KR20020056883A

KR20020056883A - 페난트롤린-7-온 유도체들과 이들의 치료에의 사용

Info

Publication number: KR20020056883A
Application number: KR1020027001753A
Authority: KR
Inventors: 이블린 델포우른; 프란시스 다로; 쟝 바스티드; 로버트 키스; 아르망 프리드만
Original assignee: 파.세 라퐁; 라보라뜨와르 엘르 라퐁
Priority date: 1999-08-13
Filing date: 2000-08-11
Publication date: 2002-07-10
Also published as: EP1202993A2; WO2001012632A3; AU7012500A; DE60023307D1; NZ516944A; CA2381352A1; CN1187352C; MXPA02001493A; CN1373761A; IL147901A0; NO20020669L; HUP0203033A3; HUP0203033A2; EP1202993B1; PL353454A1; ATE307131T1; AU777689B2; SK1672002A3; WO2001012632A2; US6809096B1

Abstract

본 발명은 일반식 (I)와 일반식 (Ia)의 화합물 사이에서 선택된 화합물의 유효량을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것으로서, 여기서: R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆과 R₇은 청구항 1에 정의된 바와 같다. 상기 화합물들은 항암성 약품으로서 치료에의 사용을 유도하는 흥미로운 세포독성 특성을 가지고 있다.

Description

페난트롤린-7-온 유도체들과 이들의 치료에의 사용{Phenanthroline-7-one derivatives and their therapeutic uses}

1999년에, 암 종양의 크기를 감소시키기 위하여, 또는 종양 과정의 진행을 억제하기 위하여 또는 극소수의 경우에 암 세포의 종양과 암전이의 위험을 제거하기 위하여 사용된 세포독성 치료(cytotoxic treatment)(화학 요법)에 수십년동안 사용되어온 다른 화학물질들과 함께 최근에 도입된 화학물질들이 조합되어졌다. 예를 들면, 결장직장암을 위한 가장 효과적인 치료제의 하나로서 거의 40년동안 알려진 5-플루오로우라실(5-Fu)은, 종양이 5-Fu에 대하여 더이상 민감하지 않을 때 국소이성화효소(topoisomerase) I(irinotecan 또는 topotecan)에 대한 특이적 저해제들의 하나 또는 다른 것으로 대체될 수 있다. 보다 일반적으로는, 결장직장암의 치료를 위하여 이용가능성이 있는 치료의 축적은 5-Fu 또는 티미딜레이트 합성효소의 선택적 저해제들의 새로운 인시튜(in-situ) "도너(donor)"인 옥살리플라틴의 유효성에 의해 또한 증가하게 되었다. 이같은 공존은 결장직장암의 치료에만 제한되지 않으며, 더구나 유방, 난소 및 폐암의 화학요법은 지금은 탁산(taxane) 유도체들의훼밀리(paclitaxel과 docetaxel)를 광범위하게 이용한다. 환자들의 삶의 질과 생존의 개선은 필수적이므로, 더욱 효과적이고 양호한 내성이 있는 치료가 필요하다. 왜냐하면, 결장직장 종양의 예를 다시 들어보면, 미국에서만 1997년에 131,000건 이상의 새로운 증례들이 진단되었으며, 이들 중의 54,000건은 환자들의 죽음을 초래한 것으로 예상되었기 때문이다(S.L. Parker, T. Tong, S. Bolden 등, CA Cancer J. Clin., 1997). 이러한 상황의 인식에 따라, 본 발명자들은 신규의 의약품 화학분야을 발전시켜 화학적 디자인/조절 연구로부터 유래되어 상당한 치료용 세포독성 활성이 부여된 합성 화합물들이 선택되도록 하기위하여, 지금까지는 거의 연구되지 않은 온난해(warm seas) 해초에서 확인된 폴리아로마틱에 주의를 집중하였다.

세계 표면의 70% 이상을 덮고 있는 바다와 해양들은 해저 식물들과 해면들에게는 집이며, 이들에 대한 진보적이고, 조직적인 천연약물학 연구는 이들 살아있는 종들이 이로운 약리학적 성질이 있는 복합 알카로이드를 포함할 수 있음을 보여준다. 예를 들면, 해면 크립토테카 크립타(Cryptotheca Crypta)와 할리콘드리아 오카다이(Halichondria okadai)는 이들의 세포들내에서 시타라빈(cytarabin) 또는 할리콘드린 B(halichondrin B)의 존재가 발견되었으므로 면밀한 연구의 주제가 되었다. 이는 발레아릭 섬(스페인)에 살고 있는 피낭동물 아플리디움 알비칸스(Aplidium albicans)로부터 아플리딘(aplidine)이 분리되었으므로 미낭동물류도 마찬가지로 연구의 주제가 되었다. 테트라히드로이소퀴놀론 구조의 알카로이드는 해초속의 엑테인아스키디아 터비나타(Ecteinascidia turbinata)로부터 분리된다. 이들 중에서 엑테인아스키딘-743이 면밀한 잠복기 연구(E. Igbicka 등, NCI-EORTC 심포지움,1998; Abst. 130, p. 34)와 항암 약품(A. Bowman 등, NCI-EORTC 심포지움, 1998; Abst. 452, p. 118; M. Villanova-Calero 등, NCI-EORTC 심포지움, 1998; Abst. 453, p. 118; M.J.X. Hillebrand 등, NCI-EORTC 심포지움 1998; Abst. 455, p. 119; E. Citkovic 등, NCI-EORTC 심포지움, 1998; Abst. 456, p. 119)으로서의 치료 가능성을 명확히 할 수 있는 임상 테스트의 주제가 되어왔다. 신규의 펜타시클릭 아크리딘 유도체들 또한 약물 화학 연구의 주제를 이루었다(D.J. Hagan 등, J. Chem. Soc., Perkin Transf., 1997; 1: 2739~2746).

바다 기원의 다른 천연의 알카로이드인 아스키디데민(ascididemin)은 피낭동물(tuincate) 디데늄 종(Didemnum sp.:J. Kobayashi 등, Tetrahedron Lett., 1998; 29: 1170~1180)과 해초속(ascidian) 시스토다이츠 델레키아제이(Cystodytes dellechiajei:I. Bonnard 등, Anti-cancer Drug Design, 1995; 10: 333~346)로부터 추출되었다. 아스키디데민(ascididemin)은 F.J. Schmitz 등(J. Org. Chem. 1991; 56: 804~808), B. Lindsay 등(Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995; 5: 739~742)과 J. Kobayashi 등(Tetrahedron Lett., 1988; 29: 1177~1180)에 의해 설명된 쥐과의 백혈병(P388 또는 L1210 주) 모델과 I. Bonnard 등(Anti-cancer Drug Design, 1995; 10: 336~346)에 의해 설명된 인간 백혈병의 모델로 입증된 항증식(antiproliferative) 특성을 가지고 있다. 또한 S.J. Bloor 등(J. Am. Chem. Soc., 1987; 109: 6134~6136)에 의해 해초속 렙토클리니데스종(Leptoclinides sp.)으로부터 분리되었고, F. Bracher 등(Heterocycles, 1989; 29: 2093~2095)에 의해 합성되었으며, 그 후 M.E. Jung 등(Heterocycles, 1994; 39; 2: 767~778)에 의해합성된 2-브로모렙토클리니돈이 언급될 수 있다. 2-브로모렙토클리니돈은 0.4㎍/㎖의 ED₅₀으로 백혈병 세포 모델에 대해 세폭독성을 나타낸다. 세포독성의 특성은 시험관 내에서의 60개의 종양 세포주 배양과 생체 조건 내에서의 인간 종양 세포주(결장 종양 SW-620과 HTC116, 신장 종양 A498과 흑색종(melanoma) LOX IM VI)를 쥐에 이식한 이종이식(xenograft)의 모델로 F. Bracher(Pharmazie, 1997; 52: 57~60)에 의해 확인되었다.

11-히드록시아스키디데민, 11-메톡시아스키디데민, 11-페닐아스키디데민, 11-니트로페닐아스키디데민, 1-니트로아스키디데민, 3-니트로아스키디데민 및 네오칼리악틴과 같은 아시키디데민으로부터 유도된 다른 화합물들은 F.J. Schmitz(J. Org. Chem., 1991; 56: 804~808)와 Y. Kitahara 등(Heterocycles, 1993; 36: 943~946; Tetrahedron Lett., 1997; 53: 17029~17038), G. Gellerman 등(Tetrahedron Lett., 1993; 34: 1827~1830), S. Nakahara 등(Heterocycles, 1993; 36: 1139~1144)과 I. Spector 등(US-A 5 432 172)과 같은 다양한 그룹에 의해 화학적으로 설명되었다.

메리딘은 해초속 암피카파 메리디아나(Amphicarpa meridiana) 또는 해저 해면인 코르티컴종(Corticum sp.)으로부터 추출된 또 다른 천연 알카로이드이다. 메리딘은 F.J. Schmitz 등(J. Org. Chem., 1991; 56: 804~808)에 의해 분리되었으며, 그 후에, 쥐과의 백혈병 모델(P388)에서 항증식 특성과 특허 US A 5 182 287호(Gunawardana 등, 1993년 1월 23일)에서 항진균성 특성에 대하여 설명하였다.두 개의 인간세포주, 결장암 세포들(HT-29)과 폐암종세포들(A549)에 대한 이들의 세포독성 특성은 R.E. Longley 등(J. of Nat. Products, 1993; 56: 915~920)에 의해 보고되었다.

이들 화합물 중에서, N. Bontemps 등(Tetrahedron Lett., 1994; 35: 7023~7026)에 의해 해초속 시스토다이츠 델레키아제이(Cystodytes dellechiajei)로부터 분리된 펜타시클릭 알카로이드인 시스토드아민이 언급될 수 있으며, 이는 인간 백혈병 림프구모세포에 대한 세포독성 활성을 나타낸다.

본 발명은, 특히 항암성의 약품으로서 유용한 폴리아로마틱 화합물들을 기초로 하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 주제는 다음의 일반식 I과 Ia의 화합물들과 이들의 약제학적으로 허용가능한 산부가염들이다:

여기에서,

R₁, R₂, R₃, R₄와 R₅는 수소, 할로겐, C₁~C₆알킬기들, 히드록실, -CHO, -OR₈, -COOH, -CN, -CO₂R₈, -CONHR₈, -CONR₈R₉, -NH₂, -NHR₈, -N(R₈)₂, -NH-CH₂-CH₂-N(CH₃)₂, -NH-CH₂-CH₂-Cl, -NHCOR₈, 몰포리노, 니트로, SO₃H,으로부터 선택되고,

R₈과 R₉는 C₁~C₆알킬기들과 페닐(C₁~C₄)알킬기들로부터 선택되고, Ar은 C₆~C₁₄아릴기로부터 선택되고,

R₆은 수소, 할로겐, C₁~C₆알킬, 또는 R₁₀이 할로겐 또는 -OH, (C₁~C₆)알콕시 또는 -O-CO-(C₁~C₆)알킬기들로부터 선택되고, n은 1~6인 -(CH₂)_nR₁₀기들, -CN, CO₂Et, 또는 R₁₁이 C₁~C₆알킬 또는 페닐 (C₁~C₄)알킬기로부터 선택되는 -COR₁₁기들과, R₁₂와 R₁₃이 수소, 또는 C₁~C₆알킬, 페닐(C₁~C₄)알킬 또는 R₁₄가 할로겐 또는 (C₁~C₆)알콕시와 -N(CH₃)₂기들로부터 선택되고, n은 1~6인 -(CH₂)_nR₁₄기로부터 서로 독립적으로 선택되는 -NR₁₂R₁₃기로부터 선택되고,

R₇은 수소, (C₁~C₆)알킬, 페닐(C₁~C₄)알킬, R₁₅와 R₁₆이 수소, C₁~C₆알킬과 페닐(C₁~C₄)알킬 형태의 그룹들로부터 서로 독립적으로 선택되는 -NR₁₅R₁₆과, R₁₇이 수소, 할로겐 또는 -OH 또는 (C₁~C₆)알콕시기로부터 선택되고, n은 1~6인 -(CH₂)_nR₁₇의 형태의 그룹으로부터 선택된다.

