KR20010102234A - 박카틴 ｉｉｉ의 ｃ-7 금속 알콕사이드 - Google Patents

Abstract

본 발명은 C-7 위치에서 금속 알콕사이드를 함유하는 박카틴 III 유도체 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다.

Description

박카틴 ＩＩＩ의 Ｃ-7 금속 알콕사이드 {C-7 METAL ALKOXIDES OF BACCATIN III}

다양한 탁산(taxane) 화합물이 항종양 활성을 나타내는 것으로 공지되어 있다. 이러한 활성의 결과로서, 과학 및 의학 분야에서 탁산에 대한 관심이 증가되고 있다. 이중에는 탁솔(taxol), 보다 최근에는 "파클리탁셀"로서 공지되어 있는 화합물이 있다. 파클리탁셀은 수가지 다양한 종양의 화학요법 치료에서 인정되었으며, 임상 실험은 파클리탁셀이 광범위한 효능성 항-백혈병 및 종양 억제 활성이 있음을 나타낸다. 파클리탁셀은 하기 화학식을 갖는다:

파클리탁셀은 수가지 주목종(속명: 탁수스(Taxus), 종명 : 탁사시(Taxaceae))에서 발견된 천연 탁산 디터페노이드이다. 불행히도, 이 화합물의 농도는 매우 낮다. 보편적으로, 주목 나무의 껍질이 가장 높은 농도의 파클리탁셀을 생산하지만, 파클리탁셀 1Kg을 얻는데는 약 16,000파운드의 나무껍질이 필요하다. 이와 같이, 분리를 통한 파클리탁셀의 이용성에 대한 장기 전망은 밝지 않다.

주목 나무중의 파클리탁셀는 매우 낮은 농도로 존재할지라도, 박카틴 III, 세팔로만닌(cephalomannine), 10-데아세틸박카틴 III 등과 같은 그 밖의 다양한 탁산 화합물이 존재하는데, 이들은 또한 주목으로부터 추출될 수 있다. 이들 기타 탁산 화합물의 일부는 더 높은 수율로 보다 용이하게 추출된다. 실제로, 비교적 높은 농도의 10-데아세틸박카틴 III는 재생시킬 수 있는 자원으로서 주목의 잎으로부터 추출될 수 있다.

성공적으로 파클리탁셀을 합성하기 위해서, 키랄, 비-라세미 측쇄, 쓸모있는 박카틴 III 본쇄의 풍부한 천연 자원 및 이들을 결합시키는 효과적인 수단에의 용이한 접근이 필요하다. 그러나, 보호된 박카틴 III 본쇄에의 상기 측쇄의 에스테르화 반응은 반구형의 보호된 박카틴 III 구조의 오목한 영역내에 위치한 박카틴 III의 장애된 C-13 히드록실 때문에 어렵다.

파클리탁셀의 반합성을 위한 한 가지 기술이 시스티(Sisti) 등의 미국 특허 제 5,684,175호에 기술되어 있다. 이 특허에서, 파클리탁셀은 C7-TES 박카틴 III을 N-카르바메이트 보호된 C2' 히드록실 벤질형 보호된 (2R,3S)-3-페닐이소세린과 결합시킴으로써 합성되며, 여기에서 C2' 히드록실은 벤질옥시메틸(BOM) 또는 벤질과 같은 수소첨가가능한 벤질형 기로 보호된다. 보호된 박카틴 III과 보호된 측쇄의 에스테르화 반응 이후에, 화합물은 적합하게 탈보호화, 아실화 및 추가 탈보화되어 파클리탁셀을 수득할 수 있다.

파클리탁셀의 반합성을 위한 또 다른 기술이 시스티 등의 미국 특허 제 5,750,737호에 공지되어 있다. 이 특허에서, C7-CBZ 박카틴 III은 C3'-N-CBZ-C2'-O-보호된 (2R,3S)-3-페닐이소세린 측쇄와 에스테르 반응을 한 후, 탈보호되어 파클리탁셀을 생성한다. 이 특허에는 C7-CBZ 박카틴 III이 n-부틸 리튬 및 벤질 클로로포르메이트(CBZ-Cl)를 박카틴 III에 첨가함으로써 생성된다고 교시되어 있다. 대안적으로, 이 특허에는 C7-CBZ 박카틴 III이 n-부틸 리튬, 아세틸 클로라이드 (또는 아세트산 무수물) 및 벤질 클로로포르메이트를 첨가함으로써 10-데아세틸박카틴 III으로부터 직접 합성될 수 있다고 교시하고 있다.

