KR102529669B1 - On-site customized odor-removing compositions and the method of preparation thereof - Google Patents

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Abstract

본 발명은 악취 제거능을 가지는 미생물 및 악취 발생 현장에서 채취한 적응 미생물을 포함하는 악취 제거용 조성물, 상기 조성물의 제조 방법 및 이를 이용한 악취 제거 방법에 대한 것으로, 상기 악취 제거용 조성물은 악취의 원인 및 발생 장소에 따라 현장에 최적화된 악취 제거능을 가질 수 있고, 비교적 간단하고 경제적인 방법으로 제조가 가능하다. The present invention relates to a composition for removing malodor comprising microorganisms capable of removing malodor and adapted microorganisms collected from sites where odors occur, a method for preparing the composition, and a method for removing malodor using the same. Depending on the place of occurrence, it can have odor removal performance optimized for the site, and it can be manufactured in a relatively simple and economical way.

Description

현장 맞춤형 악취제거용 조성물 및 이의 제조방법{ON-SITE CUSTOMIZED ODOR-REMOVING COMPOSITIONS AND THE METHOD OF PREPARATION THEREOF}Field-customized odor removal composition and its manufacturing method {ON-SITE CUSTOMIZED ODOR-REMOVING COMPOSITIONS AND THE METHOD OF PREPARATION THEREOF}

본 발명은 악취의 원인 및 발생 장소에 따라 악취를 효과적으로 제거할 수 있는 현장 맞춤형 악취제거용 조성물 및 상기 조성물의 제조방법에 관한 것이다. The present invention relates to a malodor removal composition tailored to a site capable of effectively removing malodor according to the cause and place of occurrence of the malodor, and a method for preparing the composition.

본 발명은 경기도경제과학진흥원의 경기도 기술개발사업의 "경기지역 악취 취약 축산농가의 민원 해결을 위한 맞춤형 악취 저감 솔루션 개발"(과제 번호: D202064)의 지원에 의하여 이루어진 것이다.The present invention was made with the support of "Development of customized odor reduction solution to solve civil complaints of livestock farmers vulnerable to odor in Gyeonggi-do" (Task No.: D202064) of the Gyeonggi-do Technology Development Project of the Gyeonggi Business & Science Promotion Agency.

하수처리장, 퇴비화시설, 축산시설 등 악취가 많이 발생되는 시설 인근에는 이로 인한 민원 등의 문제가 발생한다. 악취로 인해 단지 감각적인 불편뿐만 아니라, 눈, 코, 목 등이 아프거나, 구토, 어지럼증, 호흡곤란 등 다양한 증세가 호소되기도 한다. 특히 장기간 악취에 노출될 수 밖에 없는 악취 발생시설 인근 거주자 혹은 관련 업종 종사자들은 악취로 인하여 건강에 심각한 문제를 느끼고 있다. 그러므로 이는 시급하게 해결하여야 한다. Problems such as civil complaints arise in the vicinity of facilities that generate a lot of odor, such as sewage treatment plants, composting facilities, and livestock facilities. Odor causes not only sensory discomfort, but also various symptoms such as sore eyes, nose, and throat, vomiting, dizziness, and shortness of breath. In particular, residents near odor-generating facilities or workers in related industries, who are inevitably exposed to odors for a long time, feel serious health problems due to odors. Therefore, this needs to be addressed urgently.

악취의 원인이 되는 물질은 암모니아, 황화수소, 메틸메르캅탄, 아민류, 휘발성 지방산, 스틸렌, 트리메틸아민, 황화메틸, 이황화메틸, 아세트알데하이드, 프로피온산 및 길초산 등 다양한 성분이 포함될 수 있으며, 상기 성분은 단독으로 악취를 유발할 수 있으나, 보통은 2개 이상의 성분이 혼합하여 악취를 발생시키는 경우가 많다. 악취의 원인이 되는 물질에 따라 악취를 저감하는 방법도 다양하게 적용될 수 있다. 종래에는 화학적 분해법, 흡착, 중화, 마스킹, 살균 등의 다양한 방식을 이용해 왔으나, 이들은 악취의 원인을 제거하는 것이 아니라 농도를 희석시키는 것에 불과하여 근본적인 해결책이라고 볼 수 없다. 또한 특정한 약품을 분사 또는 살포하는 과정에서 인체 및 가축에 유해한 영향을 미칠 수 있고, 비용이 많이 소요되는 문제점이 있었다. Substances that cause odor may include various components such as ammonia, hydrogen sulfide, methyl mercaptan, amines, volatile fatty acids, styrene, trimethylamine, methyl sulfide, methyl disulfide, acetaldehyde, propionic acid, and valeric acid. It can cause odor, but usually two or more components are mixed to cause odor. Various methods of reducing the odor may be applied depending on the substance that causes the odor. In the past, various methods such as chemical decomposition, adsorption, neutralization, masking, and sterilization have been used, but they do not remove the cause of odor but only dilute the concentration and cannot be seen as a fundamental solution. In addition, in the process of spraying or spraying a specific chemical, it may have a harmful effect on the human body and livestock, and there is a problem in that a lot of cost is required.

