KR20040046656A

KR20040046656A - 치매 예방 및 치료용 조성물

Info

Publication number: KR20040046656A
Application number: KR1020020074646A
Authority: KR
Inventors: 이세창; 김규철; 황성주; 백영찬
Original assignee: 이세창
Priority date: 2002-11-28
Filing date: 2002-11-28
Publication date: 2004-06-05

Abstract

본　발명은　중량부로　엘－카르니틴　２－１０，　석창포　추출물　１０－３０，　당귀　추출물　１０－３０，　녹차　추출물　１０－３０，　백복신　추출물　１０－３０，　레시틴　５－２０，　타우린　２－１０，　울금　추출물　１０－３０，　진피　추출물　１０－３０，　원지　추출물　１０－３０，　DHA　１０－３０　 및　비타민류　상용량을　함유하는　치매　예방　 및　치료용　조성물에　관한　것이며, 본　발명의　조성물은　치매의　예방과　치료에　탁월한　효능을　가진다．

Description

치매　예방　 및　치료용　조성물{Composition for preventing and treating Alzheimer's syndrome}

본　발명은　치매의　예방　 및　치료용　조성물에　관한　것이다．

특히　본　발명은　엘－카르니틴，　석창포　추출물，　당귀　추출물，　녹차　추출물，　백복신　추출물，　울금　추출물，　진피　추출물，　원지　추출물，　DHA,　레시틴，　타우린， 및　비타민류를　함유하는　치매　예방　 및　치료용　조성물에　관한　것이다．　

본　발명에서　사용되는　비타민류로서는　치아민　류，　비타민　B 12류，니코틴산　아미드，　아스코르브산　 및　엽산에서　선택된　비타민　류이다．

치매는　한번　발병하면　질병의　진행을　억제하기　어려우며，　단시일내에　해결되지　않는　만성적　질환으로　막대한　국가적，　사회적　비용을　치르게　된다．　미국의　통계자료에　따르면，　알쯔하이머　병의　 경우　한　환자당약　４만달러의　의료비　지출　및　사회적　경비가　소모되는　것으로　추산되며질병으로　인한　수입의　감소와　기능상실을　고려할　 경우　비용은　약　１７만달러에　이른다고　한다．

알쯔하이머병의　 경우　６５세　이전에　발병하는　경우는　드문　편이며，연령의　증가에　따라　유병율이　증가하는데　대략　연령이　５세　증가함에　따라　유병율이　배로　증가하고　８５세　때에는　１６－３０％　정도의　유병율을보이게　된다．　그러므로　치매예방　약물의　목표는　치매의　발병율을　완전히억제하는　것이　아니라　발병의　시기를　되도록　늦추는데　초점이　맞추어져　있다．　만일　치매의　발병을　５년　정도　늦출　수　있다면　한　세대의　치매유병율은　１／２로　줄어들　수　있으며　１０년정도　늦출　수　있다면　１／４로　줄어들　수　있다．

십수년전부터　전세계적으로　치매를　예방하기　위해　여러　방법들이　모색되고　있으며，　특히　채매예방　약물을　개발하기　위해　많은　노력이　이루어지고　있다．　치매의　예방적　약물요법은　크게　두가지로　나누어지며，　하나는　이미　발병하여　진행하고　있는　질병의　경과를　억제하려는　보호적　요법（protective therapy)이며，　다른　하나는　치매의　발병　자체를　억제하려는예방적　요법(preventive therapy)이다．　이러한　약물을　개발하기　위해서는　많은　시도가　행하여지고　있으나　노화　 및　질병의　병태생리에　대한　이해가불충분한　현시점에서는　아직　뚜렷한　성과가　가시화되지　않은　상황이며　개념적　시도가　이루어지고　있는　단계에　머무르고　있다．

보호적　요법（prptective therapy)

보호적　요법은　뇌위축의　속도를　지연시킴으로서　만성　진행성　퇴행성뇌질환의　질병의　경과를　억제하기　위한　개념을　바탕을　하고　있으므로　현재　이미　발생한　뇌기능의　장애를　교정하거나　회복시키려는　치료법과는　그목적을　다소　달리하고　있다．

