KR20030083697A - 로봇-친화성 피씨알 플레이트 - Google Patents

Abstract

본 발명은 자동화된 시스템에서의 사용을 위한 마이크로타이터 플레이트에 관한 것이다. 상세하게는, 본 발명은 PCR 실험에 필요한 조건 하에서 열적으로 안정한 마이크로타이터 플레이트에 관한 것으로서, 자동화된 시스템의 기계적 조작에 필요한 강도 및 디멘션을 유지할 수 있다.

Description

로봇-친화성 피씨알 플레이트{Robot-friendly PCR Plates}

폴리머라제 체인 리액션(PCR)은 생체외 생화학 프로토콜에서 널리 사용되고 있다. PCR은 유전학, 분자생물학, 세포생물학, 임상화학, 법의학 및 분석 생화학을 포함하는 많은 과학 분야에서 진단 및 연구를 위한 현상적 수단인 것으로 알려져 왔다. PCR 동안 반응 온도를 세심하게 조절하고 사이클링시켜 수행되는 반응은, 핵산 서열의 화학적 증폭, 라이게이즈 체인 리액션 및 핵산 시퀀싱을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다. PCR은 전형적으로 열사이클러와 접촉하여 위치된 작은 튜브 내 또는 멀티-웰 마이크로타이터 플레이트 내에서 수행된다. 연구자들은 잠재적으로 몇백번의 PCR 실험을 상대적으로 효율적으로 그리고 매우 적은 부피 내에서 수행하기 위해 마이크로타이터 플레이트를 사용한다. 매우 작은 특정 부피 내의 많은 웰로부터 PCR 시약 및 산물을 첨가하고 제거하는 것은 바람직하게는 기계적으로, 구체적으로는 자동화된 컴퓨터-프로그램된 로봇공학에 의해 수행된다.

자동화된 시스템이 생화학 분야에서 샘플의 높은 처리량의 스크리닝을 위해 사용되고 있다. 자동화된 검출 시스템은 형광이미지기(fluorimager) 및 다른 생화학적 검출 시스템을 포함한다. 이러한 시스템들은 Applied Biosystem의 ABI PRISM7900 HT Sequence Detection System, Northstar™HTS Workstation, COBRA™Robotic Sample Handling System 및 FMAT™8100 HTS System을 포함하는 기기들일 수 있지만 이에 한정되는 것은 아니다. 자동화된 시스템은 예컨대, 다양한 스크리닝 프로토콜에서 사용되는 마이크로타이터 플레이트와 같은 물품을 다루기 위해 로봇식 팔을 사용할 수 있다. 이러한 물품들은 전형적으로 단단한 폴리스티렌 재료로 되어 있는데, 이것은 로봇식 팔이 쉽게 그 물품을 잡을 수 있도록 한다. 그러나, 폴리스테린은 열안정성을 나타내지 않기 때문에, 가열되어야 하는 물품, 예컨대, PCR 실험 동안에는 폴리프로필렌이 사용된다. 그러나, 폴리프로필렌은 자동화된 시스템에 사용하기에 적합하지 않다. 왜냐하면, 부드러워서 조작시 변형되는 문제가 있기 때문이다.

PCR 기기에 사용하기 위한 마이크로타이터는 폴리프로필렌, 폴리에틸렌 및 폴리카보네이트 등의 열-안정성 플라스틱 재료로 만들어진다. 로봇이 물품을 쥐고 정확한 위치로 운반하고 여러 플레이트를 함께 적층하기에 충분한 강도를 제공하는 로봇-친화성 폴리스티렌과는 달리, 열-안정성 플라스틱 재료들은 그러한 강도 및 조작성이 결여되어 있다. 또한, 폴리프로필렌은 부분적으로 불투명한 물질, 즉 흐릿하거나 완전히 투명하지 않다. 따라서, 그것들이 웰 중에 있으면 샘플을 관찰하기가 어렵다. 또한, 열-안정성 물질들로 구성된 플레이트는 그 물질들이 빛의 경로에 변화를 야기하기 때문에, 형광 엔드 포인트 측정 및 실시간 PCR에는 적합하지 않다.

