KR102626669B1

KR102626669B1 - 질환의 예방 및 치료를 위한 화합물 및 이의 용도

Info

Publication number: KR102626669B1
Application number: KR1020197036413A
Authority: KR
Inventors: 엘리제 조머; 피터 쥐. 트래버; 라파엘 니어; 샤론 쉑터; 조셉 엠. 존슨; 라이언 조지
Original assignee: 갈랙틴 사이언시즈, 엘엘씨
Priority date: 2017-05-12
Filing date: 2018-05-11
Publication date: 2024-01-17
Also published as: US11576924B2; CN110869378A; US20200155586A1; MX2019013537A; CA3062648A1; US20230132265A1; JP7204676B2; CN110869378B; ZA201908165B; EP3621973A4; KR20200016246A; JP2020519625A; WO2018209255A1; IL270469A; IL270469B1; BR112019023722A2; AU2018265571B2; IL270469B2; AU2018265571A1; EP3621973A1

Abstract

본 발명의 양태는 갈렉틴 단백질과 결합 친화도를 갖는 신규한 합성 화합물에 관한 것이다.

Description

질환의 예방 및 치료를 위한 화합물 및 이의 용도

발명자들

조머 엘리제, 트래버 피터 쥐., 니어 라파엘, 쉑터 샤론, 존슨 조셉 엠., 조지 라이언

관련 출원(들)

본 출원은 2017년 5월 12일자로 출원된 미국 가출원 연속 번호 62/505,544의 우선권의 이익을 주장하며, 그의 전문이 본원에 참고로 포함된다.

발명의 분야

본 발명의 양태는 하나 이상의 갈락토오스 결합 단백질(갈렉틴으로도 지칭함)에 의해 적어도 부분적으로 매개되는 다양한 질환의 치료를 위한 화합물, 약제학적 조성물, 화합물의 제조 방법 및 치료 방법에 관한 것이다.

갈렉틴은 베타-갈락토오스 함유 당포합체에 결합하는 S-유형 렉틴의 계열이다. 현재까지, 15개의 포유동물 갈렉틴이 분리되었다. 갈렉틴은 세포 부착, 성장 조절, 아폽토시스, 염증, 섬유형성, 종양 발달 및 진행과 같은 서로 다른 생물학적 과정을 조절한다. 갈렉틴은 염증, 섬유증 형성, 세포 부착, 세포 증식, 전이 형성, 혈관신생, 암 및 면역 억제에 관여하는 것으로 나타났다.

본 발명의 양태는 치료용 제제에 사용하기 위한 화합물, 또는 비경구 또는 장내 투여용으로 허용가능한 약제학적 담체 중에 화합물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 본 조성물은 정맥내, 피하, 피부를 통해 비경구적으로, 또는 경구 경로로 투여될 수 있다.

본 발명의 양태는, 렉틴 단백질이 만성 염증성 질환, 섬유성 질환 및 암을 포함하나 이에 한정되지 않는 발병기전에 중요한 역할을 하는 다양한 질병들의 치료를 위한 화합물 또는 조성물에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 본 화합물은 염증, 섬유형성, 혈관신생, 암의 진행 및 전이를 유도하는 병태생리학적 경로를 조절하는 것으로 알려진 렉틴 또는 갈렉틴 단백질과 당단백질과의 상호작용을 모방할 수 있다.

본 발명의 일부 양태에 따르면, 본 화합물은 아미드 -N(-Ra)-C(=O)-, 설폰아미드 -N(-H)-S(=O₂)-, 메틸에테르 -C(-H₂)-O-, 메틸에스테르 -C(=O)-O-, 카르보설폰 -C(-H₂)-S(=O)(=O)-, 포스페이트 -O-P(=O)(-OH)-, 디포스페이트 -O-P(=O)(-O)-O-P(=O)(-O)-, 히드라지드 -N(-H)-N(-H)- 및/또는 아미노산을 포함하는 적어도 2개의 원자의 A-M 스페이서를 통해 접합된 피라노실 및/또는 푸라노실 구조를 포함한다.

일부 실시양태에서, A-M 스페이서는 아미드 -N(-Ra)-C(=O)-, 설폰아미드 -N(-H)-S(=O₂)-, 메틸에테르 -C(-H₂)-O-, 메틸에스테르 -C(=O)-O-, 카르보설폰 -C(-H₂)-S(=O)(=O)-, 포스페이트 -O-P(=O)(-OH)-, 디포스페이트 -O-P(=O)(-O)-O-P(=O)(-O)-, 카르보히드라지드 -C(=O)-NH-NH-, 설포노히드라지드 -S(=O)₂-NH-NH-, 또는 포스포닉 디히드라지드 -P(=O)(-NH-NH₂)(NH-NH-) 스페이서 또는 상기한 것들 중 임의의 조합을 포함한다.

일부 실시양태에서, 상기 스페이서는 피라노실 및/또는 푸라노실 구조의 아노머 탄소에 연결된다.

일부 실시양태에서, 화합물은 유기 치환기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 특정 방향족 치환기를 피라노실 및/또는 푸라노실 구조의 아노머 탄소의 갈락토오스 코어 또는 "AM" 링커에 연결시킬 수도 있다. 이러한 방향족 치환은 렉틴의 탄수화물 인식 도메인(CRD: carbohydrate-recognition-domain)을 구성하는 아미노산 잔기들(예컨대, 아르기닌, 트립토판, 히스티딘, 글루탐산 등)과 본 화합물의 상호작용을 향상시켜 회합 및 결합 특이성을 강화시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 상기 유기 치환기는 모노사카라이드, 디사카라이드, 올리고사카라이드 또는 헤테로글리코시드, 예컨대 이미노당 또는 티오당 탄수화물을 포함한다.

일부 실시양태에서, 화합물은 2개의 갈락토시드가 A-M 스페이서에 의해 결합된 대칭형 디갈락토시드이다. 다른 실시양태에서, 화합물은 비대칭형 탄수화물로 이루어질 수 있다. 예를 들어, 각각의 갈락토시드는 서로 다른 방향족 또는 지방족 치환기, 또는 C5 산소가 S (5-티오-D-갈락토오스) 또는 N (5-이미노-D-갈락토오스)로 대체된 갈락토오스의 헤테로원자 유도체를 함유할 수 있다.

어떠한 특정 이론으로 국한시키고자 하는 것은 아니지만, A-M 스페이서는, 탄수화물을 인식하는 것으로 알려진 렉틴 또는 갈렉틴과의 특이적인 상호작용에 대한 화학적, 물리적 및 다른 자리 입체성(allosteric) 특성을 유지하면서 화합물을 대사적으로 안정하게 만든다고 생각된다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 갈락토오스의 갈락토아미드 및 갈락토설폰아미드는 O-글리코시드 결합을 갖는 화합물보다 대사적으로 더 안정하다.

본 발명의 양태는 하기 화학식 (1)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물에 관한 것이다:

화학식 (1)

상기 식 중에서,

A는 NRa, CRb, PRc 및 아미노산으로 이루어진 군으로부터 선택되고,

M은 NRa, CRb, PRc, ORd, SRe, 아미노산, 및 3개 이상의 원자의 헤테로시클릭 치환을 포함하는 소수성 탄화수소 유도체로 이루어진 군으로부터 선택되며,

Ra는 H, H₂, CH₃, COOH, NH₂, COMe, 할로겐 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고,

Rb는 H, H₂, O, OH, CH₃, COOH, NH₂, COMe, 할로겐 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되며,

Rc는 O₂, PO₂, OH, 할로겐 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고,

Rd는 H, CH₃ 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되며,

Re는 OH, O₂, S, 할로겐 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고,

B는 OH, NH₂, NHAc 또는 NH-알킬이며, 여기서 알킬은 1개 내지 18개의 탄소를 포함하며,

W는 O, S, CH₂, NH 및 Se로 이루어진 군으로부터 선택되고,

Y는 O, S, NH, CH₂, Se, S, P, 아미노산, 및 분자량이 약 50-200 D인 헤테로시클릭 치환을 포함하는 소수성 선형 및 환형 탄화수소 유도체 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고,

R₁, R₂ 및 R₃은 H, O₂, CO, NH₂, SO₂, SO, PO₂, PO, CH₃, 선형 탄화수소 및 환형 탄화수소로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며,
상기 탄화수소는

a) 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 카르복시기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 카르복시기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 아미노기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 아미노기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 아미노기 및 카르복시기 양자로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 아미노기 및 카르복시기 양자로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알케닐기 및 1개 이상의 할로겐으로 치환된 알킬기,

b) 적어도 1개의 카르복시기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 할로겐으로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 알콕시기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 니트로기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 설포기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 아미노기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 알킬아미노기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 디알킬아미노기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 히드록시기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 카르보닐기로 치환된 페닐기 및 적어도 1개의 치환된 카르보닐기로 치환된 페닐기,

c) 나프틸기, 적어도 1개의 카르복시기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 할로겐으로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 알콕시기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 니트로기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 설포기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 아미노기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 알킬아미노기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 디알킬아미노기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 히드록시기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 카르보닐기로 치환된 나프틸기 및 적어도 1개의 치환된 카르보닐기로 치환된 나프틸기,

d) 헤테로아릴기, 적어도 1개의 카르복시기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 할로겐으로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 알콕시기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 니트로기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 설포기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 아미노기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 알킬아미노기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 디알킬아미노기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 히드록시기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 카르보닐기로 치환된 헤테로아릴기 및 적어도 1개의 치환된 카르보닐기로 치환된 헤테로아릴기, 및

e) 사카라이드, 치환된 사카라이드, D-갈락토오스, 데옥시갈락토오스, 치환된 D-갈락토오스, C3-[1,2,3]-트리아졸-1-일-치환된 D-갈락토오스, 수소, 알킬기, 알케닐기, 아릴기, 헤테로아릴기, 및 헤테로사이클 및 유도체, 아미노기, 치환된 아미노기, 이미노기, 또는 치환된 이미노기

중 하나이다.

일부 실시양태에서, A-M은 아미드 -N(-Ra)-C(=O)-, 설폰아미드 -N(-H)-S(=O₂)-, 메틸에테르 -C(-H₂)-O-, 메틸에스테르 -C(=O)-O-, 카르보설폰 -C(-H₂)-S(=O)(=O)-, 포스페이트 -O-P(=O)(-OH)-, 디포스페이트 -O-P(=O)(-O)-O-P(=O)(-O)-, 히드라지드 -N(-H)-N(-H)-, 아미노산 또는 이들의 조합을 포함하는 적어도 2개의 원자의 스페이서이다.

일부 실시양태에서, A-M 스페이서는 단일 또는 이중 결합에 의해 연결된 2개 이상의 원자: C-C, C=C, C-P, C-N, C-O, N-C, N-N, N=N, N-S, N-P, S-N, P-O, O-P, S-C, S-N, S-S 또는 이들의 조합을 포함한다.

일부 실시양태에서, A-M 스페이서는 아노머 탄소 및 1개 이상의 원자, 예컨대 C 또는 N 또는 O 또는 S에 연결된 PO₂ 또는 PO₂-PO₂결합을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 C 또는 N은 아노머 탄소에 연결되고, PO₂ 또는 PO₂-PO₂는 C 또는 N에 연결된다.

일부 실시양태에서, A-M은 메틸아미드 연결된 R1이고, R2는 N'-메틸아미드-3,4-디플루오로벤젠이며, Y-R₁은 트리아졸-3-플루오로벤젠이다.

일부 실시양태에서, A-M 스페이서는 갈락토오스, 히드록실 시클로헥산, 방향족 모이어티, 알킬기, 아릴기, 아민기 또는 아미드기에 연결된다.

일부 실시양태에서, A-M 스페이서는 두 갈락토시드 또는 이의 치환된 유도체를 대칭적으로 연결한다.

일부 실시양태에서, A-M 스페이서는 두 갈락토시드 또는 이의 치환된 유도체를 비대칭적으로 연결한다.

일부 실시양태에서, 갈락토시드의 아노머 탄소는 단일 또는 이중 결합에 의해 연결된 2개 이상의 원자: C-C, C=C, C-P, C-N, C-O, N-C, N-N, N=N, N-S, N-P, S-N, P-O, O-P, 또는 이들의 조합의 스페이서를 갖는다.

본 발명의 양태는 하기 화학식 (2)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물에 관한 것이다:

화학식 (2)

상기 식 중에서,

A는 NRa, CRb, PRc 및 아미노산으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고,

M은 NRa, CRb, PRc, ORd, SRe, 아미노산, 및 3개 이상의 원자의 헤테로시클릭 치환을 포함하는 소수성 탄화수소 유도체로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며,

Rd는 H 및 CH₃으로 이루어진 군으로부터 선택되며,

W는 O, S, CH₂, NH 및 Se로 이루어진 군으로부터 선택되고,

X는 O, N, S, CH₂, NH 및 PO₂로 이루어진 군으로부터 선택되며;

Y 및 Z는 O, S, C, NH, CH₂, Se, S, P, 아미노산, 및 분자량이 약 50-200 D인 헤테로시클릭 치환을 포함하는 소수성 선형 및 환형 탄화수소 유도체 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고,

R1, R2, R3은 CO, O₂, SO₂, SO, PO₂, PO, CH, 수소, 소수성 선형 탄화수소 및 소수성 환형 탄화수소로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며,
탄화수소는

a) 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 카르복시기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 카르복시기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 아미노기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 아미노기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 아미노 및 카르복시기 양자로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 아미노 및 카르복시기 양자로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 및 1개 이상의 할로겐으로 치환된 알킬기;

b) 적어도 1개의 카르복시기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 할로겐으로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 알콕시기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 니트로기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 설포기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 아미노기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 알킬아미노기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 디알킬아미노기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 히드록시기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 카르보닐기로 치환된 페닐기, 및 적어도 1개의 치환된 카르보닐기로 치환된 페닐기;

c) 나프틸기, 적어도 1개의 카르복시기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 할로겐으로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 알콕시기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 니트로기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 설포기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 아미노기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 알킬아미노기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 디알킬아미노기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 히드록시기로 치환된 나프틸기, 적어도 1개의 카르보닐기로 치환된 나프틸기, 및 적어도 1개의 치환된 카르보닐기로 치환된 나프틸기;

d) 헤테로아릴기, 적어도 1개의 카르복시기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 할로겐으로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 알콕시기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 니트로기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 설포기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 아미노기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 알킬아미노기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 디알킬아미노기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 히드록시기로 치환된 헤테로아릴기, 적어도 1개의 카르보닐기로 치환된 헤테로아릴기 및 적어도 1개의 치환된 카르보닐기로 치환된 헤테로아릴기; 및

e) 사카라이드, 치환된 사카라이드, D-갈락토오스, 치환된 D-갈락토오스, C3-[1,2,3]-트리아졸-1-일-치환된 D-갈락토오스, 수소, 알킬기, 알케닐기, 아릴기, 헤테로아릴기, 및 헤테로사이클 및 유도체, 아미노기, 치환된 아미노기, 이미노기, 또는 치환된 이미노기

중 하나이다.

일부 실시양태에서, A-M은 아미드 -N(-Ra)-C(=O)-, 설폰아미드 -N(-H)-S(=O₂)-, 메틸에테르 -C(-H₂)-O-, 메틸에스테르 -C(=O)-O-, 카르보설폰 -C(-H₂)-S(=O)(=O)-, 포스페이트 -O-P(=O)(-OH)-, 디포스페이트 -O-P(=O)(-O)-O-P(=O)(-O)-, 카르보히드라지드 -C(=O)-NH-NH-, 설포노히드라지드 -S(=O)₂-NH-NH- 및 포스포닉 디히드라지드 -P(=O)(-NH-NH₂)(NH-NH-) 또는 이들의 조합을 포함하는, 적어도 2개의 원자의 스페이서를 나타낸다.

일부 실시양태에서, 적어도 2개의 원자의 A-M 스페이서는 갈렉틴 CRD 에피토프에 대해 약 1 nM 내지 약 50 μM의 상호작용을 허용하도록 구성된 회전 자유도(rotational freedom) 및 길이를 가진다.

일부 실시양태에서, 헤테로시클릭 치환을 포함하는 소수성 선형 및 환형 탄화수소는 약 50 내지 200 D의 분자량을 갖는다.

본 발명의 양태는 하기 표 1의 화학식의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물에 관한 것이다.

일부 실시양태에서, 화합물은 유리 형태로 존재한다. 일부 실시양태에서, 상기 유리 형태는 무수물이다. 일부 실시양태에서, 상기 유리 형태는 수화물과 같은 용매화물이다.

일부 실시양태에서, 화학식 (1) 또는 화학식 (2)의 화합물은 결정 형태이다.

본 발명의 일부 양태는 인간과 같은 포유동물의 치료제로 사용하기 위한 화학식 (1)의 화합물에 관한 것이다.

본 발명의 일부 양태는 화학식 (1) 또는 화학식 (2)의 화합물 및 임의로 약제학적으로 허용가능한 첨가제, 예컨대 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 갈렉틴에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 화합물은 갈렉틴-3, 갈렉틴-1, 갈렉틴 8 및/또는 갈렉틴 9에 결합한다.

일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 갈렉틴-3에 대한 높은 선택성 및 친화도를 가진다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 갈렉틴-3에 대하여 약 1 nM 내지 약 50 μM의 친화도를 가진다.

본 발명의 양태는 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 본 조성물은 치료적 유효량의 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 아주반트, 부형제, 제제화 담체 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 조성물은 치료적 유효량의 화합물 및 항염증성 약물, 비타민, 약제학적 약물, 뉴트라슈티컬(neutraceutical) 약물, 보충제 또는 이들의 조합을 포함한다.

본 발명의 양태는 질환의 치료가 필요한 대상체에서 상기 질환의 치료에 사용될 수 있는 화합물, 조성물 및 방법에 관한 것이다. 본 발명의 양태는 갈렉틴이 발병기전에 적어도 부분적으로 관여하는 질환의 치료에 사용될 수 있는 화합물, 조성물 및 방법에 관한 것이다.

본 발명의 양태는 질환의 치료가 필요한 대상체에서 상기 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 상기 대상체는 포유동물이다. 일부 실시양태에서, 상기 대상체는 인간이다.

일부 실시양태에서, 상기 화합물, 조성물 및 방법은 간 섬유증을 동반하거나 동반하지 않는 비알콜성 지방간염, 염증성 및 자가면역성 질환, 신생물성 병태 또는 암의 치료에 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 상기 화합물, 조성물 및 방법은 간 섬유증, 신장 섬유증, 폐 섬유증 또는 심장 섬유증의 치료에 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 상기 조성물 또는 화합물은, 간, 신장, 폐 및 심장을 포함하나 이에 제한되지 않는 장기에서 항섬유증 활성을 향상시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 상기 화합물, 조성물 및 방법은 죽상경화증 및 폐동맥 고혈압을 포함하는 혈관계통의 염증성 질환의 치료에 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 상기 화합물, 조성물 및 방법은 심부전, 부정맥 및 요독성 심근병증을 비롯한 심장 질환의 치료에 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 상기 화합물, 조성물 및 방법은 사구체병증 및 간질 신장염을 비롯한 신장 질환의 치료에 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 상기 화합물, 조성물 및 방법은 건선 및 피부경화증을 포함하나 이에 제한되지 않는 염증성, 증식성 및 섬유성 피부 질환의 치료에 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 발명은 간, 신장, 폐 및 심장을 포함하나 이에 제한되지 않는 장기에서 항섬유증 활성을 향상시킴으로써, 갈렉틴이 발병기전에 적어도 부분적으로 관여하는 염증성 및 섬유성 질환의 치료 방법에 관한 것이다.

일부 실시양태에서, 비알콜성 지방간염(NASH)을 치료하는 치료 활성을 갖는 조성물 또는 화합물에 관한 것이다. 다른 양태에서, 본 발명은 비알콜성 지방간염(NASH)과 관련된 병리 및 질환 활성을 감소시키는 방법에 관한 것이다.

일부 실시양태에서, 본 발명은 갈렉틴이 관절염, 류머티스성 관절염, 천식 및 염증성 장질환을 포함하나 이에 제한되지 않는 발병기전에 적어도 부분적으로 관여하는 염증성 및 자가면역성 질환을 치료하기 위한 화합물, 조성물 및 방법에 관한 것이다.

