KR102556457B1 - 리포익산이 다량 함유된 천연물 유래의 미백 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 천연물 유래의 리포익산을 다량 함유한 미백 조성물에 관한 것으로, 특히 기미나 주근깨 개선, 피부 미백 효과 및 우수한 보습효과를 갖는 의약품이나 화장료 조성물에 관한 것이다.
구체적으로, 본 발명의 미백 조성물은 천연물 유래의 성분들로서, 다량의 리포익산을 내포하고 있어 피부 미백 및 피부 건강 향상에 도움을 줄 수 있다. 이러한 천연물들은 그 자체로서 각각의 영양소와 기능성 성분을 제공할 수 있으며, 리포익산은 강력한 항산화 작용을 통해 피부 미백 효과를 증진시킬 수 있다.
또한, 본 발명은 천연물 유래 추출물을 포함함으로써, 인체에 무해하고, 쉽게 제품에 적용 가능하기 때문에, 이를 활용하여 샴푸, 스킨, 토너 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱 오일, 분말파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등의 다양한 제형으로 활용하는 데에 유용하다.

Description

리포익산이 다량 함유된 천연물 유래의 미백 조성물{A WHITENING COMPOSITION DERIVED FROM NATURAL PRODUCTS CONTAINING A LARGE AMOUNT OF LIPOIC ACID}

본 발명은 천연물 유래의 리포익산을 다량 함유한 미백 조성물에 관한 것으로, 특히 기미나 주근깨 개선 및 피부 미백 효과를 비롯하여 우수한 보습효과를 가지는 조성물에 관한 것이다.

피부는 신체의 외부를 덮고 있는 하나의 막으로 여러 가지 외부의 자극, 건조 등의 환경요소로부터 신체를 보호해 주는 다양한 생리적 기능을 수행하여 내부 장기와 그 밖의 체내 기관을 보호 조절하는 역할을 한다.

그러나, 피부는 연령이 증가함에 따라 생체의 생리적 기능이 저하되어 신진 대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되게 된다. 또한 광 또는 열에 반복적인 노출로 인해 피부의 외양 또는 기능이 변하게 되는데, 이로 인해 자유라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스 등은 피부의 정상 기능 저하, 멜라닌 침착에 의한 기미, 주근깨 등의 생성 및 피부 노화현상을 촉진하여 피부를 손상시키게 된다.

시간이 지남에 따라 대중은 더욱 젊어 보이는 외모를 추구하고, 미용에 지출하는 비용이 나날이 증가함에 따라 항노화를 비롯한 미백 제품에 대한 수요가 상당히 증가하고 있다.

이러한 수요에 대응하여 다양한 미백 화장품이 개발되었으며, 미백 활성 성분이 함유된 각종 크림, 로션, 세럼, 마스크 등 다양한 제형의 제품들이 계속해서 개발되고 있다. 현재 사용되고 있는 대다수의 미백 제품은 합성 화합물을 기반으로 하고 있으며, 천연물 유래의 원료를 사용하고 있는 제품의 수요는 계속해서 폭발적으로 증가하고 있다.

한편, 리포익산(Lipoic acid)은 황을 함유하는 지방산으로서 생체 내 에너지 대사에 필수적인 코엔자임의 구성 성분이다. 리포익산은 강력한 항산화제로서 수용성과 지용성 모두에 용해되어 세포 내외에서 자유라디칼을 제거하고 다른 항산화제들의 활성을 증진시킨다. 리포익산은 피부노화의 주요 원인인 콜라겐 분해를 억제하고 멜라닌 생성을 저해하여 피부주름과 기미를 개선하는 효과가 있다고 알려져 있다.

그러나 리포익산은 자연에서 매우 소량으로만 존재하며 합성 공정도 복잡하고 비용이 많이 들기 때문에 상용화하기 어려운 단점이 있다.