축산농가 등에 설치된 분뇨처리시설에서는 가축으로부터 배출되는 분뇨가 처리된다. 가축분뇨 중 소변에 함유된 다량의 요소는 우레아제 효소에 의해 암모니아로 전환된다. 즉 분뇨처리시설에서는 필연적으로 다량의 암모니아가 발생되는데, 이러한 암모니아가 악취의 근원이다. 상기 암모니아를 감소시키기 위하여 사료 첨가제 등을 급여하여 가축들의 단백질 흡수율을 높이고자 하는 노력도 진행되고 있으나, 그 효과는 미미한 수준이다. 또한, 대부분의 악취 발생원에는 한 가지 원인뿐만 아니라 여러 가지 악취발생물질(황화수소, 메틸메르캅탄 등)이 혼합되어 악취가 발생하기 때문에, 이를 종합적으로 저감시키기 위한 기술이 필요하다. In a manure treatment facility installed in a livestock farm, etc., manure discharged from livestock is treated. A large amount of urea contained in urine among livestock manure is converted to ammonia by the enzyme urease. That is, a large amount of ammonia is inevitably generated in the excreta treatment facility, and this ammonia is the source of the odor. In order to reduce the ammonia, efforts are being made to increase the protein absorption rate of livestock by feeding feed additives, but the effect is insignificant. In addition, since most odor sources generate odors not only from one cause but also from a mixture of various odor-generating substances (hydrogen sulfide, methyl mercaptan, etc.), a technology for comprehensively reducing them is required.

악취저감 기술은 크게 기술특성을 기반으로 처리방법에 따라 물리적, 화학적, 생물학적 방법으로 구분된다. 물리적 방법의 경우 부작용이나 2차적인 환경오염이 발생되지 않는 장점이 있으나, 초기 설치비용이 많이 소요되며 고장 시 수리의 문제 등이 있어서 농가에 보급되기에는 다소 어려운 것이 현실이다. 그러므로 화학적 방법이나 생물학적인 방법이 주로 사용된다. Odor reduction technology is largely classified into physical, chemical, and biological methods depending on the treatment method based on the technical characteristics. The physical method has the advantage of not causing side effects or secondary environmental pollution, but it requires a lot of initial installation cost and has problems with repair in case of failure, so it is somewhat difficult to spread to farms. Therefore, chemical methods or biological methods are mainly used.

화학적 방법에 관해서는 대한민국 등록특허공보 10-1671577에 관련 기술이 개시되어 있다. 상기문헌은 구연산 칼슘, 물, 알긴산 나트륨, 클로렐라 추출물, 병풍 추출물, 수산화마그네슘(Mg(OH)2), 산화마그네슘(MgO)을 포함하는 축산악취 제거용 조성물에 관한 것이다. 상기한 조성물에 의하여 이산화황, 황화수소, 메틸 머캅탄(CH3SH), 디메틸 설파이드[(CH3)2S] 및 아민류의 가스를 제거할 수 있다. Regarding the chemical method, related technology is disclosed in Korean Patent Registration Publication No. 10-1671577. The above document relates to a composition for removing livestock odors containing calcium citrate, water, sodium alginate, chlorella extract, folding screen extract, magnesium hydroxide (Mg(OH) 2 ), and magnesium oxide (MgO). Gases such as sulfur dioxide, hydrogen sulfide, methyl mercaptan (CH 3 SH), dimethyl sulfide [(CH 3 ) 2 S] and amines can be removed by the composition described above.

생물학적인 처리방법은 미생물을 이용하는 것이 보편적이다. 상기한 미생물을 이용한 축산악취를 제거하는 방법으로는 대한민국 등록특허공보 10-1260872를 참고할 수 있다. 상기문헌은 바실러스(Bacillus)균, 락토바실러스(Lactobacillus)균, 엔테로코커스(Enterococcus)균, 스트렙토코커스(Streptococcus)균 및 효모(Saccharomyces)균으로 구성되는 미생물 생균제; 및 유산균 배양여액을 유효성분으로 함유하는 축산악취 제거제에 대하여 개시하고 있다. 상기한 제제를 사용하여 메틸아민, 에틸아민. 트리메틸아민, 디메틸아민, 트리에틸아민, 황화수소, 메틸머캅탄 등과 같은 악취원인물질을 제거하여 악취를 없앨 수 있다. As for the biological treatment method, it is common to use microorganisms. As a method for removing livestock odor using the above microorganisms, reference may be made to Korean Registered Patent Publication No. 10-1260872. The above document is a microbial probiotic consisting of Bacillus bacteria, Lactobacillus bacteria, Enterococcus bacteria, Streptococcus bacteria and yeast (Saccharomyces) bacteria; And a livestock odor remover containing lactic acid bacteria culture filtrate as an active ingredient. methylamine, ethylamine using the formulations described above. Odor can be eliminated by removing odor-causing substances such as trimethylamine, dimethylamine, triethylamine, hydrogen sulfide, and methyl mercaptan.

