KR20050044764A - ＮＦ-κＢ 억제제 및 그 용도 - Google Patents

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Abstract

매우 강력한 항-염증성 및 항균 활성을 갖는 새로운 종류의 이미다졸린s as 4-위치 에스테르가 개시된다. 이들 이미다졸린의 합성은 복합적 합성 접근에 적용 가능한 복수성분 반응을 포함한다. 이들 두 주요 특징의 조합은 패혈성 쇼크의 치료 및 많은 다른 염증성 (관절염 및 천식) 그리고 감염성 질환의 효과적인 치료용 약물을 제공한다. 이 신규한 종류의 비-스테로이드성제의 항-염증제(천식 등의 치료를 위한), 항균제, 그리고 방부제로서의 용도가 개시된다. 이 화합물은 또한 종양(암과 같은)의 치료에 유용하다. 이 이미다졸린은 그램 (+) 균에 대한 강력한 활성은 물론 전사 인자 NF-kB의 강력한 억제제이다. 이 조성물은 또한 자가 면역질환(자가 면역 질환)의 치료 그리고 기관 및 조직 이식의 거부 방지를 위하여 유용하다.

Description

ＮＦ-κＢ 억제제 및 그 용도 {NF-kB INHIBITORS AND USES THEREOF}
관련 출원
본 출원은, 2002년 5월 31일에 출원된 미국 가출원 제 60/385,162호의 우선권을 주장하며, 2003년 1월 17일에 출원된 미국 특허 출원 제 10/347,323호의 일부 계속 출원인 2003년 5월 30일에 출원된 미국 특허 출원 제 10/449, 662호의 일부 계속 출원이다.
연방 지원 연구 및 개발에 대한 언급
적용 안 됨.
"CD로 첨부되는 컴퓨터 리스트"의 참조
적용 안 됨.
기술분야
본원 발명은 신규한 다중 치환된 4-애시드 또는 에스테르 또는 아마이드 이미다졸린 및 그 제조 공정에 관련된다. 특히 본원 발명은 NF-kB 또는 NF-kB 키나아제를 억제하며, 항-염증제 그리고/또는 항균제(antimicrobial) 그리고/또는 항암제의 화학증강제(chemopotentiator) 그리고/또는 케모센시타이저(chemosensitizer) 그리고/또는 외래성 및 내인성 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응 억제제인 4-애시드 또는 에스테르 그룹을 함유하는 다중-치환된 이미다졸린에 관련된다. 이 조성물은 염증성 질환, 알츠하이머 질환, 뇌졸중, 동맥경화증, 혈관 재협착, 당뇨병, 사구체염(glomerulophritis), 암, 호지킨씨 병, 악액질, 후천성 면역 결핍 증후군 (AIDS)을 포함하는 특정 바이러스 감염과 관련된 염증, 성인 호흡 곤란 증후군, 운동 실조증, 그리고 다양한 피부 관련 질환의 치료에 유용하다. 이 조성물은 또한 자가 면역 질환의 치료 및 기관 및 조직 이식의 거부 억제에 유용하다.
포유류 핵 전사 인자인 NF-kB는 세포자살 (프로그램 된 세포 사망)의 조절을 포함하는 유전자 전사의 활성화와 관련된, 다중-소단위의 복합체이다. (Baeuerle, Henkel, Ann. Rev. Immunol., 12: 141-179 (1994) ; Baldwin, Ann. Rev. Immunol. 14, 649-683 (1996)). NF-kB는 주로 억제성 IkB 단백질과의 불활성 복합체의 형태로 세포질에 동형이량체(homodimer) (p5O/p5O) 또는 이형이량체(heterodimer) (p5O/p65)로서 존재한다. 항암제 (White, J. Biol. Chem. 272: 14914-14920 (1997) ; Baldwin, J. Clin. invest. 107: 241-246 (2001); Hideshima. et al., J. Biol. Chem. 277: 16639-16647 (2002) ; Bottero et al. , Cancer Res. 61: 7785-7791 (2001) ; Um et al., Oncogene 20: 6048-6056 (2001); Weldon et al., Surgery 130: 143150 (2001) ; Arlt et al. , Oncogene 20: 859-868 (2001) ; Liu et al., J. Immunol. 166: 5407-5415 (2001) ; Kim et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 273: 140-146 (2000)), 바이러스 (HIV-1, HTLV-1), 염증성 사이토킨 (TNF-α, IL-1), 포르볼 에스테르, 박테리아 생성물 (LPS) 및 산소성 스트레스를 포함하는 많은 세포 자극은 IkB의 세린 32 및 36에 IKK 매개 인산화를 초래하고, 그 후 유비퀴틴화되며 26S 프로테오좀에 의하여 순차적으로 분해된다. (Baeuerle and Henkel, Ann. Rev. Immunol. 12. 141-179 (1994). IkB의 분해는 NF-kB의 방출을 확보한다. 방출에 따라, NF-κB는 핵으로 전좌되며, 여기서 소단위가 특이적 DNA 조절 인자와 결합하여 유전자의 전사를 개시한다. 전좌 동안, 최적의 유전자 전사를 위하여 부차적인 단백질 인산화가 요구된다. (Karin and Lin, Nat. Immunol. 3: 221-227 (2002); Zhong et al., Cell 89: 413-424 (1997); Sizemore et al., Mol. Cell Biol 19: 4798-4805 (1999) ; Madrid et al., Mol. 세포 Biol 20: 1626-1638 (2000)). 비록 이 인산화를 일으키는 키나아제가 아직 명백히 밝혀지지는 않았지만, 키나아제 GSK-3 의존성 사이클린이 관련되었다는 것을 제안하는 증거가 증가하고 있다. (Schwabe and Brenner, Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 283: G204-211 (2002); Ali et al., Chem. Rev. 101: 2527-2540 (2001)). NF-kB 매개 유전자 전사의 억제는 억제성 단백질 IkB의 인산화의 억제, IkB 분해의 억제, NF-kB (p5O/p65) 핵 전좌의 억제, NF-kB-DNA 결합 또는 NF-kB-매개 DNA 전사의 억제를 통하여 수행될 수 있다. (NF-kB 억제제에 대한 종합적인 검토를 위해서는, Epinat and Gilmore, Oncogene 18: 6896-6909 (1999)참조). NF-kB 활성화에 의하여 조절되는 유전자는 다수의 사이토킨(cytokines) (TNF, IL-1, IL-2, IL-6, IL iNOS), 케모킨(chemokines), 세포 부착 분자, 급성상(acute phase) 단백질, 면역조절 단백질, 아이코사노이드 대사 효소, 그리고 항-고사(anti-apoptotic) 유전자 이다.
NF-kB 활성화는 암 관련 질병에 작용한다. NF-kB는 암유전자 ras (인간 종양에서 가장 흔한 결함), TNF, 이온화 방사선 (방사 손상) 그리고 화학요법제에 의하여 활성화된다. 이들 신호에 의한 NF-kB의 활성화는 항-고사 세포 신호의 상향 조절(upregulation)을 초래하며 그러므로 화학요법에 저항성인 종양세포를 초래할 수 있다. NF-kB의 억제는 그러므로 종양을 화학요법 약물에 감수성으로 하는 가능한 치료법이며 신규한 암 치료의 유망한 후보이다. 이 치료법에 대한 관련 정보는 (Das and White, J. Biol. Chem. 272: 14914-14920 (1997) ; Baldwin, J. Clin Invest. 107: 241-246 (2001) Hideshima et al. , J. Biol. Chem. 277: 16639-16647 (2002) Weldon et al., Surgery 130: 143-150 (2001); Arlt et al., Oncogene 20: 859-868 (2001) ; Crinelli et al. , Blood Cell Mol. Dis. 26: 211-222 (2000) ; Mayo and Baldwin, Biochim. Biophys. Acta 1470: M55-62 (2000) ; Adams, Curr. Opin. Chem. Biol. 6: 493-500 (2002) ; Boland, Biochem. Soc. Trans. 29: 674-678 (2001); Chen et al., Am. J. Pathol. 159. 387-397 (2001); Cusack et al., Drug Resist. Updat. 2. 271-273 (1999); Darnell, Ji., Nat. Rev. Cancer 2. 740.749 (2002); Guttridge et al., Mol. Cell. Biol. 19. 5785.5799 (1999); Jones et al., Ann. Thorac. Surg. 70. 930.936 (2000); discussion 936-937; Orlowski et al., J. Clin. Oncol. 20: 4420-4427 (2002) ; Royds et al., Mol. Pathol. 51: 55-61 (1998) ; Shah et al. , J. Cell. Biochem. 82. 110-122 (2001); Wang et al., Science, 274: 784-787 (199 6) )에서 찾을 수 있다. NF-kB 활성화는 또한 염증성 질환에 상당한 역할을 한다. NF-kB는 TNF 및 다른 향 염증성(pro-inflammatory) 사이토킨에 의하여 활성화된다. 비-독성 억제제에 의한 NF-kB 활성화의 억제는 그러므로 많은 염증성 질환, 류머티스성 관절염, 염증성 장 질환, 천식, 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD) 골관절염, 골다공증 및 섬유화 질환(fibrotic disease)의 치료에 임상적으로 사용될 수 있다. 이에 대한 관련 정보는 (Feldmann et al., Ann. Rheum. Dis. 61: Suppl 2, ii13-18 (2002) ; Gerard and Rollins, Nat. Immunol. 2: 108-115 (2001) ; Hart et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 158. 1585.1592 (1998); Lee and Burckart, J. Clin. Pharmacol. 38. 981-993 (1998); Makarov, Arthritis Res. 3: 200-206 (2001) ; Manna et al. , J. Immunol. 163: 6800-6809 (1999) ; Miagkov et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U S Al 95, 1385913864 (1998) ; Miossec, Cell Mol. Biol . (Noisy-le-grand) , 47: 675-678 (2001); Roshak et al., Curr. Opin. Pharmacol. 2: 316-321 (2002) ; Tak and Firestein, J. Clin. Invest. 107: 7-11 (2001); Taylor, Mol. Biotechnol. 19. 153-168 (2001); Yamamoto and Gaynor, J. Clin. Invest. 107: 135-142 (2001); Zhang and Ghosh, J. 내독소 Res. 6: 453-457 (2000))에서 찾을 수 있다.
NF-kB 활성화는 면역 질환에서 상당한 역할을 한다. (Ghosh et al., Ann. Rev. Immunol. 16. 225.260 (1998)). NF-kB의 활성화는 면역학적 관련 단백질을 엔코딩하는 매우 다양한 유전자의 활성화된 전사를 유도한다. (Baeuerle and Henkel, Ann. Rev. Immunol. 12: 141-179 (1994); Daelemans et al., Antivir. Chem. Chemother. 10. 1.14 (1999)). 인간의 경우, 면역 결핍 바이러스 (HTV) 감염은 NF-kB 활성화를 유도하며, 이것은 규칙적인 바이러스 지속감염(persistence)을 유도한다. (Rabson, A. B. , Lin, H. C. Adv Pharmacol , 48, 161-207 (2000) ; Pati, S., Foulke, J. S., Jr., Barabitskaya, O., Kim, J., Nair, B. C. et al. J Virol , 77, 5759-5773 (2003) ; Quivy, V., Adam, E., Collette, Y., Demonte, D., Chariot, A. et al. J Virol, 76, 11091-11103 (2002) ; Amini, S., Clavo, A., Nadraga, Y., Giordano, A., Khalili, K. et al. Oncogene , 21, 5797-5803 (2002) ; Takada, N. . Sanda, T. , Okamoto, H., Yang, J. P., Asamitsu, K. et al. J Virol, 76, 80198030 (2002); Chen-Park, F. E.; Huang, D. B., -Noro, B., Thanos, D. , Ghosh, G. J Biol Chem, 277, 24701-24708 (2002); Ballard, D. W. Inununol Res, 23, 157-166 (2001); Baldwin, A. S. , Jr. LT C1 in -Tnves t, 1 0 7, 3 - 6 (2 0 0 1) ; Calzado, M. A., MacHo, A., Lucena, C., Munoz, E. Clin Exp 1mmunol, 120, 317-323 (2000); Roland, J., Berezov, A., Greene, M. I., Murali, R., Piatier-Tonneau, D. et al. DNA Cell Biol, 18, 819-828 (1999); Boykins, R. A., Mahieux, R., Shankavaram, U. T., Gho, Y. S., Lee, S. F. et al. J Immunol, 163, 15-20 (1999); ASin, S., Taylor, J. A., Trushin, S., Bren, G., Paya, C. V. J Virol, 73, 3893-3903 (1999); Sato, T., Asamitsu, K., Yang, J. P., Takahashi, N., Tetsuka, T. et al. AIDS Res Hum Retroviruses, 14, 293-298 (1998)). HIV-1 복제는 다양한 바이러스 단백질 및 바이러스의 LTR(long terminal repeat)와 상호작용하는 세포 전사 인자 (특히 NF-kB)를 통하여 조절된다. (Asin, S. , Taylor, J. A. , Trushin, S. , Bren, G. I Paya, C. V. J Virol,. 73, 3893-3903 (1999)). HIV-1는 잠복 상태로 들어갈 수 있으며, 여기서 통합된 프로바이러스(integrated provirus) 전사적으로 조용하게 유지된다.
세포를 잠복하여 계속적으로 감염시키기는 능력은 바이러스가 지속적인 감염을 수립하고 숙주 면역 시스템을 피하도록 돕는다. 잠복 바이러스는 림프 조직에 거주하는 T-세포에서 유전자 변이체의 커다란 저장소를 수립할 수 있다. 또한, 최근의 연구는 항바이러스 치료관련 특허에서 NF-kB를 T-세포 내의 잠복 HIV의 재활성화와 연루시킨다. (Finzi, D., Hermankova, M., Pierson, T., Carruth, L. M.,; Buck, C. et al. Science, 278, 1295-1300 (1997)). 이 분야의 관련 특허는 Baba. et al.의 EP 0931544 A2 및 Callahan et al.의 WO 02/30423 Al이다.
천식에서 나타나는 것과 같은 만성 기도 염증은 사이토킨이라는 염증성 단백질의 과도한 발현과 관련된다. 또한, IL-1 및 TNF와 같은 다른 염증성 매개체는 류머티스성 관절염과 같은 관절 질환에 주요한 역할을 한다. 이들 염증성 단백질 모두는 핵 전사 인자 카파 B (NF-kB)에 의하여 고도로 조절된다. (Yamamoto, Y., et al., J. Clin Invest 107 135-142 (2001); and Hart, L. A., et al., Am J Respir Crit Care Med 158 1585-1592 (1998)). 항-염증성 약물에 의한 이들 조절 단백질 또는 이들의 키나아제의 억제가 이들 질환의 치료에 효과적인 것으로 나타났다. (Yamamoto, Y., et al., J. Clin Invest 107 135-142 (2001); Coward, W. R., et al., Clin Exp Allergy 28 Suppl 3, 42-46 (1998) ; Badger, A. M. . et al. , J. Pharmacol Exp Ther 290 587-593 (1999); Breton, J. J., et al. , J Pharmacol Exp Ther 282 459-466 (1997) ; Roshak, A. , et al. , J Pharmacol Exp Ther 283 955-961 (1997) ; Kopp, E., et al., Science 265 956-959 (1994); Ichiyama, T., et al., Brain Res 911 56-61 (2001); Hehner, S. P., et al., J Immunol 163 5617-5623 (1999); Natarajan, K., et al., Proc Natl Acad Sci USA 93 9090-9095 (1996); and Fung-Leung, W. P., et al., Transplantation 60 362-368 (1995)). 통상의 항-염증성제, 아스피린, 및 아스피린-유사 약물, 살리실레이트가 염증의 치료에 널리 처방되는 제제이며 그들의 효과는 NF-kB의 억제에 공헌한다. 그러나 만성 염증을 치료하기 위하여, 세포 수준의 이들 살리실레이트는 매우 고 농도일 것이 요구되며 일반적으로 1-3 miliMolar 혈장 농도로 처방된다. (Science 265, 956-959 (1994)).
페니실린의 발견 이후, 100가지 이상의 항균제가 광범위한 세균 감염과 싸우기 위하여 개발되었다. 오늘날, 임상적으로 사용되는 항균제는 주로 β-락탐 (페니실린, 카바페넴 및 세팔로스포린), 아미노글리코사이드, 테트라사이클린, 술폰아마이드, 마크로라이드 (에리쓰로마이신), 퀴놀론, 및 최근 분류된 약물: 반코마이신 (글리코펩타이드)이다. 최근 몇 년 동안, 전 세계적으로 많은 새로운 박테리아 균주가 이들 약물에 저항성을 개발하였다. 새로운 항균제에 대한 수요가 존재한다.
그램 양성 또는 그램 음성 박테리아의 침투성 감염은 종종 패혈성 쇼크 및 사망을 초래한다. 두 종류 모두의 세균에 의한 혈류의 감염은 (그램 양성 및 음성) 내독소, 리포폴리사카라이드 (LPS)로 인하여 인간에서 패혈증을 유발하며. (H. Bohrer, J. Clin. Invest. 972.985 (1997)), 이것은 숙주에서 다량의 염증 반응을 촉발한다. LPS가 패혈성 쇼크를 일으키는 기전은 전사 인자 NF-kB의 활성화를 통하여서이다. 이 단백질의 키나아제에 의한 활성화는 강력한 치명적 패혈성 쇼크를 초래하는 사이토킨의 다량의 방출을 개시한다. 예를 들면, 폐렴쌍구균은 건강한 성인에서 치사율 40%로 치명적이며 포도상구균 감염은 오늘날 미국 병원에서 균혈증의 주요 원인이다. 이들 내독소에 대한 숙주의 과민 반응에 의한 패혈성 쇼크는 종종 다발성 기관 부전, 다발성 기관 실조를 일으키며, 외상 환자의 사망을 일으키는 원인이 된다. LPS에 의한 NF-kB 활성화의 억제는 그러므로 패혈성 쇼크의 치료 및 다른 세균성 감염의 치료에 치료학적으로 유용하다.
전통적인 항암제(antineoplastic agents)와 관련된 항종양 효과의 속도 및 지속을 증가시키기 위하여 현재 사용되는 증식 억제제(antiproliferative agents)의 효능을 조절하는데 관심이 집중되고 있다. 암 치료에 사용되는 전통적인 증식 억제제는 (1) 결합, 알킬화, 가닥 끊김 유도, 염기 쌍 사이에 인터칼레이팅(intercalating between) 또는 DNA 및 RNA의 총체성 및 기능을 유지하는 효소에 작용함으로써 핵산 중합체의 총체성에 작용하는 화학적 화합물 ; 그리고 (2) 효소 작용 또는 세포 총체성에 필요한 구조적 단백질(예를 들면, 항튜불린제[antitubulin agents])의 기능을 억제하기 위하여 (예를 들면 항대사물질[antimetabolites]) 단백질에 결합하는 화학제로 광범위하게 분류된다. 일부 암의 치료에 유용한 것으로 밝혀진 다른 화학적 화합물은 유방 및 전립선암의 치료를 위한 스테로이드 호르몬의 작용을 차단하는 약물, 광화학적으로 활성화된 제제, 방사선 감광화제(radiation sensitizers) 및 보호제(protectors)를 포함한다.
본 발명의 주요 관심사는 암 세포의 유전적 구조의 총체성에 직접적으로 작용하는 화합물이다. DNA 및 RNA와 같은 핵산 중합체는 항암 약물의 일차적 대상이다. 니트로겐 머스터드, 니트로소유레아, 아지리딘 (마이토마이신 C와 같은) 함유 화합물과 같은 알킬화제는 DNA를 직접적으로 공격한다. 유사하게 시스플라틴 및 카보플라틴과 같은 금속 배위 화합물은 세포가 복구하기 어려운 손상을 초래하도록 핵산 구조를 직접적으로 공격하며, 이것은 차례로 세포 죽음을 초래할 수 있다. 다른 핵산 작용 화합물은 DNA 중합체의 핵산 염기 사이에 인터칼레이트 되는 독소루비신과 같은 안트라사이클린 분자, 핵산 가닥 끊김을 일으키는 블레오마이신, 핵 중합체 구조에 부적절하게 편입되어 결국 미성숙 DNA 사슬 종결을 유도하는 피리미딘 및 퓨린 뉴클레오사이드 아날로그와 같은 뉴클레오사이드와 같은 부정(fraudulent) 뉴클레오사이드를 포함한다. 게놈의 총체성 및 기능에 작용하는 특정 효소 또한 암 세포에서 특이적 화학 제제에 의하여 억제될 수 있으며 암세포 죽음을 유도할 수 있다. 이들은 리보뉴클레오타이드 환원효소 (예를 들면, 하이드록시유레아, 겜시타빈), 토포이소머라아제 I (예를 들면, 캠포테신[camptothecin]) 그리고 토포이소머라아제 II (예를 들면 에톱사이드[etoposide])에 작용하는 효소들을 포함한다.
DNA의 대부분의 기능은 풀림(untwisting)을 요구하므로 토포이소머라아제 효소는 수퍼코일된 DNA 구조에 작용한다. 토포이소머라아제 I (톱 1)는 수퍼코일된 DNA를 풀며, 두 가닥 중 오직 하나만을 분해하는 반면, 토포이소머라아제 II (톱 2)는 모두들 분해한다.