파클리탁셀을 합성하기 위한 기존의 기술이 확실한 장점을 가질지라도, 여전히 항암 화합물과 이것의 합성 및 반합성에 유용한 중간체를 제조할 수 있는 개선된 화학 공정이 요구되고 있다. 본 발명은 금속 알콕사이드 중간체를 통해 C-7 보호된 박카틴 III 및 이의 유사체를 합성하는 방법에 관한 것이다. 그 다음, C-7 CBZ 보호된 박카틴 III을 적합하게 보호된 측쇄로 에스테르화시킨 후에 생성된 화합물을 탈보호화시켜 파클리탁셀 또는 다른 유사체를 수득할 수 있다.

본 발명은 항종양 화합물 파클리탁셀(paclitaxel)의 제조에 유용한 중간체에 관한 것이다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 박카틴(baccatin) III의 C-7 금속 알콕사이드 및 이의 유사체 뿐만 아니라, 이를 제조하는 방법에 관한 것이다.

발명의 요약

본 발명의 목적은 파클리탁셀을 합성하는데 유용한 신규한 중간체를 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 파클리탁셀의 제조에 유용한 신규한 중간체 화합물을 제조하는 방법을 제공하는 것이다.

이와 같이 본 발명은 하기 화학식의 신규한 화학 중간체에 관한 것이다:

상기 식에서, R은 알킬기이고, M⁺상대이온은 칼륨 상대이온 및 나트륨 상대이온으로 이루어진 군으로부터 선택되는 알칼리 금속 상대이온이다. 바람직한 알킬기는 메틸기이다.

본 발명은 또한 박카틴 III 또는 10-데아세틸박카틴 III인 출발 화합물로부터 상기 화학식(상기 식에서, R은 알킬기이고, M⁺상대이온은 칼륨 상대이온 및 나트륨 상대이온으로 이루어진 군으로부터 선택되는 알칼리 금속 상대이온이다)의 화합물을 제조하는 방법에 관한 것이다. 이 방법은 제 1 용매중에 출발 화합물을 용해시켜 제 1 용액을 형성한 후에 이것을 -20℃ 이하로 냉각시키는 단계를 포함한다. 그후, 칼륨 염기 및 나트륨 염기로 이루어진 군으로부터 선택되는 알칼리성 염기를 제 1 용액에 첨가하여 C-7 위치에서 금속 알콕사이드를 갖는 중간체 화합물을 형성한다. 그후, 중간체 화합물이 이미 C-10 위치에서 아세틸기를 갖지 않는 제 1 용액중에 존재하는 중간체 화합물 어느 것이나 선택적으로 C-10 위치에서 아실화된다.

바람직하게, 출발 화합물은 테트라히드로푸란(THF)중에 용해되고, 제 1 용액은 질소 분위기하에서 냉각된다. 알칼리성 염기는 바람직하게 칼륨 히드라이드 또는 나트륨 히드라이드이다. 출발 화합물이 10-데아세틸박카틴 III인 경우에, 2 당량 이상의 알칼리성 염기가 첨가된다. 알칼리성 염기가 첨가된 후에, 제 1 용액은 약 5분 동안 교반된다. 중간체 화합물은 산 클로라이드, 바람직하게는 아세틸 클로라이드, 또는 아세트산 무수물을 첨가함으로써 선택적으로 아실화된다. 퀀칭제, 바람직하게는 암모늄 클로라이드를 첨가하여 과량의 알칼리성 염기 및 아실화제를 제거할 수 있다. 바람직한 방법은 R이 메틸기인 화합물을 생성하도록 수행된다.