일반식 I 및/또는 Ia의 화합물들의 특수한 기는 다음의 것들이다:

R₁, R₂, R₃, R₄와 R₅는 수소, 할로겐, C₁~C₆알킬기들, 히드록실, -CHO, -OR₈, -COOH, -CN, -CO₂R₈, -CONHR₈, -CONR₈R₉, -NH₂, -NHR₈, -N(R₈)₂, -NH-CH₂-CH₂-N(CH₃)₂,-NHCOR₈, 몰포리노, 니트로, SO₃H,으로부터 선택되고,

R₈과 R₉는 C₁~C₆알킬기들로부터 선택되고, Ar은 C₆~C₁₄아릴기로부터 선택된다.

본 발명의 주제는 좀더 상세하게는, 일반식 (I)과 일반식(Ia)의 화합물들과 이들의 약제학적으로 허용가능한 산부가염으로부터 선택되는 화합물이다: 여기에서, R₁, R₂, R₃, R₄와 R₅는 수소, 할로겐, C₁~C₆알킬기들, 히드록실, -OR₈, -NO₂, -NH₂, -NHR₈, -NH(R₈)₂, -NH-CH₂-CH₂-N(CH₃)₂, -NH-CH₂-CH₂-Cl, -NHCOR₈로부터 선택되고, R₈은 C₁~C₆알킬기들로부터 선택되고,

R₆은 수소, R₁₀이 할로겐, -O-CO-CH₃기로부터 선택되는 -(CH₂)_nR₁₀기들, C₁~C₆알킬기들과, R₁₂와 R₁₃이 수소 또는 C₁~C₆알킬, 벤질, 또는 R₁₄가 할로겐 또는 (C₁~C₆)알콕시와 -N(CH₃)₂기들로부터 선택되고, n은 1~6인 -(CH₂)_nR₁₄기들로부터 독립적으로 선택되는 -N(R₁₂R₁₃)기들로부터 선택되고,

R₇은 수소 또는 (C₁~C₆) 알킬 형태의 기들, 벤질, R₁₅와 R₁₆이 수소, C₁~C₆알킬형태의 기들과 벤질로부터 선택되는 -N(R₁₅R₁₆)과, R₁₇이 수소, 할로겐 또는 -OH 또는 (C₁~C₆)알콕시기들로부터 선택되고, n은 1~6인 -(CH₂)_nR₁₇로부터 선택된다.

바람직한 화합물의 기는 R₁, R₂, R₃, R₄및 R₅기들 중 적어도 하나는 OR₈기인 일반식 I과 Ia로 이루어진다.

"약제학적으로 허용가능한 산부가염들"의 표현은 불리한 효과없이 유리염기들의 생물학적인 성질을 제공하는 염들을 나타낸다. 특히 이들 염들은 염산, 브롬산, 황산, 질산 또는 인산과 같은 무기산; 디소듐오르소포스페이트 및 모노포타슘 설페이트와 같은 금속산염 및 유기산들로부터 형성될 수 있다.

일반적으로, 일반식 (I)과 (Ia)의 화합물들은 다음의 단계로 이루어진 방법에 의해 얻을 수 있다:

a) 헤테로 디엘스-알더 반응(Diels-Alder reaction)에 따라 일반식 II와 일반식 IIa의 화합물의 혼합물을 얻기 위하여, 일반식 IV의 퀴놀리네디온과 일반식 V의 아자디엔(여기서, X=CH₃)을 반응시키는 단계,

b) 일반식 II와 IIa의 화합물을 임의로 분리시키는 단계,

c₁) 일반식 III 및/또는 IIIa의 엔아민을 얻기 위하여, 일반식 II 및/또는 IIa와 디메틸포름아미드 디메틸 아세탈을 연속적으로 반응시키고, 그 후 R₆및/또는 R₇치환기를 도입하기 위하여 엔아민을 기능화시키고, 일반식 I 및/또는 Ia의 화합물을 얻기 위하여 고리화시키는 단계, 또는

c₂) 일반식 I 및/또는 Ia의 화합물을 얻기 위하여 동시에 기능화 및 고리화시키는 단계,

d) 일반식 I과 Ia의 화합물을 임의로 분리시키는 단계.

또 다른 형태에서, R₆과 R₇이 수소인 일반식 I 또는 Ia의 화합물들은 다음의 단계로 이루어진 방법에 의해 얻을 수 있다:

a) 일반식 II와 IIa의 화합물의 혼합물을 얻기 위하여, 일반식 IV와 일반식 V(여기서, X=CH₂-CH₂-NHBoc)의 아자디엔을 반응시키는 단계,

b) 일반식 II와 IIa의 화합물을 임의로 분리시키는 단계,

c) 일반식 I 및/또는 Ia의 화합물을 얻기 위하여 일반식 II 및/또는 IIa의 화합물을 고리화시키는 단계,

d) 일반식 I 또는 Ia의 화합물을 임의로 분리시키는 단계.

일반식 III과 IIIa의 화합물의 고리화를 위한 반응은 적절한 용매내, NH₄Cl이 존재하는 뜨거운 조건 하에서 이루어질 수 있다.

X = CH₂-CH₂-NHBoc일 때, 일반식 I과 Ia의 화합물은 트리플루오로아세트산 매질에서 NaHCO₃의 존재하에서 일반식 II와 IIa의 화합물로부터 직접 얻어진다.

R₆치환기의 도입을 위한 기능화는 R-COCl, ClCN, ClCO₂Et, ClCH₂OR, FClO₃또는 CH₂=N⁺(CH₃)₂I^-(CH₃COOH 내에서)와 같은 유도된 반응물을 이용하여 이루어질 수 있다.

R₇치환기의 도입을 위한 기능화는 일반식 R₇-CHO의 알데히드와 만니히 반응(Mannich reaction)에 의해 이루어질 수 있다.

이 경우, 동시 고리화는 아세트산 내, 과량의 암모늄 클로라이드의 존재하에서 이루어질 수 있다.

치환된 아자디엔의 실시예는 다음의 반응식에 따라 제조될 수 있다:

TEMPO = 테트라메틸-1-피페리디닐옥시, 자유 라디칼

TBACl = 테트라부틸암모늄 클로라이드

FMTP = 포르밀메틸렌트리페닐포스포란

다음의 실시예들은 일반식 (I)과 (Ia)의 화합물들의 제조법을 예시한다.

A - 아자디엔(화합물 4)의 제조법

A-1 - N-Boc-1-아미노-2-히드록시프로판의 합성(화합물 1)

4.2g(29.7mmol)의 디-t-부틸 디카르보네이트를 0℃에서 60ml의 디옥산, 30ml의 물과 30ml의 1N NaOH의 혼합물 중의 2ml(27mmol)의 3-아미노-1-프로판올의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 밤새 교반시킨 후, 진한 HCl을 사용하여 pH 1로 산성화시켰다. 에틸 아세테이트(AcOEt)로 몇 번 추출(3회 50ml) 후에, 유기상을 MgSO₄로 건조시킨 후, 회전 증발기로 농축시켜 황색 오일의 형태로 4g의 기대했던 생성물을 얻었다.

A-2 - N-Boc-3-아미노프로판알의 합성(화합물 2)

18g(103mmol)의 화합물 1, 1.62g(10.4mmol)의 TEMPO(테트라메틸-1-피페리디닐옥시, 자유 라디칼), 2.9g(10.45mmol)의 테트라부틸암모늄 클로라이드와 21g(75.5mmol)의 N-클로로숙신이미드를 351ml의 NaHCO₃/K₂CO₃(0.5N/0.05N)와 351ml의 CHCl₃에 현탁시켰다. 반응 혼합물을 2시간동안 격렬하게 교반시켰다. 유기상을 침전에 의해 분리시키고, MgSO₄로 건조시킨 후, 회전 증발기로 농축시켜 밝은 오렌지색 오일의 형태로 기대했던 알데히드를 얻었다.

A-3 - N-Boc-5-아미노-2-펜텐-1-알(화합물 3)

11g(66.7mmol)의 화합물 2와 24.3g(80mmol)의 포르밀메틸렌트리페닐포스포란(FMTP)을 350ml의 벤젠에 용해시킨 후, 반응 혼합물을 9시간동안 환류시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 잔사를 실리카를 통한 첫번째 여과[(1/1 CHCl₃/헵탄), 그 다음에 CHCl₃]로 트리페닐포스핀을 제거하였다. 실리카를 통한 두번째 여과로 오렌지-황색 오일의 형태로 3.88g의 화합물 3을 얻을 수 있었다.

A-4 - N-Boc-5-아미노-2-펜텐-1-알 디메틸히드라존(화합물 4)

3.88g(19.5mmol)의 화합물 3을 0℃에서 30ml의 에테르 중의 1.47ml(1.95mmol)의 디메틸히드라진과 8방울의 아세트산에 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분동안 왼쪽으로 교반시키고, 유기상을 침전에 의해 분리시키고, 1N HCl로 세척한 후 포화된 NaCl 용액으로 세척하였다. MgSO₄로 건조시킨 후에 회전 증발기에서 용매를 증발시켜 오렌지-황색 오일의 형태로 4.4g의 히드라존(화합물 4)을 얻었다.

