KR102575345B1 - 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법 - Google Patents

2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR102575345B1
KR102575345B1 KR1020210064913A KR20210064913A KR102575345B1 KR 102575345 B1 KR102575345 B1 KR 102575345B1 KR 1020210064913 A KR1020210064913 A KR 1020210064913A KR 20210064913 A KR20210064913 A KR 20210064913A KR 102575345 B1 KR102575345 B1 KR 102575345B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
amino
nitrogen source
carboxymuconate
microorganism
source depletion
Prior art date
Application number
KR1020210064913A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20220157164A (ko
Inventor
최종일
Original Assignee
전남대학교산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 전남대학교산학협력단 filed Critical 전남대학교산학협력단
Priority to KR1020210064913A priority Critical patent/KR102575345B1/ko
Publication of KR20220157164A publication Critical patent/KR20220157164A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102575345B1 publication Critical patent/KR102575345B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/405—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from algae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/88—Lyases (4.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y401/00—Carbon-carbon lyases (4.1)
    • C12Y401/01—Carboxy-lyases (4.1.1)
    • C12Y401/01045—Aminocarboxymuconate-semialdehyde decarboxylase (4.1.1.45)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
    • Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
    • Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 질소원 고갈 스트레스에 대한 저항성을 증가시키는 방사무늬김(Pyropia yezoensis)에서 유래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제(2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase) 추정 유전자를 암호화하는 단리된 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환된 클라미도모나스 라인하드티(Chlamydomonas reinhardtii) 및 이를 이용한 지질 생산 방법에 관한 것으로서, 이에 따라 제조된 클라미도모나스 라인하드티는 질소원 고갈 스트레스 환경에서 우수한 생존율을 보이고, 이를 이용하여 지질, 전분 등과 같은 대사 물질을 대량 생산하는데 활용될 것으로 기대된다.

Description

2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법{Method for preparing nitrogen source depletion stress-resistant microorganism into which 2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase presumed gene is introduced and method for manufacturing lipid using the same}
본 발명은 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 방사무늬김(Pyropia yezoensis)에서 유래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제(2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase) 추정 유전자를 클라미도모나스 라인하드티(Chlamydomonas reinhardtii)에 도입하여 질소원이 제한된 조건에서 생존율을 높이고 이를 이용하여 지질을 생산하는 방법에 관한 것이다.
최근 전세계적으로 화석에너지의 고갈과 지구온난화에 직면하여, 미국을 포함하는 선진국을 중심으로 환경 친화적인 바이오, 수소, 태양 등의 신 재생에너지 활용 및 확산을 위한 정책 입안과 함께 이들 신 재생에너지의 공급과 사용이 촉진되고 있다. 국내에서도 신 재생에너지 개발에 많은 노력을 하고 있지만, 현재 연구 단계에 머물고 있는 실정이다. 바이오 에너지는 재생 가능하며, 이산화탄소를 고정함으로서 지구온난화 가속현상을 감소시킬 수 있는 장점이 있는데, 현재로서는 바이오 에탄올, 바이오 부탄올, 바이오 디젤 등에 대한 연구가 활발하게 진행되고 있다.
상기 바이오 에너지 중에서도, 가장 활발하게 연구가 진행되고 있는 것은 바이오 디젤이다. 바이오 디젤은 바이오 매스에 포함된 지방산(fatty acid)의 트랜스에스테르화(transesterification) 과정에 의해 메틸 에스터 또는 에틸 에스터 형태로 전환되어 생성되는데, 150℃의 인화점을 가지고 있어 인화점이 64℃인 경유에 비해 불이 잘 붙지 않고, 낮은 온도에서 휘발성이 높은 휘발유(45℃보다 안정적이기 때문에 비가연성 액체로 분류되며, 고온에서 불이 붙기 때문에 안정성이 더 높다고 할 수 있다. 또한, 경유와 달리 바이오 디젤은 연소될 때 발암물질 및 돌연변이를 일으키는 유해 가스 방출량이 적으며 기타 배출물이 현저하게 낮은 비독성 에너지로 알려져 있다.
이러한 바이오 디젤은 미세조류를 이용하여 생물학적으로 생산할 수 있다고 알려져 있다. 미세조류는 사료 또는 비료의 용도로 사용되고 있으며, 특히 녹조류에 속하는 스피룰리나(Spirulina sp.), 클로렐라(Chlorella sp.), 두날리엘라(Dunaliella sp.), 노스톡(Nostoc sp.) 등은 건강식품으로도 이용되고 있다. 이러한 미세조류는 태양에너지의 이용효율이 식물에 비하여 약 25배 높기 때문에, 지질의 함량이 우수한 미세조류는 바이오 디젤의 생산을 위한 바이오매스로 사용할 수 있다.
