KR20070034996A

KR20070034996A - 헤파라나제 억제제인 아자당 유도체, 이들의 제조 방법,이들을 함유하는 조성물 및 이들의 용도

Info

Publication number: KR20070034996A
Application number: KR1020067024508A
Authority: KR
Inventors: 피에르 알렉산드르 드리게즈; 모리스 프티투
Original assignee: 사노피-아벤티스
Priority date: 2004-07-23
Filing date: 2005-07-20
Publication date: 2007-03-29
Also published as: ATE525382T1; RU2007106880A; BRPI0511480A; US20070270354A1; AU2005276351A1; CN1956991A; JP2008507496A; EP1773854B1; WO2006021653A2; US20120065153A1; FR2873377B1; NZ552708A; TW200617018A; IL179076A; WO2006021653A3; IL179076A0; UY29030A1; EP1773854A2; AR052768A1; FR2873377A1

Abstract

본 발명은 유리 형태 또는 염기 또는 산으로 형성된 제약상 허용가능한 염의 형태 뿐만 아니라 용매화물 또는 수화물 형태의 화학식 I (여기서, R은 수소 원자, 히드록실 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 -O-아랄킬 라디칼을 나타내고; Z는 COO^- 라디칼 또는 히드록실 라디칼을 나타내고; X는 -OH 또는 화학식 A의 당류 단위를 나타내고; Y는 H, C₁-C₅ 알킬 또는 화학식 D의 당류 단위를 나타냄)의 헤파라나제 억제 화합물에 관한 것이다. 본 발명의 유도체는 약물로서 유용하다.

헤파라나제 억제제, 아자당, 당류, 심혈관 질환, 만성 염증 질환

Description

헤파라나제 억제제인 아자당 유도체, 이들의 제조 방법, 이들을 함유하는 조성물 및 이들의 용도 {Azasugar Derivatives, Heparanase Inhibitors, Method for Preparing Same, Compositions Containing Same, Use Thereof}

본 발명은 헤파라나제 억제제인 아자당 유도체, 이들의 제법, 이들을 함유하는 조성물 및 이들의 치료 용도에 관한 것이다.

헤파라나제는 기질로서 헤파린/헤파란 술페이트 (HS) 족 다당류를 갖는 엔도글루쿠로니다제 유형의 효소이다. 유형 I 및 II 헤파라나제는 문헌 [McKenzie et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., (2000), Vol . 276, p. 1170-1177]에 공지되어 있다. 이들은 구체적으로 D-글루쿠론산 유형의 당류 단위와 D-글루코사민 유형의 당류 단위 사이의 β-1→4 유형 결합을 가수분해하고, 약 10 내지 20개 당류 단위의 HS 단편을 방출한다 (문헌 [Pikas, D.S. et al., J. Biol. Chem., (1998), Vol. 273, p. 18770-18777] 참조). 헤파라나제는 헤파란 술페이트 프로테오글리칸 (HSPG)의 다당류 쇄를 동일한 방식으로 분해한다 (문헌 [Vlokavsky and Friedmann, J. Clin Invest., (2001), Vol . 108, p. 341-347] 참조). HSPG는 선형 HS 쇄가 공유적으로 부착된 중심 단백질로 이루어져 있다 (문헌 [Kjellen et al., Annu. Rev. Biochem., (1991), Vol . 60, p. 443-475] 참조). HSPG는 편재하는 거대분자이다. HS와 같이, HSPG는 수많은 세포 유형의 표면 및 세포외 매트릭스 (ECM)에 존재한다 (문헌 [Kjellen et al., (1991), ibid.; Bernfield et al., Annu Rev. Biochem., (1999), Vol . 68, p. 729-777; David et al., FASEB J., (1993), Vol . 7, p. 1023-1030; Lozzo et al., Annu. Rev. Biochem. (1998), Vol . 67, p. 609-652] 참조). 척추동물 및 무척추동물의 결합 조직의 주요 성분인 ECM은 세포외 환경을 차지한다. 그것은 기관을 둘러싸고, 내피, 특히 혈관 내피를 에워싸며 (문헌 [Wight et al., Arteriosclerosis, (1989), Vol . 9, p. 1-20] 참조), 그 결과 기관 및 내피의 보호를 위한 유지 및 장벽으로서의 역할을 한다 (문헌 [McKenzie et al., Biochem. J.; 2003; Vol . 373, p. 423-435] 참조). 또한, ECM은 각종 세포 메카니즘, 특히 세포 분화 및 수복에 관련된 중요한 조절자이다 (문헌 [Folkman et al., Adv. Exp. Med. Biol., (1992), Vol . 313, p. 355-364] 참조).

헤파라나제 억제 화합물은 종래 기술에서 설명되었다. 예를 들어, 국제특허출원 WO 02/0600374에는 벤즈-1,3-아졸 유도체가 기술되어 있고, 국제특허출원 WO 03/074516은 프탈이미드카르복실산 및 벤즈옥사졸 유도체에 관한 것이며, 국제특허출원 WO 04/013132에는 푸란티아졸 유도체가 기술되어 있고, 또는 국제특허출원 WO 04/046123에는 벤즈옥사졸, 벤조티아졸 및 벤즈이미다졸 유도체가 기술되어 있다.

질소 원자가 제5 위치의 산소 원자를 대체하는 단쇄 (2 단위) 아자당 유도체의 합성은 문헌 [Takahashi et al., Chem. Lett., (1994), Vol . 11, p. 2119; Takahashi et al., Tetrahedron, (2001), Vol . 57, p. 6915-6926]에 기술되었다. 그러나, 이들의 생체내 활성은 확인되지 않았다.

하기 화학식의 단일 단위를 갖는 아자당 유도체는 이미 문헌 [특허 US 6,583,158; Ichikawa et al., J. Amer. Chem. Soc., (1998), Vol . 120, p. 3007)]에 기술되었다.

여전히 양호한 시험관내 및 생체내 활성을 갖는 생성물을 발견하고 개발할 필요가 있다.

현재 놀랍게도, 합성 아자당 유도체가 헤파라나제 억제제로서 양호한 활성을 나타낸다는 것이 밝혀졌다. 따라서, 본 발명은 헤파라나제 억제제인 신규 아자당 유도체에 관한 것이다. 이들 신규 화합물은 양호한 헤파라나제 억제 활성을 나타낸다.

본 발명은 유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염기 또는 산으로 형성된 염의 형태, 및 용매화물 또는 수화물 형태의 하기 화학식 I에 해당하는 화합물에 관한 것이다.

식 중,

R은 수소 원자, 히드록실 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 -O-아랄킬 라디칼을 나타내고;

Z는 COO^- 라디칼 또는 히드록실 라디칼을 나타내고;

X는 히드록실 라디칼 또는 하기 화학식 A의 당류 단위를 나타내고:

식 중,

- R₁은 A가 아자당 단위 또는 또 다른 당류 단위에 결합하는 것을 허용하는 산소 원자를 나타내고,

- R₂는 -NH₂ 라디칼, -NHCO(C₁-C₅)알킬 라디칼, -NHCO아릴 라디칼, -NHSO₃ ^- 라디칼, 히드록실 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼, -O-아랄킬 라디칼 또는 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₃은 히드록실 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 -O-아랄킬 라디칼을 나타내고,

- R₄는 히드록실 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼, -O-아랄킬 라디칼 또는 하기 화학식 B의 당류 단위를 나타내고:

식 중,

- R₆은 B가 화학식 A의 또 다른 당류 단위에 결합하는 것을 허용하는 산소 원자를 나타내고,

- R₇ 및 R₈은 상기에서 정의한 R₃과 동일한 정의를 갖고,

- R₉는 히드록실 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼, -O-아랄킬 라디칼 또는 상기에서 정의한 화학식 A의 당류 단위를 나타내고,

- R₅는 상기에서 정의한 R₃과 동일한 정의를 갖고;

Y는 수소 원자, (C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 하기 화학식 D의 당류 단위를 나타내고:

식 중,

- R₁₀, R₁₂ 및 R₁₃은 각각 상기에서 정의한 R₅, R₃ 및 R₂와 동일한 정의를 갖고,

- R₁₁은

· D가 아자당 단위에 부착하는 것을 허용하는 (C₁-C₃)알킬렌 라디칼을 나타내거나 또는

· D가 또 다른 당류 단위에 부착하는 것을 허용하는 산소 원자를 나타내고,

- R₁₄는 -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 E가 하기 화학식의 라디칼을 나타내는 -O-E 라디칼을 나타내고:

식 중,

- R₁₅는 -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼, -O-아랄킬 라디칼 또는 R₁₁이 산소 원자를 나타내는 화학식 D의 당류 단위를 나타내고,

- R₁₆ 및 R₁₇은 상기에서 정의한 R₃과 동일한 정의를 갖지만,

단, X 및 R 각각이 히드록실 라디칼을 나타내는 경우 Y는 수소 원자를 나타내지 않으며,

화학식 I의 화합물의 구성 당류 단위의 수는 1 내지 10이다.

바람직한 한 면에 따르면, 본 발명은 유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염기 또는 산과의 염의 형태, 및 용매화물 또는 수화물 형태의 하기 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.

<화학식 I>

식 중,

R은 히드록실 라디칼을 나타내고;

Z는 COO^- 라디칼 또는 히드록실 라디칼을 나타내고;

<화학식 A>

식 중,

- R₁은 산소 원자를 나타내고,

- R₂는 -NHCOCH₃ 라디칼, -NHSO₃ ^- 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₃은 히드록실 라디칼 또는 -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼을 나타내고,

- R₄는 히드록실 라디칼 또는 -O-아랄킬 라디칼 또는 하기 화학식 B의 당류 단위를 나타내고:

<화학식 B>

식 중,

- R₆은 산소 원자를 나타내고,

- R₇은 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₈은 히드록실 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 -O-아랄킬 라디칼을 나타내고,

- R₉는 -OSO₃ ^- 라디칼, -O-아랄킬 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 상기에서 정의한 화학식 A의 당류 단위를 나타내고,

- R₅는 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고;

Y는 수소 원자 또는 하기 화학식 D의 당류 단위를 나타내고:

<화학식 D>

식 중,

- R₁₀은 상기에서 정의한 R₅와 동일한 정의를 갖고,

- R₁₂는 히드록실 라디칼 또는 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₁₃은 -NHSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₁₁은 아자당 단위에 연결된 메틸렌 라디칼 또는 E에 연결된 산소 원자를 나타내고,

- R₁₄는 -OCH₃ 라디칼 또는 E가 하기 화학식의 라디칼을 나타내는 화학식 -O-E의 라디칼을 나타내고:

<화학식 E>

식 중,

- R₁₅는 D 단위 (여기서, R₁₁은 E가 D에 연결되는 것을 허용하는 산소 원자를 나타냄)를 나타내고,

- R₁₆은 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₁₇은 히드록실 라디칼을 나타내며,

화학식 I의 화합물의 구성 당류 단위의 수는 2 내지 10이다.

특히 바람직한 화합물은 Y가 수소 원자인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명은 그의 산 형태 또는 그의 제약상 허용가능한 염의 임의의 한 형태인 아자당 유도체를 포함한다. 산 형태에서, -COO^- 및 -SO₃ ^- 관능기는 각각 -COOH 및 -SO₃H 형태이다.

특히 바람직한 한 면에 따르면, 본 발명은 하기 화합물에 관한 것이다:

· (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R)) (제20호 화합물)

· (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R)) (제27호 화합물)

· (나트륨의 3-O-메틸-2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-메틸-2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 3-O-메틸-2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-메틸-2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록 시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R)) (제47호 화합물)

· (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2,6)-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R)) (제69호 화합물)

· (나트륨의 4-O-프로필-2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R)) (제74호 화합물)

· (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(3-(히드록시)-5-히드록시메틸-4-옥시피페리딘 (3R, 4R, 5R)) (제123호 화합물)

· (나트륨의 4-O-페닐프로필-2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨 의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R)) (제124호 화합물).

본 발명의 문맥에서:

- (C₁-C₅)알킬 라디칼은 1 내지 5개의 탄소 원자를 함유할 수 있는 선형 또는 분지형 포화 지방족 라디칼을 나타내며, 예로서, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸 및 tert-부틸 라디칼 등을 언급할 수 있고,

- -O-아랄킬 라디칼은 상기에서 정의한 바와 같지만 그 스스로 치환기를 수반할 수 있는 방향족 라디칼로 치환된 알킬기를 나타내며, 예로서, p-메톡시벤질, 페닐메틸, 페닐에틸 및 페닐프로필 등을 언급할 수 있고,

- (C₁-C₃)알킬렌 라디칼은 1 내지 3개의 탄소 원자를 함유하는 2가 알킬기를 나타낸다.

제약상 허용가능한 염이란 표현은 1개 이상의 -COO^- 및/또는 -SO₃ ^- 관능기가 제약상 허용가능한 양이온에 이온결합되는 아자당 유도체인 본 발명의 아자당 유도체를 의미하는 것으로 해석된다. 본 발명에 따른 바람직한 염은 그의 양이온이 알칼리 금속 양이온으로부터 선택되는 것이고, 더욱 더 바람직하게는 그의 양이온이 Na⁺ 또는 K⁺인 것이다.

원칙적으로, 본 발명에 따른 화합물의 제조 방법은 문헌에 먼저 기록된 바와 같이 제조되고, 특히 보호기의 직교성을 고려하여 선택된 단당류, 이당류 또는 올 리고당류 모 합성단위체 (synthon)를 사용한다. 특히, EP 300099, EP 529715, EP 621282 및 EP 649854 및 문헌 [C. van Boeckel, M. Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., (1993), Vol . 32, p. 1671-1690]을 참조할 수 있다. 이어서, 이들 합성단위체는 서로 커플링되어 본 발명에 따른 화합물의 완전히 보호된 등가물을 제공한다. 이어서, 상기 보호된 등가물은 당업자에게 널리 공지된 방법을 사용하여 본 발명에 따른 화합물로 전환된다.

본 발명의 화합물이 아자당 (또는 치환된 피페리딘) 단위를 추가로 함유할 경우, 이들의 합성은 이후 단당류, 이당류 또는 올리고당류에 커플링하기 적합한 보호기를 수반하는 상기 단위의 전구체의 제조를 필요로 한다. 아자당 전구체는 문헌에 기술된 방법에 따라 제조된다. 특히 문헌 ["Iminosugars as Glycosidase Inhibitors", AE Stuetz, Wiley-VCH, 1999]을 참조할 수 있다.

쇄 집합에 필요한 합성단위체가 이용가능할 경우, 이들 합성단위체 서로의 커플링이 수행된다. 언급된 커플링 반응에서, 그의 아노머성 탄소에 대해 활성화된 "공여체" 합성단위체는 1개 이상의 유리 히드록실을 갖는 "수용체" 합성단위체와 반응한다.

본 발명은 제1 단계로, 목적하는 화합물 I의 완전히 보호된 등가물이 제조되고; 제2 단계로, 음전하기 (카르복실레이트, 술포네이트) 및 유리 히드록실이 도입되고/되거나 드러나는 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

전구체의 합성은 특히 당류 합성 방법 (문헌 [G.J. Boons, Tetrahedron, (1996), Vol . 52, p. 1095-1121; WO 98/03554 및 WO 99/36443] 참조)을 사용하여 당업자에게 널리 공지된 반응, 즉 글리코시드 결합 공여체 올리고당류가 글리코시드 결합 수용체 올리고당류와 커플링되어 그 크기가 두 반응종 크기의 합과 동일한 또 다른 올리고당류를 제공하는 반응에 따라 수행된다. 상기 순서는 목적하는 화학식 I의 화합물이 수득될 때까지 반복된다. 목적하는 최종 화합물의 구조는 각종 합성 단계에서 사용되는 화학물질의 성질을 결정하여, 당업자에게 널리 공지된 규칙에 따른 입체화학 및 위치선택성을 제어한다.

본 발명에 따른 화합물은 일반적으로 하기 반응 순서를 사용하여 그들의 완전히 보호된 다당류 전구체로부터 수득된다:

- N- 및/또는 O-술포네이트기로 전환되어야 하는 관능기의 방출 및 치환;

- 예를 들어, 환원성 아미노화 반응에 의한 기타 관능기의 방출 및 단편 서로의 임의적인 집합.

카르복실산 관능기의 방출은 상기 방법의 각종 단계에서 수행될 수 있다.

본 발명의 화합물은 당연히 당류 및 유기 합성 분야의 당업자에게 공지된 각종 전략을 사용하여 제조될 수 있다.