B - 일반식 II와 IIa의 화합물의 제조법

B-1: 4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-1b)과 4-메틸피리도-[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-1b)의 합성

20ml의 CHCl₃중의 0.5g(3.14mmol)의 퀴놀린-5,8-디온, 0.35g(3.14mmol)의 크로톤알데히드 디메틸히드라존과 0.45ml(4.76mmol)의 무수 초산의 혼합물을 초음파 베스(bath)에서 1시간동안 처리하였다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 반응 혼합물은 실리카를 통해 여과(CHCl₃)시켜 자줏빛 분말의 형태로 0.428g의 두 개의 이성질체 I-1a와 II-1a의 혼합물을 얻었다. 이 분말과 1.6g(18.4mmol)의 MnO₂를 20ml의 CHCl₃에 현탁시키고, 혼합물을 2시간동안 환류시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 여과물을 회전 증발기에서 농축시키고, 그 후 실리카 컬럼 상의 플래쉬 크로마토그래피(98/2 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제시켜 다음의 화합물을 얻었다:

중간체(I-1b): 4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온

중간체(II-1b): 4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-2: 9-메톡시-4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-2b)과 6-메톡시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-2b)의 합성

8ml의 CHCl₃중의 0.5g(2.8mmol)의 4-메톡시퀴놀린-5,8-디온, 0.32g(2.87mmol)의 크로톤알데히드 디메틸히드라존과 0.4ml(4.23mmol)의 무수 초산의 혼합물을 1시간동안 환류시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 반응 혼합물은 실리카를 통해 여과(98/2 CH₂Cl₂/MeOH)시켜 자줏빛 분말의 형태로 두 개의 이성질체 I-2a와 II-2a의 혼합물 0.48g을 얻었다. 이 분말과 2.3g(26.45mmol)의MnO₂를 26ml의 CHCl₃에 현탁시키고, 혼합물을 2시간동안 환류시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 여과물을 회전 증발기에서 농축시키고, 그 후 실리카 컬럼 상의 플래쉬 크로마토그래피(98/2 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제시켜 다음의 화합물을 얻었다:

중간체 I-2b: 9-메톡시-4-메틸피리도[2,3-g]-퀴놀린-5,10-디온

중간체 II-2b: 6-메톡시-4-메틸피리도[3,2-g]-퀴놀린-5,10-디온

B-3: 9-니트로-4-메톡시피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-5b)과 6-니트로-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-5b)의 합성

10.5ml의 CHCl₃중의 0.8g(3.92mmol)의 4-니트로퀴놀린-5,8-디온, 0.65g(5.8mmol)의 크로톤알데히드 디메틸히드라존과 0.55ml(5.8mmol)의 무수 초산의 혼합물을 30분동안 초음파 베스에서 처리하였다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 반응 혼합물은 실리카를 통해 여과(98/2 CH₂Cl₂/MeOH)시켜 자줏빛 분말의형태로 두 개의 이성질체 I-5a와 II-5a의 혼합물 0.7g을 얻었다. 이 분말과 2.9g(33.4mmol)의 MnO₂를 29ml의 CHCl₃에 현탁시키고, 혼합물을 2시간동안 환류시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 여과물을 회전 증발기에서 농축시키고, 그 후 실리카 컬럼 상의 플래쉬 크로마토그래피(98/2 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제시켜 다음의 화합물을 얻었다:

중간체 I-5b: 9-니트로-4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온

중간체 II-5b: 6-니트로-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-4: 9-디메틸아미노-4-메틸피리도-[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-3b)과 6-디메틸아미노-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-3b)의 합성

150mg(0.558mmol)의 질산화된 트리시클릭 I-5a 또는 II-5a와 0.4ml(1.95mmol)의 N,N-디메틸포름아미드 디에틸아세탈을 2.1ml의 DMF에 용해시키고, 반응 혼합물을 130℃에서 1시간동안 가열하였다. 진공 펌프로 용매를 증발시킨 후, 140mg의 중간체 화합물 II-3a 또는 II-3b를 얻었으며, 이 물질은 다음 단계에그대로 사용될 것이다:

중간체 II-3b: 6-디메틸아미노-4-메틸피리도-[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-5: 9-클로로-4-(N-Boc-1-아미노-에탄)-5,10-디히드로피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-7b)과 6-클로로-4-(N-Boc-1-아미노에탄)-5,10-디히드로피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-7b)

8.5ml의 CHCl₃중의 0.6g(3.1mmol)의 4-클로로퀴놀린-5,8-디온, 0.75g(3.1mmol)의 디메틸히드라존 4와 0.45ml(4.76mmol)의 무수 초산의 혼합물을 30분동안 초음파 베스에서 처리하였다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 2.7g(31.1mmol)의 MnO₂와 22ml의 CHCl₃를 반응 혼합물에 첨가하여 2시간동안 환류시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 여과물을 회전 증발기에서 농축시키고, 그 후 실리카 컬럼 상의 플래쉬 크로마토그래피(99/1 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제시켜 다음의 화합물을 얻었다:

중간체 I-7b: 9-클로로-4-(N-Boc-1-아미노에탄)-5,10-디히드로피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온

중간체 II-7b: 6-클로로-4-(N-Boc-1-아미노에탄)-5,10-디히드로피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-6: 3-메톡시-4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-8b)과 3-메톡시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-8b)

25ml의 CHCl₃중의 1g(6.28mmol)의 퀴놀린-5,8-디온과 1.78g(12.57mmol)의 2-메톡시-2-부텐알 디메틸히드라존의 혼합물을 5분동안 주위 온도에서 교반하였다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 반응 혼합물은 실리카를 통해 여과(95/5 CH₂Cl₂/MeOH)시켜 자줏빛 분말의 형태로 두 개의 이성질체 I-8a와 II-8a의 혼합물 1.55g을 얻었다. 이 분말과 1g(11.5mmol)의 MnO₂를 30ml의 CHCl₃에 현탁시키고, 혼합물을 주위 온도에서 1시간동안 교반시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 여과물을 회전 증발기에서 농축시키고, 그 후 실리카 컬럼 상의 플래쉬 크로마토그래피(99/1 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제시켜 다음의 화합물을 얻었다:

중간체 I-8b: 3-메톡시-4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온

중간체 II-8b: 3-메톡시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-7: 3,9-디메톡시-4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-9b)과 3,6-디메톡시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-9b)의 합성

15ml의 클로로포름 중의 2-메톡시-2-부텐알 디메틸히드라존(1g, 7.1mmol)의용액을 30ml의 클로로포름 중의 4-메톡시퀴놀린디온(1.33g, 7mmol)의 용액에 방울방울 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기하, 주위 온도에서 5시간동안 빛을 차단하면서 교반시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후 얻어진 조생성물을 비아로마틱(nonaromatic) 생성물을 포함하는 1차 분류물 F₁과 기대했던 생성물을 포함하는 2차 분류물 F₂를 생산하기 위하여 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(CHCl₃, 그 다음에 98/2 CHCl₃/MeOH, 그 다음에 95/5 CHCl₃/MeOH)로 정제시켰다. 1g의 MnO₂를 분류물 F₁과 30ml의 클로로포름에 첨가하였다. 혼합물을 90분동안 왼쪽으로 교반시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 침전물을 CHCl₃으로 세척하고, 그 다음에 MeOH로 세척하고, 여과물은 분류물 F₁'을 생산하기 위하여 회전 증발기에서 농축시켰다. 분류물 F₁'과 F₂을 조합한 후, 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(CHCl₃, 그 다음에 97/3 CHCl₃/MeOH)로 정제시켜 갈색 분말의 형태로 두 개의 기대했던 화합물 I-9b와 II-9b를 얻었다.

중간체(II-9b): 3,6-디메톡시-4-메틸피리도-[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-8 - 3-메톡시-4-메틸-9-클로로피리도-[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-10b)과 3-메톡시-4-메틸-6-클로로피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-10b)의 합성

15ml의 클로로포름 중의 2-메톡시-2-부텐알 디메틸히드라존(1g, 7.1mmol)의 용액을 30ml의 클로로포름 중의 4-클로로퀴놀린디온(1.37g, 7.1mmol)의 용액에 방울방울 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기하, 주위 온도에서 5시간 30분동안 빛을 차단하면서 교반시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후 얻어진 조생성물을 비아로마틱 생성물을 포함하는 1차 분류물 F₁을 생산하기 위하여 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(CHCl₃, 그 다음에 98/2 CHCl₃/MeOH)로 정제시켰다. 1g의 MnO₂를 이 분류물 F₁과 30ml의 클로로포름에 첨가하였다. 혼합물을 60분동안 왼쪽으로 교반시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 침전물을 CHCl₃으로 세척하고, 그 다음에 MeOH로 세척하고, 혼합물을 회전 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(97/3 [라쿠나(lacuna)])로 정제시켜 황색 분말의 형태로 화합물 I-10b와 II-10b를 얻었다.

중간체 II-10b: 3-메톡시-4-메틸-6-클로로피리도-[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-9: 3-메톡시-4-메틸-9-디메틸-아미노피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-11b)과 3-메톡시-4-메틸-6-디메틸아미노피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-11b)의 합성

THF/H₂O(4ml/2ml)의 혼합물 중의 I-10b 또는 II-10b(90mg, 0.31mmol), 디메틸암모늄 클로라이드(127mg, 1.56mmol)와 NaOH(63mg, 1.56mmol)의 용액을 1시간동안 환류시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 얻어진 조생성물을 95/5 CH₂Cl₂/MeOH 혼합물(50ml)에 용해시켰다. 유기상을 회수한 후 MgSO₄로 건조시켰다. 회전 증발기에서 농축시킨 후, 얻어진 조생성물을 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(95/5 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제시켜 황색 분말의 형태로 기대했던 화합물 I-11b 또는 II-11b를 얻었다.

중간체 II-11b: 3-메톡시-4-메틸-6-디메틸-아미노피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-10: 3,7-디메톡시-4-메틸피리도-[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-12b)과 3,8-디메톡시-4-메틸피리도-[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-12b)의 합성

1 - 2-메톡시퀴놀린-5,8-디온의 합성

1.2ℓ의 CHCl₃중의 5,8-디옥소카르보스티릴(3.1g, 17.7mmol), 실버 카보네이트(10.2g, 37mmol)와 메틸 요오다이드(31ml, 498mmol)의 현탁액을 주위 온도의 어두운 곳에서 90시간동안 교반시켰다. 침전물을 여과하여 제거하고, 여과물을 회전 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 실리카를 통한 여과(CHCl₃)로 정제시켜 황색 고체(2.2g)의 형태로 기대했던 퀴논을 얻었다.

2 - 3,7-디메톡시-4-메틸피리도-[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-12b)과 3,8-디메톡시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-12b)의 합성

10ml의 THF 중의 2-메톡시-2-부탄알 디메틸히드라존(0.75g, 5.3mmol)의 용액을 60ml의 THF 중의 메톡시퀴놀린디온(1.0g, 5.3mmol)의 용액에 방울방울 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기하, 주위 온도에서 40시간동안 빛을 차단하면서 교반시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 얻어진 조생성물을 80ml의 CHCl₃에 용해시키고, 85% MnO₂(5.4g, 53mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간동안 교반시킨 후, 셀라이트를 통해 여과하였다. 회전 증발기에서 농축시킨 후 얻어진 조생성물을 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(CHCl₃)로 정제시켜 갈색 분말의 형태로 화합물 I-12b와 II-12b를 얻었다.