본 발명자들은 다양한 천연물을 조사하던 중 리포익산이 다량으로 함유되어 있는 각종 천연물들을 이용하여, 이러한 천연물로부터 리포익산을 추출하여 함유하는 미백 조성물을 제조하면 기존의 합성 리포익산보다 안전하고 저렴하게 피부미백제를 개발할 수 있을 것으로 판단하고 본 발명을 완성하였다.

한국 공개특허 10-2003-0085771호

본 발명은 천연물 유래의 리포익산을 다량 함유한 미백 조성물을 제공하는 것으로서, 구체적으로는 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 호두, 감자, 쌀겨, 크랜베리, 아티초크, 건조맥주 효모 등의 천연물로부터 유래한 리포익산을 다량 함유한 조성물을 제공함으로써, 피부에 안전하고 우수한 미백 효과를 갖는 미백 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명에서 이루고자 하는 기술적 과제들은 이상에서 언급한 사항들로 제한되지 않으며, 언급하지 않은 또 다른 기술적 과제들은 이하 설명할 다양한 실시예들로부터 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 고려될 수 있다.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예는 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 호두, 감자, 쌀겨, 크랜베리, 아티초크 및 건조맥주 효모로 구성된 군에서 하나 이상 선택된 원료를 포함하는, 화장료 조성물을 제공한다.

구체적으로, 상기 화장료 조성물은 리포익산을 다량 함유하여 우수한 미백 및 항산화 활성을 가지는 것일 수 있으며, 본 발명에서는 실험예 1 내지 3을 통해 구체적으로 그 효과를 확인하였다.

구체적으로, 상기 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 호두, 감자, 쌀겨, 크랜베리, 아티초크, 건조맥주 효모는 모두 동일한 중량비로 혼합된 것일 수 있으며, 더욱 구체적으로는 상기 원료의 추출물이 모두 동일한 중량비로 혼합된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명 일 실시예에서는 (a) 상기 쌀겨, 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 감자, 크랜베리 및 아티초크로 이루어진 군에서 하나 이상의 원료로부터 70% 에탄올을 이용하여 1차 혼합추출물을 수득하는 단계, (b) 건조맥주 효모를 60% 에탄올을 이용하여 건조맥주 효모 추출물을 수득하는 단계 및 (c) 상기 1차 혼합추출물과 상기 건조맥주 효모 추출물을 5~15 : 1~3의 중량비로 혼합하는 단계를 포함하는 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.

구체적으로, 상기 (a) 단계에서 쌀겨, 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 감자, 크랜베리 및 아티초크는 모두 동일한 중량으로 혼합하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 상기 (c) 단계에서 상기 1차 혼합추출물 및 건조맥주 효모 추출물은 9:1의 중량비로 혼합되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 호두, 감자, 쌀겨, 크랜베리, 아티초크, 건조맥주 효모와 같은 식품들은 피부 미백 효과에 도움이 될 수 있는 항산화 성분, 비타민, 미네랄 등이 함유되어 있다. 시금치와 같은 녹색 채소는 비타민 A, C, K와 같은 영양소가 풍부하여 피부를 밝게 하고, 토마토는 항산화 성분인 라이코펜이 피부 미백에 도움을 줄 수 있다. 브로콜리와 완두는 피부에 좋은 비타민 및 미네랄이 함유되어 있으며, 호두는 각종 영양소가 풍부하고, 감자는 피부를 밝게 해주는 비타민 C가 풍부하며, 쌀겨는 피부 속 콜라겐 생성을 도와 피부 미백에 도움을 줄 수 있다. 크랜베리는 항산화 성분이 풍부하여 피부의 톤을 밝게 해주며, 아티초크는 피부에 좋은 미네랄과 영양소가 함유되어 있다. 건조맥주 효모는 피부에 비타민 B를 공급하여 피부 미백에 도움을 줄 수 있는 것으로 알려져있다.

상기 각 원료의 효과를 구체적으로 살펴보면 다음과 같다.

