KR20050042249A - Dna 복제 단백질 및 병인 관련 단백질을 코딩하는유전자 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 신규한 핵산 분자, 유전자적으로 개선된 미생물의 제조에 있어서의 그의 용도 및 상기 유전자적으로 개선된 미생물을 사용한 정밀 화학물질, 특히 아미노산의 제조 방법에 관한 것이다.
Description
세포에서 자연발생적으로 일어나는 대사 과정의 일부 산물 및 부산물은 식품, 사료, 화장품 및 제약 산업을 비롯한 다양한 산업 분야에 사용된다. 총체적으로 "정밀 화학물질"로 불리는 이들 분자로는 유기산, 단백질생성 및 비단백질생성 아미노산, 뉴클레오티드 및 뉴클레오시드, 지질 및 지방산, 디올, 탄수화물, 방향족 화합물, 비타민 및 보조인자, 및 효소가 있다. 이들은 원하는 각각 특정의 경우에 분자를 대량으로 생산하고 분비하도록 개발된 세균의 대규모 배양을 통해 최고로 생산된다. 이러한 목적에 특히 적합한 유기체는 그람 양성의 비병원성 세균인 코리네박테리움 글루타미쿰 (Corynebacterium glutamicum)이다. 균주 선별을 통해, 일련의 바람직한 화합물을 생산하는 다수의 돌연변이 균주가 개발되어 있다. 그러나, 특정 분자의 생산을 위해 개량된 균주의 선별은 시간 소모적이고 어려운 과정이다.
<발명의 개요>
본 발명은 코리네박테리움 글루타미쿰 또는 관련 박테리아 종 씨. 글루타미쿰 (C. glutamicum)의 동정 또는 분류를 위해 사용될 수 있는 신규 핵산 분자를 제공한다. 씨. 글루타미쿰은 그람-양성, 호기성 박테리아이고 다양한 정밀 화학물질의 대량 생산, 탄화수소의 분해 (예컨대, 원유 유출 경우) 및 테르페노이드의 산화를 위해 공업적으로 통상 사용된다. 따라서, 핵산 분자는 예를 들어, 발효 공정에 의해 정밀 화학물질을 생산하는 데 이용할 수 있는 미생물을 동정하는 데 사용할 수 있다. 씨. 글루타미쿰 자신이 비병원성이지만, 관련 다른 코리네박테리움 종, 예컨대 코리네박테리움 디프테리아에 (Corynebacterium diphteriae) (디프테리아 병원체)는 인간에서 주요 병원체이다. 따라서, 코리네박테리움 종의 존재의 동정능이 또한 예를 들면 진단 용도에서 임상적으로 상당히 중요할 수 있다. 또한, 상기 핵산 분자는 씨. 글루타미쿰 게놈 또는 관련 유기체의 게놈의 맵핑하기 위한 기준점으로 제공될 수 있다..
이들 신규 핵산 분자는 DNA-복제, 리보솜 및 병인 (RRP: replication, ribosomal and pathogenesis) 단백질로 본원에 칭해지는 단백질을 코딩한다. 이들 RRP 단백질은 예를 들면 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 생산에 직접 또는 간접적으로 관련될 수 있다. 본 발명의 RRP 단백질은 탄화수소의 분해 또는 테르페노이드의 산화에 관련될 수도 있다. 이들 단백질은 코리네박테리움 글루타미쿰 또는 씨. 글루타미쿰 관련 유기체의 동정에 사용될 수 있으며; 단백질 혼합물 중에 씨. 글루타미쿰 및 관련 종에 특이적인 RRP 단백질의 존재는 시료 중에 임의의 상기 박테리아의 존재른 나타낼 수 있다. 또한, 상기 RRP 단백질은 식물 또는 동물에서 질환 상태 또는 질병과 관련된 상동체를 가질 수 있으므로 상기 단백질은 약제 스크리닝 및 치료 화합물의 개발을 위한 유용한 제약상 표적으로서 제공될 수 있다.
미국 특허 제4,649,119호 (Sinskey et al.)에 개시된 바와 같이, 코리네박테리움 글루타미쿰에 사용하기 위한 클로닝 벡터의 이용가능성; 및 씨. 글루타미쿰 및 관련 브레비박테리움 (Brevibacterium) 종(예컨대, 락토페르멘툼)의 유전자 조작 기술 (Yoshihama et al, J. Bacteriol. 162: 591-597 (1985); Katsumata et al., J. Bacteriol. 159: 306-311 (1984); 및 Santamaria et al., J. Gen. Microbiol. 130: 2237-2246 (1984)) 때문에 본 발명의 핵산 분자는 이 유기체가 1종 이상의 정밀 화학물질 생산을 조정하기 위해 상기 유기체를 유전학적으로 조작하는데 사용할 수 있다. 이 조정은 본 발명의 유전자의 조작의 직접 영향 또는 이러한 조작의 간접적인 영향 때문에 일어날 수 있다. 예를 들면, 정밀 화학물질의 생합성 또는 분해와 관련된 단백질의 활성을 (즉, 상응하는 유전의 돌연변이유발에 의해) 조정하여 세포의 활성을 직접적으로 조정하고, 상기 화합물을 합성 또는 분해하여, 그에 의해 상기 정밀 화학물질의 수율 및(또는) 생산 효율을 조정할 수 있다. 마찬가지로, 정밀 화학물질의 대사 경로를 조절하는 단백질의 활성을 조정하여, 세포로부터의 정밀 화학물질의 수율 또는 생산 효율을 조정하는 이들 과정 모두로 중요 화합물의 생산을 상향 또는 하향조절하는데 직접적으로 영향을 줄 수 있다.
본 발명의 단백질의 활성의 조정 (즉, 상응하는 유전자의 돌연변이유발)은 또한 정밀 화학물질의 생산을 간접적으로 조정하여 성장 및 분열하거나 또는 생존능 및 생산성을 보유하는 세포의 활성을 전체적으로 증가시킬 수 있다. 정밀 화학물질은 성장 및 세포 분열에 대해 종종 차선인 조건하에 대량 발효 배양함으로써 씨. 글루타미쿰으로부터 보통 생산된다. 본 발명의 단백질 (예컨대, 스트레스 반응 단백질, 세포벽 단백질 또는 발생하는 세포 분열 및 세포 성장에 요구되는 화합물의 대사에 관련된 단백질, 예컨대 뉴클레오티드 및 아미노산)을 개질하여 더 양호한 생존, 성장 및 증식이 상기 조건하에 가능하여 이들 개질된 씨. 글루타미쿰 세포 수 및 생산성을 대량 배양에서 증가시킬 수 있고, 이는 또한 중요한 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율 및(또는) 생산 효율의 상승을 유도하여야 한다. 또한, 세포의 대사 경로는 상호 및 공동-조절에 반드시 의존적이다. 씨. 글루타미쿰에서 임의의 대사 경로의 활성을 변화시켜 (즉, 이러한 경로와 관련된, 본 발명의 임의의 단백질의 활성을 변화시켜서) 동시에 상기 미생물에서 정밀 화학물질의 합성 또는 분해에 직접적으로 관련될 수 있는 또다른 대사 경로의 활성 또는 조절을 변화시킬 수 있다.
본 발명의 RRP 단백질의 개질이 이러한 개질된 RRP 단백질을 함유한 씨. 글루타미쿰 계통에서의 정밀 화학물질의 수율, 생산 또는 생산성에 영향을 주는 다수의 메카니즘이 있다. 예를 들면, DNA 복제 속도를 증가시켜 (예를 들면, 하나 이상의 DNA 중합효소의 활성을 최적화시키거나 또는 DNA를 푸는 위상이성질체화효소 또는 헬리카제의 속도를 증가시킴으로써) 세포 분열을 가속화시킬 수 있고, 이는 배양액에 생존하는 정밀 화학물질-생산 세포 수를 또한 증가시킨다. 유사한 방식으로, (예컨대, 리보솜 단백질의 활성을 최적화시킴으로써) 번역의 속도를 증가시켜 중요한 1종 이상의 정밀 화학물질의 합성과 관련된 단백질의 수를 세포에서 증가시킬 수 있다. 적절하게 개질된 RRP 단백질을 갖는 미생물을 배양하는 경우 이 방법 모두는 중요한 정밀 화학물질의 생산을 증대시켜야 한다.
본 발명의 DNA 복제 단백질의 개질은 또한 더 큰 복제 정확도를 유도하여 상기 미생물의 유전학적 안정성 및 생존성을 증가시키고, 그에 의해 부정확한 복제 때문에 상기 정밀 화학물질의 생산을 증가시키는 추가 유전학적 개질을 파과하는 위험을 감소시킬 수 있다.
본 발명은 본원에서 RRP 단백질로서 칭해지고 예를 들면 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 생산 또는 생산 효율을 조절하거나 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공될 수 있는 단백질을 코딩하는 신규 핵산 분자를 제공한다. RRP 단백질을 코딩하는 핵산 분자는 본원에서 RRP 핵산 분자로서 칭해진다. 바람직한 실시양태에서, RRP 단백질은 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 생산 또는 생산 효율을 조정할 수 있거나 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공될 수 있다. 이러한 단백질의 실례는 표 1에 열거된 유전자에 의해 코딩된 것이다.
따라서, 본 발명의 한 측면은 RRP 단백질 또는 그의 생물학적 활성 부위를 코딩하는 뉴클레오티드 서열 및 또한 RRP-코딩 핵산 (예컨대, DNA 또는 mRNA)을 탐지 또는 증폭하기 위한 프라이머 또는 혼성화 프로브로서 적합한 핵산 단편을 포함하는 단리된 핵산 분자 (예컨대, cDNA)에 관한 것이다. 특히 바람직한 실시양태에서, 단리된 핵산 분자는 첨부문서 (Appendix) A에 열거된 임의의 뉴클레오티드 서열 또는 코딩 영역 또는 임의의 이들 뉴클레오티드 서열의 상보체를 포함한다. 다른 바람직한 실시양태에서, 단리된 핵산 분자는 첨부문서 B에 열거된 임의의 아미노산 서열을 코딩한다. 본 발명의 바람직한 RRP 단백질은 마찬가지로 바람직하게는 본원에 기재된 하나 이상 RRP 활성을 가진다.
첨부문서 A는 관련 위치의 서열 개질과 함께 서열목록의 핵산 서열을 하기에서 정의하고, 표 1에 기재한다.
첨부문서 B는 관련 위치의 서열 개질과 함께 서열목록의 폴리펩티드 서열을 하기에서 정의하고, 표 1에 기재한다.
추가 실시양태에서, 단리된 핵산 분자는 길이 15개 이상의 뉴클레오티드이고, 엄격한 조건 하에 첨부문서 A의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산 분자에 혼성화된다. 단리된 핵산 분자는 바람직하게는 자연 발생 핵산 분자에 상응한다. 단리된 핵산은 더 바람직하게는 자연 발생 씨. 글루타미쿰 RRP 단백질 또는 그의 생물학적 활성 부위를 코딩한다.
본 발명의 추가 측면은 본 발명의 핵산 분자를 함유한 벡터, 예를 들면 재조합 발현 벡터, 및 상기 벡터가 도입되는 숙주 세포에 관한 것이다. 일 실시양태에서, RRP 단백질은 적합한 배지에서 배양된 이 숙주 세포를 사용하여 생산된다. RRP 단백질은 이어서 배지 또는 숙주 세포로부터 단리될 수 있다.
본 발명의 추가 측면은 RRP 유전자가 도입되거나 또는 RRP 유전자가 개질된 유전학적으로 개질된 미생물에 관한 것이다. 일 실시양태에서, 상기 미생물의 게놈은 돌연변이된 RRP 서열을 이전유전자로서 코딩하는 하나 이상 본 발명의 핵산 분자를 도입시킴으로써 개질된다. 또다른 실시양태에서, 상기 미생물의 게놈의 내생 RRP 유전자는 개질된 RRP 유전자를 사용하는 상동성 재조합에 의해 개질, 예를 들면 기능적으로 파괴된다. 바람직한 실시양태에서, 이 미생물은 코리네박테리움 또는 브레비박테리움 속에 속하며, 코리네박테리아 글루타미쿰이 특히 바람직하다. 바람직한 실시양태에서, 이 미생물은 중요한 화합물, 예컨대 아미노산, 특히 바람직하게는 리신의 생산에도 사용된다.
또다른 바람직한 실시양태는 첨부문서 A에 기재된 하나 이상의 핵산 분자를 갖는 숙주 세포이다. 이러한 숙주 세포는 당업자에게 공지된 각종 방식으로 생산될 수 있다. 이 숙주 세포는 예를 들면, 몇몇 본 발명의 핵산 분자를 갖는 벡터에 의해 형질감염될 수 있다. 그러나, 각각의 경우에 본 발명의 하나의 핵산 분자를 숙주 세포 내로 도입시키기 위해 벡터를 사용할 수도 있고, 따라서 다수의 벡터를 동시에 또는 순차적으로 사용할 수 있다. 따라서, 본 발명의 다수, 수 백개 이하의 핵산 서열을 갖는 숙주 세포의 작제가 가능하다. 이러한 축적은 정밀 화학물질 생산성에 대해 숙주 세포에 추가 효과를 종종 만들 수 있다.
본 발명의 추가 측면은 단리된 RRP 단백질 또는 그의 부분, 예를 들면 생물학적 활성 부위에 관한 것이다. 바람직한 실시양태에서, 단리된 RRP 단백질 또는 그의 부분은 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 생산 또는 생산 효율을 조정할 수 있거나 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공될 수 있다. 또다른 바람직한 실시양태에서, 단리된 RRP 단백질 또는 그의 부분은 이 단백질 또는 그의 부분이 예를 들면 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 생산 또는 생산 효율을 조정하거나 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공되는 활성을 보유하도록 첨부문서 B의 아미노산 서열에 대해 충분히 상동성이다.
또한, 본 발명은 단리된 RRP 단백질 생산에 관한 것이다. 바람직한 실시양태에서, RRP 단백질은 첨부문서 B의 아미노산 서열을 포함한다. 추가로 바람직한 실시양태에서, 본 발명은 첨부문서 B의 완전 아미노산 서열 (첨부문서 A의 오픈 리딩 프레임에 의해 코딩됨)에 실질적으로 상동성인 단리된 전장 단백질에 관한 것이다.
RRP 폴리펩티드 또는 그의 생물 활성 부위를 RRP 폴리펩티드가 아닌 폴리펩티드와 작동 가능하게 연결하여 융합 단백질을 생성할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 이 융합 단백질은 RRP 단백질만의 활성과는 다르다. 다른 바람직한 실시양태에서, 상기 융합 단백질은 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 조정하거나 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공될 수 있다. 특히 바람직한 실시양태에서, 이 융합 단백질을 숙주 세포에 도입시켜 숙주 세포로부터 원하는 화합물이 생성되는 것을 조절한다.
본 발명의 추가 측면은 정밀 화학물질의 제조 방법에 관한 것이다. 이 방법은 본 발명의 RRP 핵산 분자를 발현하는 벡터를 포함하는 세포를, 정밀 화학물질이 생산되도록 배양하는 것을 제공한다. 바람직한 실시양태에서, 이 방법은 RRP 핵산을 발현하는 벡터로 세포를 형질감염시켜 상기 벡터를 함유하는 세포를 수득하는 단계도 포함한다. 추가의 바람직한 실시양태에서, 상기 방법은 추가로 정밀 화학물질을 배양액으로부터 수득하는 단계를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 세포는 코리네박테리움 또는 브레비박테리움 속에 속한다.
본 발명의 추가 측면은 미생물로부터 분자가 생산되는 것을 조절하는 방법에 관한 것이다. 이러한 방법은 RRP 단백질 활성 또는 RRP 핵산 발현을 조절하는 물질과 세포를 접촉시켜 세포 관련 활성이 상기 물질의 부재 하의 동일 활성에 비해 개질되도록 하는 것을 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 세포는 하나 이상의 씨. 글루타미쿰 RRP 단백질 활성에 대해 조정되어 이 미생물에 의해 중요한 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 개선한다. RRP 단백질 활성을 조절하는 물질은 예를 들면 RRP 단백질 활성 또는 RRP 핵산 발현을 자극하는 물질일 수 있다. RRP 단백질 활성 또는 RRP 핵산 발현을 자극하는 물질의 예로는 소분자, 활성 RRP 단백질, 및 세포에 도입된 RRP 단백질을 코딩하는 핵산이 있다. RRP 활성 또는 발현을 억제하는 물질의 예로는 소분자 및 안티센스 RRP 핵산 분자가 있다.
본 발명의 또 다른 측면은 별개의 플라스미드 상에 보유되거나 숙주 세포의 게놈 내로 도입되도록 RRP 야생형 유전자 또는 RRP-돌연변이 유전자를 세포에 도입하는 것을 포함하는, 세포로부터의 원하는 화합물의 수율, 생산 및(또는) 생산 수율을 조절하는 방법에 관한 것이다. 게놈 내로 삽입되면 (이러한 삽입은 무작위적일 수 있거나 천연 유전자가 도입된 카피로 대체되도록 하는 상동성 재조합에 의해 일어날 수 있음) 세포로부터의 조절되는 원하는 화합물의 생산을 유도한다. 바람직한 실시양태에서, 상기 수율은 증가한다. 또 다른 바람직한 실시양태에서, 상기 화학물질은 정밀 화학물질이며, 특히 바람직한 실시양태에서, 상기 정밀 화학물질은 아미노산이다. 특히 바람직한 실시양태에서, 상기 아미노산은 L-리신이다.
본 발명은 코리네박테리움 글루타미쿰 또는 관련 유기체의 동정, 씨. 글루타미쿰 게놈 (또는 매우 관련된 유기체의 게놈)의 맵핑 또는 예를 들면 발효 과정에 의한 정밀 화학물질의 생산에 사용될 수 있는 미생물의 동정에 사용될 수 있는 RRP-핵산 및 RRP-단백질 분자를 제공한다. 상기 핵산에 의해 코딩된 단백질을 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 생산 또는 생산 효율의 직접 또는 간접적 조정, 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서, 테르페노이드의 산화 또는 탄화수소의 분해를 위해 또는 치료 제약 화합물의 표적으로서 사용할 수 있다. 본 발명의 측면은 아래에 더 자세히 기재되어 있다.
Ⅰ. 정밀 화학물질
용어 "정밀 화학물질"은 당업계에 잘 인지되어 있고, 제약, 농업 및 화장품 산업과 같은, 그러나 이에 제한되지 않는 다양한 산업에 이용되는 유기체에 의해 생산되는 분자를 포함한다. 이러한 화합물로는 타르타르산, 이타콘산 및 디아미노피멜산과 같은 유기산, 단백질생성 및 비단백질생성 아미노산, 퓨린 및 피리미딘 염기, 뉴클레오시드, 및 뉴클레오티드 [예를 들어, 문헌 (Kuninaka, A. (1996) Nucleotides and related compounds, pp. 561-612, in Biotechnology Vol. 6, Rehm et al., Editors. VCH: Weinheim 및 그의 참고문헌)에 기재되어 있음), 지질, 포화 및 불포화 지방산 (예컨대, 아라키돈산), 디올 (예를 들어, 프로판디올 및 부탄디올), 탄수화물 (예를 들어, 히알루론산 및 트레할로스), 방향족 화합물 (예를 들어, 방향족 아민, 바닐린 및 인디고), 비타민 및 보조인자 [문헌 (Ullmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry, Vol. A27, "Vitamins", pp. 443-613 (1996) VCH: Weinheim 및 그의 참고문헌; 및 Ong, A. S., Niki, E. & Packer, L. (1995) "Nutrition, Lipids, Health, and Disease" Proceedings of the UNESCO/Confederation of Scientific and Technological Associations in Malaysia, and the Society for Free Radical Research Asia, held Sept. 1-3,1994 at Penang, Malaysia, AOCS Press, (1995)에 기재되어 있음], 효소 및 문헌 (Gutcho (1983) Chemicals by Fermentation, Noyes Data Corporation, ISBN: 0818805086) 및 그의 참고문헌에 기재된 다른 모든 화학물질이 있다. 이들 정밀 화학물질의 대사 및 용도는 아래에 더 자세히 기재된다.
A. 아미노산 대사 및 용도
아미노산은 모든 단백질의 기본 구조 단위를 구성하므로 모든 유기체에서 정상적인 세포 기능에 필수적이다. 용어 "아미노산"은 당업계에 인지되어 있다. 아미노산 중 단백질생성 아미노산은 20종이고 이들이 펩티드 결합에 의해 결합되어 있는 단백질에 대한 구조 단위로 작용하는 반면, 비단백질생성 아미노산 (수백 종이 공지되어 있음)은 정상적으로는 단백질에서 발견되지 않는다 [문헌 Ulmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry, Vol. A2, pp. 57-97 VCH: Weinheim (1985)을 참조함]. 비록 L-아미노산이 일반적으로 천연 발생 단백질에서 발견되는 유일한 형태일지라도 아미노산은 D-광학 또는 L-광학 구조로 존재할 수 있다. 20종의 단백질생성 아미노산 각각의 생합성 및 분해 경로의 특징은 원핵세포 및 진핵세포 둘다에서 잘 규명되어 있다 [예를 들어, 문헌 (Stryer, L. Biochemistry, 3rd edition, pp. 578-590 (1988))을 참조함]. 생합성의 복잡성으로 인한 일반적인 영양 요구물이기 때문에 "필수" 아미노산이라고 불리는 아미노산 (히스티딘, 이소루이신, 루이신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 트레오닌, 트립토판 및 발린)은 단순한 생합성 경로에 의해 나머지 11종의 "비필수" 아미노산 (알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파테이트, 시스테인, 글루타메이트, 글루타민, 글리신, 프롤린, 세린 및 티로신)으로 전환된다. 고등동물은 필수 아미노산 중 일부를 합성하는 능력을 보유하지만, 상기 필수 아미노산은 음식물로부터 공급되어야 정상적인 단백질 합성이 일어난다.
단백질 생합성에서의 아미노산의 기능 이외에, 이들 아미노산은 그 자체가 흥미로운 화학물질이고, 다수의 아미노산이 식품, 사료, 화학물질, 화장품, 농업 및 제약 산업에 다양하게 사용될 수 있는 것으로 밝혀져 있다. 리신은 인간 뿐만 아니라 가금 및 돼지와 같은 단위 (monogastric) 동물의 영양에 있어서도 중요한 아미노산이다. 글루타메이트는 향미제 첨가물 (모노-소듐 글루타메이트, MSG) 및 그외에 아스파테이트, 페닐알라닌, 글리신 및 시트테인도 식품 산업에 가장 흔히 사용된다. 글리신, L-메티오닌 및 트립토판은 모두 제약 산업에 사용된다. 글루타민, 발린, 루이신, 이소루이신, 히스티딘, 아르기닌, 프롤린, 세린 및 알라닌은 제약 및 화장품 산업 둘다에 사용된다. 트레오닌, 트립토판 및 D/L-메티오닌은 통상적인 사료 첨가제이다 (Leuchtenberger, W. (1996) Amino acid-technical production and use, pp. 466-502 in Rehm et al. (editors.) Biotechnology Vol. 6, Chapter 14a, VCH: Weinheim). 또한, 이들 아미노산은 합성 아미노산 및 단백질, 예컨대, N-아세틸시스테인, S-카르복시메틸-L-시스테인, (S)-5-히드록시트립토판, 및 문헌 (Ulmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry, Vol. A2, pp. 57-97, VCH: Weinheim, 1985)에 기재된 다른 것의 합성을 위한 전구체로 추가로 유용하다는 것이 밝혀져 있다.
이들 천연 아미노산을 생산할 수 있는 유기체, 예컨대, 세균에서의 이들 천연 아미노산의 생합성의 특징은 잘 규명되어 있다 [세균 아미노산 생합성 및 그의 조절에 대한 자세한 것은 문헌 (Umbarger, H. E. (1978) Ann. Rev. Biochem. 47: 533-606)을 참조함]. 글루타메이트는 시트르산 사이클의 중간체인 α-케토글루타레이트의 환원 아미노화에 의해 합성된다. 그 다음에 글루타민, 프롤린 및 아르기닌 각각이 글루타메이트로부터 생성된다. 세린의 생합성은 3-포스포글리세레이트 (해당작용의 중간체)에서 시작되며, 산화, 트랜스아민화 및 가수분해 단계 후 세린을 생성하는 3 단계 과정에서 발생한다. 시스테인 및 글리신 둘다 세린으로부터 생성되는데, 시스테인은 호모시스테인과 세린의 축합에 의해 생성되며, 글리신은 세린 트랜스히드록시메틸라제에 의해 촉매되는 반응에서 측쇄 β-탄소 원자가 테트라히드로폴레이트로 전달되어 생성된다. 페닐알라닌 및 티로신은 프레페네이트의 합성 후 최종 두 단계에서만 9 단계 생합성 경로에서 해당작용 및 펜토스 포스페이트 경로 전구체, 및 에리쓰로스 4-포스페이트 및 포스포에놀피루베이트로부터 합성된다. 트립토판도 이들 두 초기 분자로부터 합성되지만, 그의 합성은 11 단계 경로에 의해 합성된다. 티로신은 페닐알라닌 히드록실라제에 의해 촉매되는 반응에서 페닐알라닌으로부터 합성될 수도 있다. 알라닌, 발린 및 루이신은 해당작용의 최종 생성물인 피루베이트로부터 유도된 생합성 산물 각각이다. 아스파테이트는 시트르산 사이클의 중간체인 옥살아세테이트로부터 형성된다. 아스파라긴, 메티오닌, 트레오닌 및 리신 각각은 아스파테이트의 전환에 의해 생성된다. 이소루이신은 트레오닌으로부터 형성된다. 복잡한 9 단계 경로에서 활성화된 당인 5-포스포리보실-1-피로포스페이트로부터 히스티딘이 생성된다.
단백질 합성 필요량을 초과하는 아미노산의 양은 저장될 수 없고, 그 대신에 분해되어 세포의 주요 대사 경로에 대한 중간체로 제공된다 [자세한 것은 문헌 (Stryer, L. Biochemistry 3rd edition Chapter 21 "Amino Acid Degradation and the Urea Cycle" pp. 495-516 (1988))을 참조함]. 세포가 불필요한 아미노산을 유용한 대사 중간체로 전환시킬 수 있다 하더라도, 아미노산 생성은 에너지, 전구체 분자, 및 이들 아미노산을 합성하는 데 필요한 효소를 고려할 때 손실이다. 따라서, 특정한 아미노산의 존재가 그 자신의 생성을 서서히 또는 완전히 중지시키는 피드백 억제에 의해 아미노산의 생합성이 조절된다는 것은 놀라운 일이 아니다 [아미노산 생합성 경로의 피드백 기작에 대한 전체적인 내용은 문헌 (Stryer, L. Biochemistry 3rd editior Chapter 24 "Biosynthesis of Amino Acids and Heme" pp. 575-600 (1988))을 참조함]. 따라서, 임의의 특정 아미노산의 산출량은 세포의 아미노산의 양에 의해 제한된다.
B. 비타민, 보조인자 및 영양제의 대사 및 용도
비타민, 보조인자 및 영양제는 또다른 군의 분자를 포함한다. 이들 분자가 세균과 같은 다른 유기체에 의해 쉽게 합성된다 하더라도 고등동물은 이들 분자를 합성하고 섭취해야 하는 능력을 상실하였다. 이들 분자는 그 자체가 생활성 물질이거나, 다양한 대사 경로에서 전자 전달 물질 또는 중간체로 작용할 수 있는 생물 활성 물질의 전구체이다. 이들의 영양 가치 이외에, 이들 화합물은 색소, 항산화제 및 촉매로서, 또는 다른 과정의 보조제로서 상당한 산업적 가치를 갖는다 (이들 화합물의 구조, 활성 및 산업적인 용도에 대한 것은 예컨대, 문헌 (Ullman's Encyclopedia of Industrial Chemistry, "Vitamins" Vol. A27, pp. 443-613, VCH: Weinheim, 1996)을 참조함]. 용어 "비타민"은 당업계에 인지되어 있고, 유기체의 정상적인 기능을 위해서는 필요하지만 유기체가 스스로 합성할 수 없는 영양분을 포함한다. 비타민 군은 보조인자 및 영양제 화합물도 포함할 수 있다. 용어 "보조인자"는 정상적인 효소 활성이 일어나는 데 필요한 비단백질생성 화합물을 포함한다. 이러한 화합물은 유기성 또는 무기성일 수 있고, 본 발명의 보조인자 분자는 유기성인 것이 바람직하다. 용어 "영양제"는 식물 및 동물, 특히 인간에게 건강상 유익한 식이성 보충물을 포함한다. 이러한 분자의 예로는 비타민, 항산화제 및 일부 지질 (예를 들어, 다불포화 지방산)이 있다.
이들을 생성할 수 있는 유기체, 예컨대, 세균에서 일어나는 이들 분자의 생합성의 특징은 잘 규명되어 있다 (Ullman's Encyclopedia of Industrial Chemistry, "Vitamins" Vol. A27, pp. 443-613, VCH: Weinheim, 1996; Michal, G. (1999) Biochemical Pathways: An Atlas of Biochemistry and Molecular Biology, John Wiley & Sons; Ong, A. S., Niki, E. & Packer, L. (1995) "Nutrition, Lipids, Health, and Disease "Proceedings of the UNESCO/Confederation of Scientific and Technological Associations in Malaysia, and the Society for Free Radical Research-Asia, held Sept. 1-3, 1994 at Penang, Malaysia, AOCS Press: Champaign, IL X, 374 S).
티아민 (비타민 B1)은 피리미딘과 티아졸 잔기의 화학적 커플링에 의해 생성된다. 리보플라빈 (비타민 B2)는 구아노신-5'-트리포스페이트 (GTP) 및 리보스-5'-포스페이트로부터 합성된다. 그 다음, 리보플라빈은 플라빈 모노뉴클레오티드 (FMN) 및 플라빈 아데닌 디뉴클레오티드 (FAD)의 합성에 사용된다. 총칭하여 "비타민 B6"로 불리는 화합물 족 (예를 들어, 피리독신, 피리독사민, 피리독살-5'-포스페이트 및 시판되는 피리독신 히드로클로라이드)은 모두 통상적인 구조 단위인 5-히드록시-6-메틸피리딘의 유도체이다. 판토테네이트 (판토텐산, (R)-(+)-N-(2,4-디히드록시-3,3-디메틸-1-옥소부틸)-β-알라닌)은 화학적인 합성 또는 발효에 의해 생성될 수 있다. 판토테네이트의 생합성의 최종 단계는 β-알라닌과 판토산의 ATP-유도 축합으로 구성된다. 판토산으로 전환하는 생합성 단계, β-알라닌으로 전환하는 생합성 단계 및 판토텐산으로의 축합에 관여하는 효소는 공지되어 있다. 판토테네이트의 대사 활성 형태는 조효소 A인데, 이 조효소 A를 위한 생합성은 5 단계 효소 반응으로 진행된다. 판토테네이트, 피리독살-5'-포스페이트, 시스테인 및 ATP는 조효소 A의 전구체이다. 이들 효소는 판토테네이트의 형성을 촉매할 뿐만 아니라 (R)-판토산, (R)-판토락톤, (R)-판테놀 (프로비타민 B5), 판테테인 (및 그의 유도체) 및 조효소 A의 생성도 촉매한다.
미생물에서 전구체 분자인 피멜로일-CoA로부터 바이오틴이 생합성되는 것은 자세히 연구되어 있고 관련된 여러가지 유전자가 확인되어 있다. 상응하는 다수의 단백질이 Fe-클러스터 합성에도 관여하는 것으로 밝혀져 있고 이들 단백질은 nifS 클래스 단백질의 구성원이다. 리포산은 옥타노산으로부터 유도되고, 에너지 대사에서 조효소로 작용하는데, 여기서 상기 리포산은 에너지 대사에서 피루베이트 데히드로게나제 복합체 및 α-케토글루타레이트 데히드로게나제 복합체의 일부이다. 폴레이트는 모두 폴산의 유도체 물질의 군이고, 폴산은 L-글루탐산, p-아미노벤조산 및 6-메틸프테린으로부터 유도된다. 생전환의 대사 중간체인 구아노신-5'-트리포스페이트 (GTP), L-글루탐산 및 p-아미노벤조산으로부터 출발하는, 폴산 및 그의 유도체의 생합성은 특정 미생물에서 상세히 연구되어 있다.
코리노이드 (예컨대, 코발라민 및 특히 비타민 B12) 및 포피린은 테트라피롤 고리계에 의해 특징지워지는 화학물질의 군에 속한다. 비타민 B12의 생합성은 그 특징이 완전히 규명되어 있지는 않지만 다수의 효소 및 기질이 현재 공지되어 있다는 점에서 충분히 복잡하다. 니코틴산 (니코티네이트) 및 니코틴아미드는 "니아신"으로도 불리는 피리딘 유도체이다. 니아신은 중요한 조효소인 NAD (니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드), NADP (니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 포스페이트) 및 그들의 환원형의 전구체이다.
이들 화합물의 대량 생산은 비록 이들 화학물질 중 일부, 예를 들어, 리보플라빈, 비타민 B6, 판토테네이트 및 바이오틴이 미생물의 대량 배양에 의해서도 생산된다 하더라도 무세포 화학 합성에 주로 의존한다. 비타민 B12만이 발효에 의해 전적으로 생성되는데, 이는 비타민 B12의 합성의 복잡성 때문이다. 시험관내 방법론은 재료 및 시간, 종종 많은 비용의 상당한 투입을 요구한다.
C. 퓨린, 피리미딘, 뉴클레오시드 및 뉴클레오티드의 대사 및 용도
퓨린 및 피리미딘 대사 유전자 및 이들의 대응하는 단백질은 종양 질환 및 바이러스 감염의 치료에 중요한 표적이다. 용어 "퓨린" 또는 "피리미딘"은 핵산, 조효소 및 뉴클레오티드의 구성 성분인 질소 함유 염기를 포함한다. 용어 "뉴클레오티드"는 질소 함유 염기, 오탄당 (RNA의 경우, 상기 당은 리보스이고; DNA의 경우, 상기 당은 D-데옥시리보스임) 및 인산으로 구성된, 핵산 분자의 기본 구조 단위를 포함한다. 용어 "뉴클레오시드"는 뉴클레오티드의 전구체로 작용하지만 뉴클레오티드가 갖는 인산 잔기가 없는 분자를 포함한다. 이들 분자의 생합성을 억제하거나 핵산 분자를 형성하기 위한 이들 분자의 이동화를 억제함으로써, RNA 및 DNA 합성을 억제하는 것이 가능하고; 암세포에 표적화시키는 방식으로 상기 활성을 억제함으로써 종양 세포의 분열 및 복제 능력을 억제할 수 있다. 또한, 핵산 분자를 형성하기 보다는 에너지 저장물 (즉, AMP) 또는 조효소 (즉, FAD 및 NAD)로 작용하는 뉴클레오티드도 있다.
이들 화학물질이 퓨린 및(또는) 피리미딘 대사에 영향을 줌으로써 상기 의학적 증상에 사용될 수 있다는 것은 여러 가지 문헌에 기재되어 있다 (예를 들어, Christopherson, R.I. and Lyons, S.D. (1990) "Potent inhibitors of de novo pyrimidine and purine biosynthesis as chemotherapeutic agents. "Med. Res. Reviews 10: 505-548). 퓨린 및 피리미딘 대사에 관여하는 효소의 연구는 예를 들어, 면역억제제 또는 항증식제로 사용할 수 있는 신약의 개발에 초점을 두고 있다 (Smith, J. L., (1995) "Enzymes in Nucleotide Synthesis." Curr. Opin. Struct. Biol. 5: 752-757; Simmonds, H.A. (1995) Biochem Soc. Transact. 23: 877-902). 그러나, 퓨린 및 피리미딘 염기, 뉴클레오시드 및 뉴클레오티드는 여러 가지 정밀 화학물질 (예를 들어, 티아민, S-아데노실메티오닌, 폴레이트 또는 리보플라빈)의 생합성에 있어서 중간체로서의 용도, 세포를 위한 에너지 캐리어 (예를 들어, ATP 또는 GTP)로서의 용도, 및 통상적으로 향 상승제 (예를 들어, IMP 또는 GMP)로 사용되는 화학물질 자체를 위한 용도 또는 여러 가지 의학 용도를 갖는다 [예를 들어, 문헌 (Kuninaka, A. (1996) Nucleotides and Related Compounds in Biotechnology Vol. 6, Rehm et al., Editors. VCH: Weinheim, pp. 561-612)을 참조함]. 또한, 퓨린, 피리미딘, 뉴클레오시드 또는 뉴클레오티드 대사에 관여하는 효소를 표적으로 사용하여 살진균제, 제초제 및 살충제를 비롯한, 농작물 보호용 화학물질을 개발하는 연구가 증가하고 있다.
세균에 있어서 이들 화합물의 대사의 특징은 규명되어 있다 (예를 들어, 자세한 내용은 문헌 (Zalkin, H. and Dixon, J. E. (1992) "De novo purine nucleotide biosynthesis", in Progress in Nucleic Acid Research and Molecular Biology, Vol. 42, Academic Press:, pp. 259-287; 및 Michal, G. (1999) "Nucleotides and Nucleosides", Chapter 8 in: Biochemical Pathways: An Atlas of Biochemistry and Molecular Biology, Wiley: New York)을 참조함). 퓨린의 대사는 집중적인 연구의 대상이고, 세포의 정상적인 기능에 필수적이다. 고등 동물의 손상된 퓨린 대사는 통풍과 같은 심각한 질환을 초래할 수 있다. 퓨린 뉴클레오티드는 구아노신-5'-모노포스페이트 (GMP) 또는 아데노신-5'-모노포스페이트 (AMP)를 생성시키는 중간체 화합물인 이노신-5'-포스페이트 (IMP)를 통해 일련의 단계에서 리보스-5-포스페이트로부터 합성되고, 이들 GMP 또는 AMP로부터 뉴클레오티드로 사용되는 트리포스페이트가 용이하게 생성된다. 이들 화합물은 에너지 저장물로도 사용되므로, 이들의 분해는 세포에서 다수의 상이한 생합성 과정을 위한 에너지를 공급한다. 피리미딘 생합성은 리보스-5-포스페이트로부터의 유리딘 5'-모노포스페이트 (UMP)의 형성에 의해 진행된다. 그 다음, UMP가 시티딘 5'-트리포스페이트 (CTP)로 전환된다. 이들 모든 뉴클레오티드의 디옥시 형태는 뉴클레오티드의 디포스페이트 리보스 형태가 뉴클레오티드의 디포스페이트 데옥시리보스 형태로 전환되는 1 단계 환원 반응에서 생성된다. 인산화 후, 이들 분자는 DNA 합성에 관여할 수 있다.
D. 트레할로스의 대사 및 용도
트레할로스는 α,α-1,1 결합에 의해 결합된 두 가지 당 분자로 구성된다. 트레할로스는 감미료, 건조 또는 동결 식품용 첨가제로서 식품 산업, 및 음료 산업에 통상적으로 사용된다. 그러나, 제약, 화장품 및 생물공학 산업에도 사용된다 [예를 들어, 문헌 (Nishimoto et al., (1998) 미국 특허 제5,759,610호; Singer, M. A. and Lindquist, S. (1998) Trends Biotech. 16: 460-467; Paiva, C. L. A. and Panek, A. D. (1996) Biotech. Ann. Rev. 2: 293-314; 및 Shiosaka, M. (1997) J. Japan 172: 97-10)을 참조함]. 트레할로스는 다수의 미생물로부터 효소에 의해 생성되고 주위 배지내로 자연적으로 방출되는데, 트레할로스는 당업계에 공지된 방법을 이용하여 상기 배지로부터 단리할 수 있다.
II. 본 발명의 유전자의 활성
3가지 이상의 활성이 환경에서 생존하기 위해 특히 박테리아 종에 대해 요구된다. 첫 번째, 세포는 적어도 세포 개체수를 유지하거나 또는 증가시키기 위해 효율적으로 분열될 수 있어야 한다. 두 번째, 세포는 정상 세포 기능에 요구되는 단백질을 코딩하는 유전자를 효율적으로 발현하여야 한다. 마지막으로, 세포는 지역적 환경 조건에 적응하거나 또는 바람직한 환경에서의 물리적 운동에 의해 또는 직접적으로 환경에 작용하여 그의 생존성을 개선함으로써 그의 환경과 상호작용할 수 있어야 한다. 임의의 이들 활성과 관련된 중대한 단계는 박테리아 게놈의 복제, 단백질 생합성의 리보솜 활성 및 항세포 또는 세포 융해 활성 (유기체의 병인과 관련됨)을 포함한다.
III. 본 발명의 요소 및 방법
본 발명은 부분적으로는 본원에서 RRP 핵산 분자로 언급되는 새로운 분자의 발견을 기초로 한다. 이들 RRP 핵산 분자는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 박테리아 종의 동정, 씨. 글루타미쿰 게놈의 맵핑 및 예를 들면 발효성 공정에 의해 정밀 화학물질의 생산에 적합한 박테리아의 동정을 위한 마커로서 적합하다. 본 발명은 부분적으로 또한 상기 RRP 핵산 분자에 의해 코딩되는 이들 RRP-단백질 분자에 기초한다. 이들 RRP 분자는 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 조정하고, 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대해 동정 마커로서 제공되고, 탄화수소를 분해하고, 치료 제약 화합물의 개발에 대한 표적으로서 제공될 수 있다. 일 실시양태에서, 본 발명의 RRP 분자는 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 대사 경로에 직접 또는 간접적으로 관련된다. 바람직한 실시양태에서, 이러한 대사 경로에서 간접 또는 직접적으로 관여되는 본 발명의 RRP 분자의 활성은 이 미생물에 의한 중요한 정밀 화학물질의 생산에 영향을 미친다. 특히 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 RRP 분자의 활성을 조정하여 본 발명의 RRP 단백질이 관련된 씨. 글루타미쿰 대사 경로가 효율 또는 산출과 관련하여 조정되고, 이는 씨. 글루타미쿰에 의한 중요한 정밀 화학물질의 생산 또는 생산 효율을 직접 또는 간접적으로 조정한다.
용어 "RRP 단백질" 또는 "RRP 폴리펩티드"에는 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 조정하고, 탄화수소를 분해하고, 테르페노이드를 산화시키고, 약제 스크리닝 또는 약제 디자인에 대한 표적 단백질 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공될 수 있는 단백질이 포함된다. RRP 단백질의 예로는 표 1 및 첨부문서 A에 기재된 RRP 유전자에 의해 코딩되는 단백질이 포함된다. 용어 "RRP 유전자" 또는 "RRP 핵산 서열"에는 코딩 영역 및 이에 대응하는 비번역 5' 및 3'의 서열 영역으로 이루어진, RRP 단백질을 코딩하는 핵산 서열이 포함된다. RRP 유전자의 예로는 표 1에 기재된 것들이다. 용어 "생산" 또는 "생산성"은 당업계에서 인식되는 용어이며, 소정의 시간 및 소정의 발효 용적내에서 생성되는 발효 산물 (예를 들면, 원하는 정밀 화학물질)의 농도 (예를 들어, 1시간에 1리터 당 kg 산물)가 포함된다. 용어 "생산 효율"에는 세포에 의해 특정 생성물 양을 달성하는데 요구되는 시간(예를 들어, 세포가 특정 산출 비율의 정밀 화학물질 생성물을 얻는데 걸리는 시간)이 포함된다. 용어 "수율" 또는 "산물/탄소 수율"은 당업계에서 인식되는 용어이며, 탄소 공급원의 생성물 (즉, 정밀 화학물질)로의 전환 효율이 포함된다. 이 용어는 일반적으로는, 예를 들어, 탄소 공급원 kg 당 생성물 kg으로 표기된다. 화합물의 수율 또는 생산율을 증대시킴으로써, 소정의 시간 동안 특정 배양물 용적 중 이 화합물의 수득된 분자의 양 또는 적합한 분자의 양은 증가하게 된다. 용어 "생합성" 또는 "생합성 경로"는 당업계에서 인식되는 용어이고, 세포에 의한 중간체 화합물로부터의 화합물, 바람직하게는 유기 화합물의 합성을 포함하며, 다단계 또는 고도로 조절되는 과정일 수 있다. 용어 "분해" 또는 "분해 경로"는 당업계에서 인식되는 용어이고, 세포에 의한 화합물, 바람직하게는 유기 화합물의 분해 생성물(일반적으로 말해서, 더 작거나 덜 복잡한 구조의 분자)로의 분해를 포함하며, 다단계 또는 고도로 조절되는 과정일 수 있다. 용어 "대사"는 당업계에서 인식되는 용어이고, 유기체에서 일어나는 생화학적 반응의 전체를 포함한다. 특정 화합물의 대사 (예컨대, 아미노산 예를 들면 글리신의 대사)는 이 화합물에 영향을 미치는 세포에서의 모든 생합성, 개질 및 분해 경로를 포함한다.
또다른 실시양태에서, 본 발명의 RRP 분자는 씨. 글루타미쿰과 같은 미생물에서 목적하는 분자, 예컨대 정밀 화학물질의 생산을 직접 또는 간접적으로 조절할 수 있다. 유전자 재조합 기술을 사용하여, 본 발명의 하나 이상의 RRP 단백질을 조작하여 그의 기능을 조정할 수 있다. 기능의 이 조정은 씨. 글루타미쿰으로부터의 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율의 조정을 유도할 수 있다.
예를 들면, 정밀 화학물질의 생합성 또는 분해와 관련된 단백질의 활성을 조정하여 (즉, 상응하는 유전자의 돌연변이유발에 의해) 이 화합물의 합성 또는 분해에 대한 세포 활성을 직접적으로 조정하고, 이에 의해 정밀 화학물질의 수율 및(또는) 생산 효율을 조정할 수 있다. 마찬가지로, 세포로부터의 상기 정밀 화학물질의 수율 또는 생산 효율의 조절 방법 모두를 사용하며 정밀 화학물질 대사 경로를 조절하는 단백질의 활성을 조정하여 원하는 화합물의 생산에 대한 상향 또는 하향조절에 직접 영향을 미칠 수 있다.
정밀 화학물질의 생산은 또한 본 발명의 단백질의 활성을 조정하여 (즉, 상응하는 유전자를 돌연변이시킴으로써) 생존 및 생산성을 유지하기 위한 세포의 성장 및 분열의 활성을 전체적으로 증가시킬 수 있다. 정밀 화학물질은 성장 및 세포 분열에 대해 종종 차선인 조건하에 이들 미생물을 대량 발효 배양하여 씨. 글루타미쿰으로부터 보통 생산한다. 이들 조건에서 생존, 성장 및 증식을 개선할 수 있도록 본 발명의 단백질 (예를 들면, 스트레스 반응 단백질, 세포벽 단백질 또는 발생하는 세포 성장 및 세포 분열에 요구되는 화합물, 예컨대 뉴클레오티드 및 아미노산의 대사에 관련된 단백질)을 개질하여 대량 배양에서 이들 개질된 씨. 글루타미쿰 세포의 수 및 생산성을 증가시킬 수 있고, 이는 또한 원하는 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율 및(또는) 생산 효율의 증가를 유도하여야 한다. 또한, 세포의 대사 경로는 상호 및 공동-조절에 반드시 의존적이다. 씨. 글루타미쿰에서 임의의 대사 경로의 활성의 변화 (즉, 이러한 경로에 관련된, 임의의 본 발명의 단백질의 활성의 변화)는 이 미생물에서 정밀 화학물질의 합성 또는 분해에 직접적으로 관련될 수 있는 또다른 대사 경로의 활성 또는 조절을 동시에 변화시킬 수 있게 한다.
본 발명의 단리된 핵산 서열은 명칭이 ATCC 13032로 부여된, 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션에서 분양받을 수 있는 코리네박테리움 글루타미쿰 균주의 게놈내에 포함되어 있다. 단리된 씨. 글루타미쿰 RRP 핵산 분자의 뉴클레오티드 서열 및 씨. 글루타미쿰 RRP 단백질의 예상 아미노산 서열은 첨부문서 A 및 B 각각에 나타나 있다. 다수의 이들 뉴클레오티드 서열을 이. 콜라이 (E. coli) 유전자 또는 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis) 유전자에 상동성인 서열로서 분류 및(또는) 동정을 컴퓨터 분석으로 수행하였다.
본 발명은 또한 아미노산 서열이 첨부문서 B의 아미노산 서열에 실질적으로 상동성인 단백질에 관한 것이다. 본원에 사용되는 바와 같이. 아미노산 서열이 선별된 아미노산 서열에 실질적으로 상동성인 단백질은 선별된 아미노산 서열, 예를 들면 전체 선별된 아미노산 서열에 대해 상동성이 약 50% 이상이다. 또한, 아미노산 서열이 선별된 아미노산 서열에 실질적으로 상동성인 단백질은 선별된 서열에 대해 상동성이 약 50 내지 60% 이상, 바람직하게는 약 60 내지 70% 이상, 더 바람직하게는 약 70 내지 80%, 80 내지 90% 또는 90 내지 95% 이상, 가장 바람직하게는 약 96%, 97%, 98%, 99% 이상이다.
본 발명의 RRP 단백질 또는 그의 생물학적 활성 부위 또는 단편은 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 조정하거나, 탄화수소를 분해하거나, 테르페노이드를 산화시키거나, 약제 개발에 대한 표적으로서 제공되거나 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공될 수 있다.
본 발명의 다양한 측면은 하기 소단락에 보다 상세히 기재되어 있다.
A. 단리된 핵산 분자
본 발명의 한 측면은 RRP 폴리펩티드 또는 그의 생물학적으로 활성인 일부를 코딩하는 단리된 핵산 분자 뿐만 아니라 RRP-코딩 핵산 (예를 들어, RRP DNA) 확인 또는 증폭을 위한 혼성화 프로브 또는 프라이머로 사용하기에 충분한 핵산 단편에 관한 것이다. 이들 핵산 분자는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체의 동정, 씨. 글루타미쿰 또는 관련된 유기체의 게놈의 맵핑 또는 예를 들면 발효 공정에 의한 정밀 화학물질을 생산하기에 적합한 미생물의 동정에 사용될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "핵산 분자"는 DNA 분자 (예를 들어, cDNA 또는 게놈 DNA), RNA 분자 (예를 들어, mRNA), 및 뉴클레오티드 유사체를 사용하여 생성되는 DNA 또는 RNA 유사체를 포함하는 의미이다. 이 용어에는 또한 유전자의 코딩 영역의 3' 및 5' 말단의 둘 다에 위치하는 비번역 서열, 코딩 영역의 5' 말단으로부터 상류의 약 100개 이상의 뉴클레오티드 서열, 및 이 유전자의 코딩 영역의 3' 말단으로부터 하류의 약 20개 이상의 뉴클레오티드 서열이 포함된다. 핵산 분자는 단일 가닥 또는 이중 가닥일 수 있으며, 바람직하게는 이중 가닥 DNA이다. "단리된" 핵산 분자는 핵산의 천연 공급원에 존재하는 다른 핵산 분자로부터 분리되는 것이다. 바람직하게는, "단리된" 핵산은 이 핵산이 유도되는 생물의 게놈 DNA에서 본래 핵산의 양측면에 있는 서열 (즉, 핵산의 5' 및 3' 말단에 위치하는 서열)을 가지고 있지 않다. 예를 들어, 다양한 실시양태에서, 단리된 RRP 핵산 분자는 이 핵산이 유도되는 세포 (예를 들어, 씨. 글루타미쿰 세포)의 게놈 DNA에서 본래 핵산 분자의 양측면에 있는 약 5 kb, 4 kb, 3 kb, 2 kb, 1 kb, 0.5 kb 또는 0.1 kb 보다 작은 크기의 뉴클레오티드 서열일 수 있다. 게다가, "단리된" 핵산 분자, 예를 들어, cDNA 분자는, 재조합 기술에 의해 생산되는 경우 또다른 세포 물질 또는 배양 배지, 또는 화학적으로 합성되는 경우 화학물질 전구체 또는 다른 화학물질을 실질적으로 함유하지 않을 수 있다.
표준 분자 생물학 기술 및 본원에 제공되는 서열 정보를 이용하여, 본 발명의 핵산 분자, 예를 들어, 첨부문서 A의 뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산 분자 또는 그의 일부를 단리할 수 있다. 예를 들어, 첨부문서 A로부터의 완전 서열 또는 그의 일부를 혼성화 프로브로 사용하고 표준 혼성화 기술 (예를 들어, 문헌[Sambrook, J., Fritsh, E.F., and Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2nd, Ed., Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989]에 기재된 바와 같음)을 사용하여 씨. 글루타미쿰 뱅크로부터 씨. 글루타미쿰 RRP cDNA를 단리할 수 있다. 더우기, 첨부문서 A로부터의 완전 서열 또는 그의 일부를 포함하는 핵산 서열을 기초로 하여 설계된 올리고뉴클레오티드 프라이머를 사용하는 중합효소 연쇄반응에 의해 상기 핵산 분자를 단리할 수 있다 (예를 들면, 첨부문서 A의 이 동일 서열을 기초로하여 생산한 올리고뉴클레오티드 프라이머를 사용하는 중합효소 연쇄 반응을 통해 첨부문서 A로부터의 완전 서열 또는 그의 부분를 포함하는 핵산 분자를 단리할 수 있음). 예를 들어, mRNA는 정상 내피세포로부터 (예를 들어, 문헌[Chirgwin et al.(1979) Biochemistry 18:5294-5299]의 구아니디늄-티오시아네이트 추출 방법에 의해) 단리할 수 있고, cDNA는 역전사효소(예를 들어, Gibco/BRL(Bethesda, MD)로부터 입수가능한 몰로니(Moloney) MLV 역전사효소; 또는 세이까가꾸 아메리카, 인크.(Seikagaku America, Inc., St. Petersburg, FL)로부터 입수가능한 AMV 역전사효소) 및 첨부문서 A에 나타낸 임의의 뉴클레오티드 서열에 기초한 무작위 폴리뉴클레오티드 프라이머 또는 올리고뉴클레오티드 프라이머를 사용하여 제조할 수 있다. 첨부문서 A에 기재된 뉴클레오티드 서열 중 하나를 기초로 하여 중합효소 연쇄반응 증폭을 위한 합성 올리고뉴클레오티드 프라이머를 생산할 수 있다. 본 발명의 핵산은 cDNA 또는, 별법으로, 게놈 DNA를 주형으로 사용하고 표준 PCR 증폭 기술에 따라 적절한 올리고뉴클레오티드 프라이머를 사용하여 증폭시킬 수 있다. 이와 같이 증폭된 핵산을 적절한 벡터내에 클로닝하고 DNA 서열 분석에 의해 특성화할 수 있다. 또한, RRP 뉴클레오티드 서열에 상응하는 올리고뉴클레오티드는 표준 합성 기술, 예를 들어, 자동 DNA 합성기를 사용하여 제조할 수 있다.
바람직한 실시양태에서, 본 발명의 단리된 핵산 분자는 첨부문서 A에 기재된 뉴클레오티드 서열 중 하나를 포함한다. 첨부문서 A의 서열은 본 발명의 코리네박테리움 글루타미쿰 RRP cDNA에 상응한다. 이 cDNA는 첨부문서 A에 나타낸 서열, RRP 단백질 (즉, 첨부문서 A에서 서열 각각에 나타낸 "코딩 영역") 뿐만 아니라 5' 및 3' 비번역 서열도 포함한다. 또한, 핵산 분자는 첨부문서 A의 서열 중 하나의 코딩 영역만을 포함할 수 있다.
게다가, 본 발명의 핵산 분자는 첨부문서 A의 서열 중 한 서열의 코딩 영역의 일부만을, 예를 들어, 프로브 또는 프라이머로 사용될 수 있는 단편 또는 RRP 단백질의 생물학적으로 활성인 부분을 코딩하는 단편을 포함할 수 있다. 씨. 글루타미쿰으로부터의 RRP 유전자의 클로닝으로부터 결정되는 뉴클레오티드 서열을 이용하여 다른 유형의 세포 및 유기체에서 RRP 상동체 뿐만 아니라 다른 코리네박테리아 또는 관련 종으로부터 RRP 상동체를 동정하고(하거나) 클로닝하는데 사용하기 위해 설계된 프로브 및 프라이머를 생성시킬 수 있다. 프로브 또는 프라이머는 통상적으로 실질적으로 정제된 올리고뉴클레오티드를 포함한다. 올리고뉴클레오티드는 통상적으로 엄격 조건하에 첨부문서 A에 나타낸 임의의 서열의 센스 가닥, 첨부문서 A에 나타낸 임의의 서열의 안티센스 가닥, 또는 자연 발생적인 그의 변이체의 약 12개, 바람직하게는 약 25개, 보다 바람직하게는 약 40, 50 또는 75개 이상의 연속된 뉴클레오티드와 혼성화되는 뉴클레오티드 서열 영역을 포함한다. 첨부문서 A의 뉴클레오티드 서열을 기초로 한 프라이머는 RRP 상동체를 클로닝하기 위한 PCR 반응에서 사용될 수 있다. RRP 뉴클레오티드 서열을 기초로 한 프로브를 사용하여 동일하거나 상동성인 단백질을 코딩하는 전사체 또는 게놈 서열을 탐지할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 프로브는 그에 부착되는 표지 기, 예를 들어 방사성동위원소, 형광성 화합물, 효소 또는 효소의 보조인자를 추가로 포함한다. 이러한 프로브는, 예를 들어 세포 시료 중 RRP-코딩 핵산 양을 측정함으로써, 예를 들어 RRP mRNA 수준을 검출하거나 또는 게놈 RRP 유전자가 변이되었는지 또는 결실되었는지를 결정함으로써, RRP 단백질을 잘못 발현시키는 세포를 동정하기 위한 진단용 분석 키트의 일부로 사용될 수 있다.
일 실시양태에서, 본 발명의 핵산 분자는 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 조정하고, 탄화수소를 분해하고, 테르페노이드를 산화시키고, 약제 개발에 대한 표적으로서 제공되고, 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공되는 활성을 보유하는 단백질 또는 그의 부분에 대한, 첨부문서 B의 아미노산 서열에 충분히 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 단백질 또는 그의 부분을 코딩한다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "충분히 상동성인"이란 첨부문서 B의 아미노산 서열과 비교하여 아미노산 서열이 동일 또는 동등한 최소 수의 아미노산 잔기(예를 들어, 첨부문서 B의 서열 중 하나의 서열에서의 하나의 아미노산 잔기와 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기)를 가져서 단백질 또는 그의 부분이 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 조정하거나, 탄화수소를 분해하거나, 테르페노이드를 산화시키거나, 약제 개발에 대한 표적으로서 제공되거나, 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공될 수 있는 단백질 또는 그의 부분에 관한 것이다. 따라서, "RRP 단백질의 기능"은 1종 이상의 정밀 화학물질의 대사경로의 전체 조절, 탄화수소의 분해 또는 테르페노이드의 산화에 기여한다.
본 발명의 RRP 핵산 분자에 의해 코딩되는 단백질의 부분은 바람직하게는 RRP 단백질 중 하나의 생물학적으로 활성인 부분이다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "RRP 단백질의 생물학적으로 활성인 부분"은 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 조정하고, 탄화수소를 분해하고, 테르페노이드를 산화시키고, 약제 개발에 대한 표적으로 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공되는 RRP 단백질의 부분, 예를 들어, 도메인 또는 모티프를 포함한다. RRP 단백질 또는 그의 생물학적 활성 부위가 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 조정하거나, 탄화수소를 분해하거나 또는 테르페노이드를 산화시킬 수 있는지를 결정하기 위해, 효소 활성 분석을 수행할 수 있다. 실시예 8에 상세히 기개된 바와 같이 이들 분석 방법은 당업자에게 친숙하다.
RRP 단백질의 생물학적 활성 부위를 코딩하는 추가 핵산 단편을 첨부문서 B의 임의의 서열 부분을 단리하고, RRP 단백질 또는 RRP 펩티드의 코딩된 부위를 발현시키고 (예컨대, 시험관내 재조합 발현에 의해), 상기 RRP 단백질 또는 펩티드의 코딩된 부위의 활성을 측정하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명은 유전학적 코드의 퇴화 때문에 첨부문서 A에 나타낸 임의의 뉴클레오티드 서열 (및 그의 부분)과 상이한 핵산 분자를 포함하므로 첨부문서 A에 나타낸 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩된 것으로 동일한 RRP 단백질을 코딩한다. 또다른 실시양태에서, 본 발명의 단리된 핵산 분자는 첨부문서 B에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 가진다. 추가 실시양태에서, 본 발명의 핵산 분자는 첨부문서 B의 아미노산 서열에 실질적으로 상동성인 전장의 씨. 글루타미쿰 단백질을 코딩한다 (첨부문서 A에 나타낸 오픈 리딩 프레임에 의해 코딩됨).
개체에 존재할 수 있는 RRP 서열의 자연 발생 변이체 외에, 당업자는 마찬가지로 상기 RRP 단백질의 기능의 손상 없이 돌연변이로 첨부문서 A의 뉴클레오티드 서열을 변화시켜서, 코딩된 RRP 단백질의 아미노산 서열 변화를 유도할 수 있다는 사실을 인식하고 있다. 예를 들어, "비필수" 아미노산 잔기에서 아미노산 치환을 일으키는 뉴클레오티드 치환이 첨부문서 A의 뉴클레오티드 서열에서 일어날 수 있다. "비필수 아미노산" 잔기가 상기 RRP 단백질의 활성을 변화시키지 않으면서 RRP 단백질 (첨부문서 B) 중 하나의 야생형 서열로부터 개질될 수 있는 잔기인 반면 "필수" 아미노산 잔기는 RRP 단백질 활성에 요구된다. 그러나, 다른 아미노산 잔기 (예를 들어, RRP 활성을 갖는 도메인에서 보존되지 않거나 또는 반보존된 아미노산 잔기)는 활성에 필요하지 않을 수도 있으며, 따라서 RRP 활성을 변화시키지 않으면서도 변화시킬 수 있다.