중간체 II-12b: 3,8-디메톡시-4-메틸피리도-[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-11: 8-메톡시카보닐-8-(2'-N-Boc-아미노에틸)피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-13b)과 7-에틸카르보닐-6-(2'-N-Boc-아미노에틸)피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-13b)의 합성

15ml의 아세토니트릴 중의 N-Boc-5-아미노-2-펜텐-1-알 디메틸히드라존(1.1g, 4.56mmol)의 용액을 75ml의 아세토니트릴 중의 3-에틸시퀴놀린카르복실레이트-5,8-디온(1.05g, 4.54mmol)과 무수 초산(4.6ml)의 용액에 방울방울 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기하, 주위 온도에서 24시간동안 빛을 차단하면서 교반시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 5g의 MnO₂와 150ml의 클로로포름을 얻어진 조생성물에 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 1시간 30분동안 왼쪽으로 교반시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 침전물을 CHCl₃으로 세척하고, 그 다음에 MeOH로 세척하고, 혼합물은 회전 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 먼저 실리카를 통한 여과(99/1, 그 다음에 97/3 CHCl₃/MeOH)로 정제하고, 그 다음에 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(99/1)로 정제시켜 갈색 분말의 형태로 화합물 I-13b와 II-13b를 얻었다.

중간체 II-13b: 7-에톡시카르보닐-6-(2'-N-Boc-아미노에틸)피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-12: 7-히드록시-4-(2'-N-Boc-아미노에틸)-피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-14b)과 8-히드록시-4-(2'-N-Boc-아미노에틸)피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-14b)의 합성

30ml의 아세토니트릴 중의 N-Boc-5-아미노-2-펜텐-1-알 디메틸히드라존(1.49g, 6.15mmol)의 용액을 100ml의 아세토니트릴 중의 5,8-디옥소카르보스티릴(0.98g, 5.59mmol)과 무수 초산(5.8ml)의 용액에 방울방울 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기하, 주위 온도에서 16시간동안 빛을 차단하면서 교반시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 7g(80.5mmol)의 MnO₂와 180ml의 클로로포름을 얻어진 조생성물에 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 1시간 30분동안 왼쪽으로 교반시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 침전물을 CHCl₃으로 세척하고, 그 다음에 MeOH로 세척하고, 혼합물은 회전 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 실리카를 통한 여과(98/2, 그 다음에 95/5 CH₂Cl₂/MeOH)에 의해 정제시켜 갈색 분말의 형태로 화합물 I-14b와 II-14b를 얻었다.

중간체 II-14b: 8-히드록시-4-(2'-N-Boc-아미노에틸)-피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-13: 7-히드록시-4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-15b)과 8-히드록시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-15b)의 합성

20ml의 아세토니트릴 중의 2-부텐알 디메틸히드라존(0.703g, 6.28mmol)의 용액을 220ml의 아세토니트릴 중의 5,8-디옥소카르보스티릴(1g, 5.71mmol)과 무수 초산(6.2ml)의 용액에 방울방울 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기하, 주위 온도에서 16시간동안 빛을 차단하면서 교반시킨 후, 6시간동안 가열환류시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후 얻어진 조생성물을 비아로마틱 생성물과 기대했던생성물을 포함하는 1차 분류물을 생산하기 위하여 실리카를 통한 여과(CH₂Cl₂, 그 다음에 98/2 CH₂Cl₂/MeOH)에 의해 정제시켰다. 3g의 MnO₂와 75ml의 클로로포름을 혼합물에 추가하고, 이 혼합물을 주위 온도에서 밤새 왼쪽으로 교반시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 침전물을 CHCl₃으로 세척하고, 그 다음에 MeOH로 세척하고, 혼합물을 회전 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(99/1)로 정제시켜 베이지색 분말의 형태로 기대했던 화합물 I-15b와 II-15b를 얻었다.

중간체 II-15b: 8-히드록시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-14: 7-메톡시-4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-16b)과 8-메톡시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-16b)의 합성

100ml의 CHCl₃중의 화합물 I-15b 또는 II-15b(70mg, 0.29mmol), 메틸 요오다이드(1ml, 15.9mmol)와 Ag₂CO₂(170mg, 0.62mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 14시간동안 빛을 차단하면서 교반시킨 후, 5시간동안 56℃에서 가열하였다. 회전 증발기에서 농축시킨 후 얻어진 조생성물을 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(99.5/0.5 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제시켜 베이지-갈색 분말의 형태로 기대했던 화합물 I-16b 또는 II-16b를 얻었다.

중간체 II-16b: 8-메톡시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-15: 7,9-디클로로-4-메틸피리도-[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-17b)과 6,8-디클로로-4-메틸피리도-[3,2-g]퀴놀린-5-10-디온(중간체 II-17b)의 합성

1. 2,4-디클로로퀴놀린-5,8-디온의 합성

세륨 암모늄 니트레이트(CAN 21.4g, 39.03mmol)를 CH₃CN/H₂O 혼합물(150ml/75ml) 중의 2,4-디클로로-5,8-디메톡시퀴놀린(2.85g, 11.04mmol)의 용액에 부분적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 40분간 교반시켰다. 그 후에, 아세토니트릴을 증발시키고, 50ml의 물과 200ml의 포화된 NaHCO₃를 첨가하였다. 수성상을 CH₂Cl₂(5회 200ml)으로 추출하였다. MgSO₄로 건조 후, 회전 증발기에서 용매를 증발시켜 갈색 분말(1.9g)의 형태로 기대했던 화합물을 얻었다.

2. 7,9-디클로로-4-메틸피리도[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-17b)과 6,8-디클로로-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-17b)의 합성

20ml의 아세토니트릴 중의 2-부텐알 디메틸히드라존(0.325g, 2.89mmol)의 용액을 100ml의 아세토니트릴 중의 2,4-디클로로퀴놀린-5,8-디온(0.6g, 2.63mmol)과 무수 초산(5ml)의 용액에 방울방울 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 분위기하, 주위 온도에서 20시간동안 빛을 차단하면서 교반시켰다. 회전 증발기에서 용매를 증발시킨 후, 얻어진 조생성물을 140ml의 CHCl₃에 용해시켰다. 그 후, 3.65g의 MnO₂를 첨가한 다음에 혼합물을 주위 온도에서 56시간동안 왼쪽으로 교반시켰다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 침전물을 CHCl₃으로 세척하고, 그 다음에 MeOH로 세척하고, 용액을 회전 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 실리카를 통한 플래쉬 크로마토그래피(CH₂Cl₂)로 정제시켜 갈색 분말의 형태로 기대했던 화합물 I-17b와 II-17b를 얻었다.

중간체 II-17b: 6,8-디클로로-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

B-16 - 7,9-디메톡시-4-메틸피리도-[2,3-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 I-18b)과 6,8-메톡시-4-메틸피리도[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온(중간체 II-18b)의 합성

40ml의 메탄올 중의 화합물 I-17b 또는 화합물 II-17b(80mg, 0.27mmol)과 소듐 메톡사이드(40ml의 메탄올 중 300mg의 Na, 13.04mmol)의 혼합물을 17시간동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 건조한 상태로 농축시킨 후 50ml의 물을 첨가하였다. 25%의 HCl로 중화시킨 후, 용액을 CH₂Cl₂(3회 50ml)로 추출하였다. MgSO₄로 건조시킨 후, 회전 증발기에서 용매를 증발시켜 기대했던 화합물 I-18b 또는 II-18b[라쿠나]를 정량적으로 얻었다.

중간체 II-18b: 6,8-디메톡시-4-메틸피리도-[3,2-g]퀴놀린-5,10-디온

실시예 1

7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8293)과 7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8294)

4.5ml의 DMF 중의 63mg(2.81mmol)의 화합물 I-b와 1.7ml(9.84mmol)의 디메틸포름아미드 디에틸 아세탈을 질소 분위기하에서 1시간동안 120℃에 이르게 하였다. 진공 펌프로 용매를 증발시킨 후, 3.5g(65mmol)의 NH₄Cl과 60ml의 무수 에탄올을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분동안 환류시켰다. 회전 증발기에서 에탄올을 증발시킨 후, 50ml의 물을 잔사에 첨가하고, CH₂Cl₂(3회 50ml)로 추출하였다. 유기상을 MgSO₄로 건조시킨 후, 회전 증발기에서 용매를 증발시켜 초록빛이 도는 분말의 형태로 0.6g의 CRL 8294를 얻었다.

7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8293)

7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8294)

중간체 II-1b로부터 출발하여 상술한 방법에 따라 황색 분말의 형태로 72mg의 화합물 CRL 8294를 얻었다.

실시예 2

8-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8363)과 11-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8364)

5.2ml의 DMF 중의 74mg(2.92mmol)의 화합물 I-2b와 2ml(11.8mmol)의 디메틸포름아미드 디에틸 아세탈을 질소 분위기하에서 1시간동안 120℃에 이르게 하였다. 진공 펌프로 용매를 증발시킨 후, 4.5g(83.6mmol)의 NH₄Cl과 67ml의 무수 에탄올을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분동안 환류시켰다. 회전 증발기에서 에탄올을 증발시킨 후, 50ml의 물을 잔사에 첨가하고, CH₂Cl₂(3회 50ml)로 추출하였다. 유기상을 MgSO₄로 건조시킨 후, 회전 증발기에서 용매를 증발시키고, 잔사를 실리카 컬럼 상의 플래쉬 크로마토그래피(98/2 CHCl₃/MeOH)로 정제시켜 오렌지색 분말의 형태로 0.28g의 화합물 CRL 8363를 얻었다.

8-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8363)

11-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8364)

1.14g의 중간체 II-2b로부터 출발하여 상술한 방법에 따라 황색 분말의 형태로 0.59g의 화합물 CRL 8364를 얻었다.

실시예 3

8-(디메틸아미노)-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8800)과 11-(디메틸아미노)-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8367)

1.2ml의 DMF 중의 80mg(0.3mmol)의 트리시클릭 I-3b 또는 트리시클릭 II-3b와 0.21ml(1.05mmol)의 디메틸포름아미드 디에틸 아세탈을 질소 분위기하에서 1시간동안 120℃에 이르게 하였다. 진공 펌프로 용매를 증발시킨 후, 0.5g(9.3mmol)의 NH₄Cl과 80ml의 무수 에탄올을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40분동안 환류시켰다. 회전 증발기에서 에탄올을 증발시킨 후, 5ml의 물을 잔사에 첨가하고, CH₂Cl₂(3회 5ml)로 추출하였다. 유기상을 MgSO₄로 건조시킨 후, 회전 증발기에서 용매를 증발시켜 적색 분말의 형태로 두 개의 테트라시클릭 화합물을 정량적으로 얻었다.

11-(디메틸아미노)-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8367)

실시예 4

8-히드록시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8802)과 11-히드록시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8388)

50mg(0.126mmol)의 트리시클릭 I-7b 또는 트리시클릭 II-7b를 0.5ml의 TFA에 용해시킨 후 반응 혼합물을 24시간 교반시켰다. TFA를 회전 증발기에서 증발시킨 후, 포화 NaHCO₃용액을 pH9~10이 얻어질 때까지 첨가하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂(3회 3ml)로 추출하였다. 혼합물을 MgSO₄로 건조시킨 후, 회전 증발기에서 용매를 증발시켜 황색 분말의 형태로 20mg의 테트라시클릭 화합물을 얻었다.

