KR20070052316A

KR20070052316A - 혈관 내피 성장 인자의 경피 전달 장치 및 그 방법

Info

Publication number: KR20070052316A
Application number: KR1020077006115A
Authority: KR
Inventors: 마우드 아메리; 미셸 제이. 엔. 코미어; 유푼 마; 피터 다도나; 프랭크 스톤뱅크스
Original assignee: 알자 코포레이션
Priority date: 2004-08-19
Filing date: 2005-08-17
Publication date: 2007-05-21
Also published as: MX2007002078A; AR050608A1; WO2006023684A2; WO2006023684A3; AU2005277376A1; IL181365A0; US20060040864A1; TW200621316A; JP2008510520A; CN101048151A; EP1781266A2; CA2577711A1; ZA200702223B; NO20071469L

Abstract

본 발명은 각질층을 통해 그 밑에 있는 표피층, 또는 표피 및 진피층으로 피어싱하기에 적합한 다수의 마이크로프로젝션 (또는 이의 어레이)을 포함하는 마이크로프로젝션 부재 (또는 어셈블리)를 갖는 전달 시스템을 포함하는, 생물학적 활성제를 경피적으로 전달하기 위한 장치 및 그 방법을 제공한다. 일실시형태에 있어서, VEGF계 제제는 마이크로프로젝션 부재에 도포되는 생체 적합성 코팅에 함유된다.

Description

혈관 내피 성장 인자의 경피 전달 장치 및 그 방법 {MICROPROJECTION ARRAY PATCH FOR TRANSDERMAL DELIVERY OF VASCULAR ENDOTHELIAL GROWTH FACTORS}

본 발명은 일반적으로 경피 약물 전달 시스템 및 그 방법에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)계 제제의 경피 전달 장치 및 그 방법에 관한 것이다.

자간전증은 고혈압, 부종 및 단백뇨의 증후군인 것으로 알려져 있다. 자간전증은 임신 중 5 내지 10%에 영향을 미쳐서, 실질적인 태아 병적 상태 및 사망을 가져온다. 자간전증은 또한 매년 세계적으로 적어도 200,000명의 임산부 사망을 차지한다.

자간전증은 중증도가 경증에서 생명을 위협하는 정도로 변화할 수 있다. 경증 형태의 자간전증은 침대 요양 및 빈번한 모니터링으로 치료될 수 있다. 경증 내지 중증 경우에 대해서는, 입원이 추천되고, 발작을 예방하는 혈압약 또는 항경련약이 처방된다. 상태가 엄마 또는 아기의 생명을 위협하게 되는 경우에는, 임신은 통상 종료하고, 아기는 조산된다.

태아 및 태반의 적절한 발육은 각종 성장 인자에 의해 조정된다. 이들 성장 인자 중 하나는 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)이다. VEGF는 내피 세포 특이성 미토 겐, 혈관 신생 유도 인자 및 혈관 투과성 조정자이다.

VEGF는 또한 사구체 모세관 수복에 중요한 것으로 알려져 있다. VEGF는 호모다이머로서, 다양한 상이한 조직에서 얻은 내피 세포에서 상이하게 발현되는 2개의 상동 막관통 티로신 키나제 수용체, 즉 핀형 티로신 키나제 (Flt-1) 및 키나제 영역 수용체 (KDR) 중 하나에 결합한다. Flt-1 (그러나 KDR가 아님)는 태반 형성에 기여하는 트로포블라스트 세포에 의해 고도로 발현된다.

태반 성장 인자 (PlGF)는 또한 태반 발육에 포함되는 VEGF 패밀리 멤버이다. PlGF는 세포영양막 및 융합세포영양막에 의해 발현되고, 내피 세포의 증식, 이동 및 활성화를 유도할 수 있다. PlGF는 호모다이머로서 KDR 수용체가 아니라, Flt-1 수용체에 결합된다. PlGF 및 VEGF는 발육 태반에 중요한 미토겐 활성 및 혈관 형성에 기여한다.

최근에, sFlt-1 (Flt-1 수용체의 스플라이스 변이체)의 레벨이 자간전증에 걸린 임산부에서 얻은 태반 조직 샘플에서 현저하게 상승하는 것으로 밝혀졌다. sFlt-1은 "생리학적 싱크"로서 작용함으로써 VEGF 및 PlGF를 길항하는 것으로 알려져 있고, 자간전증 또는 자간 여성에 있어서, sFlt-1은 태반의 필수적인 혈관 신생 및 근원성 인자의 필요량의 고갈을 가져온다. 또한 과잉량의 sFlt-1도 혈액 뇌 관문을 유지하는 내피 세포 및/또는 뇌의 맥락막을 살리는 내피 세포를 분열하여 자간을 유도할 수 있으므로, 종종 자간 여성이 경험하는 뇌부종 및 뇌발작을 유발하는 것으로 여겨져 왔다 (예를 들면, PCT 특허 공개 제WO 2004/008946호 참조).

따라서, 각종 VEGF계 제제 및 화합물은 VEGF 및 PlGF 레벨을 증가시켜 상승 된 sFlt-1의 효과를 제어하도록 자간전증 또는 자간 여성에 투여되어 왔다. 실례로는 본 명세서에 참조로 포함되는 PCT 특허 공개 제WO 2004/008946호 및 미국 특허 공개 제2002/0137680호에 개시된 VEGF계 제제 및 화합물을 들 수 있다.

자간전증 등의 질환을 치료하는데 있어서의 VEGF계 제제의 효능에도 불구하고, VEGF계 제제를 특히 피하 주사를 통해 전달하는 개시된 종래의 방법과 관련된 여러가지 결점 및 불리한 점이 있다. 주요 단점으로는 피하 주사가 곤란하고, 고통스러우며, 불편한 절차인 바, 종종 환자의 약제 복용 순응도가 나빠지게 된다.

그러므로, 경피 전달은 해당 경피 전달이 아니라면 피하 주사 또는 정맥내 주사에 의해 투여될 필요가 있는 VEGF계 제제를 투여하는 효과적인 대체방법이다. 본 명세서에서 사용되는 단어 "경피"란, 수술용 칼에 의한 절개나 피하 주사 바늘에 의한 피부의 피어싱 (piercing)과 같이 피부의 실질적인 절개나 침투 없이 국소 조직이나 전신 순환계통에 피부를 통해 활성제 또는 치료제를 전달하는 것을 의미하는 총칭이다. 따라서, 경피적 약물 전달은 수동적 확산을 통한 피내, 피부내 및 표피내 전달 뿐만 아니라, 전기 (예를 들면, 이온 도입 (iontophoresis)) 및 초음파 (예를 들면, 음파 영동) 등의 외부 에너지원에 의거한 전달도 포함한다.

보다 통상적인 수동적 경피 약물 전달 시스템은 전형적으로 고농도의 활성제를 수용하는 약물 저장소를 포함한다. 이 저장소는 피부와 접촉하여, 해당 활성제를 피부를 통해 환자의 체내 조직 혹은 혈류 속으로 확산시킬 수 있는데 적합하다.

당해 기술분야에 공지된 바와 같이, 경피 약물 유동량 (flux)은 피부 상태, 약물 분자의 크기 및 물리적/화학적 특성, 및 피부를 통한 농도 경사에 의존한다. 많은 약물에 대한 피부의 저 침투성으로 인해, 경피 전달은 적용이 제한되어 있었다. 이러한 저 침투성은 주로 각질층, 지질 이중층으로 둘러싸인 케라틴 섬유 (즉, 케라티노사이트)로 채워진 편평한 사세포로 구성되는 최외 피부층에 기인한다. 이러한 고도로 규칙적인 구조의 지질 이중층은 비교적 불침투성 특징을 각질층에 부여한다.

수동적 경피 확산제의 유동량을 증대시키는 통상적인 방법 중의 하나는 약제, 즉, 피부 투과 촉진제로 피부를 전처리하거나, 해당 약제에 의해 공전달하는 것을 포함한다. 피부 투과 촉진제는 해당 약제가 전달되는 체표면에 가해질 경우, 해당 약제의 유동량을 증대시킨다. 그러나, 경피 단백질 유동량의 증대에 있어서의 이들 방법의 효능은 그들의 크기로 인해 적어도 보다 대형의 단백질에 대해서는 제한이 있었다.

경피적으로 전달되는 약제의 양을 향상시키기 위해, 최외 피부층을 기계적으로 통과하거나 붕괴시켜 피부에 경로를 형성시키도록 많은 기술 및 장치가 또한 개발되어 왔다. 실례로는 본 명세서에 참조로 포함되는 미국 특허 제3,964,482호에 개시된 약물 전달 장치를 들 수 있다.

경피 약물 전달을 증대시키기 위해 미소한 피부 피어싱 엘리먼트를 사용하는 기타 시스템 및 장치는 미국 특허 제5,879,326호 공보, 미국 특허 제3,814,097호 공보, 미국 특허 제5,250,023호 공보, 미국 특허 제3,964,482호 공보, 재발행 특허 제25,637호, PCT 공개공보인 WO 96/37155, WO 96/37256, WO 96/17648, WO 97/03718, WO 98/11937, WO 98/00193, WO 97/48440, WO 97/48441, WO 97/48442, WO 98/00193, WO 99/64580, WO 98/28037, WO 98/29298 및 WO 98/29365에 개시되어 있고, 이들 모두는 전체로서 본 명세서에 참조로 포함된다.

상기 개시된 시스템 및 장치는 피부의 최외층 (예를 들면, 각질층)을 피어싱하기 위해 각종 형태와 크기의 피어싱 엘리먼트들을 사용한다. 개시된 피어싱 엘리먼트는 일반적으로 패드나 시트 등과 같은 얇고 편평한 부재로부터 수직으로 뻗어 있다. 피어싱 엘리먼트 장치는 전형적으로 매우 작고, 약 25 내지 400 마이크론에 불과한 마이크로프로젝션 길이와 약 5 내지 50 마이크론에 불과한 마이크로프로젝션 두께를 갖는다.

상기에 개시된 시스템은 전형적으로 약제를 보유하는 저장소 및 이 저장소로부터 각질층을 통해 약제를 전달하는 중공 니들 또는 타인 (tine) 등의 전달 시스템도 추가로 포함한다. 그러한 장치의 일례가 PCT 특허 공개 제WO 93/17754호에 기재되어 있으며, 이 공보에 기재된 장치는 액제 저장소를 갖고 있다.

본 명세서에 참조로 전체로서 포함되어 있는 미국 특허 출원 제10/045,842호에 개시된 바와 같이, 물리적 저장소에 수용시키는 대신에 마이크로프로젝션 상에 코팅되는 피검자 또는 환자에게 전달되는 활성제를 갖는 것도 가능하다. 이것은 별도의 물리적인 저장소의 필요성을 제거하여 저장소용으로 특별히 약제 또는 조성물을 개발시키는 일을 제거한다.

따라서, 본 발명의 목적은 피검자에로의 VEGF계 제제의 침습성 투여를 최소량으로 촉진시키는 경피 약물 전달 장치 및 그 방법을 제공하는 것이다.

따라서, 본 발명의 목적은 피검자에로의 VEGF의 피내 전달을 제공하는 경피 약물 전달 장치 및 그 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 하나의 목적은 자간전증 또는 자간을 치료 또는 예방하기 위한 경피 약물 전달 장치 및 그 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 하나의 목적은 피검자에로의 피내 전달용 VEGF계 제제를 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 VEGF계 제제를 포함하는 생체 적합성 코팅으로 피복된 마이크로프로젝션을 포함하는 경피 약물 전달 장치 및 그 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 VEGF계 제제를 함유하는 하이드로겔 제제를 수용하기에 적합한 겔 팩을 포함하는 경피 약물 전달 장치 및 그 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 하이드로겔에 의해 전달하기 전에 재구성하기에 적합한 VEGF계 제제의 고체 형태를 포함하는 경피 약물 전달 장치 및 그 방법을 제공하는 것이다.

상기 목적 및 하기에 기재되어 명백해지는 목적에 따르면, 본 발명에 의한 VEGF계 제제를 피검자에게 경피적으로 전달하기 위한 장치 및 그 방법은 일반적으로 각질층을 통해 그 밑에 있는 표피층, 또는 표피 및 진피층으로 피어싱하기에 적합한 다수의 마이크로프로젝션 (또는 이의 어레이)을 포함하는 마이크로프로젝션 부재 (또는 어셈블리)를 갖는 전달 시스템을 포함한다. 바람직한 실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 그 내부에 배치된 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 생체 적합성 코팅을 포함한다. 또 하나의 실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함한다. 또 다른 실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 고형 제제 및 수화 하이드로겔 제제를 포함한다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 마이크로프로젝션 밀도가 적어도 약 10 마이크로프로젝션/㎠, 더욱 바람직하게는 적어도 약 200 내지 2000 마이크로프로젝션/㎠의 범위이다.

일실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 스텐레스 강, 티탄, 니켈 티탄 합금, 또는 유사한 생체 적합성 재료로 구성된다.

또 하나의 실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 폴리머 재료 등의 비전도성 재료로 구성된다. 또는, 마이크로프로젝션 부재는 파릴렌 (Parylene)^® 등의 비전도성 재료, 또는 테플론^®, 실리콘 또는 기타 저 에너지 재료 등의 소수성 재료로 코팅될 수 있다.

마이크로프로젝션 부재에 도포되어 고형 생체 적합성 코팅을 형성하는 코팅 제제는 수성 또는 비수성 제제를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 코팅 제제는 생체 적합성 담체 내에 용해되거나 상기 담체 내에 현탁될 수 있는 적어도 하나의 VEGF계 제제를 포함한다.

바람직하게는, VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염 및 단순 유도체를 포함하나, 이들에 한정되지 않는 VEGF 패밀리 멤버를 포함한다. 본 발명의 바람직한 실시형태에 있어서, VEGF계 제제는 VEGF 121을 포함한다.

본 출원서를 통해, 용어 "VEGF계 제제" 및 "VEGF 121계 제제"는 재조합 VEGF 121, 합성 VEGF 121 및 VEGF 121 염을 포함하나, 이들에 한정되지 않는다. 약제학적으로 허용가능한 VEGF 121 염의 예로는 아세테이트, 프로피오네이트, 부티레이트, 펜타노에이트, 헥사노에이트, 헵타노에이트, 레불리네이트, 염화물, 브롬화물, 시트레이트, 숙시네이트, 말레에이트, 글리콜레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 3-히드록시이소부티레이트, 2-히드록시이소부티레이트, 락테이트, 말레이트, 피루베이트, 푸마레이트, 타르타레이트, 타르트로네이트, 질산염, 인산염, 벤젠술포네이트, 메탄술포네이트, 술페이트 및 술포네이트를 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

바람직하게는, VEGF계 제제는 약 1 내지 30 중량%의 범위의 농도로 코팅 제제에 존재한다.