이처럼 지질의 함량이 우수한 미세조류로는 보트리오코코스(Botryococcus sp.)와 키오키트리움(Schiochytrium sp.)이 알려져 있는데, 상기 미세조류는 정상적인 생활환경에서는 지질의 함량이 높지 않지만, 영양공급이 중단된 상태에서 일정 시간이 경과하면, 세포 내에 지질을 축적하는 특성을 나타낸다.
이러한 특성을 이용하여 상기 미세조류를 바이오 디젤의 생산을 위한 바이오매스로 사용할 수 있으나, 상기 미세조류의 지질함량을 증가시키기 위해서는 상기 미세조류를 배양하여 증식하는 제1 공정과, 상기 증식된 미세조류에 영양공급을 중단하고 일정시간 동안 배양하여 세포 내 지질함량을 증대시키는 제2 공정이 수행되어야 하는데, 상기 2단계로 이루어진 공정을 수행하기 위해서는 과다한 시간이 요구되기 때문에 아직까지는 바이오 디젤의 산업적 생산에 사용되지 못하고 있으므로, 바이오 디젤의 생산을 위한 지질 함량이 우수한 미세조류의 개발이 절실히 요구되고 있는 실정이다.
특히 바이오 디젤 생산을 위해 사용되고 있는 미세조류의 경우 세포내의 대사 특성에 관한 연구가 부족하여 지질 생산성 증대를 위한 타겟 유전자 선별이 필요한 실정이다. 즉, 지질 함량이 증가된 재조합 균주를 개발하기 위하여 어떠한 유전자를 증폭해야 하는지에 관한 선행 연구가 부족하다.
이에 본 발명자들은 방사무늬김(Pyropia yezoensis)에서 유래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제(2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase) 추정 유전자를 과다발현시킬 경우, 과다발현된 재조합 미세조류에서 지질 함량이 증가한다는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
이에, 본 발명의 목적은 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 미생물을 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환하는 형질전환 단계를 포함하는 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 다음을 포함하는 지질 생산 방법을 제공하는 것이다:
미생물을 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환하는 형질전환 단계; 및
상기 미생물을 배양하는 배양 단계.
본 발명의 또 다른 목적은 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 지질 생산 용도에 관한 것이다.
본 발명은 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제(2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase) 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법에 관한 것으로, 본 발명에 따라 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 클라미도모나스 라인하드티(Chlamydomonas reinhardtii)는 질소원이 제한된 조건에서 생존율의 개선 및 지질 함량의 증진을 나타낸다.
본 발명자들은 환경에 따른 방사무늬김(Pyropia yezoensis) 유전자의 발현 변화로부터 특이적으로 높게 발현하는 유전자들 중에서 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈 카르복실라제와 높은 유사성을 갖는 유전자를 발견하고 이 유전자를 미세조류 클라미도모나스 라인하드티에 형질전환하여 스트레스 조건하에 내성을 평가하였다.
그 결과 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 발현된 재조합 클라미도모나스 라인하드티가 질소원이 제한된 스트레스 환경에서 내성이 더 높은 것으로 확인되었으며, 또한 2-아미노-3-카르복시뮤코 네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 발현된 재조합 클라미도모나스 라인하드티는 야생형에 비하여 더 높은 함량의 지질을 합성한다는 것을 확인하였다.
이에 본 발명에서는 방사무늬김에서 유래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자와 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미 알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자로 형질전환된 재조합 클라미도모나스 라인하드티 및 재조합 클라미도모나스 라인하드티를 이용한 지질 생산에서 지질 함량이 증가된 결과가 확인되어 본 발명을 완성하게 되었다.
이하 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.
본 발명의 일 양태는 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드이다.
상기 서열번호 3으로 표시되는 염기서열은 방사무늬김에서 유래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자인 것일 수 있다.
본 발명의 다른 양태는 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터이다.
상기 서열번호 3으로 표시되는 염기서열은 방사무늬김에서 유래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자인 것일 수 있다.
본 명세서상의 용어 "벡터(vector)"는 숙주 세포에서 목적 유전자를 발현시키기 위한 수단을 의미한다. 예를 들어, 플라스미드 벡터, 코즈미드 벡터 및 박테리오파아지 벡터, 아데노바이러스 벡터, 레트로바이러스 벡터 및 아데노연관 바이러스 벡터와 같은 바이러스 벡터를 포함한다.
