KR20020050048A - Lactobacillus sp.DW-1 동정 시스템 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 숙주특성이 높은 유산균을 개의 장관으로부터 직접분리하여 선별된 유산균의 동정, 대량생산용 배지조성을 확립하는 것이다.
본 발명에 따르면 개의 분변으로부터 유산균을 분리하여 내산성과 내담즙성이 우수한유산균을 선발, 정장작용이 우수한 유산균의 선발 및 유해군억제 유산균을 선별하여 이 선별된 균주를 API Kit등을 이용하여 동정하고 유산균을 배양하는 하는 기술이다.

Description

Lactobacillus sp.DW-1 동정 시스템{Identification system for Lactobacillus sp DW-1}
기존의 유산균은 병원성 E.Coli, Salmonella 등 유해한 병원성 미생물이 성장하면서 유산균의 성장에 방해를 주고 병원성 미생물로 인해 살균을 한다음 유산균을 사용해야 되는데 살균시 필요한 유산균이 거의 사멸하기 때문에 유산균을 사용하기전 긴 배양시간이 필요하고 활성이 좋은 유산균을 배양하기가 힘들며 또한 비용도 많이 든다. 이러한 문제점으로 주로 수입에 의존하는 실정이다.
본발명은 선발된 유산균을 E.Coli, Salmonella 등과 BHI agar에 배양하고 활성이 좋은 균주를 Bergey' s manual of systematic bacteriology에 근거하여 균주를 동정하여 유산균을 추출하는 방법이다.
공동으로 배양하여 필요한 유산균만을 추출하기 때문에 다른 미생물과 같이 배양하기 때문에 항생력이 강해 활성이 좋으며 또한 비용이 적게 들고 필요로 하는 유산균만을 추출하기 때문에 다른 미생물을 제거하기 위한 2차적인 소독이 필요없이 직접 유산균을 사용할 수 있다. 또한 대량 배양이 가능하여 대량생산이 가능하다.
이와 같은 종래의 배양보다 한단계 높은 개의 분변으로부터 직접 추출한 유산균으로 개의 소화 생리에 적합한 유산균을 추출할 수 있고 내산성 및 내담즙성이 기존 유산균보다 우수하여 대부분 소장까지 도달케하며 정장작용 및 유해균 억제력이 높아 설사 방지 및 질병 발생을 억제 할 뿐만 아니라 기존의 유산균 배양보다 활성이 높고 배양가격이 저렴한 배양조건 확립으로 경제성이 있는 유산균을 배양하는 기술이다.
(1) 본 발명은 다양한 종류의 분변 샘플을 수집하여 적정 희석시킨 다음 MRS agar에 도말하여 적정온도(37℃) 및 적정시간(24∼48시간)동안 배양하여 균주들을 분리한다.
(2) 인공위액(pH2.5) 및 인공 담즙액(oxgall함유)에서 적정시간 처리한 후 유산균을 MRS agar에 도말하여 내산성 및 내담즙성을 획득한다.
(3) In vitro 및 in vivo조건에서 정장작용이 우수한 유산균을 선발한다
(In vitro 조건설정을 위해 E. coli, Enterobacter sp. 등을 복합적으로 함유하는 실험실적 조건 설정)
(4) 선발된 유산균을 병원성 E. coli, Salmonella sp.등과 공동배양하여 억제효과를 나타내는 유산균을 최종적으로 선발한다. 이때, 유산균 및 병원성균이 동시에 성장할 수 있는 BHI broth를 이용한다
(유산균 균수검사 - MRS agar, 병원성균 검사 - BHI agar이용)
(5) 선발된 균주를 Bergey's manual of systematic bacterioiogy에 근거하여 균주를 동정한다. 균주 동정을 위해 현미경 검경, 생리학적 test, API 50 CHL을 이용한 생화학적 test등을 통하여 균주를 동정한다.
(6) 유산균의 대량배양에 적합한 배양조건 확립을 위해 배지조성(yeast extract, skim milk, whey, glucose, soybean meal, molasses 등), 초기 pH, 배지전처리 방법 등을 달리하여 최적의 고가배지인 MRS broth와 비교하여 최적의 유산균 대량 배양조건을 확립한다.
개의 분변으로부터 직접 추출한 유산균으로 개의 소화생리에 적합한 유산균을 추출하여 유산균을 배양하고 활성이 기존의 미생물보다 뛰어나기 때문에 소장까지 도달하고 정장작용과 유해균 억제력이 높아 설사방지 및 질병발생을 억제 할 수 있으며 기존 유산균 대량배양 조건보다 유산균 활성이 높고 배양가격이 저렴한 배양조건 확립으로 경제성이 있는 유산균 배양.

Claims (3)

  1. Lactobacillus sp.DW-1 동정 시스템 개발
  2. 상기 1항의 개의 분변으로부터 추출한 유산균 및 분리한 유산균들중 내산성, 내담즙성이 우수한 유산균 제조방법.
  3. 상기 1 항의 정장작용 및 유해균 억제력이 높아 설사방지 및 질병억제시키는 유산균 제조방법.
KR1020000079412A 2000-12-20 2000-12-20 Lactobacillus sp.DW-1 동정 시스템 KR20020050048A (ko)

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