일부 실시양태에서, 본 발명은 갈렉틴의 증가에 의해 촉진되는 과정들을 억제함으로써 갈렉틴이 발병기전에 적어도 부분적으로 관여하는 신생물성 병태(예컨대, 양성 또는 악성 신생물성 질환)를 치료하기 위한 조성물 또는 화합물에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 본 발명은 갈렉틴의 증가에 의해 촉진되는 과정들을 억제함으로써 갈렉틴이 발병기전에 적어도 부분적으로 관여하는 신생물 병태(예컨대, 양성 또는 악성 신생물성 질환)의 치료 방법에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 상기 조성물 또는 화합물은 종양 세포 침습, 전이 및 신혈관형성을 치료 또는 예방하는데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 조성물 또는 화합물은 원발성 및 속발성 암을 치료하는데 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 치료적 유효량의 화합물 또는 조성물은, 이에 제한되는 것은 아니지만, 치료적 유효량의 항염증성 약물, 비타민, 다른 약제학적 및 뉴트라슈디컬 약물 또는 보충제, 또는 이들의 조합물과 함께 상용이 가능하며 효과적일 수 있다.

본 발명의 일부 양태는 갈렉틴의 결합과 관련된 질환의 치료 방법에 사용하기 위한 화학식 (1) 또는 화학식 (2)의 화합물에 관한 것이다. 본 발명의 일부 양태는 갈렉틴-3의 리간드에 대한 결합과 관련된 질환의 치료 방법에 사용하기 위한 화학식 (1) 또는 화학식 (2)의 화합물에 관한 것이다.

본 발명의 일부 양태는, 인간에 있어서 갈렉틴, 예컨대 갈렉틴-3의 리간드에 대한 결합과 관련된 질환의 치료 방법으로서, 상기 방법이 치료적 유효량의 적어도 하나의 화학식 (1) 또는 화학식 (2)의 화합물을 상기 질환의 치료를 필요로 하는 인간에게 투여하는 단계를 포함하는 치료 방법에 관한 것이다.

본 특허 또는 출원 파일은 칼라로 그려진 적어도 하나의 도면을 포함한다. 상기 칼라 도면(들)이 포함된 본 특허 또는 특허 출원 공보는 원 간행물은 요청시 및 필요 비용 지불시 사무실에서 그 사본이 제공될 것이다.
본 발명을 첨부된 도면들을 참조하여 추가로 설명할 것이며, 상기 도면에서 유사한 구조들은 수개의 도면 상에서 유사한 부호로 표시된다. 도시된 도면들은 반드시 일정한 비율로 축적한 것이 아니라, 일반적으로 본 발명의 원리를 설명하는 것에 중점을 두었다.
도 1a는 3곳의 잠재적인 상호작용 부위를 갖는 갈렉틴-3 탄수화물 인식 도메인 (CRD) 결합 포켓의 고화질 3D 구조를 도시한 것이다.
도 1b는 락토오스 단위가 결합된 갈렉틴-3 C-말단에서의 CRD 포켓 위치를 도시한 것이다.
도 2는 갈렉틴-3 CRD 부위 부근 - 결합 향상을 위한 잠재적인 협동 아미노산에 대한 지도를 도시한 것이다.
도 3a는 일부 실시양태에 따른 갈락토아미드숙신이미드 연결된 화합물의 가상 시뮬레이션 환경(in-silico)의 3D 모델로 예측한 도킹 포즈를 도시한 것이다.
도 3b는 일부 실시양태에 따른 갈락토아미드 연결된 화합물의 가상 시뮬레이션 환경의 3D 모델로 예측한 도킹 포즈를 도시한 것이다.
도 4a-4k는 일부 실시양태에 따른 예시적인 갈락토아미드 화합물의 합성을 도시한 것이다.
도 5a는 일부 실시양태에 따른 특이적 항-갈렉틴-3 단일클론 항체 결합 어세이 (ELISA 포맷)을 이용한 갈렉틴 결합 모이어티의 억제를 도시한 것이다.
도 5b는 일부 실시양태에 따른 인테그린-갈렉틴-3 기능 어세이 (CRD ELISA 포맷)을 이용한 갈렉틴의 억제를 도시한 것이다.
도 6a는 일부 실시양태에 따른 항-갈렉틴 활성 화합물을 스크리닝하기 위한 형광 공명 에너지 전이 분석 어세이 (FRET 포맷)을 도시한 것이다.
도 6b는 일부 실시양태에 따른 CRD에 특이적으로 결합하는 화합물을 검출하는 형광 편광화 어세이 포맷을 도시한 것이다.
도 7a는 다수의 갈락토아미드 유도체에 대한 ELISA MAb와 ELISA 인테그린 어세이 간의 상관관계를 도시한 것이다.
도 7b는 일부 실시양태에 따른 ELISA 인테그린-Gal-3과 ELISA MAb-Gal-3 어세이에 의한 화합물 IC50 (50% 억제 농도 점수)의 예를 보여준다.
도 8a는 일부 실시양태에 따른 화합물 (600 계열)에 의한 형광 리간드의 CRD 특이적 결합의 형광 편광화의 감소를 나타낸 것이다.
도 8b는 본 발명의 일부 실시양태에 따른 화합물 (600 계열)에 의한 갈렉틴-3의 인테그린-aMB2와의 상호작용에 대한 표적 억제의 예를 나타낸 것이다.
도 9는 갈렉틴-3의 인테그린-aVB6와의 상호작용에 대한 본 발명의 화합물 (600 계열)에 의한 일부 실시양태에 따른 표적 억제의 예를 나타낸 것이다.
도 10a 및 10b는 본 발명의 일부 실시양태에 따른 화합물 및 화합물 IC50 (600 계열)을 이용하여 염증성 대식세포 (LPS로 스트레스를 준 THP-1 세포 배양물)에 의한 사이토카인 MCP-1 분비 억제의 예를 나타낸 것이다.

본 발명의 상세한 실시양태들을 여기에 개시하지만; 개시된 실시양태들은 다양한 형태로 구현될 수 있는 본 발명을 단지 예시하는 것일 뿐이라는 점을 이해하여야 할 것이다. 또한, 본 발명의 다양한 실시양태들과 관련하여 제시된 각 실시예들도 예시를 위한 것이지 본 발명을 한정하려는 것은 아니다. 또한, 도면은 반드시 일정한 비율로 제작한 것은 아니며, 특정한 구성요소의 세부 사항을 나타내기 위해 일부 특징들은 과장될 수도 있다. 또한, 도면에 나타낸 임의의 측정값, 사양 등은 예시적인 것일 뿐 본 발명을 한정하려는 것은 아니다. 따라서, 본원에 개시된 특정 구조 및 기능적 세부 사항들은 제한적으로 해석되어서는 안되며, 당업자가 본 발명을 다양하게 사용하도록 교시하기 위한 대표적인 기준으로서만 해석되어야 할 것이다.

본원에서 문헌들의 인용은, 본원에 인용된 문헌들 중 임의의 문헌이 관련된 선행 기술임을 인정하거나, 또는 상기 인용된 문헌들이 본 출원의 청구범위의 특허성에 대한 논거로서 간주됨을 인정하려는 것은 아니다.

명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐, 하기의 용어들은 문맥상 명백하게 달리 지시하지 않는 한, 본원과 명백히 관련된 의미를 가진다. 본원에서 사용된 바와 같이, "한 실시양태에서" 및 "일부 실시양태에서"라는 문구는 동일할 수는 있지만 반드시 동일한 실시양태(들)을 가리킬 필요는 없다. 또한, 본원에서 사용된 바와 같이, "또 다른 실시양태에서" 및 "일부 다른 실시양태에서"라는 문구는 다를 수는 있더라도 반드시 다른 실시양태를 의미할 필요는 없다. 따라서, 이하에서 설명되는 바와 같이, 본 발명의 다양한 실시양태들은 본 발명의 범위 또는 개념을 벗어남이 없이 용이하게 조합될 수 있다.

또한, 본원에 사용된 "또는"이라는 용어는 포괄적인 "또는" 기능어로서, 문맥상 명백하게 달리 지시하지 않는 한, "및/또는"이라는 용어와 동일하다. "기반으로 하는(based on)"이라는 용어는 배타적인 것이 아니며, 문맥상 명백하게 달리 지시하지 않는 한, 설명하지 않은 추가적인 요인들도 허용된다. 또한, 명세서 전반에 걸쳐, 단수형의 의미는 복수형의 해당 대상물도 포함한다.

달리 명시하지 않는 한, 본원에 나타낸 모든 백분율은 중량/중량이다.

본 발명의 양태는 갈락토오스(또는 헤테로글리코시드)의 아노머 탄소 상의 "아미드" 또는 "설폰아미드" 결합에 결합된 갈락토오스(또는 헤테로글리코시드) 코어의 모노, 디사카라이드 및 올리고사카라이드의 조성물에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, "AM" 함유 분자는 탄수화물을 인식하는 것으로 알려진 렉틴과의 특이적 상호작용을 위한 화학적, 물리적 및 다른 자리 입체성 특성을 유지하면서 이들을 대사적으로 활성인 상태로 만든다. 일부 실시양태에서, 상기 갈락토오스 코어에 첨가된 특정 방향족 치환은, 렉틴의 탄수화물-인식-도메인(CRD)을 구성하는 아미노산 잔기들(예컨대, 아르기닌, 트립토판, 히스티딘, 글루탐산 등)과의 상호작용을 향상시키고 이에 따라 회합 및 결합 특이성을 강화시킴으로써 "아미드" 결합된 피라노실 및/또는 푸라노실 구조의 친화도를 더욱 향상시킨다.

갈렉틴

갈렉틴(갈랍틴 또는 S-렉틴으로도 알려져 있음)은 베타-갈락토시드에 결합하는 렉틴 부류이다. 일반명으로서 갈렉틴은 동물 렉틴의 부류에 대하여 1994년에 제안되었다 (Barondes, S. H., et al.: Galectins: a family of animal beta-galactoside-binding lectins. Cell 76, 597-598, 1994). 상기 부류는 베타-갈락토시드에 대한 친화도를 가지며 특정 서열 성분들을 공유하는 적어도 1개의 특징적인 탄수화물 인식 도메인(CRD)을 함유하는 것으로 정의된다. 추가의 구조적 특성 분석을 통해 갈렉틴을 하기를 포함하는 3개의 하위군으로 분류한다: (1) 단일 CRD를 갖는 갈렉틴, (2) 링커 펩타이드에 의해 결합된 2개의 CRD를 갖는 갈렉틴, 및 (3) 서로 다른 유형의 N-말단 도메인에 결합된 1개의 CRD를 갖는 하나의 구성원(갈렉틴-3)이 있는 군. 상기 갈렉틴 탄수화물 인식 도메인은 약 135개의 아미노산의 베타-샌드위치이다. 상기 두 시트는 오목면 (S-면으로도 칭함)을 형성하는 6개의 가닥 및 볼록면 (F-면)을 형성하는 5개의 가닥으로 약간 구부러져 있다. 상기 오목면은 탄수화물이 결합되어 있는 그루브를 형성한다 (Leffler H, Carlsson S, Hedlund M, Qian Y, Poirier F (2004). “Introduction to galectins”. Glycoconj. J. 19 (7-9): 433-40).

발달, 분화, 형태형성, 종양 전이, 아폽토시스, RNA 스플라이싱 및 기타 다수의 현상들을 비롯한 광범위한 생물학적 현상들이 갈렉틴과 관련이 있는 것으로 밝혀졌다.

일반적으로, 상기 탄수화물 도메인은 당단백질과 관련된 갈락토오스 잔기에 결합한다. 갈렉틴은 락토오스[(β-D-갈락토시도)-D-글루코오스], N-아세틸-락토오스아민, 폴리-N-아세틸락토오스아민, 갈락토만난, 또는 펙틴의 단편들과 같은 다른 유기 화합물에 부착된 갈락토오스 잔기들에 대하여 친화성을 나타낸다. 그러나, 갈락토오스 자체는 갈렉틴에 결합하지 않는다는 점에 유의할 필요가 있다.

펙틴 및 변형된 펙틴과 같은 식물 폴리사카라이드는, 짐작컨대 거대 분자, 본 건에서는 동물 세포의 경우 당단백질이 아닌 복합 탄수화물이라는 맥락으로 제시되는 갈락토오스 잔기를 함유하는 것을 기반으로 해서 갈렉틴 단백질에 결합하는 것으로 나타났다.

1개 또는 2개의 탄수화물 도메인을 탠덤 방식으로 함유하는 적어도 15개의 포유동물 갈렉틴 단백질이 확인되었다.

갈렉틴 단백질은 세포내 공간에서 발견되는데, 여기서 이들은 다수의 기능들을 할당받기도 하고, 또한 세포외 공간으로 분비되어 거기서 서로 다른 기능들을 가지기도 한다. 세포외 공간에서, 갈렉틴 단백질들은, 기능을 조절할 수 있는 당단백질들 간의 상호작용을 촉진하거나, 또는 내재성 막 당단백질 수용체의 경우에, 세포 신호전달의 변형을 촉진하는 것을 비롯하여 갈락토오스 함유 당단백질들 간의 상호작용으로 매개되는 여러가지 기능을 가질 수 있다 [Sato et al., "Galectins as danger signals in host-pathogen and host-tumor interactions: new members of the growing group of "Alarmins." In "Galectins," (Klyosov, et al eds.), John Wiley and Sons, 115-145, 2008, Liu et al., "Galectins in acute and chronic inflammation," Ann. N.Y. Acad. Sci. 1253: 80-91, 2012]. 세포외 공간 내의 갈렉틴 단백질들은 세포-세포 및 세포 기질 상호작용을 추가적으로 촉진할 수 있다 [Wang et al., "Nuclear and cytoplasmic localization of galectin-1 and galectin-3 and their roles in pre-mRNA splicing." In "Galectins" (Klyosov et al eds.), John Wiley and Sons, 87-95, 2008]. 세포내 공간과 관련하여, 갈렉틴 기능은 단백질-단백질 상호작용과 보다 관련이 있는 것처럼 보이지만, 세포내 소포 수송은 당단백질과의 상호작용과 관련이 있는 듯하다.

갈렉틴은 동종이량체화를 촉진하는 도메인을 함유하는 것으로 나타났다. 따라서, 갈렉틴은 당단백질들 간의 "분자 접착제(molecular glue)"로 작용할 수 있다. 갈렉틴은 핵과 세포질을 비롯한 다수의 세포 구획들에서 발견되며, 세포 표면 및 세포외 기질 당단백질과 상호작용하는 세포외 공간으로 분비된다. 분자 상호작용의 기전은 그 소재에 따라 달라질 수 있다. 세포외 공간에서 갈렉틴은 당단백질과 상호작용할 수 있지만, 세포내 공간에서 다른 단백질들과 갈렉틴의 상호작용은 일반적으로 단백질 도메인을 통해 일어난다. 세포외 공간에서 세포 표면 수용체들의 회합은 수용체 신호전달 또는 리간드와의 상호작용 능력을 증가 또는 감소시킬 수 있다.

갈렉틴 단백질은 염증, 섬유증, 자가 면역 및 신생물과 관련된 질환을 포함하나 이에 한정되지 않는 여러가지 동물 및 인간의 질환 상태에서 현저히 증가된다. 갈렉틴은 후술하는 같이 질환의 발병기전에 직접적으로 연루되어 있다. 예를 들어, 갈렉틴에 좌우될 수 있는 질환 상태로, 이에 제한되는 것은 아니나, 급성 및 만성 염증, 알레르기 질환, 천식, 피부염, 자가면역성 질환, 염증성 및 퇴행성 관절염, 면역 매개성 신경계 질환, 다수의 장기들(이에 제한되는 것은 아니나, 간, 폐, 신장, 췌장 및 심장을 포함)의 섬유증, 염증성 장 질환, 죽상동맥경화증, 심부전, 안구 염증성 질환, 광범위한 종류의 암을 포함한다.

질환 상태 이외에도, 갈렉틴은 백신접종, 외인성 병원체 및 암세포에 대한 면역 세포의 반응을 조절하는 중요한 조절성 분자이다.

당업자라면 누구나, 갈렉틴에 결합할 수 있고/있거나, 당단백질에 대한 갈렉틴의 친화도를 변화시키거나, 갈렉틴들 간의 이종성 또는 동종성 상호작용을 감소시키거나, 또는 그렇지 않으면 갈렉틴 단백질의 기능, 합성 또는 대사를 변화시킬 수 있는 화합물이라면, 갈렉틴 의존성 질환에서 중요한 치료 효과를 나타낼 수 있다는 점을 알 수 있을 것이다.

갈렉틴-1 및 갈렉틴-3과 같은 갈렉틴 단백질은 염증, 섬유성 장애 및 신생물에서 현저하게 증가되는 것으로 밝혀졌다 (문헌 [Ito et al. "Galectin-1 as a potent target for cancer therapy: role in the tumor microenvironment", Cancer Metastasis Rev. PMID: 22706847 (2012)], [Nangia-Makker et al. Galectin-3 binding and metastasis," Methods Mol. Biol. 878: 251-266, 2012], [Canesin et al. Galectin-3 expression is associated with bladder cancer progression and clinical outcome," Tumour Biol. 31: 277-285, 2010], [Wanninger et al. "Systemic and hepatic vein galectin-3 are increased in patients with alcoholic liver cirrhosis and negatively correlate with liver function," Cytokine. 55: 435-40, 2011]). 더욱이, 실험들을 통해서 갈렉틴, 특히 갈렉틴-1 (gal-1) 및 갈렉틴-3 (gal-3)이 이러한 부류의 질환들의 발병기전에 직접적으로 관여하는 것으로 밝혀졌다 (문헌 [Toussaint et al., "Galectin-1, a gene preferentially expressed at the tumor margin, promotes glioblastoma cell invasion.", Mol. Cancer. 11: 32, 2012], [Liu et al. 2012], [Newlaczyl et al., "Galectin-3―a jack-of-all-trades in cancer," Cancer Lett. 313: 123-128, 2011], [Banh et al., "Tumor galectin-1 mediates tumor growth and metastasis through regulation of T-cell apoptosis," Cancer Res. 71: 4423-31, 2011], [Lefranc et al., "Galectin-1 mediated biochemical controls of melanoma and glioma aggressive behavior," World J. Biol. Chem. 2: 193-201, 2011], [Forsman et al., "Galectin 3 aggravates joint inflammation and destruction in antigen-induced arthritis," Arthritis Reum. 63: 445-454, 2011], [de Boer et al., "Galectin-3 in cardiac remodeling and heart failure," Curr. Heart Fail. Rep. 7, 1-8, 2010], [Ueland et al., "Galectin-3 in heart failure: high levels are associated with all-cause mortality," Int J. Cardiol. 150: 361-364, 2011], [Ohshima et al., "Galectin 3 and its binding protein in rheumatoid arthritis," Arthritis Rheum. 48: 2788-2795, 2003]).

높은 수준의 혈청 갈렉틴-3은, 갈렉틴-3 시험을 사용하여 고위험군 환자를 식별하는 것이 중요한 환자 관리의 일부가 되는, 보다 공격적인 형태의 심부전과 같은 일부 인간 질환과 관련이 있는 것으로 밝혀졌다. 갈렉틴-3 시험은 의사가 입원 또는 사망 위험이 높은 환자를 결정하는 데 유용할 수 있다. 예를 들어, BGM 갈렉틴-3® 시험은 혈청 또는 혈장에서 갈렉틴-3을 정량적으로 측정하는 시험관내 진단 장치로서, 만성 심부전으로 진단받은 환자의 예후 평가를 보조하는 임상 평가와 함께 사용할 수 있다. 내인성 단백질 갈렉틴-3의 농도 측정은 심장 재동기화 요법(cardiac resynchronization therapy)으로 치료된 환자들의 질환 진행이나 치료 효능을 예측하거나 모니터링하는데 사용될 수 있다 (US 8,672,857호 참조, 본 문헌의 전문은 본원에 참고로 포함됨).

갈렉틴-8 (gal-8)은 폐 암종에서 과발현되며 이종이식된 교모세포종의 침습성 영역에 존재하는 것으로 밝혀졌다.

갈렉틴-9 (gal-9)는 면역 염증성 질환으로부터 발생하는 병변의 제어에 관여하고, 일반적으로 염증에 연루되어 있는 것으로 생각된다. Gal-9는 활성화된 특정 세포에서 아폽토시스를 매개하는 것으로 보인다.

본 발명의 양태는 인간의 질환, 예컨대 염증성 질환, 섬유성 질환, 신생물성 질환 또는 이들의 조합에 관여하는 갈렉틴에 결합하는 화합물에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 본 화합물은 갈렉틴-1 (gal-1), 갈렉틴-3 (gal-3), 갈렉틴-8 (gal-8) 및/또는 갈렉틴-9 (gal-9)와 같은 갈렉틴에 결합한다.