그러나 상기 기술은 다양한 악취의 원인 및 발생 장소에 따른 효과적인 대응방법에 해당되지 않는다는 단점이 있다. 뿐만 아니라 제제의 형태가 액상, 분말 등 다양한 제형으로 제제화를 요구하는 현장의 니즈를 충족시키지 못하고 있다. 특히, 2021년 3월 25일부터 축산농가 퇴액비 부숙도 검사 의무화가 실시되고 있다.However, the above technique has a disadvantage in that it does not correspond to an effective countermeasure method according to the cause and place of occurrence of various odors. In addition, the form of the formulation does not meet the needs of the field requiring formulation in various formulations such as liquid and powder. In particular, from March 25, 2021, compulsory inspections for the ripeness of compost in livestock farms have been implemented.

따라서, 본 발명자들은 기존의 악취 제거 방법의 단점을 개선하고, 친환경적으로 이를 저감할 수 있는 미생물 제제에 대한 연구를 거듭하였다. 다양한 현장에서의 악취 발생 원인을 정확하게 파악하고, 주요 악취 발생 물질들에 대한 물리 화학적 특성에 대한 연구 끝에, 이를 효과적이고 친환경적인 방법으로 저감시키고 오염된 토양을 복원하며, 아울러 퇴비화를 촉진시킬 수 있는 현장 맞춤형 악취제거용 조성물 및 이의 제조방법을 완성하기에 이르렀다.Therefore, the present inventors have repeatedly studied microbial preparations that can improve the disadvantages of existing odor removal methods and reduce them in an environmentally friendly manner. After accurately identifying the cause of odor generation in various sites and studying the physicochemical properties of major odor generating substances, we can reduce them in an effective and eco-friendly way, restore contaminated soil, and promote composting. A field-customized composition for removing odor and a manufacturing method thereof have been completed.

대한민국 등록특허공보 제10-1671577호(2016.10.26.)Republic of Korea Patent Registration No. 10-1671577 (2016.10.26.) 대한민국 등록특허공보 제10-1260872호(2013.04.29.)Republic of Korea Patent Registration No. 10-1260872 (2013.04.29.)

본 발명의 목적은 악취 발생 원인 물질을 분해하여 악취 저감 효과를 가지는 미생물 및 악취 발생원으로부터 채취한 시료로부터 분리한 적응 미생물을 포함하는 현장 맞춤형 악취 제거용 조성물을 제공하는 것이다. An object of the present invention is to provide a site-customized odor removal composition comprising a microorganism having an odor reducing effect by decomposing a substance causing malodor and an adapted microorganism isolated from a sample collected from the odor generating source.

본 발명의 다른 목적은 상기 현장 맞춤형 악취 제거용 조성물을 포함하는 현장 맞춤형 악취 제거용 미생물 제제를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a site-customized microbial preparation for removing malodor comprising the site-customized malodor removal composition.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 현장 맞춤형 악취 제거용 조성물을 제조하는 방법 및 이를 이용한 축산 농가 등에 악취 저감 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for preparing the site-specific malodor removal composition and a malodor reduction method for livestock farms using the same.

본 발명은 악취 발생 원인 물질을 분해하여 악취 저감능을 가지는 미생물, 상기 미생물의 배양물, 상기 배양물의 농축액 또는 건조물; 및 악취 발생원으로부터 채취한 시료로부터 분리한 적응 미생물, 상기 적응 미생물의 배양물, 상기 배양물의 농축액 또는 건조물을 포함하고, 상기 악취 저감 효과를 가지는 미생물은 사카로마이세스 세레비지애, 바실러스 아밀로리퀴파시엔스, 바실러스 서브틸리스, 바실러스 리케니포미스 및 로도슈도모나스 팔루스트리스로 이루어진 군으로부터 선택된 1이상의 미생물을 포함하는, 현장 맞춤형 악취 제거용 조성물을 제공한다.The present invention is a microorganism having an odor reducing ability by decomposing a substance causing odor, a culture of the microorganism, a concentrate or dried product of the culture; and an adapted microorganism isolated from a sample collected from an odor generating source, a culture of the adapted microorganism, or a concentrate or dried product of the culture, wherein the microorganism having the odor reducing effect is Saccharomyces cerevisiae, Bacillus amyloliquis Provided is a composition for removing malodor tailored to the site, including one or more microorganisms selected from the group consisting of Paciens, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis and Rhodopseudomonas palustris.

또한, 본 발명은 전술한 조성물을 포함하는 현장 맞춤형 악취 제거용 미생물 제제를 제공한다.In addition, the present invention provides a site-specific microbial preparation for removing malodor comprising the above-described composition.