상기한 방법은 본 발명의 바람직한 방법이다. 그러나, 화학식 I의 화합물은 예를 들어, 문헌 ["Monosaccharides, Their chemistry and their roles in natural products", P.M. Collins and R.J. Ferrier, J. Wiley ＆ Sons, 1995; G.J. Boons, Tetrahedron, (1996), Vol . 52, p. 1095-1121]에 기술된 당 화학에 널리 공지된 기타 방법으로 제조될 수 있다.

화합물 I의 제조 방법에 사용된 보호기는 당 화학, 예를 들어, 문헌 [Protective Groups in Organic Synthesis, TW Greene, PGM Wuts, John Wiley ＆ Sons, New York, 1999]에서 통상적으로 사용된 것이다.

보호기는 예를 들어, 아세틸, 할로메틸, 벤조일, 레불리닐, 벤질, 치환된 벤질, 임의로는 치환된 트리틸, 카르바메이트, 테트라히드로피라닐, 알릴, 펜테닐, tert-부틸디메틸실릴 (tBDMS) 또는 트리메틸실릴에틸 기로부터 유리하게 선택된다.

활성화기는 예를 들어, 문헌 [G.J. Boons, Tetrahedron, (1996), Vol . 52, p. 1095-1121]에 따른 당 화학에서 전형적으로 사용된 것이다. 이들 활성화기는 예를 들어, 이미데이트, 티오글리코시드, 펜테닐글리코시드, 크산테이트, 포스파이트 또는 할라이드로부터 선택된다.

상기한 방법은 염 형태의 본 발명 화합물을 수득할 수 있게 한다. 해당 산을 수득하기 위해, 염 형태의 본 발명 화합물은 산 형태의 양이온 교환 수지와 접촉하게 된다.

이어서, 산 형태의 본 발명 화합물은 목적하는 염을 수득하기 위해 염기로 중화될 수 있다. 화학식 I의 화합물의 염을 제조하기 위해, 화학식 I의 화합물의 제약상 허용가능한 염을 제공하는 임의의 무기 또는 유기 염기를 사용할 수 있다. 수산화나트륨, 칼륨, 칼슘 또는 마그네슘이 염기로서 바람직하게 사용된다. 화학식 I의 화합물의 나트륨 및 칼슘 염이 바람직한 염이다.

본 발명에 따른 화합물은 생화학 및 약물학 연구의 주제였다. 하기 비제한적인 시험은 본 발명을 예시한다.

하기 용어는 다음과 같이 정의된다:

PET: 폴리에틸렌 테레프탈레이트,

AM: 아세톡시메틸,

DMEM: 둘베코 개질 이글 배지 (Dulbecco's modified EaglEs medium),

EDTA: 에틸렌디아민테트라아세트산,

Tris: 트리스(히드록시메틸)아미노메탄,

AT: 항트롬빈 III,

nkat: 나노카탈 = 단위 시간 당 촉매되는 기질량을 나타내는 효소의 측정 단위 (제조자에 의해 주어짐).

1. 효소계에서의 헤파라나제 억제제 활성의 평가 (본 발명에 따른 화합물의 IC ₅₀ 값 결정)

헤파라나제 활성을 그의 폰다파리눅스 (fondaparinux) 분해력으로 증명하였다. 폰다파리눅스의 농도를 그의 항-인자 Xa 활성을 이용하여 측정하였다.

A. 물질 및 방법

헤파라나제는 사노피-신데라보 (Sanofi-Synthelabo) (프랑스 라베지 소재)에서 생산된다. 인자 Xa 분석용 시약은 크로모제닉스 (Chromogenix) (프랑스 몽펠리에 소재)에서 시판된다.

헤파라나제 억제제인 본 발명에 따른 화합물의 증가하는 농축액 (다양한 희석액: 1 nM 내지 10 μM)을 고정된 헤파라나제 농도에서 혼합하였다 (각 배치에 대 한 예비 실험으로 첨가된 폰다파리눅스 0.45 ㎍/ml을 분해하기에 충분한 효소 활성을 결정할 수 있었다). 37℃에서 5분 후, 혼합물을 폰다파리눅스에 노출시키고, 37℃에서 1시간 동안 두었다. 반응을 95℃에서 5분 동안 가열함으로써 중단시켰다. 잔류 폰다파리눅스 농도를 인자 Xa와 그의 특정 발색성 기질 (참조: S2222)을 첨가하여 최종적으로 측정하였다.

각종 혼합물을 하기 절차에 따라 제조하였다:

a) 반응 혼합물

아세트산나트륨 완충액 (0.2 M, pH 4.2) 50 ㎕를 폰다파리눅스 (0.45 ㎍/ml) 50 ㎕ 및 헤파라나제 용액 59 ㎕와 혼합하였다. 혼합물을 37℃에서 1시간 동안에 이어 95℃에서 5분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 반응 혼합물 100 ㎕를 pH 14의 175 mM NaCl, 75 mM EDTA를 함유하는 50 mM 트리스 완충액 50 ㎕와 혼합하였다. 그 결과 pH는 4.2에서 7로 변하였다.

폰다파리눅스의 항-인자 Xa 활성을 하기 방식으로 측정하였다:

b) 폰다파리눅스의 항-인자 Xa 활성 분석

단계 a)에서 수득한 용액 100 ㎕를 AT (0.5 μ/ml) 100 ㎕와 혼합하였다. 혼합물을 37℃에서 2분 동안 유지시키고, 이어서 인자 Xa (7 nkat/ml) 100 ㎕를 첨가하였다. 혼합물을 37℃에서 2분 동안 유지시키고, 이어서 발생성 기질 (참조: S2222) 100 ㎕를 첨가하였다. 혼합물을 37℃에서 2분 동안 유지시키고, 이어서 아세트산 (50％) 100 ㎕를 첨가하였다.

광학 밀도를 405 nm에서 판독하였다.

억제 백분율을 억제제 없는 대조군에 대하여 결정하였다. 억제 백분율의 곡선으로 IC₅₀을 계산할 수 있었다.

B. 결과

본 발명에 따른 화합물의 IC₅₀ 값은 10 nM 내지 10 μM이었다.

예를 들어, 제27호 화합물의 IC₅₀ 값은 11±4 nM (두 분석에서 수행된 평균±SD)이었다.

2. HT1080 종양 세포의 침입에 대한 헤파라나제 억제제의 효과

헤파라나제 억제제인 화학식 I의 화합물의 효과를 HT1080 종양 세포의 침임에 대해 시험관내 시험하였다.

A. 물질 및 방법

a) 세포 배양

인간 섬유육종으로부터 유도된 세포 HT1080 (ATCC CCL-121)을 콜라겐 코팅된 플라스크 (벡톤 디킨손 (Becton Dickinson) 75 ㎠; 참조: 354523)상의 5％ 소태아 혈청, 글루타민 (2 mM) (참조: 기브코 (GIBCO) 25030-024), 피루빈산나트륨 (1 mM) (참조: 기브코 11360-039) 및 비필수 아미노산 (1X) (참조: 기브코 11140-035)을 함유하는 DMEM 배지 (참조: 기브코 11960-044)에서 50 내지 80％ 컨플루언스 (confluence)로 배양하였다.

b) 세포 침입 시험

HT1080 세포 침입의 측정을 24-웰 플레이트의 벡톤 디킨손 팔콘 HTS 플루오 로블록 멀티웰 인서트 시스템 키트 (Becton Dickinson falcon HTS Fluoroblock Multiwell Insert System kit) (참조: 351158) 상에서 수행하였다. 이들 측정 챔버는 시험관내에서 세포의 침임 특성을 평가할 수 있는 조건을 세포에 제공하였다.

키트는 균일한 매트리겔 매트릭스 (Matrigel Matrix) (벡톤 디킨손; 참조: 354230) 층이 침착되고 8 미크론의 기공이 뚫려있는 PET 막을 함유하는 배양 삽입물과 조합된 플레이트로 구성되어 있었다.

매트리겔은 그의 조성으로 인해 고화시 기저 막과 동등한 구조를 형성하는 EHS (Engelbreth-Holm-Swarm) 종양으로부터 추출된 용해성 기저막이다.

메트리겔 층은 막의 기공을 차단하고, 그 결과 막을 가로지르는 비침임 세포의 이동을 차단한다. 반대로, 침입 (종양 또는 비종양) 세포는 막을 가로질러 이동하기 전에 분리되어 매트리겔 층을 침입할 수 있을 것이다.

세포 이동의 정량화를 칼세인 AM (몰레큘러 프로브즈 (Molecular Probes) C-3100)으로 표지하여 수행하였다. 방출된 형광 신호를 퍼킨 엘머 왈락 빅토르 3 판독기 (Perkin Elmer Wallac VICTOR 3 reader)를 이용하여 측정하였고, 이는 매트리겔 겔에 침입한 세포 수와 직접적으로 상관될 수 있었다. 이들을 연구된 생성물로 동일한 실험에서 제조된 대조군과 비교 (0％ 및 5％의 소태아 혈청 존재하에서의 반응)함으로써, 생성물 존재하에서의 세포 침입의 억제 백분율을 결정할 수 있었다.

B. 결과

일련의 독립적인 결정 (2 내지 4로 다양함)은 1 nM 내지 10 μM의 농도의 본 발명에 따른 화합물이 평균 8 내지 60％의 백분율로 세포 침입을 억제함을 보여줄 수 있었다.

예를 들어, 일련의 4개의 독립적인 결정은 10 μM의 제20호 화합물이 평균 40.3±8.3％ (평균±표준편차)와 같은 백분율로 세포 침입을 억제함을 보여줄 수 있었다.

또한, 제20호 화합물은 세포 침입에 대해 용량-의존성 효과를 가졌다.

실제로:

- 0.3 μM 농도의 제20호 화합물은 26±3％로 세포 침입을 억제하였고,

- 1 μM 농도의 제20호 화합물은 53±11％로 세포 침입을 억제하였다.

상기 결과는 제20호 화합물 용량의 기능으로서 세포 침입의 억제가 증가함을 증명한다.

따라서, 본 발명에 따른 화학식 I의 화합물은 헤파라나제에 대한 양호한 친화성을 나타내고, 헤파라나제 억제 효과를 나타낸다.

동물 및 인간에서 헤파라나제 분비의 증가와 암 진행이 상관된다는 것이 증명되었다 (문헌 [Goldschmit et al., PNAS, (2002), Vol . 99(15), p. 10031-10036] 참조). 예를 들어, 높은 헤파라나제 수준이 전이성 종양을 가진 동물의 혈청에서 (문헌 [Vlodavsky et al., Isr. J. Med. Sci. (1988), Vol . 24(9-10), p. 464-470] 참조) 또는 수많은 전이를 발전시키는 암으로 고통받는 환자의 소변에서 (문헌 [Vlodavsky et al., Curr. Biol., (1997), Vol . 7(1), p. 43-51] 참조) 감지되었다. 종양 생검은 동일한 상관관계를 보여주었다 (문헌 [Vlodavsky et al., Isr. J. Med. Sci., (1988), Vol . 24(9-10), p. 464-470] 참조). 따라서, 헤파라나제 분비의 증가와 종양 세포의 전이 잠재성 사이에 상관관계가 존재한다 (문헌 [Vlodavsky et al., Invasion Metastasis, (1994), Vol . 14, p. 290-302; Nature Medicine, (1999), Vol . 5, p. 793-802] 참조).

종양 세포에 의해 분비되는 헤파라나제는 ECM의 주요 성분인 HSPG 및 HS를 분해시킨다. 그 결과 관통된 ECM은 종양 및 전이 세포가 순환하는 것을 허용하고, 또한 새롭게 형성된 혈관 (혈관신생)의 침입을 허용한다 (문헌 [Suzanne A. Eccles, Nat. Med., (1999), Vol . 5(7), p. 793-809] 참조). 혈관신생은 이전에 존재하는 혈관으로부터 또는 골수 세포의 동원 및 분화에 의해 새로운 모세혈관을 생성하는 과정이다. 따라서, 내피 세포의 제어되지 않은 증식 및 골수로부터의 혈관아세포 동원 모두가 종양의 새로운 혈관화 과정에서 관찰된다.

따라서, 헤파라나제는 암 세포의 침입 및 한편으로는 전이화, 다른 한편으로는 혈관신생 과정의 억제를 목적으로 하는 요법을 위한 적절한 표적물을 나타낸다. 암 (또는 암종)이란 표현은 피부뿐만 아니라 특히 기관 벽에 존재하는 상피의 임의의 악성 세포 성장, 및 전이성 종양 세포, 예를 들어 흑색종, 중피종, 림프종, 백혈병, 섬유육종, 횡문근육종, 비대세포종뿐만 아니라 대장, 직장, 전립선, 폐, 유방, 췌장, 소장, 신장, 난소, 자궁, 경부, 방광, 간 및 위와 같은 조직에 영향을 미치는 암종의 출현을 의미하는 것으로 해석된다. 암종은 인접 조직을 침투하고 다른 먼 기관, 예를 들어 간, 폐, 뇌 또는 뼈로 퍼진다 (전이한다). 따라서, 본 발명의 화합물과 같이 헤파라나제 억제 활성을 갖는 화합물은 상기 암 (문헌 [Fang J et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, (2000), Vol . 97(8), p. 3884-3889; Kondraganti et al., Cancer Res., (2000), Vol . 60(24), p. 6851-6855] 참조), 및 특히 대장직장, 전립선, 폐, 유방, 췌장, 신장, 방광 및 난소 암의 치료에 유용할 수 있다.

뉴로트로핀 (NT) 족 분자에 대한 수용체인 p75 수용체는 뇌에서의 전이화 현상의 대표적인 표지로서 확인되었다. 또한, NT 분비는 헤파라나제 분비의 증가와 관련된다는 것이 증명되었다 (문헌 [Marchetti D. et al., J. Cell. Biochem., (2004), Vol . 91(1), p. 206-215] 참조). 따라서, 본 발명의 화합물과 같이 헤파라나제 억제 활성을 갖는 화합물은 중주신경계에서 p75 수용체의 활성화 작용을 억제함으로써 전이화를 감소시키는데 유용할 수 있다 (문헌 [Marchetti D. et al., Pathol. Oncol. Res., (2003) Vol . 9(3), p. 147-158 and Epub, (2003), Review; Walch ET. et al., Int. J. Cancer, (1999), Vol . 82(1), p. 112-120; Menter DG. et al., Invasion Metastasis, (1994-95), Vol . 14(1-6), p. 372-384; Marchetti D. et al., Int. J. Cancer, (1993), Vol . 55(4), p. 692-699] 참조).

또한, ECM의 HSPG에 대한 헤파라나제의 활성은 염증 및 자가면역 반응의 개시와 상관되는 것처럼 보인다 (문헌 [Vlodavsky et al., Invasion metastasis, (1994), Vol . 4, p. 290-302; Goldschmit et al., Med. Sci. (2002), Vol . 99(15), p. 10031-10036] 참조). 혈소판, 과립구, B 및 T 림프구, 대식세포 및 비대세포와 ECM의 상호작용은 헤파라나제에 의한 HS 분해와 관련된다 (문헌 [Vlodavsky et al., Invasion Metastasis, (1992), Vol . 12, p. 112-127] 참조). 따라서, 본 발 명의 화합물과 같이 헤파라나제 억제 활성을 갖는 화합물은 염증 질환, 특히 만성 염증 질환, 예를 들어 류마티스성 관절염 또는 두 가지 형태의 만성 염증성 장질환, 즉 UC (궤양성 대장염) 및 크론병 (CD)를 포함하는 IBD (염증성 장질환) 또는 자가면역 질환을 치료하는데 유용할 수 있다.

기타 연구는 헤파라나제가 심혈관 질환의 치료 역할을 할 수 있다고 제시하고 (문헌 [Journal of Pharmacological Sciences, (2004), 94, No. Supplement 1, pp. 160P, print.; Meeting Info.: 77th Annual Meeting of the Japanese Pharmacological Society, Osaka, Japan. March 08-10, 2004. Japanese Pharmacological Society; Miller, Heather Ann, Diss. Abstr. Int., (1984), B 2003, 64(5); Demir et al., Clin. Appl. Thromb. Hemost., (2001), Vol . 7(2), p. 131-140] 참조), 그 예로는 혈관성형술 후의 재협착, 당뇨병성 망막증과 같은 당뇨병의 혈관 합병증에 관련된 질환, 죽상동맥경화 (문헌 [Atherosclerosis, (1999), Vol . 145, p. 97-106; J. Clin. Invest., (1997), Vol . 100, p. 867-874] 참조) 또는 혈전색전성 질환 및 동맥 혈전증이 있다. 따라서, 본 발명에 따른 헤파라나제 억제 화합물은 이들 병리에서 선택 요법을 나타낼 수 있다.

