록삼(Ibuproxam), 인도프로펜(Indoprofen), 케토프로펜(Ketoprofen), 록소프로펜(Loxoprofen), 미로프로펜(Miroprofen), 나프록센(Naproxen), 옥사프로진(Oxaprozin), 피케토프로펜(Piketoprofen), 피로프로펜(Piroprofen), 프라노프로펜(Pranoprofen), 프로티니진산(Protinizinic Acid), 서프로펜(Suprofen) 및 티아프로펜산(Tiaprofenic Acid)), 피라졸(예를 들어, 디페나미졸(Difenamizole) 및 에피리졸(Epirizole)), 피라졸론(예를 들어, 아파존(Apazone), 벤즈피레릴론(Benzpiperylon), 페프라존(Feprazone), 모페부타존(Mofebutazone), 모라존(Morazone), 옥시펜부타존(Oxyphenbutazone), 페닐부타존(Phenylbutazone), 피페부존(Pipebuzone), 프로피페나존(Propyphenazone), 라미페나존(Ramifenazone), 석시부존(Suxibuzone) 및 티아졸리노부타존(Thiazolinobutazone)), 살리실산 유도체(예를 들어, 아세트아미노살롤, 5-아미노살리실산, 아스피린(Aspirin), 베노릴레이트(Benorylate), 비페닐 아스피린(Biphenyl Aspirin), 브로모살리게닌(Bromosaligenin), 칼슘 아세틸살리실레이트(Calcium Acetylsalicylate), 디플루니살(Diflunisal), 에테르살레이트(Etersalate), 펜도살(Fendosal), 플루페니살(Flufenisal), 겐티스산(Gentisic Acid), 글리콜 살리실레이트(Glycol Salicylate), 이미다졸 살리실레이트, 리신 아세틸살리실레이트, 메살라민(Mesalamine), 모르폴린 살리실레이트, 1-나프틸 살리실레이트, 올살라진(Olsalazine), 파르살미드(Parsalmide), 페닐 아세틸살리실레이트, 페닐 살리실레이트, 2-포스포녹시벤조산, 살라세타미드(Salacetamide), 살리실아미드 O-아세트산, 살리실산, 살리실로일 살리실산, 살리실설푸르산, 살살레이트(Salsalate) 및 설파살라진(Sulfasalazine)), 티아진카르복사미드(예를 들어, 드록시캄(Droxicam), 이속시캄(Isoxicam), 피록시캄(Piroxicam) 및 테녹시캄(Tenoxicam)), ε-아세트아미도카프로산, S-아데노실메티오닌, 3-아미노-4-히드록시부티르산, 아믹세트린(Amixetrine), 벤다작(Bendazac), 벤지다민(Benzydamine), 부콜롬(Bucolome), 디펜피라미드(Difenpiramide), 디타졸(Ditazol), 에모르파존(Emorfazone), 구아이아줄렌(Guaiazulene), 케토롤락(Ketorolac), 메클로페남산(Meclofenamic Acid), 메페남산(Mefenamic Acid), 나부메톤(Nabumetone), 니메설리드(Nimesulide), 오르고테인(Orgotein), 옥사세프롤(Oxaceprol), 파라닐린(Paranyline), 페리속살(Perisoxal), 피폭심(Pifoxime), 피록시캄(Piroxicam), 프로쿠아존(Proquazone), 테니다프(Tenidap) 및 COX-2 억제제(예를 들어, 로페콕시브(Rofecoxib), 발데콕시브(Valdecoxib) 및 셀레콕시브(Celecoxib))가 포함된다.

항염증제의 추가의 예로는 아스피린, 나트륨 살리실레이트, 콜린 마그네슘 트리살리실레이트, 살살레이트, 디플루니살, 설파살라진, 올살라진, 파라-아미노페놀 유도체, 인돌, 인덴 아세트산, 헤테로아릴 아세트산, 안트라닐산, 에놀산, 알카논, 디아릴-치환된 푸라논, 디아릴-치환된 피라졸, 인돌 아세트산, 또는 설폰아닐리드가 포함된다.

몇몇 구체예에서, 본 발명의 화합물은 나탈리주마브와 같은 항-인테그린 차단 항체 및 인터페론과 같은 면역치료제와 조합하여 투여될 수 있다.

탈수초성 장애를 치료하기에 적합한 치료제의 예로는 피르페니돈(Pirfenidone), 에팔레스타트(Epalrestat), 네파조돈 히드로클로라이드(Nefazodone hydrochloride), 메만틴(Memantine) 히드로클로라이드, 미톡산트론(Mitoxantrone) 히드로클로라이드, 미토잔트론(Mitozantrone) 히드로클로라이드, 탈리도미드(Thalidomide), 로퀴니멕스(Roquinimex), 벤라팍신(Venlafaxine) 히드로클로라이드, 인탁셀(Intaxel), 파클리탁셀(Paclitaxel), 재조합 사람 신경 성장 인자; 신경 성장 인자, 이부딜라스트(ibudilast), 클라드리빈(Cladribine), 베라프로스트 소듐(Beraprost sodium), 레바세카르닌(Levacecarnine) 히드로클로라이드; 아세틸-L-카르니틴(Acetyl-L-carnitine) 히드로클로라이드; 레보카르니틴(Levocarnitine) 아세틸 클로라이드, 드록시도파(Droxidopa), 인터페론 알파, 천연 인터페론 알파, 사람 림포블라스토이드 인터페론(human lymphoblastoid interferon), 인터페론 베타-1b, 인터페론 베타-Ser, 알렘투주마브(Alemtuzumab), 마이코페놀레이트 모페틸(Mycophenolate mofetil), 졸레드론산 일수화물(Zoledronic acid monohydrate), 아다팔렌(Adapalene), 엘리프로딜(Eliprodil), 도네페질(Donepezil) 히드로클로라이드, 덱사나비놀(Dexanabinol), 덱사나비논(Dexanabinone), 크살리프로덴(Xaliproden) 히드로클로라이드, 인터페론 알파-n3, 리포산, 티옥트산(thioctic acid), 테리플루노미드(Teriflunomide), 아토르바스타틴(Atorvastatin), 피마딘(Pymadin), 4-아미노피리딘, 팜프리딘(Fampridine), 피다레스타트(Fidarestat), 프릴릭시마브(Priliximab), 픽산트론 말레에이트(Pixantrone maleate), 다클릭시마브(Dacliximab), 다클리주마브(Daclizumab), 글라티라머 아세테이트(Glatiramer acetate), 리툭시마브(Rituximab), 핀골리모드(Fingolimod) 히드로클로라이드, 인터페론 베타-1a, 나탈리주마브(Natalizumab), 아바타셉트(Abatacept), 텝시롤리무스(Temsirolimus), 레네르셉트(Lenercept), 루복시스타우린 메실레이트 수화물(Ruboxistaurin mesilate hydrate), 덱스트로메토르판/퀴니딘 설페이트(Dextromethorphan/quinidine sulfate), 카프사이신(Capsaicin), 디메틸푸마레이트 또는 드로나비놀/칸나비디올(Dronabinol/cannabidiol)이 포함된다.

몇몇 구체예에서, 본 발명의 화합물은 다발성 경화증에 대해 효과적인 하나 이상의 약제학적 활성제와 조합하여 투여될 수 있다. 이러한 활성제의 예로는 인터페론(인터페론 베타 1-a, 베타 1-b, 및 알파), 글라티라머 아세테이트 또는 코르티코스페로이드, 예컨대, 메틸프레디솔론 및 프레드니손 뿐만 아니라, 화학치료제, 예컨대, 미톡산트론(mitoxantrone), 메토트렉세이트(methotrexate), 아자티오프린(azathioprine), 클라드리빈 시클로포스파미드(cladribine cyclophosphamide), 시클로스포린(cyclosporine) 및 티사브리(tysabri)가 포함된다.

다발성 경화증에 대해 효과적이고, 본 발명의 화합물과 조합하여 투여되기에 적합한 약제학적 활성제의 추가의 예는 하기 구조식의 화합물을 포함한다:

화학식(A)의 화합물과 동시 투여될 수 있는 약제학적 제의 추가의 예로는 하기가 포함된다:

TCR Vβ6, 아미노산 서열 39-58, Leu - Gly - Gln - Gly - Pro - Glu - Phe - Leu - Thr - Tyr - Phe - Gln - Asn - Glu - Ala - Gln - Leu - Glu - Lys - Ser (SEQ ID NO:1)로 이루어진 T-세포 수용체 (TCR) Vβ6 CDR2 펩티드 백신;

미엘린 염기성 단백질 면역원 펩티드, 아미노산 서열 75-95, Lys - Ser - His - Gly - Arg - Thr - Gln - Asp - Glu - Asn - Pro - Val - Val - His - Phe - Phe - Lys - Asn - Ile - Val - Thr (SEQ ID NO:2);

티플리모티드(Tiplimotide), 미엘린 염기성 단백질 면역원 백신 펩티드, 아미노산 서열 83-99, D - Ala - lys - pro - val - val - his - leu - phe - ala - asp - ile - val - thr - pro - arg - thr - pro, (SEQ ID NO:3);

미엘린 염기성 단백질 면역원 펩티드, 아미노산 서열 82-98, Asp - glu - asp - pro - val - val - his - phe - phe - lys - asp - ile - val - thr - pro - arg - thr, (SEQ ID NO:4);

아드레노코르티코트로프 호르몬 (ACTH), Ser - Tyr - Ser - met - glu - his - phe - arg - try - gly - lys - pro - val - gly - lys- lys - arg - arg - pro - val - lys - val - tyr- pro - asp - gly - ala - glu - asp - glu - leu - ala - glu - ala - phe - pro - leu - glut - phe, (SEQ ID NO:5).

다발성 경화증에 효과적이고, 본 발명의 화합물과 조합하여 투여되기에 적합한 약제학적 활성제의 추가의 예로는 하기가 포함된다:

3-4 디아미노피리딘; ABT-874; 악토스(Actos)® (피오글리타존(pioglitazone)); ALCAR (아세틸-L-카르니틴(carnitine)); 알파 리포산; 안드로겐(AndroGel)® (테스토스페론 겔(testosterone gel)); 트리메토프림(trimethoprim)과 비타민 C의 조합; 아지트로마이신(azithromycin)과 리팜핀(rifampin)의 조합; 미노사이클린(minocycline); 도네제필(donezepil) HCL; 아비디아(Avandia)® (로지글리타존 말레에이트( rosiglitazone maleate); IFN 베타-la의 조합) 및 아세트아미노펜, 이부프로펜(ibuprofen) 또는 프레디손; 아보넥스(Avonex)®(인터페론 베타-1a) + 셀셉트(Cellcept)®(마이코페놀레이트 모페틸(mycophenolate mofetil)의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-la)와 코팍손(Copaxone)®(글라티라머 아세테이트)의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-la)와 독시시클린(doxycycline)의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-1a)와 EMLA (리도카인(lidocaine) 및 프릴로카인(prilocaine)) 마취 크림의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-1a) 및 에스트로겐 및 프로게스테론; 아보넥스®(인터페론 베타-1a) + 플루다라(Fludara)®(플루다라빈 포스페이트(fludarabine phosphate))의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-1a) 및 메토트렉세이트(methotrexate) 및 류코보린 레스큐(leucovorin rescue)의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-1a) 및 메토트렉세이트 및 메틸프레디솔론의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-1a) 및 노반트론(Novantron)®(미톡산트론(mitoxantrone))의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-1a) 및 프로작( Prozac)® (플루옥세틴(fluoxetine))의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-1a)와 토파막스(Topamax)®(토피라메이트(topiramate))의 조합; 아보넥스®(인터페론 베타-1a)와 조코르(Zocor)®(심바스타틴(simvastatin))의 조합; AVP-923 (덱스트로메토르판/퀴니딘); 베타세론(Betaseron)®(인터페론 베타-lb)과 이무란(Imuran)® (아자티오프린(azathioprine))의 조합; 베타세론®(인터페론 베타-lb) 및 코팍손®(글라티라머 아세테이트)의 조합; BHT-3009-01과 리피토르(Lipitor)®(아토르바스타틴(atorvastatin))의 조합; 골수/말초 조혈모세포 이식물질; 셀셉트®(마이코페놀레이트 모페틸(mycophenolate mofetil)); 셀셉트(CellCept)®(마이코페놀레이트 모페틸)와 아보넥스®(인터페론 베타-1a)의 조합; 오랄 클라드리빈(Oral cladribine); CNTO 1275 (모노클로날 항체); 코팍손®(글라티라머 아세테이트)과 항생제 치료제(모노시클린(minocycline))의 조합; 코팍손®(글라티라머 아세테이트)과 노반트론®(미톡산트론(mitoxantrone))의 조합; 코팍손®(글라티라머 아세테이트)과 프레드니손의 조합; 코팍손®(글라티라머 아세테이트)과 프로벤틸(Proventil)®(알부테롤(albuterol))의 조합; 시클로포스파미드; 다클리주마브(Daclizumab); 데스카르(Deskar)® (피르페니돈(pirfenidone)); 에스트리올(Estriol); 푸마르산 에스테르; 가비트릴(Gabitril)®(트리아가빈(tiagabine) HCL); 징코 빌로바(Ginkgo biloba); IDEC-131 (항- CD40L 또는 항-CD 154); 면역글로불린과 메틸프레드니솔론의 조합; 이노신(Inosine); 인터페론 타우(Interferon tau); 라믹탈(Lamictal)®(라모트리긴(lamotrigine)); 렉사프로(Lexapro)®(에스시탈로프람(escitalopram)); 리피토르(Lipitor)®(아토르바스타틴(atorvastatin)); 리피토르®(아토르바스타틴)와 레비프(Rebif)®(인터페론 베타-1a)의 조합; 림포사이타페레시스(Lymphocytapheresis)(면역 세포의 제거), 이무란®(아자티오프린) 및 프레드니손의 조합; MBP8298; 메틸프레드니솔론; 메틸프레드니솔론과 아보넥스(인터페론 베타-1a)의 조합; 모디오달(Modiodal)(모다피닐(modafinil)); NBI-5788 (변경된 펩티드 리간드); 노반트론®(주입 농축물을 위한 미톡산트론(mitoxantrone)) 과 아보넥스®(인터페론 베타-1a) 또는 코팍손® (글라티라머 아세테이트)의 조합; 오메가-3 지방산 보충; 픽산트론(Pixantrone)(BBR 2778); 프로비길(Provigil)®(모다피닐(modafinil))과 아보넥스®(인터페론 베타-1a)의 조합; 라파문(Rapamune)®(시롤리무스(sirolimus)); RG2077; 리툭산(Rituxan)®(리툭시마브(rituximab)); 롤리프람(Rolipram) (포스포디에스테라제-4 억제제); SAIK-MS (라퀴니모드(laquinimod), ABR-215062); T 세포 백신화; 테리플루노미드(Teriflunomide); 테트라히드로칸나비놀(Tetrahydrocannabinol); 테트라히드로칸나비놀(드로나비놀)(Tetrahydrocannabinol (dronabinol)); 탈라믹 자극(Thalamic stimulation); 티사브리®(나탈리주마브)와 아보넥스®(인터페론 베타-1a)의 조합; 티사브리®(나탈리주마브)와 코팍손®(글라티라머 아세테이트)의 조합; 및 비아그라(Viagra)®(실다페닐(sildafenil) 시트레이트).

다발성 경화증에 대해 효과적이고, 본 발명의 화합물과 조합하여 투여되기에 적합한 약제학적 활성제의 또 다른 예는 도 14에 기재된 화합물이 포함된다. 추가로, 코팍손(글라티라머)가 본 발명의 화합물과 함께 경구적으로 동시 투여될 수 있다.

다른 구체예에서, 다발성 경화증에 대해 효과적이고, 본 발명의 화합물과 조합하여 투여되기에 적합한 약제학적 활성제는 하기 화합물을 포함한다: 세로노/이벡스(Serono/Ivex)사에 의해 개발된 백혈병 치료에 사용되는 글라드를빈(cladrlbine)의 경구 제형인 마일리낙스(Mylinax); 사노플-아벤티스(Sanofl-Aventis)사에 의해 개발된 경구 면역억제제인, 아라바(Arava) 대사물질 테리플루노미드(Teriflunomide); 노바티스(Novartis)사에 의해 개발된 경구 면역조절제(스핑고신-1-포스페이트 수용체 효능제)인 FTY 720; 바이스 MS 메디컬(Bio MS Medical)사에 의해 개발된 미엘린 대해 유도된 항체의 출현을 감소시키기 위한 합성 미엘린 염기성 단백질인, MBP 8298; 아코르다(Acorda) 사에 의해 개발된 칼륨 채널 차단제인 희귀의약품인 4-아미노피리들린(4-AP); 바이엘(Bayer)사에 의해 개발된 정맥내 면역글로불린 제형인 가무넥스(Gamunex); 비오젠 아이덱/푸마팜(Biogen Idec/Fumapharm)사에 의해 개발된 제 2 생성 경구 푸트나레이트(futnarate)인 BG-12 푸마레이트; 웨이쓰(Wyeth) 사에 의해 개발된 T-림프구 증식 차단제인 템시롤리무스(Temsirolimus); 에이살(Eisal) 사에 의해 개발된 AMPA 수용체 효능제인 E-2007; 젠자임(Genzyme)사에 의해 개발된 CD52에 대해 유도된 사람화된 항체인 캄파트(Campath); 이뮨 리스판스(Immune Response)사에 의해 개발된 백신인 뉴로 박스(Neuro Vax); 머크(Merck) 사에 의해 개발된 스타틴(statin)인 조코르(Zocor); 뉴로크린(Neurocrine) 사에 의해 개발된 미엘린-모방성 펩티드 리간드인 NBI 5788; 펩젠(Pepgen) 사에 의해 개발된 인터페론 타우인 타우페론(Tauferon); 프로테인 디자인(Protein Design) 사에 의해 개발된 사람화된 항-CD25 면역억제 항체인, 제나팍스(Zenapax); 트랜지션 테라퓨틱스(Transition Therapeutics)사에 의해 개발된 메틸 도네이터(donator)인 MS-IET와 EMZ 701의 조합; 액티브 바이오테크/테바(Active Biotech/Teva) 사에 의해 개발된 리노미드(linomide) 유도체의 경구 제형인 라퀸르모드(Laquinlmod); 마막(Mamac) 사에 의해 개발된 TNF-알파 억제제인 데스카르 피르페니돈(deskar pirfenidone); 안티센스 테라퓨틱스(Antisense Therapeutics)사에 의해 개발된 VLA4를 표적으로 하는 제 2 생성 안티센스 억제제인 ATL-1102.

몇몇 구체예에서, 화학식(A)의 화합물은 항혈관형성제, 특히 성장 인자 수용체, 상피 성장 인자 수용체(EGFR), 혈관생성 상피 성장 인자 수용체(VEGFR), 및 섬유아세포 성장 인자 수용체(FGFR)를 억제하는 제와 조합하여 투여될 수 있다. 이러한 제의 예로는 이레사(Iressa), 타르세바(Tarceva), 에르비툭스(Erbitux), 펠리티니브(Pelitinib), AEE-788, CP-547632, CP-547623, 타이커브(Tykerb)(GW-2016), INCB-7839, ARRY-334543, BMS-599626, BIBW-2992, 팔니다몰(Falnidamol), AG1517, E-7080, KRN-951, GFKI-258, BAY-579352, CP-7055, CEP-5214, 서텐트(Sutent), 마구젠(Macugen), 넥사바르(Nexavar), 네오바스타트(Neovastat), 바탈라니브 석시네이트(Vatalanib succinate), GW-78603413, 루센티스(Lucentis), 테아비고(Teavigo), AG-13958, AMG-706, 악시티니브(Axitinib), ABT-869, 에비존(Evizon), 아플리딘(Aplidin), NM-3, PI-88, 코프렉사(Coprexa), AZD-2171, XL-189, XL-880, XL-820, XL-647, ZK-CDK, VEGFTrap, OSI-930, 아바스타틴(Avastin), 레블리미드(Revlimid), 엔도스타르(Endostar), 리노미드(Linomide), 크신레이(Xinlay), SU-668, BIBF-1120, BMS-5826624, BMS-540215가 포함된다.

몇몇 구체예에서, 화학식 (I)-(IV)의 화합물을 포함하여 화학식(A)의 화합물은 T-세포 회귀(homing), 일출(extravastion) 및 이동(transmigration)에 영향을 미치는 제와 함께 투여될 수 있다. 이러한 제의 예로는 FTY- 720PKI-166, PTK-787, SU-11248가 포함된다.

몇몇 구체예에서, 화학식 (I)-(IV)의 화합물을 포함하여 화학식(A)의 화합물은 VLA-4를 억제하는 제와 함께 투여될 수 있다. 이러한 제의 예로는 타사브리(Tysabri), 바이오-1211(Bio-1211), HMR-1031, SB-683698, RBx-4638, RO-0272441, RBx-7796, SB-683699, DW-908e, AJM-300, 및 PS-460644가 포함된다.

본 발명의 화합물의 일일 투약은 한 구체예에서, 일주일 동안 반복될 수 있다. 또 다른 구체예에서, 일일 투약이 한달 내지 여섯달; 여섯달 내지 일년; 일년 내지 오년; 및 오년 내지 십년 동안 반복될 수 있다. 또 다른 구체예에서, 반복 투여의 처리 기간은 의사에 의해 결정된다.

본 발명은 하기 실시예에 의해 설명되며, 이는 본 발명을 어떠한 방식으로든 제한하고자 하는 것은 아니다.

실시예 1 시다멕스 ^TM 는 실험관내 실험에서 LPS로 자극하면 B-세포의 증식을 억제하고, Con A로 자극하면 T-세포의 증식을 억제한다.

시다멕스^TM의 활성을 실험관내 검정에서 수차례 미톡산트론과 비교하여 다발성 경화증 신경염증 및 항원 제시와 관련된 여러 주요 조절 시스템에서 시다멕스^TM의 효과를 측정하였다.

IL-4는 B 세포, 비만 세포 및 마크로파아지에 대한 성장 및 분화 인자로서 작용하며, 마우스에서 IgE 합성을 위한 스위치 인자이다. 이는 또한, 클로닝된 CD4⁺ T 세포의 성장을 증진시키고, 클래스 II MHC 분자 발현 및 휴지 B 림프구 확대를 향상시킨다. 인간에서, CD4⁺ T 림프구 또한, IL-4를 생성하나, 이는 B 세포 또는 비만 세포 성장 인자로서 작용하는 것으로 입증되지 않았다. 뮤린 및 인간 IL-4 모두는 B 림프구의 스위칭을 유도하여 IgE를 합성한다. 인간 IL-4는 또한, 인간에서 B 림프구 및 마크로파아지에 의해 CD23을 유도한다. IL-4는 세포 매개된 면역에서 일정 역할을 수행할 수 있다.

IL-10은 T _H1 세포에 의한 사이토카인 합성을 억제하며, 항원 제시를 차단하며, 인터페론 γ의 형성을 억제한다. IL-10은 항원을 제시하며, IL-1, IL-6 및 TNF-α를 형성하는 마크로파아지 능력을 억제한다. IL-10은 또한, IgE 조절에 관여한다. IL-10이 세포-매개된 면역을 억제하지만, 이는 실험관내에서 B 림프구, IL-2 및 IL-4 T 림프구 반응을 자극하며, IL-3 및 IL-4에 노출된 뮤린 비만 세포를 자극한다. IL-10은 다발성 경화증과 타입 I 당뇨병에서 T 림프구 자가면역을 억제하며, 동종이식편 생존을 조장하는 치료학적 유용성을 갖는다.

본 실험에서, 시험 화합물 및/또는 비히클을 RPMI 완충제 pH 7.4에서 2시간 동안 인간 말초혈 단핵 백혈구 (PBML, 1 x 10⁶/ml)와 사전인큐베이션시켰다. 그 후, 콘카나발린 A (Con A, 20㎍/ml)를 첨가하여 37℃에서 5% CO₂중에서 밤새 세포를 자극하였다. 그 후, 상기 상태의 배지에서 IL-4 및 IL-10 사이토카인 수준을 샌드위치 ELISA 키트를 사용하여 정량하였다. 화합물을 10, 1, 0.1, 0.01 및 0.001 μM로 스크리닝하였다.