또한, 본 발명은 악취 발생원으로부터 시료를 채취하여, 시료 내 포함된 미생물을 1차 배양하는 단계; 상기 1차 배양된 미생물 중, 적응 미생물을 분리하여 별도의 배지에서 2차 배양하는 단계: 및 상기 적응 미생물 또는 이의 배양액 및 악취 저감 효과를 가지는 미생물 또는 이의 배양액을 혼합하는 단계를 포함하고, 상기 1차 또는 2차 배양은 고체 배지에 악취 발생원으로부터 채취한 시료를 도말하여 배양하는 것이며, 상기 적응 미생물은 1차 배양된 시료 중 우점 배양된 미생물을 1 또는 2 이상 분리하여 2차 배양한 것이고, 상기 악취 저감 효과를 가지는 미생물은 사카로마이세스 세레비지애, 바실러스 아밀로리퀴파시엔스, 바실러스 서브틸리스, 바실러스 리케니포미스 및 로도슈도모나스 팔루스트리스를 포함하는 군으로부터 하나 이상의 미생물을 선택하여 포함하는, 현장 맞춤형 미생물 탈취제의 제조 방법을 제공한다.In addition, the present invention comprises the steps of taking a sample from the odor generating source and primary culturing the microorganisms included in the sample; Separating adapted microorganisms from among the primary cultured microorganisms and secondary culturing them in a separate medium: mixing the adapted microorganisms or their culture medium and the microorganisms having an odor reducing effect or their culture medium; Primary or secondary culture is cultured by smearing a sample taken from a source of odor on a solid medium, and the adapted microorganism is a secondary culture by separating one or two or more predominantly cultured microorganisms from the primary cultured sample. Microorganisms having an odor-reducing effect are selected from the group consisting of Saccharomyces cerevisiae, Bacillus amyloliquifaciens, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, and Rhodopseudomonas palustris. , Provides a method for manufacturing a site-specific microbial deodorant.

또한, 본 발명은 전술한 악취 제거용 조성물을 시료를 채취한 악취 발생원의 폐수, 축산 분뇨, 퇴비 또는 생활 폐기물과 함께 배양하여 악취를 제거하는 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for removing odor by incubating the above-described composition for removing odor together with sampled wastewater, livestock manure, compost, or household waste.

본 발명은 악취 발생 현장에서 채취한 적응 미생물을 포함하는 악취 제거용 조성물에 대한 것으로, 상기 조성물은 악취의 원인 및 발생 장소에 따라 최적화된 악취 제거 효과를 가진다. 특히 본 발명의 조성물은 미생물 제제로서 화학적인 방제에 의한 유해성을 개선하여 친환경적이고 경제적인 방법으로 악취를 제거할 수 있다. 또한, 다수의 악취 원인 성분이 혼합된 경우에도 이를 효과적으로 제거할 수 있으며, 액상, 분말 등 다양한 제형으로 제제화가 가능하다. The present invention relates to a composition for removing odor containing adapted microorganisms collected from a site where odor is generated, and the composition has an effect of removing odor optimized according to the cause and location of the odor. In particular, the composition of the present invention, as a microbial agent, can improve the harmfulness caused by chemical control to remove odors in an eco-friendly and economical way. In addition, even when a plurality of odor-causing components are mixed, it can be effectively removed, and it can be formulated into various formulations such as liquid and powder.

도 1은 본 발명의 악취 제거용 조성물의 제조 공정을 단계별로 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명의 적응 미생물을 분리하기 위한 악취 발생원 시료의 1차 배양 및 2차 분리 배양 과정을 나타낸 것이다.
도 3은 악취 발생원의 시료로부터 분리된 적응 미생물을 진탕 배양하는 과정을 나타낸 것이다.
도 4는 적응 미생물 살포 전/후 분뇨 상태를 나타낸 것이다.
도 5는 연속적 희석 후 도말을 하여 적응 미생물을 분리하는 과정을 나타낸 것이다.
1 is a diagram showing a step-by-step process for preparing a composition for removing odor according to the present invention.
Figure 2 shows the primary culture and secondary separation and culture processes of odor generating source samples for isolating the adapted microorganisms of the present invention.
3 shows a process of shaking and culturing adapted microorganisms isolated from a sample of an odor generating source.
Figure 4 shows the state of manure before / after application of adapted microorganisms.
Figure 5 shows the process of isolating adapted microorganisms by smearing after serial dilution.

이하, 본 발명에 대하여 더욱 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명은 악취 발생 원인 물질을 분해하여 악취 저감능을 가지는 미생물, 상기 미생물의 배양물, 상기 배양물의 농축액 또는 건조물; 및 악취 발생원으로부터 채취한 시료로부터 분리한 적응 미생물, 상기 적응 미생물의 배양물, 상기 배양물의 농축액 또는 건조물을 포함하고, 상기 악취 저감 효과를 가지는 미생물은 사카로마이세스 세레비지애, 바실러스 아밀로리퀴파시엔스, 바실러스 서브틸리스, 바실러스 리케니포미스 및 로도슈도모나스 팔루스트리스로 이루어진 군으로부터 선택된 1이상의 미생물을 포함하는, 현장 맞춤형 악취 제거용 조성물에 관한 것이다.The present invention is a microorganism having an odor reducing ability by decomposing a substance causing odor, a culture of the microorganism, a concentrate or dried product of the culture; and an adapted microorganism isolated from a sample collected from an odor generating source, a culture of the adapted microorganism, or a concentrate or dried product of the culture, wherein the microorganism having the odor reducing effect is Saccharomyces cerevisiae, Bacillus amyloliquis It relates to a composition for removing malodor tailored to the site, comprising at least one microorganism selected from the group consisting of Paciens, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, and Rhodopseudomonas palustris.