11-히드록시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8388)

실시예 5

8-클로로-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8396)과 11-클로로-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8801)

260mg(0.67mmol)의 트리시클릭 I-7b 또는 트리시클릭 II-7b를 2.6ml의 TFA에 용해시킨 후, 반응 혼합물을 64시간동안 교반시켰다. TFA를 회전 증발기에서 증발시킨 후, 200ml의 95/5 CH₂Cl₂/MeOH를 첨가하고, 그 후에 포화된 NaHCO₃용액을 pH 10이 얻어질 때까지 첨가하였다. 유기상을 회수하여 물로 세척하였다. MgSO₄로 건조시킨 후, 회전 증발기에서 용매를 증발시켜 갈색 분말의 형태로 40mg의 테트라시클릭 화합물을 얻었으며, 이는 에테르로 세척하였다.

8-클로로-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8396)

실시예 6

4-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8400) 및 4-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8401)

DMF 0.7ml중의 트리시클릭 I-8b 또는 트리시클릭 II-8b 100mg(0.39mmol)과 디메틸포름아미드 디에틸 아세탈 0.27ml(1.37mmol)를 1시간 동안, 질소하에서 120℃로 만들었다. 진공펌프로 용매를 증발시킨 후에, NH₄Cl 0.6g(11.7mmol)과 무수 에탄올 90ml를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 환류시켰다. 회전식 증발기로 에탄올을 증발시킨 후에, 물 10ml를 잔사에 첨가하고, CH₂Cl₂로 추출을 실행하였다(3회 10ml). MgSO₄로 유기상을 건조시킨 후에, 회전식 증발기로 용매를 증발시키고, 실리카로 여과(95/5 CH₂Cl₂/MeOH)시키므로써 정제하여, CRL 8400 및 CRL 8401 화합물을 갈색 분말 형태로 얻었다.

4-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8400)

4-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온-(CRL 8401)

실시예 7

4,8-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8803) 및 4,11-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8440)

DMF 1ml중의 I-9b 화합물 또는 II-9b 화합물(100mg, 0.35mmol)과 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈(0.24ml, 1.23mmol)의 용액을 90분 동안 120℃로 만들었다. 반응 혼합물을 고진공 상태에서 농축시켜 DMF를 제거하고, 잔사는 무수 EtOH 100ml로 희석시켰다. NH₄Cl 0.6g을 첨가한 후에, 혼합물을 30분 동안 환류시켰다. 회전식 증발기에서 농축시킨 후에, 물 30ml를 첨가하고, 혼합물을 CHCl₃로 추출하였다(3회 75ml). 유기상들을 MgSO₄하에서 건조시켜 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 실리카상에서 플래쉬크로마토그래피(95/5 CH₃Cl₃/MeOH)로 정제하여, 황색분말의 형태로 화합물을 얻었다.

4,11-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8440)

실시예 8

4-메톡시-8-디메틸아미노-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8804) 및 4-메톡시-11-디메틸아미노-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린

-7-온(CRL 8441)

DMF 2ml중의 I-11b 화합물 또는 II-11b 화합물(80mg, 0.27mmol)과 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈(0.18ml, 0.94mmol)의 용액을 3시간 동안 120℃로 만들었다. 반응 혼합물을 고진공 상태에서 농축시켜 DMF를 제거하고, 잔사는 무수 EtOH 90ml로 희석시켰다. NH₄Cl 0.4g을 첨가한 후에, 혼합물을 30분 동안 환류시킨 후 회전식 증발기에서 농축시켰다. 물 30ml를 첨가한 후에 용액을 CH₂Cl₂로 추출하였다(3회 50ml). 유기상들을 MgSO₄하에서 건조시켜 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 실리카상에서 플래쉬크로마토그래피(95/5 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제하여, 적-갈색분말의 형태로 테트라시클릭 화합물을 얻었다.

4-메톡시-11-디메틸아미노-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8441)

실시예 9

4,10-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8805) 및 4,9-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8479)

DMF 1ml중의 I-12b 화합물 또는 II-12b화합물(100mg, 0.35mmol)과 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈(0.24ml, 1.23mmol)의 용액을 1시간 동안 120℃로 만들었다. 반응 혼합물을 고진공 상태에서 농축시켜 DMF를 제거하고, 잔사는 무수 EtOH 100ml로 희석시켰다. NH₄Cl 0.54g을 첨가한 후에, 혼합물을 30분 동안 환류시켰다. 회전식 증발기에서 농축시킨 후, 물 20ml를 첨가하여 용액을 CHCl₃로 추출하였다(3회 30ml). 유기상들을 MgSO₄하에서 건조시켜 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 실리카상에서 플래쉬크로마토그래피(CHCl₃)로 정제하여, 녹색분말의 형태로 테트라시클릭 화합물을 얻었다.

4,9-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8479)

실시예 10

9-에톡시카르보닐-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8805) 및 10-에톡시카르보닐-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8482)

CH₂Cl₂15ml중의 I-13b 화합물 또는 II-13b 화합물(30mg, 0.07mmol)과 트리플루오로아세트산(0.27ml, 3.5mmol)의 용액을 64시간 동안 교반하였다. 회전식 증발기에서 농축시킨 후, 반응 혼합물을 포화된 NaHCO₃용액 10ml로 염기화시키고, CHCl₃로 추출하였다(2회 30ml). 유기상들을 MgSO₄하에서 건조시킨 후 회전식 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 잔사를 실리카상에서 정제하여, 황색분말의 형태로 테트라시클릭 화합물을 얻었다.

10-에톡시카르보닐-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8482)

실시예 11

10-히드록시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8809) 및 9-히드록시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8483)

CH₂Cl₂30ml중의 I-14b 화합물 또는 II-14b 화합물(트리시클릭 56)(50mg, 0.135mmol)의 용액과 트리플루오로아세트산(0.54ml, 7mmol)의 용액을 48시간 동안교반하였다. 회전식 증발기에서 농축시킨 후, 반응 혼합물을 포화된 NaHCO₃용액 13ml로 염기화시키고, CH₂Cl₂(7회 30ml)로 추출하였다. 유기상들을 MgSO₄하에서 건조시킨 후 회전식 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 잔사를 플래쉬크로마토그래피(97/2 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제하여, 오렌지분말의 형태로 테트라시클릭 화합물을 얻었다.

9-히드록시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8483)

실시예 12

10-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8810) 및 9-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8484)

DMF 3.2ml중의 I-16b 화합물 또는 II-16b 화합물(200mg, 0.786mmol)과 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈(0.47ml, 2.73mmol)의 용액을 2시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 고진공상태에서 농축시켜 DMF를 제거하고, 잔사는 무수 EtOH 200ml로 희석시켰다. NH₄Cl 1.4g(26.2mmol)을 첨가한 후에, 용액을 30분 동안 환류시켰다. 회전식 증발기에서 농축시킨 후, 물 50ml를 첨가한 후 용액을 CH₂Cl₂로 추출하였다(5회 40ml). 유기상들을 MgSO₄하에서 건조시켜 농축시켰다. 얻어진 조생성물을 실리카상에서 플래쉬크로마토그래피(99/1 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제하여, 갈색분말의 형태로 테트라시클릭 화합물을 얻었다.

9-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8484)

실시예 13

8,10-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8811) 및 9,11-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8485)

DMF 1.5ml중의 I-18b 화합물 또는 II-18b 화합물(105mg, 0.37mmol)과 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈(0.22ml, 1.29mmol)의 용액을 1시간 30분 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 고진공상태에서 농축시켜 DMF를 제거한 후, 잔사를 무수EtOH 95ml로 희석시켰다. NH₄Cl 0.7g(13.08mmol)을 첨가하고, 용액을 30분 동안 환류시켰다. 회전식 증발기에서 농축시킨 후, 물 50ml를 첨가하였다. 용액을 CH₂Cl₂로 추출하였다(5회 40ml). 유기상들을 MgSO₄하에서 건조시켜 농축하였다. 얻어진 조생성물을 실리카상에서 플래쉬크로마토그래피(99/1 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제하여, 오렌지-황색분말의 형태로 테트라시클릭 화합물을 얻었다.

9,11-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8485)

실시예 14

8-디메틸아미노-10-클로로-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8812) 및 9-클로로-11-디메틸아미노-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린

-7-온(CRL 8485)

DMF 1.1ml중의 I-17b 화합물 또는 II-17b 화합물(110mg, 0.375mmol)과 N,N-디메틸포름아미드 디에틸 아세탈(0.23ml, 1.31mmol)의 용액을 1시간 30분 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 고진공상태에서 농축시켜 DMF를 제거한 후, 잔사를 무수 EtOH 95ml로 희석시켰다. NH₄Cl 0.7g(13.08mmol)을 첨가한 후에, 혼합물을 30분 동안 환류시킨 후, 회전식 증발기에서 농축시켰다. 물 50ml를 첨가한 후 용액을 CH₂Cl₂로 추출하였다(5회 40ml). 유기상들을 MgSO₄하에서 건조시켜 농축하였다. 얻어진 조생성물을 실리카상에서 플래쉬크로마토그래피(99/1 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제하여, 자색-적색분말의 형태로 테트라시클릭 화합물을 얻었다.

9-클로로-11-디메틸아미노-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8486)

실시예 15

4-히드록시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온 디히드로요오다이드(CRL 8813) 및 4-히드록시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-

온 디히드로요오다이드(CRL 8487)

요오드화수소산(물중의 57%: 10ml, 44.6mmol)을 아세트산(4ml)중의 CRL 8400 화합물 또는 CRL 8401 화합물의 현탁액(50mg, 0.19mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 21시간 동안 100℃에서 가열하였다. 냉각한 후에 여과하고, 기대되는 화합물의 디히드로요오다이드를 자색분말 형태로 분리하였다.

4-히드록시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온디히드로요오다이드(CRL 8487)

실시예 16

4-클로로-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8806) 및 4-클로로-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8480)

POCl₃(3.5ml)중의 CRL 8813 화합물 또는 CRL 8487 화합물(45mg, 0.14mol)의 용액을 2시간 동안 환류시켰다. 회전식 증발기에서 증발시킨 후에, 혼합물을 1N NaHCO₃용액(10ml)으로 pH8까지 염기화시킨 후, 5% MeOH/CHCl₃혼합물(2 ×20ml)로 추출을 실행하였다. 유기상들을 MgSO₄로 건조시킨 후, 회전식 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 잔사를 플래쉬크로마토그래피(99/1 CH₂Cl₂/MeOH)로 정제하여, 기대되는 화합물을 갈색분말 형태로 얻었다.