PCR은 94 내지 95℃ 처리의 수회 사이클을 필요로 하는데, 그 과정에서 폴리프로필렌으로 제조된 플레이트는 종종 변형, 예컨대, 수축, 트위스팅 및 휘어짐을 나타낸다. 그러한 마이크로타이터 플레이트의 디멘션(dimension) 변화는 중요한 문제를 일으킨다. 마이크로타이터 플레이트의 여러개 웰들 간의 열 전도도는 변형된 플레이트 상에서는 균일하지 않다. 왜냐하면, 플레이트에 가해진 열의 디멘션이 고정되고, 이는 변형된 모양의 마이크로타이터 플레이트에 순응하도록 설계되어 있지 않기 때문이다. 또한, 열적으로 안정하지 않은 마이크로타이터 플레이트가 PCR 다음에 자동화된 액체 핸들러에서 조작되는 경우, 플레이트의 트위스팅 또는 휘어짐으로 야기된 디멘션의 변화가 문제된다. 이러한 상황에서, 디스펜서 노즐이 플레이트의 각 웰의 바닥에 닿는 데에 어려움이 있을 수 있다. 어떤 경우에는, 디스펜서 노즐이 웰의 측면에 접촉할 수도 있고, 웰의 바닥에 닿지 않을 수도 있다. 디스펜서 노즐이 웰의 바닥에 접촉하지 못한다면, 용액이 웰 내로 분배될 때 웰 내에 버블이 형성될 수도 있고, 그렇지 않으면 용액이 마이크로타이터 플레이트로부터 제거될 때 웰 내에 실질적인 양의 용액이 남게 될 수도 있다. 이러한 것들은 PCR 실험의 준비 및 수행에서 자동화된 시스템을 사용하고자 하는 연구원들에게는 주요한 관심사이다. 웰 내로 용액을 분배하고 PCR 이후에 산물을 제거함에 있어서의 부정확성으로 인해, 농도 등의 측정 및 원하는 분자의 검출에 있어 심각한 오류가 야기될 수 있다.

또한, 변형된 마이크로타이터 플레이트의 웰에 밀봉 캡이 적용될 때, 웰 내의 용액이 PCR 동안 밀봉 캡과 플레이트 간의 공간으로부터 증발하거나 누수될 수도 있다. 더욱이, 일단 플레이트의 디멘션이 PCR 이후에 변하면, 로봇은 열사이클러로부터 플레이트를 효과적으로 조작하거나 제거할 수 없다. 자동화된 시스템은 전자적으로 프로그램되어 있어서, 특정 파라미터에 따라 플레이트 및 각 웰들을 위치시킨다. 따라서 그 기계는 플레이트 및 웰들의 디멘션이 변형되면 그것들의 디멘션 또는 위치의 변화를 인식할 수가 없다. 따라서, PCR 실험 과정에 걸쳐 웰들의 위치가 마이크로타이터 플레이트의 변형에 의해 변화하면, 자동화된 시스템의 로봇공학은 이용될 수가 없다. PCR 동안의 플레이트의 변형에 의해 야기된 문제들은 384 및 1536 웰 플레이트의 사용시 더 작은 웰과 더 작은 양의 액체가 사용될 때 특히 심각해진다.

사용되는 플라스틱 재료의 두께가 증가하면 어느 정도까지는 변형을 예방할 수도 있지만, PCR 실험에서 중요한 한 요소는 열 전도도이다. PCR 플레이트 웰의 벽을 통한 열 사이클로부터의 빠른 열 전도도를 유지하기 위해서는, 벽 두께는 얇아야 하며, 통상 약 0.3μm이어야 한다.

본 발명은 마이크로타이터 플레이트, 더욱 상세하게는 자동화된 시스템에 사용하기 위한 폴리머라제 체인 리액션(PCR)을 위해 고안된 플레이트에 관한 것이다.

도 1은 예비-어닐링된 ABI 384-웰 PCR 플레이트 및 본 발명에 따른 384-웰 플레이트에서 수행된 PCR 이후에 측정된 엔드-포인트 형광 강도를 나타내는 그래프이다. 강도는 β-액틴 플라스미드 DNA 농도와 관련하여 나타내었다. 데이타는 실시예 1에 기재되어 있다.

도 2는 각각 본 발명의 어닐링된 384-웰 플레이트, 본 발명의 비-처리된 384-웰 플레이트, ABI 384-웰 플레이트 및 ABgeneThermo-fast 384-웰 플레이트 상에서 수행된 PCR의 각 사이클에서 측정된 형광 변화를 나타내는 그래프이다. 형광은 40회의 PCR 사이클 각각에서 측정하였다. 그 데이타 및 PCR 조건은 실시예1에 기재되어 있다.