17±1g 무게의 balb/c 마우스의 비장으로부터 분리한 B-림프구 세포를 사용하였다. 시험 화합물 및/또는 비히클을 37℃에서 24시간 동안 AIM-V 배지 pH 7.4에서 10㎍/ml 리포폴리사카라이드 (LPS)의 존재하에 세포 (1.5 x 10⁶/ml)와 인큐베이션하였다. 그 후, [³H]티미딘 (120nM)을 추가의 하룻밤의 인큐베이션 기간 동안 첨가하였다. 티미딘 혼입을 액체 섬광 계수에 의해 평가하였다.

17±1g 무게의 balb/c 마우스의 흉선으로부터 분리된 T-림프구 세포를 사용하였다. 시험 화합물 및/또는 비히클을 37℃에서 24시간 동안 AIM-V 배지 pH 7.4에서 3㎍/ml 콘카나발린 A (Con A)의 존재하에 세포 (4 x 10⁶/ml)와 인큐베이션하였다. 그 후, [³H]티미딘 (120nM)을 추가의 하룻밤의 인큐베이션 기간 동안 첨가하였 다. 티미딘 혼입을 액체 섬광 계수에 의해 평가하였다.

화합물을 10, 1, 0.1, 0.01 및 0.001 μM로 스크리닝하였다.

미톡산트론 및 시다멕스^TM에 대한 결과는 표 1에 제시하였다. 비히클 대조군 반응에 비해 50% 이상 (≥50%) 까지의 세포 증식의 시험 화합물 유도된 억제는 현저한 억제 활성인 것으로 나타내었다.

표 1		시다멕스^TM		미톡산트론
	농도	성장 억제율%	IC50	성장 억제율%	IC50
매개인자 방출, IL-4
	10μM	105	3.33μM	108	2.96μM
	1μM	-9		-4
	0.1μM	2		18
	10nM	7		13
	1nM	8		11
매개인자 방출, IL-10
	10μM	99	1.2μM	102	0.759μM
	1μM	39		60
	0.1μM	16		5
	10nM	16		1
	1nM	1		2

세포 증식, B-세포 + LPS
	10μM	103	0.038μM	102	7.31nM
	1μM	101		102
	0.1μM	80		93
	10nM	38		54
	1nM	0		18
세포 증식, T-세포 + ConA
	10μM	104	0.014μM	103	0.032μM
	1μM	103		103
	0.1μM	82		80
	10nM	44		19
	1nM	10		-1

표 1, 도 1A, 1B 및 도 2A와 2B에 기술된 결과는 시다멕스^TM가 다발성 경화증과 같은 신경염증 질환에서 매우 중요한 염증 매개인자 IL-4 및 IL-10의 방출을 억제함을 보여준다. 또한, 시다멕스^TM는 B- 및 T-세포 관련 실험관내 증식 검정에서 높은 수준의 성장 억제를 나타내었다. 시다멕스^TM의 활성은 대조군 화합물 미톡산트론의 활성에 필적하다.

실시예 2 시다멕스 ^TM 는 4주 동안의 주 처리 사이클로 만성 다발성 경화증의 동물 모델의 자가면역성 뇌척수염 (EAE)의 증상을 완화시킨다.

다발성 경화증 (MS)과 관련된 다양한 질환을 치료하기 위한 약제 화합물의 용도를 나타내는 한 방법은 실험 동물에서 자가면역성 뇌척수염의 영향을 억제하는 능력에 있다.

자가면역성 뇌척수염 (EAE)은 MS에 대한 동물 모델이며, 이는 특정한 민감성 포유동물 종에서 미엘린 염기성 단백질에 대한 T-세포 매개된 자가면역 질환 유도를 수반한다. EAE 모델은 MS와 관련된 뇌 및 척수의 염증을 연구하는데 적합한 방식이다 (Bolton, C.Mult, Scler, 1995; 1(3);143-9).

설치류에서, 전체 척수 또는 척수 성분 예컨대, 미엘린 염기성 단백질의 주입은 T-림프구의 활성화에 기초한 자가면역 반응을 유도한다. 임상적 질환은 전형적으로 접종 후 약 8-10일 후에 징후가 나타나며, 가벼운 보행 장애 및 꼬리 무력증 내지 완전한 마비 및 사망에 이르는 광범위한 범의 이상 행동으로서 관찰된다. 전형적으로 체중 감소가 발생한다. 생존한 동물에서, 계속적인 회복이 발생하며, 대부분의 운동 기능의 일정치 않은 회복을 수반한다. 종, 알레르겐 및 사용된 방법에 따라, EAE 모델로 시험한 동물은 단일 (급성 EAE) 또는 여러 (만성 재발성 EAE) 발병을 경험할 수 있다.

EAE의 치료는 많은 구조적 형태로 수행된다: 치료는 예방적일 수 있으며, 면역화 전에 치료학적 조성물이 투여된다; 치료는 유도 첫주 동안 개시될 수 있다; 치료는 임상적 징후가 어느 정도에 이른 후 (급성 또는 만성) 중재적으로 개시될 수 있다. 예방적 프로토콜은 문헌에 매우 일반적인 것이며, 발병 후 치료는 더욱 드물며, 질환의 발병 일주일 후 치료가 가장 빈번하다. 본원에 보고된 실험은 마지막 부류에 해당하는 것으로서, 광대한 탈미엘린화된 혈소판을 갖는 만성의 진행성 (CP) 상태의 동물을 치료하는 것이다. 완전 프로인트 애쥬번트중의 전체 CNS에 의해 유도된 CP-EAE는 과도한 염증 및 탈미엘린화된 변화를 갖는 중증 질환이다. 일반적인 원리로서, 더욱 나중에서의 성공적인 중재가 인간 질환에서 양호한 효력을 예견할 수 있게 해주는 것으로 여겨진다. 이는 특히 예방 연구와 관련되며, 이는 MS의 특징인 CNS 염증에 대해 논의하기 보다는 말초 면역계에 촛점을 맞춘 것이다.

방법

본 실험에서, 암컷의 어린 하트레이 (Hartley) 기니아 피그 (225g)를 동일량의 완전 프로인트 애쥬번트를 갖는 균질화된 전체 CNS (염수중)로 면역화시키고, 죽은 M. 결핵을 10mg 첨가하였다. 동물 (>95%)은 면역화 후 7일에 임상적 증상을 나타내었다. 다양한 중증의 급성 발병이 7일 내지 20일 사이에 발생하고, 이어서 뒷다리 마비, 대변의 장내 고형화 및 대변실금을 나타내는 임상적 이상이 나타났다. 표 2는 임상적 스코어를 나타낸다. 이러한 임상 특징은 염증을 나타내며, 허 리 척수 탈미엘린화를 유도한다. 이전 실험의 최근 조사는, 1주 넘게 "2"의 임상 스코어를 갖는 40일된 동물의 척수에서 탈미엘린화된 혈소판이 97% 발생함을 보여준다.

이들 실험에서, 면역화된 동물을 40일 또는 52일까지 간호하고, 4주에 한번 8mg/kg 및 16mg/kg 시다멕스^TM (심장내), 또는 20mg/kg 및 40mg/kg 시다멕스^TM (i.p.)로 처리하였다. 대조군에는 비히클을 제공하였다. 임상 징후를 매일 스코어링하고, 체중을 기록하였다. 처리 기간 완료시, 뇌 및 척수를 절개하고, 포르말린으로 고정시키고, 수막 염증, 혈관주위세포 침윤, 선조직 척수염 및 탈미엘린화의 일정한 병리학적 실험을 위해 헤마톡실린-에오신 및 솔로크롬 R 염색된 섹션을 사용하여 블라인딩 관찰자에 의해 봉쇄하였다.

비처리된 만성 EAE 동물 (n=5)을 40일에 희생시키고, 마찬가지로 비-EAE 대조군 (n=5)을 40일에 희생시켰다. 각각의 10일 처리 기간 후, 각 군으로부터의 5마리 동물을 희생시키고 (0.25ml 나트륨 펜토바르비탈), 혈액 샘플을 FACS 검정을 위해 수집하고 (하기 참조), 뇌 및 척수를 절개하고 섹션화시켰다. 척수의 허리, 흉곽 및 경부에 해당하는 3개의 척수 섹션을 사용하였다. 뇌를 5개의 가로 섹션으로 컷팅하였다; 처음 3개의 기부 섹션을 하나의 블록에서 혼합하였으며, 마지막 두 원위 섹션을 또 다른 블록에서 혼합하였다. 조직을 10% 포르말린으로 고정시키고, 파라핀에 함침시켰다. 5 마이크로미터 섹션을 헤마톡실린-에오신 (H-E) 또는 솔로크롬-R-시아닌 (SCR)으로 염색하고, 4개의 카테고리 각각에서 블라인드 관찰자에 의해 평가하게 하였다; 수막 염증, 혈관주위 침윤, 뇌염 또는 척수염 및 탈미엘린화 (표 2). 혼합된 병리학적 스코어는 각 동물에서 모든 5개 CNS 섹션으로부터의 전체 스코어 (포텐셜 20)를 나타낸다.

표 2

병리학적 스코어 등급

M: 수막에서의 염증 반응

0: 변화 없음

1: 단핵 세포에 의한 혈관주위 및/또는 수막 침윤, 1-3 혈관 관련됨.

2: 4-6개 혈관 관련됨.

3: 6+ 혈관 관련됨.

4: 거의 모든 또는 모든 혈관이 관련된 수막의 심한 침윤.

P: 선조직 혈관주위 침윤

0: 변화 없음

1: 비르코우-로빈 공간에서 1-3개 선조직 혈관 침윤.

2: 4-6개 혈관 관련됨.

3: 6+ 혈관 관련됨.

4: 실질적으로 모든 혈관 관련됨.

E: 뇌염 또는 척수염

0: 신경 선조직의 침윤 없음; 신경 선조직을 침윤하는 미세아교세포 또는 염증 세포

1: 약간 흩어진 세포

2: 여러 혈관주위 커프로부터 세포에 의해 침윤

3: 더 많은 영역의 신경 선조직 관련됨

4: 실질적으로 전체 섹션이 침윤됨

D: 탈미엘린화, 재미엘린화 및 미엘린 부스러기

0: 탈미엘린화되지 않음

1: 연막하 탈미엘린 단일 병소 또는 미엘린 부스러기 발생

2: 여러 작은 병소에서 탈미엘린화

3: 하나의 크게 유착된 영역에서 탈미엘린화

4: 여러개의 크게 유착된 영역에서 탈미엘린화

척수에서 관찰된 이상물을 정량하기 위해, H-E로 염색된 섹션을 12개의 대표적인 파이형 영역으로 나누었다. 각각의 영역에서, 0.12-mm² 영역내의 세포 수를 시그마 스캔 프로 이미지 검정 소프트웨어 (SPSS)로 계수하고, 모든 12개 영역에서의 세포의 통합된 평균 수를 전체 척수 (동물당 36 영역)에 대해 계산하였다. 모든 세포 핵을 계수하고, 세포 수에 침윤물 이외에 뉴론 및 아교 세포가 포함될 수 있다. 그러므로, 비-EAE 동물에서의 세포 계수가 기준이 된다.

결과

20 및 40 mg/kg (i.p.)으로 제공되는 경우 시다멕스^TM는 임상 과정 및 병리학적 발견에서 현저하고 많은 변화를 유도한다. 도 3은 지시된 날짜 후 동물의 평균 임상 스코어를 나타낸다. 처리된 동물 모두는 어느 정도의 임상적 회복을 나타내었으며, 40mg/kg 그룹은 처리 2주 이내에 회복에 도달하였다.