또한, 헤파라나제는 신장 여과 및 재흡수 기능이 손상될 수 있는 특정한 신장 기능부전의 경우와 관련된 것으로 공지된다 (문헌 [FASEB J, (2004), Vol . 18, p. 252-263] 참조). 따라서, 본 발명에 따른 헤파라나제 억제 화합물은 이러한 병리에서의 선택 요법을 나타낼 수 있다.

또한, ECM의 HSPG는 성장 인자, 특히 FGF (섬유아세포 성장 인자)의 조절을 통해 세포 성장 및 활성화의 주요 조절자로서의 역할을 하는 것처럼 보인다. 예를 들어, 헤파라나제 활성은 특히 혈관신생을 자극하고, 종양 진행을 촉진하는 FGF와 같은 성장 인자의 방출과 관련된다 (문헌 [Bashkin et al., Biochemistry, (1989), Vol . 28, p. 1737-1743] 참조). 따라서, 헤파라나제는 FCF와 관련된 질환의 치료를 위한 적절한 표적물을 나타낸다.

일반적으로, FGF는 자가분비, 측분비 또는 죽스타크린 (juxtacrine) 분비를 통해 암 세포 성장 자극의 규제해제 현상에 상당한 정도 관련된다. 또한, FGF는 종양 성장과 또한 전이화 현상 모두에 대해 우세한 역할을 하는 종양 혈관신생을 개시한다.

혈관신생은 이전에 존재하는 혈관으로부터 또는 골수 세포의 동원 및 분화에 의해 새로운 모세혈관을 생성하는 과정이다. 따라서, 내피 세포의 제어되지 않은 증식 및 골수로부터의 혈관아세포 동원 모두가 종양의 신혈관화 과정에서 관찰된다. 시험관내 및 생체내에서 여러 성장 인자, 특히 FGF 1 또는 a-FGF 및 FGF 2 또는 b-FGF가 내피 증식을 자극하는 것으로 나타났다.

a-FGF 및 b-FGF는 예를 들어 전립선 세포의 성장 및 유지에 중요한 역할을 한다 (문헌 [Doll JA, et al., Prostate, (2001), Vol . 305, p. 49-293] 참조).

여러 연구는 a-FGF와 b-FGF 및 이들의 수용체 (FGFR)가 인간 유방 종양주 (특히 MCF7) 및 종양 생체조직 모두에 존재함을 보여준다.

신경교종 세포는 시험관내 및 생체내에서 a-FGF 및 b-FGF를 생성하고 그의 표면에 각종 FGF 수용체를 갖는다.

보다 최근에는, 백혈병 및 림프종에서 전혈관신생제, 특히 FGF의 잠재적인 역할이 기록되었다 (문헌 [Thomas DA et al., Acta Haematol, (2001), Vol . 207, p. 106-190] 참조).

CML (만성 골수단구성 백혈병)에서 골수 혈관신생 과정과 골수외 질환 사이의 상관관계가 존재한다.

혈관 평활근 세포의 증식 및 이동은 동맥의 내막 비대의 원인이 되고, 그 결과 죽상동맥경화 및 혈관성형술과 동맥내막절제술 후의 재협착에 우세한 역할을 한다. 생체내 연구는 풍선 손상 (balloon injury)에 의한 경동맥의 손상 후 a-FGF 및 b-FGF의 국소적 생성을 보여준다.

당뇨병에 기인한 혈관 장애는 혈관 반응성 및 혈류의 손상, 과투과성, 증가된 증식 반응 및 매트릭스 단백질 침착의 증가를 특징으로 한다. 더욱 자세하게, a-FGF 및 b-FGF는 당뇨병성 망막증을 가진 환자의 망막전 막, 근원 모세혈관의 막 및 증식성 망막증으로 고통받는 환자의 유리체액에 존재한다.

류마티스성 관절염 (RA)은 병인이 알려지지 않은 만성 질환이다. 이는 수많은 기관에 영향을 미치지만, 대부분 심각한 형태의 RA는 파괴를 야기하는 관절의 진행성 활액 염증이다. 혈관신생은 이러한 병리의 진행에 대단히 영향을 미치는 것처럼 보인다. 따라서, a-FGF 및 b-FGF는 RA로 고통받는 환자의 활액 조직 및 관절액에서 감지되었고, 이는 상기 성장 인자가 이러한 병리의 개시 및/또는 진행과 관련되어 있음을 나타낸다. 래트에서의 AIA 모델 (관절염의 보조제-유도성 모델)은 b-FGF의 과발현이 질환의 심각성을 증가시키는 반면 항체를 중화시키는 항 b- FGF는 RA의 진행을 차단하는 것을 보여주었다 (문헌 [Yamashita et al., J. Immunol., (2002), Vol . 57, p. 168-450; Manabe et al., Rheumatol, (1999), Vol. 20, p. 38-714] 참조).

또한, 혈관신생 및 염증은 통증을 수반하는 관절 파괴를 유도하는 골관절염과 관련된 과정 중에 발생하는 주요 현상이다. 또한, 혈관신생은 연골의 비대 및 골화 역할을 하여 관절 변형의 원인이 될 수 있다 (문헌 [Bonnet CS et al., Rheumatology. (1) 7-16 2005] 참조).

IBD (염증성 장질환)는 두 가지 형태의 만성 염증성 장질환, 즉 UC (궤양성 대장염) 및 크론병 (CD)를 포함한다. IBD는 면역 기능장애로 인해 염증성 시토카인의 부적절한 생성을 야기하여 국소적 미세혈관계의 확립을 유도하는 하는 것이 특징이다. 이러한 염증 발단의 혈관신생의 결과는 혈관수축에 의해 유도되는 장 국소빈혈이다. 고순환 및 국소적 b-FGF 수준은 이들 병리로 고통받는 환자에서 측정되었다 (문헌 [Kanazawa et al., American Journal of Gastroenterology, (2001), Vol . 28, p. 96-822; Thorn et al., Scandinavian Journal of Gastroenterology, (2000), Vol . 12, p. 35-408] 참조).

따라서, 본 발명의 화합물과 같이 헤파라나제 억제 활성을 갖는 화합물은 FGF 및/또는 그의 수용체의 상향조절에 관련된 질환의 치료에 유용할 수 있다.

그의 낮은 독성과 그의 약물 및 생물 특성으로 인해, 본 발명의 화합물은 고도로 혈관화되거나 (폐, 유방, 전립선, 식도) 또는 전이를 유도하거나 (대장, 위, 흑색종) 또는 자가분비 방식 또는 마지막으로 림프종 및 백혈병 유형의 병리 중 a- FGF 또는 b-FGF에 감응하는 임의의 암종의 치료에서 그 용도를 발견한다. 이들 화합물은 단독으로, 또는 적합한 화학요법이나 방사선요법과 조합되거나 또는 항혈관신생제의 처리와 조합되는 선택 요법을 나타낸다. 또한, 본 발명에 따른 화합물은 죽상동맥경화, 혈관성형술 후의 재협착과 같은 심혈관 질환의 치료, 혈관내 인공삽입물의 장착 및/또는 관상동맥 우회로 수술 후에 나타나는 합병증 또는 당뇨병성 망막증과 같은 당뇨병의 혈관 합병증과 관련된 질환의 치료에서 그 용도를 발견한다. 또한, 본 발명의 화합물은 류마티스성 관절염 또는 IBD와 같은 만성 염증 질환의 치료에서 그 용도를 발견한다.

또한, 본 발명에 따른 생성물은 황반변성의 치료에서 그 용도를 발견한다. 성인에서의 시력 상실의 주요 특징은 신혈관화 및 이후 눈에 상당한 기능 장애를 일으키고 초기 실명을 야기하는 출혈이다. 최근에, 눈의 신혈관화 현상과 관련된 메카니즘의 연구가 상기 병리에서 전혈관신생 인자의 관련성을 증명할 수 있게 하였다.

또한, 본 발명의 화합물은 외과수술 치료, 방사선요법과 같은 하나 이상의 항암 치료와 조합되거나 또는 혈관신생을 차단하는 화합물과 조합되어 사용될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 암 치료를 위해, 단독으로, 또는 또 다른 활성 성분, 예를 들어 시스플라틴, 시클로포스파미드, 메토트렉세이트, 5-플루오로우라실, 파클리탁셀, 도세탁셀, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 비노렐빈, 독소루비신, 타목시펜, 토레미펜, 메게스트롤 아세테이트, 아나스트로졸, 고세렐린, 카페시타빈 및 랄록시펜 또는 항혈관신생 활성을 갖는 분자와 조합되어 사용될 수 있다.

따라서, 또 다른 면에 따르면, 본 발명의 주제는 활성 성분으로서 유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염기 또는 산으로 형성된 염 형태의 화학식 I의 화합물을, 본 발명에 따라 임의로는 1종 이상의 불활성이며 적절한 부형제와 함께 함유하는 제약 조성물이다.

상기 부형제는 목적하는 제약 투여 형태 및 투여 방식에 따라 선택된다: 경구, 혀밑, 피하, 근육내, 정맥내, 경피, 경점막, 국소 또는 직장.

각 투여 단위에서, 활성 성분은 목적하는 예방 또는 치료 효과를 획득하기 위해 예상되는 매일의 용량에 대해 적절한 양으로 존재한다. 각 투여 단위는 활성 성분 0.1 내지 100 mg, 바람직하게는 0.5 내지 50 mg을 함유할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 경구, 혀밑, 피하, 근육내, 정맥내, 기관내, 국부, 비내, 경피, 직장, 안구내 및 질 투여를 위해 의도될 수 있다. 투여를 위한 단위 형태는 예를 들어 정제, 젤라틴 캡슐, 과립, 분말, 경구 또는 주사용 용액 또는 현탁액, 패취, 주사기 펜 및 좌약일 수 있다. 국소 투여용으로, 연고, 크림, 로션, 눈물액, 겔, 분무액 및 오일이 예상될 수 있다.

상기 투여 형태는 사용된 갈레노스파 (galenic) 형태에 따라 체중 kg 당 활성 성분 1 내지 100 mg을 매일 투여할 수 있는 용량을 함유한다.

정제를 제조하기 위해, 희석제, 예를 들어 락토스, 미결정질 셀룰로스 및 전분, 제제화 보조제, 예를 들어 결합제 (폴리비닐피롤리돈 및 히드록시프로필메틸셀룰로스 등), 유동화제, 예를 들어 실리카, 및 윤활제, 예를 들어 스테아르산마그네슘, 스테아르산, 글리세릴 트리베헤네이트 및 스테아릴푸마르산나트륨으로 구성될 수 있는 제약 비히클을 활성 성분에 첨가하고, 미분화거나 하지 않는다. 또한, 습윤제 또는 계면활성제, 예를 들어 소듐 라우릴 술페이트를 첨가할 수 있다.

생산 기술은 직타식, 건조과립식, 습식과립식 또는 고온-용융식일 수 있다.

정제는 코팅되지 않거나, 예를 들어 수크로스로 코팅되거나, 또는 각종 중합체 또는 기타 적절한 물질로 코팅될 수 있다. 이들은 코팅에 사용된 중합체 매트릭스 또는 특정 중합체에 의해 활성 성분의 급속한, 지연된 또는 연장된 방출을 허용하도록 디자인될 수 있다.

젤라틴 캡슐을 제조하기 위해, 활성 성분은 건조 제약 비히클 (단순 혼합물, 건조 또는 습식 과립, 또는 고온-용융물), 액체 제약 비히클 또는 반고체 제약 비히클과 혼합된다.

젤라틴 캡슐은 급속한, 연장된 또는 지연된 활성 (예를 들어, 장용성 형태)을 갖기 위해 경질 또는 연질, 필름코팅된 것 또는 되지 않은 것일 수 있다.

시럽이나 엘릭서제 형태 또는 액적 형태 투여용 조성물은 활성 성분과 함께 감미제, 바람직하게는 칼로리 없는 감미제, 방부제로서의 메틸파라벤 또는 프로필파라벤, 타액 개질제 및 착색제를 함유할 수 있다.

수분산성 분말 및 과립은 분산제 또는 습윤제, 또는 폴리비닐피롤리돈과 같은 분산제와의 혼합물, 및 감미제 및 맛 교정제와의 혼합물 형태로 활성 성분을 함유할 수 있다.

직장 투여를 위해, 직장 온도에서 용융되는 결합제, 예를 들어 코코아 버터 또는 폴리에틸렌 글리콜로 제조된 좌약이 사용된다.

비경구 투여를 위해, 제약 적합성 분산제 및/또는 습윤제, 예를 들어 프로필렌 글리콜 또는 부틸렌 글리콜을 함유하는 수성 현탁액, 등장성 염 용액 또는 주사용 무균 용액이 사용된다.

또한, 활성 성분은 마이크로캡슐의 형태로, 임의로는 1종 이상의 담체 또는 첨가제와 함께, 또는 중합체 매트릭스나 시클로덱스트린과 함께 (패취, 연장된 방출 형태) 제제화될 수 있다.

본 발명에 따른 국소 투여용 조성물은 피부 적합성 배지를 포함한다. 그들은 특히 수성, 알콜 또는 수성-알콜 용액, 겔, 크림이나 겔의 외관을 갖는 유중수형 또는 수중유형 에멀젼, 마이크로에멀젼, 에어로졸의 형태로, 또는 심지어 이온 및/또는 비이온 지질을 함유하는 소포성 분산액의 형태로 제공될 수 있다. 이들 갈레노스파 형태는 고찰된 분야의 관습법에 따라 제조된다.

본 발명에 따른 국소 조성물은 피부 적합성 배지를 포함한다. 그들은 특히 수성, 알콜 또는 수성-알콜 용액, 겔, 크림이나 겔의 외관을 갖는 유중수형 또는 수중유형 에멀젼, 마이크로에멀젼, 에어로졸의 형태로, 또는 이온 및/또는 비이온 지질을 함유하는 소포성 현탁액의 형태로 제공될 수 있다. 이들 갈레노스파 형태는 고찰된 분야의 관습법에 따라 제조된다.

제한 없이 주어진 하기 실시예에서 본 발명에 따른 화합물의 제법을 예시하였다.

본문에 사용된 약어는 다음과 같다:

Ac = 아세틸

All = 알릴

Bn = 벤질

Me = 메틸

Ph = 페닐

PMB = (4-메톡시)벤질

PMBBr = (3-브로모-4-메톡시)벤질

Z = 벤질옥시카르보닐

TLC = 박층 크로마토그래피

하기 실시예에서 본 발명에 따른 화합물의 제법을 제한 없이 예시하였다. 이들 다양한 실시예의 제조에 착수하기 전에, 본 발명의 화합물 또는 기타 제제의 제조에 유용한 화합물의 제조 방법 (제법)을 하기에 기술하였다.

하기 제법 및 실시예를 위해, 하기 실험 방법을 사용하였다:

방법 1

1차 알콜에서 산의로의 산화 후 벤질 에스테르로의 전환

템포 (TEMPO)^® (0.02 몰 당량) 및 탄산수소나트륨 포화 수용액 (4 l/mol)을 테트라히드로푸란 (THF) (3.5 l/mol) 중 산화될 화합물 (1 몰 당량)의 용액에 첨가하였다. 0℃로 냉각 후, 브로모단 (2 몰 당량)을 20분에 걸쳐 적가하였다. 자기 교반 3시간 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 디메틸포름아미드 (DMF) (4.95 l/mol)의 반복적인 기화에 의해 건조시켰다. 그 결과 수득한 조 화합물을 다음 단계에서와 같이 사용하였다.

디메틸포름아미드 중 이전 화합물의 용액 (13.1 l/mol)을 실온에서 (1-15시간) 벤질 브로마이드 (10 몰 당량) 및 탄산수소칼륨 (5 몰 당량)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 농축시킨 후 잔류물을 에틸 아세테이트 (35 l/mol) 중에 용해시키고, 물로 세척하고, 건조시키고 (황산나트륨), 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피로 예상된 벤질 에스테르를 수득하였다.

방법 2

tert-부틸디메틸실릴 트리플레이트에 의해 촉매된 이미데이트의 커플링

디클로로메탄 중 tert-부틸디메틸실릴 트리플레이트의 용액 (0.1M, 이미데이트 1 몰 당 0.15 몰)을 디클로로메탄/디에틸 에테르 혼합물 중 이미데이트 및 글리코실 수용체의 용액 (1:2, 22.5-45 l/mol)에 아르곤 하에서, 20℃에서, 4 Å 분자 체의 존재하에 첨가하였다. 10-45분 (TLC) 후, 고체 탄산수소나트륨을 첨가하였다. 용액을 여과하고, 물로 세척하고, 건조시키고, 건조상태로 기화시켰다.