본 발명의 상기 및 기타 목적은 본 발명의 예시적 구체예에 대한 하기의 상세한 설명으로부터 보다 용이하게 인지되고 이해될 것이다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 광범위하게 신규한 화합물, 즉 박카틴 III의 C-7 금속 알콕사이드 및 이의 유사체에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 화합물을 제조하는 방법에 관한 것이다. 상기 화합물은 파클리탁셀 및 파클리탁셀 유사체의 효과적인 제조에 명백하게 유용하다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 C-7 CBZ 박카틴 III의 합성에서 유용한 중간체로서 박카틴 III의 C-7 금속 알콕사이드를 기술하고 있으며, 이것은 파클리탁셀의 제조에 유용한 중간체이다. C-7 CBZ 박카틴 III은 C-2'에서 수소첨가가능한 벤질형 히드록실 보호기를 갖는 N-CBZ-3-페닐이소세린산으로 에스테르화되어 보호된 박카틴 III 본쇄의 C-13 히드록실에서 측쇄를 결합시킬 수 있다. 본원에 기술된 일반적인 공정은 C-7 금속 알콕사이드 중간체를 통한 C-7 CBZ 박카틴 III 본쇄의 생성, C-2'에서 수소첨가가능한 벤질형 보호기를 갖는 적합하게 보호된 N-CBZ-3-페닐이소세린산을 이용한 C-7 CBZ 박카틴 III 본쇄의 축합, 및 이후 탈보호화를 이용하여 파클리탁셀을 제조하는 것과 관련된다.

A. C-7 금속 알콕사이드 중간체를 통해 C-7 CBZ 보호된 박카틴 III을 생성하는 방법

본 발명에 따라, C-7 CBZ 보호된 박카틴 III을 생성하는 2가지 대안적인 방식이 기술되어 있다. 한편, 박카틴 III은 C-7 부위에서 탈보호되어 C-7 CBZ 박카틴 III을 수득할 수 있다. 반면에, 10-데아세틸박카틴 III (10-DAB)는 박카틴 III 중간체를 통하지 않고서 C-7 CBZ 박카틴 III로 직접 전환될 수 있다. 박카틴 III으로부터 생성하는 방법은 수율 및 단순화의 면에서 유리하다.

박카틴 III 보다 10-데아세틸박카틴 III이 천연적으로 훨씬 풍부하고, 비용이 저렴하기 때문에, 10-데아세틸박카틴 III을 사용하는 방법이 유용하나, 이와 같은 대안적인 방법을 사용할 경우 수율이 감소된다.

방법 1

(박카틴 III 사용)

C-7 CBZ 박카틴 III은 화학식을 가지며, 하기반응식 I에 따라 박카틴 III으로부터 합성될 수 있다:

박카틴 III을 무수 THF(테트라히드로푸란)중에 용해하여 제 1 용액을 형성하고, 제 1 용액은 질소 분위하에서 -20℃ 미만의 저온으로 냉각시킨다. 그 다음, 칼륨 히드라이드 또는 나트륨 히드라이드(헥산중의 1.6M)와 같은 알칼리성 염기를 제 1 용액에 한방울씩 첨가하여 제 2 용액을 형성하고, 제 2 용액을 저온에서 약 5분 동안 교반시킨다. 이렇게 하여 하기 화학식의 박카틴 III의 C-7 금속 알콕사이드를 형성한다:

상기 식에서, M⁺은 K⁺또는 Na⁺이고, R은 CH₃이다.

벤질 클로로포르메이트(CBZ-Cl)을 제 2 용액에 한방울씩 첨가하여 제 3 용액을 형성한 후, 약 1시간에 걸쳐 제 3 용액을 교반시키면서 0℃로 가온시킨다. 제 3 용액을 차거운 포화된 암모늄 클로라이드로 퀀칭시켜 과량의 알칼리성 염기 및CBZ-Cl을 제거하고, 혼합물을 진공하에서 농축시켜 제 1 잔여물을 수득한다. 다음, 제 1 잔여물을 에틸 아세테이트중에 취하고, 물로 한번 세척하여 원하지 않은 염을 제거한다. 다음, 잔여물을 소금물로 세척한다. 그 다음, 유기층을 건조시키고 진공하에서 농축시켜 제 2 잔여물을 수득한다. 제 2 잔여물을 재결정화시키거나 에틸 아세테이트:헥산을 이용한 칼럼 크로마토그래피로 정제시켜 백색 고형의 C-7 CBZ 박카틴 III을 수득하였다.

당업자들은 칼륨 히드라이드 및 나트륨 히드라이드와 다른 알칼리성 염기를 사용하여 상응하는 하기 화학식의 박카틴 III의 C-7 금속 알콕사이드를 형성할 수 있다:

상기 식에서, M⁺은 K⁺또는 Na⁺이고, R은 CH₃이다.