시금치는 항산화 성분인 플라보노이드와 비타민C가 풍부해 체내 활성산소를 제거하고, 멜라닌 생성을 저해하는 효과가 있다. 또한 엽산과 엽록소가 다량 함유되어 있어 위암과 대장암, 폐암 예방에도 도움을 줍니다. 시금치를 말려서 가루로 만들어 천연팩으로 사용하면 피부 미백 케어, 기미, 잡티 제거 및 예방에 효과를 기대할 수 있다.

토마토는 항산화 성분인 리코펜이 많이 들어있는 채소로, 리코펜은 자외선으로 인한 피부 손상을 방지하고, 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 역할을 할 수 있다. 또한 비타민C와 A도 함유하고 있어 피부 탄력과 윤기를 증진시킬 수 있다.

브로콜리는 비타민C와 카로티노이드가 많이 들어있는 채소로, 자외선으로 인한 피부 손상을 방지하고, 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 역할을 하며, 비타민E와 K도 함유하고 있어 피부 탄력과 보습에 좋다.

완두는 비타민C와 A의 함유량이 높아 자외선으로 인한 피부 손상을 방지하고, 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 역할을 할 수 있으며, 비타민B군과 철분도 함유하고 있어 혈액 순환과 세포 재생에 효과적이다.

호두는 오메가3 지방산과 비타민E를 많이 함유함으로써, 피부 손상을 방지하고, 항염증 작용을 하는 역할을 할 뿐 아니라, 아르기닌과 아미노산도 함유하고 있어 혈관 건강과 혈액 순환에 효과적이다.

감자에는 다량의 비타민C가 함유되어 있어서 훌륭한 미백 성분 역할을 하며, 안색이 어두워지는 것을 방지할 수 있고, 콜라겐 생성에 필요한 판토텐산과 피부 탄력에 좋은 비타민E를 함유하여 우수한 피부 미백 효과를 기대할 수 있다.

쌀겨는 현미의 영양소가 녹아 있는 부분으로 비타민A, 비타민B1, 비타민B6, 비타민E, 미네랄 등이 풍부하게 들어있어, 얼굴 기미, 잔주름 예방 및 완화, 각질제거, 피부보습, 영양공급에 도움을 줄 수 있다. 또한 쌀겨에는 세라마이드와 멜라닌 생성을 억제하는 성분이 있어 피부 미백 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

크랜베리는 항산화 성분인 안토시아닌과 프로안토시아니딘이 많이 들어있는 과일로, 이들은 자외선으로 인한 피부 손상을 방지하고, 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 역할을 한다. 또한 비타민C와 A도 함유하고 있어 피부 탄력과 윤기를 증진시킬 수 있다.

아티초크는 식이섬유와 카로티노이드가 많이 들어있는 채소로, 장내 환경을 개선하고, 자외선으로 인한 피부 손상을 방지하는 역할을 할 수 있으며, 비타민C와 K도 함유하고 있어 피부 탄력과 보습에 좋은 것으로 알려져 있다.

건조맥주 효모는 비타민B군과 단백질이 많이 들어있어 피부의 신진대사와 재생을 촉진하는 역할을 할 수 있으며, 글루타치온과 아미노산도 함유하고 있어 멜라닌 색소의 생성을 억제하고 항산화 작용을 하는 역할을 할 수 있다.

상기 “추출물”은 용매와 추출 원료를 특정 조건 하에서 접촉시킴으로써 추출 원료에 함유된 유효성분이 전이된 용매를 지칭하는 것으로, 천연물로부터 원료에 함유된 성분을 분리해낸 물질이라면, 추출 방법이나 성분의 종류와 무관하게 모두 포함할 수 있다. 예컨대, 물이나 유기용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출한 것, 천연물의 특정 성분, 예컨대 오일과 같은 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함할 수 있고, 본 발명에서는 특히 에센셜 오일일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한 상기 열거된 천연물 유래의 추출물, 상기 추출물의 희석액이나 농축액, 상기 추출물을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출물의 조제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출물 자체 및 추출물을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함할 수 있다. 나아가, 상기 추출물은 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물로부터도 추출이 가능하다.