본 명세서에서 용어‘현장 맞춤형’이란, 악취가 발생되는 여러 가지 발생원에 따라 최적화된 의미를 포함하는 것이며, 본 발명의 현장 맞춤형 악취 제거용 조성물은 현장의 악취 발생원으로부터 채취한 시료로부터 수득한 적응 미생물을 악취 제거 조성물에 포함하도록 함으로써, 해당 악취 발생원의 악취 제거 효과를 극대화 할 수 있게 된다. 일반적으로 축산분뇨 내에는 가축 생육을 위해 사료에 참가한 아연, 구리 등 다양한 염들이 축적되어 높은 염농도를 나타낸다. 높은 염농도에서는 염내성을 가진 균주 외에 일반적인 균주는 자라는게 쉽지 않다. 따라서, 현장에서 수득한 적응 미생물은 현장 내 환경(높은 염농도)에서 가장 적합한 균주이며, 이러한 균주의 우점화를 통해 가축분뇨와 같은 유기물의 분해하여 부숙을 촉진하고 악취를 저감하는 결과를 가져온다. In the present specification, the term 'customized to the site' includes a meaning optimized according to various sources of odor generation, and the composition for eliminating odor tailored to the site of the present invention is an adapted microorganism obtained from a sample collected from a source of odor in the field. By including in the malodor removal composition, it is possible to maximize the malodor removal effect of the malodor generating source. In general, in livestock manure, various salts such as zinc and copper, which participated in feed for livestock growth, accumulate and show high salt concentration. In high salt concentrations, it is not easy to grow general strains other than salt-tolerant strains. Therefore, the adapted microorganisms obtained in the field are the most suitable strains in the in-situ environment (high salt concentration), and through the dominance of these strains, decomposition of organic matter such as livestock manure promotes ripening and reduces odor.

본 명세서에서 용어 ‘악취 발생원’이란, 악취 원인 물질을 포함하는 다양한 폐기물, 분뇨 등을 의미하며, 상기‘악취 원인 물질’은 후각을 자극하여 불쾌감과 혐오감을 주는, 주로 자극성 있는 기체를 유발하는 물질을 의미한다. 상기 악취 원인 물질은 주로 휘발성 화합물에 속하고, 질소화합물, 황화합물, 저급지방산류, 카르보닐 화합물, 에스테르류, 페놀/크레졸류, 알코올류, 탄화수소류, 염소화합물 등이 포함될 수 있다. 이에 제한되는 것은 아니나, 본 발명의 악취 원인 물질은 질소화합물 또는 황화합물일 수 있으며, 보다 바람직하게는 암모니아, 황화수소, 황화메틸, 메틸메르캅탄 또는 아민류를 포함할 수 있다.In this specification, the term 'odor source' refers to various wastes, manure, etc., including odor-causing substances, and the 'odor-causing material' is a substance that stimulates the sense of smell and causes discomfort and aversion, mainly irritating gases. means The odor-causing substances mainly belong to volatile compounds, and may include nitrogen compounds, sulfur compounds, lower fatty acids, carbonyl compounds, esters, phenols/cresols, alcohols, hydrocarbons, chlorine compounds, and the like. Although not limited thereto, the odor-causing substance of the present invention may be a nitrogen compound or a sulfur compound, and more preferably may include ammonia, hydrogen sulfide, methyl sulfide, methyl mercaptan, or amines.

본 발명의 일 성분인 ‘악취 저감능을 가지는 미생물’은 상기 악취 원인 물질 중 하나 이상을 분해하여 악취를 제거하는 기능을 가진다. 상기 악취 저감능을 가지는 미생물은 그 종류에 제한되는 것은 아니나, 본 발명에서는 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae), 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 리케니포미스(Bacillus licheniformis) 및 로도슈도모나스 팔루스트리스(Rhodopseudomonas palustris) 중 하나 이상을 선택하여 포함할 수 있다. One component of the present invention, the 'microorganism having an odor reducing ability', has a function of removing odor by decomposing one or more of the odor-causing substances. The microorganism having the odor reducing ability is not limited to the type, but in the present invention, Saccharomyces cerevisiae , Bacillus amyloliquefaciens , Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis ) , Bacillus licheniformis ( Bacillus licheniformis ) and Rhodopseudomonas palustris ( Rhodopseudomonas palustris ).