방법 2

(10-데아세틸박카틴 III의 사용)

대안적으로, C-7 CBZ 박카틴 III은 하기 반응식에 따라 10-데아세틸박카틴III으로부터 직접 합성할 수 있다:

여기에서, 10-DAB를 THF중에 용해시켜 제 1 용액을 형성하고, 제 1 용액은 질소 분위하에서 -20℃ 미만의 저온으로 냉각시킨다. 그 다음, 칼륨 히드라이드 또는 나트륨 히드라이드(헥산중의 1.6M)와 같은 2 당량 이상의 알칼리성 염기를 제 1 용액에 한방울씩 첨가하여 제 2 용액을 형성하고, 제 2 용액을 저온에서 약 5분 동안 교반시킨다. 바람직하게는, 아세틸 클로라이드(1 당량)를 제 2 용액에 첨가하여 제 3 용액을 형성하고, 이를 약 30분 동안 저온에서 교반시킨다. 대안적으로, 아세틸 무수물(1 당량)이 아세틸 클로라이드 대신에 사용되어 10-DAB를 아실화시킬 수 있다.

또 다른 경우에, 벤질 클로로포르메이트(1 당량)를 제 3 용액에 첨가하여 제 4 용액을 형성한 후, 이를 저온에서 부가 30분 동안 교반시킨 후, 30분에 걸쳐 0℃로 가온시킨다. 그후, 제 4 용액을 저온에서 차거운 포화된 암모늄 클로라이드로 퀀칭시켜 과량의 알칼리성 염기, 아세틸 클로라이드 및 CBZ-Cl을 제거하고, 혼합물을 실온으로 가온시킨다. 용매를 진공하에서 제거하여 초기 잔여물을 수득하고, 에틸 아세테이트중에 취하고 물로 세척하여 원하지 않은 염을 제거한다. 다음, 잔여물을 소금물로 세척하고, 건조시키고 진공하에서 농축시켜 최종 잔여물을 수득한다. 최종 잔여물을 크로마토그래피(실리카 겔 헥산:에틸 아세테이트)로 정제시켜 C-7 CBZ 박카틴 III을 수득하였다. 이러한 방법은 반응에서 형성되는 중간체가 박카틴 III의 C-7 금속 알콕사이드, 즉 중간체가 박카틴 III 자체가 아님에 따라, 10-DAB로부터 C-7 CBZ 박카틴 III의 직접적인 합성을 나타냄을 주지하는 것이 중요하다.

방법 1 및 2 모두가 구체적으로 박카틴 III을 생성하는 방법에 관한 것일지라도, 단순히 방법 2에서 적당한 산 클로라이드를 제 2 용액으로 치환함으로써 박카틴 III 유사체가 방법 2의 공정으로부터 생성될 수 있음이 당업자에게 자명해야 한다. 이렇게 하여 C-10에서 상이한 알킬기를 갖는 유사체가 형성된다. 상기 공정에서 생성된 중간체는 다음과 같다:

상기 식에서, M⁺은 K⁺또는 Na⁺이고, R은 CH₃또는 또 다른 알킬기이다.

C-7 CBZ 박카틴 III의 생성에 대한 방법 1 및 2 모두는 일반화된 방법으로서 나타낼 수 있음이 인지되어야 한다. 일반화된 방법은 제 1 용매중에 박카틴 III 및 10-데아세틸박카틴 III으로 이루어진 군으로부터 선택되는 출발 화합물을 용해시켜 제 1 용액을 형성하는 단계로부터 출발한다. 그 다음, 제 1 용액을 -20℃ 이하의 온도로 냉각시킨다. 그후, 알칼리성 염기를 제 1 용액에 첨가하여 C-7 위치에서 금속 알콕사이드를 갖는 중간체 화합물을 형성한다. 다음, 10-DAB 출발 화합물에 대해서 요구되는 바와 같이, 이 방법은 C-10 위치에서 제 1 용액중에 존재하는 제 1 중간체 화합물 중 어느 것이나 선택적으로 아실화시키는 것을 포함하며, 이때 중간체 화합물은 C-10 위치에서 이미 아세킬기를 갖지 않아 박카틴 III의 C-7 금속 알콕사이드의 제 2 용액을 생성한다. 대안적으로, 제 1 중간체 화합물은 적당한 산 클로라이드로 아실화되어 C-10 에서 다양한 알킬기를 갖는 유사체를 형성한다. 물론, 출발 화합물이 박카틴 III 인 경우에, C-10 위치는 이미 아세틸기를 갖는다. 어느 경우에나, 이 방법은 제 2 용액에 CBZ-Cl을 첨가하여 C-7 CBZ 박카틴 III의 제 3 용액을 형성하는 단계를 포함할 수 있다.