상기 재조합 벡터로 사용될 수 있는 벡터는 당업계에서 종종 사용되는 플라스미드(예를 들면, pSC101, pGV1106, pACYC177, ColE1, pKT230, pME290, pBR322, pUC8/9, pUC6, pBD9, pHC79, pIJ61, pLAFR1, pHV14, pGEX 시리즈, pET 시리즈 및 pUC19 등), 파지 (예를 들면, λgt4λB, λ-Charon, λΔz1 및 M13 등) 또는 바이러스 (예를 들면, SV40 등)를 조작하여 제작될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 질소원 고갈 스트레스에 대한 저항성을 증가시키는 방사무늬김에서 유 래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열은, 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열일 수 있으며, 예를 들어, 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 폴리뉴클레오타이드일 수 있다.
또는, 상기 폴리뉴클레오타이드는 상기 서열번호 3의 염기서열에 대하여 실질적 동일성을 갖는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 것일 수 있다.
상기의 실질적인 동일성은 각각의 뉴클레오타이드 서열과 임의의 다른 뉴클레오타이드 서열을 최대한 대응되도록 정렬하고, 그 서열을 분석하여, 상기 임의의 다른 뉴클레오타이드 서열이 각각의 뉴클레오타이드 서열과 70% 이상, 90% 이상, 또는 98% 이상의 서열 상동성을 갖는 것을 의미한다.
본 발명의 또 다른 양태는 상기 재조합 벡터로 형질전환된 숙주 세포에 관한 것이다.
본 발명의 일 예에서, 목적 단백질이 삽입된 발현벡터를 숙주 세포에 삽입함 으로써 지방 생산능력이 향상된 형질전환체를 만들 수 있으며, 상기 형질전환체는 상기 재조합 벡터를 적절한 숙주 세포에 도입시킴으로써 얻어진 것일 수 있다. 상기 숙주세포는 상기 발현벡터를 안정되면서 연속적으로 클로닝 또는 발현시킬 수 있는 세포로서 당업계에 공지된 어떠한 숙주 세포도 이용할 수 있다.
상기 방사무늬김에서 유래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자 또는 이를 포함하는 재조합 벡터의 숙주 세포 내로의 운반(도입)은, 당업계에 널리 알려진 운반 방법을 사용할 수 있다. 상기 운반 방법은 예를 들어, 숙주 세포가 원핵 세포인 경우, CaCl2 방법 또는 전기 천공 방법 등을 사용할 수 있고, 숙주 세포가 진핵 세포인 경우에는, 미세 주입법, 칼슘 포스페이트 침전법, 전기 천공법, 리포좀매개 형질감염법 및 유전자 밤바드먼트 등을 사용할 수 있으나, 이에 한정하지는 않는다.
상기 형질전환된 숙주 세포를 선별하는 방법은 선택 표지에 의해 발현되는 표현형을 이용하여, 당업계에 널리 알려진 방법에 따라 용이하게 실시할 수 있다. 예를 들어, 상기 선택 표지가 특정 항생제 내성 유전자인 경우에는, 상기 항생제가 함유된 배지에서 형질전환체를 배양함으로써 형질전환체를 용이하게 선별할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태는 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물이다.
본 발명에 있어서 상기 미생물은 조류(algae)인 것일 수 있고, 예를 들어, 클라미도모나스 라인하드티인 것일 수 있다.
본 발명에 있어서 상기 폴리뉴클레오타이드는 방사무늬김에서 유래한 것일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 형질전환된 클라미도모나스 라인하드티는 방사무늬김에서 유래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입되어 질소원 고갈 스트레스에 대한 저항성이 증가되었다.
본 발명의 또 다른 양태는 미생물을 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환하는 형질전환 단계를 포함하는 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법이다.
본 발명에 있어서 상기 미생물은 조류인 것일 수 있고, 예를 들어, 클라미도모나스 라인하드티인 것일 수 있다.
본 발명에 있어서 상기 폴리뉴클레오타이드는 방사무늬김에서 유래한 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태는 다음을 포함하는 지질 생산 방법이다:
미생물을 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환하는 형질전환 단계; 및
상기 미생물을 배양하는 배양 단계.
본 발명에 있어서 상기 미생물은 조류인 것일 수 있고, 예를 들어, 클라미도모나스 라인하드티인 것일 수 있다.
본 발명에 있어서 상기 폴리뉴클레오타이드는 방사무늬김에서 유래한 것일 수 있다.
본 발명에 있어서 상기 지질 생산 방법은 배양 단계의 수행 후 미생물 및 이의 배양액으로부터 지질을 회수하는 회수 단계를 추가적으로 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 상기 형질전환된 클라미도모나스 라인하드티는 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 폴리뉴클레오타이드가 도입되지 않은 대조군에 비하여 지질의 함량이 높아져 바이오 디젤 생산량이 현저히 증가되는 효과를 나타냈다. 따라서, 상기 재조합 클라미도모나스 라인하드티는 유전자가 발현하지 않는 야생형 대조군에 비하여 지질의 함량이 높아져 향후 바이오 디젤 생산에 활용될 수 있다.