보호적　요법은　신경계　퇴행성　질환에서　나타나는　신경　세포　소실의기전에　대한　이해를　바탕으로　하여야　하며　아직　이러한　기전에　대한　이해는　충분하지　않으며　약물의　개발은　초기단계에　머무르고　있다．　신경세포의　소실은　크게　보아　두가지　기전에　의해　유발　혹은　촉진될　것으로　보이며，　흥분성　신경전달물질의　과도한　자극에　의한　신경독성　기전화　환경적　혹은　내인성　요인에　의한　산화　스트레스（Oxitative stress)기전이　그것이다．

글루타메이트（Glutamate)는　중추신경계에서　가장　중요한　흥분성　신경전달물질로　학습과　기억에　중요한　역할을　하는데　작용속도가　매우　빠른　신경독성물질이기도　하다．생리적　환경에서는　독성　작용을　하기　이전　단계에　신경　세포　및　교세포（glia)에서　글루타메이트의　재흡수가　일어난다．그러나　저산소증이나　허혈상태에서는　글루타메이트에　대한　완충작용이　충분히일어나지　못하고　NMDA　수용체를　통한　Ca의　세포내　유입이　발생하여　세포의　죽음을　초래하게　된다．

치매　치료제의　개발

현재　이루어지고　있는　치매치료제의　개발，　전략의　목표는　다음과　같이　몇가지로　구분할　수　있다．　

　　１．　인지기능장애의　개선，　즉　기억력의　회복，

　２．　행동장애　또는　이상행동의　치료，

　　３．　치매　진행의　억제，

　　４．　치매　발생시기의　지연，

　　５．　치매발생의　예방　등이다．

현재　전세계적으로　이루어지고　있는　대부분의　연구는　증상의　완화를일차　목표로　하고　있다．

Ⅰ.콜린계　신경세포　강화제（Cholinergic enhancers)

알츠하이머형　치매환자　뇌조직내에서　세포의　기억에　관여하는　신경전달물질인　아세틸　콜린（Ach)의　기능이　현저히　저하되어　있음이　밝혀짐으로서　이를　교정하려는　노력이　가장　먼저　시도되었다．　따라서　중추성으로　작용하는　부족한　Ach의　기능을　보충하는　방법으로　Ach으　전구물질을　투여하거나　Ach의　생체내　파괴를　줄이는　약물들이　개발되고　있다．

－콜린에스테라제　억제제

１）　테트라하이드로아미노아크리딘（THA, Tacrine)

중추성으로　작용하는　기역적　콜린에스타레제로　경증　AD　환자의　약　１／３에서　증상　개선이　관찰된다．

２）도네페질　염산염

피페리딘　유도체의　가역성　AchE　억제제이며　여타의　억제제와　화학적을　차이가　있다．　선택적으로　중추성　AchE에만　작용하여　말초에　주로　분포하는　부티릴　코린에스테라제와는　거의　친화성이　없다．

３）　리바스티그민（Rivastigmine)

페닐－카바메이트　유도처의　중추신경계　선택적　AchE　억제제이다．

４）　엡타스티그민　MF-201

약물작용기간이　긴　Ach E 억제제로　현재　개발중에　있다．

５）　기타　여러　약물이　개발중에　있다．

2. 아세틸콜린　수용체　촉진제（Cholinergic receptor Agonists)

１） AF　１０２B

M1　무스카린성　수용체를　통한　선택적　M1　아고니스트로서　세포배양실험에서　신호전달체계　 및　아밀로이드　전구물질의　분비를　촉진시키는　것으로알려져　있으며　현재　개발중에　있다．

２）　Xanomelins Skin Patch(Lilly, Phase II)

선택적　M1　무스카린　수용체　촉진제로　현재　임상실험중에　있다．

３．　기타　신경전달물질의　조절

AD　환자에게서는　콜린계　신경전달물질　이외에도　다른　신경전달물질　 및　펩타이드　시스템의　이상도　발견되어　이에　대한　연구도　함께　이루어지고　있다．

１）　베스피르딘（Bespirdine)　획스트－루셀　현재　개발중에　있다．

２）　온단스테론（Ondansteron) 세로토닌　수용체　촉진제

３）　CX516: NMDA　수용체　촉진제로　현재　개발중에　있다．

４）　기타　여러　약물들이　현재　개발중에　있다．

그러나　지금까지　개발된　치매　치료제로서는　AchE　억제제인　약물들은대부분　말초신경의　콜린성　부작용이　있고，　간독성의　부작용이　나타나는　등의 부작용을　가지고　있다．