4-클로로-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8480)

실시예 17

4-디메틸아미노-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8807) 및 4-디메틸아미노-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8481)

디메틸아민 하이드로클로라이드(24mg, 0.29mmol)중의 CRL 8806 화합물 또는 CRL 8480 화합물(14mg, 0.052mmol)의 용액 및 THF/H₂O 혼합물(2ml/1ml)중의 수산화나트륨(13mg, 0.32mmol)을 1시간 30분 동안 환류시켰다. 회전식 증발기에서 증발시킨 후에, 혼합물에 물 15ml를 채웠다. CHCl₃(3 ×20ml)로 추출한 후에, 유기상들을 MgSO₄로 건조시킨 후, 회전식 증발기에서 농축시켰다. 얻어진 잔사를 플래쉬크로마토그래피(95/5 CHCl₃/MeOH)로 정제하여, 기대되는 화합물을 적색분말 형태로 얻었다.

4-디메틸아미노-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8481)

실시예 18

3-아세톡시메틸-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8825) 및 3-아세톡시메틸-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8824)

DMF(3ml)중의 I-1b 화합물과 II-1b 화합물(0.11g, 0.5mmol) 및 디메틸포름아미드 디에틸 아세탈(1.5mmol)의 용액을 1시간 동안 120℃에서 질소존재하에서 가열시켰다. 냉각한 후에 혼합물을 진공하에서 농축시켜서 고체 형태의 기대한 유도체들을 생성하였다. 상기 고체 유도체(125mg, 0.45mmol)를 DMF로 채우고, 에센모서의 염(Eschenmoser's salt) 13mg(0.7mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 115℃로 질소분위기하에서 가열하였다. 냉각한 후에, NH₄Cl(10mmol)과 아세트산(75ml)을 혼합물에 첨가하여, 30분 동안 115℃로 만들었다. 냉각한 후에, 반응 혼합물을 얼음에 부어서 10% KOH로 염기화하고 CHCl₃로 추출하였다. 유기상들을 MgSO₄로 건조시키고, 회전식 증발기에서 농축시켰다. 잔사는 실리카상에서 플래쉬크로마토그래피로 정제하였다.

3-아세탈-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8815) 및 3-아세탈-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8814),

3-시아노-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8817) 및 3-시아노-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8816),

3-에톡시카르보닐-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8819) 및 3-에톡시카르보닐-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8818),

3-메톡시메틸-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8821) 및 3-메톡시메틸-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8820),

3-플루오로-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8823) 및 3-플루오로-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8822),

3-아세톡시메틸-9-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8825) 및 3-아세톡시메틸-9-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8824)은 상기 기술된 제조방법에 따라서 제조된다.

실시예 19

2-메틸-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8827) 및 2-메틸-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8826)

I-1b 화합물과 II-b 화합물의 혼합물(80mg, 0.4mmol)을 염화암모늄(64mg, 12mmol)과 함께 아세트산(10ml)에 용해시키고, 이 용액을 계속 교반하면서 70℃까지 가열하였다. 아세트산(10ml)중의 아세트알데히드(88mg, 2mmol)를 한방울씩 첨가하였다. 혼합물을 45분 동안 질소존재하 환류로 가열한 후 냉각하였다. 물을 첨가한 후에, 용액을 NH₄OH로 염기화시키고, 디클로로메탄으로 추출하였다. MgSO₄로 건조시켜 증발시킨 후에, 얻어진 잔사는 실리카상에서 플래쉬크로마토그래피로 정제하였다.

2-벤질-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8829) 및 2-벤질-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8828),

2-(2'-클로로에틸)-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8831) 및 2-(2'-클로로에틸)-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8830),

2-(2'-메톡시메틸)-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온(CRL 8833) 및 2-(2'-메톡시메틸)-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온(CRL 8832)은 상기 기술된 제조방법에 따라서 제조된다.

하기에 나타낸 시험관내 및 생체내의 약리학적 테스트의 결과들은 일반식(I) 및 일반식(Ia)의 화합물들의 세포독성 특성들과 최대 허용투여량(MTD)을 증명한다.

1 - 배양액내에서 종양 세포주들에 관한 세포독성활성(MTT 테스트)

종양세포들에 관한 일반식(Ⅰ)과 (Ia) 화합물들의 영향은 MTT 비색 테스트를 사용하여 평가되었다(T. Mosman, J. Immunol. Methods, 1983; 65: 55∼63, J. Carmichael 등, Cancer Res. 1987; 47: 936∼942).

MTT 테스트의 원리는, 대사적으로 활성인 살아있는 세포들에 대하여 노랑색의 생성물 MTT (3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸리움 브로마이드)가 파랑색의 생성물인 포름아잔(formazan)으로 미토콘드리아내에서 환원되는 것에 기초한다. 이와 같이 얻은 포름아잔의 양은 배양웰(well) 또는 웰내에 존재하는 살아있는 세포들의 양에 정비례한다. 이같은 포름아잔의 양은 분광광도 측정법에 의해 측정된다.

세포주들은 25MM HEPES MEM(최소 필수배지) 기초배지를 포함하는 뚜껑이 달린 배양접시들내에서 37℃에서 단층 배양된다. 이 배지는 다양한 범위의 이배체(diploid) 또는 일차 포유류 세포들을 성장시키기에 적합한 웰이다. 이 배지는 그후에 다음의 내용에 따라서 영양 보충된다.

- 56℃에서 1시간동안 탈보충된 5% FCS(Foetal Calf Serum : 태아송아지혈청)일정량,

- L-글루타민 0.6mg/ml,

- 페니실린 200 IU/ml,

- 스트렙토마이신 200㎍/ml,

- 젠타마이신 0.1mg/ml.

사용된 12개의 인간 암 세포주들은 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션(ATCC Rockville, MD, USA)으로부터 구입했다. 이들 12개의 세포주들은 다음과 같다:

- 두개의 글리오블라스토마스인 U-373MG(ATCC 코드 : HTB-17)과 U-87MG(ATCC 코드 : HTB-14),

- 성상세포종인 SW1088(ATCC 코드 : HTB-12),

- 두개의 non-small-cell 폐암들인 A549(ATCC 코드 : CCL-185)와 A-427(ATCC 코드 : HTB-53),

- 두개의 결장직장암들인 HCT-15(ATCC 코드 : CCL-225)와 LoVo(ATCC 코드 : CCL-229),

- 두개의 유방암인 T-47D(ATCC 코드 : HTB-133)와 MCF7(ATCC 코드 : HTB-22),

- 두개의 방광암들인 J82(ATCC 코드 : HTB-1)와 T24(ATCC 코드 : HPB-4)

- 전립선암인 PC-3(ATCC 코드 : CRL-1435).

실험상 : 배지 20,000∼50,000 cells/ml(사용된 세포타입에 따라)를 포함하는 세포현탁액 100㎕를 평평한 바닥으로 된 96-웰 멀티-웰 플레이트에서 접종시키고, CO₂5%와 습도 70%를 포함하는 대기하에서 37℃에서 배양한다. 24시간동안 배양한 후에 배지를 테스트용 생성물을 용해시키기 위해 사용된 용매(대조조건)의 농도가 10^-5M∼10^-10M 범위내에 있는 여러가지의 테스트용 화합물들을 포함하는 새로운 배지 100ul로 대체한다. 상기 조건하에서 72시간동안 배양한 후에, 배지를 RPMI 1640내에 1mg/ml의 비율로 용해된 MTT의 노랑색 용액 100㎕로 대체한다. 마이크로플레이트를 37℃에서 3시간동안 재배양한 다음에 10분간 400g로 원심분리한다. MTT의 노랑색 용액을 제거한 후에 세포수준으로 생성된 파랑색의 포름아잔 결정들을 DMSO 100㎕에 용해시킨다. 그후에 마이크로플레이트를 5분동안 진탕시킨다. 결과로 생긴 파랑색이 착색된 강도와 실험의 말기에도 여전히 살아있는 세포들에 의한노랑색 MTT 생성물의 파랑색 포름아잔으로의 전환의 강도는 각각 포름아잔의 최대 흡수파장과 배경 노이스에 상응하는 파장 570nm와 630nm에서 DYNATECH IMMUNOASSAY SYSTEM 기계를 사용하는 분광광도 측정법에 의하여 정량한다. 분광광도기내에 설치된 소프트웨어는 평균광학밀도값과 또는 표준 편차(Std. Dev.)와 평균값의 표준오차(SEM)를 계산한다.

상이한 종양 세포주들에 관한 일반식 (Ⅰ)과 일반식 (Ia) 화합물들의 세포성장에 대한 억제 활성은 천연생성물의 활성과 비교하여 평가되었다. 각각의 화합물을 위해 얻어진 억제 농도(IC₅₀)를 이루는 농도의 값을 하기 표 1에 나타낸다.

연구된 화합물들 모두는 12개의 인간종양 세포주들(U-87MG, U-373MG, SW 1088, T24, J82, HCT-15, LoVo, MCF7, T-47D, A549, A-427과 PC-3)의 세포증식에 관하여 상당한 억제활성을 보여주며, 테스트된 종양세포주들과 화합물들에 따라서 10^-5M∼10^-9M의 IC₅₀에서 상당한 억제 활성도를 보여준다.

2 - 최대허용 투여량(MTD)의 결정

최대허용 투여량의 평가는 4∼6주 된 B6D2F1/JiCo 마우스들에 대하여 실시되었다. 화합물들을 2.5∼160㎎/㎏의 범위에서 투여량을 증가시키면서 복강내로 투여했다. MTD(㎎/㎏로 표시된)의 값은 고려중인 생성물을 단일투여한 후 14일의 기간에 걸쳐 시험동물들의 생존율을 관찰하므로써 결정되었다. 또한 동물들의 중량의 변화도 이 기간 동안에 걸쳐서 모니터된다. MTD 값이 160㎎/㎏보다 큰 경우, MTD 값은 디폴트(default)값으로서 160㎎/㎏으로 분류된다.

최대허용 투여량(MTD)의 평가 결과를 다음의 표 2에 나타낸다.

최대 허용 투여량

CRL 화합물들	MTD(mg/kg)
CRL 8388(실시예 4)	10
CRL 8293(실시예 1)	10
CRL 8294(실시예 1)	10
CRL 8363(실시예 2)	10
CRL 8364(실시예 2)	5
CRL 8367(실시예 3)	10
CRL 8396(실시예 5)	20
CRL 8400(실시예 6)	>160
CRL 8401(실시예 6)	>160
CRL 8440(실시예 7)	20
CRL 8441(실시예 8)	>160

이러한 훼밀리의 생성물들은 직접적인 세포독성을 나타내거나, 또는 그러한 직접적인 세포독성이 부족할 수 있는데, 직접적인 세포독성이 부족한 경우에는 생체 내에서 높은 조직 농도로 사용되도록 상당히 높은 투여량이 사용된다.

3- 생체내 항종양 활성

테스트들은 다음의 모델로 실행되었다:

- 호르몬-불감성 마우스 유방 암종 MXT(HI-MXT),

- 호르몬-민감성 마우스 유방 선암 MXT(HS-MXT),

- 임파종 L1210.