질환으로부터 회복되는 세로 경로가 도 4에 추가로 설명되어 있다. 본 실험에서, 비히클 대조군은 질환의 고정된 경로를 나타내었다. 대조군보다 더욱 중증의 질환을 나타내는 연구에 20 및 40 mg/kg 군으로 처리된 동물을 사용하였으며, 처리군으로 할당하기 전에 동시적 환경하에 두어 현상이 무작위적이 되게 하였다. 화살표로 나타낸 바와 같이, 처리는 40일에 시작하였으며, 총 4회 투여로 진행하였다. 두 처리군이 대조군보다 더욱 심한 질환 상태에서 연구를 시작하였음에도 불구하고 처리 말기에는 두 처리군은 대조군 보다 현저하게 낮은 수준으로까지 현저한 질환 개선을 나타내었다. 비록 3 및 4개의 동물 소그룹이 p 값을 나타내는 통계적학적 유의성은 처리가 대조군과 비교하여 통계학적으로 상이한 결과를 나타낸다는 전제를 지지한다. 중간 정도의 차이에 있어서는 맨-휘트니 (Mann-Whitney) 또는 윌콕손 랭크-섬 테스트 (Wilcoxon rank-sum test)에 의한 비모수적 비교에 의해 측정하였다. 유의값은 40 및 20 mg/kg 그룹 각각에 있어서 0.001 및 0.004이었다.

병리학적 발견은 대부분 생소한 것이었다. 수막 염증 및 혈관주위 침윤에 대한 스코어는 비히클 대조군 보다 처리된 그룹에서 더욱 심각하였다 (데이타 미기재). 그러나, 본 발명자들은 두가지의 매우 중요한 발견을 하였다: 존재하는 병변에서 세포가 현저하게 손실되었으며 (미도시됨), 본 발명자들은 사전에 재미엘린화에 기여하는 미엘린 창백을 관찰하였다 (데이타 미기재). 후자의 관찰은 염증 세포의 제거로 인한 CNS의 허용되는 재미엘린화에 일치한다.

탈미엘린화는 MS 병변의 주요 병리학적 특징이다. 이는 단지 축색 돌기의 전기 반응을 변형시킬 뿐만 아니라, 현재 의견으로는 연장된 탈미엘린화가 영구적인 축색돌기의 손상 및 치사를 초래할 수 있다. 이와 같이, 신경퇴행 또한, MS 병리학적 여건의 주요 요소이다. 이와 관련하여, 시다멕스^TM는 이러한 진행성 모델에서 97% 척수 탈미엘린화에 도달한 질환의 진행 기간 후에도 내생적 재미엘린화를 가능하게 하는데 효과적임이 입증되었다. 존재하는 병변에서 염증을 감소시킴으로써 이러한 CNS 회복이 허용되는 것이 분명하다. 장기간의 시다멕스^TM 처리 후, 실질적으로 염증 세포가 남아있지 않는 만성의 탈미엘린화된 혈소판이 관찰가능하며, 이들 병변중 일부가 재미엘린화의 암시하는 미엘린 창백 (소위, MS에서의 새도우 혈소판으로 불림)을 나타낸다. 이러한 세포의 결실 또는 세포 왕래의 하향 조정 또는 억제에 의한 새로운 T-세포 침윤을 예방하면, 염증 병변으로의 추가적인 마크로파아지의 보충을 방해할 것이다. 결론적으로, 병변에서의 면역 세포는 아폽토시스에 의해 치사되며, 병변은 비교적 침윤으로부터 벗어난 채로 남게된다. 사이토 킨, 및 마크로파아지의 ROS-매개된 조직 독성의 제거는 CNS 회복 메카니즘을 활성화시킬 것이며, 재미엘린화가 관찰된다. 이와 같이, 시다멕스^TM는 말초 면역 시스템에 영향을 끼치는 것으로 여겨지며, 또한 CNS 염증에 대한 직접적인 효과가 제외되진 않는다.

대조군 보다 높은 수막 염증 스코어 및 큰 염증 커프의 계속적인 존재는 CNS 혈관 주위로 축적되나, 선조직으로 이동하지 않는 면역 성분 백혈구의 연속적 생성에 부합된다.

실시예 3 시다멕스 ^TM 는 4, 6 및 8회의 주 처리 사이클 및 4주 약물 처리-4주 약물 중단 사이클에서 만성 다발성 경화증의 동물 모델의 자가면역성 뇌척수염 (EAE)의 증상을 완화시킨다.

실시예 2에 기술된 실험을 여러 목적을 갖고 더 큰 그룹 및 더 긴 처리 사이클로 확대하였다. 상기 발견을 확증하는 것 이외에, 약물 중단 후 효과를 포함하는 반응의 정도 및 내성을 알아내고, 절박한 손상 또는 독성의 신호를 감지하기 위해 면역 작용에 대한 약물 처리 영향을 입증하기 위해 구체적인 노력을 기울였다.

상기 기술된 바와 같이 질환 유도 후, 동물을 무작위로 5개 그룹 즉, 하나의 비히클 대조군 및 4개의 처리군으로 나누었다. 처리군의 동물에 20mg/kg의 연구 약물을 4, 6 및 8주 동안 주 1회씩 복강내 투여하고, 추가의 군은 4주 동안 주 1회 처리하고, 추가로 4주 동안에는 약물 이외의 비히클 용액 (염수)로 처리하여 관찰하였다.

실시예 2의 방법으로부터 변형된 프로토콜은 2 초과의 질환 중증도를 나타내는 동물중 면역화된 동물 집단을 선별하고, 무작위화시켜 각 군의 평균 질환 중증도가 1 내지 1.5의 중증 스코어 범위에 맞춰지게 하였다는 점이다. 이러한 측정은, 처리를 위해 선택된 동물이 처음부터 상응하는 비히클 대조군 보다 더욱 중증을 나타내는 실시예 2에서 관찰된 우연적인 환경을 피하기 위한 것이다.

모든 처리된 동물은 질환에서 통계학적으로 현저한 개선을 나타내었다. 즉, 신경 척수 선조직에 대한 염증 세포 공격의 탈미엘린 과정에 기여하는 마비 증상이 질환전의 기준선에 근접하도록 감소하였다. 이러한 결과는 질환 경로 플롯의 단순한 조사에 의해 분명해지며, 또한 비모수적 랭크-오더 통계적 검정법에 의해 매우 현저한 것으로 입증되었다.

도 5에 도시된 바와 같이 4주 처리 사이클 결과 (n=14)는 평균 1.3의 출발 질환 상태로부터 평균 0.7로 임상 중증 스코어가 감소하는 경향을 보여준다. 이러한 변화는 0.0001의 중앙값 차이에 대한 p 값을 갖는 대조군 (n=13)과 통계학적으로 상이하다. 유사한 투약 반응이 6주 처리 과정을 나타내는 도 6에서 입증되었다. 또한, 대조군에 있어서 1.3의 평균 중증 스코어 (n=4)로부터 처리군에 있어서 0.3 (n=3)으로 질환이 개선되었으며, 0.009의 통계적 유의성 p 값을 갖는다. 도 7은 8주 처리군을 나타낸다. 비히클 대조군은 더욱 중증으로 진행된 질환을 가져 탈미엘린화에 기여하는 더 큰 마비 증상을 가지며, 4주 후 등급이 1.3에서 1.7로 증가하였다. 반대로, 두 처리군 모두는 탈미엘린의 역행을 암시하는 진행성 질환 완화을 나타낸다. 8회 연속 투약 처리된 동물의 경우, 정상적인 질환전 임상 스코 어에 대한 경향은 초기에는 변화가능하나, 처리 과정 말기에는 기준선에 집중된다. 회복 프로파일에서 개체간 이종성에도 불구하고, 전체 랭크-오더 검정은 처리군 (n=3)과 대조군 (n=5) 간의 차가 0.0006의 p 값으로 현저함을 보여준다. 4주 후 처리군의 처리를 중단하였으며, 대조군과 현저한 수준 차이를 나타내는 중단 시점에서 질환은 안정한 상태였으며, 0.002의 p 값을 갖는다.

이러한 연구 결과는 도 7에 도시되어 있다. 먼저, 치료학적 반응은 대조군에 대한 등급화된 시간에 따른 반응을 나타낸다. 병든 동물은 반응 동안 주마다 점점 더 건강해진 반면, 대조군 동물은 완전한 신경 장애로 비가역적으로 진행되었으며, 이의 근본적 원인은 비가역적인 탈미엘린화이다. 두번째로, 약물 치료의 누적되는 약력학적 효과는 영속적인데, 그 이유는 처리된 동물은 치료 상태에 상응하는 안정한 상태로 유지되는 반면, 비처리된 대조군은 질환 진행 속도를 가속화시키기 때문이다. 진행성 MS에 대한 가장 믿을만한 최근의 치료제 즉, 문헌 [Piraino P.S. et al., J.Neuroimmunology, 131:147-159, 2002]에 기술된 바와 같은 소위 α4 인터페론 안타고니스트 예컨대, 티사브리(Tysabri) 및 이의 소분자 리간드 등가물로 수득된 효과에 비추어 보면 특히 주목할 만한 결과이다. MS의 동일한 기니아 피그 EAE 모델에서 치료를 중단한 경우, 치료군 동물은 7일 이내에 비처리된 대조군의 질환 수준으로 되돌아 갔으며, 오래 지속되는 유리한 약력학적 효과에 대해 입증되지 않았다.

시다멕스와 α4 인터그린 안타고니스트 및 시다멕스와 기타 T-세포 매개된 염증 반응을 제지하는 치료제간의 치료학적 효과의 대비되는 결과는, 시다멕스가 염증 세포의 활성화 및 보충을 통해 이의 활동이 발휘되는 것이 아님을 뜻한다. 질환 회복의 시간 경로에 걸쳐 주기적 간격으로 희생된 동물로부터 취한 척수의 조직병리는 실시예 2에서 주시된 바와 같이 혈관 및 혈관주위 커프에서 염증 세포의 감소가 아닌 축적을 나타낸다. 그러나, 이들 세포는 선조직의 기부 구성원을 지나 이동하는 것이 분명히 차단되었으며, 이는 이러한 차단이 세포 유착, 운동성, 및 세포외 매트릭스 재구성을 포함할 수 있는 메카니즘에 의해 수행됨을 암시한다.

이는 T-세포 군집 또는 T-세포 서브타입 비에서 변화가 없는 코르티코스테로이드, 인터페론 및 인터그린 안타고니스트 치료제와 비교할 경우, 시다멕스 작용 모드의 구별되고 예상치 못한 특징으로서 입증가능하다. 본 실시예에서, 도 8의 패널 A에 도시된 바와 같이, 전체 T-세포 계수에 있어서 처리군과 비히클 대조군 간에 차이가 관찰되지 않았다. 패널 B 및 C에 도시된 바와 같이 시다멕스^TM 처리에 의해 조절된 CD4 또는 CD8 T-세포 군집 또한 마찬가지다. B-세포가 대조군과 현저한 차이를 나타내지 않지만, 질환의 작용 및 치료 기간과 같은 넓은 범위에 걸쳐 감소하는 경향이 나타남이 분명하다. 마찬가지로, MS에 있어서 세포독성 치료제 예컨대, 미톡산트론 및 시클로포스프아미드, 예를 들어, 시다멕스^TM는 실시예 1에 제시된 증거에 따라 자극된 세포 배양물중에 B-세포 수를 일시적으로 감소시킬 수 있으나, 생체내에서 연장된 노출에 대한 효과는 입증되지 않았다. 이러한 관찰 결과는 추가로, 시다멕스^TM가 면역 시스템을 소모시키지 않으며 항원 제시 병원체에 대한 숙주 방어를 감소시키지 않는 신규한 메카니즘에 의해 작용한다는 개념을 강 화시킨다. 이러한 특성은 만성 질환 또는 급성 질환 예컨대, MS 플레어 업스 (MS flair ups)를 치료하고자 하는 치료법에서 그렇지 않다면, 건강한 피검체에서 매우 바람직하고 유익할 것이다.

실시예 4 시다멕스 ^TM 는 72시간 간격을 두고 2회 투여한 후 만성의 다발성 경화증 동물 모델의 자가면역성 뇌척수염의 증상을 전환시킨다.

주를 기준으로 하여 시다멕스^TM로의 처리시 질환 회복의 시간 경로의 검정은 질환 완화에서 2일 내지 3일 주기성을 나타낸다. 이러한 현상은 도 7에 도시된 8주 처리 시험군에서 특히 입증된다. 이러한 처리군에서 개별적 동물은 상이하게 반응하여 평균 약력학적 반응이 연속적인 투약 간격 사이에 "톱니-날 (saw-tooth)" 패턴으로 나타나는 것으로 관찰되었다. 군내의 특이적 동물의 기록을 추적하는데 있어서, 일부는 일시적으로 회복되며, 투약 후 2-3일 동안 질환이 개선되었으며, 그 후 더 높은 질환 스코어로 되돌아갔다. 전체적인 경향은 8주에 걸친 질환 개선으로 유도되나, "톱니-날" 반응 현상은 질환 징후의 더욱 부드러운 전환을 최적으로 달성하는 일시적 처리 간격에 대한 의문을 일으킨다.