본　발명자들은　AchE　억제작용을　가지며，　부작용이　없는　약물을　개발하고자　많은　연구，　특히　천연물에서　이러한　약물을　찾으려　예의　노력한　결과，　본　발명을　완성하였다．

본　발명은　엘－카르니틴，　석창포　추출물，　당귀　추출물，　녹차　추출물，　백복신　추출물，　레시틴，　타우린，　울금　추출물，　진피　추출물，원지　추출물，　DHA　 및　비타민류를　함유하는　치매　예방　 및　치료용　조성물에　관한　것이다．

본　발명에서　사용되는　비타민류로서는　치아민　류，　시아노코랄라민，니코틴산　아미드，　아스코르브산　 및　엽산에서　선택된　비타민　류이다．

　　　본　발명에서　사용되는　천연물들은　이들을　물　또는　저급　알칸올이나또는　물과　저급알카놀과의　혼합용매에서　선택된　용매로　추출한　추출물의　형태로　사용될　수　있다．　이들　성분들은　각각　추출하거나　또는　함께　혼합하여　추출할　수도　있다．

본　발명에서는　중량부로　엘－카르니틴　２－１０，　석창포　추출물　１０－３０，　당귀　추출물　１０－３０，　녹차　추출물　１０－３０，　백복신　추출물　１０－３０，　레시틴　５－２０，　타우린　２－１０，　울금　추출물　１０－３０，　진피　추출물　１０－３０，　원지　추출물　１０－３０，　DHA　１０－３０　 및　비타민류　상용량을　함유하는　치매　예방　 및　치료용　조성물에　관한　것이다．

상기의　조성물은　이들　성분들　단독　또는　식품　또는　의약품의　제조에　통상으로　사용되는　부형제와　함께　산제，　과립제，　정제，　캡슐제　또는　액제로　제제화하여　사용될　수　있다．

본　발명에서　사용되는　천연물들은　그　성질상　각각의　원료　천연물들의　수많은　성분들중　어느　성분（들）이　치매의　예방과　치료효과를　가지는지는　정확히　확인할　수는　없지만　상기의　조성에서　최적의　효과를　나타낸다．

본　발명의　조성물은　일일　１００mg　내지　３０００mg을　일일　１　내지　수회　분할하여　투여할　수　있다．

다음에　본　발명을　실시예　 및　실험예로서　본　발명을　더욱　상세히　설명한다．

실시예　１

석창포　１kg,　당귀 1kg，　백복신 kg，　울금 1kg，　진피 1kg，　원지　1kg 을　물　３０리터에　넣고，　서서히　가열하여　１０시간　환류시켰다．　여과한후　여액을　농축시키고　얻어진　농축액을　동결　건조시켜서　동결건조물　１１０g을　얻었다．

실시예　２

석창포　１kg,　당귀 1kg，　백복신 kg，　울금 1kg，　진피 1kg，　원지　1kg 을　５０％　엔탄올　수용액　３０리터에　넣고，　서서히　가열하여　１０시간　환류시켰다．　여과한후　여액을　농축시키고　얻어진　농축액을동결　건조시켜서　동결건조물　１２０g을　얻었다．