고형 생체 적합성 코팅 (즉, 마이크로프로젝션 부재 또는 제품)에 함유되는 VEGF계 제제의 양은 바람직하게는 1 내지 1000 ㎍의 범위, 더욱 바람직하게는 1 내지 500 ㎍의 범위, 보다 바람직하게는 1 내지 200 ㎍의 범위이다.

바람직하게는, 코팅 제제의 pH는 약 pH 5.5 이하 또는 pH 7.0 이상이다. 더욱 바람직하게는, 코팅 제제의 pH는 약 pH 2 내지 pH 5.5 또는 pH 7.0 내지 pH 11의 범위이다. 보다 바람직하게는, 코팅 제제의 pH는 약 pH 2.5 내지 pH 5.5 또는 pH 7.0 내지 pH 10.5이다.

본 발명의 특정 실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션을 코팅하는데 사용되는 코팅 제제의 점도는 저 휘발성 카운터 이온을 가함으로써 증진된다. 일실시형태에 있어서, 코팅 제제의 pH가 pH 5.5 미만인 경우에는, VEGF계 제제는 양전하를 갖고, 점도 증진 카운터 이온은 산을 포함한다. 바람직하게는, 산성 카운터 이온은 적어도 하나의 산성 pKa 및 P_atm에서의 약 50℃보다 높은 융점 또는 약 170℃보다 높은 비점을 갖는 비휘발성 약산을 포함한다. 적절한 산으로는 시트르산, 숙신산, 글리콜산, 글루콘산, 글루쿠론산, 락트산, 말산, 피루브산, 타르타르산, 타르트론산 및 푸마르산을 들 수 있다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 산성 카운터 이온은 약 2보다 낮은 적어도 하나의 pKa를 나타내는 강산을 포함한다. 이러한 강산의 예로는 염산, 브롬화수소산, 질산, 술폰산, 황산, 말레산, 인산, 벤젠술폰산 및 메탄술폰산을 들 수 있다.

본 발명의 또 하나의 실시형태는 적어도 하나의 카운터 이온이 약산을 포함하고, 적어도 하나의 카운터 이온이 비휘발성 약산을 포함하는 카운터 이온의 혼합물에 관한 것이다.

다른 실시형태는 적어도 하나의 카운터 이온이 강산을 포함하고, 적어도 하나의 카운터 이온이 고 휘발성을 갖고 약 2보다 높은 적어도 하나의 pKa 및 P_atm에서의 약 50℃보다 낮은 융점 또는 약 170℃보다 낮은 비점을 갖는 약산을 포함하는 카운터 이온의 혼합물에 관한 것이다. 이러한 산의 예로는 아세트산, 프로피온산, 펜탄산 등을 들 수 있다.

산성 카운터 이온은 제제의 pH에서 VEGF계 제제에 존재하는 양전하를 중화하기에 충분한 양으로 존재하는 것이 바람직하다. 또 하나의 부가적인 실시형태에 있어서, 과량의 카운터 이온 (유리산 또는 염으로서)은 pH를 조절하여, 충분한 완충 능력을 부여하도록 가해진다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 코팅 제제의 pH가 pH 7.0보다 크면, VEGF계 제제는 음전하를 갖고, 점도 증진 카운터 이온은 염기를 포함한다. 본 발명의 바람직한 실시형태에 있어서, 염기성 카운터 이온은 적어도 하나의 산성 pKa 및 P_atm에서의 약 50℃보다 높은 융점 또는 약 170℃보다 높은 비점을 갖는 저휘발성 약염기를 포함한다. 적절한 염기로는 모노에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 트로메타민, 메틸글루카민 및 글루코사민 등을 들 수 있다.

또 하나의 실시형태에 있어서, 카운터 이온은 약 12보다 큰 적어도 하나의 pKa를 나타내는 강염기를 포함한다. 적절한 강염기로는 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화칼슘 및 수산화마그네슘을 들 수 있다.

본 발명의 또 하나의 실시형태는 적어도 하나의 카운터 이온이 강염기를 포함하고, 적어도 하나의 카운터 이온이 저 휘발성을 지닌 약염기를 포함하는 카운터 이온의 혼합물에 관한 것이다.

다른 실시형태는 적어도 하나의 카운터 이온이 강염기를 포함하고, 적어도 하나의 카운터 이온이 고 휘발성을 갖고 약 12보다 낮은 적어도 하나의 pKa 및 P_atm에서의 약 50℃보다 낮은 융점 또는 약 170℃보다 낮은 비점을 나타내는 약염기를 포함하는 카운터 이온의 혼합물에 관한 것이다. 이러한 염기의 예로는 암모니아 및 모르폴린을 들 수 있다.

본 발명의 상술한 실시형태에 있어서, 염기성 카운터 이온은 제제의 pH에서 VEGF계 제제의 음전하를 중화하기에 충분한 것이 바람직하다. 부가적인 실시형태에 있어서, 과량의 카운터 이온 (유리산 또는 염으로서)은 pH를 조절하여, 충분한 완충 능력을 부여하도록 가해진다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 상기 코팅 제제는 적어도 1종의 완충액을 포함한다. 이러한 완충액의 예로는 아스코르브산, 시트르산, 숙신산, 글리콜산, 글루콘산, 글루쿠론산, 락트산, 말산, 피루브산, 타르타르산, 타르트론산, 푸마르산, 말레산, 인산, 트리카르발릴산, 말론산, 아디프산, 시트라콘산, 글루타라트산 (glutaratic acid), 이타콘산, 메사콘산, 시트라말산, 디메틸올프로피온산, 티글리산 (tiglic acid), 글리세르산, 메타크릴산, 이소크로톤산, β-히드록시부티르산, 크로톤산, 안젤산 (angelic acid), 히드라크릴산, 아스파르트산, 글루탐산, 글리신, 모노에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 트로메타민, 리신, 히스티딘, 아르기닌, 모르폴린, 메틸글루카민, 글루코사민, 및 이들의 혼합물을 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 상기 코팅 제제는 양성 이온성, 양성, 양이온성, 음이온성 또는 비이온성일 수 있는 적어도 1종의 계면활성제를 포함하며, 그 예로는 라우로암포아세트산나트륨, 도데실황산나트륨 (SDS), 염화세틸피리디늄 (CPC), 도데실트리메틸암모늄클로라이드 (TMAC), 염화벤잘코늄, 트윈 20 및 트윈 80 등의 폴리소르베이트류, 소르비탄라우레이트 등의 기타 소르비탄 유도체, 라우레스-4의 알콕시화 알콜류, 및 크레모포 (Cremophor) EL^® 등의 폴리옥시에틸렌 피마자유 유도체를 들 수 있지만, 이들에 한정되지 않는다.

본 발명의 상술한 실시형태에 있어서, 계면활성제의 농도는 바람직하게는 코팅 제제의 약 0.001 내지 2 중량%의 범위이다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 상기 코팅 제제는 양친매성을 지닌 적어도 1종의 폴리머 재료 또는 폴리머를 포함하며, 그 예로는 플루로닉 뿐만 아니라, 히드록시에틸셀룰로스 (HEC), 히드록시프로필메틸셀룰로스 (HPMC), 히드록시프로필셀룰로스 (HPC), 메틸셀룰로스 (MC), 히드록시에틸메틸셀룰로스 (HEMC), 또는 에틸히드록시에틸셀룰로스 (EHEC) 등의 셀룰로스 유도체를 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 코팅 제제 중의 양친매성을 나타내는 폴리머의 농도는 바람직하게는 상기 코팅 제제의 약 0.01 내지 20 중량%의 범위, 더욱 바람직하게는 약 0.03 내지 10 중량%의 범위이다.

또 하나의 실시형태에 있어서, 코팅 제제는 하기 그룹, 히드록시에틸스타치, 카르복시메틸셀룰로스 및 이의 염, 덱스트란, 폴리(비닐알콜), 폴리(에틸렌옥사이드), 폴리(2-히드록시에틸메타크릴레이트), 폴리(n-비닐피롤리돈), 폴리에틸렌글리콜 및 이들의 혼합물 중에서 선택되는 친수성 폴리머 및 유사 폴리머를 포함한다.

바람직한 실시형태에 있어서, 코팅 제제 중의 친수성 폴리머의 농도는 코팅 제제의 약 0.01 내지 20 중량%의 범위, 더욱 바람직하게는 약 0.03 내지 10 중량%의 범위이다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 코팅 제제는 생체 적합성 담체를 포함하며, 상기 생체 적합성 담체의 예로는 인간 알부민, 생체 공학적 인간 알부민, 폴리글루탐산, 폴리아스파르트산, 폴리히스티딘, 펜토산 폴리설페이트, 폴리아미노산, 수크로스, 트레할로스, 멜레지토스, 라피노스 및 스타키오스를 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

바람직하게는, 코팅 제제 중의 생체 적합성 담체의 농도는 코팅 제제의 약 2 내지 70 중량%의 범위, 더욱 바람직하게는 약 5 내지 50 중량%의 범위이다.

또 하나의 실시형태에 있어서, 코팅 제제는 안정제를 포함하며, 상기 안정제의 예로는 비환원당, 다당류 또는 환원당을 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

본 발명의 방법 및 조성물에 사용되는 적절한 비환원당의 예로는 수크로스, 트레할로스, 스타키오스 또는 라피노스를 들 수 있다.

본 발명의 방법 및 조성물에 사용되는 적절한 다당류의 예로는 덱스트란, 가용성 전분, 덱스트린, 및 인슐린을 들 수 있다.

본 발명의 방법 및 조성물에 사용되는 적절한 환원당의 예로는 아피오스, 아라비노스, 릭소스, 리보스, 크실로스, 디지톡소스, 푸코스, 퀘르시톨, 퀴노보스, 람노스, 알로스, 알트로스, 프룩토스, 갈락토스, 글루코스, 굴로스 (gulose), 하마멜로스, 이도스 (idose), 만노스, 타가토스 등의 단당류; 및 프리메베로스, 비키아노스, 루티노스, 스킬라비오스, 셀로비오스, 겐티오비오스, 락토스, 락툴로스, 말토스, 멜리비오스, 소포로스, 및 투라노스 등의 이당류를 들 수 있다.

바람직하게는, 코팅 제제 중의 안정제의 농도는 VEGF계 제제에 대하여 약 0.1 내지 2.0:1의 비율을 갖는다.

또 하나의 실시형태에 있어서, 코팅 제제는 혈관수축제를 포함하며, 이러한 혈관수축제의 예로는 아미데프린, 카파미놀, 사이클로펜타민, 데옥시에피네프린, 에피네프린, 펠리프레신, 인단아졸린, 메티졸린, 미도드린, 나파졸린, 노르데프린, 옥토드린, 오르니프레신, 옥시메타졸린, 페닐에프린, 페닐에탄올아민, 페닐프로판올아민, 프로필헥세드린, 슈도에페드린, 테트라하이드로졸린, 트라마졸린, 투아미노헵탄, 티마졸린, 바소프레신, 크실로메타졸린 및 이들의 혼합물을 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다. 가장 바람직한 혈관수축제는 에피네프린, 나파졸린, 테트라하이드로졸린, 인단아졸린, 메티졸린, 트라마졸린, 티마졸린, 옥시메타졸린 및 크실로메타졸린을 포함한다.

혈관수축제의 농도는 사용할 경우, 바람직하게는 코팅 제제의 약 0.1 중량% 내지 10 중량%의 범위이다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 코팅 제제는 적어도 하나의 "경로 개통 조정제 (pathway patency modulator)"를 포함하며, 상기 경로 개통 조정제의 예로는 삼투압제 (예를 들면, 염화나트륨), 양성 이온성 화합물 (예를 들면, 아미노산), 및 베타메타손 21-인산이나트륨염, 트리암시놀론 아세토나이드 21-인산이나트륨, 하이드로코르타메이트 염산염, 하이드로코르티손 21-인산이나트륨염, 메틸프레드니솔론 21-인산이나트륨염, 메틸프레드니솔론 21-숙신산나트륨염, 파라메타손 인산이나트륨 및 프레드니솔론 21-숙신산나트륨염 등의 항염증제, 및 시트르산, 시트레이트 (예를 들면, 시트르산나트륨), 덱스트린 황산나트륨, 아스피린 및 EDTA 등의 항응고제를 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

바람직하게는, 코팅 제제의 점도는 약 3 센티포아즈 내지 500 센티포아즈이다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 생체 적합성 코팅의 두께는 마이크로프로젝션 표면에서 측정된 것으로, 25 마이크론 미만, 더욱 바람직하게는 10 마이크론 미만이다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 전달 시스템은 하이드로겔 제제를 포함한다. 바람직하게는, 하이드로겔 제제는 겔 팩에 함유된다.

본 발명의 적어도 하나의 실시형태에 있어서, 하이드로겔 제제는 적어도 하나의 VEGF계 제제를 함유한다.

바람직하게는, VEGF계 제제는 포화 초과 또는 포화 이하의 농도로 존재한다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, VEGF계 제제는 하이드로겔 제제의 약 1 내지 40 중량%의 범위로 포함된다.

바람직하게는, 하이드로겔 제제는 고분자 네트워크를 갖는 수성 하이드로겔을 포함한다.

본 발명의 바람직한 실시형태에 있어서, 고분자 네트워크는 히드록시에틸스타치, 덱스트란, 히드록시에틸셀룰로스 (HEC), 히드록시프로필메틸셀룰로스 (HPMC), 히드록시프로필셀룰로스 (HPC), 메틸셀룰로스 (MC), 히드록시에틸메틸셀룰로스 (HEMC), 에틸히드록시에틸셀룰로스 (EHEC), 카르복시메틸셀룰로스 (CMC), 폴리(비닐알콜), 폴리(에틸렌옥사이드), 폴리(2-히드록시에틸메타크릴레이트), 폴리(n-비닐피롤리돈) 및 플루로닉를 들 수 있지만, 이들에 한정되지 않는다.

하이드로겔 제제는 바람직하게는 양성 이온성, 양성, 양이온성, 음이온성 또는 비이온성일 수 있는 적어도 하나의 계면활성제를 포함한다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 계면활성제는 라우로암포아세트산나트륨, 도데실황산나트륨 (SDS), 염화세틸피리디늄 (CPC), 도데실트리메틸암모늄클로라이드 (TMAC), 염화벤잘코늄, 트윈 20 및 트윈 80 등의 폴리소르베이트류, 소르비탄라우레이트 등의 기타 소르비탄 유도체, 및 라우레스-4 등의 알콕시화 알콜류를 포함한다.