갈렉틴 억제제

갈렉틴-1 및/또는 갈렉틴-3에 결합할 수 있는 천연 올리고사카라이드 리간드, 예를 들어, 펙틴의 변형된 형태 및 구아검에서 유도된 갈락토만난이 소개된 바 있다 (WO 2013040316, US 20110294755, WO 2015138438 참조). 락토오스, N-아세틸락토오스아민(LacNAc) 및 티오락토오스와 같은 합성 디갈락토시드는 폐 섬유증 및 기타 섬유성 질환에 대하여 효과가 있다 (WO 2014067986 A1).

단백질 결정학에서의 진전 및 여러가지 갈렉틴의 탄수화물 인식 도메인(CRD)의 고화질 3D 구조의 유용성으로 인해, 갈락토오스 또는 락토오스보다 친화도가 큰 CRD에 대하여 향상된 친화도를 갖는 다수의 유도체들을 제조할 수 있었다(WO 2014067986 A). 이러한 화합물들은 인간의 특발성 폐섬유증(IPF)을 모방하는 것으로 생각되는 폐 섬유증의 동물 모델의 치료에 효과적인 것으로 밝혀졌다. 예를 들어, 3-플루오로페닐-2,3-트리아졸 기로 치환된 티오-디갈락토피라노실(TD-139)은 갈렉틴-3에 결합하며 폐 섬유증의 마우스 모델에서 효과적인 것으로 보고된 바 있다. 상기 화합물은 기관내 점적주입 또는 네뷸라이저를 사용하여 폐 투여로 투여해야 한다 (US8703720, US7700763, US7638623, US7230096 참조).

본 발명의 양태는 갈렉틴 단백질의 천연 리간드를 모방하는 신규한 화합물에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 본 화합물은 갈렉틴-3의 천연 리간드를 모방한다. 일부 실시양태에서, 본 화합물은 갈렉틴-1의 천연 리간드를 모방한다.

일부 실시양태에서, 본 화합물은 갈락토오스 상의 아노머 탄소에 결합된 갈락토오스-AM 코어로 구성된 모노, 디 또는 올리고머 구조를 가지며, 이는 나머지 분자에 대한 링커로서 작용한다. 일부 실시양태에서, 상기 갈락토오스-AM 코어는 (갈렉틴-3의 고화질 3D 구조로 도 1a, 1b에 나타낸 바와 같이) 갈렉틴 CRD에 결합하는 다른 사카라이드/아미노산/산/기에 결합할 수 있으며, 이들과 함께 CRD에 대한 해당 화합물의 친화도를 향상시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 갈락토오스-AM 코어는 (갈렉틴-3의 고화질 3D 구조로 도 1a, 1b 및 도 2에 나타낸 바와 같이) 갈렉틴 CRD의 "B 부위"에서 결합하는 다른 사카라이드/아미노산/산/기에 결합할 수 있으며, 이들과 함께 CRD에 대한 해당 화합물의 친화도를 향상시킬 수 있다.

일부 양태에 따르면, 본 화합물은 A 부위 및/또는 C 부위와 상호작용하여 CRD와의 회합을 더욱 개선하고 갈렉틴 의존성 병증을 표적으로 하는 치료제로서의 이들의 잠재력을 향상시키는 치환을 함유할 수도 있다. 일부 실시양태에서, 상기 치환기는 본원에서 기술된 바와 같이 가상 시뮬레이션 환경 분석 (컴퓨터를 이용하는 분자 모델링)을 통해서 선택될 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 치환기는 관심대상의 갈렉틴 단백질과의 결합 어세이를 사용하여 추가로 스크리닝될 수도 있다. 예를 들어, 본 화합물은 배양된 활성화 대식세포에 대한 갈렉틴-3 결합 어세이 및/또는 시험관내 염증 및 섬유증 모델을 사용하여 스크리닝될 수도 있다 (Macrophage polarization minireview, AbD Serotec 참조).

일부 양태에 따르면, 본 화합물은 코어인 갈락토오스-AM에 대한 하나 이상의 특정 치환기를 포함한다. 예를 들어, 코어인 갈락토오스-AM은 CRD 내에 위치한 잔기들과 상호작용하는 특정 치환기들로 치환될 수 있다. 이러한 치환기들은 해당 화합물의 회합 및 잠재적 효능 뿐만 아니라 '약물가능성(drugability)' 특성을 크게 증가시킬 수 있다.

갈락토시드 화합물

대부분의 "아미드" 및 "설폰" 유기 및 무기 화합물은 음식을 통해 쉽게 흡수되어 대사의 주요 기관인 간으로 운반된다. "아미드" 화합물의 일반적인 대사는 화학적 특성, 즉 산화환원 활성 "아미드" 화합물, 메틸아미드의 전구체 및 아미노산과의 접합에 의존하는 3가지 주요 경로를 따른다.

AM 스페이서

본 발명의 양태는 피라노실 및/또는 푸라노실의 아노머 탄소 상의 "A-M" 스페이서에 결합된 피라노실 및/또는 푸라노실 갈락토오스 구조를 포함하는 화합물에 관한 것이다.

일부 실시양태에서, A-M은 아미드 -N(-Ra)-C(=O)-, 설폰아미드 -N(-H)-S(=O₂)-, 메틸에테르 -C(-H₂)-O-, 메틸에스테르 -C(=O)-O-, 카르보설폰 -C(-H₂)-S(=O)(=O)-, 포스페이트 -O-P(=O)(-OH)-, 디포스페이트 -O-P(=O)(-O)-O-P(=O)(-O)-, 히드라지드 -N(-H)-N(-H)-, 아미노산 또는 이들의 조합을 포함하는 적어도 2개의 원자의 스페이서를 나타낸다.

일부 실시양태에서, A-M 스페이서는 아노머 탄소 및 1개 이상의 원자, 예컨대 C 또는 N 또는 O 또는 S에 연결된 PO₂ 또는 PO₂-PO₂ 결합을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 C 또는 N은 아노머 탄소에 연결되고, PO₂ 또는 PO₂-PO₂는 C 또는 N에 연결된다.

어떠한 특정 이론으로 한정하고자 하는 것은 아니지만, A-M은 더 많은 회전 자유도와 길이를 갖는 적어도 2개의 원자의 스페이서로서, 이로 인해 갈렉틴 CRD 에피토프 및 주위의 아미노산 부위들에 대해 보다 더 가깝고 기밀한 상호작용을 제공할 수 있다. 아미드 -N(-Ra)-C(=O)-, 설폰아미드 -N(-H)-S(=O₂)-, 메틸에테르 -C(-H₂)-O-, 메틸에스테르 -C(=O)-O-, 카르보설폰 -C(-H₂)-S(=O)(=O)-, 포스페이트 -O-P(=O)(-OH)-, 디포스페이트 -O-P(=O)(-O)-O-P(=O)(-O)-, 카르보히드라지드 -C(=O)-NH-NH-, 설포노히드라지드 -S(=O)₂-NH-NH- 및 포스포닉 디히드라지드 -P(=O)(-NH-NH₂)(NH-NH-)와 같은 스페이스는 갈렉틴과의 상호작용을 증대시킨다.

본 발명의 양태는 피라노실 및/또는 푸라노실의 아노머 탄소 상의 "아미드" 또는 "설폰" 유형의 구조에 결합된 피라노실 및/또는 푸라노실 갈락토오스 구조를 포함하는 화합물에 관한 것이다. 본원에서, 아미드 결합은 C-N 결합 (R-C(O)-NH-R)을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 아미드 결합은 설폰아미드 결합일 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 설폰 결합은 일반식 R-S(=O)₂-R'로 나타낼 수 있다. 본원에서, 아미드 결합은 C-N 결합 (R-C(O)-NH-R)일 수 있다. 일부 실시양태에서, 아미드 결합은 N-SO₂ (설폰아미드 결합) 또는 일반식 R-N-S(=O)₂-R'일 수 있다. 일부 실시양태에서, C-SO₂ (설폰 결합)는 화학식 R-C-S(=O)₂-R'로 나타낼 수 있다.

일부 실시양태에서, 특정 방향족 치환기를 갈락토오스 코어 또는 헤테로글리코시드 코어에 첨가하여 "아미드" 결합된 피라노실 및/또는 푸라노실 구조의 친화도를 추가로 향상시킬 수 있다. 이러한 방향족 치환기는 렉틴의 탄수화물 인식 도메인(CRD)을 구성하는 아미노산 잔기들(예컨대, 아르기닌, 트립토판, 히스티딘, 글루탐산 등)과 본 화합물의 상호작용을 향상시켜 회합 및 결합 특이성을 강화시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 화합물은 갈락토오스 또는 헤테로글리코시드의 아노머 탄소 상의 "아미드" 또는 "설폰" 원자에 결합된 상기 갈락토오스 또는 헤테로글리코시드 코어의 모노사카라이드, 디사카라이드 및 올리고사카라이드를 포함한다.

일부 실시양태에서, 화합물은 2개의 갈락토시드가 하나 이상의 "아미드" 및/또는 "설폰" 결합에 의해 결합된 대칭형 디갈락토시드이다. 일부 실시양태에서, 화합물은 2개의 갈락토시드가 하나 이상의 설폰아미드 결합에 의해 결합된 대칭형 디갈락토시드이다. 일부 실시양태에서, 화합물은 2개의 갈락토시드가 하나 이상의 "아미드" 결합에 의해 결합되고 상기 "아미드"가 갈락토오스의 아노머 탄소에 결합된 대칭형 디갈락토시드이다. 일부 실시양태에서, 화합물은 2개의 갈락토시드가 하나 이상의 "아미드" 결합 및 하나 이상의 설폰 결합에 의해 결합되고 상기 "아미드"가 갈락토오스의 아노머 탄소에 결합된 대칭형 디갈락토시드이다. 다른 실시양태에서, 화합물은 비대칭형 디갈락토시드일 수 있다. 예를 들어, 화합물은 갈락토오스 코어 상에 서로 다른 방향족 또는 지방족 치환기를 함유할 수 있다.

일부 실시양태에서, 화합물은 갈락토오스의 아노머 탄소 상에 하나 이상의 "아미드" 또는 "설폰"을 함유하는 단일 갈락토시드인 대칭형 갈락토시드이다. 일부 실시양태에서, 상기 갈락토시드는 해당 갈락토오스의 아노머 탄소에 결합된 하나 이상의 "아미드" 및 상기 "아미드"에 결합된 하나 이상의 황을 함유한다. 일부 실시양태에서, 화합물은 갈락토오스 코어 상에 서로 다른 방향족 또는 지방족 치환기를 함유할 수 있다.

어떠한 특정 이론으로 한정하고자 하는 것은 아니지만, AM 결합을 함유하는 화합물이, 탄수화물을 인식하는 것으로 알려진 렉틴 또는 갈렉틴과의 특이적인 상호작용에 대한 화학적, 물리적 및 다른 자리 입체성 특성을 유지하면서 화합물을 대사적으로 안정하게 만든다고 생각된다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 갈락토오스의 디갈락토시드 또는 올리고사카라이드는 O-글리코시드 결합을 갖는 화합물보다 대사적으로 더 안정하고 대부분의 갈락코시다제 분해에 대하여 저항력이 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 갈락토오스의 디갈락토시드 또는 올리고사카라이드는 S-글리코시드 결합을 갖는 화합물보다 대사적으로 더 안정하다.

본 발명의 양태는 또 다른 갈락토오스, 히드록실 시클로헥산, 방향족 모이어티, 알킬, 아릴, 아민 또는 아미드 기에 "아미드" 유형의 가교[AM]를 갖는 갈락토시드 구조를 기반으로 하는 화합물에 관한 것이다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알킬기"라는 용어는 1개 내지 12개의 탄소 원자, 예를 들어 1개 내지 7개 또는 1개 내지 4개의 탄소 원자를 포함하는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 알킬기는 직쇄형 또는 분지쇄형일 수 있다. 일부 실시양태에서, 알킬기는 3개 내지 7개의 탄소 원자, 바람직하게는 3, 4, 5, 6개 또는 7개의 탄소 원자를 포함하는 환을 형성할 수 있다. 따라서, 알킬은 임의의 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 3-메틸부틸, 2,2-디메틸프로필, n-헥실, 2-메틸펜틸, 2,2-디메틸부틸, 2,3-디메틸부틸, n-헵틸, 2-메틸헥실, 2,2-디메틸펜틸, 2,3-디메틸펜틸, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸 및 1-메틸시클로프로필을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알케닐기"라는 용어는 2개 내지 12개, 예를 들어 2개 내지 7개의 탄소 원자를 포함하는 것을 의미한다. 상기 알케닐기는 적어도 1개의 이중 결합을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 알케닐기는 임의의 비닐, 알릴, 부트-1-에닐, 부트-2-에닐, 2,2-디메틸에테닐, 2,2-디메틸프로프-1-에닐, 펜트-1-에닐, 펜트-2-에닐, 2,3-디메틸부트-1-에닐, 헥스-1-에닐, 헥스-2-에닐, 헥스-3-에닐, 프로프-1,2-디에닐, 4-메틸헥스-1-에닐, 시클로프로프-1-에닐 기 등을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알콕시기"라는 용어는 하나 이상의 불포화 탄소 원자를 포함할 수 있는 1-12개의 탄소 원자를 함유하는 알콕시기에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 알콕시기는 하나 이상의 불포화 탄소 원자를 포함할 수 있는 1개 내지 7개 또는 1개 내지 4개의 탄소 원자를 함유한다. 따라서, "알콕시기"라는 용어는 메톡시기, 에톡시기, 프로폭시기, 이소프로폭시기, n-부톡시기, sec-부톡시기, tert-부톡시기, 펜톡시기, 이소펜톡시기, 3-메틸부톡시기, 2,2-디메틸프로폭시기, n-헥스옥시기, 2-메틸펜톡시기, 2,2-디메틸부톡시기, 2,3-디메틸부톡시기, n-헵트옥시기, 2-메틸헥스옥시기, 2,2-디메틸펜톡시기, 2,3-디메틸펜톡시기, 시클로프로폭시기, 시클로부톡시기, 시클로펜틸옥시기, 시클로헥실옥시기, 시클로헵틸옥시기 및 1-메틸시클로프로필옥시기를 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "아릴기"라는 용어는 4개 내지 12개의 탄소 원자를 포함하는 것을 의미한다. 상기 아릴기는 페닐기 또는 나프틸기일 수 있다. 상기 언급한 기들은 유기 화학 분야에 공지된 다른 치환기들로 자연적으로 치환될 수 있다. 상기 기들은 2 이상의 상기 치환기들로 치환될 수도 있다. 치환기의 예로는 할로겐, 알킬, 알케닐, 알콕시, 니트로, 설포, 아미노, 히드록시 및 카르보닐기를 들 수 있다. 할로겐 치환기는 브로모, 플루오로, 요오도 및 클로로일 수 있다. 알킬기는 1개 내지 7개의 탄소 원자를 함유하는 상기 정의된 바와 같은 것이다. 알케닐은 2개 내지 7개의 탄소 원자, 바람직하게는 2개 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 상기 정의된 바와 같은 것이다. 알콕시는 불포화 탄소 원자를 함유할 수 있는 1개 내지 7개의 탄소 원자, 바람직하게는 1개 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 하기 정의된 바와 같은 것이다. 트리플루오로메틸과 같은 치환기들의 조합이 존재할 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "헤테로아릴기"라는 용어는 고리 중 적어도 1개의 원자가 헤테로원자인, 즉 탄소가 아닌 4개 내지 18개의 탄소 원자를 포함하는 임의의 아릴기를 포함하는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 상기 헤테로아릴기는 피리딘 또는 인돌기일 수 있다.

상기 언급한 기들은 유기 화학 분야에 공지된 다른 치환기들로 치환될 수 있다. 상기 기들은 2 이상의 치환기들로 치환될 수도 있다. 치환기의 예로는 할로겐, 알콕시, 니트로, 설포, 아미노, 히드록시 및 카르보닐기를 들 수 있다. 할로겐 치환기는 브로모, 플루오로, 요오도 및 클로로일 수 있다. 알킬기는 1개 내지 7개의 탄소 원자를 함유하는 상기 정의된 바와 같은 것이다. 알케닐은 2개 내지 7개의 탄소 원자, 예를 들어 2개 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 상기에서 정의된 바와 같은 것이다. 알콕시는 불포화 탄소 원자를 함유할 수 있는 1개 내지 7개의 탄소 원자, 예를 들어 1개 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 하기에서 정의된 바와 같은 것이다. 일부 실시양태에서, 상기 치환기는

a) 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 카르복시기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 카르복시기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 아미노기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 아미노기로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 아미노 및 카르복시기 양자로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알킬기, 아미노 및 카르복시기 양자로 치환된 적어도 3개의 탄소의 알케닐기, 및 1개 이상의 할로겐으로 치환된 알킬기 (여기서, 할로겐은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오드 기일 수 있다);

b) 적어도 1개의 카르복시기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 할로겐으로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 알콕시기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 니트로기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 설포기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 아미노기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 알킬아미노기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 디알킬아미노기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 히드록시기로 치환된 페닐기, 적어도 1개의 카르보닐기로 치환된 페닐기 및 적어도 1개의 치환된 카르보닐기로 치환된 페닐기;

를 포함할 수 있다.

여기서, NRx는 수소, 알킬기, 알케닐기, 아릴기, 헤테로아릴기 및 헤테로사이클로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알콕시기"라는 용어는 하나 이상의 불포화 탄소 원자를 포함할 수 있는 1-7개의 탄소 원자를 함유하는 알콕시기에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 알킬기는 하나 이상의 불포화 탄소 원자를 포함할 수 있는 1-4개의 탄소 원자를 함유한다. 따라서, "알콕시기"라는 용어는 메톡시기, 에톡시기, 프로폭시기, 이소프로폭시기, n-부톡시기, sec-부톡시기, tert-부톡시기, 펜톡시기, 이소펜톡시기, 3-메틸부톡시기, 2,2-디메틸프로폭시기, n-헥스옥시기, 2-메틸펜톡시기, 2,2-디메틸부톡시기, 2,3-디메틸부톡시기, n-헵트옥시기, 2-메틸헥스옥시기, 2,2-디메틸펜톡시기, 2,3-디메틸펜톡시기, 시클로프로폭시기, 시클로부톡시기, 시클로펜틸옥시기, 시클로헥실옥시기, 시클로헵틸옥시기 및 1-메틸시클로프로필옥시기를 포함한다.

단량체 화합물

일부 실시양태에서, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물은 하기 화학식 (1)을 가진다:

화학식 (1)

상기 식 중에서,

B는 OH, NH₂, NHAc 또는 NH-알킬이며, 여기서 알킬기는 1개 내지 18개의 탄소를 포함하고,

W는 O, S, CH₂, NH 및 Se로 이루어진 군으로부터 선택되고,

중 하나이다.

일부 실시양태에서, A-M은 아미드 -N(-Ra)-C(=O)-, 설폰아미드 -N(-H)-S(=O₂)-, 메틸에테르 -C(-H₂)-O-, 메틸에스테르 -C(=O)-O-, 카르보설폰 -C(-H₂)-S(=O)(=O)-, 포스페이트 -O-P(=O)(-OH)-, 디포스페이트 -O-P(=O)(-O)-O-P(=O)(-O)-, 히드라지드 -N(-H)-N(-H)-, 아미노산 또는 이들의 조합을 포함하는 적어도 2개의 원자들의 스페이서를 나타낸다.

일부 실시양태에서, 화합물은 일반식 (1)을 가지며, 이 경우 AM--R1은 예를 들어 N'-메틸아미드-3,4-디플루오로벤젠이고, Y-R1은 트리아졸-3-플루오로벤젠이다.

이량체 화합물

일부 실시양태에서, 화합물은 이량체 폴리히드록실화 시클로알칸 화합물이다.

일부 실시양태에서, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물은 화학식 (2)를 가진다:

화학식 (2)

상기 식 중에서,

A-M은 아미드 -N(-Ra)-C(=O)-, 설폰아미드 -N(-H)-S(=O₂)-, 메틸에테르 -C(-H₂)-O-, 메틸에스테르 -C(=O)-O-, 카르보설폰 -C(-H₂)-S(=O)(=O)-, 포스페이트 -O-P(=O)(-OH)-, 디포스페이트 -O-P(=O)(-O)-O-P(=O)(-O)-, 카르보히드라지드 -C(=O)-NH-NH-, 설포노히드라지드 -S(=O)₂-NH-NH-, 히드라지드 -N(-H)-N(-H)-, 포스포닉 디히드라지드 -P(=O)(-NH-NH₂)(NH-NH-) 또는 이들의 조합을 포함하는, 적어도 2개의 원자들의 스페이서를 나타내며,

A는 NRa, CRb, PRc 또는 아미노산으로부터 독립적으로 선택되고,

M은 NRa, CRb, PRc, ORd, SRe, 아미노산, 또는 3개 이상의 원자의 헤테로시클릭 치환을 포함하는 소수성 탄화수소 유도체로부터 독립적으로 선택되며,

B는 OH, NH₂, NHAc, 또는 1개 내지 18개의 탄소의 NH-알킬이며,

W는 O, S, CH₂, NH 및 Se로 이루어진 군으로부터 선택되고,

X는 O, N, S, CH₂, NH 및 PO₂로 이루어진 군으로부터 선택되며;

중 하나이다.