실시예　３

실시예　１의　추출물　　　　　　　　１２０mg

녹차　추출물（시판품）　　　　　　　　２０mg

L-카르니틴　　　　　　　　　　　　　　５mg

DHA　분말（１％）　　　　　　　　　２０mg

레시틴　　　　　　　　　　　　　　１０mg

타우린　　　　　　　　　　　　　　　　５mg

질산　치아민　　　　　　　　　　　　　１mg

엽산　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２mg

０．１％　시아노코발라민

（V. B12로서　０．００２mg）　　　　2mg

니코틴산　아미드　　　　　　　　　　　５mg

상기의　성분을　혼합하여　조성물을　제조하였다．

실시예　４

실시예　１의　추출물　　　　　　　　１２０mg

녹차　추출물（시판품）　　　　　　　　２０mg

L-카르니틴　　　　　　　　　　　　　　５mg

DHA　분말（１％）　　　　　　　　　２０mg

레시틴　　　　　　　　　　　　　　　１０mg

타우린　　　　　　　　　　　　　　　　５mg

질산　치아민　　　　　　　　　　　　　１mg

엽산　　　　　　　　　　　　　　　　　０.２mg

０．１％　시아노코발라민

（V. B12로서　０．００２mg）　　　　2mg

니코틴산　아미드　　　　　　　　　　　５mg

유당　　　　　　　　　　　　　　　　６０．３mg

스테아린산　마그네슘　　　　　　　　　１．５mg

상기의　성분을　혼합하고　젤라틴　캡슐에　충진하여　캠슐제를　제조하였다．

실시예　５

실시예　１의　추출물　　　　　　　　１２０mg

녹차　추출물（시판품）　　　　　　　　２０mg

L-카르니틴　　　　　　　　　　　　　　５mg

DHA　분말（１％）　　　　　　　　　２０mg

레시틴　　　　　　　　　　　　　　　１０mg

타우린　　　　　　　　　　　　　　　　５mg

질산　치아민　　　　　　　　　　　　　１mg

엽산　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２mg

０．１％　시아노코발라민

（V. B12로서　０．００２mg ）　　　　 2mg

니코틴산　아미드　　　　　　　　　　　５mg

유당　　　　　　　　　　　　　　　　６０．３mg

탈크　　　　　　　　　　　　　　　　　５mg

스테아린산　마그네슘　　　　　　　　　１．５mg

상기의　성분을　통상의　정제의　제조방법으로　타정하고　필름코팅하여　정제를　제조하였다．

실시예　６

실시예　１의　추출물　　　　　　　　　６０mg

녹차　추출물（시판품）　　　　　　　　１０mg

L-카르니틴　　　　　　　　　　　　　　２．４５mg

DHA　분말（１％）　　　　　　　　　１０mg

레시틴　　　　　　　　　　　　　　　５０mg

타우린　　　　　　　　　　　　　　　　２．５mg

질산　치아민　　　　　　　　　　　　　０．５mg

엽산　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１mg

０．１％　시아노코발라민

（V. B12로서　０．００２mg）　　　　１mg

니코틴산　아미드　　　　　　　　　　　２．５mg

주사용　증류수　　　　　적당량　전체　２ml

상기의　성분을　주사용　증류수에　용해시킨 후　앰플에　충진하고　멸균시켜서　주사제를　제조하였다．

실시예　７

실시예　１의　추출물　　　　　　　　　１２００mg

녹차　추출물（시판품）　　　　　　　　　１００mg

L-카르니틴　　　　　　　　　　　　　　　　　２．４５mg

DHA　분말（１％）　　　　　　　　　　　２１０mg

레시틴　　　　　　　　　　　　　　　　　５００mg

타우린　　　　　　　　　　　　　　　　　５００mg

질산　치아민　　　　　　　　　　　　　　　　５mg

엽산　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１mg

０．１％　시아노코발라민

（V. B12로서　０．００２mg）　　　　　　１０mg

니코틴산　아미드　　　　　　　　　　　　　　２５mg

이성화당　　　　　　　　　　　　　　　　２０gm

정제수　　　　　　　적량　전체　　　　１００ml

상기의　성분을　정제수에　용해시킨　후　１００ml용량의　갈색병에　충진하고　멸균시켜서　액제를　제조하였다．

실험예　１　：　

본　발명의　조성물의　AchE　효소억제　효능실험

AchE（Sigma　Cat. No. C-2888)　1000IU을　１ml의　인산염　완충액

(PBS:0.1M, pH7.3)에　용해시킨후　여기에　실시예　３에서　얻어진　조성물을　각각　０．０２５g， 0.05g 및　０．１g씩　용해시켰다．

다음에，각각의　시료에 대하여　Ellman's coupled 효소효능　검색방법에　따라서효소의　속도상수계수　Km(미카엘리스　상수）　 및　Vmax(최대속도）를　DTNB（５，５－디티오－비스－（２－니트로－벤조인산）을　카플링제로　사용하여　흡광계로　４６０nm에서　그　흡광도를　측정하였다．　본　발명의　조성물에　의한　AchE　억제효과는　다음의　표　１에　나타내었다．