또 하나의 실시형태에 있어서, 하이드로겔 제제는 양친매성을 지닌 폴리머 재료 또는 폴리머를 포함하며, 그 예로는 플루로닉 뿐만 아니라, 히드록시에틸셀룰로스 (HEC), 히드록시프로필메틸셀룰로스 (HPMC), 히드록시프로필셀룰로스 (HPC), 메틸셀룰로스 (MC), 히드록시에틸메틸셀룰로스 (HEMC) 및 에틸히드록시에틸셀룰로스 (EHEC) 등의 셀룰로스 유도체를 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 하이드로겔 제제는 적어도 하나의 경로 개통 조정제를 포함하며, 상기 경로 개통 조정제의 예로는 삼투압제 (예를 들면, 염화나트륨), 양성 이온성 화합물 (예를 들면, 아미노산), 및 베타메타손 21-인산이나트륨염, 트리암시놀론 아세토나이드 21-인산이나트륨, 하이드로코르타메이트 염산염, 하이드로코르티손 21-인산이나트륨염, 메틸프레드니솔론 21-인산이나트륨염, 메틸프레드니솔론 21-숙신산나트륨염, 파라메타손 인산이나트륨 및 프레드니솔론 21-숙신산나트륨염 등의 항염증제, 및 시트르산, 시트레이트 (예를 들면, 시트르산나트륨), 덱스트린 황산나트륨 및 EDTA 등의 항응고제를 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

본 발명의 또 다른 실시형태에 있어서, 하이드로겔 제제는 적어도 하나의 혈관수축제를 포함하며, 이러한 혈관수축제의 예로는 에피네프린, 나파졸린, 테트라하이드로졸린, 인단아졸린, 메티졸린, 트라마졸린, 티마졸린, 옥시메타졸린, 크실로메타졸린, 아미데프린, 카파미놀, 사이클로펜타민, 데옥시에피네프린, 에피네프린, 펠리프레신, 인단아졸린, 메티졸린, 미도드린, 나파졸린, 노르데프린, 옥토드린, 오르니프레신, 옥시메타졸린, 페닐에프린, 페닐에탄올아민, 페닐프로판올아민, 프로필헥세드린, 슈도에페드린, 테트라하이드로졸린, 트라마졸린, 투아미노헵탄, 티마졸린, 바소프레신 및 크실로메타졸린, 및 이들의 혼합물을 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

본 발명의 또 다른 실시형태에 있어서, VEGF계 제제를 전달하기 위한 전달 시스템은 상하부면, 마이크로프로젝션 부재를 통해 뻗어있는 다수의 개구부 및 마이크로프로젝션 부재의 하부면으로부터 돌출하는 다수의 마이크로프로젝션을 갖는 마이크로프로젝션 부재를 포함한다. 마이크로프로젝션 부재는 또한 하이드로겔 제제 및 적어도 하나의 VEGF계 제제, 바람직하게는 VEGF 121를 갖는 고형 제제를 포함한다.

일실시형태에 있어서, 고형 제제는 마이크로프로젝션 부재의 상부면에 인접하게 배치된다. 또 하나의 실시형태에 있어서, 고형 제제는 마이크로프로젝션 부재의 하부면에 인접하게 배치된다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 하이드로겔 제제는 VEGF계 제제를 함유하지 않기 때문에, 수화기구에 지나지 않는다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 고형 제제는 고체 필름을 포함한다. 바람직하게는 고체 필름은 적어도 하나의 VEGF계 제제, 히드록시에틸스타치, 덱스트란, 히드록시에틸셀룰로스 (HEC), 히드록시프로필메틸셀룰로스 (HPMC), 히드록시프로필셀룰로스 (HPC), 메틸셀룰로스 (MC), 히드록시에틸메틸셀룰로스 (HEMC), 에틸히드록시에틸셀룰로스 (EHEC), 카르복시메틸셀룰로스 (CMC), 폴리(비닐알콜), 폴리(에틸렌옥사이드), 폴리(2-히드록시에틸메타크릴레이트), 폴리(n-비닐피롤리돈) 및 플루로닉 등의 폴리머 재료, 글리세롤, 프로필렌글리콜 및 폴리에틸렌글리콜 등의 가소제, 트윈 20 및 트윈 80 등의 계면활성제, 및 물, 이소프로판올, 메탄올 및 에탄올 등의 휘발성 용매로 구성되는 액제를 캐스팅하여 제조된다.

본 발명의 다른 실시형태에 있어서, 고형 제제는 분무 건조, 동결 건조, 분무 동결 건조 및 초임계 유체 추출로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 과정에 의해 형성된다. 현재 바람직한 과정은 분무 동결 건조이다. 상술한 실시형태에 있어서, 생체 적합성 코팅은 약 15분 이하, 바람직하게는 약 1분 이하로 적절한 용매에 의해 재구성되기에 적합하다. 코팅 제제는 또한 바람직하게는 산화방지제를 포함한다.

본 발명의 일실시형태에 따르면, VEGF계 제제를 환자에게 전달하기 위한 방법은 하기 단계, (i) 다수의 마이크로프로젝션 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 생체 적합성 코팅을 포함하는 마이크로프로젝션 부재를 갖는 전달 시스템을 제공하는 단계 및 (ii) 코팅된 마이크로프로젝션 부재를 액츄에이터를 통해 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 피부를 피어싱하고, 약제 함유 코팅이 체액에 의해 용해되어, 피부로 방출되는 단계를 포함한다.

코팅된 마이크로프로젝션 부재는 바람직하게는 5초 내지 24 시간 지속하는 기간 동안 환자의 피부에 둔다. 원하는 착용 시간 후에, 마이크로프로젝션 부재는 피부로부터 제거된다.

본 발명의 다른 실시형태에 따르면, VEGF계 제제를 환자에게 전달하기 위한 방법은 하기 단계: (i) 마이크로프로젝션 부재 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩을 갖는 전달 시스템을 제공하는 단계 및 (ii) 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하고, 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하여, 약제 함유 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계를 포함한다.

마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리는 바람직하게는 5분 내지 24 시간 지속하는 기간 동안 환자의 피부에 둔다. 원하는 착용 시간 후에, 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리는 피부로부터 제거된다.

상술한 실시형태의 한 측면에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 약제를 함유하는 생체 적합성 코팅을 포함한다.

바람직하게는, 코팅된 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리 (약제 함유 하이드로겔 제제 포함)는 바람직하게는 5초 내지 24 시간 지속하는 기간 동안 환자의 피부에 둔다.

상술한 실시형태의 한 측면에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 약제를 함유하는 생체 적합성 코팅을 포함하고, 하이드로겔 제제는 VEGF계 제제를 함유하지 않기 때문에, 수화기구에 지나지 않는다.

바람직하게는, 코팅된 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리 (약제 함유 하이드로겔 제제 포함)는 바람직하게는 5분 내지 24 시간 지속하는 기간 동안 환자의 피부에 둔다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 따르면, VEGF계 제제를 환자에게 전달하기 위한 방법은 하기 단계: (i) 마이크로프로젝션 부재 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩을 갖는 전달 시스템을 제공하는 단계, (ii) 마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하고, 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하는 단계, 및 (iii) 사용된 마이크로프로젝션 부재의 상부에 겔 팩을 배치하여, 약제 함유 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계를 포함한다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 따르면, VEGF계 제제를 전달하기 위한 방법은 하기 단계: (i) 마이크로프로젝션 부재 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩을 갖는 전달 시스템을 제공하는 단계, (ii) 마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하고, 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하는 단계, (iii) 마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부로부터 제거하는 단계, 및 (iv) 전처리된 피부의 상부에 겔 팩을 배치하여, 약제 함유 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계를 포함한다.

겔 팩은 바람직하게는 5분 내지 24 시간 지속하는 기간 동안 환자의 피부에 둔다. 원하는 착용 시간 후에, 겔 팩은 피부로부터 제거된다.

본 발명의 또 다른 실시형태에 있어서, VEGF계 제제를 함유하는 생체 적합성 코팅을 갖는 마이크로프로젝션 부재는 환자의 피부에 사용된 다음에, VEGF계 제제를 함유하는 하이드로겔 제제를 갖는 겔 팩은 사용된 마이크로프로젝션 부재의 상부에 배치되어, 약제 함유 코팅이 체액에 의해 용해되어, 피부로 방출되고, 약제 함유 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 각질층의 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동한다.

마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리는 바람직하게는 5분 내지 24 시간 지속하는 기간 동안 환자의 피부에 둔다. 원하는 착용 시간 후에, 마이크로프로젝션 부재 및 겔 팩은 제거된다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, VEGF계 제제를 전달하기 위한 방법은 하기 단계, (i) 마이크로프로젝션 부재, 하이드로겔 제제, 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 고형 제제를 갖는 마이크로프로젝션 어셈블리를 제공하는 단계, 및 (ii) 마이크로프로젝션 어셈블리를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하고, 하이드로겔 제제가 VEGF계 제제를 수화시켜 고형 제제로부터 방출시켜, VEGF계 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 각질층의 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계를 포함한다.

마이크로프로젝션 부재는 바람직하게는 5분 내지 24 시간 지속하는 기간 동안 환자의 피부에 둔다. 원하는 착용 시간 후에, 마이크로프로젝션 부재는 피부로부터 제거된다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, VEGF계 제제를 전달하기 위한 방법은 하기 단계: (i) 마이크로프로젝션 부재, 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 고형 제제를 갖는 마이크로프로젝션 어셈블리를 제공하는 단계, (ii) 하이드로겔 제제를 갖는 겔 팩을 제공하는 단계, (iii) 마이크로프로젝션 어셈블리를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하는 단계, 및 (iv) 겔 팩을 사용된 마이크로프로젝션 어셈블리 상에 배치하여, 하이드로겔 제제가 겔 팩으로부터 방출되어, 고형 제제에 함유된 제제가 방출되고, 제제 및 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 각질층의 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계를 포함한다.

바람직하게는, 본 명세서에 사용된 마이크로프로젝션 부재 (및 어셈블리) 및 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리는 액츄에이터를 통해 환자의 피부에 사용된다.

바람직하게는, 상술한 방법을 통해 피내로 전달되는 VEGF계 제제의 용량은 용량 단위당 약 1 내지 500 ㎍의 범위, 더욱 바람직하게는 약 1 내지 100 ㎍의 범위, 보다 바람직하게는 약 1 내지 50 ㎍의 범위이다.

본 발명을 상세히 설명하기 전에, 본 발명은 특히 예시된 재료, 방법 또는 구조 자체에 한정되지 않고, 이들은 물론 변경가능한 것은 당연하다. 따라서, 본 명세서에 기재된 것과 유사 혹은 등가의 다수의 재료 및 방법을 본 발명의 실시에 이용할 수 있지만, 본 명세서에서는 바람직한 재료 및 방법에 대해 설명하기로 한다.

또한, 본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명의 특정 실시형태를 설명하기 위한 것일 뿐, 이것에 한정하고자 하는 것이 아님은 당연하다.

달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 일반적으로 이해하고 있는 것과 마찬가지의 의미를 지닌다.

또한, 앞에서 혹은 이하의 설명에 있어서 본 명세서에 인용된 모든 특허 공개, 특허 및 특허 출원은 전체로서 본 명세서에 참조로 포함된다.

마지막으로, 본 명세서 및 첨부된 청구의 범위에서 사용되는 단수 형태는 그 내용이 달리 명확히 지적되지 않는 한 복수의 형태도 포함하는 것이다. 따라서, 예를 들면 단수 형태로 기재된 "VEGF계 제제"는 이러한 제제를 2종 이상 포함하는 것을 의미하고, 단수 형태로 기재된 "마이크로프로젝션"은 이러한 마이크로프로젝션을 2개 이상 포함하는 것을 의미한다.

정의:

본 명세서에서 사용되는 용어 "경피"란, 국소 혹은 전신 치료를 위해 피부 속으로 및/또는 피부를 통해 약제를 전달하는 것을 의미한다. 따라서, 용어 "경피"란, 이온 도입 및 음파 영동 등의 에너지원 확산 전달뿐만 아니라, 수동적 확산을 통해 피부내로 및/또는 피부를 통해 펩티드 등의 약제를 피내, 피부내 및 표피내 전달을 의미하는 동시에 포함한다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "경피 유동"이란, 경피 전달의 속도를 의미한다.

본 명세서에 사용된 용어 "피검자"는 인간, 또는 소, 말, 개, 양 또는 고양이 등의 인간 이외의 포유동물을 포함하나, 이들에 한정되지 않는 포유동물을 의미한다. 용어 "피검자"는 또한 임신한 포유동물, 출산후의 포유동물 및 비임신 포유동물을 포함한다.

본 명세서에 사용되는 용어 "자간전증"은 단백뇨 또는 부종 또는 둘다를 지닌 고혈압, 사구체 기능 장애, 뇌부종, 폐부종, 간부종, 또는 임신 또는 최근 임신의 영향으로 인한 응고 이상의 특징이 있는 다장기 질환을 의미한다. 자간전증은 일반적으로 임신 20주째 후에 일어나며, 종종 하기 증상의 조합에 의해 반영된다: (1) 임신 20주 후의 수축기 혈압 (BP) 140 mmHg 및 확장기 BP 90 mmHg, (2) 새로 발생된 단백뇨 (요검사에 의해 1+, 24시간 축뇨 중의 단백질 >300 mg, 또는 단백질/크레아티닌 비가 > 0.3인 단일 무작위 요샘플) 및 (3) 출산후 12 주에서의 고혈압 및 단백뇨의 분해능. 자간전증의 증상은 또한 신장 기능 장애 및 사구체 내피증 또는 비대를 포함할 수 있다.

자간전증에 있어서, 고혈압 및 단백뇨는 일반적으로 서로 7일 이내에 발생한다. 중증 자간전증에 있어서, 중증 고혈압, 중증 단백뇨 및 HELLP 증후군 (용혈, 간효소의 상승, 혈소판 수의 저하) 또는 자간이 동시에 발생하거나, 또는 한번에 하나의 증상만이 발생할 수 있다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "자간전증의 증상" 및 "자간 증상"은 발작 및 혼수 상태를 포함하는 임신 또는 최근 임신의 영향으로 인한 상술한 증상의 발현을 의미한다.

본 명세서에 사용된 용어 "치료"는 예방 및/또는 치료 목적으로 치료제 또는 약제학적 조성물을 투여하는 것을 의미한다.

본 명세서에 사용된 용어 "치료상의 처치"는 피검자의 상태를 개선시키도록 이미 질환을 앓고 있는 피검자의 치료를 위한 투여를 의미한다. 바람직하게는, 피검자는 본 명세서에 기재된 특징적인 증상의 확인에 기초하여 자간전증 또는 자간을 앓고 있는 것으로서 진단된다.