도 3은 본 발명의 PCR 플레이트의 디멘션 변화를 나타내는 그래프이다. 다양한 조건 하에서 플레이트를 처리한 후 가로, 세로 및 높이에서의 변화를 측정하였다. 본 발명에 따른 플레이트의 변화는 표준 ABI 플레이트에서 관찰된 변형과 비교될 수 있다.

도 4는 아가로오스 젤에서의 전기영동에 의한 PCR 산물의 분석을 나타낸다. PCR 실험을 서로 다른 네개의 PCR 플레이트를 사용한 것을 제외하고는 동일한 조건 하에서 수행하였다. PCR 조건 및 플레이트에 대한 상세한 사항은 하기 실시예 3에 기재하였다.

바람직한 구체예의 상세한 설명

자동화된 PCR 기기에서 사용하기 위한 이상적인 플라스틱 재료는 하기 특성을 나타낸다:

1. 적어도 폴리스티렌의 강도와 유사한 정도의 강도;

2. 94 내지 95℃에서의 열 안정성;

3. 습한 조건하에서 94 내지 95℃ 처리 후 최소한의 변형(수축, 트위스팅, 휘어짐 등);

4. 인젝션 몰딩(injection molding) 기술에 의한 대량 생산성;

5. 적어도 폴리프로필렌의 열 전도도와 유사한 정도의 빠른 열 전도도;

6. 단백질, DNA, RNA, 올리고뉴클레오티드 및 뉴클레오티드의 최소한의 비-특이적 흡착; 및

7. 최소한의 또는 적어도 예측가능한 인젝션 몰딩을 위한 수축 요소.

규칙배열 폴리스티렌 및 시클릭 올레핀 폴리머는 열안정성을 나타내며, 폴리스티렌과 같은 강도를 갖으며, 둘다 인젝팅 몰딩에 적합하다. 또한, 본 발명의 발명자들은 실험을 통해 상기 재료들로 제조된 물품, 특히 PCR 플레이트는 비-특이적 DNA 또는 단백질의 부착이 관찰되지 않는다는 것을 발견하였다. 본 발명자들은 자동화된 시스템의 PCR 및 조작에 필요한 기준을 충분히 만족시키는 열 안정성 및 강도를 유지할 수 있는 규칙배열 폴리스티렌 및 시클릭 올레핀 폴리머 중 하나를 주로 하여 제조된 마이크로타이터 플레이트를 발명하였다.

시클릭 올레핀 폴리머는 Nippon Xeon(상표명 Zeonex및 Zeonor), Mitsui Chemical(상표명 Apel) 및 JSR Corporation(상표명 Arton)으로부터 얻을 수 있다. 본 발명의 마이크로타이터 플레이트는 다양한 등급의 시클릭 올레핀, 예컨대, 1410R 등급 시클릭 올레핀(Nippon Zeon, Japan)으로 제조될 수 있다. 시클릭 올레핀 폴리머는 또한 시클로-올레핀 폴리머로도 불리우는데, 이는 고리-모양의 노보렌 분자-이것은 다이시클로펜타디엔(DCPD) 및 에틸렌으로부터 제조됨-로부터 유도된 열가소성 물질이다. 지방족 고리 올레핀 수지는 모노머들의 첨가 중합, 첨가 공중합, 고리 열림 상호교환반응 중합 또는 고리 열림 상호교환반응 공중합에 의해 제조될 수 있다. 상기 수지는 열안정성, 낮은 수분 흡수도, 디멘션 안정성 및 높은용융 흐름 속도(melt-flow rate)를 나타낸다. 특히, Zeonex및 Zeonor또한 화학적 저항 및 매우 낮은 형광성을 나타낸다. 본 발명에 따른 시클릭 올레핀 마이크로타이터 플레이트는 140℃까지의 열에 안정하다.

규칙배열 폴리스티렌(SPS)는 메탈로센 촉매반응 중합에 의해 제조된다. 상품명 Xarec의 규칙배열 폴리스티렌은 Idemitsu Petrochemical Company(Tokyo, Japan)으로부터 얻어질 수 있다. 본 발명의 마이크로타이터 플레이트는 다양한 등급의 SPS, 예컨대 S100 등급으로 구성될 수 있다. 본 발명의 규칙배열 폴리스티렌 마이크로타이터 플레이트는 250℃의 온도까지 안정하다.