토포이소머라아제 I 억제는 식물 기원의 알칼로이드인 캠포테신(camptothecin) (CPT)이 톱 I의 가장 잘 알려진 억제제이며 매우 강력한 항암제라는 것의 발견을 통하여 암 화학요법에서 중요하게 되었다. CPT는 희수나무(Chinese tree), Camptotheca acuminata에 함유되어 있다. 다수의 아날로그가 다수의 종양 타입의 치료에 상업적으로 이용되도록 승인되었다. 이들에는 CPT-11 (이리노테칸) 및 토포테칸이 포함된다.
캠포테신(camptothecin)의 많은 타입의 암에 대한 임상적 활성이 증명 가능한 반면, 종양 반응 속도, 반응의 지속 및 종국적 환자의 생존에 대한 개선은 여전히 탐구중이다. 여기서 개시된 발명은 토포이소머라아제 I 억제제를 포함하는 화학요법 약물, 특히, 캠포테신(camptothecin)의 항종양 효과를 강화할 수 있는 신규한 용도를 입증한다.
관련 문헌에는 다음이 포함된다. : Cancer Chemotherapeutic Agents, W.O. Foye, ed., (ACS, Washington, D. C.) (1995)); Cancer Chemotherapy Handbook, R. T. Dorr and D. D. VonHoff, (Appleton and Lange, Norwalk, Connecticut) (1994); and M.P. Boland, Biochemical Society Transactions (2001) volume 29, part 6, p 674-678. DNA damage signaling and NF-xB. implications for survival and death in mammalian cells.
NF-kB는 세포자살 (프로그램 된 세포 죽음)을 억제하는 것으로 생각된다. 많은 임상적으로 사용되는 화학요법제(빈크리스틴 및 빈블라스틴을 포함하는 빈카 알칼로이드, 캠포테신[camptothecin] 및 기타)는 최근 NF-kB을 활성화하여 그들의 세포독성에 방해를 초래하는 것으로 나타났다. 이 형태의 저항성은 통상적으로 NF-kB 매개 화학내성(chemoresistance)이라 지시된다. NF-kB의 억제는 종양 세포 및 고형 종양의 화학요법제에 대한 감수성을 증가시키는 것으로 나타났다.
참조문헌: Cusack, J.C., Liu, F., Baldwin, A.S. Drug Resist Updat , 21 271-273 (1999); Mayo, M.w., Baldwin, A.S. Science, 274, 784-787 (1996); Cusack, J.C., Jr., Liu, R., Baldwin, A.S., Jr. Cancer Res, 60, 2323-2330 (2000) . Brandes, L.M. , Lin, Z.P. , Patierno, S.R., Kennedy, K.A. Mol Pharmacol, 60, 559-567 (2001); Arlt, A., Vorndamm, J., Breitenbroich, M., Folsch, U.R., Kalthoff, H. et al. Oncogene , 20, 859-868 (2001). Cusack, J.C., Jr., Liu, R., Houston, M., Abendroth, K., Elliott, P. J. et al. Cancer Res 61, 3535-3540 (2001).
본 발명은 임상적으로 중요한 화합물로서 이미다졸린의 합성 및 용도를 개시한다. 이미다졸린은 새로운 1,2-디폴라 사이클로첨가 반응을 통하여 제조된다. "문숀[munchones]" 의 아주락톤[azlactones]을 이용하는 1,3 디폴라 사이클로첨가 반응은 피롤 및 이미다졸의 합성을 위한 일반적 경로를 제공한다. (Hershenson, F.M.P., 합성 999-1001 (1988); Consonni, R.C., et al., J. chem. Research (S) 188-189 (1991) ; and Bilodeau, M.T.C. I J. Org. Chem. 63 2800-2801 (1998)). 이러한 접근 방식은 헤테로사이클의 이미다졸린 종류를 위해서는 아직 보고되지 않았다. 이미다졸린의 효율적인 합성에 대한 합성 및 약물학적 관심은 몇몇 다양한 합성적 접근 방법의 개발을 촉진하였다. (Puntener, K., et al., J. Org Chem 65 83018306 (2000) ; Hsiao, Y. H. j J. Org. Chem. 62 3586-3591 (1997)). 최근, Arndtsen 등은 이민, 애시드 클로라이드 및 일산화탄소의 Pd-촉매된 커플링을 통하여 대칭적으로 치환된 이미다졸린 카복실릭 애시드의 합성을 보고하였다. (Dghaym, R.D. D., et al., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 40 3228-3230 (2001)). 또한, 아조메틴 이리드(azomethine ylides)의 부분입체이성질 선택성(diastereoselective) 1,3-디폴라 사이클로첨가는 아미노 산 에스테르로부터 순수한 거울상 이성질(enantiopure) 설핀이민(sulfinimine)으로 N-설피닐 이미다졸리딘을 산출하는 것으로 보고되었다. (Viso, A., et al., J. Org. Chem. 62 23162317 (1997)).
Ritzeler등의 미국 특허 제6,318,978호는 본원 발명의 그것과 구조적으로 상당히 다른 3,4-벤즈이미다졸을 개시한다. 그들은 NF-kB 키나아제를 억제한다. 활성은 치환체 이미다졸린 및 벤젠 링에서 다수의 다른 치환체가 있는 경우에 유지된다. M. Karin, Nature Immunology, 3, 221-227 (2002); Baldwin, J. Clin. invest., 3, 241-246 (2001); T. Huang et al, J. Biol. Chem. , 275, 9501-9509 (2000) ; and J. Cusack and Baldwin, Cancer Research, 60, 2323-2330 (2000)에서는 암에 대한 NF-kB의 활성화의 효과를 개시한다. Baltimore의 미국 특허 제. 5, 804, 374호 및 제6, 410, 516호는 NF-kB억제를 개시하며, 이것은 여기에 참조문헌으로서 편입된다.
억제의 일반적 방법론에 대한 관심 특허는 Schwartz 등의 미국 특허 제 5,821,072호 및 등의 제 6,001,563호에서 제공된다.
도 1은 화합물 1 ~ 20의 구조를 도시한다.
도 2는 대표적인 화합물 1의 x-선 결정구조를 도시한다.
도 3은 이미다졸린 8-10과 핵 추출물의 EMSA이다. 레인 1, DNA만 (대조군); 레인 2, DNA, p5O 동형중합체로의 핵 추출물 (10 ㎍)(대조군) ; 레인 3, DNA, PMA 활성화된 핵 추출물 (10 ㎍) (대조군); 레인 4, DNA, 활성화 안 된 PMA 핵 추출물 (10 ㎍) (대조군); 레인 5, DNA, 화합물 8(1.0 μM)로 PMA 활성화 후 핵 추출물 (10 ㎍) ; 레인 6, DNA, 화합물 8(0.1 μM)로 PMA 활성화 후 핵 추출물 (10 ㎍) ; 레인 7, DNA, 화합물 9(1.0 μM)로 PMA 활성화 후 핵 추출물 (10 ㎍); 레인 8, DNA, 화합물 9(0.1 μM)로 PMA 활성화 후 핵 추출물 (10 ㎍) ; 레인 9, DNA, 화합물 10 (1.0 μM)로 PMA 활성화 후 핵 추출물 (10 ㎍) ; 레인 10, DNA, 화합물 10 (0.1 μM)로 PMA 활성화 후 핵 추출물 (10 ㎍).
도 4A 및 4B는 화합물 4 및 6으로의 종양 성장 지연을 나타낸다.
도 5는 이미다졸린 골격 28-33의 합성을 도시한다.
도 6은 신규한 이미다졸린 28-50의 구조를 도시한다. 37 및 38은 (COCl)2, EtOH로 에스테르화 한 후이다. 39는 H2, 5% Pd/C로 수소화한 후이다.
도 7은 p65 ELISA로 측정한 화합물 32에 의한 NF-kB의 핵 전좌 억제를 나타낸다.
도 8은 p65 ELISA로 측정한 화합물 28-33에 의한 NF-kB의 핵 전좌 억제를 나타낸다.
도 9는 화합물 32에 반응한 시간에 따른 세포의 죽음이 미미함을 나타낸다.
도 1OA는 화합물 28, 32, 및 33이 쥐에서 독성이 아님을 나타낸다.
도 10B는 화합물 29 및 31이 쥐에서 독성이 아님을 나타낸다.
도 11은 캠포테신(camptothecin)에 의한 NF-kB 활성화의 EMSA 분석을 나타낸다.
레인 1: NF-kB 공통(consensus) 올리고뉴클레오타이드 (0.16 pmol/λ); 레인 2: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (PMA/ PHA, 20 ㎍) ; 레인 3: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (PMA/ PHA, 20 ㎍) + 항체 p65; 레인 4: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (-PMA/-PHA, 20 ㎍) ; 레인 5: NF-kB 공통 올리고 (0. 16 pmol/λ) + 핵 추출물 (10 μM CPT, 20 ㎍) ; 레인 6: NF-kB 공통 올리고 (0.16pmol/λ) + 핵 추출물 (1 μM CPT, 20 ㎍) ; 레인 7: NF-kB 공통 올리고 (0. 16 pmol/λ) + 핵 추출물 (0.1 μM CPT, 20 ㎍); 레인 8: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (0.01 μM CPT, 20 ㎍).
CPT 배양 모두는 2 시간동안 수행되었다. PMA/PHA 양성 대조군은 4 시간동안 배양되었다.
도 12는 이미다졸린 32에 의한 CPT 활성화된 NF-kB의 억제에 대한 EMSA 분석을 나타낸다. 레인 1: NF-kB 공통 올리고뉴클레오타이드 (0.16 pmol/λ); 레인 2: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (PMA/ PHA) ; 레인 3: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (PMA/ PHA) + 항체 p65; 레인 4: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (-PMA/-PHA) ; 레인 5: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (0.1 μM CPT); 레인 6: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (0.1 μM CPT + 5 μM PDTC); 레인 7: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (0.1 μM CPT + 10 μM 32); 레인 8: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (0.1 μM CPT + 1 μM 32) ; 레인 9: NF-kB 공통 올리고 (0. 16 pmol/λ) + 핵 추출물 (0.1 μM CPT + 0.1 μM 32) ; 레인 10: NF-kB 공통 올리고 (0.16 pmol/λ) + 핵 추출물 (0. 1 μM CPT + 0.01 μM 32)
CPT 배양 모두는 2 시간동안 수행되었다. PMA/PHA 양성 대조군은 4 시간동안 배양되었다.
도 13A는 1 μM이미다졸린 31에 의한 캠포테신(camptothecin)에 대한 CEM 세포의 감작(sensitization)을 나타낸다.
도 13B는 0.1 μM 이미다졸린 31에 의한 캠포테신(camptothecin)에 대한 CEM 세포의 감작(sensitization)을 나타낸다.
도 13C는 0.01 μM 이미다졸린 31에 의한 캠포테신(camptothecin)에 대한 CEM 세포의 감작(sensitization)을 나타낸다.
도 13D는 1 μM 이미다졸린 30에 의한 캠포테신(camptothecin)에 대한 CEM 세포의 감작(sensitization)을 나타낸다.
도 13E는 0.1 μM 이미다졸린 30에 의한 캠포테신(camptothecin)에 대한 CEM 세포의 감작(sensitization)을 나타낸다.
도 13F는 0.01 μM 이미다졸린 30에 의한 캠포테신(camptothecin)에 대한 CEM 세포의 감작(sensitization)을 나타낸다.
도 14는 이미다졸린 32의 다양한 농도와 CPT (0.1 μM)의 복합 치료에서 48시간 후 세포 자살의 용량 의존성 증가를 나타내는 표이다.
도 15A는 이미다졸린 32에 의한 시스플라틴의 화학증강(chemopntentiation)을 나타낸다. ● 는 0.1 μM 시스-플라틴 및 0.1 μM 이미다졸린 32; ▲는 1.0 μM 시스-플라틴; ■는 0.01 μM 시스-플라틴; ◆는 10 μM 이미다졸린 32.
도 15B는 이미다졸린 32와 0.1 μM 시스-플라틴의 용량 반응을 나타내는 표이다.
상세한 설명
여기에서 인용된 모든 특허권, 특허출원, 정부 발행물, 정부 규정, 및 논문들은 그 전체로서 여기에 참조문헌으로서 편입된다. 혼동이 있는 경우, 정의를 포함한 본원의 설명에 따른다.
본원 발명은 이미다졸린에 의하여 전사 인자 NF-카파B (NF-kB)의 병리학적 활성화를 억제하는 방법을 제공한다. 이들 제제는 합성되었으며 NF-kB의 강력한 비-독성 억제제로 밝혀졌다. 그러한 화합물들은 NF-kB 시그날링 경로의 활성화가 연관된 질병의 치료에 사용 가능하다. NF-kB 활성화의 억제는 류머티스성 관절염, 염증성 장 질환, 천신(astma), 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD) 골관절염, 골다공증 및 섬유화 질환과 같은 다양한 염증성 질환에 관련된 유전자의 전사를 억제한다. NF-kB의 억제는 전신 홍반성 루푸스, 다발성 경화증, 건선성 관절염, 강직성 척추염을 포함하는 자가 면역 질환, 그리고 조직 및 기관 거부의 치료에 유용하다. 또한, NF-kB의 억제는 알츠하이머씨 병, 동맥경화증(stroke atherosclerosis), 혈관 재협착(restenosis), 당뇨병, 사구체신염(glomerulophritis), 암, 호지킨씨병, 악액질, 감염 그리고 후천성 면역 결핍 증후군 (AIDS)을 포함하는 특정 바이러스 감염과 관련된 염증, 성인 호흡곤란 증후군, 혈관 확장성 실조증(Ataxia Telangiestasia) 그리고 건선, 아토피 피부염 그리고 자외선 유도 피부 손상을 포함하는 다양한 피부 관련 질환의 치료에 유용하다. 특히 실시예에서, 이미다졸린은 포유류에 도입된 외래성 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 능력을 갖는다. 이것은 화합물이 자가 면역 질환의 치료에 유용하며, 조직, 피부, 및 기관 이식의 거부를 억제하기 위하여 유용하도록 한다.
바람직한 화합물은 도 1 및 6에 도시된다. 입체적 배치(stereopositioning)는 도 2에 도시된다. 이둘 두 중요 성질의 조합은 이 부류의 이미다졸린이 염증성 질환, 암, 자가 면역 질환에 그리고 이식된 기관, 조직, 식피된 피부의 거부를 억제하는 극히 효과적인 치료용 약물이 되도록 한다. 본 발명의 목적은 (1) 항-염증제 (예를 들면 천식 및 류머티스성 관절염의 치료에), (2) 방부제를 포함하는 항균제 (3) 항암제 및 시스플라틴 등과 같은 항암 약물의 강화제(potentiator) (4) 항-자가면역제 (예를 들면, 전신성 홍반성 루푸스, 다발성 경화증, 건선성 관절염, 강직성 척추염과 같은 자가 면역 질환의 치료를 위한) 그리고 (5) 이식된 기관 또는 식피된 피부의 거부를 억제하기 위하여 다른 항 거부 화합물과 함께 또는 단독으로 기관 이식 및 피부 식피에서 사용하는 항-거부제로서 치료적 용도를 위하여 다중 치환된 이미다졸린을 사용하는 것이다.
본원 발명의 화합물은 생체 밖에서 (0.1 μM 농도 미만) NF-kB의 매우 강력한 억제제이며 세포에서의 예비적 실험은 이 화학물이 72시간 이상의 기간에 걸쳐 세포독성이지 않았음을 나타낸다. 몇몇 이미다졸린은 50 ㎍/mL의 MIC로 몇몇 박테리아 균주에 대하여 항균활성을 나타내었다.
본원 발명은 또한 이미다졸린-타입 NF-kB 억제제의 제 1 분류의 합성에 관련된다. 이미다졸린은 일반적 틀(templates)로서 아미노산 유도 옥사졸리디논을 사용하는 신규한 고도로 부분입체이성질 선택성인 복수성분 합성을 통하여 제조되었다.
이미다졸린 카복실릭 애시드의 일반적 합성 절차는 다음과 같다. 건조 CH2C12 (10 mL) 내의 알데하이드 (예를 들면 0.57 mmol), 아민 (예를 들면 0. 57 mmol) 용액이 N2하에서 2 시간동안 환류 되었다. 건조 CH2C12 (예를 들면 5 mL) 내의 옥사졸론 (예를 들면 0.57 mmol)용액이 첨가되었으며 혼합물은 N2하에서 6시간 동안 환류 되고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 생성물은 바람직하게는 1:1 CH2C12로부터 침전되거나 또는 4:1 EtOAc/MeOH 실리카 겔 크로마토그래피 후 분리되었다.
이것은 아릴, 아실, 알킬 및 헤테로사이클릭 비대칭적으로 치환된 이미다졸린의 신규한 고도로 부분입체이성질 선택성 복수성분 one-pot 합성이다. 소수의 루이스 산을 검토한 후, TMSCl (트리메틸시릴클로라이드)가 이미다졸린을 단일 스테레오메터로서 우수한 수득율로 제공하기 위하여 아즈락톤 및 이민의 축합을 촉진함이 밝혀졌다. (도식 1).
도식 1 - 이미다졸린의 복수성분 one-pot 합성
R이 키랄인 아실 클로라이드 (RCOCl)가 단일 거울상 이성질체를 얻기 위하여 사용될 수 있다. 아즈락톤은 높은 수득율로 순수한 아즈락톤을 제공하기 위하여 EDCl (1-(3-디메틸아미노프로필) 에틸카보디이미드 하이드로클로라이드) 매개 탈수가 수반되는 다른 N-아실-α-아미노산으로부터 제조되었다. (Schunk et al. , Onganic letters 2: 907-910 (2000) ; Sain et al. , Heterocycles 23: 1611-1614 (1985)). 아민과의 사이클로첨가 반응은 높은 치환된 이미다졸린을 우수한 수득율로 제공하기 위하여 약간 상승된 온도(예를 들면 400 ℃)에서 잘 진행된다. 트리메틸시릴 클로라이드의 부재는 아마도 케텐 중간체를 통하여 β-락탐의 형성을 초래한다. (Peddibhotla et al., Highly Diastereoselective Multicomponent Synthesis of Unsymmetrical Imidasoline, Organic Letters 4: 3533-3535 (2002)). NOE 실험 및 X-선 결정그래프로 측정한 결과 오직 이미다졸의 트랜스 부분입체이성질체가 대부분의 이들 반응에서 관찰되었다. 부분입체이성질 선택성 복수성분 one-pot 합성은 광범위한 아릴, 아실, 알킬 및 헤테로사이클릭 치환된 이미다졸린을 탁월한 수득율로 제공하였다.
이미다졸린 1-10의 제조
화합물 R1 R2 R3 R4 R5 수득율(%)
1 페닐 메틸 페닐 벤질 H 75
2 페닐 메틸 4-메톡시-페닐 벤질 H 78
3 페닐 메틸 페닐 4-플루오로페닐 H 74
4 페닐 페닐 페닐 벤질 H 65
5 페닐 1H-인돌- 3-일-메틸 페닐 벤질 H 68
6 페닐 메틸 피리딘-4-일 벤질 H 76
7a 페닐 메틸 페닐 H H 70
8 페닐 메틸 에톡시-카보닐 H H 72
9b 페닐 메틸 피리딘-4-일 벤질 Et 76
10c 페닐 메틸 페닐 벤질 Et 75
a 화합물 1의 수소화 후(10%Pd/C, H2, 1 atm). b 화합물 6의 에스테르화 후(SOCl2, EtOH). c 화합물 1의 에스테르화 후(SOCl2, EtOH).
이 공정의 완전한 메커니즘 세부사항은 여전히 조사 중이나, 반응은 초기에 예측한 바와 같이 트리메틸시릴 클로라이드에 의하여 옥사졸론의 카보닐 산소의 활성화에 의하여 진행하고, 그 후 중간체 니트릴륨 이온으로 링-개방을 일으키는 것으로는 보이지 않는다. (Ivanova, G.G., Tetrahedron 48 177-186 (1992)). 약간 과량의 트리에틸아민의 존재 하에 축합의 수행은 반응을 모두 정지시키는데, 이것은 산성 조건이 요구됨을 제안한다. 또한, TiCl4 또는 BF3, OEt2와 같은 루이스 산의 첨가는 생성물의 형성을 유도하지 않았다. 이러한 발견에 기초하여, 반응은 아마도 1,3-디폴라 타입의 사이클로첨가에 의하여 수행되는 것으로 제안되었다. 사이클로첨가 동안의 R2 및 R3 성분 사이의 입체 반발력은 부분입체이성질선택성을 설명할 수 있다. (도식 2).