본 발명은 질소원 고갈 스트레스에 대한 저항성을 증가시키는 방사무늬김(Pyropia yezoensis)에서 유래한 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제(2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase) 추정 유전자를 암호화하는 단리된 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환된 클라미도모나스 라인하드티(Chlamydomonas reinhardtii) 및 이를 이용한 지질 생산 방법에 관한 것으로서, 이에 따라 제조된 클라미도모나스 라인하드티는 질소원 고갈 스트레스 환경에서 우수한 생존율을 보이고, 이를 이용하여 지질, 전분 등과 같은 대사 물질을 대량 생산하는데 활용될 것으로 기대된다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 재조합 클라미도모나스 라인하 드티(Chlamydomonas reinhardtii)의 질소원 고갈 조건에서의 스트레스 내성을 보여주는 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 재조합 클라미도모나스 라인하 드티(B)의 야생형(A) 대비 지질 함량을 나타낸 사진이다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 "%"는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (중량/중량)%, 고체/액체는 (중량/부피)%, 그리고 액체/액체는 (부피/부피)%이다.
실시예 1: 방사무늬김으로부터 RNA 추출 및 cDNA합성
방사무늬김(Pyropia yezoensis)은 국립수산과학원 해조류연구센터로부터 분양 받아 사용하였다. 구체적으로, MGM(Modified Grund Media) 배지를 C10H14O6N2Na22H2O(Na2EDTA) 3.72 g, FeSO47H2O 0.28 g, Na2HPO412H2O 10.74 g, NaNO3 42.5 g, MnCl27H2O 0.019197 g 및 비타민 B12(Cyanocobalamin) 1 mg를 포함한 멸균된 해수 1리터(ℓ)를 사용하여 제조하였다. 그 다음, 방사무늬김을 MGM 배지에 넣고, 식물 배양 접사(Plant culture dish; 100 X 40 mm)에 100 mL의 부피로 첨가한 후, 광도 >20 umol photon m-2s-1, 12:12 명(Light):암(Dark) 사이클, 온도 12℃를 유지하여 1 내지 10주 동안 배양하였다.
방사무늬김 엽상체 100 mg을 액체질소로 냉동시켜 멸균된 막자 사발로 잘게 분쇄하였다. RNA 정제 키트(RNA purification kit, QIAGEN RNeasy®Mini kit)를 사용하여, 가루가 된 조직 100 mg을 1.5 mL 마이크로 센트리퓨즈(micro centrifuge) 튜브에 넣고 450 uL RLT 버퍼를 넣고 교반한 후, QIAshredder 스핀 컬럼(spin column)에 옮겨 2분 동안 15000 rpm으로 원심분리하였다.
그 다음, 분리된 버퍼에 에탄올(ethanol)을 200 uL 볼륨을 섞어주고, RNeasy 스핀 컬럼(spin column)에 걸어 15초 >8000 g로 원심분리를 하였다. 떨어진 버퍼를 제거하고 컬럼에 700 uL RW1 버퍼로 15초 >8000 g로 세척 후, 떨어진 버퍼를 제거하고 500 uL RPE 버퍼로 15초, 2분 >8000 g로 2번 세척하였다. 컬럼을 새로운 1.5 mL 마이크로 센트리퓨즈 튜브에 옮겨 30 내지 50 uL의 RNase 제거수(RNase-free water)를 첨가하고 1분 >8000 g로 원심분리 후 각각의 RNA 시료를 수득하였다.
Biodrop(Biochrom, Germany)을 흡광도 230 nm와 흡광도 280 nm의 파장 범위로 설정하고 RNase 제거수 2 uL를 스팟에 넣고 베이스(base)를 잡았다. 상기 RNA 시료 2 uL를 스팟에 넣고 흡광도 260 nm를 통해 RNA 정량 값을 확인하였다.
상기 정량한 2 uL RNA 시료를 키트(Transcriptor Fiest Strand cDNA Synthesis Kit, Roche, Germany)를 사용하여 cDNA를 합성하였다. 구체적으로, 정량된 각각의 2 uL RNA 시료에 올리고-dT 1 uL와 DEPC-water를 이용하여 총 13 uL로 맞춰 65℃에서 10분 동안 인큐베이션(incubation)하였다. 처리 후 RT reaction(5x) 4 uL, 역전사효소(Reverse transcriptase) 1 uL, RNase 억제제(inhibitor) 0.5 uL, DNTP 2 uL를 첨가하여 50℃에서 60분, 85℃에서 5분 동안 인큐베이션(incubation)하여 각각의 cDNA를 합성하였다.