4∼6주 된 B6D2F1/Jico 마우스들에 이식된 왓슨 C. 등(Cancer Res.,1997; 37: 3344∼3348)의 마우스 유방 선암 MXT의 모델은 유선 유관으로부터 파생된다. 초기에는, 변이된 호르몬-민감성 종양(HS-MXT 모델)은 변이되지 않은 호르몬-불감성 종양(HI-MXT 모델)의 방향으로 발생된다. 항종양 활성을 갖는 약품이 HI-MXT 종양과 HS-MXT 종양이 생긴 동물의 생존기간을 임상학적으로 연장시킨다는 것이 증명되어 왔다. 이것은 예컨대 시클로포스파미드, 에토포시드 또는 아드리아마이신의 경우이다.

임파종 L 1210의 모델은, 마우스의 피하에 이식된 마우스 유래의 L 1210 백혈병 세포들의 모델이다. 그들은 모든 경우에 피하내 고체 종양으로 빠르게 성장한다(L 1210 s.c.).

생성물의 MTD값이 결정된 경우, 그것의 생체내 항종양 활성은 마우스 유래의 HS-MXT와 마우스 유방암종 HI-MXT의 유방선암의 모델과 피하 임파종 L 1210의 모델에 대해 MTD/2, MTD/4 및 MTD/8 투여량으로 특정되었다.

하기에 나타난 모든 예들에서 조절상태는, 어떠한 모델이던간에, 사용된 일반식 (I)과 일반식 (Ia)의 여러가지 화합물을 용해시키기 위해 사용된 용매를 포함하는 생리식염수 0.2ml를 3주 연속 1주당 3회 투여율(월요일, 수요일 그리고 금요일)로 투여한 9마리 또는 15마리의 마우스들로 구성된 배치(batch)에 의해 나타내어진다.

이와 같은 테스트를 하는 동안, 종양성장 또는 마우스들의 생존율이 결정되었다:

ⅰ) -종양성장은 이식된 HS-MXT, HI-MXT 또는 L 1210 종양의 면적을 일주일에 두번(월요일과 금요일) 측정하므로써 평가되었다. 이 면적은 종양의 가장 넓은 두개의 수직축의 값을 곱하므로써 계산된다. 이러한 축들의 값은 활동계(sliding caliper)를 사용하여 계산된다.

ⅱ)마우스들의 생존율은 다음과 같이 형태적으로 또는 T/C 비율로 계산된다 :

이러한 비율은 대조 마우스들의 배치의 중간(median) 마우스의 평균 생존시간에 대한 처리된 마우스들의 배치의 중간 마우스의 평균 생존 시간을 나타낸다. 따라서, T/C 인덱스가 130%를 넘는 경우, 동물들의 생존에 있어서 상당한(P<0.05) 증가가 유도된다. 반면에, 이와 같은 T/C값이 70% 이하인 경우 독성 효과가 있다.

3.1.- 마우스 유방 암종(HI-MXT)

HI-MXT 종양의 성장에 대한 CRL 8293과 CRL 8294 두 생성물들의 영향은 예로써 하기에 나타내어질 것이다. 주어진 실험 조건에 따라 HI-MXT 종양들이 이식된 마우스들의 각각의 배치는 15마리의 마우스들로 이루어진다.

처리 1

CRT 8293 생성물이 복강내로 투여된다. 생성물의 제 1 주입은 이식후7일째(D7)에 5mg/kg의 투여량으로 3주 연속 주당 3회 주입율(월요일, 수요일 그리고 금요일)로 실행된다.

처리 2

CRL 8294 생성물이 복강내로 투여된다. 생성물의 제 1 주입은 이식후 7일째(D7)에 5mg/kg의 투여량으로 3주 연속 주당 3회 주입율(월요일, 수요일 그리고 금요일)로 실행된다.

종양 이식후 21일째 즉, CRL 8293 생성물 또는 CRL 8294 생성물의 6회 투여 후에, 대조 상태와 비교하여 처리 1과 처리 2로 유도된 HI-MXT 종양들의 면적의 감소(-) 또는 증가(+)는 하기 표 3에 퍼센트로 나타낸다. 대조 동물들의 100%는 이식후 21일째에 여전히 살아 있다.

처리	종양 면적(%로 표시)
1(CRL 8293)	-33
2(CRL 8294)	-36

이러한 결과들은 CRL 8293과 CRL 8294 두 생성물들이 HI-MTX 종양들의 성장을 상당히 감소시킨다는 것을 나타낸다. 이러한 결과들은 일반식 I 및 일반식 Ia의 생성물들이 생체내에서 그리고 이러한 모델에서 유리한 항종양 활성을 나타낸다는 것을 보여준다.

3.2.- 마우스 유방 선암(HS-MXT)

HS-MXT 종양의 성장에 대한 CRL 8293과 CRL 8294의 두개의 생성물의 영향은 예로써 하기에 나타내어질 것이다. 주어진 실험 조건에 따라 HS-MXT 종양을 이식한마우스들의 각각의 배치는 9마리의 마우스들로 이루어진다.

처리 10

CRL 8293 생성물은 복강내로 투여된다. 생성물의 제 1 주입은 이식후 7일째(D7)에 5mg/kg의 투여량으로 연속 3주 동안 주당 3회 주입율(월요일, 수요일 및 금요일)로 실행된다.

처리 20

CRL 8294 생성물은 복강내 경로로 단독으로 투여된다. 생성물의 제 1 주입은 이식후 7일째(D7)에 5mg/kg의 투여량으로 연속 3주 동안 주당 3회 주입율(월요일, 수요일 및 금요일)로 실행된다.

종양 이식 후 31일째 즉, CRL 8293 및 CRL 8294의 두 생성물들의 실험 프로토콜에서 제공된 9회 투여 후에, 대조 상태와 비교하여 처리 10과 20으로 유도된 HS-MXT 종양들의 면적의 감소(-) 또는 증가(+)는 다음의 표 4에 퍼센트로 나타내어진다. 대조 동물들의 100%는 이식후 31일째에 여전히 살아있다.

처리	종양 면적(%로 표시)
10(CRL 8293)	-45
20(CRL 8294)	-64

이러한 결과들은 CRL 8293과 CRL 8294의 두개의 생성물들이 HS-MXT 종양들의 성장에 있어서 상당한 감소를 유도한다는 것을 나타낸다. 이러한 결과들은 HI-MXT 모델에 있어서와 같이, 일반식 I 및 일반식 Ia의 생성물들은 HS-MXT 모델에서 상당히 유리한 항종양 활성을 나타낸다는 것을 보여준다.

3.3.- 임파종 L 1210

마우스들의 생존시간에 따른 CRL 8294의 영향은 예로써 하기에 나타내어질 것이다(표 5). 주어진 실험조건에 따라 임파종 L 1210으로 이식된 마우스들의 각각의 배치는 9마리의 마우스들로 이루어진다.

처리 100

CRL 8294 생성물은 복강내로 단독으로 투여된다. 생성물의 제 1 주입은 이식후 7일째(D7)에 1.25mg/kg의 투여량으로 연속 3주 동안 주당 3회 주입율(월요일, 수요일 및 금요일)로 실행된다.

처리	T/C(%로 표시)
100(CRL 8294)	136

일반식 (I)의 CRL 8294 화합물은 피하 임파종 L 1210의 모델에서 항종양 활성을 나타낸다. 이러한 활성은 대조 마우스들의 배치의 중간 마우스의 평균 생존시간과 비교하여, 처리된 마우스들의 배치의 중간 마우스의 평균 생존시간의 상당한 연장에 의해 특징화된다.

4- 허용/세포독성 활성 비율

평균 IC₅₀값(nM로 표시)(연구된 각각의 12개의 종양주들에서 얻어진 개별적인 세포독성 활성으로부터 계산된)과 IC₅₀값에 대한 MTD값의 비율을 취하므로써 계산된 MTD/IC₅₀비율의 결과들을 하기 표 6에 나타낸다. MTD/IC₅₀은 무차원 수로 표시된다.

CRL 화합물들	IC₅₀(nM)	MTD/IC₅₀	MTD/IC₅₀*
CRL 8388(실시예 4)	6200	0.0016	1
CRL 8293(실시예 1)	1250	0.008	5
CRL 8294(실시예 1)	1450	0.007	4.4
CRL 8363(실시예 2)	500	0.02	12.5
CRL 8364(실시예 2)	270	0.019	12
CRL 8367(실시예 3)	1650	0.006	3.8
CRL 8396(실시예 5)	600	0.033	20.6
CRL 8400(실시예 6)	380	0.42	262
CRL 8401(실시예 6)	53	3	1870
CRL 8440(실시예 7)	10	0.42	1240
CRL 8441(실시예 8)	5000	3	19.8

* : 여러가지 화합물들의 MTD/IC₅₀비율은 참고적으로 CRL 8388을 1로 하여, 그에 대한 비율로 계산되었다.

일반식 (I)과 일반식 (Ia)의 화합물들은 상기 기술된 실험조건들하에서 시험관내와 생체내 모두에서 상당한 항종양 활성을 나타낸다. 그들은 MTT 비색 테스트들의 결과에 의해 나타내어진 바와 같이, 시험관내에서의 종양세포들의 성장을 억제한다. 그들은 HI-MXT와 HS-MXT 종양들의 생체내 성장을 상당히 억제하고, 대조 마우스들의 배치의 중간 마우스의 평균 생존시간과 비교하여, 임파종 L 1210이 이식되고 처리된 마우스들의 배치의 중간 마우스의 평균 생존시간을 상당히 증가시킨다.

세포독성 특성때문에, 일반식 (I)과 일반식 (Ia)의 화합물들은, 기술된 바와 같이 또는 허용가능한 약제염들 또는 용매 화합물의 형태로, 암종양과 그들의 전이의 치료에 필요한 약제의 활성성분들로서 사용될 수 있다.

일반식 (I)과 일반식 (Ia)의 화합물들은 일반적으로 체표면적 ㎡당 또는 중량의 kg당 필요한 투여량 유닛으로 투여된다. 상기 투여량 유닛은 활성 성분과 하나 (또는 그 이상의) 약제학적 부형제(들)이 혼합된 약제학적 조성물로 제제화되는 것이 바람직하다.

일반식 (I)과 일반식 (Ia)의 화합물들은, 각각의 치료의 처리 싸이클 수의 함수로서, 급성기에서 치유적 처리를 위해 0.05∼350mg/체표면적㎡의 투여량으로, 바람직하게는 0.5∼50mg/㎡/일의 투여량으로, 치료가 필요한 환자의 암 병리학에 따라서 사용될 수 있다. 유지 처리를 위해서, 일반식 (I)과 일반식 (Ia)의 화합물들은 치료의 처리싸이클 수에 따라서 0.05∼25mg/㎡/일의 투여량으로, 바람직하게는 0.1∼1.5mg/㎡/일의 투여량으로 사용되는 것이 유리할 것이다. 그들은 강력한 복합화학요법을 위한 프로토콜에서 사용되는 항종양 약물과 조합하여 사용될 수 있다.

구강투여 또는 정맥내 투여를 위한 본 발명의 약제학적 조성물에 있어서, 활성 성분은 인간의 치료법에 적합한 통상의 약제학적 담체와의 혼합물로서, 유닛 투여의 형태로 투여될 수 있다. 적당한 유닛 투여 형태들은 선택적으로 셀 수 있는 정제와 같이 구강으로 투여되는 형태들 또는 젤라팀 캡슐, 이식 투여 형태 및 정맥내 투여 형태들을 포함한다.