본 명세서에 사용된 용어 "예방적인 처치"는 아직까지는 병에 걸리지 않았으나, 특정 질환에 걸리기 쉽거나, 아니면 특정 질환이 진행될 위험성이 있는 피검자의 예방적 치료를 나타낸다.

본 명세서에 사용된 용어 "혈관 내피 성장 인자" 및 "VEGF"는 특히 본 명세서에 참조로 포함되는 미국 특허 제5,332,671호, 제5,240,848호, 제5,194,596호 및 제5,219,739호에 정의된 성장 인자와 상응하는 포유류의 성장 인자를 나타내며, VEGF 생물 활성을 갖는다. 자연 VEGF의 생물 활성은 혈관 내피 세포 또는 제대정맥 내피 세포의 선택적 성장의 촉진 및 혈관 형성의 유도를 포함한다.

본 명세서에 사용된 용어 "VEGF계 제제" 및 "VEGF 121계 제제"는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145, VEGF 121, bVEGF 120, bVEGF 164, hVEGF 121 및 hVEGF 165의 이소형, 및 이들의 염, 변이체, 유사체, 단순 유도체 및 혼합물을 포함하나, 이들에 한정되지 않는 모든 VEGF 패밀리 멤버를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

따라서, 용어 "VEGF계 제제" 및 "VEGF 121계 제제"는 재조합 VEGF 121, 합성 VEGF 121 및 VEGF 121 염을 포함하나, 이들에 한정되지 않는다. 약제학적으로 허용가능한 VEGF 121 염의 예로는 아세테이트, 프로피오네이트, 부티레이트, 펜타노에이트, 헥사노에이트, 헵타노에이트, 레불리네이트, 염화물, 브롬화물, 시트레이트, 숙시네이트, 말레에이트, 글리콜레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 3-히드록시이소부티레이트, 2-히드록시이소부티레이트, 락테이트, 말레이트, 피루베이트, 푸마레이트, 타르타레이트, 타르트로네이트, 질산염, 인산염, 벤젠술포네이트, 메탄술포네이트, 술페이트 및 술포네이트를 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

하나 이상의 VEGF계 제제를 약제 공급원, 저장소, 및/또는 본 발명의 코팅에 혼입할 수 있고, 용어 "VEGF계 제제"의 사용은 결코 이러한 제제의 2종 이상의 사용을 배제하지 않는다는 것을 알 수 있다.

본 명세서에 사용된 용어 "생물학적 유효량" 또는 "치료학적 유효량"은 원하는 치료학적, 종종 유익한 결과를 달성하는데 필요한 VEGF계 제제의 양 또는 비율을 의미한다. 따라서, 본 발명의 코팅에 사용되는 VEGF계 제제의 양은 원하는 치료학적 결과를 달성하도록 VEGF계 제제의 치료학적 유효량을 전달하는데 필요한 양일 것이다. 실제로, 이는 전달되는 특정 VEGF계 제제, 전달 부위, 치료할 상태의 중증도, 원하는 치료 효과 및 코팅으로부터 피부 조직으로의 VEGF계 제제의 전달에 대한 용해 및 방출 속도에 따라 변화할 것이다.

바람직하게는, 자간전증 또는 자간에 걸린 피검자에게 투여되는 VEGF계 제제의 치료학적 유효량은 본 명세서에 기재한 바와 같이, 자간전증 또는 자간의 증상에 있어서의 정성적 또는 정량적 감소를 일으키기에 충분하다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "공전달"이란, VEGF계 제제가 전달되기 전, VEGF계 제제의 경피 유동전과 경피 유동시, VEGF계 제제의 경피 유동시, VEGF계 제제의 경피 유동시와 경피 유동후, 및/또는 VEGF계 제제의 경피 유동후에, 보충제(들)가 경피 투여되는 것을 의미한다. 또한, 2종 이상의 VEGF계 제제를 코팅 및/또는 제제에 처방함으로써, VEGF계 제제의 공전달을 할 수 있다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "마이크로프로젝션" 및 "마이크로프로트루젼"이란, 피검자, 특히 살아있는 포유동물, 특히 사람의 피부의 하부의 표피층 또는 표피 및 진피층으로 피어싱하거나 절개하는데 적합한 피어싱 엘리먼트를 의미한다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 피어싱 엘리먼트는 프로젝션 길이가 1000 마이크론 미만이다. 또 하나의 실시형태에 있어서, 피어싱 엘리먼트는 프로젝션 길이가 500 마이크론 미만, 더욱 바람직하게는 250 마이크론 미만이다. 마이크로프로젝션은 또한 폭 (도 1에서 "W"로 나타냄)이 약 25 내지 500 마이크론의 범위이고, 두께가 약 10 내지 100 마이크론의 범위이다. 마이크로프로젝션은 니들, 블레이드, 핀, 펀치 및 이들의 조합 등의 상이한 형상으로 형성될 수 있다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "마이크로프로젝션 부재"란, 일반적으로 각질층을 피어싱하기 위한 어레이 형태로 배열된 다수의 마이크로프로젝션을 포함하는 마이크로프로젝션 어레이를 의미한다. 마이크로프로젝션 부재는 도 1에 도시된 바와 같이 얇은 시트로부터 다수의 마이크로프로젝션을 에칭하거나 펀칭하고, 이들 마이크로프로젝션을 해당 시트의 평면으로부터 접거나 구부려서 소정 형상을 형성함으로써 형성될 수 있다. 마이크로프로젝션 부재는 또한, 예를 들면 미국 특허 제6,050,988호에 개시된 바와 같은 스트립의 각각의 가장자리를 따라 마이크로프로젝션을 지닌 1개 이상의 스트립을 형성하는 방법과 같은 기타 공지의 방법으로 형성될 수 있고, 상기 미국 특허는 전체로서 본 명세서에 참조로 포함된다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "코팅 제제"란, 마이크로프로젝션 및/또는 이의 어레이를 코팅하는데 사용되는 자유로이 유동하는 조성물 또는 혼합물을 의미하는 동시에 포함하는 것을 뜻한다. 바람직하게는, 코팅 제제는 제제 중의 용액 또는 현탁액 상태일 수 있는 적어도 하나의 VEGF계 제제를 포함한다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "생체 적합성 코팅" 및 "고체 코팅"이란, 실질적으로 고체 상태의 "코팅 제제"를 의미하는 동시에 포함하는 것을 뜻한다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "고형 제제"란, 캐스팅에 의해 형성된 고체 필름, 및 분무 건조, 동결 건조, 분무 동결 건조 및 초임계 유체 추출에 의해 형성된 분말 또는 케이크를 의미하는 동시에 포함하는 것을 뜻한다.

상술한 바와 같이, 본 발명은 일반적으로 각질층을 통해 하부 표피층, 또는 표피 및 진피층으로 피어싱하기에 적합한 다수의 마이크로프로젝션 (또는 그의 어레이)을 갖는 마이크로프로젝션 부재 (또는 시스템)를 포함하는 전달 시스템을 포함한다. 상기 마이크로프로젝션 부재 (또는 시스템)는 적어도 하나의 약제 공급원 또는 약제 전달 매개물 (즉, 생체 적합성 코팅, 하이드로겔 제제, 또는 고형 제제)을 포함한다. 바람직한 실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 그 위에 배치된 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 생체 적합성 코팅을 포함한다.

상술한 바와 같이, "자간전증"은 전형적으로 단백뇨 또는 부종 또는 둘다를 지닌 고혈압, 사구체 기능 장애, 뇌부종, 간부종, 폐부종 또는 임신 또는 최근 임신의 영향으로 인한 응고 이상의 특징이 있는 다장기 질환이다. 자간전증은 일반적으로 임신 20주째 후에 일어난다. 자간전증과 관련된 증상은 종종 하기를 포함한다: (1) 임신 20주 후의 수축기 혈압 (BP) 140 mmHg 및 확장기 BP 90 mmHg, (2) 새로 발생된 단백뇨 (요검사에 의해 1+, 24시간 축뇨 중의 단백질 >300 mg, 또는 단백질/크레아티닌 비가 > 0.3인 단일 무작위 요샘플) 및 (3) 출산후 12 주에서의 고혈압 및 단백뇨의 분해능. 자간전증의 증상은 또한 신장 기능 장애 및 사구체 내피증 또는 비대를 포함할 수 있다.

중증 자간전증은 일반적으로 (1) 확장기 BP 110 mmHg 또는 (2) 24시간 축뇨 중의 3.5 g 이상의 단백질의 측정값 또는 요검사에 의해 적어도 3+ 단백질을 지닌 2개의 무작위 요샘플의 특징이 있는 단백뇨로서 정의된다.

본 명세서에 상세히 논의된 바와 같이, 본 발명의 주요한 이점은 전달 시스템이 VEGF계 제제를 피검자, 특히 인간 환자에게 전신적으로 전달하여, VEGF계 제제가 자간전증 및/또는 자간의 상술한 증상 중 적어도 하나에 있어서의 정성적 또는 정량적 감소를 일으킨다..

이제부터 도 1을 참조하면, 본 발명에 사용하기 위한 마이크로프로젝션 부재 (30)의 일실시형태가 도시되어 있다. 도 1에 예시된 바와 같이, 마이크로프로젝션 부재 (30)는 다수의 마이크로프로젝션 (34)을 갖는 마이크로프로젝션 어레이 (32)를 포함한다. 상기 마이크로프로젝션 (34)은 바람직하게는 상술한 실시형태에 있어서 개구부 (38)를 포함하는 시트로부터 실질적으로 90°각도로 뻗어 있다.

본 발명에 의하면, 상기 시트 (36)는 해당 시트 (36)용 이면 (40)을 포함한 전달용 패치에 혼입될 수 있고, 피부에 상기 패치를 붙이기 위한 접착제 (16)를 부가적으로 포함할 수 있다 (도 3 참조). 본 실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 (34)은 얇은 금속제의 시트 (36)로부터 다수의 마이크로프로젝션 (34)을 에칭하거나 펀칭하여, 이들 마이크로프로젝션 (34)을 상기 시트 (36)의 평면으로부터 구부림으로써 형성된다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 부재 (30)는 마이크로프로젝션 밀도가 적어도 약 10 마이크로프로젝션/㎠, 더욱 바람직하게는 적어도 약 200 내지 2000 마이크로프로젝션/㎠의 범위이다. 바람직하게는, 약제가 통과하는 단위 면적당 개구부의 개수는 적어도 약 10 개구부/㎠ 이상 약 2000 개구부/㎠ 미만이다.

상술한 바와 같이, 마이크로프로젝션 (34)은 프로젝션 길이가 바람직하게는 1000 마이크론 미만이다. 일실시형태에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 (34)는 프로젝션 길이가 500 마이크론 미만, 더욱 바람직하게는 250 마이크론 미만이다. 마이크로프로젝션 (34)은 또한 바람직하게는 폭이 약 25 내지 500 마이크론의 범위이고, 두께가 약 10 내지 100 마이크론의 범위이다.

일실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 부재 (30)의 생체 적합성을 향상시키기 위해 (예를 들면, 피검자의 피부에 도포한 후의 출혈 및 자극을 최소화하기 위해), 마이크로프로젝션 (34)은 길이가 바람직하게는 145 ㎛ 미만, 더욱 바람직하게는 약 50 내지 145 ㎛, 보다 바람직하게는 약 70 내지 140 ㎛의 범위이다. 또한, 상기 마이크로프로젝션 부재 (30)는 마이크로프로젝션 밀도가 바람직하게는 약 100 마이크로프로젝션/㎠ 초과, 더욱 바람직하게는 적어도 약 200 내지 3000 마이크로프로젝션/㎠의 범위를 갖는 어레이를 포함한다.

마이크로프로젝션 부재 (30)는 스텐레스 강, 티탄, 니켈 티탄 합금 등의 각종 금속 또는 유사한 생체 적합성 재료로 제작될 수 있다.

본 발명에 의하면, 마이크로프로젝션 부재 (30)는 폴리머 재료 등의 비도전성 재료로 구성할 수도 있다.

또는, 마이크로프로젝션 부재는 파릴렌^® 등의 비전도성 재료, 또는 테플론^®, 실리콘 또는 기타 저 에너지 재료 등의 소수성 재료로 코팅될 수 있다. 상술한 소수성 재료 및 관련된 기준 (예를 들면, 포토레지스트) 층은 미국 특허 출원 제60/484,142호에 개시되어 있으며, 이 특허 공개는 참조로 본 명세서에 포함된다.

본 발명에서 사용될 수 있는 마이크로프로젝션 부재는 미국 특허 제6,083,196호, 제6,050,988호 및 제6,091,975호에 개시된 부재를 포함하지만, 이들에 한정되지 않으며, 상기 미국 특허는 전체로서 본 명세서에 참조로 포함된다.

본 발명에서 사용될 수 있는 다른 마이크로프로젝션 부재는 실리콘 칩 에칭기술을 이용한 실리콘 에칭 또는 에칭된 마이크로몰드를 이용한 플라스틱 성형에 의해 형성된 부재를 포함하고, 이들 부재는 미국 특허 제5,879,326호에 개시되어 있으며, 이 특허는 전체로서 본 명세서에 참조로 포함된다.

본 발명에 따르면, 숙주에게 투여되는 VEGF계 제제는 마이크로프로젝션 부재 (30)에 배치되는 생체 적합성 코팅에 함유되거나, 하이드로겔 제제에 함유되거나, 생체 적합성 코팅 및 하이드로겔 제제 양쪽에 함유될 수 있다.

또 하나의 실시형태에 있어서, 마이크로프로젝션 부재는 약제 함유 고형 제제를 포함하고, VEGF계 제제는 생체 적합성 코팅, 하이드로겔 제제 또는 고형 제제, 또는 이들 3개의 모든 전달 매개물에 함유될 수 있다.

본 발명에 따르면, 적어도 하나의 VEGF계 제제는 적어도 하나의 상술한 전달 매개물에 함유된다. 전달 매개물, 따라서 마이크로프로젝션 시스템에 사용되는 VEGF계 제제의 양은 VEGF계 제제의 치료학적 유효량을 전달하여 원하는 결과를 달성하기에 필요한 양일 것이다. 실제로는, 이는 특정 VEGF계 제제, 전달 부위, 상태 중증도, 원하는 치료 효과에 따라 광범위하게 변화할 것이다.