이후 합성된 cDNA에서 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제(2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase)로 추정되는 유전자를 하기 표 1의 프라이머를 사용하여 PCR 증폭하였다. 얻어진 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제(2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase) 추정 유전자의 염기서열 및 아미노산 서열은 하기 표 1과 같다.
서열번호 명칭 서열 (5'->3')
1 forward primer CAC CAT CGA TAT GAA GAT AGA TAG CCA CGC A
2 reverse primer CGC CAG ATC TTC AAA TAC TTT CTT TCA TCT TTA CT
3 2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase 코딩 염기서열 ATGAAGATAGATAGCCACGCACATATATTGCCCAAAACTTGGGAAAGCCTTAAAGATAAATTTGGATACGGTGGGTTTATAGAACTAGACCACCATAAACCCCATGCGGCGCGTATGATGCGTGATGATGGAATGTGGTTTCGTGAGATTCATGAAAGATGCTGGTATCCCGAAGCTATAATAAAAGATATGGACGATTACGGGGTAGATATGATGGTATTGTGTACCGTACCTGTACTGTTTAACTATTGGGCAAAACCAGAACATACTTACGAGTGGAGTATTTTCTTGAACGACCATATTGCCGATGTGCAAGCTAAATACCGCAAACGTTTTATTAGCTTAGGTACATTGCCCATGCAAGATATCCCATTGGCTATAAAAGAAATGGAGCGCTGCAAAAATGTTTTAGGACTTCCAGGAGTAGAGATAGGGACAAATATTAACGGTAAAAACTTAGATCATGAGAGCTTTTTCCCGTTTTATGAAGCTGCCGAAGCACTTGATATGGGTATATTTATACACCCTTGGGATATGATGGGTACTGACCAAATGCCTGATTATTTTATGCCGTGGTTAGTGGGTATGCCTGCCGAAGAAAGCCGCGCCATTTGCAGCTTAATATTTGGTGGCGTGTTTGATAAATTCCCTAAACTGCGCTTCATGGTGGCACATGGGGGAGGTTCTTTTCCTTTTACATTGGGTAGAGTGGCACACGGTTATGCTTGCCGCCCTGATTTATGTAACGTGAATGATATAAAAAATCCACGCGAGTATGCCCGCCGTTTTTGGGTAGATGGTATTACGCATGATAAAGATGCTATGCGTTACCTAATAAACCTTATGGGGGACGACCGTATTATGTACGGAACGGATTACCCATTCCCTTTAGGTGATTTAGAGCATGGTAAATTTTTAGAAGAAATGACCGACCTAAGTGCACAAACCAAACAAAATATTTTCTCTAATAATGTACTGGATTGGTTAGGTATGGAAGCCGAAGAGGGAGTTGGAGTAAAGATGAAAGAAAGTATTTGA
4 2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase 추정 단백질 아미노산 서열 MKIDSHAHILPKTWESLKDKFGYGGFIELDHHKPHAARMMRDDGMWFREIHERCWYPEAIIKDMDDYGVDMMVLCTVPVLFNYWAKPEHTYEWSIFLNDHIADVQAKYRKRFISLGTLPMQDIPLAIKEMERCKNVLGLPGVEIGTNINGKNLDHESFFPFYEAAEALDMGIFIHPWDMMGTDQMPDYFMPWLVGMPAEESRAICSLIFGGVFDKFPKLRFMVAHGGGSFPFTLGRVAHGYACRPDLCNVNDIKNPREYARRFWVDGITHDKDAMRYLINLMGDDRIMYGTDYPFPLGDLEHGKFLEEMTDLSAQTKQNIFSNNVLDWLGMEAEEGVGVKMKESI
실시예 2: 재조합 클라미도모나스에서의 질소원 고갈 내성 확인
상기 증폭된 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 클라미도모나스 라인하드티(Chlamydomonas reinhardtii)에서 질소원 고갈에 대한 내성을 부여하는지를 확인하였다.
구체적으로, 서열번호 1 및 2의 PCR 프라이머 쌍을 이용하여 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자를 PCR 증폭한 후, GeneArt® Chlamydomonas TOPO® Engineering Kits (A14264)의 벡터 pChlamy_3/D-TOPO를 이용하여 유전자를 발현시켰다.