방법 3

에스테르의 비누화 방법

30％의 과산화수소 (H₂O₂) (7.16 l/mol 에스테르) 및 0.7N의 수산화리튬 수용액 (에스테르 1 몰 당 2.3 몰)을 테트라히드로푸란 (160 l/mol) 중에 비누화 될 화합물 용액에 -5℃에서 연속적으로 첨가하였다. -5℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 배지를 0℃에서 4시간 동안 놓아두고, 이어서 에스테르가 소모될 때까지 실온에서 교반하였다. 이어서, 조 반응 생성물을 임의로는 LH-20 컬럼 상에서 정제하였다.

방법 4

술폰화

트리에틸아민/삼산화황 복합체 (히드록실 관능기 당 5 몰)을 디메틸포름아미드 중 황산화 될 화합물의 용액 (90 l/mol)에 첨가하였다. 55℃에서 12 내지 22시간 후, 메탄올 또는 탄산수소나트륨 수용액을 0℃에서 첨가하고, 실온에서 0.5 내지 24시간 교반한 후, 반응 배지를 LH-20 컬럼 또는 두 개의 세파덱스 (Sephadex)^® G-25 컬럼 (0.2M의 염화나트륨 수용액에 이어서 물로 연속적으로 용출됨)을 이용하여 정제하였다. 이어서, 생성물을 함유하는 분획물을 고진공 하에서 농축시켜 목적하는 생성물을 수득하였다.

방법 5

벤질 에테르 및/또는 벤질 에스테르의 수소첨가분해

빙초산/물/tert-부탄올 혼합물 중 화합물의 용액을 수소 대기 (3-15 바) 하에서 5 또는 10％의 탄소 상의 팔라듐 (화합물 질량의 0.7-3배와 대등함)의 존재하 에 6-16시간 (TLC) 동안 계속 교반하였다. 여과 후, 용액을 세파덱스^® G-25 컬럼의 상부에 침전시키고, 0.2M의 염화나트륨으로 용출시켰다. 생성물을 함유하는 분획물을 농축시키고, 물로 용출되는 동일한 컬럼을 사용하여 탈염시켰다. 최종 화합물을 냉동-건조 후 수득하였다.

본 발명에 따른 화합물의 제조에 유용한 제법을 하기에 기술하였다.

제법 1:

(3S,4R,5R)- 디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 히드록시피페리딘 -1,3- 디카르복실레이트 (제6호)의 합성

단계 1.a: (3R,4R,5R)-1-벤질 3-( 벤질옥시 )-5-( 히드록시메틸 )피페리딘-4-올 ( 제2호 )의 제조

화합물 (1)의 합성은 문헌 [T.M. Jespersen and M. Bois, Tetrahedron (1994) 50 (47), 13449-13460] 및 특허 제US 5,844,102호에 기술되어 있다. 화합물 (2)의 합성은 특허 WO 98/50359에 기술되어 있다.

메탄올 (590 ml) 중 화합물 (1) (10.8 g, 42.8 mmol)의 용액에 메탄올 (100 ml) 중 소듐 시아노보로히드라이드 (5.38 g, 2 몰 당량)에 이어서 아세트산 (7.4 ml, 3 몰 당량) 및 벤질아민 용액 (5.1 ml, 1.1 당량)을 -10℃에서 연속적으로 첨가하였다. 실온으로 되돌린 후, 반응 혼합물을 50℃에서 2시간 동안 가열하였다. 실온으로 되돌린 후, 2％의 탄산수소나트륨 용액 (85 ml)을 첨가하였다. 메탄올을 진공 하에서 농축시킨 후 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 유기 상을 물에 이어서 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 건조시킨 (Na₂SO₄) 후 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 1.b: (3R,4R,5R)- 메틸 [4-( 아세틸옥시 )-1-벤질-5-( 벤질옥시 )피페리딘-3-일]아세테이트 ( 제3호 )의 제조

트리에틸아민 (13.5 ml, 2.25 몰 당량), 4-(디메틸아미노)피리딘 (DMAP) (7.84 g, 1.5 당량) 및 아세트산 무수물 (61 ml, 15 몰 당량)을 디클로로메탄 (345 ml) 중 단계 1.a에서 수득한 조 화합물 (2) (10.8 g)의 용액에 연속적으로 첨가하였다. 온도를 10분 동안 0℃에서 유지시킨 후 반응 배지를 실온에서 16시간 동안 놓아두었다. 이어서, 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카겔 상에서 정제하여 화합물 (3) (7.65 g, 43％, 2 단계)을 수득하였다.

단계 1.c: (3R,4R,5R)-벤질 4-( 아세틸옥시 )-3-( 아세틸옥시메틸 )-5-( 벤질옥시 )피페리딘-1-카르복실레이트 ( 제4호 )의 제조

벤질옥시카르보닐 클로라이드 (2.4 ml, 3 몰 당량)를 테트라히드로푸란 (28 ml) 중 단계 1.b에서 수득한 화합물 (3) (2.31 g, 5.6 mmol)의 용액에 아르곤 하에 서, -10℃에서 첨가한 후, 반응 배지를 실온에서 18시간 동안 교반하도록 두었다. 이어서, 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카겔 (1:9의 디에틸 에테르-디이소프로필 에테르) 상에서 정제하여 화합물 (4) (2.14 g, 84％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 478.3 [(M+Na)⁺].

단계 1.d: (3R,4R,5R)-벤질 3-( 벤질옥시 )-4-히드록시-5-( 히드록시메틸 )피페리딘-1-카르복실레이트 ( 제5호 )의 제조

0.84M의 수산화리튬 일수화물 용액 (25 ml, 5 몰 당량)을 디옥산 (25 ml) 중 단계 1.c에서 수득한 화합물 (4) (1.9 g, 4.2 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 반응 배지를 0℃에서 5분 동안 유지시킨 후 실온에서 30분 동안 놓아두었다. 염산 (HCl: 3N)으로 중화시킨 후, 반응 배지를 디클로로메탄 중에 희석하고, 물로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 (3:1의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 화합물 (5) (1.59 g, 90％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 394.4 [(M+Na)⁺].

단계 1.e: (3S,4R,5R)- 디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 히드록시피페리딘 -1,3- 디카르복실레 이트 ( 제6호 )의 제조

단계 1.d에서 수득한 화합물 (5) (3.18 g, 8.6 mmol)를 방법 1에 따라 처리하여 화합물 (6) (2.92 g, 71％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 476.5 [(M+Na)⁺].

제법 2

(벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미 데이트) (제11호)의 합성

단계 2.a: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(1,6-안히드로-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-β-D-글루코피라노스) ( 제8호 )의 제조

문헌 [Y. Ichikawa et al., Tetrahedron Lett. (1986) 27 (5) 611-614]에 기술된 2'-O-벤조일화 화합물과 동일한 방식으로 제조된 2'-O-아세틸화 형태의 화합물 (7) (18.0 g, 31.48 mmol)을 방법 1에 따라 처리하여, 실리카겔 (3:7의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제한 후, 화합물 (8) (16.4 g, 77％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 698.3 [(M+Na)⁺].

단계 2.b: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(1,6-디-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스) ( 제9호 )의 제조

트리플루오로아세트산 (TFA) (4.7 ml, 11 몰 당량)을 아세트산 무수물 (52 ml, 100 몰 당량) 중 단계 2.a에서 수득한 화합물 (8) (3.74 g, 5.54 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 실온으로 되돌린 후, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하고, 이어서 농축시키고, 톨루엔과 동시기화시키고, 실리카겔 (4:1의 톨루엔-에틸 아세테이트) 상에서 정제하여 화합물 (9) (4.33 g, 95％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 842.2 [(M+Na)⁺].

단계 2.c: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스) ( 제10호 )의 제조

벤질아민 (BnNH₂) (22 ml, 38 몰 당량)을 디에틸 에테르 (210 ml) 중 단계 2.b에서 수득한 화합물 (9) (4.3 g, 5.24 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 실온에서 4.5시간 동안 교반한 후, 배지를 1N의 HCl로 산성화시키고, 이어서 에틸 아세테이트로 추출하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 농축시키고, 실리카겔 (35:65의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 (10) (3.4 g, 83％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 800.2 [(M+Na)⁺].

단계 2.d: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세 트이미데이트) ( 제11호 )의 제조

탄산세슘 (Cs₂CO₃) (2.26 g, 1.6 몰 당량)에 이어서 트리클로로아세토니트릴 (CCl₃CN) (1.74 ml, 5.0 몰 당량)을 디클로로메탄 (82 ml) 중 단계 2.c에서 수득한 화합물 (10) (3.38 g, 4.35 mmol)의 용액에 아르곤 하에서 첨가하였다. 1.5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 여과하고, 이어서 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 (3:7의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 (11) (2.96 g, 74％)을 수득하였다.

제법 3:

(나트륨의 3-O-벤질-2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피 라노실 )-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코 피라노실)-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제19호)의 합성

단계 3.a: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(1,6- 안히드로 -2- 아지도 -3-O-벤질-2-데옥시-β-D-글루코피라노스) ( 제12호 )의 제조

단계 2.d에서 수득한 화합물 (11) (455 mg, 0.50 mmol) 및 단계 2.a에서 수득한 화합물 (8) (675 mg, 1 mmol)을 방법 2에 따라 처리하여 정제한 후, 화합물 (12) (385 mg, 54％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1457.6 [(M+Na)⁺].

단계 3.b: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실우로네이트-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(1,6-디-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스) ( 제13호 )의 제조

단계 3.a에서 수득한 화합물 (12) (365 mg, 0.254 mmol)를 화합물 (9)의 합성 (단계 2.b)와 같이 처리하여, 실리카겔 (1:1의 Et₂O-디이소프로필 에테르) 상에서 정제한 후, (13) (376 mg, 97％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1560.7 [(M+Na)⁺].

단계 3.c: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아지도 -3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스) ( 제14호 )의 제조

단계 3.b에서 수득한 화합물 (13) (364 mg, 0.237 mmol)을 화합물 (10)의 합성 (단계 2.c)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카겔 (7:3의 Et₂O-디이소프로필 에테르) 상에서 정제한 후, 화합물 (14) (310 mg, 87％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1518.8 [(M+Na)⁺].

단계 3.d: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 2-O- 아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아지도 -3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트 ) ( 제15호 )의 제조

단계 3.c에서 수득한 화합물 (14) (279 mg, 0.187 mmol)를 화합물 (11)의 합성 (단계 2.d)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카겔 (1:1의 Et₂O-디이소프로필 에테르) 상에서 정제한 후, (15) (230 mg, 75％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1660.6 [(M+Na)⁺].

단계 3.e: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실 우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 옥 시피페리딘-1,3-카르복실레이트) ( 제16호 )의 제조

단계 3.d에서 수득한 화합물 (15) (217 mg, 0.132 mmol) 및 단계 1.e에서 수득한 (6) (126 mg, 0.264 mmol)을 방법 2에 따라 처리하여 정제한 후, 화합물 (16) (168 mg, 66％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1976.0 [(M+Na)⁺].

단계 3.f: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실 우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-아세트아 미도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제17호 )의 제조

단계 3.e에서 수득한 화합물 (16) (138.5 mg, 70.9 μmol)을 피리딘 (1.16 mL) 중에 용해시킨 후 티오아세트산 (1.14 mL, 225 몰 당량)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 배지를 실온에서 14시간 동안 교반한 후 농축시키고, 실리카겔 (3:2의 시클로헥산-에틸 아세테이트) 상에서 정제하여 화합물 (17) (118 mg, 84％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 2007.7 [(M+Na)⁺].

단계 3.g: (3-O-벤질-α-L-이도피라노실우론산)-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우론산 )-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실산-1-카르복실레이트) ( 제18호 )의 제조

단계 3.f에서 수득한 화합물 (17) (101 mg, 50.9 μmol)을 방법 3에 따라 처리한 후 반응 배지를 6N의 염산 (pH 1)으로 산성화시키고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기상을 5％의 아황산나트륨 (Na₂SO₃)에 이어서 물로 세척하였다. 건조, 여과 및 농축 후, 잔류물을 다음 단계에서 조 상태로 사용하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1505.6 [(M+H)⁺].

단계 3.h: (나트륨의 3-O-벤질-2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코 피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루 코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리 딘-1-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제19호 )의 제조

단계 3.g에서 수득한 조 화합물 (18)을 방법 4에 따라 처리하여 화합물 (19) (50 mg, 54％ (2 단계))를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 2014 [(M-3Na+3H)^-].

제법 4:

(나트륨의 3-O-벤질-2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(3-O-벤질-2-데옥시-2-N-소듐 술포네이토 -6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실 우로네이트)-(1-4)-(3-O-벤질-2-데옥시-2-N-소듐 술포네이토 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제26호)의 합성

단계 4.a: (3-O-벤질-α-L-이도피라노실우론산)-(1-4)-(2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우론산 )-(1-4)-(2- 아 지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카르복실레 이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제24호 )의 제조

단계 3.e에서 수득한 화합물 (16) (175 mg, 89.6 μmol)을 방법 3에 따라 처리한 후 반응 배지를 6N의 염산 (pH 2)으로 산성화시켰다. 이어서, 혼합물을 세파덱스^® LH-20 컬럼 (1:1의 디클로로메탄-에탄올) 상에서 정제하여 화합물 (24) (100 mg, 76％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1474.1 [(M+H)⁺].

단계 4.b: (3-O-벤질-α-L-이도피라노실우론산)-(1-4)-(2-아미노-3-O-벤질-2-데옥시-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우론산 )-(1-4)-(2-아미노-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질-3-카르복실산의 5-( 벤 질옥시)-4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제25호 )의 제조

문헌 [H. Sajiki et al., J. Org. Chem. (1998), Vol . 63, p. 7990-7992]에 기술된 방법에 따라 제조된 10％의 Pd/C/에틸렌디아민 복합체 (107 mg)를 1:1의 메탄올-테트라히드로푸란 혼합물 (1 ml) 중 단계 4.a에서 수득한 화합물 (24) (35 mg)의 용액에 첨가하였다. 이어서, 배지를 H₂ 압력 (3 바) 하에 실온에서 16시간 동안 놓아두었다. 여과 및 농축 후, 조 반응 생성물을 다시 동일한 조건 하에서 반응시키고, 이어서 실리카겔 (에틸 아세테이트-피리딘-아세트산-물, 6:2:0.6:1) 상에서 정제하여 화합물 (25) (12 mg, 44％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1421.4 [(M+H)⁺].

단계 4.c: (나트륨의 3-O-벤질-2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-벤질-2-데옥시-2-N-소듐 술포네이토 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노 실우로네이트)-(1-4)-(3-O-벤질-2-데옥시-2-N-소듐 술포네이토 -6-O-소듐 술포네이 토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )- 4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제26호 )의 제조

단계 4.b에서 수득한 화합물 (25) (8.5 mg, 5.98 μmol)를 방법 4에 따라 처리하여 화합물 (26) (7 mg, 56％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 2133.8 [(M-H)^-].

제법 5:

(벤질 2-O-아세틸-4-O- 레불리노일 -3-O- 메틸 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-O-(3-브로모-4-메톡시)벤질-3-O-메틸-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트) (제40호)의 합성

단계 5.a: 1,6- 안히드로 -4-O-( 테트라히드로피란 -2-일)-2-O-(4- 메톡시 )벤질-β-D-글루코피라노스 ( 제29호 )의 제조

나트륨 (1.37 g, 0.33 몰 당량)을 파라-메톡시벤질 알콜 (25 ml, 1.1 몰 당량) 중 화합물 (28) (문헌 [H. Paulsen and W. Stenzel, Chem. Ber. (1978) 111, 2348-57]에 따라 제조됨) (41 g, 180 mmol)의 용액에 40℃에서 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 110℃에서 20분 동안 가열한 후 메탄올 (20 ml)을 0℃에서 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 유지하였다. 농축 후, 실리카겔 (3:7의 에틸 아세테이트-디이소프로필 에테르) 상에서 정제하여 (29) (20.1 g, 31％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 384.2 [(M+Na)⁺].