제약학적 조성물에서, 이미다졸린은 밀리리터 또는 그램당 1 ~ 1, 000 마이크로그램의 투여 용량에서 억제성이다. 이것은 자가 면역 질환의 치료 또는 항거부 화합물 또는 약물을 위하여 다른 화합물 또는 약물과 1 대 100 또는 100 대 1의 비율로 사용될 수 있다. 바람직한 실시예에서, 환자의 치료를 위하여 하나 이상의 이미다졸린이 제약학적으로 수용 가능한 담체 내에 억제성 투여 용량으로 환자에게 제공된다. 이와 같이, 이미다졸린은 제약학적 담체 물질과 전통적인 혼합, 과립화, 코팅, 현탁 및 캡슐화 방법과 같은 이 분야에 널리 알려진 방법에 의하여 경구 또는 직장 투여를 위한 전통적 제제로 가공된다. 따라서 경구용 이미다졸린 제조는 하나 이상의 이미다졸린과 고형의 제약학적 담체를 조합함으로써 얻을 수 있다. ; 선택적으로 결과물인 혼합물을 과립화하고; 혼합물 또는 과립은, 필요한 경우 그리고/또는 선택적으로 적절한 보조제의 첨가 후, 정제 또는 당의정 핵(dragee core)의 형태로 가공된다.
고형 제제를 위한 적절한 제약학적 담체는 특히, 예를 들면, 락토오스, 사카로오스만니톨 또는 솔비톨과 같은 당, 셀룰로오스 제제 그리고/또는 칼슘 포스페이트, 예를 들면, 트리칼슘 포스페이트 또는 칼슘 하이드로겐 포스페이트와 같은 충전제; 또한 예를 들면, 옥수수, 밀, 쌀 또는 감자 전분을 사용하는 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸 셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸 셀룰로오스, 소듐 카복시메틸 셀룰로오스 그리고/또는 폴리비닐피롤리돈, 부분적으로 자유 작용기를 갖는 폴리아크릴레이트 또는 폴리메트아크릴레이트의 에스테르와 같은 결합제; 그리고/또는, 전술한 전분, 또한 카복시메틸 전분, 가교된 폴리비닐피롤리돈, 아가, 또는 알긴산 또는 소듐 알지네이트와 같은 그것의 염과 같은 발포제이다. 보조제는 일차적으로 유동-조절제 및 활제, 예를 들면, 규산, 탈크, 스테아르산 또는 마그네슘 스테아레이트 또는 칼슘 스테아레이트와 같은 그것의 염이다. 당의정은 선택적으로 그들이 사용되는 위산에 저항성인 적절한 코팅, 특히 선택적으로 수성 용제 내에 검 아라빅, 탈크, 폴리비닐피롤리돈, 그리고/또는 티타늄 디옥사이드, 라커(lacquer) 용액을 함유하는 농축된 당 용액 또는, 위액에 저항성인 코팅을 제조하기 위하여, 프탈산 에스테르 또는 트리아세틴과 같은 적절한 연화제와 함께 또는 단독으로, 부분적 자유 작용기를 갖는 폴리아크릴레이트 또는 폴리메트아크릴레이트의 에스테르 용액, 또는 아세틸셀룰로오스 프탈레이트 또는 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 프탈레이트와 같은 적절한 셀룰로오스의 용액으로 된 코팅과 함께 제공된다. 안료 물질 또는 염료가 예를 들면 활성물질의 다양한 투여 용량을 인식하고 표시하기 위하여 정제 또는 당의정 코팅에 첨가될 수 있다.
경구로 투여 가능한 하나 이상의 이미디졸린을 포함하는 이미다졸린 제제는 또한 젤라틴 및, 필요하다면, 글리세린 또는 솔비톨과 같은 연화제로 제조된 경질 또는 연질 폐쇄 캡슐은 물론 단단한 젤라틴 캡슐을 포함한다. 경질 젤라틴 캡슐은 하나 이상의 이미다졸린을 과립 형태로, 예를 들면 옥수수 전분과 같은 충전제, 선택적으로 과립화된 밀 전분, 결합제 또는 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 콜로이드성 규산과 같은 활제, 및 선택적으로 안정화제와 혼합하여 함유할 수 있다. 폐쇄된 캡슐에서, 하나 이상의의 이미다졸린은 분말 또는 과립 형태이다; 또는 바람직하게는 적절한 용제 내의 현탁액 형태로 존재할 수 있다. 여기서 현탁액의 안정화를 위하여 예를 들면, 글리세린 모노스테아레이트가 첨가될 수 있다.
경구 투여되는 다른 이미다졸린 제제, 예를 들면 수성 현탁액은 보통의 방식으로 제조된다. 이 현탁액은 단일 투여용량에 충분한 농도로 하나 이상의 이미디졸린을 현탁된 형태로 함유한다. 또는 수성 현탁액은 최소 용량의 안정화제 그리고/또는 가향 물질, 예를 들면, 사카린-소듐과 같은 감미제를, 또는 일정 용량의 당 그리고/또는 솔비톨 또는 유사 물질을 함유하는 시럽으로서 함유한다. 또한 예를 들면, 쉐이크의 제조를 위한 농축액 또는 농축된 현탁액이 적절하다. 그러한 농축액은 또한 단일-투여용량 용량으로 포장될 수 있다.
직장 투여에 적절한 이미다졸린 제제, 예를 들면, 좌약은 하나 이상의 이미다졸린과 좌약 기초 물질의 혼합물로 구성된다. 그러한 물질은, 특히, 천연 또는 합성 트리글리세라이드 혼합물이다. 또한 적절한 것에는 기초 물질내의 하나 이상의 이미다졸린 현탁액으로 구성되는 젤라틴 직장 캡슐이 있다. 적절한 기초 물질은 예를 들면, 고도의 또는 특히, 중간 포화된 지방산의 액체 트리글리세라이드이다.
역시 특별한 관심은 전분, 특히 옥수수 전분 또는 밀 전분, 또한, 예를 들면, 감자 전분 또는 쌀 전분과 혼합된 미세하게 연마된, 바람직하게는 5 ㎛ 또는 그 이하의 입자 크기의 중간값을 갖는 하나 이상의 이미다졸린을 함유하는 제제를 제공하는 것이다. 이들은 바람직하게는 프로펠러-유사, 날이 예리한 교반 장치를 갖는 고속 교반기에서, 예를 들면 3 ~ 10분의 혼합 시간으로, 그리고 조성물이 대 용량의 경우 필요하다면 냉각과 함께 간단히 혼합함으로써 제조된다. 혼합 공정에서, 하나 이상의 이미다졸린 입자는 전분 입자 상에 일부 입자의 크기가 연속적으로 감소하면서 균일하게 침착된다. 전술한 혼합물은 통상의, 예를 들면, 전술한, 보조제화 함께 고체 투여 단위의 형태로 가공될 수 있다. ; 즉, 예를 들면 정제 또는 당의정의 형태로 압축되거나 또는 캡슐에 충전된다. 그들은 그러나 또한 직접적으로 사용될 수 있으며, 또는 수성 현탁액의 제조를 위한 농축액으로서, 예를 들면, 약 5- ~ 20-배 용량의 물과 함께, 예를 들면, 제약학적으로 수용 가능한 습윤제(wetting agents) 그리고 고급 지방산 또는 소듐 라우릴 설페이트와 폴리옥시에틸렌 솔비탄의 에스테르와 같은 분산제, 그리고/또는 가향 물질과 같은 보조제의 첨가 후에 사용될 수 있다. 이미다졸린/전분 혼합물을 계면-활성 물질 또는 다른 보조제와 조합하는 대신, 이들 물질은 또한 현탁액을 제조하기 위하여 물에 첨가될 것이다. 하나 이상의 이미다졸린/전분 혼합물 및 선택적으로 보조제로 구성된 현탁액 제조를 위한 농축액은, 단일-투여용량 용량으로, 필요하다면 공기 차단 및 수분-차단 방식으로 포장될 수 있다.
또한, 하나 이상의 이미다졸린은 환자에게 복강 내, 비강 내, 피하, 또는 정맥 내로 투여될 수 있다. 일반적으로, 복강, 비강, 피하, 또는 정맥 투여를 위하여, 하나 이상의 이미다졸린이 수성 용제 또는 식물유 또는 다른 유사 오일, 합성 지방 산 글리세라이드, 고급 지방 산 에스테르 또는 프로필렌 글리콜과 같은 비수성 용제에 그들을 용해, 현탁 또는 유화시킴으로써; 그리고 필요하다면, 용해제, 등장제, 현탁제, 유화제, 안정화제 그리고 보존제와 같은 전통적인 첨가제와 함께 제공된다. 바람직하게는, 하나 이상의 이미다졸린은 온혈 동물 또는 인간의 복강 내, 피하, 또는 정맥 내 용도에서 수용가능한 조성물로 제공된다. 예를 들면, 그러한 조성물은 하나 이상의 안트라퀴논을 위한 담체로서 완충 포스페이트 염 용액과 같은 생리학적으로 수용 가능한 용액을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 용액은 생리학적 pH이다. 특정 실시예에서, 조성물은 정맥 내 투여에 의하여 종양을 관류하여 환자에게 직접 주사된다.
본원 발명에 따른 제제는 온혈 동물 또는 인간에게 투여하기 위하여 적절한 농도의 하나 이상의 이미다졸린을 포함한다. 이 농도는 투여 모드에 따르며, 약 0.3% ~ 95%, 바람직하게는 약 2.5% ~ 90%이다. 현탁액의 경우, 농도는 대개 30%이하이며, 바람직하게는 약 2.5%; 그리고 하나 이상의 이미다졸린을 보유하는 정제, 당의정 및 캡슐의 경우는 역으로, 하나 이상의 이미다졸린의 필요한 투여 용량의 용이한 섭취를 확보하기 위하여 농도는 바람직하게는 약 0.3%이상이다. 하나 이상의 이미다졸린을 포함하는 제제로 환자를 치료하는 것은 바람직하게는 시간에 걸쳐서 실질적으로 NF-kB억제에 충분한 하나 이상의 이미다졸린의 투여 용량의 한번 이상의 투여에 의하여 수행된다. 필요하다면, 투여용량은 매일 투여되거나 또는 몇 시간 간격으로 투여되는 몇몇 부분 투여 용량으로 나뉘어 투여될 수 있다. 특정 경우에서, 제제는 방사능(radiation) 또는 화학요법과 같은 하나 이상의 다른 치료법과 함께 또는 그 후에 사용될 수 있다. 투여되는 하나 이상의 이미다졸린의 투여 용량은 치료될 환자 (온혈 동물의 종 또는 인간), 치료될 환자의 일반적 상태, 그리고 치료될 질환의 타입 또는 기관 이식 또는 피부 식피의 타입 모두에 따른다.
NF-kB 활성화가 면역 질환에 상당한 역할을 하므로, 본원 발명은 자가 면역 질환 그리고 기관 및 피부 이식의 거부를 억제하기 위한 면역 억제제로서 유용하다. (Ghosh et al. , Ann. Rev. Immunol. 16: 225-260 (1998)). NF-kB의 활성화는 많은 면역학적 관련 단백질을 엔코딩하는 수많은 다양한 유전자의 활성 전사를 초래한다. (Baeuerle and Henkel, Ann. Rev. Immunol. : 141-17 (1994) ; Daelemans et al. , Antivir. Chem. Chemother. 10: 1-14 (1999)). 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 경우, 감염은 NF-kB 활성화를 유도하며, 이것은 규칙적인 바이러스 지속감염(persistence)을 유도한다. (Rabson et al. , Adv. Pharmacol. 48: 161-207 (2000) ; Pati et al., J. Virol. 77: 5759-5773 (2003); Quivy et al., J. Virol. 76: 11091-11103 (2002) ; Amini et al. , Oncogene 21: 5797-5803 (2002) ; Takada et al., J. Virol. 76: 80198030 (2002) ; Chen-Park et al., J. Biol. Chem. 277. 24701.24708 (2002); Ballard, Immunol. Res. 23: 157-166 (2001) ; Baldwin, J. Clin. Invest. 107: 3-6 (2001) ; Calzado et al., Clin. Exp. Immunol. 120: 317-323 (2000) ; Roland et al. , DNA Cell Biol 18: 819-828 (1999) ; Boykins et al,., J. Immunol. 163: 15-20 (1999); Asin et al., J. Virol. 73: 3893-3903 (1999) ; Sato et al., AIDS Res. Hum. Retroviruses 14:, 293-29 (1998)). HIV-1 복제는 바이러스의 LTR(long terminal repeat)과 상호작용하는 세포 전자 인자(특히 NF-kB)는 물론 바이러스 정규 단백질의 다양성을 통하여 조절된다. (Asin et al., J. Virol. 73: 3893-3903 (1999)). HIV-1는 잠복 상태에 들어갈 수 있으며, 여기서 침투된 프로바이러스는 전사적으로 조용히 유지된다. 이 잠복적으로 세포를 계속 감염시키는 능력은 바이러스가 지속적인 감염 침 숙수의 면역체계를 피하도록 돕는다. 잠복 바이러스는 림프 조직에 거주하는 T-세포에서 유전적 변이체의 커다란 저장소를 수립할 수 있다. 또한, 최근 연구는 항 바이러스 치료를 수행하는 환자에서 T-세포에서 잠복 HIV의 재 활성화와 NK-kB를 관련시킨다. (Finzi et al., Science 278: 1295-1300 (1997)).
NF-kB 활성화가 염증 질환에서 상당한 역할을 하므로 본원 발명은 염증성 질환의 치료에 유용하다. NF-kB는 TNF 및 다른 프로-염증성 사이토킨에 의하여 활성화된다. NF-kB 활성화의 비-독성 억제제에 의한 억제는, 그러므로, 많은 염증성 질환, 류머티스성 관절염 염증성 장 질환, 천식(astma), 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD) 골관절염, 골다공증 및 섬유화 질환의 치료에 임상적 용도를 갖는다. 이에 대한 관련 정보는 다음에서 찾을 수 있다. (Feldmann et al., Ann. Rheum. Dis. 61: Suppl, 2, iil3-18 (2002); Gerard and Rollins, Nat. Immunol. 2: 108-115 (2001); Hart et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 158: 15851592 (1998); Lee and Burckart, J. Clin. Pharmacol. 38. 981.99 (1998); Makarov, Arthritis Res. 3: 200-206 (2001) ; Manna et al., J. Immunol. 163: 6800-6809 (1999) ; Miagkov et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 1385913864 (1998) ; Miossec, Cell. Mol. Biol. (Noisy-le-grand) 47: 675-678 (2001); Roshak et al., Curr. Opin. Pharmacol. 2: 316-321 (2002) ; Tak and Firestein, J. Clin. Invest. 107: 7-11 (2001); Taylor, Mol. Biotechnol. 19. 153-168 (2001); Yamamoto and Gaynor, J. Clin. Invest. 107: 135-142 (2001); Zhang and Ghosh, J. Endotixin Res. 6: 453-457 (2000)).
여기서 개시된 화합물의 염증에 대한 억제성 효과의 증명을 위한 모델은 다음을 포함한다.
패혈성 쇼크 모델: Ref. Journal of Clinical Investigation 100: 972-985 (1997). 패혈증의 치사율에 대한 NF-kB의 역할. 동물 모델: 10-12 주령의 암컷 BALB/c 쥐에 LPS의 치사 효과에 그들을 감작시키기 위하여 E. coli LPS (Sigma, 1.75 ㎍/0.1 mL 멸균 PBS, pH 7.4) 및 D-갈락토사민 (Sigma, 15 mg/0.1 mL 멸균 PBS)의 혼합물 18-20g가 복강 내로 주사되었다. (또한, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 76. 5939.5943 (1979) 및 J. Exp. Med. 165, 65 7 - 6 63 (1987)참조). 치사율은 4, 8, 12, 16, 20, 그리고 24 시간 후에 관찰되었다.
염증 모델: Chang, Eur. J. Pharmacol. 142: 197-205 (1987)에 개시된 PMA를 사용하는 귀 부종. 에탄올에 용해된 20 μL의 PMA의 적용 (5 ㎍/귀) 30분 전과 후에 20μL의 이미다졸린 (다양한 농도), 덱사메타손 (40 ㎍/귀) 또는 부형제 (DMSO: 에탄올; 25:75 v/v)가 쥐의 오른쪽 귀에 국소 적용되었다. MA적용 6시간 후에 마이크로 자(microgauge)를 사용하여 귀의 부종이 측정되었으며 치료된 (오른쪽) 및 치료되지 않은 (왼쪽) 귀 사이의 두께의 평균차로 표현되었다. p <0.05가 값이 통계학적으로 현저한 것으로 고려되었다.
발명의 요약
본원 발명은 포유류에 충분한 용량의 다중-치환된 4-애시드 또는 4-알킬 에스테르 이미다졸린을 염증 억제를 위하여 투여하는 것을 포함하는 포유류의 염증 억제 방법에 관련된다.
본원 발명은 또한 그것의 키나아제, 또는 억제성 단백질, I 카파 B(IkB)의 분해 억제에 의하여 NF-kB 단백질의 활성화를 억제하는 방법과 단백질 또는 그것의 활성화 단백질을 단백질의 활성화 억제에 충분한 용량의 다중-치환된 4-애시드 또는 4-알킬 에스테르 또는 아마이드 이미다졸린과 접촉시키는 것을 포함하는 NF-kB 억제 능력에 관련된다.
본원 발명은 또한 자가 면역 질환, 후천성 면역 결핍 증후군 (AIDS)을 포함하는 특정 바이러스 감염, 성인 호흡곤란 증후군, 혈관 확장성 실조증(Ataxia Telangiestasia) 그리고 건선(건선), 아토피 피부염 및 자외선 유도 피부 손상을 포함하는 다양한 피부 관련 질환의 억제 방법에 관련된다.
본원 발명은 또한 포유류에 도입된 외래성 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 것에 관련되며, 이것은 화학물이 자가 면역 질환의 치료에 유용하며, 조직, 피부, 및 기관 이식의 거부를 억제하는 데 유용하도록 만든다.
본원 발명은 또한 암을 충분한 용량의 다중-치환된 이미다졸린과 접촉시켜 암을 억제하는 것을 포함하는 암 억제 방법 에 관련된다.
본원 발명은 다음 구조식의 이미다졸린에 관련된다.:
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; X는 O 및 S로 구성된 그룹에서 선택되고; 그리고 R5는 수소, 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, NH2, NH-R6 그리고
으로 구성된 그룹에서 선택되며, 여기서 R6 및 R7은 동일하거나 또는 다르며, 수소, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 그리고 헤테로아릴 및 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택된다.
또한 본원 발명은 다음 구조식의 이미다졸린에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 여기서 R8 및 R9는 동일하거나 또는 다르며, 수소, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴 그리고 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택된다.
또한, 본원 발명은 다음 구조식의 이미다졸린을 아민과 반응시키는 것을 포함하는 아미노 이미다졸린의 제조 공정에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; X는 O 및 S로 구성된 그룹에서 선택되고; 그리고 R5는 수소, 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴, NH2, NH-R6 그리고
으로 구성된 그룹에서 선택되며, 여기서 R6 및 R7은 동일하거나 또는 다르며, 수소, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 그리고 헤테로아릴 및 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이 이미다졸린을 다음 구조의 아민과 반응시켜:
다음 구조의 화합물을 제조한다. :
여기서 R8 및 R9는 동일하거나 또는 다르며, 수소, 알킬, 아실, 아릴알킬, 그리고 헤테로아릴로 구성된 그룹에서 선택된다.
본원 발명은 다음 구조식의 이미다졸린에 관련된다.:
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 특히 다음 구조식의 이미다졸린에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 개별적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다. 바람직하게는 R1은 페닐이며; R4는 벤질; R5는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬이다. 또한 바람직하게는 R5는 에틸; R2는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬이다. 가장 바람직하게는 R2는 메틸이며 R3은 페닐 및 치환된 페닐로 구성된 그룹에서 선택된다.
R1은 페닐이며, R2는 메틸, R3은 페닐, R4는 벤질 그리고 R 5는 H인 이미다졸린 (화합물 1)이 바람직한 화합물이다. R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 4-메톡시페닐, R4는 벤질 그리고 R5는 H인 이미다졸린 (화합물 2)이 바람직한 화합물이다. R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 페닐, R4는 4-플루오로페닐 그리고 R5는 H인 이미다졸린 (화합물 3)이 바람직한 화합물이다. R1은 페닐, R2는 페닐, R3은 페닐, R4는 벤질 그리고 R5는 H인 이미다졸린 (화합물 4)이 바람직한 화합물이다. 여기서 R1은 페닐, R2는 1H-인돌-3-일메틸, R3은 페닐, R4는 벤질 그리고 R5는 H인 이미다졸린 (화합물 5)이 바람직한 화합물이다. 여기서 R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 피리딘-4-일, R4 는 벤질 그리고 R5는 H인 이미다졸린 (화합물 6)이 바람직한 화합물이다. 여기서 R1은 페닐, R2 는 메틸, R3은 페닐, R4는 H 그리고 R5는 H인 이미다졸린 (화합물 7)이 바람직한 화합물이다. 여기서 R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 에톡시카보닐, R4는 H 그리고 R5는 H인 이미다졸린 (화합물 8)이 바람직한 화합물이다. 여기서 R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 피리딘-4-일, R4는 벤질 그리고 R5는 Et인 이미다졸린 (화합물 9)이 바람직한 화합물이다. 여기서 R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 페닐, R4는 벤질 그리고 R5는 Et인 이미다졸린 (화합물 10)이 바람직한 화합물이다.