따라서, 본 발명의 또다른 측면은 RRP 활성에 필수적이지 않은 아미노산 잔기에서의 변화를 포함하는 RRP 단백질을 코딩하는 핵산 분자에 관한 것이다. 이러한 RRP 단백질은 첨부문서 B의 서열로부터의 아미노산 서열이 다르지만, 상기 단백질을 본원에 기재된 RRP 활성 중 적어도 하나를 보유한다. 일 실시양태에서, 단리된 핵산 분자는, 첨부문서 B의 아미노산 서열과 약 50% 이상 상동성인 아미노산 서열을 포함하며, 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 조정하거나, 탄화수소를 분해하거나, 테르페노이드를 산화시키거나, 약제 개발에 대한 표적으로서 제공되거나 또는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 유기체에 대한 동정 마커로서 제공되는 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함한다.
코딩된 단백질 내에 하나 이상의 아미노산의 치환, 부가 또는 결실이 도입되도록 첨부문서 A의 뉴클레오티드 서열 내에 하나 이상의 뉴클레오티드의 치환, 부가 또는 결실을 도입시킴으로써, 첨부문서 B의 단백질 서열과 상동성인 RRP 단백질을 코딩하는 단리된 핵산 분자를 생성시킬 수 있다. 부위-지정 돌연변이유발법 및 PCR-매개 돌연변이유발법과 같은 표준 기술에 의해 첨부문서 A의 서열 중 하나에 돌연변이를 도입할 수 있다. 바람직하게는, 예상되는 하나 이상의 비필수 아미노산 잔기에서 보존된 아미노산 치환을 수행할 수 있다. "보존된 아미노산 치환"이란 아미노산 잔기가 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체되는 것을 말한다. 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 군은 당업계에 정의되어 있다. 이러한 군에는 염기성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 리신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 아스파라긴산, 글루탐산), 비하전된 극성 측쇄를 갖는 아미노산(예를 들어, 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인), 비극성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 베타-분지 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 트레오닌, 발린, 이소루이신) 및 방향족 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)이 포함된다. 따라서, RRP 단백질에서 예상되는 비필수 아미노산 잔기는 바람직하게는 동일한 측쇄 군으로부터의 다른 아미노산 잔기로 치환된다. 또다른 실시양태에서, 돌연변이는, 예를 들어, 포화 돌연변이유발법에 의해 RRP 코딩 서열의 전부 또는 일부를 따라 무작위적으로 도입될 수 있으며, RRP 활성을 보유하는 변이체를 동정하기 위해, 생성된 변이체를 본원에 기재된 RRP 활성에 대하여 시험할 수 있다. 첨부문서 A의 임의의 서열을 돌연변이 유발시킨 다음, 코딩된 단백질을 재조합적으로 발현시킬 수 있고, 예를 들어 본원에 기재된 분석법을 이용하여 상기 단백질의 활성을 측정할 수 있다 (실시예 8 참조).
B. 재조합 발현 벡터 및 숙주 세포
본 발명의 다른 측면은 RRP 단백질 (또는 그의 부분)을 코딩하는 핵산을 함유하는 벡터, 바람직하게는 발현 벡터에 관한 것이다. 본원에서 사용하는 용어 "벡터"는 그에 연결된 다른 핵산을 수송할 수 있는 핵산 분자에 관한 것이다. 벡터의 한 유형으로 "플라스미드"란 추가의 DNA 단편이 라이게이션될 수 있는 환형 이중쇄 DNA 루프를 의미한다. 벡터의 다른 유형은 바이러스 벡터이고 추가의 DNA 단편을 바이러스 게놈 내로 라이게이션시킬 수 있다. 특정 벡터는 도입된 숙주 세포 내에서 자가 복제 능력이 있다 (예, 세균 복제 개시점을 가진 세균 벡터 및 포유류의 에피솜 벡터). 다른 벡터 (예, 포유류의 비-에피솜 벡터)는 숙주 세포 내로 도입 시에 숙주 게놈 내로 삽입되고, 이렇게 함으로써 숙주 게놈과 함께 복제된다. 게다가, 특정 벡터는 작동 가능하게 연결된 유전자의 발현을 조절할 수 있다. 본 명세서에서는 그러한 벡터를 "발현 벡터"로 지칭한다. 일반적으로, 재조합 DNA 기술에서 사용하는 발현 벡터는 플라스미드의 형태를 갖는다. 플라스미드는 가장 일반적으로 사용되는 벡터 형태이기 때문에, 본 명세서에서는 "플라스미드"와 "벡터"를 혼용할 수 있다. 본 발명에는 동등한 기능을 제공하는 바이러스 벡터 (예, 복제 결손 레트로바이러스, 아데노 바이러스 및 아데노-관련 바이러스)와 같은 다른 형태의 발현 벡터도 포함된다.
본 발명의 재조합 발현 벡터는 숙주 세포 내에서 핵산의 발현에 적합한 형태인 본 발명의 핵산을 포함하며, 즉 적합한 형태란 상기 재조합 발현 벡터가 발현용 숙주 세포를 기준으로 선택된 하나 이상의 조절 서열 (발현되는 핵산 서열에 작동 가능하게 연결됨)을 함유하고 있음을 의미한다. 재조합 발현 벡터 내에서, "작동 가능하게 연결된"이란 목적하는 뉴클레오티드 서열이 발현 가능하도록 조절 서열(들)에 연결된 것을 의미한다 (예, 시험관내 전사/번역 시스템 내 또는 벡터가 숙주 세포 내로 도입되는 경우 숙주 세포 내). 용어 "조절 서열"이란 프로모터, 억제제-결합 부위, 할성제-결합 부위, 인핸서 영역 및 기타 발현 조절 요소 (예, 폴리아데닐화 신호)를 포함하는 것이다. 그러한 조절 서열은, 예를 들어 문헌 [Goeddel; Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, CA (1990)]에 기술되어 있다. 조절 서열에는 다수의 숙주 세포 유형 내에서 뉴클레오티드 서열의 발현을 조절하는 것과 단지 특정 숙주 세포 내에서의 뉴클레오티드 서열을 발현하는 것이 포함된다. 당업자는 발현 벡터 설계가 형질전환되는 숙주 세포의 선택, 목적 단백질의 발현 정도 등과 같은 인자들에 따라 다를 수 있음을 이해할 것이다. 본 발명의 발현 벡터는 숙주세포에 도입됨으로써 본 명세서에 기술된 핵산에 의해 코딩되는 융합 단백질 또는 펩티드를 비롯한 단백질 또는 펩티드를 생산할 수 있다 (예, RRP 단백질, RRP 단백질의 돌연변이형, 융합 단백질 등).
본 발명의 재조합 발현 벡터는 원핵 또는 진핵 세포에서의 RRP 단백질 발현용으로 설계될 수 있다. 예를 들어, RRP 유전자는 씨. 글루타미쿰과 같은 세균 세포, 곤충 세포 (바큘로바이러스 발현 벡터 사용), 효모 및 다른 진균류 세포 (문헌 [Romanos, M.A. et al. (1992) "Foreign gene expression in yeast: a review", Yeast 8:423-488; van den Hondel, C.A.M.J.J. et al. (1991) "Heterologous gene expression in filamentous fungi" in: More Gene Manipulations in Fungi, J.W. Bennet & L.L. Lasure, Editors, pp. 396-428: Academic Press: San Diego; 및 van den Hondel, C.A.M.J.J. & Punt, P.J. (1991) "Gene transfer systems and vector development for filamentous fungi, in: Applied Molecular Genetics of Fungi, Peberdy, J.F. et al., Editors, pp. 1-28, Cambridge University Press: Cambridge] 참조), 조류 및 다세포 식물 세포 (문헌 [Schmidt, R. and Willmitzer, L. (1988) High efficiency Agrobacterium tumefactiens-mediated transformation of Arabidopsis thaliana leaf and cotyledon explants" Plant Cell Rep.:583-586] 참조) 또는 포유류 세포 내에서 발현될 수 있다. 적합한 숙주 세포는 문헌 [Goeddel, Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, CA (1990)]에 더 기술되어 있다. 별법으로, 예를 들어 T7 프로모터 조절 서열 및 T7 중합효소를 사용하여 재조합 발현 벡터를 시험관 내에서 전사 및 번역시킬 수 있다.
원핵 세포 내에서 단백질을 발현시키는 것은 대체로 융합 또는 비-융합 단백질이 발현되도록 하는 구성적 또는 유도적 프로모터 함유 벡터로 수행한다. 융합 벡터는 그의 코딩되는 단백질에, 일반적으로는 재조합 단백질의 아미노 말단에 다수의 아미노산을 조절한다. 그러한 융합 벡터는 전형적으로 세 가지 목적: 1) 재조합 단백질의 발현 증가, 2) 재조합 단백질의 가용성 증가 및 3) 친화도 정제에서 리간드로서 작용함에 의한 재조합 단백질 정제 상의 용이함을 위한 것이다. 대개 융합 발현 벡터 내에서는 융합 단위와 재조합 단백질의 접합부에 단백질 절단 부위가 도입되어 있어서 융합 단백질을 정제한 후 융합 단위로부터 재조합 단백질을 분리하는 것이 가능하다. 그러한 효소 및 그의 상응하는 인식 서열에는 인자 Xa, 트롬빈 및 엔테로키나제가 포함된다.
전형적인 융합 발현 벡터에는 pGEX (Pharmacia Biotech Inc; 문헌 [Smith, D.B. and Johnson, K.S. (1988) Gene 67:31-40] 참조), pMAL (New England Biolabs, Beverly, MA) 및 pRIT5 (Pharmacia, Piscataway, NJ)가 포함되며, 이들은 각각 글루타티온-S-트랜스퍼라제 (GST), 말토스 E-결합 단백질 또는 프로틴 A (protein A)를 재조합 표적 단백질에 융합시킨다. 한 실시양태에서는 RRP 단백질의 코딩 서열을 pGEX 발현 벡터 내로 클로닝하여 N-말단 내지 C-말단에 GST-트롬빈 절단 부위-X 단백질을 함유하는 융합 단백질 코딩 벡터를 생성하였다. 상기 융합 단백질은 글루타티온-아가로스 수지를 사용하는 친화도 크로마토그래피에 의해 정제할 수 있다. GST에 융합되지 않은 재조합 RRP 단백질은 융합 단백질을 트롬빈으로 절단함으로써 얻을 수 있다.
적합한 유도적 비-융합 대장균 발현 벡터의 예로는 pTrc (문헌 [Amann et al.,(1988) Gene 69:301-315] 참조) 및 pET 11d (문헌 [Studier et al., Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, California (1990) 60-89]가 있다. pTrc로부터 표적 유전자가 발현되는 것은 혼성 trp-lac 융합 프로모터를 통한 숙주의 RNA 중합효소 전사에 의한 것이다. pET 11d 벡터로부터 표적 유전자가 발현되는 것은 T7 gn 10-lac 융합 프로모터를 통한 동시 발현된 바이러스 RNA 중합효소 (T7 gn1)로 매개되는 전사에 의한 것이다. 이 바이러스 중합효소는 lacUV 5 프로모터의 전사 조절 하에 T7 gn1 유전자를 함유하는 상재 λ프로파지로부터 숙주 균주 BL21(DE3) 또는 HMS174(DE3)에 의해 공급된다.
재조합 단백질의 발현을 극대화하는 전략의 일환으로 재조합 단백질을 단백질 분해에 의해 절단하는 능력을 감소시킨 숙주 세균 내에서 상기 단백질을 발현시키는 것이 있다 (문헌 [Gottesman, S., Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, California (1990) 119-128] 참조). 다른 전략으로는 발현 벡터 내로 삽입되는 핵산의 핵산 서열을 변형하여 각각의 아미노산에 대한 개별적인 코돈이 발현을 위해 선택된 세균 (예를 들어, 씨. 글루타미쿰)가 선호하는 코돈이 되도록 하는 것이 있다 (문헌 [Wada et al.(1992) Nucleic Acids Res. 20:2111-2118] 참조). 본 발명의 핵산 서열을 변형하는 것은 표준 DNA 합성 기술에 의해 수행될 수 있다.
다른 실시양태에서, RRP 단백질 발현 벡터는 효모 발현 벡터이다. 효모 에스. 세레비지애의 발현 벡터의 예로는 pYepSec1 (문헌 [Baldari, et al.,(1987) Embo J.6:229-234), pMFa (문헌 [Kurjan and Herskowitz,(1982) Cell 30:933-943] 참조), pJRY88 (문헌 [Shultz et al.,(1987) Gene 54:113-123] 참조) 및 pYES2 (Invitrogen Corporation, San Diego, CA)가 포함된다. 사상 진균류와 같은 다른 진균류용으로 적절한 벡터 및 벡터의 제조 방법으로는 문헌 [van den Hondel, C.A.M.J.J. & Punt, P.J. (1991) "Gene transfer systems and vector development for filamentous fungi, in: Applied Molecular Genetics of Fungi, J.F. Peberdy, et al., Editors, pp. 1-28, Cambridge University Press: Cambridge]에 상술된 것들이 포함된다.
별법으로, 바큘로바이러스 발현 벡터를 사용하여 본 발명의 RRP 단백질을 곤충 세포 내에서 발현시킬 수 있다. 배양된 곤충 세포 (예, Sf9 세포)에서의 단백질 발현용 바큘로바이러스 벡터에는 pAc계 (문헌 [Smith et al. (1983) Mol. Cell Biol. 3:2156-2165] 참조) 및 pVL계 (문헌 [Lucklow and Summers (1989) Virology 170:31-39] 참조)가 포함된다.
다른 실시양태에서는 단세포 식물 세포 (예를 들어, 조류) 또는 고등 식물 (예, 작물 식물과 같은 종자 식물)로부터의 세포 내에서 본 발명의 RRP 단백질을 발현시킬 수 있다. 식물 발현 벡터의 예로는 문헌 [Becker, D., Kemper, E., Schell, J. and Masterson, R. (1992) "New plant binary vectors with selectable markers located proximal to the left border", Plant Mol. Biol. 20: 1195-1197], 문헌 [Bevan, M.W. (1984) "Binary Agrobacterium vectors for plant transformation", Nucl. Acid. Res. 12: 8711-8721]에 상술된 것들이 포함된다.
또 다른 실시양태에서는 포유류 발현 벡터를 사용하여 포유류 세포 내에서 본 발명의 핵산을 발현시킨다. 포유류 발현 벡터의 예로는 pCDM8 (문헌 [Seed, B. (1987) Nature 329:840] 참조) 및 pMT2PC (문헌 [Kaufman et al. (1987) EMBO J. 6:187-195] 참조)가 포함된다. 포유류 세포를 사용하는 경우, 발현 벡터의 조절 기능은 대개 바이러스 조절 요소에 의한 것이다. 예를 들어, 일반적으로 사용되는 프로모터는 폴리오마, 아데노바이러스 2, 사이토메갈로바이러스 및 시미안 바이러스 40으로부터 유래된 것이다. 원핵 세포 및 진핵 세포 둘 다에 적합한 다른 발현계에 대해서는 문헌 [Chapters 16 and 17 of Sambrook, J., Fritsh, E.F., and Maniatis, T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2nd. Edition. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989]을 참조한다.
다른 실시양태에서, 재조합 포유류 발현 벡터는 바람직하게는 특정 세포 유형에서 핵산의 발현을 가능하게 한다 (예, 조직-특이적 조절 요소가 핵산을 발현시키는데 사용됨). 조직-특이적 조절 요소는 당업계에 공지되어 있다. 적합한 조직-특이적 프로모터에 대한 제한되지 않는 예로는 알부민 프로모터 (간-특이적; 문헌 [Pinkert et al. (1987) Genes Dev. 1: 268-277] 참조), 림프양-특이적 프로모터 (문헌 [Calame and Eaton (1988) Adv. Immunol. 43: 235-275] 참조), 특히 T 세포 수용체의 프로모터 (문헌 [Winoto and Baltimore (1989) EMBO J. 8: 729-733] 참조)와 이뮤노글로불린의 프로모터 (문헌 [Banerji et al. (1983) Cell 33: 729-740], 문헌 [Queen and Baltimore (1983) Cell 33: 741-748] 참조), 뉴런-특이적 프로모터 (예, 뉴로필라멘트 프로모터; 문헌 [Byrne and Ruddle (1989) PNAS 86: 5473-5477] 참조), 췌장-특이적 프로모터 (문헌 [Edlund et al. (1985) Science 230: 912-916] 참조) 및 유선-특이적 프로모터 (예, 유청 프로모터; 미국 특허 제4,873,316호 및 유럽 출원 번호 제264,166호 참조)가 포함된다. 또한, 발생-조절 프로모터, 예를 들어 쥐의 hox 프로모터 (문헌 [Kessel and Gruss (1990) Science 249: 374-379] 참조) 및 α-페토프로테인 프로모터 (문헌 [Campes and Tilghman (1989) Genes Dev. 3: 537-546] 참조)도 포함된다.
본 발명은 안티센스 방향으로 발현 벡터 내에서 클로닝된 본 발명의 DNA 분자를 함유하는 재조합 발현 벡터를 추가로 제공한다. 즉, 상기 DNA 분자는 RRP mRNA에 대해 안티센스인 RNA 분자의 (상기 DNA 분자의 전사에 의한) 발현이 가능하도록 조절 서열에 작동 가능하게 연결된다. 안티센스 방향으로 클로닝된 핵산에 작동 가능하게 연결되고 다양한 세포 유형에서 안티센스 RNA 분자의 연속 발현을 조절하는 조절 서열을 선택할 수 있는데, 예를 들어 바이러스 프로모터 및(또는) 인핸서, 또는 안티센스 RNA의 구성적, 조직-특이적 또는 세포형 특이적 발현을 조절하는 조절 서열을 선택할 수 있다. 안티센스 발현 벡터는 고효율의 조절 영역의 조절 하에서 안티센스 핵산을 생산하는 재조합 플라스미드, 파지미드 또는 약독화 바이러스의 형태일 수 있으며, 그 활성은 상기 벡터가 도입된 세포 유형에 의해 결정될 수 있다. 안티센스 유전자를 사용하여 유전자 발현을 조절하는 것에 대해서는 문헌 [Weintraub, H. et al., Antisense RNA as a molecular tool for genetic analysis, Reviews - Trends in Genetics, Vol. 1(1) 1986]을 참조한다.
본 발명의 다른 측면은 본 발명의 재조합 발현 벡터가 도입된 숙주 세포에 관한 것이다. 용어 "숙주 세포" 및 "재조합 숙주 세포"는 본 명세서에서 혼용되고 있다. 그러한 용어는 특정 대상 세포를 지칭할 뿐만 아니라 그러한 세포의 자손 또는 잠재적인 자손도 의미하는 것으로 이해한다. 세대를 지나면서 돌연변이나 환경의 영향으로 인해 특정 변형이 나타날 수 있기 때문에, 사실 그러한 자손은 부모 세포와 동일하지 않지만, 여전히 본 명세서에서 사용하는 용어의 범위에 포함된다.
숙주 세포는 임의의 원핵 세포 또는 진핵 세포일 수 있다. 예를 들어, RRP 단백질은 씨. 글루타미쿰과 같은 세균 세포, 곤충 세포, 효모 또는 포유류 세포 (예를 들어, 중국산 큰쥐 난소 세포 (CHO) 또는 COS 세포) 내에서 발현될 수 있다. 다른 적합한 숙주 세포는 당업자에게 공지되어 있다. 본 발명의 핵산 및 단백질 분자를 위한 숙주 세포로서 적합한 방식으로 사용할 수 있는 코리네박테리움 글루타미쿰 관련 미생물이 표 3에 기재되어 있다.
벡터 DNA는 통상적인 형질전환 또는 형질감염 기술을 통해 원핵 또는 진핵 세포 내로 도입될 수 있다. 본원에서 사용된 용어 "형질전환", "형질감염", "접합" 및 "형질도입"이란 이종 핵산 (예, DNA)을 숙주 세포 내에 도입하는 다양한 공지 기술을 의미하는 것이며, 천연 수용법 (natural competence), 화학적 매개 전달법, 인산 칼슘 또는 염화 칼슘 동시 침전법, DEAE-덱스트란-경유 형질감염법, 리포펙션법 (lipofection) 또는 전기천공법이 포함된다. 숙주 세포를 형질전환 또는 형질감염시키는데 적합한 방법은 문헌 [Sambrook et al. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2nd, Edition, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989)] 및 다른 실험 안내서에서 찾을 수 있다.
포유류 세포의 안정적 형질감염에 대해서는, 발현 벡터와 이용된 형질감염 기술에 따라, 단지 일부 소수 세포만이 그의 게놈 내로 이종 DNA를 삽입할 수 있다는 것이 알려져 있다. 이들 인서트를 확인하고 선별하기 위해, 일반적으로 선별 가능 표지 (예, 항생제 내성)를 코딩하는 유전자를 목적 유전자와 함께 숙주 세포 내로 도입시킨다. 바람직한 선별 가능 표지에는 G418, 하이그로마이신 및 메토트렉세이트와 같은 약물 내성을 부여하는 것들이 포함된다. 선별 가능 표지를 코딩하는 핵산은 RRP 단백질을 코딩하는 그 벡터 상에서 숙주 세포 내로 도입될 수 있으며, 또는 별도의 벡터 상에서 도입될 수도 있다. 도입된 핵산이 안정적으로 형질감염된 세포는, 예를 들어 약물 선별을 통해 동정할 수 있다 (예, 선별 가능 표지 유전자가 혼입된 세포는 생존할 것이나, 그렇지 않은 다른 세포는 사멸함).
상동성 재조합 미생물을 제조하기 위해서, 결실, 부가 또는 치환을 도입시켜 RRP 유전자를 변형 (예, 기능을 파괴)시킨 하나 이상의 RRP 유전자를 함유하는 벡터를 제조한다. 바람직하게는 이 RRP 유전자는 코리네박테리움 글루타미쿰 RRP 유전자이지만, 관련 세균으로부터의 상동체, 또는 포유류, 효모 또는 곤충 기원의 상동체도 사용할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 상기 벡터는 상동성 재조합에 의해 내생성 RRP 유전자가 기능적으로 파괴 (즉, 더이상 기능적 단백질을 코딩하지 않음, "녹 아웃 (knock-out)" 벡터로도 지칭함)되도록 설계된다. 별법으로, 상기 벡터는 상동성 재조합에 의해 내생성 RRP 유전자가 돌연변이되거나 달리 변형되었지만 여전히 기능적 단백질을 코딩 (즉, 상류 조절 영역이 변형되어 내생성 RRP 단백질의 발현이 변형될 수 있음)하도록 설계된다. 상동성 재조합 벡터에는 변형된 RRP 유전자 단편의 5' 및 3' 말단의 측면에 RRP 유전자의 추가적인 핵산이 자리하여 벡터에 의해 운반된 외래 RRP 유전자와 미생물 내의 내생성 RRP 유전자 사이에 상동성 재조합이 일어날 수 있다. 추가된 측면 RRP 핵산은 내생성 유전자와 성공적으로 상동성 재조합 되기에 충분한 길이를 갖는다. 전형적으로, 수 킬로베이스 미만의 측면 DNA (5' 및 3' 말단 둘 다)가 상기 벡터 내에 포함된다 (예를 들어, 상동성 재조합 벡터에 대해 기술하는 문헌 [Thomas, K.R., and Capecchi, M.R. (1987) Cell 51:503] 참조). 상기 벡터는 (예, 전기천공법에 의해) 미생물 내로 도입되고, 도입된 RRP 유전자와 내생성 RRP 유전자가 상동성 재조합된 세포를 당업계에 공지된 기술에 의해 선별한다.
다른 실시양태에서, 재조합 미생물은 도입된 유전자의 발현을 조절하도록 선별 시스템을 포함하는 것으로 제조할 수 있다. 예를 들어, 벡터 상에서 RRP 유전자가 lac 오페론의 조절 하에 위치하며 포함된 경우에는 오직 IPTG의 존재 하에서만 RRP 유전자의 발현이 가능하다. 그러한 조절 시스템은 당업계에 공지되어 있다.
배양된 원핵 또는 진핵 숙주 세포와 같은 본 발명의 숙주 세포는 RRP 단백질을 생산 (즉, 발현)에 사용될 수 있다. 또한, 본 발명은 본 발명의 숙주 세포를 이용한 RRP 단백질의 생산 방법을 추가로 제공한다. 한 실시양태에서, 상기 방법은 본 발명의 (RRP 단백질을 코딩하는 재조합 발현 벡터가 도입되거나, 야생형 또는 변형된 RRP 단백질을 코딩하는 유전자가 게놈 내로 도입된) 숙주 세포를 RRP 단백질이 생산될 때까지 적합한 배지에서 배양하는 것을 포함한다. 다른 실시양태에서, 상기 방법은 상기 배지 또는 숙주 세포로부터 RRP 단백질을 단리하는 것을 추가로 포함한다.
C. 본 발명의 용도 및 방법
본원에 기재한 핵산 분자, 단백질, 단백질 상동체, 융합 단백질, 프라이머, 벡터 및 숙주세포는 코리네박테리움 글루타미쿰 및 관련된 유기체의 동정, 씨. 글루타미쿰과 관련된 유기체의 게놈 맵핑, 씨. 글루타미쿰의 목적 서열의 동정 및 위치 확인, 진화 연구, 기능에 필요한 RRP 단백질 부위의 결정, RRP 단백질의 활성 조절, 하나 이상의 대사 경로의 활성 조절 및 정밀 화학 물질과 같은 목적 화합물의 세포 생산 조절 등의 방법 중 하나 이상에 사용할 수 있다. 본 발명의 RRP 핵산 분자는 다수의 용도를 가진다. 첫 번째, 본 발명의 RRP 핵산 분자는 유기체를 코리네박테리움 글루타미쿰 또는 가까운 관계물로서 동정하기 위해 사용될 수 있다. 본 발명의 RRP 핵산 분자는 미생물의 혼합된 개체들 중에서 씨. 글루타미쿰 또는 그의 관계물의 존재를 동정하기 위해 사용될 수도 있다. 본 발명은 다수의 씨. 글루타미쿰 유전자의 핵산 서열을 제공한다. 이 유기체에 특이적인 씨. 글루타미쿰 유전자의 영역을 포함하는 프로프를 사용하여 엄격한 조건 하에 미생물의 동질 또는 혼합된 개체의 배양의 추출된 게놈 DNA를 탐침함으로써 상기 유기체의 존재를 결정하는 것이 가능하다. 코리네박테리움 글루타미쿰 자신이 비병원성이지만, 병원성 종, 예컨대 코리네박테리움 디프테리아에 관련된다. 이러한 유기체의 탐지는 실질적으로 임상상 중요하다.
시료에서 씨. 글루타미쿰의 존재는 당업계에 공지된 기술을 사용하여 탐지될 수 있다. 특히, 시료의 세포는 적합한 액상 또는 고상 배양 배지에서 먼저 성장시켜 배양액에서 세포 수를 증가시킬 수 있다. 상기 세포를 용해시키고, 그에 함유된 모든 DNA를 추출하고, 필요에 따라 차후 분석을 방해할 수 있는 세포 파편 및 단백질 물질을 제거한다. 중합효소 연쇄 반응 또는 당업계에 공지된 유사 기술을 발명의 RRP 핵산 분자에 특이적이고, 시료에 존재하는 경우 핵산 시료와 인큐베이션되어 특정 RRP 핵산 서열을 증폭시키는 프라이머와 함께 수행한다 (핵산 서열 증폭에 보통 사용된 방법에 대한 일반 리뷰는 문헌 [Mullis et al., U.S. Patent No. 4683195, Mullis et al., U.S. Patent No. 4965188 and Innis, M.A. and Gelfand, D.H. (1989) PCR-Protocols, A guide to Metohods and Applications, Academic Press, pp. 3-12, and (1988) Biotechnology 6:1197 and international Patent Application No. WO89/01050]에서 알 수 있음). 증폭될 특정 핵산 서열은 씨. 글루타미쿰 및 단지 소수의 관련된 박테리아의 게놈에 그의 독점적인 존재에 기초하여 선별된다. 목적 증폭 산물의 존재는 씨. 글루타미쿰 또는 씨. 글루타미쿰과 매우 관련된 유기체의 존재를 나타낸다.
본 발명의 핵산 및 단백질 분자는 게놈의 특정 영역에 대한 마커로서 또한 제공될 수 있다. 당업계에 공지된 기술을 사용하여 글루타미쿰 게놈에 대해 본 발명의 RRP 핵산 분자의 물리적 위치를 탐지할 수 있고, 이것은 맵에 대해 다른 핵산 분자 및 유전자를 더 용이하게 위치화시키는데 사용될 수도 있다. 또한, 본 발명의 핵산 분자는 이들 핵산 분자에 대한 관련 종의 서열에 충분히 상동성이서 마찬가지로 이러한 박테리아 (예컨대, 브레비박테리움 락토페르멘툼)의 게놈 맵의 작제를 가능하게 할 수 있다.
본 발명의 핵산 및 단백질 분자는 게놈의 맵핑 및 씨. 글루타미쿰 단백질의 기능 연구에 적합하다. 특정 씨. 글루타미쿰 DNA-결합 단백질이 결합할 수 있는 게놈 영역은 예를 들면 씨. 글루타미쿰 게놈의 절단 및 단편과 상기 DNA-결합 단백질과의 인큐베이션으로 동정될 수 있다. 단백질에 결합하는 이들 단편은 본 발명의 핵산 분자로 바람직하게는 용이하게 탐지가능한 표지를 사용하여 탐침할 수도 있으며; 게놈 단편에 대한 이러한 핵산 분자의 결합은 씨. 글루타미쿰의 게놈 맵 상에 상기 단편을 위치화시킬 수 있고, 이것은 상이한 효소를 사용하여 수회 수행하는 경우 단백질이 결합하는 핵산 서열을 신속하게 결정하는 것을 촉진한다.
본 발명의 RRP 핵산 분자는 마찬가지로 진화 연구 및 단백질 구조 연구에 적합하다. 원핵 및 진핵 세포의 다양성은 본 발명의 분자가 관련된 대사 과정을 이용하며; 본 발명의 핵산 분자의 서열을 다른 유기체로부터의 유사한 효소를 코딩하는 것과 비교하여 상기 유기체의 진화 관련성 정도를 결정함으로써 가능하다. 따라서, 이러한 비교는 서열이 보존되거나 되지 않은 것을 결정할 수 있게 하고, 이는 효소 기능이 필수인 이들 단백질 영역의 결정을 도울 수 있다. 이 유형의 결정은 단백질 가공 연구에 대해 가치있고, 상기 단백질이 그의 기능 손실 없이 허용될 수 있는 돌연변이유발 정도를 나타낼 수 있다.
본 발명의 RRP 단백질은 공지되지 않은 박테리아를 씨. 글루타미쿰으로서 분류하거나 또는 시료 중의 씨. 글루타미쿰 또는 가깝게 관련된 박테리아를 동정하기 위한 마커로서 사용될 수 있다. 당업계에 공지된 기술을 사용하여 예를 들면 시료에서 필요에 따라 세포를 증폭하여 (예를 들면, 적합한 배지에서 배양함으로써) 시료의 양을 증가시키고, 이어서 상기 세포를 융해시켜 그에 함유된 단백질을 유리하는 것이 가능하다. 필요에 따라, 상기 시료를 정제하여 세포 파편 및 핵산 분자를 제거할 수 있으며, 이는 차후 분석을 방해할 수 있다. 본 발명의 선택된 RRP 단백질이 시료체 존재하는 경우 그의 표적 단백질에 결합하는 항체와 함께 이 RRP 단백질에 특이적인 항체를 단백질 시료와 전형적인 웨스턴 분석 형식으로 인큐베이션할 수 있다 (예를 들면, 문헌 [Ausubel et al., (1988) Current Protocols in Molecular Biology, Wiley: New York] 참조). RRP 단백질은 씨. 글루타미쿰 또는 씨. 글루타미쿰 및 매우 가깝게 관려된 박테리아에서 특이적이거나 또는 거의 특이적인 경우 이 유형의 분석에 대해 선별된다. 시료의 단백질을 이어서 겔 전기영동으로 분획하고, 적합한 매트릭스, 예컨대 니트로셀룰로오스로 옮긴다. 탐지가능 표지 (예컨대, 화학발광 또는 측색)를 갖는 적합한 2차 항체를 상기 매트릭스와 인큐베이션한 후에 엄격한 세척을 한다. 표지의 존재 또는 부재는 시료에서 표적 단백질의 존재 또는 부재를 나타낸다. 이 단백질이 존재하는 경우, 이는 씨. 글루타미쿰의 존재를 나타낸다. 유사한 방법은 공지되지 않은 박테리아를 씨. 글루타미쿰으로서 분류할 수 있게 하며; 이 박테리아는 다수의 씨. 글루타미쿰-특이성 단백질이 상기 공지되지 않은 박테리아로부터 제조된 단백질 시료에서 탐지되지 않는 경우 아마 씨. 글루타미쿰이 아니다.
본 발명의 RRP 핵산 분자의 유전 조작은 야생형 RRP 단백질과 비교하여 기능적으로 상이한 RRP 단백질을 생성할 수 있다. 그의 효율 또는 활성과 관련하여 개선될 수 있는 이들 단백질은 보통 세포보다 더 많은 양으로 세포에 존재할 수 있거나 또는 그의 효율 또는 활성과 관련하여 약화될 수 있다.
활성의 이들 변화는 씨. 글루타미쿰에서 1종 이상의 정밀 화학물질의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 직접적으로 조절할 수 있다. 예를 들면, 정밀 화학물질의 생합성 또는 분해에 관련된 단백질의 활성을 조정하여 (즉, 상응하는 유전자를 돌연변이시킴으로써) 세포의 활성을 직접적으로 조정하고, 이 화합물을 합성 및 분해하고, 그에 의해 상기 정밀 화학물질의 수율 및(또는) 생산 효율을 조정할 수 있다. 마찬가지로, 정밀 화학물질의 대사 경로를 조절하는 단백질의 활성을 조정하여 세포로부터 정밀 화학물질의 수율 또는 생산 효율을 조절하는 이들 과정 모두로 원하는 화합물의 생산을 상향 또는 하향조절하는 직접적인 영향을 가질 수 있다.
본 발명의 단백질의 활성의 조정 (즉, 상응하는 유전자의 돌연변이유발)은 정밀 화학물질의 생산을 간접적으로 조정하여 세포의 성장 및 분열, 또는 생존성 및 생산성의 보유 활성을 전체적으로 증가시킬 수도 있다. 정밀 화학물질은 성장 및 세포 분열에 대해 종종 차선인 조건하에 이들 미생물의 대량 발효 배양액으로 씨. 글루타미쿰으로부터 보통 생산된다. 본 발명의 단백질 (예컨대, 스트레스 반응 단백질, 세포벽 단백질 또는 일어나는 세포 성장 및 세포 분열에 대해 요구되는 화합물, 예컨대 뉴클레오티드 및 아미노산의 대사에 관련된 단백질)을 개질하여 더 양호한 생존, 성장 및 증식을 상기 조건하에 가능하게 하여 대량 배양액에서 이들 개질된 씨. 글루타미쿰 세포의 수 및 생산성을 증가시킬 수 있고, 이것은 또한 원하는 1종 이상의 정밀 화학물질의 증가된 수율 및(또는) 생산 효율을 유도하여야 한다. 또한, 세포의 대사 경로는 상호 및 공동-조절에 대해 반드시 의존적이다. 씨. 글루타미쿰에서 임의의 대사 경로의 활성을 변화시켜 (즉, 이러한 경로와 관련된, 본 발명의 임의의 단백질의 활성을 변화시켜서) 동시에 상기 미생물에서 정밀 화학물질의 합성 또는 분해에 직접적으로 관련될 수 있는 또다른 대사 경로의 활성 또는 조절을 변화시킬 수 있다.
씨. 글루타미쿰에서 정밀 화학물질의 수율을 증가시켜야 하는, RRP 단백질의 돌연변이유발에 대한 상술된 방법은 제한되지 않으며, 이들 돌연변이유발 방법의 변형도 당업자에게 매우 분명하다. 이들 방법을 사용하고, 본원에 개시된 메카니즘을 포함함으로써 본 발명의 핵산 및 단백질 분자를 사용하여 돌연변이 RRP 핵산 및 단백질 분자를 발현하는 씨. 글루타미쿰 또는 관련 박테리아 계통을 생산하여 원하는 화합물의 수율, 생산 및(또는) 생산 효율을 개선할 수 있다. 원하는 화합물은 생합성 경로의 최종 산물 및 자연 발생 대사 경로의 중간체 및 또한 씨. 글루타미쿰 대사에서 자연 발생되지 않지만 본 발명의 씨. 글루타미쿰 계통에 의해 생산되는 분자를 포함하는 씨. 글루타미쿰에 의해 생산된 임의의 산물일 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 실시예에 의해 예시되나, 이에 한정되는 것으로 해석해서는 안된다. 본원에 인용된 모든 참고 문헌, 특허 출원, 특허, 공개된 특허 출원의 모든 내용은 참고로 본원에 인용된다.
실시예 1: 코리네박테리움 글루타미쿰 ATCC13032의 전체 게놈 DNA의 제조
BHI 배지 (디프코 (Difco) 제품) 중의 코리네박테리움 글루타미쿰 (ATCC 13032) 배양물을 30℃에서 격렬히 진탕시키면서 밤새 배양하였다. 원심분리하여 세포를 회수하여 상층액은 버리고, 세포를 완충액-I 5 mL (배양물 처음 부피의 5%에 해당함-언급한 모든 부피는 배양 부피 100 mL에 대해 계산한 값임) 중에 재현탁했다. 완충액-I의 조성은 다음과 같았다: 140.34 g/L 수크로스, 2.46 g/L MgS04 ×7 H2O, 10 mL/L KH2PO4 용액 (100 g/L, KOH를 사용하여 pH 6.7로 조정함), 50 mL/L M12 농축물 (10 g/L (NH4)2SO4, 1 g/L NaCl, 2 g/L MgSO4 ×7 H2O, 0.2 g/L CaCl2, 0.5 g/L 효모 추출물 (디프코 제품), 10 mL/L 미량 원소 혼합물 (200 mg/L FeSO4 ×H2O, 10 mg/L ZnSO4 ×7 H2O, 3 mg/L MnCl2 ×4 H2O, 30 mg/L H3BO3, 20 mg/L CoCl2 ×6 H2O, 1 mg/L NiCl2 ×6 H2O, 3 mg/L Na2MoO4 ×2 H2O), 500 mg/L 착화제 (EDTA 또는 시트르산), 100 mL/L 비타민 혼합물 (0.2 mg/L 바이오틴, 0.2 mg/L 엽산, 20 mg/L p-아미노 벤조산, 20 mg/L 리보플라빈, 40 mg/L Ca 판토테네이트, 140 mg/L 니코틴산, 40 mg/L 피리독살 히드로클로라이드, 200 mg/L 미오이노시톨). 상기 현탁액에 리소짐을 최종 농도 2.5 mg/mL로 첨가했다. 37℃에서 대략 4시간 동안 인큐베이션시킨 후, 세포벽을 파괴하고 원심분리하여 원형질체를 수거했다. 펠렛을 완충액-I 5 mL로 1회 세척하고, TE 완충액 (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8) 5 mL로 1회 세척했다. 펠렛을 TE 완충액 4 mL 중에 재현탁하고, SDS 용액 (10%) 0.5 mL 및 NaCl 용액 (5 M) 0.5 mL을 첨가했다. 프로테이나제 K를 최종 농도 200 ㎍/mL로 첨가한 후, 상기 현탁액을 37℃에서 대략 18시간 동안 인큐베이션시켰다. 표준 방법에 따라 DNA를 페놀, 페놀/클로로포름/이소아밀 알콜 및 클로로포름/이소아밀 알콜로 추출하여 정제했다. 이어서, 1/50배 부피의 3 M 아세트산나트륨 및 2배 부피의 에탄올을 첨가하여 DNA를 침전시킨 후, -20℃에서 30분 동안 인큐베이션시키고, SS34 회전자 (소르발 (Sorvall) 제품)를 사용한 고속 원심분리기에서 12,000 rpm로 30분 동안 원심분리했다. DNA를 20 ㎍/mL RNaseA를 함유하는 TE 완충액 1 mL 중에 용해시키고, 4℃에서 3시간 이상 동안 TE 완충액 1000 mL 중에 투석했다. 투석 동안, 상기 완충액을 3회 교환하였다. 투석된 DNA 용액을 0.4 mL씩 분취하여, 2 M LiCl 0.4 mL 및 에탄올 0.8 mL을 첨가했다. -20℃에서 30분 동안 인큐베이션시킨 후, 원심분리 (13,000 rpm, 독일 하나우 헤래우스에 소재하는 바이오퓨지 프레스코 (Biofuge Fresco) 제품)하여 DNA를 수집했다. DNA 펠렛을 TE 완충액 중에 용해했다. 이 방법으로 제조된 DNA를 서던 블롯팅 또는 게놈 뱅크 제작 등의 모든 목적에 이용했다.
실시예 2: 대장균에서 코리네박테리움 글루타미쿰 (ATCC13032)의 게놈 뱅크 제작
실시예 1에 기재한 바와 같이 제조된 DNA를 사용하여, 공지되고 확립되어 있는 방법 (예를 들어 문헌 [Sambrook, J. et al. (1989) "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", Cold Spring Harbor Laboratory Press] 또는 문헌 [Ausubel, F.M. et al. (1994) "Current Protocols in Molecular Biology", John Wiley & Sons] 참조)에 따라 코스미드 및 플라스미드 뱅크를 제작했다.
임의의 플라스미드 또는 코스미드를 사용할 수 있었다. 특히, 플라스미드 pBR322 [Sutcliffe, J.G. (1979) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 75:3737-3741]; pACYC177 [Change & Cohen (1978) J. Bacteriol 134:1141-1156], pBS 계열의 플라스미드 (pBSSK+, pBSSK- 등; 미국 라졸라에 소재하는 스트라타진 (Stratagene) 제품) 또는 SuperCos I (미국 라졸라에 소재하는 스트라타진 제품) 또는 Lorist6 [Gibson, T.J., Rosenthal A. and Waterson, R.H. (1987) Gene 53:283-286] 등의 코스미드를 사용하는 것이 바람직했다.
실시예 3: DNA 서열분석 및 컴퓨터를 이용한 기능 분석
실시예 2에 기재한 바와 같은 게놈 뱅크를 사용하여, 표준 방법, 특히 ABI377 서열 분석기를 사용한 쇄 종결 방법 (예를 들어 문헌 [Fleischman, R.D. et al. (1995) "Whole-genome Random Sequencing and Assembly of Haemophilus Influenzae Rd.", Science, 269:496-512])에 따른 DNA 서열분석을 수행했다. 하기 뉴클레오티드 서열을 갖는 서열분석 프라이머를 사용했다: 5'-GGAAACAGTATGACCATG-3' 또는 5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3'.
실시예 4: 생체내 돌연변이유발
코리네박테리움 글루타미쿰의 생체내 돌연변이유발은 유전 정보의 통합성을 유지할 수 없는 대장균 또는 다른 미생물 (예를 들면, 바실러스 종 또는 사카로마이세스 세레비지애 등의 효모)에 플라스미드 (또는 다른 벡터) DNA를 계대배양하여 수행할 수 있다. 전형적인 돌연변이유발 균주는 DNA 복구 시스템에 관한 유전자 (예를 들면, mutHLS, mutD, mutT 등; 비교하기 위해서는 문헌 [Rupp, W.D. (1996) DNA repair mechanisms, in Escherichia coli and Salmonella, pp. 2277-2294, ASM: Washington] 참조)에 돌연변이가 있다. 이러한 균주들은 당업자에게 공지되어 있다. 이러한 균주의 사용법은 예를 들어 문헌 [Greener, A. and Callahan, M. (1994) Strategies 7:32-34]에 예시되어 있다.
실시예 5: 대장균과 코리네박테리움 글루타미쿰 사이의 DNA 전달
여러 코리네박테리움 및 브레비박테리움 종은 자율적으로 복제되는 내인성 플라스미드 (예를 들면, pHM1519 또는 pBL1 등)를 함유하고 있다 (이에 관해 검토하기 위해서는 예를 들어 문헌 [Martin, J.F. et al. (1987) Biotechnology, 5:137-146] 참조). 대장균 및 코리네박테리움 글루타미쿰에 사용하기 위한 셔틀 벡터는 대장균의 경우에 사용하는 표준 벡터 (문헌 [Sambrook, J. et al. (1989), "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", Cold Spring Harbor Laboratory Press] 또는 문헌 [Ausubel, F.M. et al. (1994) "Current Protocols in Molecular Biology", John Wiley & Sons])에 코리네박테리움 글루타미쿰의 복제 기점 및 적당한 마커를 부가하여 사용함으로써 쉽게 제작될 수 있다. 이러한 복제 기점은 코리네박테리움 및 브레비박테리움 종에서 단리한 내인성 플라스미드로부터 얻는 것이 바람직하다. 이들 종에 특히 유용한 형질전환 마커는 카나마이신 내성 유전자 (예를 들면, Tn5 또는 Tn903 트란스포손에서 유래함) 또는 클로람페니콜 내성 유전자 [Winnacker, E.L. (1987) "From Genes to Clones-Introduction to Gene Technology", VCH, Weinheim]이다. 대장균 및 코리네박테리움 글루타미쿰에서 복제되고 유전자 과다발현을 비롯한 각종 목적에 사용할 수 있는 매우 다양한 셔틀 벡터의 제조법에 관한 문헌들이 많이 있다 (예를 들어 [Yoshihama, M. et al. (1985) J. Bacteriol. 162:591-597], [Martin J.F. et al. (1987) Biotechnology, 5:137-146] 및 [Eikmanns, B.J. et al. (1991) Gene, 102:93-98] 참조).
표준 방법을 이용하여, 관심 유전자를 상기 기재한 셔틀 벡터들 중 하나에 클로닝하고 이러한 하이브리드 벡터를 코리네박테리움 글루타미쿰 균주에 도입할 수 있다. 코리네박테리움 글루타미쿰은 원형질체 형질전환법 [Kastsumata, R. et al. (1984) J. Bacteriol. 159:306-311], 전기천공법 [Liebl, E. et al. (1989) FEMS Microbiol. Letters, 53:399-303]을 이용하고 특정 벡터가 사용되는 경우에는 접합법 (예를 들어 문헌 [Schaefer, A et al. (1990) J. Bacteriol. 172:1663-1666]에 기재된 바와 같음)도 이용하여 형질전환시킬 수 있다. 또한, 코리네박테리움 글루타미쿰으로부터 플라스미드 DNA를 제조 (당업계에 공지된 표준 방법을 사용함)하고, 이것으로 대장균을 형질전환시켜 코리네박테리움 글루타미쿰의 셔틀 벡터를 대장균에 전달할 수도 있다. 이러한 형질전환 단계는 표준 방법으로 수행할 수 있지만, NM522 [Gough & Murray (1983) J. Mol. Biol. 166:1-19] 등과 같은 Mcr-결핍 대장균 균주를 사용하는 것이 유리하다.
실시예 6: 돌연변이된 단백질의 발현 측정
형질전환된 숙주 세포에서 돌연변이된 단백질의 활성 관찰은 상기 돌연변이 단백질이 야생형 단백질과 유사한 방식 및 유사한 양으로 발현된다는 사실을 바탕으로 한다. 돌연변이된 유전자의 전사량 (유전자 생성물의 번역에 이용가능한 mRNA 양에 관한 지표) 측정에 적합한 방법은 관심 유전자에 결합하도록 고안되어 검출가능한 표지 (통상적으로 방사성 표지 또는 화학발광 표지)가 부착된 프라이머를 사용하여 노던 블롯팅 (예를 들어 문헌 [Ausubel et al. (1988) Current Protocols in Molecular Biology, Wiley: New York] 참조)을 수행하는 것인데, 이는 유기체 배양물의 전체 RNA를 추출하고 겔상에서 분리하여 안정한 매트릭스에 옮긴 후에 상기 프로브와 인큐베이션시켜, 프로브의 결합 및 그 결합 활성이 상기 유전자에 대한 mRNA의 존재 여부 및 또한 그 존재량을 지시하는 방법이다. 이러한 정보는 돌연변이된 유전자의 전사 정도에 관한 지표가 된다. 예를 들어 문헌 [Bormann, E.R. et al. (1992) Mol. Microbiol. 6:317-326]에 기재된 것과 같이 당업계에 공지된 각종 방법들을 이용하여 코리네박테리움 글루타미쿰의 세포내 전체 RNA를 단리할 수 있다.
상기 mRNA로부터 번역된 단백질의 존재 여부 또는 그 상대량은 웨스턴 블롯팅과 같은 표준 기술을 사용하여 측정할 수 있다 (예를 들어 문헌 [Ausubel et al. (1988) Current Protocols in Molecular Biology, Wiley: New York] 참조). 이 방법에서는, 세포내 전체 단백질을 추출하여 겔 전기영동법으로 분리한 후에 이를 니트로셀룰로스 등과 같은 매트릭스에 옮겨서 관심 단백질에 특이적으로 결합하는 항체 등과 같은 프로브와 함께 인큐베이션시킨다. 통상적으로, 이 프로브에는 쉽게 검출될 수 있는 화학발광 표지 또는 비색 표지가 부착되어 있다. 표지의 존재 여부 및 그의 관찰된 양은 그 세포 내에서 원하는 돌연변이 단백질의 존재 여부 및 그 존재량을 지시한다.
실시예 7: 유전자 변형된 코리네박테리움 글루타미쿰의 성장 - 배지 및 배양 조건
유전자 변형된 코리네박테리움을 합성 또는 천연 성장 배지에서 배양한다. 코리네박테리움을 위한 여러 다양한 성장 배지는 당업계에 공지되어 있으며 쉽게 입수가능하다 (문헌 [Lieb et al. (1989) Appl. Microbiol. Biotechnol. 32:205-210], [von der Osten et al. (1998) Biotechnology Letters, 11:11-16], 독일 특허 제4,120,867호, [Liebl (1992) "The Genus Corynebacterium", in: The Procaryotes, Volume II, Balows, A. et al., Editors. Springer-Verlag]). 이들 배지는 1종 이상의 탄소 공급원, 질소 공급원, 무기염, 비타민 및 미량 원소로 구성된다. 바람직한 탄소 공급원은 단당류, 이당류 또는 다당류 등의 당이다. 매우 훌륭한 탄소 공급원의 예로는 글루코스, 프럭토스, 만노스, 갈락토스, 리보스, 소르보스, 리불로스, 락토스, 말토스, 수크로스, 라피노스, 녹말 및 셀룰로스 등이 있다. 또한, 당 정제시 생성되는 당밀 또는 기타 부산물 등과 같은 복합 화합물 등으로서 배지에 당을 공급할 수도 있다. 또한, 각종 탄소 공급원들의 혼합물을 첨가하는 것이 유리할 수도 있다. 다른 가능한 탄소 공급원은 메탄올, 에탄올, 아세트산 또는 락트산 등의 알콜 및 유기산이다. 질소 공급원은 통상적으로 유기 또는 무기 질소 화합물이거나 이러한 화합물을 함유하는 물질이다. 질소 공급원의 예로는 암모니아 기체 및 NH4Cl 또는 (NH4)2SO4, NH40H 등의 암모늄염, 질산염, 우레아, 아미노산 또는 옥수수 침지액, 대두 가루, 대두 단백질, 효모 추출물, 육류 추출물 등과 같은 복합 질소 공급원 등이 있다.
배지에 함유시킬 수 있는 무기 염 화합물로는 칼슘, 마그네슘, 나트륨, 코발트, 몰리브덴, 칼륨, 망간, 아연, 구리 및 철의 염산염, 인산염 또는 황산염 등이 있다. 킬레이팅제를 배지에 첨가하여 금속 이온을 용액 중에 유지할 수 있다. 특히 적합한 킬레이팅제로는 카테콜 또는 프로토카테쿠에이트 등과 같은 디히드록시페놀 또는 시트르산 등의 유기산 등이 있다. 또한, 배지에는 통상적으로 비타민 또는 성장 촉진제 등의 다른 성장 인자가 함유되어 있고, 이들의 예로는 바이오틴, 리보플라빈, 티아민, 엽산, 니코틴산, 판토테네이트 및 피리독신 등이 있다. 성장 인자 및 염은 흔히 효모 추출물, 당밀, 옥수수 침유 등과 같은 복합 배지 성분으로부터 생성된다. 배지의 정확한 조성은 특정 실험마다 크게 달라지고, 각 경우마다 따로 결정된다. 배지의 최적화에 관한 정보는 문헌 ["Applied Microbiol. Physiology, A Practical Approach (editors P.M. Rhodes, P.F. Stanbury, IRL Press (1997) pp.53-73, ISBN 0 19 963577 3)]에서 찾을 수 있다. 또한, 스탠다드 1 (Standard 1) (머크 (Merck) 제품) 또는 BHI (Brain Heart Infusion, 디프코 제품) 등과 같이 제조 회사가 시판하는 것을 구입할 수도 있다.
모든 배지 성분들을 열처리 (1.5 bar 및 121℃에서 20분) 또는 멸균 여과로 멸균시킨다. 이 성분들은 한꺼번에 멸균시킬 수도 있고 필요에 따라서는 따로 멸균시킬 수도 있다. 모든 배지 성분들은 배양 초기부터 함유시킬 수도 있고, 원한다면 연속적으로 또는 배치식으로 첨가할 수도 있다.
배양 조건은 각 실험마다 따로 정의된다. 온도는 15℃와 45℃ 사이의 범위이어야 하고, 실험하는 동안 일정하게 유지시키거나 변경시킬 수 있다. 배지의 pH는 5 내지 8.5의 범위, 바람직하게는 약 7.0 정도이어야 하며, 배지에 완충액을 첨가하여 유지시킬 수 있다. 이러한 목적으로 사용할 수 있는 완충액의 예로는 인산칼륨 완충액 등이 있다. MOPS, HEPES, ACES 등과 같은 합성 완충액을 대안적으로 사용하거나 동시에 사용할 수 있다. 또한, 배양하는 동안 NaOH 또는 NH4OH를 첨가하여 pH를 일정하게 유지시킬 수도 있다. 효모 추출물 등의 복합 배지 성분이 사용되는 경우, 많은 복합 화합물들은 완충 성능이 높기 때문에 추가 완충액에 대한 요구를 감소시킬 수 있다. 미생물 배양에 발효기를 사용하는 경우, pH는 암모니아 기체를 사용하여 조절할 수도 있다.
인큐베이션 기간은 통상적으로 수 시간 내지 수 일이다. 이 시간은 브로쓰에 축적되는 생성물의 양이 최대가 되도록 선택한다. 개시한 성장 실험을 다양한 크기의 미량역가 플레이트, 유리관, 유리 플라스크 또는 유리 또는 금속 발효기 등의 각종 용기에서 수행할 수 있다. 다수의 클론을 스크리닝하기 위해서는, 미생물을 배플이 있거나 없는 미량역가 플레이트, 유리관 또는 진탕 플라스크에서 배양해야 한다. 요구되는 성장 배지를 100 mL 진탕 플라스크에 10% (부피 기준) 채워 사용하는 것이 바람직하다. 이 플라스크들은 100 내지 300 rpm 속력 범위의 회전 진탕기 상에서 진탕 (진폭 25 mm)되어야 한다. 대기를 습하게 유지함으로써 증발로 인한 손실량을 감소시키거나, 별법으로는 증발로 인한 손실량을 정확하게 보정해야 한다.
유전자 변형된 클론을 연구하는 경우, 변형되지 않은 대조 클론 또는 인서트가 없는 원래의 플라스미드를 함유하는 대조 클론도 분석해야 한다. CM 플레이트 (10 g/L 글루코스, 2.5 g/L NaCl, 2 g/L 우레아, 10 g/L 폴리펩톤, 5 g/L 효모 추출물, 5 g/L 육류 추출물, 22 g/L 아가, 2 M NaOH을 사용하여 pH 6.8로 조정) 등과 같은 아가 플레이트 상에서 30℃에서 인큐베이션하여 성장시킨 세포를 OD600이 0.5 내지 1.5가 되도록 배지에 접종한다. 배지 접종은 CM 플레이트로부터의 코리네박테리움 글루타미쿰 세포의 염수 용액을 도입하거나, 상기 박테리아의 예비배양액을 첨가하여 수행한다.
실시예 8: 돌연변이된 단백질의 기능에 관한 시험관내 분석
효소의 활성 및 반응 속도 (kinetics) 측정법은 당업계에 공지되어 있다. 특정하게 변형된 효소의 활성 측정 실험은 야생형 효소의 비활성에 맞추어야 하며, 당업자라면 이를 잘 수행할 수 있다. 효소에 관한 일반적인 개요 뿐만 아니라 효소의 구조, 반응 속도, 원리, 방법, 적용에 관한 구체적인 세부사항 및 많은 효소들의 활성 측정 방법의 예는 예를 들어 하기의 참고문헌에서 찾을 수 있다: [Dixon, M., and Webb, E.C.: (1979) Enzymes. Longmans: London; Fersht (1985) Enzyme Structure and Mechanism. Freeman, New York], [Walsh (1979) Enzymatic Reaction Mechanisms. Freeman: San Francisco], [Price, N.C., Stevens, L. (1982) Fundamentals of Enzymology. Oxford Univ. Press: Oxford], [Boyer, P.D., editors (1983) The Enzymes, 3rd edition. Academic Press: New York], [Bisswanger, H., (1994) Enzymkinetik, 2nd edition. VCH: Weinheim (ISBN 3527300325)], [Bergmeyer, H.U., Bergmeyer, J., Grassl, M., editors (1983-1986) Methods of Enzymatic Analysis, 3rd edition, Vol. I-XII, Verlag Chemie: Weinheim] 및 [Ullmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry (1987) Vol. A9, "Enzymes". VCH: Weinheim, pp. 352-363].
DNA에 결합하는 단백질의 활성은 DNA 밴드쉬프트 분석법 (겔 지연 분석법이라고 지칭하기도 함) 등과 같이 잘 확립되어 있는 여러 방법들을 사용하여 측정할 수 있다. 상기 단백질들이 다른 분자들의 발현에 미치는 영향은 리포터 유전자 분석법 (예를 들어 문헌 [Kolmar, H. et al. (1995) EMBO J. 14:3895-3904]과 그의 참고문헌에 기재된 바와 같음)을 사용하여 측정할 수 있다. β-갈락토시다제 등의 효소, 녹색 형광 단백질 및 여러가지 기타 효소가 사용되는 리포터 유전자 시험 시스템은 원핵 세포 및 진핵 세포 모두에의 적용에 대해 공지되어 있으며 잘 확립되어 있다.
막 수송 단백질의 활성은 문헌 [Gennis, R.B. (1989) "Pores, Channels and Transporters", in Biomembranes, Molecular Structure and Function, Springer: Heidelberg, pp. 85-137, 199-234 및 270-322]에 기재된 기술에 따라 측정할 수 있다.
실시예 9: 돌연변이된 단백질이 관심 생성물의 생산에 미치는 영향의 분석
코리네박테리움 글루타미쿰에서의 유전자 변형이 관심 화합물 (예컨대 아미노산)의 생산에 미치는 영향은 변형된 미생물을 적합한 조건 (예를 들어 상기 기재한 조건)하에서 성장시키고, 관심 생성물 (즉, 아미노산)의 생산 증가에 관여한 배지 성분 및(또는) 세포내 성분을 시험하여 결정할 수 있다. 이러한 분석 기술은 당업자에게 익히 공지되어 있으며, 분광분석법, 박층 크로마토그래피법, 각종 유형의 착색법, 효소적 및 미생물학적 방법 및 고성능 액체 크로마토그래피법 등과 같은 분석용 크로마토그래피법 등이 있다 (예를 들어 문헌 ([Ullman, Encyclopedia of Industrial Chemistry, Vol. A2, pp. 89-90 및 pp. 443-613, VCH: Weinheim (1985)], [Fallon, A. et al., (1987) "Applications of HPLC in Biochemistry" in: Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology, Vol. 17], [Rehm et al. (1993) Biotechnology, Vol. 3, Chapter III: "Product recovery and purification", pp. 469-714, VCH: Weinheim], [Belter, P.A. et al. (1988) Bioseparations: downstream processing for biotechnology, John Wiley and Sons], [Kennedy, J.F. and Cabral, J.M.S. (1992) Recovery processes for biological materials, John Wiley and Sons], [Shaeiwitz, J.A. and Henry, J.D. (1988) Biochemical separations, in Ulmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry, Vol. B3, Chapter 11, pp. 1-27, VCH: Weinheim] 및 [Dechow, F.J. (1989) Separation and purification techniques in biotechnology, Noyes Publications]) 참조).
최종 발효 생성물의 측정 뿐만 아니라, 중간체 및 부산물 등과 같이 관심 화합물의 생산에 이용된 대사 경로 중의 다른 성분들을 분석함으로써 전반적인 화합물 생산 효율을 측정할 수도 있다. 분석 방법으로는 배지 내의 영양분 (예컨대 당, 탄화수소, 질소 공급원, 인산염 및 기타 이온) 함량 측정, 바이오매스의 조성 및 성장 측정, 생합성 경로의 공통 대사물질의 생산 분석 및 발효 동안에 생성된 기체의 측정 등이 있다. 이러한 측정을 위한 표준 방법은 문헌 [Applied Microbial Physiology, A Practical Approach, P.M.Rhodes and P.F.Stanbury, eds., IRL Press, pp. 103-129, 131-163 및 165-192 (ISBN:0199635773)과 그의 참고문헌]에 기재되어 있다.