일부 실시양태에서, 화합물은 하기 일반식을 가진다:

상기 식 중에서,

A-M은 아미드, 설페이트, 설폰아미드, 탄소 에스테르이고/이거나, AM-벤젠-AM 구조와 같은 아릴 유도체를 포함하고 (실시예 14, 반응식 6);

W는 O, N, S, CH₂, NH 및 Se로 이루어진 군으로부터 선택된다.

Y 및 Z는 O, S, C, NH, CH₂, NR, Se 및 아미노산으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

R1, R2, R3 및 R4 (Rx)는 CO, SO₂, SO, PO₂, PO, CH, 수소, 하기를 포함하나 그에 제한되지 않는 분자량 약 50-200 D의 헤테로시클릭 치환을 포함하는 소수성 선형 및 환형으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다:

e) 사카라이드, 치환된 사카라이드, D-갈락토오스, 치환된 D-갈락토오스, C3-[1,2,3]-트리아졸-1-일-치환된 D-갈락토오스, 수소, 알킬기, 알케닐기, 아릴기, 헤테로아릴기, 및 헤테로사이클 및 유도체, 아미노기, 치환된 아미노기, 이미노기, 또는 치환된 이미노기.

Rx는 수소, 알킬기, 알케닐기, 아릴기, 헤테로아릴기 및 헤테로사이클로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본원에서 사용된 바와 같이, "알킬기"라는 용어는 하나 이상의 불포화 탄소 원자를 포함할 수 있는 1-7개의 탄소 원자를 함유하는 알킬기에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 상기 알킬기는 하나 이상의 불포화 탄소 원자를 포함할 수 있는 1-4개의 탄소 원자를 함유한다. 상기 알킬기의 탄소 원자는 직쇄 또는 분지쇄를 형성할 수 있다. 상기 알킬기의 탄소 원자는 3, 4, 5, 6개 또는 7개의 탄소 원자를 함유하는 환을 형성할 수 있다. 따라서, 본원에서 사용된 바와 같이, "알킬기"라는 용어는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 3-메틸부틸, 2,2-디메틸프로필, n-헥실, 2-메틸펜틸, 2,2-디메틸부틸, 2,3-디메틸부틸, n-헵틸, 2-메틸헥실, 2,2-디메틸펜틸, 2,3-디메틸펜틸, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸 및 1-메틸시클로프로필을 포함한다.

어떠한 특정 이론으로 한정하고자 하는 것은 아니지만, 본원에서 기재된 갈락토오스-아미드 또는 황 기반의 링커 화합물은 안정성이 개선되는데, 그 이유는 예컨대 치환이 없는 방향족 고리, 탄소-산소 시스템, 탄소-질소 시스템 등의 그 구조가 가수분해(대사) 및 산화되는 경향이 덜하기 때문이다.

합성 경로

본 발명의 화합물은 하기의 일반적인 방법 및 절차에 의해 제조될 수 있다. 통상적이거나 바람직한 공정 조건(예컨대, 반응 온도, 시간, 반응물의 몰비, 용매, 압력, pH 등)이 주어지는 경우, 달리 언급하지 않는 한 다른 공정 조건들도 사용될 수 있음을 이해해야 한다. 최적 반응 조건은 특정 반응물, 사용된 용매 및 pH 등에 따라 달라질 수 있지만, 이러한 조건들은 통상적인 최적화 절차를 사용하여 당업자에 의해 결정될 수 있다.

일부 실시양태에서, 화합물은 실시예 14에 제공되고 도 4에 나타낸 합성 경로를 사용하여 합성하였다.

예를 들어, 화합물 G631 (갈락토설폰아미드, GTJC-026)은 실시예 14의 반응식 11에 나타낸 것과 같이 제조하였다 (도 4에 나타냄).

일부 실시양태에서, 디갈락토아미드 화합물은 실시예 14의 반응식 6에 제공되고 도 4에 나타낸 합성 경로를 사용하여 합성하였다.

예를 들어, 화합물 G637 (아릴아미드 결합을 갖는 디갈락토아미드, GTJC-013-12)은 실시예 14의 반응식 6 및 도 4에 나타낸 바와 같이 제조하였다.

약제학적 조성물

본 발명의 양태는 약제의 제조를 위한 본원에 기재된 화합물의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 양태는 본원에 기재된 하나 이상의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 상기 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용가능한 아주반트, 희석제, 부형제 및 담체 중 하나 이상을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 기재된 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 경구, 정맥내, 국소, 복강내, 비강, 협측, 설하 또는 피하 투여를 위해, 또는 예를 들어 에어로졸 또는 공기 현탁된 미세 분말의 형태로 호흡기를 통한 투여를 위해, 또는 눈, 안구내, 유리체내 또는 각막을 통한 투여를 위해 적합하게 만들 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 기재된 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 예를 들어, 정제, 캡슐, 분말, 주사액, 스프레이액, 연고, 경피 패치 또는 좌약의 형태일 수 있다.

치료 방법

본 발명의 일부 양태는 갈렉틴의 리간드에 대한 결합과 관련된 질환의 치료에 사용하기 위한, 본원에 기재된 화합물 또는 본원에 기재된 조성물의 용도에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 갈렉틴은 갈렉틴-3이다.

본 발명의 일부 양태는 갈렉틴의 리간드에 대한 결합과 관련된 다양한 질환들의 치료 방법에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 치료적 유효량의 본원에 기재된 적어도 하나의 화합물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 이를 필요로 하는 대상체는 높은 수준의 갈렉틴-3을 함유하는 인간이다. 갈렉틴, 예를 들어 갈렉틴-3의 수준은 당업계에 공지된 임의의 방법을 사용하여 정량화할 수 있다.

일부 실시양태에서, 상기 질환은 염증성 질환, 예를 들어 염증성 장질환, 크론병, 다발성 경화증, 전신 홍반성 루푸스, 궤양성 대장염이다.

일부 실시양태에서, 상기 질환은 섬유증, 예를 들어 간 섬유증, 폐 섬유증, 신장 섬유증, 심장 섬유증 또는 장기의 정상적인 기능에 위해를 가하는 임의의 장기의 섬유증이다.

일부 실시양태에서, 상기 질환은 암이다.

일부 실시양태에서, 상기 질환은 자가면역성 질환, 예컨대 류머티스성 관절염 및 다발성 경화증이다.

일부 실시양태에서, 상기 질환은 심장병 또는 심부전이다.

일부 실시양태에서, 상기 질환은 대사성 질환, 예를 들어 당뇨병이다.

일부 실시양태에서, 관련된 질환은 비정상적인 혈관신생, 예컨대 안구 혈관신생, 상기 안구 혈관신생과 관련된 질환 또는 병태 및 암이다.

일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 유기 치환기에 대한 아미드 또는 설폰 아미드 유형의 결합을 통해 접합된 피라노실 및/또는 푸라노실 구조를 포함하고, 일반 구조 R'-Gal-AM-R"의 "갈락토아미드" 및/또는 "갈락토설폰아미드"로 나타내는데, 여기서 "AM"은 "아미드" 또는 "설폰아미드" 유형의 결합이고, R'와 R"는 유기 치환기이다.

일부 실시양태에서, 화합물은 유기 치환기에 대한 "AM" 유형의 결합에 의해 피라노실 및/또는 푸라노실의 아노머 탄소를 통해 연결된 피라노실 및/또는 푸라노실과 같은 기능성 갈락토오스로 이루어진다. 본원에서, 상기 "AM" 결합은 단순한 아미드로 제한되지 않으며, 임의의 하기 결합일 수 있다: N'-메틸아미드, 설폰아미드, C-아미드, O-숙신이미드, 아세토히드라지드, 메틸 아미드, N-에틸벤젠-아미드, N-에틸아미드, N-메톡시프로판-아미드, N-메톡시프로판올-아미드, 메틸-황 또는 설폰 링커 또는 상기한 것들의 임의의 조합.

일부 실시양태에서, 상기 유기 치환기는 피라노실 및/또는 푸라노실 구조의 아노머 탄소의 갈락토오스 코어 또는 "AM" 링커에 연결된 특정 방향족 치환기이다. 이러한 방향족 치환은 렉틴의 탄수화물 인식 도메인(CRD)을 구성하는 아미노산 잔기들(예컨대, 아르기닌, 트립토판, 히스티딘, 글루탐산 등)과 본 화합물의 상호작용을 향상시켜 회합 및 결합 특이성을 강화시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 상기 유기 치환기는 모노사카라이드, 디사카라이드, 올리고사카라이드 또는 헤테로글리코시드, 예컨대 산소를 대체하는 질소 또는 황 원자를 함유하고 갈락토오스 코어의 아노머 탄소 상의 "아미드" 링커에 결합된 이미노당 또는 티오당 탄수화물을 포함한다.

일부 실시양태에서, 화합물은 2개의 갈락토시드가 "아미드" 링커에 의해 결합된 대칭형 디갈락토시드이다. 다른 실시양태에서, 화합물은 비대칭형 탄수화물로 이루어질 수 있다. 예를 들어, 각각의 갈락토시드는 서로 다른 방향족 또는 지방족 치환기, 또는 C5 산소가 S (5-티오-D-갈락토오스) 또는 N (5-이미노-D-갈락토오스)로 대체된 갈락토오스의 헤테로원자 유도체를 함유할 수 있다.

어떠한 특정 이론으로 한정하고자 하는 것은 아니지만, "아미드" 기반의 링커 함유 분자들을 함유하는 화합물이, 탄수화물을 인식하는 것으로 알려진 렉틴 또는 갈렉틴과의 특이적인 상호작용에 대한 화학적, 물리적 및 다른 자리 입체성 특성을 유지하면서 화합물을 대사적으로 안정하게 만든다고 생각된다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 갈락토오스의 갈락토아미드 및 갈락토설폰아미드는 O-글리코시드 결합을 갖는 화합물보다 대사적으로 더 안정하다.

본 발명의 양태는 하기의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물이다:

상기 식 중에서,

X는 NH, NCH₂, SNH, SO₂, CH₂, COH, Se 또는 아미노산이고,

Z는 치환기 R₂ 및 R₃에 대하여 "AM" 아미드 유형의 결합, 예컨대, 아미드, N'-메틸아미드, 설폰아미드, 카르보설폰, 설포네이트, 아세토히드라지드 결합을 생성하기 위해 C, NH, O, S, SO₂, COH, Se로 이루어진 결합으로부터 독립적으로 선택되며;

W는 O, N, S, CH₂, NH 및 Se로 이루어진 군으로부터 선택되고;

Y는 O, S, C, NH, CH₂, Se 및 아미노산으로 이루어진 군으로부터 선택되며;

R₁, R₂, R₃ 및 R₄는 H, CO, SO₂, SO, PO₂, PO, CH, 및 분자량 약 50-200 D의 헤테로시클릭 치환을 포함하는 소수성 선형 및 환형 탄화수소로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.

일부 실시양태에서, AM 결합은 Se 또는 Se-Se 결합 및 1개 이상의 원자들, 예컨대 C 또는 N을 포함한다. 일부 실시양태에서, Se는 아노머 탄소에 직접적으로 연결될 수 있고, C, N 또는 O에 연결된다. 일부 실시양태에서, Se는 제2 위치에 존재할 수 있으며, C 또는 N은 아노머 탄소에 연결된다.

일부 실시양태에서, 소수성 선형 및 환형 탄화수소는

: a) 적어도 4개의 탄소의 알킬기, 적어도 4개의 탄소의 알케닐기, 카르복시기로 치환된 적어도 4개의 탄소의 알킬기, 카르복시기로 치환된 적어도 4개의 탄소의 알케닐기, 아미노기로 치환된 적어도 4개의 탄소의 알킬기, 아미노기로 치환된 적어도 4개의 탄소의 알케닐기, 아미노 및 카르복시기 양자로 치환된 적어도 4개의 탄소의 알킬기, 아미노 및 카르복시기 양자로 치환된 적어도 4개의 탄소의 알케닐기, 및 1개 이상의 할로겐으로 치환된 알킬기,

중 하나를 포함할 수 있다.

실시예

실시예 1: 생리학적 리간드에 대한 갈렉틴 결합의 화합물 억제

갈렉틴-3 및 갈렉틴-1을 포함하나 이에 제한되지 않는 갈렉틴 단백질은, 설치류, 영장류 및 인간을 포함하나 이제 제한되지 않는 포유동물 종에서 다수의 생물학적으로 관련이 있는 결합 리간드를 가진다. 갈렉틴은 β-갈락토시드 함유 당을 갖는 당단백질에 결합하는 탄수화물 결합 단백질이다. 갈렉틴 단백질이 이러한 리간드에 결합한 결과, 세포 안과 밖 및 조직 및 전체 유기체에서 세포 생존 및 신호전달을 조절하거나, 세포 성장 및 주화성에 영향을 미치거나, 사이토카인 분비를 방해하거나, 세포-세포 및 세포-기질 상호작용을 매개하거나, 또는 종양 진행 및 전이에 영향을 미치는 것을 비롯한 수많은 생물학적 효과를 유발한다. 또한, 갈렉틴 단백질의 정상적 발현의 변화는, 염증성, 섬유성 및 신생물성 질환을 포함하나 이에 제한되지 않는 다수의 질환들에서의 병리학적 효과를 일으킨다 (도 8b, 9 참조).

본 발명의 화합물의 갈렉틴-3의 작용 활성과 중화 효과를 스크리닝하기 위해, 특정 단일클론 항체를 선택하였고, ELISA 포맷을 이용한 분석 어세이를 도 5a에 도시된 바와 같이 개발하였다. 갈렉틴-3에 대한 상기 항체 기반의 ELISA와 인테그린 aMB2의 억제와의 억제 비교는 도 7a 및 도 7b에 제시된 바와 같이 0.95보다 우수한 회귀 계수를 가졌다.

본 발명에 기재된 화합물은 갈렉틴-3을 포함하나 이에 제한되지 않는 갈렉틴 단백질의 탄수화물 인식 도메인에 결합하여, 생물학적으로 관련이 있는 리간드와의 상호작용을 방해하도록 고안되었다. 이러한 화합물들은, 정상적인 발현 수준으로 또는 생리학적 수준 이상으로 증가되는 상황으로 병리학적 과정에 관여할 수 있는 갈렉틴 단백질의 기능을 억제하기 위한 것이다.

정상 세포 기능 및 질환의 병리학에서 중요한 갈렉틴 단백질에 대한 일부 리간드에는, 이에 제한되는 것은 아니지만, TIM-3 (T 세포 면역글로불린 뮤신-3), CD8, T 세포 수용체, 인테그린, 갈렉틴-3 결합 단백질, TGF-β 수용체, 라미닌, 피브로넥틴, BCR (B 세포 수용체), CTLA-4 (세포독성 T-림프구 관련 단백질-4), EGFR (상피세포 성장 인자 수용체), FGFR (섬유모세포 성장 인자 수용체), GLUT-2 (글루코오스 수송체-2), IGFR (인슐린 유사 성장 인자 수용체), 다양한 인터루킨, LPG (리포포스포글리칸), MHC (주요 조직적합성 복합체), PDGFR (혈소판 유래의 성장 인자 수용체), TCR (T 세포 수용체), TGF-β (형질전환 성장 인자-β), TGFβR (형질 전환 성장 인자-β 수용체), CD98, Mac3 항원 [CD107b (분화 107b의 클러스터)로도 알려진 리소좀 관련 막 단백질 2 (LAMP2)]을 포함한다.

세포 기능을 매개하는 다양한 이러한 생물학적 리간드들과 갈렉틴 단백질의 물리적 상호작용을 평가하기 위해 실험을 수행하였다. 상기 실험은 다양한 갈렉틴-3 리간드들 간의 상호작용을 평가하여 도 5b에 나타낸 분석 어세이와 같이 본원에 기재된 화합물들이 이러한 상호작용을 억제할 수 있는지 알아보기기 위해 고안되었다.

상기 어세이 포맷을 사용한 결과, 본원에 기재된 화합물은, 다양한 인테그린 분자(αVβ3, αVβ6, αMβ2, α2β3 등)를 포함하나 이에 제한되지 않는 이들의 리간드들과 갈렉틴 단백질의 상호작용을 약 5 nM 내지 약 40 μM 범위의 IC50으로 억제하는 것으로 나타났다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 5 nM 내지 약 20 nM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 5 nM 내지 약 100 nM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 10 nM 내지 약 100 nM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 50 nM 내지 약 5 μM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 0.5 μM 내지 약 10 μM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 도 7a 및 도 7b에 열거된 바와 같이 약 5 μM 내지 약 40 μM이다. 인테그린 aMB2와 갈렉틴-3 상호작용에 대한 예시적인 본 발명의 화합물의 억제 효과의 추가의 예들을 도 8b에 나타내었고, 인테그린 aVM6과 갈렉틴-3의 억제에 대한 추가의 예들은 도 9에 나타내었다.

실시예 2: 갈렉틴의 표지된 프로브에 대한 결합을 억제하는 화합물

갈렉틴-3 및 다른 갈렉틴 단백질들에 결합하는 플루오레세인 표지된 프로브를 개발된 바 있는데, 이러한 프로브들은 형광 편광화를 사용하여 갈렉틴 단백질에 대한 리간드의 결합 친화도를 측정하는 어세이를 확립하기 위해 사용되어 왔다(Sorme P, et al. Anal Biochem. 2004 Nov 1;334(1):36-47).

본원에 기재된 화합물은 상기 어세이 포맷 (도 6b)을 사용하여 갈렉틴-3 뿐만 아니라 다른 갈렉틴 단백질들에도 강하게 결합하여, 약 5 nM 내지 약 40 μM의 IC₅₀(50% 억제 농도)로, 높은 친화도를 갖는 상기 프로브를 대체한다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 5 nM 내지 약 20 nM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 5 nM 내지 약 100 nM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 10 nM 내지 약 100 nM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 50 nM 내지 약 5 μM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 0.5 μM 내지 약 10 μM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 5 μM 내지 약 40 μM이다.

예시적인 본 발명의 화합물을 합성하여 (도 4) 형광 편광화 어세이에 억제 활성을 나타내었다 (도 8a).

실시예 3: FRET 어세이를 사용하여 갈렉틴 결합을 억제하는 화합물

FRET 어세이 (형광 공명 에너지 전이 어세이)는, 갈렉틴-3을 포함하나 이에 제한되지 않는 갈렉틴 단백질과 형광 표지된 프로브 모델 (도 6a 참조)의 상호작용을 평가하기 위해 개발되었다. 상기 어세이를 사용하면, 본원에 기재된 화합물은 갈렉틴-3 뿐만 아니라 다른 갈렉틴 단백질들에도 강하게 결합하여, 약 5 nM 내지 약 40 μM의 IC₅₀(50% 억제 농도)로, 높은 친화도를 갖는 상기 프로브를 대체한다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 5 nM 내지 약 20 nM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 5 nM 내지 약 100 nM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 10 nM 내지 약 100 nM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 50 nM 내지 약 5 μM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 0.5 μM 내지 약 10 μM이다. 일부 실시양태에서, IC50은 약 5 μM 내지 약 40 μM이다.

실시예 4: 갈렉틴 단백질 중의 아미노산 잔기에 결합하는 화합물

이종핵(Heteronuclear) NMR 분광법은, 갈렉틴-3 분자 상의 상호작용 잔기들을 평가하기 위해, 갈렉틴-3을 포함하나 이에 제한되지 않는 갈렉틴 분자들과 본원에 기재된 화합물의 상호작용을 평가하는데 사용된다.

Gal-1의 제조에 대해 전술한 바와 같이, 균일하게 ¹⁵N-표지된 Gal-3을 BL21(DE3) 컴피턴트 세포(Novagen)에서 발현시키고, 최소 배지 중에서 성장시키며, 락토오스 친화성 컬럼에서 정제한 후, 겔 여과 컬럼 상에서 분별 분류한다 [Nesmelova IV, Pang M, Baum LG, Mayo KH. 1H, 13C, and 15N backbone and side-chain chemical shift assignments for the 29 kDa human galectin-1 protein dimer. Biomol NMR Assign 2008 Dec;2(2):203-205].