이제부터 도 2를 참조하면, 그 내부에 배치된 VEGF계 제제를 갖는 생체 적합성 코팅 (35)을 포함하는 마이크로프로젝션 (34)을 갖는 마이크로프로젝션 부재 (30)가 도시되어 있다. 본 발명에 의하면, 상기 코팅 (35)은 각 마이크로프로젝션 (34)을 부분적으로 또는 완전히 피복할 수 있다. 예를 들면, 상기 코팅 (35)은 상기 마이크로프로젝션 (34) 상의 건식 패턴 코팅일 수 있다. 상기 코팅 (35)은 또한 상기 마이크로프로젝션 (34)을 형성하기 전후에 도포될 수 있다.

본 발명에 의하면, 상기 코팅 (35)은 다양한 공지된 방법에 의해 마이크로프로젝션 (34)에 도포될 수 있다. 바람직하게는, 상기 코팅은 단지 피부를 피어싱하는 마이크로프로젝션 부재 (30) 또는 마이크로프로젝션 (34)의 부분 (예를 들면, 선단부 (39))에만 도포된다.

이러한 코팅 방법의 하나로서 침지 코팅법을 들 수 있다. 침지 코팅은 마이크로프로젝션 (34)을 코팅 용액으로 부분적으로 또는 완전히 침지함으로써 마이크로프로젝션을 피복하는 수법으로서 설명될 수 있다. 부분 침지 기술을 이용하면, 마이크로프로젝션 (34)의 선단부 (39)에만 상기 코팅 (35)을 제한하는 것이 가능하다.

또 다른 피복 방법으로는, 마찬가지로 마이크로프로젝션 (34)의 선단부 (39)에 코팅(35)을 제한하는 롤러 코팅 기구를 이용하는 롤러 피복법을 들 수 있다. 이 롤러 피복법은 예를 들면, 미국 특허 출원 제10/099,604호 (미국 특허 공개 제2002/0132054호)에 개시되어 있고, 이 특허 출원은 전체로서 본 명세서에 참조로 포함된다. 상기 미국 특허 출원에 상세히 설명되어 있는 바와 같이, 개시된 롤러 피복법은 피부를 피어싱하는 동안 마이크로프로젝션 (34)으로부터 용이하게 제거되지 않는 평활한 코팅을 제공한다.

본 발명에 의하면, 마이크로프로젝션 (34)은 구멍 (도시 생략), 홈 (도시 생략), 표면 요철 (도시 생략) 또는 유사한 변형 형태와 같은 코팅 (35)의 용적을 수용 및/또는 증대시키는데 적합한 수단도 포함할 수 있고, 이러한 수단은 다량의 코팅이 침착될 수 있는 증대된 표면적을 제공한다.

본 발명의 범위 내에서 사용할 수 있는 또 다른 피복 방법으로는 분무 피복법을 들 수 있다. 본 발명에 의하면, 분무 피복법은 코팅 조성물의 에어로졸 현탁액의 형성을 포함할 수 있다. 바람직한 실시형태에 있어서, 약 10 내지 200 피코리터의 액적 크기를 지닌 에어로졸 현탁액이 마이크로프로젝션 (10) 상에 분무되고 나서 건조된다.

패턴 코팅은 마이크로프로젝션 (34)을 코팅하는데 사용될 수도 있다. 패턴 코팅은 마이크로프로젝션 표면상에 퇴적된 액체를 위치결정하기 위한 분배 시스템을 이용하여 도포될 수 있다. 상기 퇴적된 액체의 양은 바람직하게는 마이크로프로젝션 1개당 0.1 내지 20 나노리터의 범위이다. 적절한 정밀 계량 액체 디스펜서의 예는 미국 특허 제5,916,524호, 미국 특허 제5,743,960호, 미국 특허 제5,741,554호, 및 미국 특허 제5,738,728호에 개시되어 있고, 이들 특허는 전체로서 본 명세서에 참조로 포함된다.

마이크로프로젝션 코팅 제제 또는 용액은 공지의 솔레노이드 밸브 디스펜서, 임의의 유체 가동 수단 및 일반적으로 전계를 이용해서 제어되는 위치결정수단을 이용하는 잉크 젯 수법에 의해 도포될 수도 있다. 인쇄 산업의 기타 액체 분배 수법 또는 당해 기술분야에 공지된 유사한 액체 분배 수법은 본 발명의 패턴 코팅을 도포하는데 사용될 수 있다.

이제부터 도 4 및 도 5를 참조하면, 보존 및 적용을 위해서, 마이크로프로젝션 부재 (30)는 미국 특허 출원 제09/976,762호 (특허 공개 제2002/0091357호)에 상세히 설명되어 있는 바와 같이, 바람직하게는 접착 탭 (6)에 의해 리테이너 링 (40)에 매달려 있으며, 상기 특허 출원은 참조로 전체로서 본 명세서에 포함된다.

리테이너 링 (40)에 마이크로프로젝션 부재 (30)를 배치한 후, 마이크로프로젝션 부재 (30)는 환자의 피부에 적용된다. 바람직하게는, 마이크로프로젝션 부재 (30)는 도 6에 도시되고 공동 계류 중인 미국 특허 출원 제09/976,798호에 기재되어 있는 바와 같은 충격식 애플리케이터 (45)를 이용해서 피부에 적용되고, 상기 특허 출원은 참조로 전체로서 본 명세서에 포함된다.

상술한 바와 같이, 본 발명의 일실시형태에 의하면, 고형 생체 적합성 코팅을 형성하기 위해 마이크로프로젝션 부재 (30)에 도포된 코팅 제제는 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 수성 및 비수성 제제를 포함할 수 있다. 다른 실시형태에 있어서, 코팅 제제는 비수계 제제를 포함한다. 본 발명에 의하면, VEGF계 제제는 생체 적합성 담체 내에 용해되거나 상기 담체 내에 현탁될 수 있다.

이제부터 도 7을 참조하면, VEGF 121, 25개의 산성 pKa 및 23개의 염기성 pKa를 나타내는 단백질의 예측된 전하 프로파일을 도시한다. 도 7에 예시된 바와 같이, pH 6.0에서, 단백질은 0의 알짜 전하를 나타낸다. 이 점은 등전점 또는 pI로도 불리운다.

이제부터 도 8을 참조하면, VEGF 121의 알짜 전하종의 예측된 몰 비를 도시한다. 도 8에 예시된 바와 같이, 중성종 만이 pH 5.5 내지 pH 7.0의 pH 범위에서 상당량으로 존재한다 (또한 도 9 참조). 이러한 pH 범위에서, 단백질은 용액에서 침전하는 것으로 예기된다.

따라서, 데이터는 본 발명의 마이크로프로젝션 어레이에 대한 코팅용으로 허용가능한 제제와 상용성을 지닌 VEGF 121 용해도가 약 pH 5.5 이하 또는 pH 7.0 이상의 pH에서 얻어질 수 있음을 보여준다. 따라서, 본 발명의 코팅 제제에 대한 pH의 바람직한 범위는 pH 2 내지 pH 5.5 또는 pH 7.0 내지 pH 11이다.

바람직하게는, VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염, 변이체, 유사체 및 단순 유도체를 포함하나, 이들에 한정되지 않는 VEGF 패밀리 멤버를 포함한다. 본 발명의 바람직한 실시형태에 있어서, VEGF계 제제는 VEGF 121을 포함한다.

고형 생체 적합성 코팅 (즉, 마이크로프로젝션 부재 또는 제품)에 함유되는 VEGF계 제제의 양은 바람직하게는 약 1 내지 1000 ㎍의 범위, 더욱 바람직하게는 약 1 내지 500 ㎍의 범위, 보다 바람직하게는 약 1 내지 200 ㎍의 범위이다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 상기 코팅 제제는 적어도 1종의 완충액을 포함한다. 이러한 완충액의 예로는 아스코르브산, 시트르산, 숙신산, 글리콜산, 글루콘산, 글루쿠론산, 락트산, 말산, 피루브산, 타르타르산, 타르트론산, 푸마르산, 말레산, 인산, 트리카르발릴산, 말론산, 아디프산, 시트라콘산, 글루타라트산, 이타콘산, 메사콘산, 시트라말산, 디메틸올프로피온산, 티글리산, 글리세르산, 메타크릴산, 이소크로톤산, β-히드록시부티르산, 크로톤산, 안젤산, 히드라크릴산, 아스파르트산, 글루탐산, 글리신, 모노에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 트로메타민, 리신, 히스티딘, 아르기닌, 모르폴린, 메틸글루카민, 글루코사민, 및 이들의 혼합물을 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

본 발명의 방법 및 조성물에 사용되는 적절한 환원당의 예로는 아피오스, 아라비노스, 릭소스, 리보스, 크실로스, 디지톡소스, 푸코스, 퀘르시톨, 퀴노보스, 람노스, 알로스, 알트로스, 프룩토스, 갈락토스, 글루코스, 굴로스, 하마멜로스, 이도스, 만노스, 타가토스 등의 단당류; 및 프리메베로스, 비키아노스, 루티노스, 스킬라비오스, 셀로비오스, 겐티오비오스, 락토스, 락툴로스, 말토스, 멜리비오스, 소포로스, 및 투라노스 등의 이당류를 들 수 있다.

당해 기술분야의 숙련가에 의해 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 코팅 제제 및 따라서, 고형 생체 적합성 코팅에로의 혈관수축제의 첨가는 마이크로프로젝션 부재 또는 어레이의 사용 후에 일어날 수 있는 출혈을 방지하고, 사용 부위에서의 혈류 감소 및 피부 부위로부터 시스템 순환으로의 흡수율의 감소를 통한 VEGF계 제제의 약물 동태를 연장시키는데 특히 유용하다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 코팅 제제는 적어도 하나의 "경로 개통 조정제"를 포함하며, 상기 경로 개통 조정제의 예로는 삼투압제 (예를 들면, 염화나트륨), 양성 이온성 화합물 (예를 들면, 아미노산), 및 베타메타손 21-인산이나트륨염, 트리암시놀론 아세토나이드 21-인산이나트륨, 하이드로코르타메이트 염산염, 하이드로코르티손 21-인산이나트륨염, 메틸프레드니솔론 21-인산이나트륨염, 메틸프레드니솔론 21-숙신산나트륨염, 파라메타손 인산이나트륨 및 프레드니솔론 21-숙신산나트륨염 등의 항염증제, 및 시트르산, 시트레이트 (예를 들면, 시트르산나트륨), 덱스트린 황산나트륨 및 EDTA 등의 항응고제를 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

원하는 코팅 두께는 필요한 용량, 따라서 그 용량을 전달하는데 필요한 코팅 두께, 시트의 단위 면적당 마이크로프로젝션의 밀도, 코팅 조성물의 점도와 농도 및 선택된 코팅 방법을 포함한 몇몇 인자에 의존한다.

본 발명에 따르면, 코팅 제제가 마이크로프로젝션 (34)에 도포된 후에, 코팅 제제는 각종 수단에 의해 건조될 수 있다. 본 발명의 바람직한 실시형태에 있어서, 코팅된 마이크로프로젝션 부재 (30)는 주변 실내 조건에서 건조된다. 그러나, 각종 온도 및 습도 레벨이 마이크로프로젝션상의 코팅 제제를 건조시키는데 이용될 수 있다. 또한, 코팅된 마이크로프로젝션 부재는 코팅으로부터 물을 제거하기 위해 가열되거나, 동결 건조되거나, 냉동 건조되거나 유사한 기술이 사용될 수 있다.

본 발명에 따르면, VEGF계 제제는 또한 하이드로겔 제제를 통해 전달될 수 있다. 따라서, 상술한 실시형태에 있어서, 전달 시스템은 하이드로겔 제제와, 전체로서 본 명세서에 참조로 포함되는 미국 특허 제6,083,196호, 제6,050,988호 및 제6,091,975호, 및 공동 계류 중인 미국 특허 출원 제10/970,901호, 제10/971,430호, 제10/971,877호 및 제10/971,338호에 개시된 것 등의 하이드로겔 제제를 수용하기 위한 수단 (예를 들면, 겔 팩)을 포함할 것이다.

적어도 하나의 실시형태에 있어서, 하이드로겔 제제는 적어도 하나의 VEGF계 제제를 함유한다. 본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 하이드로겔 제제는 VEGF계 제제를 함유하지 않기 때문에, 수화기구에 지나지 않는다.

본 발명에 따르면, 하이드로겔 제제가 상술한 VEGF계 제제 중의 하나를 함유하는 경우에는, VEGF계 제제는 포화 초과 또는 포화 이하의 농도로 존재할 수 있다. 본 발명의 하이드로겔 제제에 사용되는 VEGF계 제제의 양은 원하는 치료학적 결과를 달성하도록 VEGF계 제제의 치료학적 유효량을 전달하는데 필요한 양일 것이다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, VEGF계 제제의 농도는 하이드로겔 제제의 적어도 1 내지 40 중량%의 범위이다.

본 발명에 따르면, 하이드로겔 제제가 VEGF계 제제를 함유하지 않는 경우에는, VEGF계 제제는 상술한 바와 같이, 마이크로프로젝션 부재에 코팅되거나, 후술하는 바와 같이 고형 제제에 함유될 수 있다.

바람직하게는, 본 발명의 하이드로겔 제제는 수성 하이드로겔을 포함한다. 하이드로겔은 이들의 고 수분 함유량 및 생체 적합성 때문에 바람직한 제제이다.

당해 기술분야에 공지된 바와 같이, 하이드로겔은 물에서 팽윤하는 고분자 네트워크이다. 적절한 고분자 네트워크의 예로는 히드록시에틸셀룰로스 (HEC), 히드록시프로필메틸셀룰로스 (HPMC), 히드록시프로필셀룰로스 (HPC), 메틸셀룰로스 (MC), 히드록시에틸메틸셀룰로스 (HEMC), 에틸히드록시에틸셀룰로스 (EHEC), 카르복시메틸셀룰로스 (CMC), 폴리(비닐알콜), 폴리(에틸렌옥사이드), 폴리(2-히드록시에틸메타크릴레이트), 폴리(n-비닐피롤리돈) 및 플루로닉를 들 수 있지만, 이들에 한정되지 않는다. 가장 바람직한 폴리머 재료는 셀룰로스 유도체이다. 상술한 폴리머는 상이한 평균 분자량을 나타내는 각종 등급으로 얻어질 수 있으므로, 상이한 레올로지 특성을 나타낸다.

바람직하게는, 폴리머 재료의 농도는 하이드로겔 제제의 약 0.5 내지 40 중량%의 범위이다.

본 발명의 하이드로겔 제제는 바람직하게는 제제가 제제와, 마이크로프로젝션 부재와, 피부와, 임의로 고형 제제 간의 최적 접촉을 달성하기 위해 중요한 충분한 습윤 특성을 나타내는 것을 확보하도록 충분한 표면 활성을 갖는다.