본 명세서에서 용어 ‘적응 미생물’ 이란, 악취 발생원에서 채취한 시료를 배양한 배양물에서 우점된 미생물을 의미하는 것이며, 이는 상기 배양물에서 미생물이 이루는 콜로니의 수가 많고, 면적이 넓은 종을 의미한다. 상기 적응 미생물은 1개 또는 2개 이상일 수 있다. 적응 미생물을 활용하는 것은 악취 발생 현장의 유기물을 잘 분해하는 미생물을 분리 배양하여 유기물의 분해 및 악취 제거 효과를 향상시키기 위함이다. 악취 발생원에는 폐기물에 포함된 유기물의 종류에 따라 이를 영양분으로 활용하여 번식하는 미생물이 다양하게 포함되어 있으므로, 이를 악취 제거 미생물과 함께 조성물 내에 포함할 경우 해당 현장에서의 악취 발생 물질의 분해가 더욱 효과적으로 이루어질 수 있고, 이에 따른 악취 저감 효과도 크게 향상될 수 있다.As used herein, the term 'adapted microorganism' refers to a microorganism that is dominant in a culture obtained by culturing a sample taken from an odor generating source, and refers to a species with a large number of colonies formed by microorganisms in the culture and a large area. . The adapted microorganisms may be one or two or more. The use of adapted microorganisms is to improve the decomposition of organic matter and the removal of odor by isolating and culturing microorganisms that decompose well the organic matter at the site where the odor occurs. Odor generating sources include various microorganisms that reproduce using organic substances as nutrients depending on the type of organic matter contained in the waste, so when they are included in the composition together with odor removing microorganisms, the decomposition of odor generating substances at the site is more effective. Accordingly, the odor reduction effect can be greatly improved.

본 발명의 조성물은 상기 미생물들을 미생물 자체로서 포함하거나, 상기 미생물의 배양액, 배양액의 건조물 또는 농축액으로 포함될 수 있으며, 액체 또는 고체 형태로 포함될 수 있다. 상기 배양액 또는 배양액의 건조물은 특정 미생물을 배양 배지 또는 배양액에서 배양한 것을 의미하며, 배양액 내에 미생물이 포함되어 있는 것이 바람직하다. The composition of the present invention may include the microorganisms as microorganisms themselves, or may be included in a culture medium of the microorganisms, a dried product or a concentrated solution of the culture medium, and may be included in a liquid or solid form. The culture medium or dried material of the culture medium means that a specific microorganism is cultured in a culture medium or culture medium, and it is preferable that the microorganism is contained in the culture medium.

본 발명의 조성물은 이에 제한되는 것은 아니나, 상기 악취 저감능을 가지는 미생물 또는 미생물의 배양액과 적응 미생물 또는 이의 배양액의 비율은 1:1 내지 6:1의 비율로 조성물 내에 포함될 수 있다. 상기 비율은 악취 발생 현장의 원인 물질의 종류에 따라 다르게 조절될 수 있다. The composition of the present invention is not limited thereto, but the ratio of the microorganism having the malodor reducing ability or the culture solution of the microorganism to the adapted microorganism or the culture solution thereof may be included in the composition at a ratio of 1:1 to 6:1. The ratio may be adjusted differently according to the type of the causative substance at the site of odor generation.

또한 전체 조성물에 대하여, 미생물 또는 미생물 배양액은 10 내지 90 중량%로 포함될 수 있으며, 보다 바람직하게는 10 내지 60 중량%로 포함될 수 있다. 미생물의 함량이 상기 범위를 만족하는 경우 경제적으로 바람직하면서도 악취 제거 효과가 우수하다. 구체적으로 본 발명에 따른 조성물은 현장의 악취종류에 따라서 상기 미생물 또는 미생물 배양액을 상기 범위 내로 적절히 달리하여 사용할 수 있다. In addition, with respect to the total composition, the microorganism or microbial culture may be included in 10 to 90% by weight, more preferably 10 to 60% by weight. When the content of microorganisms satisfies the above range, it is economically desirable and has an excellent odor removal effect. Specifically, the composition according to the present invention may be used by properly changing the microorganism or microbial culture medium within the above range according to the type of odor in the field.

또한 본 발명의 조성물은 상기 미생물 이외에, 미생물을 안정화시키기 위하여, 미생물의 영양원이 되는 물질을 추가로 포함할 수 있으며, 상기 영양원은 그 성분에 제한되는 것은 아니나, 포도당, 당밀, 부식산, 쌀겨 및 아미노산 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 포도당, 당밀 또는 아미노산을 혼합하여 사용하였다. In addition, the composition of the present invention may further include, in addition to the microorganisms, a material that serves as a nutrient source for microorganisms in order to stabilize the microorganisms, and the nutrient source is not limited to those components, but glucose, molasses, humic acid, rice bran and It may contain one or more of the amino acids. In one embodiment of the present invention, glucose, molasses or amino acids were mixed and used.