실시예 10: 코리네박테리움 글루타미쿰 배양물로부터의 관심 생성물의 정제
당업계에 공지된 여러가지 방법을 사용하여, 코리네박테리움 글루타미쿰 세포 또는 상기 기재한 배양물의 상층액으로부터 관심 생성물을 수득할 수 있다. 세포가 관심 생성물을 분비하지 않는 경우에는 배양물을 저속 원심분리하여 세포를 수거하고 기계적인 힘이나 초음파 등과 같은 표준 기술로 세포를 용균시킬 수 있다. 원심분리로 세포 잔해를 제거하여 가용성 단백질을 함유하는 상층액 분획물을 수득하고, 이를 사용하여 관심 화합물을 추가로 정제한다. 코리네박테리움 글루타미쿰 세포가 생성물을 분비하는 경우에는 배양물을 저속 원심분리하여 세포를 제거하고, 수득한 상층액 분획물을 추가로 정제한다.
상기 두 가지 정제 방법 모두의 경우에서 수득한 상층액 분획물을 적합한 수지를 사용한 크로마토그래피에 적용하여 관심 분자는 크로마토그래피 수지 상에 남지만 샘플 중의 많은 오염물질들은 남지 않게 하거나, 오염물질들은 수지에 남지만 원하는 분자는 남지 않게 한다. 필요에 따라서는, 동일하거나 상이한 크로마토그래피 수지를 사용하여 이러한 크로마토그래피 단계를 반복할 수 있다. 당업자라면, 적합한 크로마토그래피 수지를 선택하고 정제할 특정 분자에 대해 가장 효과적으로 이를 적용하는 것에 숙달되어 있을 것이다. 정제된 생성물을 여과 또는 한외여과사켜 농축시키고, 생성물의 안정성이 최대가 되는 온도에 저장할 수 있다.
당업계에는 상기 기재한 정제법 및 예를 들어 문헌 [Bailey, J.E. & Ollis, D.F. Biochemical Engineering Fundamentals, McGraw-Hill: New York (1986)]에 기재된 정제법 등을 포함하나 이에 제한되지 않는 여러가지 정제법들이 공지되어 있다.
단리된 화합물의 확인 및 순도는 당업계의 기술로 측정할 수 있다. 이러한 기술로는 고성능 액체 크로마토그래피법 (HPLC), 분광분석법, 착색법, 박층 크로마토그래피법, NIRS법, 효소 분석법 또는 미생물학적 분석법 등이 있다. 이러한 분석 방법은 하기 문헌에서 고찰된다: [Patek et al. (1994) Appl. Environ. Microbiol. 60:133-140], [Malakhova et al. (1996) Biotekhnologiya 11:27-32], [Schmidt et al. (1998) Bioprocess Engineer. 19:67-70], [Ulmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry, (1996) Vol. A27, VCH: Weinheim, pp. 89-90, pp. 521-540, pp. 540-547, pp. 559-566, pp. 575-581 및 pp. 581-587], [Michal, G. (1999) Biochemical Pathways: An Atlas of Biochemistry and Molecular Biology, John Wiley and Sons] 및 [Fallon, A. et al. (1987) Applications of HPLC in Biochemistry in: Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology, Vol. 17].
등가물
당업자라면, 단순한 통상의 방법을 이용하여 본 발명의 특정 실시양태의 수많은 등가물을 알아내거나 확인할 수 있다. 이러한 등가물은 하기한 청구의 범위에 포함된다.
표 1의 정보는 다음과 같이 이해되어야 한다:
컬럼 1에서, "DNA 서열 번호"의 해당 번호는 첨부된 서열 목록에서의 서열 번호 각각을 지칭하는 것이다. 따라서, 컬럼 "DNA 서열 번호"의 "5"는 서열 5를 지칭한다.
컬럼 2에서, "아미노산 서열 번호"의 해당 번호는 첨부된 서열 목록에서의 서열 번호 각각을 지칭하는 것이다. 따라서, 컬럼 "아미노산 서열 번호"의 "6"은 서열 6을 지칭한다.
컬럼 3에서, "확인"은 각 서열에 대한 명확한 내부 명칭을 기재한 것이다.
컬럼 4에서, "아미노산 위치"의 해당 번호는 각 경우에서 동일 열에 있는 "아미노산 서열 번호"에 기재된 폴리펩티드 서열에서의 아미노산 위치를 지칭한다. 따라서, 컬럼 "아미노산 위치"의 "26"은 해당 폴리펩티드 서열의 아미노산 위치 26이다. 위치 번호는 N 말단을 +1로 하여 출발한다.
컬럼 5에서, "아미노산 야생형"의 해당 문자는 각 경우의 컬럼 4에 표시한 야생형 서열에서 해당 위치에 존재하는 아미노산을 지칭하며, 1문자 코드로 나타내었다.
컬럼 6에서, "아미노산 돌연변이체"의 해당 문자는 각 경우의 컬럼 4에 표시한 돌연변이체 서열에서 해당 위치에 존재하는 아미노산을 지칭하며, 1문자 코드로 나타내었다.
컬럼 7에서, "기능"은 해당 폴리펩티드 서열의 생리적 기능을 기재한 것이다.
단백질원성 아미노산의 1문자 코드는 다음과 같다:
A 알라닌
C 시스테인
D 아스파르트산
E 글루탐산
F 페닐알라닌
G 글리신
H 히스티딘
I 이소루이신
K 리신
L 루이신
M 메티오닌
N 아스파라긴
P 프롤린
Q 글루타민
R 아르기닌
S 세린
T 트레오닌
V 발린
W 트립토판
Y 티로신
SEQUENCE LISTING
<110> BASF Aktiengesellschaft
<120> Genes coding for DNA replication and pathogenesis proteins
<130> O.Z. 0050/52977
<160> 96
<210> 1
<211> 2326
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(2296)
<223> RXA00050
<400> 1
agcaatgtcc cattttccct gctcacctgt atgggcaccc gcggcggaag tggaattgca 60
tatggagttt tgatgatatt tagcgtaact taaaggaaca atg agt aat acc gag 115
Met Ser Asn Thr Glu
1 5
aac gtc aac ggc gac gta gaa cag ccg aat aac gtc att tcg tcg gaa 163
Asn Val Asn Gly Asp Val Glu Gln Pro Asn Asn Val Ile Ser Ser Glu
10 15 20
tct cag gaa acc ccg cag ggt gac tca gca tca gct gac ttc gct ctc 211
Ser Gln Glu Thr Pro Gln Gly Asp Ser Ala Ser Ala Asp Phe Ala Leu
25 30 35
gaa acc cca acc aac act gtt gaa gat gca cca gca tct gag ggt agc 259
Glu Thr Pro Thr Asn Thr Val Glu Asp Ala Pro Ala Ser Glu Gly Ser
40 45 50
gaa gag atc acc agg gtt gcg gat act tct gag gac gcc gac tct gca 307
Glu Glu Ile Thr Arg Val Ala Asp Thr Ser Glu Asp Ala Asp Ser Ala
55 60 65
gat gca gac aac gcg agc aat gta atc aat gag aat gag gac tcc tcg 355
Asp Ala Asp Asn Ala Ser Asn Val Ile Asn Glu Asn Glu Asp Ser Ser
70 75 80 85
gaa ggt gct aac cag cct tca aac gag tca tcc tct acg gaa gcc aaa 403
Glu Gly Ala Asn Gln Pro Ser Asn Glu Ser Ser Ser Thr Glu Ala Lys
90 95 100
tcc ggc ttc gat gca ctc gga ctg cca gag cgt gtt ctt gac gct gtg 451
Ser Gly Phe Asp Ala Leu Gly Leu Pro Glu Arg Val Leu Asp Ala Val
105 110 115
cgc aag gtg ggt tac gaa act cct tcc cca att cag gca caa acc atc 499
Arg Lys Val Gly Tyr Glu Thr Pro Ser Pro Ile Gln Ala Gln Thr Ile
120 125 130
cca atc ctc atg gag ggc cag gat gtt gtt ggt cta gca cag acc ggt 547
Pro Ile Leu Met Glu Gly Gln Asp Val Val Gly Leu Ala Gln Thr Gly
135 140 145
acc ggt aag act gca gct ttc gcg ctg cca atc ctt gcc cgt att gac 595
Thr Gly Lys Thr Ala Ala Phe Ala Leu Pro Ile Leu Ala Arg Ile Asp
150 155 160 165
aag tcc gtg cgc agc cca cag gca ctt gtg ctt gcc cct acc cgt gag 643
Lys Ser Val Arg Ser Pro Gln Ala Leu Val Leu Ala Pro Thr Arg Glu
170 175 180
ctg gca ctt cag gtt gct gac tcc ttc caa tcc ttc gct gac cac gtc 691
Leu Ala Leu Gln Val Ala Asp Ser Phe Gln Ser Phe Ala Asp His Val
185 190 195
ggt ggc ctg aac gtt ctg cca atc tat ggt gga cag gct tac ggc att 739
Gly Gly Leu Asn Val Leu Pro Ile Tyr Gly Gly Gln Ala Tyr Gly Ile
200 205 210
cag ctc tct ggc ctg cgt cgt ggc gct cac atc gtc gtg ggt acc cca 787
Gln Leu Ser Gly Leu Arg Arg Gly Ala His Ile Val Val Gly Thr Pro
215 220 225
ggc cga atc atc gat cac ctc gaa aag ggc tcc ctg gat atc tcc gga 835
Gly Arg Ile Ile Asp His Leu Glu Lys Gly Ser Leu Asp Ile Ser Gly
230 235 240 245
ctg cgc ttc ctc gtg ctc gat gaa gca gac gag atg ctg aac atg ggc 883
Leu Arg Phe Leu Val Leu Asp Glu Ala Asp Glu Met Leu Asn Met Gly
250 255 260
ttc cag gaa gat gtc gag cgc atc ctc gag gac acc cca gac gag aag 931
Phe Gln Glu Asp Val Glu Arg Ile Leu Glu Asp Thr Pro Asp Glu Lys
265 270 275
cag gtt gca cta ttc tcc gca acg atg cca aac ggc att cgt cgc ctg 979
Gln Val Ala Leu Phe Ser Ala Thr Met Pro Asn Gly Ile Arg Arg Leu
280 285 290
tcc aag cag tac ctg aac aac cct gct gaa atc acc gtt aag tcc gag 1027
Ser Lys Gln Tyr Leu Asn Asn Pro Ala Glu Ile Thr Val Lys Ser Glu
295 300 305
acc agg act aac acc aac atc acc cag cgc ttc ctc aac gtt gca cac 1075
Thr Arg Thr Asn Thr Asn Ile Thr Gln Arg Phe Leu Asn Val Ala His
310 315 320 325
cgc aac aag atg gat gca ctg acc cgt att ctc gag gtc acc gag ttt 1123
Arg Asn Lys Met Asp Ala Leu Thr Arg Ile Leu Glu Val Thr Glu Phe
330 335 340
gaa gca atg atc atg ttc gtg cgc acc aag cac gaa act gaa gaa gtt 1171
Glu Ala Met Ile Met Phe Val Arg Thr Lys His Glu Thr Glu Glu Val
345 350 355
gct gaa aag ctc cgt gca cgc gga ttc tcc gca gca gcc atc aac ggc 1219
Ala Glu Lys Leu Arg Ala Arg Gly Phe Ser Ala Ala Ala Ile Asn Gly
360 365 370
gac att gct cag gca cag cgt gag cgc acc gtc gac cag ctg aag gac 1267
Asp Ile Ala Gln Ala Gln Arg Glu Arg Thr Val Asp Gln Leu Lys Asp
375 380 385
ggc cgc ctg gac atc ctc gtt gca acc gac gtt gca gcc cgt ggt ctt 1315
Gly Arg Leu Asp Ile Leu Val Ala Thr Asp Val Ala Ala Arg Gly Leu
390 395 400 405
gac gtt gag cgc atc tcc cac gtg ctt aac ttc gac att cca aac gac 1363
Asp Val Glu Arg Ile Ser His Val Leu Asn Phe Asp Ile Pro Asn Asp
410 415 420
acc gag tcc tac gtt cac cgc atc ggc cgc acc ggc cgt gca gga cgt 1411
Thr Glu Ser Tyr Val His Arg Ile Gly Arg Thr Gly Arg Ala Gly Arg
425 430 435
acc ggc gag gca atc ctg ttc gtg acc cca cgt gag cgt cgt atg ctt 1459
Thr Gly Glu Ala Ile Leu Phe Val Thr Pro Arg Glu Arg Arg Met Leu
440 445 450
cgc tcc atc gag cgc gca acc aac gca cca ctg cac gaa atg gaa ctg 1507
Arg Ser Ile Glu Arg Ala Thr Asn Ala Pro Leu His Glu Met Glu Leu
455 460 465
cca acc gtc gat cag gtc aac gac ttc cgc aag gtc aag ttc gct gac 1555
Pro Thr Val Asp Gln Val Asn Asp Phe Arg Lys Val Lys Phe Ala Asp
470 475 480 485
tcc atc acc aag tcc ctc gag gac aag cag atg gac ctg ttc cgc acc 1603
Ser Ile Thr Lys Ser Leu Glu Asp Lys Gln Met Asp Leu Phe Arg Thr
490 495 500
ctg gtc aag gaa tac tcc cag gcc aac gac gtt cct cta gag gac atc 1651
Leu Val Lys Glu Tyr Ser Gln Ala Asn Asp Val Pro Leu Glu Asp Ile
505 510 515
gca gcg gca ctg gca acc cag gca cag tcc ggc gac ttc ctg ctc aag 1699
Ala Ala Ala Leu Ala Thr Gln Ala Gln Ser Gly Asp Phe Leu Leu Lys
520 525 530
gag ctc cca cca gag cgc cgt gag cgc aac gac cgc cgt cgt gac cgt 1747
Glu Leu Pro Pro Glu Arg Arg Glu Arg Asn Asp Arg Arg Arg Asp Arg
535 540 545
gac ttc gac gac cgt ggt gga cgt gga cgc gac cgt gac cgt ggc gac 1795
Asp Phe Asp Asp Arg Gly Gly Arg Gly Arg Asp Arg Asp Arg Gly Asp
550 555 560 565
cgc gga gat cgt ggc tca cgc ttc gac cgc gac gac gag aac ctg gca 1843
Arg Gly Asp Arg Gly Ser Arg Phe Asp Arg Asp Asp Glu Asn Leu Ala
570 575 580
acc tac cgc ctc gca gtg ggc aag cgc cag cac atc cgc cca ggc gca 1891
Thr Tyr Arg Leu Ala Val Gly Lys Arg Gln His Ile Arg Pro Gly Ala
585 590 595
atc gtt ggt gca ctt gcc aac gaa ggt ggc ctg aac tcc aag gac ttc 1939
Ile Val Gly Ala Leu Ala Asn Glu Gly Gly Leu Asn Ser Lys Asp Phe
600 605 610
ggc cgc atc acc atc gca gcc gac cac acc ctg gtt gaa ctg cca aag 1987
Gly Arg Ile Thr Ile Ala Ala Asp His Thr Leu Val Glu Leu Pro Lys
615 620 625
gat ctc cca cag agc gtt ctt gac aac ctg cgc gac acc cgc atc tcc 2035
Asp Leu Pro Gln Ser Val Leu Asp Asn Leu Arg Asp Thr Arg Ile Ser
630 635 640 645
ggc cag ctc atc aac ata gaa cgc gac tcc ggt gga cgc cca cca cgc 2083
Gly Gln Leu Ile Asn Ile Glu Arg Asp Ser Gly Gly Arg Pro Pro Arg
650 655 660
cgc ttc gag cgc gat gac cgt ggc gga cgc ggc gga ttc cgc ggc gac 2131
Arg Phe Glu Arg Asp Asp Arg Gly Gly Arg Gly Gly Phe Arg Gly Asp
665 670 675
cgt gat gac cgc ggt gga cgt gga cgt gac cgt gac gat cgt gga agc 2179
Arg Asp Asp Arg Gly Gly Arg Gly Arg Asp Arg Asp Asp Arg Gly Ser
680 685 690
cgt gga ggt ttc cgc ggt gga cgt gac cgt gat gat cgt ggc gga cgc 2227
Arg Gly Gly Phe Arg Gly Gly Arg Asp Arg Asp Asp Arg Gly Gly Arg
695 700 705
ggt gga ttc cgc gga cgc gac gac cgc gga gac cgt ggt ggc cgt ggc 2275
Gly Gly Phe Arg Gly Arg Asp Asp Arg Gly Asp Arg Gly Gly Arg Gly
710 715 720 725
ggt tac cgt ggc gga cgc gac taagagttcg ttttagcttc agctcaggtt 2326
Gly Tyr Arg Gly Gly Arg Asp
730
<210> 2
<211> 732
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 2
Met Ser Asn Thr Glu Asn Val Asn Gly Asp Val Glu Gln Pro Asn Asn
1 5 10 15
Val Ile Ser Ser Glu Ser Gln Glu Thr Pro Gln Gly Asp Ser Ala Ser
20 25 30
Ala Asp Phe Ala Leu Glu Thr Pro Thr Asn Thr Val Glu Asp Ala Pro
35 40 45
Ala Ser Glu Gly Ser Glu Glu Ile Thr Arg Val Ala Asp Thr Ser Glu
50 55 60
Asp Ala Asp Ser Ala Asp Ala Asp Asn Ala Ser Asn Val Ile Asn Glu
65 70 75 80
Asn Glu Asp Ser Ser Glu Gly Ala Asn Gln Pro Ser Asn Glu Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Glu Ala Lys Ser Gly Phe Asp Ala Leu Gly Leu Pro Glu Arg
100 105 110
Val Leu Asp Ala Val Arg Lys Val Gly Tyr Glu Thr Pro Ser Pro Ile
115 120 125
Gln Ala Gln Thr Ile Pro Ile Leu Met Glu Gly Gln Asp Val Val Gly
130 135 140
Leu Ala Gln Thr Gly Thr Gly Lys Thr Ala Ala Phe Ala Leu Pro Ile
145 150 155 160
Leu Ala Arg Ile Asp Lys Ser Val Arg Ser Pro Gln Ala Leu Val Leu
165 170 175
Ala Pro Thr Arg Glu Leu Ala Leu Gln Val Ala Asp Ser Phe Gln Ser
180 185 190
Phe Ala Asp His Val Gly Gly Leu Asn Val Leu Pro Ile Tyr Gly Gly
195 200 205
Gln Ala Tyr Gly Ile Gln Leu Ser Gly Leu Arg Arg Gly Ala His Ile
210 215 220
Val Val Gly Thr Pro Gly Arg Ile Ile Asp His Leu Glu Lys Gly Ser
225 230 235 240
Leu Asp Ile Ser Gly Leu Arg Phe Leu Val Leu Asp Glu Ala Asp Glu
245 250 255
Met Leu Asn Met Gly Phe Gln Glu Asp Val Glu Arg Ile Leu Glu Asp
260 265 270
Thr Pro Asp Glu Lys Gln Val Ala Leu Phe Ser Ala Thr Met Pro Asn
275 280 285
Gly Ile Arg Arg Leu Ser Lys Gln Tyr Leu Asn Asn Pro Ala Glu Ile
290 295 300
Thr Val Lys Ser Glu Thr Arg Thr Asn Thr Asn Ile Thr Gln Arg Phe
305 310 315 320
Leu Asn Val Ala His Arg Asn Lys Met Asp Ala Leu Thr Arg Ile Leu
325 330 335
Glu Val Thr Glu Phe Glu Ala Met Ile Met Phe Val Arg Thr Lys His
340 345 350
Glu Thr Glu Glu Val Ala Glu Lys Leu Arg Ala Arg Gly Phe Ser Ala
355 360 365
Ala Ala Ile Asn Gly Asp Ile Ala Gln Ala Gln Arg Glu Arg Thr Val
370 375 380
Asp Gln Leu Lys Asp Gly Arg Leu Asp Ile Leu Val Ala Thr Asp Val
385 390 395 400
Ala Ala Arg Gly Leu Asp Val Glu Arg Ile Ser His Val Leu Asn Phe
405 410 415
Asp Ile Pro Asn Asp Thr Glu Ser Tyr Val His Arg Ile Gly Arg Thr
420 425 430
Gly Arg Ala Gly Arg Thr Gly Glu Ala Ile Leu Phe Val Thr Pro Arg
435 440 445
Glu Arg Arg Met Leu Arg Ser Ile Glu Arg Ala Thr Asn Ala Pro Leu
450 455 460
His Glu Met Glu Leu Pro Thr Val Asp Gln Val Asn Asp Phe Arg Lys
465 470 475 480
Val Lys Phe Ala Asp Ser Ile Thr Lys Ser Leu Glu Asp Lys Gln Met
485 490 495
Asp Leu Phe Arg Thr Leu Val Lys Glu Tyr Ser Gln Ala Asn Asp Val
500 505 510
Pro Leu Glu Asp Ile Ala Ala Ala Leu Ala Thr Gln Ala Gln Ser Gly
515 520 525
Asp Phe Leu Leu Lys Glu Leu Pro Pro Glu Arg Arg Glu Arg Asn Asp
530 535 540
Arg Arg Arg Asp Arg Asp Phe Asp Asp Arg Gly Gly Arg Gly Arg Asp
545 550 555 560
Arg Asp Arg Gly Asp Arg Gly Asp Arg Gly Ser Arg Phe Asp Arg Asp
565 570 575
Asp Glu Asn Leu Ala Thr Tyr Arg Leu Ala Val Gly Lys Arg Gln His
580 585 590
Ile Arg Pro Gly Ala Ile Val Gly Ala Leu Ala Asn Glu Gly Gly Leu
595 600 605
Asn Ser Lys Asp Phe Gly Arg Ile Thr Ile Ala Ala Asp His Thr Leu
610 615 620
Val Glu Leu Pro Lys Asp Leu Pro Gln Ser Val Leu Asp Asn Leu Arg
625 630 635 640
Asp Thr Arg Ile Ser Gly Gln Leu Ile Asn Ile Glu Arg Asp Ser Gly
645 650 655
Gly Arg Pro Pro Arg Arg Phe Glu Arg Asp Asp Arg Gly Gly Arg Gly
660 665 670
Gly Phe Arg Gly Asp Arg Asp Asp Arg Gly Gly Arg Gly Arg Asp Arg
675 680 685
Asp Asp Arg Gly Ser Arg Gly Gly Phe Arg Gly Gly Arg Asp Arg Asp
690 695 700
Asp Arg Gly Gly Arg Gly Gly Phe Arg Gly Arg Asp Asp Arg Gly Asp
705 710 715 720
Arg Gly Gly Arg Gly Gly Tyr Arg Gly Gly Arg Asp
725 730
<210> 3
<211> 2845
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(2815)
<223> RXA00061
<400> 3
aatcaattgc agaactaacc cggttgtttc cgagccagtc tgaatgactg aaagcaatat 60
tagaccatca atgattagga atggaaatta ggggtctggt ttg ggt gaa tgt gtc 115
Leu Gly Glu Cys Val
1 5
gct aat ttt tcc act cgc cta cac tcg gga ggc gtg act gag aag act 163
Ala Asn Phe Ser Thr Arg Leu His Ser Gly Gly Val Thr Glu Lys Thr
10 15 20
gac cag acc tta atg ctt atc gac ggc cac tcg atg gct ttc cgc gca 211
Asp Gln Thr Leu Met Leu Ile Asp Gly His Ser Met Ala Phe Arg Ala
25 30 35
ttc ttt gct ttg ccg gct gag aat ttc tcc acg tcg ggc ggg cag gcc 259
Phe Phe Ala Leu Pro Ala Glu Asn Phe Ser Thr Ser Gly Gly Gln Ala
40 45 50
acc aat gct gtc tat ggc ttt ctc tcg atg ctg tcc acg ttg ttg aag 307
Thr Asn Ala Val Tyr Gly Phe Leu Ser Met Leu Ser Thr Leu Leu Lys
55 60 65
gat gag cag cct act cat gtg gcg gtg gct ttc gat gtg ggg cgt aag 355
Asp Glu Gln Pro Thr His Val Ala Val Ala Phe Asp Val Gly Arg Lys
70 75 80 85
acg ttc cgt acc gat atg ttc ccg gcg tat aag gcg cag cgt gaa gca 403
Thr Phe Arg Thr Asp Met Phe Pro Ala Tyr Lys Ala Gln Arg Glu Ala
90 95 100
acg cca cct gag ttt aag ggc cag gtg gaa atc ctc aag gag gtg ttg 451
Thr Pro Pro Glu Phe Lys Gly Gln Val Glu Ile Leu Lys Glu Val Leu
105 110 115
tcc act ttg gga att acg act att gag aaa atc gat ttt gag gct gat 499
Ser Thr Leu Gly Ile Thr Thr Ile Glu Lys Ile Asp Phe Glu Ala Asp
120 125 130
gat gtg atc gcc acg ttg tct gtg gcg gcg aaa cct tta ggc ttt aag 547
Asp Val Ile Ala Thr Leu Ser Val Ala Ala Lys Pro Leu Gly Phe Lys
135 140 145
acg ctg att gtt acg ggt gac cgt gat tcc ttc cag ttg gtc aat gac 595
Thr Leu Ile Val Thr Gly Asp Arg Asp Ser Phe Gln Leu Val Asn Asp
150 155 160 165
acc acc acg gtg ttg tat ccg atg aag ggc gtg tct gtg ctg cac cgt 643
Thr Thr Thr Val Leu Tyr Pro Met Lys Gly Val Ser Val Leu His Arg
170 175 180
ttc acg ccg gaa gca gtg gag gag aag tat gga ctg aca ccg agg cag 691
Phe Thr Pro Glu Ala Val Glu Glu Lys Tyr Gly Leu Thr Pro Arg Gln
185 190 195
tat ccg gag ttt gca gcg ctg cgt ggt gat cct tcc gat aac ttg cct 739
Tyr Pro Glu Phe Ala Ala Leu Arg Gly Asp Pro Ser Asp Asn Leu Pro
200 205 210
aat att cct ggc gtg ggc gag aag act gct acc aag tgg att gcc cag 787
Asn Ile Pro Gly Val Gly Glu Lys Thr Ala Thr Lys Trp Ile Ala Gln
215 220 225
tat gaa act ttg gat aat ttg ctt gat cac gct gat gag atc aag ggc 835
Tyr Glu Thr Leu Asp Asn Leu Leu Asp His Ala Asp Glu Ile Lys Gly
230 235 240 245
aag gtt ggc gcc agc ctg cgt gag cgc att gag cag gtc cgg atg aac 883
Lys Val Gly Ala Ser Leu Arg Glu Arg Ile Glu Gln Val Arg Met Asn
250 255 260
cgc aag ctc acg gag atg gtg aag gat ctg gag ctg ccg ctt ggt ccg 931
Arg Lys Leu Thr Glu Met Val Lys Asp Leu Glu Leu Pro Leu Gly Pro
265 270 275
gac gat ttt gag atg aag cct gtg cag gtt gcg gag gtt gcg gcg aag 979
Asp Asp Phe Glu Met Lys Pro Val Gln Val Ala Glu Val Ala Ala Lys
280 285 290
ttt gac gat ctg gag ttt ggt acc aat ttg cgt gag cgg gtg ctg gcg 1027
Phe Asp Asp Leu Glu Phe Gly Thr Asn Leu Arg Glu Arg Val Leu Ala
295 300 305
gtg gtg aag gcc gag ggt tcc gct gcc ccc gtg gag gaa gtg gaa gcg 1075
Val Val Lys Ala Glu Gly Ser Ala Ala Pro Val Glu Glu Val Glu Ala
310 315 320 325
gaa cag gtt gtc gtc gat acg caa tct ttg gcg caa tgg ctg cct gct 1123
Glu Gln Val Val Val Asp Thr Gln Ser Leu Ala Gln Trp Leu Pro Ala
330 335 340
agg gct ggc cag gcg ctt gct tta gcg ctg gct gga gtg gct aaa cct 1171
Arg Ala Gly Gln Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ala Gly Val Ala Lys Pro
345 350 355
gct gct ggc gac acg tat gcg cta gcg att gcg gat acc aag cgc cat 1219
Ala Ala Gly Asp Thr Tyr Ala Leu Ala Ile Ala Asp Thr Lys Arg His
360 365 370
gcg gtg ttg gtt gat gtg gct gat att tca gcg gag gat gaa aag gcg 1267
Ala Val Leu Val Asp Val Ala Asp Ile Ser Ala Glu Asp Glu Lys Ala
375 380 385
ctg gcc acg tgg ttg gcg tcg gaa gat cca aag atg ctg cac ggc gct 1315
Leu Ala Thr Trp Leu Ala Ser Glu Asp Pro Lys Met Leu His Gly Ala
390 395 400 405
aag gcc gcc tat cat atg ctc gct ggg cgc ggt ttt gag ctg cac ggc 1363
Lys Ala Ala Tyr His Met Leu Ala Gly Arg Gly Phe Glu Leu His Gly
410 415 420
gtg gtg cat gac acg gcg atc gcg gca tac ttg ctg cgt ccg ggc caa 1411
Val Val His Asp Thr Ala Ile Ala Ala Tyr Leu Leu Arg Pro Gly Gln
425 430 435
cgc acc tat gag ctt gcc gac gtc tac cag cgg cat ctt caa cga cag 1459
Arg Thr Tyr Glu Leu Ala Asp Val Tyr Gln Arg His Leu Gln Arg Gln
440 445 450
ttg tct aca aac gac aat ggc ggc cag ctc acg ctg ctc gac gca gct 1507
Leu Ser Thr Asn Asp Asn Gly Gly Gln Leu Thr Leu Leu Asp Ala Ala
455 460 465
gat gac caa tcg ctt gtt gat gat gtc att gca atc ctt gag ctg tct 1555
Asp Asp Gln Ser Leu Val Asp Asp Val Ile Ala Ile Leu Glu Leu Ser
470 475 480 485
gaa gaa ttg acc aaa cag ctt cag gag att caa gct ttt gag ctt tac 1603
Glu Glu Leu Thr Lys Gln Leu Gln Glu Ile Gln Ala Phe Glu Leu Tyr
490 495 500
cat gac ctg gaa att ccg ctg tcg gga att ctg gcg cgc atg gag gcc 1651
His Asp Leu Glu Ile Pro Leu Ser Gly Ile Leu Ala Arg Met Glu Ala
505 510 515
atc ggt atc gct gtt gat gtt gcc act ttg gaa gag cag ttg aag act 1699
Ile Gly Ile Ala Val Asp Val Ala Thr Leu Glu Glu Gln Leu Lys Thr
520 525 530
ttc att ggt cag gtt gct cag gaa gag gaa gca gct cgc gag ctc gct 1747
Phe Ile Gly Gln Val Ala Gln Glu Glu Glu Ala Ala Arg Glu Leu Ala
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gag gat cca acc ctg aat ctc tcg agc ccg aag cag ctg caa gtg gtg 1795
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ctt ttt gag acg ttc gga atg ccg aaa acc aag aaa acc aag acc ggc 1843
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cac cca ttc cta gat cac ctg ttg gca cac cgt cag tac caa aag atg 1939
His Pro Phe Leu Asp His Leu Leu Ala His Arg Gln Tyr Gln Lys Met
600 605 610
aag acc act ctg gaa ggt ctc atc cgt gag gtg gct cct gat ggc cgt 1987
Lys Thr Thr Leu Glu Gly Leu Ile Arg Glu Val Ala Pro Asp Gly Arg
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att cac acc acc ttc aac cag acg gtg gcg tct acg gga cgt ttg tca 2035
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acc cct gag ctg cgt cgc cag gtc aag gcc atg tct tac ggt ctg gtg 2323
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ttc gtt gcg cac ggc acc gat ggc ctt gcc ggt cct tgg gcg cag cag 451
Phe Val Ala His Gly Thr Asp Gly Leu Ala Gly Pro Trp Ala Gln Gln
105 110 115
gca cag gta ggt gat gtc atc gcg ttc ggc ggc cca ggt ggc gca tgg 499
Ala Gln Val Gly Asp Val Ile Ala Phe Gly Gly Pro Gly Gly Ala Trp
120 125 130
aag cca gaa acc acc tat gag cac tac gtt ctc gca ggc gat gaa gcc 547
Lys Pro Glu Thr Thr Tyr Glu His Tyr Val Leu Ala Gly Asp Glu Ala
135 140 145
gca gca ccc gca att ttc gca gcc tta gaa cac cta ccc gcc ggc acc 595
Ala Ala Pro Ala Ile Phe Ala Ala Leu Glu His Leu Pro Ala Gly Thr
150 155 160 165
acc gcc aaa gcc ttc att gaa atc tcc tcc aac gaa gcg cgt ttc aac 643
Thr Ala Lys Ala Phe Ile Glu Ile Ser Ser Asn Glu Ala Arg Phe Asn
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gcc cca gcc agc gac aac atc gag gtt gtc tgg gtg ccc cgc gac ggc 691
Ala Pro Ala Ser Asp Asn Ile Glu Val Val Trp Val Pro Arg Asp Gly
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gcc acc cac ggt aca ttg ctt atc gac gcc ctc cgc cag gac ggc tac 739
Ala Thr His Gly Thr Leu Leu Ile Asp Ala Leu Arg Gln Asp Gly Tyr
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cca acc aag aaa act tcc tgg ttc atc cac gga gtc gcc gaa atg gtg 787
Pro Thr Lys Lys Thr Ser Trp Phe Ile His Gly Val Ala Glu Met Val
215 220 225
aag gaa acc cgc aaa ttc ctc ttc gtg gaa ggc aac gta gac aaa gct 835
Lys Glu Thr Arg Lys Phe Leu Phe Val Glu Gly Asn Val Asp Lys Ala
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gat gca tcc att tcc gga tac tgg cgc ctt ggc atg acc gaa gac cag 883
Asp Ala Ser Ile Ser Gly Tyr Trp Arg Leu Gly Met Thr Glu Asp Gln
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tgg cag gcc tcc aag cgg gag ttc aat gag caa aat gag gca gaa gaa 931
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His Tyr Ile Lys Ile Leu Phe Val Pro Ala Gly Ala Asp Tyr Ser Trp
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Pro Val Arg Arg Thr Tyr Thr Phe Arg Thr Val Asp Thr Val Ala Gly
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ttgcagtaat tacagacact tttaaggaga taatttaaac atg gca gga aat gac 115
Met Ala Gly Asn Asp
1 5
agt cgt cga ggc ggc tta cgc aag acc aat aaa aaa ggt gca acc aag 163
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ggc agt ggc gga cag gtt cgt cgc ggt ctg aaa ggt aag ggg cct acc 211
Gly Ser Gly Gly Gln Val Arg Arg Gly Leu Lys Gly Lys Gly Pro Thr
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cct aaa gct gag gat cgc acc tat cac gca gct cac aag cgc aag gtg 259
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gag cgt gat cgt cgt gat cgt gga cgc cac cag cgt gaa atg cca gag 307
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200 205 210
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Met Glu Trp Asn Gly Gly Gly Ser Phe Asn Gly Arg Pro Leu Ser Trp
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tcc aaa ttg gaa aga atc ctc tca ggt aaa aag gtc gaa tct ctg cgt 211
Ser Lys Leu Glu Arg Ile Leu Ser Gly Lys Lys Val Glu Ser Leu Arg
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ccg gtg ctg cat gag ccg gat gcg cag gcg cct tca tct gcc atg cag 259
Pro Val Leu His Glu Pro Asp Ala Gln Ala Pro Ser Ser Ala Met Gln
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Lys Lys Leu Gly Leu Val Ala Leu Ser Val Met Asp Arg Asp Gly Phe
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105 110 115
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120 125 130
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Leu Cys Lys Asn Pro Glu Gly Tyr Lys Lys Leu Ser His Leu Ile Ser
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Gly Asp Thr Leu Leu Lys Ala His Pro Asp Tyr Ala Asp Leu Ile Ala
280 285 290
acc acg gtg gaa tta gct gct gaa tgt gct ttc acc cta gat ttg gtg 1027
Thr Thr Val Glu Leu Ala Ala Glu Cys Ala Phe Thr Leu Asp Leu Val
295 300 305
gcc ccg aat ctg ccc aag tgg gat acc cct ggt gaa cac acg gaa atg 1075
Ala Pro Asn Leu Pro Lys Trp Asp Thr Pro Gly Glu His Thr Glu Met
310 315 320 325
tcc tgg ctt gcg cac ctg gtt tcc act cgg att gat acc cgc tat gtg 1123
Ser Trp Leu Ala His Leu Val Ser Thr Arg Ile Asp Thr Arg Tyr Val
330 335 340
ggg cgc tcc gca gac atc aaa gca cga gct gcc aca caa att gac tat 1171
Gly Arg Ser Ala Asp Ile Lys Ala Arg Ala Ala Thr Gln Ile Asp Tyr
345 350 355
gaa tta ggc gtt att gaa aag ctg ggt ttt cca ggc tat ttc ctc gtc 1219
Glu Leu Gly Val Ile Glu Lys Leu Gly Phe Pro Gly Tyr Phe Leu Val
360 365 370
gtt aat gat ctg gtg gag ttt tgt cgc gat tcc aat att ttg tgc caa 1267
Val Asn Asp Leu Val Glu Phe Cys Arg Asp Ser Asn Ile Leu Cys Gln
375 380 385
ggc aga ggt tcc gcg gcg aac tcg gcg gtg tgc ttt gtc cta ggc atc 1315
Gly Arg Gly Ser Ala Ala Asn Ser Ala Val Cys Phe Val Leu Gly Ile
390 395 400 405
acc aac gcg gag ccg atc tct gct gga ttg ttg ttt gaa cgg ttt tta 1363
Thr Asn Ala Glu Pro Ile Ser Ala Gly Leu Leu Phe Glu Arg Phe Leu
410 415 420
tct cct gac cgg gat ggt cca cca gat att gac att gat att gaa tcc 1411
Ser Pro Asp Arg Asp Gly Pro Pro Asp Ile Asp Ile Asp Ile Glu Ser
425 430 435
ggc agg cgc gaa gaa gta atc caa tac gtg tat gaa aaa tac gga agg 1459
Gly Arg Arg Glu Glu Val Ile Gln Tyr Val Tyr Glu Lys Tyr Gly Arg
440 445 450
gat aac gca gct caa gta gcc aat gtc att acc tac cga aca aaa ggc 1507
Asp Asn Ala Ala Gln Val Ala Asn Val Ile Thr Tyr Arg Thr Lys Gly
455 460 465
gcg atg cgt gat gct gcc cgt gca ctg ggt tac ccg caa ggt gct gcc 1555
Ala Met Arg Asp Ala Ala Arg Ala Leu Gly Tyr Pro Gln Gly Ala Ala
470 475 480 485
gat gcc tgg gct aaa gga acc tcg gaa cca ccc gat gat gtg ctg gaa 1603
Asp Ala Trp Ala Lys Gly Thr Ser Glu Pro Pro Asp Asp Val Leu Glu
490 495 500
tta gct gcg caa ttt aaa ggg caa cca cgg cat ttg ggt att cac tcc 1651
Leu Ala Ala Gln Phe Lys Gly Gln Pro Arg His Leu Gly Ile His Ser
505 510 515
ggt ggc atg gtc att tgc gat cgc ccc atc gcc gat gtg gtg cca gtg 1699
Gly Gly Met Val Ile Cys Asp Arg Pro Ile Ala Asp Val Val Pro Val
520 525 530
gaa tgg gct cgg atg gat aac cgc tcg gtt gtg caa tgg gat aaa gat 1747
Glu Trp Ala Arg Met Asp Asn Arg Ser Val Val Gln Trp Asp Lys Asp
535 540 545
gac tgt gcc acg gca ggc ttg gtc aaa ttc gac ctt ttg gga ttg ggc 1795
Asp Cys Ala Thr Ala Gly Leu Val Lys Phe Asp Leu Leu Gly Leu Gly
550 555 560 565
atg ttg gaa gcc atc cat cac atg ctg gat ctg gtg gca gaa cac cga 1843
Met Leu Glu Ala Ile His His Met Leu Asp Leu Val Ala Glu His Arg
570 575 580
ggt aaa aag atc aat ttg tgg gaa cta gat ctg gcg gaa ccg gag gtc 1891
Gly Lys Lys Ile Asn Leu Trp Glu Leu Asp Leu Ala Glu Pro Glu Val
585 590 595
tat gac atg ttg tgc aag gca gat gcc gtg ggt gtg ttc cag gtg gaa 1939
Tyr Asp Met Leu Cys Lys Ala Asp Ala Val Gly Val Phe Gln Val Glu
600 605 610
tca cgt gcg cag tta tcc acg ctg cct cga ctc aag ccc cgc acc ttc 1987
Ser Arg Ala Gln Leu Ser Thr Leu Pro Arg Leu Lys Pro Arg Thr Phe
615 620 625
ttt gac ctg gtc gtg gag gta gct ctg att cgt cca ggt ccc atc caa 2035
Phe Asp Leu Val Val Glu Val Ala Leu Ile Arg Pro Gly Pro Ile Gln
630 635 640 645
ggc gga tcg gtg cac ccg tat ttg cgg cgc cgt gct ggt gaa gag gcc 2083
Gly Gly Ser Val His Pro Tyr Leu Arg Arg Arg Ala Gly Glu Glu Ala
650 655 660
atc act tat gac cac ccc gtg ttg gaa aag tct ttg ggt aaa acc tta 2131
Ile Thr Tyr Asp His Pro Val Leu Glu Lys Ser Leu Gly Lys Thr Leu
665 670 675
gga atc cca ctg ttt cag gaa cag ctc atg cag gta gct gtt gat gct 2179
Gly Ile Pro Leu Phe Gln Glu Gln Leu Met Gln Val Ala Val Asp Ala
680 685 690
gca ggt ttt agt ggt ggg gaa gcg gat tcc ttg cgc aga gcg atg ggg 2227
Ala Gly Phe Ser Gly Gly Glu Ala Asp Ser Leu Arg Arg Ala Met Gly
695 700 705
tcg aaa cgc tca cct gaa cgc atg gct gcg ttg cgc tcg cgg ttt ttc 2275
Ser Lys Arg Ser Pro Glu Arg Met Ala Ala Leu Arg Ser Arg Phe Phe
710 715 720 725
caa ggg ctg aaa gat acc aat ggg att gtg ggg gag acc gcc gag aaa 2323
Gln Gly Leu Lys Asp Thr Asn Gly Ile Val Gly Glu Thr Ala Glu Lys
730 735 740
ctg tgg aac aaa att gtg gcc ttt gct gcc tac ggt ttt ccg gaa tcg 2371
Leu Trp Asn Lys Ile Val Ala Phe Ala Ala Tyr Gly Phe Pro Glu Ser
745 750 755
cat tcg cag tcg ttt gcg tcc ttg gtg tat ttc tcc gcg tgg ttt aaa 2419
His Ser Gln Ser Phe Ala Ser Leu Val Tyr Phe Ser Ala Trp Phe Lys
760 765 770
tac cac tac ccg gct gaa ttc tgc gtg gga tta ttg cgg gca caa ccc 2467
Tyr His Tyr Pro Ala Glu Phe Cys Val Gly Leu Leu Arg Ala Gln Pro
775 780 785
atg ggt ttc tat tca cca cag tct ttg atc agt gat gcc aga cgc cac 2515
Met Gly Phe Tyr Ser Pro Gln Ser Leu Ile Ser Asp Ala Arg Arg His
790 795 800 805
ggc gtg agt atc ctg ccg atc acg gtc aat gat tcc ggt gtg gag gcc 2563
Gly Val Ser Ile Leu Pro Ile Thr Val Asn Asp Ser Gly Val Glu Ala
810 815 820
gat gct ccg aat ggt gcg att cga ttg ggg ctc aac ctg gtg aaa ggc 2611
Asp Ala Pro Asn Gly Ala Ile Arg Leu Gly Leu Asn Leu Val Lys Gly
825 830 835
ctt ggc cac gat gcc gcg caa aga ata gag gac aac gcc ccg ttt gat 2659
Leu Gly His Asp Ala Ala Gln Arg Ile Glu Asp Asn Ala Pro Phe Asp
840 845 850
tcc att ccg gat tta tcg cgc cgg gct gat ctt aat gtt gct caa gtt 2707
Ser Ile Pro Asp Leu Ser Arg Arg Ala Asp Leu Asn Val Ala Gln Val
855 860 865
gag gca ttg gcg cga gcg gga gcg gtg gac tgc ttg ggg gtc gga cgt 2755
Glu Ala Leu Ala Arg Ala Gly Ala Val Asp Cys Leu Gly Val Gly Arg
870 875 880 885
cga caa gca tta tgg caa gcg ggc gtc gca gcg acc gaa aaa cct gga 2803
Arg Gln Ala Leu Trp Gln Ala Gly Val Ala Ala Thr Glu Lys Pro Gly
890 895 900
atg ctg cct ggc ctt tcg gtg att gaa gct ccg gcg ttg ccg ggg atg 2851
Met Leu Pro Gly Leu Ser Val Ile Glu Ala Pro Ala Leu Pro Gly Met
905 910 915
agc gcc ttt gag ctg atg gcg acc aat att tcc gcc acg gga gtc acc 2899
Ser Ala Phe Glu Leu Met Ala Thr Asn Ile Ser Ala Thr Gly Val Thr
920 925 930
gcg gat tat cag ccg atg gcg ttg att cgg gag cgg atg gag gag ctg 2947
Ala Asp Tyr Gln Pro Met Ala Leu Ile Arg Glu Arg Met Glu Glu Leu
935 940 945
ggg atc gtg ccg gcg gat cgg cta ttg gag gtg gaa gat ggc acg cgg 2995
Gly Ile Val Pro Ala Asp Arg Leu Leu Glu Val Glu Asp Gly Thr Arg
950 955 960 965
ctg cgg atc gct ggc att gtc acg cac cgg cag cgc ccg caa act gcg 3043
Leu Arg Ile Ala Gly Ile Val Thr His Arg Gln Arg Pro Gln Thr Ala
970 975 980
tcg ggg ctg aca ttt tta ggg atg gag gat gag acc ggg ctg atg aat 3091
Ser Gly Leu Thr Phe Leu Gly Met Glu Asp Glu Thr Gly Leu Met Asn
985 990 995
gtg atg gtg tcc gtt ggg ttg tgg cag cgg cag cgc gtg ctg gcc aga 3139
Val Met Val Ser Val Gly Leu Trp Gln Arg Gln Arg Val Leu Ala Arg
1000 1005 1010
aat gcc aag gcg ttg att att cga ggg att gtg cag aat gcg caa ggg 3187
Asn Ala Lys Ala Leu Ile Ile Arg Gly Ile Val Gln Asn Ala Gln Gly
1015 1020 1025
gtg gcg aca gtt gtc gct gac cgg ttg gaa ccg ttg gac atg ggg gag 3235
Val Ala Thr Val Val Ala Asp Arg Leu Glu Pro Leu Asp Met Gly Glu
1030 1035 1040 1045
ttt ctc agc cgt ggc tca cga gat ttt cga taatttggca aagtggacat 3285
Phe Leu Ser Arg Gly Ser Arg Asp Phe Arg
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tatgacaaat 3295
<210> 14
<211> 1055
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 14
Met Tyr Pro Ile Ile Met Glu Trp Asn Gly Gly Gly Ser Phe Asn Gly
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Arg Pro Leu Ser Trp Ser Lys Leu Glu Arg Ile Leu Ser Gly Lys Lys
20 25 30
Val Glu Ser Leu Arg Pro Val Leu His Glu Pro Asp Ala Gln Ala Pro
35 40 45
Ser Ser Ala Met Gln Gly Glu Ala Ser Val Pro Phe Ala Glu Leu His
50 55 60
Ala Thr Ser Ser Tyr Asn Phe Leu Thr Gly Ala Ser Asp Pro Ser Asp
65 70 75 80
Val Val Val Gln Ala Lys Lys Leu Gly Leu Val Ala Leu Ser Val Met
85 90 95
Asp Arg Asp Gly Phe Tyr Gly Ala Val Arg Phe Ala Glu Ala Ala Ala
100 105 110
Glu Ala Gly Met His Thr Val Tyr Gly Ala Glu Leu Ser Leu Gln Glu
115 120 125
Gly Val Leu Thr Val Leu Cys Lys Asn Pro Glu Gly Tyr Lys Lys Leu
130 135 140
Ser His Leu Ile Ser Asp Ala Lys Met Ala Thr Gly Glu Lys Gly Glu
145 150 155 160
Val Arg Tyr Pro Pro Leu Pro Met Val Ala Glu His Ala Ala Gly Asp
165 170 175
Trp Val Val Leu Ala Gly Phe Gln Trp Leu Asp Lys Ile Asp Tyr Val
180 185 190
Ile Asp Cys Phe Lys Pro Glu Asn Ile Val Leu Glu Phe Gly Ser Thr
195 200 205
Met Thr Pro Glu Asp Ala Asp Arg Asn Glu Tyr Leu Arg Arg Thr Gln
210 215 220
Ala Lys Phe Gln Leu Arg Gly Ile Leu Ser Thr Asn Pro Glu Ser Ala
225 230 235 240
Ala Arg Gly Ser Val Arg Leu Ala Gly Ala Lys Gln Ala Leu Ala Arg
245 250 255
Lys Met Pro Leu Ala Asp Ala Glu Ser Glu Leu His Pro Met Gly Thr
260 265 270
Thr Trp Met Arg Ser Gly Asp Thr Leu Leu Lys Ala His Pro Asp Tyr
275 280 285
Ala Asp Leu Ile Ala Thr Thr Val Glu Leu Ala Ala Glu Cys Ala Phe
290 295 300
Thr Leu Asp Leu Val Ala Pro Asn Leu Pro Lys Trp Asp Thr Pro Gly
305 310 315 320
Glu His Thr Glu Met Ser Trp Leu Ala His Leu Val Ser Thr Arg Ile
325 330 335
Asp Thr Arg Tyr Val Gly Arg Ser Ala Asp Ile Lys Ala Arg Ala Ala
340 345 350
Thr Gln Ile Asp Tyr Glu Leu Gly Val Ile Glu Lys Leu Gly Phe Pro
355 360 365
Gly Tyr Phe Leu Val Val Asn Asp Leu Val Glu Phe Cys Arg Asp Ser
370 375 380
Asn Ile Leu Cys Gln Gly Arg Gly Ser Ala Ala Asn Ser Ala Val Cys
385 390 395 400
Phe Val Leu Gly Ile Thr Asn Ala Glu Pro Ile Ser Ala Gly Leu Leu
405 410 415
Phe Glu Arg Phe Leu Ser Pro Asp Arg Asp Gly Pro Pro Asp Ile Asp
420 425 430
Ile Asp Ile Glu Ser Gly Arg Arg Glu Glu Val Ile Gln Tyr Val Tyr
435 440 445
Glu Lys Tyr Gly Arg Asp Asn Ala Ala Gln Val Ala Asn Val Ile Thr
450 455 460
Tyr Arg Thr Lys Gly Ala Met Arg Asp Ala Ala Arg Ala Leu Gly Tyr
465 470 475 480
Pro Gln Gly Ala Ala Asp Ala Trp Ala Lys Gly Thr Ser Glu Pro Pro
485 490 495
Asp Asp Val Leu Glu Leu Ala Ala Gln Phe Lys Gly Gln Pro Arg His
500 505 510
Leu Gly Ile His Ser Gly Gly Met Val Ile Cys Asp Arg Pro Ile Ala
515 520 525
Asp Val Val Pro Val Glu Trp Ala Arg Met Asp Asn Arg Ser Val Val
530 535 540
Gln Trp Asp Lys Asp Asp Cys Ala Thr Ala Gly Leu Val Lys Phe Asp
545 550 555 560
Leu Leu Gly Leu Gly Met Leu Glu Ala Ile His His Met Leu Asp Leu
565 570 575
Val Ala Glu His Arg Gly Lys Lys Ile Asn Leu Trp Glu Leu Asp Leu
580 585 590
Ala Glu Pro Glu Val Tyr Asp Met Leu Cys Lys Ala Asp Ala Val Gly
595 600 605
Val Phe Gln Val Glu Ser Arg Ala Gln Leu Ser Thr Leu Pro Arg Leu
610 615 620
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625 630 635 640
Pro Gly Pro Ile Gln Gly Gly Ser Val His Pro Tyr Leu Arg Arg Arg
645 650 655
Ala Gly Glu Glu Ala Ile Thr Tyr Asp His Pro Val Leu Glu Lys Ser
660 665 670
Leu Gly Lys Thr Leu Gly Ile Pro Leu Phe Gln Glu Gln Leu Met Gln
675 680 685
Val Ala Val Asp Ala Ala Gly Phe Ser Gly Gly Glu Ala Asp Ser Leu
690 695 700
Arg Arg Ala Met Gly Ser Lys Arg Ser Pro Glu Arg Met Ala Ala Leu
705 710 715 720
Arg Ser Arg Phe Phe Gln Gly Leu Lys Asp Thr Asn Gly Ile Val Gly
725 730 735
Glu Thr Ala Glu Lys Leu Trp Asn Lys Ile Val Ala Phe Ala Ala Tyr
740 745 750
Gly Phe Pro Glu Ser His Ser Gln Ser Phe Ala Ser Leu Val Tyr Phe
755 760 765
Ser Ala Trp Phe Lys Tyr His Tyr Pro Ala Glu Phe Cys Val Gly Leu
770 775 780
Leu Arg Ala Gln Pro Met Gly Phe Tyr Ser Pro Gln Ser Leu Ile Ser
785 790 795 800
Asp Ala Arg Arg His Gly Val Ser Ile Leu Pro Ile Thr Val Asn Asp
805 810 815
Ser Gly Val Glu Ala Asp Ala Pro Asn Gly Ala Ile Arg Leu Gly Leu
820 825 830
Asn Leu Val Lys Gly Leu Gly His Asp Ala Ala Gln Arg Ile Glu Asp
835 840 845
Asn Ala Pro Phe Asp Ser Ile Pro Asp Leu Ser Arg Arg Ala Asp Leu
850 855 860
Asn Val Ala Gln Val Glu Ala Leu Ala Arg Ala Gly Ala Val Asp Cys
865 870 875 880
Leu Gly Val Gly Arg Arg Gln Ala Leu Trp Gln Ala Gly Val Ala Ala
885 890 895
Thr Glu Lys Pro Gly Met Leu Pro Gly Leu Ser Val Ile Glu Ala Pro
900 905 910
Ala Leu Pro Gly Met Ser Ala Phe Glu Leu Met Ala Thr Asn Ile Ser
915 920 925
Ala Thr Gly Val Thr Ala Asp Tyr Gln Pro Met Ala Leu Ile Arg Glu
930 935 940
Arg Met Glu Glu Leu Gly Ile Val Pro Ala Asp Arg Leu Leu Glu Val
945 950 955 960
Glu Asp Gly Thr Arg Leu Arg Ile Ala Gly Ile Val Thr His Arg Gln
965 970 975
Arg Pro Gln Thr Ala Ser Gly Leu Thr Phe Leu Gly Met Glu Asp Glu
980 985 990
Thr Gly Leu Met Asn Val Met Val Ser Val Gly Leu Trp Gln Arg Gln
995 1000 1005
Arg Val Leu Ala Arg Asn Ala Lys Ala Leu Ile Ile Arg Gly Ile Val
1010 1015 1020
Gln Asn Ala Gln Gly Val Ala Thr Val Val Ala Asp Arg Leu Glu Pro
1025 1030 1035 1040
Leu Asp Met Gly Glu Phe Leu Ser Arg Gly Ser Arg Asp Phe Arg
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<210> 15
<211> 526
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(496)
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<400> 15
cgactattga gttcggtgag cgttgagtgg ccagaaaaca cacggttaac gtccaaggtg 60
ggaagggaac cccaacgaga aaggcatcag gtcgtctcta atg aca atg act gat 115
Met Thr Met Thr Asp
1 5
cca atc gcc gac atg ctg tcg cgc gtg cgc aat gct agc aat gcg cac 163
Pro Ile Ala Asp Met Leu Ser Arg Val Arg Asn Ala Ser Asn Ala His
10 15 20
cac gac acc gtg tcc atg cca tcc tcc aag atc aag gca aac atc gcc 211
His Asp Thr Val Ser Met Pro Ser Ser Lys Ile Lys Ala Asn Ile Ala
25 30 35
gag atc ttg aag cag gaa ggc tac atc gct aac tac acc gtt gag gat 259
Glu Ile Leu Lys Gln Glu Gly Tyr Ile Ala Asn Tyr Thr Val Glu Asp
40 45 50
gca aag gtc ggc aag acc ctg tcc ctc gag ctg aag tac agc aac acc 307
Ala Lys Val Gly Lys Thr Leu Ser Leu Glu Leu Lys Tyr Ser Asn Thr
55 60 65
cgt gag cgc tcc atc gct ggt ctg cgc cgc gtt tcc aag cct ggt ctg 355
Arg Glu Arg Ser Ile Ala Gly Leu Arg Arg Val Ser Lys Pro Gly Leu
70 75 80 85
cgt gta tac gct aag tcc acc aat ctg cca cag gtt ctg ggc ggc ctt 403
Arg Val Tyr Ala Lys Ser Thr Asn Leu Pro Gln Val Leu Gly Gly Leu
90 95 100
ggc gtg gct atc att tcc acg tca cag ggc ctc ctg acc gac cgt cag 451
Gly Val Ala Ile Ile Ser Thr Ser Gln Gly Leu Leu Thr Asp Arg Gln
105 110 115
gct acc gag aag ggc gta ggc gga gaa gtc ctc gcc tac gtc tgg 496
Ala Thr Glu Lys Gly Val Gly Gly Glu Val Leu Ala Tyr Val Trp
120 125 130
taatagggag gattgactaa atatgtcacg 526
<210> 16
<211> 132
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35 40 45
Tyr Thr Val Glu Asp Ala Lys Val Gly Lys Thr Leu Ser Leu Glu Leu
50 55 60
Lys Tyr Ser Asn Thr Arg Glu Arg Ser Ile Ala Gly Leu Arg Arg Val
65 70 75 80
Ser Lys Pro Gly Leu Arg Val Tyr Ala Lys Ser Thr Asn Leu Pro Gln
85 90 95
Val Leu Gly Gly Leu Gly Val Ala Ile Ile Ser Thr Ser Gln Gly Leu
100 105 110
Leu Thr Asp Arg Gln Ala Thr Glu Lys Gly Val Gly Gly Glu Val Leu
115 120 125
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130
<210> 17
<211> 532
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(502)
<223> RXA00696
<400> 17
gatccgccgc ctgcgtaagg acgatcctta caagggtaag ggcatccgct acgagggtga 60
gcagatccgc cgcaaggtcg gaaagacggg taagtaagca atg agc aac act gaa 115
Met Ser Asn Thr Glu
1 5
aac aag cag aag cgc gtt tcc gtt ggc aag gac atc gcg act cgt cgt 163
Asn Lys Gln Lys Arg Val Ser Val Gly Lys Asp Ile Ala Thr Arg Arg
10 15 20
cgc gtt gcc cgt gca cgc cgc cac ttc cgc atc cgc aag aac ctg cgt 211
Arg Val Ala Arg Ala Arg Arg His Phe Arg Ile Arg Lys Asn Leu Arg
25 30 35
ggc acc cca gag gct cca cgt ttg gtt gtc cac cgc tct tct cgc cac 259
Gly Thr Pro Glu Ala Pro Arg Leu Val Val His Arg Ser Ser Arg His
40 45 50
atg cac gtt cag atc atc gat gac gtt gca ggc cac acc ctg gct gca 307
Met His Val Gln Ile Ile Asp Asp Val Ala Gly His Thr Leu Ala Ala
55 60 65
gct tct tcc atc gag gct gag gtt cgc gca act gag ggc gac aag aag 355
Ala Ser Ser Ile Glu Ala Glu Val Arg Ala Thr Glu Gly Asp Lys Lys
70 75 80 85
gct aag ggc gca aag gtc ggt cag ctg atc gcc gag cgc gct aag gct 403
Ala Lys Gly Ala Lys Val Gly Gln Leu Ile Ala Glu Arg Ala Lys Ala
90 95 100
gct ggt atc gag cag gtc gtc ttc gac cgc gct ggt tac aag tac cac 451
Ala Gly Ile Glu Gln Val Val Phe Asp Arg Ala Gly Tyr Lys Tyr His
105 110 115
ggc cgc gtt gca gct ctc gct gac gcc gct cgt gaa ggt ggt ctg aaa 499
Gly Arg Val Ala Ala Leu Ala Asp Ala Ala Arg Glu Gly Gly Leu Lys
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ttc taatgatgac catttctaag aacatcaacg 532
Phe
<210> 18
<211> 134
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<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 18
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20 25 30
Arg Lys Asn Leu Arg Gly Thr Pro Glu Ala Pro Arg Leu Val Val His
35 40 45
Arg Ser Ser Arg His Met His Val Gln Ile Ile Asp Asp Val Ala Gly
50 55 60
His Thr Leu Ala Ala Ala Ser Ser Ile Glu Ala Glu Val Arg Ala Thr
65 70 75 80
Glu Gly Asp Lys Lys Ala Lys Gly Ala Lys Val Gly Gln Leu Ile Ala
85 90 95
Glu Arg Ala Lys Ala Ala Gly Ile Glu Gln Val Val Phe Asp Arg Ala
100 105 110
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115 120 125
Glu Gly Gly Leu Lys Phe
130
<210> 19
<211> 1372
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(1342)
<223> RXA00807
<400> 19
tgctctaagc aatcgactca tgctcaatac tctaacgtgc cggtgcgaca tcgcgaggat 60
gtagtgagga agtagtgtag agatcgtgac taattcgagt gtg ttt gac agt ctc 115
Val Phe Asp Ser Leu
1 5
gcc ggc tcc aaa aca gtg tcc aag acg ctt ttc gac gcg gcc tcc agc 163
Ala Gly Ser Lys Thr Val Ser Lys Thr Leu Phe Asp Ala Ala Ser Ser
10 15 20
gcg cgt gcc ctt gtc cgc gcc cga acc aca gaa cgt gcc cgc gcc cgg 211
Ala Arg Ala Leu Val Arg Ala Arg Thr Thr Glu Arg Ala Arg Ala Arg
25 30 35
gca gaa cac caa aac cct gca atg atc cac gac tcc ggc ttt gcc cag 259
Ala Glu His Gln Asn Pro Ala Met Ile His Asp Ser Gly Phe Ala Gln
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tgt gga caa tgc gag gat tgc cgc gcc gcc atg gga ggc agc cac ccc 403
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Ala Arg Glu Val Ile Lys Ala Ala Ala Val Ser Pro Val Ala Gly Asn
120 125 130
tgg cga gtc gtc atc ttc gaa aac gcc gac cga ctc acc atg caa gcc 547
Trp Arg Val Val Ile Phe Glu Asn Ala Asp Arg Leu Thr Met Gln Ala
135 140 145
gcc aac gcc ttg ctg aaa acc gtg gag gaa cca acc gaa agc acc gtg 595
Ala Asn Ala Leu Leu Lys Thr Val Glu Glu Pro Thr Glu Ser Thr Val
150 155 160 165
atg att ctg tgc gca ccc acc aca gac ccc cgc gac att gcg atc acc 643
Met Ile Leu Cys Ala Pro Thr Thr Asp Pro Arg Asp Ile Ala Ile Thr
170 175 180
ctc cgc tcc cgc tgc agg cac ctc tac att ccc acc ccc tcc atc gcg 691
Leu Arg Ser Arg Cys Arg His Leu Tyr Ile Pro Thr Pro Ser Ile Ala
185 190 195
gaa gtc gca cga atc ctc gta gct gaa ggc aac gtc agc caa gcg gat 739
Glu Val Ala Arg Ile Leu Val Ala Glu Gly Asn Val Ser Gln Ala Asp
200 205 210
gca gaa tta gcg gcg gct gcc tca ggc gct cac atc ggc agg gct cga 787
Ala Glu Leu Ala Ala Ala Ala Ser Gly Ala His Ile Gly Arg Ala Arg
215 220 225
tac tta gcg cac aac aac gcc gcc caa cgc aga cgc gcc agc atc ctc 835
Tyr Leu Ala His Asn Asn Ala Ala Gln Arg Arg Arg Ala Ser Ile Leu
230 235 240 245
aac ctg gcc gaa tta atc ttc cac ggt gat gtc gcc ttc cgc tcc gta 883
Asn Leu Ala Glu Leu Ile Phe His Gly Asp Val Ala Phe Arg Ser Val
250 255 260
aac acc ttg gtc aaa atg gtg gaa acc gaa gcc aaa gac agc aac aaa 931
Asn Thr Leu Val Lys Met Val Glu Thr Glu Ala Lys Asp Ser Asn Lys
265 270 275
gaa aaa gaa gaa gcc gaa ctc gaa gcc gta aga atc tca ctc ggc atg 979
Glu Lys Glu Glu Ala Glu Leu Glu Ala Val Arg Ile Ser Leu Gly Met
280 285 290
ggg gcc aaa ggc aaa ggt gtc cac aaa gca gta cgt gga gga gcg gga 1027
Gly Ala Lys Gly Lys Gly Val His Lys Ala Val Arg Gly Gly Ala Gly
295 300 305
gat ttc aaa gca ctc gaa gac caa caa aaa ctc cga cgc acc cga ttc 1075
Asp Phe Lys Ala Leu Glu Asp Gln Gln Lys Leu Arg Arg Thr Arg Phe
310 315 320 325
ctc cgc gac agc ctc gac ctc gca ctc gtc gac cta gcc ggc atc tac 1123
Leu Arg Asp Ser Leu Asp Leu Ala Leu Val Asp Leu Ala Gly Ile Tyr
330 335 340
cgc gat gcc atc atc att tcc tcc caa gcc caa gtc gga ctc aca cac 1171
Arg Asp Ala Ile Ile Ile Ser Ser Gln Ala Gln Val Gly Leu Thr His
345 350 355
ccc gat atg gaa ggc ctc tcc caa gaa ctc gca aca aaa gta agc caa 1219
Pro Asp Met Glu Gly Leu Ser Gln Glu Leu Ala Thr Lys Val Ser Gln