본 발명에 따르면, 충분한 습윤 특성은 하이드로겔 제제 중에 계면활성제 또는 양친매성을 갖는 폴리머 등의 적어도 습윤제를 혼입함으로써 달성된다. 임의로, 습윤제는 또한 고형 제제에 혼입될 수도 있다.

본 발명에 따르면, 계면활성제는 양성 이온성, 양성, 양이온성, 음이온성 또는 비이온성일 수 있다. 적절한 계면활성제의 예로는 라우로암포아세트산나트륨, 도데실황산나트륨 (SDS), 염화세틸피리디늄 (CPC), 도데실트리메틸암모늄클로라이드 (TMAC), 염화벤잘코늄, 트윈 20 및 트윈 80 등의 폴리소르베이트류, 소르비탄라우레이트 등의 기타 소르비탄 유도체, 및 라우레스-4 등의 알콕시화 알콜류를 들 수 있다. 가장 바람직한 계면활성제는 트윈 20, 트윈 80 및 SDS를 포함한다.

양친매성을 갖는 적절한 폴리머 재료 또는 폴리머의 예로는 플루로닉 뿐만 아니라, 히드록시에틸셀룰로스 (HEC), 히드록시프로필메틸셀룰로스 (HPMC), 히드록시프로필셀룰로스 (HPC), 메틸셀룰로스 (MC), 히드록시에틸메틸셀룰로스 (HEMC), 또는 에틸히드록시에틸셀룰로스 (EHEC) 등의 셀룰로스 유도체를 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

바람직하게는, 계면활성제의 농도는 하이드로겔 제제의 약 0.001 내지 2 중량%의 범위이다. 양친매성을 나타내는 폴리머의 농도는 바람직하게는 하이드로겔 제제의 약 0.5 내지 40 중량%의 범위이다.

당해 기술분야의 숙련가에 의해 알 수 있는 바와 같이, 상술한 습윤제는 단독으로 또는 조합하여 사용될 수 있다.

본 발명에 따르면, 하이드로겔 제제는 상술한 경로 개통 조정제 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.

하이드로겔 제제는 또한 상술한 혈관수축제 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.

본 발명의 하이드로겔 제제는 제제가 겔 팩에 함유될 수 있고, 적용 과정 시에 이의 완전성을 유지하며, 마이크로프로젝션 부재 개구부를 통해 피부 경로로 유동할 수 있도록 충분한 유체 상태가 되도록 충분한 점도를 나타낸다.

뉴턴 특성을 나타내는 하이드로겔 제제에 대해서는, 하이드로겔 제제의 점도는 바람직하게는 25℃에서 측정된 것으로서, 약 2 내지 30포아즈 (P)의 범위이다. 전단 박화 (shear-thinning) 하이드로겔 제제에 대해서는, 25℃에서 측정된 점도는 바람직하게는 각각 667/s 및 2667/s의 전단 속도에서 1.5 내지 30 P의 범위 또는 0.5 및 10 P이다. 팽창성 제제에 대해서는, 25℃에서 측정된 점도는 바람직하게는 667/s의 전단 속도에서 약 1.5 내지 30 P의 범위이다.

본 발명에 따르면, VEGF계 제제는 또한 고형 제제에 포함될 수 있다. 일실시형태에 있어서, 고형 제제는 유사하게 본 명세서에 전체로서 참조로 포함되는 PCT 특허 공개 제WO 98/28037호에 개시된 바와 같은 고체 필름이다. 또 하나의 실시형태에 있어서, 고형 제제는 후술하는 바와 같이, 건조 분말 제제이다. 상술한고형 제제는 본 명세서에 참조로 포함되는 공동 계류 중인 특허 출원 제10/970,901호에 개시된 바와 같은 마이크로프로젝션 어레이의 피부측 또는 어레이의 상부면에위치되도록 적합될 수 있다.

상술한 공동 계류 중인 특허 출원에서 상세히 검토된 바와 같이, 고체 필름을 포함하는 고형 제제는 전형적으로 VEGF계 제제, 히드록시에틸셀룰로스 (HEC), 히드록시프로필메틸셀룰로스 (HPMC), 히드록시프로필셀룰로스 (HPC), 메틸셀룰로스 (MC), 히드록시에틸메틸셀룰로스 (HEMC), 에틸히드록시에틸셀룰로스 (EHEC), 카르복시메틸셀룰로스 (CMC), 폴리(비닐알콜), 폴리(에틸렌옥사이드), 폴리(2-히드록시에틸메타크릴레이트), 폴리(n-비닐피롤리돈) 또는 플루로닉 등의 폴리머 재료, 글리세롤, 프로필렌글리콜 또는 폴리에틸렌글리콜 등의 가소제, 트윈 20 또는 트윈 80 등의 계면활성제, 및 물, 이소프로판올 또는 에탄올 등의 휘발성 용매로 구성되는 액제를 캐스팅하여 제조된다. 캐스팅 및 후속의 용매 증발 후에, 고체 필름이 제조된다.

일실시형태에 있어서, 고체 필름을 제조하기 위해 사용되는 액제는 VEGF계 제제 0.1 내지 20 중량%, 폴리머 5 내지 40 중량%, 가소제 5 내지 40 중량%, 계면활성제 0 내지 2 중량%, 및 휘발성 용매로 구성되는 잔부를 포함한다.

상술한 바와 같이, 본 발명의 다른 실시형태에 있어서, 고형 제제는 분말 또는 케이크 제제이다. 적절한 제제는 분무 건조, 동결 건조, 분무 동결 건조 및 초임계 유체 처리로 얻어진다. 본 발명에 따르면, 이들 방법은 VEGF계 제제의 경피 전달 이전에 하이드로겔 제제로 재구성되는 고 페이로드 분말 또는 케이크 고형 제제를 형성한다. 바람직하게는, 분말 제제는 재구성을 촉진시키고 환자의 약제 복용 순응도를 향상시키기 위해 비교적 높은 다공률을 갖기에 적합하다.

상술한 분말 및 케이크 제제를 제조하는 공정은 전형적으로 약 85%의 수율을 갖는 것으로 고도로 유효하다. 또한, 상기 공정은 Tg를 저하시키고, 보존기간을 감소시킬 수 있는 가소제의 사용을 요하지 않는다. 바람직하게는, 상술한 방법에서 건조 또는 초임계 유체 추출된 제제는 또한 VEGF계 제제를 보호하기 위한 당류 또는 당 알콜 등의 탄수화물을 포함한다. 바람직하게는, 제제는 메티오닌 등의 산화방지제를 포함한다.

분무 건조, 동결 건조, 분무 동결 건조 및 초임계 유체 추출에 의해, 입경 및 입자 분포, 입자 형상 및 모르폴러지를 양호하게 제어할 수 있다. 상술한 기술은 또한 당해 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들면, 분무 동결 건조 과정은 300 mg만한 작은 배치 사이즈 (batch size)가 고 수율로 제조될 수 있기 때문에, 가치가 높은 치료 약제에 이상적이다. 상술한 과정에 의해, 바람직하게는 약 15분 이하, 더욱 바람직하게는 약 1분 이하로 재구성될 수 있는 고형 제제를 제조할 수 있다.

알 수 있는 바와 같이, 분무 건조, 동결 건조, 분무 동결 건조 및 초임계 유체 추출 과정은 상술한 마이크로프로젝션 시스템으로 용이하게 혼입되는 케이크 형태를 생성시킨다. 또는, 상기 공정은 분말 형태를 생성시키고, 추가로 처리되어, 케이크를 형성시킨다. 다른 실시형태에 있어서, 분말 형태는 하이드로겔과 연통하기에 적합한 컨테이너에 보유된다. 바람직하게는, 이러한 실시형태는 재구성이 요구될 때까지 분말 형태를 하이드로겔과 분리하도록 박리성 릴리스 라이너를 포함한다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, 적절한 분무 동결 건조 과정은 일반적으로 VEGF계 제제를 함유하는 분무 액제를 액체 질소에 노출시키는 것을 포함한다. 환산 온도하에서, 분무 액적은 밀리초의 시간 스케일에서 동결된다. 이러한 동결 과정은 매우 미세한 얼음 결정을 생성시키고, 이어서 동결건조된다. 상술한 기술은 입자내 다공률이 높은 분말을 생성시켜, 수성 매체에서 신속하게 재구성할 수 있다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, 적절한 초임계 유체 과정은 일반적으로 이의 임계 온도 및 압력 이상에서 유지되는 용매 중에서 VEGF계 제제의 액제를 결정화하는 것을 포함한다. 결정화 과정의 조건을 제어함으로써, 원하는 입경 및 입자 분포, 입자 형상 및 모르폴러지를 갖는 VEGF계 제제 분말을 제조할 수 있다.

바람직하게는, 고형 제제를 제조하는데 사용되는 액제의 pH는 약 pH 5.5 이하 또는 pH 7.0 이상이다. 더욱 바람직하게는, 고형 제제를 제조하는데 사용되는 액제의 pH는 약 pH 2 내지 pH 5.5 또는 pH 7.0 내지 pH 11의 범위이다. 보다 바람직하게는, 고형 제제를 제조하는데 사용되는 액제의 pH는 약 pH 2.5 내지 pH 5.5 또는 pH 7.0 내지 pH 10.5이다.

또 하나의 실시형태에 있어서, 고형 제제는 안정제를 포함하며, 상기 안정제의 예로는 비환원당, 다당류 또는 환원당을 들 수 있으나, 이들에 한정되지 않는다.

적절한 비환원당의 예로는 수크로스, 트레할로스, 스타키오스 또는 라피노스를 들 수 있다.

적절한 다당류의 예로는 덱스트란, 가용성 전분, 덱스트린, 및 인슐린을 들 수 있다.

적절한 환원당의 예로는 아피오스, 아라비노스, 릭소스, 리보스, 크실로스, 디지톡소스, 푸코스, 퀘르시톨, 퀴노보스, 람노스, 알로스, 알트로스, 프룩토스, 갈락토스, 글루코스, 굴로스, 하마멜로스, 이도스, 만노스, 타가토스 등의 단당류; 및 프리메베로스, 비키아노스, 루티노스, 스킬라비오스, 셀로비오스, 겐티오비오스, 락토스, 락툴로스, 말토스, 멜리비오스, 소포로스, 및 투라노스 등의 이당류를 들 수 있다.

본 발명에 따르면, 고형 제제는 상술한 경로 개통 조정제, 혈관수축제 또는 완충액 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.

본 발명의 일실시형태에 있어서, VEGF계 제제를 환자에게 전달하기 위한 방법은 하기 단계, (i) 다수의 마이크로프로젝션 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 생체 적합성 코팅을 포함하는 마이크로프로젝션 부재를 갖는 전달 시스템을 제공하는 단계 및 (ii) 코팅된 마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 피부를 피어싱하고, 약제 함유 코팅이 체액에 의해 용해되어 피부로 방출되는 단계를 포함한다.

본 발명의 다른 실시형태에 있어서, VEGF계 제제를 환자에게 전달하기 위한 방법은 하기 단계: (i) 마이크로프로젝션 부재, 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩을 갖는 전달 시스템을 제공하는 단계 및 (ii) 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하고, 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하여, 약제 함유 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계를 포함한다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, VEGF계 제제를 환자에게 전달하기 위한 방법은 하기 단계: (i) 마이크로프로젝션 부재, 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩을 갖는 전달 시스템을 제공하는 단계, (ii) 마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하고, 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하는 단계, 및 (iii) 사용된 마이크로프로젝션 부재의 상부에 겔 팩을 배치하여, 약제 함유 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계를 포함한다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, VEGF계 제제를 전달하기 위한 방법은 하기 단계: (i) 마이크로프로젝션 부재, 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩을 갖는 전달 시스템을 제공하는 단계, (ii) 마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하고, 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하는 단계, (iii) 마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부로부터 제거하는 단계, 및 (iv) 전처리된 피부의 상부에 겔 팩을 배치하여, 약제 함유 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계를 포함한다.

본 발명의 또 하나의 실시형태에 있어서, VEGF계 제제를 전달하기 위한 방법은 하기 단계: (i) 마이크로프로젝션 부재, 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 고형 제제를 갖는 마이크로프로젝션 어셈블리를 제공하는 단계, (ii) 하이드로겔 제제를 갖는 겔 팩을 제공하는 단계, (iii) 마이크로프로젝션 어셈블리를 환자의 피부에 사용하여, 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하는 단계, 및 (iv) 겔 팩을 사용된 마이크로프로젝션 어셈블리 상에 배치하여, 하이드로겔 제제가 겔 팩으로부터 방출되어, 고형 제제에 함유된 제제를 방출하고, 제제 및 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 각질층의 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계를 포함한다.

바람직하게는, 본 명세서에 사용된 마이크로프로젝션 부재 및 어셈블리, 및 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리는 액츄에이터를 통해 환자의 피부에 사용된다.

바람직하게는, 상술한 방법을 통해 피내로 전달되는 VEGF계 제제의 용량은 용량 단위당 약 1 내지 500 ㎍의 범위, 더욱 바람직하게는 약 1 내지 100 ㎍의 범위, 보다 바람직하게는 약 1 내지 200 ㎍의 범위이다.

본 발명이 어떤 식으로든 이점에 관해서는 제한되지 않기 때문에, 피부 보호제를 통한 약물 수송을 촉진시키기 위해서는, 본 발명은 또한 다양한 이온 도입 또는 전기 수송 (electrotransport) 시스템과 함께 이용될 수 있음은 당해 기술분야의 숙련가에게 이해될 것이다. 구체적인 전기 수송 약물 전달 시스템은 본 명세서에 참조로 전체로서 포함되어 있는 미국 특허 제5,147,296호, 제5,080,646호, 제5,169,382호 및 제5,169,383호에 개시되어 있다.

용어 "전기 수송"은 일반적으로 피부, 점막 또는 손발톱 등의 체표면을 통한 유익한 약제, 예를 들면 약물 또는 약물 전구체의 통과를 말한다. 약제의 수송은 전위의 인가에 의해 유도되거나 향상되어, 전류의 인가를 가져오고, 약제를 전달하거나 약제의 전달을 향상시키거나, "리버스" 전기 수송에 관해서는 약제를 샘플링하거나 약제의 샘플링을 향상시킨다. 약제의 인체 내 또는 인체 밖으로의 전기 수송은 각종 방법으로 달성될 수 있다.

광범위하게 이용되는 전기 수송법 중의 하나인 이온 도입은 전하를 띤 이온의 전기적으로 유도된 수송을 포함한다. 전하를 띠지 않거나 또는 중성 전하를 띤 분자의 경피 수송 (예를 들면, 글루코스의 경피 샘플링)에 포함되는 전기 수송법의 다른 형태인 전기 침투법은 전계의 영향하에 약제를 지닌 용매의 막을 통한 이동을 포함한다.