벡터 pChlamy_3/D-TOPO가 히그로마이신(hygromycin) 내성유전자를 가지므로, 야생형인 클라미도모나스 라인하드티 C137에 gene pulse(Bio-Rad)를 이용하여 전기천공법으로 형질 전환하였으며 2 내지 3주 동안 배양한 후, 15 mg/L 히그로마이신이 첨가된 배지에서 선별하여 형질전환체를 수득하였다.
그 다음, 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 발현된 재조합 클라미도모나스 라인하드티와 야생형 클라미도모나스 라인하드티를 질소원이 제한된 조건에서 28℃, 6일 동안 배양한 다음 생존 세포의 비율을 측정하여 생존율(survival rate)을 나타내었다.
도 1에서 확인할 수 있듯이, 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 발현된 재조합 클라미도모나스 라인하드티는 야생형 클라미도모나스 라인하드티에 비하여 질소원 고갈 조건에서 더 우수한 생존율을 보이는 것을 확인하였다.
실시예 3: 재조합 클라미도모나스의 지질 함량 비교
방사무늬김 유래 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실 라제 추정 유전자가 발현된 재조합 클라미도모나스 라인하드티와 야생형 클라미도모나스 라인하드티를 MBBM(Modified Bold's Basal Medium) 배지에 넣은 다음 광도 20 umol photon m-2s-1, 12:12 명:암 사이클, 온도 20℃를 유지하여 6일 동안 배양하였다. 배양이 끝난 균주들을 나일레드(nile red)로 염색한 후에 현미경으로 관찰하였다.
도 2에서 확인할 수 있듯이, 붉은색을 띠는 부분이 세포내 축적된 지질을 나타내는 것으로, 방사무늬김 유래 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 발현된 재조합 클라미도모나스 라인하드티(B)는 야생형 클라미도모나스 라인하드티(A)에 비하여 높은 지질 함량을 갖는 것이 확인되었다.
<110> INDUSTRY FOUNDATION OF CHONNAM NATIONAL UNIVERSITY <120> Method for preparing nitrogen source depletion stress-resistant microorganism into which 2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase presumed gene is introduced and method for manufacturing lipid using the same <130> PN210204 <160> 4 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer <400> 1 caccatcgat atgaagatag atagccacgc a 31 <210> 2 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer <400> 2 cgccagatct tcaaatactt tctttcatct ttact 35 <210> 3 <211> 1038 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Pyropia yezoensis <400> 3 atgaagatag atagccacgc acatatattg cccaaaactt gggaaagcct taaagataaa 60 tttggatacg gtgggtttat agaactagac caccataaac cccatgcggc gcgtatgatg 120 cgtgatgatg gaatgtggtt tcgtgagatt catgaaagat gctggtatcc cgaagctata 180 ataaaagata tggacgatta cggggtagat atgatggtat tgtgtaccgt acctgtactg 240 tttaactatt gggcaaaacc agaacatact tacgagtgga gtattttctt gaacgaccat 300 attgccgatg tgcaagctaa ataccgcaaa cgttttatta gcttaggtac attgcccatg 360 caagatatcc cattggctat aaaagaaatg gagcgctgca aaaatgtttt aggacttcca 420 ggagtagaga tagggacaaa tattaacggt aaaaacttag atcatgagag ctttttcccg 480 ttttatgaag ctgccgaagc acttgatatg ggtatattta tacacccttg ggatatgatg 540 ggtactgacc aaatgcctga ttattttatg ccgtggttag tgggtatgcc tgccgaagaa 600 agccgcgcca tttgcagctt aatatttggt ggcgtgtttg ataaattccc taaactgcgc 660 ttcatggtgg cacatggggg aggttctttt ccttttacat tgggtagagt ggcacacggt 720 tatgcttgcc gccctgattt atgtaacgtg aatgatataa aaaatccacg cgagtatgcc 780 cgccgttttt gggtagatgg tattacgcat gataaagatg ctatgcgtta cctaataaac 840 cttatggggg acgaccgtat tatgtacgga acggattacc cattcccttt aggtgattta 900 gagcatggta aatttttaga agaaatgacc gacctaagtg cacaaaccaa acaaaatatt 960 ttctctaata atgtactgga ttggttaggt atggaagccg aagagggagt tggagtaaag 