본원 발명은 또한 다음 구조식의 이미다졸린의 제조 공정에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다. 이 공정은 다음을 포함한다. :
(a) 이미다졸린을 생성하기 위하여 약 0 ~ 100℃의 온도에서 비-반응성 가스의 존재 하에서 물 없이 트리틸 시릴 클로라이드 또는 애시드 클로라이드 및 반응물을 위한 용제의 존재 하에서 다음의 반응 혼합물을 반응시키는 단계:
(1) 다음 구조식의 옥사졸론:
(2) 다음 구조식의 케톤:
R3=0
; 그리고
(3) 다음 구조식의 아민:
H2N-R4
; 그리고
(b) 반응 혼합물로부터 이미다졸린을 분리하는 단계. 이미다졸린은 알코올과의 반응으로 에스테르화될 수 있다. 이미다졸린은 가장 바람직하게는 알코올 및 술포닐 디클로라이드와 반응하여 에스테르화된다.
본원 발명은 포유류에 염증억제를 위하여 충분한 용량으로 다음 구조식의 이미다졸린을 투여하는 것을 포함하는 포유류의 염증 억제 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아랄킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다. 바람직하게는 포유류는 인간이다. 포유류는 하등한 포유류일 수 있다. 투여는 경구, 국소 또는 주사로(정맥 주사와 같은) 포유류에 투여될 수 있다.
본원 발명은 또한 미생물을 억제하기 위하여 다음 구조식의 화합물의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 미생물 억제 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아랄킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다. 억제는 생체 밖에서의 또는 생체 내에서 가능하다. 하등 포유류 또는 인간에게 투여될 수 있다. 경구, 주사 또는 국소를 통하여 포유류에 투여될 수 있다.
또한, 본원 발명은 단백질과 다음 구조의 화합물을 접촉시키는 것을 포함하는 NF-kB 또는 NF-kB 키나아제인 단백질의 분해 억제 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아랄킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다. 이 화합물은 또한 NFkB가 관련된 종양(암)의 치료에 유용하다. 억제는 바람직하게는 생체 내에서 일어난다.
본원 발명은 또한 외래성 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하기 위하여 포유류에 다음 구조식의 이미다졸의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 포유류에 도입된 외래성 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 개별적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 또한 자가 면역 질환의 치료를 위하여 포유류에 다음 구조식의 이미다졸린의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 포유류에서 완전한 면역결핍을 가져오지 않고 포유류의 자가 면역 질환을 치료하는 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 개별적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 또한 포유류에 이식된 기관의 거부를 억제하기 위하여 포유류에 다음 구조식의 이미다졸린의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 포유류에 이식된 기관의 거부를 억제하는 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 개별적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 또한 잠복 감염된 세포에서 HIV의 재활성화를 억제하기 위하여 다음 구조식의 이미다졸린의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 HIV로 잠복 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화를 억제하는 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 개별적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 수소 및 알킬 그룹으로 구성된 그룹에서 선택되며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원은 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 0, N, S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 0, N, S를 갖는 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이다.
본원 발명은 또한 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 0, N, S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 0, N 또는 S 또는 그들의 조합으로 된 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며; 그리고 R5는 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 0, N 또는 S 또는 그들의 조합을 포함하는 헤테로아릴 그리고 0, N, S 또는 그들의 조합을 포함하는 헤테로사이클릭인 1 ~ 15 탄소 원자를 함유하는 에스테르 그룹이며 그리고 여기서 탄소원자는 선택적으로 할로겐으로 치환된다.
본원 발명은, 또한 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 0, N, S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 0, N 또는 S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 여기서 에스테르 그룹에서 R11 및 R12는 수소, 알킬, 아릴, 아릴알킬 및 할로겐으로 구성된 그룹에서 선택되며, 그리고 R6 ~ R10은 수소, 할로겐, 알킬 할라이드, 에테르, 사이클릭 에테르, 사이클릭 알킬, 아릴 또는 아실, 아민, 하이드록실 그리고 5 ~ 14 탄소 원자를 포함하는 0, N 또는 S 또는 그들의 조합으로 된 헤테로사이클릭 또는 헤테로아릴 링으로 구성된 그룹에서 선택된다.
본원 발명은 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 0, N, S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 0, N 또는 S 또는 그들의 조합을 된 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 여기서 R5 및 R6은 수소, 알킬, 아릴, 아릴알킬 및 할로겐으로 구성된 그룹에서 선택되며, 그리고 여기서 R7은 아릴 및 5 ~ 14 탄소 원자를 포함하는 하나 이상의 N, S, 또는 0 또는 그들의 조합을 함유하는 헤테로사이클릭 그룹으로 구성된 그룹에서 선택된다.
본원 발명은 또한 염증 억제에 충분한 용량으로 포유류에 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르를 투여하는 것을 포함하는 포유류의 염증 억제 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.
본원 발명은 또한 다음을 포함하는 미생물 억제 방법에 관련된다.:
미생물을 억제하기 위하여 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르의 유효 용량을 투여하는 단계:
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 단백질을 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르와 접촉시키는 것을 포함하는 NF-kB 또는 NF-kB 키나아제인 단백질의 분해 억제 방법에 관련된다.:
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 또한 다중-치환된 4-애시드 또는 4-알킬 에스테르 이미다졸린을 포유류에 염증 억제에 충분한 용량으로 투여하는 것을 포함하는 포유류의 염증 억제 방법에 관련된다.
본원 발명은 또한 단백질을 단백질의 분해 억제에 충분한 용량의 다중-치환된 이미다졸린 에스테르와 접촉시키는 것으로 포함하는 NF-kB 또는 NF-kB 키나아제인 단백질의 분해 억제 방법에 관련된다.
본원 발명은 또한 암의 억제에 충분한 용량의 다중-치환된 이미다졸린 에스테르를 암과 접촉시키는 것을 포함하는 암 억제 방법에 관련된다.
본원 발명은 또한 종양 또는 암의 억제에 충분한 용량으로 포유류에 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르를 투여하는 것을 포함하는 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 (a) 다음 구조식의 이미다졸린 :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.; 그리고
(b) 종양 또는 암의 성장 억제 약물을 포함하는 조성물.
본원 발명은 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르를 포유류에 투여하여 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 단계를 포함하는, 포유류에 도입된 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 또한 자가 면역 질환을 치료하기 위하여 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 포유류에서 완전한 면역 결핍을 초래하지 않으면서 자가 면역 질환을 치료하는 방법에 관련된다.:
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 또한 포유류로 이식된 기관의 거부를 억제하기 위하여 포유류에 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 포유류에 이식된 기관의 거부 억제 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
본원 발명은 또한 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화를 억제하기 위하여 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 HIV로 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화 억제 방법에 관련된다. :
여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환된다.
전술한 방법의 다른 실시예에서, R1은 페닐, R4는 벤질, R5는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬 , R5는 에틸, R2는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬, R 2는 메틸 그리고 R3은 페닐 및 치환된 페닐, 또는 위의 조합으로 구성된 그룹에서 선택된다.
R1은
(1) 아래에 의하여 서로 독립적으로 모노- 또는 디- 치환된 페닐,
(1)(1) - CN;
(1)(2) - N02;
(1)(3) - 0 - (C1-C4)-알킬;
(1)(4) - NH2; 또는
(1)(5) - (C1-C4)-알킬-NH2;
(1)(6) - x, 여기서 x는 할로겐.
(2) 5 ~ 14 링 멤버를 갖는 헤테로아릴, 여기서 헤테로아릴은 비-치환되거나 또는 서로 독립적으로 -N-R14에 의하여 모노-, 디-, 또는 트리 치환되고, 여기서 -N-R14는 - (C1-C6)- 알킬, - (C3-C6) - 사이클로알킬, 페닐, 할로겐, -OH, 또는 - (C1-C4) -알킬; 또는
(3) 5 ~ 12 링 멤버를 갖는 헤테로사이클, 여기서 헤테로사이클은 비-치환되거나 또는 서로 독립적으로 -N-R14에 의하여 모노-, 디-, 또는 트리 치환되고, 여기서 -N-R14는 - (C1-C6) -알킬, - (C3-C6) -사이클로알킬, 페닐, 할로겐, -OH, 또는 - (C1-C4) -알킬.
"할로겐"이라는 표현은 불소, 염소, 브롬, 요오드를 의미하는 것으로 이해된다. "아릴"이라는 표현은 링에 6 ~ 14 탄소 원자를 갖는 방향족 탄화수소 그룹으로 이해된다. (C6-C14) -아릴 그룹은, 예를 들면, 페닐, 나프틸, 예를 들면, 1-나프틸, 2-나프틸, 바이페닐일, 예를 들면, 2-바이페닐일, 3-바이페닐일, 그리고 4-바이페닐일, 안트릴, 또는 플루오레닐 등이다. 바이페닐일 그룹, 나프틸 그룹, 그리고, 특히, 페닐 그룹이 바람직한 아릴 그룹이다. 아릴 그룹, 특히 페닐 그룹은 동일한 또는 다른 그룹, 바람직하게는 (C1-C8) -알킬, 특히 (C1-C4) -알킬, (C1-C8)-알콕시, 특히 (C1-C4)-알콕시, 할로겐, 니트로, 아미노, 트리플루오로메틸, 하이드록실, 하이드록시-(C1-C4)- 알킬-, 하이드록시메틸, 1-하이드록시에틸, 또는 2-하이드록시에틸과 같은, 메틸렌디옥시, 에틸렌디옥시, 포르밀, 아세틸, 시아노, 하이드록시카보닐, 아미노카보닐, (C1-C4) 알콕시카보닐, 페닐, 페녹시, 벤질, 벤질옥시, 또는 테트라졸일로부터 선택된 그룹에 의하여 모노 치환 또는 폴리 치환될 수 있으며, 바람직하게는 모노 치환된, 디-치환된, 또는 트리-치환된다. 또한, 아릴이 페닐인 경우, 페닐은 선택적으로 -CN, -NO2, (C1-C4)-알킬, -N(R11) 2, -NH-C(0)-R11, -S (0)xR1, 여기서 x는 0, 1, 또는 2의 정수, - C(0)-R11, 여기서 R11은 위와 같이 정의됨, 또는 - (C1-C4) 알킬-NH2에 의하여 서로 독립적으로 모노- 또는 디-치환된다. 동일하게, 예를 들면, 아릴알킬 또는 아릴카보닐과 같은 그룹에 적용된다. 아릴알킬 그룹은, 특히, 벤질 및 또한 1- 및 2-나프틸메틸, 2-, 3-, 및 4-바이페닐일메틸, 그리고 9-플루오레닐메틸이다. 치환된 아릴알킬 그룹은, 예를 들면, 하나 이상의 (C1-C8) -알킬 그룹, 특히 (C1-C4)-알킬 그룹, 예를 들면, 2-, 3-, 및 4-메틸벤질, 4-이소부틸벤질, 4-tert-부틸벤질, 4-옥틸벤질, 3,5-디메틸벤질, 펜타메틸벤질, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 및 8-메틸-l-나프틸메틸, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 및 8-메틸 나프틸메틸에 의하여, 하나 이상의 (C1 -C8) -알콕시 그룹, 특히 (C1-C4 ) 알콕시 그룹, 벤질 그룹에 의하여 아릴 성분에서 치환된 벤질 그룹 및 그리고 나프틸메틸 그룹이며, 그리고 아릴 성분에서 치환된 나프틸메틸 그룹, 예를 들면, 4-메톡시벤질, 4-네오펜틸옥시벤질, 3,5-디메톡시벤질, 3,4-메틸렌디옥시벤질, 2,3,4-트리메톡시벤질, 니트로벤질 그룹, 예를 들면, 2-, 3-, 및 4-니트로벤질, 할로벤질 그룹, 예를 들면, 2-, 3-, 및 4-클로로- 그리고 2-, 3-, 및 4-플루오로벤질, 3,4-디클로로벤질, 펜타플루오로벤질, 트리플루오로메틸벤질 그룹, 예를 들면, 3- 및 4-트리플루오로메틸벤질, 또는 3,5-비스(트리플루오로메틸)벤질이다.
모노 치환된 페닐 그룹에서, 치환체는 2-위치, 3-위치, 또는 4-위치에 배치될 수 있다. 디-치환된 페닐은 2,3-위치, 2,4-위치, 2,5-위치, 2,6-위치, 3,4-위치, 또는 3,5-위치에서 치환될 수 있다. 트리-치환된 페닐 그룹에서, 치환체는2,3,4-위치, 2,3,5-위치, 2,4,5-위치, 2,4,6-위치, 2,3,6-위치, 또는 3,4,5-위치에 배치될 수 있다.
아릴 그룹에 대한 설명은 따라서 이가(divalent) 아릴렌 그룹, 예를 들면, 존재할 수 있는 페닐렌 그룹, 예를 들면 1,4-페닐렌 또는 1,3-페닐렌으로서, 에 적용된다.
페닐렌- (C1-C6) -알킬은 특히 페닐렌메틸 (-C6H4-CH2 -) 및 페닐렌에틸. (C1-C6)이다. 알킬렌페닐은 특히 메틸렌페닐 (-CH2-C6H4-)이다. 페닐렌-(C1-C6)-알케닐은 특히 페닐렌에테닐 및 페닐렌프로페닐이다.
" 5 ~ 14 링 멤버를 갖는 헤테로아릴"은 링 멤버로서 1, 2, 3, 4, 또는 5 헤테로원자를 함유하는 5 ~ 14 링 멤버를 갖는 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 방향족 시스템의 그룹을 나타낸다. 헤테로원자의 예는 N, 0, 및 S이다. 만일 다수의 헤테로원자가 함유된 경우, 이들은 동일하거나 또는 다를 수 있다. 헤테로아릴 그룹 역시 (C1-C8)알킬, 특히 (C1-C4)-알킬, (C1-C8 )-알콕시, 특히 (C1-C4)-알콕시, 할로겐, 니트로, -N(R11)2, 트리플루오로메틸, 하이드록실, 하이드록시- (C1-C 4) -알킬, 하이드록시메틸, 1-하이드록시에틸, 또는 2-하이드록시에틸과 같은, 메틸렌디옥시, 포르밀, 아세틸, 시아노, 하이드록시카보닐, 아미노카보닐, (C1-C4)-알콕시카보닐, 페닐, 페녹시, 벤질, 벤질옥시, 또는 테트라졸일에서 선택된 동일한 또는 다른 그룹에 의하여 모노 치환된 또는 폴리-치환될 수 있으며, 바람직하게는 모노 치환된, 디-치환된, 또는 트리-치환된다. 5 ~ 14 링 멤버를 갖는 헤테로아릴은 바람직하게는 1, 2, 3, 또는 4, 특히 1, 2, 또는 3의, N, 0, 및 S에서 선택된 동일한 또는 다른 헤테로원자를 함유하는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 그룹을 나타내며, 그리고 이것은 1, 2, 3, 또는 4, 특히 1, 2, 또는 3의, (C1-C6)-알킬, (C1 -C6)-알콕시, 불소, 염소, 니트로, -N(R11)2, 트리플루오로메틸, 하이드록실, 하이드록시 (C1-C4)-알킬, (C1-C4)-알콕시카보닐, 페닐, 페녹시, 벤질옥시, 그리고 벤질에서 선택된 동일한 또는 다른 치환체로 치환될 수 있다. 헤테로아릴은 특히 바람직하게는 5 ~ 10 링 멤버를 갖는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 그룹, 특히 1, 2, 또는 3, 특히 1 또는 2의 N, 0, 및 S에서 선택된 동일한 또는 다른 헤테로원자를 함유하는 5-멤버 또는 6-멤버 모노사이클릭 방향족 그룹을 나타내며, 이것은 1 또는 2의 (C1-C4)-알킬, 할로겐, 하이드록실, -N(R11)2, (C1 -C4)알콕시, 페닐, 페녹시, 벤질옥시, 및 벤질에서 선택된 동일한 또는 다른 치환체에 의하여 치환될 수 있다. R11은 구조식 Ⅰ의 R9치환체로 정의된다.
"5 ~ 12 링 멤버를 갖는 헤테로사이클"은 부분적으로 포화되거나 완전히 포화된 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 5 멤버 ~12-멤버 헤테로사이클릭 링을 나타낸다. 헤테로원자의 예는 N, 0, 및 S이다. 헤테로사이클은 비-치환되거나 동일한 또는 다른 치환체에 의하여 하나 이상의 탄소 또는 하나 이상의 헤테로원자에 치환된다. 이들 치환체는 라디칼 헤테로아릴로서 위에서 정의된다. 특히, 헤테로사이클릭 링은 (C1-C8)알킬, 예를 들면, (C1-C4)-알킬, (C1 -C8)-알콕시, 예를 들면, 메톡시와 같은 (C1-C4) -알콕시, 페닐- (C1-C4) 알콕시, 예를 들면, 벤질옥시, 하이드록실, 옥소, 할로겐, 니트로, 아미노, 또는 트리플루오로메틸에서 선택된 동일한 또는 다른 그룹에 의하여 탄소에 모노 치환 또는 폴리 치환, 예를 들면, 모노 치환, 디-치환된, 트리-치환된, 또는 테트라 치환된다. 그리고/또는 이것은 (C1-C8) -알킬, 예를 들면, 메틸 또는 에틸과 같은 (C1-C4) -알킬에 의하여, 선택적으로 치환된 페닐 또는 페닐-(C1-C4)-알킬, 예를 들면, 벤질에 의하여 헤테로사이클릭 링의 링 질소에 치환된다. 질소 헤테로사이클은 또한 N-옥사이드 또는 사차 염으로서 존재할 수 있다.
5 ~ 14 링 멤버를 갖는 헤테로아릴 또는 5 ~ 12 링 멤버를 갖는 헤테로사이클의 예시는 피롤, 퓨란, 치오펜, 이미다졸 , 피라졸, 옥사졸, 이속사졸, 티아졸, 이소티아졸, 테트라졸, 1,3,4-옥사디아졸, 1,2,3,5-옥사티아디아졸 옥사이드, 트라아졸론, 옥사디아졸론, 이속사졸론, 옥사디아졸리딘디온, F, CN, CF3, 또는 COO-(C1-C4)-알킬로 치환된 트리아졸, 3-하이드록시피롤-2,4-디온, 5-옥소-1,2,4-티아디아졸, 피리딘, 피라진, 피리미딘, 인돌, 이소인돌, 인다졸, 프탈라진, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 퀴녹살린, 퀴나졸린, 시놀린, 카볼린, 그리고 이들 헤티로 사이클의 벤조-융합된, 사이클로펜타-, 사이클로헥사-, 또는 사이클로헵타-융합된 유도체로부터 유도된 그룹이다. 특히 바람직한 그룹은 2- 또는 3피롤일, 페닐피롤일, 4- 또는 5-페닐 피롤일과 같은, 2-퓨릴, 2-티에닐, 4-이미다졸일, 메틸이미다졸일, 예를 들면, 1-메틸-2,4-, 또는 5-이미다졸일, 1,3-티아졸-2-일, 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2-, 3-, 또는 4-피리딜-N-옥사이드, 2-피라지닐, 2-, 4-, 또는 5-피리미딘일, 2-, 3-, 또는 5-인돌일, 치환된 2-인돌일, 예를 들면, 1-메틸-, 5-메틸-, 5-메톡시, 5-벤질옥시-, 5-클로로-, 또는 4,5-디메틸 인돌일, 1-벤질-2- 또는 -3-인돌일, 4,5,6,7-테트라하이드로-2-인돌일, 사이클로헵타[b]-5-피롤일, 2-, 3-, 또는 4-퀴놀일, 1-, 3-, 또는 4-이소퀴놀일, 1-옥소-1,2-디하이드로-3-이소퀴놀일, 2-퀸옥살리닐, 2-벤조퓨라닐, 2-벤조티에닐, 2-벤즈옥사졸일, 또는 벤조티아졸일, 또는 디하이드로피리딘일, 피롤리디닐, 예를 들면, 2- 또는 3-(N-메틸피롤리디닐), 피페라지닐, 몰폴리닐, 치오몰폴리닐, 테트라하이드로티에닐, 또는 벤조디옥솔라닐이다.
따라서 숙주의 세포 증식성 질환, 특히 종양의 치료를 위한 방법 및 조성물이 제공된다. 이 방법에서, 제약학적으로 수용 가능한 이미다졸린 및 증식 억제제가 바람직하게는 전신적으로 투여된다.
숙주에서 세포 증식성 질환, 특히 종양의 치료를 위한 방법 및 조성물이 제공된다. 이 방법에서, 제약학적으로 수용 가능한 이미다졸린이 항암 효과를 개선하기 위하여 증식 억제제와 함께 바람직하게는 전신적으로 투여된다. 바람직한 실시예에서, 이미다졸린은 화학증강제(chemopotentiator) 효과를 제공한다.
화학 제제는 그것이 화학증강제 또는 증식 억제제가 단독으로 사용되는 경우의 활성에 비하여 추가적 방식(additive fashion) 이상으로 공지된 증식 억제성 약물의 효과를 증진시키는 경우 화학증강제(chemopotentiator) 이다. 일부 경우, 케모센시타이징 효과(chemosensitizing effect)가 관찰된다. 이것은 만일 단독으로 사용하는 경우 현저한 항종양 효과를 나타내지는 않을 수 있으나, 증식 억제제 단독으로 사용하는 것보다 추가적 방식 이상으로 항종양 효과를 개선하는 경우의 제제의 사용의 효과로 정의된다.