균일하게 ¹⁵N-표지된 Gal-3을 95% H₂O/5% D₂O 혼합물을 사용하여 제조한 pH 7.0의 20 mM 인산칼륨 완충액 중에 2 mg/ml의 농도로 용해시켰다. ¹H-¹⁵N HSQC NMR 실험을 사용하여 본원에 기재된 일군의 화합물들의 결합을 조사하였다. 재조합 인간 Gal-3에 대한 ¹H 및 ¹⁵N 공명주파수 지정(resonance assignment)은 이미 보고된 바 있다 [Ippel H, et al. (1)H, (13)C, and (15)N backbone and side-chain chemical shift assignments for the 36 proline-containing, full length 29 kDa human chimera-type galectin-3. Biomol NMR Assign 2015 Apr;9(1):59-63].

NMR 실험은 H/C/N 3중-공명 프로브 및 x/y/z 3축 펄스장 구배 유닛을 구비한 브루커(Bruker) 600MHz, 700MHz 또는 850MHz 분광계 상에서 30℃로 수행한다. 구배 민감도가 향상된 버전의 2차원 ¹H-¹⁵N HSQC는 각기 질소 및 양성자 크기로 256(t1)×2048(t2) 복소수형 데이터 포인트에 적용시킨다. 원 데이터는 NMRPipe를 사용하여 변환 및 처리하고 NMRview를 사용하여 분석한다.

상기 실험은 갈렉틴-3의 탄수화물 결합 도메인 내의 결합 잔기들에서 본원에 기재된 화합물들과 갈락토오스 간의 차이점을 보여준다.

실시예 5: 갈렉틴 결합 억제와 관련된 사이토카인 활성의 세포 활성

실시예 1은 생리학적 리간드의 갈렉틴 분자에 대한 결합을 억제하는 본 출원의 화합물의 능력에 대해 기술하고 있다. 본 실시예의 실험에서는, 이러한 결합 상호작용의 기능적 함의를 평가하였다.

본원에 기재된 화합물에 의해 억제되는, 갈렉틴-3과 상호작용하는 것들 중 하나는 TGF-β 수용체이었다. 따라서, 실험은 세포주에서의 TGR-β 수용체 활성에 대한 화합물의 효과를 평가하기 위해 수행하였다. LX-2 및 THP-1 세포를 포함하나 이에 제한되지 않는 다양한 TGF-β 반응성 세포주를 TGF-β로 처리한 후, 다양한 세포내 SMAD 단백질의 인산화를 포함하나 이에 제한되지 않는 제2 메신저 시스템의 활성화를 조사함으로써 세포들의 반응을 측정하였다. TGF-β가 다양한 세포주에서 제2 메신저 시스템을 활성화시킨다는 것을 규명한 후, 상기 세포들을 본원에 기재된 화합물로 처리하였다. 상기 실험을 통해, 이러한 화합물들이 TGF-β 신호전달 경로를 억제한다는 것을 알 수 있었는데, 이는 실시예 1에 기재된 결합 상호작용 억제가 세포 모델에서 생리학적 역할을 가지고 있음을 확인시켜 주는 것이다.

다양한 인테그린 분자들과 갈렉틴-3의 상호작용을 억제하는 생리학적 유의성을 평가하기 위해 세포 어세이도 수행하였다. 세포-세포 상호작용 연구는 혈관 내피세포 뿐만 아니라 다른 세포주에 결합하는 단핵구를 사용하여 수행하였다. 본원에 기재된 화합물을 사용한 세포의 처리는 이러한 인테그린 의존성 상호작용을 억제하는 것으로 나타났던 바, 이로써 실시예 1에 기재된 결합 상호작용 억제가 세포 모델에서 생리학적 역할을 가진다는 점을 확인하였다.

실시예 1에 정의된 다양한 인테그린 및 다른 세포 표면 분자와의 갈렉틴 -3의 상호작용을 억제하는 생리학적 유의성을 평가하기 위해 세포 운동성 어세이를 수행하였다. 세포 연구는 반투과막으로 분리된 웰 장치에서 다수의 세포주들을 사용하여 수행하였다. 본원에 기재된 화합물을 사용한 세포의 처리는 세포 운동성을 억제하는 것으로 나타났던 바, 이로써 실시예 1에 기재된 결합 상호작용 억제가 세포 모델에서 생리학적 역할을 가진다는 점을 확인하였다.

실시예 6: 시험관내 염증성 모델 (단핵구 기반 어세이)

PMA (Phorbol 12-myristate 13-acetate: 포르볼 12-미리스테이트 13-아세테이트)를 2-4일 동안 사용하여, 염증성 대식세포로 분화되는 THP-1 단핵구 배양물로부터 출발하는 대식세포 편광 모델을 수립하였다. 상기 대식세포는 일단 분화되면(M0 대식세포), 대식세포 활성화(M1)를 위한 LPS 또는 LPS 및 IFN-감마로 1-3일 동안 염증 단계로 유도되었다. 사이토카인 및 케모카인 어레이를 분석하여 THP-1 유래 대식세포의 염증 단계로의 분극화를 확인하였다. 대식세포 분극화에 대한 항-갈렉틴-3 화합물의 영향에 대한 평가는, 먼저 비색법 (테트라졸륨 시약 사용)을 사용하여 세포 생존율을 모니터링하여 증식 또는 세포독성 어세이 {프로메가 제조, 신규한 테트라졸륨 화합물인 [3-(4,5-디메틸-2-일)-5-(3-카르복시메톡시페닐)-2-(4-설포페닐)-2H-테트라졸륨, 내부 염; MTS] 및 전자 커플링 시약 (페나진 에토설페이트, PES)을 함유하는 CellTiter 96® AQueous One Solution 세포 증식 어세이}에서 생존 세포의 수를 측정하고, 염증의 세포 과정에서 단핵구/대식세포의 이동과 침윤을 조절하는 핵심 단백질인 케모카인 단핵구 화학유인성 단백질-1 (MCP-1/CCL2)의 정량적 측정으로 평가된 염증 단계에 의해 이루어졌다. 다른 사이토카인 및 케모카인의 발현과 분비에 대한 후속 시험들은 선도 활성 화합물에 대하여 수행되었다. 일부 실시양태에 따른 화합물에 대한 결과는 도 10a에 나타낸 바와 같이 MCP-1의 백분율 감소로 나타내었다.

방법 단계의 예는 다음과 같다:

1) THP-1 세포를, 겐타마이신(Gentamicin)을 함유하는 배지에서 배양하였다.

2) THP-1 세포들을, 5-50 ng/ml PMA를 함유하는 어세이 배지에서 2일 간의 항온배양을 위해 96 웰 플레이트의 웰 (웰당 2,000개의 세포)로 옮긴다.

3) 시험 화합물의 연속 희석은 LPS (1-10 ng/ml) 함유 배지 중에서 수행한다.

4) 겐타마이신과 5-20 ng/ml PMA도 함유하는 200 ml의 각 웰의 최종 어세이 부피에, 100 ml의 화합물/LPS 용액을 각 웰에 첨가한다.

5) 세포는 최대 8일까지 항온배양한다.

6) 바이오마커 어세이를 위해 격일로 20-60 ㎕의 샘플을 제거한다.

7) 종료시 15 ml의 프로메가 기질인 CellTiter 96 Aqueous One Solution을 준비하여 각 웰에 첨가한 후, 세포독성을 (490 nm에서) 모니터링한다.

8) 세포 바이오마커 평가를 위해, 세포들을 1XPBS로 세척하고 200 ㎕의 용해 완충액으로 1시간 동안 추출한다. 추출물을 10분 동안 회전시킨 후 120 ㎕의 샘플을 상단으로부터 제거한다. 모든 샘플은 시험할 때까지 -70℃로 유지한다. (도 10 참고)

실시예 7: 세포 배양 섬유 형성 모델

본원의 화합물의 세포에 대한 영향을 평가하기 위해, LX-2 세포를 포함하나 이에 제한되지 않는 섬유형성 성상 세포 배양물을 사용하여 실험을 수행하였다. LX-2 세포는 혈청이 결핍된 배지 및 서로 다른 비율의 THP-1 세포로 컨디셔닝된 배지로 스파이크된 배지를 사용하여 배양액 중에서 활성화시켰다. TIMP-1을 포함하나 이에 제한되지 않는 명확히 규명된 다양한 마커들을 사용하여 LX-2 세포의 활성화를 모니터링하였다. 입증가능한 LX-2 세포 활성화는 처리 후 24 시간까지 분명하였다. 본원에 기재된 화합물을 사용한 세포의 처리는 활성화를 억제하는 것으로 나타났는데, 이는 세포 모델에서 생리학적 역할을 확인시켜주는 것이다.

실시예 8: 간 섬유증의 생체내 동물 모델

NASH 마우스 섬유증 모델

상기 NASH 모델은 수컷의 신생 마우스[C57BL/6J 마우스]를 사용하였다. 생후 2일 차에 당뇨병을 유발하는 스트렙토조토신(미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마) 용액의 단일 피하 주사로 상기 질환을 유발시켰다. 4주령 이후, 고지방식(HFD, 지방에서 57%의 kcal)은 타임라인에 동봉된 그래프에 나타난 바와 같이 12주에서 최대 16주 동안 도입하였다. 다양한 용량의 비히클 및 시험 물질을 매주 경구 또는 SQ 또는 정맥내 투여하고 체중 1kg 당 mg으로 계산하였다. 동물 관리는 승인된 동물 사용 지침에 따른 프로토콜을 따랐다. 동물을 3시간 동안 절식시킨 후, 에테르 마취 하에 직접적인 심장 천자를 통한 방혈로 희생시켰다.

혈장 ALT 수준 및 체중을 기반으로 한 처리 전에, 마우스들을 처리군으로 무작위 추출하였다. 최소 3개의 군들에 대하여 연구하였다.

1군: 12마리의 정상적인 마우스들에게 아무런 처리없이 무제한으로 자유롭게 보통의 식단을 급식하였다.

2군: 6주 내지 12주령에, 12마리의 NASH 마우스에게 비히클 (0.9%의 염화나트륨)을 매주 1회 정맥내 투여하였다.

3군: 6주 내지 12주령에, 12마리의 NASH 마우스에게 비히클 (0.9%의 염화나트륨) 중의 시험 제품을 매주 1회 정맥내 투여하였다.

처리하고 4주가 지난 후에 마우스들을 희생시켰다.

본원에 기술된 셀레노-갈락토시드 화합물은, 비히클 대조군에 비해 콜라겐 10% 내지 80%으로 측정된 간 섬유증을 1군에서 규명된 거의 정상적인 콜라겐 수준으로 감소시킨다.

일반 생화학 시험:

당뇨병성 공복 혈당은 예를 들어 G Checker [일본 소재의 산교 쥬야쿠 컴퍼니 리미티드(Sanko Junyaku Co. Ltd.) 제조]를 사용하여 전혈 샘플에서 측정하였다.

간 기능은 예컨대 FUJI DRY CHEM 7000 (일본 소재의 후지 필름 제조)을 사용하여 AST, ALT, 총 빌리루빈, 크레아티닌 및 TG의 수준을 혈장에서 측정하여 평가하였다.

간 생화학: 콜라겐 함량의 정량적 평가인 간 히드록시프롤린 함량을 정량하기 위해, 냉동 간 샘플 (40-70 mg)을 표준 알칼리산 가수분해 방법으로 처리한 후, 히드록시프롤린 함량을 총 간 단백질에 대하여 보정하였다.

총 간 지질 추출물은 폴치법(Folch’s method)에 의해 미상엽으로부터 수득하였고, 간 TG 수준은 트리글리세리드 E-시험(일본 와코)을 사용하여 측정하였다.

조직병리학 및 면역조직화학적 분석 간 박편들을 보우잉 용액 중에서 미리 고정시킨 간 조직의 파라핀 블록으로부터 절단하고, 릴리-마이어 헤마톡실린[일본 소재의 뮤토 퓨어 케미컬즈(Muto Pure Chemicals) 제조] 및 에오신 용액(일본 와코)으로 염색하였다.

콜라겐 침착을 시각화하기 위해, 보우잉 용액 중에서 고정시킨 간 박편들을 피크로-시리우스 레드 용액 [picro-Sirius red solution, 독일 소재의 발데크 게엠베하 운트 코 카게(Waldeck GmbH & Co. KG) 제조]을 사용하여 염색하였다. NAFLD 활성 점수(NAS)도 확립된 기준에 따라 계산하였다.

SMA, F4/80, 갈렉틴-3, CD36 및 iNOS에 대한 면역조직화학은 염증 및 섬유증의 정도에 대한 지표로서 각각의 양의 영역으로부터 추정될 수 있다.

랫트의 섬유증/간경화증 모델 (TAA 모델):

상기 실험은 실험실 동물의 관리 및 사용 지침 (Institute of Laboratory Animal Resources, 1996, Nat. Acad. Press) 및 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC: Institutional Animal Care and Use committee)에 따라 유지된 동물 연구 시설(Jackson Laboratory)에서 수득한 160g 내지 280g의 수컷 스프라그-돌리(Sprague-Dawley) 랫트를 사용하였다. 실험 종료시, 동물들을 페노바비탈 마취 하에 동물을 안락사시켰다.

2주의 적응 기간 후에, 8주간의 유도 기간을 개시하며, 이 시기에 모든 랫트들에게 0.9%의 식염수에 용해된 멸균 용액의 복강내(IP) 주사제인 티오아세트아미드(TAA, 미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마 케미컬 컴퍼니)를 주 2회 또는 3회의 IP 주사로 투여하는데, 첫주에 450 mg/kg/주로 투여한 후, 7주 요법으로 400 mg/kg/wk 체중으로 투여하였다. 섬유증 진행을 평가하기 위해, 4주와 8주차에 2마리의 랫트를 안락사시킨 후 간에 대하여 조직학 검사를 수행하였다. 간경화증을 전개시키기 위해서는, 동물에게 11-12주까지 TAA를 복강내(IP) 투여하며, 섬유증은 8주면 충분하다. 치료는 8주에 시작하여 4주 동안 이루어지며, 비히클 대조군은 0.9%의 NaCl을 4주간 주 2회 복강내 투여하였다. 실험용 시험 제품은 섬유증 또는 간경화증 각각에 대해 8주 또는 11주에 시작하여 주 2회 또는 1회로 복강내 투여하였다. 치료 기간의 종료시, 1-5% 사이의 이소플루오란을 사용하여 흡입을 통해 랫트를 마취시킨 후 개복술을 수행하였다. 랫트를 희생시키는 시점에, 간문맥으로 도입된 16G 혈관카테터를 사용하여 간문맥압을 측정함으로써 수주(water column)의 높이를 측정하였다. 간을 제거하고 무게를 측정한 후, 가장 큰 간엽의 조각들을 추가의 분석에 사용하였다. 비장도 제거하여 폐기 전에 무게를 측정하였다.

시리우스 레드로 염색시킨 실험의 간 박편들에 대한 예시적인 조직구조는 항-섬유증 효과에 대해 통계적으로 허용가능한 평균 콜라겐이 20% 감소되었음을 보여주었다. 브릿지 섬유증의 가닥들은 진행성 섬유증 단계를 나타낸다 (이들은 콜라겐 섬유의 가닥들임).

생화학 시험:

NASH 모델의 경우와 같이, 섬유증으로 인해 확장된 간 손상을 평가하기 위해 다양한 진단 시험을 수행하였다:

총 간 지질 추출물은 폴치법에 의해 미상엽으로부터 수득하였고, 간 TG 수준은 트리글리세리드 E-시험(일본 와코)을 사용하여 측정하였다.

조직병리학 및 면역조직화학적 분석 간 박편들을 보우잉 용액 중에서 미리 고정시킨 간 조직의 파라핀 블록으로부터 절단하고, 릴리-마이어 헤마톡실린[일본 소재의 뮤토 퓨어 케미컬즈 제조] 및 에오신 용액(일본 와코)으로 염색하였다.

콜라겐 침착을 시각화하기 위해, 보우잉 용액 중에서 고정시킨 간 박편들을 피크로-시리우스 레드 용액 (독일 소재의 발데크 게엠베하 운트 코 카게 제조)을 사용하여 염색하였다. NAFLD 활성 점수(NAS)도 확립된 기준에 따라 계산하였다.

간 섬유증의 담관 모델

상기 실험은 담관 결찰 또는 담관성 섬유증을 유발하는 약물을 이용한 처리 후 간 섬유증에 대한 본원에 기재된 화합물의 효능을 평가하기 위해 수행하였다. 본원에 기재된 화합물로 처리된 동물은 간 섬유증이 비히클 대조군에 비해 감소된 것으로 나타났다.

실시예 9: 폐 섬유증의 생체내 동물 모델

상기 실험은 블레오마이신으로 유발된 폐 섬유증의 예방에 대한 본원에 기재된 화합물의 효능을 평가하기 위해 수행하였다. 기관내 식염수를 주입한 미처리 대조군은 10마리의 마우스로 구성하였다. 0일째에 블레오마이신을 다른 마우스 군들의 폐로 천천히 기관내 주입하여 투여하였다. -1, 2, 6, 9, 13, 16일 및 20일째에, 마우스에게 비히클을 매일 1회 (iv, ip, 피하 또는 경구) 투약하거나, 또는 본원에 기재된 다양한 용량의 화합물을 매일 1회 (iv, ip, 피하 또는 경구) 투약하였다. 동물들의 체중을 측정하고 매일 호흡 곤란에 대하여 평가하였다. 21일째에, 모든 동물들을 안락사시킨 후 폐의 습윤 중량을 측정하였다. 희생시, 혈청을 준비하기 위해 후안와 출혈을 통해 혈액을 수집하였다. 우측 폐엽은 후속 히드록시프롤린 분석을 위해 급속 냉동시키는 한편, 좌측의 것은 조직 분석을 위해 10%의 포르말린 중에 취입 및 고정시켰다. 상기 포르말린으로 고정시킨 폐는 통상적인 조직학적 평가를 위해 처리하였다.

실시예 10: 신장 섬유증의 생체내 동물 모델

상기 실험은 일측성 요관 결찰 및 당뇨병성 신장병증 모델을 사용하여 신장 섬유증에 대한 본원에 기재된 화합물의 효능을 평가하기 위해 수행하였다. 본원의 다양한 화합물로 처리한 동물들은 신장 섬유증이 비히클 대조군에 비해 감소한 것으로 나타났다.

실시예 11: 심혈관 섬유증의 생체내 동물 모델

상기 실험은 심부전, 심방 세동, 폐동맥 고혈압 및 죽상경화증의 모델을 사용하여 심장과 혈관의 섬유증에 대한 본원에 기재된 화합물의 효능을 평가하기 위해 수행하였다. 본원의 다양한 화합물로 처리한 동물들은 심혈관 섬유증이 비히클 대조군에 비해 감소한 것으로 나타났다.

실시예 12: VEGF-A-유도된 혈관신생

혈관 내피 성장 인자 수용체-2 (VEGFR-2)를 통한 VEGF 신호전달은 주된 혈관 신생 경로이다. 갈렉틴 단백질은 신호 전달 경로에서 중요하다. 본원에 기재된 화합물은 상해에 반응하여 마우스 각막의 신혈관형성을 억제할 수 있다.

실시예 13: 화합물 흡수, 분포, 대사 및 제거의 평가

용해도 (열역학 및 동역학적 방법), 다양한 pH 변화, 생물학적 관련 배지 (FaSSIF, FaSSGF, FeSSIF)에서의 용해도, LogD (옥탄올/물 및 시클로헥산/물), 혈장에서의 화학적 안정성 및 혈액 분배를 포함하나 이에 제한되지 않는 물리화학적 특성에 대하여 본원에 기재된 화합물을 평가하였다.

PAMPA (parallel artificial membrane permeability assay: 평행 인공막 투과성 어세이), Caco-2 및 MDCK(야생형)를 포함하나 이에 제한되지 않는 시험관내 투과성 특성에 대하여 본원에 기재된 화합물을 평가하였다.

마우스 (스위스 알비노, C57, Balb/C), 랫트 (위스타(Wistar), 스프라그 돌리), 래빗 (뉴질랜드 화이트), 개 (비글), 시노몰구스 원숭이 등에서 다양한 경로 즉, 경구, 정맥내, 복강내, 피하에 의한 약동학, 조직 분포, 뇌와 혈장에서의 비율, 담즙 배출 및 물질 수지에 의한 약동학을 포함하나 이에 제한되지 않는 동물의 약동학적 특성들에 대하여 본원에 기재된 화합물을 평가하였다.

혈장 단백질 결합 (한외여과시킨 후, 평형 투석) 및 마이크로솜 단백질 결합을 포함하나 이에 제한되지 않는 단백질 결합에 대하여 본원에 기재된 화합물을 평가하였다.

시토크롬 P450 억제, 시토크롬 P450 시간 의존성 억제, 대사 안정성, 간 마이크로솜 대사, S-9 분획 대사, 저온 보존된 간세포에 대한 효과, 혈장 안정성 및 GSH 트래핑을 포함하나 이에 제한되지 않는 시험관내 대사에 대하여 본원에 기재된 화합물을 평가하였다.