1020 atgaaagaaa gtatttga 1038 <210> 4 <211> 345 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> Pyropia yezoensis <400> 4 Met Lys Ile Asp Ser His Ala His Ile Leu Pro Lys Thr Trp Glu Ser 1 5 10 15 Leu Lys Asp Lys Phe Gly Tyr Gly Gly Phe Ile Glu Leu Asp His His 20 25 30 Lys Pro His Ala Ala Arg Met Met Arg Asp Asp Gly Met Trp Phe Arg 35 40 45 Glu Ile His Glu Arg Cys Trp Tyr Pro Glu Ala Ile Ile Lys Asp Met 50 55 60 Asp Asp Tyr Gly Val Asp Met Met Val Leu Cys Thr Val Pro Val Leu 65 70 75 80 Phe Asn Tyr Trp Ala Lys Pro Glu His Thr Tyr Glu Trp Ser Ile Phe 85 90 95 Leu Asn Asp His Ile Ala Asp Val Gln Ala Lys Tyr Arg Lys Arg Phe 100 105 110 Ile Ser Leu Gly Thr Leu Pro Met Gln Asp Ile Pro Leu Ala Ile Lys 115 120 125 Glu Met Glu Arg Cys Lys Asn Val Leu Gly Leu Pro Gly Val Glu Ile 130 135 140 Gly Thr Asn Ile Asn Gly Lys Asn Leu Asp His Glu Ser Phe Phe Pro 145 150 155 160 Phe Tyr Glu Ala Ala Glu Ala Leu Asp Met Gly Ile Phe Ile His Pro 165 170 175 Trp Asp Met Met Gly Thr Asp Gln Met Pro Asp Tyr Phe Met Pro Trp 180 185 190 Leu Val Gly Met Pro Ala Glu Glu Ser Arg Ala Ile Cys Ser Leu Ile 195 200 205 Phe Gly Gly Val Phe Asp Lys Phe Pro Lys Leu Arg Phe Met Val Ala 210 215 220 His Gly Gly Gly Ser Phe Pro Phe Thr Leu Gly Arg Val Ala His Gly 225 230 235 240 Tyr Ala Cys Arg Pro Asp Leu Cys Asn Val Asn Asp Ile Lys Asn Pro 245 250 255 Arg Glu Tyr Ala Arg Arg Phe Trp Val Asp Gly Ile Thr His Asp Lys 260 265 270 Asp Ala Met Arg Tyr Leu Ile Asn Leu Met Gly Asp Asp Arg Ile Met 275 280 285 Tyr Gly Thr Asp Tyr Pro Phe Pro Leu Gly Asp Leu Glu His Gly Lys 290 295 300 Phe Leu Glu Glu Met Thr Asp Leu Ser Ala Gln Thr Lys Gln Asn Ile 305 310 315 320 Phe Ser Asn Asn Val Leu Asp Trp Leu Gly Met Glu Ala Glu Glu Gly 325 330 335 Val Gly Val Lys Met Lys Glu Ser Ile 340 345

Claims (11)

  1. 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드.
  2. 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터.
  3. 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 미생물은 클라미도모나스 라인하드티(Chlamydomonas reinhardtii)인 것인, 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물.
  5. 제3항에 있어서, 상기 폴리뉴클레오타이드는 방사무늬김에서 유래한 것인, 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물.
  6. 미생물을 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환하는 형질전환 단계를 포함하는 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법.
  7. 제6항에 있어서, 상기 미생물은 클라미도모나스 라인하드티(Chlamydomonas reinhardtii)인 것인, 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법.
  8. 제6항에 있어서, 상기 폴리뉴클레오타이드는 방사무늬김에서 유래한 것인, 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법.
  9. 다음을 포함하는 지질 생산 방법:
    미생물을 서열번호 3으로 표시되는 염기서열로 이루어진 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환하는 형질전환 단계; 및
    상기 미생물을 배양하는 배양 단계.
  10. 제9항에 있어서, 상기 미생물은 클라미도모나스 라인하드티(Chlamydomonas reinhardtii)인 것인, 지질 생산 방법.
  11. 제9항에 있어서, 상기 폴리뉴클레오타이드는 방사무늬김에서 유래한 것인, 지질 생산 방법.