360 365 370
gaa gga ctc ctg gca tgc ctc gac gcg atc tcc aaa tgc cgc gaa tcc 1267
Glu Gly Leu Leu Ala Cys Leu Asp Ala Ile Ser Lys Cys Arg Glu Ser
375 380 385
ttc ggc ttc aat gta cga ccc atc gtg gcc atg gac gcc ctg gta gga 1315
Phe Gly Phe Asn Val Arg Pro Ile Val Ala Met Asp Ala Leu Val Gly
390 395 400 405
cgc ctg cgc aaa gcc tac aaa gtg tcc taaacacccc aaattattga 1362
Arg Leu Arg Lys Ala Tyr Lys Val Ser
410
agtcaagaac 1372
<210> 20
<211> 414
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 20
Val Phe Asp Ser Leu Ala Gly Ser Lys Thr Val Ser Lys Thr Leu Phe
1 5 10 15
Asp Ala Ala Ser Ser Ala Arg Ala Leu Val Arg Ala Arg Thr Thr Glu
20 25 30
Arg Ala Arg Ala Arg Ala Glu His Gln Asn Pro Ala Met Ile His Asp
35 40 45
Ser Gly Phe Ala Gln Ser Trp Leu Phe Thr Gly Pro Pro Gly Ser Gly
50 55 60
Arg Ser Val Ala Ala Lys Val Phe Ala Ala Thr Leu Val Cys Ser Asn
65 70 75 80
Pro Asp Val Val Gly Cys Gly Gln Cys Glu Asp Cys Arg Ala Ala Met
85 90 95
Gly Gly Ser His Pro Asp Ile Glu His Ile Val Pro Gln Gln Leu Ser
100 105 110
Ile Gly Val Asp Ala Ala Arg Glu Val Ile Lys Ala Ala Ala Val Ser
115 120 125
Pro Val Ala Gly Asn Trp Arg Val Val Ile Phe Glu Asn Ala Asp Arg
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Leu Thr Met Gln Ala Ala Asn Ala Leu Leu Lys Thr Val Glu Glu Pro
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Asp Ile Ala Ile Thr Leu Arg Ser Arg Cys Arg His Leu Tyr Ile Pro
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Thr Pro Ser Ile Ala Glu Val Ala Arg Ile Leu Val Ala Glu Gly Asn
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Val Ser Gln Ala Asp Ala Glu Leu Ala Ala Ala Ala Ser Gly Ala His
210 215 220
Ile Gly Arg Ala Arg Tyr Leu Ala His Asn Asn Ala Ala Gln Arg Arg
225 230 235 240
Arg Ala Ser Ile Leu Asn Leu Ala Glu Leu Ile Phe His Gly Asp Val
245 250 255
Ala Phe Arg Ser Val Asn Thr Leu Val Lys Met Val Glu Thr Glu Ala
260 265 270
Lys Asp Ser Asn Lys Glu Lys Glu Glu Ala Glu Leu Glu Ala Val Arg
275 280 285
Ile Ser Leu Gly Met Gly Ala Lys Gly Lys Gly Val His Lys Ala Val
290 295 300
Arg Gly Gly Ala Gly Asp Phe Lys Ala Leu Glu Asp Gln Gln Lys Leu
305 310 315 320
Arg Arg Thr Arg Phe Leu Arg Asp Ser Leu Asp Leu Ala Leu Val Asp
325 330 335
Leu Ala Gly Ile Tyr Arg Asp Ala Ile Ile Ile Ser Ser Gln Ala Gln
340 345 350
Val Gly Leu Thr His Pro Asp Met Glu Gly Leu Ser Gln Glu Leu Ala
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Thr Lys Val Ser Gln Glu Gly Leu Leu Ala Cys Leu Asp Ala Ile Ser
370 375 380
Lys Cys Arg Glu Ser Phe Gly Phe Asn Val Arg Pro Ile Val Ala Met
385 390 395 400
Asp Ala Leu Val Gly Arg Leu Arg Lys Ala Tyr Lys Val Ser
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<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
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<400> 21
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agggtggtgt ccattgattc agatcgaaag gaccacacct gtg atc gcg gct tac 115
Val Ile Ala Ala Tyr
1 5
ggc gca tcc atc tct ttg gat gat tcc acc ctc acc atc tct tat tcc 163
Gly Ala Ser Ile Ser Leu Asp Asp Ser Thr Leu Thr Ile Ser Tyr Ser
10 15 20
cct ctt ctt gct gct ctt tct aag tcc agc gca caa tcg gaa tcg gtt 211
Pro Leu Leu Ala Ala Leu Ser Lys Ser Ser Ala Gln Ser Glu Ser Val
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gat ctg aca cag gtc tct gga gta tct gtg cag gat ccc act gct ttt 259
Asp Leu Thr Gln Val Ser Gly Val Ser Val Gln Asp Pro Thr Ala Phe
40 45 50
act cac ggc ttt tta aac ctg gag ggc gtg gat aaa tcc atc gcc ttt 307
Thr His Gly Phe Leu Asn Leu Glu Gly Val Asp Lys Ser Ile Ala Phe
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gcc cca aat agt tcg gca gat tta gct gcg ctg gca gct gat att gat 355
Ala Pro Asn Ser Ser Ala Asp Leu Ala Ala Leu Ala Ala Asp Ile Asp
70 75 80 85
gct gtg ttg aag ggt gaa aag cca cag cac ctg ggt ggc gga gcc cca 403
Ala Val Leu Lys Gly Glu Lys Pro Gln His Leu Gly Gly Gly Ala Pro
90 95 100
gta gtg cct tca gct cca tct act gtt gct ggt ctg aat ttc gtg ggc 451
Val Val Pro Ser Ala Pro Ser Thr Val Ala Gly Leu Asn Phe Val Gly
105 110 115
ttt gac gta gag acg gcc aat gat gat tgg ggt tcc atc tgc cag att 499
Phe Asp Val Glu Thr Ala Asn Asp Asp Trp Gly Ser Ile Cys Gln Ile
120 125 130
ggt ttg gtc aag tac gtc gat ggt gtg gag gaa tct tcg gag tca tgg 547
Gly Leu Val Lys Tyr Val Asp Gly Val Glu Glu Ser Ser Glu Ser Trp
135 140 145
ttg tgt act cct cct gag agc ctg aat ttc ttc aat gag atc aac att 595
Leu Cys Thr Pro Pro Glu Ser Leu Asn Phe Phe Asn Glu Ile Asn Ile
150 155 160 165
ggt att cac ggc atc acc cca gag atg gtt gct gat cag cct cgt ttt 643
Gly Ile His Gly Ile Thr Pro Glu Met Val Ala Asp Gln Pro Arg Phe
170 175 180
gca gac ctt gtg ccc aag atg gtg gag ttc gtt ggg gat ttg ccg ttg 691
Ala Asp Leu Val Pro Lys Met Val Glu Phe Val Gly Asp Leu Pro Leu
185 190 195
gtt gct cac aat gcg cag ttt gat ttc acc gca ttg tcg cgc gcg tgt 739
Val Ala His Asn Ala Gln Phe Asp Phe Thr Ala Leu Ser Arg Ala Cys
200 205 210
gct gcc tca ggg atc gat gtc cca gag atg att tat ggc tgc tcg ttg 787
Ala Ala Ser Gly Ile Asp Val Pro Glu Met Ile Tyr Gly Cys Ser Leu
215 220 225
acg ttg gca cgc aat gag aag ctg cag gtg gaa aac cat aag ctt cca 835
Thr Leu Ala Arg Asn Glu Lys Leu Gln Val Glu Asn His Lys Leu Pro
230 235 240 245
acg gtg gct agt cat tta ggg ttt gag ctg aaa aac cac cac gat gct 883
Thr Val Ala Ser His Leu Gly Phe Glu Leu Lys Asn His His Asp Ala
250 255 260
gct gaa gat gct cgc gcg tgt gct gcg att acc att gcg ttg gca aag 931
Ala Glu Asp Ala Arg Ala Cys Ala Ala Ile Thr Ile Ala Leu Ala Lys
265 270 275
cgc cac agc ttt gag ggc agc ttt gtg gat ttc gtt cac agc cgt ggt 979
Arg His Ser Phe Glu Gly Ser Phe Val Asp Phe Val His Ser Arg Gly
280 285 290
ttc acc atg gga acc gtg gat aac gcc cgg gtg tat ccg gtg ctg aag 1027
Phe Thr Met Gly Thr Val Asp Asn Ala Arg Val Tyr Pro Val Leu Lys
295 300 305
gat cgt tct gga gct aac gtt gcg ttg cag cgt cga aac ttt ggt ttg 1075
Asp Arg Ser Gly Ala Asn Val Ala Leu Gln Arg Arg Asn Phe Gly Leu
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gat gca ggc aag acc gaa gtc ccc gtg cag cca gct gtt gat cca gcg 1123
Asp Ala Gly Lys Thr Glu Val Pro Val Gln Pro Ala Val Asp Pro Ala
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tgg gaa acc ccg aag gcg gag cca aaa aag caa tct ggc cgc cgt gca 1171
Trp Glu Thr Pro Lys Ala Glu Pro Lys Lys Gln Ser Gly Arg Arg Ala
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gat gct gat ccg tcg agc att ctc tat ggc cag aat gtg acc ttg act 1267
Asp Ala Asp Pro Ser Ser Ile Leu Tyr Gly Gln Asn Val Thr Leu Thr
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Gly Asp Phe Glu Pro Tyr Glu Lys Gly Ala Leu Trp Gln Arg Ile Ala
390 395 400 405
gat caa ggt gcg ctg atc ggt aag aac gtg act aag aag acc acc att 1363
Asp Gln Gly Ala Leu Ile Gly Lys Asn Val Thr Lys Lys Thr Thr Ile
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ttg gtt gct ggc ccg tgg gca acg att acc agt aag caa aaa cgt gct 1411
Leu Val Ala Gly Pro Trp Ala Thr Ile Thr Ser Lys Gln Lys Arg Ala
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gag gag ttg aaa gaa aaa gga cag gac atc cag atc tgg gat gaa aag 1459
Glu Glu Leu Lys Glu Lys Gly Gln Asp Ile Gln Ile Trp Asp Glu Lys
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cag ctg ttt acg gct ctg ggg tta gat gaa cag ccc ccg ttt 1501
Gln Leu Phe Thr Ala Leu Gly Leu Asp Glu Gln Pro Pro Phe
455 460 465
taaaagaatt ttctaaaact cgggaacctt 1531
<210> 22
<211> 467
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 22
Val Ile Ala Ala Tyr Gly Ala Ser Ile Ser Leu Asp Asp Ser Thr Leu
1 5 10 15
Thr Ile Ser Tyr Ser Pro Leu Leu Ala Ala Leu Ser Lys Ser Ser Ala
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Gln Ser Glu Ser Val Asp Leu Thr Gln Val Ser Gly Val Ser Val Gln
35 40 45
Asp Pro Thr Ala Phe Thr His Gly Phe Leu Asn Leu Glu Gly Val Asp
50 55 60
Lys Ser Ile Ala Phe Ala Pro Asn Ser Ser Ala Asp Leu Ala Ala Leu
65 70 75 80
Ala Ala Asp Ile Asp Ala Val Leu Lys Gly Glu Lys Pro Gln His Leu
85 90 95
Gly Gly Gly Ala Pro Val Val Pro Ser Ala Pro Ser Thr Val Ala Gly
100 105 110
Leu Asn Phe Val Gly Phe Asp Val Glu Thr Ala Asn Asp Asp Trp Gly
115 120 125
Ser Ile Cys Gln Ile Gly Leu Val Lys Tyr Val Asp Gly Val Glu Glu
130 135 140
Ser Ser Glu Ser Trp Leu Cys Thr Pro Pro Glu Ser Leu Asn Phe Phe
145 150 155 160
Asn Glu Ile Asn Ile Gly Ile His Gly Ile Thr Pro Glu Met Val Ala
165 170 175
Asp Gln Pro Arg Phe Ala Asp Leu Val Pro Lys Met Val Glu Phe Val
180 185 190
Gly Asp Leu Pro Leu Val Ala His Asn Ala Gln Phe Asp Phe Thr Ala
195 200 205
Leu Ser Arg Ala Cys Ala Ala Ser Gly Ile Asp Val Pro Glu Met Ile
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Ser Gly Arg Arg Ala Pro Trp Asp Lys Val Ala Thr Pro Glu Val Ile
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Pro Asp Pro Asn Pro Asp Ala Asp Pro Ser Ser Ile Leu Tyr Gly Gln
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Met Pro Thr Ile Gln
1 5
cag ctg gtc cgt aag gcc cgc cac gat aag tcc gac aag gtg gct acc 163
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gcg gca ctg aag ggt tcc cct cag cgt cgt ggc gta tgc acc cgt gtg 211
Ala Ala Leu Lys Gly Ser Pro Gln Arg Arg Gly Val Cys Thr Arg Val
25 30 35
tac acc acc acc cct aag aag cct aac tct gct ctt cgt aag gtc gct 259
Tyr Thr Thr Thr Pro Lys Lys Pro Asn Ser Ala Leu Arg Lys Val Ala
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cgt gtg cgc ctt acc tcc ggc atc gag gtt tcc gct tac atc cct ggt 307
Arg Val Arg Leu Thr Ser Gly Ile Glu Val Ser Ala Tyr Ile Pro Gly
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Glu Gly His Asn Leu Gln Glu His Ser Met Val Leu Val Arg Gly Gly
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cgt gtt aag gac ctc cca ggt gtc cgt tac aag atc gtc cgt ggc gca 403
Arg Val Lys Asp Leu Pro Gly Val Arg Tyr Lys Ile Val Arg Gly Ala
90 95 100
ctg gat acc cag ggt gtt aag gac cgc aag cag gct cgt tcc cgc tac 451
Leu Asp Thr Gln Gly Val Lys Asp Arg Lys Gln Ala Arg Ser Arg Tyr
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ggc gcg aag agg gga taattaaaaa tgcgtaaatc agcagctcct 496
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<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 24
Met Pro Thr Ile Gln Gln Leu Val Arg Lys Ala Arg His Asp Lys Ser
1 5 10 15
Asp Lys Val Ala Thr Ala Ala Leu Lys Gly Ser Pro Gln Arg Arg Gly
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Leu Arg Lys Val Ala Arg Val Arg Leu Thr Ser Gly Ile Glu Val Ser
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ttctcaaggc tccctctcct ttaagttcgt ggccccagcg ccagcttttt tcataaaaac 60
tcaacaggca ctgtgggacc ccttcacttt gaaagacatc atg cgc ccc tct tcc 115
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cgg cca ctt ggc ctc gtc cta tgc acc gca ctg gca tca acg atc atc 163
Arg Pro Leu Gly Leu Val Leu Cys Thr Ala Leu Ala Ser Thr Ile Ile
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gcc atc gcc cca cat acc gcc agc tac ggc tac tac gtt gat gca tgg 259
Ala Ile Ala Pro His Thr Ala Ser Tyr Gly Tyr Tyr Val Asp Ala Trp
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gac acc aac gtt tcc act gat ctg aat cca tca agt aat gca gct gtt 307
Asp Thr Asn Val Ser Thr Asp Leu Asn Pro Ser Ser Asn Ala Ala Val
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ggc gta ctg gag gaa atg ctt gag ctg tgg acc cca ggc gaa gaa tgg 355
Gly Val Leu Glu Glu Met Leu Glu Leu Trp Thr Pro Gly Glu Glu Trp
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aac acc ggc gtc aag gtt gac ccc acc gtg ctg gat tcc aac atc gca 403
Asn Thr Gly Val Lys Val Asp Pro Thr Val Leu Asp Ser Asn Ile Ala
90 95 100
cag tct gtg gca atc tcc cag cag gcg acc gat gct cag caa gaa cgt 451
Gln Ser Val Ala Ile Ser Gln Gln Ala Thr Asp Ala Gln Gln Glu Arg
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gct tgg gtt att gat cgc cgc aac cag aac tac acc gca acc gac ggt 499
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120 125 130
ctt ggc gca tac gca gat agt tac cgc gag acc gca cag gtg ggc acc 547
Leu Gly Ala Tyr Ala Asp Ser Tyr Arg Glu Thr Ala Gln Val Gly Thr
135 140 145
acc atc cct gac gtt gtt cca gct gat gcc acc acc gtg aag tac aac 595
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150 155 160 165
gat ggc ggc aat gtg aat ggc aat tgg gca gag acc ggt gga gaa ctc 643
Asp Gly Gly Asn Val Asn Gly Asn Trp Ala Glu Thr Gly Gly Glu Leu
170 175 180
gga tcc act gtt gat cta att gaa gct atc cgt cag cat gcc gca acc 691
Gly Ser Thr Val Asp Leu Ile Glu Ala Ile Arg Gln His Ala Ala Thr
185 190 195
agc aac aat gcc aag gcg tac tac caa tac cca cgc ccc tac cgc tgg 739
Ser Asn Asn Ala Lys Ala Tyr Tyr Gln Tyr Pro Arg Pro Tyr Arg Trp
200 205 210
act gaa tcc atc gaa cca gaa gcc tgg ggc gag ggc gtt gac atg cca 787
Thr Glu Ser Ile Glu Pro Glu Ala Trp Gly Glu Gly Val Asp Met Pro
215 220 225
gag tat gca aac cca ctg cgc aag gat gaa tcc gaa gct gcc agc gat 835
Glu Tyr Ala Asn Pro Leu Arg Lys Asp Glu Ser Glu Ala Ala Ser Asp
230 235 240 245
ggc ggt ttc cct tcc gga cac acc tcc gca ggc ggc atg gca acc aac 883
Gly Gly Phe Pro Ser Gly His Thr Ser Ala Gly Gly Met Ala Thr Asn
250 255 260
ggc ctg gct tac gct ttc cca cag caa tac gat aaa ctg ctc atg act 931
Gly Leu Ala Tyr Ala Phe Pro Gln Gln Tyr Asp Lys Leu Leu Met Thr
265 270 275
gca gcg gaa atc ggc gaa agc cgc atc cag ctg ggc atg cac tct ccg 979
Ala Ala Glu Ile Gly Glu Ser Arg Ile Gln Leu Gly Met His Ser Pro
280 285 290
ctt gat gtt att ggc ggc cgt gtt cta tcc acc gcg att act gca ggt 1027
Leu Asp Val Ile Gly Gly Arg Val Leu Ser Thr Ala Ile Thr Ala Gly
295 300 305
gca ctt aat gat ccg aat ctc gac tcg gtg aag gct gaa gcc ttc gat 1075
Ala Leu Asn Asp Pro Asn Leu Asp Ser Val Lys Ala Glu Ala Phe Asp
310 315 320 325
gat gct cag gca tgg atc agt aac cag agc gac atc acc acc aac act 1123
Asp Ala Gln Ala Trp Ile Ser Asn Gln Ser Asp Ile Thr Thr Asn Thr
330 335 340
cgc gat ttt gat gag caa ctc gcc gag tac acc aac ttc ctc acc ttc 1171
Arg Asp Phe Asp Glu Gln Leu Ala Glu Tyr Thr Asn Phe Leu Thr Phe
345 350 355
ggc ttc gag cag tcc ggc gac acc acc caa gac atg cgc gtg cca aag 1219
Gly Phe Glu Gln Ser Gly Asp Thr Thr Gln Asp Met Arg Val Pro Lys
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gga gct gag gct ctg ctg gaa acc cgc ctt ccg tac ctt gat gac gaa 1267
Gly Ala Glu Ala Leu Leu Glu Thr Arg Leu Pro Tyr Leu Asp Asp Glu
375 380 385
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Gln Arg Arg Trp Val Leu His Ser Thr Gly Leu Glu Ser Gly Phe Pro
390 395 400 405
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410 415 420
cag gct ggc tac agt gca ttc gat acc aac gtt gac gtc acc atg aat 1411
Gln Ala Gly Tyr Ser Ala Phe Asp Thr Asn Val Asp Val Thr Met Asn
425 430 435
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Glu Gly Ala Gly Ser Leu Thr Lys Asn Gly Ser Gly Glu Leu Thr Leu
455 460 465
tca ggt gac aac tcc tac acc ggt gga acc acc atc acc gcg ggc acc 1555
Ser Gly Asp Asn Ser Tyr Thr Gly Gly Thr Thr Ile Thr Ala Gly Thr
470 475 480 485
ttg gtt gct gca act gag tca gct ctg gga gca ggc gat ctc acc atc 1603
Leu Val Ala Ala Thr Glu Ser Ala Leu Gly Ala Gly Asp Leu Thr Ile
490 495 500
aac gat ggt gca acc ttg aag atc acc cag cct gtc acc gtg gat gga 1651
Asn Asp Gly Ala Thr Leu Lys Ile Thr Gln Pro Val Thr Val Asp Gly
505 510 515
acc gca aac ctg gga gga act ctg cac gtt gcc ctt cct gtt ggc acc 1699
Thr Ala Asn Leu Gly Gly Thr Leu His Val Ala Leu Pro Val Gly Thr
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aac cac gtc acc gtg atc gat gct gca tca att tcc ggt gaa ttt gat 1747
Asn His Val Thr Val Ile Asp Ala Ala Ser Ile Ser Gly Glu Phe Asp
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gag gtt att gtt gat ggc gca gtt gac gct cag gtg agc tac gac aac 1795
Glu Val Ile Val Asp Gly Ala Val Asp Ala Gln Val Ser Tyr Asp Asn
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Gly Ser Val Val Ile Thr Thr Gly Ala Pro Ser Asp Asp Val Lys Glu
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act ggc tct tct gct ggc gga att ctt gcc atc gtg gca gcc ctg ggt 1891
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Gly Ile Ala Ala Leu Ile Phe Gly Ala Phe Thr Gln Phe Gly Phe Pro
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1 5
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tac gac gct tcc atc gac gta gct atc cgc ctg ggc gtt gac cca cgt 259
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Gly Gly Asp Val Phe Ser Phe Leu Met Glu Met Glu His Ile Ser Phe
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105 110 115
tac caa ggt ggt ggc ccg ggg cgc cgt gag gaa cct gga act cgc cag 499
Tyr Gln Gly Gly Gly Pro Gly Arg Arg Glu Glu Pro Gly Thr Arg Gln
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cgc ctt att ttg gct aat aag gct gcg cac cag ttt tat cgc gag caa 547
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tta gaa acc ccc gaa gca caa cct ggc agg gag ttt ttg ctg cag cgt 595
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Lys Met Gly Lys Tyr Met Asn Thr Pro Glu Thr Leu Leu Tyr Lys Lys
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Ser Lys Val Leu Phe Gly Leu Asp Ser Ala Lys Lys Ala Ile Ala Ala
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Gly His Gln Ala Val Val Val Glu Gly Tyr Thr Asp Val Met Ala Met
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Tyr Phe Arg Gly Glu Leu Ile Tyr Thr Phe Asp Gly Asp Glu Ala Gly
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Ile Val Ala Asp Ile Arg Asp Lys Thr Leu Gln Ser Glu Tyr Ala Arg
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Arg Ala Lys Arg Phe Asp Gln Pro Leu Glu Asp Gln Ser Leu Arg Pro
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acc atg gcg ctg cct aat ccg cgg aac cct gtg ctg tgg cag gaa cgg 1603
Thr Met Ala Leu Pro Asn Pro Arg Asn Pro Val Leu Trp Gln Glu Arg
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Glu Ser Leu Lys Ile Ala Leu Gln Tyr Pro Glu Leu Ala Gly Ser Tyr
505 510 515
ttt gat gga ctg cca acc gat agc ttc acc aac cct gcc tac cgc atg 1699
Phe Asp Gly Leu Pro Thr Asp Ser Phe Thr Asn Pro Ala Tyr Arg Met
520 525 530
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Val Arg Asp Ala Ile Ser Ala Ala Gly Gly Cys Glu Arg Ala Leu Asp
535 540 545
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Gly Thr Asp Trp Leu Pro Ala Val Ser Glu Asn Met Thr Asp Ile Leu
550 555 560 565
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Gly Thr Ser Leu Val Ser Glu Leu Ala Met Glu Pro Ile Glu Val Glu
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Ala Gln Asp Leu Glu Ser Tyr Thr Asp Gly Val Leu Ser Arg Leu Gln
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Glu Thr Arg Val Gly Asn Gln Ile Ala Ile Leu Lys Gly Gln Leu Gln
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115 120 125
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Phe Tyr Arg Glu Gln Leu Glu Thr Pro Glu Ala Gln Pro Gly Arg Glu
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Phe Leu Leu Gln Arg Gly Phe Gly Gln Gln His Ile Tyr His Phe Glu
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Lys Lys Gly Phe Glu Phe Lys Glu Leu Glu Ala Ala Gly Leu Ser Lys
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Leu Phe Asp Asp Asp Lys Met Gly Lys Tyr Met Asn Thr Pro Glu Thr
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Leu Leu Tyr Lys Lys Ser Lys Val Leu Phe Gly Leu Asp Ser Ala Lys
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25 30 35
ggt gag ttc act gct gcg gca gat ctc ttg gct agc gga act ggg ccc 259
Gly Glu Phe Thr Ala Ala Ala Asp Leu Leu Ala Ser Gly Thr Gly Pro
40 45 50
ttc gcc att gat acg gaa cgc gcg tcc ggt ttt aga tac gat gac cgc 307
Phe Ala Ile Asp Thr Glu Arg Ala Ser Gly Phe Arg Tyr Asp Asp Arg
55 60 65
gca ttt ttg att cag atc cgg cgc cgt ggc agc gga act ctc cta ttc 355
Ala Phe Leu Ile Gln Ile Arg Arg Arg Gly Ser Gly Thr Leu Leu Phe
70 75 80 85
gac ccg gag cag ttc cgt cct gaa tta act cag gcg tta aag ccg gtg 403
Asp Pro Glu Gln Phe Arg Pro Glu Leu Thr Gln Ala Leu Lys Pro Val
90 95 100
ctc aat ggt caa gag tgg atc att cac gca gca agc acc gat ttg ccg 451
Leu Asn Gly Gln Glu Trp Ile Ile His Ala Ala Ser Thr Asp Leu Pro
105 110 115
agc ctt gcg tgg ctt gat ctt cac ccc gga tta ctc ttt gat aca gaa 499
Ser Leu Ala Trp Leu Asp Leu His Pro Gly Leu Leu Phe Asp Thr Glu
120 125 130
ctt gct ggc cgc tta gcc gga ttt gat cac gtt aat ctc gct gcc atg 547
Leu Ala Gly Arg Leu Ala Gly Phe Asp His Val Asn Leu Ala Ala Met
135 140 145
gtg gaa cag att ttt gat ctc cac ttg ctc aaa ggc cac ggt tcg gaa 595
Val Glu Gln Ile Phe Asp Leu His Leu Leu Lys Gly His Gly Ser Glu
150 155 160 165
gat tgg tcc aag cgt cct ctg ccg gaa tct tgg ctc aac tac gca gca 643
Asp Trp Ser Lys Arg Pro Leu Pro Glu Ser Trp Leu Asn Tyr Ala Ala
170 175 180
ctc gat gtg gag atg ctg ctg gag ctt gcc gat gtc atg gct gaa atc 691
Leu Asp Val Glu Met Leu Leu Glu Leu Ala Asp Val Met Ala Glu Ile
185 190 195
ctg gat cag cag gga aaa ctc ccc tgg gct gaa cag gaa ttt gtc cat 739
Leu Asp Gln Gln Gly Lys Leu Pro Trp Ala Glu Gln Glu Phe Val His
200 205 210
att gtg gat caa ttc gcc acg atg acc gaa cct tcc gaa acg tcc tgg 787
Ile Val Asp Gln Phe Ala Thr Met Thr Glu Pro Ser Glu Thr Ser Trp
215 220 225
cag gac ctt aaa ggg ctg tcc act ctc aaa cga cca gac caa tta gtt 835
Gln Asp Leu Lys Gly Leu Ser Thr Leu Lys Arg Pro Asp Gln Leu Val
230 235 240 245
gtg gcc cgt gaa atg tgg ttg gaa cgc gac tct ttc gca gcc tcc cgc 883
Val Ala Arg Glu Met Trp Leu Glu Arg Asp Ser Phe Ala Ala Ser Arg
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gac ctg gcg ccc ggt aaa gtg ctg tcc aac aaa gtc atc gtg gaa gtc 931
Asp Leu Ala Pro Gly Lys Val Leu Ser Asn Lys Val Ile Val Glu Val
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gcc cgt gtt ctc ccc cgc acc ccg gca gaa tta gcg cag gtc aag gga 979
Ala Arg Val Leu Pro Arg Thr Pro Ala Glu Leu Ala Gln Val Lys Gly
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ttc ccc ggt cga tcc cag ggt gcc acc aaa cgc tgg ttc cgc atc atc 1027
Phe Pro Gly Arg Ser Gln Gly Ala Thr Lys Arg Trp Phe Arg Ile Ile
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acc cgg gcg ctc aaa tcc cct cgc agg aac tgg cca aag cct cag cag 1075
Thr Arg Ala Leu Lys Ser Pro Arg Arg Asn Trp Pro Lys Pro Gln Gln
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cgc aag gac ggc atc ccc gat cgt cgc gcg tgg gcg tcc tac tac cca 1123
Arg Lys Asp Gly Ile Pro Asp Arg Arg Ala Trp Ala Ser Tyr Tyr Pro
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Glu Glu His Glu Val Leu Gln Glu Ile Arg Ala Leu Ile Asp Asp Leu
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gcc gcc gat atc aac gtt ccc ggc gag aat atc ctt cag cct tca act 1219
Ala Ala Asp Ile Asn Val Pro Gly Glu Asn Ile Leu Gln Pro Ser Thr
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ctg cga gta gct gtg tgg atg gct aaa cac acc ggc gag atc cat aat 1267
Leu Arg Val Ala Val Trp Met Ala Lys His Thr Gly Glu Ile His Asn
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Ala Glu Thr Leu Asn Ala Val Leu Arg Asp Tyr Gly Ala Arg Gln Trp
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caa att gac cag act ttt ccg att ctg tcc gcc aac ttg ctg aag ctc 1363
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<213> Corynebacterium glutamicum
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50 55 60
Arg Tyr Asp Asp Arg Ala Phe Leu Ile Gln Ile Arg Arg Arg Gly Ser
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Ser Ala Ala Glu Arg Phe Glu Glu Ile Val Arg Thr Ala Gly Tyr Met
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Ser Asp Ala Val Gly Ala Asp Ala Val Val Phe Ala Gly Glu Ser Val
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gat cca ctt ggc gca aaa gct gtg cgc tcc tca gcg gga tcg ctg ttt 643
Asp Pro Leu Gly Ala Lys Ala Val Arg Ser Ser Ala Gly Ser Leu Phe
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cac att cca gtg gca cgc aac aac aac atc gca gat gtc ttg ggg cag 691
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ctt cgt tcc aag ggt ctg cag atc ctt gcg acc tca gcc gat ggg gaa 739
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<213> Corynebacterium glutamicum
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cgc acc gtc atc gtt atc acc gag ctg cca tac cag gtc aac ccg gat 931
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265 270 275
aac ctg atc tct aat atc gcg gag cag gtg cgc gac ggc aag ctc gtg 979
Asn Leu Ile Ser Asn Ile Ala Glu Gln Val Arg Asp Gly Lys Leu Val
280 285 290
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Ile Glu Leu Glu Ile Ala Asp Leu Lys Ala Ile Leu Ala Ser Pro Glu
455 460 465
cgt cag cgc acc atc gtt cgc gat gag ctg acc gaa atc gtg gaa aag 1555
Arg Gln Arg Thr Ile Val Arg Asp Glu Leu Thr Glu Ile Val Glu Lys
470 475 480 485
tac ggc gac gag cgt cgt tcc cag atc atc gct gcc acc ggc gac gtg 1603
Tyr Gly Asp Glu Arg Arg Ser Gln Ile Ile Ala Ala Thr Gly Asp Val
490 495 500
tct gaa gaa gac ctc att gcg cgt gaa aac gtt gtc atc acc att acc 1651
Ser Glu Glu Asp Leu Ile Ala Arg Glu Asn Val Val Ile Thr Ile Thr
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tcc acc ggt tac gca aag cgc acc aag gtc gat gcc tac aag tcg caa 1699
Ser Thr Gly Tyr Ala Lys Arg Thr Lys Val Asp Ala Tyr Lys Ser Gln
520 525 530
aag cgt ggc ggc aag ggt gtt cgt ggc gca gag ctc aag caa gat gac 1747
Lys Arg Gly Gly Lys Gly Val Arg Gly Ala Glu Leu Lys Gln Asp Asp
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att gtt cgt cac ttc ttc gtc agc tcc acc cac gac tgg att ttg ttc 1795
Ile Val Arg His Phe Phe Val Ser Ser Thr His Asp Trp Ile Leu Phe
550 555 560 565
ttc acc aac tac ggt cgc gtg tac cgc ctc aag gca ttc gaa ctt cca 1843
Phe Thr Asn Tyr Gly Arg Val Tyr Arg Leu Lys Ala Phe Glu Leu Pro
570 575 580
gag gca tcc cgc acc gca cgt gga cag cac gtg gcc aac ctt ctg gaa 1891
Glu Ala Ser Arg Thr Ala Arg Gly Gln His Val Ala Asn Leu Leu Glu
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ttc caa cct ggt gag caa atc gcc cag gtc atc cag ttg gaa agc tac 1939
Phe Gln Pro Gly Glu Gln Ile Ala Gln Val Ile Gln Leu Glu Ser Tyr
600 605 610
aac gac ttc cca tac ctg gtg ctc gca acc gca cac ggt cgc gtg aag 1987
Asn Asp Phe Pro Tyr Leu Val Leu Ala Thr Ala His Gly Arg Val Lys
615 620 625
aag tcc cgc ctg ctc gac tac gaa tca gca cgt tcc ggt ggc ctc atc 2035
Lys Ser Arg Leu Leu Asp Tyr Glu Ser Ala Arg Ser Gly Gly Leu Ile
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gcc atc aac ctg aac gag gac gat cgc ctc atc ggc gcc gca ctt tgc 2083
Ala Ile Asn Leu Asn Glu Asp Asp Arg Leu Ile Gly Ala Ala Leu Cys
650 655 660
ggt gaa gaa gac gat ctg ctg ctg gtc tct gaa ttc gga cag tcc atc 2131
Gly Glu Glu Asp Asp Leu Leu Leu Val Ser Glu Phe Gly Gln Ser Ile
665 670 675
cgc ttc acc gcc gac gat gag cag ctc cgc ccc atg ggc cgc gcc acc 2179
Arg Phe Thr Ala Asp Asp Glu Gln Leu Arg Pro Met Gly Arg Ala Thr
680 685 690
gcc ggt gtc aag ggc atg cgc ttc cgc gac aac gac caa ctg ctg tcc 2227
Ala Gly Val Lys Gly Met Arg Phe Arg Asp Asn Asp Gln Leu Leu Ser
695 700 705
atg tcc gtg gtc cgc gac ggc gaa ttc ctc ctc gtt gcc acc tcc ggc 2275
Met Ser Val Val Arg Asp Gly Glu Phe Leu Leu Val Ala Thr Ser Gly
710 715 720 725
ggc tac ggc aag cgc acc cca ctt gag gat tac tcc acc cag ggc cgt 2323
Gly Tyr Gly Lys Arg Thr Pro Leu Glu Asp Tyr Ser Thr Gln Gly Arg
730 735 740
ggt ggc ctc ggc gtg gtg acc ttc aag tac acc ccg aag cgc ggt cgc 2371
Gly Gly Leu Gly Val Val Thr Phe Lys Tyr Thr Pro Lys Arg Gly Arg
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ctc gtc agc gcc atc gca gtt gag gaa gat gac gag atc ttc gcc atc 2419
Leu Val Ser Ala Ile Ala Val Glu Glu Asp Asp Glu Ile Phe Ala Ile
760 765 770
acc tcc gcc ggc ggc gtt gtt cgc acc gaa gtc aag cag atc cga cca 2467
Thr Ser Ala Gly Gly Val Val Arg Thr Glu Val Lys Gln Ile Arg Pro
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tcc tcc cgt gca aca atg ggt gtt cga ctg gtc aac ttg gaa gaa ggt 2515
Ser Ser Arg Ala Thr Met Gly Val Arg Leu Val Asn Leu Glu Glu Gly
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Val Glu Leu Leu Ala Ile Asp Lys Asn Val Glu Asp Gln Gly Glu Ala
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tcc gca gaa gca gta gca aag ggt gca gtc gaa gga cca gca tcc aag 2611
Ser Ala Glu Ala Val Ala Lys Gly Ala Val Glu Gly Pro Ala Ser Lys
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act gct gcc gaa gaa acc gac tcc gtt gac aac gga tcc gac gaa aac 2659
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Ile Val Gly Arg Ala Leu Pro Glu Val Arg Asp Gly Leu Lys Pro Val
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85 90 95
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100 105 110
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Ile Val Arg Arg Thr Gln Tyr Arg Leu Asp Lys Ala Glu Glu Arg Ala
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1 5
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aat gag ctg cga gct ctc gct gac tct gga gat aag aag gct cgt cgc 211
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att acg gaa acg agc cct gac aaa tgg cta att gat ggc gat acc cct 1171
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tta gag gta gag cga aac gtg cct gta aaa ctg gcg ctc gct ctg ctc 1411
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<213> Corynebacterium glutamicum
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Trp Arg Asn Pro Pro Glu Val Leu Thr Leu Ala Asn Ala Val Ser Arg
360 365 370
gag gtg ctt ggg tcg ccc gat gcg ccg act cgg acg gtg cag ccg ctg 1267
Glu Val Leu Gly Ser Pro Asp Ala Pro Thr Arg Thr Val Gln Pro Leu
375 380 385
cag cct cgg gaa ggc gca ccg acc ggt gaa gtg tcg ctc gga tgg ttt 1315
Gln Pro Arg Glu Gly Ala Pro Thr Gly Glu Val Ser Leu Gly Trp Phe
390 395 400 405
ggt acg gcg gcg cag gaa cgt gag ttt gtg gct gat gag atg gtg aag 1363
Gly Thr Ala Ala Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Asp Glu Met Val Lys
410 415 420
cat tgg aat gcg cgg gag gag aag ggc aca ttt act gct gcg gtg ttg 1411
His Trp Asn Ala Arg Glu Glu Lys Gly Thr Phe Thr Ala Ala Val Leu
425 430 435
gtg cgt aag aag cgt cat tcg gca ccg atg gcg gag gag ctg acc aag 1459
Val Arg Lys Lys Arg His Ser Ala Pro Met Ala Glu Glu Leu Thr Lys
440 445 450
cgt ggc atc ccc gtg gag atc gtc gga ctg tct ggt ttg ttg gat atc 1507
Arg Gly Ile Pro Val Glu Ile Val Gly Leu Ser Gly Leu Leu Asp Ile
455 460 465
cct gag att gcc gat cta att tct cta gca act atg ctc gtg cgt cct 1555
Pro Glu Ile Ala Asp Leu Ile Ser Leu Ala Thr Met Leu Val Arg Pro
470 475 480 485
cac gat aat cgg gct gcg ttg cgt att ttg gcg ggc ccg cat gtg ggt 1603
His Asp Asn Arg Ala Ala Leu Arg Ile Leu Ala Gly Pro His Val Gly
490 495 500
ttg ggt gtg gcg gat ttg cag cgg ttg cag ggt cgt gcg cgc aat att 1651
Leu Gly Val Ala Asp Leu Gln Arg Leu Gln Gly Arg Ala Arg Asn Ile
505 510 515
gcg ggt cgt gtg tct cgt gag cgt cga gag aag aac cca gat cca tta 1699
Ala Gly Arg Val Ser Arg Glu Arg Arg Glu Lys Asn Pro Asp Pro Leu
520 525 530
gcg gag ctt gat gcg att att gag gaa gcg act gcg att gaa ccg gaa 1747
Ala Glu Leu Asp Ala Ile Ile Glu Glu Ala Thr Ala Ile Glu Pro Glu
535 540 545
gct gtg gtt ggt cta gct gat gcg gtt gcc gat ttg ggt gag ggc gat 1795
Ala Val Val Gly Leu Ala Asp Ala Val Ala Asp Leu Gly Glu Gly Asp
550 555 560 565
cgt ttc agc gag gag ggg ttg agt cgt ttg aag cga ctg gcc act cag 1843
Arg Phe Ser Glu Glu Gly Leu Ser Arg Leu Lys Arg Leu Ala Thr Gln
570 575 580
ttg cga tat ttg cgt aag tac agc ttg ggt cgt tcg gtg gcg gac att 1891
Leu Arg Tyr Leu Arg Lys Tyr Ser Leu Gly Arg Ser Val Ala Asp Ile
585 590 595
ttt gct gat att gaa act gtg ttc aat att cgc acg gag gtg ttg tcg 1939
Phe Ala Asp Ile Glu Thr Val Phe Asn Ile Arg Thr Glu Val Leu Ser
600 605 610
agg cag gat cct cac gcc gat ggt gct gct gga acg gtg cat ttg gat 1987
Arg Gln Asp Pro His Ala Asp Gly Ala Ala Gly Thr Val His Leu Asp
615 620 625
aag ttc gca gaa gag gtc gca agt cac ggt ggc att ggg ctg cct gag 2035
Lys Phe Ala Glu Glu Val Ala Ser His Gly Gly Ile Gly Leu Pro Glu
630 635 640 645
ctg ttg gac tat ttt gag ctc gcg aag gat cag gaa gag ggc ctt gag 2083
Leu Leu Asp Tyr Phe Glu Leu Ala Lys Asp Gln Glu Glu Gly Leu Glu
650 655 660
ccg ggt gag gtg acg gtt cgc agc gat cgt gtg cag atc ctt act gtc 2131
Pro Gly Glu Val Thr Val Arg Ser Asp Arg Val Gln Ile Leu Thr Val
665 670 675
cac aag gct aag ggt ttg gag tgg gat atc gtt tcg gtg ttg cat gcc 2179
His Lys Ala Lys Gly Leu Glu Trp Asp Ile Val Ser Val Leu His Ala
680 685 690
gat gcg tcg acc tat gat gcg aag gct tcg acg tgg ttg aaa aat gtc 2227
Asp Ala Ser Thr Tyr Asp Ala Lys Ala Ser Thr Trp Leu Lys Asn Val
695 700 705
acg atg atc ccg tcg tcg ctt cgt ggc gat gcc ggg acc ggc gcc cca 2275
Thr Met Ile Pro Ser Ser Leu Arg Gly Asp Ala Gly Thr Gly Ala Pro
710 715 720 725
gag atg gat acc tct gag gcg gac gat cgc aaa gct ctg gaa gat tcc 2323
Glu Met Asp Thr Ser Glu Ala Asp Asp Arg Lys Ala Leu Glu Asp Ser
730 735 740
ggc aag gag tac acc agt gaa gtg cgt gag ggg tta cgg gag gaa aat 2371
Gly Lys Glu Tyr Thr Ser Glu Val Arg Glu Gly Leu Arg Glu Glu Asn
745 750 755
tcg cga ctg ttt tat gtc ggt atc acg cgc agc gaa cgg gtg ttg ctc 2419
Ser Arg Leu Phe Tyr Val Gly Ile Thr Arg Ser Glu Arg Val Leu Leu
760 765 770
gtg acg ggt tcg gcg ctt gat gaa agt ggc aca aag gcg aaa gtt ccc 2467
Val Thr Gly Ser Ala Leu Asp Glu Ser Gly Thr Lys Ala Lys Val Pro
775 780 785
tac ggc cac ttg gag atc ctt cgg gat aaa gcg ccg gag tgc gtg gtg 2515
Tyr Gly His Leu Glu Ile Leu Arg Asp Lys Ala Pro Glu Cys Val Val
790 795 800 805
tcg tgg tgg gaa ggg gaa gag ggg gac gtc gaa aag caa aaa cct gcg 2563
Ser Trp Trp Glu Gly Glu Glu Gly Asp Val Glu Lys Gln Lys Pro Ala
810 815 820
gaa ggc gtc ttc ccg caa ctg ctc gcc gct gac tcc tcc ggc gcg gat 2611
Glu Gly Val Phe Pro Gln Leu Leu Ala Ala Asp Ser Ser Gly Ala Asp
825 830 835
ttg gtg cgc ggc ccg cgc gcc gag cca aac aac gag ggc ggg ctg gaa 2659
Leu Val Arg Gly Pro Arg Ala Glu Pro Asn Asn Glu Gly Gly Leu Glu
840 845 850
agc ttg tgg gaa aaa gag gta agc gcg ctt atc gac gaa cac cgc cgc 2707
Ser Leu Trp Glu Lys Glu Val Ser Ala Leu Ile Asp Glu His Arg Arg
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ctt tcc aac ccc atc gtc gaa gtc gaa acg ccc cgc gaa ctc acg gcc 2755
Leu Ser Asn Pro Ile Val Glu Val Glu Thr Pro Arg Glu Leu Thr Ala
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acc gac ctc gtc tct atg aaa aac aat ccc gaa cag ttc gcc cga cga 2803
Thr Asp Leu Val Ser Met Lys Asn Asn Pro Glu Gln Phe Ala Arg Arg
890 895 900
atg cgt cgc cct gtc ccg ttc aaa cca aac acc tac gca aaa cgc ggc 2851
Met Arg Arg Pro Val Pro Phe Lys Pro Asn Thr Tyr Ala Lys Arg Gly
905 910 915
aca ctg ttc cac caa tgg ctc gaa gat cgg ttt ggc agc acc gcg ctt 2899
Thr Leu Phe His Gln Trp Leu Glu Asp Arg Phe Gly Ser Thr Ala Leu
920 925 930
ctc gac gaa acc gag ctc ccc ggc atc gac gag gac tac tcg gat gac 2947
Leu Asp Glu Thr Glu Leu Pro Gly Ile Asp Glu Asp Tyr Ser Asp Asp
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gca ttc atc gaa ctc cgc gac gcg ttc cta gga tct act tgg gaa aac 2995
Ala Phe Ile Glu Leu Arg Asp Ala Phe Leu Gly Ser Thr Trp Glu Asn
950 955 960 965
cgc aca ccg gaa ttc gtc gaa cat ccc ttc gaa gta acg atc ggc gaa 3043
Arg Thr Pro Glu Phe Val Glu His Pro Phe Glu Val Thr Ile Gly Glu
970 975 980
cac gtc atc cgc ggc cgc atg gac gcc gtc ttc cac acc gat ggc acc 3091
His Val Ile Arg Gly Arg Met Asp Ala Val Phe His Thr Asp Gly Thr
985 990 995
tgg atg gtg gtc gac tgg aaa acc gga cgc acc cca acc ggc ccc gaa 3139
Trp Met Val Val Asp Trp Lys Thr Gly Arg Thr Pro Thr Gly Pro Glu
1000 1005 1010
atg gac gca gcg atc atc cag ctc gct gtc tat aga ctc gcc tgg gca 3187
Met Asp Ala Ala Ile Ile Gln Leu Ala Val Tyr Arg Leu Ala Trp Ala
1015 1020 1025
cga ctc aaa ggc ctc gaa cct gaa gaa gtc cgc gca gca ttc cat tac 3235
Arg Leu Lys Gly Leu Glu Pro Glu Glu Val Arg Ala Ala Phe His Tyr
1030 1035 1040 1045
gtc gcc cac gat cac acc ttt gag ccg aac gat ctg ccg act caa gaa 3283
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gaa cta gcc cgg ctg ctc agt cag gaa tgatgcgcct aagatcaaac 3330
Glu Leu Ala Arg Leu Leu Ser Gln Glu
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aagaatgaaa 3340
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<211> 1070
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 42
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1 5 10 15
His Ala Pro Thr Asp Gln Gln Ser Ala Ile Ile Gly Ser Glu Pro Gly
20 25 30
Pro Leu Leu Val Val Ala Gly Ala Gly Ala Gly Lys Thr Glu Thr Met
35 40 45
Ala Ala Arg Val Val Trp Leu Val Ala Asn Gly Phe Val Ala Pro Asp
50 55 60
Gln Val Leu Gly Leu Thr Phe Thr Arg Lys Ala Ala Gln Gln Leu Ser
65 70 75 80
Gln Arg Ile Arg Lys Arg Leu Glu Thr Leu Ala Gly Val Pro Arg Leu
85 90 95
Lys Asp Ile Asp Pro Thr Gly Gln Leu Glu Lys Asn Leu Gln Ala Ile
100 105 110
Thr Pro Thr Val Ser Thr Tyr Asp Ser Tyr Ala Gly Thr Leu Ile Arg
115 120 125
Glu Tyr Gly Leu Leu Leu Pro Val Glu Pro Ser Ala Arg Leu Ile Thr
130 135 140
Gln Thr Glu Leu Tyr His Ile Ala Arg Asn Val Val Asn Asn Tyr Asp
145 150 155 160
Gly Glu Leu Thr Ala Thr Gln Thr Pro Ala Thr Val Thr Glu Tyr Leu
165 170 175
Leu Lys Leu Val Ser Glu Met Asp Asn His Met Val Thr Ala Glu Asp
180 185 190
Ile Arg Glu Glu Ser Asp Pro Phe Ile Lys Leu Phe Asp Glu Leu Pro
195 200 205
Lys Gly Lys Gly Gln Arg Asp Asn Leu Asn Ala Glu Met Thr Lys Trp
210 215 220
Arg Asp Thr Gln Val Ala Arg Leu Gln Tyr Leu Pro Leu Val Lys Ala
225 230 235 240
Leu Lys Glu Glu Leu His Asn Gln Ala Val Val Thr Phe Gly Glu Gln
245 250 255
Met Ser Lys Ala Ala His Leu Ala Ser Thr His Pro Gln Val Gly Tyr
260 265 270
Ser Gln Arg Arg Arg Phe Arg Val Val Met Leu Asp Glu Tyr Gln Asp
275 280 285
Thr Ser His Ser Gln Arg Val Leu Leu Ser Ser Leu Phe Gly Gly Thr
290 295 300
Asp Pro Gly Leu Thr Val Asn Ala Val Gly Asp Pro Met Gln Ala Ile
305 310 315 320
Tyr Gly Trp Arg Gly Ala Thr Ala Ala Asn Leu Glu Asn Phe Val Asp
325 330 335
Asp Phe Pro Val Ile His Leu Asp Gly Lys Thr Arg Ala Pro Lys Asn
340 345 350
Glu Leu Thr Thr Ser Trp Arg Asn Pro Pro Glu Val Leu Thr Leu Ala
355 360 365
Asn Ala Val Ser Arg Glu Val Leu Gly Ser Pro Asp Ala Pro Thr Arg
370 375 380
Thr Val Gln Pro Leu Gln Pro Arg Glu Gly Ala Pro Thr Gly Glu Val
385 390 395 400
Ser Leu Gly Trp Phe Gly Thr Ala Ala Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala
405 410 415
Asp Glu Met Val Lys His Trp Asn Ala Arg Glu Glu Lys Gly Thr Phe
420 425 430
Thr Ala Ala Val Leu Val Arg Lys Lys Arg His Ser Ala Pro Met Ala
435 440 445
Glu Glu Leu Thr Lys Arg Gly Ile Pro Val Glu Ile Val Gly Leu Ser
450 455 460
Gly Leu Leu Asp Ile Pro Glu Ile Ala Asp Leu Ile Ser Leu Ala Thr
465 470 475 480
Met Leu Val Arg Pro His Asp Asn Arg Ala Ala Leu Arg Ile Leu Ala
485 490 495
Gly Pro His Val Gly Leu Gly Val Ala Asp Leu Gln Arg Leu Gln Gly
500 505 510
Arg Ala Arg Asn Ile Ala Gly Arg Val Ser Arg Glu Arg Arg Glu Lys
515 520 525
Asn Pro Asp Pro Leu Ala Glu Leu Asp Ala Ile Ile Glu Glu Ala Thr
530 535 540
Ala Ile Glu Pro Glu Ala Val Val Gly Leu Ala Asp Ala Val Ala Asp
545 550 555 560
Leu Gly Glu Gly Asp Arg Phe Ser Glu Glu Gly Leu Ser Arg Leu Lys
565 570 575
Arg Leu Ala Thr Gln Leu Arg Tyr Leu Arg Lys Tyr Ser Leu Gly Arg
580 585 590
Ser Val Ala Asp Ile Phe Ala Asp Ile Glu Thr Val Phe Asn Ile Arg
595 600 605
Thr Glu Val Leu Ser Arg Gln Asp Pro His Ala Asp Gly Ala Ala Gly
610 615 620
Thr Val His Leu Asp Lys Phe Ala Glu Glu Val Ala Ser His Gly Gly
625 630 635 640
Ile Gly Leu Pro Glu Leu Leu Asp Tyr Phe Glu Leu Ala Lys Asp Gln
645 650 655
Glu Glu Gly Leu Glu Pro Gly Glu Val Thr Val Arg Ser Asp Arg Val
660 665 670
Gln Ile Leu Thr Val His Lys Ala Lys Gly Leu Glu Trp Asp Ile Val
675 680 685
Ser Val Leu His Ala Asp Ala Ser Thr Tyr Asp Ala Lys Ala Ser Thr
690 695 700
Trp Leu Lys Asn Val Thr Met Ile Pro Ser Ser Leu Arg Gly Asp Ala
705 710 715 720
Gly Thr Gly Ala Pro Glu Met Asp Thr Ser Glu Ala Asp Asp Arg Lys
725 730 735
Ala Leu Glu Asp Ser Gly Lys Glu Tyr Thr Ser Glu Val Arg Glu Gly
740 745 750
Leu Arg Glu Glu Asn Ser Arg Leu Phe Tyr Val Gly Ile Thr Arg Ser
755 760 765
Glu Arg Val Leu Leu Val Thr Gly Ser Ala Leu Asp Glu Ser Gly Thr
770 775 780
Lys Ala Lys Val Pro Tyr Gly His Leu Glu Ile Leu Arg Asp Lys Ala
785 790 795 800
Pro Glu Cys Val Val Ser Trp Trp Glu Gly Glu Glu Gly Asp Val Glu
805 810 815
Lys Gln Lys Pro Ala Glu Gly Val Phe Pro Gln Leu Leu Ala Ala Asp
820 825 830
Ser Ser Gly Ala Asp Leu Val Arg Gly Pro Arg Ala Glu Pro Asn Asn
835 840 845
Glu Gly Gly Leu Glu Ser Leu Trp Glu Lys Glu Val Ser Ala Leu Ile
850 855 860
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865 870 875 880
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885 890 895
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900 905 910
Tyr Ala Lys Arg Gly Thr Leu Phe His Gln Trp Leu Glu Asp Arg Phe
915 920 925
Gly Ser Thr Ala Leu Leu Asp Glu Thr Glu Leu Pro Gly Ile Asp Glu
930 935 940
Asp Tyr Ser Asp Asp Ala Phe Ile Glu Leu Arg Asp Ala Phe Leu Gly
945 950 955 960
Ser Thr Trp Glu Asn Arg Thr Pro Glu Phe Val Glu His Pro Phe Glu
965 970 975
Val Thr Ile Gly Glu His Val Ile Arg Gly Arg Met Asp Ala Val Phe
980 985 990
His Thr Asp Gly Thr Trp Met Val Val Asp Trp Lys Thr Gly Arg Thr
995 1000 1005
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1010 1015 1020
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1025 1030 1035 1040
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1045 1050 1055
Leu Pro Thr Gln Glu Glu Leu Ala Arg Leu Leu Ser Gln Glu
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<210> 43
<211> 3895
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(3865)
<223> RXA01770
<400> 43
tgctcatgac aggtaattca acgcgttacc ctgctgcagc ataaaagaac ctgcctcaac 60
acacctccac tttttctact tttaagaaag ccacattctc atg cca att atc att 115
Met Pro Ile Ile Ile
1 5
gat aac ctc aat tct gac gac gac tcc acc atc ggc act gcc acc gaa 163
Asp Asn Leu Asn Ser Asp Asp Asp Ser Thr Ile Gly Thr Ala Thr Glu
10 15 20
tac aac cct gac act gac gcc gat tta ctt gat gct att aac gct gat 211
Tyr Asn Pro Asp Thr Asp Ala Asp Leu Leu Asp Ala Ile Asn Ala Asp
25 30 35
gct gac ctt gat ggc gac gcc acc atc agc act aac gcg aca gaa gaa 259
Ala Asp Leu Asp Gly Asp Ala Thr Ile Ser Thr Asn Ala Thr Glu Glu
40 45 50
ggt gta gac gca gca gct gaa aaa cct aag aaa aag cgt aaa gcc cct 307
Gly Val Asp Ala Ala Ala Glu Lys Pro Lys Lys Lys Arg Lys Ala Pro
55 60 65
gct ctg aag cct aaa gga ctc acg gca aag ttc ttc cac cgt gat ctt 355
Ala Leu Lys Pro Lys Gly Leu Thr Ala Lys Phe Phe His Arg Asp Leu
70 75 80 85
act ggc gta ggt ggt agg acc ggt cgc ctc aac aag aac gta cac ccg 403
Thr Gly Val Gly Gly Arg Thr Gly Arg Leu Asn Lys Asn Val His Pro
90 95 100
acc aac cca gat ctg tcc tac cag cca gtc tct gat gtc tac acc cca 451
Thr Asn Pro Asp Leu Ser Tyr Gln Pro Val Ser Asp Val Tyr Thr Pro
105 110 115
caa tca gca gat cac aag ggt att aag acc cgc tac atc ctt acc cat 499
Gln Ser Ala Asp His Lys Gly Ile Lys Thr Arg Tyr Ile Leu Thr His
120 125 130
cca acc ccc gct gtt gtt ctc agt gag tcc atc agc aac gcg ttt cat 547
Pro Thr Pro Ala Val Val Leu Ser Glu Ser Ile Ser Asn Ala Phe His
135 140 145
gtc tct acc ctg cgt cgc aac aat aat gtc aac aac tct gat tcg gaa 595
Val Ser Thr Leu Arg Arg Asn Asn Asn Val Asn Asn Ser Asp Ser Glu