더욱 빈번한 투약 스케줄이 질환 증상을 더욱 신속하게 해소하는지에 대한 가능성을 시험하기 위해, 투약 사이클을 관찰된 반응 주기에 맞추어 실험을 수행하였다. 따라서, 실시예 2의 방법은 동물 및 대조군 군에 적용되며, 이는 면역화시킨 후 30일에 질환이 만성기에 도달하게 된다. 1의 질환 스코어를 갖는 6마리 동물을 선택하여, 이들중 반에 20mg/kg 시다멕스^TM를 복강내 투여하였다. 3마리 동물 에 72시간 간격을 두고 2회 투여하였다. 3마리 동물은 비히클 대조군으로서 작용한다.

도 9에 도시된 바와 같이, 72시간 스케줄로의 시마덱스^TM 처리는 질환의 진행을 전환시키고, 단지 2회 투여로 기준 임상 스코어로 회복된 반면, 대조군에서는 질환이 계속해서 진행되었다. 차이는 랭크-섬 테스트(rank-sum test)에 의한 p 값 0.002의 정도로 통계학적으로 현저하다.

이러한 실험은 시다멕스^TM의 더욱 빈번한 투약은 약물 체류 시간, 미엘린상의 염증 세포에 의한 공격의 일시적 특성, 및 허용되는 재미엘린화의 고유의 과정 사이의 특정 균형에 부합하도록 맞춰질 수 있다. 따라서, 더욱 빈번한 또는 집중적인 약물 전달 스케줄에 의해 질환으로부터의 회복을 촉진하고, 이어서 덜 빈번하게 그러나, 주기적이고 효능 촉진적인 용량으로 염증 세포 폐색의 이로운 효과를 유지하기 위해 복합적 투약 요법이 적용될 수 있다. 실시예 3의 도 7에서 입증된 치료 및 질환 전환의 "톱니-날" 패턴은, 시다멕스^TM의 효과가 투약 사이에 2-3일 간격에 걸쳐 약화될 수 있음을 시사한다. 이러한 실험은 시다멕스^TM의 효율이 더욱 빈번한 약물 투여를 통해 강화될 수 있음을 확인시켜 준다.

실시예 5 시마덱스 ^TM 는 질환 유도의 초기 경로에 걸쳐 매일 투여시 급성 다발성 경화증 동물 모델의 자가면역성 뇌척수염 (EAE)의 증상을 완화시킨다.

실시예 2에 기술된 바와 같이, 기니아 피그의 EAE 모델은 이상성이다. 미엘 린 염기성 단백질이 초기 면역화를 손상시킨 후, 면역화 후 9일에 질환의 급성 징후를 갖는 신경학적 장애의 전형적인 임상 패턴이 개시된다. 임상적 발병은 체중 저하, 뒷다리 약화 및 비정상적인 바로잡기 반사를 초래한다. 이러한 증상의 중증도는 6-7일에 걸쳐 정점에 이르며, 이어서 질환 경로가 임상적으로 회복되지 않는 고정된 진행성 저하로 변화되는 경우인 20일까지는 일시적이고 부분적인 짧은 기간동안의 회복이 이어진다.

시마덱스의 중요한 유용성 확대로서, 질환 발명의 초기 단계에서 이의 치료학적 효과를 시험하였다. 또한, 실험은 실시예 4의 결과에 기초로 고안되었으며, 이는 더욱 빈번한 투약이 더욱 신속하고 단향성의 증상 해소를 제공함을 시사한다. EAE의 급성기는 또한, 완화-재발 다발성 경화증을 갖는 인간 피검체의 경우로 예상되는 활성적이나 진행성일 필요는 없는 질환을 모방하기 때문에, 실험은 추가로 미톡산트론과 비교하여 효율을 시험하도록 고안되었다. 초기에 지시된 바와 같이 이러한 약물은 승인된 치료제이며, 화학 발달의 출발점으로서 심독성에 대한 원인 제제로서 공지된 독성전달물질이 없는 시다멕스^TM 분자가 되는 약물로서 작용한다.

따라서, 실시예 2의 방법에 의해 초래된 EAE를 갖는 기니아 피그의 3개의 무작위적 그룹을 각각 6mg/kg의 시다멕스^TM (완전 염 수화물) 및 0.35mg/kg의 미톡산트론으로 처리하였다. 동물을 면역화 후 7일부터 시작하여 15일 동안 복강내 주입으로 매일 처리하였다. 대조군은 비히클로 처리하였다. 본 발명자들은 15개의 연속적인 6mg/kg 용량의 시다멕스^TM는 실시예 4에서 "매 72시간 마다 20mg/kg"과 상응 하는 약물 노출 수준을 나타내며, 실시예 2에서 매주 제공되는 20mg/kg과 40mg/kg 투약 스케쥴 사이의 중간 노출 수준에 상응하는 것으로 추론하였다. 미톡산트론 용량은 종래의 래트 또는 마우스에 제공된 매일 투여되는 전형적인 높은 투여량을 반영하나, 기나아 피그에 상대적으로 비례하게 하였다.

도 10에 제시된 결과로부터 판단할 수 있는 바와 같이, 시다멕스^TM 또는 미톡산트론으로 처리한 그룹은 비히클 대조군과는 일관되게 상이한 경향을 나타내었다. 대조군에서, 질환의 발병 후 15일까지 임상 스코어가 지속적으로 증가하였으며, 20일까지 특징적인 짧은 기간의 회복 및 더 높은 질환 중증도로의 이차 악화가 이어졌다. 미톡산트론 및 시다멕스의 경우, 신경학적 손상에서의 초기 악화가 저지되었으며, 모든 동물은 투약 기간에 걸쳐 기본 수준으로의 회복 경로에 놓여 있었다. 그러나, 맨-휘트니 랭크 섬 테스트에 의한 통계학적 분석은 대조군 및 미톡산트론 효능에 대한 시다멕스^TM의 치료학적 효과는 0.05 미만의 p 값으로 통계학적으로 의미심장하다. 미톡산트론과 대조군의 효능 사이의 중앙 스코어에서의 차이는 통계학적으로 의미가 없다. 도 11은 체중 증량 프로파일로서, 기니아 피그의 일반적인 건강 상태의 민감한 지시제이다. 급성 EAE 질환 발병은 급격한 체중 손실을 촉발시키며, 이로부터 15일 후 지속적 회복으로 전개된다. 대조군 동물 및 시다멕스^TM 처리된 동물은 매일 체중 증가력을 회복하였으며, 이는 중증의 만성 질환의 발병전의 건강한 때의 기니아 피그의 수준이다. 그러나, 본 실험 하에서, 미톡산트론은 더 적은 투여량으로 EAE의 급성 만성 징후를 완화시킬 수 있으나, 체중 증가에 장애가 되며, 이는 잠재적으로 넓은 범위에서 세포독성인 약물에 대한 일반적인 독성 반응의 신호이다. 비히클 대조군과 시다멕스^TM간의 체중 증량 프로파일을 맨-휘트니 랭크-섬 테스트에 의해 비교하면 통계학적으로 의미를 띠지 않으나, 시다멕스^TM와 미톡산트론간의 차이는 0.034의 p 값으로 통계학적으로 의미있다.

이러한 결과는 시다멕스^TM가 유독한 세포독성에 대한 부담 없이 초기 급성기 및 만성기의 활성 질환 경로에 걸쳐 EAE의 표출을 변형시킴을 확인시켜 준다. 도 12에 도시된 병리학적 검정은, 시다멕스^TM가 염증 세포에 의한 선조직의 침윤을 저지시킨다는 실시예 2에 기술된 조직학적 방법에 의한 초기 관찰을 확인시켜준다. 이는 미톡산트론의 작용 모드 및 면역억제성인 미톡산트론 부류의 약물과 현저한 차이를 나타낸다. 대조군으로부터 통계적으로 현저한 차이 (p 값 < 0.05)에 의해 판단되는 바와 같이 혈관주위 커프 (P), 척수염 (E) 및 탈미엘린화 (D) 감소에 대한 두 약물의 효과에 있어서 동일한 결과가 나오지만, 시다멕스^TM와 미톡산트론은 수막 염증 (M)에 대해 동일한 작용을 나타내지 않는다. 미톡산트론은 염증 세포의 활성화 및 보충을 차단하는 면역제제제로서, 수막 염증 (M)에서 염증 세포를 통계적으로 현저하게 감소시킨다. 나머지 세개의 조직병리학적 평가에 따른 치료학적 결과가 실질적으로 유사하다 할지라도 시다멕스^TM는 그렇지 않다.

이러한 발견은 인간 질환에 적용될 수 있는데, 그 이유는 우발 감염에 대해 면역학적 및 염증 반응을 개시하는 숙주의 능력을 손상시키지 않으면서 MS 질환을 치료하는데 매우 유리한 것으로 여겨지기 때문이다. 위장관 작용 및 영양공급 유지에 손상을 끼칠 수 있는 세포독성제에 대한 반응에 있어서, 이러한 기니아 피그 실험에서 정상적인 성장 및 체중 증가에 대한 부정적 영향의 부재는 시다멕스^TM 치료가 주는 또 다른 안전성 이점의 증거가 된다. 급성의 활성 질환을 치료하는데 있어서 시다멕스^TM의 누적된 15일 투여 용량은 90mg/kg이다. 인간 투여량 특정 수준에 대한 상대측정에 의해 상응하는 인간 투여량 540mg/몸체 표면적 m²이 산출되었으며 (유리 염기), 이는 안전하고 내성이 되는 단일 용량에 해당하며, 이는 매 3주마다 반복된 투여량으로서의 640mg/m² 투여량 보다 적다. 다른 한편으로, 미톡산트론의 상대측정량은 45mg/m²의 상응하는 총 인간 투여량이다. 12mg/m²의 미톡산트론이 3달 투약 사이클로 MS의 치료에 사용되기 때문에, 이는 일년치 치료의 전체 용량에 해당한다. 이와 같이, 시다멕스^TM 대 미톡산트론의 상대적 효율에 대한 이러한 비교예에서의 실험적 발견은, 인간에서 시다멕스^TM의 단일 투여량이 일년 경로의 미톡산트론과 높지 않다면 유사한 치료학적 이점을 나타냄을 시사한다.

실시예 6 시마덱스 ^TM 는 류마티스 관절염 및 자가면역 질환의 동물 모델인 마우스의 콜라겐 항체 유도된 관절염의 증상을 완화시킨다.

류마티스 관절염 (RA)은 관절의 만성 미란성 염증을 특징으로 하는 자가면역 질환이며, 연골 및 뼈의 손상을 초래한다. 여러 항류마티스 약제 (DMARDS)가 RA의 치료에 사용된다. 현재, 두개의 가장 중요한 DMARD는 종양 신생 인자 α (TNF-α) 및 메톡트렉세이트 (MTX)의 억제제이다. RA 관련된 다양한 질환의 치료를 위한 약제 조성물의 유용성을 입증하기 위한 한 방법은 마우스에서 콜라겐 모노클로날 항체 (mAB)에 의한 관절염의 유도 억제 능력을 입증하는 것이다.

콜라겐-유도된 관절염 (CIA)은 관절연골의 주요 성분 단백질인 타입 II 콜라겐으로 면역화에 의해 민감한 종인 설치류 (래트 및 마우스) 및 인간외 영장류에서 유도될 수 있는 실험적 자가면역 질환이다. CIA는 마우스 다리의 팽창 및 홍반에 의해 명백해진다. 이러한 자가면역성 모델은 류마티스 관절염 (RA)과 여러 임상 및 병리학적 특징을 공유하며, RA의 가장 널리 연구된 모델이다. 마우스 모델에서 CIA는 문헌 [Courtenay et al., in 1980 : Courtnay, J.S., Dallman, M.J., Dayman, A.D., Marticn A., and Mosedale, B. (1980) Immunisation against heterologous type II collagen induces arthritis in mice. Nature 283, 666-668]에 처음으로 기술되었다. RA와 마찬가지로, CIA에 대한 민감성은 주조직적합복합체 단백질 (MHC)의 클래스 II 분자에 의해 조절되며, 이는 T 세포에 의해 수행된 중요한 역할을 나타낸다.