시험관내 (마이크로솜, S9 및 간세포) 및 생체내 샘플의 확인을 포함하나 이에 제한되지 않는 대사산물의 확인에 대하여 본원에 기재된 화합물을 평가하였다.

실시예 14: 갈락토아미드 및 갈락토설폰아미드 화합물의 합성

일부 실시양태에 따른 화합물의 비제한적인 실시예를 표 1과 도 4에 나타내었다.

반응식 1 - C ₃ -N ₃ -갈락토시드 중간체의 합성 (도 4a)

단계 1:

(3aR,5R,6aS)-5-((S)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸디히드로푸로[2,3-d][1,3]디옥솔-6(5H)-온:

DCM (8000 mL) 중 (3aR,5S,6S,6aR)-5-((S)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[2,3-d][1,3]디옥솔-6-올 (1000 g, 3846 mmol)의 교반된 용액에 Ac2O (3.9 당량) 이후 PDC (1.5 당량)를 2시간 동안 실온에서 분할하여 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 3시간 동안 환류시켰다. 완료 후, 미정제 생성물을 SiO₂ 컬럼 (60-120 메쉬, 15 kg)을 통과시켜 에틸 아세테이트 (40 L)로 용출시켰다. 용매를 증발시켜 점착성의 황색 액체인 표제 화합물을 수득하였다 (580 g, 58%). ¹H NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 6.13 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.35- 4.42 (m, 3H), 4.01 - 4.07 (m, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.44 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H).

단계 2:

(3aR,6aR)-5-((S)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸-3a,6a-디히드로 푸로[2,3-d][1,3]디옥솔-6-일 아세테이트: ACN 및 피리딘 중 (3aR,5R,6aS)-5-((S)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸디히드로푸로 [2,3-d][1,3]디옥솔-6(5H)-온 (580 g)의 교반된 용액에 Ac2O를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 80℃로 16시간 동안 가열하였다. 출발 물질이 소진된 후 (TLC로 모니터링함), 상기 반응 혼합물을 진공 중에서 농축시키고 톨루엔 (3×250 mL)과 함께 공증류시켜 암갈색의 점착성 액체인 표제 화합물 (595 g, 미정제, 88%)을 수득하였다.

1H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 6.03 - 6.02 d, 1H), 5.39 - 5.38 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 4.7(t,1H), 4.0 - 4.10(m, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.54 (s, 3H), 1.46 (s, 3H), 1.44 (s, 3H), 1.37 (s, 3H).

단계 3:

(3aR,5S,6R,6aR)-5-((R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸 테트라히드로푸로 [2,3-d][1,3]디옥솔-6-일 아세테이트: EtOAc (8 부피) 중 (3aR,6aR)-5-((S)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸-3a,6a-디히드로 푸로[2,3-d][1,3]디옥솔-6-일 아세테이트 (595 g)의 교반된 용액에 10% Pd/C (200 g, 50% 습윤)를 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 H₂대기 (80 psi) 하에 40℃로 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고, EtOAc (5×300 mL)로 세척한 후, 진공 중에서 농축시켜 점착성의 황색 액체인 표제 화합물을 수득하였다 (544 g, 91%). ¹H NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 5.80 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 5.04 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 4.78 - 4.81 (m, 1H), 4.58 - 4.64 (m, 1H), 4.01 - 4.13 (m, 2H), 3.5 (t, J = 15.7 Hz, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.57 (s, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.34 (s, 3H).

단계 4:

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[2,3-d][1,3]디옥솔-6-올: MeOH : H₂O (1900 mL:1900 mL) 중 (3aR,5S,6R,6aR)-5-((R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸 테트라히드로푸로 [2,3-d][1,3]디옥솔-6-일 아세테이트 (544.0 g)의 교반된 용액에 Et3N (3.0 당량)을 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 실온에서 3.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 진공 중에서 농축시킨 후 톨루엔 (3×500 mL)과 함께 공증류시켜 검은색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (510 g, 미정제). 상기 미정제 화합물을 정제하지 않고 다음 단계에서 사용하였다. ¹H NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 5.78 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.66 (t, J = 10.2 Hz, 1H), 4.44 - 4.50 (m, 1H), 4.2 (m, 1H), 3.9 (m, 1H), 3.03 - 3.09 (m, 1H), 3.70 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 1.44 (s, 3H), 1.42 (s, 3H), 1.37 (s, 3H).

단계 5 및 6

(3aR,5R,6S,6aR)-6-아지도-5-((R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸 테트라히드로푸로[2,3-d][1,3]디옥솔:

DCM:피리딘 (3.0 당량) 중 (3aR,5R,6R,6aR)-5-((R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[2,3-d][1,3]디옥솔-6-올 (510 g)의 교반된 용액에 DCM 중의 트리플루오로메탄설폰산 무수물을 -20℃에서 천천히 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 동일한 온도에서 30분간 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 매우 차가운 1N HCl (pH ~ 6)로 냉각시키고, 수성층을 DCM (2×1000 mL)으로 추출, 건조 (Na₂SO₄) 및 농축시켰다. 상기 미정제 잔류물을 DMF에 용해시키고, NaN₃ (5.0 당량)을 0℃에서 분할하여 첨가한 후, 동일한 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 얼음물 (500 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (2×1000 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 다시 매우 차가운 물 (3×500 mL)로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄) 및 농축시켰다. 상기 잔류물을 섬광 컬럼 크로마토그래피 [순상, 실리카겔 (100-200 메쉬), 구배는 0 - 5%의 헥산 중 EtOAc]로 정제하여 담황색 검인 표제 화합물을 수득하였다 (150 g, 27%). ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 5.80 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.60 - 4.63 (m, 1H) 4.35 - 4.39 (m, 1H), 4.10 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.89 - 3.93 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.55 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.36 (s, 3H).

단계 7:

(3R,4S,5R,6R)-4-아지도-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2,3,5-트리올의 합성: DCM (500 mL) 중 (3aR,5R,6S,6aR)-6-아지도-5-((R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)-2,2-디메틸 테트라히드로푸로 [2,3-d][1,3]디옥솔 (150 g)의 용액에, 물 중의 90% TFA를 -20℃에서 천천히 첨가한 후, 동일한 온도에서 15분간 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 진공 중에서 농축시키고 톨루엔 (3×500 mL)과 함께 공증류시켜 황색 고체인 (3R,4S,5R,6R)-4-아지도-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2,3,5-트리올을 수득하였다 (100 g, 94 %).

1H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 5.23 (d, J = 3.44 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 7.64 Hz, 1H), 4.64 (t, J = 15.7 Hz, 2H), 3.87 - 3.93 (m, 1H), 3.58 (t, J = 17.7 Hz, 1H), 3.48 - 3.56 (m, 1H).

반응식 2 - "갈락토아미드" 중간체의 합성 (도 4a)

단계 1:

(3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(히드록시메틸) 테트라히드로-2H-피란-2,3,5-트리올 (3):

CuSO₄.5H₂O (638 mg, 1.64 mmol) 및 아스코르브산나트륨 (870 mg, 4.39 mmol)을 실온에서 EtOH - H₂O (1:1, 20 mL) 중의 (3R,4S,5R,6R)-4-아지도-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2,3,5-트리올 (2.0 g, 9.75 mmol) 및 1-에티닐-3-플루오로벤젠 (2.46 g, 19.51 mmol)의 용액에 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 70℃로 5시간 동안 가열하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 휘발성 물질을 증발시키고 수성 부분을 EtOAc (3×30 mL)로 추출하였다. 유기층을 건조 (Na₂SO₄) 및 농축시킨 후, 잔류물을 Et₂O로 연화시켜 황색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (2.8 g, 90%). ESIMS m/z 326 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, 아노머 혼합물, α:β = 1:1): δ 3.37 - 3.46 (m, 3H), 3.49 - 3.57 (m, 3H), 3.66 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 3.86 - 3.89 (m, 1H), 3.92 - 3.96 (m, 2H), 4.03 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 4.25 - 4.32 (m, 1H), 4.53 - 4.61 (m, 2H), 4.66 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.71 (dd, J = 11.0 & 3.1 Hz, 1H), 4.84 - 4.89 (m, 2H), 5.11 - 5.17 (m, 3H), 5.23 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.14 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 7.46 - 7.51 (m, 2H), 7.69 (d, J = 10.2 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.61 (s, 1H).

단계 2:

(2R,3R,4S,5R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2-(히드록시메틸)-6-(메틸아미노)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 (4):

메틸 아민 (THF 중의 1.0 M, 10.0 mL)을 0℃에서 THF (4 mL) 중의 (3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2,3,5-트리올 (950 mg, 2.91 mmol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 휘발성 물질들을 감압 하에 증발시켜 녹색을 띤 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (900 mg, 미정제). ESIMS m/z 347.12 [M+H]⁺;¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 2.04 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.76 - 2.80 (m, 1H), 4.03 - 4.17 (m, 3H), 5.44 - 5.53 (m, 3H), 7.27 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 2H).

반응식 3 - G623의 합성 (도 4b)

단계 1:

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸시클로프로판카르복스아미드 (GTJC-013-03):

Na₂CO₃(235 mg, 2.212 mmol) 및 시클로프로판카르보닐 클로라이드 2 (94 mg, 0.885 mmol)를 0℃에서 메탄올 (3 mL) 중의 (2R,3R,4S,5R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2-(히드록시메틸)-6-(메틸아미노)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 1 (150 mg, 0.442 mmol)의 용액에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 냉각시킨 후, EtOAc (3×25 mL)로 추출하였다. 혼합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄), 여과시킨 후, 45℃에서 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM 중의 4% 메탄올로 용출시키는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (35 mg, 19%). HRMS: (ESI) [M+H]⁺ C₁₉H₂₃FN₄O₅에 대한 계산치 406.17, 실측치: 407.36 [M+H]⁺; LCMS: m/z 407 [M+H]⁺ (ES⁺) 3.92분에 89.73% 및 4.14분에 7.08%.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, 아노머 혼합물, α:β = 1:9): δ 8.72 (s, 1H), 7.69 - 7.76 (m, 2H), 7.43 - 7.52 (m, 1H), 7.13 - 7.17 (m, 1H), 5.54 - 5.57 (m, 1H), 5.34 (d, 0.9 H, J1-2 = 6.4 Hz, a-H-1), 5.33 (d, 0.1 H, J1-2 = 2.7 Hz, β-H-1), 4.96 - 5.00 (m, 1H), 4.48 - 4.82 (m, 2H), 3.74 - 3.92 (m, 2H), 3.48 - 3.53 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.08 (m, 1H), 0.75 - 0.85 (m, 4H),

반응식 4 - G620의 합성 (도 4b)

단계 1:

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸티오펜-2-카르복스아미드 (GTJC-013-04):

Na₂CO₃ (47.04 mg, 0.4437 mmol) 및 티오펜-2-카르보닐 클로라이드 2 (43.19 mg, 0.2958 mmol)를 0℃에서 메탄올 (3 mL) 중의 (2R,3R,4S,5R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2-(히드록시메틸)-6-(메틸아미노)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 1 (50 mg, 0.1479 mmol)의 용액에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 냉각시킨 후, EtOAc (3×25 mL)로 추출하였다. 혼합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄), 여과시킨 후, 45℃에서 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM 중의 2% 메탄올을 사용하는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (15 mg, 23%). HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₀H₂₁FN₄O₅S에 대한 계산치: 448.12, 실측치: 449.35 [M+H]⁺; LCMS: m/z 449 [M+H]⁺;

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, 단일 β 이성질체): δ 8.66 (s, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.75 - 7.82 (m, 2H), 7.63 (d, 1H), 7.47 - 7.52 (m, 1H), 7.13 - 7.17 (m, 2H), 5.60 (s, 1H), 5.35 (d, J1-2 = 6.5 Hz, a-H-1), 5.19 (s, 1H), 4.91 - 4.94 (m, 1H), 4.86 (m, 1H), 4.52 - 4.54 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 3.52 - 3.56 (m, 2H), 3.06 (s, 3H).

G617의 합성 (도 4b)

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸-2-나프트아미드 (GTJC-013-08).

GTJC-013-03 또는 GTJC-013-04에 대하여 사용된 표준 절차에 따라 합성됨

외관: 백색 고체; 합성: 85 mg; 수율 23%

LCMS: m/z 493 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 3.13 (s, 3H), 3.52 - 3.60 (m, 2H), 3.66 - 3.72 (m, 1H), 3.79 - 3.83 (m, 1H), 4.50 - 4.56 (m, 1H), 4.72 - 4.77 (m, 1H), 4.85 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.01 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 5.33 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.55 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.13 - 7.18 (m, 1H), 7.46 - 7.52 (m, 1H), 7.58 - 7.74 (m, 5H), 7.99 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 8.05 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.71 (s, 1H).

G627 의 합성 (도 4b)

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸-3-(트리플루오로메틸)벤즈아미드 (GTJC-013-09)

외관: 백색 고체; 합성: 40 mg; 수율 13%

HRMS (ESI) [M+H]⁺C₂₃H₂₂F₄N₄O₅에 대한 계산치 510.15, 실측치: 511.37 [M+H]⁺

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (아노머 혼합물 α:β = 1:8): δ 8.73 (s, 1H), 7.87 - 7.93 (m, 3H), 7.67 - 7.74 (m, 3H), 7.47 - 7.52 (m, 1H), 7.13 - 7.18 (m, 1H), 5.60 (d, J1-2 = 6.68 Hz, a-H-1), 5.34 (d, 1H,), 5.01 (d, J1-2 = 4.7 Hz, β-H-1), 4.43 - 4.83 (m, 4H), 3.53 - 3.58 (m, 4H), 3.08 (s, 3H) .

G628의 합성 (도 4b)

3,4-디플루오로-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸벤즈아미드 (GTJC-013-10)

외관: 백색 고체; 합성: 25 mg; 수율 9%

α, β 이성질체는 대용량 HPLC로 분리함.

LCMS (β 이성질체): m/z 479 [M+H]⁺ (ES⁺), 4.65분 (98.44%)

LCMS (α 이성질체): m/z 479 [M+H]⁺ (ES⁺), 4.79분 (97.98%)

¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆, 단일 β 이성질체) δ 8.73 (s, 1H), 7.72 - 7.74 (m, 1H), 7.62 - 7.67 (m, 1H), 7.57 - 7.60 (m, 1H), 7.50 - 7.54 (m, 2H), 7.42 - 7.47 (m, 1H), 7.12 - 7.17 (m, 1H), 5.58 - 5.62 (m, 1H), 5.34 (d, 1H, J = 6.68 Hz), 4.82 - 4.99 (m, 2H), 4.78 (d, 1H, J1-2 = 11.9 Hz, a-H-1), 4.45 - 4.52 (m, 1H), 3.82 - 3.96 (m, 1H), 3.49 - 3.60 (m, 3H), 3.05 (s, 3H).

¹H-NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 단일 α 이성질체) δ 9.00 (s, 1H), 7.72 - 7.74 (m, 1H), 7.66 - 7.68 (m, 1H), 7.49 - 7.62 (m, 3H), 7.42 (m, 1H), 7.16 - 7.21 (m, 1H), 6.21 (bs, 1H), 5.17 - 5.29 (m, 3H), 4.78 - 4.83 (m, 1H), 4.62 - 4.64 (m, 1H), 4.45 (d, 1H, J1-2 = 8.12 Hz, β-H-1), 3.38 - 3.41 (m, 2H), 3.28 - 3.33 (m, 2H), 3.05 (s, 3H).

G622 의 합성 (도 4b)

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸-1H-인돌-2-카르복스아미드 (GTJC-013-11)

외관: 백색 고체; 합성: 12 mg; 수율 8%

HRMS (ESI) [M+H]⁺C₂₄H₂₄FN₅O₅에 대한 계산치 481.18, 실측치: 482.38 [M+H]⁺; LCMS: m/z 482 (M+H)⁺ (ES⁺) 4.78분에 93.64%; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, 단일 β 이성질체): δ 11.58 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.71 - 7.73 (m, 1H), 7.62 - 7.68 (m, 2H), 7.49 - 7.52 (m, 1H), 7.44 - 7.47 (m, 1H), 7.19 - 7.22 (m, 1H), 7.13 - 7.17 (m, 1H), 7.06 - 7.08 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.60 (s, 2H), 5.36 (d, 1H, J1-2 = 6.52 Hz, a-H-1), 4.94 (m, 2H), 4.55 (m, 1H), 3.84 - 3.91 (m, 2H), 3.55 - 3.64 (m, 2H), 3.10 (s, 3H).

G641 의 합성 (도 4b)

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸-2-페닐아세트아미드 (GTJC-013-27):

외관: 백색 고체; 합성: 30 mg; 수율 23%

ESIMS: m/z 347.12 [M+1]⁺;¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 3.49 - 3.61 (m, 4H), 3.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.99 (dd, 6.6 & 2.9 Hz, 2H), 4.36 - 4.43 (m, 2H), 4.70 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.82 (dd, 10.5 & 2.8 Hz, 2H), 5.19 (d, J = 9.7 Hz, 2H), 5.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 5.40 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.12 - 7.17 (m, 2H), 7.46 - 7.51 (m, 2H), 7.66 (dd, J = 10.2 & 2.3 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 8.67 (s, 2H).

G649 의 합성 (도 4b)

2-(3,4-디플루오로페닐)-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸아세트아미드 (GTJC-013-37)

외관: 백색 고체; 합성: 25 mg; 수율 17%

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₃H₂₃F₃N₄O₅에 대한 계산치 492.16, 실측치: 493.5 [M+H]⁺

LCMS: m/z 493.5 [M+H]⁺ (ES⁺) 4.75분에 88.40% 및 4.88분에 9.81%,

1H-NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 아노머 혼합물, α:β = 1:9): δ 8.74 (s, 1H), 7.69 - 7.76 (m, 2H), 7.49 - 7.53 (m, 1H), 7.31 - 7.39 (m, 2H), 7.28 - 7.29 (m, 2H), 5.59 (d, 1H, J1-2 = 9.48 Hz, a-H-1), 4.70 - 5.36 (m, 5H), 3.76 - 3.94 (m, 4H), 3.45 - 3.51 (m, 2H), 3.03 (s, 3H) .

G651의 합성 (도 4b)

2-(3,4-디플루오로페녹시)-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸아세트아미드 (GTJC-013-38)

외관: 백색 고체; 합성: 15 mg; 수율 11%

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₃H₂₃F₃N₄O₆에 대한 계산치 508.16, 실측치: 509.52 [M+H]+

LCMS: m/z 509.5 [M+H]⁺ (ES⁺) 4.86분에 91.95% & 4.96분에 6.98%,

¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 아노머 혼합물 α:β = 1:13): δ 8.77 (s, 2H), 7.74 - 7.76 (m, 2H), 7.69 - 7.72 (m, 2H), 7.47 - 7.53 (m, 2H), 7.30- 7.37 (m, 2H), 7.13 - 7.18 (m, 2H), 7.02 - 7.08 (m, 2H), 6.76 - 6.80 (m, 2H), 5.73 (d, 1H, J1-2 = 6.8 Hz, a-H-1), 5.37 - 5.41 (m, 2H), 5.29 - 5.31 (m, 1H), 5.02 - 5.04 (m, 1H), 4.91 - 4.98 (m, 5H), 4.76 - 4.79 (m, 2H), 4.70 - 4.72 (m, 1H), 4.37 - 4.44 (m, 2H), 3.91 - 3.96 (m, 3H), 3.79 - 3.82 (m, 1H), 3.50 - 3.56 (m, 2H), 3.00 (s, 2H), 2.88 (s, 3H).

G652의 합성 ( 도 4b)

3-(3,4-디플루오로페닐)-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸프로판아미드 (GTJC-013-41):

외관: 백색 고체; 합성: 11 mg; 수율 9%

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₄H₂₅F₃N₄O₅에 대한 계산치 506.18, 실측치: 507.52 [M+H]⁺; LCMS: m/z 507.5 [M+H]⁺ (ES⁺) 5.04분에 75.38%, 5.15분에 7.07%, 7.07%, 5.28분에 15.93%.

¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 3개의 이성질체의 혼합물): δ 8.71 (s, 1H), 7.51 - 7.77 (m, 2H), 7.37 - 7.49 (m, 1H), 7.29 - 7.35 (m, 2H), 7.14 - 7.26 (m, 2H), 5.48 (d, 1H, J1-2 = 6.92 Hz, a-H-1), 4.68 - 5.32 (m, 4H), 4.40 - 4.50 (m, 1H), 3.51 - 3.99 (m, 4H), 2.54 - 2.89 (m, 7H).