여기서 사용되는 이미다졸린이라는 용어는 그것의 모든 화학적 계열 멤버의 형태 및 아날로그를 포함한다. 이미다졸린 계열은 전술한 링 구조의 화학적 구조로 정의된다.
여기서 사용되는 증식 억제제는 세포성색전(cytostasis) 또는 세포독성을 유도하는 화합물이다. 세포성색전은 세포의 성장을 억제하는 것이며, 세포 독성은 세포를 사멸하는 것으로 정의된다. 증식 억제제의 일부 예에는 메토트렉세이트, 5-플루오로유라실, 겜시타빈, 시타라빈과 같은 항대사 물질; 빈카 알칼로이드, 파크리탁셀, 콜히친과 같은 항-튜불린 단백질제; 타목시펜, LHRH 아날로그와 같은 호르몬 길항제; 그리고 멜파란, BCNU, CCNU, 치오테파와 같은 알킬화제, 독소루비신과 같은 인터칼레이팅제 그리고 시스플라틴 및 카보플라틴과 같은 금속 배위 복합체와 같은 핵산 손상제가 포함된다. 바람직하게는 이 약물은 다우노마이신(daunomycin)과 같은 토포이소머라아제 II 억제제이다.
따라서 숙주에서 세포 증식성 질환, 특히 종양의 치료를 위한 방법 및 조성물이 제공된다. 이 방법에서, 제약학적으로 수용 가능한 이미다졸린 및 증식 억제제가 바람직하게는 전신적으로 투여된다.
자가 면역 질환의 치료 또는 기관 이식 또는 피부 식피를 위한 방법 및 조성물이 또한 제공된다. 이 방법에서, 제약학적으로 수용 가능한 이미다졸린이 자가 면역 질환 또는 이식 또는 식피와 관련된 면역 반응의 억제를 개선하기 위하여 선택적으로 하나 이상의 항-자가면역제 또는 항-거부제와 함께 바람직하게는 전신적으로 투여된다.
목적
본원 발명의 목적은 포유류에 도입된 외래성 NF-kB 활성화제의 면역 반응을 억제하는 신규한 화합물을 제공하는 것이다.
본원 발명의 목적은 또한 포유류에 이식된 기관의 거부와 관련된 면역 반응을 억제하는 신규한 화합물을 제공하는 것이다.
본원 발명의 목적은 또한 NF-kB 활성화와 관련된 포유류의 자가 면역 질환과 관련된 면역반응을 억제하는 신규한 화합물을 제공하는 것이다.
본원 발명의 다른 목적은 HIV로 감염된 세포의 세포핵으로의 NF-kB 전좌를 억제함으로써 HIV를 억제하는 것이다.
본원 발명의 또 다른 목적은 포유류에서 완전한 면역 결핍을 가져오지 않으면서 자가 면역 질환과 관련된 면역반응 또는 기관 이식에 관련된 것과 같은 외래성 NFKB 활성화제에 대한 면역반응을 억제하는 것이다 .
본원 발명의 또 다른 목적은 항염증성, 항균성이며 NFKB 또는 NFKB 키나아제를 억제하는 신규한 화합물을 제공하는 것이다.
본원 발명의 또 다른 목적은 화학내성(chemoresistance)의 억제로 암을 억제를 제공하는 것이다.
본원 발명의 또 다른 목적은 그러한 화합물의 제조를 위한 신규한 공정을 제공하는 것이다.
이들 및 본원 발명의 다른 목적들은 이하의 도면과 바람직한 실시예로 보다 자세히 설명될 것이다.
이하의 실시예는 본원 발명의 이해를 더욱 돕기 위한 것이다.
실시예 1-20
실험 부분 :
D1-(3S,4S)-1-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 SP-1-61 (1)이 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (15 mL) 내의 벤즈알데하이드 (0.06 g, 0.57 mmol), 벤질아민 (0.061 g, 0.57 mmol) 용액이 질소 하에서 2 시간동안 환류 되었다. 2-페닐 메틸-4H-옥사졸린-5-온(0.1 g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0.74 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었으며 그 후 실온(room temperature)에서 하룻밤동안 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.155 g, 74%)
Dl-(3S,4S)-l-벤질-5-(4-메톡시페닐)-4-메틸-2-페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 SP-1-63 (2)이 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (15 mL)내의 p-아니스알데하이드 (0.077 g, 0.57 mmol), 벤질아민 (0.061g, 0.57 mmol)용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2-페닐 메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.1 g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0.74 mmol)이 첨가되었고 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었으며 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.180 g, 78%)
D1-(3S,4S)-1-(4-플루오로페닐)-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 SP-1-101 (3)이 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (15 mL)내의 벤즈알데하이드 (0.060 g, 0.57 mmol), 4-플루오로아닐린 (0.063 g, 0.57 mmol)용액이 질소 하에서 2시간동안 환류 되었다. 2-페닐-4-메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.1g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0.74 mmol)이 첨가되었고, 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었으며, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산s 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.160 g, 74%)
D1-(3S,4S)-l-벤질-2,4,5-트리페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 SP-1-125 (4)가 다음과 같이 제조되었다.
용액 of in 건조 디클로로메탄 (120 mL)내의 벤즈알데하이드 (0.6g, 5.7 mmol), 벤질아민 (0.61g, 5.7 mmol)용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2,4-디페닐-4H-옥사졸린-5-온 (1.35g, 5.7 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.8 g, 7.4 mmol)이 첨가되었고 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었으며, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 생성물은 1:5 에탄올/에틸 아세테이트로 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의하여 정제되어 65% 수득율로 회색이 도는 흰색의 고체로서 생성물 2.1g을 공급하였다.
D1-(3S,4S)-l-벤질-4-(1H-인돌-3-일메틸)-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 SP-1-128 (5)이 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (120 mL)내의 벤즈알데하이드 (0.6g, 5.7 mmol), 벤질아민 (0.61g, 5.7 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 4(1H-인돌-3-일메틸)-2-페닐-4H-옥사졸-5-온 (1.65 g, 5.7 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.8g, 7.4 mmol)이 첨가되었고 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었으며, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 생성물은 1:5 에탄올/에틸 아세테이트로 실리카-겔 칼럼 크로마토그래피에 의하여 정제되어 68% 수득율로 회색이 도는 흰색의 고체의 생성물 3.1g을 제공하였다.
D1-(3S,4S)-l-벤질-4-메틸-2-페닐-5-피리딘-4일-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4- 카복실릭 애시드 SP-1-150 (6) 가 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (15 mL)내의 피리딘 카복살알데하이드 (0.061 g, 0.57 mmol), 벤질아민 (0.061 g, 0.57 mmol)용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2-페닐-4-메틸 4H-옥사졸린-5-온 (0.1g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0. 74 mmol)이 첨가되었고 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었으며, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 4:1 에틸 아세테이트/메탄올을 사용하여 회색이 도는 흰색의 고체로서 분리되었다. (0.161g, 76%)
D1 (3S,4S)-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드: 16/17 [JK1-1-135] (7)가 다음과 같이 제조되었다.
건조 THF (30 mL)내의 이미다졸린 카복실릭 애시드 10 (0.1 gm, 0.27 mmol) 및 사이클로헥센 (0.1 mL. 1.25 mmol)의 잘-교반된 현탁액에 10% Pd/C (45 mg, 0.06 mmol)가 첨가되었다. 현탁액은 36시간 동안 환류 되었다. 반응 혼합물이 실온으로 냉각되었고 에탄올 (10 mL)이 첨가되었다. 혼합물은 Celite bed로 여과되고 에탄올로 세척한 다음 여과액은 감압 하에서 증발되었다. 미정제(crude) 생성물은 에탄올을 사용하는 컬럼 실리카-겔 크로마토그래피로 정제되어, 백색 고체를 수득하였다. (0.070 g, 93%)
D1-(3S,4S)-1-(4-플루오로페닐)-4-메틸-2-페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸 -4,5-디카복실릭 애시드 5-에틸 에스테르 SP-1-175 (8)가 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (15 mL) 내의 4-플루오로아닐린 (0.063g, 0.57 mmol), 톨루엔 (1.03 g/ml)내의 50% 용액으로서 에틸 글리옥살레이트 (0.058 g, 0.57 mmol), 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2-페닐-4-메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.1 g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0.74 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 4:1 에틸 아세테이트/메탄올을 사용하는 실리카-겔 컬럼 크로마토그래피로 정제되어, 백색 고체를 수득하였다. (0.152 g, 72%).
D1-(3S,4S)-1-벤질-4-메틸-2-페닐-5-피리딘-4-일-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 에틸 에스테르 JK-1-183 (9)이 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (30 mL)내의 dl-(3S,4S)-1-벤질-4-메틸-2-페닐-5-피리딘-4일-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 12 (0.1 g, 0.27 mmol)의 잘-교반된 현탁액에 0℃에서 건조 디클로로메탄 (5 mL)내의 옥살릴 클로라이드 (0.14 g, 1.1 mmol) 용액이 첨가되었다. DMF (0. 001 mL)용액이 반응 혼합물에 첨가되었고 다시 2 시간 동안 0℃에서 교반되었다. 디클로로메탄은 진공 하에서 증발되었고 반응 혼합물은 0℃로 냉각되었고, 그 후 무수 에탄올 (20 mL)이 첨가되었다.
이 용액은 다시 1시간 동안 교반되었다. 용제는 진공 하에서 증발되었고, 반응 혼합물은 디클로로메탄 (30 mL)으로 희석되고 포화된 소듐 바이카보네이트 (1-0 mL) 및 물(10 mL)로 세척되었다. 유기 층은 소듐 설페이트로 건조시키고 정제되지 않은 생성물을 수득하기 위하여 진공 하에서 농축되었으며, 이것은 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카-겔 컬럼 크로마토그래피로 정제되어, 밝은 노란색 오일을 수득하였다. (0.097 gm, 91%).
D1-(3S,4S)-1-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 에틸 에스테르 JK-1-186 (10) 가 다음과 같이 제조되었다.
건조 메틸렌 클로라이드 (30 mL) 내의 이미다졸린 카복실릭 애시드 10 (0.1 gm, 0.27 mmol)의 잘-교반된 현탁액에 0℃에서 건조 디클로로메탄 (5 mL)내의 옥살릴 클로라이드 (0.14 g, 1.1 mmol)용액이 첨가되었다. 건조 디클로로메탄(l mL)내의 DMF (0.001 mL) 용액이 반응 혼합물에 첨가되었으며 다시 2시간 동안 0℃에서 교반되었다. 디클로로메탄은 진공 하에서 증발되었으며 반응 혼합물은 0℃로 냉각되었고, 그 후 무수 에탄올 (20 mL)이 첨가되었다. 용액은 다시 1시간 동안 교반되었다. 용제는 진공 하에서 증발되었으며 반응 혼합물은 디클로로메탄 (30 mL)로 희석되었고 포화된 소듐 바이카보네이트 (10 mL)와 물 (10 mL)로 세척되었다. 유기 층은 소듐 설페이트로 건조시키고 진공 하에서 농축되어 정제되지 않은 생성물을 수득하였으며, 이것은 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카-겔 컬럼 크로마토그래피로 더욱 정제되어, 무색 오일을 수득하였다. (0.095 gm, 89%).
D1-(3S,4S)-1-메톡시카보닐메틸-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 JK-1-199 (11)가 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (50 mL)내의 TMSCl (0.37 g, 3.42 mmol) 및 2-페닐 메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.5 g, 2.85 mmol)의 잘 교반된 용액에 건조 메틸렌 클로라이드 (20 mL)내의 (벤질리덴-아미노)-아세틱 애시드 메틸 에스테르 (0. gm, mmol) 용액이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 10시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 디클로로메탄/헥산 혼합물 을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.70 g, 70%)
1-벤질-5-(4-메톡시-페닐)-2,4-디메틸-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 SP-1-189 (12)가 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (150 mL)내의 p-아니스알데하이드 (1.4 g, 10.4 mmol), 벤질아민 (1.11 g, 10.4 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2, 4-디메틸-4H-옥사졸린-5-온 SP-1-188 (1f) (1g, 8.7 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (1.22 g, 11.3 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응은 진공 하에서 건조하기 위하여 혼합물 증발되었다. 생성물은 1: 1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (1.9 g, 65 %)
D1-(3S,4S)-1-(2-에톡시카보닐-에틸)-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 JK-1-215 (13)가 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (80 mL)내의 2-페닐-4-디메틸-4H-옥사졸린-5-온 (1.0 g, 5.7 mmol) 및 TMSCl (1 mL, 6.8 mmol)의 잘 교반된 용액에 건조 메틸렌 클로라이드 (60 mL) 내의 3-(벤질리덴-아미노)-프로피오닉 애시드 에틸 에스테르 (1.4 gm, 6.8 mmol)용액이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 10시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (1.08 g, 51.4%)
D1-(3S, 4S)-1-(1-메톡시카보닐-에틸)-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 JK-1-192 (14)가 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (50 mL)내의 2-페닐 메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.25 g, 1.5 mmol) 및 TMSCl (0.23 mL, 1.8 mmol)의 잘 교반된 용액에 건조 메틸렌 클로라이드 (20 mL)내의 2-(벤질리덴-아미노) -프로피오닉 애시드 메틸 에스테르 (0.34 gm, 1.8 mmol) 용액이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 10시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.340 g, 66%)
1-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-일)-메탄올 14 [JK-1-123] (15)이 다음과 같이 제조되었다.
건조 THF (5 mL)내의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (0.12 gm, 0.3 mmol)의 잘 교반된 현탁액에 건조 THF (5 mL)내의 1-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 (0.1 gm, 0.27 mnol) 용액이 0℃에서 액적으로 첨가되었고, 동일한 온도에서 15분 동안 교반되고 냉각 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 소광(quenched)되었다. [주의: 암모늄 클로라이드 용액은 30분 동안 0℃에서 유지하고; 극도로 주의하면서 첨가되어야 하며; 매우 발열 반응이며 반응 혼합물은 0℃에서 유지되어야 한다. ] 그 후 10 mL의 10% HCl가 첨가되었다. 반응 혼합물은 과량의 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석되고 물 (20 mL)로 세척되며 무수 소듐 설페이트로 건조되고, 주름 잡힌 여과지로 여과한 다음 유기 층은 감압 하에서 증발시켜 정제되지 않은 생성물을 수득하고, 이것은 에틸 아세테이트를 사용하는 컬럼 크로마토그래피로 정제되었다. 수득율: 79%; 점성 오일.
1-벤질-4-(2-메톡시카보닐-에틸)-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸 -4-카복실릭 애시드 SP-1-201 (16)이 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (100 mL)내의 벤즈알데하이드 (0.252 g, 2.4 mmol), 벤질아민 (0.258 g, 2.4 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 3-(5-옥소-2-페닐-4,5-디하이드로-옥사졸-4-일)-프로피오닉 애시드 메틸 에스테르 SP-1-182 (1e)(0.5 g 1 2 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.282 g, 2.6 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.54 g, 60%)
D1-(3S, 4S)-1-벤질-2,4-디메틸-5-페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 15[JK-1-238] (17)이 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (60 mL)내의 2,4-디메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.4 g, 3.5 mmol) 및 TMSCl (0.58 mL, 4.2 mmol)의 잘 교반된 용액에 건조 메틸렌 클로라이드 (40 mL)내의 벤질-벤질리덴-아민 (0.82 gm, 4.2 mmol) 용액이 첨가되었으며 혼합물이 질소 하에서 10시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/ 헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.60 g, 60%).
D1-(3S, 4S)-l-벤질-2,4-디페닐-5-피리딘-4-일-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 SP-1-195 (18)가 다음과 같이 제조되었다.
건조 디클로로메탄 (120 mL) 내의 피리딘 카복실알데하이드 (0. 61 g, 0.57 mmol), 벤질아민 (0.61 g, 5.7 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2,4-디페닐-4H-옥사졸린-5-온 (1.35 g, 5.7 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.8 g, 7.4 mmol)이 첨가되었으며, 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤 동안 실온에서 교반되었다. 생성물은 디클로로메탄/에테르 혼합물로부터 침전됨으로써 정제되어 55% 수득율로 회색이 도는 흰색의 고체로서 생성물 1.35g을 제공하였다.
화합물 19 및 20이 다음과 같이 제조되었다.
1-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드로부터 1-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 (1-페닐에틸)-아마이드의 합성: JK 309.
건조 메틸렌 클로라이드 (25 mL) 내의 1-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 (1.0 g, 0.27 mmol), (S)-(-)-1-페닐-에틸아민 (0.36 g, 29 mmol)의 잘 교반된 현탁액에 EDCIHCl (0.57g, 29 mmol)가 첨가되었으며, 5분 후 분 메틸렌 클로라이드 (10 mL) 내의 DMAP (.35 gm, 29 mmol) 용액이 첨가되고 5-6 시간동안 교반되었다. 반응 혼합물은 물 (2 x 10 mL), 포화된 소듐 바이카보네이트 (20 mL), 물 (20 mL), 2N HCl (20 mL), 그 후 물 (30 mL)로 세척되었다. 유기 층은 소듐 설페이트로 건조되고 감압 하에서 증발되었다. 정제되지 않은 생성물은 에틸 아세테이트 헥산 혼합물 (1:1)을 사용하는 컬럼 실리카-겔 크로마토그래피로 정제되었다.
화합물 19: 수득율 (0.26 g, 40.7%)
화합물 20: 수득율 (0.24 g, 38%)
실시예 21
모든 화합물은 Breton 및 Charbot-Fletcher (Breton et al. , J. Pharmacol. Exp. Ther. 282 459-466 (1997))의 절차를 사용하여 핵 추출물에서 생체 밖에서의 NF-kB 활성을 조사함으로써 그들의 잠재 항-염증성 활성을 평가하였다. 간단히, 인간 Jurkat 백혈병 T-세포 (clone E6-1; Amer. Type Culture Collection, Manassas, Virginia)가 10% 소 태아 혈청, 페니실린 (614 ㎍/mL), 스트렙토마이신 (10 ㎍/mL) 그리고 Hepes 완충액 이 보충된 RPMI-1640 배지 (Gibco-BRL, Bethesda, Maryland)를 사용하여 pH 7.2, 37℃, 5% C02에서 배양된다. Jurkat 세포 (1 X 107 세포/mL)는 그 후 다양한 농도의 이미다졸린으로 30 분 동안 37℃에서 처리되고, 다시 5 시간 동안 PMA 자극 (5.0 ng/mL)이 수반된다. 핵 추출물은 20분 동안 이중 가닥 Cy3 라벨된 NF-kB 공통 올리고뉴클레오타이드, 5'-AGTTGAGGGGACTTTCCCAGGC-3' (SEQ ID NO:1)로 실온에서 배양된다. 정제되지 않은 혼합물은 1X 트리스 붕산염/EDTA 완충액에서 제조된 5% 비-변성(non-denaturing) 폴리아크릴아마이드 겔에 부하되고, 200V에서 2시간 동안 전기영동 된다. 전기영동 후, 겔은 NF-kB-DNA 결합을 탐지하기 위하여 포스포이메져[phosphorimager] (Biorad FX PLUS)를 사용하여 분석된다.
세포를 이미다졸린으로 처리하는 것은 핵 NF-kB 활성의 현저한 억제를 나타내었다. 도 3은 이미다졸린 8-10 (도 3, 레인 5-10)에 의한 핵 NF-kB-DNA 결합의 감소를 명백히 도시한다.
이미다졸린으로 처리된 세포는 핵 NF-kB 활성의 현저한 억제를 나타내었다. (도 3). 도 3은 이미다졸린 8-10의 100 nM 농도의 존재 하에서 핵 NF-kB-DNA 결합의 현저한 감소를 명백히 나타낸다. (도 3, 레인 5-10).
레인 5에서의 서서히 이동하는 밴드의 명백한 부재는 Jurkat 백혈병 T-세포에서 화합물 8의 1μM 농도에 의한 현저한 (94%) NF-kB 억제를 지시한다. 레인 6은 화합물 8의 100ηM의 농도에 의하여 핵에서 NF-kB-DNA 결합의 88% 억제를 나타낸다.
실시예 22
모든 화합물은 NF-kB 억제에 대한 그들의 활성이 테스트되었으며, 테이터는 표 2에 도시된다. 현재, 이 시리즈에서 가장 활성인 화합물은 100 nM 농도에서 NF-kB의 88%를 억제를 나타내는 헤테로사이클릭 이미다졸린 9 이다. 예비 시험의 결과 이미다졸린은 72시간 까지 현저한 세포 독성을 나타내지 않음을 나타내었다.
화합물 농도 % 억제
1 1.0μM 19 %
2 1.0μM 68 %
3 1.0μM 35 %
4 1.0μM 65 %
5 1.0μM 0 %
6 0.1μM 84 %
7 0.1μM 38 %
8 0.1μM 88 %
9 0.1μM 71 %
10 0.1μM 22 %
이 시리즈에서 가장 활성인 화합물은 화합물 8이었다.