본 발명의 마이크로타이터 플레이트는 바람직하게는 통상의 잘 알려진 플라스틱 재료의 인젝션 몰딩 방법에 의해 제조되지만, 당업자에게 공지된 다른 수단에 의해 형성될 수도 있다. 마이크로타이터 플레이트 조성물은 폴리머, 염색제, 윤활제 또는 당업자에게 공지된 다른 첨가제들을 포함할 수 있다.

마이크로타이터 플레이트의 벽들은 스트립 형태 또는 직렬 형태로 정렬될 수 있고, 또한 매트릭스 형태로 정렬될 수도 있다. 어떤 마이크로타이터 플레이트 구조는 웰들의 센터 간에 9mm 이격된 8 ×12웰, 총 96웰을 갖는다. 고처리량 스크리닝을 위해서는, 다른 구조가 고안될 수 있는데, 웰의 총 수를 증가시키면서 웰 플레이트의 전체 크기를 동일하게 유지시키는 구조가 그것이다. 예컨대, 웰 센터들 간에 4.5mm 이격된 16 ×24웰을 갖도록 구성된 384-웰 플레이트 및 웰 센터들 간에 2.25mm 이격된 32 ×48 웰을 갖는 1538-웰 플레이트를 들 수 있다. 이러한 웰 플레이트의 전체 크기가 96-웰 플레이트와 동일하기 때문에, 384 및 1536 웰 플레이트내의 웰들의 크기는 필수적으로 96-웰 플레이트 내의 웰들 크기보다 작은 반면에 웰들의 깊이는 동일하게 유지된다. 마이크로타이터 플레이트의 전체 디멘션은 Society for Biomolecular Screening (SBS)에 의해 결정된 국제표준에 의해 정해진다.

현재 PCR 기기를 위해 생화학 분야에서 사용 중인 마이크로타이터 플레이트와는 달리, 본 발명의 마이크로타이터 플레이트는, 도 3에 도시되고 실시예 2에 기재된 바와 같이, PCR 실험 동안 또는 그 이후에 휘어짐을 거의 나타내지 않거나 아예 나타내지 않는다. 따라서, 마이크로타이터 플레이트 및 열사이클러 간의 균일한 접촉을 가능케 하고 플레이트의 정확한 디멘션이 유지되어 자동화된 시스템에서 조작이 용이해지기 때문에, PCR 실험이 수행될 수 있는 일정한 환경을 제공한다. 이러한 조건들은 고처리량 스크리닝 절차에 이상적이며, 특히 384-웰 플레이트와 같은 많은 웰을 포함하는 플레이트에 이용된다.

또한 선행기술의 마이크로타이터 플레이트는 흐릿한 외형을 가지므로 플레이트 상에서 웰의 바닥에 형성될 수 있는 버블을 식별하기가 어렵다. 이에 비해, 본 발명에서 사용되는 플라스틱 재료는 투명하기 때문에, 마이크로타이터 플레이트의 웰 내의 용액을 쉽게 볼 수 있다. 본 발명에서 사용되는 재료는 도 1 및 2에 나타내고 실시예 1에 기재된 바와 같이, 종래 기술에서 사용되는 재료에 비해 매우 낮은 자발형광성을 나타내므로, 본 발명은 실시간 PCR 기기에 사용되기에 적합하다.

발명의 개요

본 발명은 규칙배열 폴리스티렌을 포함하는 조성물로 제조된 폴리머라제 체인 리액션 기기에서의 사용을 위한 마이크로타이터 플레이트에 관한 것이다. 본 발명에 따른 마이크로타이터 플레이트는 96,384 또는 1536-웰 플레이트일 수 있다.

또한, 본 발명은 시클릭 올레핀 폴리머를 포함하는 조성물로 제조된 폴리머라제 체인 리액션 기기에 사용하기 위한 마이크로타이터 플레이트에 관한 것이다. 상기 시클릭 올레핀 플레이트는 96,384 또는 1536-웰 플레이트일 수 있다.