G658의 합성 (도 4b)

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-3,4-디메톡시-N-메틸벤즈아미드 (GTJC-013-46-1):

외관: 백색 고체; 합성: 110 mg; 수율 37%

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₄H₂₇FN₄O₇에 대한 계산치 502.19, 실측치: 503.52 [M+H]⁺; LCMS: m/z 503.5 (M+H)⁺ (ES⁺) 4.25분에 95.21%; ¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 단일 β 이성질체): δ 8.71 (s, 1H), 7.68 - 7.75 (m, 2H), 7.46 - 7.52 (m, 1H), 7.12 - 7.18 (m, 3H), 7.01 (d, J = 8.28 Hz, 1H), 5.55 (d, 1H, J1-2 = 6.36 Hz, a-H-1), 5.32 (d, J = 6.64 Hz, 1H), 4.90 - 4.92 (m, 1H), 4.83 (m, 2H), 4.45 - 4.52 (m, 1H), 3.79 - 3.85 (m, 7H), 3.61 - 3.67 (m, 1H), 3.32 - 3.59 (m, 2H), 3.02 (s, 3H).

G655의 합성 ( 도 4b)

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-3,4-디히드록시-N-메틸벤즈아미드 (GTJC-013-46):

GTJC-013-23에 대하여 사용된 표준 절차에 따라 합성됨

외관: 백색 고체; 합성: 18 mg; 수율 24%

HRMS (ESI) [M+H]⁺C₂₂H₂₃FN₄O₇에 대한 계산치 474.16, 실측치: 475.50 [M+H]⁺

LCMS: m/z 475.5 [M+H]⁺ (ES⁺) 3.86분에 98.93%.

¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 단일 β 이성질체): δ 9.11 (bs, 2H), 8.71 (s, 1H), 7.74 (d, 1H, J = 7.68 Hz,), 7.69 (d, J =10.32 Hz, 1H), 7.46 - 7.52 (m, 1H), 7.12 - 7.17 (m, 1H), 6.94 (s, 2H), 6.73 - 6.75 (m, 1H), 5.51 (d, 1H, J1-2 = 6.01 Hz, α-H-1), 5.29 (bs, 1H), 4.45 - 4.85 (m, 4H), 3.86 (bs,1H), 3.57 (m, 3H), 2.98 (s, 3H).

G642의 합성 (도 4b)

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸-3-(트리플루오로메톡시)벤즈아미드 (GTJC-013-45)

외관: 백색 고체; 합성: 50 mg; 수율 33%

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₃H₂₂F₄N₄O₆에 대한 계산치 526.15, 실측치: 527.47 [M+H]⁺

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, 아노머 혼합물): δ 8.82 (s, 1H), 7.83 - 7.93 (m, 3H), 7.69 - 7.77 (m, 3H), 7.49 - 7.52 (m, 1H), 7.13 - 7.18 (m, 1H), 5.60 (d, 1H, J1-2 = 6.68 Hz, α-H-1), 5.34 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.14 (d, 1H, J1-2 = 4.0 Hz, β- H-1), 4.47 - 4.61 (m, 4H), 3.39 - 3.60 (m, 4H), 3.08 (s, 3H).

G650의 합성 (도 4b)

2,3,4,5,6-펜타플루오로-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸벤즈아미드 (GTJC-013-47)의 합성

외관: 백색 고체; 합성: 30 mg; 수율 19%

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₂H₁₈F₆N₄O₅에 대한 계산치 532.12, 실측치: 533.48 [M+H]⁺; LCMS: m/z 533.4 [M+H]⁺ (ES⁺) 5.04분에 82.08% & 5.15분에 14.98%.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, 아노머 혼합물, α:β = 1:6): δ 8.71 (s, 1H), 7.55 - 7.74 (m, 2H), 7.47 - 7.52 (m, 1H), 7.13 - 7.21 (m, 1H), 5.37 (d, 1H, J1-2 = 6.6 Hz, a-H-1), 4.37 - 5.62 (m, 5H), 3.32 - 3.69 (m, 4H), 3.07 (s, 3H).

G629의 합성 (도 4b)

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-메톡시-N-메틸-2-나프트아미드 (GTJC-013-22)

외관: 백색 고체; 합성: 110 mg; 수율 35%

ESIMS: m/z 347.12 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 3.49 - 3.61 (m, 4H), 3.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.99 (dd, 6.6 & 2.9 Hz, 2H), 4.36 - 4.43 (m, 2H), 4.70 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.82 (dd, 10.5, 2.8 Hz, 2H), 5.19 (d, J = 9.7 Hz, 2H), 5.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 5.40 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.12 - 7.17 (m, 2H), 7.46 - 7.51 (m, 2H), 7.66 (dd, J = 10.2 & 2.3 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 8.67 (s, 2H).

반응식 5 (도 4c)

G635의 합성

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-히드록시-N-메틸-2-나프트아미드 (GTJC-013-23):

DCM (4 mL) 중의 N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-메톡시-N-메틸-2-나프트아미드 (80 mg, 0.1532 mmol)의 용액에 0℃에서 BBr3 (115.4 mg, 0.4597 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃ 용액 (6 mL)으로 냉각시켜 pH~8로 조절하고, 수성층을 DCM (3×10 mL)으로 추출하였다. 혼합된 유기층을 건조 (Na₂SO₄) 및 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM 중의 3% 메탄올로 용출시키는 섬광 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (13 mg, 17 %). ESIMS: m/z 347.12 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 3.49 - 3.61 (m, 4H), 3.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.99 (dd, 6.6, 2.9 Hz, 2H), 4.36 - 4.43 (m, 2H), 4.70 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.82 (dd, 10.5 & 2.8 Hz, 2H), 5.19 (d, J = 9.7 Hz, 2H), 5.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 5.40 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.12 - 7.17 (m, 2H), 7.46 - 7.51 (m, 2H), 7.66 (dd, J = 10.2 & 2.3 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 8.67 (s, 2H).

반응식 6 (도 4d)

G637의 합성

N1,N4-비스((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N1,N4-디메틸테레프탈아미드 (GTJC-013-12): 메탄올 (3 mL) 중의 (2R,3R,4S,5R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2-(히드록시메틸)-6-(메틸아미노)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 (140 mg, 0.4142 mmol)의 용액에 0℃에서 Na₂CO₃ (220 mg, 2.0710 mmol) 및 테레프탈로일 디클로라이드 (172 mg, 0.8284 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 냉각시킨 후, EtOAc (3×25 mL)로 추출하였다. 혼합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄), 여과시킨 후, 45℃에서 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 대용량 HPLC로 정제하여 백색 고체인 표제 화합물 (3 mg)을 수득하였다. HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₃₈H₄₀F₂N₈O₁₀에 대한 계산치 806.28, 실측치: 807.71 [M+H]⁺; LCMS: m/z 807.7 (M+H)⁺ (ES⁺) 4.49분에 98.10%. ¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆, β 이성질체): δ 8.73 (s, 2H), 7.65 - 7.74 (m, 8H), 7.47 - 7.52 (m, 2H), 7.13 - 7.17 (m, 2H), 5.64 (d, 2H, J1-2 = 6.48 Hz, a-H-1), 5.34 - 5.36 (m, 2H), 4.76 - 4.81 (m, 4H), 4.49 - 4.53 (m, 2H), 3.61 - 3.73 (m, 2H), 3.54 - 3.58 (m, 6H), 3.08 (s, 6H).

반응식 7 (도 4e)

G638의 합성

단계-1:

(2R,3R,4S,5R,6R)-2-(아세톡시메틸)-6-아지도-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트:

DMF (20 mL) 중의 (2R,3R,4S,5R,6R)-2-(아세톡시메틸)-6-브로모-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (1.92 g, 3.74 mmol)의 용액에 실온에서 NaN3 (1.21 g, 18.7 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 차가운 물 (20 mL)로 냉각시켰다. 수성층을 EtOAc (2×20 mL)로 추출하고, 건조 (Na₂SO₄) 및 진공에서 농축시켰다. 상기 미정제 잔류물을 섬광 컬럼 크로마토그래피 [순상, 실리카겔 (100-200 메쉬), 구배는 0 - 50%의 헥산 중 EtOAc]로 정제하여 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (670 mg, 38%). ESIMS m/z 477 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 1.95 (s, 3H), 2.07 (s, 6H), 4.17 - 4.24 (m, 3H), 4.81 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.17 (dd, J = 11.3 & 3.1 Hz, 1H), 5.59 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 5.62 - 5.70 (m, 1H), 7.02 - 7.06 (m, 1H), 7.35 - 7.41 (m, 1H), 7.52 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.80 (s, 1H).

단계-2:

(3R,4S,5R,6R)-2-(2-나프트아미도)-6-(아세톡시메틸)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트:

THF (5 mL) 중의 (2R,3R,4S,5R,6R)-2-(아세톡시메틸)-6-아지도-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (100 mg, 0.21 mmol)의 용액에 Pd-C (20 mg, 10%, 건조)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 실온에서 H₂ (1기압) 하에 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 피리딘 (0.05 mL, 0.63 mmol)을 상기 반응 혼합물에 첨가하고, 0℃로 냉각시키며, 2-나프토일 클로라이드 (80 mg, 0.42 mmol)를 천천히 첨가한 후, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 여과시킨 후, EtOAc (3×10 mL)로 세척하였다. 혼합된 유기층을 물 (10 mL)로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄) 및 진공 하에 농축시켜 백색의 점착성 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (158 mg, 미정제). ESIMS: m/z 605 [M+H]⁺.

단계-3:

N-((3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-2-나프트아미드 (GTJC-013-15):

MeOH (5 mL) 중의 (3R,4S,5R,6R)-2-(2-나프트아미도)-6-(아세톡시메틸)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (4, 158 mg, 0.26 mmol)의 용액에 0℃에서 NaOMe (0.26 mL, 1M, 0.26 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 Amberlyst 15로 산성화시키고 (pH ~6) 여과하였다. MeOH (3×10 mL)로 세척한 후, 진공에서 농축시켰다. 상기 잔류물을 섬광 컬럼 크로마토그래피 [순상, 실리카겔 (100-200 메쉬), 구배는 0 - 10%의 DCM 중 MeOH]로 정제하여 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (60 mg, 48%). LCMS: m/z 479 (M+H)⁺; (ES⁺) 4.80분에 70.96% 및 4.87분에 23.57%. ¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆): δ 3.53 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.83 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 3.97 - 4.02 (m, 2H), 4.39 - 4.44 (m, 1H), 4.70 - 4.74 (m, 1H), 4.93 (dd, J = 10.8, 2.8 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.36 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.16 (td, J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.46 - 7.52 (m, 1H), 7.59 - 7.66 (m, 2H), 7.69 - 7.76 (m, 2H), 7.96 - 8.07 (m, 4H), 8.50, 8.60 (각각 단일항, 1H), 9.27 (d, J = 8.9 Hz, 1H).

반응식 8 (도 4f)

G633의 합성

단계-1:

(3R,4S,5R,6R)-2-(벤질아미노)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올:

벤질아민 (87.1 mg, 0.8136 mmol)을 THF (2 mL) 중의 (3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(히드록시메틸) 테트라히드로-2H-피란-2,3,5-트리올 (250 mg, 0.7396 mmol)의 용액에 첨가한 후, 상기 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 농축시킨 후, 잔류물을 Et₂O로 연화시켜 담황색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (150 mg). 상기 미정제 물질을 다음 단계에서 사용하였다. ESIMS: m/z 353 [M+H]⁺.

단계 2:

N-벤질-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-2-나프트아미드:

Na₂CO₃ (115.04 mg, 1.0869 mmol) 및 2-나프토일 클로라이드 (190.99 mg, 0.7246 mmol)를 0℃에서 메탄올 (3 mL) 중의 (3R,4S,5R,6R)-2-(벤질아미노)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 (150 mg, 0.3623 mmol)의 용액에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 냉각시킨 후, EtOAc (3×25 mL)로 추출하였다. 혼합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄), 여과시킨 후, 45℃에서 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 대용량 HPLC로 정제하여 아노머 혼합물인 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다 (3 mg). HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₃₂H₂₉FN₄O₅에 대한 계산치 568.21, 실측치: 569.53 [M+H]⁺; LCMS: m/z 569.5 [M+H]⁺ (ES⁺) 5.59분에 96.83%.

¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 단일 β 이성질체): δ 8.70 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.07 - 8.08 (m, 1H), 7.98 - 8.01 (m, 2H), 7.51 - 7.71 (m, 7H), 7.46 - 7.51 (m, 1H), 7.31 - 7.35 (m, 2H), 7.20 - 7.24 (m, 1H), 7.12 - 7.17 (m, 1H), 5.66 (bs, 1H), 5.32 (bs, 1H), 5.06 (d, 1H, J1-2 = 7.72 Hz, a-H-1), 4.86 -4.89 (m, 1H), 4.77 - 4.79 (m, 1H), 4.65 - 4.69 (m, 1H), 4.54 - 4.59 (m, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.62 - 3.70 (m, 2H), 3.56 - 3.58 (m, 1H).

G639의 합성

N-벤질-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)벤즈아미드 (GTJC-013-20)

GTJC-013-24에 대하여 사용된 표준 절차에 따라 합성됨

외관: 백색 고체; 합성: 1 mg

ESIMS: 949 [M+H]⁺; LCMS: m/z 697 (M+H)⁺ (ES⁺) 4.51분에 96.37%,

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 3.49 - 3.61 (m, 4H), 3.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.99 (dd, 6.6 & 2.9 Hz, 2H), 4.36 - 4.43 (m, 2H), 4.70 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.82 (dd, 10.5 & 2.8 Hz, 2H), 5.19 (d, J = 9.7 Hz, 2H), 5.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 5.40 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.12 - 7.17 (m, 2H), 7.46 - 7.51 (m, 2H), 7.66 (dd, J = 10.2 & 2.3 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 8.67 (s, 2H).

반응식 9 (도 4g)

G643의 합성

단계-1:

(3R,4S,5R,6R)-2-(에틸아미노)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 (2):

에틸아민 (THF 중의 1.0 M, 2 mL) 중의 (3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(히드록시메틸) 테트라히드로-2H-피란-2,3,5-트리올 (3, 150 mg, 1.53 mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 상기 생성된 미정제 잔류물을 Et₂O로 연화시켜 담황색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (100 mg, 미정제). 상기 물질을 추가로 정제하지 않고 다음 단계에서 사용하였다. HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₁₆H₂₁FN₄O₄에 대한 계산치 352.15, 실측치: 353.33 [M+H]⁺; ESIMS: m/z 353 [M+H]⁺.

단계-2:

N-에틸-3,4-디플루오로-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)벤즈아미드 (GTJC-013-42):

메탄올 (3 mL) 중의 (3R,4S,5R,6R)-2-(에틸아미노)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 (100 mg, 0.2840 mmol)의 용액에 0℃에서 Na₂CO₃ (90.04 mg, 0.8522 mmol) 및 3,4-디플루오로벤조일 클로라이드 (99.99 mg, 0.5681 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 3시간 후, 상기 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 냉각시킨 후, EtOAc (3×25 mL)로 추출하였다. 혼합된 유기층을 염수로 세척하여 건조 (Na₂SO₄)시켰다. 용매를 45℃에서 감압 하에 제거하고, 잔류물을 DCM 중의 4.5% 메탄올을 사용하는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (15 mg, 11 %).

HRMS (ESI) [M+H]⁺C₂₃H₂₃F₃N₄O₅에 대한 계산치 492.16, 실측치: 493.47 [M+H]⁺

LCMS: m/z 493.4 [M+H]⁺ (ES⁺), 5.28분 (93.45%) & 5.39분 (6.26%).

¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 아노머 혼합물 α:β = 1:15): δ 8.75 (s, 1H), 7.71 - 7.76 (m, 1H), 7.65 - 7.69 (m, 1H), 7.48 - 7.59 (m, 3H), 7.41 - 7.47 (m, 1H), 7.12 - 7.17 (m, 1H), 5.50 (d, 1H, J1-2 = 6.92 Hz, a-H-1), 5.34 (d, J = 6.48 Hz ,1H), 4.62 - 4.79 (m, 3H), 4.42 - 4.49 (m, 1H), 3.82 (bs, 1H), 3.66 - 3.69 (m, 1H),3.32 - 3.54 (m, 4H), 1.25 (m, 3H).

반응식 10 (도 4h)

G654의 합성

단계 1:

(2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2-(히드록시메틸)-6-((2-메톡시에틸)아미노)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 (3):

2-메톡시에탄-1-아민 2 (93.25 mg, 1.226 mmol)를 THF (5 ml) 중의 (3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(히드록시메틸) 테트라히드로-2H-피란-2,3,5-트리올 (1, 200 mg, 0.613 mmol)의 용액에 첨가한 후, 상기 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 진공에서 농축시킨 후, 잔류물을 Et₂O로 연화시켜 담황색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (170 mg, 미정제). 상기 물질을 다음 단계에서 사용하였다. HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₁₇H₂₃FN₄O₅에 대한 계산치 382.17, 실측치: 383.17 [M+H]⁺; ESIMS: m/z 383 [M+H]⁺.

단계 2:

3,4-디플루오로-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-(2-메톡시에틸)벤즈아미드 (GTJC-013-43-1):

메탄올 (3 mL) 중의 (2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2-(히드록시메틸)-6-((2-메톡시에틸)아미노)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 (150 mg, 0.3926 mmol)의 용액에 0℃에서 Na₂CO₃ (124.8 mg, 1.1780 mmol) 및 3,4-디플루오로벤조일 클로라이드 (138.02 mg, 0.7853 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 3시간 후, 상기 반응 혼합물을 물 (5 mL)로 냉각시킨 후, EtOAc (3×25 mL)로 추출하였다. 혼합된 유기상을 염수로 세척하여 건조 (Na₂SO₄)시켰다. 용매를 45℃에서 감압 하에 제거하고, 잔류물을 DCM 중의 2% 메탄올을 사용하는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (110 mg, 54%). HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₄H₂₅F₃N₄O₆에 대한 계산치 522.17, 실측치: 523.58 [M+H]⁺

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆; D2O, β 이성질체): δ 8.76 (s, 1H), 7.71 - 7.75 (m, 1H), 7.68 - 7.71 (m, 1H), 7.56 - 7.68 (m, 3H), 7.47 - 7.51 (m, 1H), 7.12 - 7.17 (m, 1H), 5.47 (d, 1H, J1-2 = 6.44 Hz, a-H-1), 5.36 (d, J = 6.56 Hz, 1H), 4.83 - 4.85 (m, 1H), 4.76 - 4.78 (m, 2H), 4.43 - 4.50 (m, 1H), 3.83 - 3.88 (m, 2H), 3.48 - 3.56 (m, 6H), 3.29 (s, 3H).

단계 3:

3,4-디플루오로-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-(2-히드록시에틸)벤즈아미드 (GTJC-013-43):

DCM (4 mL) 중 3,4-디플루오로-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-(2-메톡시에틸)벤즈아미드 (80 mg, 0.1532 mmol)의 용액에 0℃에서 BBr3 (115.4 mg, 0.4597 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃ 용액 (6 mL)으로 냉각시켜 pH~8로 조절하고, DCM (3×25 mL)으로 추출하였다. 혼합된 유기상을 염수로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄), 여과시킨 후, 45℃에서 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 대용량 HPLC로 정제하여 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (6 mg, 8%).

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₃H₂₃F₃N₄O₆에 대한 계산치 508.16, 실측치: 509.5 [M+H]⁺

LCMS: m/z 509.5 (M+H)⁺ (ES⁺) 4.57분에 59.89%, 4.66분에 29.86%, 4.76분에 9.66%.

¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 3개 이성질체의 혼합물): δ 8.69 (s, 1H), 7.45 - 7.77 (m, 6H), 7.13 - 7.18 (m, 1H), 5.56 (d, 1H, J1-2 = 6.16 Hz, a-H-1), 5.37 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.41 - 5.04 (m, 5H), 3.48 - 4.28 (m, 8H).

반응식 11 (도 4i)

G631의 합성

단계 1:

(2R,3R,4S,5R)-2-(아세톡시메틸)-6-아미노-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 히드로클로라이드 (3):

10% Pd-C (50 mg) 및 농축 HCl (2방울)을 메탄올 (3 mL) 중 (2R,3R,4S,5R)-2-(아세톡시메틸)-6-아지도-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (115 mg, 0.2415 mol)의 용액에 첨가하였다. 상기 혼합물을 수소 대기 (풍선압) 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고, 메탄올 (10 mL)로 세척하였다. 혼합된 여과액을 진공에서 농축시켜 황백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (93 mg, 86%). 상기 잔류물을 추가로 정제하지 않고 다음 단계에서 사용하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 2.04 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.76 - 2.80 (m, 1H), 4.03 - 4.17 (m, 3H), 5.44 - 5.53 (m, 3H), 7.27 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 2H).