150 155 160 165
ttg gct gcc tgg ccg tac ctc tac caa ctc gat att ccg cag ctg gac 643
Leu Ala Ala Trp Pro Tyr Leu Tyr Gln Leu Asp Ile Pro Gln Leu Asp
170 175 180
cag atg att aat gtc gct gac atc tgt gat tac cat ttc cac gga tat 691
Gln Met Ile Asn Val Ala Asp Ile Cys Asp Tyr His Phe His Gly Tyr
185 190 195
aac ctg tgg gtg gat ttt acc ccg cag act atc gct cta cga tcc ggt 739
Asn Leu Trp Val Asp Phe Thr Pro Gln Thr Ile Ala Leu Arg Ser Gly
200 205 210
aag acg gta ctc gat gac ggt acc acc gcc tct gat aac acc act cat 787
Lys Thr Val Leu Asp Asp Gly Thr Thr Ala Ser Asp Asn Thr Thr His
215 220 225
gtc tat tac cgc gtc acc gtt cac gtt att gcc ggt caa gat cat gga 835
Val Tyr Tyr Arg Val Thr Val His Val Ile Ala Gly Gln Asp His Gly
230 235 240 245
tct act ctg ctt gat gac cag ggc aac cag gtg ctt gat agg gat gat 883
Ser Thr Leu Leu Asp Asp Gln Gly Asn Gln Val Leu Asp Arg Asp Asp
250 255 260
aat cct att tct acc cca agt atc aag cgt att ggc gct gtc act gat 931
Asn Pro Ile Ser Thr Pro Ser Ile Lys Arg Ile Gly Ala Val Thr Asp
265 270 275
ctt ttc gat cac aat cct ttt ggc ttc gct agt gta aac tct ttc gca 979
Leu Phe Asp His Asn Pro Phe Gly Phe Ala Ser Val Asn Ser Phe Ala
280 285 290
ttt gtc gat ttc tca tgg gac cca gcc acc acc ttg gtc gat atg ctc 1027
Phe Val Asp Phe Ser Trp Asp Pro Ala Thr Thr Leu Val Asp Met Leu
295 300 305
aac aac ctt gat tca tat ctc tct aat cac atc aat att gcc agc tcc 1075
Asn Asn Leu Asp Ser Tyr Leu Ser Asn His Ile Asn Ile Ala Ser Ser
310 315 320 325
cca acc ccc att gcc ctc gat atg gtt gtg ctc aat gaa tgg tct gaa 1123
Pro Thr Pro Ile Ala Leu Asp Met Val Val Leu Asn Glu Trp Ser Glu
330 335 340
aag tcc tat cag ctg tgc gaa cgc gtt gtt gca cag gca aag ctc atc 1171
Lys Ser Tyr Gln Leu Cys Glu Arg Val Val Ala Gln Ala Lys Leu Ile
345 350 355
aac agc aac aag atc acc gca cat gtg agt gat gtc atc aag caa aat 1219
Asn Ser Asn Lys Ile Thr Ala His Val Ser Asp Val Ile Lys Gln Asn
360 365 370
gcc cac aat atc ttg tgg ttt acc gaa cag atg aac cct ggc acc acc 1267
Ala His Asn Ile Leu Trp Phe Thr Glu Gln Met Asn Pro Gly Thr Thr
375 380 385
aac ctc agc gag gta cct atc tcc aag aag tct atg ctg ccg atg tct 1315
Asn Leu Ser Glu Val Pro Ile Ser Lys Lys Ser Met Leu Pro Met Ser
390 395 400 405
cgc cag cta cgt att ttg gag cac tac gat gta cca ctg acc gcg tac 1363
Arg Gln Leu Arg Ile Leu Glu His Tyr Asp Val Pro Leu Thr Ala Tyr
410 415 420
tct gct ctt ttc tgg act gtc agc gcc att aag aat gaa tct atg gtg 1411
Ser Ala Leu Phe Trp Thr Val Ser Ala Ile Lys Asn Glu Ser Met Val
425 430 435
cag tac ctt gtg cga cag aat atg cag ctc acc ttg agc tca aat ctg 1459
Gln Tyr Leu Val Arg Gln Asn Met Gln Leu Thr Leu Ser Ser Asn Leu
440 445 450
gat gca ctc aac tcc att gtc tcc cag ctc cct gta cca gat aag gac 1507
Asp Ala Leu Asn Ser Ile Val Ser Gln Leu Pro Val Pro Asp Lys Asp
455 460 465
gtt gtg gct gct tct ggc tac cag att cag cca cac ttc tcc acg cag 1555
Val Val Ala Ala Ser Gly Tyr Gln Ile Gln Pro His Phe Ser Thr Gln
470 475 480 485
cag cgt gaa gca atc acc act gat aat cct ctc gcg att att cag gcc 1603
Gln Arg Glu Ala Ile Thr Thr Asp Asn Pro Leu Ala Ile Ile Gln Ala
490 495 500
ggt gct ggt acc ggt aaa tcc acc gtg att ctg gaa cgc att gag tac 1651
Gly Ala Gly Thr Gly Lys Ser Thr Val Ile Leu Glu Arg Ile Glu Tyr
505 510 515
ttg tgc gct gca ggc acc aac cct gaa gag att gct gtg ctg tct ttt 1699
Leu Cys Ala Ala Gly Thr Asn Pro Glu Glu Ile Ala Val Leu Ser Phe
520 525 530
act aat gct gcc gcc gat aac atc aca gca aaa aat gac aag gtg acc 1747
Thr Asn Ala Ala Ala Asp Asn Ile Thr Ala Lys Asn Asp Lys Val Thr
535 540 545
tct atg acc atc tcc aag atg gtt cat gag att tac gca cac aat ttc 1795
Ser Met Thr Ile Ser Lys Met Val His Glu Ile Tyr Ala His Asn Phe
550 555 560 565
cct gat cat gag atc tcc acc atc gac acc att atc aat acg ctt gat 1843
Pro Asp His Glu Ile Ser Thr Ile Asp Thr Ile Ile Asn Thr Leu Asp
570 575 580
att gaa tac ggc gat caa atg gtg acc tcc gat tac atg att cag ctc 1891
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585 590 595
cgt gac ctg ctc tat aag gtc atg acg cag ggt ggc aac gcc aac ctg 1939
Arg Asp Leu Leu Tyr Lys Val Met Thr Gln Gly Gly Asn Ala Asn Leu
600 605 610
aca gcg ttg agc atc ttc atg gaa tcc cat atc gag gcg ttc atc tcg 1987
Thr Ala Leu Ser Ile Phe Met Glu Ser His Ile Glu Ala Phe Ile Ser
615 620 625
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650 655 660
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665 670 675
ttt gca ctt cgt ttt gcg gca aag cac aat acg agt ctg tac ttg gtg 2179
Phe Ala Leu Arg Phe Ala Ala Lys His Asn Thr Ser Leu Tyr Leu Val
680 685 690
ggt gac tcg tca cag acc ttg tat gag ttc cgt tct gct aac cct aag 2227
Gly Asp Ser Ser Gln Thr Leu Tyr Glu Phe Arg Ser Ala Asn Pro Lys
695 700 705
gct ctg aac tcc ctg gaa gca tct ggt gtt ttc ggt acc tac cgt ttg 2275
Ala Leu Asn Ser Leu Glu Ala Ser Gly Val Phe Gly Thr Tyr Arg Leu
710 715 720 725
acc acc aat tac cgt tcc aac cag gaa att ctt gac ttc gct aat atc 2323
Thr Thr Asn Tyr Arg Ser Asn Gln Glu Ile Leu Asp Phe Ala Asn Ile
730 735 740
cac ctc tcg gat att gaa gct aac cag ttc gca ggt att cag ctc tac 2371
His Leu Ser Asp Ile Glu Ala Asn Gln Phe Ala Gly Ile Gln Leu Tyr
745 750 755
gcc aac tct ttt gat gca cct act gcg gac agc ttc aaa gaa aag gtt 2419
Ala Asn Ser Phe Asp Ala Pro Thr Ala Asp Ser Phe Lys Glu Lys Val
760 765 770
gaa ctg gac atg cac cat gtg tct aag cag tct gag ttt acc gac agc 2467
Glu Leu Asp Met His His Val Ser Lys Gln Ser Glu Phe Thr Asp Ser
775 780 785
att cct tat ttc atg gag tcc aat aaa gct cgc ttt gat gct gcg atc 2515
Ile Pro Tyr Phe Met Glu Ser Asn Lys Ala Arg Phe Asp Ala Ala Ile
790 795 800 805
ttg aac aat gag caa acc att gtg ctt gct cat tct ggt cgt gaa att 2563
Leu Asn Asn Glu Gln Thr Ile Val Leu Ala His Ser Gly Arg Glu Ile
810 815 820
cgt gca gcg cag caa gcg cta gcc gag atg tac ccc agc atc acg gtg 2611
Arg Ala Ala Gln Gln Ala Leu Ala Glu Met Tyr Pro Ser Ile Thr Val
825 830 835
cgt aac ttg cag tcc gat aag ggt ttc aac aac acg gta ttt tcg acc 2659
Arg Asn Leu Gln Ser Asp Lys Gly Phe Asn Asn Thr Val Phe Ser Thr
840 845 850
ttt att aag gat ttc tgg ttt gag gtc acc gct gta gac cca gct cat 2707
Phe Ile Lys Asp Phe Trp Phe Glu Val Thr Ala Val Asp Pro Ala His
855 860 865
gcc gca ttt acc ttt acc agc caa gtc acc gct cat cta gat aag ttg 2755
Ala Ala Phe Thr Phe Thr Ser Gln Val Thr Ala His Leu Asp Lys Leu
870 875 880 885
gta cgc gga aag cgt gag cag atg gag gat cgc gtt atc cgg tct atg 2803
Val Arg Gly Lys Arg Glu Gln Met Glu Asp Arg Val Ile Arg Ser Met
890 895 900
gct gca tgg tgg cgt gaa aat gag cgt gac atc cag ggt tgg gtg cag 2851
Ala Ala Trp Trp Arg Glu Asn Glu Arg Asp Ile Gln Gly Trp Val Gln
905 910 915
caa act cag tcc ggt gcg atc acc aac gaa gag ttc ttc tac cgt ctt 2899
Gln Thr Gln Ser Gly Ala Ile Thr Asn Glu Glu Phe Phe Tyr Arg Leu
920 925 930
cgt cag tgc att ctt gac tat gaa atc agg aat aac cga gca cgt cag 2947
Arg Gln Cys Ile Leu Asp Tyr Glu Ile Arg Asn Asn Arg Ala Arg Gln
935 940 945
tcc atg ctc aat gcg cgc aac aac gct aac aag gag gct gtc gca cag 2995
Ser Met Leu Asn Ala Arg Asn Asn Ala Asn Lys Glu Ala Val Ala Gln
950 955 960 965
gag aaa cca ctg ctc atg gtc tcc acc att cac agt gca aag ggt ctg 3043
Glu Lys Pro Leu Leu Met Val Ser Thr Ile His Ser Ala Lys Gly Leu
970 975 980
gaa ttc gat aat gtc atc gtg ctt caa aaa cca agc tcc gat gca gag 3091
Glu Phe Asp Asn Val Ile Val Leu Gln Lys Pro Ser Ser Asp Ala Glu
985 990 995
atg acc gaa gaa ggt aag cgc gca acc tat gtg gcg ctg acc cgt gca 3139
Met Thr Glu Glu Gly Lys Arg Ala Thr Tyr Val Ala Leu Thr Arg Ala
1000 1005 1010
aaa aag cgt gaa ctc att att gct ggt tct act cgc gca tac cca cgc 3187
Lys Lys Arg Glu Leu Ile Ile Ala Gly Ser Thr Arg Ala Tyr Pro Arg
1015 1020 1025
atc gtc acc gat tat gag caa atc gtt gat ctt ctt gaa aag cgc gat 3235
Ile Val Thr Asp Tyr Glu Gln Ile Val Asp Leu Leu Glu Lys Arg Asp
1030 1035 1040 1045
gag gag cgc aaa att aag gag gaa gag gct gca gca ctc gcc acc ctt 3283
Glu Glu Arg Lys Ile Lys Glu Glu Glu Ala Ala Ala Leu Ala Thr Leu
1050 1055 1060
gaa gct gaa cag gag acg cgc gcc ctt gct gct gct gag gcg cag gct 3331
Glu Ala Glu Gln Glu Thr Arg Ala Leu Ala Ala Ala Glu Ala Gln Ala
1065 1070 1075
cag gcg ttg ttg ctt gag cac aac ccg tgg ttg cgt gat ctc agc gat 3379
Gln Ala Leu Leu Leu Glu His Asn Pro Trp Leu Arg Asp Leu Ser Asp
1080 1085 1090
gaa gaa gtc act gct cta act gag caa gag atc atc aac aat gtt gag 3427
Glu Glu Val Thr Ala Leu Thr Glu Gln Glu Ile Ile Asn Asn Val Glu
1095 1100 1105
gca gcc cta cag att gaa gaa gag gag gaa gag gct cgt gca ctc gct 3475
Ala Ala Leu Gln Ile Glu Glu Glu Glu Glu Glu Ala Arg Ala Leu Ala
1110 1115 1120 1125
gca gca gag cca gca att cag cag tac ttg tct cag ttt gct ttc gat 3523
Ala Ala Glu Pro Ala Ile Gln Gln Tyr Leu Ser Gln Phe Ala Phe Asp
1130 1135 1140
gag ttc ccg gac gac gac aat gta gcc aac act gtc gta cat gta gca 3571
Glu Phe Pro Asp Asp Asp Asn Val Ala Asn Thr Val Val His Val Ala
1145 1150 1155
cca cag cct att ctc cac cag gca gtg cct gca gat gtg act gta caa 3619
Pro Gln Pro Ile Leu His Gln Ala Val Pro Ala Asp Val Thr Val Gln
1160 1165 1170
tca agc acc gcc ccc gta aca cct gtt gtt gcg gat ctt gag gta acc 3667
Ser Ser Thr Ala Pro Val Thr Pro Val Val Ala Asp Leu Glu Val Thr
1175 1180 1185
act gtt gca gct gat cca gtc gaa ccg act atc gtt gct gca cag cct 3715
Thr Val Ala Ala Asp Pro Val Glu Pro Thr Ile Val Ala Ala Gln Pro
1190 1195 1200 1205
gag gtg gac gac aac ctt gtc tac agc acg tcc acc cct aat agt cac 3763
Glu Val Asp Asp Asn Leu Val Tyr Ser Thr Ser Thr Pro Asn Ser His
1210 1215 1220
agt gac gtt att gca gtg aac tct gat acc tca gaa aac gct gct gtt 3811
Ser Asp Val Ile Ala Val Asn Ser Asp Thr Ser Glu Asn Ala Ala Val
1225 1230 1235
aat cca gtt ctg tcc gat att gag gca ctc cga gca att ttc aac aac 3859
Asn Pro Val Leu Ser Asp Ile Glu Ala Leu Arg Ala Ile Phe Asn Asn
1240 1245 1250
cag gac taaaacacct gctgctgttg agcgcttctc 3895
Gln Asp
1255
<210> 44
<211> 1255
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 44
Met Pro Ile Ile Ile Asp Asn Leu Asn Ser Asp Asp Asp Ser Thr Ile
1 5 10 15
Gly Thr Ala Thr Glu Tyr Asn Pro Asp Thr Asp Ala Asp Leu Leu Asp
20 25 30
Ala Ile Asn Ala Asp Ala Asp Leu Asp Gly Asp Ala Thr Ile Ser Thr
35 40 45
Asn Ala Thr Glu Glu Gly Val Asp Ala Ala Ala Glu Lys Pro Lys Lys
50 55 60
Lys Arg Lys Ala Pro Ala Leu Lys Pro Lys Gly Leu Thr Ala Lys Phe
65 70 75 80
Phe His Arg Asp Leu Thr Gly Val Gly Gly Arg Thr Gly Arg Leu Asn
85 90 95
Lys Asn Val His Pro Thr Asn Pro Asp Leu Ser Tyr Gln Pro Val Ser
100 105 110
Asp Val Tyr Thr Pro Gln Ser Ala Asp His Lys Gly Ile Lys Thr Arg
115 120 125
Tyr Ile Leu Thr His Pro Thr Pro Ala Val Val Leu Ser Glu Ser Ile
130 135 140
Ser Asn Ala Phe His Val Ser Thr Leu Arg Arg Asn Asn Asn Val Asn
145 150 155 160
Asn Ser Asp Ser Glu Leu Ala Ala Trp Pro Tyr Leu Tyr Gln Leu Asp
165 170 175
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180 185 190
His Phe His Gly Tyr Asn Leu Trp Val Asp Phe Thr Pro Gln Thr Ile
195 200 205
Ala Leu Arg Ser Gly Lys Thr Val Leu Asp Asp Gly Thr Thr Ala Ser
210 215 220
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225 230 235 240
Gly Gln Asp His Gly Ser Thr Leu Leu Asp Asp Gln Gly Asn Gln Val
245 250 255
Leu Asp Arg Asp Asp Asn Pro Ile Ser Thr Pro Ser Ile Lys Arg Ile
260 265 270
Gly Ala Val Thr Asp Leu Phe Asp His Asn Pro Phe Gly Phe Ala Ser
275 280 285
Val Asn Ser Phe Ala Phe Val Asp Phe Ser Trp Asp Pro Ala Thr Thr
290 295 300
Leu Val Asp Met Leu Asn Asn Leu Asp Ser Tyr Leu Ser Asn His Ile
305 310 315 320
Asn Ile Ala Ser Ser Pro Thr Pro Ile Ala Leu Asp Met Val Val Leu
325 330 335
Asn Glu Trp Ser Glu Lys Ser Tyr Gln Leu Cys Glu Arg Val Val Ala
340 345 350
Gln Ala Lys Leu Ile Asn Ser Asn Lys Ile Thr Ala His Val Ser Asp
355 360 365
Val Ile Lys Gln Asn Ala His Asn Ile Leu Trp Phe Thr Glu Gln Met
370 375 380
Asn Pro Gly Thr Thr Asn Leu Ser Glu Val Pro Ile Ser Lys Lys Ser
385 390 395 400
Met Leu Pro Met Ser Arg Gln Leu Arg Ile Leu Glu His Tyr Asp Val
405 410 415
Pro Leu Thr Ala Tyr Ser Ala Leu Phe Trp Thr Val Ser Ala Ile Lys
420 425 430
Asn Glu Ser Met Val Gln Tyr Leu Val Arg Gln Asn Met Gln Leu Thr
435 440 445
Leu Ser Ser Asn Leu Asp Ala Leu Asn Ser Ile Val Ser Gln Leu Pro
450 455 460
Val Pro Asp Lys Asp Val Val Ala Ala Ser Gly Tyr Gln Ile Gln Pro
465 470 475 480
His Phe Ser Thr Gln Gln Arg Glu Ala Ile Thr Thr Asp Asn Pro Leu
485 490 495
Ala Ile Ile Gln Ala Gly Ala Gly Thr Gly Lys Ser Thr Val Ile Leu
500 505 510
Glu Arg Ile Glu Tyr Leu Cys Ala Ala Gly Thr Asn Pro Glu Glu Ile
515 520 525
Ala Val Leu Ser Phe Thr Asn Ala Ala Ala Asp Asn Ile Thr Ala Lys
530 535 540
Asn Asp Lys Val Thr Ser Met Thr Ile Ser Lys Met Val His Glu Ile
545 550 555 560
Tyr Ala His Asn Phe Pro Asp His Glu Ile Ser Thr Ile Asp Thr Ile
565 570 575
Ile Asn Thr Leu Asp Ile Glu Tyr Gly Asp Gln Met Val Thr Ser Asp
580 585 590
Tyr Met Ile Gln Leu Arg Asp Leu Leu Tyr Lys Val Met Thr Gln Gly
595 600 605
Gly Asn Ala Asn Leu Thr Ala Leu Ser Ile Phe Met Glu Ser His Ile
610 615 620
Glu Ala Phe Ile Ser Val Leu Asp Gln Ile Lys Gln Thr Ser Leu Glu
625 630 635 640
Leu Glu Ile Ile Ile Cys Tyr Leu Leu Leu Asp Lys Leu Ile Glu Pro
645 650 655
His Ala Ser Pro Lys Tyr Leu Ile Ile Asp Glu Val Gln Asp Asn Ser
660 665 670
Val Phe Glu Phe Val Phe Ala Leu Arg Phe Ala Ala Lys His Asn Thr
675 680 685
Ser Leu Tyr Leu Val Gly Asp Ser Ser Gln Thr Leu Tyr Glu Phe Arg
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Ser Ala Asn Pro Lys Ala Leu Asn Ser Leu Glu Ala Ser Gly Val Phe
705 710 715 720
Gly Thr Tyr Arg Leu Thr Thr Asn Tyr Arg Ser Asn Gln Glu Ile Leu
725 730 735
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770 775 780
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785 790 795 800
Phe Asp Ala Ala Ile Leu Asn Asn Glu Gln Thr Ile Val Leu Ala His
805 810 815
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820 825 830
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835 840 845
Thr Val Phe Ser Thr Phe Ile Lys Asp Phe Trp Phe Glu Val Thr Ala
850 855 860
Val Asp Pro Ala His Ala Ala Phe Thr Phe Thr Ser Gln Val Thr Ala
865 870 875 880
His Leu Asp Lys Leu Val Arg Gly Lys Arg Glu Gln Met Glu Asp Arg
885 890 895
Val Ile Arg Ser Met Ala Ala Trp Trp Arg Glu Asn Glu Arg Asp Ile
900 905 910
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Phe Phe Tyr Arg Leu Arg Gln Cys Ile Leu Asp Tyr Glu Ile Arg Asn
930 935 940
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965 970 975
Ser Ala Lys Gly Leu Glu Phe Asp Asn Val Ile Val Leu Gln Lys Pro
980 985 990
Ser Ser Asp Ala Glu Met Thr Glu Glu Gly Lys Arg Ala Thr Tyr Val
995 1000 1005
Ala Leu Thr Arg Ala Lys Lys Arg Glu Leu Ile Ile Ala Gly Ser Thr
1010 1015 1020
Arg Ala Tyr Pro Arg Ile Val Thr Asp Tyr Glu Gln Ile Val Asp Leu
1025 1030 1035 1040
Leu Glu Lys Arg Asp Glu Glu Arg Lys Ile Lys Glu Glu Glu Ala Ala
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Ala Leu Ala Thr Leu Glu Ala Glu Gln Glu Thr Arg Ala Leu Ala Ala
1060 1065 1070
Ala Glu Ala Gln Ala Gln Ala Leu Leu Leu Glu His Asn Pro Trp Leu
1075 1080 1085
Arg Asp Leu Ser Asp Glu Glu Val Thr Ala Leu Thr Glu Gln Glu Ile
1090 1095 1100
Ile Asn Asn Val Glu Ala Ala Leu Gln Ile Glu Glu Glu Glu Glu Glu
1105 1110 1115 1120
Ala Arg Ala Leu Ala Ala Ala Glu Pro Ala Ile Gln Gln Tyr Leu Ser
1125 1130 1135
Gln Phe Ala Phe Asp Glu Phe Pro Asp Asp Asp Asn Val Ala Asn Thr
1140 1145 1150
Val Val His Val Ala Pro Gln Pro Ile Leu His Gln Ala Val Pro Ala
1155 1160 1165
Asp Val Thr Val Gln Ser Ser Thr Ala Pro Val Thr Pro Val Val Ala
1170 1175 1180
Asp Leu Glu Val Thr Thr Val Ala Ala Asp Pro Val Glu Pro Thr Ile
1185 1190 1195 1200
Val Ala Ala Gln Pro Glu Val Asp Asp Asn Leu Val Tyr Ser Thr Ser
1205 1210 1215
Thr Pro Asn Ser His Ser Asp Val Ile Ala Val Asn Ser Asp Thr Ser
1220 1225 1230
Glu Asn Ala Ala Val Asn Pro Val Leu Ser Asp Ile Glu Ala Leu Arg
1235 1240 1245
Ala Ile Phe Asn Asn Gln Asp
1250 1255
<210> 45
<211> 5068
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(5038)
<223> RXA01772
<400> 45
ccagaaggaa tcctcccgca ccggctggct cgttagcctg aagtagcact tcgaatctaa 60
gaccaccaaa tggacatgtc ctttgagtga ataggacaca atg gaa tgc atg tcc 115
Met Glu Cys Met Ser
1 5
acg att act gat gct gta tcc gcc ctg cgc aca ctg cct tcc cag tct 163
Thr Ile Thr Asp Ala Val Ser Ala Leu Arg Thr Leu Pro Ser Gln Ser
10 15 20
gcg cag ggt ttg gct ttt gaa aaa ctc atg gtc aac ttc att aag tct 211
Ala Gln Gly Leu Ala Phe Glu Lys Leu Met Val Asn Phe Ile Lys Ser
25 30 35
gac ccc act ctc tcc act gag ttt gat gaa gtc cat cgt tgg gtc gat 259
Asp Pro Thr Leu Ser Thr Glu Phe Asp Glu Val His Arg Trp Val Asp
40 45 50
tgg cca tat aac ggt ggc acc atg gat act ggc atc gac tta gtg gct 307
Trp Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Met Asp Thr Gly Ile Asp Leu Val Ala
55 60 65
tat aac aag gac gat gat gct tat acg gcg atc cag tgc aag ttt tat 355
Tyr Asn Lys Asp Asp Asp Ala Tyr Thr Ala Ile Gln Cys Lys Phe Tyr
70 75 80 85
ctt ccc act act tcc ctg gca aaa gga cag cta gat tcc ttc ttt gaa 403
Leu Pro Thr Thr Ser Leu Ala Lys Gly Gln Leu Asp Ser Phe Phe Glu
90 95 100
gcc tcg gga cgc act ttt gaa acc cct gaa gga aca cgc tcc ttt agc 451
Ala Ser Gly Arg Thr Phe Glu Thr Pro Glu Gly Thr Arg Ser Phe Ser
105 110 115
aat aga ctc gtt att tcc act act gat aag tgg agt tca aat gcg gaa 499
Asn Arg Leu Val Ile Ser Thr Thr Asp Lys Trp Ser Ser Asn Ala Glu
120 125 130
aag atg ttg gag aac caa acc att cca act aac cgc att ggt cta tct 547
Lys Met Leu Glu Asn Gln Thr Ile Pro Thr Asn Arg Ile Gly Leu Ser
135 140 145
gca att gcg gaa tcc ccg att gac tgg gat att gcc tat cca ggt tct 595
Ala Ile Ala Glu Ser Pro Ile Asp Trp Asp Ile Ala Tyr Pro Gly Ser
150 155 160 165
gaa tta act att aac ctg cag ctt aaa gag ccg tat agc cct cgt cct 643
Glu Leu Thr Ile Asn Leu Gln Leu Lys Glu Pro Tyr Ser Pro Arg Pro
170 175 180
cac cag caa act gct att gaa aaa gca att gaa ggc ttc caa act cat 691
His Gln Gln Thr Ala Ile Glu Lys Ala Ile Glu Gly Phe Gln Thr His
185 190 195
gac cgt ggc aag ctc atc atg gct tgc ggt acc gga aaa acc ttt act 739
Asp Arg Gly Lys Leu Ile Met Ala Cys Gly Thr Gly Lys Thr Phe Thr
200 205 210
gcc ctg cgt ctt tct gaa gag gtt gcg cga ctc aat ggc aat aaa gct 787
Ala Leu Arg Leu Ser Glu Glu Val Ala Arg Leu Asn Gly Asn Lys Ala
215 220 225
cgc att ctt ttt cta gtc cct tcc atc agc ttg ctt tcg caa aca ctc 835
Arg Ile Leu Phe Leu Val Pro Ser Ile Ser Leu Leu Ser Gln Thr Leu
230 235 240 245
aaa gag tgg act gca caa aag aca atg gat ctt cgt cct gtc gcc gta 883
Lys Glu Trp Thr Ala Gln Lys Thr Met Asp Leu Arg Pro Val Ala Val
250 255 260
tgt tct gac tcc aag gtc tcc aag gct gca gaa gat att gct gct tat 931
Cys Ser Asp Ser Lys Val Ser Lys Ala Ala Glu Asp Ile Ala Ala Tyr
265 270 275
gat ctt gaa gtt ccg gta agt act gat ggt gca ttg att gcg gaa aaa 979
Asp Leu Glu Val Pro Val Ser Thr Asp Gly Ala Leu Ile Ala Glu Lys
280 285 290
ctg gag cat cgt aag cga gca gca gga ttg acc gtg gtg ttc tct act 1027
Leu Glu His Arg Lys Arg Ala Ala Gly Leu Thr Val Val Phe Ser Thr
295 300 305
tac cag tcc ctt cct gct gtt cac gcg gct caa gaa gct ggg gct gag 1075
Tyr Gln Ser Leu Pro Ala Val His Ala Ala Gln Glu Ala Gly Ala Glu
310 315 320 325
ccc ttt gat ctt gtc atc tgc gat gaa gcc cac cgc acc aca ggc atc 1123
Pro Phe Asp Leu Val Ile Cys Asp Glu Ala His Arg Thr Thr Gly Ile
330 335 340
acc ttg gct gga gaa gac cct tca aac ttc acc cgc att cat gac gct 1171
Thr Leu Ala Gly Glu Asp Pro Ser Asn Phe Thr Arg Ile His Asp Ala
345 350 355
tct tat atc aag gca gca aag cgg ctg tac atg acg gca acc cca agg 1219
Ser Tyr Ile Lys Ala Ala Lys Arg Leu Tyr Met Thr Ala Thr Pro Arg
360 365 370
ctt ttc gac gac tcc gtg aag ggc aag gct gca gat cat tca gct gaa 1267
Leu Phe Asp Asp Ser Val Lys Gly Lys Ala Ala Asp His Ser Ala Glu
375 380 385
gtt tct tcc atg gat gat gaa gca atc tac gga ccc gaa ttt cac cgg 1315
Val Ser Ser Met Asp Asp Glu Ala Ile Tyr Gly Pro Glu Phe His Arg
390 395 400 405
ctg ggt ttt ggg gaa gca gta gaa aaa ggc ctg ctt act gac tac aaa 1363
Leu Gly Phe Gly Glu Ala Val Glu Lys Gly Leu Leu Thr Asp Tyr Lys
410 415 420
gtt gta gtg atg aca gtt gat gag caa gtt gca gcc agt gcc tta act 1411
Val Val Val Met Thr Val Asp Glu Gln Val Ala Ala Ser Ala Leu Thr
425 430 435
gtt ttg ggt tca aca cct ggt gaa gaa ctc act ctg gac atg act tcc 1459
Val Leu Gly Ser Thr Pro Gly Glu Glu Leu Thr Leu Asp Met Thr Ser
440 445 450
gca att att ggc gcg tgg aat ggc ttg gca aag cgt tcg ggt aaa gag 1507
Ala Ile Ile Gly Ala Trp Asn Gly Leu Ala Lys Arg Ser Gly Lys Glu
455 460 465
caa gac acc aag act ggt ttc tca agc tct gac gca gca atg gaa cga 1555
Gln Asp Thr Lys Thr Gly Phe Ser Ser Ser Asp Ala Ala Met Glu Arg
470 475 480 485
gct gtt gca ttt gcg cga gac att aag act tct cag caa atc gcg gag 1603
Ala Val Ala Phe Ala Arg Asp Ile Lys Thr Ser Gln Gln Ile Ala Glu
490 495 500
tct ttt cca cga gtt gtc aat gct tat acg act gag ctt gag gtt aaa 1651
Ser Phe Pro Arg Val Val Asn Ala Tyr Thr Thr Glu Leu Glu Val Lys
505 510 515
aac gat gac gta gat gag cac aac ctc aat ttg agc gtg gca tgc cag 1699
Asn Asp Asp Val Asp Glu His Asn Leu Asn Leu Ser Val Ala Cys Gln
520 525 530
cat gtc gat gga tca atg aat gcg ctg gaa cga aac tct cgt tta act 1747
His Val Asp Gly Ser Met Asn Ala Leu Glu Arg Asn Ser Arg Leu Thr
535 540 545
tgg ctt aaa gct cct acc cag tca atg gaa acc aag att ctt act aac 1795
Trp Leu Lys Ala Pro Thr Gln Ser Met Glu Thr Lys Ile Leu Thr Asn
550 555 560 565
gcg cgc tgc ctt tct gag ggt gtc gat gta ccg gct ttg gat tcc gta 1843
Ala Arg Cys Leu Ser Glu Gly Val Asp Val Pro Ala Leu Asp Ser Val
570 575 580
atc ttc ttt aat ccc cgt aat tcc atg gtg gat gtg gtt cag tcg gtt 1891
Ile Phe Phe Asn Pro Arg Asn Ser Met Val Asp Val Val Gln Ser Val
585 590 595
ggc cga gtt atg cgt aaa tct cca ggt aag aat tac gga tat atc atc 1939
Gly Arg Val Met Arg Lys Ser Pro Gly Lys Asn Tyr Gly Tyr Ile Ile
600 605 610
ttg cca gtt gct gtt ccc cca ggt gtt gca cca tca gct gcg tta aat 1987
Leu Pro Val Ala Val Pro Pro Gly Val Ala Pro Ser Ala Ala Leu Asn
615 620 625
gat tca cgc cgc ttc aag gtt gta tgg cag gtt ctt aac gcc ctt cgt 2035
Asp Ser Arg Arg Phe Lys Val Val Trp Gln Val Leu Asn Ala Leu Arg
630 635 640 645
gct cac gat gac cgt ttt aac gca atg gtg aac tcc att gcg ctc aat 2083
Ala His Asp Asp Arg Phe Asn Ala Met Val Asn Ser Ile Ala Leu Asn
650 655 660
gag gga aat att aag gat cta cct gtt gag act gag cat act ggc cct 2131
Glu Gly Asn Ile Lys Asp Leu Pro Val Glu Thr Glu His Thr Gly Pro
665 670 675
aca agt aaa gat aga gat aac gca ccc tat gac agt gct gaa tcc gct 2179
Thr Ser Lys Asp Arg Asp Asn Ala Pro Tyr Asp Ser Ala Glu Ser Ala
680 685 690
aca caa tac gta ctg ttc tct tta gaa cag tgg caa gaa gcg atc tac 2227
Thr Gln Tyr Val Leu Phe Ser Leu Glu Gln Trp Gln Glu Ala Ile Tyr
695 700 705
acc aag ctt gta gat aaa gtt ggt acc cga acc tac tgg gaa gat tgg 2275
Thr Lys Leu Val Asp Lys Val Gly Thr Arg Thr Tyr Trp Glu Asp Trp
710 715 720 725
gca gat gat gtt gct gac atc gcc caa gca caa ata acc cgt att aaa 2323
Ala Asp Asp Val Ala Asp Ile Ala Gln Ala Gln Ile Thr Arg Ile Lys
730 735 740
gcg ctc tta gac aat gct tca cca acg atc aaa gaa gag ttc gag cga 2371
Ala Leu Leu Asp Asn Ala Ser Pro Thr Ile Lys Glu Glu Phe Glu Arg
745 750 755
ttt gtt gaa ggt cta cgt ggc aac ctc aat gag tcc atc tct gac gac 2419
Phe Val Glu Gly Leu Arg Gly Asn Leu Asn Glu Ser Ile Ser Asp Asp
760 765 770
gag gca atc agc atg ttg tca cag cat ctg atc acc gca cca gtg ttt 2467
Glu Ala Ile Ser Met Leu Ser Gln His Leu Ile Thr Ala Pro Val Phe
775 780 785
gac gct cta ttt gct gaa tca agc ttc gct aag caa aac cct gtt tcc 2515
Asp Ala Leu Phe Ala Glu Ser Ser Phe Ala Lys Gln Asn Pro Val Ser
790 795 800 805
cag gtt atg caa cgc atg gca gat gct ctt aat agt gct gaa ctt aac 2563
Gln Val Met Gln Arg Met Ala Asp Ala Leu Asn Ser Ala Glu Leu Asn
810 815 820
tct gaa acg gaa aaa ctt gag aag ttc tat gac tct gtt cgt atc cgt 2611
Ser Glu Thr Glu Lys Leu Glu Lys Phe Tyr Asp Ser Val Arg Ile Arg
825 830 835
gct gct gaa gta agc tcc gca gct ggt aaa caa gca gta att aaa gac 2659
Ala Ala Glu Val Ser Ser Ala Ala Gly Lys Gln Ala Val Ile Lys Asp
840 845 850
ctc tac gaa cga ttc ttt aaa aag gcc ttt aaa aag caa tct gaa gct 2707
Leu Tyr Glu Arg Phe Phe Lys Lys Ala Phe Lys Lys Gln Ser Glu Ala
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cta ggt att gtc tat acc cct gtt gag atc gtg gac ttt att ctg cga 2755
Leu Gly Ile Val Tyr Thr Pro Val Glu Ile Val Asp Phe Ile Leu Arg
870 875 880 885
gct gcc gat gat gtg tcc aag aag cat ttt ggt cgt ggc tta agc gat 2803
Ala Ala Asp Asp Val Ser Lys Lys His Phe Gly Arg Gly Leu Ser Asp
890 895 900
aaa gat gtc cat gtt ctt gat cct ttc acc ggt acg ggt act ttt atg 2851
Lys Asp Val His Val Leu Asp Pro Phe Thr Gly Thr Gly Thr Phe Met
905 910 915
gtg cgt tta ttg cag tca ggt cta att aag cct gaa gat ttg gcc cgt 2899
Val Arg Leu Leu Gln Ser Gly Leu Ile Lys Pro Glu Asp Leu Ala Arg
920 925 930
aaa tat gcc aat gag ctg cac gct act gag atc atg ttg ctt gcc tat 2947
Lys Tyr Ala Asn Glu Leu His Ala Thr Glu Ile Met Leu Leu Ala Tyr
935 940 945
tat gtt gcg gcc gtt aac att gag acc act tat ttt ggt ctc gag gga 2995
Tyr Val Ala Ala Val Asn Ile Glu Thr Thr Tyr Phe Gly Leu Glu Gly
950 955 960 965
gag cgt gct ctg cgt aat ggt gaa gat gcg ccg gtc tat gag ccg ttt 3043
Glu Arg Ala Leu Arg Asn Gly Glu Asp Ala Pro Val Tyr Glu Pro Phe
970 975 980
gat ggc att gtg ttg ggt gat acc ttc cag atg tat gaa gac gat gac 3091
Asp Gly Ile Val Leu Gly Asp Thr Phe Gln Met Tyr Glu Asp Asp Asp
985 990 995
aaa ctc gat cta gat gtt ttt act gct aac aat gac cgt atg gag cgt 3139
Lys Leu Asp Leu Asp Val Phe Thr Ala Asn Asn Asp Arg Met Glu Arg
1000 1005 1010
cag aga ctt act cct gta cag gtt att gtg ggt aac ccg cct tac tct 3187
Gln Arg Leu Thr Pro Val Gln Val Ile Val Gly Asn Pro Pro Tyr Ser
1015 1020 1025
gtg ggg caa tcg agt gcg aat gac aat aac gca aac ctc aag tac ccc 3235
Val Gly Gln Ser Ser Ala Asn Asp Asn Asn Ala Asn Leu Lys Tyr Pro
1030 1035 1040 1045
act ctt gat cga cgt att gaa gat tct tat gcg aag tat tcg acc gca 3283
Thr Leu Asp Arg Arg Ile Glu Asp Ser Tyr Ala Lys Tyr Ser Thr Ala
1050 1055 1060
aca aat aag aac tct ctg tac gac tcc tat tta cgt gct ttc cgg tgg 3331
Thr Asn Lys Asn Ser Leu Tyr Asp Ser Tyr Leu Arg Ala Phe Arg Trp
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gca aca gat cgt att cac aca caa ggg gtt gtt gct ttt gtt tct aac 3379
Ala Thr Asp Arg Ile His Thr Gln Gly Val Val Ala Phe Val Ser Asn
1080 1085 1090
aac ggt tgg gtt gac ggc aat acc gct gat ggt gtg cgc cta agt ttg 3427
Asn Gly Trp Val Asp Gly Asn Thr Ala Asp Gly Val Arg Leu Ser Leu
1095 1100 1105
gca cag gac ttc tcc gag att tat gtt ttc aac ctt cgt ggc aat tcc 3475
Ala Gln Asp Phe Ser Glu Ile Tyr Val Phe Asn Leu Arg Gly Asn Ser
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cga aca ggt ggt gat ttg gct aag cgc gag ggc ggc aac gtc ttt aat 3523
Arg Thr Gly Gly Asp Leu Ala Lys Arg Glu Gly Gly Asn Val Phe Asn
1130 1135 1140
gtc cgt gtg ggt act caa atc att gtt gcc gtg aaa aac cca caa ttg 3571
Val Arg Val Gly Thr Gln Ile Ile Val Ala Val Lys Asn Pro Gln Leu
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tct ggt tgc agg att ctt tat aaa gat att ggt gac aat ctc agc gcg 3619
Ser Gly Cys Arg Ile Leu Tyr Lys Asp Ile Gly Asp Asn Leu Ser Ala
1160 1165 1170
gat gcg aag ttg aac gag att gcc gtt gcc aca att gag ggc gct gag 3667
Asp Ala Lys Leu Asn Glu Ile Ala Val Ala Thr Ile Glu Gly Ala Glu
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tgg cag act att tcg cct aat gaa tat gga gat tgg atc agc cag cgc 3715
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tct gta gat ttt gat acc tgg cct gta ctc ggt gat aag aaa aac aaa 3763
Ser Val Asp Phe Asp Thr Trp Pro Val Leu Gly Asp Lys Lys Asn Lys
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tct ttt gat cca agc agc atc caa atg tcc ttg tat cgt cca ttt ttc 4099
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Glu Ile Leu Asp Gly Tyr Arg Arg Val Asp Asn Ile Thr Asp Glu Ile
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Leu Lys Leu Tyr Gln Ser Ser Leu Gly Glu Asp Val Thr Lys Asp Asp
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Pro Arg Tyr Ile Val Glu Leu Ile Ala Lys Val Thr Arg Val Ala Val
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gag acc atg aga att gta gag gag ctt tgagttttcc tactgcagct 5058
Glu Thr Met Arg Ile Val Glu Glu Leu
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<220>
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<223> RXA01949
<400> 47
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Met Ala Thr Ile Ala
1 5
aac cca cgc gac atc atc atc gca ccg gtc gtt tct gag aag tcc tac 163
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10 15 20
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25 30 35
aac aag act cag atc aag att gcc atc gaa gag atc ttc ggc gtc aag 259
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ctt cgc gaa ggc agc gac tcc atc gac atc ttc agc ggc tcc gtc gct 403
Leu Arg Glu Gly Ser Asp Ser Ile Asp Ile Phe Ser Gly Ser Val Ala
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taagacgtcg atagaaaagg acacattatg 433
<210> 48
<211> 101
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 48
Met Ala Thr Ile Ala Asn Pro Arg Asp Ile Ile Ile Ala Pro Val Val
1 5 10 15
Ser Glu Lys Ser Tyr Gly Leu Met Glu Gln Asn Val Tyr Thr Phe Phe
20 25 30
Val Ser Thr Asp Ala Asn Lys Thr Gln Ile Lys Ile Ala Ile Glu Glu
35 40 45
Ile Phe Gly Val Lys Val Ala Ser Val Asn Thr Val Asn Arg Ala Gly
50 55 60
Lys Arg Lys Arg Ser Arg Thr Gly Phe Gly Thr Arg Lys Ala Thr Lys
65 70 75 80
Arg Ala Tyr Val Thr Leu Arg Glu Gly Ser Asp Ser Ile Asp Ile Phe
85 90 95
Ser Gly Ser Val Ala
100
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<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
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<223> RXA01966
<400> 49
gctgtccaag gccatgaatt ttgtgtcctc tgttgctcca accgctgtgc tctcccctgt 60
tatgggctgg gtttataaga agatgggtta gtttttaaaa gtg tct gaa tct gaa 115
Val Ser Glu Ser Glu
1 5
aac aac aca aca cca gca gtc gca gct cgc gat gac cgt ctg gtc tgg 163
Asn Asn Thr Thr Pro Ala Val Ala Ala Arg Asp Asp Arg Leu Val Trp
10 15 20
gtc gat ctg gaa atg act ggt cta gat ttg aag cgc cac gtg atc gtg 211
Val Asp Leu Glu Met Thr Gly Leu Asp Leu Lys Arg His Val Ile Val
25 30 35
gag gtt gcg gcg ttg gtc act gac gct aac ctc aac gtt ttg ggc gag 259
Glu Val Ala Ala Leu Val Thr Asp Ala Asn Leu Asn Val Leu Gly Glu
40 45 50
ggc gtg gac ttg gtt gtt cac gca act gaa gaa gag ctc gcg cag atg 307
Gly Val Asp Leu Val Val His Ala Thr Glu Glu Glu Leu Ala Gln Met
55 60 65
gat gat ttt gtc acc aac atg cac gaa tcc tct ggg ctg act gag cag 355
Asp Asp Phe Val Thr Asn Met His Glu Ser Ser Gly Leu Thr Glu Gln
70 75 80 85
atc cgg gaa tcc gcg gtc acg ttg aag gaa gcc gaa gat gct gtg ctc 403
Ile Arg Glu Ser Ala Val Thr Leu Lys Glu Ala Glu Asp Ala Val Leu
90 95 100
gca ttg att gaa aag cac tgc gat cca gcc cat cct gca ccg cta gct 451
Ala Leu Ile Glu Lys His Cys Asp Pro Ala His Pro Ala Pro Leu Ala
105 110 115
ggt aac tcc att gcc act gac cgc gcg ttt atc cgc gaa cat atg cca 499
Gly Asn Ser Ile Ala Thr Asp Arg Ala Phe Ile Arg Glu His Met Pro
120 125 130
cgt ctt gat gag gcc ctg cat tac cgc atg gtg gat gtg tcc tcg gtg 547
Arg Leu Asp Glu Ala Leu His Tyr Arg Met Val Asp Val Ser Ser Val
135 140 145
aag gaa ttg gcg cgt cgc tgg tac cca cgc gtg tac tac aag cag ccg 595
Lys Glu Leu Ala Arg Arg Trp Tyr Pro Arg Val Tyr Tyr Lys Gln Pro
150 155 160 165
gag aag ggt ttg gcg cac cgc gcg ttg gcg gac att gtg gag tcg att 643
Glu Lys Gly Leu Ala His Arg Ala Leu Ala Asp Ile Val Glu Ser Ile
170 175 180
cgg gag ttg gat tac tac cgt cgc tca ttt ttt gtt gca gag cct ggt 691
Arg Glu Leu Asp Tyr Tyr Arg Arg Ser Phe Phe Val Ala Glu Pro Gly
185 190 195
cct acc tct gag cag tgc gca gat gat gcg cag gca gcg gtg gac cgt 739
Pro Thr Ser Glu Gln Cys Ala Asp Asp Ala Gln Ala Ala Val Asp Arg
200 205 210
ttt gca ccc tac ttt gat tagagggttt taagcagcct ggtgagttcg 787
Phe Ala Pro Tyr Phe Asp
215
<210> 50
<211> 219
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 50
Val Ser Glu Ser Glu Asn Asn Thr Thr Pro Ala Val Ala Ala Arg Asp
1 5 10 15
Asp Arg Leu Val Trp Val Asp Leu Glu Met Thr Gly Leu Asp Leu Lys
20 25 30
Arg His Val Ile Val Glu Val Ala Ala Leu Val Thr Asp Ala Asn Leu
35 40 45
Asn Val Leu Gly Glu Gly Val Asp Leu Val Val His Ala Thr Glu Glu
50 55 60
Glu Leu Ala Gln Met Asp Asp Phe Val Thr Asn Met His Glu Ser Ser
65 70 75 80
Gly Leu Thr Glu Gln Ile Arg Glu Ser Ala Val Thr Leu Lys Glu Ala
85 90 95
Glu Asp Ala Val Leu Ala Leu Ile Glu Lys His Cys Asp Pro Ala His
100 105 110
Pro Ala Pro Leu Ala Gly Asn Ser Ile Ala Thr Asp Arg Ala Phe Ile
115 120 125
Arg Glu His Met Pro Arg Leu Asp Glu Ala Leu His Tyr Arg Met Val
130 135 140
Asp Val Ser Ser Val Lys Glu Leu Ala Arg Arg Trp Tyr Pro Arg Val
145 150 155 160
Tyr Tyr Lys Gln Pro Glu Lys Gly Leu Ala His Arg Ala Leu Ala Asp
165 170 175
Ile Val Glu Ser Ile Arg Glu Leu Asp Tyr Tyr Arg Arg Ser Phe Phe
180 185 190
Val Ala Glu Pro Gly Pro Thr Ser Glu Gln Cys Ala Asp Asp Ala Gln
195 200 205
Ala Ala Val Asp Arg Phe Ala Pro Tyr Phe Asp
210 215
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<213> Corynebacterium glutamicum
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aacagcacgg atcaggacct caagatttgt ctgaccccac tcagggtgat gttgcagacg 60
aattttaggg agtatcaaaa cttgggacta ctatcgatac gtg atg act caa gta 115
Val Met Thr Gln Val
1 5
acc gaa tcc gct gtc cgc agc gcg cta tcc cgc gta gag gat cca gag 163
Thr Glu Ser Ala Val Arg Ser Ala Leu Ser Arg Val Glu Asp Pro Glu
10 15 20
atc ggt aag ccc atc aca gag ctc ggc atg gtc aaa tca gtg tcc atc 211
Ile Gly Lys Pro Ile Thr Glu Leu Gly Met Val Lys Ser Val Ser Ile
25 30 35
gac ggc tct gat gtc cag gtg gag gtc tac ctg acg atc gcg gct tgc 259
Asp Gly Ser Asp Val Gln Val Glu Val Tyr Leu Thr Ile Ala Ala Cys
40 45 50
ccg atg aaa acc acc att gtc acc aac act gaa gca gct ctc aaa gac 307
Pro Met Lys Thr Thr Ile Val Thr Asn Thr Glu Ala Ala Leu Lys Asp
55 60 65
atc gac ggg gtt ggc caa gtt cat gtc acc acc gat gtc atg agt gat 355
Ile Asp Gly Val Gly Gln Val His Val Thr Thr Asp Val Met Ser Asp
70 75 80 85
gaa cag cgc cgt gcg ctc cgc gtc tcc ctg cgc ggt gaa act tct gag 403
Glu Gln Arg Arg Ala Leu Arg Val Ser Leu Arg Gly Glu Thr Ser Glu
90 95 100
cca gtg att cca ttc gct cag cct ggt tcc act acc cgc gtt tac gct 451
Pro Val Ile Pro Phe Ala Gln Pro Gly Ser Thr Thr Arg Val Tyr Ala
105 110 115
gtt gct tcc ggc aaa ggt ggc gta gga aaa tcc tcc atg acg gtg aac 499
Val Ala Ser Gly Lys Gly Gly Val Gly Lys Ser Ser Met Thr Val Asn
120 125 130
ttg gct gca gcc cta gcc aag cgc ggg ctg tct gtg gga att ttg gat 547
Leu Ala Ala Ala Leu Ala Lys Arg Gly Leu Ser Val Gly Ile Leu Asp
135 140 145
gcc gat att tac gga cac tca gtg ccc gga atg ctc ggc tcg gac caa 595
Ala Asp Ile Tyr Gly His Ser Val Pro Gly Met Leu Gly Ser Asp Gln
150 155 160 165
cgc cca cac cag gtc gat gac atg atc atg cct ccc cag gcg cac ggc 643
Arg Pro His Gln Val Asp Asp Met Ile Met Pro Pro Gln Ala His Gly
170 175 180
gtg aag atg ata tcc att gct cac ttc acc gaa gga aat gct cct gtg 691
Val Lys Met Ile Ser Ile Ala His Phe Thr Glu Gly Asn Ala Pro Val
185 190 195
gtg tgg cgt gga cca atg ctg cac cgt gcc atc cag caa ttc ctc act 739
Val Trp Arg Gly Pro Met Leu His Arg Ala Ile Gln Gln Phe Leu Thr
200 205 210
gac gtg ttc tgg ggc gac ctg gat att ttg ctg ctg gat ctt cct cca 787
Asp Val Phe Trp Gly Asp Leu Asp Ile Leu Leu Leu Asp Leu Pro Pro
215 220 225
gga act ggt gac atc gcc atc acc gtt gcc caa ttg atc ccg aat gct 835
Gly Thr Gly Asp Ile Ala Ile Thr Val Ala Gln Leu Ile Pro Asn Ala
230 235 240 245
gag ttg ctc att gtg acc act cct cag gct gcc gca gct gag gtt gcc 883
Glu Leu Leu Ile Val Thr Thr Pro Gln Ala Ala Ala Ala Glu Val Ala
250 255 260
gag cga gca gga acg atc tct gtg cag acc aac cag aag gtt gct ggc 931
Glu Arg Ala Gly Thr Ile Ser Val Gln Thr Asn Gln Lys Val Ala Gly
265 270 275
gtg att gaa aac atg tct gcc atg gtg ctt cct gat ggc acc acc atg 979
Val Ile Glu Asn Met Ser Ala Met Val Leu Pro Asp Gly Thr Thr Met
280 285 290
gat gtt ttc ggc acc ggc ggc ggt caa aag att gct gat cgt ctt acc 1027
Asp Val Phe Gly Thr Gly Gly Gly Gln Lys Ile Ala Asp Arg Leu Thr
295 300 305
gct gtg aca ggt gaa gag gtc aag gtt atc gga tct gtt cca ttg gat 1075
Ala Val Thr Gly Glu Glu Val Lys Val Ile Gly Ser Val Pro Leu Asp
310 315 320 325
ccg aac ctg cgt atc ggt ggc gat gtg gga aat cct att gcg att tct 1123
Pro Asn Leu Arg Ile Gly Gly Asp Val Gly Asn Pro Ile Ala Ile Ser
330 335 340
gaa cca cac tcc cca acc gct gca gcg atc aat gag atc gct gaa cac 1171
Glu Pro His Ser Pro Thr Ala Ala Ala Ile Asn Glu Ile Ala Glu His
345 350 355
cta gct cac cgc aag gta tcg ctg gtg ggt aaa acg ctt ggg ctt ggc 1219
Leu Ala His Arg Lys Val Ser Leu Val Gly Lys Thr Leu Gly Leu Gly
360 365 370
gtt aaa taaaagctaa ataatatcgg tccaagagac 1255
Val Lys
375
<210> 52
<211> 375
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 52
Val Met Thr Gln Val Thr Glu Ser Ala Val Arg Ser Ala Leu Ser Arg
1 5 10 15
Val Glu Asp Pro Glu Ile Gly Lys Pro Ile Thr Glu Leu Gly Met Val
20 25 30
Lys Ser Val Ser Ile Asp Gly Ser Asp Val Gln Val Glu Val Tyr Leu
35 40 45
Thr Ile Ala Ala Cys Pro Met Lys Thr Thr Ile Val Thr Asn Thr Glu
50 55 60
Ala Ala Leu Lys Asp Ile Asp Gly Val Gly Gln Val His Val Thr Thr
65 70 75 80
Asp Val Met Ser Asp Glu Gln Arg Arg Ala Leu Arg Val Ser Leu Arg
85 90 95
Gly Glu Thr Ser Glu Pro Val Ile Pro Phe Ala Gln Pro Gly Ser Thr
100 105 110
Thr Arg Val Tyr Ala Val Ala Ser Gly Lys Gly Gly Val Gly Lys Ser
115 120 125
Ser Met Thr Val Asn Leu Ala Ala Ala Leu Ala Lys Arg Gly Leu Ser
130 135 140
Val Gly Ile Leu Asp Ala Asp Ile Tyr Gly His Ser Val Pro Gly Met
145 150 155 160
Leu Gly Ser Asp Gln Arg Pro His Gln Val Asp Asp Met Ile Met Pro
165 170 175
Pro Gln Ala His Gly Val Lys Met Ile Ser Ile Ala His Phe Thr Glu
180 185 190
Gly Asn Ala Pro Val Val Trp Arg Gly Pro Met Leu His Arg Ala Ile
195 200 205
Gln Gln Phe Leu Thr Asp Val Phe Trp Gly Asp Leu Asp Ile Leu Leu
210 215 220
Leu Asp Leu Pro Pro Gly Thr Gly Asp Ile Ala Ile Thr Val Ala Gln
225 230 235 240
Leu Ile Pro Asn Ala Glu Leu Leu Ile Val Thr Thr Pro Gln Ala Ala
245 250 255
Ala Ala Glu Val Ala Glu Arg Ala Gly Thr Ile Ser Val Gln Thr Asn
260 265 270
Gln Lys Val Ala Gly Val Ile Glu Asn Met Ser Ala Met Val Leu Pro
275 280 285
Asp Gly Thr Thr Met Asp Val Phe Gly Thr Gly Gly Gly Gln Lys Ile
290 295 300
Ala Asp Arg Leu Thr Ala Val Thr Gly Glu Glu Val Lys Val Ile Gly
305 310 315 320
Ser Val Pro Leu Asp Pro Asn Leu Arg Ile Gly Gly Asp Val Gly Asn
325 330 335
Pro Ile Ala Ile Ser Glu Pro His Ser Pro Thr Ala Ala Ala Ile Asn
340 345 350
Glu Ile Ala Glu His Leu Ala His Arg Lys Val Ser Leu Val Gly Lys
355 360 365
Thr Leu Gly Leu Gly Val Lys
370 375
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<211> 3595
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(3565)
<223> RXA02082
<400> 53
gctcgtatcg cagaccaggt catgtggaca cagttattga gcaatggggc gagccgcgtg 60
acgttgaagg ctttgtggag cgctagactt taaccccgtt atg tat ttg aaa tcg 115
Met Tyr Leu Lys Ser
1 5
ttg acg ctc aag ggg ttt aag tct ttc gcg tct gcg acg acc ctg aaa 163
Leu Thr Leu Lys Gly Phe Lys Ser Phe Ala Ser Ala Thr Thr Leu Lys
10 15 20
ttt gag cca ggc att tgt gcc gtg gtg ggt ccg aat ggt tca ggc aaa 211
Phe Glu Pro Gly Ile Cys Ala Val Val Gly Pro Asn Gly Ser Gly Lys
25 30 35
tcc aat gtg gtt gat gcg ctg gcc tgg gtg atg ggt gaa ggt tct gcg 259
Ser Asn Val Val Asp Ala Leu Ala Trp Val Met Gly Glu Gly Ser Ala
40 45 50
aag acc ttg cgt ggc ggc aaa atg gaa gat gtc att ttt gct ggc gcg 307
Lys Thr Leu Arg Gly Gly Lys Met Glu Asp Val Ile Phe Ala Gly Ala
55 60 65
ggc gat cgt aaa ccg ttg ggt cgc gca gaa gtc acg ctg acc att gat 355
Gly Asp Arg Lys Pro Leu Gly Arg Ala Glu Val Thr Leu Thr Ile Asp
70 75 80 85
aac tct gat ggc gca ctg ccc att gag tac acc gaa gtg tcg gtg acc 403
Asn Ser Asp Gly Ala Leu Pro Ile Glu Tyr Thr Glu Val Ser Val Thr
90 95 100
aga cgg atg ttc cgt gat ggt gca agt gaa tat gag atc aat ggg gcg 451
Arg Arg Met Phe Arg Asp Gly Ala Ser Glu Tyr Glu Ile Asn Gly Ala
105 110 115
aaa gct cga ttg atg gat atc cag gag ctg ttg tcg gat acc ggt att 499
Lys Ala Arg Leu Met Asp Ile Gln Glu Leu Leu Ser Asp Thr Gly Ile
120 125 130
ggc cgt gaa atg cac atc atg gtg ggg cag gga aag ctc gca gag att 547
Gly Arg Glu Met His Ile Met Val Gly Gln Gly Lys Leu Ala Glu Ile
135 140 145
ttg gag tcc cgc ccc gaa gag cgc cga gcg tat atc gaa gaa gct gcg 595
Leu Glu Ser Arg Pro Glu Glu Arg Arg Ala Tyr Ile Glu Glu Ala Ala
150 155 160 165
ggt gtg ctc aag cac cgg cgc agg aaa gaa aag gcg cag cgc aaa ctt 643
Gly Val Leu Lys His Arg Arg Arg Lys Glu Lys Ala Gln Arg Lys Leu
170 175 180
cag ggc atg cag gtc aat ctt gat cgt ttg cag gat ctg acc cat gag 691
Gln Gly Met Gln Val Asn Leu Asp Arg Leu Gln Asp Leu Thr His Glu
185 190 195
ttg gcc aag cag ctc aag ccg ttg gct agg cag gcg gaa gca gcg cag 739
Leu Ala Lys Gln Leu Lys Pro Leu Ala Arg Gln Ala Glu Ala Ala Gln
200 205 210
cgt gcg gcg acg gtg cag gct gat ttg cgt gat gcg cgt ttc cag att 787
Arg Ala Ala Thr Val Gln Ala Asp Leu Arg Asp Ala Arg Phe Gln Ile
215 220 225
gct ggc ttt gag atc gtg aag ctc tcg gaa aag ctg gaa acc tct act 835
Ala Gly Phe Glu Ile Val Lys Leu Ser Glu Lys Leu Glu Thr Ser Thr
230 235 240 245
gag cgc gag aaa atg att cgt gag cag gcg gaa gca gca caa gag cag 883
Glu Arg Glu Lys Met Ile Arg Glu Gln Ala Glu Ala Ala Gln Glu Gln
250 255 260
ctg gaa gaa gcc acc aca act cag atg gaa gtg gag atg gag ttg gcg 931
Leu Glu Glu Ala Thr Thr Thr Gln Met Glu Val Glu Met Glu Leu Ala
265 270 275
gag atc act ccg cag gct gaa gct gcg caa cag ttg tgg ttt gat ttg 979
Glu Ile Thr Pro Gln Ala Glu Ala Ala Gln Gln Leu Trp Phe Asp Leu
280 285 290
tct tcg ctg gct gag cgg gtg tcg gca acg atg cgt att gct gca gac 1027
Ser Ser Leu Ala Glu Arg Val Ser Ala Thr Met Arg Ile Ala Ala Asp
295 300 305
cgt gcg agt tca ggt gcc gcg gat gtg ccg tat gcg ggc cag gat cct 1075
Arg Ala Ser Ser Gly Ala Ala Asp Val Pro Tyr Ala Gly Gln Asp Pro
310 315 320 325
gat gag ttg ctt ggt cgg gcc gaa act gct gac aaa gaa tta gaa gaa 1123
Asp Glu Leu Leu Gly Arg Ala Glu Thr Ala Asp Lys Glu Leu Glu Glu
330 335 340
ctc gag atg gcc gtg gaa atg acc acc gag cgt ttg acc tcc att caa 1171
Leu Glu Met Ala Val Glu Met Thr Thr Glu Arg Leu Thr Ser Ile Gln
345 350 355
gag gaa gcc gag gat aag gcc gcg cag gct cgt gag gct gag cgt gaa 1219
Glu Glu Ala Glu Asp Lys Ala Ala Gln Ala Arg Glu Ala Glu Arg Glu
360 365 370
cac ttg gcg cag gtc agg gcg att tct gat cgt cgt gaa ggt gtt gtg 1267
His Leu Ala Gln Val Arg Ala Ile Ser Asp Arg Arg Glu Gly Val Val
375 380 385
cgc ctg ctt gca tct gag gaa tct ttg cgc acc cag cac acg tca gca 1315
Arg Leu Leu Ala Ser Glu Glu Ser Leu Arg Thr Gln His Thr Ser Ala
390 395 400 405
gag gag gaa gct gag cga ctc agt gag cag ctt gag gag ttc atc ggc 1363
Glu Glu Glu Ala Glu Arg Leu Ser Glu Gln Leu Glu Glu Phe Ile Gly
410 415 420
cgc att ttg gat gtg gaa cgt gaa cgt cgc ctc acc gat gag cgt aaa 1411
Arg Ile Leu Asp Val Glu Arg Glu Arg Arg Leu Thr Asp Glu Arg Lys
425 430 435
cag ggc gtt gac acg gat cgt gcg ccc ttg gaa gaa gcc ctc aaa cag 1459
Gln Gly Val Asp Thr Asp Arg Ala Pro Leu Glu Glu Ala Leu Lys Gln