본 발명에서, 상기 조성물은 그 제형에 제한되는 것은 아니나, 통상적으로 사용되는 담체와 혼합하여 분말, 펠렛 과립 또는 용액 등으로 제형화할 수 있다. 상기 담체는 물, 셀라이트, 제올라이트, 필라이트, 버미큘라이트, 피트모스, 탈크, 카올리나이트, 벤토나이즈, 피그더스트, 피쉬더스트, 치큰더스트, 라이스더스트, 래이프더스트, 본더스트 및 카올린 등이 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present invention, the composition is not limited to its dosage form, but may be formulated into a powder, pellet granule, or solution by mixing with a commonly used carrier. The carrier may be water, celite, zeolite, fillite, vermiculite, peat moss, talc, kaolinite, bentonize, pig dust, fish dust, chicken dust, rice dust, rappe dust, bone dust, and kaolin. It is not limited thereto.

도 1은 본 발명의 악취 제거용 조성물의 제조 공정을 단계별로 예시한 도이다. 예컨대 도 1을 참고하면 미생물 배양에 필요한 배지를 준비하여 살균 및 멸균하고, 각 미생물별 배양조건으로 대량 배양기에서 미생물을 배양한 뒤, 배양된 미생물의 밀도, 오염정도를 검사하는 단계를 거칠 수 있다. 그 후, 제품 용기에 배합비에 따라 분말 원료를 첨가하고, 제품 용기에 배합비에 따라 액상 원료를 첨가한 뒤, 제조가 완료된 제품에 스티커를 부착함으로써 악취 제거용 조성물을 제조할 수 있으며, 제조된 악취 제거용 조성물은 제품 출하 전까지 처온창고에서 보관할 수 있다.1 is a diagram illustrating a step-by-step manufacturing process of a composition for removing malodor of the present invention. For example, referring to FIG. 1, a medium necessary for culturing microorganisms is prepared, sterilized and sterilized, cultured microorganisms in a mass incubator under culture conditions for each microorganism, and then the density and degree of contamination of the cultured microorganisms can be examined. . Thereafter, a composition for removing odor can be prepared by adding powdered raw materials to the product container according to the mixing ratio, adding liquid raw materials to the product container according to the mixing ratio, and then attaching a sticker to the product that has been manufactured. The composition for removal can be stored in a storage room until the product is shipped.

본 발명은 또한, 전술한 조성물을 포함하는 현장 맞춤형 악취 제거용 미생물 제제에 관한 것이다.The present invention also relates to a microbial preparation for removing malodor tailored to the site comprising the above-described composition.

상기 제제는 상기 조성물의 분말, 건조물, 액체 또는 농축액일 수 있으나 이에 한정되지는 않는다. The preparation may be a powder, dry matter, liquid or concentrate of the composition, but is not limited thereto.

구체적으로 본 발명의 상기 악취 제거용 조성물은 통상적으로 사용되는 담체 또는 부형제와 혼합되어 액제, 농축액, 건조물 또는 분말의 형태로 제제화될 수 있다. 고체 형태의 제제는 미생물을 담체에 부착한 후, 수분 함량이 0.1 내지 10 중량%가 되도록 건조하고 비드,분말 또는 과립 등의 형태로 제품화할 수 있다. Specifically, the composition for removing malodor of the present invention may be mixed with a commonly used carrier or excipient and formulated in the form of a liquid, concentrate, dry material or powder. The preparation in solid form may be commercialized in the form of beads, powders, or granules after attaching microorganisms to a carrier, drying the water content to 0.1 to 10% by weight, and the like.

상기 고체 형태의 제제는 부형제를 더 포함할 수 있으며, 상기 부형제는 전분, 아미노산, 비타민C, 비타민E, 키토산 및 포도당을 단독으로 사용하거나 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. The solid formulation may further include an excipient, and the excipient may be used alone or in combination of two or more of starch, amino acid, vitamin C, vitamin E, chitosan, and glucose, but is not limited thereto.

본 발명은 또한, 악취 발생원으로부터 시료를 채취하여, 시료 내 포함된 미생물을 1차 배양하는 단계; 상기 1차 배양된 미생물 중, 적응 미생물을 분리하여 별도의 배지에서 2차 배양하는 단계: 및 상기 적응 미생물 또는 이의 배양액 및 악취 저감 효과를 가지는 미생물 또는 이의 배양액을 혼합하는 단계를 포함하고, 상기 1차 또는 2차 배양은 고체 배지에 악취 발생원으로부터 채취한 시료를 도말하여 배양하는 것이며, 상기 적응 미생물은 1차 배양된 시료 중 우점 배양된 미생물을 1 또는 2 이상 분리하여 2차 배양한 것이고, 상기 악취 저감 효과를 가지는 미생물은 사카로마이세스 세레비지애, 바실러스 아밀로리퀴파시엔스, 바실러스 서브틸리스, 바실러스 리케니포미스 및 로도슈도모나스 팔루스트리스를 포함하는 군으로부터 하나 이상의 미생물을 선택하여 포함하는, 현장 맞춤형 미생물 탈취제의 제조 방법에 관한 것이다. The present invention also includes the steps of taking a sample from the odor generating source and primary culturing the microorganisms included in the sample; Separating adapted microorganisms from among the primary cultured microorganisms and secondary culturing them in a separate medium: mixing the adapted microorganisms or their culture medium and the microorganisms having an odor reducing effect or their culture medium; Primary or secondary culture is cultured by smearing a sample taken from a source of odor on a solid medium, and the adapted microorganism is a secondary culture by separating one or two or more predominantly cultured microorganisms from the primary cultured sample. Microorganisms having an odor-reducing effect are selected from the group consisting of Saccharomyces cerevisiae, Bacillus amyloliquifaciens, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, and Rhodopseudomonas palustris. , It relates to a method for manufacturing a site-specific microbial deodorant.