본 발명의 추출물을 추출하는 방법은 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 냉침 추출, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법, 압출 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.

본 발명에서 사용되는 추출용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 필요에 따라 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물; 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올 등의 C1 내지 C4의 저급 알코올; 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등의 다가 알코올; 및 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매; 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있으며, 구체적으로, 물, 저급알코올, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트를 단독으로 사용하거나 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다. 아울러, 상기와 같이 추출한 추출물은 부유하는 고체 입자를 제거하기 위해 여과, 예를 들어 나일론 등을 이용해 입자를 걸러내거나 냉동여과법 등을 이용해 여과한 후, 그대로 사용하거나 이를 동결건조, 열풍건조, 분무건조 등을 이용해 건조시켜 사용할 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 상기 피부 외용제 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

구체적으로, 상기 화장료 조성물은 각질 제거, 피부 진정 효과, 피부 염증완화, 피지 완화, 피부장벽 개선 및 색소 침착 완화 효과를 갖는 것일 수 있으며, 이러한 효과 각각을 구체적인 실험예를 통하여 확인하였다.

본 발명에서 상기 화장료 조성물은 샴푸, 스킨, 토너, 유연화장수, 영양화장수, 수분크림, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 앰플, 젤, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 미스트, 스프레이 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다. 구체적으로, 상기 화장료 조성물은 샴푸 형태로 제형화 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 화장료 조성물은 통상의 방법에 의해 제형화될 수 있다. 피부 외용제의 제형화에 있어서 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있고, 화장료 조성물의 제형화에 있어서 International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed(The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995)에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있다.

구체적으로, 상기 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형으로 제조할 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등의 화장수; 훼이셜 로션, 바디로션 등의 유액; 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등의 크림; 에센스; 화장연고; 스프레이; 젤; 팩; 선 스크린; 메이크업 베이스; 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션; 파우더; 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일 등의 메이크업 제거제; 또는 클렌징 폼, 비누, 바디워시 등의 세정제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 상기 화장료 조성물은, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 화장료 조성물은 각각의 제형에 있어서 상기 필수성분 외에 제형의 종류 또는 사용 목적 등에 따라 본 발명에 따른 목적을 저해하지 않는 범위 내에서 다른 성분들이 적절히 배합될 수 있다.

상기 화장료 조성물은 통상적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있으며, 예컨대 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 허용 가능한 담체는 제형에 따라 달리할 수 있다. 예컨대, 연고, 페이스트, 크림 또는 젤로 제형화될 때 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 사용될 수 있다

상기 화장료 조성물은 파우더 또는 스프레이로 제형화될 때, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 사용될 수 있고, 스프레이의 경우 클로로플루오로히드로카본, 프로판, 부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 더 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물은 용액 또는 유탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 용매, 용해화제, 또는 유탁화제가 사용될 수 있고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-브틸글리콜 오일이 사용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 사용될 수 있다.

상기 화장료 조성물은 현탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리 옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 사용될 수 있다.

상기 화장료 조성물이 비누로 제형화될 때, 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 사용될 수 있다.

상기 화장료 조성물은 최종 제품의 품질이나 기능에 따라 업계에서 통상적으로 사용되는 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉 쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 추가적으로 함유할 수 있다.

다만, 상기 보조제 및 그 혼합 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 영향을 미치지 않도록 적절히 선택할 수 있다.

본 발명의 미백 조성물은 천연물 유래의 성분들로서, 다량의 리포익산을 내포하고 있어 피부 미백 및 피부 건강 향상에 도움을 줄 수 있다. 이러한 천연물들은 그 자체로서 각각의 영양소와 기능성 성분을 제공할 수 있으며, 리포익산은 강력한 항산화 작용을 통해 피부 미백 효과를 증진시킬 수 있다.

상기 미백 조성물은 조성물은 이를 활용하여 샴푸, 스킨, 토너 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱 오일, 분말파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등의 다양한 제형으로 활용하는 데에 유용하다.