단계 5.b: 1,6- 안히드로 -4-O-( 테트라히드로피란 -2-일)-2-O-(4- 메톡시 )벤질-3-O- 메 틸-β-D-글루코피라노스 ( 제30호 )의 제조

메틸 요오다이드 (2.67 ml) 및 수화나트륨 (2.68 g)을 디메틸포름아미드 (107 ml) 중 단계 5.a에서 수득한 화합물 (29) (13.1 g, 35.8 mmol)의 용액에 0℃에서 및 아르곤 대기 하에서 연속적으로 첨가하였다. 실온으로 되돌린 후, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하고, 이어서 메탄올을 0℃에서 첨가하고, 배지를 에틸 아세테이트로 추출하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켜 (30)을 수득하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 403.3 [(M+Na)⁺].

단계 5.c: 1,6- 안히드로 -2-O-(4- 메톡시 )벤질-3-O- 메틸 -β-D- 글루코피라노스 ( 제31호 )의 제조

캄포술폰산 (CSA)의 0.25M 메탄올 용액 (1 몰 당량)을 메탄올 (143 ml) 중 단계 5.b에서 수득한 조 화합물 (30)의 용액에 첨가하였다. 자기 교반 30분 후, 배지를 디클로로메탄으로 희석하고, 이어서 물, 2％의 탄산수소나트륨 수용액, 물로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켰다. 실리카겔 (3:7의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 화합물 (31) (9.0 g, 85％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 319.1 [(M+Na)⁺].

단계 5.d: 에틸 2-O-아세틸-4,6-O- 이소프로필리덴 -3-O- 메틸 -1- 티오 -α,β-L-이도피라노시드 ( 제33호 )의 제조

트리에틸아민 (2.2 ml), DMAP (173 mg) 및 아세트산 무수물 (1.34 ml)을 디클로로메탄 (37 ml) 중 조 화합물 (32) (문헌 [P. Duchaussoy et al., Carbohydr. Res. (1999), 317, 63-84]에 따라 제조됨) (1.99 g, 7.1 mmol)의 용액에 아르곤 하에서, 0℃에서 연속적으로 첨가하였다. 온도를 0℃에서 10분 동안 유지시킨 후 반응 배지를 실온에서 16시간 동안 놓아두었다. 이어서, 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 잔류물을 실리카 (1:1의 Et₂O-시클로헥산) 상에서 정제하여 화합물 (33) (2.1 g, 92％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 343.3 [(M+Na)⁺].

단계 5.e: (2-O-아세틸-4,6-O- 이소프로필리덴 -3-O- 메틸 -α-L- 이도피라노실 )-(1-4)-(1,6-안히드로-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-메틸-β-D-글루코피라노스) ( 제34α호 ) 및 (2-O-아세틸-4,6-O- 이소프로필리덴 -3-O- 메틸 -β-L- 이도피라노실 )-(1-4)-(1,6- 안히 드로 -2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-메틸-β-D-글루코피라노스) ( 제34β호 )의 제조

1:1의 디클로로메탄-디옥산 혼합물 (16.5 ml) 중 N-요오도숙신이미드 (1.38 g) 및 트리플루오로메탄술폰산 (63.5 ㎕)의 용액을 톨루엔 (50 ml) 중 단계 5.d에서 수득한 화합물 (33) (1.86 g, 5.79 mmol) 및 단계 5.c에서 수득한 화합물 (31) (1.46 g, 4.94 mmol)의 혼합물에 아르곤 하에서, 20℃에서, 4 Å 분자 체 (2.89 g)의 존재하에 첨가하였다. 45분 동안 교반한 후, 고체 탄산수소나트륨을 반응 배지에 첨가하고, 여과 후 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 10％의 티오황산나트륨 (Na₂S₂O₃) 수용액 및 염화나트륨 포화 수용액으로 세척하였다. 건조 및 농축 후, 잔류물을 다음 단계에서 직접 사용하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 577.4 [(M+Na)⁺].

단계 5.f: (2-O-아세틸-3-O- 메틸 -α-L- 이도피라노실 )-(1-4)-(1,6- 안히드로 -2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-메틸-β-D-글루코피라노스) ( 제35α호 ) 및 (2-O-아세틸-3-O-메틸-β-L- 이도피라노실 )-(1-4)-(1,6- 안히드로 -2-O-(4- 메톡시 )벤질-3-O- 메틸 -β-D- 글루코피라노스 ) ( 제35β호 )의 제조

70％의 아세트산 (55 ml)을 1,2-디클로로에탄 (12 ml) 중 단계 5.e에서 수득한 혼합된 화합물 34α 및 34β의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 50분 동안 가열한 후 진공 하에서 농축시키고, 수득한 잔류물을 실리카겔 (3:2의 톨루엔-아세톤) 상에서 정제하여 화합물 (35α) (1.56 g, 61％, 2 단계) 및 화합물 (35β) (0.36 g, 14％, 2 단계)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 537.5 [(M+Na)⁺].

단계 5.g: (벤질 2-O-아세틸-3-O-메틸-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(1,6-안히드로-2-O-(3-브로모-4-메톡시)벤질-3-O-메틸-β-D-글루코피라노스) ( 제36호 )의 제조

단계 5.f에서 수득한 화합물 (35α) (0.975 g, 1.89 mmol)를 방법 1에 따라 처리하여, 실리카겔 (1:1의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제한 후, 화합물 (36) (1.09 g, 83％)을 수득하였다.

단계 5.h: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-메틸-α-L-이도피라노실우로네이 트 )-(1-4)-(1,6- 안히드로 -2-O-(3- 브로모 -4- 메톡시 )벤질-3-O- 메틸 -β-D- 글루 코피라노스) ( 제37호 )의 제조

DMAP (43 mg, 0.2 몰 당량), 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (EDCl) (0.675 g, 2 몰 당량) 및 레불린산 (0.361 ml, 2 몰 당량)을 디옥산 (35 ml) 중 단계 5.g에서 수득한 화합물 (36) (1.09 g, 1.56 mmol)의 용액에 아르곤 하에서 연속적으로 첨가하고, 16시간 동안 교반한 후 반응 배지를 10％의 황산수소칼륨 (KHSO₄) 용액, 물, 2％의 탄산수소나트륨으로 연속적으로 세척하고, 이어서 용액을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켜 잔류물을 수득하였고, 이를 실리카겔 (2:3의 에틸 아세테이트-디클로로메탄) 상에서 정제하여 화합물 (37) (1.07 g, 86％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 819.4 [(M+Na)⁺].

단계 5.i: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-메틸-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(1,6-디-O-아세틸-2-O-(3- 브로모 -4- 메톡시 )벤질-3-O- 메틸 -α,β-D-글루코피라노스) ( 제38호 )의 제조

단계 5.h에서 수득한 화합물 (37) (1.07 g, 1.34 mmol)을 화합물 (9)의 합성 (단계 2.b)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카겔 (2:3의 에틸 아세테이트-디클로로메탄) 상에서 정제한 후, 화합물 (38) (1.04 g, 87％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 921.4 [(M+Na)⁺].

단계 5.j: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-메틸-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-O-(3- 브로모 -4- 메톡시 )벤질-3-O- 메틸 -α,β-D- 글루 코피라노스) ( 제39호 )의 제조

단계 5.i에서 수득한 화합물 (38) (1.04 g, 1.16 mmol)을 화합물 (10)의 합성 (단계 2.c)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카겔 (1:1의 에틸 아세테이트-디클로로메탄) 상에서 정제한 후, 화합물 (39) (740 mg, 74％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 877.3 [(M+Na)⁺].

단계 5.k: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-메틸-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(3-브로모-4-메톡시)벤질-3-O-메틸-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트 ) ( 제40호 )의 제조

단계 5.j에서 수득한 화합물 (39) (740 mg, 860 μmol)를 화합물 (11)의 합 성에 대해서와 같이 처리하여, 실리카겔 (3:7의 에틸 아세테이트-디클로로메탄) 상에서 정제한 후, 화합물 (40) (714 mg, 83％)을 수득하였다.

제법 6:

(나트륨의 3-O- 메틸 -2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이 트)-(1-4)-(3-O-메틸-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 3-O- 메틸 -2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(3-O- 메 틸-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카르 복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제46호 화합물)의 합성

단계 6.a: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-메틸-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(3-브로모-4-메톡시)벤질-3-O-메틸-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제41호 )의 제조

단계 5.k에서 수득한 화합물 (40) (94 mg, 0.094 mmol, 1.0 몰 당량) 및 단계 1.e에서 수득한 화합물 (6) (111 mg, 0.234 mmol, 2.5 몰 당량)의 혼합물을 방법 2에 따라 처리하여, 세파덱스^® LH-20 컬럼에 이어 실리카겔 (9:1의 디클로로메탄-에틸 아세테이트) 상에서 정제한 후, 화합물 (41) (62 mg, 50％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1336.5 [(M+Na)⁺].

단계 6.b: (벤질 2-O-아세틸-3-O-메틸-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(3-브로모-4-메톡시)벤질-3-O-메틸-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1,3- 디카르복실레이트 ) ( 제42호 )의 제조

히드라진 아세테이트 (21 mg, 10 몰 당량)를 1:2의 톨루엔/에탄올 혼합물 (9 ml) 중 단계 6.a에서 수득한 화합물 (41) (60 mg, 45.7 μmol)의 용액에 첨가하였다. 자기 교반 3시간 후, 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 잔류물을 디클로로메탄으로 희석하고, 2％의 탄산수소나트륨 용액, 물로 세척하고, 유기상을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 이어서 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 (3:2의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 화합물 (42) (48 mg, 88％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1238.5 [(M+Na)⁺].

단계 6.c: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-메틸-α-L-이도피라노실우로네이 트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(3-브로모-4-메톡시)벤질-3-O-메틸-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-메틸-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(3-브로모-4-메톡시)벤질-3-O-메틸-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1,3- 디카르복실레이트 ) ( 제43호 )의 제조

단계 5.k에서 수득한 화합물 (40) (197.7 mg, 197.7 μmol, 1.14 몰 당량) 및 단계 6.b에서 수득한 화합물 (42) (210.5 mg, 173.2 μmol, 1.0 몰 당량)의 혼합물을 방법 2에 따라 처리하여, 세파덱스^® LH-20 컬럼에 이어 실리카겔 (1:1의 톨루엔-아세톤) 상에서 정제한 후, 화합물 (43) (176 mg, 50％)을 수득하였다.

단계 6.d: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-메틸-α-L-이도피라노실우 로네이 트)-(1-4)-(6-O-아세틸-3-O-메틸-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O- 메틸 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-3-O- 메틸 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제44호 )의 제조

사염화지르코늄 (ZrCl₄) (39 mg, 5 몰 당량)을 아세토니트릴 (3 ml) 중 단계 6.c에서 수득한 화합물 (43) (69 mg, 33.6 μmol)의 용액에 0℃에서 및 아르곤 대기 하에서 첨가하였다. 실온에서 45분 동안 교반한 후, 혼합물을 진공 하에서 농 축시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 건조, 여과 및 농축 후 잔류물을 실리카겔 (3:7의 아세톤-톨루엔) 상에서 정제하여 화합물 (44) (52 mg, 89％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1676.7 [(M+Na)⁺].

단계 6.e: (3-O-메틸-α-L-이도피라노실우론산)-(1-4)-(3-O-메틸-α-D-글루 코피라 노실)-(1-4)-(3-O- 메틸 -α-L- 이도피라노실우론산 )-(1-4)-(3-O- 메틸 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질-3-카르복실산의 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제45호 )의 제조

단계 6.d에서 수득한 화합물 (44) (18 mg, 11 μmol)를 방법 3에 따라 처리하여 정제한 후, 화합물 (34) (5.8 mg, 47％)를 수득하였고, 이를 카르복실산기에 대해 부분적으로 에스테르화할 수 있었다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1118.4 [(M+H)⁺].

단계 6.f: (나트륨의 3-O- 메틸 -2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-메틸-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 3-O- 메틸 -2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-메틸-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카 르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제46호 )의 제조

단계 6.e에서 수득한 화합물 (45) (7 mg, 6.26 μmol)를 방법 4에 따라 처리 하여 정제한 후, 화합물 (46) (10 mg, 77％)을 수득하였고, 이를 카르복실산기에 대해 부분적으로 에스테르화할 수 있었다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1897.0 [(M+Na-H)⁺].

제법 7:

(벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트) (제57호)의 합성

단계 7.a: 1,6- 안히드로 -4-O-( 테트라히드로피란 -2-일)-2-O-(4- 메톡시 )벤질-3-O-벤질-β-D-글루코피라노스 ( 제48호 )의 제조

벤질 브로마이드 (5.1 ml)에 이어서 수화나트륨 (4.6 g)을 DMF (300 ml) 중 단계 5.a에서 수득한 (29) (19.96 g, 54.5 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 첨가 마지막에, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 놓아둔 후, 메탄올 (18 ml)을 0℃ 에서 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 배지를 에틸 아세테이트 (600 ml)로 희석하고, 물 (300 ml)로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (5:95의 에틸 아세테이트-디이소프로필 에테르)로 정제하여 (48) (20.6 g, 83％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 479.3 [(M+Na)⁺].

단계 7.b: 1,6- 안히드로 -2-O-(4- 메톡시 )-벤질-3-O-벤질-β-D- 글루코피라노스 ( 제49호 )의 제조

단계 7.a에서 수득한 화합물 (48) (20.6 g, 45.2 mmol)을 화합물 (31)의 합성 (단계 5.c)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (3:7의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제한 후, (49) (14.4 g, 86％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 395.4 [(M+Na)⁺].

단계 7.c: (2-O-아세틸-4,6-O- 이소프로필리덴 -3-O-벤질-α,β-L- 이도피라노실 )-(1-4)-(1,6-안히드로-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-β-D-글루코피라노스) ( 제51호 )의 제조

화합물 (50) (문헌 [C. Tabeur et al. for the 2-O-benzoylated derivative, Carbohydr. Res. (1996), 281, 253-276]에 기술된 방법에 따라 제조됨) (16.91 g, 42.6 mmol) 및 단계 7.b에서 수득한 화합물 (49) (14.44 g, 38.8 mmol)을 (34)의 합성 (단계 5.e)에 대해서와 같이 반응시켜, 실리카 (15:85의 에틸 아세테이트-디이소프로필 에테르) 상에서 정제한 후, 화합물 (51) (17.05 g, 62％ (56％ 알파- L))을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 729.3 [(M+Na)⁺].

단계 7.d: (2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실)-(1-4)-(1,6-안히드로-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-β-D-글루코피라노스) ( 제52호 )의 제조

단계 5.c에서 수득한 화합물 (51) (12.38, 17.51 mmol)을 (35)의 합성 (단계 5.f)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (4:1의 톨루엔-아세톤) 상에서 정제한 후, (52) (10.85 g, 93％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 689.3 [(M+Na)⁺].

단계 7.e: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(1,6-안히드로-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-β-D-글루코피라노스) ( 제53호 )의 제조

단계 7.d에서 수득한 화합물 (52) (10.85 g, 16.27 mmol)를 방법 1에 따라 처리하여, 실리카 (3:7의 아세톤-시클로헥산) 상에서 정제한 후, (53) (8.44 g, 61％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 793.3 [(M+Na)⁺].

단계 7.f: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-레불리노일-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(1,6-안히드로-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-β-D-글루코피라노스) ( 제54호 )의 제조

단계 7.e에서 수득한 화합물 (53) (3.2 g, 3.77 mmol)을 (37)의 합성 (단계 5.h)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (1:4의 아세톤-톨루엔) 상에서 정제한 후, (54) (3.17 g, 89％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 891.3 [(M+Na)⁺].

단계 7.g: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(1,6- 디 -O- 아세틸 -2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α,β-D-글루코피라노스) ( 제55호 )의 제조

단계 7.f에서 수득한 화합물 (54) (1.45 g, 1.53 mmol)를 (9)의 합성에 대해서와 같이, 단 0℃에서 1시간 동안 처리하여, 실리카 (85:15의 톨루엔-아세톤) 상에서 정제한 후, (55) (1.25 g, 78％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 993.3 [(M+Na)⁺].

단계 7.h: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우 로네이 트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α,β-D-글루코피라노스) ( 제56호 )의 합성

단계 7.g에서 수득한 화합물 (55)를 (10)의 합성 (단계 2.c)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (25:75의 디에틸 에테르-디클로로메탄) 상에서 정제한 후, (56) (429 mg, 56％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 951.3 [(M+Na)⁺].

단계 7.i: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이 트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트 ) ( 제57호 )의 제조

단계 7.h에서 수득한 화합물 (56) (429 mg, 426 μmol)을 (11)의 합성 (단계 2.d)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (1:1의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제한 후, 유도체 (57) (396 mg, 80％)을 수득하였다.