포유류 Jurkat 세포 백혈병 T 세포에서의 IC50 값: IC50 값은 세포에서 50%의 단백질/효가 억제되는 화합물의 농도로 정의된다.
화합물 IC50
1 1.95μM
2 40 ηM
3 6.5 ηM
4 73 ηM
5 시험 안 됨
6 0.3 μM
7 20 ηM
실시예 23
화합물 4, 6, 및 7이 박테리아의 억제에 대하여 테스트되었다. 총 9가지 박테리아가 균주가 스크린 되었다. 다음의 그램-음성 및 그램-양성 박테리아가 포함되었다. : Staphylococcus aureus, Enterobacter aerogenes, Esherichia coli, Klebsiella pneumonia. Pseudomonas aeruginosa, Serratia marcescens, Bacillus cerius, Bacillus subtillus 그리고 micrococcus luteus. 박테리아 분획이 저장소로부터 분리되어, 영양 한천 플레이트에 스트리크(streak) 되었고 18-24 시간동안 35℃에서 배양되었다. 작업용 박테리아 현탁액은 3-5 분리된 콜로니를 5 mL 식염수 용액에 현탁 함으로써 제조되었다. 이 현탁액의 현탁도는 분광 광도로 주의 깊게 조절되어 0.5 McFarland 표준과 동일하게 조절하였다. 구역 직경(zone diameters)은 NCCLS 가이드라인 (National Committee for Clinical Laboratory Standards. Methods for dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria that: Grow Aerobically. Fifth Edition: Approved Standard M7-A5. Wayne, PA: NCCLS (2000))에 따른 양이온-보충된 Mueller-Hinton 한천을 사용하는 표준화된 디스크 확산법에 의하여 측정되었다. 최소 억제 농도(MICs)는 명백한 억제 구역을 제공하는 가장 낮은 농도로 간주되었다. 배양된 한천 플레이트는 16-20 시간동안 35℃ 대기 중에서 배양되었다. 구역의 직경은 밀리미터 단위로 측정하였으며, 결과는 표 4에 도시된다.
화합물4
미생물 MIC
Bacillus subtillus 13 mm 50 ㎍
Bacillus cereus 11 mm 50 ㎍
Micrococcus luteus 12 mm 200 ㎍
Staphylococcus aureus 12 nm 200 ㎍
화합물 6
미생물 MIC
Micrococcus luteus 10 mm 200 ㎍
화합물 7
미생물 MIC
Micrbcoccus luteus 10 mm 56 ㎍
실시예 24
RIF-1 Murine 종양 모델에서의 이미다졸린의 처리.
몇몇의 NF-kB 억제제 (화합물 1, 3, 4, 및 6)가 동물에서 테스트되었다. 종양 세포가 쥐의 등에 좌우 양측으로 주입되었다. 종양이 100 ㎣ 에 도달하면, 쥐는 화합물의 복강 내 주사로 처리되었다. 종양의 부피는 처치 첫 날 크기의 4배에 도달할 때까지 주 3회 측정되었다. 데이터는 "4X 일" 또는 치료된 '4X 일'의 치료되지 않는 대조군에 대한 비율로 기록되었다.
쥐를 화합물 4 (1-SP 84) 존재 하에서 시스플라틴 (CDDP) 및 캠포테신(camptothecin) (CPT)의 복합 치료하는 것은 시스-플라틴의 상당한 화학증강[chemopotnetiation]을 나타내었다 (도 4A). 또한, 이 그룹은 실험 22일에 8 종양 중 4개가 그것의 <4X의 부피로 유지되었다. 화합물 4의 존재 하에 현저한 캠포테신(camptothecin)의 화학 증강을 나타나지 않았다.
화합물 6 (1-SP-6-95)은 캠포테신(camptothecin)은 물론 시스-플라틴의 현저한 화학증강을 나타내었다. 그러나 6에 의한 화학증강은 화합물 4에서 나타난 것만큼 분명하지는 않았다.
쥐를 이미다졸린 없이 그리고 이미다졸린과 함께 시스플라틴 (CDDP) 및 캠포테신(camptothecin) (CPT)로 복합 치료하는 것은 화합물 1 및 3이 시스-플라틴 또는 캠포테신(camptothecin)에 현저한 화학 증강을 보이지 않음을 나타내었다. (데이터 제공되지 않음).
시스플라틴과 화합물 4의 복합 치료는 시스-플라틴 (0. 82 일) 또는 캠포테신(camptothecin) (3.79 일) 단독으로 치료한 경우에 비하여, 10.26일 이상 종양 성장 지연을 나타내었다. (표 5). 또한, 이 RIF-1 murine 모델에서 반수의 종양은 화합물 4와의 복합 치료에 노출되는 경우는 22일에 4X 종양 부피 한계 지점에 도달하지 않았다.
*이 그룹은 22일에 8종양 중 4개가 < 4x 이었다.
약어: CDDP (시스-플라틴) 및 CPT (캠포테신) 그리고 IP (복강 내 주사).
이 데이터는 통상적으로 사용되는 항암 약물의 화학증강에 대한 이미다졸린의 효능을 나타낸다. 이들 신규한 NF-kB 억제제 (특히 화합물 4)에 의한 화학내성의 억제는 항암 약물 단독으로 종양을 치료하는 것에 비하여 종양 성장의 현저한 지연을 유도한다.
실시예 25
도 5 및 6에 도시된 바와 같이, T-세포에서 강력한 NF-kB억제제인 새로운 부류의 이미다졸린이 합성되었다.
우리는 최근 치환된 이미다졸린의 신규한 고도로 부분입체이성질 선택성인 복수성분의 one-pot 합성을 보고하였다. (도 5)(Peddibhota et al., Org. Lett 4: 3533-3535 (2002)) 이들 저 분자량 골격(scaffold)은 알킬, 아릴, 아실, 및 헤테로사이클릭 치환에 다양하게 적용 가능한 4-지점을 함유한다. 놀랍게도, 아즈락톤 (또는 옥사졸론)의 사용은 아직 이미다졸린 골격의 부분입체이성질선택성의 고도로 다양한 집합에 효율적으로 들어가도록 하지 못하고 있다. 그러나 N-메틸화된 메조이온성 옥사졸론 (또는 "문숀[munchones]")을 이용하는 1,3 디폴라 사이클로첨가는 잘 알려져 있으며 피롤 및 이미다졸 합성의 일반적 경로를 제공한다. (Gerard and Rollines, Nat. Immunol. 2: 108115 (2001) ; Hart et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 158. 1885-1592 (1998); Makarov, Arthritis Res. 3: 200206 (2001)). 소수의 루이스 산을 스크린한 후, 우리는 TMSCl가 옥사졸론과 이민이 이미다졸린 골격을 제공하는 반응을 단일 부분입체이성질체로서 매우 우수한 수득율로 촉진하는 것을 밝혀내었다. (도 6). 이미다졸린의 커다란 라이브러리가 제조되었으며 몇몇 멤버는 생물학적 성질이 평가되었다. 이들 제제를 스크린 하여, 우리는 NF-kB 활성화의 강력한 억제제인 이미다졸린을 찾아내었다. 이들 화합물의 합성이 이하에서 개시된다.
반응은 다른 지시가 없는 한 오븐-건조된 유리용기 내에서 질소 대기 하에서 수행되었다. 모든 상업적 시약이 추가 정제 없이 사용되었다. 모든 용제는 시약 등급(reagent grade)이었다. THF는 질소 하에서 소듐/벤조페논으로부터 새로 증류되었다. 톨루엔, 디클로로메탄 및 TMSCl은 질소 하에서 CaH2 로부터 새로 증류되었다. 모든 반응은 자력 교반되었으며 Analtech 0.25-mm 미리 코팅된 실리카 겔 플레이트로 된 박막 크로마토그래피로 모니터 되었다. 칼럼 크로마토그래피는 EM Science에서 공급된 실리카 겔 60 (230-400 메쉬)에서 수행되었다. 수득율은 다른 언급이 없는 한 크로마토그래프 및 분광광도계 방법에 의한 순수한 화합물을 지시한다. 녹는점은 현미경이 부착된 Mel-Temp (실험실 기구) 장치로 측정되었다. 적외선 스펙트럼은 Nicolet IR/42 스펙트로메터에서 측정되었다. 양자, 탄소, 및 NMR 스펙트럼은 Varian Gemini-300 스펙트로메터 또는 Varian VXR-500 스펙트로메터로 기록되었다. 화학적 이동(Chemical shifts)은 용제 클로로포름 (1H 에 대하여 δ 7.24 그리고 13C에 대하여 δ 77.0) 및 디메틸 술폭사이드(1H 에 대하여 δ_2.49 그리고 13 C에 대하여 δ 39.5)의 잔여 피크에 대하여 보고되었다. 고-해상 질량 스펙트럼은 South Carolina대학 Mass Spectrometry Laboratory, Department of Chemistry & Biochemistry에서 Micromass VG-70S 질량 분석기로 얻었다. 가스 크로마토그래피/저-해상도 질량 스펙트럼은 TRIO-1 EI 질량 분석기에 연결된 Hewlet-Packard 5890 Series II 가스 크로마토그래프에서 기록되었다. 모든 화학물질은 Aldrich Chemical Co.에서 공급되었으며 수령한 대로 사용하였다.
* 유도체: k 및 l - 에틸 에스테르; m-알코올.
* 유도체: k 및 l - 에틸 에스테르; m-알코올.
위의 화합물 합성의 일반적 절차는 다음과 같았다.
2-옥사졸린-5-온의 합성은 다음과 같았다.
디클로로메탄 (20 mL)내의 벤조일 아미노 애시드 (2 mmol.) 및 EDCI.HCl (2 mmol.)이 0℃에서 라세미 화합물은 1시간, 광학 활성 화합물은 15분 동안 교반되었다. 반응 혼합물은 차가운(얼음을 함유하는) 물, 수성 NaHCO3, 그리고 물 (각 10mL)로 연속적으로 세척되었다. 용액은 무수 마그네슘 설페이트로 건조되었고, 여과되고, 용제는 진공 하에서 건조되어 고체 또는 오일의 옥사졸론을 제공하였다.
이미다졸린-4-카복실릭 애시드의 합성은 다음과 같았다. 건조 톨루엔/건조 디클로로메탄 (10 mL)내의 알데하이드 (1 mmol) 및 아민 (1 mmol)용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 용제는 감압 하에서 증발되었으며 이민은 디클로로메탄 (10 mL)에 재용해 되었다. 이 용액에 옥사졸론 (1 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (1.3 mmol) 이 첨가되고 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었으며, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산으로부터 침전되거나 또는 4:1 에틸 아세테이트/메탄올로 실리카 겔 크로마토그래피 후 분리되었다.
화합물 33 (2a), dl-(4S,5S)-1-벤질 메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드는 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (15 mL) 내의 벤즈알데하이드 (0.06 g, 0.57 mmol), 벤질아민 (0.061 g, 0.57 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2-페닐-4-메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.1g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0.74 mmol) 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.155 g, 74 %).; HRMS (EI) : C24H22N202에 대하여 계산된 [M-H]+ 369.1603, 발견된 [M-H]+ 369.1610; M. P. : 185-190℃에서 분해.
화합물 34 (2b), dl-(4S, 5S)-1-벤질-5-(4-메톡시페닐)-4메틸 페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (15 mL)내의 p-아니스알데하이드 (0.077 g, 0.57 mmol), 벤질아민 (0.061 g, 0.57 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2-페닐-4-메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.1 g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0.74 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.180 g, 78 %). HRMS (EI) : C25H24N203에 대하여 계산된 [M-H]+ 397.1709, 발견된 [M-H]+ 399.1717; M. P. : 205-208℃에서 분해.
화합물 28 (2c), dl-(4S, 5S)-1-(4플루오로페닐) 메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H이미다졸 카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (15 mL)내의 벤즈알데하이드 (0.060 g, 0.57 mmol), 4-플루오로아닐린 (0.063 91 0.57 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2-페닐-4-메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.1 g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0.74 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 침전되었다. 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0. 160 g, 74 %). HRMS (EI) 에 대하여 계산된 C23H19FN202에 대하여 계산된 [M-H]+ 373.1352, 발견된 [M-H]+ 373.1359; M. P. : 230-232 ℃에서 분해.
화합물 31 (2d), dl-(4S, 5S)-l-벤질-4-메틸 페닐 피리딘-4일-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (15 mL)내의 피리딘 카복실알데하이드 (0.061 g, 0.57 mmol), 벤질아민 (0.061 g, 0.57 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2-페닐-4-메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.1 g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0.74 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 4:1 에틸 아세테이트/메탄올을 사용하여 회색이 도는 흰색의 고체로서 분리되었다.(0.161 g, %). HRMS (EI): C23H21N302에 대하여 계산된 [M-H] + 370.1556, 발견된 [M-H]+ 370.1556; M. P. : 185-190 ℃에서 분해.
화합물 29 (2e), dl-(4S, 5S)-1-(4-플루오로페닐)-4-메틸 페닐-4,5-디하이드로-lH-이미다졸-4,5-디카복실릭 애시드 5-에틸 에스테르가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (15 mL)내의 4-플루오로아닐린 (0.063 g, 0.57 mmol), 톨루엔 (1.03 g/mL) 내의 50 % 용액으로서의 에틸 글리옥살레이트 (0.058 g, 0.57 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2-페닐-4-메틸-4H-옥사졸린 -5-온 (0.1 g, 0.57 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.08 g, 0.74 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 4:1 에틸 아세테이트/메탄올을 사용하여 실리카-겔 컬럼 크로마토그래피로 정제되어 백색 고체를 수득하였다. (0.152 g, 72 %) . HRMS (EI) : C20H19FN20 4 에 대하여 계산된 [M-H]+ 369.1251, 그리고 관찰된 [M-H]+ 369.1255; M. P.: 190-193 ℃에서 분해
화합물 40 (2g), dl-(4S, 5S)-l-메톡시카보닐메틸-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (50 ml)내의 2-페닐 메틸 H-옥사졸린-5-온 (0.5 g, 2.85 mmol) 및 TMSCl (0.37 g, 3.42 mmol)의 잘 교반된 용액에 건조 메틸렌 클로라이드 (20 ml)내의 (벤질리덴-아미노) -아세틱 애시드 메틸 에스테르 (0. gm, mmol)의 용액이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 10시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.70 g, 70 %). MS (EI) : C20H20N204에 대하여 계산된 (m/z) 352.14 관찰된 m/z = 353.2; M. P.: 215-217℃에서 분해.
화합물 42 (2h), dl-(4S, 5S)-1-(1-메톡시카보닐-에틸)-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-lH-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (50 ml)내의 2-페닐 메틸-4H-옥사졸린-5-온 (0.25 g, 1.5 mmol) 및 TMSCl (0.23 ml, 1.8 mmol)의 잘 교반된 용액에 건조 메틸렌 클로라이드 (20 ml)내의 2-(벤질리덴-아미노)-프로피오닉 애시드 메틸 에스테르 (0.34 gm, 1.8 mmol) 용액이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 10시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/ 헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.340 g, 66 %). MS (EI) : C21H22N204에 대하여 계산된 (m/z) 366.4 관찰된 m/z = 366 M.P.: 222-226℃에서 분해.
화합물 41 (2i), dl-(4S, 5S)-1-(2-에톡시카보닐-에틸)-4-메틸-2, 5-디페닐-4, 5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (80 ml) 내의 2-페닐-4-디메틸-4H-옥사졸린-5-온 (1.0 g, 5.7 mmol) 및TMSCl (1 ml, 6.8 mmol)의 잘 교반된 용액에 건조 메틸렌 클로라이드 (60 ml) 내의 3-(벤질리덴-아미노)-프로피오닉 애시드 에틸 에스테르 (1.4 gm, 6.8 mmol) 용액이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 10시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (1.08g, 51.4%) MS (EI) : C22H24N204에 대하여 계산된 (m/z) 380.44 관찰된 m/z = 380 M.P.: 218-220℃에서 분해.
화합물 37 (2j), dl-(4S, 5S)-l-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 에틸 에스테르가 다음과 같이 합성되었다. 건조 메틸렌 클로라이드 (30 mL)내의 이미다졸린 카복실릭 애시드 2a (0.1 g, 0.27 mmol)의 잘-교반된 현탁액에 O℃에서 건조 디클로로메탄 (5 mL)내의 옥살릴 클로라이드 (0.14 g, 1.1 mmol) 용액이 첨가되었다. 건조 디클로로메탄 (1 mL) 내의 DMF (0.001 mL) 용액이 반응 혼합물에 첨가되었으며 0℃에서 다시 2 시간 동안 교반되었다. 디클로로메탄은 진공 하에서 증발되었으며 반응 혼합물은 0℃에서 냉각되었고, 그 후 무수 에탄올 (20 mL)이 첨가되었다. 용액은 다시 1시간 동안 교반되었다. 용제는 진공 하에서 증발되었으며 반응 혼합물은 디클로로메탄 (30 mL)으로 희석되었고 포화된 소듐 바이카보네이트 (10 mL) 및 물 (10 mL)로 세척되었다. 유기 층은 소듐 설페이트로 건조되었고 진공 하에서 농축되어 정제되지 않은 생성물을 수득하였고, 이것은 다시 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카-겔 컬럼 크로마토그래피로 더욱 정제되어 무색 오일을 수득하였다. (0. 095gm, 89%). MS (EI) : C26H26N202에 대하여 계산된 (m/z) 398.2 관찰된 m/z = 398
화합물 38 (2k), dl-(4S, 5S)-l-벤질 메틸 페닐 피리딘-4-일-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 에틸 에스테르 가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (30 mL) 내의 dl-(3S, 4S)-1-벤질-4-메틸-2-페닐-5-피리딘-4일-4,5-디하이드로-lH-이미다졸-4-카복실릭 애시드 2d (0.1 g, 0.27 mmol)의 잘 교반된 현탁액에 0℃에서 건조 디클로로메탄 (5 mL) 내의 옥살릴 클로라이드 (0.14 g, 1.1 mmol) 용액이 첨가되었다. 건조 디클로로메탄 (1 mL) 내의 DMF (0.001 mL) 용액이 반응 혼합물에 첨가되었으며 0℃에서 다시 2 시간동안 교반되었다. 디클로로메탄은 진공 하에서 증발되었으며 반응 혼합물은 O℃로 냉각 되고 그 후 무수 에탄올 (20 mL)이 첨가되었다. 용액은 다시 1시간 동안 교반되었다. 용제는 진공 하에서 증발되었으며 반응 혼합물은 디클로로메탄 (30 mL)으로 희석되었고 포화된 소듐 바이카보네이트 (10 mL) 및 물(10 mL)로 세척되었다. 유기 층은 소듐 설페이트로 건조하였으며 진공 하에서 농축되어 정제되지 않은 생성물을 수득하였으며, 이것은 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카-겔 컬럼 크로마토그래피로 더욱 정제되어, 밝은 노란색 오일을 수득하였다. (0.097gm, 91%). MS (EI) : C25H26N202 에 대하여 계산된 (m/z) 399.19 관찰된 m/z: 399
화합물 45 (2l), dl-(4S, 5S)-l-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-일)메탄올이 다음과 같이 합성되었다. 건조 THF (5 ml)내의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (0. 12gm, 0. 3 mmol)의 잘 교반된 현탁액에 건조 THF (5 ml)내의 1-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 (0.1 gm, 0.27 mmol) 용액이 0℃에서 액적으로 첨가되었으며, 동일한 온도에서 15 분 동안 교반되었고 냉각 포화 암모늄 클로라이드 용액으로 소광(quenched)되었다. [주의: 암모늄 클로라이드 용액은 30분 동안 0℃에서 유지하고; 극도로 주의하면서 첨가되어야 하며; 매우 발열 반응이며 반응 혼합물은 0℃에서 유지되어야 한다.] 그 후 약 10 ml의 10% HCl이 첨가되었다. 반응 혼합물은 과 희석ed with excess of 과량의 에틸 아세테이트 (100 ml)로 희석되고 물(20 ml)로 세척하고 무수 소듐 설페이트로 건조하여, 주름 잡힌 여과지로 여과한 다음 유기 층은 감압 하에서 증발시켜 정제되지 않은 생성물을 수득하고, 이것은 에틸 아세테이트를 사용하는 컬럼 크로마토그래피로 정제되었다. 수득율: 79%; 점성 오일, m/z: 357
화합물 39 (2m), dl-(4S, 5S)-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-lH-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 THF (30 mL) 내의 이미다졸린 카복실릭 애시드 2a (0.1 g, 0.27 mmol) 및 사이클로헥센 (0.1 mL, 1.25 mmol)의 잘 교반된 현탁액에 10% Pd/C (45 mg, 0.06 mmol)가 첨가되었다. 현탁액은 36시간 동안 환류 되었다. 반응 혼합물은 실온으로 냉각되었고 에탄올 (10 mL)이 첨가되었다. 혼합물은 Celite bed로 여과되고, 에탄올로 세척되고 여과액은 감압 하에서 증발되었다. 정제되지 않은 생성물은 에탄올을 사용하는 컬럼 실리카-겔 크로마토그래피로 정제되어 백색 고체를 수득하였다. (0.070 g, 93%). MS (EI) : C17H16N 202에 대하여 계산된 (m/z) 280.12 관찰된 m/z: 280.1; M.P.: 222-224℃에서 분해.