방법

6-7주령의 3개의 BALB/c 종 마우스 그룹을 타입 II 콜라겐에 대해 증가된 모노클로날 항체 (mAB) 및 리포폴리사카라이드 (LPS)에 의한 관절염 유도에 사용하였다. 4개의 상이한 mAB (D8, F10, DI-2G 및 A2)의 복합물을 총 4mg/마우스의 양 으로 0일째에 동물에 정맥내 투여하고, 72시간 후 (3일째)에 25mg/마우스의 LPS로 정맥내 투여하였다. 3일째로부터, 시험 물질 및 비히클을 각각 3일 연속으로 일일 1회 경구 투여하였다. 각각의 동물에 있어서, 양 뒷발의 부피를 0, 5, 7, 10, 14 및 17일째에 수세포 (water cell) (12mm 직경)를 갖는 플레티스모미터 (plethysmometer)를 사용하여 측정하였다. mAB + LPS에 의해 유도된 부피에서의 증가 억제율은 하기 방정식으로 계산하였다:

억제율 (%) : [1 - (Tn - T0)/(Cn - C0)] x 100%]

여기서, C0 (Cn): 비히클 대조군에서 0일째 (n 일째)의 부피

T0 (Tn): 시험 화합물 처리된 군에서 0일째 (N 일째)의 부피

뒷발에서 수종의 30% 이상의 감소는 현저한 것으로 간주된다.

결과

CIA의 발병을 모니터링하기 위해, mAB 처리된 마우스의 두개의 뒷발의 부피를 측정하였다. 대조군 (비히클) 처리된 동물에서, 5일째에 발은 42 부피%로 빠르게 염증을 일으켰고, 10일째에 최대 부피가 관찰된 후, 팽창부가 가라앉기 시작하였다. 도 13에 도시된 바와 같이, 시다멕스^TM로 처리된 군에서, 5일째의 초기 팽창 부피는 대조군 보다 약간 적었으며 (32% vs. 42%), 현격하게 덜한 염증 (발 부피 측정)이 10일 (29% vs. 75%), 14일 (18% vs. 70%) 및 17일 (19% vs. 47%)에 관찰되었다. 한쌍의 t-테스트에 의한 평균차 및 비모수 맨-휘트니 랭크-섬에 의한 중앙값의 차이는 모두 0.01 미만의 p 값을 나타낸다.

결론

시다멕스^TM는 마우스 CIA 모델에서 현저한 항-관절염 활성을 가지며, 10일째 (61% 억제), 14일째 (74% 억제) 및 17일째 (59% 억제)에 현저한 항-염증 활성을 갖는 것으로 입증되었다. 이러한 발견은 EAE 및 일반적인 자가면역 질환에서 종래 실시예와 관련되는데, 이들은 예상치못한 메카니즘을 통한 시다멕스^TM의 효력을 예시하기 때문이다. 류마티스 관절염의 콜라겐 항체 모델은 중요한데, 그 이유는 이는 항원제시의 일차 염증 손상을 우회하기 때문이다. 코르티코스테로이드와 같은 전형적인 항염증제 및 메토트렉세이트와 같은 항-폴레이트는 염증 세포 활성화 및 보충의 일차 현상을 억제함으로써 자가면역 염증 질환의 영향을 완화시킨다. 항체 유도된 모델은, 선조직에 대한 연장된 공격 동안 MS에서의 경우에서와 같이 활성화된 세포가 연골에 침습성을 띠게 되고, 관외 일출되고 이동된 후 자가면역 반응의 후속 단계에 나타나는 질환의 증상을 유도한다.

메토트렉세이트 즉, 벤치마크 치료제는 교환 및 이동 특성 보다 T-세포 활성화에 본질적으로 덜 의존적인 항체 유도된 모델에서 이점을 감소시키는 것으로 증명되었다. 랜즈 (Lange) 등의 작업이 본원에 인용되었다 (Annals of Rheumatoid Disease 64:599-605, 2005). 반대로, 시다멕스^TM는 본 모델에서 완전히 활성인 것으로 나타났다. 본 실시예에서 나타난 결과는 특히 인간 피검체의 치료에 관련되는데, 그 이유는 치료학적 효과가 경구 투여에 의해 수득되기 때문이다. 주입가능한 생물학적 약제 예컨대, 차단 항체의 시대에서, 경구 경로를 통한 효과적인 비면 역억제성 치료법의 추가는 특히 바람직하다.

실시예 7 시다멕스 ^TM 는 염증 세포 유착, 세포-표면 시그널링 및 세포 증식의 과다발현된 표적 메카니즘을 하향 조절한다.

유전자 발현에 대한 시다멕스^TM의 치료 효과를 조사기 위해, 마이크로어레이 실험을 수행하였다.

신속하게 증식하는 침윤성 세포로서 상이한 조직 기원으로부터 많은 다른 세포 유형으로 보편화될 수 있는 성향을 갖는 두개의 직장암 세포주 (HT29 & HCT116)를 연구를 위해 선택하였다. 두개의 세포주는 불멸의 콜론 칼시노마이다. 이들의 유전자 발현 패턴은 신경장관 세포의 성향을 모방하는 것으로 공지되어 있으며, 따라서, 유사한 상피 또는 기원 세포에서 발견되는 종류의 조절 패턴의 적합한 자극을 제공한다. 이들 존재론적 근원을 갖는 세포는 또한, 예컨대, 염증성 장 질환이 있는 신경장관 기원 조직에 공통인 자가면역 및 염증 민감성 부류에 적합한 모델이다.

중추신경계 및 해부학적으로 비관련된 조직 모두에서 유전자 발현 패턴의 중복성 및 공통성을 입증한 상이한 유전자 발현 어레이를 사용한 총망라한 연구에 관해 논의하겠다 (Zhang J. et al., "Neural system-enriched expression: relationship to biological pathways and neurological diseases", Physiol. Genomics 18:167-183, 2004). 이들의 교시 내용이 본원에 참고문헌으로 인용된 장 (Zhang)과 동료들은 신경계 10 영역 및 30 말초 기관에서 8,734 유전자의 발현 생 성물을 프로파일하였다. 이들의 분석은 신경계 질환에 관련된 유전자의 약 70%가 또한 상피 기원의 조직을 포함하는 다양한 조직 및 말초 혈액에서 발견됨을 알아내었다. 이들 연구자들은 또한, 신경계 질환과 관련되나, 더욱 용이한 샘플링이 수득될 수 있는 다양한 말초 조직으로부터 공급된 유전자 프로필이 이들 질환에 대한 메카니즘을 더욱 잘 이해할 수 있게 할 것임을 시사한다. 따라서, 이들 세포 및 신경계 조직에 공통인 경로에 대해 약물의 영향을 이해하기 위한 모델 범례로서 유전자 발현 연구에서 콜론 세포의 사용이 실험적으로 정당하다.

따라서, 본 발명의 화합물의 메카니즘 작용을 입증하기 위한 특정 연구를 바람직한 이미다조아크리니돈 조성물 (이하에서는 시다멕스^TM로 기재)을 사용하여 수행하였다.

세포를 GI150 농도 (0.68 및 0.21 μMolar, 각각 HT29 및 HCT116 세포주에 있어서)의 시다멕스^TM의 존재하에 성장시키고, 1, 8 및 48시간의 노출 후 비처리된 대조군 분획물과 함께 채취하였다. 냉동된 세포 펠렛을 삼중으로 용해시키고, 전체 RNA를 스핀 칼럼에 의해 정제 분리하였다 (모든 시약은 암비온 (Ambion)으로부터 입수). 순도를 위한 QC 검사 후, 총 RNA를 선형 증폭에 의해 cRNA로 전환시키고, 10㎍의 샘플을 코데링크 휴먼 홀 게놈 바이오어레이 (CodeLink Human Whole Genome Bioarray :GH Healthcare and GenUs Biosystems)에 적용시켰다.

어레이를 삼중으로 진행시키고, 복제 변이가능성의 통계학적 분석 후 비교하였다. 유전자(EST 포함)는 베이스라인으로부터의 변화가 코드링크 익스프레션 어 낼러시스(CodeLink Expression Analysis; GE Healthcare) 및 진스프링(GeneSpring; Silicon Genetics) 소프트웨어를 이용한 T-시험(p<0.05, α=0.025)에 의해 유효한 것으로 나타내는 경우 분화적으로 발현되는 것으로 간주되었다. 오류발견율 및 표준화된 유전자 존재론/경로의 표시를 이후 개방 처리 소프트웨어 패키지, EASE 및GoMiner, 및 패스웨이 어낼러시스(Pathways Analysis; Ingenuity Systems)로 표현에서 "배(fold)" 변화를 필터링하므로써 결정하였다. 기능적 주석을 이후 메드미너(MedMiner) 문헌 연구 환경에서 추가로 조사하였다.

24 시간 시험 인큐베이션에서 샘플링된 간격에 걸쳐, 271개의 하향조절된(downregulated) 유전자를 55,000개 유전자 단편 등록의 어레이내로부터 두 가지 세포 타입으로 유효하게 표시하였다. 이들의 리스트를 하기 표 3에 나타내었으며, 여기서 첫번째 컬럼 데이타는 대조군에 대한 배 변경을 나타낸 것이며, 두번째 컬럼은 유전자 기호를 인용한 것이며, 세번째 컬럼은 유전자은행 등록번호를 인용한 것이며, 네번째 컬럼은 요약된 유전자 기능의 설명을 제공한 것이다.

표 3: 시마덱스™의 작용에 의해 유효하게 하향조절된 유전자

분석

유전자 존재론의 배경에서 기술된 이러한 검토는 시마덱스™가 다면성 효과를 갖는 경우, 세포 응집 및 증식의 메카니즘 및 침윤 세포 성장과 관련된 공정에서 난해함을 나타내고 있으며, 이는 처음부터 기술된 자가면역 질병과 관련된 면역 병인학의 특징이다.

표 3의 증거에서 더욱 상세한 분석은, 예를 들어 하향 조절된 유전자의 현저한 비율이 세포 표면 신호화, 운동성, 이동, 및 접착의 메나키즘과 관련되며, 이는 염증 세포가 혈관 장벽을 가로지르고 유연조직 층을 관통할 수 있음을 나타낸다. 당업자는 이들의 존재론적 상호관계가 문헌에서 공개된 도메인의 데이타베이스내에 전부 기술되어 있으며, 이는 하기 정보로부터 발췌되는 것으로 인식될 것이다. 이러한 데이타베이스는 동일한 사이트에서 DAVID(Database for Annotation, Visualization and Integrated Discovery, from the National Institute of Allergy and Infectious Disease, http://apps1.niaid.nih.gob/david;the sister program EASE(Expression Analysis Systematic Explorer); 및 진카드 바이오정보 프로젝트(http://genome-www.stanford.edu/genecards/index.shtml)를 포함한다.

예를 들어, 논의 하의 분화 유전자 발현 실험에서, 하향 조절된 유전자 ACTA2 ACVRL1, BGN, DSC3, ENG, FBAN1, FBLN1, HMMR, IGTA2B, ITGA2B, ITGA9, ITGAE, LIMS2, LTB, MAPT, MSLN, NMI, PCDH7, PECAM1, PRDM1, SEMA7A, VAPA 모두는 인테그린 및 카드헤린과 같은 접착 인자의 직접 조절에 의해, 또는 이들의 발현 및 접착 공정을 추가로 촉진시키는 보조 단백질의 어셈블리를 촉진시키는 성장 인자 신호를 방해하므로써 이들 공정의 조절에 관여한다. 본 배경에서 특별히 중요한 점은 SYNE1 스펙트린 반복의 두드러진 1500 배 하향-조절이다. 이러한 유전자에 의해 코딩된 네스프린 패밀리 중 보조 단백질은 신경조직화 및 세포 골격의 구조적 보존을 유지하며, SYNE1의 하향 조절은 침투 운동 기간 동안 이들의 형태 및 기하학을 유지하기 위해 염증 세포의 능력을 손상시키는 것으로 예상될 것이다. 따라서, 세포 형태를 유지시키기 위한 조직의 분할 유전자 발현 상에서 시마덱스™의 이러한 효과는 전달 동안 이들 세포의 붕괴를 초래하고, 결과는 또한 시마덱스의 치료학적 작용 모드의 조직 병리학과 일치한다.