전기 수송법의 또 다른 형태인 전기 천공법은 전기 펄스, 고전압 펄스를 막에 인가함으로써 형성되는 세공을 통한 약제의 통과를 포함한다.

많은 경우에 있어서, 상술한 과정들 중 한가지 이상이 동시에 상이한 정도로 일어날 수도 있다. 따라서, 용어 "전기 수송"이란 약제가 실제로 수송되는 특정 메카니즘(들)에 관계없이, 적어도 1종의 전하를 띤 또는 전하를 띠지 않는 약제 또는 그 혼합물의 전기적으로 유도되거나 향상된 수송을 포함하도록 본 명세서에서 가능한 가장 넓은 의미로 해석된다. 또한, 초음파 영동 (sonophoresis) 또는 압전 소자 등의 다른 수송 향상법은 본 발명과 관련하여 사용될 수 있다.

본 발명의 추가 특징과 이점은 첨부도면에 예시된 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시형태에 대한 하기의 더욱 구체적인 설명으로부터 명백해질 것이며, 전체 도면에 있어서 동일한 참조부호는 일반적으로 동일한 부분 혹은 엘리먼트를 나타낸다.

도 1은 마이크로프로젝션 부재의 일례의 일부분에 대한 사시도이다.

도 2는 본 발명에 의한 마이크로프로젝션에 부착된 코팅을 갖는 도 1에 도시된 마이크로프로젝션 부재의 사시도이다.

도 3은 접착 이면 (adhesive backing)을 갖는 마이크로프로젝션 부재의 측단면도이다.

도 4는 그 내부에 배치된 마이크로프로젝션 부재를 갖는 리테이너의 측단면도이다.

도 5는 도 4에 도시된 리테이너의 사시도이다.

도 6은 애플리케이터 및 리테이너의 분해사시도이다.

도 7은 VEGF계 제제에 대한 전하 프로파일을 예시하는 그래프이다.

도 8 및 도 9는 VEGF계 제제의 알짜 전하종의 몰 비를 예시하는 그래프이다.

하기 실시예는 당해 기술분야의 숙련가가 본 발명을 더욱 분명히 이해하여 실시할 수 있도록 주어진다. 이들 실시예는 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니라, 단순히 대표적인 예로서 예시되는 것이다.

VEGF 제제:

적절한 분석법을 개발하여, 경피 전달 마이크로프로젝션 어레이를 코팅하기에 적합한 VEGF계 제제 제형의 적합성을 증명하도록 하기 연구 조사를 행하였다. 110 mL 용적의 VEGF (Scios lot# 8331:058 재생 #1)를 Scios로부터 받았다. 이 용액 중, 10O mL (＠ 1.82 mg VEGF/mL)를 3:1 중량비의 수크로스:VEGF로 제형화하여, 각각 25 mL 액제를 함유하는 4개의 5O mL 원심분리관의 버티스 매니폴드 스타일 (Virtis manifold style) 동결 건조기에서 동결건조시켰다. 동결건조에 이어서, 각 분말을 2 mL WFI로 재구성하고, 혼합하여, 10,000 MWCO 투석 카세트에 로딩하였다. 농축물을 적어도 12h/교환 동안 2 내지 8℃에서 2개의 1 L 대체물 중의 2 mM 시트레이트 완충액 (pH 4.6)에 대하여 투석하였다 투석 후에, 리텐테이트 (retentate) 21 mL를 카세트로부터 회수하여, 8.7 mg/mL의 개시 농도에 기초한 단백질 함량에 대하여 UV-Vis로 분석하였다. 새로 주입한 원료 및 회수된 리텐테이트의 UV 함량 분석의 결과, 처음에 동결 건조하여, 투석 처리 단계를 행한 후에 VEGF 펩티드 96%가 회수되었음을 나타냈다.

그 다음에, 투석 리텐테이트를 3:1 중량비의 수크로스:VEGF로 다시 제형화하 여, 버티스 매니폴드 스타일 동결 건조기에서 동결건조시켰다. 동결건조된 분말 약 722 mg을 회수하여, HPLC로 분석한 결과를 표 1에 나타낸다.

샘플	순도 (%)
샘플	RP-HPLC	SEC	IEC
8331:058 원료	96.6	99.6	87.0
2× 동결건조된 분말	96.4	99.2	87.7
VEGF 후코팅 용액	96.2	98.0	87.5
코팅된 어레이 추출물	96.7	99.1	88.0

제제 특성:

동결건조된 분말 약 2분의 1 (332 mg)을 400 ㎕ WFI + 0.125% 폴리소르베이트 20으로 재구성하여, 계산된 VEGF 농도 110 mg/mL, 33O mg/mL 수크로스 및 0.13% 폴리소르베이트 20를 갖는 코팅 용액 ∼750 ㎕를 제조하였다. 분말은 침전물 또는 응집체/섬유 형성의 명백한 증거없이 완전히 재구성되었다. 이러한 코팅 용액의 샘플을 펠티에 쿨러 및 1°콘을 갖춘 볼린 (Bohlin) C-VOR 콘 플레이트 점도계로 분석하였다.

70 ㎕ 샘플에 대한 점도를 400 l/s의 전단 속도에서 온도의 함수, 및 5℃ 및 400 l/s의 전단 속도에서 시간의 함수로서 측정하여, 일정한 전단 및 이러한 제제에 대한 전단하의 겔화 경향의 존재에서의 코팅 용액의 안정성을 측정하였다. 온도 분석의 결과, 코팅 제제의 점도가 온도 저하의 함수로서 약간 증가됨을 나타냈다. 이는 다른 펩티드 코팅 용액에 대한 이전의 관찰과 일치한다.

1℃의 통상적인 코팅 온도에서의 60 cP의 얻어진 점도는 마이크로프로젝션 어레이에 대한 허용가능한 코팅성 파라미터의 범위에 있다. 시간 분석의 결과, 이러한 코팅 용액은 일정한 전단하에서 2시간 후에 겔 성향을 나타내지 않음을 알 수 있었다. 점도에 있어서의 약간의 증가 및 감소가 관찰된 바, 아마도 제어되지 않은 주변 실내 습도로 인한 샘플 스테이지 상의 물의 응축/증발로 인해 실험에 걸쳐서 변화된 용액 농도 및 희석을 나타내는 것으로 보인다.

이러한 제제에 대한 전단 속도의 함수로서의 점도 프로파일을 5℃에서 평가하였다. 용액의 점도는 일반적으로 뉴턴 유체 거동을 나타낸 직선 (R2=0.9839)에 대한 전단 속도 저하의 함수로서의 용액의 전단 속도 및 전단 응력에 있어서의 증가에 민감하지 않았다.

VEGF 코팅 용액의 접촉각을 탄텍 (Tantec) 접촉각도계로 티탄 기판 상에서 측정하였다. 당해 기술분야의 숙련가에 의해 인지되는 바와 같이, 접촉각이 지나치게 크면, 예를 들면 70°를 초과하면, 티탄 선단부의 양호한 습윤 상태를 가져올 수 없으며, 제제가 "코팅불가능하게"된다. 유사하게는. 접촉각이 지나치게 작으면, 예를 들면, 30°미만이면, 용액이 지나치게 습윤가능하게 된다. 각 코팅 통과 후 용액 중에 침지한 후에 선단부에 코팅 용액이 거의 남지 않거나, 선단부는 마이크로프로젝션 샤프트를 따라 지나치게 깊이 습윤되어, 어레이 베이스로의 비바람직한 제제 이동을 가져온다. 0.13% 폴리소르베이트 20를 갖는 110 mg/mL VEGF 용액에 대한 접촉각은 약 54°이었고, 이 값은 다른 펩티드 제제로 코팅된 마이크로프로젝션 어레이에 대하여 관찰된 코팅가능한 영역 범위이다.

코팅 가능성:

제제의 코팅 유효성을 증명하기 위해, 11O mg/mL VEGF 코팅 용액 700 ㎕를 코팅 저장소에 로딩한다. 저장소의 닥터 블레이드와 드럼 사이의 약 100 ㎛ 갭을 갖는 0.621 인치의 스텐레스 강제 드럼 및 델린 (Delrin) 측판을 갖는 저장소를 사용하여, 롤러 코팅 기술을 이용하였다. 저장소를 펠티에 냉각 단계를 이용하여 -1℃의 온도로 냉각한 결과, 3 내지 4℃의 드럼 표면에 대한 필름 온도를 얻었다.

드럼을 50 rpm의 속도로 회전시키고, 마이크로프로젝션 어레이의 스트립 [매크로플럭스 (Macroflux)^® MF1035 2 ㎠ 어레이, 225 ㎛ 공칭 선단부 프로젝션 길이 (Alza Corp. (Mountain View, CA) 제]을 250 ㎛의 슬레드 높이 (225 ㎛ 선단부 + 25 ㎛ 포일 백킹)를 이용하여 코팅하였다. 마이크로프로젝션 어레이 스트립을 6, 8, 10, 12 및 14 코팅 통과에 의해 코팅하여, 코팅량 프로파일을 산출하고, 코팅 과정 자체의 가능성을 결정하였다. 코팅된 스트립을, 후술하는 RP-HPLC 함량 분석을 이용하는 VEGF 함량에 대한 주사 전자 현미경 사진 (SEM) 및 역상 고압 액체 크로마토그래피 (RP-HPLC)로 분석하였다.

SEM 화상을 관찰한 바, 제제에 의해 형성된 코팅이 마이크로프로젝션 어레이를 통해 균일한 완만한 선단부 코팅된 모르폴러지를 갖는 것을 나타냈다. 또한, 이러한 코팅 제제에 대한 점도 및 접촉각은 화상으로부터, 코팅이 마이크로프로젝션의 샤프트 아래로 지나치게 멀리 습윤되지 않는다는 것이 입증되기 때문에, 허용가능하다. RP 함량 분석의 결과, 1회 코팅 통과 당 코팅량이 6 내지 14회의 통과 영역에서 양호한 직선성을 갖는 것을 알 수 있고, 처음 6회 코팅 이외의 각 통과시에 약 1O ㎍ VEGF가 첨가되었다.

분석법 개발:

고감도 RP-HPLC법을 개발하여, 패치 잔류물 및 저농도 피부 스웝 샘플에 대하여 저 농도 분석을 적응시켜, 시험관 내 및 생체 내 임상전 전달 연구를 지지하였다. 개선된 RP 프로토콜은 작은 좁은 내경을 갖는 분석 컬럼을 사용하여, 주입된 샘플이 큰 내경의 컬럼을 이용하는 것보다 분리시에 덜 희석되기 때문에 방법의 감도를 향상시킨다. 좁은 내경의 컬럼에 최적화된 이동상 구배도 사용하였다. 따라서, 이러한 개선된 방법을 이용하는 신호/노이즈 비가 증가되어, 45 ㎍의 VEGF/어레이와 동일하거나 이것보다 큰 VEGF 코팅량의 분석을 행할 수 있다. 통상적인 분석은 100 ㎍ 이상의 VEGF/어레이를 요하였다. 구체적으로, 아질런트 조박스 (Agilent Zorbax) 2.1 × 150 mm, C3 및 5 ㎛의 좁은 내경 컬럼을 이용하여, RP에 대한 정량 한계는 다른 방법에서 필요한 1.8 ㎍과 비교하여, VEGF에 대하여 0.36 ㎍으로 감소될 수 있다.

이러한 RP 분석, 및 사이즈 배제 크로마토그래피 (SEC) 및 이온 교환 크로마토그래피 (IEC)에 의해 펩티드 순도에 대한 1시간 코팅 과정 후에, 코팅 용액 샘플을 측정하였다. 이들 결과를 코팅된 어레이의 VEGF, 재동결건조된 분말 및 추출물의 대조 샘플과 비교하였다. 상술한 바와 같이, 데이터를 표 1에 재현한다. RP 및 IEC 분석의 결과, 펩티드가 예비 처방, 코팅 또는 최종 추출 과정 시에 화학 분해의 어떠한 사인도 나타내지 않음을 알 수 있었다. SEC 결과는 잠재적으로 처리된 재료, 특히 코팅후 용액에 있어서 약간 높은 이량체 함량을 나타내었다. 그러나, 코팅 과정 또는 분석 전의 샘플 보관시에 응집이 부가적으로 일어나는지는 불분명하다.

코팅 안정성:

상술한 바와 같은 80 ㎍ VEGF로 코팅된 어레이를 5 ㎠ 접착 패치, 리테이너 링으로 조립하고, 질소 퍼징된 포일 파우치에 4Å 분자체의 건조제 3.5 g으로 포장한 후, 고온 (40℃)하에 보관하여, 안정성 및 주요 분해 경로를 측정하였다. 스트레스된 샘플을 T=O, 1주, 2주 및 1개월에서 잡아당겨, RP-HPLC, 음이온 교환 크로마토그래피 (AEC) 및 SEC로 분석하였다. 이들 시스템에 대한 안정성 데이터는 표 2에 요약되어 있다. 보관된 시점으로부터 얻어진 데이터는 제로 시점에서 분석된 샘플 및 제제 원료 표준품과 비교된다. 이들 결과로부터, 40℃의 고온에서도 시간에 대하여 VEGF계 제제로 코팅된 마이크로프로젝션 어레이는 우수한 화학 안정성을 나타내는 것을 알 수 있다.

샘플	RP-HPLC VEGF (㎍/어레이)	AEC	SEC
샘플	RP-HPLC VEGF (㎍/어레이)	순도 (%)
RS 1.82 mg/mL	NA	87.1	99.7
12-1＠T=0	80.2	88.0	99.1
1-1 ＠40C/1주	82.3	87.1	99.5
1-2 ＠40C/1주	78.4	87.7	99.6
1-3 ＠40C/1주	70.9	87.2	99.6
평균	77.2	87.3	99.6
2-1 ＠40C/2주	78.0	87.5	99.5
2-2 ＠40C/2주	76.0	87.3	99.5
2-3 ＠40C/2주	76.1	87.5	99.5
평균	76.7	87.4	99.5
3-1 ＠40C/1개월	96.9	86.8	99.3
3-2 ＠40C/1개월	97.8	86.2	99.3
3-3 ＠40C/1개월	97.8	86.4	99.3
평균	97.5	86.5	99.3

코팅된 어레이를 이용한 VEGF 전달:

상이한 코팅된 어레이 패치를 무모 기니아 피그 (HGP)에 사용하여, 약물 전달의 가능성을 테스트하였다. 구체적으로, 0.29 J 가력 장치 (force applicator)를 이용하여, VEGF 24 ㎍, 42 ㎍ 및 80 ㎍으로 상술한 바와 같이 코팅된 마이크로프로젝션 어레이에 대한 약물 전달의 내성 효율을 평가하기 위해 임상전 시험을 행하였다. 어레이에 남아있는 약물의 양을 측정하기 위해 HGP에 사용된 후에 제거된 어레이에 대하여 잔류 분석을 행하였다. 이들 잔류량을 표 3의 대조군과 비교하여, 전달량을 나타낸다. 관련된 홍반/부종 자국과 함께, 본 시험으로부터, 대부분의 코팅된 VEGF가 심각한 국소 반응 없이 마이크로프로젝션으로부터 HGP 피부로 전달됨을 알 수 있었다.