비경구적 투여(일정 유속으로 정맥내 주입)에 있어서, 살균 수용성 현탁액, 살균 등장 식염수 용액, 또는 약물학적으로 허용가능한 분산제 및/또는 가용화제, 예컨대 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 또는 β-싸이클로덱스트린을 포함하는 살균 주사제 용액이 사용된다.

따라서, 1∼24시간 동안의 주입을 위한 정맥내 주입용 수용액을 제조하기 위해서, 다음의 공용매가 사용될 수 있다: 에탄올과 같은 알코올; 또는 폴리에틸렌 글리콜 또는 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜 및 Tween 80과 같은 친수성 계면활성제.

정제 형태의 고체 조성물이 제조될 경우, 소듐 라우릴 설페이트와 같은 습윤제가 초미분쇄되거나 또는 초미분쇄되지 않은 활성 성분들에 첨가될 수 있고, 전체의 조합물은, 예컨대 실리카, 젤라틴, 전분, 락토오스, 마그네슘 스테아레이트, 탈크, 아라비아 검 등과 같은 약제학적 담체와 혼합될 수 있다. 정제들은 슈크로오스, 다양한 폴리머들, 또는 다른 적당한 물질들로 코팅될 수 있고, 선택적으로 정제들은 활성이 연장되거나 지연되어, 그 결과 미리 결정된 양의 활성 성분들이 연속적으로 방출되도록 처리될 수 있다.

젤라틴 캡슐의 제조는 활성 성분을 글리콜 또는 글리세롤 에스테르와 같은 희석제와 혼합하고, 얻어진 혼합물을 유연한 또는 단단한 젤라틴 캡슐내로 통합시키므로써 얻어진다.

또한 활성 성분은, 선택적으로 하나 이상의 지지체 또는 첨가제를 포함하는, 마이크로캡슐의 형태로 또는 초미구의 형태로 제제화될 수 있다.

활성 성분은 또한 시클로덱스트린, 예컨대 α-, β- 또는 γ-시클로덱스트린, 2-히드록시프로필-β-시클로덱스트린 또는 메틸-β-시클로덱스트린과의 복합체의 형태로 제공될 수 있다.

일반식 (I)과 일반식 (Ia)의 화합물은 강력한 세포독성 활성에 의해 대부분의 고체 종양의 치료에 사용될 것이고, 특히 뇌종양, 폐암, 난소종양과 유방종양, 자궁내막암, 결장직장암, 전립선암과 고환종양들의 치료에 사용될 것이다.

Claims

다음 일반식의 화합물들 및 이들의 약제학적으로 허용가능한 산부가염:

여기에서:

R₁, R₂, R₃, R₄및 R₅는 수소, 할로겐, C₁∼C₆알킬기, 히드록실, -CHO, -OR₈, -COOH, -CN, -CO₂R₈, -CONHR₈, -CONR₈R₉, -NH₂, -NHR₈, -N(R₈)₂, -NH-CH₂-CH₂-N(CH₃)₂, -NH-CH₂-CH₂-Cl, -NHCOR₈, 몰포리노, 니트로, SO₃H,로부터 선택되고,

상기에서 R₈및 R₉는 C₁∼C₆알킬기와 페닐(C₁∼C₄)알킬기로부터 선택되고, Ar은 C₆∼C₁₄아릴기이며,

R₆는 수소, 할로겐, C₁∼C₆알킬, 또는 R₁₀이 할로겐 또는 -OH, (C₁∼C₆)알콕시기 또는 -O-CO-(C₁∼C₆)알킬기로부터 선택되며 n은 1∼6인 -(CH₂)_nR₁₀기, -CN, -CO₂Et, 또는 R₁₁이 C₁∼C₆알킬기 및 페닐(C₁∼C₄)알킬기로부터 선택되는 -COR₁₁기, 및 R₁₂와 R₁₃이 수소 또는 C₁∼C₆알킬, 페닐(C₁∼C₄)알킬 또는 R₁₄가 할로겐, (C₁∼C₆)알콕시 및 -N(CH₃)₂기로부터 선택되며 n은 1∼6인 -(CH₂)_nR₁₄기로부터 서로 독립적으로 선택되는 -NR₁₂R₁₃기로부터 선택되고,

R₇은 수소, (C₁∼C₆)알킬, 페닐(C₁∼C₄)알킬, R₁₅와 R₁₆이 수소, C₁∼C₆알킬, 페닐(C₁∼C₄)알킬 타입의 기들로부터 서로 독립적으로 선택되는 -NR₁₅R₁₆기, 및 R₁₇이 수소, 할로겐 또는 -OH 또는 (C₁∼C₆)알콕시기로부터 선택되며 n은 1∼6인 -(CH₂)_nR₁₇로부터 선택된다.
제 1항에 있어서,

R₁, R₂, R₃, R₄및 R₅는 수소, 할로겐, C₁∼C₆알킬기, 히드록실, -CHO, -OR₈, -COOH, -CN, -CO₂R₈, -CONHR₈, -CONR₈R₉, -NH₂, -NHR₈, -N(R₈)₂, -NH-CH₂-CH₂-N(CH₃)₂, -NHCOR₈, 몰포리노, 니트로, SO₃H,로부터 선택되고,

R₈및 R₉는 C₁∼C₆알킬기로부터 선택되고, Ar은 C₆∼C₁₄아릴기로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 일반식 I 또는 일반식 Ia의 화합물.
제 1항에 있어서,

R₁, R₂, R₃, R₄및 R₅는 수소, 할로겐, C₁∼C₆알킬기, 히드록실, -OR₈, -NO₂, -NH₂, -NHR₈, -NH(R₈)₂, -NH-CH₂-CH₂-N(CH₃)₂, -NH-CH₂-CH₂-Cl, -NHCOR₈로부터 선택되고, 여기서 R₈은 C₁∼C₆알킬기로부터 선택되며,

R₆는 수소, R₁₀이 할로겐, -O-CO-CH₃기로부터 선택되는 -(CH₂)_nR₁₀기, C₁∼C₆알킬기, 및 R₁₂와 R₁₃이 수소 또는 C₁∼C₆알킬기, 벤질기 또는 R₁₄가 할로겐 또는 (C₁∼C₆)알콕시기와 -N(CH₃)₂기로부터 선택되며 n은 1∼6인 -(CH₂)_nR₁₄기로부터 서로 독립적으로 선택되는 -NR₁₂R₁₃기로부터 선택되고,

R₇은 수소 또는 C₁∼C₆알킬, 벤질, R₁₅와 R₁₆이 수소, C₁∼C₆알킬 및 벤질로부터 선택되는 -NR₁₅R₁₆기, 및 R₁₇이 수소, 할로겐 또는 -OH 또는 (C₁∼C₆) 알콕시기로부터 선택되며 n은 1∼6인 -(CH₂)_nR₁₇타입의 기들로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 일반식 I 또는 일반식 Ia의 화합물 및 이들의 약제학적으로 허용가능한 산부가염.
제 3항에 있어서, R₁, R₂, R₃, R₄및 R₅중의 적어도 하나가 -OR₈기인 것을 특징으로 하는 일반식 I 또는 일반식 Ia의 화합물.
제 3항에 있어서,

R₁은 수소, 할로겐 또는 히드록실기, 메톡시기, 니트로기, -NH₂, -NHCH₃, -NH-CH₂-CH₂-N(CH₃)₂, -NH-CH₂-CH₂-Cl 또는 -NHCOCH₃기로부터 선택되고,

R₂는 수소이고,

R₃와 R₅는 수소 또는 히드록실기 또는 메톡시기로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 일반식 I 또는 일반식 Ia의 화합물 및 이들의 약제학적으로 허용가능한 산부가염.
제 3항에 있어서,

11-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온,

11-클로로-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온,

4-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온,

4, 11-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온,

4,9-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온,

9-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온,

9,11-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온,

3-아세톡시메틸-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온,

3-아세톡시메틸-9-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온, 또는

2-(2-클로로에틸)-7H-피리도[4,3,2-de][1,7]페난트롤린-7-온인 것을 특징으로 하는 일반식 (I)의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 산부가염.
제 3항에 있어서,

8-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온,

8-클로로-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온,

4-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온,

4,8-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온,

4,10-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온,

10-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온,

8,10-디메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온,

3-아세톡시메틸-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온,

3-아세톡시메틸-9-메톡시-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온, 또는

2-(2-클로로에틸)-7H-피리도[4,3,2-de][1,10]페난트롤린-7-온인 것을 특징으로 하는 일반식 (Ia)의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 산부가염.
세포독성 특성에 의하여 암세포 종양 및 그들의 전이를 치료하기 위한 제 1항 내지 제 7항중 어느 한 항에 따른 화합물들로부터 선택된 유효량의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
항암 약제의 제조에 있어서 제 1항 내지 제 7항중 어느 한 항에 따른 화합물들의 사용.
다음의 단계들로 이루어진 것을 특징으로 하는 제1항에 따른 화합물의 제조방법 :

a) 다음 일반식의 퀴놀린디온과

다음 일반식의 아자디엔을 헤테로 디엘스-알더반응에 따라 반응시켜,

(여기서, X=CH₃)

다음 일반식들의 화합물의 혼합물을 얻는 단계;

b) 일반식 II 및 일반식 IIa의 화합물을 임의로 분리시키는 단계;

c₁) 이어서, 다음 일반식의 엔아민을 얻기 위해서, 일반식 II 및/또는 일반식 IIa의 화합물을 디메틸포름아미드 디메틸 아세탈과 반응시키고,

그런 다음, R₆및/또는 R₇치환기를 도입하기 위해서 엔아민을 기능화시키고, 일반식 I 및/또는 일반식 Ia의 화합물을 얻기위하여 고리화시키는 단계,

또는

c₂) 일반식 I 및/또는 일반식 Ia의 화합물을 얻기 위해서, 동시에 기능화 및 고리화시키는 단계;

d) 일반식 I 및 일반식 Ia의 화합물을 임의로 분리시키는 단계.
다음의 단계들로 이루어진 것을 특징으로 하는, R₆와 R₇이 수소원자인 제1항에 따른 일반식 I 또는 일반식 Ia의 화합물의 제조방법 :

a) 다음의 일반식 퀴놀린디온과

다음의 일반식 아자디엔을 헤테로 디엘스-알더 반응에 따라 반응시켜,

(여기서, X=CH₂-CH₂-NHBoc)

다음 일반식들의 화합물의 혼합물을 얻는 단계;

b) 일반식 II 및 일반식 IIa의 화합물들을 임의로 분리시키는 단계;

c) 일반식 I 및/또는 일반식 Ia의 화합물을 얻기 위해서, 일반식 II 및/또는 일반식 IIa의 화합물을 고리화시키는 단계;

d) 일반식 I 또는 일반식 Ia의 화합물을 임의로 분리시키는 단계.
유효량의 제 1항에 따른 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 암종양 환자의 치료방법.