단계 2:

(2R,3R,4S,5R,6R)-2-(아세톡시메틸)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(페닐설폰아미도)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (4):

DCM (5 mL) 중 (2R,3R,4S,5R)-2-(아세톡시메틸)-6-아미노-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 히드로클로라이드 (3, 93 mg 0.1913 mmol)의 용액에 0℃에서 피리딘 (46 mg, 0.5740 mmol) 및 벤젠 설포닐 클로라이드 (50.69 mg, 0.2870 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 물 (3 mL)로 냉각시킨 후, DCM (3×15 mL)으로 추출하였다. 혼합된 유기층을 건조 (Na₂SO₄)시킨 후, 진공에서 농축시켜 황백색의 반고체인 표제 화합물을 수득하였다 (130 mg, 미정제). HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₆H₂₇FN₄O₉S에 대한 계산치 590.15, 실측치: 591.32 [M+H]⁺;¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 3.49 - 3.61 (m, 4H), 3.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.99 (dd, 6.6 & 2.9 Hz, 2H), 4.36 - 4.43 (m, 2H), 4.70 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.82 (dd, 10.5 & 2.8 Hz, 2H), 5.19 (d, J = 9.7 Hz, 2H), 5.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 5.40 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.12 - 7.17 (m, 2H), 7.46 - 7.51 (m, 2H), 7.66 (dd, J = 10.2 & 2.3 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 8.67 (s, 2H).

단계 3:

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)벤젠설폰아미드 (GTJC-026):

MeOH (5 mL) 중 (2R,3R,4S,5R,6R)-2-(아세톡시메틸)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-6-(페닐설폰아미도)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (120 mg, 0.203 mmol)의 용액에 0℃에서 NaOMe (0.46 mL, 1M, 0.46 mmol)를 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 Amberlyst 15 수지로 산성화시키고 (pH ~5), MeOH (3×5 mL)로 세척한 후, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 대용량 HPLC로 정제하여 아노머 혼합물인 표제 화합물 (GTJC-026-P1, 3 mg, 4개 이성질체의 혼합물, GTJC-026-P2, 1 mg, 아노머 혼합물, α:β = 1:12)을 백색 고체로서 수득하였다.

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₀H₂₁FN₄O₆S에 대한 계산치 464.12, 실측치: 465.42 [M+H]⁺

LCMS: (GTJC-026-P1) m/z 465.4 [M+H]⁺ (ES⁺) 4.33분에 58.97%, 4.38분에 27.97%, 4.55분에 6.57% & 4.74분에 2.61%.

¹H NMR (GTJC-026-P1) (400 MHz; DMSO-d₆, 4개 이성질체의 혼합물): δ 8.60 (s, 0.5H), 8.58 (s, 0.5H), 7.87 - 7.90 (m, 2H), 7.62 - 7.74 (m, 2H), 7.46 - 7.61 (m, 4H), 7.12 - 7.16 (m, 1H), 5.38 (d, 1H, J1-2 = 7.12 Hz, a-H-1), 3.63 - 5.39 (m, 7H), 3.10 - 3.13 (m, 2H), 2.49 - 2.58 (m, 1H).

LCMS: (GTJC-026-P2) m/z 465.38 [M+H]⁺, (ES⁺) 4.33분에 89.0% 및 4.38분에 7.34%.

¹H NMR (GTJC-026-P2) (400 MHz; DMSO-d₆, 아노머 혼합물, α:β = 1:12): δ 8.76 (bs, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.89 (d, J = 7.32, 2H), 7.68 - 7.72 (m, 2H), 7.46 - 7.62 (m, 4H), 7.12 - 7.17 (m, 1H), 5.40 (d, 1H, J1-2 = 7.12 Hz, a-H-1), 5.26 (d, J = 5.7, 1H), 4.83 - 4.86 (m, 1H), 4.69 (d, J = 8.56, 1H), 4.40 - 4.52 (m, 1H), 3.89 - 3.90 (m, 1H), 3.62 - 3.65 (m, 1H), 3.09 - 3.14 (m, 1H), 2.50 (s, 1H).

G630의 합성

N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)벤젠설폰아미드 (GTJC-055):

GTJC-026에 대하여 사용된 표준 절차에 따라 합성됨

외관: 백색 고체

합성: (GTJC-055-P1, 3 이성질체, 15 mg) 및 (GTJC-055-P2, 4 이성질체, 8 mg)

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₂₀H₁₉F₃N₄O₆S에 대한 계산치 500.10, 실측치: 501.20 [M+H]⁺

LCMS (GTJC-055-P1,): m/z 501 [M+H]⁺ (ES⁺), 4.66분에 78.32%, 4.72분에 7.41% & 4.83분에 12.44%.

¹H NMR (GTJC-055-P1) (400 MHz; DMSO-d₆): δ 8.55 (s, 1H), 7.81 - 7.91 (m, 1H), 7.60 -7.74 (m, 4H), 7.46 - 7.51 (m, 1H), 7.12 - 7.17 (m, 1H), 5.43 (d, 1H, J1-2 = 7.12 Hz, a-H-1), 5.26 (d, 1H, J = 5.88 Hz), 4.83 - 4.86 (m, 1H), 4.67 - 4.69 (m, 1H), 4.54 - 4.57 (m, 1H), 4.01 - 4.04 (m, 1H), 3.89 (bs, 1H), 3.66 - 3.69 (m, 1H), 3.32 - 3.37 (m, 1H), 3.16 - 3.19 (m, 1H).

LCMS (GTJC-055-P2): m/z 501 [M+H] + (ES+), 4.66분에 62.43%, 4.72분에 24.51%, 4.85분에 5.63% & 5.04분에 3.81%.

¹H NMR (GTJC-055-P2) (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.50 (s, 1H), 7.83 - 7.94 (m, 1H), 7.60 - 7.74 (m, 5H), 7.46 - 7.51 (m, 1H), 7.17 - 7.27 (m, 1H), 5.43 (d, 1H, J1-2 = 7.2 Hz, a-H-1), 5.24 - 5.27 (m, 1H), 4.83 - 4.86 (m, 1H), 4.68 (d, J =8.5 Hz, 1H), 4.46 - 4.57 (m, 1H), 4.02 - 4.04 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.66 - 3.67 (m, 1H), 3.31 - 3.35 (m, 1H), 3.16 - 3.19 (m, 1H).

반응식 12 (도 4j)

G632의 합성

단계 1:

N-(3-머캅토페닐)아세트아미드 (2): EtOAc (50 mL) 중 3-아미노벤젠티오l (2 g, 16.0 mmol)의 용액에 0℃에서 Ac2O (1.66 mL, 17.6 mmol)를 천천히 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 물 (40 mL)로 냉각시켰다. 유기층을 분리한 후, 수성층을 EtOAc (2×10 mL)로 추출하였다. 혼합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄) 및 진공에서 농축시켜 담갈색의 점착성 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (2.23 g, 83%). ESIMS: m/z 166 [M+H]⁺;¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 2.02 (s, 3H), 5.39 (bs, 1H), 6.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.14 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 9.90 (s, 1H).

단계 2:

(3R,4S,5R,6R)-2-((3-아세트아미도페닐)티오)-6-(아세톡시메틸)-4-아지도테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (4):

DCM (20 mL) 중 N-(3-머캅토페닐)아세트아미드 (2, 161 mg, 0.96 mmol) 및 (3R,4S,5R,6R)-6-(아세톡시메틸)-4-아지도테트라히드로-2H-피란-2,3,5-트리일 트리아세테이트 (180 mg, 0.48 mmol)의 용액에 0℃에서 BF3.Et₂O (304 mg, 0.96 mmol)를 천천히 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 55℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 냉각시킨 후, DCM (3×10 mL)으로 추출하였다. 혼합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄) 및 진공에서 농축시켰다. 상기 미정제 잔류물을 섬광 컬럼 크로마토그래피 [순상, 실리카겔 (100-200 메쉬), 구배는 0 - 70%의 헥산 중 EtOAc]로 정제하여 황백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (177 mg, 77%). 상기 미정제 잔류물을 추가로 정제하지 않고 다음 단계에서 사용하였다. ESIMS: m/z 481 [M+H]⁺

단계 3:

(3R,4S,5R,6R)-2-((3-아세트아미도페닐)티오)-6-(아세톡시메틸)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (6):

EtOH (5 mL)과 물 (5 mL) 중의 (3R,4S,5R,6R)-2-((3-아세트아미도페닐)티오)-6-(아세톡시메틸)-4-아지도테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (230 mg 0.48 mmol) 및 1-에티닐-3-플루오로벤젠 (121 mg, 0.96 mmol)의 용액에 실온에서 아스코르브산나트륨 (43 mg, 0.21 mmol)과 CuSO₄.5H₂O (32 mg, 0.07 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석시킨 후, 셀라이트의 패드를 통해 여과시키고, EtOAc (3×10 mL)로 세척한 후, 진공 중에서 농축시켜 황백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (243 mg, 84%). 상기 미정제 잔류물을 추가로 정제하지 않고 다음 단계에서 사용하였다. ESIMS: m/z 601 [M+H]⁺.

단계 4:

N-(3-(((3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)티오)페닐)아세트아미드의 합성 (GTJC-023):

MeOH (5 mL) 중의 (3R,4S,5R,6R)-2-((3-아세트아미도페닐)티오)-6-(아세톡시메틸)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)테트라히드로-2H-피란-3,5-디일 디아세테이트 (180 mg, 0.3 mmol)의 용액에 0℃에서 NaOMe (0.3 mL, 1M, 0.3 mmol)를 천천히 첨가한 후, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 Amberlyst 15 수지로 산성화시키고 (pH ~5), MeOH (3×10 mL)로 세척한 후, 진공에서 농축시켰다. 상기 미정제 잔류물을 섬광 컬럼 크로마토그래피 [순상, 실리카겔 (100-200 메쉬), 구배는 0 - 10%의 DCM 중 MeOH]로 정제하였다. 상기 수득한 백색 고체를 Et₂O로 연화시켜 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (68 mg, 48%).

LCMS: m/z 475 (M+H)⁺ (ES⁺), 4.40분에 75.88% 및 4.63분에 22.76%.

¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆): δ 2.04 (S, 3H), 3.35 - 4.05 (중첩 신호, m, 4H), 4.12 - 5.67 (중첩 신호, m, 6H), 7.23 - 7.31 (m, 3H), 7.36 - 7.52 (m, 2H), 7.67 - 7.76 (m, 2H), 7.80 (s, 1H), 8.69, 8.88 (각각 단일항, 1H), 9.96, 10.01 (각각 단일항, 1H).

단계 5:

N-(3-(((3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)설포닐)페닐)아세트아미드 (GTJC-029):

DCM (4 mL) 중 N-(3-(((3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)티오)페닐)아세트아미드 (30 mg, 0.063 mmol)의 용액에 0℃에서 m-CPBA (15 mg, 0.063 mmol)를 첨가한 후, 동일한 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 물로 냉각시켰다. NaOH (10 mL, 2M) 및 수성층을 DCM (3×10 mL)으로 추출하였다. 혼합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄) 및 진공에서 농축시켰다. 상기 잔류물을 Et₂O로 연화시켜 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (16 mg, 50%).

LCMS: m/z 475 [M+H]⁺ (ES⁺), 4.18분에 22.84%, 4.29분에 64.79%, 4.41분에 8.33%, 4.91분에 2.40%.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 2.07, 2.08 (각각 단일항, 3H), 3.26 - 3.31 (m, 1H), 3.40 - 4.74 (중첩 신호, m, 6H), 4.96 (dd, J = 10.6 & 2.3 Hz, 1H), 5.22 - 5.98 (중첩 신호, m, 2H), 7.13 - 7.17 (m, 1H), 7.46 - 7.62 (m, 3H), 7.67 - 7.78 (m, 2H), 7.83 - 7.88 (m, 1H), 8.20, 8.21, 8.27 (각각 단일항, 1H), 8.67, 8.68, 8.77 (각각 단일항, 1H), 10.29, 10.30, 10.34 (각각 단일항, 1H).

반응식 13 (도 4k)

G670의 합성

단계 1 및 2:

N-((3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸프로피올아미드 (GTJC-013-62):

MeOH (10 mL) 중 (2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-2-(히드록시메틸)-6-(메틸아미노)테트라히드로-2H-피란-3,5-디올 (300 mg, 0.8875 mmol)의 용액에 Na₂CO₃(940 mg, 8.8757 mmol)을 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 프로피올로일 클로라이드 (156 mg, 1.7751 mmol)를 0℃에서 천천히 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완료 후, 상기 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 상기 미정제 잔류물을 섬광 컬럼 크로마토그래피 [순상, 실리카겔 (100-200 메쉬), 구배는 0 - 10%의 DCM 중 MeOH]로 정제하여, 백색 고체인 N-((3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸프로피올아미드 (GTJC-013-62, 단일 β 이성질체, 2 mg), 백색 고체인 (Z)-3-클로로-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸아크릴아미드 (GTJC-013-63-P1, 단일 β 이성질체, 2 mg) 및 백색 고체인 (E)-3-클로로-N-((2R,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸아크릴아미드(GTJC-013-63-P2, 단일 β 이성질체, 1 mg)의 혼합물을 수득하였다.

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₁₈H₁₉FN₄O₅에 대한 계산치 390.13, 실측치: 391.16 [M+H]⁺

LCMS (GTJC-013-62): m/z 391 [M+H]⁺ (ES⁺) 3.88분에 95.11%.

1H-NMR (400 MHz; DMSO-d₆, (GTJC-013-62, 단일 β 이성질체)): δ 8.74 (s, 1H), 7.73 - 7.75 (m, 1H), 7.68 - 7.70 (m, 1H), 7.47 - 7.52 (m, 1H), 7.13 - 7.17 (m, 1H), 5.66 (d, 1H, J1-2 = 6.12 Hz, a-H-1), 3.80 - 5.51 (m, 7H), 3.51 - 3.53 (m, 2H), 3.15 - 3.17 (m, 2H), 2.89 (s, 2H).

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₁₈H₂₀ClFN₄O₅에 대한 계산치 426.11, 실측치: 427.11 [M+H]⁺

LCMS (GTJC-013-63-P1): m/z 427.1 [M+H]⁺ (ES⁺) 3.96분에 93.52%.

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆, (GTJC-013-63-P1, 단일 β 이성질체)): δ 8.73 (s, 1H), 7.53 - 7.7 5(m, 1H), 7.68 - 7.70 (m, 1H), 7.47 - 7.52 (m, 1H), 7.13 - 7.17 (m, 1H), 6.74 - 6.76 (m, 1H), 6.65 - 6.67 (m, 1H), 5.60 (d, 1H, J1-2 = 8.6 Hz, a-H-1), 5.30 - 5.37 (m, 1H), 4.91 - 4.95 (m, 2H), 4.74 (m, 1H), 4.37 (m, 1H), 3.92 (m, 1H), 3.81(t, J = 5.96 Hz, 1H), 3.51 (m, 2H), 2.90 (s, 3H).

HRMS (ESI) [M+H]⁺ C₁₈H₂₀ClFN₄O₅에 대한 계산치 426.11, 실측치: 427.14 [M+H]⁺

LCMS (GTJC-013-63-P2): m/z 427.1 [M+H]⁺(ES⁺) 4.22분에 90.74%.

¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆) (GTJC-013-63-P2, 단일 β 이성질체): δ 8.74 (s, 1H), 7.73 - 7.75 (m, 1H), 7.68 - 7.71 (m, 1H), 7.47 - 7.52 (m, 1H), 7.31 - 7.34 (m, 1H), 7.13 - 7.17 (m, 1H), 7.09 (m, 1H), 5.59 (m, 1H), 5.38 (m, 1H), 5.22 (d, 1H, J1-2 = 8.84 Hz, a-H-1), 4.98 (m, 1H), 4.76 (m, 1H), 4.39 (m, 1H), 3.92 - 3.93 (m, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.90 (s, 3H).

(S)-6-아미노-2-(4-(((3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)(메틸)카르바모일)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)헥산산 (GTJC-057):

톨루엔 (5 mL) 중 N-((3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-플루오로페닐)-1H-1,2,3-트리아졸-1-일)-3,5-디히드록시-6-(히드록시메틸)테트라히드로-2H-피란-2-일)-N-메틸프로피올아미드 (100 mg 0.2564 mmol)의 용액에 0℃에서 DIPEA (66.15 mg, 0.5128 mmol), CuI (48.50 mg, 0.2564 mmol) 및 (S)-3-아지도-7-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-2-옥소헵탄산 (92.7 mg, 0.3076 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 12시간 후, 상기 반응 혼합물을 HCl (5 mL) 중에서 냉각시킨 후, 30분간 교반하였다. 분리된 수성층의 유기 화합물을 DCM 중 5%의 MeOH (3×25 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 염수로 세척하고 무수 Na₂SO₄로 건조시켰다. 용매를 45℃에서 감압 하에 제거하여 백색 고체인 표제 화합물을 수득하였다 (GTJC-057, 단일 β 이성질체, 15 mg, 5.2%).

HRMS (ESI) [M+H]⁺C₂₄H₃₁FN₈O₇에 대한 계산치 562.23, 실측치: 563.38 [M+H]⁺

LCMS: m/z 563.3 (M+H)⁺ (ES⁺) 3.13분에 98.41%.

¹H NMR (400 MHz; DMSO-d₆, 단일 β 이성질체): δ 8.77 (s, 1H), 8.42 (m, 1H), 7.68 - 7.75 (m, 2H), 7.38 - 7.57 (m, 1H), 7.12 - 7.16 (t, J = 8.42 Hz, 1H), 5.72 (d, 1H, J1-2 = 7.8 Hz, a-H-1), 5.64 (m, 1H), 5.25 - 5.35 (m, 1H), 4.61 - 4.70 (m, 1H), 4.51 (bs, 1H), 3.93 (m, 1H), 3.71 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 3.31 - 3.35 (m, 2H), 3.26 - 3.31 (m, 2H), 3.05 (s, 2H), 2.78 (m, 1H), 2.49 - 2.54 (m, 2H), 2.44 (s, 1H), 2.13 - 2.24 (m, 1H), 1.55 - 1.59 (m, 1H), 1.29 (m, 1H).

Claims

삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
하기 화학식을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물:

.
삭제
제14항에 있어서, 화합물은 유리 형태로 존재하는 것인 화합물.
제16항에 있어서, 유리 형태는 무수물인 화합물.
제16항에 있어서, 유리 형태는 수화물인 화합물.
제14항에 있어서, 화합물은 갈렉틴 3, 갈렉틴 1, 갈렉틴 8, 갈렉틴 9 또는 이들의 조합과 결합하는 것인 화합물.
제14항에 있어서, 화합물은 갈렉틴-3에 대하여 1 nM 내지 50 μM의 친화도를 갖는 것인 화합물.
삭제
삭제
질병의 치료를 필요로 하는 대상체에서 그 질병을 치료하기 위한 치료적 유효량의 제14항 및 제16항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 적어도 하나의 화합물을 포함하는 약학 조성물로서, 상기 질병은 비알코올성 지방간염, 섬유증, 간경화증, 염증성 질환, 자가면역성 질환, 신생물성 질환, 대사성 질환, 암, 심부전, 부정맥, 요독성 심근병증, 만성 신장 질환, 폐 질환, 피부 자가면역성 피부 질환, 증식성 피부 질환, 섬유성 피부 질환, 건선 또는 아토피성 피부염인, 약제학적 조성물.
삭제
삭제
제23항에 있어서, 염증성 질환은 염증성 장 질환, 크론병, 다발성 경화증, 전신 홍반성 루푸스, 관절염, 류머티스성 관절염, 천식 또는 궤양성 대장염인 약제학적 조성물.
제23항에 있어서, 섬유증은 간 섬유증, 신장 섬유증, 폐 섬유증, 또는 심장 섬유증인 약제학적 조성물.
제23항에 있어서, 자가면역성 질환은 류머티스성 관절염 또는 다발성 경화증인 약제학적 조성물.
제23항에 있어서, 질병은 심부전, 부정맥, 또는 요독성 심근병증인 약제학적 조성물.
제23항에 있어서, 질병은 만성 신장 및 폐 질환인 약제학적 조성물.
제23항에 있어서, 질병은 피부 자가면역성, 증식성 및 섬유성 피부 질환, 임의로는 건선 또는 아토피성 피부염인 약제학적 조성물.
제23항에 있어서, 신생물성 질환은 양성 또는 악성 신생물성 질환인 약제학적 조성물.
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제
삭제