또한, 본 발명은 천연물 유래 추출물을 포함함으로써, 인체에 무해하고, 쉽게 제품에 적용 가능한 것을 특징으로 한다.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

이하의 실시예들은 실시예들의 구성요소들과 특징들을 소정 형태로 결합한 것들이다. 각 구성요소 또는 특징은 별도의 명시적 언급이 없는 한 선택적인 것으로 고려될 수 있다. 각 구성요소 또는 특징은 다른 구성요소나 특징과 결합되지 않은 형태로 실시될 수 있다. 또한, 일부 구성요소들 및/또는 특징들을 결합하여 다양한 실시예들을 구성할 수도 있다. 다양한 실시예들에서 설명되는 동작들의 순서는 변경될 수 있다. 어느 실시예의 일부 구성이나 특징은 다른 실시예에 포함될 수 있고, 또는 다른 실시예의 대응하는 구성 또는 특징과 교체될 수 있다.

실시예 1. 본 발명 미백 조성물의 제조

본 발명의 미백 조성물을 제조하기 위하여, 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 호두, 감자, 쌀겨, 크랜베리, 아티초크 및 건조 맥주효모를 준비하였다. 구체적으로, 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 감자, 크랜베리 및 아티초크는 세척하고 잘게 썰어 준비하고, 쌀겨 및 건조 맥주효모는 분말화 된 것을 구입하여 사용하였다.

상기 쌀겨, 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 감자, 크랜베리 및 아티초크를 모두 동일 중량으로 혼합하고, 70% 에탄올을 이용하여 60~70℃에서 3시간 동안 가열하여 추출한 후에, 고형물을 제거하고 에탄올을 증발시켜 1차 혼합추출물을 수득하였다.

이후, 건조맥주 효모를 60% 에탄올로 50~60℃에서 1시간 동안 추출하여 효모 추출액을 제조한 후에, 고형물을 제거하고 에탄올을 증발시켜 건조맥주 효모 추출물을 수득하였다.

이후, 상기 1차 혼합추출물과 상기 건조맥주 효모 추출물을 9:1의 중량비로 혼합하여 본 발명 미백 조성물을 제조하였다.

비교예 1. 비율을 달리한 미백 조성물의 제조

상기 실시예 1의 미백 조성물과 같은 방법을 이용하여 제조하되, 아티초크의 양을 절반으로, 토마토의 양을 2배로 하여 전체 중량은 동일하게 하여 1차 혼합추출물을 수득하고, 이후 건조맥주 효모 추출물과 9:1의 중량비로 혼합하여 비교예 1의 미백 조성물을 제조하였다.

비교예 2~3. 항산화 효과가 있는 다른 천연물로의 대체

상기 실시예 1의 방법과 동일하게 미백 조성물을 제조하되, 본 발명에서 사용한 천연물 외에 항산화 효과가 있는 것을 널리 알려진 타임을 아티초크 대신 넣은 것을 비교예 2, 아티초크 대신 케일을 넣어 제조한 것을 비교예 3으로 설정하였다.

실험예 1. 실시예 및 비교예의 항산화 효과 확인

상기 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 항산화능을 확인하기 위하여, DPPH(1,1-diphenyl1-2-picrylhydrazyl) 자유라디칼 소거활성을 평가하였다.

DPPH 측정법은 억제제(inhibitor)가 안정한 라디칼 DPPH를 소거하여 탈색되는 정도를 520nm에서 흡광도를 측정하는 방법이다. 대조군으로는 비타민C를 이용하였고, 라디칼 DPPH는 50% 소거하는 농도(SC₅₀)를 측정하고, 이를 대조군과 비교하였다.

[식 1]

DPPH 소거활성(%) = [1-(실시예 또는 비교예 시료처리군의 흡광도/시료 무처리군의 흡광도)]X100

그 결과, 하기 표 1에 나타난 바와 같이, 실시예 및 비교예 모두에서 항산화 효과를 확인하였으며, 특히 실시예 1의 효과가 현저히 우수한 것을 확인하였다.