440 445 450
gca aaa cat gaa gcc gaa gca gca gag act cgt ctt gag gag ctt cgt 1507
Ala Lys His Glu Ala Glu Ala Ala Glu Thr Arg Leu Glu Glu Leu Arg
455 460 465
act aag cgc agc gat ctg gaa aaa gaa gta tcc agg ttg cag tcg cgc 1555
Thr Lys Arg Ser Asp Leu Glu Lys Glu Val Ser Arg Leu Gln Ser Arg
470 475 480 485
att gag acg ctt aac caa aat agg cca cgt tcc gat gct gct gat gtg 1603
Ile Glu Thr Leu Asn Gln Asn Arg Pro Arg Ser Asp Ala Ala Asp Val
490 495 500
gtg gat tac ccg cag ctg gcc acg ttg att cga ccg caa cga aac gtc 1651
Val Asp Tyr Pro Gln Leu Ala Thr Leu Ile Arg Pro Gln Arg Asn Val
505 510 515
gat aag gct ctc gct gcc gcc ctg ggt gcg cat gcc gag gcg ctg gct 1699
Asp Lys Ala Leu Ala Ala Ala Leu Gly Ala His Ala Glu Ala Leu Ala
520 525 530
ggc gag gct gcg gaa ggg ctc gtc gag aag ctt atc gac gcc ggc gtt 1747
Gly Glu Ala Ala Glu Gly Leu Val Glu Lys Leu Ile Asp Ala Gly Val
535 540 545
gca cgc acc atc atc gtt gat ggc acg cag gct ggc ggc gca tgg cgc 1795
Ala Arg Thr Ile Ile Val Asp Gly Thr Gln Ala Gly Gly Ala Trp Arg
550 555 560 565
ctg gac gcg aac att ccg gcc ggg gcg agc tgg ctg ctc gac cat gtt 1843
Leu Asp Ala Asn Ile Pro Ala Gly Ala Ser Trp Leu Leu Asp His Val
570 575 580
gat ctg gat ccg gcg att gcc ggc ccg gta aac cgg ctg ctt gcc gac 1891
Asp Leu Asp Pro Ala Ile Ala Gly Pro Val Asn Arg Leu Leu Ala Asp
585 590 595
gtt gtg ctt gtc gac gac ccc tcc ctc ggc cgc caa gca atc gag gat 1939
Val Val Leu Val Asp Asp Pro Ser Leu Gly Arg Gln Ala Ile Glu Asp
600 605 610
gat ccc cgt ctg cgt gcc gtt gac cgc aat ggt gtg ctc atc ggc gct 1987
Asp Pro Arg Leu Arg Ala Val Asp Arg Asn Gly Val Leu Ile Gly Ala
615 620 625
ggg tgg att cag gtc ggc acc gaa acc tcg act gtg gaa atc aca gct 2035
Gly Trp Ile Gln Val Gly Thr Glu Thr Ser Thr Val Glu Ile Thr Ala
630 635 640 645
caa att gag gaa gca gaa gct caa ctt gct gcg gcc tct gcc gcc ttg 2083
Gln Ile Glu Glu Ala Glu Ala Gln Leu Ala Ala Ala Ser Ala Ala Leu
650 655 660
gac gac att gcc ggc act ttt gat ggc gcc ctc cac gct gcc gac aac 2131
Asp Asp Ile Ala Gly Thr Phe Asp Gly Ala Leu His Ala Ala Asp Asn
665 670 675
act cgc gtc gag gtg gct gcc cgc acc gca gcc ctg cgc gaa ctc gac 2179
Thr Arg Val Glu Val Ala Ala Arg Thr Ala Ala Leu Arg Glu Leu Asp
680 685 690
atg acc agg gat tcc atc acc cgc gat ctc gcg cgc ttg gac aaa caa 2227
Met Thr Arg Asp Ser Ile Thr Arg Asp Leu Ala Arg Leu Asp Lys Gln
695 700 705
cat gag gcc gcc gaa tcc gag cgc gtc cgc cat gtt gga cgc ctg cat 2275
His Glu Ala Ala Glu Ser Glu Arg Val Arg His Val Gly Arg Leu His
710 715 720 725
gct gcg gaa aca cgc cgt gaa gag ctg cgc gaa cag tta gaa gac atc 2323
Ala Ala Glu Thr Arg Arg Glu Glu Leu Arg Glu Gln Leu Glu Asp Ile
730 735 740
gtc gat cga ctc tcc cgc gtg gaa gac gaa gaa gac gct gac gaa ccc 2371
Val Asp Arg Leu Ser Arg Val Glu Asp Glu Glu Asp Ala Asp Glu Pro
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tca acc acc gcc cgc gac caa gca aat gcc gag ctg caa caa atc cgc 2419
Ser Thr Thr Ala Arg Asp Gln Ala Asn Ala Glu Leu Gln Gln Ile Arg
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gcc atg gaa atg gaa gca cgc ctt gcc caa cgc acc gcc gaa gag cgc 2467
Ala Met Glu Met Glu Ala Arg Leu Ala Gln Arg Thr Ala Glu Glu Arg
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gcc ggg cag cag cgg ggc aag ggc gat agt ctg cga cgc cag gcc gag 2515
Ala Gly Gln Gln Arg Gly Lys Gly Asp Ser Leu Arg Arg Gln Ala Glu
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cat gag cgc caa gcc aaa atc cgg cat gaa caa gcc atg gaa gcc cgt 2563
His Glu Arg Gln Ala Lys Ile Arg His Glu Gln Ala Met Glu Ala Arg
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cgc agg cgc acc caa ttg gct gca gcc gtg caa aat ggc gca cgc gat 2611
Arg Arg Arg Thr Gln Leu Ala Ala Ala Val Gln Asn Gly Ala Arg Asp
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gtg gcc gag cgt gtc tca gct gcc ctt gcc caa gca gcc atc gaa aga 2659
Val Ala Glu Arg Val Ser Ala Ala Leu Ala Gln Ala Ala Ile Glu Arg
840 845 850
gat cag cac aac cgc gac aaa gcg ctg ctg acc tca cac tta gcg cgc 2707
Asp Gln His Asn Arg Asp Lys Ala Leu Leu Thr Ser His Leu Ala Arg
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gcc aaa gat gct gtg agt gct gca cgc cag cac ctc aat cga ctc agc 2755
Ala Lys Asp Ala Val Ser Ala Ala Arg Gln His Leu Asn Arg Leu Ser
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gac aac gcc cac tcc atg gaa ctt gcg cgc agc caa gct caa gtg cgc 2803
Asp Asn Ala His Ser Met Glu Leu Ala Arg Ser Gln Ala Gln Val Arg
890 895 900
atg gag gaa gcc gtt gcc aaa atc acc gag caa ctt ggc att ccg gtc 2851
Met Glu Glu Ala Val Ala Lys Ile Thr Glu Gln Leu Gly Ile Pro Val
905 910 915
gca gaa ttg ctg cgc gat tac acc cca gat gaa aac ttt gat gaa aag 2899
Ala Glu Leu Leu Arg Asp Tyr Thr Pro Asp Glu Asn Phe Asp Glu Lys
920 925 930
ttc caa cgg gca cgc ctc aaa caa gcc gaa aaa gac ctc gcc gca cta 2947
Phe Gln Arg Ala Arg Leu Lys Gln Ala Glu Lys Asp Leu Ala Ala Leu
935 940 945
ggc aaa gtc aac ccc ctg gcc ttg gaa gaa ttc aaa gcc ttg gaa gag 2995
Gly Lys Val Asn Pro Leu Ala Leu Glu Glu Phe Lys Ala Leu Glu Glu
950 955 960 965
cgc tac gag ttc ctc tcc acc caa ttg gcc gat gtg gaa caa gcc cgc 3043
Arg Tyr Glu Phe Leu Ser Thr Gln Leu Ala Asp Val Glu Gln Ala Arg
970 975 980
gcc gat ctg agc ggc gtg att gaa gaa gtc gat gcg aaa att ctg cag 3091
Ala Asp Leu Ser Gly Val Ile Glu Glu Val Asp Ala Lys Ile Leu Gln
985 990 995
ctt ttc acc gat gcc tgg aac gac gtg gaa gca gaa ttc cca cgc gtg 3139
Leu Phe Thr Asp Ala Trp Asn Asp Val Glu Ala Glu Phe Pro Arg Val
1000 1005 1010
ttc aac acc ttg ttc cca ggt ggc gaa ggc aaa ctg atc ctc acc gag 3187
Phe Asn Thr Leu Phe Pro Gly Gly Glu Gly Lys Leu Ile Leu Thr Glu
1015 1020 1025
ccc gat gat ttg ctg gca acc ggc atc gaa gtg gaa gcc cgc cca cca 3235
Pro Asp Asp Leu Leu Ala Thr Gly Ile Glu Val Glu Ala Arg Pro Pro
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gga aaa cgc gtc aag cgc cta tcg ctg cta tcc ggt ggc gaa aaa tcc 3283
Gly Lys Arg Val Lys Arg Leu Ser Leu Leu Ser Gly Gly Glu Lys Ser
1050 1055 1060
ctc acc gca cta gcc atg ctc gtc gcg att ttc cgc gcc cga ccc agc 3331
Leu Thr Ala Leu Ala Met Leu Val Ala Ile Phe Arg Ala Arg Pro Ser
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cct ttc tac gtg atg gat gag gtg gaa gca gca ctc gat gat gtc aac 3379
Pro Phe Tyr Val Met Asp Glu Val Glu Ala Ala Leu Asp Asp Val Asn
1080 1085 1090
ctt cgc cga ctt atc gca ctg ttt gaa gag ttg cgc cgc gac tcc cag 3427
Leu Arg Arg Leu Ile Ala Leu Phe Glu Glu Leu Arg Arg Asp Ser Gln
1095 1100 1105
ctc att gtg atc acc cac caa aaa ccc acc atg gat gtg gct aac gta 3475
Leu Ile Val Ile Thr His Gln Lys Pro Thr Met Asp Val Ala Asn Val
1110 1115 1120 1125
ctc tac ggc gtc acc atg cgt ggc gat ggc gtt acc cgc gtg atc tcc 3523
Leu Tyr Gly Val Thr Met Arg Gly Asp Gly Val Thr Arg Val Ile Ser
1130 1135 1140
caa cgc atg gaa cct gct tct gca atg gaa act gtg gcg ggg 3565
Gln Arg Met Glu Pro Ala Ser Ala Met Glu Thr Val Ala Gly
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<213> Corynebacterium glutamicum
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Asn Gly Ser Gly Lys Ser Asn Val Val Asp Ala Leu Ala Trp Val Met
35 40 45
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50 55 60
Ile Phe Ala Gly Ala Gly Asp Arg Lys Pro Leu Gly Arg Ala Glu Val
65 70 75 80
Thr Leu Thr Ile Asp Asn Ser Asp Gly Ala Leu Pro Ile Glu Tyr Thr
85 90 95
Glu Val Ser Val Thr Arg Arg Met Phe Arg Asp Gly Ala Ser Glu Tyr
100 105 110
Glu Ile Asn Gly Ala Lys Ala Arg Leu Met Asp Ile Gln Glu Leu Leu
115 120 125
Ser Asp Thr Gly Ile Gly Arg Glu Met His Ile Met Val Gly Gln Gly
130 135 140
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Ile Glu Glu Ala Ala Gly Val Leu Lys His Arg Arg Arg Lys Glu Lys
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Leu Glu Thr Ser Thr Glu Arg Glu Lys Met Ile Arg Glu Gln Ala Glu
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Ala Ala Gln Glu Gln Leu Glu Glu Ala Thr Thr Thr Gln Met Glu Val
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275 280 285
Leu Trp Phe Asp Leu Ser Ser Leu Ala Glu Arg Val Ser Ala Thr Met
290 295 300
Arg Ile Ala Ala Asp Arg Ala Ser Ser Gly Ala Ala Asp Val Pro Tyr
305 310 315 320
Ala Gly Gln Asp Pro Asp Glu Leu Leu Gly Arg Ala Glu Thr Ala Asp
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Lys Glu Leu Glu Glu Leu Glu Met Ala Val Glu Met Thr Thr Glu Arg
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Leu Thr Ser Ile Gln Glu Glu Ala Glu Asp Lys Ala Ala Gln Ala Arg
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Arg Glu Gly Val Val Arg Leu Leu Ala Ser Glu Glu Ser Leu Arg Thr
385 390 395 400
Gln His Thr Ser Ala Glu Glu Glu Ala Glu Arg Leu Ser Glu Gln Leu
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Glu Glu Phe Ile Gly Arg Ile Leu Asp Val Glu Arg Glu Arg Arg Leu
420 425 430
Thr Asp Glu Arg Lys Gln Gly Val Asp Thr Asp Arg Ala Pro Leu Glu
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Glu Ala Leu Lys Gln Ala Lys His Glu Ala Glu Ala Ala Glu Thr Arg
450 455 460
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Met Ser Leu Ala Thr
1 5
gtg gga aac aat ctt gat tcc cgt tac acc atg gcg tcg ggt atc cgt 163
Val Gly Asn Asn Leu Asp Ser Arg Tyr Thr Met Ala Ser Gly Ile Arg
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cgc cag atc aac aag gtc ttc cca act cac tgg tcc ttc atg ctc ggc 211
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gag att gcg ctt tac agc ttc atc gtc ttg ctg ctg act ggt gtc tac 259
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ctg acc ctg ttc ttc gac cca tca atc acc aag gtc att tat gac ggc 307
Leu Thr Leu Phe Phe Asp Pro Ser Ile Thr Lys Val Ile Tyr Asp Gly
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ggc tac ctc cca ctg aac ggt gtg gag atg tcc cgt gca tac gca act 355
Gly Tyr Leu Pro Leu Asn Gly Val Glu Met Ser Arg Ala Tyr Ala Thr
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gcg ttg gat att tcc ttc gag gtt cgc ggt ggt ctg ttc atc cgc cag 403
Ala Leu Asp Ile Ser Phe Glu Val Arg Gly Gly Leu Phe Ile Arg Gln
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atg cac cac tgg gca gcc ctg ctg ttc gtt gta tcc atg ctg gtt cac 451
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atg ctc cgt att ttc ttc acc ggt gcg ttc cgt cgc cca cgt gaa gca 499
Met Leu Arg Ile Phe Phe Thr Gly Ala Phe Arg Arg Pro Arg Glu Ala
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aac tgg atc atc ggt gtt gtt ctg atc atc ctg ggt atg gct gaa ggc 547
Asn Trp Ile Ile Gly Val Val Leu Ile Ile Leu Gly Met Ala Glu Gly
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Phe Met Gly Tyr Ser Leu Pro Asp Asp Leu Leu Ser Gly Val Gly Leu
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Arg Ile Met Ser Ala Ile Ile Val Gly Leu Pro Ile Ile Gly Thr Trp
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Asp Arg Phe Tyr Ile Ala His Val Leu Ile Ile Pro Ala Ile Leu Leu
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Gly Leu Ile Ala Ala His Leu Ala Leu Val Trp Tyr Gln Lys His Thr
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cag ttc cca ggc gct ggc cgc act gag aac aac gtg atc ggt atc cga 835
Gln Phe Pro Gly Ala Gly Arg Thr Glu Asn Asn Val Ile Gly Ile Arg
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Ile Met Pro Leu Phe Ala Val Lys Ala Val Ala Phe Gly Leu Ile Val
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Phe Gly Phe Leu Ala Leu Leu Ala Gly Val Thr Thr Ile Asn Ala Ile
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Trp Asn Leu Gly Pro Tyr Asn Pro Ser Gln Val Ser Ala Gly Ser Gln
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Pro Asp Val Tyr Met Leu Trp Thr Asp Gly Ala Ala Arg Val Met Pro
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Ala Trp Glu Leu Tyr Leu Gly Asn Tyr Thr Ile Pro Ala Val Phe Trp
310 315 320 325
gtt gct gtg atg ctg ggt atc ctc gtg gtt ctg ctt gtg act tac cca 1123
Val Ala Val Met Leu Gly Ile Leu Val Val Leu Leu Val Thr Tyr Pro
330 335 340
ttc att gag cgt aag ttc acc ggc gac gat gca cac cac aac ttg ctg 1171
Phe Ile Glu Arg Lys Phe Thr Gly Asp Asp Ala His His Asn Leu Leu
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cag cgt cct cgc gat gtt cca gtc cgc acc tca ctc ggt gtc atg gcg 1219
Gln Arg Pro Arg Asp Val Pro Val Arg Thr Ser Leu Gly Val Met Ala
360 365 370
ctt gtc ttc tac atc ctg ctt acc gtt tct ggt ggt aac gat gtt tac 1267
Leu Val Phe Tyr Ile Leu Leu Thr Val Ser Gly Gly Asn Asp Val Tyr
375 380 385
gca atg cag ttc cat gtt tca ctg aac gcg atg acc tgg atc ggt cgt 1315
Ala Met Gln Phe His Val Ser Leu Asn Ala Met Thr Trp Ile Gly Arg
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atc ggc ctc atc gtt gga cca gct att gca tac ttc atc act tac cga 1363
Ile Gly Leu Ile Val Gly Pro Ala Ile Ala Tyr Phe Ile Thr Tyr Arg
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Leu Cys Ile Gly Leu Gln Arg Ser Asp Arg Glu Val Leu Glu His Gly
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atc gag acc ggt atc atc aag cag atg cca aat ggt gcc ttc att gaa 1459
Ile Glu Thr Gly Ile Ile Lys Gln Met Pro Asn Gly Ala Phe Ile Glu
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gtt cac cag cca ctt ggc cca gtt gat gac cat ggt cac cca atc cca 1507
Val His Gln Pro Leu Gly Pro Val Asp Asp His Gly His Pro Ile Pro
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ctg cca tac gct ggc gct gcg gtt cca aag cag atg aac cag ctt ggt 1555
Leu Pro Tyr Ala Gly Ala Ala Val Pro Lys Gln Met Asn Gln Leu Gly
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gac atc cgt gcg aag gct aag gaa att gag cac gca aac cac att gag 1651
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Gly Asn Asp Val Tyr Ala Met Gln Phe His Val Ser Leu Asn Ala Met
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Met Cys Ser Leu Ser
1 5
aaa ttc tta atg tac agg caa ttg atg agt tca aga att ggc aat ttt 163
Lys Phe Leu Met Tyr Arg Gln Leu Met Ser Ser Arg Ile Gly Asn Phe
10 15 20
ctt ata aat cgc att tcc acg ggc ctg ccc gta gaa aat att atc cct 211
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25 30 35
cac ctg caa gaa gct ttt tcg gcc gga cct aaa aac ctt gtc att cag 259
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215 220 225
gtc gac tgg gat ttc ctc gac cac atg gcg cag aaa act cac gat gcg 835
Val Asp Trp Asp Phe Leu Asp His Met Ala Gln Lys Thr His Asp Ala
230 235 240 245
gtg aca cat tca gag cac tct gca ctc att ttc gtc cca ggt gtg cgt 883
Val Thr His Ser Glu His Ser Ala Leu Ile Phe Val Pro Gly Val Arg
250 255 260
gaa att gat cga gta atg agc acg ctc aaa tcg ctc ggc cat aat aat 931
Glu Ile Asp Arg Val Met Ser Thr Leu Lys Ser Leu Gly His Asn Asn
265 270 275
gtt ttc cca ctt cat ggc caa ctc agc ccg acc gaa caa gac cgc gcc 979
Val Phe Pro Leu His Gly Gln Leu Ser Pro Thr Glu Gln Asp Arg Ala
280 285 290
ctc gca ccg tca caa cag cag cgc atc att gtc tcc act ccc gtt gcg 1027
Leu Ala Pro Ser Gln Gln Gln Arg Ile Ile Val Ser Thr Pro Val Ala
295 300 305
gaa agc tcc cta act gtg cct gga gtt cgc atc gtg gtg gat tcc ggc 1075
Glu Ser Ser Leu Thr Val Pro Gly Val Arg Ile Val Val Asp Ser Gly
310 315 320 325
ctc tca cga agc ccc aaa cga gac tct gcc cgc ggc atg aca gga ctg 1123
Leu Ser Arg Ser Pro Lys Arg Asp Ser Ala Arg Gly Met Thr Gly Leu
330 335 340
atc acc agc agt tgc gcg cag gct tca gca ggc caa cgc gca ggt cgc 1171
Ile Thr Ser Ser Cys Ala Gln Ala Ser Ala Gly Gln Arg Ala Gly Arg
345 350 355
gct ggc cgt gaa gga cca gga caa ata atc aga tgc tat tcc gaa gaa 1219
Ala Gly Arg Glu Gly Pro Gly Gln Ile Ile Arg Cys Tyr Ser Glu Glu
360 365 370
gac ttc tcc cac ttc cca cga ttt gtg aca cca gaa atc agc tcc gct 1267
Asp Phe Ser His Phe Pro Arg Phe Val Thr Pro Glu Ile Ser Ser Ala
375 380 385
gac ctc acc caa gca gcc ctc tgg ctc gcc caa tgg gga acg tca cct 1315
Asp Leu Thr Gln Ala Ala Leu Trp Leu Ala Gln Trp Gly Thr Ser Pro
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gcg gat tta ccg ctt ctt gat caa ccc cct cac gca gcc tgg acg gct 1363
Ala Asp Leu Pro Leu Leu Asp Gln Pro Pro His Ala Ala Trp Thr Ala
410 415 420
gca caa cag atc ctg cgc ctc atc ggc gcg ctt gaa ggt gac gct atc 1411
Ala Gln Gln Ile Leu Arg Leu Ile Gly Ala Leu Glu Gly Asp Ala Ile
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acg agc ctg gga cat cgc tta tcg acg ctt ccc ctc tgc cct caa ctc 1459
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gtg gtg tcc gaa aac ccg cag ggg gac gtc gaa aag caa caa ccc gac 1555
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Lys Arg Glu Val Glu Arg Leu Arg Arg Leu Ala Pro Ala Ser Val Gly
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Ala Arg Leu Met Asp Ser Asp Leu Lys Asp Ala Glu Trp Ile Ser Val
535 540 545
gct gca att aac cgc tca caa aat tct gcc atc atc cgc gcc gcc gcc 1795
Ala Ala Ile Asn Arg Ser Gln Asn Ser Ala Ile Ile Arg Ala Ala Ala
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cgc att tca gag gac gat gcc ata gac atc atc gga gtc gtg gaa gaa 1843
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acc cgc gcg att ttt gtc aac gga aaa gtc caa gcc cgg aag gtc aaa 1891
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gca gca ggc gcg atc gaa tta agt tcc act ccg aca aaa cca aca ccc 1939
Ala Ala Gly Ala Ile Glu Leu Ser Ser Thr Pro Thr Lys Pro Thr Pro
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gcc gaa gcc tcg gaa aca atc gcc aca gcc ctt gcc aaa ggc gga atc 1987
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Ala Asp Pro His Leu Trp Leu Ser Pro Glu Ile Glu Ala Leu Ser His
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<220>
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<222> (101)..(6400)
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<400> 59
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Met Ser Ser Leu Ile
1 5
cct gtc cat gcg gct ggc agc att caa gaa ggc atc acc gaa tat ttg 163
Pro Val His Ala Ala Gly Ser Ile Gln Glu Gly Ile Thr Glu Tyr Leu
10 15 20
acc acc agt ttt tcc ctt gcg gat aag caa gtg gcc acc gag ctc aag 211
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25 30 35
cgg ttc ttg ggc cac ggt gat tcc ggc atg ttc cac ggg cct tat gtg 259
Arg Phe Leu Gly His Gly Asp Ser Gly Met Phe His Gly Pro Tyr Val
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ttc ctc tac ccg att ctg gat cat gcc ctg cgc ctg cgg aaa cgt ggc 499
Phe Leu Tyr Pro Ile Leu Asp His Ala Leu Arg Leu Arg Lys Arg Gly
120 125 130
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Leu Lys Gly Val Thr Ala Gly Ile Tyr Thr Gly Glu Ala Lys Gly Asn
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cgg gtt agt ccc cca gat att ttg ctc acc aac tac aaa atg ttg gat 739
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Gln Leu Leu Leu Arg Ser Val Asp Arg Glu Met Trp Gln Lys Ser Ala
215 220 225
acc tct ttg cag tat tta gta ctt gat gag ttc cac act tat gac ggt 835
Thr Ser Leu Gln Tyr Leu Val Leu Asp Glu Phe His Thr Tyr Asp Gly
230 235 240 245
gct caa ggt aca gat gtg gcg ttg ttg ttg cgg cgt ttg ggg ctc atg 883
Ala Gln Gly Thr Asp Val Ala Leu Leu Leu Arg Arg Leu Gly Leu Met
250 255 260
ctg aaa tcc cag cag cct gct aat ttt ttg gat gat agt gcc atg cac 931
Leu Lys Ser Gln Gln Pro Ala Asn Phe Leu Asp Asp Ser Ala Met His
265 270 275
cgg cca ttg ggc att att acg cca gtg gct acc tca gca acc ttg ggt 979
Arg Pro Leu Gly Ile Ile Thr Pro Val Ala Thr Ser Ala Thr Leu Gly
280 285 290
tct ggt gat tcc ggc tcc ccc atg ttg gat ttt gct tac acc att ttt 1027
Ser Gly Asp Ser Gly Ser Pro Met Leu Asp Phe Ala Tyr Thr Ile Phe
295 300 305
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Gly Glu Arg Phe Pro Ala Asp Ala Ile Val Gly Glu Thr Arg Leu Glu
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ctg gat caa tgg cgc gca gaa att gcc cag aat ttt ggt gcc cca gca 1123
Leu Asp Gln Trp Arg Ala Glu Ile Ala Gln Asn Phe Gly Ala Pro Ala
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Leu Gly Glu Val Lys Ala Ala Glu Phe Ile Ser His Ala Leu Ala Ala
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920 925 930
aca aag ctt ttc gac gct tta agc aac cgc agc att ctc tcc tca ata 2947
Thr Lys Leu Phe Asp Ala Leu Ser Asn Arg Ser Ile Leu Ser Ser Ile
935 940 945
tct acc gac agc ggc gga aaa atc tac tgc ctc gag gcc gaa cgc atc 2995
Ser Thr Asp Ser Gly Gly Lys Ile Tyr Cys Leu Glu Ala Glu Arg Ile
950 955 960 965
cgt att ttt agc gaa gac cat ccc gaa gtt ctg gaa tgc agc gtg tgc 3043
Arg Ile Phe Ser Glu Asp His Pro Glu Val Leu Glu Cys Ser Val Cys
970 975 980
cat gcc caa act ggt gta act gat cat gtg cgt gaa ctt ctt gat ggc 3091
His Ala Gln Thr Gly Val Thr Asp His Val Arg Glu Leu Leu Asp Gly
985 990 995
gct ccg tgt ttt agc cct agt tgt ggg ggc gtt ctc cat acc gag gaa 3139
Ala Pro Cys Phe Ser Pro Ser Cys Gly Gly Val Leu His Thr Glu Glu
1000 1005 1010
gta gaa gac aac tac tac cgc agg ctt tat tcc gca att gaa ccg cgc 3187
Val Glu Asp Asn Tyr Tyr Arg Arg Leu Tyr Ser Ala Ile Glu Pro Arg
1015 1020 1025
act gtc att gcc cgc gag cac acc agc atg ctc aag aaa aaa gac cgc 3235
Thr Val Ile Ala Arg Glu His Thr Ser Met Leu Lys Lys Lys Asp Arg
1030 1035 1040 1045
ctc gca ctc gaa caa tcc ttt aga ggt gga gaa ggc tcg gcc aaa caa 3283
Leu Ala Leu Glu Gln Ser Phe Arg Gly Gly Glu Gly Ser Ala Lys Gln
1050 1055 1060
tcc ccc gat gcg ccc aat gtg ttg gta gct acg cca acg ctg gaa atg 3331
Ser Pro Asp Ala Pro Asn Val Leu Val Ala Thr Pro Thr Leu Glu Met
1065 1070 1075
ggt att gac atc ggc gat ctc tcc acc gtg atg ctt gcg tct ttg cca 3379
Gly Ile Asp Ile Gly Asp Leu Ser Thr Val Met Leu Ala Ser Leu Pro
1080 1085 1090
aca tca gtg gcc agt tat gta cag cgt gtt ggt cgt gcc ggg cgc ctc 3427
Thr Ser Val Ala Ser Tyr Val Gln Arg Val Gly Arg Ala Gly Arg Leu
1095 1100 1105
agc gga aac tcg ttg gta ctc gcc gtg gtg cgt ggc cgc ggt gtc aca 3475
Ser Gly Asn Ser Leu Val Leu Ala Val Val Arg Gly Arg Gly Val Thr
1110 1115 1120 1125
ttg cct cgt ctt aac caa ccg ctc tcc atg atc aag gga gct att acc 3523
Leu Pro Arg Leu Asn Gln Pro Leu Ser Met Ile Lys Gly Ala Ile Thr
1130 1135 1140
cca cca gtt gcg tat ctt tcc gcc agt gaa atc ttg cac cgc caa ttc 3571
Pro Pro Val Ala Tyr Leu Ser Ala Ser Glu Ile Leu His Arg Gln Phe
1145 1150 1155
ttg gca tat gtg atc gac tgc tta gat act cgc gcc gaa ctg cca aaa 3619
Leu Ala Tyr Val Ile Asp Cys Leu Asp Thr Arg Ala Glu Leu Pro Lys
1160 1165 1170
ctc gaa aca gca att gat gtt ttt gat aat gcc gcc gga aaa aca cct 3667
Leu Glu Thr Ala Ile Asp Val Phe Asp Asn Ala Ala Gly Lys Thr Pro
1175 1180 1185
ttg gtt gca tta ctc aaa gcg cag att cac gca ggc cta gat cct ttg 3715
Leu Val Ala Leu Leu Lys Ala Gln Ile His Ala Gly Leu Asp Pro Leu
1190 1195 1200 1205
ctg gag gaa ttt gta cgc acc ctc aac atg caa atc agc att gat aat 3763
Leu Glu Glu Phe Val Arg Thr Leu Asn Met Gln Ile Ser Ile Asp Asn
1210 1215 1220
att ttc gaa ctg cgc act tgg gca tct gga aat agc aca gac tcc ctc 3811
Ile Phe Glu Leu Arg Thr Trp Ala Ser Gly Asn Ser Thr Asp Ser Leu
1225 1230 1235
ctc gcg ctg ctg gaa acc tcc caa aaa gag tgg atg gaa gaa cgc cgc 3859
Leu Ala Leu Leu Glu Thr Ser Gln Lys Glu Trp Met Glu Glu Arg Arg
1240 1245 1250
agc ctt acc gcg cgg cgg gga gaa ctc gaa aaa atc ttt gac aaa cta 3907
Ser Leu Thr Ala Arg Arg Gly Glu Leu Glu Lys Ile Phe Asp Lys Leu
1255 1260 1265
gat gcg cgc aat gat gca cat gat gaa gag cta aag gaa gaa aaa cgt 3955
Asp Ala Arg Asn Asp Ala His Asp Glu Glu Leu Lys Glu Glu Lys Arg
1270 1275 1280 1285
aaa acc gca gct tcc ctt aaa gcc gtc aaa ctt caa atc cgt gat cta 4003
Lys Thr Ala Ala Ser Leu Lys Ala Val Lys Leu Gln Ile Arg Asp Leu
1290 1295 1300
ctt ggt gaa ttc tgg atc gct gct ttg gag cgt tat ggt ctc ctg ccc 4051
Leu Gly Glu Phe Trp Ile Ala Ala Leu Glu Arg Tyr Gly Leu Leu Pro
1305 1310 1315
aac ttc acc ctg gtt gat gat tcc gta gaa ctt aat gtg gcg gtt act 4099
Asn Phe Thr Leu Val Asp Asp Ser Val Glu Leu Asn Val Ala Val Thr
1320 1325 1330
tcg ttc aac ccc cag gaa gtg gaa ttt gat acc aag aat cat gcc tac 4147
Ser Phe Asn Pro Gln Glu Val Glu Phe Asp Thr Lys Asn His Ala Tyr
1335 1340 1345
tcg cgt ggg atc tct gca gcg ctt ttt gag ctc gct ccc ggt gcg acc 4195
Ser Arg Gly Ile Ser Ala Ala Leu Phe Glu Leu Ala Pro Gly Ala Thr
1350 1355 1360 1365
ttt tat gcc caa gga att gct gcc aaa gtt gat tcc att gag att ggt 4243
Phe Tyr Ala Gln Gly Ile Ala Ala Lys Val Asp Ser Ile Glu Ile Gly
1370 1375 1380
gaa cat ggc tct gcc att gag caa tgg cgg ttg tgc ccc gtg tgc tcg 4291
Glu His Gly Ser Ala Ile Glu Gln Trp Arg Leu Cys Pro Val Cys Ser
1385 1390 1395
cac tcc gaa atc ctc cag ccg ggt gtc tct aca ccg gga tcg tgt cct 4339
His Ser Glu Ile Leu Gln Pro Gly Val Ser Thr Pro Gly Ser Cys Pro
1400 1405 1410
acc tgt ggc tcc ccc gcc ttt gcc gat aag gga caa atc cta gag gta 4387
Thr Cys Gly Ser Pro Ala Phe Ala Asp Lys Gly Gln Ile Leu Glu Val
1415 1420 1425
gtg caa atg cgt aag gtt tcc tcc gca gtg gag aaa act cgc gct gcc 4435
Val Gln Met Arg Lys Val Ser Ser Ala Val Glu Lys Thr Arg Ala Ala
1430 1435 1440 1445
att agc gat gac cgt gaa gat cgc ttt agc acc cgc ttt aac cag cac 4483
Ile Ser Asp Asp Arg Glu Asp Arg Phe Ser Thr Arg Phe Asn Gln His
1450 1455 1460
gtc agc ttt gtc gtt cca cca gat ggc cat gga aaa tcc tgg tat ttg 4531
Val Ser Phe Val Val Pro Pro Asp Gly His Gly Lys Ser Trp Tyr Leu
1465 1470 1475
aat gat ggt ttt ggc att gag cat ctg ccc aag gtg gaa tta cgc tgg 4579
Asn Asp Gly Phe Gly Ile Glu His Leu Pro Lys Val Glu Leu Arg Trp
1480 1485 1490
ctg aac tta gga att ggc aat ggc caa aag cgt cgg ctc ggt ggc ttt 4627
Leu Asn Leu Gly Ile Gly Asn Gly Gln Lys Arg Arg Leu Gly Gly Phe
1495 1500 1505
gaa gtc acc agc cca cta ttt aat gtg tgc cgc cac tgt gga cat tta 4675
Glu Val Thr Ser Pro Leu Phe Asn Val Cys Arg His Cys Gly His Leu
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gat tcc gag gca gga gct aac tca cgc tgg gat cac cga ccc tgg tgc 4723
Asp Ser Glu Ala Gly Ala Asn Ser Arg Trp Asp His Arg Pro Trp Cys
1530 1535 1540
cca cac cgt tat gag caa aaa gaa gat acc gta tct ttc gct ttg ggt 4771
Pro His Arg Tyr Glu Gln Lys Glu Asp Thr Val Ser Phe Ala Leu Gly
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cgt act ctt aaa acc caa ggc gtg ctc atg ctg ctg ccc gaa tat ttt 4819
Arg Thr Leu Lys Thr Gln Gly Val Leu Met Leu Leu Pro Glu Tyr Phe
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ggc agt gaa gcc gat tct atg gtg gta acc agc ctc att gct gct atc 4867
Gly Ser Glu Ala Asp Ser Met Val Val Thr Ser Leu Ile Ala Ala Ile
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Lys Leu Gly Phe Arg Glu Val Leu Gly Gly Asp Pro Asp His Leu Asp
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gtc acc agt gtg cag gtc ccc cgt act tct ggc gat ggt gca ctt gat 4963
Val Thr Ser Val Gln Val Pro Arg Thr Ser Gly Asp Gly Ala Leu Asp
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gcc ctt ttg ctg cac gat cag gtt cca gga ggc acg ggt tat ctt aac 5011
Ala Leu Leu Leu His Asp Gln Val Pro Gly Gly Thr Gly Tyr Leu Asn
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Gln Phe Ala Asp Pro Thr Lys Val Arg Glu Leu Ile Ser Arg Ala Trp
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Glu Arg Val Ser Arg Cys Gln Cys Gln Tyr Asp Glu Arg Leu Ala Cys
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Pro Glu Cys Leu Leu Pro Tyr Thr Arg Thr Ala Thr Leu Leu Gln Thr
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Ser Arg Ala Ala Ala Glu Lys Ala Leu Arg Ala Ile Leu Leu Asn Ser
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Ser Arg Pro Glu Glu Ile Thr Asp Leu Ser Ala Val Pro Asp Trp Thr
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Phe Leu Glu Lys Arg Pro Glu Asn Thr Leu Gly Ser Gln Leu Glu Leu
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Arg Phe Arg Val Met Leu Arg Arg Ala Leu Lys Asn Arg His Ala Lys
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Leu Val Asp Arg Val Asn Gly Ser Asn Ser Tyr Val Asp Ile Glu Met
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Ser Ser Gly Val Arg Trp Arg Met Ser Glu Gln Val Asp Arg Gly Tyr
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Thr Arg Pro Asp Phe Trp Phe Glu Pro Leu Asn Gly Asn Tyr Pro Thr
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Val Ala Val Phe Thr Asp Gly Ala Ala Phe His Ile Ser Ser Ala Asn
1800 1805 1810
tac cgt ctt gat ggc gat att cag aaa cgg atg aaa cta gcg ctc gat 5587
Tyr Arg Leu Asp Gly Asp Ile Gln Lys Arg Met Lys Leu Ala Leu Asp
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cca gac aat att ttg ccg tgg aat atc act agc tta gac ctc gac cgc 5635
Pro Asp Asn Ile Leu Pro Trp Asn Ile Thr Ser Leu Asp Leu Asp Arg
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1850 1855 1860
atc ggc agg cag ctc agc aaa gca aat ttg att ctt gat cca caa tca 5731
Ile Gly Arg Gln Leu Ser Lys Ala Asn Leu Ile Leu Asp Pro Gln Ser
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Thr Ala Leu Leu Ala Ala Thr Pro Met Asp Gln Leu Leu Ala Phe Leu
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1895 1900 1905
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Ala His Met Leu Gly His Asn Pro Gln Lys Asn Gly Asp Gly Ile Val
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Gly Thr Phe Arg Asn Lys Ile Ser Leu Arg Ala Thr Met Val Asn Arg
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Leu Glu Val Asp Thr Trp Thr Ala Phe Leu Asn Leu Ala Asn Leu Met
1960 1965 1970
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Trp Leu Ala Pro Glu Ser Val Asp Val Ser Thr Asn Gly Ser Pro His
1975 1980 1985
aaa att gat att gtg cct gct cca gca gct ccg ctt gct gtt gaa gtt 6115
Lys Ile Asp Ile Val Pro Ala Pro Ala Ala Pro Leu Ala Val Glu Val
1990 1995 2000 2005
cct gaa ttg tgg gct ccc atc ttg gat ggc ttt acc gcc gat gaa gat 6163
Pro Glu Leu Trp Ala Pro Ile Leu Asp Gly Phe Thr Ala Asp Glu Asp
2010 2015 2020
gaa gaa gcc gaa ggc gct ttg cag atc ttg gct aag gaa cat gcc ctg 6211
Glu Glu Ala Glu Gly Ala Leu Gln Ile Leu Ala Lys Glu His Ala Leu
2025 2030 2035
gtt cca gag acc acc ggt gat gag ctc tcg agt att cct acg att gct 6259
Val Pro Glu Thr Thr Gly Asp Glu Leu Ser Ser Ile Pro Thr Ile Ala
2040 2045 2050
acg tgg ccg agt gtc aag atc gct ttg ctc tat gaa tct gat ccc gat 6307
Thr Trp Pro Ser Val Lys Ile Ala Leu Leu Tyr Glu Ser Asp Pro Asp
2055 2060 2065
gag cct ttg gag gat gat ctc aaa gct gaa ggt tgg acg ctg ctt ttt 6355
Glu Pro Leu Glu Asp Asp Leu Lys Ala Glu Gly Trp Thr Leu Leu Phe
2070 2075 2080 2085
gca aat gac ctc gag acc tcc gat att ccc gct gcc ctt cgt ccc 6400
Ala Asn Asp Leu Glu Thr Ser Asp Ile Pro Ala Ala Leu Arg Pro
2090 2095 2100
tagtacaccc aaagtttatg aaagataaaa 6430
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<211> 2100
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 60
Met Ser Ser Leu Ile Pro Val His Ala Ala Gly Ser Ile Gln Glu Gly
1 5 10 15
Ile Thr Glu Tyr Leu Thr Thr Ser Phe Ser Leu Ala Asp Lys Gln Val
20 25 30
Ala Thr Glu Leu Lys Arg Phe Leu Gly His Gly Asp Ser Gly Met Phe
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His Gly Pro Tyr Val Arg Ala Arg Leu Pro Tyr Ala Gln Ala Gln Glu
50 55 60
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His Gln Lys Ala Ala Phe Gln Arg Leu Ser Ser Leu Asp Asn Arg Gly
85 90 95
Lys Asp Arg Arg Pro Asp Pro Thr Leu Val Val Thr Gly Thr Gly Ser
100 105 110
Gly Lys Thr Glu Ser Phe Leu Tyr Pro Ile Leu Asp His Ala Leu Arg
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Leu Arg Lys Arg Gly Gln Gln Gly Ile Lys Ala Leu Leu Leu Tyr Pro
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His Thr Tyr Asp Gly Ala Gln Gly Thr Asp Val Ala Leu Leu Leu Arg
245 250 255
Arg Leu Gly Leu Met Leu Lys Ser Gln Gln Pro Ala Asn Phe Leu Asp
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305 310 315 320
Glu Thr Arg Leu Glu Leu Asp Gln Trp Arg Ala Glu Ile Ala Gln Asn
325 330 335
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Asp Ile Glu Val Val Leu Asp Thr Ile Ala Thr Ala Gln His Glu Asp
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Asp Tyr Ala Gln Leu Cys Phe Arg Val Phe Cys Glu Lys Val Trp Leu
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Cys Glu Ala Asp Leu His Ala Ala Ile Ser Ala Tyr Ala Ala His Asp
385 390 395 400
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Ala Thr Ala Arg Ile Leu Gly Glu Val Lys Ala Ala Glu Phe Ile Ser
435 440 445
His Ala Leu Ala Ala Met Ala Phe Val Arg Ala Glu Tyr Gly Lys Val
450 455 460
Ala Ala Trp Gly Ala Lys Arg Leu Pro Gly Val Glu Thr His Leu Trp
465 470 475 480
Val Arg Glu Val Ser Arg Ile Asp Arg Ala Leu Gly Val Gly Asp Glu
485 490 495
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500 505 510
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Glu Gln Lys Ile Arg Leu Asn Ser Phe Glu Gln Pro His Lys Gln Arg
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Arg Ser Val Ala Gly Pro Arg Gly Val Asp Gly Thr Ser Ala Val Leu
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595 600 605
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915 920 925
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1425 1430 1435 1440
Lys Thr Arg Ala Ala Ile Ser Asp Asp Arg Glu Asp Arg Phe Ser Thr
1445 1450 1455
Arg Phe Asn Gln His Val Ser Phe Val Val Pro Pro Asp Gly His Gly
1460 1465 1470
Lys Ser Trp Tyr Leu Asn Asp Gly Phe Gly Ile Glu His Leu Pro Lys
1475 1480 1485
Val Glu Leu Arg Trp Leu Asn Leu Gly Ile Gly Asn Gly Gln Lys Arg
1490 1495 1500
Arg Leu Gly Gly Phe Glu Val Thr Ser Pro Leu Phe Asn Val Cys Arg
1505 1510 1515 1520
His Cys Gly His Leu Asp Ser Glu Ala Gly Ala Asn Ser Arg Trp Asp
1525 1530 1535
His Arg Pro Trp Cys Pro His Arg Tyr Glu Gln Lys Glu Asp Thr Val
1540 1545 1550
Ser Phe Ala Leu Gly Arg Thr Leu Lys Thr Gln Gly Val Leu Met Leu
1555 1560 1565
Leu Pro Glu Tyr Phe Gly Ser Glu Ala Asp Ser Met Val Val Thr Ser
1570 1575 1580
Leu Ile Ala Ala Ile Lys Leu Gly Phe Arg Glu Val Leu Gly Gly Asp
1585 1590 1595 1600
Pro Asp His Leu Asp Val Thr Ser Val Gln Val Pro Arg Thr Ser Gly
1605 1610 1615
Asp Gly Ala Leu Asp Ala Leu Leu Leu His Asp Gln Val Pro Gly Gly
1620 1625 1630
Thr Gly Tyr Leu Asn Gln Phe Ala Asp Pro Thr Lys Val Arg Glu Leu
1635 1640 1645
Ile Ser Arg Ala Trp Glu Arg Val Ser Arg Cys Gln Cys Gln Tyr Asp
1650 1655 1660
Glu Arg Leu Ala Cys Pro Glu Cys Leu Leu Pro Tyr Thr Arg Thr Ala
1665 1670 1675 1680
Thr Leu Leu Gln Thr Ser Arg Ala Ala Ala Glu Lys Ala Leu Arg Ala
1685 1690 1695
Ile Leu Leu Asn Ser Ser Arg Pro Glu Glu Ile Thr Asp Leu Ser Ala
1700 1705 1710
Val Pro Asp Trp Thr Phe Leu Glu Lys Arg Pro Glu Asn Thr Leu Gly
1715 1720 1725
Ser Gln Leu Glu Leu Arg Phe Arg Val Met Leu Arg Arg Ala Leu Lys
1730 1735 1740
Asn Arg His Ala Lys Leu Val Asp Arg Val Asn Gly Ser Asn Ser Tyr
1745 1750 1755 1760
Val Asp Ile Glu Met Ser Ser Gly Val Arg Trp Arg Met Ser Glu Gln
1765 1770 1775
Val Asp Arg Gly Tyr Thr Arg Pro Asp Phe Trp Phe Glu Pro Leu Asn
1780 1785 1790
Gly Asn Tyr Pro Thr Val Ala Val Phe Thr Asp Gly Ala Ala Phe His
1795 1800 1805
Ile Ser Ser Ala Asn Tyr Arg Leu Asp Gly Asp Ile Gln Lys Arg Met
1810 1815 1820
Lys Leu Ala Leu Asp Pro Asp Asn Ile Leu Pro Trp Asn Ile Thr Ser
1825 1830 1835 1840
Leu Asp Leu Asp Arg Phe Ser Asn Pro Ala Ala Gln Gly Glu Glu Pro
1845 1850 1855
Ala Trp Phe Ser Pro Ile Gly Arg Gln Leu Ser Lys Ala Asn Leu Ile
1860 1865 1870
Leu Asp Pro Gln Ser Thr Ala Leu Leu Ala Ala Thr Pro Met Asp Gln
1875 1880 1885
Leu Leu Ala Phe Leu Asp Asn Pro Ala Ala Ser Ser Trp Lys Glu Phe
1890 1895 1900
Ala His Ile Ala Ala Ala His Met Leu Gly His Asn Pro Gln Lys Asn
1905 1910 1915 1920
Gly Asp Gly Ile Val Gly Thr Phe Arg Asn Lys Ile Ser Leu Arg Ala
1925 1930 1935
Thr Met Val Asn Arg Glu Leu Arg Ala Arg Gln Leu Trp Leu Ala Pro
1940 1945 1950
Thr Thr Pro Glu Glu Leu Glu Val Asp Thr Trp Thr Ala Phe Leu Asn
1955 1960 1965
Leu Ala Asn Leu Met Trp Leu Ala Pro Glu Ser Val Asp Val Ser Thr
1970 1975 1980
Asn Gly Ser Pro His Lys Ile Asp Ile Val Pro Ala Pro Ala Ala Pro
1985 1990 1995 2000
Leu Ala Val Glu Val Pro Glu Leu Trp Ala Pro Ile Leu Asp Gly Phe
2005 2010 2015
Thr Ala Asp Glu Asp Glu Glu Ala Glu Gly Ala Leu Gln Ile Leu Ala
2020 2025 2030
Lys Glu His Ala Leu Val Pro Glu Thr Thr Gly Asp Glu Leu Ser Ser
2035 2040 2045
Ile Pro Thr Ile Ala Thr Trp Pro Ser Val Lys Ile Ala Leu Leu Tyr
2050 2055 2060
Glu Ser Asp Pro Asp Glu Pro Leu Glu Asp Asp Leu Lys Ala Glu Gly
2065 2070 2075 2080
Trp Thr Leu Leu Phe Ala Asn Asp Leu Glu Thr Ser Asp Ile Pro Ala
2085 2090 2095
Ala Leu Arg Pro
2100
<210> 61
<211> 4930
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(4900)
<223> RXA02363
<400> 61
ttcctcgtct cacaggattt gacctggtga gtgccgaagc gaaagtgctc agcgcaataa 60
acaacaacaa tataatccca actgcaattt aaggatcact atg tcc aac gca cct 115
Met Ser Asn Ala Pro
1 5
aaa aag agc ttt tca gac ttc ttt tcc cca cta gca acc gaa act gaa 163
Lys Lys Ser Phe Ser Asp Phe Phe Ser Pro Leu Ala Thr Glu Thr Glu
10 15 20
aca act att acg ctc tcg gca att gag gta gag aaa gtc aat gcc aag 211
Thr Thr Ile Thr Leu Ser Ala Ile Glu Val Glu Lys Val Asn Ala Lys
25 30 35
act gaa gtc act cga aat att gat cca gtc gaa gca gca gaa caa atc 259
Thr Glu Val Thr Arg Asn Ile Asp Pro Val Glu Ala Ala Glu Gln Ile
40 45 50
agc cgc gac tac cgc cgc tac ctg aaa aca ctt att agc ccc agt aat 307
Ser Arg Asp Tyr Arg Arg Tyr Leu Lys Thr Leu Ile Ser Pro Ser Asn
55 60 65
aag aca att gcg gca gaa ttc aac cga gag att gat gag tcc gaa aac 355
Lys Thr Ile Ala Ala Glu Phe Asn Arg Glu Ile Asp Glu Ser Glu Asn
70 75 80 85
ctt gtc tac gga cca att ttg cag ctg act ccg cct tat gca cca ggt 403
Leu Val Tyr Gly Pro Ile Leu Gln Leu Thr Pro Pro Tyr Ala Pro Gly
90 95 100
aag tcc cct gct caa tta att gat gag gga gtc ctt tct cca aac ttc 451
Lys Ser Pro Ala Gln Leu Ile Asp Glu Gly Val Leu Ser Pro Asn Phe
105 110 115
tca cgt ctc gat gcc gca cta ccc aaa gat cgc ccg ctt tat cag cat 499
Ser Arg Leu Asp Ala Ala Leu Pro Lys Asp Arg Pro Leu Tyr Gln His
120 125 130
cag gaa gac gct ctg cga aaa atc gct agt ggc cga aac tta atc gtt 547
Gln Glu Asp Ala Leu Arg Lys Ile Ala Ser Gly Arg Asn Leu Ile Val
135 140 145
tca acc ggt aca gga tct gga aaa aca gag tct ttc ctc atc ccg atc 595
Ser Thr Gly Thr Gly Ser Gly Lys Thr Glu Ser Phe Leu Ile Pro Ile
150 155 160 165
ttt gac caa ctg ctc cgc caa caa caa gcc ggt gag tta aat cct ggt 643
Phe Asp Gln Leu Leu Arg Gln Gln Gln Ala Gly Glu Leu Asn Pro Gly
170 175 180
gtc aga gca ttg ctt ctt tac cct atg aat gct ctt gca aat gat cag 691
Val Arg Ala Leu Leu Leu Tyr Pro Met Asn Ala Leu Ala Asn Asp Gln
185 190 195
gag aaa cgt ctc cgc gaa tta ttg gca gac acc ccg gaa att act ttt 739
Glu Lys Arg Leu Arg Glu Leu Leu Ala Asp Thr Pro Glu Ile Thr Phe
200 205 210
ggt cga tac acc gga gat acc aaa cag acc cgt gaa gaa gcc gag aaa 787
Gly Arg Tyr Thr Gly Asp Thr Lys Gln Thr Arg Glu Glu Ala Glu Lys
215 220 225
tac ttc aaa ctg att aat ggg cga aat gcg acc cct cta cct aat gag 835
Tyr Phe Lys Leu Ile Asn Gly Arg Asn Ala Thr Pro Leu Pro Asn Glu
230 235 240 245
cta att agc cgt gat gag atg cag gaa aat cca cct cat atc ttg ctc 883
Leu Ile Ser Arg Asp Glu Met Gln Glu Asn Pro Pro His Ile Leu Leu
250 255 260
acc aac tac gca atg ttg gaa tac ctc ctg ctt cgt cct gca gac aac 931
Thr Asn Tyr Ala Met Leu Glu Tyr Leu Leu Leu Arg Pro Ala Asp Asn
265 270 275
gca ttc ttc gat gat gca tat tcc aat aat tgg aag ttc ctt gtt ctt 979
Ala Phe Phe Asp Asp Ala Tyr Ser Asn Asn Trp Lys Phe Leu Val Leu
280 285 290
gat gaa gct cat gtc tac gcc gga gca caa ggc act gaa gtc ggc atg 1027
Asp Glu Ala His Val Tyr Ala Gly Ala Gln Gly Thr Glu Val Gly Met
295 300 305
ctg atg agg cgc ctg aaa gat cgt gtc caa cga gga aat ccc ctc cag 1075
Leu Met Arg Arg Leu Lys Asp Arg Val Gln Arg Gly Asn Pro Leu Gln
310 315 320 325
tgc atc gct aca agt gct tct ttg gaa gga act aaa gaa gcc atc atg 1123
Cys Ile Ala Thr Ser Ala Ser Leu Glu Gly Thr Lys Glu Ala Ile Met
330 335 340
acc ttt gga caa gac ctc ttt ggt gaa cct ttt gag ttt gtc aac gaa 1171
Thr Phe Gly Gln Asp Leu Phe Gly Glu Pro Phe Glu Phe Val Asn Glu
345 350 355
gat ccc tcg cgc cag gat ttg gta tcc gcg cat cgg aga aaa cta cca 1219
Asp Pro Ser Arg Gln Asp Leu Val Ser Ala His Arg Arg Lys Leu Pro
360 365 370
aaa acc ttt acg tgg tcc cta cca gat gag ctc ttt gac cag cct tta 1267
Lys Thr Phe Thr Trp Ser Leu Pro Asp Glu Leu Phe Asp Gln Pro Leu
375 380 385
gaa agt gat ggt ctt ttc caa gca cta caa gag cgc ggt gga gat caa 1315
Glu Ser Asp Gly Leu Phe Gln Ala Leu Gln Glu Arg Gly Gly Asp Gln
390 395 400 405
tac gaa gag ctc tcc aaa gaa gaa cac atc gta aaa ctc cgc gaa cta 1363
Tyr Glu Glu Leu Ser Lys Glu Glu His Ile Val Lys Leu Arg Glu Leu
410 415 420
tcc cag caa tca agc act cga gtt gaa gac atc ggc aag ggt ctt tgg 1411
Ser Gln Gln Ser Ser Thr Arg Val Glu Asp Ile Gly Lys Gly Leu Trp
425 430 435
cca aat gtt act gat aaa gca tca atg cac cgc aca cat atg ctg gtg 1459
Pro Asn Val Thr Asp Lys Ala Ser Met His Arg Thr His Met Leu Val
440 445 450
aat tta ggc agt ggc gtt cta tcc cat gat gga gta cca gct ctg tcc 1507
Asn Leu Gly Ser Gly Val Leu Ser His Asp Gly Val Pro Ala Leu Ser
455 460 465
gcg cgt tat cac atg ttt gtc cgc gca gtt gaa ggc gct ttt ctt ggg 1555
Ala Arg Tyr His Met Phe Val Arg Ala Val Glu Gly Ala Phe Leu Gly
470 475 480 485
tat aca gag caa gga aag cca atc gtg tcc ttg gac cgg caa gtg aca 1603
Tyr Thr Glu Gln Gly Lys Pro Ile Val Ser Leu Asp Arg Gln Val Thr
490 495 500
tta ggc gac aca gct cga cca atg tat gaa atg ggt gct tgc atc aaa 1651
Leu Gly Asp Thr Ala Arg Pro Met Tyr Glu Met Gly Ala Cys Ile Lys
505 510 515
tgt gga acc gtt cat atc agc gcc cat aat gat tct ggt ttc ctt gtg 1699
Cys Gly Thr Val His Ile Ser Ala His Asn Asp Ser Gly Phe Leu Val
520 525 530
cct cca gag aat tcc tca aat ttc gac gaa caa cag ctc aaa tgg gta 1747
Pro Pro Glu Asn Ser Ser Asn Phe Asp Glu Gln Gln Leu Lys Trp Val
535 540 545
gtc ctc acc gat gat ttc gaa aca gca gac atc gac gaa gat gac cta 1795
Val Leu Thr Asp Asp Phe Glu Thr Ala Asp Ile Asp Glu Asp Asp Leu
550 555 560 565
gaa act gat gct gac gag aac gtc aaa gtc ctt gag cta caa aaa tta 1843
Glu Thr Asp Ala Asp Glu Asn Val Lys Val Leu Glu Leu Gln Lys Leu
570 575 580
tgt acg gcc tgc gga aaa cta aac gga aag aac tct ctt ctc tgc tcc 1891
Cys Thr Ala Cys Gly Lys Leu Asn Gly Lys Asn Ser Leu Leu Cys Ser
585 590 595
gga tgc tca tca cat cat gac cag ttt att gat gta aag atc ttg gaa 1939
Gly Cys Ser Ser His His Asp Gln Phe Ile Asp Val Lys Ile Leu Glu
600 605 610
ccc cgg aat ggt agc caa tta aca tgc act cga tgc ggt ggc cga gaa 1987
Pro Arg Asn Gly Ser Gln Leu Thr Cys Thr Arg Cys Gly Gly Arg Glu
615 620 625
aag aac ctg att cga cga ctc cga acc gat tca aat gct gca cct tct 2035
Lys Asn Leu Ile Arg Arg Leu Arg Thr Asp Ser Asn Ala Ala Pro Ser
630 635 640 645
gtc ctc acc aca tca ttg ttc caa ctg ttg cca gaa tca gct gat caa 2083
Val Leu Thr Thr Ser Leu Phe Gln Leu Leu Pro Glu Ser Ala Asp Gln
650 655 660
gat aca tca cgc aag atc ggt gct gga cgc aaa cta ctc acg ttt tct 2131
Asp Thr Ser Arg Lys Ile Gly Ala Gly Arg Lys Leu Leu Thr Phe Ser
665 670 675
gac tcc cgc cag gct gcc gct tac gca gca cca tat ttg caa gca agt 2179
Asp Ser Arg Gln Ala Ala Ala Tyr Ala Ala Pro Tyr Leu Gln Ala Ser
680 685 690
tac acc agg ttg cta gag cga aga atc ctc att gag acc ctg cgg gat 2227
Tyr Thr Arg Leu Leu Glu Arg Arg Ile Leu Ile Glu Thr Leu Arg Asp
695 700 705
gaa gaa ttt act gaa ggc gca tcc att gaa cga tgg att tcc cgc gca 2275
Glu Glu Phe Thr Glu Gly Ala Ser Ile Glu Arg Trp Ile Ser Arg Ala