제법 8:

(벤질 2-O-아세틸-4-O-알릴-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트) (제62호)의 합성

단계 8.a: (벤질 2-O-아세틸-4-O-알릴옥시카르보닐-3-O-벤질-α-L-이도피라 노실우로네이트 )-(1-4)-(1,6- 안히드로 -2-O-(4- 메톡시 )벤질-3-O-벤질-β-D- 글루코피 라노스) ( 제58호 )의 제조

THF (2.35 ml) 중 피리딘 (759 ㎕, 9.41 mmol), DMAP (115 mg, 0.94 mmol) 및 알릴 클로로포르메이트 (995 ㎕, 9.41 mmol)의 용액을 THF (9.4 ml) 중 단계 7.e에서 수득한 (53) (0.800 g, 0.9414 mmol)의 용액에 0℃에서 및 아르곤 대기 하에서 첨가하였다. 교반을 밤새 유지한 후 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 10％의 KHSO₄, 2％의 탄산수소나트륨, 물로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (1:9의 아세톤-톨루엔)로 정제하여 (58) (0.809 g, 92％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 877.3 [(M+Na)⁺].

단계 8.b: (벤질 2-O-아세틸-4-O-알릴-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(1,6-안히드로-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-β-D-글루코피라노스) ( 제59호 )의 제조

팔라듐 디아세테이트 (3.9 mg, 0.017 mmol) 및 트리페닐포스핀 (22.6 mg, 0.086 mmol)을 THF (6 ml) 중 단계 8.a에서 수득한 화합물 (58) (0.805 g, 0.862 mmol)의 용액에 아르곤 대기 하에서 연속적으로 첨가하였다. 혼합물의 온도를 15분 동안 90℃가 되도록 한 후, 배지를 진공 하에서 농축시키고, 실리카 (15:85의 아세톤-톨루엔) 상에서 정제하여 (59) (0.587 g, 66％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 833.4 [(M+Na)⁺].

단계 8.c: (벤질 2-O-아세틸-4-O-알릴-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(1,6-디-O-아세틸-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α,β-D-글루코피라노스) ( 제60호 )의 제조

단계 8.b에서 수득한 화합물 (59) (0.587 g, 0.660 mmol)를 화합물 (55)의 합성 (단계 7.g)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (9:1의 아세톤-톨루엔) 상에서 정제한 후, (60) (0.37 g, 57％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 936.4 [(M+Na)⁺].

단계 8.d: (벤질 2-O-아세틸-4-O-알릴-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α,β-D-글루코피라노스) ( 제61호 )의 제조

단계 8.c에서 수득한 화합물 (60)을 (10)의 합성 (단계 2.c)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카겔 (2:3의 시클로헥산-에틸 아세테이트) 상에서 정제한 후, (61) (240 mg, 70％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 893.4 [(M+Na)+].

단계 8.e: (벤질 2-O-아세틸-4-알릴-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트) ( 제62호 )의 제조

단계 8.d에서 수득한 화합물 (61) (234 mg, 246 μmol)을 (11)의 합성 (단계 2.d)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (86:14의 아세톤-톨루엔) 상에서 정제한 후, 유도체 (62) (249 mg, 93％)를 수득하였다.

제법 9 및 10의 합성을 하기와 같이 도식으로 나타낼 수 있다.

제법 9:

(나트륨의 3-O-벤질-2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이 트)-(1-4)-(3-O-벤질-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(3-O-벤질-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카르 복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제68호)의 합성

단계 9.a: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우 로네이 트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-O-(4- 메톡시 )벤질-3-O-벤질-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1,3- 디카르복실레이트 ) ( 제63호 )의 제조

단계 7.i에서 수득한 화합물 (57) (396 mg, 0.34 mmol) 및 단계 1.e에서 수득한 화합물 (6) (405 mg, 0.85 mmol)을 방법 2에 따라 처리하여 정제한 후, (63) (369 mg, 73％)을 수득하였다.

단계 9.b: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1,3- 디카르복실레이트 ) ( 제64호 )의 제조

단계 9.a에서 수득한 화합물 (63) (372 mg, 0.254 mmol)을 (42)의 합성 (단계 6.b)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (2:3의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제한 후, 화합물 (64) (301 mg, 87％)를 수득하였다.

단계 9.c: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(4-메톡시)벤질-3-O-벤질-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제65호 )의 제조

단계 7.i에서 수득한 화합물 (57) (124 mg, 0.108 mmol) 및 단계 9.b에서 수득한 (64) (150 mg, 0.110 mmol)을 방법 2에 따라 처리하여 정제한 후, (65) (90 mg, 35％)를 수득하였다.

단계 9.d: (벤질 2-O-아세틸-4-O-레불리노일-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -3-O-벤질-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질 2-O- 아세틸 -3-O-벤질-α-L- 이도피라노실 우로네이트)-(1-4)-(6-O-아세틸-3-O-벤질-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제66호 )의 제조

단계 9.c에서 수득한 화합물 (65) (45 mg, 0.19 mmol)를 (44)의 합성 (단계 6.d)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (3:2의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제한 후, 화합물 (66) (34 mg, 91％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1982.0 [(M+Na)⁺].

단계 9.e: (3-O-벤질-α-L-이도피라노실우론산)-(1-4)-(3-O-벤질-α-D-글루 코피라노실 )-(1-4)-(3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우론산 )-(1-4)-(3-O-벤질-α-D- 글 루코피라노실)-(1-4)-(벤질-3-카르복실산의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복 실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제67호 )의 제조

단계 9.d에서 수득한 화합물 (66) (25 mg, 12.8 μmol)을 방법 3에 따라 처리하였다. 반응 혼합물을 6N의 염산 (pH 2)으로 산성화시킨 후, 9:1의 DMF/물 혼 합물 중에서 평형화된 LH-20 컬럼 (100 ml) 상에 침전시켰다. 이어서, 생성물을 함유하는 분획물을 농축시키고, 실리카 (7:3의 디클로로메탄-메탄올) 상에서 정제하여 (67) (10.4 mg, 59％)를 수득하였고, 이를 카르복실산기에 대해 부분적으로 에스테르화할 수 있었다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1422.7 [(M+H)⁺].

단계 9.f: (나트륨의 3-O-벤질-2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-벤질-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(3-O-벤질-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 벤질-3-카르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제68호 )의 제조

단계 9.e에서 수득한 화합물 (67) (10.4 mg, 9 μmol)을 방법 4에 따라 처리하여 (68)을 수득하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.

제법 10:

(나트륨의 4-O-알릴-3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네 이트)-(1-4)-(3-O-벤질-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(3-O-벤질-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카 르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제73 호)의 합성

단계 10.g: (벤질 2-O-아세틸-4-O-알릴-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이 트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-O-(4- 메톡시 )벤질-3-O-벤질-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-O-(4- 메톡시 )벤질-3-O-벤질-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-((3S,4R,5R)- 디벤질 -5-( 벤질옥시 )-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제70호 )의 제조

단계 8.e에서 수득한 화합물 (62) (244 mg, 0.223 mmol) 및 단계 9.b에서 수득한 화합물 (64) (138 mg, 0.101 mmol)를 방법 2에 따라 처리하여 정제한 후, (70) (100 mg, 43％)을 수득하였다.

단계 10.h: (벤질 2-O-아세틸-4-O-알릴-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이 트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -3-O-벤질-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질 2-O- 아세틸 -3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -3-O-벤질-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1,3- 디카르복실레 이트) ( 제71호 )의 제조.

단계 10.g에서 수득한 화합물 (70) (92 mg, 40.0 μmol)을 화합물 (44)의 합성 (단계 6.d)에 대해서와 같이 처리하여, 실리카 (17:83의 아세톤-톨루엔) 상에서 정제한 후, 화합물 (71) (44 mg, 59％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1924.0 [(M+Na)⁺].

단계 10.i: (4-O-알릴-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우론산)-(1-4)-(3-O-벤질-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우론산 )-(1-4)-(3-O-벤질-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질-3-카르복실산의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제72호 )의 제조

단계 10.h에서 수득한 화합물 (71) (41 mg, 21.6 μmol)을 방법 3에 따라 처리하였다. 반응 혼합물을 1:1의 디클로로메탄-에탄올 혼합물 중에서 평형화된 LH-20 컬럼 (210 ml) 상에 침전시켰다. 이어서, 생성물을 함유하는 분획물을 농축시키고, 실리카 상에서 정제하여 (72) (30.3 mg, 96％)를 수득하였고, 이를 카르복실산기에 대해 부분적으로 에스테르화할 수 있었다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1462.4 [(M+H)⁺].

단계 10.j: (나트륨의 4-O-알릴-3-O-벤질-2-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라 노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-벤질-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(3-O-벤질-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 벤질-3-카르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제73호 )의 제조

단계 10.i에서 수득한 화합물 (72) (10.0 mg, 6.44 μmol)를 방법 4에 따라 처리하여 (73)을 수득하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.

제법 11:

메틸 (2-N-소듐 술포네이토 -2,4- 디데옥시 -4- 포르밀 -3,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노시드) (제89호)의 합성

단계 11.a: 1,6:2,3-디- 안히드로 -4- 데옥시 -4-( 프로프 -1-엔-1-일)-β-D- 만노 피라노스 ( 제76호 )의 제조

삼염화로듐 일수화물 (202 mg, 0.15 몰 당량)을 에탄올 (56.5 ml) 중 에폭시드 (75) (문헌 [AG Kelly and JS Roberts, J. Chem. Soc., Chem. Commun., (1980), Vol 288]에 따라 제조됨) (1.2 g, 7.14 mmol)의 용액에 아르곤 하에서 첨가하였다. 75℃에서 1시간 25분 동안 교반한 후, 반응 배지에 빙냉수 250 ml를 붓고, 이어서 5분 동안 교반한 후, 생성물을 디에틸 에테르로 추출하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 농축시켰다. 이어서, 잔류물을 실리카 (45:55의 디이소프로필 에테르-시클로헥산) 상에서 정제하고, 화합물 (76)을 함유하는 분획물을 부분적으로 농축시켰다 ((76)은 휘발성임).

단계 11.b: 1,6- 안히드로 -2- 아지도 -2,4- 디데옥시 -4-( 프로프 -1-엔-1-일)-β-D- 글루코피라노스 ( 제77호 )의 제조

단계 11.a에서 수득한 화합물 (76)을 디메틸포름아미드-물 혼합물 (40 ml, 4:1) 중에 용해시킨 후, 소듐 아지드 (7.0 g)를 첨가하고, 혼합물을 환류 하에서 10.5시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응 배지를 에틸 아세테이트로 추출하고, 물에 이어서 염화나트륨 포화 수용액으로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 농축시키고, 실리카겔 상에서 정제하여 화합물 (77) (674 mg, 48％)을 수득하였다.

단계 11.c: 1,3,6-트리-O-아세틸-2- 아지도 -2,4- 디데옥시 -4-( 프로프 -1-엔-1-일)-α,β-D-글루코피라노스 ( 제78호 )의 제조

단계 11.b에서 수득한 화합물 (77) (3.5 g, 16.57 mmol)을 화합물 (9)의 합성 (단계 2.b)에 대해서와 같이 처리하여 정제한 후, 화합물 (78) (5.88 g, 100％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 378 [(M+Na)⁺].

단계 11.d: 3,6-디-O-아세틸-2- 아지도 -2,4- 디데옥시 -4-( 프로프 -1-엔-1-일)-α,β-D-글루코피라노스 ( 제79호 )의 제조

에탄올아민 (4.0 ml, 4 몰 당량)을 테트라히드로푸란 (140 ml) 중 단계 11.c에서 수득한 화합물 (78) (5.88 g, 16.5 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. +4℃에서 16시간 후, 배지를 에틸 아세테이트로 희석하고, 산성화시키고 (1N의 HCl), 물로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 농축시켜 정제한 후, 화합물 (79) (4.66 g, 90％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 336 [(M+Na)⁺].

단계 11.e: 3,6-디-O-아세틸-2- 아지도 -2,4- 디데옥시 -4-( 프로프 -1-엔-1-일)-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트 ( 제80호 )의 제조

탄산칼륨 (K₂CO₃) (3.34 g, 1.6 몰 당량)에 이어서 CCl₃CN (7.6 ml, 5 몰 당량)을 디클로로메탄 (285 ml) 중 단계 11.d에서 수득한 화합물 (79) (4.66 g, 14.9 mmol)의 용액에 아르곤 하에서 첨가하였다. 자기 교반 17시간 후, 반응 혼합물을 여과하고, 농축시키고, 실리카 상에서 정제하여 화합물 (80) (5.65 g, 83％)을 수득하였다.

단계 11.f: 메틸 (3,6-디-O-아세틸-2-아지도-2,4-디데옥시-4-(프로프-1-엔-1-일)- α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(메틸 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-3-O-벤질-2- 벤질옥시카르보닐아미노 -2- 데옥시 -α-D-글루코피라노시드) ( 제82호 )의 제조

단계 11.e에서 수득한 화합물 (80) (5.65 g, 12.3 mmol) 및 화합물 (81) (문헌 [J.C. Jacquinet et al., Carbohydr. Res. 130 (1984), 221-241]에 따라 제조됨) (11.54 g, 1.2 몰 당량)을 방법 2에 따라 반응시켜 정제한 후, 화합물 (82) (9.39 g, 71％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1077.5 [(M+H)⁺].

단계 11.g: 메틸 (3,6-디-O-아세틸-2-아지도-2,4-디데옥시-4-(1,2-디히드록시프로필)-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(메틸 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -3-O-벤질-2-벤질옥시카르보닐아미노-2-데옥시-α-D-글루코피라노시드) ( 제83호 )의 제조

물 (8.35 ml, 1 몰 당량) 중 N-메틸모르폴린 N-옥시드 일수화물 (NMO) (1.11 g, 20 몰 당량) 및 4％의 사산화오스뮴 (OsO₄)을 1:1의 테트라히드로푸란-디클로로메탄 혼합물 (8 ml) 중 단계 11.f에서 수득한 화합물 (82) (513. mg, 0.476 mmol)의 용액에 첨가하였다. 실온에서 3일 동안 교반한 후, 1:1의 디클로로메탄-물 혼합물 뿐만 아니라 37.5％의 아황산수소나트륨 (NaHSO₃) 용액을 첨가하고, 추가 30분 동안 교반을 유지하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 추출하고, 실리카 상에서 정제하고, 출발 물질을 함유하는 분획물을 완전히 소모할 때까지 상기 조건 하 에서 반응시켰다. 정제한 후, 화합물 (83) (293 mg, 66％)을 최종적으로 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1111.4 [(M+H)⁺].

단계 11.h: 메틸 (3,6-디-O-아세틸-2- 아지도 -2,4- 디데옥시 -4-(5- 메틸 -2- 페닐 -1,3-디옥솔란-4-일)-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(메틸 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O- 아세틸 -3-O-벤질-2-벤질옥시카르보닐아미노-2-데옥시-α-D-글루코피라노시드) ( 제84호 )의 제조

CSA (21.6 mg, 0.2 몰 당량) 및 벤질리덴 디메틸 아세탈 (160 ㎕, 2.3 몰 당량) 을 아세토니트릴 중 단계 11.g에서 수득한 화합물 (83) (518 mg, 0.466 mmol)의 용액에 아르곤 하에서 첨가하였다. 1시간 30분 동안 교반한 후, 배지를 트리에틸아민으로 중화시키고, 건조상태로 농축시킨 후, 실리카 상에서 정제하여 화합물 (84) (454 mg, 74％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1199.5 [(M+H)⁺].

단계 11.1: 메틸 (2-아지도-2,4-디데옥시-4-(5-메틸-2-페닐-1,3-디옥솔란-4-일)-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우론산 )-(1-4)-(3-O-벤질-2-벤질옥시카르보닐아미노-2-데옥시-α-D-글루코피라노시드) ( 제85호 )의 제조

단계 11.h에서 수득한 화합물 (84) (215 mg, 0.18 mmol)를 방법 3에 따라 처리하였다. 실온에서의 자기 교반 16시간 후, 배지를 메탄올 (12.5 ml)로 희석하고, 이어서 4N의 수산화나트륨 수용액 (11.5 ml)을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 4시간 동안 교반하고, 6N의 염산으로 산성화시키고 (pH 5), 디클로로메탄으로 추출하고, 5％ Na₂SO₃ 및 마지막에 포화 염화나트륨으로 세척하였다. 건조 및 농축 후, 잔류물을 실리카 상에서 정제하여 화합물 (85) (157 mg, 86％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1017.3 [(M+H)⁺].