칼슘 이온 및 고에너지 포스페이트 발생을 위한 필수적인 공정은 ATP1B4, ATP2B3, CAMK1, EGFL6, GPR24, IBSP, NUDT1, RAD54B, RYR3 및 SLC9A7의 하향 조절에 의해 증명된 바와 같이 순서대로 영향을 미친다. 세포 증식은 다른 이러한 관련된 유전자 중 BIRC5, CCL23, CCNB2, CDC2, CDC25C, CKS1B, CREM, EGFL6, FCAR, IL13RA2, IL1RAP, IL1RL1, MAPK13, NRG1, PTPRG, STK6에 의해 매개된 세포 주기 블로킹을 통해 제어된다. 측분비 및 자가분비 조절에 의한 핵조절은 또한 예를 들어, 손상과 관련된 신경전달물질 운송체를 포함하는 신경염증 손상에 대해 추가로 반응하는 시스템의 하향 조절, 치솟는 글루타메이트 신호화에서 증명된다. 후자 부류의 하향조절된 유전자는 ADCYAP1, GABRA3, GGH, KCNQ3, SLC1A2(및 이의 SLC 패밀리 용질 담체 동족체), 및 SULT4A1에 의해 대표된다. 이러한 후자 유전자는 300 배 하향 조절과 가까운 것으로 나타났다. 이는 헤파란 술페이트화와 관련된 유전자이다. 술페이트된 헤파란은 인테그린을 라미닌에 결합시키고 이에 따라 침투적 염증 세포를 기저막을 통해 CNS 유연조직으로 이동시키는 연결을 제공하는 "분자 벨크로"를 구성한다. 이러한 공정의 하향 조절은 혈관 커프스(cuffs)의 범위내에 염증 세포를 유지시키는 것으로 예상되는데, 이는 실시예 2 내지 8에 기재된 시마덱스™ 치료 효과에서 조직병리학적 평가의 경우인 것으로 관찰되기 때문이다.

시마덱스™에 의해 영향을 미치는 이러한 유전자의 통합된 기능은 예를 들어 아르네트 하 등(Arnett HA et al.)의 연구("Functional genomic analysis of remyelination reveals importance of inflammation in oligodendrocyte regeneration," J.Neuroscience 23(30):9824-9832, 2003); 린드버그 알엘피 등(Lindberg RLP et al.)의 연구("Multiple sclrosis as a generalized CNS disease-comparative microarray analysis of normal appearing white matter and lesions in secondary progressive MS," J.Neuroimmunology 152:154-167, 2004); 및 타조우리 엘 등(Tajouri L. et al.)의 연구 ("Quantitative and qualitative changes in gene expression patterns chracterize the activity of plaques in multiple sclerosis," Mol.Brain Res. 119:170-183, 2003)에서와 같이 마이크로어레이 실험에서 관찰되는 분화 발현 프로필과 일치한다. 이들 연구는 본원에 기술된 유전자 설명과 유사한 방식으로, 특히 다발성 경화증이 프라임 환경으로서 제공하기 위한 자가면역 제거 모델의 문장에서 대표적인 자가면역 염증 손상 및 이후 이로부터의 회복의 특징으로 분류한다. 그러므로, 다발성 경화증 및 유사한 원인학의 자가면역 질환의 치료에서 시마덱스™ 및 이의 같은 종류의 것의 적용의 주장은 화합물의 분자 약리학 측면에서 명백할 수 있다.

본 발명은 구체적으로 나타내고 이의 바람직한 구체예와 관련하여 기술되는 한, 당업자에 의해 다양한 변형 형태로 이해될 것이며, 상세한 설명은 첨부된 청구항에 의해 포함된 본 발명의 범위를 벗어나지 않고 본원에서 이루어질 수 있다.

SEQUENCE LISTING <110> Xanthus Life Sciences, Inc. Alfred M. Ajami Michael A. Boss Jesse Paterson <120> Compounds for Treating Autoimmune and Demyelinating Diseases <130> 3287.1006-004 <140> PCT/US2006/002952 <141> 2006-01-27 <150> 60/647,980 <151> 2005-01-28 <150> 60/757,736 <151> 2006-01-09 <160> 5 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> polypeptide corresponding to positions 39-58 of human T-cell receptor Vbeta6 CDR2 <400> 1 Leu Gly Gln Gly Pro Glu Phe Leu Thr Tyr Phe Gln Asn Glu Ala Gln 1 5 10 15 Leu Glu Lys Ser 20 <210> 2 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> immunogenic polypeptide corresponding to positions 75-95 of human myelin basic protein <400> 2 Lys Ser His Gly Arg Thr Gln Asp Glu Asn Pro Val Val His Phe Phe 1 5 10 15 Lys Asn Ile Val Thr 20 <210> 3 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Tiplimotide, immunogenic polypeptide corresponding to positions 83-99 of the human myelin basic protein <400> 3 Ala Lys Pro Val Val His Leu Phe Ala Asp Ile Val Thr Pro Arg Thr 1 5 10 15 Pro <210> 4 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> immunogenic peptide derived from human myelin basic protein <400> 4 Asp Glu Asp Pro Val Val His Phe Phe Lys Asp Ile Val Thr Pro Arg 1 5 10 15 Thr <210> 5 <211> 39 <212> PRT <213> Homo Sapiens <220> <221> PEPTIDE <222> (0)...(0) <223> Human ACTH <400> 5 Ser Tyr Ser Met Glu His Phe Arg Trp Gly Lys Pro Val Gly Lys Lys 1 5 10 15 Arg Arg Pro Val Lys Val Tyr Pro Asp Gly Ala Glu Asp Glu Leu Ala 20 25 30 Glu Ala Phe Pro Leu Glu Phe 35

Claims

염증성 질환을 앓고 있는 환자에게 치료학적 유효량의 하기 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하여, 염증성 질환을 앓고 있는 환자를 치료하는 방법:

(A).

상기 식에서,

R은 -H, 치환되거나 비치환된 알킬, 히드록실, 알콕시기, 할로겐이거나,

구조식
에 의해 표현되는 기이거나;

R 및 R⁵는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하거나;

R 및 R⁴는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하며;

R²는 -H, 치환되거나 비치환된 Cl-C1O 알킬 또는 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이며;

R³는 -(CH₂)_n-NR^aR^b이고, 여기에서, n은 1 내지 5이고, R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이거나, -NR^aR^b는 하나 이상의 치환가능한 탄소에서 메틸, 히드록실, 또는 메톡시기로 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이며, N-피라지닐은 C1-C4 알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환되며;

R⁴, R⁵ 및 R⁶는 각각 독립적으로 -H, -OH, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시이거나,

R⁵ 및 R⁶는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성한다.
제 1항에 있어서, 화학식 (A)의 화합물이 하기 화학식 (I)에 의해 표현되는 방법:

(I)

상기 식에서,

R은 -OH 또는 C1-C6 알콕시기이고;

R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환되거나 비치환된 알킬이며;

R²는 -H 또는 C1-C6 알킬이며;

n은 2 내지 5의 정수이다.
제 2항에 있어서, 염증성 질환이 전신 루푸스, 염증성 장질환, 건선, 크론병, 류마티스 관절염, 사르코이드증, 알츠하이머병, 만성 염증성 탈수초성 신경병증, 인슐린 의존성 당뇨병, 아테롬성동맥경화증, 천식, 척수 손상 또는 뇌졸증인 방법.
제 2항에 있어서, R은 -OH 또는 -OCH₃인 방법.
제 2항에 있어서, n은 2 또는 3인 방법.
제 2항에 있어서, R²가 -H 또는 C1-C4 알킬인 방법.
제 2항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 C1-C3 알킬인 방법.
제 7항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 에틸 또는 메틸인 방법.
제 2항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 알킬이고, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 방법.
제 2항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 -H 또는 알킬이며, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 방법.
제 9항에 있어서, R^a 및 R^b상의 치환기가 독립적으로 히드록시에틸, 아미노에틸, N-알킬아미노에틸 및 N,N-디알킬아미노에틸인 방법.
제 2항에 있어서, R이 -OH 또는 OCH₃이며, R^a 및 R^b는 동일하고, 메틸 또는 에틸이며; n은 2 또는 3이고; R²는 수소 또는 C1-C4 알킬인 방법.
제 2항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이

로부터 선택된 방법.
제 2항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 하기 화학식 (III)의 화합물인 방법:

(III)
탈수초성 질환을 앓고 있는 환자에게 치료학적 유효량의 하기 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하여, 탈수초성 질환을 앓고 있는 환자를 치료하는 방법:

(A).

상기 식에서,

R은 -H, 치환되거나 비치환된 알킬, 히드록실, 알콕시기, 할로겐이거나,

구조식
에 의해 표현되는 기이거나;

R 및 R⁵는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하거나;

R 및 R⁴는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하며;

R²는 -H, 치환되거나 비치환된 Cl-C1O 알킬 또는 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이며;

R³는 -(CH₂)_n-NR^aR^b이고, 여기에서, n은 1 내지 5이고, R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이거나, -NR^aR^b는 하나 이상의 치환가능한 탄소에서 메틸, 히드록실, 또는 메톡시기로 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이며, N-피라지닐은 C1-C4 알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환되며;

R⁴, R⁵ 및 R⁶는 각각 독립적으로 -H, -OH, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시이거나,

R⁵ 및 R⁶는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성한다.
제 15항에 있어서, 화학식 (A)의 화합물이 하기 화학식 (I)에 의해 표현되는 방법:

(I)

상기 식에서,

R은 -OH 또는 C1-C6 알콕시기이고;

R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환되거나 비치환된 알킬이며;

R²는 -H 또는 C1-C6 알킬이며;

n은 2 내지 5의 정수이다.
제 16항에 있어서, 염증성 질환이 다발성 경화증, 선천성 대사 장애, 비정상 미엘린화에 의한 신경병증, 약물 유래된 탈미엘린화, 방사선 유도된 탈미엘린화, 유전적 탈미엘린화 질병, 프리온(prion) 유래된 탈미엘린화, 뇌염 유도된 탈미엘린화, 척수 손상, 알츠하이머병 또는 만성 염증성 탈수초성 신경병증인 방법.
제 16항에 있어서, R은 -OH 또는 -OCH₃인 방법.
제 16항에 있어서, n은 2 또는 3인 방법.
제 16항에 있어서, R²가 -H 또는 C1-C4 알킬인 방법.
제 16항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 C1-C3 알킬인 방법.
제 21항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 에틸 또는 메틸인 방법.
제 16항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 알킬이고, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 방법.
제 16항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 -H 또는 알킬이며, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 방법.
제 23항에 있어서, R^a 및 R^b상의 치환기가 독립적으로 히드록시에틸, 아미노에틸, N-알킬아미노에틸 및 N,N-디알킬아미노에틸인 방법.
제 16항에 있어서, R이 -OH 또는 OCH₃이며, R^a 및 R^b는 동일하고, 메틸 또는 에틸이며; n은 2 또는 3이고; R²는 수소 또는 C1-C4 알킬인 방법.
제 16항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이

로부터 선택된 방법.
제 16항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 하기 화학식 (III)의 화합물인 방법:

(III)
다발성 경화증을 앓고 있는 환자에게 치료학적 유효량의 하기 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하여, 다발성 경화증을 앓고 있는 환자를 치료하는 방법:

(A).

상기 식에서,

R은 -H, 치환되거나 비치환된 알킬, 히드록실, 알콕시기, 할로겐이거나,

구조식
에 의해 표현되는 기이거나;

R 및 R⁵는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하거나;

R 및 R⁴는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하며;

R²는 -H, 치환되거나 비치환된 Cl-C1O 알킬 또는 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이며;

R³는 -(CH₂)_n-NR^aR^b이고, 여기에서, n은 1 내지 5이고, R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이거나, -NR^aR^b는 하나 이상의 치환가능한 탄소에서 메틸, 히드록실, 또는 메톡시기로 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이며, N-피라지닐은 C1-C4 알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환되며;

R⁴, R⁵ 및 R⁶는 각각 독립적으로 -H, -OH, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시이거나,

R⁵ 및 R⁶는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성한다.
제 29항에 있어서, 화학식 (A)의 화합물이 하기 화학식 (III)의 화합물인 방법:

(III)
치료학적 유효량의 하기 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하여, 환자의 신경 세포의 재미엘린화를 증진시키는 방법:

(A).