화합물 32 (2n), dl-(4S,5S)-l-벤질-2,4,5-트리페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. A 용액 of in 건조 디클로로메탄 (120 mL)내의 벤즈알데하이드 (0.6 g, 5. 7 mmol), 벤질아민 (0. 61 g 1 5. 7 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2,4-디페닐-4H-옥사졸린-5-온 (1.35 g, 5.7 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.8 g, 7.4 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 생성물은 1:5 에탄올/에틸 아세테이트로 실리카-겔 컬럼 크로마토그래피에 의하여 정제되어 회색이 도는 흰색의 고체로서 2.1 g의 생성물을 65% 수득율로 제공하였다. HRMS (EI) : C29H24N202에 대하여 계산된 [(M-H)-CO 2]+ 387. 1526 그리고 관찰된 [(M-H)-CO2]+ 387.1539; M. P. : 153-155℃에서 분해.
화합물 35 (2o), dl-(4S,5S)-1-벤질-2,4-디페닐-5-피리딘-4-일-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (120 mL) 내의 피리딘 카복실알데하이드 (0.61 g, 0.57 mmol), 벤질아민 (0. 61 g, 5.7 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2,4-디페닐-4H-옥사졸린-5-온 (1.35 g, 5.7 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.8 g, 7.4 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 생성물은 디클로로메탄/에테르 혼합물로부터 침전되어 회색이 도는 흰색의 고체로서 1.35 g의 생성물을 55 % 수득율로 제공하였다. MS (EI) : C24H22N2 02에 대하여 계산된 (m/z) 434.34, 발견된 (m/z) 434.2
화합물 30 (2p), dl-(4S, 5S)-1-(4-플루오로페닐)-2,4-디페닐-4,5-디하이드로-lH-이미다졸-4,5-디카복실릭 애시드 5-에틸 에스테르가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (250 mL) 내의 4플루오로아닐린 (0.93 g, 8.3 mmol), 톨루엔 (1.03 g/mL) 내의 50 % 용액으로서 에틸 글리옥살레이트 (0.85 g, 8.3 mmol)의 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2,4-디페닐-4H-옥사졸린-5-온 (2g, 8.3 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (1.16, 10.8 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 디클로로메탄/에테르로 침전시켜 정제하여 백색 고체를 수득하였다. (2.4 g, 68 %). MS (EI) : C25H21FN204에 대하여 계산된 [M]+ 432.15, 그리고 관찰된 [M]+ 432.4;
화합물 36 (2q), dl-(4S, 5S)-1-벤질-4-(1H-인돌-3-일메틸)-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸 4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (120 mL) 내의 벤즈알데하이드 (0.6 g, 5.7 mmol), 벤질아민 (0.61 g, 5.7 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 4-(lH-인돌-3-일메틸)-2-페닐-4H-옥사졸-5-온 (1.65 g, 5.7 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.8 g, 7.4 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 생성물은 1:5 에탄올/에틸 아세테이트로 실리카-겔 컬럼 크로마토그래피에 의하여 정제되어 3.1 g의 생성물을 68 % 수득율로 회색이 도는 흰색의 고체로서 제공하였다. HRMS (EI) : C32H27N302에 대하여 계산된 [M-H]+ 484.2025 그리고 관찰된 [M-H]+ 484.2011; M.P. : >250℃에서 분해.
화합물 44 (2r), dl-(4S,5S)-1-벤질-4-(2-메톡시카보닐-에틸)-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (100 mL) 내의 벤즈알데하이드 (0.252 g, 2.4 mmol), 벤질아민 (0.258 g, 2.4 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 3-(5-옥소-2-페닐-4,5-디하이드로-옥사졸-4-일)-프로피오닉 애시드 메틸 에스테르 SP-1-182 (1e)(0.5 g, 2 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.282 g, 2.6 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여 증발되었다. 생성물은 1:1 디클로로메탄/헥산 혼합물을 사용하여 백색 고체로서 침전되었다. (0.54 g, 60 %). MS (EI) : C24H22N202에 대하여 계산된 (m/z) 442.5, 발견된 (m/z) 442
화합물 2s, dl-(4S,5S)-1,2-디벤질-4,5-디페닐-4,5-디하이드로-lH-이미다졸 -4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (120 mL) 내의 벤즈알데하이드 (0.6 g, 5.7 mmol), 벤질아민 (0.61 g, 5.7 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안환류 되었다. 2-벤질-4-페닐-4H-옥사졸린-5-온 (1.43 g, 5.7 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (0.8 g, 7.4 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 생성물은 부분입체이성질체의 혼합물(3: 1 비율)이었으며 60% 수득율로 얻었다. 위의 트랜스-부분입체이성질체는 메탄올/에테르로부터 반복 침전으로 얻었다. HRMS (EI): C30H26N2 02에 대하여 계산된 [(M-H)-CO2]+ 402.5 그리고 관찰된 [(M-H)-CO2]+ 402. 1.
화합물 46 (2t), dl-(4S,5S)-l,2-디벤질-4-메틸-5-페닐-4,5-디하이드로-lH-이미다졸-4-카복실릭 애시드, 및 화합물 47 (3t), dl-(4S,5R)-1,2-디벤질-4-메틸 -5-페닐-4,5-디하이드로-lH-이미다졸-4-카복실릭 애시드가 다음과 같이 합성되었다. 건조 디클로로메탄 (250 mL) 내의 벤즈알데하이드 (1.13g, 10.58 mmol), 벤질아민 (1.13g, 10.58 mmol) 용액이 질소 하에서 2시간 동안 환류 되었다. 2-벤질 -4-메틸-4H-옥사졸린-5-온 (2g, 10.58 mmol) 및 클로로트리메틸실란 (1.48 g, 10.58 mmol)이 첨가되었으며 혼합물은 질소 하에서 6시간 동안 환류 되었고, 그 후 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 건조하기 위하여. 증발되었다. 디클로로메탄/에테르 혼합물 (0. 6 g, 30 %)을 사용하여 백색 고체로서 침전되어 나온 생성물은 시스-이성질체 (3t)로 밝혀졌다. 트랜스-이성질체 (2t)는 그 후 모액으로부터 침전되어 나왔다. 그 후 소량이 (3) (0.15g, 7%)의 미량을 제거하기 위하여 그리고 특정을 위하여 소량이 재침전 되었다.
화합물 및 합성 방법이 표 8과 9에 요약되어 있다.
* 유도체: k 및 l -에틸 에스테르; 1-알코올.
N.O. - 최적화되지 않음
실시예 26
도 5의 이미다졸린의 NF-kB의 핵 전좌를 억제하는 능력이 개시된다. NF-kB의 p5O/p65 헤테로이량체의 핵 전좌의 억제는 p65-ELISA 분석으로 확인하였다. 세포는 PDTC (IkB 인산화의 억제, 그러므로 NF-kB 전좌를 억제하는 것으로 보고된 양성 대조군), 그리고 이미다졸린 32로, PMA 활성화 30분 전에 처리되었으며, 30분 동안의 배양 기간 후 핵 추출물이 분ㄹ되었다. PDTC와 이미다졸린은 100ηM ~ 5.0μM의 농도 범위에서 NF-kB p5O/p65 헤테로이량체 전좌의 현저한 억제는 나타내었다. 그러나 하이메니알디신[hymenialdisine] (음성 대조군 - NF-kB-DNA 결합 억제, 그러나 핵 전좌는 억제하지 않음)는 그렇지 않았다. (도 7, 이미다졸린 32의 대표적 적정[titration]을). 그러므로 이들 결과는 이미다졸린 32가 NF-kB 전좌를 마이크로몰 미만의 농도에서 현저하게 억제한다는 것을 나타내며, 심지어 PDTC보다 더 활성임 화합물 28-33 은 T-세포에서 그들의 독성이 평가되었으며 현저한 독성을 나타내지 않는 것으로 밝혀졌다. 세포 치사는 48 시간 의 기간에 걸쳐서 측정되었으며 결과는 표 10에 도시되었고 "가장 독성인(most toxic)" 억제제 32의 대표 그래프가 도 9에 도시되었다.
화합물 (1.0 μM) 세포자살 (± S.D.)
세포만 1.00 (정상화)
28 1.25 ± 0.18
29 0.95 ± 0.24
30 1.18 ± 0.20
31 1.18 ± 0.00b
32 1.98 ± 0.0001
이 복합적 연구 전에, 화합물의 독성이 쥐 모델에서 측정되었다. 화합물 28-33은 100 mg/kg까지의 농도에서 명백한 독성을 나타내지 않았다. 간단히, 약물은 DMSO에 용해되었으며 그리고 100 μL이 복강 내 주사 (IP)로 0일에 쥐에 제공되었다. 초기에, 투여용량 (5.0 및 50 mg/kg의 화합물 28, 32, 그리고 33)이 사용되었다. 이들이 잘 견디어졌으므로 (도 6A), 화합물 (29 및 31)이 50 그리고 100 mg/kg으로 사용되었다. (도 10B). 만일 체중이 초기 체중으로부터 적어도 10% 감소하지 않았다면, 독성은 현저한 것으로 고려되지 않았다. 체중 및 치사는 독성의 2가지 기준이었다. 이들 모델에서 2주의 기간 동안 독성은 관찰되지 않았다. 화합물 30 또한 동일한 타입의 시험에서 비-독성인 것으로 밝혀졌다.
이 결과는 이들 신규한 이미다졸린이 전사 인자 NF-kB의 강력한 억제제이며 T-세포 및 동물 모델에서 비-독성임을 나타낸다. 비-독성의 강력한 NF-kB 억제제의 조합은 NF-kB 조절 질환 및 염증성 질환, 특정 바이러스 감염, 자가 면역 질환과 같은 질환의 치료와 기관 및 조직 이식의 억제에서 유용하다.
실시예 27
이 실시예는 이미다졸린 28-33의 NF-kB 활성화에 대한 억제 효과 및 그것의 시스-플라틴의 화학증강 능력을 보여준다.
캠포테신(camptothecin) (CPT)은 Camptotheca acuminata Decaisne의 열매로부터 추출된 알칼로이드이며 토포이소머라아제 억제제로 밝혀졌다. (Denny, ACS Press: Washington, D.C., 483-500 (1995)). 현재, CPT-11과 토포테칸을 포함하는 몇몇 수용성 아날로그가 미국에서 성공적으로 임상 시험을 통과하였다. (Wall, Med. Res. Rev. 18. 299.314 (1998)). 캠포테신은 안정한 3원의(ternary) 토포이소머라아제 I-DNA 분해성 복합체(cleavable complex)를 형성함으로써 그것의 항종양 활성을 나타낸다. 이 분해 DNA 복합체의 안정화는 신호 경로를 개시하여, 궁극적으로는 세포 자살을 유도한다. (Pommier et al., Biochim. Biophys. Acta 1400: 83-105 (1998); Macdonald et al., Comprehensive natural products chemistry; Elsevier-North Holland: Amsterdam, pp 593-614 (1999)).
토포이소머라아제 I-DNA 분해성 복합체의 안정화 이외에, 캠포테신은 또한 핵 전사 인자 NF-kB에 의하여 매개되는 DNA 복구 메커니즘을 활성화한다. (Boland, Biochem Soc Trans 29: 674-678 (2001) ; Bottero et al. , Cancer Res 61: 77857791 (2001) ; Huanget al., J Biol Chem 275: 9501-9509 (2000) ; Piret and Piette, Nucl. Acids Res. 24: 4242-4248 (1996)). 캠포테신 (CPT)과 같은 DNA 손상제에 의한 NF-kB의 활성화는 몇몇 그룹에 의하여 다른 세포 주에서 보고된 바 있다. (Bottero et al., Cancer Res 61: 7785-7791 (2001) ; Huanget al., J Biol Chem 275: 9501-9509 (2000) ; Piret and Piette, Nucl. Acids Res. 24: 4242-4248 (1996)). CEM 백혈병 T-세포는 캠포테신에 의한 NF-kB 활성화에 감수성인 것으로 입증되었으며 이들 결과는 우리의 연구소에서 EMSA 분석을 사용하여 확인되었다. (도 3) (Piret and Piette, Nucl. Acids Res. 24: 4242-4248 (1996)). CEM 세포는 다양한 농도의 캠포테신 (CPT)과 함께 또는 그것 없이 배양되었다. 양성 대조군은 PMA/PHA 활성화를 포함하였다.(도 11, 레인 2). 레인3은 PMA/PHA 활성화를 사용하고, 그 후 명백히 NF-kB/DNA 복합체를 확인하기 위하여 추출물을 NF-kB p65 항체로 처리하는 양성 대조군을 포함하였다.
예측한 대로, 핵 추출물을 p65 항체로 치료하는 것은 현저한 NF-kB/DNA 결합의 감소를 초래하였다. (레인 3). 음성 대조군으로서, 세포는 활성화되지 않은 채로 유지되었으며 핵 추출물은 NF-kB 공통 서열로 처리되었으며, 이것은 오직 약한 배경 수준의NF-kB를 나타내었다. (레인 4). CEM 세포를 10 μM ~ 10 nM 범위의 농도의 캠포테신으로 처리하는 것은(도 11, 레인 5-8) NF-kB 활성화에 기인하는 상당한 용량의 NF-kB/DNA 결합을 나타내었다.
이미다졸린에 의한 NF-kB의 캠포테신 매개 활성화의 억제는 다음과 같다. NF-kB 활성화의 유도는 광범위한 시그날링 경로를 통하여 진행될 수 있다. (Delhase et al., Science 284: 309-313 (1999); Karin, Oncogene 18: 6867-6874 (1999)). NF-kB 활성화의 억제는 많은 다른 경로의 억제를 통하여 진행될 수 있다. (Epinat and Gilmore, Oncogene 18: 6896-6909 (1999)). 그러므로 이들 경로의 조절자(Modulators)는 일반적 활성화 억제제로서 작용하는 반면, 다른 것은 특정 유도 경로를 억제할 것이다. (Epinat and Gilmore, Oncogene 18: 6896-6909 (1999)). 이미다졸린이 캠포테신 유도 NF-kB 활성화의 특정 경로를 억제하는 지를 조사하기 위하여, 우리는 이미다졸린의 존재 하에서 캠포테신 유도 NF-kB 핵 결합의 억제를 조사하였다.
CEM 세포가 캠포테신 (0.1 μM)에 의하여 활성화되기 30분 전에 다양한 농도의 이미다졸린 32로 처리되었다. 도 12에 도시된 바와 같이, 이미다졸린 32의 첨가는 투여용량에 상응하는 방식으로 캠포테신 유도 NF-kB 핵 결합을 억제하였다. 대조구 레인은 다음을 포함한다. : DNA 만 (레인 1), PMA/PHA 활성화 NF-kB (레인 2), 초변화를 제공하는, p65 항체로 처리된 PMA/PHA 활성화 NF-kB, (레인 3) 그리고 활성화되지 않은 대조구 (레인 4). 캠포테신으로 NF-kB를 활성화하는 것은 NF-kB-DNA 복합체를 지시하는 강한 밴드를 제공한다. (레인 5). 비-선택성 NF-kB 억제제 PDTC의 존재 하에서 DNA 결합을 억제하는 것은 결합의 감소를 유도하였다. (레인 6). 캠포테신 유도 DNA 결합의 유사한 감소가 명백히 10 μM ~ 10 nM 농도 범위의 이미다졸린 32의 치료에 따른 레인 7-10에서 나타났다. Comparison of 레인 5 (0.1 μM CPT에 의하여 활성화됨)와 레인 7 (0.1 μM CPT에 의하여 활성화됨 + 10 μM 화합물 32)의 비교는 NF-kB-DNA 복합체 형성의 현저한 감소를 나타낸다. 이미다졸린 28-33이 CEM 세포에서 캠포테신의 활성을 증진시키는 그들의 능력에 대하여 평가되었다. 세포자살의 유도는 캠포테신을 포함하는 대부분의 화학치료제의 보증이다. 고사(apoptotic) 세포의 조직적 분해(systematic disassembly)는 활성 카스페이스(caspases)에 의하여 수행된다. (Thornberry et al., Nature 356: 768-774 (1992) ; Nicholson et al., Trends Biochem. Sci. 22: 299-306 (1997)) 표준 세포자살 분석법은 Promega의 APO-ONE 동종 카스페이스-3/7 분석법이며, 이것은 카스페이스 활성이 세포에서 세포 자살 유도를 직접 정량하는 장점이 있다. (Thornberry et al., Nature 356: 768-774 (1992); Nicholson et al., Trends Biochem. Sci. 22: 299-306 (1997)). NF-kB 억제는 항-고사(anti-apoptotic) 신호 경로의 억제- 따라서 세포자살의 증진-를 통하여 화학 요법제의 활성을 증진시켜야 한다는 가설에 따라 (Boland, Biochem. Soc Trans 29: 674-678 (2001); Chiao et al., Cancer 95: 1696-1705 (2002)), 우리는 이미다졸린의 효과를 이 카스페이스-3/7 분석법을 사용하여 조사하였다. 이 분석은 이미다졸린과 함께 그리고 이미다졸 없이 그리고 캠포테신으로 유도된 고사 세포 사망 수준을 정량하며 캠포테신에 의한 세포자살 증진의 직접적 수준을 설정할 것이다. 대표적 세포 치사 그래프는 도 13 A-F에 도시된다.
이 그래프들은 2가지 중요한 생물학적 효과를 나타낸다. 약물 (이미다졸린)만의 라인(검은 삼각형)에 도시된 것과 같이 이미다졸린은 비독성이다(또는 적어도 CEM 세포에서 현저한 세포독성을 나타내지 않는다.) 이미다졸린은 토포이소머라아제 억제제, 캠포테신 (CPT)과 조합하여 사용되는 경우 현저하게 세포 자살을 유도하는 것으로 나타난다. (X 라인 vs 사각형의 CPT만의 라인). 캠포테신의 농도는 모든 실험에서 0.1 μM로 일정하게 유지되었으며, 이미다졸린과의 복합 치료에서 현저한, 투여용량-시간에 상응하는 세포 자살 유도가 나타났다.
화합물 세포자살 ± S.D. 48 시간 후 캠포테신(0.1 μM)의 증진 배수
세포 만 1.00 (정상화된)
28 1.25 ± (0.18)
29 0.95 ± (0.24)
30 1.18 ± (0.20)
31 1.18 ± (0.00)b
32 1.98 ± (0.0001)
CPT (0.1 μM) 3.17 ± (1.35) 1.00
CPT + 28 4.55 ± (0.83) 1.44
CPT + 29 7.32 ± (0.93) 2.26
CPT + 30 7.15 ± (0.11) 2.31
CPT + 31 7.74 ± (0.00)b 2.44
CPT + 32 12.63 ± (0.85)a 3.98
a도 13A-F에 도시된 데이터의 완전한 세트
b단일 실험의 데이터
이 시리즈에서 가장 활성인 화합물은 그러므로 트리페닐 치환된 벤질 이미다졸린 32이다. 이미다졸린 32는 1.0 μM에서 캠포테신-유도 세포자살의 수준을 4 배 증진시켰다. (표 11 및 도 14 참조).
10 μM로 72 시간에 걸쳐서 시험된 세포에서는 물론 (데이터 제공되지 않음), 이 세포자살 (카스페이스-3) 분석에서 48시간에 걸쳐서 1.0μM 까지의 이미다졸린만으로 치료된 경우 현저한 세포 치사의 유도는 관찰되지 않았다. 우리의 몇몇 다른 이미다졸린에 의한 세포 자살 유도의 결과는 표 11에 도시된다.
이것은 CEM 세포를 0.1 μM 캠포테신 (CPT)으로 처리하고 48시간 후의 고사 세포 치사 수를 0.1 μM 캠포테신(CPT)과 1.0 μM 이미다졸린 32로 복합 처리 후의 죽은 세포의 수에 비교하여 결정되었다.
유사한 실험에서, 이미다졸린 32는 시스-플라틴의 화학증강제임이 밝혀졌다. (도 15A 및 15B). Combination of 0.1 μM 시스-플라틴과 0.1 μM 32의 조합은 T-세포에서 (CEM 세포) 1.0 μM의 시스-플라틴 ( 10-배 증가) 혼자보다 세포 자살을 더 유도하는 것으로 밝혀졌다.