본　조성물의　사용량（g/ml）	Vmax	효소활성감소（％）
대조군	4.275x10^-3	0
0.025	3.626x10^-3	24.5
0.05	3.102x10^-3	27.4
0.10	1.429x10^-3	66.6

상기의　표　１에서　확인되는　바와　같이　본　발명의　조성물을　０．０２５g/ml를　사용한　 경우　효소의　활성이　２４．５％，　０．０５g/ml를　사용한　 경우　２７．４％　 및　０．１g/ml를　사용한　 경우　６６．６％가　각각　감소된　것이　확인된다．

시판중인　THA（상품명　Cognex)가　최고　４０％의　AchE　억제효과를　가지는　것으로　보고（Keio J. Med., 36, 381, 1987)임에　비추어　본　발명의　조성물은　매우　우수한　효능을　가짐을　알　수　있다．

실험예　２

랫트　뇌에서　AchE　억제　효과　실험

２０주령의　스프라그－도울리（Sprague-Dawley)종　랫트를　７필씩　대조군과　시험군으로　나누고，　대조군에는　위약을，　나머지　실험군에는　실시예　３에서　제조된　조성물을　０．５g을　증류수　１００ml에　용해시킨　용액을　일일　약　３ml씩　１０일간　경구투여하였다．１０일이　지난후　랫트의　뇌를　적출하여　뇌의　총　중량을　측정하고　여기에　인산염 완충액（0.1M, pH 7.3)５ml를　가하고　완전히　마쇄하였다．　６시간동안　교반한　후　여기에　１．５ml의인산염　완충액（０．１M, pH 7.3)을　가하고　교반한후　약　４℃에서　１５분간원심분리（기종명　Hettich Rotina 48R)하여　１０００rpm으로　분리하고　니트로셀롤루오스　필터（Pore Size : 0.45mm)를　사용하여　정제하였다．　정제된　AchE의　효소활성은　UV－visible　흡광기를　사용하여　Ellman's coupled 효소　효능검색방법（Ellman, G. L., Biochem. Pharmacol., 7, 88, 1961)을　사용하여　측정하였다．

１ml　용량의　석영　큐벳내에　인산염　완충액（０．１M, pH 7.3)　７９０μl, 기질（아세틸콜린）５mM 용액　60μl커플링제로　디티오니트로벤조인산（DTNB）　５mM　용액　１２０μl를　넣고　약　５분간　배양한　다음　대조군과　실험군의　뇌에서　추출한　용액　１０μl를　각각　넣고　AchE의　활성을　측정하였다．마이카엘리스－멘텐　식（Michaelis-Menten equatiion)을　사용하여　기질의　변화에　대한　시간대별　효소반응속도를　측정하였다．　그　결과는　다음의　표　２에　나타내었다．

랫트	평균　AchE 초기속도（AL/s)	AchE　활성도　감소（％）
대조군	3.100x１０^-3	0
실시예３조성물（３ml/day)	2.348x１０^-3	24.4

상기의　결과로부터　확인되는　바와　같이，　본　발명의　조성물은　랫트에　１０알간　투여하였을　 경우　투여하지　않은　대조군의　뇌의　AchE　활성도에　비하여　２４．４％가　감소하는　결과를　나타내었다．　

따라서，　본　발명의　조성물은　신경전달물질　분해효소의　억제효과를　가지고있음이　확인되었다．

실험예　３

랫트　뇌에서　신경전달물질인　아세틸콜린의　농도변화에　대한　실험

２０주령의　스프라그－도울리（Sprague-Dawley)종　랫트를　７필씩　대조군과　시험군으로　나누고，　대조군에는　위약을，　나머지　실험군에는　실시예　３에서　제조된　조성물을　０．５g을　증류수　１００ml에　용해시킨　용액을　일일　약　３ml씩　１０일간　경구투여하였다．１０일이　지난후　랫트의　뇌를　적출하여　뇌의　총　중량을　측정하고　여기에　０．２％　트리톤　X-１００을　함유하는　인산염 완충액（0.1M, pH 7.3)　１０ml를　가하고　완전히　마쇄하여　균질화시켰다．