상기 식에서,

R은 -H, 치환되거나 비치환된 알킬, 히드록실, 알콕시기, 할로겐이거나,

구조식
에 의해 표현되는 기이거나;

R 및 R⁵는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하거나;

R 및 R⁴는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하며;

R²는 -H, 치환되거나 비치환된 Cl-C1O 알킬 또는 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이며;

R³는 -(CH₂)_n-NR^aR^b이고, 여기에서, n은 1 내지 5이고, R^a 및 R^b는 각각 독립 적으로 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이거나, -NR^aR^b는 하나 이상의 치환가능한 탄소에서 메틸, 히드록실, 또는 메톡시기로 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이며, N-피라지닐은 C1-C4 알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환되며;

R⁴, R⁵ 및 R⁶는 각각 독립적으로 -H, -OH, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시이거나,

R⁵ 및 R⁶는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성한다.
제 31항에 있어서, 화학식 (A)의 화합물이 하기 화학식 (I)에 의해 표현되는 방법:

(I)

상기 식에서,

R은 -OH 또는 C1-C6 알콕시기이고;

R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환되거나 비치환된 알킬이며;

R²는 -H 또는 C1-C6 알킬이며;

n은 2 내지 5의 정수이다.
제 32항에 있어서, R은 -OH 또는 -OCH₃인 방법.
제 32항에 있어서, n은 2 또는 3인 방법.
제 32항에 있어서, R²가 -H 또는 C1-C4 알킬인 방법.
제 32항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 C1-C3 알킬인 방법.
제 36항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 에틸 또는 메틸인 방법.
제 32항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 알킬이고, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 방법.
제 32항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 -H 또는 알킬이며, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 방법.
제 32항에 있어서, R^a 및 R^b상의 치환기가 독립적으로 히드록시에틸, 아미노에틸, N-알킬아미노에틸 및 N,N-디알킬아미노에틸인 방법.
제 32항에 있어서, R이 -OH 또는 OCH₃이며, R^a 및 R^b는 동일하고, 메틸 또는 에틸이며; n은 2 또는 3이고; R²는 수소 또는 C1-C4 알킬인 방법.
제 32항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이

로부터 선택된 방법.
제 32항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 하기 화학식 (III)의 화합물인 방법:

(III)
제 32항에 있어서, 환자가 인간인 방법.
제 44항에 있어서, 인간이 세포를 탈미엘린화시키는 질환을 앓고 있으며, 이러한 질환은 다발성 경화증, 선천성 대사 장애, 비정상 미엘린화에 의한 신경병증, 약물 유래된 탈미엘린화, 방사선 유도된 탈미엘린화, 유전적 탈미엘린화 질병, 프리온 유래된 탈미엘린화, 뇌염 유도된 탈미엘린화, 척수 손상, 알츠하이머병 또는 만성 염증성 탈수초성 신경병증인 방법.
제 44항에 있어서, 인간이 다발성 경화증을 앓고 있는 방법.
제 32항에 있어서, 화합물이 비경구적으로 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, 화합물이 이를 필요로 하는 환자에게 만성적으로 투여되 는 방법.
제 48항에 있어서, 화합물의 만성 투여가 1년 이상의 기간에 걸쳐 매주 또는 매달 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, 항염증제가 화합물과 함께 환자에 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, EGFR 억제제가 화합물과 함께 환자에 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, VEGFR 억제제가 화합물과 함께 환자에 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, FGFR 억제제가 화합물과 함께 환자에 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, T 세포의 회귀, 일출 또는 이동 억제제가 화합물과 함께 환자에 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, VLA4 억제제가 화합물과 함께 환자에 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, 인터페론이 화합물과 함께 환자에 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, 화학요법제가 화합물과 함께 환자에 투여되는 방법.
제 32항에 있어서, 면역치료제가 화합물과 함께 환자에 투여되는 방법.
제 50항에 있어서, 항염증제가 아드레노코르티코트로프 호르몬, 코르티코스테로이드, 인터페론, 글라티라머 아세테이트, 또는 비스테로이드성 항염증 약물인 방법.
제 59항에 있어서, 인터페론이 인터페론 베타-1b 또는 인터페론 베타-1a인 방법.
제 59항에 있어서, 코르티코스테로이드가 프레드니손(prednisone), 메틸프레드니솔론(methylprednisolone), 덱사메타손(dexamethasone), 코르티솔(Cortisol), 코르티손(cortisone), 플루드로코르티손(fludrocortisone), 프레드니솔론(prednisolone), 6α-메틸프레드니솔론(6α-methylprednisolone), 트리암시놀론(triamcinolone), 또는 베타메타손(betamethasone)인 방법.
제 59항에 있어서, 코르티코스테로이드가 프레드니솔론인 방법.
제 59항에 있어서, 비스테로이드성 항염증 약물이 아스피린, 나트륨 살리실 레이트, 콜린 마그네슘 트리살리실레이트, 살살레이트, 디플루니살, 설파살라진, 올살라진, 파라-아미노페놀 유도체, 인돌, 인덴 아세트산, 헤테로아릴 아세트산, 안트라닐산, 에놀산, 알카논, 디아릴-치환된 푸라논, 디아릴-치환된 피라졸, 인돌 아세트산, 또는 설폰아닐리드인 방법.
제 32항에 있어서, 화합물이 경구, 정맥내 또는 피하내 투여되는 방법.
제 64항에 있어서, 화합물이 환자에 정맥내 투여되며, 환자에서 효과적인 화합물의 혈액내 수준이 10ng/ml 이상이 되도록 투여되는 방법.
제 64항에 있어서, 화합물이 환자의 체중 kg 당 20㎍ 내지 약 500㎍의 양으로 정맥내 투여되는 방법.
치료학적 유효량의 하기 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 항염증제를 포함하는 조성물:

(A).

상기 식에서,

R은 -H, 치환되거나 비치환된 알킬, 히드록실, 알콕시기, 할로겐이거나,

구조식
에 의해 표현되는 기이거나;

R 및 R⁵는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하거나;

R 및 R⁴는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하며;

R²는 -H, 치환되거나 비치환된 Cl-C1O 알킬 또는 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이며;

R³는 -(CH₂)_n-NR^aR^b이고, 여기에서, n은 1 내지 5이고, R^a 및 R^b는 각각 독립 적으로 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이거나, -NR^aR^b는 하나 이상의 치환가능한 탄소에서 메틸, 히드록실, 또는 메톡시기로 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이며, N-피라지닐은 C1-C4 알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환되며;

R⁴, R⁵ 및 R⁶는 각각 독립적으로 -H, -OH, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시이거나,

R⁵ 및 R⁶는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성한다.
제 67항에 있어서, 화학식 (A)의 화합물이 하기 화학식 (I)에 의해 표현되는 조성물:

(I)

상기 식에서,

R은 -OH 또는 C1-C6 알콕시기이고;

R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환되거나 비치환된 알킬이며;

R²는 -H 또는 C1-C6 알킬이며;

n은 2 내지 5의 정수이다.
제 68항에 있어서, R은 -OH 또는 -OCH₃인 조성물.
제 68항에 있어서, n은 2 또는 3인 조성물.
제 68항에 있어서, R²가 -H 또는 C1-C4 알킬인 조성물.
제 68항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 C1-C3 알킬인 조성물.
제 68항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 에틸 또는 메틸인 조성물.
제 68항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 알킬이고, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 조성물.
제 68항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 -H 또는 알킬이며, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 조성물.
제 75항에 있어서, R^a 및 R^b상의 치환기가 독립적으로 히드록시에틸, 아미노에틸, N-알킬아미노에틸 및 N,N-디알킬아미노에틸인 조성물.
제 68항에 있어서, R이 -OH 또는 OCH₃이며, R^a 및 R^b는 동일하고, 메틸 또는 에틸이며; n은 2 또는 3이고; R²는 수소 또는 C1-C4 알킬인 조성물.
제 68항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이

로부터 선택된 조성물.
제 68항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 하기 화학식 (III)의 화합물인 조성물:

(III)
척수중의 면역 세포의 림프구 침윤을 억제하는데 충분한 양의 화합물을 환자에 투여하여 척수의 신경 세포의 재미엘린화를 증진시켜 환자의 마비를 치료하는 것을 포함하여, 탈미엘린화로부터 초래된 마비를 회복시키는 방법으로서, 화합물이 하기 화학식(A)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인 방법:

(A).

상기 식에서,

R은 -H, 치환되거나 비치환된 알킬, 히드록실, 알콕시기, 할로겐이거나,

구조식
에 의해 표현되는 기이거나;

R 및 R⁵는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하거나;

R 및 R⁴는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성하며;

R²는 -H, 치환되거나 비치환된 Cl-C1O 알킬 또는 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이며;

R³는 -(CH₂)_n-NR^aR^b이고, 여기에서, n은 1 내지 5이고, R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소 또는 치환되거나 비치환된 알킬이거나, -NR^aR^b는 하나 이상의 치환가능한 탄소에서 메틸, 히드록실, 또는 메톡시기로 치환되거나 비치환된 N-모르폴리닐 또는 N-피라지닐이며, N-피라지닐은 C1-C4 알킬 또는 -NR^cR^d(여기에서, R^c 및 R^d는 개별적으로 -H, 메틸 또는 에틸이다)로 치환된 C1-C4 알킬로 N'-치환되거나 비치환되며;

R⁴, R⁵ 및 R⁶는 각각 독립적으로 -H, -OH, 할로겐 또는 C1-C6 알콕시이거나,

R⁵ 및 R⁶는 이들의 개입되는 탄소 원자와 함께 치환되거나 비치환된 5원, 6원 또는 7원의 시클로알킬 또는 비방향족 헤테로사이클을 형성한다.
제 80항에 있어서, 화학식 (A)의 화합물이 하기 화학식 (I)에 의해 표현되는 방법:

(I)

상기 식에서,

R은 -OH 또는 C1-C6 알콕시기이고;

R^a 및 R^b는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환되거나 비치환된 알킬이며;

R²는 -H 또는 C1-C6 알킬이며;

n은 2 내지 5의 정수이다.
제 81항에 있어서, R은 -OH 또는 -OCH₃인 방법.
제 81항에 있어서, n은 2 또는 3인 방법.
제 81항에 있어서, R²가 -H 또는 C1-C4 알킬인 방법.
제 81항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 C1-C3 알킬인 방법.
제 81항에 있어서, R^a 및 R^b가 각각 독립적으로 에틸 또는 메틸인 방법.
제 81항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 알킬이고, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 방법.
제 81항에 있어서, R^a 및 R^b가 독립적으로 각각 -H 또는 알킬이며, C1-C4 히드록시알킬, 아미노, C1-C4 N-알킬-아미노 또는 C1-C4 N,N-디알킬아미노 기로 치환되거나 비치환된 방법.
제 87항에 있어서, R^a 및 R^b상의 치환기가 독립적으로 히드록시에틸, 아미노에틸, N-알킬아미노에틸 및 N,N-디알킬아미노에틸인 방법.
제 81항에 있어서, R이 -OH 또는 OCH₃이며, R^a 및 R^b는 동일하고, 메틸 또는 에틸이며; n은 2 또는 3이고; R²는 수소 또는 C1-C4 알킬인 방법.
제 81항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이

로부터 선택된 방법.
제 81항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 하기 화학식 (III)의 화합물인 방법:

(III)
제 81항에 있어서, 면역제제제가 함께 투여되는 것을 추가로 포함하는 방법.
제 93항에 있어서, 면역억제제가 아드레노코르티코트로프 호르몬, 코르티코스테로이드 또는 인터페론인 방법.
제 94항에 있어서, 인터페론이 인터페론 베타-1b 또는 인터페론 베타-1a인 방법.
제 94항에 있어서, 코르티코스테로이드가 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손, 코르티솔, 코르티손, 플루드로코르티손, 프레드니솔론, 6α-메틸프레드니솔론, 트리암시놀론, 또는 베타메타손인 방법.