	DPPH 라디칼 소거능 (%)
대조군(비타민C)	35.21
실시예 1	44.31
비교예 1	35.14
비교예 2	30.77
비교예 3	36.81

실험예 2. 미백 효과 실험-멜라닌 총량 감소 효과 확인

본 발명의 조성물이 미백효과를 갖는지 확인하기 위하여, 쥐의 멜라노마 세포(B-16 mouse melanoma cell)의 배양액에 첨가하여 세포 수준에서의 미백 효과를 우선적으로 확인하였다.

실시예 1 및 비교예 1~3의 조성물을 최종농도가 1%가 되도록 배지에 첨가하여 실험하였으며, 대조군인 알부틴은 200ug/ml가 되도록 배지에 첨가하여 각각 B-16 멜라노마 세포에 처리하여 3일간 배양하였다.

이후, 세포들을 트립신(trypsin) 처리하여 배양용기로부터 떼어내 원심분리 한 후 멜라닌을 추출하였다. 떼어 낸 세포는 수산화 나트륨 용액(1N농도) 1ml를 가하여 10분간 끓여 멜라닌을 녹이고 분광 광도계를 이용하여, 400나노미터(nm)에서 흡광도를 측정하여 생성된 멜라닌의 양을 측정하였다.

상기 멜라닌 양은 단위 세포수당(10⁶　cell)의 흡광도로 나타내는 방법으로 측정하였으며, 대조군에 대한 상대적인 멜라닌 총량에 대한 저해율(%)로 계산하고 결과를 표 2에 정리하였다.

	멜라닌 합성 저해율 (%)
대조군(알부틴)	100%
실시예 1	122%
비교예 1	93%
비교예 2	88%
비교예 3	76%

상기 표 2의 결과에서 볼 수 있듯이, 본원 발명의 실시예 및 비교예 조성물 모두 멜라닌 합성을 저해하는 효능이 있으며, 특히 실시예 1의 조성물은 기존에 알려진 미백 물질인 알부틴보다 우수한 미백 효과를 보였으며, 항산화 효과가 있는 것으로 잘 알려진 다른 천연물을 이용한 경우와 비교하여도 현저히 우수한 효과를 확인하였다.

실험예 3. 미백 활성 평가-티로시나아제 저해활성 측정

본 발명 실시예 및 비교예 조성물의 미백 활성을 분석하기 위하여, 타이로시나아제(tyrosinase)에 대한 저해 활성을 측정하였다.

타이로시나아제(tyrosinase)는 피부가 자외선에 노출되면 티로신에서부터 멜라닌 생성에 가장 중요하게 작용하는 효소이다. 타이로시나아제 활성을 저해함으로써 멜라닌 생성을 억제할 수 있으며, 이로 인해 기미, 주근깨, 노인성 홍반 등의 유발을 막을 수 있는 것으로 알려져 있다.

구체적으로, B16F10 melanoma 세포를 6-well에 3x10⁴ cell이 되도록 접종하여 배양하고, 24시간 뒤 각 well에 시료를 48시간 동안 처리하였다. 처리 후 PBS로 2회 세척한 후 각 well의 세포에 lysis buffer를 가하였다. 얼음 위에서 세포를 파괴시키고 원심분리한 후 상층액만 따로 모아 효소 용액으로 사용하였다. L-DOPA를 2 mg/mL 농도로 0.1 M sodium phosphate buffer (pH 6.8)에 녹여 기질을 준비하고 기질 160μL에 효소용액 40μL를 가하고 37℃에서 1시간 가온하고 생성된 DOPA chrome의 양을 490 nm에서 측정하고 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.

	티로시나아제 저해활성 (%)
실시예 1	40.2%
비교예 1	33.3%
비교예 2	35.8%
비교예 3	27.1%

그 결과, 실시예 1 조성물의 타이로시나아제 억제 활성이 가장 높았으며, 원료의 혼합비율을 달리한 비교예 1 및 항산화 활성이 있는 다른 원료로 일부 대체한 비교예 2, 3의 조성물은 실시예 1 조성물에 비하여 낮은 활성을 나타내는 것을 확인하였다.