B. 3-페닐이소세린 측쇄를 생성하는 방법

C3' N-CBZ C-2' 벤질형 보호된 (2R,3S)-3-페닐이소세린 측쇄를 생성하는 방법은 이미 시스티 등의 미국 특허 제 5,684,175호(발명의 명칭: "C-2' Hydroxyl-Benzyl Protected, N-Carbamate Protected (2R,3S)-3-Phenylisoserine and Production Process Therefor")에 공지되어 있다. 이 화합물은 하기 화학식을 갖는다:

여기에서, C-2' 히드록실상의 P₁보호기는 벤질옥시메틸(BOM) 또는 벤질과 같은 수소첨가가능한 보호기이다.

C. C-7 CBZ 박카틴 III과 상기 측쇄의 에스테르화

C3' N-CBZ C-2'-보호된 (2R,3S)-3-페닐이소세린 측쇄(여기에서, C-2' 히드록실은 수소첨가가능한 보호기로 보호된다)를 이용한 C-7 CBZ 박카틴 III의 에스테르화는 하기와 같이 수행될 수 있다. 하기에 제시된 바람직한 수소첨가가능한 벤질기는 BOM(벤질옥시메틸)이다. 유용한 반응이 하기에 도시되어 있다:

여기에서, C-7 CBZ 박카틴 III(1 당량) 및 산 측쇄(6 당량)을 톨루엔 중에 용해시킨다. 이 혼합물에, 0.5 당량의 DMAP(디메틸아미노 피리딘) 및 바람직하게는 6 당량의 디시클로헥실카르보디이미드(DCC)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 30분 내지 1시간 동안 70℃에서 가열한다. 온도 범위는 60 내지 80℃ 일 수 있다. 그러나, 다른 디알킬 카르보디이미드가 DCC 대신 사용될 수 있으며, 한 가지 예는 디이소프로필카르보디이미드이다.

다음, 용액을 실온으로 냉각시키고, 이 용액에 균등한 부피의 에틸 아세테이트 또는 디에틸 에테르를 첨가한다. 그 다음, 생성된 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 이 온도에서 24시간 동안 유지시킨다. 그후, 혼합물을 여과하고, 잔여물을 디에틸 에테르 또는 에틸 아세테이트로 세정한다. 그 다음, 조합된 유기상을 염산(5%), 물 및 마지막으로 소금물로 세척한다. 유기상을 분리하고, 건조시키고, 진공하에서 농축시켜, 하기 화학식의 에스테르화된 화합물을 생성한다:

D. 파클리탁셀에 대한 탈보호화

이제, 상기에서 에스테르화된 화합물은 질소 및 C-7 CBZ기를 제거하고, 질소상에 벤조일기를 놓고, 마지막으로 C-2' 벤질형 보호기를 제거함으로써 파클리탁셀로 전환될 수 있다. CBZ기의 제거, 및 질소에의 벤조일기의 연속 첨가는 하기와 같이 수행된다(BOM은 C-2' 히드록실 부위에서 보호기로서 도시되어 있으며, 벤질기가 또한 사용될 수 있다):

여기에서, 커플링된 생성물은 펄만(Pearlman) 촉매가 첨가된 이소프로판올중에 용해된다. 생성된 혼합물은 24시간 동안 40psi에서 수소첨가되며, 대안적으로 혼합물은 24시간 동안 1기압의 수소하에서 교반될 수 있다. 그후, 혼합물을 규조토를 통해 여과시키고, 진공하에 잔여물로 환원시켰다. 바람직하게는 잔여물을 톨루엔중에 취하고 무수 탄산칼륨을 첨가하였다. 대안적으로, 잔여물을 에틸 아세테이트 또는 톨루엔중에 취할 수 있으며, 트리에틸아민과 같은 3차 아민 염기를 첨가한다. 또 다른 경우에, 그 다음 벤조일 클로라이드를 한방울씩 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반시켰다. 그 다음, 생성된 혼합물을 물 및 마지막에 소금물로 세척한다. 그후 생성된 유기상을 분리하고, 건조시키고 진공하에 농축시켜 C-2' BOM 파클리탁셀을 수득한다.