단계 11.j: 메틸 (2-아지도-2,4-디데옥시-4-(5-메틸-2-페닐-1,3-디옥솔란-4-일)-3,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-벤질-2-벤질옥시카르보닐아미노-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노시드 ) ( 제86호 )의 제조

단계 11.i에서 수득한 화합물 (85) (160 mg, 0.157 mmol)를 방법 4로 처리하여 화합물 (86) (215 mg, 95％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 689.1 [(M+H-3Na)^2-].

단계 11.k: 메틸 (2-아미노-2,4-디데옥시-4-(1,2-디히드록시프로필)-3,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨 2-O-소듐 술포네이토-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-아미노-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노시드) ( 제87호 )의 제조

단계 11.j에서 수득한 화합물 (86) (210 mg, 0.145 mmol)을 아세트산 없이 방법 5에 따라 처리하여 화합물 (87) (108 mg, 73％)을 수득하였다. 필요한 경우, 벤질 양성자가 NMR에 의해 완전히 사라질 때까지 반응을 수회 반복하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 996.1 [(M+H-Na)^-].

단계 11.l: 메틸 (2-N-소듐 술포네이토-2,4-디데옥시-4-(1,2-디히드록시프로필)-3,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨 2-O-소듐 술포네이토 -α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토 -2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노시드) ( 제88호 )의 제조

pH를 1N의 수산화나트륨으로 9.3에서 유지시키면서, 피리딘.SO₃ 복합체 (662 mg, 4.16 mmol)를 물 (7 ml) 중 단계 11.k에서 수득한 화합물 (87) (106 mg, 0.104 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 이어서, 온도를 실온으로 증가시키고, pH를 9.3에서 유지시키면서 반응 배지를 16시간 동안 교반한 후, 0.2M의 염화나트륨 용액으로 평형화된 세파덱스^® G-25 겔 컬럼 상에서 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획물을 배합하고 농축시킨 후, 잔류물을 물로 용출되는 동일한 세파덱스^® G-25 겔 컬럼에 의해 정제하여 화합물 (88) (116 mg, 91％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1199.8 [(M+H-Na)^-].

단계 11.m: 메틸 (2-N-소듐 술포네이토-2,4-디데옥시-4-포르밀-3,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨 2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토 -2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노시드) ( 제89호 )의 제조

과요오드산나트륨 (22.1 mg, 1.1 몰 당량)을 물 (1.9 ml) 중 단계 11.l에서 수득한 화합물 (88) (115 mg, 94 μmol)의 용액에 첨가하였다. 자기 교반 1시간 후, 반응 배지를 물로 평형화된 세파덱스^® G-25 겔 컬럼 상에서 정제하여 화합물 (89) (107 mg, 96％)를 수득하였다.

제법 12:

(2- 아세트아미도 -3,4-디-O-벤질-2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코 피라노실)-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제97호)의 합성

단계 12.a: (6-O-아세틸-2- 아지도 -3,4-디-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제94호 )의 제조

화합물 (93) (문헌 [R. Verduyn et al., Recl. Trav. Chim. the Netherlands, 109 (1990), 12, 591) (361 mg, 0.631 mmol) 및 단계 1.e에서 수득한 화합물 (6) (200 mg, 0.421 mmol)을 방법 2에 따라 처리하여 정제한 후, 화합물 (94) (224 mg, 60％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 885.4 [(M+H)⁺].

단계 12.b: (6-O-아세틸-2- 아세트아미도 -3,4-디-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제95호 )의 제조

단계 12.a에서 수득한 화합물 (94) (56.3 mg, 63.6 μmol)를 (17)의 합성 (단계 3.f)에 대해서와 같이 처리하여 화합물 (95) (54.5 mg, 95％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 901.2 [(M+H)⁺].

단계 12.c: (2- 아세트아미도 -3,4-디-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(3S,4R,5R)벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1- 카르복실레이트 -3- 카르복실산 ( 제96호 )의 제조

단계 12.b에서 수득한 화합물 (95) (101 mg, 50.9 μmol)를 방법 3에 따라 처리하였다. 잔류물을 다음 단계에서 원 상태로 사용하였다.

단계 12.d: (2- 아세트아미도 -3,4-디-O-벤질-2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 벤질-3- 카르복실레이트의 5-( 벤질옥시 )-4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) ( 제97호 )의 제조

단계 12.c에서 수득한 조 화합물 (96)을 방법 4에 따라 처리하여 화합물 (97) (35 mg, 88％ (2 단계))을 수득하였고, 이를 카르복실산 관능기에 대해 부분적으로 에스테르화할 수 있었다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 847.2 [(M-H)^-].

제법 13:

(3R,4R,5R)-벤질 3-(벤질옥시)-5-[(벤질옥시)메틸]-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트 (제100호)의 합성

단계 13.a: (4 aR ,8R,8 aR )벤질 8-( 벤질옥시 )-2- 페닐테트라히드로 -4H-[1,3] 디 옥시노[5,4-c]피리딘-6(5H)카르복실레이트 ( 제99호 )의 제조

캄포술폰산 (31 mg, 0.2 몰 당량)에 이어서 벤즈알데히드 디메틸 아세탈 (0.23 ml, 2.3 몰 당량)을 아세토니트릴 (13.4 ml) 중 화합물 (5) (250 mg, 0.67 mmol)의 용액에 첨가하였다. 실온에서의 자기 교반 1시간 후, 반응 배지를 트리에틸아민으로 중화시키고, 농축시키고, 실리카겔 (15:85의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 화합물 (99) (281 mg, 91％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 482.2 [(M+Na)⁺].

단계 13.b: (3R,4R,5R)-벤질 3-(벤질옥시)-5-[(벤질옥시)메틸]-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트 ( 제100호 )의 제조

트리에틸실란 (0.20 ml, 4 몰 당량), 트리플루오로아세트산 (0.09 ml, 4 몰 당량) 및 트리플루오로아세트산 무수물 (3 ㎕, 0.07 몰 당량)을 디클로로메탄 (1.2 ml) 중 단계 13.a에서 수득한 화합물 (99) (141 mg, 0.31 mmol)의 용액에 아르곤 하에서, 0℃에서, 연속적으로 첨가하였다. 온도를 0℃에서 5분 동안 유지시킨 후 반응 배지를 실온에서 3.5시간 동안 놓아두었다. 이어서, 반응 혼합물을 탄산수소나트륨 수용액, 물로 중화시키고, 유기상을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 상에서 정제하여 화합물 (100) (76 mg, 54％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 462.3 [(M+H)⁺].

제법 14:

(나트륨의 3-O-벤질-2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이 트)-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피 라노실)-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3R,4R,5R)-벤질 3-(벤질옥시)-5-[(벤질옥시)메틸]-4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트) (제104호)의 합성

단계 14.a: (벤질-2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실 우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-((3R,4R,5R)-벤질 3-(벤질옥시)-5-[(벤질옥시)메틸]-4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트) ( 제101호 )의 제조

화합물 (15) (123 mg, 0.075 mmol) 및 (100) (69 mg, 0.149 mmol)을 방법 2에 따라 처리하여 정제한 후, 화합물 (101) (117 mg, 80％)을 수득하였다. α/β 비 55/45.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1962 [(M+Na)⁺].

단계 14.b: (벤질 2,4-디-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아세트아미도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O- 아세틸 -2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3R,4R,5R)-벤질 3-(벤질옥시)-5-[(벤질옥시)메틸]-4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트) ( 제102호 )의 제조

화합물 (101) (117 mg, 60 μmol)을 피리딘 (1 ml) 중에 용해시킨 후 티오아세트산 (1 ml, 225 몰 당량)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 배지를 실온에서 17시간 동안 교반한 후 농축시키고, 실리카겔 (4:96의 에탄올-톨루엔) 상에서 정제하여 화합물 (102) (50 mg, 42％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1971.9 [(M+H)⁺].

단계 14.c: 3-O-벤질-α-L-이도피라노실우론산-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우론산 )-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3R,4R,5R)-벤질 3-(벤질옥시)-5-[(벤질옥시)메틸]-4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트) ( 제103호 )의 제조

화합물 (102) (50 mg, 25 μmol)를 방법 3에 따라 처리하여 유도체 (103)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1581.7 [(M+H)⁺].

단계 14.d: (나트륨의 3-O-벤질-2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노 실우로 네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-((3R,4R,5R)-벤질 3-(벤질옥시)-5-[(벤질옥시)메틸]-4-옥시피페리딘-1-카르복실레이트) ( 제104호 )의 제조

화합물 (103)을 방법 4에 따라 처리하여 화합물 (104) (43 mg, 80％, (2 단계))를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 2134.3 [(M-Na)^-].

제법 15:

(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트 ) (제114호)의 합성

단계 15.a: (4,6-O- 이소프로필리덴 -3-O-벤질-2-O-(4- 메톡시 )벤질-α-L- 이도 피라노실)-(1-4)-(1,6-안히드로-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-β-D-글루코피라노스) ( 제106호 )의 제조

NaH (6.93 g, 1.3 몰 당량)에 이어서 파라-메톡시벤질 클로라이드 (24 ml, 1.6 몰 당량)를 DMF (445 ml) 중 화합물 (105) (문헌 [C.A.A. van Boeckel et al., J. Carbohydrate Chemistry (1985) 4 (3), 293-321]에 따라 제조됨) (63.2 g, 111 mmol)의 용액에 0℃에서 및 아르곤 하에서 첨가하였다. 자기 교반 2시간 후, 메탄올 (9 ml)을 첨가하고, 반응 배지를 진공 하에서 농축시키고, 조 반응 생성물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카 (15:85의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 (106)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 707.3 [(M+NH₄)⁺].

단계 15.b: (3-O-벤질-2-O-(4- 메톡시 )벤질-α-L- 이도피라노실 )-(1-4)-(1,6-안히드로-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-β-D-글루코피라노스) ( 제107호 )의 제조

이전 단계에서 수득한 화합물 (106)을 물 중 80％의 아세트산에 노출시켰다. 자기 교반 15시간 후, 반응 혼합물을 얼음으로 냉각시키고, 희석시키고 (디클로로메탄), 탄산수소나트륨으로 중화시켰다. 유기상을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카 (3:7의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 (107) (63.2 g, 88％, 2 단계)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 672.3 [(M+Na)⁺].

단계 15.c: (3-O-벤질-6-O-tert-부틸디메틸실릴-2-O-(4-메톡시)벤질-α-L-이 도피라노실 )-(1-4)-(1,6- 안히드로 -2- 아지도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -β-D- 글루코피라노 스) ( 제108호 )의 제조

화합물 (107) (64.2 g)을 디클로로메탄 (200 ml) 중에 용해시켰다. 트리에틸아민 (30.3 ml, 2.2 몰 당량), 4-디메틸아미노피리딘 (1.21 g, 0.1 몰 당량) 및 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (17.04 g, 1.1 몰 당량)를 0℃에서 및 아르곤 하에서 연속적으로 첨가하였다. 자기 교반 4시간 후, 10％의 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드를 첨가하고, 1시간 후, 반응 배지를 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카 (15:85의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 (108)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 786.3 [(M+Na)⁺].

단계 15.d: (3-O-벤질-6-O-tert-부틸디메틸실릴-2-O-(4-메톡시)벤질-4-O-페 닐프로필 -α-L- 이도피라노실 )-(1-4)-(1,6- 안히드로 -2- 아지도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -β-D-글루코피라노스) ( 제109호 )의 제조

페닐프로필 브로마이드 (74 ml, 5 몰 당량)에 이어서 NaH (7 g, 1.5 몰 당량)를 디메틸포름아미드 (485 ml) 중 화합물 (108)의 용액에 0℃에서 및 아르곤 하에서 첨가하였다. 자기 교반 5.5시간 후, 메탄올 (50 ml)을 첨가하고, 반응 배지를 진공 하에서 농축시키고, 조 반응 생성물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켰다. 수득한 잔류물을 실리카 (15:85의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 (109) (49.3 g, 58％, 2 단계)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 904.3 [(M+Na)⁺].

단계 15.e-f: (2-O-아세틸-3-O-벤질-6-O-tert-부틸디메틸실릴-4-O-페닐프로필-α-L- 이도피라노실 )-(1-4)-(1,6- 안히드로 -2- 아지도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -β-D- 글루코피라노스 ) ( 제110호 )의 제조

물 (112 ml)을 디클로로메탄 (2.2 l) 중 (109) (49.3 g, 55.9 mmol)의 용액에 이어서 DDQ (19.03 g, 1.5 몰 당량)에 0℃에서 첨가하였다. 0℃에서 3시간 동 안 교반한 후, 탄산수소나트륨 용액을 첨가하였다. 유기상을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 농축시켰다. 수득한 잔류물을 피리딘 (335 ml) 중에 용해시킨 후 아세트산 무수물 (28 ml) 및 4-디메틸아미노피리딘 (682 mg)을 첨가하였다. 자기 교반 16시간 후, 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 수득한 잔류물을 실리카 (15:85의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 (110) (34.4 g, 77％, 2 단계)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 826.4 [(M+Na)⁺].

단계 15.d-h: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실 우로네 이트)-(1-4)-(1,6-안히드로-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-β-D-글루코피라노스) ( 제111호 )의 제조

크롬산 무수물 (10 g)을 함유하는 3.5M의 황산 수용액 (45 ml)을 아세톤 (1.46 l) 중 (110) (25.17 g, 31.3 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 0℃에서의 자기 교반 3시간 후, 반응 배지를 디클로로메탄으로 희석하고, 물로 세척하고, 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 반응 생성물을 수득하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. 상기에서 수득한 잔류물을 디메틸포름아미드 (230 ml) 중에 용해시키고, 탄산수소칼륨 (16.7 g, 5 몰 당량) 및 벤질 브로마이드 (39.8 ml, 10 몰 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반한 후 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 세척하고, 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 실리카겔 (1:4의 에틸 아세테이트-톨루엔) 상에서 정제하여 화합물 (111) (22.6 g, 91％, 2 단계)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 811.3 [(M+NH₄)⁺].

단계 15.i: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실우 로네이 트)-(1-4)-(1,6-디-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스) ( 제112호 )의 제조

트리플루오로아세트산 (TFA) (1.14 ml, 11 몰 당량)을 아세트산 무수물 (13.2 ml, 100 몰 당량) 중 화합물 (111) (1.11 g, 1.39 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 실온으로 되돌린 후, 반응 혼합물을 3.5시간 동안 교반하고, 이어서 농축시키고, 톨루엔과 동시기화시키고, 실리카겔 (85:15의 톨루엔-에틸 아세테이트) 상에서 정제하여 화합물 (112) (1.15 g, 93％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 918.3 [(M+Na)⁺].

단계 15.j: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실우 로네이 트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스) ( 제113호 )의 제조

벤질아민 (BnNH₂) (5.25 ml, 38 몰 당량)을 디에틸 에테르 (51 ml) 중 화합물 (112) (1.13 g, 1.26 mmol)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 실온에서 5시간 15분 동안 교반한 후, 배지를 1N의 HCl로 산성화시키고, 이어서 디에틸 에테르로 추출하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 농축시키고, 실리카겔 (35:65의 에틸 아세테이트-시 클로헥산) 상에서 정제하여 (113) (0.97 g, 90％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 854.3 [(M+H)⁺].

단계 15.k: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O- 페닐프로필 -α-L- 이도피라노실우 로네이트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트) ( 제114호 )의 제조

탄산세슘 (Cs₂CO₃) (0.583 g, 1.6 몰 당량)에 이어서 트리클로로아세토니트릴 (CCl₃CN) (0.56 ml, 5.0 몰 당량)을 디클로로메탄 (21.2 ml) 중 화합물 (113) (0.95 g, 1.12 mmol)의 용액에 아르곤 하에서 첨가하였다. 35분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 여과하고, 이어서 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 (25:75의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서 정제하여 (114) (995 mg, 90％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1021.5 [(M+Na)⁺].

제법 16:

(벤질 3-O-벤질-4-O- 페닐프로필 -2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네 이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) (제122호)의 합성

단계 16.a: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아지도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(1,6- 안히 드로-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-β-D-글루코피라노스) ( 제115호 )의 제조

화합물 (114) (990 mg, 0.99 mmol) 및 화합물 (8) (1.15 g, 1.7 mmol)을 방법 2에 따라 처리하여 정제한 후, 화합물 (115) (623 mg, 42％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1533.8 [(M+Na)⁺].

단계 16.b: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아지도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(1,6-디-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스) ( 제116호 )의 제조

화합물 (115) (590 mg, 0.39 mmol)를 화합물 (112)의 합성에 대해서와 같이 처리하여, 실리카겔 (7:3의 시클로헥산-에틸 아세테이트) 상에서 정제한 후, (116) (609 mg, 97％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1636.2 [(M+Na)⁺].