또한, 본 발명은 시클릭 올레핀 폴리머를 포함하는 조성물로 제조된 마이크로타이터 플레이트에 관한 것으로서, 여기서 상기 폴리머는 노보렌 모노머의 첨가 중합, 첨가 공중합, 고리 열림 상호교환반응 중합 또는 고리 열림 상호교환반응 공중합에 의해 제조된 것을 특징으로 한다. 또한 본 발명은 시클릭 올레핀 폴리머를 포함하는 조성물로 제조된 마이크로타이터 플레이트에 관한 것인데, 여기서 폴리머는 시클로펜타디엔 모노머의 첨가 중합, 첨가 공중합, 고리 열림 상호교환반응 중합 또는 고리 열림 상호교환반응 공중합에 의해 제조된 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 필수적으로 규칙배열 폴리스티렌 또는 시클릭 올레핀 폴리머 중 하나로 이루어진 PCR 기기 용 마이크로타이터 플레이트에 관한 것이다.

실시예 1

시클릭 올레핀(Zeonor, Nippon Xeon, Japan)으로 구성된 384-웰 마이크로타이터 플레이트를 ABI PRISM™ 384-웰 Clear Optical Reaction Plates (Applied Biosystems) 및 ABgeneThermo-fast 플레이트와 비교하기 위해 실시간 PCR을 수행하였다. 본 발명의 384-웰 플레이트 중 일부를 세시간동안 110℃에서 어닐링하였다.

ABI PRISM7900 HT Sequence Detection System (Applied Biosystems)를 이용하여 β-액틴 플라스미드 DNA의 열배 희석액과 함께 ABI TaqManβ-액틴을 사용하여 PCR을 수행하였다. ABI TaqMan은 β-액틴 플라이머 및 이중-표지된 발형광성 혼성화 프로브-이것은 한 형광 염료와 결합된다-를 포함한다. 리포터로서 기능하는 FAM 및 그 방출 스펙트럼을 이차 염료, TAMRA로 소멸시켰다. 2.5 마이크로리터(3M)의 β-액틴 정방향 프라이머, 2.5 마이크로리터(3M)의 β-액틴 역방향 프라이머 및 2.5 마이크로리터(2M)의 상기 기재된 프로브를 12.5 마이크로리터의 ABI 2 ×Master Mix(이것은 DNA 폴리머라제, dNTP 및 최적화된 버퍼 구성성분들을 함유함)와 함께 혼합하였다.

다양한 농도의 플라스미드 DNA를 10ng/샘플 내지 0.1fg/샘플 범위의 DEPC-처리된 물 5마이크로리터에서 10배 희석으로 각 희석당 이중으로 제조하였다. 그 다음에, 플라스미드 DNA의 각 일련의 희석액 5 마이크로리터를 상기 기재된 TaqManβ-액틴 PCR 혼합 용액 20 마이크로리터와 혼합하였다.

PCR을 하기와 같이 수행하였다: 50℃에서 2분, 95℃에서 10분, 및 95℃에서 15초 및 60℃에서 1분간 40 사이클. 형광 데이타를 각 샘플에 대해 60℃ 단계에서 수집하였다. 이 데이타는 도 2에 나타나 있다. 그 그래프는 일련의 각 희석액에 대한 각 사이클에서 이중으로 측정된 형광을 나타낸다.

PCR를 PRISM? 7900에서 수행한 후, ABI 플레이트 및 Zeonor 예비-어닐링된 플레이트에서의 엔드-포인트 PCR 산물을 488nm의 여기 파장 및 505nm의 방출 파장으로 FMBIO형광이미지기(Hitachi)에 의해 스캐닝하였다. 그 강도는 두 방법으로 계산하였다. 먼저 강도를 한 웰 및 21.68mm의 주변 면적을 포함하는 큰 강도 면적에 기초하여 계산하였다. 그 후 강도를 웰의 중심(1.03mm)인 작은 강도 면적을 선별하여 계산하였다. 이러한 계산의 결과는 도 1에 나타나 있다.

실시예 2

본 발명의 시클릭 올레핀 384-웰 마이크로타이터 플레이트(Zeonor) 여섯개를 하기 조건으로 처리하였다: 각각 0.5, 1.0 및 1.5시간동안 110℃ 및 0.5 및 1.0 시간동안 125℃. 이렇게 처리된 플레이트들을 ABI PRISM7900(Applied Biosystems) 상에서, 그 384 웰 각각 내의 20 마이크로리터의 물과 함께 94℃에서 15초간 및 60℃에서 60초간(열사이클러는 105℃까지 가열됨)의 50회의 PCR 사이클을 처리하였다. 각 플레이트의 가로, 세로, 높이를 PCR 전후에 캘리퍼로 측정하였고, 도 3은 이러한 디멘션등의 변화를 나타내는 그래프이다. 이와 비교하기 위하여 ABI 384-웰 Clear Optical Reaction Plate를 또한 동일한 PCR 조건 하에서 테스트하였다.