710 715 720 725
agt gaa gtg gcg aaa aac aat cga gtc ctc gct aac aac ttg aac cca 2323
Ser Glu Val Ala Lys Asn Asn Arg Val Leu Ala Asn Asn Leu Asn Pro
730 735 740
cgc gaa aca cta gaa cag aca ggt aac tgg gta ttc gca gat ctt gct 2371
Arg Glu Thr Leu Glu Gln Thr Gly Asn Trp Val Phe Ala Asp Leu Ala
745 750 755
tcg aca gtc cga cgt agt tcg act gaa ggg ctt gga cta gcc aaa att 2419
Ser Thr Val Arg Arg Ser Ser Thr Glu Gly Leu Gly Leu Ala Lys Ile
760 765 770
gaa ctg acc cct gag gct ttg tcg caa ctc agt ttc aga aaa cca ctt 2467
Glu Leu Thr Pro Glu Ala Leu Ser Gln Leu Ser Phe Arg Lys Pro Leu
775 780 785
ggc gag atg ttt ggg gat ccg gat gcc gcc gac gcc ttt ttt aat ctc 2515
Gly Glu Met Phe Gly Asp Pro Asp Ala Ala Asp Ala Phe Phe Asn Leu
790 795 800 805
ttc gct caa gaa ttc cgt cac aag ggc gca atc aat tgc cct gac tac 2563
Phe Ala Gln Glu Phe Arg His Lys Gly Ala Ile Asn Cys Pro Asp Tyr
810 815 820
gtc aat ctt gag gat gaa cgc ttt ggc cct cgt cgt ggg cag cac ttt 2611
Val Asn Leu Glu Asp Glu Arg Phe Gly Pro Arg Arg Gly Gln His Phe
825 830 835
ttc acc aaa gat ggt gga aga aaa tca aca cga cgc ctc tac tca tgg 2659
Phe Thr Lys Asp Gly Gly Arg Lys Ser Thr Arg Arg Leu Tyr Ser Trp
840 845 850
att ccg caa cga gga acc aac aat cgc aag gac ttc att aca aaa gtc 2707
Ile Pro Gln Arg Gly Thr Asn Asn Arg Lys Asp Phe Ile Thr Lys Val
855 860 865
ttg aac cgc atc gga caa gca ggt gac gaa ggt gaa aat att acg acg 2755
Leu Asn Arg Ile Gly Gln Ala Gly Asp Glu Gly Glu Asn Ile Thr Thr
870 875 880 885
ctt ctc cat cac cta tgg aat gac tac act aat tcc gaa att ttg aag 2803
Leu Leu His His Leu Trp Asn Asp Tyr Thr Asn Ser Glu Ile Leu Lys
890 895 900
gtc cca ggc gaa aag gcc gaa ggc tac aca ctt aac tac aac tca ctg 2851
Val Pro Gly Glu Lys Ala Glu Gly Tyr Thr Leu Asn Tyr Asn Ser Leu
905 910 915
caa gta agc cct gga aaa caa cat tcc tgg tat gaa tgt gac act tgt 2899
Gln Val Ser Pro Gly Lys Gln His Ser Trp Tyr Glu Cys Asp Thr Cys
920 925 930
aga aat aca acg cca ttt aat gtt ctc ggg ctg tgt cca cat ggg ttc 2947
Arg Asn Thr Thr Pro Phe Asn Val Leu Gly Leu Cys Pro His Gly Phe
935 940 945
tgt aaa ggc aag cta aaa gaa atc gat act tct tta ccg gag tat gcc 2995
Cys Lys Gly Lys Leu Lys Glu Ile Asp Thr Ser Leu Pro Glu Tyr Ala
950 955 960 965
aac aat cat tat cgg aag ttg gca aca tcg ctt gaa att ctt ccg ctt 3043
Asn Asn His Tyr Arg Lys Leu Ala Thr Ser Leu Glu Ile Leu Pro Leu
970 975 980
tca gcc aaa gag cac act gct caa tgg acg cca acg gag gct gca gag 3091
Ser Ala Lys Glu His Thr Ala Gln Trp Thr Pro Thr Glu Ala Ala Glu
985 990 995
gtt cag aaa gaa ttc atc gaa gga aaa atc aat gtc cta agc tgt tct 3139
Val Gln Lys Glu Phe Ile Glu Gly Lys Ile Asn Val Leu Ser Cys Ser
1000 1005 1010
act acg ttt gag ctt gga gtt gac gtt ggt gat ctg cag tca gta atg 3187
Thr Thr Phe Glu Leu Gly Val Asp Val Gly Asp Leu Gln Ser Val Met
1015 1020 1025
atg cgc aac gta ccg cca cgt acg gct aac tat gtg caa cgt gcg gga 3235
Met Arg Asn Val Pro Pro Arg Thr Ala Asn Tyr Val Gln Arg Ala Gly
1030 1035 1040 1045
cgt gcg gga cgc cga tca ggt tca gca gct ttt gtg ctt acc ttt gct 3283
Arg Ala Gly Arg Arg Ser Gly Ser Ala Ala Phe Val Leu Thr Phe Ala
1050 1055 1060
aag cga tct tct cat gac ttg gct gta ttt aag aac cca acc cag atg 3331
Lys Arg Ser Ser His Asp Leu Ala Val Phe Lys Asn Pro Thr Gln Met
1065 1070 1075
att gat ggc gaa atg aca gtg cca ttt ttg cac att aac aat gcc cga 3379
Ile Asp Gly Glu Met Thr Val Pro Phe Leu His Ile Asn Asn Ala Arg
1080 1085 1090
atc gcc cgt cgt cac acc tat tca atc gct ctc gcc gca ttt ttc cga 3427
Ile Ala Arg Arg His Thr Tyr Ser Ile Ala Leu Ala Ala Phe Phe Arg
1095 1100 1105
gag cag gct gcc caa aat cgg ttc tgg aaa aag gcc gga gag ttc ttc 3475
Glu Gln Ala Ala Gln Asn Arg Phe Trp Lys Lys Ala Gly Glu Phe Phe
1110 1115 1120 1125
ctt ggc act gat gca gct cca tac ctt agg cct gct gtc gca gag caa 3523
Leu Gly Thr Asp Ala Ala Pro Tyr Leu Arg Pro Ala Val Ala Glu Gln
1130 1135 1140
gag gca acg gag atc ctc gaa gag ttt ctc tcc cct gtt cct aat tac 3571
Glu Ala Thr Glu Ile Leu Glu Glu Phe Leu Ser Pro Val Pro Asn Tyr
1145 1150 1155
atc act gaa gcc ctc cgt cgc gta ttc cct gag tcc ctg cat gag gat 3619
Ile Thr Glu Ala Leu Arg Arg Val Phe Pro Glu Ser Leu His Glu Asp
1160 1165 1170
ctg gat att gaa aat caa ggt tgg gtt aaa caa ttc ctt gaa att ttc 3667
Leu Asp Ile Glu Asn Gln Gly Trp Val Lys Gln Phe Leu Glu Ile Phe
1175 1180 1185
gat aca act cgt cag gag atc tcc gaa gat ttc caa acg ctt aaa aag 3715
Asp Thr Thr Arg Gln Glu Ile Ser Glu Asp Phe Gln Thr Leu Lys Lys
1190 1195 1200 1205
atg caa ggg cga gcg ctg ggc agt gaa caa ggc aaa aag gca gat gcc 3763
Met Gln Gly Arg Ala Leu Gly Ser Glu Gln Gly Lys Lys Ala Asp Ala
1210 1215 1220
ttc aaa cgc aca atc aca act ctg atg gac caa gat ctt ttg gga tac 3811
Phe Lys Arg Thr Ile Thr Thr Leu Met Asp Gln Asp Leu Leu Gly Tyr
1225 1230 1235
ttg gcc aag aag aac atg ctg ccc aag tac agc ttc cct gtc gat aca 3859
Leu Ala Lys Lys Asn Met Leu Pro Lys Tyr Ser Phe Pro Val Asp Thr
1240 1245 1250
gta gat ctt caa aca aac ttc agt gaa gct gga aat aag gtg agc ttg 3907
Val Asp Leu Gln Thr Asn Phe Ser Glu Ala Gly Asn Lys Val Ser Leu
1255 1260 1265
tca cga gat ctt cag cta gcg att acc gac tat gct cct ggt gcg gag 3955
Ser Arg Asp Leu Gln Leu Ala Ile Thr Asp Tyr Ala Pro Gly Ala Glu
1270 1275 1280 1285
tta gta gca ggc gga aaa ttg tgg aaa tcc gct ggc att cga cac cta 4003
Leu Val Ala Gly Gly Lys Leu Trp Lys Ser Ala Gly Ile Arg His Leu
1290 1295 1300
gcc ggt aaa aag gtg gaa act ttt tat tgg aca acg tgt act gag tgt 4051
Ala Gly Lys Lys Val Glu Thr Phe Tyr Trp Thr Thr Cys Thr Glu Cys
1305 1310 1315
aaa cat act gaa acc tct cgt ttt gga ttt aca tct gaa gat gtc tgt 4099
Lys His Thr Glu Thr Ser Arg Phe Gly Phe Thr Ser Glu Asp Val Cys
1320 1325 1330
tct cag tgc tct gca cca ata tcg ctg ggt aaa gag aac aag ttc ctt 4147
Ser Gln Cys Ser Ala Pro Ile Ser Leu Gly Lys Glu Asn Lys Phe Leu
1335 1340 1345
atc cct cgt ttt ggt ttc gtt gca gac cca aat cca act gaa gtg ggc 4195
Ile Pro Arg Phe Gly Phe Val Ala Asp Pro Asn Pro Thr Glu Val Gly
1350 1355 1360 1365
act gct ccc ccg gtc cga tcc tct aat cga ctt gaa ttt gta aag cag 4243
Thr Ala Pro Pro Val Arg Ser Ser Asn Arg Leu Glu Phe Val Lys Gln
1370 1375 1380
ttc ggt gtc aaa gat gac agt gaa gag ttc tca aat tca gat ggg aca 4291
Phe Gly Val Lys Asp Asp Ser Glu Glu Phe Ser Asn Ser Asp Gly Thr
1385 1390 1395
gca act gcg caa gta ctt act tct tct tgg agt cgg acg gag atg gga 4339
Ala Thr Ala Gln Val Leu Thr Ser Ser Trp Ser Arg Thr Glu Met Gly
1400 1405 1410
gcg ctt gaa aca ggt cct aac aag aat gga ttt tgg tat tgc caa aca 4387
Ala Leu Glu Thr Gly Pro Asn Lys Asn Gly Phe Trp Tyr Cys Gln Thr
1415 1420 1425
tgc gga ttc ggc act ccc aat ggc gcc gaa atc cct aaa agc cat cga 4435
Cys Gly Phe Gly Thr Pro Asn Gly Ala Glu Ile Pro Lys Ser His Arg
1430 1435 1440 1445
aac ccc aga act aag cag cag tgt ggc acc tac tac tta gaa ccc cac 4483
Asn Pro Arg Thr Lys Gln Gln Cys Gly Thr Tyr Tyr Leu Glu Pro His
1450 1455 1460
tct ttg ggt cac acc tac caa act gac atc gcg aca gtt gcc gtt cct 4531
Ser Leu Gly His Thr Tyr Gln Thr Asp Ile Ala Thr Val Ala Val Pro
1465 1470 1475
tct tat aca aat ctt gac ttc gaa ggg tgg cgc tct gga atg tac gcc 4579
Ser Tyr Thr Asn Leu Asp Phe Glu Gly Trp Arg Ser Gly Met Tyr Ala
1480 1485 1490
atc atc gag gca gct gct gaa tgt tta gaa atc aat cgt gat gat cta 4627
Ile Ile Glu Ala Ala Ala Glu Cys Leu Glu Ile Asn Arg Asp Asp Leu
1495 1500 1505
aac ggc acc atg gcg aaa cac gac aac agg cca acg atg gtg ttg ttc 4675
Asn Gly Thr Met Ala Lys His Asp Asn Arg Pro Thr Met Val Leu Phe
1510 1515 1520 1525
gat act gtt cct ggt gga gct ggt att acc cga aaa gtt cga gaa aac 4723
Asp Thr Val Pro Gly Gly Ala Gly Ile Thr Arg Lys Val Arg Glu Asn
1530 1535 1540
ttc cct caa gta ctc gaa gcg gca att aga agg gtc gaa acc tgt tct 4771
Phe Pro Gln Val Leu Glu Ala Ala Ile Arg Arg Val Glu Thr Cys Ser
1545 1550 1555
tgt ggc atc gat act tcg tgt tat gcc tgt ttg cga tca ttt tct aac 4819
Cys Gly Ile Asp Thr Ser Cys Tyr Ala Cys Leu Arg Ser Phe Ser Asn
1560 1565 1570
cag cgt ttc cat ctc gat tta agg cgc gat att gca ttg gac ttg ctt 4867
Gln Arg Phe His Leu Asp Leu Arg Arg Asp Ile Ala Leu Asp Leu Leu
1575 1580 1585
cac cat atg gcg gtt gcg atg cca aaa tct gag tagataacac cagctaccca 4920
His His Met Ala Val Ala Met Pro Lys Ser Glu
1590 1595 1600
cagctaaaag 4930
<210> 62
<211> 1600
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 62
Met Ser Asn Ala Pro Lys Lys Ser Phe Ser Asp Phe Phe Ser Pro Leu
1 5 10 15
Ala Thr Glu Thr Glu Thr Thr Ile Thr Leu Ser Ala Ile Glu Val Glu
20 25 30
Lys Val Asn Ala Lys Thr Glu Val Thr Arg Asn Ile Asp Pro Val Glu
35 40 45
Ala Ala Glu Gln Ile Ser Arg Asp Tyr Arg Arg Tyr Leu Lys Thr Leu
50 55 60
Ile Ser Pro Ser Asn Lys Thr Ile Ala Ala Glu Phe Asn Arg Glu Ile
65 70 75 80
Asp Glu Ser Glu Asn Leu Val Tyr Gly Pro Ile Leu Gln Leu Thr Pro
85 90 95
Pro Tyr Ala Pro Gly Lys Ser Pro Ala Gln Leu Ile Asp Glu Gly Val
100 105 110
Leu Ser Pro Asn Phe Ser Arg Leu Asp Ala Ala Leu Pro Lys Asp Arg
115 120 125
Pro Leu Tyr Gln His Gln Glu Asp Ala Leu Arg Lys Ile Ala Ser Gly
130 135 140
Arg Asn Leu Ile Val Ser Thr Gly Thr Gly Ser Gly Lys Thr Glu Ser
145 150 155 160
Phe Leu Ile Pro Ile Phe Asp Gln Leu Leu Arg Gln Gln Gln Ala Gly
165 170 175
Glu Leu Asn Pro Gly Val Arg Ala Leu Leu Leu Tyr Pro Met Asn Ala
180 185 190
Leu Ala Asn Asp Gln Glu Lys Arg Leu Arg Glu Leu Leu Ala Asp Thr
195 200 205
Pro Glu Ile Thr Phe Gly Arg Tyr Thr Gly Asp Thr Lys Gln Thr Arg
210 215 220
Glu Glu Ala Glu Lys Tyr Phe Lys Leu Ile Asn Gly Arg Asn Ala Thr
225 230 235 240
Pro Leu Pro Asn Glu Leu Ile Ser Arg Asp Glu Met Gln Glu Asn Pro
245 250 255
Pro His Ile Leu Leu Thr Asn Tyr Ala Met Leu Glu Tyr Leu Leu Leu
260 265 270
Arg Pro Ala Asp Asn Ala Phe Phe Asp Asp Ala Tyr Ser Asn Asn Trp
275 280 285
Lys Phe Leu Val Leu Asp Glu Ala His Val Tyr Ala Gly Ala Gln Gly
290 295 300
Thr Glu Val Gly Met Leu Met Arg Arg Leu Lys Asp Arg Val Gln Arg
305 310 315 320
Gly Asn Pro Leu Gln Cys Ile Ala Thr Ser Ala Ser Leu Glu Gly Thr
325 330 335
Lys Glu Ala Ile Met Thr Phe Gly Gln Asp Leu Phe Gly Glu Pro Phe
340 345 350
Glu Phe Val Asn Glu Asp Pro Ser Arg Gln Asp Leu Val Ser Ala His
355 360 365
Arg Arg Lys Leu Pro Lys Thr Phe Thr Trp Ser Leu Pro Asp Glu Leu
370 375 380
Phe Asp Gln Pro Leu Glu Ser Asp Gly Leu Phe Gln Ala Leu Gln Glu
385 390 395 400
Arg Gly Gly Asp Gln Tyr Glu Glu Leu Ser Lys Glu Glu His Ile Val
405 410 415
Lys Leu Arg Glu Leu Ser Gln Gln Ser Ser Thr Arg Val Glu Asp Ile
420 425 430
Gly Lys Gly Leu Trp Pro Asn Val Thr Asp Lys Ala Ser Met His Arg
435 440 445
Thr His Met Leu Val Asn Leu Gly Ser Gly Val Leu Ser His Asp Gly
450 455 460
Val Pro Ala Leu Ser Ala Arg Tyr His Met Phe Val Arg Ala Val Glu
465 470 475 480
Gly Ala Phe Leu Gly Tyr Thr Glu Gln Gly Lys Pro Ile Val Ser Leu
485 490 495
Asp Arg Gln Val Thr Leu Gly Asp Thr Ala Arg Pro Met Tyr Glu Met
500 505 510
Gly Ala Cys Ile Lys Cys Gly Thr Val His Ile Ser Ala His Asn Asp
515 520 525
Ser Gly Phe Leu Val Pro Pro Glu Asn Ser Ser Asn Phe Asp Glu Gln
530 535 540
Gln Leu Lys Trp Val Val Leu Thr Asp Asp Phe Glu Thr Ala Asp Ile
545 550 555 560
Asp Glu Asp Asp Leu Glu Thr Asp Ala Asp Glu Asn Val Lys Val Leu
565 570 575
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580 585 590
Ser Leu Leu Cys Ser Gly Cys Ser Ser His His Asp Gln Phe Ile Asp
595 600 605
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610 615 620
Cys Gly Gly Arg Glu Lys Asn Leu Ile Arg Arg Leu Arg Thr Asp Ser
625 630 635 640
Asn Ala Ala Pro Ser Val Leu Thr Thr Ser Leu Phe Gln Leu Leu Pro
645 650 655
Glu Ser Ala Asp Gln Asp Thr Ser Arg Lys Ile Gly Ala Gly Arg Lys
660 665 670
Leu Leu Thr Phe Ser Asp Ser Arg Gln Ala Ala Ala Tyr Ala Ala Pro
675 680 685
Tyr Leu Gln Ala Ser Tyr Thr Arg Leu Leu Glu Arg Arg Ile Leu Ile
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725 730 735
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Phe Ile Thr Lys Val Leu Asn Arg Ile Gly Gln Ala Gly Asp Glu Gly
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885 890 895
Ser Glu Ile Leu Lys Val Pro Gly Glu Lys Ala Glu Gly Tyr Thr Leu
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Asn Tyr Asn Ser Leu Gln Val Ser Pro Gly Lys Gln His Ser Trp Tyr
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980 985 990
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1460 1465 1470
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1540 1545 1550
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1555 1560 1565
Arg Ser Phe Ser Asn Gln Arg Phe His Leu Asp Leu Arg Arg Asp Ile
1570 1575 1580
Ala Leu Asp Leu Leu His His Met Ala Val Ala Met Pro Lys Ser Glu
1585 1590 1595 1600
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<220>
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<222> (101)..(667)
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<400> 63
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tagtagataa aattgttctt aaagcgacat tattgtctgc atg gaa gac gat ctc 115
Met Glu Asp Asp Leu
1 5
agt gct gct ctc gtc aaa gcg ctt ttc gac gcg cga acc caa cgc agg 163
Ser Ala Ala Leu Val Lys Ala Leu Phe Asp Ala Arg Thr Gln Arg Arg
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ctc tct atc tcg gcg tta gct gaa tcc tcc ggt gtg tcg cga gca atg 211
Leu Ser Ile Ser Ala Leu Ala Glu Ser Ser Gly Val Ser Arg Ala Met
25 30 35
att tcc cgc gtg gaa aac gca gag gcg caa cca agc gct gca tta ctt 259
Ile Ser Arg Val Glu Asn Ala Glu Ala Gln Pro Ser Ala Ala Leu Leu
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gga cgc ctt tcc ggt gca ttg ggt atg acg ctt tcg gag ctc att gca 307
Gly Arg Leu Ser Gly Ala Leu Gly Met Thr Leu Ser Glu Leu Ile Ala
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cag gct gaa ggt ggc tat gac cgg ggc gct cgg cgg tca aag cag tct 355
Gln Ala Glu Gly Gly Tyr Asp Arg Gly Ala Arg Arg Ser Lys Gln Ser
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gta tgg aca gat cca gct acc ggt tac aca cgg cgt gca gtg tca cag 403
Val Trp Thr Asp Pro Ala Thr Gly Tyr Thr Arg Arg Ala Val Ser Gln
90 95 100
ccg tca gaa tcc cca cta gaa cta gtg gaa gta atg ctg cct cct ggg 451
Pro Ser Glu Ser Pro Leu Glu Leu Val Glu Val Met Leu Pro Pro Gly
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gcg gaa gtt ggc tac cca gct gat gct tat cgt ttc atg gat cag gtg 499
Ala Glu Val Gly Tyr Pro Ala Asp Ala Tyr Arg Phe Met Asp Gln Val
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gtc tgg gta ctc gaa ggg gcc gtt cgt att act gaa ggt gaa gag gtc 547
Val Trp Val Leu Glu Gly Ala Val Arg Ile Thr Glu Gly Glu Glu Val
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cac gaa ctt tca acg ggg gat tgt cta cgg ttt ggg cct ccg cga gat 595
His Glu Leu Ser Thr Gly Asp Cys Leu Arg Phe Gly Pro Pro Arg Asp
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acc gac ttt gct aat ccc acc acc gta gcc act agg tat tta gtt gcc 643
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ttg gac aag cgt gta cct cgt gct tgatataaca agtaaggaag cctgatgaat 697
Leu Asp Lys Arg Val Pro Arg Ala
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<210> 64
<211> 189
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 64
Met Glu Asp Asp Leu Ser Ala Ala Leu Val Lys Ala Leu Phe Asp Ala
1 5 10 15
Arg Thr Gln Arg Arg Leu Ser Ile Ser Ala Leu Ala Glu Ser Ser Gly
20 25 30
Val Ser Arg Ala Met Ile Ser Arg Val Glu Asn Ala Glu Ala Gln Pro
35 40 45
Ser Ala Ala Leu Leu Gly Arg Leu Ser Gly Ala Leu Gly Met Thr Leu
50 55 60
Ser Glu Leu Ile Ala Gln Ala Glu Gly Gly Tyr Asp Arg Gly Ala Arg
65 70 75 80
Arg Ser Lys Gln Ser Val Trp Thr Asp Pro Ala Thr Gly Tyr Thr Arg
85 90 95
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100 105 110
Met Leu Pro Pro Gly Ala Glu Val Gly Tyr Pro Ala Asp Ala Tyr Arg
115 120 125
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130 135 140
Glu Gly Glu Glu Val His Glu Leu Ser Thr Gly Asp Cys Leu Arg Phe
145 150 155 160
Gly Pro Pro Arg Asp Thr Asp Phe Ala Asn Pro Thr Thr Val Ala Thr
165 170 175
Arg Tyr Leu Val Ala Leu Asp Lys Arg Val Pro Arg Ala
180 185
<210> 65
<211> 3712
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(3682)
<223> RXA02657
<400> 65
tatgcgagta cgccgaaaat catagctgtt accttatacc taggttagaa aagccgagat 60
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Met Ala Arg Leu Ser
1 5
cac atg gcc aag caa tcc tca ttt gta cat ctt cac aac cac acc gag 163
His Met Ala Lys Gln Ser Ser Phe Val His Leu His Asn His Thr Glu
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ttt tcc atg ctt gat gga atg gcc aag atc gat atg ttg gcc gat gag 211
Phe Ser Met Leu Asp Gly Met Ala Lys Ile Asp Met Leu Ala Asp Glu
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Val Lys Ala Gln Gly Met Pro Ala Val Gly Ile Thr Asp His Gly Asn
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Met Tyr Gly Ser Asn Pro Phe Tyr Arg Lys Met Thr Glu Met Gly Ile
55 60 65
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Lys Pro Ile Ile Gly Ile Glu Thr Tyr Met Ala Pro Glu Ser Arg Phe
70 75 80 85
aag aaa gag cgt gtg cgt tgg ggc gaa cca cac caa aaa tca gat gat 403
Lys Lys Glu Arg Val Arg Trp Gly Glu Pro His Gln Lys Ser Asp Asp
90 95 100
gtt tct ggt tcc ggt gcg tat ttg cac cag acg atg ctt gca gaa aac 451
Val Ser Gly Ser Gly Ala Tyr Leu His Gln Thr Met Leu Ala Glu Asn
105 110 115
acc aca ggt tta aga aac ctc ttt tat cta tct tcg atg gca tcg tac 499
Thr Thr Gly Leu Arg Asn Leu Phe Tyr Leu Ser Ser Met Ala Ser Tyr
120 125 130
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Glu Gly Gln Leu Gly Lys Trp Pro Arg Met Asp Ala Asp Ile Ile Ala
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Glu His Ala Glu Gly Ile Ile Ala Thr Thr Gly Cys Pro Ser Gly Asp
150 155 160 165
gtg caa aca cgc ctg cgc ttg ggc cag ttc gac gaa gcc ctt gaa gca 643
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170 175 180
gcc gcc atg tgg cag gac atc tat ggt cgc gac aac tac ttc ctc gag 691
Ala Ala Met Trp Gln Asp Ile Tyr Gly Arg Asp Asn Tyr Phe Leu Glu
185 190 195
ttg atg gac cac ggg ctc gac att gaa acc cgt gtg cgc agt gag ctg 739
Leu Met Asp His Gly Leu Asp Ile Glu Thr Arg Val Arg Ser Glu Leu
200 205 210
ctc gaa atc gga cgc aag ctc aat ttg cca ccc ctg gtc acc aac gac 787
Leu Glu Ile Gly Arg Lys Leu Asn Leu Pro Pro Leu Val Thr Asn Asp
215 220 225
tgc cac tat gtg ctg gaa tct cag gcg caa gcc cac gag gca atg ctc 835
Cys His Tyr Val Leu Glu Ser Gln Ala Gln Ala His Glu Ala Met Leu
230 235 240 245
tgc gtg caa aca ggc aag acg ctt cat gat gaa gac cga ttc aaa ttc 883
Cys Val Gln Thr Gly Lys Thr Leu His Asp Glu Asp Arg Phe Lys Phe
250 255 260
ggc gga acc ggc tat tac gtt aaa tct gca gaa caa atg cgt gca ctc 931
Gly Gly Thr Gly Tyr Tyr Val Lys Ser Ala Glu Gln Met Arg Ala Leu
265 270 275
tgg gac gac atg gtt cca gat ggc tgc gac aac acc ctg tgg atc gct 979
Trp Asp Asp Met Val Pro Asp Gly Cys Asp Asn Thr Leu Trp Ile Ala
280 285 290
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Glu Arg Val Gln Ser Tyr Asp Glu Ile Trp Glu Glu His Ser His Asp
295 300 305
cgc atg cct atc gct gat gtt cca gaa ggc tac acc cca acc act tgg 1075
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Leu His His Glu Val Met Ala Gly Leu Glu Asp Arg Phe Ser Gly Gln
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caa gtt cct gag gat tat att gag cgc gcg gag tat gag atc tcc gtt 1171
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Asp Pro Met Glu His Gly Leu Leu Phe Glu Arg Phe Leu Asn Pro Glu
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cga cca tcc gca ccc gat atc gat att gac ttc gat gat cgc cgc cgc 1411
Arg Pro Ser Ala Pro Asp Ile Asp Ile Asp Phe Asp Asp Arg Arg Arg
425 430 435
ggt gaa atg atc cgt tac gca gct gac cgt tgg ggc gag gac aag att 1459
Gly Glu Met Ile Arg Tyr Ala Ala Asp Arg Trp Gly Glu Asp Lys Ile
440 445 450
gct cag gtg atc acc ttc ggt acg gtg aaa aca aag cag gca ctg aaa 1507
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Asp Ser Ala Arg Val Gln Met Gly Gln Pro Gly Tyr Gln Ile Ala Asp
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cgc gtg atc aag gag ctt cca cct gcc att atg gcg aag gat att ccg 1603
Arg Val Ile Lys Glu Leu Pro Pro Ala Ile Met Ala Lys Asp Ile Pro
490 495 500
ttg tcc ggt atc acc gat ccg gat cac cct cgt ttt aat gaa gca ggt 1651
Leu Ser Gly Ile Thr Asp Pro Asp His Pro Arg Phe Asn Glu Ala Gly
505 510 515
gcg gtg cgc cag ctg atc gaa acc gac cct gat gtg aag cgc att tac 1699
Ala Val Arg Gln Leu Ile Glu Thr Asp Pro Asp Val Lys Arg Ile Tyr
520 525 530
gac acc gct cgt ggt ttg gaa ggc gtg gtg cgc caa tct ggc gtg cac 1747
Asp Thr Ala Arg Gly Leu Glu Gly Val Val Arg Gln Ser Gly Val His
535 540 545
gcg tgt gcc gtg att atg tct tct gta ccg ctg ctg gac tgc att ccg 1795
Ala Cys Ala Val Ile Met Ser Ser Val Pro Leu Leu Asp Cys Ile Pro
550 555 560 565
atg tgg aag cgg cca gcc gac ggc gca ctg att aca ggc tgg gat tac 1843
Met Trp Lys Arg Pro Ala Asp Gly Ala Leu Ile Thr Gly Trp Asp Tyr
570 575 580
cca gca tgt gag gcc att ggc ctg ttg aag atg gac ttc ctg gga ctt 1891
Pro Ala Cys Glu Ala Ile Gly Leu Leu Lys Met Asp Phe Leu Gly Leu
585 590 595
cga aac ctt acc gtt att ggc gat gcg att gaa aac att aag gcc aac 1939
Arg Asn Leu Thr Val Ile Gly Asp Ala Ile Glu Asn Ile Lys Ala Asn
600 605 610
cgc gat ggg gaa gtg ctt gat cta gaa aac cta gcg atc gag gat gaa 1987
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Glu Thr Tyr Lys Leu Leu Gly Arg Gly Glu Thr Leu Gly Val Phe Gln
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ctt gat ggt ggt ggc atg cag gag ctg ctg aag cgt atg cag cca acc 2083
Leu Asp Gly Gly Gly Met Gln Glu Leu Leu Lys Arg Met Gln Pro Thr
650 655 660
ggc ttc aat gac atc gtc gca gcg ctt gcg ctg tat cgc cca ggc ccc 2131
Gly Phe Asn Asp Ile Val Ala Ala Leu Ala Leu Tyr Arg Pro Gly Pro
665 670 675
atg ggt gtg aac gcg cac tgg gat tac gcc gac cgt aaa aac gga cgc 2179
Met Gly Val Asn Ala His Trp Asp Tyr Ala Asp Arg Lys Asn Gly Arg
680 685 690
aag ccc att act cca att cac cca gag ttg gag gaa gct ctg gaa gaa 2227
Lys Pro Ile Thr Pro Ile His Pro Glu Leu Glu Glu Ala Leu Glu Glu
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atc ctt ggt gaa acc tat ggt ctg att gtg tac cag gag cag atc atg 2275
Ile Leu Gly Glu Thr Tyr Gly Leu Ile Val Tyr Gln Glu Gln Ile Met
710 715 720 725
agg atc tcc cag aag gtc gca aac tac acc gct ggt caa gca gat ggt 2323
Arg Ile Ser Gln Lys Val Ala Asn Tyr Thr Ala Gly Gln Ala Asp Gly
730 735 740
ttc cgt aaa gcc atg ggt aag aag aag ccc gag gtc ctg gaa aag gag 2371
Phe Arg Lys Ala Met Gly Lys Lys Lys Pro Glu Val Leu Glu Lys Glu
745 750 755
ttc gca aac ttc gaa ggt gga atg aag gcg aac ggc tat tca gat gcc 2419
Phe Ala Asn Phe Glu Gly Gly Met Lys Ala Asn Gly Tyr Ser Asp Ala
760 765 770
gcg att aag act ttg tgg gat acc att ctg ccg ttc gcc ggc tac gcg 2467
Ala Ile Lys Thr Leu Trp Asp Thr Ile Leu Pro Phe Ala Gly Tyr Ala
775 780 785
ttc aac aag tct cac gcc gca ggt tat gga ctt gta tcc ttc tgg act 2515
Phe Asn Lys Ser His Ala Ala Gly Tyr Gly Leu Val Ser Phe Trp Thr
790 795 800 805
gcc tat ttg aag gcg cac tac gcg ccg gaa tac atg gca gca ctg ctg 2563
Ala Tyr Leu Lys Ala His Tyr Ala Pro Glu Tyr Met Ala Ala Leu Leu
810 815 820
act tct gtg ggt gat aac aag gac aaa tcg gcg atc tac ctt tct gat 2611
Thr Ser Val Gly Asp Asn Lys Asp Lys Ser Ala Ile Tyr Leu Ser Asp
825 830 835
tgc cga cac ctt gga att cga gtg ctt tcg ccg gat att aac gag tcc 2659
Cys Arg His Leu Gly Ile Arg Val Leu Ser Pro Asp Ile Asn Glu Ser
840 845 850
tcg ttg aac ttc ctt cct gtt ggc acc gat att cgc tat ggc ctg gga 2707
Ser Leu Asn Phe Leu Pro Val Gly Thr Asp Ile Arg Tyr Gly Leu Gly
855 860 865
gcc att aga aac gtg ggt gct gaa gtt gtg gat tcc att ttg gat acc 2755
Ala Ile Arg Asn Val Gly Ala Glu Val Val Asp Ser Ile Leu Asp Thr
870 875 880 885
cgc aag gaa aag ggc cta ttt aag gac ttc tca gac tac ttg gac aag 2803
Arg Lys Glu Lys Gly Leu Phe Lys Asp Phe Ser Asp Tyr Leu Asp Lys
890 895 900
atc gat acc ctg ccg tgt aac aag cgc atc acc gag tct ttg atc aag 2851
Ile Asp Thr Leu Pro Cys Asn Lys Arg Ile Thr Glu Ser Leu Ile Lys
905 910 915
ggt ggc gct ttt gac tcc ctt gga cac gca cga aaa ggc ctc atg ctg 2899
Gly Gly Ala Phe Asp Ser Leu Gly His Ala Arg Lys Gly Leu Met Leu
920 925 930
gtc ttc gaa gat gcc gtt gat tcc gtc atc gct acc aaa aaa gct gct 2947
Val Phe Glu Asp Ala Val Asp Ser Val Ile Ala Thr Lys Lys Ala Ala
935 940 945
gac aag gga caa ttt gat ctc ttt gca gct ttc gac tcg gat aac aac 2995
Asp Lys Gly Gln Phe Asp Leu Phe Ala Ala Phe Asp Ser Asp Asn Asn
950 955 960 965
gac gat gtg gca agt ttc ttc cag atc acc gtt cct gat gac gaa tgg 3043
Asp Asp Val Ala Ser Phe Phe Gln Ile Thr Val Pro Asp Asp Glu Trp
970 975 980
gac cgt aag cat gag ctc gca ctc gag cga gaa atg ctg ggt ctg tat 3091
Asp Arg Lys His Glu Leu Ala Leu Glu Arg Glu Met Leu Gly Leu Tyr
985 990 995
gtt tct gga cac cca ctc gat ggc tat gaa gat gcc att gct gcc cag 3139
Val Ser Gly His Pro Leu Asp Gly Tyr Glu Asp Ala Ile Ala Ala Gln
1000 1005 1010
gtt gat aca gca ctg acc acc att gtt gcc ggt gaa ctc aag cac ggc 3187
Val Asp Thr Ala Leu Thr Thr Ile Val Ala Gly Glu Leu Lys His Gly
1015 1020 1025
gca gaa gtg acc gtg ggt ggc att atc tct ggt gtg gat cga cgg ttc 3235
Ala Glu Val Thr Val Gly Gly Ile Ile Ser Gly Val Asp Arg Arg Phe
1030 1035 1040 1045
tcc aag aag gac ggt tcc cct tgg gcg att gtc acc att gaa gat cac 3283
Ser Lys Lys Asp Gly Ser Pro Trp Ala Ile Val Thr Ile Glu Asp His
1050 1055 1060
aac ggc gcg tcc gtt gaa ttg ttg gtc ttc aac aag gtg tat tcc atc 3331
Asn Gly Ala Ser Val Glu Leu Leu Val Phe Asn Lys Val Tyr Ser Ile
1065 1070 1075
gtt gga tcc atg att gtg gaa gac aac atc atc ttg gcc aag gca cac 3379
Val Gly Ser Met Ile Val Glu Asp Asn Ile Ile Leu Ala Lys Ala His
1080 1085 1090
atc tcc att cga gat gat cgt atg agc ctt ttc tgt gat gat ctc cgc 3427
Ile Ser Ile Arg Asp Asp Arg Met Ser Leu Phe Cys Asp Asp Leu Arg
1095 1100 1105
gtt cca gag ctt ggg cca gga aac ggg caa gga ctt ccg ctt cgt ttg 3475
Val Pro Glu Leu Gly Pro Gly Asn Gly Gln Gly Leu Pro Leu Arg Leu
1110 1115 1120 1125
tcc atg cgt act gat cag tgc acc atg tcc aac att gcc aag ctc aag 3523
Ser Met Arg Thr Asp Gln Cys Thr Met Ser Asn Ile Ala Lys Leu Lys
1130 1135 1140
cag gtg ctg gtg gac aac aag ggt gaa tct gat gtg tac ctc aat ttg 3571
Gln Val Leu Val Asp Asn Lys Gly Glu Ser Asp Val Tyr Leu Asn Leu
1145 1150 1155
atc gat ggg gat aac tcc acg gtc atg att ttg ggt gat cac tta aga 3619
Ile Asp Gly Asp Asn Ser Thr Val Met Ile Leu Gly Asp His Leu Arg
1160 1165 1170
gtc aac cga tcc gca agt ttg atg ggc gac ctc aag gca acg atg ggg 3667
Val Asn Arg Ser Ala Ser Leu Met Gly Asp Leu Lys Ala Thr Met Gly
1175 1180 1185
cca ggc atc ctc ggt taatcacatc acactgggat taccccgtgt 3712
Pro Gly Ile Leu Gly
1190
<210> 66
<211> 1194
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 66
Met Ala Arg Leu Ser His Met Ala Lys Gln Ser Ser Phe Val His Leu
1 5 10 15
His Asn His Thr Glu Phe Ser Met Leu Asp Gly Met Ala Lys Ile Asp
20 25 30
Met Leu Ala Asp Glu Val Lys Ala Gln Gly Met Pro Ala Val Gly Ile
35 40 45
Thr Asp His Gly Asn Met Tyr Gly Ser Asn Pro Phe Tyr Arg Lys Met
50 55 60
Thr Glu Met Gly Ile Lys Pro Ile Ile Gly Ile Glu Thr Tyr Met Ala
65 70 75 80
Pro Glu Ser Arg Phe Lys Lys Glu Arg Val Arg Trp Gly Glu Pro His
85 90 95
Gln Lys Ser Asp Asp Val Ser Gly Ser Gly Ala Tyr Leu His Gln Thr
100 105 110
Met Leu Ala Glu Asn Thr Thr Gly Leu Arg Asn Leu Phe Tyr Leu Ser
115 120 125
Ser Met Ala Ser Tyr Glu Gly Gln Leu Gly Lys Trp Pro Arg Met Asp
130 135 140
Ala Asp Ile Ile Ala Glu His Ala Glu Gly Ile Ile Ala Thr Thr Gly
145 150 155 160
Cys Pro Ser Gly Asp Val Gln Thr Arg Leu Arg Leu Gly Gln Phe Asp
165 170 175
Glu Ala Leu Glu Ala Ala Ala Met Trp Gln Asp Ile Tyr Gly Arg Asp
180 185 190
Asn Tyr Phe Leu Glu Leu Met Asp His Gly Leu Asp Ile Glu Thr Arg
195 200 205
Val Arg Ser Glu Leu Leu Glu Ile Gly Arg Lys Leu Asn Leu Pro Pro
210 215 220
Leu Val Thr Asn Asp Cys His Tyr Val Leu Glu Ser Gln Ala Gln Ala
225 230 235 240
His Glu Ala Met Leu Cys Val Gln Thr Gly Lys Thr Leu His Asp Glu
245 250 255
Asp Arg Phe Lys Phe Gly Gly Thr Gly Tyr Tyr Val Lys Ser Ala Glu
260 265 270
Gln Met Arg Ala Leu Trp Asp Asp Met Val Pro Asp Gly Cys Asp Asn
275 280 285
Thr Leu Trp Ile Ala Glu Arg Val Gln Ser Tyr Asp Glu Ile Trp Glu
290 295 300
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305 310 315 320
Thr Pro Thr Thr Trp Leu His His Glu Val Met Ala Gly Leu Glu Asp
325 330 335
Arg Phe Ser Gly Gln Gln Val Pro Glu Asp Tyr Ile Glu Arg Ala Glu
340 345 350
Tyr Glu Ile Ser Val Ile Asp Met Lys Gly Tyr Pro Ser Tyr Phe Leu
355 360 365
Ile Val Ala Glu Ile Ile Lys His Ala Arg Ser Ile Gly Ile Arg Val
370 375 380
Gly Pro Gly Arg Gly Ser Ala Ala Gly Ala Leu Val Ala Tyr Ala Leu
385 390 395 400
Thr Ile Thr Asn Ile Asp Pro Met Glu His Gly Leu Leu Phe Glu Arg
405 410 415
Phe Leu Asn Pro Glu Arg Pro Ser Ala Pro Asp Ile Asp Ile Asp Phe
420 425 430
Asp Asp Arg Arg Arg Gly Glu Met Ile Arg Tyr Ala Ala Asp Arg Trp
435 440 445
Gly Glu Asp Lys Ile Ala Gln Val Ile Thr Phe Gly Thr Val Lys Thr
450 455 460
Lys Gln Ala Leu Lys Asp Ser Ala Arg Val Gln Met Gly Gln Pro Gly
465 470 475 480
Tyr Gln Ile Ala Asp Arg Val Ile Lys Glu Leu Pro Pro Ala Ile Met
485 490 495
Ala Lys Asp Ile Pro Leu Ser Gly Ile Thr Asp Pro Asp His Pro Arg
500 505 510
Phe Asn Glu Ala Gly Ala Val Arg Gln Leu Ile Glu Thr Asp Pro Asp
515 520 525
Val Lys Arg Ile Tyr Asp Thr Ala Arg Gly Leu Glu Gly Val Val Arg
530 535 540
Gln Ser Gly Val His Ala Cys Ala Val Ile Met Ser Ser Val Pro Leu
545 550 555 560
Leu Asp Cys Ile Pro Met Trp Lys Arg Pro Ala Asp Gly Ala Leu Ile
565 570 575
Thr Gly Trp Asp Tyr Pro Ala Cys Glu Ala Ile Gly Leu Leu Lys Met
580 585 590
Asp Phe Leu Gly Leu Arg Asn Leu Thr Val Ile Gly Asp Ala Ile Glu
595 600 605
Asn Ile Lys Ala Asn Arg Asp Gly Glu Val Leu Asp Leu Glu Asn Leu
610 615 620
Ala Ile Glu Asp Glu Glu Thr Tyr Lys Leu Leu Gly Arg Gly Glu Thr
625 630 635 640
Leu Gly Val Phe Gln Leu Asp Gly Gly Gly Met Gln Glu Leu Leu Lys
645 650 655
Arg Met Gln Pro Thr Gly Phe Asn Asp Ile Val Ala Ala Leu Ala Leu
660 665 670
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725 730 735
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Val Leu Glu Lys Glu Phe Ala Asn Phe Glu Gly Gly Met Lys Ala Asn
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Gly Tyr Ser Asp Ala Ala Ile Lys Thr Leu Trp Asp Thr Ile Leu Pro
770 775 780
Phe Ala Gly Tyr Ala Phe Asn Lys Ser His Ala Ala Gly Tyr Gly Leu
785 790 795 800
Val Ser Phe Trp Thr Ala Tyr Leu Lys Ala His Tyr Ala Pro Glu Tyr
805 810 815
Met Ala Ala Leu Leu Thr Ser Val Gly Asp Asn Lys Asp Lys Ser Ala
820 825 830
Ile Tyr Leu Ser Asp Cys Arg His Leu Gly Ile Arg Val Leu Ser Pro
835 840 845
Asp Ile Asn Glu Ser Ser Leu Asn Phe Leu Pro Val Gly Thr Asp Ile
850 855 860
Arg Tyr Gly Leu Gly Ala Ile Arg Asn Val Gly Ala Glu Val Val Asp
865 870 875 880
Ser Ile Leu Asp Thr Arg Lys Glu Lys Gly Leu Phe Lys Asp Phe Ser
885 890 895
Asp Tyr Leu Asp Lys Ile Asp Thr Leu Pro Cys Asn Lys Arg Ile Thr
900 905 910
Glu Ser Leu Ile Lys Gly Gly Ala Phe Asp Ser Leu Gly His Ala Arg
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Lys Gly Leu Met Leu Val Phe Glu Asp Ala Val Asp Ser Val Ile Ala
930 935 940
Thr Lys Lys Ala Ala Asp Lys Gly Gln Phe Asp Leu Phe Ala Ala Phe
945 950 955 960
Asp Ser Asp Asn Asn Asp Asp Val Ala Ser Phe Phe Gln Ile Thr Val
965 970 975
Pro Asp Asp Glu Trp Asp Arg Lys His Glu Leu Ala Leu Glu Arg Glu
980 985 990
Met Leu Gly Leu Tyr Val Ser Gly His Pro Leu Asp Gly Tyr Glu Asp
995 1000 1005
Ala Ile Ala Ala Gln Val Asp Thr Ala Leu Thr Thr Ile Val Ala Gly
1010 1015 1020
Glu Leu Lys His Gly Ala Glu Val Thr Val Gly Gly Ile Ile Ser Gly
1025 1030 1035 1040
Val Asp Arg Arg Phe Ser Lys Lys Asp Gly Ser Pro Trp Ala Ile Val
1045 1050 1055
Thr Ile Glu Asp His Asn Gly Ala Ser Val Glu Leu Leu Val Phe Asn
1060 1065 1070
Lys Val Tyr Ser Ile Val Gly Ser Met Ile Val Glu Asp Asn Ile Ile
1075 1080 1085
Leu Ala Lys Ala His Ile Ser Ile Arg Asp Asp Arg Met Ser Leu Phe
1090 1095 1100
Cys Asp Asp Leu Arg Val Pro Glu Leu Gly Pro Gly Asn Gly Gln Gly
1105 1110 1115 1120
Leu Pro Leu Arg Leu Ser Met Arg Thr Asp Gln Cys Thr Met Ser Asn
1125 1130 1135
Ile Ala Lys Leu Lys Gln Val Leu Val Asp Asn Lys Gly Glu Ser Asp
1140 1145 1150
Val Tyr Leu Asn Leu Ile Asp Gly Asp Asn Ser Thr Val Met Ile Leu
1155 1160 1165
Gly Asp His Leu Arg Val Asn Arg Ser Ala Ser Leu Met Gly Asp Leu
1170 1175 1180
Lys Ala Thr Met Gly Pro Gly Ile Leu Gly
1185 1190
<210> 67
<211> 4036
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(4006)
<223> RXA03166
<400> 67
ccctccctat agtgattagt tcacctccag actacctggc accgcgtggg ctgctttcac 60
ttggactttc ggcaaagaca agtagaatta gcccctagtc atg act act tct gaa 115
Met Thr Thr Ser Glu
1 5
act gcc cca tca aag gct tcc ctg tat gaa ctt tta gag ggc gta tcc 163
Thr Ala Pro Ser Lys Ala Ser Leu Tyr Glu Leu Leu Glu Gly Val Ser
10 15 20
ctc tcc gac gag cgc acg ttt agg cgc cga ctg tcc aaa gcc cgc gcg 211
Leu Ser Asp Glu Arg Thr Phe Arg Arg Arg Leu Ser Lys Ala Arg Ala
25 30 35
ccc aag gcg ctt ggt gcg att aag gct gat atc gat aag gca cgc ttg 259
Pro Lys Ala Leu Gly Ala Ile Lys Ala Asp Ile Asp Lys Ala Arg Leu
40 45 50
ctt atc gac gaa aag agc cag tta att ccg tct atc acc tac cca gaa 307
Leu Ile Asp Glu Lys Ser Gln Leu Ile Pro Ser Ile Thr Tyr Pro Glu
55 60 65
aac ctt ccg gtg agt tcc cgg cgc gat gat atc gcc gag gct atc cgt 355
Asn Leu Pro Val Ser Ser Arg Arg Asp Asp Ile Ala Glu Ala Ile Arg
70 75 80 85
gat aat cag gtg gtt att atc gcc ggt gag act ggt tcg ggt aag acg 403
Asp Asn Gln Val Val Ile Ile Ala Gly Glu Thr Gly Ser Gly Lys Thr
90 95 100
act cag att cct aag att tgt ttg gac cta ggc cgt ggc cgg cgt ggg 451
Thr Gln Ile Pro Lys Ile Cys Leu Asp Leu Gly Arg Gly Arg Arg Gly
105 110 115
ctc att ggc cac aca cag cca cgt cga tta gca gct agg acc gtc gcc 499
Leu Ile Gly His Thr Gln Pro Arg Arg Leu Ala Ala Arg Thr Val Ala
120 125 130
gag cgc atc gcc gat gaa ttg ggg caa gac atc ggc gaa tcg gtg ggt 547
Glu Arg Ile Ala Asp Glu Leu Gly Gln Asp Ile Gly Glu Ser Val Gly
135 140 145
tat gcg att cgt ttt gat gat cga gtt tcc tcg cat aca tcc gtg aag 595
Tyr Ala Ile Arg Phe Asp Asp Arg Val Ser Ser His Thr Ser Val Lys
150 155 160 165
ttg atg acg gat ggt att ttg ctt gct gaa atg cag cgg gat cgt ttc 643
Leu Met Thr Asp Gly Ile Leu Leu Ala Glu Met Gln Arg Asp Arg Phe
170 175 180
ctc aat gcg tat gac acc atc atc atc gat gag gcg cat gaa cgt tcc 691
Leu Asn Ala Tyr Asp Thr Ile Ile Ile Asp Glu Ala His Glu Arg Ser
185 190 195
ctc aac att gac ttc att ctg ggt tat ttg cgc cag ttg ttg cct aag 739
Leu Asn Ile Asp Phe Ile Leu Gly Tyr Leu Arg Gln Leu Leu Pro Lys
200 205 210
cgc cct gat ctt aaa gtc att att acc tcc gca acg att gac cct gag 787
Arg Pro Asp Leu Lys Val Ile Ile Thr Ser Ala Thr Ile Asp Pro Glu
215 220 225
cgt ttc gcg gag cac ttt gct gat gct tct gga aaa cca gca cca att 835
Arg Phe Ala Glu His Phe Ala Asp Ala Ser Gly Lys Pro Ala Pro Ile
230 235 240 245
atc gag gtc tcc ggc cgc acc ttc ccg gta gag atc cgt tat cgc cca 883
Ile Glu Val Ser Gly Arg Thr Phe Pro Val Glu Ile Arg Tyr Arg Pro
250 255 260
ctt gag gta tta gac ggc gat aaa att atc gat acc gat ccc ctt gac 931
Leu Glu Val Leu Asp Gly Asp Lys Ile Ile Asp Thr Asp Pro Leu Asp
265 270 275
ggc ttg tgt tct gct ttg gaa gag ctc atg gct gaa ggc gac ggc gat 979
Gly Leu Cys Ser Ala Leu Glu Glu Leu Met Ala Glu Gly Asp Gly Asp
280 285 290
atc ctc tgc ttc ttt gcc ggt gag cgt gat atc cgc gat gcc atg gag 1027
Ile Leu Cys Phe Phe Ala Gly Glu Arg Asp Ile Arg Asp Ala Met Glu
295 300 305
gca atc gag gcc cga cgc tgg aaa ggt gtg gaa gtc act ccc ctg ttt 1075
Ala Ile Glu Ala Arg Arg Trp Lys Gly Val Glu Val Thr Pro Leu Phe
310 315 320 325
ggc cgc ctg tcc aac cag gag cag cac cgt gta ttt agc ccg cac tct 1123
Gly Arg Leu Ser Asn Gln Glu Gln His Arg Val Phe Ser Pro His Ser
330 335 340
ggt cga cgc att gtg ctt tcc acc aat atc gca gag aca tcc ctg acg 1171
Gly Arg Arg Ile Val Leu Ser Thr Asn Ile Ala Glu Thr Ser Leu Thr
345 350 355
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Val Pro Gly Ile His Tyr Val Val Asp Thr Gly Thr Ala Arg Ile Ser
360 365 370
cgt tat tca gtg cgc acc aag gtg cag cgc ctt ccg att gag aac att 1267
Arg Tyr Ser Val Arg Thr Lys Val Gln Arg Leu Pro Ile Glu Asn Ile
375 380 385
tcc cag gcc agc gca aac cag cgt tct ggt cgt tgt ggt cgt gtc gca 1315
Ser Gln Ala Ser Ala Asn Gln Arg Ser Gly Arg Cys Gly Arg Val Ala
390 395 400 405
gac ggt att gcg att cgt ttg tat tcc gaa gat gat ttc aac tct cgc 1363
Asp Gly Ile Ala Ile Arg Leu Tyr Ser Glu Asp Asp Phe Asn Ser Arg
410 415 420
cca gag ttc acc gat ccg gaa att ctg cgc acc aac ttg gcg agc gtt 1411
Pro Glu Phe Thr Asp Pro Glu Ile Leu Arg Thr Asn Leu Ala Ser Val
425 430 435
att ttg cgc atg gcg tcg ctg cgt ctt ggc gat att aat gat ttc ccc 1459
Ile Leu Arg Met Ala Ser Leu Arg Leu Gly Asp Ile Asn Asp Phe Pro
440 445 450
ttc gtc caa gcc cca gag caa cgc tcc atc agg gat ggt att ttg ctg 1507
Phe Val Gln Ala Pro Glu Gln Arg Ser Ile Arg Asp Gly Ile Leu Leu
455 460 465
ctc cac gag ttg ggc gca ctc acc gac gac acc caa gcc gat ggt tca 1555
Leu His Glu Leu Gly Ala Leu Thr Asp Asp Thr Gln Ala Asp Gly Ser
470 475 480 485
ccg cag ctc acc cag atc ggt aaa gac tta gcc aac atc cca gtc gat 1603
Pro Gln Leu Thr Gln Ile Gly Lys Asp Leu Ala Asn Ile Pro Val Asp
490 495 500
ccc cgc atg gcc cgc atg ctc gta gaa gcc aac act cta ggc tgc ctg 1651
Pro Arg Met Ala Arg Met Leu Val Glu Ala Asn Thr Leu Gly Cys Leu
505 510 515
cat tct gtc atg gtc att gtg tcc gct ctg acg att caa gat gtt cgc 1699
His Ser Val Met Val Ile Val Ser Ala Leu Thr Ile Gln Asp Val Arg
520 525 530
gaa cgc ccc ctg gaa ttc caa gcc caa gct gat caa gcc cac gct agg 1747
Glu Arg Pro Leu Glu Phe Gln Ala Gln Ala Asp Gln Ala His Ala Arg
535 540 545
ttc aag gac acc acc tca gat ttc tta ggc ttt ttg aaa ctg tgg gag 1795
Phe Lys Asp Thr Thr Ser Asp Phe Leu Gly Phe Leu Lys Leu Trp Glu
550 555 560 565
tac atc gcc gat cag cgc aat caa agc agc ggc aat tcc ttc cgc aag 1843
Tyr Ile Ala Asp Gln Arg Asn Gln Ser Ser Gly Asn Ser Phe Arg Lys
570 575 580
cag atg aaa aaa gaa ttc ctc cac tac atg cgt atc cgc gag tgg tgg 1891
Gln Met Lys Lys Glu Phe Leu His Tyr Met Arg Ile Arg Glu Trp Trp
585 590 595
gat ttg gtg cgc caa tta gag cag att ggc cag caa ctt ggt tgg gca 1939
Asp Leu Val Arg Gln Leu Glu Gln Ile Gly Gln Gln Leu Gly Trp Ala
600 605 610
aag aag gag cag gtt gca ggc acc gcc agc cct gac atc att cac caa 1987
Lys Lys Glu Gln Val Ala Gly Thr Ala Ser Pro Asp Ile Ile His Gln
615 620 625
tcc ttg ctc acc ggt ctg ctc tcg caa atc ggt tcc cgt gat ggt gag 2035
Ser Leu Leu Thr Gly Leu Leu Ser Gln Ile Gly Ser Arg Asp Gly Glu
630 635 640 645
agc aaa gaa ttc act gga gcc aga ggt acc aaa ttc ttg gtc ttt cct 2083
Ser Lys Glu Phe Thr Gly Ala Arg Gly Thr Lys Phe Leu Val Phe Pro
650 655 660
ggt tct gcg cta acc aag aag ccg cca cag ttc atc atg gct ggc caa 2131
Gly Ser Ala Leu Thr Lys Lys Pro Pro Gln Phe Ile Met Ala Gly Gln
665 670 675
ttg gta gaa acc tca cgt ttg tgg gct cgc gat gta gcc aag att gaa 2179
Leu Val Glu Thr Ser Arg Leu Trp Ala Arg Asp Val Ala Lys Ile Glu
680 685 690
cca gag tgg gtg gaa aaa gca gcc ggc cca ttg ctc aag cac caa tac 2227
Pro Glu Trp Val Glu Lys Ala Ala Gly Pro Leu Leu Lys His Gln Tyr
695 700 705
tct gaa ccg tat tgg tcc tca aag cgt ggc gct gcc atg gtg cac cgc 2275
Ser Glu Pro Tyr Trp Ser Ser Lys Arg Gly Ala Ala Met Val His Arg
710 715 720 725
aaa tca acg ctc tac ggt gtg aca att gtt gcc gac aag gta gtt ccc 2323
Lys Ser Thr Leu Tyr Gly Val Thr Ile Val Ala Asp Lys Val Val Pro
730 735 740
tac cac acg gtt gat ccc gtg gct gcg cgc gat atg ttc atc cgc cat 2371
Tyr His Thr Val Asp Pro Val Ala Ala Arg Asp Met Phe Ile Arg His
745 750 755
gcc ctc atc gaa ggc gat tgg tcc act cac cac cgc ttc tac cac gac 2419
Ala Leu Ile Glu Gly Asp Trp Ser Thr His His Arg Phe Tyr His Asp
760 765 770
aac gtg gcc aaa ttg gag gca atc gga gaa ctt gaa gcc aag gcg cgt 2467
Asn Val Ala Lys Leu Glu Ala Ile Gly Glu Leu Glu Ala Lys Ala Arg
775 780 785
cgc cgc gac atc gtc gta gat gaa gac acc ctg ttt gat ttc tac gat 2515
Arg Arg Asp Ile Val Val Asp Glu Asp Thr Leu Phe Asp Phe Tyr Asp
790 795 800 805
gcc aag ctt cca agc aac gcc acc acc acc cgc aat ttc gat tcc tgg 2563
Ala Lys Leu Pro Ser Asn Ala Thr Thr Thr Arg Asn Phe Asp Ser Trp
810 815 820
tgg aag aaa aca tca cgc gtc aca cca gat ctt ctc gat ttc gac cca 2611
Trp Lys Lys Thr Ser Arg Val Thr Pro Asp Leu Leu Asp Phe Asp Pro
825 830 835
gat agt ctg atc aac gaa gac gct gac ggc gtt aac gaa gaa gcc ttc 2659
Asp Ser Leu Ile Asn Glu Asp Ala Asp Gly Val Asn Glu Glu Ala Phe
840 845 850
ccc gac aag tgg att aaa ggc agc ctg atc ttc gat ctc agc tac cac 2707
Pro Asp Lys Trp Ile Lys Gly Ser Leu Ile Phe Asp Leu Ser Tyr His
855 860 865
ttc gaa ccc ggc cac cgc gat gac ggc gtc aca gtc ctc atc ccc att 2755
Phe Glu Pro Gly His Arg Asp Asp Gly Val Thr Val Leu Ile Pro Ile
870 875 880 885
cca gtg ctg ggt gga ctt gat acc gaa ggc ttc gat tgg cta gtt cca 2803
Pro Val Leu Gly Gly Leu Asp Thr Glu Gly Phe Asp Trp Leu Val Pro
890 895 900
ggc tta agg ctt gat ttg gtg acc gag tta atc cgc acc atg cct aag 2851
Gly Leu Arg Leu Asp Leu Val Thr Glu Leu Ile Arg Thr Met Pro Lys
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gct tta cga cgc acc gtt gtc cct gcc ccg gat ttc gcc gag cgg gtc 2899
Ala Leu Arg Arg Thr Val Val Pro Ala Pro Asp Phe Ala Glu Arg Val
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ttg ccg tta ctg cgt ccc tac atg aca cca ctg acc acc caa ctt gcc 2947
Leu Pro Leu Leu Arg Pro Tyr Met Thr Pro Leu Thr Thr Gln Leu Ala
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Asp Ala Leu His Thr Leu Gly Gly Gln Gly Ile Asn Ala Ser Asp Phe
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Asp Pro Ala Lys Leu Pro Asp His Leu Arg Ile Ser Tyr Ala Ala Val
970 975 980
gat cgt cgt ggc aag atc atc gac cgc gac cgt gac ctc gaa gca cta 3091
Asp Arg Arg Gly Lys Ile Ile Asp Arg Asp Arg Asp Leu Glu Ala Leu
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aag aaa cgc cgc gcg aac caa atc agg gca tct gtt tct agc gtt gct 3139
Lys Lys Arg Arg Ala Asn Gln Ile Arg Ala Ser Val Ser Ser Val Ala
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aag gca tcc gaa caa gat gaa act acg cag tgg acc aca gat acc ttg 3187
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ttg aca ctg ttg atg cgt gag att gaa gta tcc aca aag caa atg gtc 3379
Leu Thr Leu Leu Met Arg Glu Ile Glu Val Ser Thr Lys Gln Met Val
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Val Ile Ala Tyr Ala
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ggt act act ggt acc tgt tta aaa gtc agc ccc aac gcc tat gtt gaa 163
Gly Thr Thr Gly Thr Cys Leu Lys Val Ser Pro Asn Ala Tyr Val Glu
10 15 20
gat atg gat gta cac gca gat act cga gaa ttc ctc act gcg cgc cgc 211
Asp Met Asp Val His Ala Asp Thr Arg Glu Phe Leu Thr Ala Arg Arg
25 30 35
aat cgt ctc act cca aaa gac gcc gga ttg cct att tac caa ggc aaa 259
Asn Arg Leu Thr Pro Lys Asp Ala Gly Leu Pro Ile Tyr Gln Gly Lys
40 45 50
agg cga gtt ccg ggg ctt cga cgt gaa gaa gtg gcc atg ttg gct ggc 307
Arg Arg Val Pro Gly Leu Arg Arg Glu Glu Val Ala Met Leu Ala Gly
55 60 65
gtg agc gtg gac tat tac aca cgt ctt gaa cga ggc aac ttg agt ggt 355