KR1020210064913A 2021-05-20 2021-05-20 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법 KR102575345B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020210064913A KR102575345B1 (ko) 2021-05-20 2021-05-20 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020210064913A KR102575345B1 (ko) 2021-05-20 2021-05-20 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20220157164A KR20220157164A (ko) 2022-11-29
KR102575345B1 true KR102575345B1 (ko) 2023-09-06

Family

ID=84235247

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020210064913A KR102575345B1 (ko) 2021-05-20 2021-05-20 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102575345B1 (ko)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101107980B1 (ko) 2009-10-28 2012-01-25 한국에너지기술연구원 ｇｌｇＡ１ 유전자와 이를 포함하는 재조합벡터와 이로부터 형질전환된 숙주세포와 이의 생합성 제어를 통한 남세균 총지질 함량 조절 방법
KR101563148B1 (ko) 2014-05-15 2015-10-26 한국생명공학연구원 감마선 조사에 의해 바이오매스, 전분 및 지질 함량이 증진된 미세조류 클라미도모나스 레인하드티아이 변이체 및 이의 용도

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101695465B1 (ko) * 2015-06-02 2017-01-12 재단법인 탄소순환형 차세대 바이오매스 생산전환 기술연구단 염기성 나선 루프 나선 전사 인자 단백질을 코딩하는 유전자의 과발현을 이용하여 미세조류의 지질 생산성 및 생장률을 증가시키는 방법

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101107980B1 (ko) 2009-10-28 2012-01-25 한국에너지기술연구원 ｇｌｇＡ１ 유전자와 이를 포함하는 재조합벡터와 이로부터 형질전환된 숙주세포와 이의 생합성 제어를 통한 남세균 총지질 함량 조절 방법
KR101563148B1 (ko) 2014-05-15 2015-10-26 한국생명공학연구원 감마선 조사에 의해 바이오매스, 전분 및 지질 함량이 증진된 미세조류 클라미도모나스 레인하드티아이 변이체 및 이의 용도

Also Published As

Publication number Publication date
KR20220157164A (ko) 2022-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2723620C2 (ru) Система, способы и композиции для биопереработки
CN103906845B (zh) 在重组微生物细胞中制备奇数链脂肪酸衍生物
EP3153579B1 (en) Car enzymes and improved production of fatty alcohols
CN101748069A (zh) 一种重组蓝藻
Kashiyama et al. Engineered chlorophyll catabolism conferring predator resistance for microalgal biomass production
KR101525319B1 (ko) 신규한 마이크래티니엄 이너멈 nlp-f014 균주 및 이의 용도
KR102575345B1 (ko) 2-아미노-3-카르복시뮤코네이트-6-세미알데히드 탈카르복실라제 추정 유전자가 도입된 질소원 고갈 스트레스 저항성 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법
CN106604990A (zh) 具有改进的特性的ω‑羟化酶相关的融合多肽
KR101894192B1 (ko) 방사무늬김 유래의 열 충격 단백질 70을 발현하는 재조합 조류 및 이를 이용한 지질 생산방법
KR102020109B1 (ko) 방사무늬김 유래의 망가니즈 슈퍼옥사이드 디스뮤타제를 발현하는 재조합 조류 및 이를 이용한 지질 생산방법
KR102575348B1 (ko) 지방산 불포화 효소 유사 유전자가 도입된 지질 생산성이 증진된 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법
KR102575346B1 (ko) 파시클린 도메인 함유 단백질 유전자가 도입된 지질 생산성이 증진된 미생물의 제조방법 및 이를 이용한 지질 생산 방법
JP6080049B2 (ja) 自己溶菌能を有するシアノバクテリアを用いたバイオ燃料等有用物質の製造方法
KR101857260B1 (ko) 산화적 스트레스에 대한 저항성을 증가시키는 김 유래 돌연변이 아스코베이트 페록시다제 폴리뉴클레오타이드가 도입된 균주 및 이를 이용한 지질 생산 방법
Leite et al. Engineered cyanobacteria: research and application in bioenergy
KR102358538B1 (ko) 유전자 총법을 이용한 미세조류의 교정 방법
KR20230150147A (ko) 아미도기 가수분해 효소 유사 유전자가 도입된 지질 생산성이 향상된 미생물 및 이를 이용한 지질 생산 방법
KR20230151313A (ko) 마이오-이노시톨-1-포스페이트 합성효소 유사 유전자가 도입된 지질 생산성이 향상된 미생물 및 이를 이용한 지질 생산 방법
KR20230151687A (ko) 타이로신 3-모노옥시제네이즈 유사 유전자가 도입된 지질 생산성이 향상된 미생물 및 이를 이용한 지질 생산 방법
KR20230151310A (ko) 글루타티온 과산화효소 유사 유전자가 도입된 지질 생산성이 향상된 미생물 및 이를 이용한 지질 생산 방법
KR20240055933A (ko) Adp/atp 캐리어 단백질-유사 단백질을 코딩하는 지질 함량이 증가된 미생물
CN107400673B (zh) 一种集胞藻pcc6803的突变株及其应用
KR20240055934A (ko) 아르기니노숙시네이트 리아제-유사 단백질을 코딩하는 지질 함량이 증가된 미생물
KR20240041388A (ko) S-아데노실메티오닌 합성효소 유전자가 도입된 지질 생산성이 향상된 미생물 및 이를 이용한 지질 생산 방법
CN105705513A (zh) 改进的乙酰-coa羧化酶变体

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right