마지막으로, C-2' BOM은 하기 반응에 따라 제거한다:

BOM 보호된 파클리탁셀을 펄만 촉매가 첨가된 이소프로판올중에 용해시킨다. 이 혼합물을 40psi 수소하에서 24시간 동안 수소화시켜 파클리탁셀을 수득한다.

이상과 같이, 본 발명은 예시적 구체예와 관련하여 상세하게 설명되었다. 본 발명은 종래 기술의 면에서 해석되는 하기 청구범위에 의해 한정되며, 변형 또는 변화가 본 발명의 범위를 벗어나지 않고서 예시적 구체예에서 이루어질 수 있다.

Claims (14)

1. 하기 화학식의 화합물:

   상기 식에서,

   R은 알킬기이고,

   M⁺상대이온은 칼륨 상대이온 및 나트륨 상대이온으로 이루어진 군으로부터 선택되는 알칼리 금속 상대이온이다.
2. 제 1항에 있어서, R이 메틸기임을 특징으로 하는 화합물.
3. 박카틴(baccatin) III 및 10-데아세틸박카틴 III으로 이루어진 군으로부터 선택되는 출발 화합물로부터 하기 화학식의 화합물을 제조하는 방법으로서,

   (a) 제 1 용매중에 출발 화합물을 용해시켜 제 1 용액을 형성하는 단계;

   (b) 제 1 용액을 -20℃ 이하로 냉각시키는 단계;

   (c) 제 1 용액에 칼륨 염기 및 나트륨 염기로 이루어진 군으로부터 선택되는알칼리성 염기를 첨가하여 C-7 위치에서 금속 알콕사이드를 갖는 중간체 화합물을 형성하는 단계;

   (d) 중간체 화합물이 이미 C-10 위치에서 아세틸기를 갖지 않는 제 1 용액중에 존재하는 중간체 화합물의 C-10 위치에서 선택적으로 아실화시키는 단계를 포함하는 방법:

   상기 식에서,

   R은 알킬기이고,

   M⁺상대이온은 칼륨 상대이온 및 나트륨 상대이온으로 이루어진 군으로부터 선택되는 알칼리 금속 상대이온이다.
4. 제 3항에 있어서, 제 1 용매가 테트라히드로푸란(THF)임을 특징으로 하는 방법.
5. 제 3항에 있어서, 냉각 단계가 질소 분위기하에서 수행됨을 특징으로 하는 방법.
6. 제 3항에 있어서, 출발 화합물이 10-데아세틸박카틴 III 이고, 2 당량 이상의 알칼리성 염기가 제 1 용액에 첨가됨을 특징으로 하는 방법.
7. 제 3항에 있어서, 알칼리성 염기가 칼륨 히드라이드 및 나트륨 히드라이드로 이루어진 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법.
8. 제 3항에 있어서, 알칼리성 염기를 첨가한 후에 제 1 용액을 약 5분 동안 교반시킴을 특징으로 하는 방법.
9. 제 3항에 있어서, 출발 화합물이 10-데아세틸박카틴 III 이고, 선택적으로 아실화시키는 단계가 제 1 용액에 산 클로라이드를 첨가함으로써 수행됨을 특징으로 하는 방법.
10. 제 9항에 있어서, 산 클로라이드가 아세틸 클로라이드임을 특징으로 하는 방법.
11. 제 3항에 있어서, 출발 화합물이 10-데아세틸박카틴 III 이고, 선택적으로 아실화시키는 단계가 제 1 용액에 아세트산 무수물을 첨가함으로서 수행됨을 특징으로 하는 방법.
12. 제 3항에 있어서, 제 1 용액을 퀀칭제로 퀀칭시키는 부가 단계를 포함함을 특징으로 하는 방법.
13. 제 12항에 있어서, 퀀칭제가 암모늄 클로라이드임을 특징으로 하는 방법.
14. 제 3항에 있어서, R이 메틸기임을 특징으로 하는 방법.