샘플 ID	잔류물 (㎍/어레이)	잔류물 평균 (㎍/어레이)	대조군 (㎍/어레이)	대조군 평균 (㎍/어레이)
#1, 24 ㎍ 사용	BOL (<1.82 ㎍/어레이)	0.9	27.1	30.7
	2.8		29.1
	0.0		36.0
#2, 42 ㎍ 사용	2.8	4.5	46.2	45.8
	3.7		46.4
	7.0		44.7
#3, 80 ㎍ 사용	10.3	9.7	93.1	94.1
	10.4		97.1
	8.4		92.0

요약하면, 상기 실시예로부터, lO mg/mL로 농축되고, 시트레이트 함량을 줄이도록 투석되며, 3:1 수크로스:VEGF 제제로 동결건조되어, 0.125% 폴리소르베이트 20로 제구성된 VEGF계 제제가 마이크로프로젝션 선단부 코팅 과정에 대한 허용 점도 및 접촉각을 갖는 코팅 용액 0.75 mL를 생성할 수 있음을 알 수 있다. VEGF 약 20 ㎍ 내지 9 ㎍의 양으로 VEGF로 마이크로프로젝션 어레이를 성공적으로 코팅하기 위해 제제를 사용할 수 있다. 본 시험으로부터, 코팅된 VEGF가 원래의 API 용액과 유사한 순도 및 RP-HPLC 프로파일을 갖는 것이 입증되었다. 부가적인 HPLC 시험 (IC, SEC)으로부터, API의 순도가 고온에서의 제형, 코팅 및 보관시에 그대로 존재하는 것으로 측정되었다. 또한, 코팅된 어레이가 약 5 내지 200 ㎍ VEGF/mL의 범위에서 우수한 직선성을 갖는 것으로 측정되었다.

본 발명의 정신과 범위로부터 일탈하는 일없이, 당해 기술분야의 숙련가는 각종 용도 및 조건에 적합하도록 본 발명에 대해 각종 변화와 변경을 행할 수 있다. 이와 같이 해서, 이들 변화와 변경은 적절한 동시에 정당한 것이며, 나아가서는, 이하의 청구의 범위와 등가의 범위 내에 들어가는 것으로 의도하고자 한다.

Claims

환자의 각질층을 피어싱하기에 적합한 다수의 마이크로프로젝션을 갖는 마이크로프로젝션 부재; 및

마이크로프로젝션 부재에 배치되고, 그 위에 배치된 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 코팅 제제로 형성되는 생체 적합성 코팅을 포함하는, VEGF계 제제를 환자에게 경피적으로 전달하기 위한 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 코팅은 다수의 마이크로프로젝션 중 적어도 하나에 배치되는 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 코팅 제제는 수성 제제를 포함하는 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 코팅 제제는 비수성 제제를 포함하는 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염 및 단순 유도체로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 장치.
제 5 항에 있어서, 상기 VEGF 121은 아세테이트, 프로피오네이트, 부티레이 트, 펜타노에이트, 헥사노에이트, 헵타노에이트, 레불리네이트, 염화물, 브롬화물, 시트레이트, 숙시네이트, 말레에이트, 글리콜레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 3-히드록시이소부티레이트, 2-히드록시이소부티레이트, 락테이트, 말레이트, 피루베이트, 푸마레이트, 타르타레이트, 타르트로네이트, 질산염, 인산염, 벤젠술포네이트, 메탄술포네이트, 술페이트 및 술포네이트로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 코팅 제제의 약 1 내지 30 중량%의 범위로 포함되는 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 생체 적합성 코팅의 1 ㎍ 내지 1000 ㎍의 범위로 포함되는 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 코팅 제제의 pH는 약 pH 5.5 이하인 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 코팅 제제의 pH는 약 pH 7.0 이상인 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 코팅 제제는 적어도 하나의 저 휘발성 카운터 이온을 포함하는 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 코팅 제제는 다수의 카운터 이온을 포함하는 장치.
제 9 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 코팅 제제의 pH에서 양전하를 갖고, 상기 코팅 제제는 적어도 하나의 산성 카운터 이온을 포함하는 장치.
제 12 항에 있어서, 상기 다수의 카운터 이온 중 적어도 하나는 제 1 약산을 포함하고, 상기 다수의 카운터 이온 중 적어도 하나는 제 2 비휘발성 약산을 포함하는 장치.
제 12 항에 있어서, 상기 다수의 카운터 이온 중 적어도 하나는 고 휘발성을 갖는 제 2 약산을 포함하는 장치.
제 10 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 코팅 제제의 pH에서 음전하를 갖고, 상기 코팅 제제는 염기를 포함하는 적어도 하나의 제 2 카운터 이온을 포함하는 장치.
제 12 항에 있어서, 상기 다수의 카운터 이온 중 적어도 하나는 제 1 강염기를 포함하고, 상기 다수의 카운터 이온 중 적어도 하나는 제 2 약염기를 포함하는 장치.
제 12 항에 있어서, 상기 다수의 카운터 이온 중 적어도 하나는 제 2 강염기를 포함하고, 상기 다수의 카운터 이온 중 적어도 하나는 제 3 약염기를 포함하는 장치.
제 11 항에 있어서, 상기 코팅 제제에 존재하는 저 휘발성 카운터 이온의 양은 VEGF계 제제의 전하를 중화하는데 충분한 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 VEGF 121을 포함하고, 상기 코팅 제제는 적어도 하나의 점도 증진 카운터 이온을 포함하는 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 코팅 제제는 점도가 약 3 센티포아즈 내지 500 센티포아즈의 범위인 장치.
제 1 항에 있어서, 상기 생체 적합성 코팅의 두께는 약 25 마이크론 미만인 장치.
환자의 각질층을 피어싱하기에 적합한 다수의 마이크로프로젝션을 갖는 마이크로프로젝션 부재; 및

적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖고, 마이크로프로젝션 부재와 연통하는 하이드로겔 제제를 포함하는, VEGF계 제제를 환자에게 경피적으로 전달하기 위한 전달 시스템.
제 23 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 하이드로겔 제제의 약 1 내지 40 중량%의 범위로 포함되는 전달 시스템.
제 23 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염 및 단순 유도체로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 전달 시스템.
제 23 항에 있어서, 상기 하이드로겔 제제는 고분자 네트워크를 갖는 수성 하이드로겔을 포함하는 전달 시스템.
제 23 항에 있어서, 상기 하이드로겔 제제는 라우로암포아세트산나트륨, 도데실황산나트륨 (SDS), 염화세틸피리디늄 (CPC), 도데실트리메틸암모늄클로라이드 (TMAC), 염화벤잘코늄, 폴리소르베이트류, 소르비탄 유도체, 및 알콕시화 알콜류로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 적어도 하나의 계면활성제를 포함하는 전달 시스템.
환자의 각질층을 피어싱하기에 적합한 다수의 마이크로프로젝션을 갖는 마이크로프로젝션 부재;

마이크로프로젝션 부재에 인접하게 배치된 고형 제제; 및

고형 제제와 연통하는 하이드로겔 제제를 포함하는, VEGF계 제제를 환자에게 경피적으로 전달하기 위한 전달 시스템.
제 28 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염 및 단순 유도체로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 전달 시스템.
제 28 항에 있어서, 상기 고형 제제는 적어도 하나의 VEGF계 제제, 폴리머 재료, 가소제, 계면활성제, 및 휘발성 용매를 포함하는 액제를 캐스팅하여 제조되는 고체 필름인 전달 시스템.
제 28 항에 있어서, 상기 고형 제제는 분무 건조, 동결 건조, 분무 동결 건조 및 초임계 유체 추출로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 과정에 의해 형성되는 전달 시스템.
다수의 마이크로프로젝션, 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 포함하는 그 위에 배치된 코팅을 갖는 마이크로프로젝션 부재를 제공하는 단계;

마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부 부위에 사용하여, 다수의 마이크로프로젝션이 각질층을 피어싱하여, VEGF계 제제를 환자에게 전달하는 단계; 및

마이크로프로젝션 부재를 피부 부위로부터 제거하는 단계를 포함하는, VEGF계 제제를 환자에게 경피적으로 전달하기 위한 방법.
제 32 항에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 부재는 5초 내지 24 시간 범위의 기간 동안 피부 부위에 사용한 채로 있는 방법.
제 32 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 생체 적합성 코팅의 약 1 ㎍ 내지 1000 ㎍의 범위로 포함되는 방법.
다수의 마이크로프로젝션을 포함하는 마이크로프로젝션 부재 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩을 갖는 마이크로프로젝션 어셈블리를 제공하는 단계;

마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리를 환자의 피부 부위에 사용하여, 환자의 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하고,

하이드로겔 제제가 겔 팩으로부터 방출되어, 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계; 및

마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리를 피부 부위로부터 제거하는 단계를 포함하는, VEGF계 제제를 환자에게 경피적으로 전달하기 위한 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리는 5분 내지 24 시간 범위의 기간 동안 피부 부위에 사용한 채로 있는 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 부재는 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 생체 적합성 코팅을 포함하는 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리는 5초 내지 24 시간 범위의 기간 동안 피부 부위에 사용한 채로 있는 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염 및 단순 유도체로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 방법.
제 35 항에 있어서, 상기 하이드로겔 제제는 VEGF계 제제를 함유하지 않는 방법.
다수의 마이크로프로젝션을 갖는 마이크로프로젝션 부재, 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩을 갖는 마이크로프로젝션 어셈블리를 제공하는 단계;

마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부 부위에 사용하여, 환자의 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하는 단계;

겔 팩을 마이크로프로젝션 부재 상에 배치하여, 하이드로겔 제제가 겔 팩으로부터 방출되어, 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계; 및

마이크로프로젝션 부재를 피부 부위로부터 제거하는 단계를 포함하는, VEGF계 제제를 환자에게 경피적으로 전달하기 위한 방법.
제 41 항에 있어서, 상기 겔 팩은 릴리스 라이너를 포함하고, 겔 팩을 마이크로프로젝션 부재에 배치하기 전에 릴리스 라이너를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
제 41 항에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 부재-겔 팩 어셈블리는 5분 내지 24 시간 범위의 기간 동안 피부 부위에 사용한 채로 있는 방법.
제 41 항에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 부재는 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 생체 적합성 코팅을 포함하는 방법.
제 41 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염 및 단순 유도체로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 방법.
제 41 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 하이드로겔 제제의 약 0.1 내지 2 중량%의 범위로 포함되는 방법.
다수의 마이크로프로젝션을 포함하는 마이크로프로젝션 부재, 및 적어도 하나의 VEGF계 제제를 갖는 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩을 갖는 마이크로프로젝션 어셈블리를 제공하는 단계;

마이크로프로젝션 부재를 환자의 피부 부위에 사용하여, 환자의 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하는 단계;

마이크로프로젝션 부재를 피부 부위로부터 제거하는 단계;

겔 팩을 전처리된 피부 부위에 배치하여, 하이드로겔 제제가 겔 팩으로부터 방출되어, 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계; 및

겔 팩을 피부 부위로부터 제거하는 단계를 포함하는, VEGF계 제제를 환자에게 경피적으로 전달하기 위한 방법.
제 47 항에 있어서, 상기 겔 팩은 5분 내지 24 시간 범위의 기간 동안 전처리된 피부 부위에 사용한 채로 있는 방법.
제 47 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염 및 단순 유도 체로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 방법.
다수의 마이크로프로젝션을 포함하는 마이크로프로젝션 부재, 하이드로겔 제제를 포함하는 겔 팩, 및 마이크로프로젝션 부재에 인접하게 배치되고 적어도 하나의 VEGF계 제제를 포함하는 고형 제제를 갖는 마이크로프로젝션 어셈블리를 제공하는 단계;

마이크로프로젝션 어셈블리를 환자의 피부 부위에 사용하여, 환자의 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하고, 하이드로겔 제제가 겔 팩으로부터 방출되어, 고형 제제에 함유된 제제가 방출되고, 제제 및 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계; 및

마이크로프로젝션 어셈블리를 피부 부위로부터 제거하는 단계를 포함하는, VEGF계 제제를 환자에게 경피적으로 전달하기 위한 방법.
제 50 항에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 어셈블리는 5분 내지 24 시간 범위의 기간 동안 피부 부위에 사용한 채로 있는 방법.
제 50 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염 및 단순 유도체로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 방법.
다수의 마이크로프로젝션을 포함하는 마이크로프로젝션 부재, 및 마이크로프로젝션에 인접하게 배치되고 적어도 하나의 VEGF계 제제를 포함하는 고형 제제를 갖는 마이크로프로젝션 어셈블리를 제공하는 단계;

하이드로겔 제제를 갖는 겔 팩을 제공하는 단계;

마이크로프로젝션 어셈블리를 환자의 피부 부위에 사용하여, 환자의 각질층에 다수의 마이크로슬릿을 형성하는 단계;

겔 팩을 마이크로프로젝션 어셈블리에 배치하여, 하이드로겔 제제가 겔 팩으로부터 방출되어, 고형 제제에 함유된 제제가 방출되고, 제제 및 하이드로겔 제제가 마이크로프로젝션에 의해 형성된 마이크로슬릿을 통해 이것으로 이동하는 단계; 및

마이크로프로젝션 어셈블리를 피부 부위로부터 제거하는 단계를 포함하는, VEGF계 제제를 환자에게 경피적으로 전달하기 위한 방법.
제 53 항에 있어서, 상기 겔 팩은 릴리스 라이너를 포함하고, 겔 팩을 마이크로프로젝션 어셈블리에 배치하기 전에 릴리스 라이너를 제거하는 단계를 포함하는 방법.
제 53 항에 있어서, 상기 마이크로프로젝션 어셈블리-겔 팩은 5분 내지 24 시간 범위의 기간 동안 피부 부위에 사용한 채로 있는 방법.
제 53 항에 있어서, 상기 VEGF계 제제는 VEGF 206, VEGF 189, VEGF 183, VEGF 165, VEGF 148, VEGF 145 및 VEGF 121의 이소형, 및 이들의 염 및 단순 유도체로 구성되는 그룹 중에서 선택되는 방법.