단계 16.c: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아지도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스) ( 제117호 )의 제조

화합물 (116) (592 mg, 0.367 mmol)을 화합물 (113)의 합성에 대해서와 같이 처리하여, 실리카겔 (65:35의 시클로헥산-에틸 아세테이트) 상에서 정제한 후, 화합물 (117) (530 mg, 92％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1593.9 [(M+Na)⁺].

단계 16.d: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아지도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α,β-D-글루코피라노스 트리클로로아세트이미데이트 ) ( 제118호 )의 제조

화합물 (117) (511 mg, 0.325 mmol)을 화합물 (114)의 합성에 대해서와 같이 처리하여, 실리카겔 (7:3의 시클로헥산-에틸 아세테이트) 상에서 정제한 후, (118) (495 mg, 89％)을 수득하였다.

C₈₅H₉₀Cl₃N₇O₂₅에 대해 계산된 원소 분석: C, 59.49; H, 5.29; N, 5.71.

수득치: C, 59.49; H, 5.50; N, 5.48.

단계 16.e: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아지도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2-아지도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제119호 )의 제조

화합물 (118) (497 mg, 0.279 mmol) 및 (6) (255 mg, 0.536 mmol)을 방법 2에 따라 처리하여 정제한 후, 화합물 (119) (375 mg, 66％)를 수득하였다.

C₁₁₁H₁₁₇N₇O₃₀에 대해 계산된 원소 분석: C, 59.49; H, 5.29; N, 5.71.

수득치: C, 59.49; H, 5.50; N, 5.48.

단계 16.f: (벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-4-O-페닐프로필-α-L-이도피라노실우 로네이트 )-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아세트아미도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라 노실)-(1-4)-(벤질 2-O-아세틸-3-O-벤질-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(6-O-아세틸-2- 아세트아미도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1,3- 디카르복실레이트 ) ( 제120호 )의 제조

화합물 (119) (180 mg, 88.7 μmol)를 피리딘 (1.4 ml) 중에 용해시킨 후 티오아세트산 (1.4 ml, 225 몰 당량)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 배지를 실온에서 17시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 실리카겔 (4:1의 톨루엔-아세톤) 상에서 정제하여 화합물 (120) (153 mg, 84％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 2084.8 [(M+Na)⁺].

단계 16.g: (벤질 3-O-벤질-4-O- 페닐프로필 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 3-O-벤질-α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2- 아세트아미도 -3-O-벤질-2- 데옥시 -α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-( 벤질옥시 )-4- 옥시피페리딘 -1,3- 디카르 복실레이트) ( 제121호 )의 제조

화합물 (120) (190 mg, 93.6 μmol)을 방법 3에 따라 처리하였다. 수득한 폴리올을 디메틸포름아미드 (4.4 ml) 중에 용해시키고, 탄산수소칼륨 (85 mg, 10 몰 당량) 및 벤질 브로마이드 (202 ㎕, 20 몰 당량)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반한 후 LH-20 컬럼 상에서 정제하였다.

실리카겔 (2:3의 에틸 아세테이트-시클로헥산) 상에서의 정제로 (121) (108 mg, 62％ (2 단계))을 수득할 수 있었다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1884.2 [(M+Na)⁺].

단계 16.h: (벤질 3-O-벤질-4-O- 페닐프로필 -2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도 피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이 토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(벤질 3-O-벤질-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피 라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-3-O-벤질-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D-글루코피라노실)-(1-4)-((3S,4R,5R)-디벤질 5-(벤질옥시)-4-옥시피페리딘-1,3-디카르복실레이트) ( 제122호 )의 제조

화합물 (121) (41 mg, 21.6 μmol)을 방법 4에 따라 처리하여 화합물 (122) (49 mg, 99％)를 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 2301.0 [(M-H)^-].

하기 실시예에서 제한 없이 본 발명 화합물의 제법을 예시하였다. 질량 및 NMR 스펙트럼으로 수득한 화합물의 구조를 확인하였다.

실시예 1 :

(나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2- 아세트아미도 -2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록 시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제20호 화합물)의 합성

제법 3의 화합물 (19) (50 mg, 24.02 μmol)를 방법 5에 따라 처리하여 화합물 (20) (26 mg, 72％)을 수득하였다.

실시예 2 :

(2- 아세트아미도 -2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4- 옥시피페리딘 -3- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제21호 화합물)의 합성

제법 12의 화합물 (97)을 방법 5에 따라 처리하여 화합물 (21)을 수득하였다.

실시예 3 :

(나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)- (2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4- 옥시피페리딘 -3- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제22호 화합물)의 합성

화합물 (22)를 동일한 방식으로 제조하였다.

실시예 4 :

(2- 아세트아미도 -2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2- 아세트 아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제23호 화합물)의 합성

화합물 (23)을 동일한 방식으로 제조하였다.

실시예 5 :

(나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토 -2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제27호 화합물)의 합성

제법 4의 화합물 (26) (7.0 mg, 3.28 μmol)을 방법 5에 따라 처리하여 화합물 (27) (2.9 mg, 55％)을 수득하였다.

실시예 6 :

(나트륨의 3-O- 메틸 -2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(3-O-메틸-2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 3-O- 메틸 -2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(3-O- 메틸 -2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제47호 화합물)의 합성

제법 6의 화합물 (46)을 방법 5에 따라 처리하여 정제한 후, 화합물 (47) (5 mg, 57％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1650.9 [(M-Na+H)^-].

실시예 7 :

(나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포 네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루 코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4- 옥시피페리딘 -3- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제69호 화합물)의 합성

제법 9의 조 화합물 (68)을 방법 5에 따라 처리하여 (69) (3.8 mg, 25％, 2 단계)를 수득하였다.

실시예 8 :

(나트륨의 4-O-프로필-2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4- 옥시피페리딘 -3- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제74호 화합물)의 합성

제법 10의 조 화합물 (73)을 방법 5에 따라 처리하여 (74) (6.0 mg, 62％, 2 단계)를 수득하였다.

실시예 9 :

메틸 (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4- 옥시피페리딘 -1-일-3- 카르복실레이트 (3S,4R,5R))-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토 -2,4- 디데옥시 -4- 메틸 -3,6-디-O-소듐 술포네이토 -α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨 2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이 트)-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토 -2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노 시드) (제90호 화합물)의 합성

소듐 시아노보로히드라이드 (4.4 mg, 2.4 몰 당량)를 인산염 완충액 (pH 7) 중 제법 11의 화합물 (89) (24 mg, 26.9 μmol) 및 실시예 3의 화합물 (22) (61 mg, 1.9 몰 당량)의 용액에 0℃에서 첨가하였다. 0℃에서 8시간 동안 교반한 후, 반응 배지를 실온에서 16시간 동안 놓아두고, 이어서 0.2M의 염화나트륨으로 용출되는 세파덱스^® G-25 겔 컬럼 상에 이어 물로 용출되는 동일한 세파덱스^® G-25 겔 컬럼 상에서 연속적으로 정제하여 화합물 (90) (17 mg, 31％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 2029.3 [(M+H-Na)^-].

실시예 10 :

메틸 (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4- 옥시피페리딘 -1-일-3- 카르복실레이트 (3S,4R,5R))-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토 -2,4- 디데옥시 -4- 메틸 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루 코피라노실)-(1-4)-(나트륨 2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토 -2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노시 드) (제91호 화합물)의 합성

화합물 (91)을 동일한 방식으로 제조하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1927.1 [(M+H-Na)^-].

실시예 11 :

메틸 (나트륨의 5-(히드록시)-4- 옥시피페리딘 -1-일-3- 카르복실레이트 (3S,4R,5R))-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토 -2,4- 디데옥시 -4- 메틸 -3,6-디-O-소듐 술포 네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨 2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노 실우로네이트)-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토 -2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글 루코피라노시드) (제92호 화합물)의 합성

화합물 (92)를 동일한 방식으로 제조하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 1321.1 [(M+H-Na)^-].

실시예 12 :

(2- 아세트아미도 -2- 데옥시 -6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4- 옥시피페리딘 -1- 메틸 -3- 카르복실레이트 (3S,4R,5R)) (제98호 화합물)의 합성

제법 12의 화합물 (97) (20 mg, 21.3 μmol)을 방법 5에 따라 3:1:1의 메탄올-아세트산-물 혼합물 중에서 수소 스트림 하에 처리하여 화합물 (98) (6.0 mg, 57％)을 수득하였다.

질량 스펙트럼 (ESI) m/z 456.8 [(M-H)^-].

실시예 13 :

(나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2- 아세트아미도 -2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1,4)-(5-(히드록시)-3- 히드 록시메틸-4-옥시피페리딘-(3R,4R,5R)) (제123호 화합물)의 합성

화합물 (104) (41 mg, 19 μmol)를 방법 5에 따라 처리하여 화합물 (123) (10.7 mg, 38％)을 수득하였다.

실시예 14 :

(나트륨의 4-O- 페닐프로필 -2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이 트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토 -α-L- 이도피라노실우로네이트 )-(1-4)-(2- 아 세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토 -α-D- 글루코피라노실 )-(1,4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3R,4R,5R)) (제124호 화합물)의 합성

화합물 (122)를 방법 5에 따라 처리하여 화합물 (124)를 수득하였다.

Claims

유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염기 또는 산으로 형성된 염의 형태, 및 용매화물 또는 수화물 형태의 하기 화학식 I의 화합물.

<화학식 I>

식 중,

R은 수소 원자, 히드록실 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 -O-아랄킬 라디칼을 나타내고;

Z는 COO^- 라디칼 또는 히드록실 라디칼을 나타내고;

X는 히드록실 라디칼 또는 하기 화학식 A의 당류 단위를 나타내고:

<화학식 A>

식 중,

- R₁은 A가 아자당 단위 또는 또 다른 당류 단위에 결합하는 것을 허용하는 산소 원자를 나타내고,

- R₂는 -NH₂ 라디칼, -NHCO(C₁-C₅)알킬 라디칼, -NHCO아릴 라디칼, -NHSO₃ ^- 라디칼, 히드록실 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼, -O-아랄킬 라디칼 또는 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₃은 히드록실 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 -O-아랄킬 라디칼을 나타내고,

- R₄는 히드록실 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼, -O-아랄킬 라디칼 또는 하기 화학식 B의 당류 단위를 나타내고:

<화학식 B>

식 중,

- R₆은 B가 화학식 A의 또 다른 당류 단위에 결합하는 것을 허용하는 산소 원자를 나타내고,

- R₇ 및 R₈은 상기에서 정의한 R₃과 동일한 정의를 갖고,

- R₉는 히드록실기, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼, -O-아랄킬 라디칼 또는 상기에서 정의한 화학식 A의 당류 단위를 나타내고,

- R₅는 상기에서 정의한 R₃과 동일한 정의를 갖고;

Y는 수소 원자, (C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 하기 화학식 D의 당류 단위를 나타내고:

<화학식 D>

식 중,

- R₁₀, R₁₂ 및 R₁₃은 각각 상기에서 정의한 R₅, R₃ 및 R₂와 동일한 정의를 갖고,

- R₁₁은

· D가 아자당 단위에 부착하는 것을 허용하는 (C₁-C₃)알킬렌 라디칼을 나타내거나 또는

· D가 또 다른 당류 단위에 부착하는 것을 허용하는 산소 원자를 나타내고,

- R₁₄는 -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 E가 하기 화학식의 라디칼을 나타내는 화학식 -O-E의 라디칼을 나타내고:

<화학식 E>

식 중,

- R₁₅는 -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼, -O-아랄킬 라디칼 또는 R₁₁이 산소 원자를 나타내는 화학식 D의 당류 단위를 나타내고,

- R₁₆ 및 R₁₇은 상기에서 정의한 R₃과 동일한 정의를 갖지만,

단, X 및 R 각각이 히드록실 라디칼을 나타내는 경우 Y는 수소 원자를 나타내지 않으며,

화학식 I의 화합물의 구성 당류 단위의 수는 1 내지 10이다.
제1항에 있어서, 유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염기 또는 산과의 염의 형태, 및 용매화물 또는 수화물 형태의 하기 화학식 I의 화합물.

<화학식 I>

식 중,

R은 수소 원자, 히드록실 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또 는 -O-아랄킬 라디칼을 나타내고;

Z는 COO^- 라디칼 또는 히드록실 라디칼을 나타내고;

X는 히드록실 라디칼 또는 하기 화학식 A의 당류 단위를 나타내고:

<화학식 A>

식 중,

- R₁은 산소 원자를 나타내고,

- R₂는 -NHCOCH₃ 라디칼, -NHSO₃ ^- 라디칼, -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₃은 히드록실 라디칼 또는 -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼을 나타내고,

- R₄는 히드록실 라디칼 또는 -O-아랄킬 라디칼 또는 하기 화학식 B의 당류 단위를 나타내고:

<화학식 B>

식 중,

- R₆은 산소 원자를 나타내고,

- R₇은 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₈은 히드록실 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 -O-아랄킬 라디칼을 나타내고,

- R₉는 -OSO₃ ^- 라디칼, -O-아랄킬 라디칼, -O-(C₁-C₅)알킬 라디칼 또는 상기에서 정의한 화학식 A의 당류 단위를 나타내고,

- R₅는 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고;

Y는 수소 원자 또는 하기 화학식 D의 당류 단위를 나타내고:

<화학식 D>

식 중,

- R₁₀은 상기에서 정의한 R₅와 동일한 정의를 갖고,

- R₁₂는 히드록실 라디칼 또는 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₁₃은 -NHSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₁₁은 아자당 단위에 연결된 메틸렌 라디칼 또는 E에 연결된 산소 원자 를 나타내고,

- R₁₄는 -OCH₃ 라디칼 또는 E가 하기 화학식의 라디칼을 나타내는 화학식 -O-E의 라디칼을 나타내고:

<화학식 E>

식 중,

- R₁₅는 D 단위 (여기서, R₁₁은 E가 D에 연결되는 것을 허용하는 산소 원자를 나타냄)를 나타내고,

- R₁₆은 -OSO₃ ^- 라디칼을 나타내고,

- R₁₇은 히드록실 라디칼을 나타내며,

화학식 I의 화합물의 구성 당류 단위의 수는 2 내지 10이다.
제1항 또는 제2항에 있어서, Y가 수소 원자이고 Z가 COO^- 라디칼인 화학식 I의 화합물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 하기로부터 선택되는 화합물:

· (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1- 4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R))

· (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-N-소듐 술포네이토-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R))

· (나트륨의 3-O-메틸-2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-메틸-2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 3-O-메틸-2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(3-O-메틸-2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R))

· (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2,6)-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R))

· (나트륨의 4-O-프로필-2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이 트)-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2,6-디-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R))

· (나트륨의 2,4-디-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(3-(히드록시)-5-히드록시메틸-4-옥시피페리딘 (3R, 4R, 5R))

· (나트륨의 4-O-페닐프로필-2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 2-O-소듐 술포네이토-α-L-이도피라노실우로네이트)-(1-4)-(2-아세트아미도-2-데옥시-6-O-소듐 술포네이토-α-D-글루코피라노실)-(1-4)-(나트륨의 5-(히드록시)-4-옥시피페리딘-3-카르복실레이트 (3S, 4R, 5R)).
임의로 1종 이상의 불활성이며 적절한 부형제와 조합된 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따르는 화학식 I의 화합물을 활성 성분으로서 함유하는 제약 조성물.
제5항에 있어서, 헤파라나제와 관련된 질환의 치료에 유용한 제약 조성물.
제5항에 있어서, 폐, 유방, 전립선 및 식도 암종과 같은 고도로 혈관화되는 암종, 대장암 및 위암과 같은 전이를 유도하는 암, 흑색종, 신경교종, 림프종 및 백혈병의 치료에 유용한 제약 조성물.
제5항에 있어서, 죽상동맥경화, 혈관성형술 후의 재협착과 같은 심혈관 질환, 혈관내 인공삽입물의 장착 및/또는 관상동맥 우회로 수술 또는 기타 혈관 이식 후에 나타나는 합병증, 심장 비대 또는 당뇨병성 망막증과 같은 당뇨병의 혈관 합병증과 관련된 질환의 치료에 유용한 제약 조성물.
제5항에 있어서, 류마티스성 관절염 또는 IBD와 같은 만성 염증 질환의 치료에 유용한 제약 조성물.
제5항에 있어서, 황반변성 치료에 유용한 제약 조성물.