실험예 4. 피부 보습 효과 확인

본 발명 화장료 조성물이 피부 보습 효과를 가지는지 확인하였다. 구체적으로, 상기 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 조성물을 피부에 1회 도포 시, 피부 보습 지속력을 알아보기 위하여, 건조를 호소하거나, 건성 피부라고 생각되는 20~40대 성인 남, 녀 20명에게 상기의 화장료 조성물을 얼굴 및 전박 내측에 도포한 후, 24시간 동안 코니오미터(corneometer; CM820 courage Khazaka electronic GmbH, Germany)를 이용하여 피부 수분량을 측정하였다. 코니오미터는 피부의 표피 내에 존재하는 수분의 양을 센서를 이용하여 수분의 이온 정도를 측정하고 이를 수치화하여 수분의 양을 계산함으로써 보습력을 측정하는 것이다.

구체적으로, 측정하고자 하는 피부 부위에 코니어미터 프로브를 올려놓고, 프로브를 피부에 누르면 센서를 통하여 피부의 전기 전도도(capacitance)가 수치화되어 화면에 표시되며, 이를 확인하는 방법으로 측정하였다.

상기 방법으로 미리 도포 시작 전 항온, 항습 조건(24℃, 습도 40%)에서 코니오미터를 이용하여 피부 수분량을 측정하여 기본 값으로 삼고, 12시간, 24시간 경과 후의 변화를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 1에 나타난 바와 같다.

시료	피부 수분량(%)
	도포 전	12시간 후	24시간 후
실시예 1	30.0	44.2	41.0
비교예 1	30.1	35.1	34.1
비교예 2	30.3	36.1	35.5
비교예 3	30.0	34.9	32.1

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 실시예 1의 조성물을 도포한 경우 보습력이 24시간 이상 지속되고 피부 수분 함량 증가 효과 또한 비교예 1 내지 3의 조성물을 도포한 경우에 비해 현저히 높음을 확인하였다.상술한 다양한 실시예들은 그 기술적 아이디어 및 필수적 특징을 벗어나지 않는 범위에서 다른 특정한 형태로 구체화될 수 있다. 따라서, 상기의 상세한 설명은 모든 면에서 제한적으로 해석되어서는 아니되고 예시적인 것으로 고려되어야 한다. 다양한 실시예들의 범위는 첨부된 청구항의 합리적 해석에 의해 결정되어야 하고, 다양한 실시예들의 등가적 범위 내에서의 모든 변경은 다양한 실시예들의 범위에 포함된다. 또한, 특허청구범위에서 명시적인 인용 관계가 있지 않은 청구항들을 결합하여 실시예를 구성하거나 출원 후의 보정에 의해 새로운 청구항으로 포함할 수 있다.

Claims (5)

1. 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 호두, 감자, 쌀겨, 크랜베리, 아티초크 및 건조맥주 효모가 동일한 중량비로 혼합된 원료로부터 추출된 혼합추출물을 포함하고,
   피부 미백, 항산화 활성 및 보습효과를 갖는 것인, 화장료 조성물.
   
2. 삭제
3. 삭제
4. (a) 쌀겨, 시금치, 토마토, 브로콜리, 완두, 호두, 감자, 크랜베리 및 아티초크가 동일한 중량으로 혼합된 원료로부터 70% 에탄올을 이용하여 1차 혼합추출물을 수득하는 단계;
   (b) 건조맥주 효모를 60% 에탄올을 이용하여 건조맥주 효모 추출물을 수득하는 단계; 및
   (c) 상기 1차 혼합추출물과 상기 건조맥주 효모 추출물을 9:1의 중량비로 혼합하는 단계를 포함하는,
   화장료 조성물의 제조방법.
   
5. 제4항의 제조방법에 의해 제조된, 화장료 조성물.