실시예 3

ABI MicroAmpOptical 96-웰 Reaction Plate, 본 발명의 블랙 규칙배열 폴리스티렌 (SPS) 96-웰 플레이트, 본 발명의 화이트 SPS 96-웰 플레이트 및 본 발명의 시클릭 올레핀(Zeonor) 96-웰 플레이트에서 PCR을 수행하였다. PCR 반응 혼합물은 0.25 마이크로리터의 β-액틴 특이적 프라이머, 2.5mM의 MgCl₂, 100mM의 dNTP, 1×PCR 버퍼 및 1 유닛의 Taq 폴리머라제(Promega)를 함유하였다. 각 개별 혼합물은 또한 20 마이크로리터의 100, 10, 1, 0.1 또는 0ng 인간 게놈 DNA를 각각 포함하였다. PCR 조건은 다음과 같았다: PTC-100™ Thermal Cycler(MJ Research) 또는 GeneAmp2700 열사이클러(Applied Biosystems) 중 하나 상에서 94℃에서 45초간, 60℃에서 1분간 및 72℃에서 1분간의 25 사이클. PCR 산물은 2.0% 아가로오스 젤 전기영동에 의해 분석하고, 그 결과는 도 4에 나타내었다.

Claims (16)

1. 복수개의 웰을 포함하는 폴리머라제 체인 리액션 기기에서의 사용을 위한 마이크로타이터 플레이트로서, 상기 플레이트는 규칙배열 폴리스티렌을 포함하는 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
2. 제1항에 있어서, 상기 플레이트는, 96-웰 플레이트인 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
3. 제1항에 있어서, 상기 플레이트는, 384-웰 플레이트인 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
4. 제1항에 있어서, 상기 플레이트는 1536-웰 플레이트인 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
5. 복수개의 웰을 포함하는 폴리머라제 체인 리액션 기기에서의 사용을 위한 마이크로타이터 플레이트로서, 상기 플레이트는 시클릭 올레핀 폴리머를 포함하는 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
6. 제5항에 있어서, 상기 플레이트는, 96-웰 플레이트인 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
7. 제5항에 있어서, 상기 플레이트는, 384-웰 플레이트인 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
8. 제5항에 있어서, 상기 플레이트는 1536-웰 플레이트인 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
9. 제5항에 있어서, 상기 시클릭 올레핀 폴리머는, 노보렌(norborene) 모노머의 첨가 중합, 첨가 공중합, 고리 열림 상호교환반응 중합 및 고리 열림 상호교환반응 공중합으로 이루어진 군으로부터 선택된 과정에 의해 생산된 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
10. 제5항에 있어서, 상기 시클릭 올레핀 폴리머는 시클로펜타디엔 모노머의 첨가 중합, 첨가 공중합, 고리 열림 상호교환반응 중합 및 고리 열림 상호교환반응 공중합으로 이루어진 군으로부터 선택된 과정에 의해 생산된 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
11. 복수개의 웰을 포함하는 폴리머라제 체인 리액션 기기에서의 사용을 위한 마이크로타이터 플레이트로서, 상기 플레이트는 필수적으로 규칙배열 폴리스티렌으로이루어진 재료로 구성된 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
12. 복수개의 웰을 포함하는 폴리머라제 체인 리액션 기기에서의 사용을 위한 마이크로타이터 플레이트로서, 상기 플레이트는 필수적으로 시클릭 올레핀 폴리머로 이루어진 재료로 구성된 것을 특징으로 하는 마이크로타이터 플레이트.
13. 제1항, 제5항, 제11항 또는 제12항 중 어느 한 항에 따른 플레이트를 사용하는 방법으로서,

    상기 웰 중 하나 이상의 웰에 핵산을 위치시키는 단계; 및

    상기 핵산의 온도를 높이고 낮추는 것을 포함하는 방식으로 상기 핵산을 증폭시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
14. 제13항에 있어서, 상기 웰에서 증폭된 핵산의 존재를 검출하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
15. 제14항에 있어서, 상기 검출하는 단계는 상기 증폭된 핵산의 양을 정량하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
16. 제14항에 있어서, 상기 검출 단계가 일어나는 자동화된 검출 시스템 내에 상기 플레이트를 위치시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.