실험재료 및 방법
NF-kB-DNA 결합의 EMSA 분석은 다음과 같았다. 인간 Jurkat 백혈병 T-세포 (clone E6-1; Amer. Type Culture Collection, Rockville, MD)가 10% 소 태아 혈청, 페니실린 (614 ηg/mL), 스트렙토마이신 (10 μg/mL) 그리고 HEPES 완충액이 보충된 RPMI-1640 배지 (Gibco-BRL, Rockville, MD)로 pH 7.2, 37℃, 5% C02에서 배양되었다. Jurkat 세포 (1 X 106 세포/mL)는 그 후 다양한 농도의 화합물로 30분 동안 37℃, 5% C0에서 처리되었으며, 그 후 PMA (50 ng/mL) 및 PHA (1 mM/mL) 자극이 다시 30분간 수행되었다. 세포는 원심분리로 수확되고, 냉 PBS로 세척되었으며 핵 추출물은 전술한 바대로 제조되었다. (Dignam, et al., Nucl. Acids Res 11: 1475-1489 (1983)). 추출물의 단백질 농도는 BioRad 시약으로 Bradford (1976)의 방법에 따라 측정되었다. 핵 추출물은 이중 가닥 Cy3 라벨된 NF-kB 공통 올리고뉴클레오타이드, 5'-AGTTGAGGGGACTTTC CCAGGC-3'(SEQ ID NO:1)과 함께 20분 동안 실온에서 배양되었다. 결합 혼합물 (25 mL)은 10 mM HEPES-NaOH pH 7.9, 4 mM 트리스-HCl, pH 7.9, 6.OmM KCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 10% 글리세롤, 0.3 mg/mL 소 혈청 알부민 그리고 1 mg의 폴리 (dI. dC)를 함유하였다. 결합 혼합물 (10 mg의 핵 추출물 단백질)이 0.16 pmol의 Cy3 라벨된 올리고뉴클레오타이드와 20분간 실온에서 배양되었다. 혼합물은 1X 트리스 붕산염/EDTA 완충액에서 제조된 4% 폴리아크릴아마이드 겔에 부하되었고 200 V에서 20 분간 전기영동 되었다. 전기영동 후, 겔은 NF-kB-DNA 결합의 탐지를 위하여 포스포이메져(Biorad FX plus)를 사용하여 분석되었다.
p65-ELISA 분석에 의한 전좌의 억제는 다음과 같았다. 핵으로 전좌된 p65/p5O 헤테로이량체의 용량은 NF-kB p65 샌드위치 ELISA 분석법 (Imgenex Corp.)을 사용하여 측정되었다. Jurkat 세포가 2 X 106 세포/mL로 배양되었으며 50 ng/mL PMA 및 1μg/mL PMA/PHA로 처리되고 37℃, 5% C02에서 배양되었다. 세포는 30분 후 수확되었고 핵 추출물은 전술한 Dignam and coworkers가 개시한 대로 제조되었다. (Dignam, et al., Nucl. Acids Res 11: 1475-1489 (1983)). NF-kB p65 샌드위치 ELISA 키트가 그 후 제조자의 프로토콜에 따라 핵으로의 p65 전좌를 감시하고 정량하기 위하여 사용되었다. PDTC는 NF-kB 전좌의 억제제로 보고되어 있으며 우리의 데이터는 100 nM ~ 5.0 μM 범위의 농도에서 이것이 NF-kB 전좌를 억제한다는 것을 확인하였다.
카스페이스 3/7 분석법을 사용한 세포자살 유도는 다음과 같았다. CEM 세포가 (CCRF-CEM); Amer. Type Culture Collection, Rockville, MD) 10% 소 태아 혈청, 페니실린 (614 ηg/mL), 스트렙토마이신 (10 μg/mL) 그리고 hepes 완충액이 보충된 RPMI1640 배지 (Gibco-BRL, Rockville, MD)로 pH 7.2, 37℃, 5% C02에서 배양되었다. DMSO가 모든 약물을 위한 벡터로서 사용되었으며 대조 시험에 첨가되었다. 세포 배양은 1μM, 0.1μM 또는 10nM의 이미다졸린으로 처리되었으며 37℃, 5% C02에서 배양되었다. 배양액(aliquote)은 96-웰(well) 플레이트로 이동되었으며 동일 부피의 Apo-ONETM 동종 카스페이스-3/7 분석 (Promega Corporation) 시약과 혼합되었다. 플레이트의 성분은 부드럽게 혼합되었으며 1시간 동안 배양되었다. 각 웰의 형광도가 그 후 분자이메져(Molecular Imager) FX Pro로 532 nm에서 측정되었다. 모든 보고된 데이터는 다른 언급이 없는 한 두 개별적 실험의 평균 데이터 이다.
실시예 28
이미다졸린 벤질 에스테르의 제조
EDCl.HCl: 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 하이드로클로라이드
DMAP: 디메틸 아미노피리딘
1-벤질 메틸-2,5-디페닐-4, 5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 벤질 에스테르 [SP-2- 611]의 합성:
화염 건조된 플라스크에서 질소 대기 하에서 1-벤질 메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸-4-카복실릭 애시드 (0.1g, 0.27 mmol)가 건조 메틸렌 클로라이드 (10ml)에 현탁 되었다. 용액은 아이스-바스에서 냉각되고 EDCl.HCl (0.057 g, 0.29mmol)이 첨가된 후, 5분 후에 DMAP (0.35 g, 0.29 mmol)이 첨가되고 20 분 동안 교반되었다. 벤질 알코올(0.062 g, 0.58 mmol)이 첨가되고 혼합물은 실온에서 하룻밤 동안 교반되었다. 반응 혼합물은 2N HCl (2 x 20 ml), 포화 소듐 바이카보네이트 (2 x 20 ml), 그 후 함수(20 ml) 로 세척되었다. 유기 층은 소듐 설페이트로 건조되고 감압 하에서 증발되었다. 정제되지 않은 생성물은 70 % 에테르/헥산 혼합물을 사용하는 컬럼 실리카-겔 크로마토그래피로 정제되었다.
실시예 29
1-벤질-4-메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸 애시드 1-페닐-에틸 에스테르 SP-1-396의 합성. :
건조 메틸렌 클로라이드 (25ml) 내의 1-벤질 메틸-2,5-디페닐-4,5-디하이드로-1H-이미다졸 카복실릭 애시드 (1.0g, 0.27 mmol)의 잘 교반된 현탁액이 화염 건조된 플라스크 내에서 질소 대기 하에서 제조되고 아이스-바스(ice-bath)에서 0℃로 냉각되었다. 이 혼합물에 EDCl.HCl (0.57g, 29mmol)이 첨가되고, 그 후 DMAP (0.35gm, 29 mmol)가 첨가되고 20분간 교반되었다. (R)-(+)-l-페닐-에탄올 (0.72g, 2 eq., 58 mmol)이 첨가되었고 혼합물 하룻밤동안 실온에서 교반되었다. 반응 혼합물은 2N HCl (2 x 20 ml), 포화 소듐 바이카보네이트 (2 x 20 ml), 그 후 함수(20ml)로 세척되었다. 유기 층은 dried over 소듐 설페이트로 건조시키고 감압 하에서 증발되었다. 정제되지 않은 생성물은 70 % 에테르 헥산 혼합물을 사용하는 컬럼 실리카-겔 크로마토그래피로 정제되었다.
여기서 본원 발명은 실시예를 참고하여 설명되었으나. 이는 본 발명을 제한하고자 한 것이 아님을 이해하여야 한다. 이 분야의 당업자는 이로부터 본 발명의 범위 내의 추가적 변형 및 실시예를 인식할 수 있을 것이다. 그러므로 본원 발명은 오직 첨부된 청구범위에 의하여 제한된다.

Claims (90)

  1. 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르:
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 0, N, S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 0, N, S를 갖는 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹 임.
  2. 제 1항에 있어서, R1은 페닐인 이미다졸린 에스테르.
  3. 제 1항에 있어서, R4는 벤질인 이미다졸린 에스테르.
  4. 제 1항에 있어서, R5는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬인 이미다졸린 에스테르.
  5. 제 4항에 있어서, R5는 에틸인 이미다졸린 에스테르.
  6. 제 1항에 있어서, R2는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬인 이미다졸린 에스테르.
  7. 제 6항에 있어서, R2는 메틸인 이미다졸린 에스테르.
  8. 제 1항에 있어서, R3은 페닐 및 치환된 페닐로 구성된 그룹에서 선택되는 이미다졸린 에스테르.
  9. 제 1항에 있어서, R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 페닐, 그리고 R4는 벤질인 이미다졸린 에스테르.
  10. 제 1항에 있어서, R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 4-메톡시페닐, 그리고 R 4는 벤질인 이미다졸린 에스테르.
  11. 제 1항에 있어서, R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 페닐, 그리고 R4는 4-플루오로페닐인 이미다졸린 에스테르.
  12. 제 1항에 있어서, R1은 페닐, R2는 페닐, R3은 페닐, 그리고 R4는 벤질인 이미다졸린 에스테르.
  13. 제 1항에 있어서, R1은 페닐, R2는 1H-인돌-3-일메틸, R3은 페닐, 그리고 R4는벤질인 이미다졸린 에스테르.
  14. 제 1항에 있어서, R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 피리딘-4-일, 그리고 R 4는 벤질인 이미다졸린 에스테르.
  15. 제 1항에 있어서, R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 페닐, 그리고 R4는 H인 이미다졸린 에스테르.
  16. 제 1항에 있어서, R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 에톡시카보닐, 그리고 R 4는 H인 이미다졸린 에스테르.
  17. 제 1항에 있어서, R1은 페닐, R2는 메틸, R3은 피리딘-4-일, 그리고 R 4는 벤질인 이미다졸린 에스테르.
  18. 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르:
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 0, N, S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 0, N 또는 S 또는 그들의 조합으로 된 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며; 그리고 R5는 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 0, N 또는 S 또는 그들의 조합을 포함하는 헤테로아릴 그리고 0, N, S 또는 그들의 조합을 포함하는 헤테로사이클릭인 1 ~ 15 탄소 원자를 함유하는 에스테르 그룹이며 그리고 여기서 탄소원자는 선택적으로 할로겐으로 치환됨.
  19. 제 18항에 있어서, R1 및 R3은 페닐, R4는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬 그리고 R4는 벤질인 이미다졸린 에스테르.
  20. 제 19항에 있어서, R5는 벤질 그룹인 이미다졸린 에스테르.
  21. 제 19항에 있어서, R5는 1-페닐-에틸인 이미다졸린 에스테르.
  22. 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르:
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 0, N, S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 0, N 또는 S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 여기서 에스테르 그룹에서 R11 및 R12는 수소, 알킬, 아릴, 아릴알킬 및 할로겐으로 구성된 그룹에서 선택되며, 그리고 R6 ~ R10은 수소, 할로겐, 알킬 할라이드, 에테르, 사이클릭 에테르, 사이클릭 알킬, 아릴 또는 아실, 아민, 하이드록실 그리고 5 ~ 14 탄소 원자를 포함하는 0, N 또는 S 또는 그들의 조합으로 된 헤테로사이클릭 또는 헤테로아릴 링으로 구성된 그룹에서 선택됨.
  23. 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르:
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 0, N, S 또는 그들의 조합을 갖는 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 0, N 또는 S 또는 그들의 조합을 된 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 여기서 R5 및 R6은 수소, 알킬, 아릴, 아릴알킬 및 할로겐으로 구성된 그룹에서 선택되며, 그리고 여기서 R7은 5 ~ 14 탄소 원자를 포함하는 하나 이상의 N, S, 또는 0 또는 그들의 조합을 함유하는 헤테로사이클릭 그룹 및 아릴로 구성된 그룹에서 선택됨.
  24. 염증 억제에 충분한 용량으로 포유류에 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르를 투여하는 것을 포함하는 포유류의 염증 억제 방법. :
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 및 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며 ; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.
  25. 제 24항에 있어서, 포유류는 인간인 포유류의 염증 억제 방법.
  26. 제 24항에 있어서, 포유류는 하등한 포유류인 포유류의 염증 억제 방법.
  27. 제 24항, 제 25항 또는 제 26항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 경구로 투여하는 포유류의 염증 억제 방법.
  28. 제 24항, 제 25항 또는 제 26항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 국소 투여하는 포유류의 염증 억제 방법.
  29. 제 24항, 제 25항 또는 제 26항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 주사로 투여하는 포유류의 염증 억제 방법.
  30. 제 24항, 제 25항 또는 제 26항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 정맥 투여하는 포유류의 염증 억제 방법.
  31. 다음을 포함하는 미생물 억제 방법.:
    미생물을 억제하기 위하여 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르의 유효 용량을 투여하는 단계:
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.
  32. 제 31항에 있어서, 생체 밖에서의 억제하는 미생물 억제 방법.
  33. 제 31항에 있어서, 생체 내에서 염증을 억제하는 미생물 억제 방법.
  34. 제 31항에 있어서, 포유류에 투여하는 미생물 억제 방법.
  35. 제 34항에 있어서, 포유류는 인간인 미생물 억제 방법.
  36. 제 31항, 제 32항 또는 제 33항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 경구로 투여하는 미생물 억제 방법.
  37. 제 31항, 제 32항 또는 제 33항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 주사로 투여하는 미생물 억제 방법.
  38. 제 31항, 제 32항 또는 제 33항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 정맥 투여하는 미생물 억제 방법.
  39. 제 31항, 제 32항 또는 제 33항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 국소 투여하는 미생물 억제 방법.
  40. 단백질을 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르와 접촉시키는 것을 포함하는 NF-kB 또는 NF-kB 키나아제인 단백질의 분해 억제 방법.:
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.
  41. 제 40항에 있어서, 생체 내에서 억제하는 NF-kB 또는 NF-kB 키나아제인 단백질의 분해 억제 방법.
  42. 제 40항에 있어서, 암의 치료에 사용되는 NF-kB 또는 NF-kB 키나아제인 단백질의 분해 억제 방법.
  43. 다중-치환된 4-애시드 또는 4-알킬 에스테르 이미다졸린을 포유류에 염증 억제에 충분한 용량으로 투여하는 것을 포함하는 포유류의 염증 억제 방법.
  44. 단백질을 단백질의 분해 억제에 충분한 용량의 다중-치환된 이미다졸린 에스테르와 접촉시키는 것으로 포함하는 NF-kB 또는 NF-kB 키나아제인 단백질의 분해 억제 방법.
  45. 암의 억제에 충분한 용량의 다중-치환된 이미다졸린 에스테르를 암과 접촉시키는 것을 포함하는 암 억제 방법.
  46. 종양 또는 암의 억제에 충분한 용량으로 포유류에 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르를 투여하는 것을 포함하는 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법. :
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.
  47. 제 46항에 있어서, 포유류는 인간인 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  48. 제 46항에 있어서, 포유류는 하등한 포유류인 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  49. 제 46항, 제 47항 또는 제 48항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 경구로 투여하는 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  50. 제 46항, 제 47항 또는 제 48항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 국소 투여하는 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  51. 제 46항, 제 47항 또는 제 48항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 주사로 투여하는 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  52. 제 46항, 제 47항 또는 제 48항 중 어느 한 항에 있어서, 포유류에 정맥 투여하는 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  53. 제 46항에 있어서, 이미다졸린이 종양 또는 암의 성장을 억제하는 약물과 혼합되는 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  54. 제 46항에 있어서, 상기 약물은 플라티네이트(platinate)인 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  55. 제 46항에 있어서, 상기 약물은 캠포테신(camptothecin)인 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  56. 제 46항, 제 47항 또는 제 48항 중 어느 한 항의 포유류에서 종양 또는 암의 억제 방법.
  57. (a) 다음 구조식의 이미다졸린 :
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.; 그리고
    (b) 종양 또는 암의 성장 억제 약물을 포함하는 조성물.
  58. 제 57항에 있어서, 상기 약물은 플라티네이트(platinate)인 조성물.
  59. 제 57항에 있어서, 상기 약물은 캠포테신(camptothecin). 인 조성물.
  60. 제 57항, 제 58항 또는 제 59항 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적 담체를 포함하는 조성물.
  61. 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르를 포유류에 투여하여 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 단계를 포함하는 포유류에 도입된 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 방법. :
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.
  62. 제 61항에 있어서, R1은 페닐인 포유류에 도입된 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 방법.
  63. 제 61항에 있어서, R4는 벤질인 포유류에 도입된 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 방법.
  64. 제 61항에 있어서, R5는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬인 포유류에 도입된 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 방법.
  65. 제 61항에 있어서, R5는 에틸인 포유류에 도입된 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 방법.
  66. 제 61항에 있어서, R2는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬인 포유류에 도입된 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 방법.
  67. 제 61항에 있어서, R2는 메틸이며 R3은 페닐 및 치환된 페닐로 구성된 그룹에서 선택되는 포유류에 도입된 외래 NF-kB 활성화제에 대한 면역 반응을 억제하는 방법.
  68. 자가 면역 질환을 치료하기 위하여 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 포유류에서 완전한 면역 결핍을 초래하지 않으면서 자가 면역 질환을 치료하는 방법.
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.
  69. 제 68항에 있어서, R1은 페닐인 포유류에서 완전한 면역 결핍을 초래하지 않으면서 자가 면역 질환을 치료하는 방법.
  70. 제 68항에 있어서, R4는 벤질인 포유류에서 완전한 면역 결핍을 초래하지 않으면서 자가 면역 질환을 치료하는 방법.
  71. 제 68항에 있어서, R5는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬인 포유류에서 완전한 면역 결핍을 초래하지 않으면서 자가 면역 질환을 치료하는 방법.
  72. 제 68항에 있어서, R5는 에틸인 포유류에서 완전한 면역 결핍을 초래하지 않으면서 자가 면역 질환을 치료하는 방법.
  73. 제 68항에 있어서, R2는 1 ~ 4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬 인 포유류에서 완전한 면역 결핍을 초래하지 않으면서 자가 면역 질환을 치료하는 방법.
  74. 제 68항에 있어서, R2는 메틸이며 R3은 페닐 및 치환된 페닐로 구성된 그룹에서 선택되는 포유류에서 완전한 면역 결핍을 초래하지 않으면서 자가 면역 질환을 치료하는 방법.
  75. 포유류로 이식된 기관의 거부를 억제하기 위하여 포유류에 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 포유류에 이식된 기관의 거부 억제 방법. :
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.
  76. 제 75항에 있어서, R1은 페닐인 포유류에 이식된 기관의 거부 억제 방법.
  77. 제 75항에 있어서, R4는 벤질인 포유류에 이식된 기관의 거부 억제 방법.
  78. 제 75항에 있어서, R5는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬인 포유류에 이식된 기관의 거부 억제 방법.
  79. 제 75항에 있어서, R5는 에틸인 포유류에 이식된 기관의 거부 억제 방법.
  80. 제 75항에 있어서, R2는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬인 포유류에 이식된 기관의 거부 억제 방법.
  81. 제 75항에 있어서, R2는 메틸이며 R3은 페닐 및 치환된 페닐로 구성된 그룹에서 선택되는 포유류에 이식된 기관의 거부 억제 방법.
  82. 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화를 억제하기 위하여 다음 구조식의 이미다졸린 에스테르의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는 HIV로 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화 억제 방법. :
    여기서 R1, R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 5 ~ 14 링 멤버를 함유하는 헤테로아릴, 그리고 5 ~ 12 링 멤버를 함유하는 헤테로사이클릭으로 구성된 그룹에서 선택되며; 그리고 R5는 이미다졸린의 에스테르를 제공하는 그룹이며, 이들 모두는 선택적으로 치환됨.
  83. 제 82항에 있어서, R1은 페닐인 HIV로 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화 억제 방법.
  84. 제 82항에 있어서, R4는 벤질인 HIV로 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화 억제 방법.
  85. 제 82항에 있어서, R5는 1~4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬인 HIV로 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화 억제 방법.
  86. 제 82항에 있어서, R5는 에틸인 HIV로 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화 억제 방법.
  87. 제 82항에 있어서, R2는 1 ~ 4 탄소 원자를 함유하는 저급 알킬인 HIV로 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화 억제 방법.
  88. 제 82항에 있어서, R2는 메틸이며 R3은 페닐 및 치환된 페닐로 구성되는 그룹에서 선택되는 HIV로 잠재적으로 감염된 세포에서 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV)의 재활성화 억제 방법.
  89. 제 46항에 있어서, 상기 약물은 토포아이소머라제 II 억제제인 방법.
  90. 제 89항에 있어서, 상기 약물은 다우노마이신(daunomycin)인 방법.
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Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080114015A1 (en) * 2002-05-31 2008-05-15 Board Of Trustees Of Michigan State University NF-kB inhibitors and uses thereof
US7528161B2 (en) * 2002-05-31 2009-05-05 Michigan State University NF-kappaB inhibitors and uses thereof
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EP2130822A1 (en) * 2005-12-01 2009-12-09 F. Hoffmann-La Roche AG 2,4,5-triphenyl imidazoline derivatives as inhibitors of the interaction between p53 and mdm2 proteins for use as anticancer agents
DE102005061430A1 (de) * 2005-12-22 2007-07-05 Grünenthal GmbH Substituierte Imidazolin-Derivate
US8129345B2 (en) * 2006-07-20 2012-03-06 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. MUC1-IκB kinase complexes and their activities
USRE48948E1 (en) 2008-04-18 2022-03-01 Warsaw Orthopedic, Inc. Clonidine compounds in a biodegradable polymer
US20100239632A1 (en) 2009-03-23 2010-09-23 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug depots for treatment of pain and inflammation in sinus and nasal cavities or cardiac tissue
EP3142658B1 (en) 2014-05-16 2020-01-15 Atriva Therapeutics GmbH Novel anti-infective strategy against influenza virus and s. aureus coinfections

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002030423A1 (en) * 2000-10-12 2002-04-18 Smithkline Beecham Corporation NF-λB INHIBITORS
US6878735B2 (en) * 2002-05-31 2005-04-12 Board Of Trustees Of Michigan State University Multi-substituted imidazolines and method of use thereof

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