균질화된 뇌세포 용액을 4℃에서 15분간 원심분리 (기종명 Hettich Rotina 48R)하여　１０００rpm으로　분리하고　니트로셀롤루오스　필터（Pore Size : 0.45mm）를사용하여　정제하였다．　분리　정제된　아세틸콜린은　전극　검출기가　부착된　HPLC를　사용하여　정량분석하였다．　먼저　정확한　농도의　아세틸콜린의　표준　그래프를　작성한　후　랫트의　뇌에서　추출한　시료　２０μl를　동일한　조건하에　분석하였다．　분석조건은　유속　１０m/sec，　검출범위　３．９０６２nA，　용리제로는　인산염 완충액（0.1M, pH 7.3)을　사용하였다．　시간대별로　７필의랫트를　한　군으로　하여　본　조성물을　투여한　랫트의　뇌에서　분리된　아세틸콜린의　양을　대조군의　아세틸콜린의　양과　비교하였다．　그　결과는　다음의　표　３에　나타내었다．

시간（일）	아세틸콜린　양（μM)	아세틸콜린　증가율（%)	랫트의　수
대조군	107.5	0	7
투여군(5일)	145.7	35.5	7
투여군(10일)	183.9	71.1	7

상기의　결과로부터　본　발명의　조성물을　투여한　랫트에서　신경전달물질인　아세틸콜린의　농도가　증가하는　것을　보여주고　있으며，　이는　본　발명의　조성물의　AchE　억제효과가　생체내에서　나타내고　있음을　보여주고　있다．　즉，상기　결과에　의하면，　본　발명의　조성물을　투여한　후　５일후에약　３５．５％의　아세틸콜린　증가를　나타내고　있으며，　１０일후에는　７１．１％의　증가를　나타내고　있다．　이러한　효과는　대단히　우수한　것이다．

상기의　실험예들에서　확인되는　바와　같이，　본　발명의　조성물은　치매의　예방과　치료에　사용될　수　있음을　보여주고　있다．

본　조성물에　사용된　모든　생약성분이나　비타민류는　실제로　사용되고있는　천연물이나　식품　보조제로　사용되고　있는　물질들이다．　따라서，　본발명의　조성물은　치매의　예방과　치료에　보조식품으로　사용될　수도　있고，치료제로도　사용될　수　있다．

본　발명의　조성물은　치매의　예방과　치료에　탁월한　효과를　가지고　있고，　본　발명을　구성하는　천연물이나　비타민류들은　이미　식품이나　식품보조제　또는　의약품으로　사용되고　있으므로，　본　발명의　조성물은　치매의예방과　치료에　보조식품　또는　의약품으로　사용될　수　있다．

Claims

중량부로　엘－카르니틴　２－１０，　석창포　추출물　１０－３０，　당귀추출물　１０－３０，　녹차　추출물　１０－３０，　백복신　추출물　１０－３０，　레시틴　５－２０，　타우린　２－１０，　울금　추출물　１０－３０，　진피추출물　１０－３０，　원지　추출물　１０－３０，　DHA　１０－３０　 및　비타민류　상용량을　함유하는　치매　예방　 및　치료용　조성물．
제　１항에　있어서，　비타민류로　질산　치아민，　엽산，　비타민　B12，니코틴산　아미드에서　선택된　１종이상의　비타민을　함유하는　치매　예방　 및치료용　조성물．
석창포,　당귀，　백복신，　울금，　진피，　원지를　각각　물，　저급　알카놀，　또는　물과　저급　알카놀의　혼합용매에서　추출하거나，　또는　석창포,당귀，　백복신，　울금，　진피，　원지를　함께　물，　저급　알카놀，　또는　물과　저급　알카놀의　혼합용매에서　추출하고　용매를　제거하여　얻어진　추출물에　L-카르니틴，DHA，　녹차　추출물，　타우린，　레시틴　 및　비타민류를　첨가하여　치매의　예방과　치료용　조성물을　제조하는　방법．