Val Ser Val Asp Tyr Tyr Thr Arg Leu Glu Arg Gly Asn Leu Ser Gly
70 75 80 85
gtg tca gaa cag gtg tta agc gcg tta gct act gcc tta cag ctg gat 403
Val Ser Glu Gln Val Leu Ser Ala Leu Ala Thr Ala Leu Gln Leu Asp
90 95 100
gat gcg gag acg cag cat ctg ttt gat ctg gcc aag ctc agt aat tca 451
Asp Ala Glu Thr Gln His Leu Phe Asp Leu Ala Lys Leu Ser Asn Ser
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ccg gcg tca cgg cgt aag cgt acc cct gca ccg aag tct gtg ctg cgc 499
Pro Ala Ser Arg Arg Lys Arg Thr Pro Ala Pro Lys Ser Val Leu Arg
120 125 130
cct gag gtg ctg cga att ctc aat tcg atg cac gat att cca gca tat 547
Pro Glu Val Leu Arg Ile Leu Asn Ser Met His Asp Ile Pro Ala Tyr
135 140 145
att cgt tct gaa agc cgt gac ctt ctg gca gcc aac act ttt ggt cgt 595
Ile Arg Ser Glu Ser Arg Asp Leu Leu Ala Ala Asn Thr Phe Gly Arg
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gcg cta tat gca ccg ttg tat gaa agc acg gtc tcc gat gga att agt 643
Ala Leu Tyr Ala Pro Leu Tyr Glu Ser Thr Val Ser Asp Gly Ile Ser
170 175 180
ggg gaa ccg ggg tca atc aat gtt gca cgc ttt aca ttc ctc gat cca 691
Gly Glu Pro Gly Ser Ile Asn Val Ala Arg Phe Thr Phe Leu Asp Pro
185 190 195
gca gcg cgc gaa ttt ttc cct gag tgg gag aga act tcg gca gat ttg 739
Ala Ala Arg Glu Phe Phe Pro Glu Trp Glu Arg Thr Ser Ala Asp Leu
200 205 210
gta gcc agc ttg cgc acc gtt gca gca cag cgg ccc aac gac acg ttg 787
Val Ala Ser Leu Arg Thr Val Ala Ala Gln Arg Pro Asn Asp Thr Leu
215 220 225
ttt agc aat ttg atc ggt gag ctg gtg acc aag tca gaa gtc ttc gcg 835
Phe Ser Asn Leu Ile Gly Glu Leu Val Thr Lys Ser Glu Val Phe Ala
230 235 240 245
caa atg tgg gcc gac cat aat gtc cgc atg cat cga aca ggt tcc aag 883
Gln Met Trp Ala Asp His Asn Val Arg Met His Arg Thr Gly Ser Lys
250 255 260
aag atc gtg cac ccg ttg gtg ggg gag atg gag ctg gat ttt gaa acg 931
Lys Ile Val His Pro Leu Val Gly Glu Met Glu Leu Asp Phe Glu Thr
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ctt gat ctt cca gca gat ccc gat att gcc ctc gtg gtg tac tcc gct 979
Leu Asp Leu Pro Ala Asp Pro Asp Ile Ala Leu Val Val Tyr Ser Ala
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gcg gaa ggt tcg aca tct gca atg aac ctt caa ctt ctg gcc aat tgg 1027
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aca ggt aat gac agc ccc tcc ctc agc aca gaa ctt ggt gac act att 1075
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Lys Ser Val Leu Arg Pro Glu Val Leu Arg Ile Leu Asn Ser Met His
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Arg Thr Gly Ser Lys Lys Ile Val His Pro Leu Val Gly Glu Met Glu
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Met Ser Asp Thr Thr
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gac agc cac gac cca gca acc tcc cct aca gtc gat tca gcc gca tcc 163
Asp Ser His Asp Pro Ala Thr Ser Pro Thr Val Asp Ser Ala Ala Ser
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ggt act tct gac ccc aac cag caa ccc aag aag aaa ttc acc atc att 211
Gly Thr Ser Asp Pro Asn Gln Gln Pro Lys Lys Lys Phe Thr Ile Ile
25 30 35
aag cag gtg aac atg att gcg cgt act gcc att gat gac tgc att aat 259
Lys Gln Val Asn Met Ile Ala Arg Thr Ala Ile Asp Asp Cys Ile Asn
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ttt gtc ttt ctt gct aaa tct gca gtg aac tac aac cca aat gca caa 787
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Ser Ala Trp Phe Tyr Ser Glu Ala Gly Asn Asn Gly Lys Gly Thr Leu
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Val Glu Leu Met Arg Asn Ile Leu Gly Ala Glu Ala Tyr Thr Ser Ile
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Gln Leu Ser Asp Phe Ser Lys Glu Phe His Leu Glu Ser Leu Thr Arg
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1 5
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cgg tct caa atg tgg ttg tgc cga tgt atg tgc ggc tcc gaa aat gct 547
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gtt gct ggg att atg ttg agg cag ggt att agc caa tcg tgt ggt tgt 595
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<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
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<222> (101)..(2377)
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Ser Gly His Leu Tyr Glu Phe Val Glu Pro Glu Glu Met Val Pro Pro
40 45 50
agc tat gcc gat aag atc ggc ggc tac tgg gat ctg gct aag ctg ccg 307
Ser Tyr Ala Asp Lys Ile Gly Gly Tyr Trp Asp Leu Ala Lys Leu Pro
55 60 65
tgg gat gag acg cag ttt ttg tgg tca cgc gag caa aag cac ggt gca 355
Trp Asp Glu Thr Gln Phe Leu Trp Ser Arg Glu Gln Lys His Gly Ala
70 75 80 85
gct aac acg att gca cgc att aag aaa acc ttg agc agc tgc acc acc 403
Ala Asn Thr Ile Ala Arg Ile Lys Lys Thr Leu Ser Ser Cys Thr Thr
90 95 100
att gtg atc gga tca gat att gat ccc acg ggc gaa ggt gat ctg ttg 451
Ile Val Ile Gly Ser Asp Ile Asp Pro Thr Gly Glu Gly Asp Leu Leu
105 110 115
gcg tgg gag att atc gct gag ctg ggg tta gac acc aag aag att cag 499
Ala Trp Glu Ile Ile Ala Glu Leu Gly Leu Asp Thr Lys Lys Ile Gln
120 125 130
cgt atg gaa ttt gtt gat gag gcg ccg gcc tcg att cag cag gcg ttt 547
Arg Met Glu Phe Val Asp Glu Ala Pro Ala Ser Ile Gln Gln Ala Phe
135 140 145
atc aac cgc cgc gat gtg acc tcc atg cat gac gag ccc aat tat ctt 595
Ile Asn Arg Arg Asp Val Thr Ser Met His Asp Glu Pro Asn Tyr Leu
150 155 160 165
aag gcg gaa ttc cga tca cgc ttt gat ttg ctg tcg atg cag tgg act 643
Lys Ala Glu Phe Arg Ser Arg Phe Asp Leu Leu Ser Met Gln Trp Thr
170 175 180
cgc ggt gcc acc aaa gtg cta gag acc act ggt cgg cgt gca gtg ttg 691
Arg Gly Ala Thr Lys Val Leu Glu Thr Thr Gly Arg Arg Ala Val Leu
185 190 195
cgc aat ggt cgc ctg aaa tct gcc atg gtt gcg att gtg ggg cag ggc 739
Arg Asn Gly Arg Leu Lys Ser Ala Met Val Ala Ile Val Gly Gln Gly
200 205 210
tta gat gcg tac aac gat tat aaa aag att cct ttt tat caa aac cgc 787
Leu Asp Ala Tyr Asn Asp Tyr Lys Lys Ile Pro Phe Tyr Gln Asn Arg
215 220 225
ttc att gat gat cac ggt gta agt tac gtc aac ccc gag gaa ccg cgt 835
Phe Ile Asp Asp His Gly Val Ser Tyr Val Asn Pro Glu Glu Pro Arg
230 235 240 245
tat aag act tgc gac gag gta cca cag ctt tat aag gct agt gcg gtc 883
Tyr Lys Thr Cys Asp Glu Val Pro Gln Leu Tyr Lys Ala Ser Ala Val
250 255 260
gaa tgc tat gag aag agc atg aaa aag acc gcg cca cca cgt cta ctt 931
Glu Cys Tyr Glu Lys Ser Met Lys Lys Thr Ala Pro Pro Arg Leu Leu
265 270 275
gac ctg gcg agc ctg tcg gcc ctg ctg tct aaa gag ggc ttt agc gca 979
Asp Leu Ala Ser Leu Ser Ala Leu Leu Ser Lys Glu Gly Phe Ser Ala
280 285 290
aag aac gtg ctt aag act tat cag cag atg tac gag gcg cag gtc gtg 1027
Lys Asn Val Leu Lys Thr Tyr Gln Gln Met Tyr Glu Ala Gln Val Val
295 300 305
tct tat ccg cgt acc gag gat aag acg att acc cct gag cag ttt aag 1075
Ser Tyr Pro Arg Thr Glu Asp Lys Thr Ile Thr Pro Glu Gln Phe Lys
310 315 320 325
gaa cta gcg ccg ttg gtc gat aag atc gcc ggc ctg gtt ggt gtg aac 1123
Glu Leu Ala Pro Leu Val Asp Lys Ile Ala Gly Leu Val Gly Val Asn
330 335 340
ccg gct gac ctt acg cac cga cag cca cgg tcc acg cat gtt aag ccc 1171
Pro Ala Asp Leu Thr His Arg Gln Pro Arg Ser Thr His Val Lys Pro
345 350 355
aag ggt gca cac ggc gcc aac cgt ccg ggt ttg aat gtg ccg acc agt 1219
Lys Gly Ala His Gly Ala Asn Arg Pro Gly Leu Asn Val Pro Thr Ser
360 365 370
att gca gcg gtg aaa acc acc tac ggt gtg ctc gga cag cgc att tat 1267
Ile Ala Ala Val Lys Thr Thr Tyr Gly Val Leu Gly Gln Arg Ile Tyr
375 380 385
gaa gtg ctc gct aag agc tat ctc acg atg ctg gca gag gat tac ctc 1315
Glu Val Leu Ala Lys Ser Tyr Leu Thr Met Leu Ala Glu Asp Tyr Leu
390 395 400 405
tat gag cac caa aaa ggc cgc gtc gtg gat tac cca gcg ttt ctc ggt 1363
Tyr Glu His Gln Lys Gly Arg Val Val Asp Tyr Pro Ala Phe Leu Gly
410 415 420
aca gca aat gtg cca aag tcc ttg ggt tgg aaa ggt att ttc gac gta 1411
Thr Ala Asn Val Pro Lys Ser Leu Gly Trp Lys Gly Ile Phe Asp Val
425 430 435
gac gct gag gct gat gat gat gct gcc ggc agt gat gca gca cag cag 1459
Asp Ala Glu Ala Asp Asp Asp Ala Ala Gly Ser Asp Ala Ala Gln Gln
440 445 450
ggg att ggt act cgt gct gag cca gaa gtg ttt gag ggt ttt ccg cag 1507
Gly Ile Gly Thr Arg Ala Glu Pro Glu Val Phe Glu Gly Phe Pro Gln
455 460 465
cga cca ccg cat ccg tca atg acg tgg ttg atg aaa cag ctc gat aag 1555
Arg Pro Pro His Pro Ser Met Thr Trp Leu Met Lys Gln Leu Asp Lys
470 475 480 485
cat gat gtc ggt acc ggt gcg aca cga acg agc acc tat gcc gag gtc 1603
His Asp Val Gly Thr Gly Ala Thr Arg Thr Ser Thr Tyr Ala Glu Val
490 495 500
aca gcc ggc aag tca gca ttg ctc aaa gaa acg cgt ggc aaa gtc act 1651
Thr Ala Gly Lys Ser Ala Leu Leu Lys Glu Thr Arg Gly Lys Val Thr
505 510 515
atg act gac gca ggg caa ctg aat tat ctg ctg ctt cct ggc acc cac 1699
Met Thr Asp Ala Gly Gln Leu Asn Tyr Leu Leu Leu Pro Gly Thr His
520 525 530
att ggc gac ctc aaa ctt acc gag cgc gtt tat gcc gat atg gca gcg 1747
Ile Gly Asp Leu Lys Leu Thr Glu Arg Val Tyr Ala Asp Met Ala Ala
535 540 545
gtt gct gct ggt gaa aag act gca gag cag gca ctg gaa cca gtt aaa 1795
Val Ala Ala Gly Glu Lys Thr Ala Glu Gln Ala Leu Glu Pro Val Lys
550 555 560 565
cag tgg gtc gaa gaa gat att gcg acc atg acc cgt aac gca aaa aac 1843
Gln Trp Val Glu Glu Asp Ile Ala Thr Met Thr Arg Asn Ala Lys Asn
570 575 580
atc ccc caa gaa cta gga aag aaa ctc atg act act act ttt acc cct 1891
Ile Pro Gln Glu Leu Gly Lys Lys Leu Met Thr Thr Thr Phe Thr Pro
585 590 595
tct gtc aag cac tcc ggc acc tgg aac ggt gag cag gtg agc ttt aag 1939
Ser Val Lys His Ser Gly Thr Trp Asn Gly Glu Gln Val Ser Phe Lys
600 605 610
aag gtc tac tgc ggg cat gaa ttt agc gat gca gaa tgc gag gcg ttg 1987
Lys Val Tyr Cys Gly His Glu Phe Ser Asp Ala Glu Cys Glu Ala Leu
615 620 625
ctg cgc ggt gag gag ctc acc att acc gat gcc atg att ggt gga cag 2035
Leu Arg Gly Glu Glu Leu Thr Ile Thr Asp Ala Met Ile Gly Gly Gln
630 635 640 645
atc acg aca gtc acc ggc aag ctg gcg cat caa agc ttt aac aaa gac 2083
Ile Thr Thr Val Thr Gly Lys Leu Ala His Gln Ser Phe Asn Lys Asp
650 655 660
ggc aag acc att aag ttc ttt ggg ttt aag ggg cag gtt gat cgc att 2131
Gly Lys Thr Ile Lys Phe Phe Gly Phe Lys Gly Gln Val Asp Arg Ile
665 670 675
gcc tct gca gac cca gct gtg tac gcg gtg ggt gtg tgg aag gtt gag 2179
Ala Ser Ala Asp Pro Ala Val Tyr Ala Val Gly Val Trp Lys Val Glu
680 685 690
ggt gaa aag att cgc ttc aag cgc gta tgg ggt ggt cac aag ttc acc 2227
Gly Glu Lys Ile Arg Phe Lys Arg Val Trp Gly Gly His Lys Phe Thr
695 700 705
gac aag gag atc gcc gat ctg ctt gag ggc cgc gag att gct ttt gat 2275
Asp Lys Glu Ile Ala Asp Leu Leu Glu Gly Arg Glu Ile Ala Phe Asp
710 715 720 725
gcc atg tcg aag gcc aag aag ccg tac acc gct cgg gga tcg ctg cag 2323
Ala Met Ser Lys Ala Lys Lys Pro Tyr Thr Ala Arg Gly Ser Leu Gln
730 735 740
cgc ggc gag tac aac ggt aat tcg ttc gtc ggc ttc cag ctc gca cca 2371
Arg Gly Glu Tyr Asn Gly Asn Ser Phe Val Gly Phe Gln Leu Ala Pro
745 750 755
cgc gat taacgcacaa gtacgtgcac tagaagaaac 2407
Arg Asp
<210> 80
<211> 759
<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
<400> 80
Leu Thr Ile Gly Ile Leu Thr Glu Lys Ala Ser Ala Ala Lys Asn Phe
1 5 10 15
Ala Lys Ala Leu Gly Gly Pro Ser Gly Thr Tyr Asn Gly Glu Lys Tyr
20 25 30
Val Ile Ala Ala Ala Ser Gly His Leu Tyr Glu Phe Val Glu Pro Glu
35 40 45
Glu Met Val Pro Pro Ser Tyr Ala Asp Lys Ile Gly Gly Tyr Trp Asp
50 55 60
Leu Ala Lys Leu Pro Trp Asp Glu Thr Gln Phe Leu Trp Ser Arg Glu
65 70 75 80
Gln Lys His Gly Ala Ala Asn Thr Ile Ala Arg Ile Lys Lys Thr Leu
85 90 95
Ser Ser Cys Thr Thr Ile Val Ile Gly Ser Asp Ile Asp Pro Thr Gly
100 105 110
Glu Gly Asp Leu Leu Ala Trp Glu Ile Ile Ala Glu Leu Gly Leu Asp
115 120 125
Thr Lys Lys Ile Gln Arg Met Glu Phe Val Asp Glu Ala Pro Ala Ser
130 135 140
Ile Gln Gln Ala Phe Ile Asn Arg Arg Asp Val Thr Ser Met His Asp
145 150 155 160
Glu Pro Asn Tyr Leu Lys Ala Glu Phe Arg Ser Arg Phe Asp Leu Leu
165 170 175
Ser Met Gln Trp Thr Arg Gly Ala Thr Lys Val Leu Glu Thr Thr Gly
180 185 190
Arg Arg Ala Val Leu Arg Asn Gly Arg Leu Lys Ser Ala Met Val Ala
195 200 205
Ile Val Gly Gln Gly Leu Asp Ala Tyr Asn Asp Tyr Lys Lys Ile Pro
210 215 220
Phe Tyr Gln Asn Arg Phe Ile Asp Asp His Gly Val Ser Tyr Val Asn
225 230 235 240
Pro Glu Glu Pro Arg Tyr Lys Thr Cys Asp Glu Val Pro Gln Leu Tyr
245 250 255
Lys Ala Ser Ala Val Glu Cys Tyr Glu Lys Ser Met Lys Lys Thr Ala
260 265 270
Pro Pro Arg Leu Leu Asp Leu Ala Ser Leu Ser Ala Leu Leu Ser Lys
275 280 285
Glu Gly Phe Ser Ala Lys Asn Val Leu Lys Thr Tyr Gln Gln Met Tyr
290 295 300
Glu Ala Gln Val Val Ser Tyr Pro Arg Thr Glu Asp Lys Thr Ile Thr
305 310 315 320
Pro Glu Gln Phe Lys Glu Leu Ala Pro Leu Val Asp Lys Ile Ala Gly
325 330 335
Leu Val Gly Val Asn Pro Ala Asp Leu Thr His Arg Gln Pro Arg Ser
340 345 350
Thr His Val Lys Pro Lys Gly Ala His Gly Ala Asn Arg Pro Gly Leu
355 360 365
Asn Val Pro Thr Ser Ile Ala Ala Val Lys Thr Thr Tyr Gly Val Leu
370 375 380
Gly Gln Arg Ile Tyr Glu Val Leu Ala Lys Ser Tyr Leu Thr Met Leu
385 390 395 400
Ala Glu Asp Tyr Leu Tyr Glu His Gln Lys Gly Arg Val Val Asp Tyr
405 410 415
Pro Ala Phe Leu Gly Thr Ala Asn Val Pro Lys Ser Leu Gly Trp Lys
420 425 430
Gly Ile Phe Asp Val Asp Ala Glu Ala Asp Asp Asp Ala Ala Gly Ser
435 440 445
Asp Ala Ala Gln Gln Gly Ile Gly Thr Arg Ala Glu Pro Glu Val Phe
450 455 460
Glu Gly Phe Pro Gln Arg Pro Pro His Pro Ser Met Thr Trp Leu Met
465 470 475 480
Lys Gln Leu Asp Lys His Asp Val Gly Thr Gly Ala Thr Arg Thr Ser
485 490 495
Thr Tyr Ala Glu Val Thr Ala Gly Lys Ser Ala Leu Leu Lys Glu Thr
500 505 510
Arg Gly Lys Val Thr Met Thr Asp Ala Gly Gln Leu Asn Tyr Leu Leu
515 520 525
Leu Pro Gly Thr His Ile Gly Asp Leu Lys Leu Thr Glu Arg Val Tyr
530 535 540
Ala Asp Met Ala Ala Val Ala Ala Gly Glu Lys Thr Ala Glu Gln Ala
545 550 555 560
Leu Glu Pro Val Lys Gln Trp Val Glu Glu Asp Ile Ala Thr Met Thr
565 570 575
Arg Asn Ala Lys Asn Ile Pro Gln Glu Leu Gly Lys Lys Leu Met Thr
580 585 590
Thr Thr Phe Thr Pro Ser Val Lys His Ser Gly Thr Trp Asn Gly Glu
595 600 605
Gln Val Ser Phe Lys Lys Val Tyr Cys Gly His Glu Phe Ser Asp Ala
610 615 620
Glu Cys Glu Ala Leu Leu Arg Gly Glu Glu Leu Thr Ile Thr Asp Ala
625 630 635 640
Met Ile Gly Gly Gln Ile Thr Thr Val Thr Gly Lys Leu Ala His Gln
645 650 655
Ser Phe Asn Lys Asp Gly Lys Thr Ile Lys Phe Phe Gly Phe Lys Gly
660 665 670
Gln Val Asp Arg Ile Ala Ser Ala Asp Pro Ala Val Tyr Ala Val Gly
675 680 685
Val Trp Lys Val Glu Gly Glu Lys Ile Arg Phe Lys Arg Val Trp Gly
690 695 700
Gly His Lys Phe Thr Asp Lys Glu Ile Ala Asp Leu Leu Glu Gly Arg
705 710 715 720
Glu Ile Ala Phe Asp Ala Met Ser Lys Ala Lys Lys Pro Tyr Thr Ala
725 730 735
Arg Gly Ser Leu Gln Arg Gly Glu Tyr Asn Gly Asn Ser Phe Val Gly
740 745 750
Phe Gln Leu Ala Pro Arg Asp
755
<210> 81
<211> 3118
<212> DNA
<213> Corynebacterium glutamicum
<220>
<221> CDS
<222> (101)..(3088)
<223> RXA03903
<400> 81
catagtgggc acagacacgc aataagaaca gtggctttct gaagtgttct aaaaggaaca 60
tgaagggggt caaggcagtt aacgagaggg atgcattccc gtg gca gat acc gca 115
Val Ala Asp Thr Ala
1 5
ggc acc aca gga tcg aaa aag aag tac ttg gtg atc gtc gag tcg gcg 163
Gly Thr Thr Gly Ser Lys Lys Lys Tyr Leu Val Ile Val Glu Ser Ala
10 15 20
acc aag gct aaa aag att cag cct tac ctt ggc aac gac tac atc gtc 211
Thr Lys Ala Lys Lys Ile Gln Pro Tyr Leu Gly Asn Asp Tyr Ile Val
25 30 35
gag gcc tcc gtt ggt cat att cgt gat ctg cca cgt ggc gct gct gac 259
Glu Ala Ser Val Gly His Ile Arg Asp Leu Pro Arg Gly Ala Ala Asp
40 45 50
atc cct gca aag tac aag aag gag cct tgg gct cgt ctt ggt gtg gac 307
Ile Pro Ala Lys Tyr Lys Lys Glu Pro Trp Ala Arg Leu Gly Val Asp
55 60 65
acc gat cgc ggt ttc gcg ccg ctt tat gtg gtg agc ccc gat aaa aag 355
Thr Asp Arg Gly Phe Ala Pro Leu Tyr Val Val Ser Pro Asp Lys Lys
70 75 80 85
aag aag gtc gct gac ctc aag gcg aag ctc aag ctc gtt gat gag ttg 403
Lys Lys Val Ala Asp Leu Lys Ala Lys Leu Lys Leu Val Asp Glu Leu
90 95 100
ctg ctg gca aca gac ccc gac cgt gag ggc gag gcg att gcg tgg cat 451
Leu Leu Ala Thr Asp Pro Asp Arg Glu Gly Glu Ala Ile Ala Trp His
105 110 115
ttg ctt gag gtg ttg aag ccg act gtt cct gtg cgt cgc atg gtg ttc 499
Leu Leu Glu Val Leu Lys Pro Thr Val Pro Val Arg Arg Met Val Phe
120 125 130
aat gag atc acg aag cct gcc att ttg gct gcg gcg gaa aac act cgt 547
Asn Glu Ile Thr Lys Pro Ala Ile Leu Ala Ala Ala Glu Asn Thr Arg
135 140 145
gag ctg gat gag aac ctg gtg gat gcg cag gaa act cgt cgt att ctg 595
Glu Leu Asp Glu Asn Leu Val Asp Ala Gln Glu Thr Arg Arg Ile Leu
150 155 160 165
gac cgt ttg tac ggc tat gaa gtc tct cct gtg ctg tgg aaa aag gtc 643
Asp Arg Leu Tyr Gly Tyr Glu Val Ser Pro Val Leu Trp Lys Lys Val
170 175 180
atg ccg agg ttg tcg gcg ggc cgt gtg cag tcg gtg gca acc cgt gtg 691
Met Pro Arg Leu Ser Ala Gly Arg Val Gln Ser Val Ala Thr Arg Val
185 190 195
att gtt gag cgg gag cgc gag cgc atg gcg ttc gtg tcg gcg gat tat 739
Ile Val Glu Arg Glu Arg Glu Arg Met Ala Phe Val Ser Ala Asp Tyr
200 205 210
tgg gat ctg tcg gcg gag ttt aat gcg cgt gaa aac ggc aag gcg gat 787
Trp Asp Leu Ser Ala Glu Phe Asn Ala Arg Glu Asn Gly Lys Ala Asp
215 220 225
tcg gat aac ccg tcg tcg ttt act gcg cgt ttg tcc acg att gat gga 835
Ser Asp Asn Pro Ser Ser Phe Thr Ala Arg Leu Ser Thr Ile Asp Gly
230 235 240 245
aac cgt gtt gct caa ggc cgt gat ttt aat gat cgg gga gag ctg acc 883
Asn Arg Val Ala Gln Gly Arg Asp Phe Asn Asp Arg Gly Glu Leu Thr
250 255 260
tcg gag gct gtc gtc gtc gat aag cag cgt gct gag gcg tta gcc gag 931
Ser Glu Ala Val Val Val Asp Lys Gln Arg Ala Glu Ala Leu Ala Glu
265 270 275
gct ttg gaa ggc cag gaa atg gcc gtc gtt ggg gtc gag gaa aag ccg 979
Ala Leu Glu Gly Gln Glu Met Ala Val Val Gly Val Glu Glu Lys Pro
280 285 290
tac acc cgt cgc cct tat gcg ccg ttt atg acc tct acg ctg cag caa 1027
Tyr Thr Arg Arg Pro Tyr Ala Pro Phe Met Thr Ser Thr Leu Gln Gln
295 300 305
gag tct ggc cgc aag ctg cat tac act tct gag cgc acg atg cgt att 1075
Glu Ser Gly Arg Lys Leu His Tyr Thr Ser Glu Arg Thr Met Arg Ile
310 315 320 325
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Ala Gln Arg Leu Tyr Glu Asn Gly His Ile Thr Tyr Met Arg Thr Asp
330 335 340
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Ser Thr Ser Leu Ser Glu Gln Gly Met Lys Ala Ala Arg Asp Gln Ala
345 350 355
ttg gag ctg tac ggt gcg gaa tat gtt tcg ccg agc cca cgt acc tat 1219
Leu Glu Leu Tyr Gly Ala Glu Tyr Val Ser Pro Ser Pro Arg Thr Tyr
360 365 370
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Asp Arg Lys Val Lys Asn Ser Gln Glu Ala His Glu Ala Ile Arg Pro
375 380 385
gct ggt gaa act ttt gcg acc ccg ggc cag ctg cat ggc cag ttg gat 1315
Ala Gly Glu Thr Phe Ala Thr Pro Gly Gln Leu His Gly Gln Leu Asp
390 395 400 405
gcg gaa gaa ttt aag ctc tat gag ctg att tgg cag cgc act gtg gcc 1363
Ala Glu Glu Phe Lys Leu Tyr Glu Leu Ile Trp Gln Arg Thr Val Ala
410 415 420
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Ser Gln Met Ala Asp Ala Lys Gly Thr Ser Met Lys Val Thr Ile Gly
425 430 435
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Gly Thr Ala Lys Thr Gly Glu Lys Thr Glu Phe Asn Ala Thr Gly Arg
440 445 450
acg ctg act ttc cct ggc ttc ctg cgc gct tac gtg gaa acc acc cgc 1507
Thr Leu Thr Phe Pro Gly Phe Leu Arg Ala Tyr Val Glu Thr Thr Arg
455 460 465
acc gcc gat ggc cgc gac gta gct gac aac gcc gaa aag cgt ctg cca 1555
Thr Ala Asp Gly Arg Asp Val Ala Asp Asn Ala Glu Lys Arg Leu Pro
470 475 480 485
ctg ctg tct gag ggc gat ctg ctc aag gtt ttg agc atc gaa gcc gat 1603
Leu Leu Ser Glu Gly Asp Leu Leu Lys Val Leu Ser Ile Glu Ala Asp
490 495 500
ggt cac agc acc aat cca cct gcg cgc tac aca gag gcg tcg ctg gtg 1651
Gly His Ser Thr Asn Pro Pro Ala Arg Tyr Thr Glu Ala Ser Leu Val
505 510 515
aag aag atg gaa gat ctg ggc atc ggc cgt cct tcc act tat gca tcg 1699
Lys Lys Met Glu Asp Leu Gly Ile Gly Arg Pro Ser Thr Tyr Ala Ser
520 525 530
atc att aag acg att cag gat cga ggc tac gtt tat tcg cgt ggc aat 1747
Ile Ile Lys Thr Ile Gln Asp Arg Gly Tyr Val Tyr Ser Arg Gly Asn
535 540 545
gcg ctg gtg ccg tcc tgg gtc gcg ttc gcc gtg gtc gga ttg ctt gaa 1795
Ala Leu Val Pro Ser Trp Val Ala Phe Ala Val Val Gly Leu Leu Glu
550 555 560 565
gcc aac ttc acc tcg ctg gtg gat tac gat ttc acc tcc tcc atg gaa 1843
Ala Asn Phe Thr Ser Leu Val Asp Tyr Asp Phe Thr Ser Ser Met Glu
570 575 580
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Asp Glu Leu Asp Asn Ile Ala Ala Gly Arg Glu Gly Arg Thr Glu Trp
585 590 595
ctc aac ggt ttc tac ttc ggc gat gcc gaa gcg gat cag tcc atg gct 1939
Leu Asn Gly Phe Tyr Phe Gly Asp Ala Glu Ala Asp Gln Ser Met Ala
600 605 610
gaa tca gtt gcc cgc cag ggc ggt ttg aag gcg ctt gtc gac gcg aac 1987
Glu Ser Val Ala Arg Gln Gly Gly Leu Lys Ala Leu Val Asp Ala Asn
615 620 625
ctg gag cac atc gac gcg cgt tca gta aac tca ctc aag ctt ttc gac 2035
Leu Glu His Ile Asp Ala Arg Ser Val Asn Ser Leu Lys Leu Phe Asp
630 635 640 645
gac gcc gaa ggc cgt gcc gtg aac gtt cga gtc gga cgc tac ggt ccg 2083
Asp Ala Glu Gly Arg Ala Val Asn Val Arg Val Gly Arg Tyr Gly Pro
650 655 660
tac atc gag cgc atc gtg ggc acc acc gcg gaa ggc gag cca gaa ttt 2131
Tyr Ile Glu Arg Ile Val Gly Thr Thr Ala Glu Gly Glu Pro Glu Phe
665 670 675
cag cgc gcc aac cta cct gag gaa acc acg cct gat gag ctg acc ctc 2179
Gln Arg Ala Asn Leu Pro Glu Glu Thr Thr Pro Asp Glu Leu Thr Leu
680 685 690
gag gtc gct gag aag ctc ttc gct acc cca caa ggt gga cgt gaa ctg 2227
Glu Val Ala Glu Lys Leu Phe Ala Thr Pro Gln Gly Gly Arg Glu Leu
695 700 705
ggc att aac cca gca aac ggt cgc atg gtg gtg gct aag gaa ggc cgc 2275
Gly Ile Asn Pro Ala Asn Gly Arg Met Val Val Ala Lys Glu Gly Arg
710 715 720 725
ttt ggt cca tac gtg atc gag cag gtc acg gac tca gag cgc gct ggc 2323
Phe Gly Pro Tyr Val Ile Glu Gln Val Thr Asp Ser Glu Arg Ala Gly
730 735 740
gcc gaa gcc caa gca gaa gaa gtc gtt gca gcg gaa cga aaa gct gaa 2371
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760 765 770
aag act gcc gca aac cag aag gaa aag cgc atc aac cag ctg gtt gag 2467
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775 780 785
gaa aac ctc aag cca gcg acc gca tcc ctg ttc agc ggc atg gaa cct 2515
Glu Asn Leu Lys Pro Ala Thr Ala Ser Leu Phe Ser Gly Met Glu Pro
790 795 800 805
gca acc gtg acc ctg gaa gaa gcc ctc aag ctg ctg tcc ctg cca cgc 2563
Ala Thr Val Thr Leu Glu Glu Ala Leu Lys Leu Leu Ser Leu Pro Arg
810 815 820
gaa gta ggt gtc gat cct tcc gac aac gaa gtg atc acc gct caa aac 2611
Glu Val Gly Val Asp Pro Ser Asp Asn Glu Val Ile Thr Ala Gln Asn
825 830 835
gga cga tac ggc cct tat ctg aag aag ggt agc gac tcc cgt tcc ctc 2659
Gly Arg Tyr Gly Pro Tyr Leu Lys Lys Gly Ser Asp Ser Arg Ser Leu
840 845 850
aac agc gaa gag cag atc ttc acc gtc act ttg gat gag gct cgc cgc 2707
Asn Ser Glu Glu Gln Ile Phe Thr Val Thr Leu Asp Glu Ala Arg Arg
855 860 865
atc tac gcc gaa cca aag cgt cgt gga cgc gcc gct gct cag cca cca 2755
Ile Tyr Ala Glu Pro Lys Arg Arg Gly Arg Ala Ala Ala Gln Pro Pro
870 875 880 885
ctg aag caa ctt ggc gac aat gac gtt tcc ggc aaa cca atg acc gtc 2803
Leu Lys Gln Leu Gly Asp Asn Asp Val Ser Gly Lys Pro Met Thr Val
890 895 900
aag gac gga cgt ttc ggc cca tac gtc acc gac ggc acc acc aac gcg 2851
Lys Asp Gly Arg Phe Gly Pro Tyr Val Thr Asp Gly Thr Thr Asn Ala
905 910 915
tca ctg cgc aag ggc gat gtt cca gag tcc ctg acc gat gcg cgt gcc 2899
Ser Leu Arg Lys Gly Asp Val Pro Glu Ser Leu Thr Asp Ala Arg Ala
920 925 930
aac gag tta ctt tcc gag cgt cgt gcc aag gaa gca gca gat ggc gga 2947
Asn Glu Leu Leu Ser Glu Arg Arg Ala Lys Glu Ala Ala Asp Gly Gly
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gct cct gcg aag aag acg tcc act aaa aag act gca gcc aag aag acc 2995
Ala Pro Ala Lys Lys Thr Ser Thr Lys Lys Thr Ala Ala Lys Lys Thr
950 955 960 965
acg gct aaa aag aca aca gct aag aaa acc gtg agg aag gct ccg ccg 3043
Thr Ala Lys Lys Thr Thr Ala Lys Lys Thr Val Arg Lys Ala Pro Pro
970 975 980
aaa acc acc aaa aac gtg gtg aag gcc ggc gct aag aag aag tcc 3088
Lys Thr Thr Lys Asn Val Val Lys Ala Gly Ala Lys Lys Lys Ser
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taaaacatgc tgaacgggtt cgtgaccaaa 3118
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<212> PRT
<213> Corynebacterium glutamicum
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Ser Pro Asp Lys Lys Lys Lys Val Ala Asp Leu Lys Ala Lys Leu Lys
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100 105 110
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Arg Arg Met Val Phe Asn Glu Ile Thr Lys Pro Ala Ile Leu Ala Ala
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Arg Glu Phe Ala Arg Val Arg Pro Asn Glu Ala Val Thr Lys Leu Arg
675 680 685
Asn Ala Ile Arg Asp His Glu Ala His His Trp Pro Asp Arg Glu His
690 695 700
Leu Ala Arg Thr Ala Glu Arg Met Ile Arg Lys Glu Arg Asp Leu Ala
705 710 715 720
Lys Leu Thr Gly Asn Val Asp Lys Ala Arg Glu Thr Leu Gly Arg Thr
725 730 735
Phe Glu Arg Ile Leu Ser Leu Leu Ser Glu Met Asp Tyr Val Asp Tyr
740 745 750
Ser Asn Pro Asp Asn Pro Val Ile Thr Asp Glu Gly Glu Arg Leu Ala
755 760 765
Lys Ile His Ser Glu Ala Asp Leu Leu Val Ala Gln Cys Leu Lys Arg
770 775 780
Gly Ile Trp Asp Asn Leu Asp Pro Ala Glu Leu Ala Gly Val Val Ser
785 790 795 800
Met Cys Thr Phe Glu Asn Arg Arg Glu Thr Gly Gly Glu Ala Gln Ala
805 810 815
Val Thr Glu Ala Met Ala Asp Ser Met Asn Ser Val Glu Arg Ile Trp
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Gly Glu Leu Val Glu Asp Glu Arg Arg His Arg Leu Pro Ile Thr Arg
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885 890 895
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Val Ala Leu Tyr Ser Lys Tyr Arg Pro Ala Ser Phe Gly Glu Leu Val
1 5 10 15
ggg cag tcg caa gtg act gac cct ctg tcc gca gct ttg gat agc ggg 96
Gly Gln Ser Gln Val Thr Asp Pro Leu Ser Ala Ala Leu Asp Ser Gly
20 25 30
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Arg Ile Asn His Ala Tyr Leu Phe Ser Gly Pro Arg Gly Cys Gly Lys
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Thr Ser Ser Ala Arg Ile Leu Ala Arg Ser Leu Asn Cys Val Glu Gly
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cca act tcc acg ccg tgt ggg gtg tgt aat tct tgc gta gcg ctg gcc 240
Pro Thr Ser Thr Pro Cys Gly Val Cys Asn Ser Cys Val Ala Leu Ala
65 70 75 80
ccg ggt ggc cct gga acc ctt gat gta aca gag ctc gac gcc gcg agt 288
Pro Gly Gly Pro Gly Thr Leu Asp Val Thr Glu Leu Asp Ala Ala Ser
85 90 95
aac aat ggt gtc gat gac atg cgt gaa ctg cgc gaa cgc gcg aac tac 336
Asn Asn Gly Val Asp Asp Met Arg Glu Leu Arg Glu Arg Ala Asn Tyr
100 105 110
gcc ccg gcg gaa tct cgc tac cgc gtg ttc atc att gac gaa gcc cac 384
Ala Pro Ala Glu Ser Arg Tyr Arg Val Phe Ile Ile Asp Glu Ala His
115 120 125
atg atc agt acc caa ggc ttc aac gcc ttg ctg aaa atc gtt gaa gag 432
Met Ile Ser Thr Gln Gly Phe Asn Ala Leu Leu Lys Ile Val Glu Glu
130 135 140
cca cca gcg cac ctg att ttc atc ttc gcc acc acc gag ccg gac aaa 480
Pro Pro Ala His Leu Ile Phe Ile Phe Ala Thr Thr Glu Pro Asp Lys
145 150 155 160
atg atc ggt acg atc cgt tcc cgc acg cac aat tac cca ttc cgc ctg 528
Met Ile Gly Thr Ile Arg Ser Arg Thr His Asn Tyr Pro Phe Arg Leu
165 170 175
ctc acc cca ggg gat atg cgc aaa gtg ctg aaa aat gcg gtc gat ggc 576
Leu Thr Pro Gly Asp Met Arg Lys Val Leu Lys Asn Ala Val Asp Gly
180 185 190
gaa ggc gtc cac gtc gac gat tcc gtt tac cca ctg gtc atc cgc gcc 624
Glu Gly Val His Val Asp Asp Ser Val Tyr Pro Leu Val Ile Arg Ala
195 200 205
ggc ggc ggc agc ccc cgc gac agc ctc tcc atc ctc gac cag ctc atc 672
Gly Gly Gly Ser Pro Arg Asp Ser Leu Ser Ile Leu Asp Gln Leu Ile
210 215 220
gcc ggc tcg ggc ccg gag ggc ttg aca tat gag cgc gcc ttg ccg ctg 720
Ala Gly Ser Gly Pro Glu Gly Leu Thr Tyr Glu Arg Ala Leu Pro Leu
225 230 235 240
ctc ggt gtc aca agc ttc acg ctt atc gac gat tcg atc cat gcc ctt 768
Leu Gly Val Thr Ser Phe Thr Leu Ile Asp Asp Ser Ile His Ala Leu
245 250 255
gca tct aaa gac aac gca agc atg ttc acc acg atc gat aac gtc atc 816
Ala Ser Lys Asp Asn Ala Ser Met Phe Thr Thr Ile Asp Asn Val Ile
260 265 270
gaa gaa ggc ctc gaa ccg cga cgc ttc acg atc gac ctc ctc gac cgc 864
Glu Glu Gly Leu Glu Pro Arg Arg Phe Thr Ile Asp Leu Leu Asp Arg
275 280 285
ctc cgc gac ttg atg gtc ctc caa gcc gtc cca gaa gca cta aac ctc 912
Leu Arg Asp Leu Met Val Leu Gln Ala Val Pro Glu Ala Leu Asn Leu
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ggg ctt gtc gac gcc ccc acc gac cgc gcc gac gcc cta atc gaa caa 960
Gly Leu Val Asp Ala Pro Thr Asp Arg Ala Asp Ala Leu Ile Glu Gln
305 310 315 320
tcc acc ctg ttc aaa ggc aac gag ctc gcc aac cta gcc tcc atg gtg 1008
Ser Thr Leu Phe Lys Gly Asn Glu Leu Ala Asn Leu Ala Ser Met Val
325 330 335
aac tcc gga ctc gac gac atg cgt ggt gcc acc tca ccg cgc ctc ctt 1056
Asn Ser Gly Leu Asp Asp Met Arg Gly Ala Thr Ser Pro Arg Leu Leu
340 345 350
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Leu Glu Ile Leu Cys Ala Arg Leu Leu Leu Ala Ser Asn Thr Val Ala
355 360 365
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Gly Pro Ala Val Ser Ser Ser Thr Asp Ala Ala Pro Ala Ala Thr Pro
370 375 380
ggt ggt ctc act ggt att gct gct gcc cgc gcg aaa gca cgg gag tat 1200
Gly Gly Leu Thr Gly Ile Ala Ala Ala Arg Ala Lys Ala Arg Glu Tyr
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gga cag aag aag gca gct cca gct cct gca cca act cct gcg ccc gag 1248
Gly Gln Lys Lys Ala Ala Pro Ala Pro Ala Pro Thr Pro Ala Pro Glu
405 410 415
cca gtg cgc gaa cag tct ctt gca cca acg cct gaa cca acg cca gcg 1296
Pro Val Arg Glu Gln Ser Leu Ala Pro Thr Pro Glu Pro Thr Pro Ala
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gct gaa cct aca tct cag ccc gcg ccg gaa ccg gaa ccc gcc agg gaa 1344
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Pro Val Val Glu Val Arg Glu Ala Ser Val Glu Lys Gln Pro Ala Ser
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Pro Pro Pro Ala Pro Val Val Pro Ala Thr Pro Ala Ala Pro Ala Ala
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Gly Ala Ala Lys Pro Ala Trp Lys Glu Arg Val Glu Gln Ala Ala Ala
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Asn Ala Ala Gln Gln Arg Gln His Arg Gln Gly Ser Ser Glu Pro Phe
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Leu Arg Asp Leu Met Val Leu Gln Ala Val Pro Glu Ala Leu Asn Leu
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<213> Corynebacterium glutamicum
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tat tcc tca ctg gca gaa gca atc atg gct tat gac cgt ggt gta ctt 1920
Tyr Ser Ser Leu Ala Glu Ala Ile Met Ala Tyr Asp Arg Gly Val Leu
625 630 635 640
ggc ctg cag gcc cca gtt cgc atc cgt ttg aac cac ctg cgc cca cca 1968
Gly Leu Gln Ala Pro Val Arg Ile Arg Leu Asn His Leu Arg Pro Pro
645 650 655
gct gag gta gaa gca gag cag ttc cca gat gga tgg aac cag ggc gag 2016
Ala Glu Val Glu Ala Glu Gln Phe Pro Asp Gly Trp Asn Gln Gly Glu
660 665 670
act tgg ttg gct cac acc acc ttg ggt cgc gtt atg ttc aac gag atc 2064
Thr Trp Leu Ala His Thr Thr Leu Gly Arg Val Met Phe Asn Glu Ile
675 680 685
ctg cct tgg aac tac cca tac ctt gag ggc gtt atg gtc cgt aag ggt 2112
Leu Pro Trp Asn Tyr Pro Tyr Leu Glu Gly Val Met Val Arg Lys Gly
690 695 700
ggc ggc tcc gac aag atc atg ctt ggc gac gta gtc aat gac ctc gct 2160
Gly Gly Ser Asp Lys Ile Met Leu Gly Asp Val Val Asn Asp Leu Ala
705 710 715 720
gct aag tac cca atg atc acc gtg gct cag acc atg gac aag atg aag 2208
Ala Lys Tyr Pro Met Ile Thr Val Ala Gln Thr Met Asp Lys Met Lys
725 730 735
gat gct ggc ttc tac tgg tca acc cgt tcc ggt gtg acc atc gct atg 2256
Asp Ala Gly Phe Tyr Trp Ser Thr Arg Ser Gly Val Thr Ile Ala Met
740 745 750
tct gac gtt ttg gtt ctt cct aac aag gaa gaa atg ctg gac cgc tac 2304
Ser Asp Val Leu Val Leu Pro Asn Lys Glu Glu Met Leu Asp Arg Tyr
755 760 765
gag gaa tct gca cgc cag atc gaa gtt aag tac aac cgc ggt aag ctc 2352
Glu Glu Ser Ala Arg Gln Ile Glu Val Lys Tyr Asn Arg Gly Lys Leu
770 775 780
acc ggc cgt gag cgc tac gac cgt ctg gtc gag ctg tgg aag gac gca 2400
Thr Gly Arg Glu Arg Tyr Asp Arg Leu Val Glu Leu Trp Lys Asp Ala
785 790 795 800
act gac gag gtt gga cag gct gtc gag gat ctg tac cca gac gac aac 2448
Thr Asp Glu Val Gly Gln Ala Val Glu Asp Leu Tyr Pro Asp Asp Asn
805 810 815
cca att cca atg atc gtg aag tct ggt gct gcc ggt aac atg cgt cag 2496
Pro Ile Pro Met Ile Val Lys Ser Gly Ala Ala Gly Asn Met Arg Gln
820 825 830
atc tgg acc ctt gct ggt atg aag ggc atg gtt gtg aac tcg aag ggt 2544
Ile Trp Thr Leu Ala Gly Met Lys Gly Met Val Val Asn Ser Lys Gly
835 840 845
gac tac atc acc cgc ccg atc aag act tcc ttc cgt gaa ggc ttg acc 2592
Asp Tyr Ile Thr Arg Pro Ile Lys Thr Ser Phe Arg Glu Gly Leu Thr
850 855 860
gtt ctc gag tac ttc aac aac tcc cac ggt tcc cgt aag ggc ctg gcc 2640
Val Leu Glu Tyr Phe Asn Asn Ser His Gly Ser Arg Lys Gly Leu Ala
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gat acc gcg ctg cgt acc gct gac tcc ggt tac ctg acc cgt cgt ctt 2688
Asp Thr Ala Leu Arg Thr Ala Asp Ser Gly Tyr Leu Thr Arg Arg Leu
885 890 895
gtt gac gtc gct cag gac gtc atc gtg cgt gtt gag gac tgt ggc acc 2736
Val Asp Val Ala Gln Asp Val Ile Val Arg Val Glu Asp Cys Gly Thr
900 905 910
cgc cag ggt gtt cgc gtt cct gtc gct gct gag gtt ctg gat gca act 2784
Arg Gln Gly Val Arg Val Pro Val Ala Ala Glu Val Leu Asp Ala Thr
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ggt gct gtc acc ggc tac acc cgc cat gac ctg atc gag act tct gtc 2832
Gly Ala Val Thr Gly Tyr Thr Arg His Asp Leu Ile Glu Thr Ser Val
930 935 940
tcc ggt cgt gtt ctg gct ggc gat gca acc aac gct gca ggc gag gtt 2880
Ser Gly Arg Val Leu Ala Gly Asp Ala Thr Asn Ala Ala Gly Glu Val
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gtg ctt gct gct ggt acc gac ctg acc gag ctc aac att gac ctt ctg 2928
Val Leu Ala Ala Gly Thr Asp Leu Thr Glu Leu Asn Ile Asp Leu Leu
965 970 975
gtc gag gct ggc atc aag gac gtc aag gtt cgt tcc gta ctt acc tgc 2976
Val Glu Ala Gly Ile Lys Asp Val Lys Val Arg Ser Val Leu Thr Cys
980 985 990
cag acc cca acc ggt gtt tgt gct aag tgc tac ggc aag tcc atg gct 3024
Gln Thr Pro Thr Gly Val Cys Ala Lys Cys Tyr Gly Lys Ser Met Ala
995 1000 1005
tcc ggc cag cag gtt gat atc gga gag gct gtc ggt att gtt gct gca 3072
Ser Gly Gln Gln Val Asp Ile Gly Glu Ala Val Gly Ile Val Ala Ala
1010 1015 1020
cag tcc att ggt gag cct ggt acc cag ctg acc atg cgt acc ttc cac 3120
Gln Ser Ile Gly Glu Pro Gly Thr Gln Leu Thr Met Arg Thr Phe His
1025 1030 1035 1040
cag ggt ggt gtc ggt ggc gat att acc ggc ggt ctg cct cgt gtt cag 3168
Gln Gly Gly Val Gly Gly Asp Ile Thr Gly Gly Leu Pro Arg Val Gln
1045 1050 1055
gag ctg ttt gag gca cgt gtt cct aag aac tgt gca cca att gct tct 3216
Glu Leu Phe Glu Ala Arg Val Pro Lys Asn Cys Ala Pro Ile Ala Ser
1060 1065 1070
gtt gaa ggt gtt atc cac ctt gag gat gaa ggc aac ttc tac act ctg 3264
Val Glu Gly Val Ile His Leu Glu Asp Glu Gly Asn Phe Tyr Thr Leu
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Thr Ile Val Pro Asp Asp Gly Ser Asp Asn Val Val Tyr Glu Lys Leu
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tcc aag cga cag ggt ctt gca tcc act cgc gtg gct atg gag tcc aac 3360
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Ala Gly Ala Phe Ile Glu Arg Thr Leu Thr Glu Gly Asp Arg Val Thr
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Val Gly Gln Arg Leu Leu Arg Gly Ala Ala Asp Pro His Asp Val Leu
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Glu Ile Leu Gly Arg Arg Gly Val Glu Gln His Leu Ile Asp Glu Val
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cag gct gtt tac cgt gca cag ggt gtg gcc atc cac gac aag cac atc 3552
Gln Ala Val Tyr Arg Ala Gln Gly Val Ala Ile His Asp Lys His Ile
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Glu Ile Ile Ile Arg Gln Met Leu Arg Arg Gly Thr Val Ile Glu Ser
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Gly Ser Thr Glu Phe Leu Pro Gly Ser Leu Val Asp Leu Ser Glu Ala
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Leu Arg Ser Glu Ile Met Gly Ile Thr Lys Ala Ser Leu Ala Thr Glu
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tct tgg ctg tct gca gcg tcc ttc cag gag acc act cgt gtc ctg act 3792
Ser Trp Leu Ser Ala Ala Ser Phe Gln Glu Thr Thr Arg Val Leu Thr
1250 1255 1260
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Tyr Ser Ile Pro Thr Tyr Gly Glu Ser Ile Tyr Gly Asp Asp Gly Phe
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ggt gag ttc acc ggc gca tcc gtc cca ttg gat gag gct ttc 4026
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Gly Ile Ile Cys Glu Arg Cys Gly Val Glu Val Thr Lys Ser Lys Val
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100 105 110
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275 280 285
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660 665 670
Thr Trp Leu Ala His Thr Thr Leu Gly Arg Val Met Phe Asn Glu Ile
675 680 685
Leu Pro Trp Asn Tyr Pro Tyr Leu Glu Gly Val Met Val Arg Lys Gly
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Gly Gly Ser Asp Lys Ile Met Leu Gly Asp Val Val Asn Asp Leu Ala
705 710 715 720
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725 730 735
Asp Ala Gly Phe Tyr Trp Ser Thr Arg Ser Gly Val Thr Ile Ala Met
740 745 750
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770 775 780
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785 790 795 800
Thr Asp Glu Val Gly Gln Ala Val Glu Asp Leu Tyr Pro Asp Asp Asn
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Ile Trp Thr Leu Ala Gly Met Lys Gly Met Val Val Asn Ser Lys Gly
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Asp Tyr Ile Thr Arg Pro Ile Lys Thr Ser Phe Arg Glu Gly Leu Thr
850 855 860
Val Leu Glu Tyr Phe Asn Asn Ser His Gly Ser Arg Lys Gly Leu Ala
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Asp Thr Ala Leu Arg Thr Ala Asp Ser Gly Tyr Leu Thr Arg Arg Leu
885 890 895
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900 905 910
Arg Gln Gly Val Arg Val Pro Val Ala Ala Glu Val Leu Asp Ala Thr
915 920 925
Gly Ala Val Thr Gly Tyr Thr Arg His Asp Leu Ile Glu Thr Ser Val
930 935 940
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Asp Ala Ala Ile Asn Lys Arg Ser Asp Lys Leu Ile Gly Leu Lys Glu
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Asn Val Ile Ile Gly Lys Leu Ile Pro Ala Gly Thr Gly Ile Ser Arg
1285 1290 1295
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Tyr Ser Ile Pro Thr Tyr Gly Glu Ser Ile Tyr Gly Asp Asp Gly Phe
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1330 1335 1340
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atc acc acc cgt cac cgc ggt ggt gga cac aag cgc cgc tac cgc gtc 192
Ile Thr Thr Arg His Arg Gly Gly Gly His Lys Arg Arg Tyr Arg Val
50 55 60
atc gac ttc cgt cgt aac gac aag gat ggc gta ttg gcg aag gtc gct 240
Ile Asp Phe Arg Arg Asn Asp Lys Asp Gly Val Leu Ala Lys Val Ala
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cac atc gag tac gac cca aac cgt acc gct aac att gca ctg ctt cac 288
His Ile Glu Tyr Asp Pro Asn Arg Thr Ala Asn Ile Ala Leu Leu His
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aac aac ctg cca ctg cgt aac atc ccg act ggt acc acc atc cac aac 432
Asn Asn Leu Pro Leu Arg Asn Ile Pro Thr Gly Thr Thr Ile His Asn
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gtg gag ttg aag cca ggc gca ggt gca aag ctg gca cgt tcc gct gga 480
Val Glu Leu Lys Pro Gly Ala Gly Ala Lys Leu Ala Arg Ser Ala Gly
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Ala Ser Ile Gln Leu Leu Gly Lys Glu Gly Ser Tyr Ala Val Leu Arg
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atg cca tcc tcc gag atc cga cgc gta gac atc cgc tgc cgc gcg act 576
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gtt ggt gag gtc ggc aac gcc gag cag atc aac att cgt tgg ggt aaa 624
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gct ggt cgt atg cgt tgg aag ggc tgg cgc cca acc gtc cgt ggt gtc 672
Ala Gly Arg Met Arg Trp Lys Gly Trp Arg Pro Thr Val Arg Gly Val
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gtt atg aac ccg gtc gac cac cca cac ggt ggt ggt gaa ggt aag act 720
Val Met Asn Pro Val Asp His Pro His Gly Gly Gly Glu Gly Lys Thr
225 230 235 240
tct ggt ggt cgc cac cca gtc tcc cca tgg gga cag aag gaa ggc cgc 768
Ser Gly Gly Arg His Pro Val Ser Pro Trp Gly Gln Lys Glu Gly Arg
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Thr Arg Lys Pro Lys Arg Tyr Ser Asp Asp Met Ile Val Arg Arg Arg
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cgt gct aac aag aac aag aag cgc 840
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Leu Leu Arg Pro Leu Ser Lys Thr Gly Gly Arg Asn Ser His Gly His
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Ile Thr Thr Arg His Arg Gly Gly Gly His Lys Arg Arg Tyr Arg Val
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130 135 140
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<220>
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cag gca cga cgc tca ttg gga act att cct aaa gat cag cgc aag gat 240
Gln Ala Arg Arg Ser Leu Gly Thr Ile Pro Lys Asp Gln Arg Lys Asp
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gcg ggc cgc ttt gtc aac atg gca ctt ggt cgc gca gaa aag cac ttt 288
Ala Gly Arg Phe Val Asn Met Ala Leu Gly Arg Ala Glu Lys His Phe
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gct cag gtc aag gtt gtt ttg gaa gaa aag cgc aac gca gaa gtc cta 336
Ala Gln Val Lys Val Val Leu Glu Glu Lys Arg Asn Ala Glu Val Leu
100 105 110
gag ctt gag cgc gtt gac gtc acc gtt cca acc acc cgc gag cag gtt 384
Glu Leu Glu Arg Val Asp Val Thr Val Pro Thr Thr Arg Glu Gln Val
115 120 125
ggt gcg ctg cac ccc atc acg atc ctc aac gag cag atc gca gac atc 432
Gly Ala Leu His Pro Ile Thr Ile Leu Asn Glu Gln Ile Ala Asp Ile
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ttc gtg ggc atg ggc tgg gaa atc gcc gag ggc cca gag gtg gaa gca 480
Phe Val Gly Met Gly Trp Glu Ile Ala Glu Gly Pro Glu Val Glu Ala
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Glu Tyr Phe Asn Phe Asp Ala Leu Asn Phe Leu Pro Asp His Pro Ala
165 170 175
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ctt gca gtt gat aag ggt ctg act atg gct cac ctg cgc ggc acc ttg 768
Leu Ala Val Asp Lys Gly Leu Thr Met Ala His Leu Arg Gly Thr Leu
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260 265 270
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att cgc ttc acc ctc cca ttc ggc att cag gca 1089
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290 295 300
Phe Ile Glu Gln Gly Ala Leu Glu Tyr Gly Glu Asp Ala Thr Gln Glu
305 310 315 320
Asn Ile Asp Arg Phe Gly Arg Thr His Met Thr Met Arg Tyr His Pro
325 330 335
Asp Phe Asp Val Trp Ser Phe Asp Leu Ser Gln Thr Pro Lys Pro Ser
340 345 350
Thr Gln Ile Gly Gln Asp
355
Claims (8)
- 표 1의 컬럼 2에 각각 나타낸 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드를 코딩하며, 표 1의 컬럼 4에 나타낸 아미노산 위치에서 그와 동일 열에 있는 표 1의 컬럼 5에 나타낸 특정 아미노산이 아닌 단백질원성 아미노산을 코딩하는 단리된 핵산 분자.
- 제1항에 있어서, 표 1의 컬럼 4에 나타낸 아미노산 위치에서 그와 동일 열에 있는 컬럼 6에 나타낸 아미노산을 코딩하는 단리된 핵산 분자.
- 제1항에 따른 하나 이상의 핵산 서열을 포함하는 벡터.
- 제3항에 따른 하나 이상의 벡터로 형질감염된 숙주 세포.
- 제4항에 있어서, 상기 핵산 분자의 발현에 의해 상기 세포로부터의 정밀 화학물질 (fine chemical) 생산이 조정되는 숙주 세포.
- 제3항에 따른 하나 이상의 벡터로 형질감염된 세포를 배양하여 정밀 화학물질이 생산되도록 하는 단계를 포함하는, 정밀 화학물질의 제조 방법.
- 제6항에 있어서, 정밀 화학물질이 아미노산인 방법.
- 제7항에 있어서, 상기 아미노산이 리신인 방법.
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