상기 적응 미생물은 앞서 설명한 바와 같이, 탈취 대상이 되는 현장의 악취 발생원으로부터 채취한 시료에 우점된 미생물을 의미하는 것이다. 일반적인 양돈농가의 경우 축사 지상에서 가축을 사육하고 축사 하부 슬러러피트에 돈분뇨를 저장하는 형태를 갖는다. 가축사료에는 성장을 위해 인산염류, 칼슘염류, 무기물류 등 각종 염류가 포함되어 있으며 이러한 사료를 먹고 슬러리피트 내 많은 염들이 축적이 된다. 따라서, 일반적인 미생물들이 높은 염농도를 갖는 슬러리피트 내에서 생육을 하지 못하는 문제가 발생한다. 그러나 본 발명에 따른 현장 맞춤형 미생물 탈취제는 현장에서 적응 미생물을 분리 및 배양함으로써 염내성을 갖는 미생물의 제공이 가능하다.As described above, the adapted microorganisms refer to microorganisms that are predominant in samples collected from odor sources in the field to be deodorized. In the case of a general pig farm, livestock are raised on the ground of the barn and pig manure is stored in a slurry pit under the barn. Livestock feed contains various salts such as phosphates, calcium salts, and inorganic materials for growth, and many salts accumulate in the slurry pit after eating these feeds. Therefore, there arises a problem that general microorganisms do not grow in a slurry pit having a high salt concentration. However, the site-specific microbial deodorant according to the present invention can provide microorganisms having salt tolerance by isolating and culturing adapted microorganisms in the field.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 적응 미생물을 분리하기 위하여, 1차로 상기 시료를 고체 한천배지에 도말하여 배양한 후, 육안으로 콜로니의 숫자가 많은 우점균을 2차로 고체 한천 배지에 분리 배양하였다. 분리 배양된 적응 미생물은 1종 또는 2종 이상일 수 있으며, 분리 배양된 적응 미생물을 액체 배지로 옮긴 후, 진탕 배양하여 사용하였다(도 3 참고).According to one embodiment of the present invention, in order to isolate the adapted microorganisms, the sample is first smeared and cultured on a solid agar medium, and then dominant bacteria having a large number of colonies visually are secondarily separated and cultured on a solid agar medium. did The isolated and cultured adapted microorganisms may be one or two or more species, and the isolated and cultured adapted microorganisms were transferred to a liquid medium and then shaken and cultured for use (see FIG. 3 ).

우점하는 적응 미생물은 연속적 희석(Serial dilution)을 하여 시료를 만든 후 이를 세균용 배지 TSA에 깔아서 확인한다. 색상, 콜로니 모양, 냄새 등 육안으로 확인하여 한천배지 내 가장 많은 세균을 적응 미생물로 칭한다. 이러한 적응 미생물을 단일 콜로니로 계대하여 보관한다. 연속적 희석 후 도말을 하여 적응 미생물을 분리하는 과정을 도 5에 나타내었다.The dominant adapted microorganism is confirmed by making a sample by serial dilution and spreading it on a bacterial medium TSA. Color, colony shape, smell, etc. are visually checked and the most bacteria in the agar medium are called adapted microorganisms. These adapted microorganisms are passaged and stored as single colonies. 5 shows the process of separating adapted microorganisms by smearing after serial dilution.

본 발명은 또한 전술한 악취 제거용 조성물을 시료를 채취한 악취 발생원의 폐수, 축산 분뇨, 퇴비 또는 생활 폐기물과 함께 배양하여 악취를 제거하는 방법에 관한 것이다.The present invention also relates to a method for removing odor by incubating the above-described composition for removing odor together with wastewater, livestock manure, compost, or household waste from a sampled odor source.

본 발명에 따른 악취 제거용 조성물을 사용하는 경우 2차 오염 없이 악취를 감소시킬 수 있으므로 부숙이 완료된 액비 및 퇴비를 사용함에 따라 토양 개량 및 환경 개선의 효과가 있다. In the case of using the composition for removing odor according to the present invention, odor can be reduced without secondary contamination, and thus there is an effect of soil improvement and environmental improvement by using composted liquid manure and compost.

이하, 본 명세서를 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세히 설명한다. 그러나, 본 명세서에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 명세서의 범위가 아래에서 상술하는 실시예들에 한정되는 것으로 해석되지는 않는다. 본 명세서의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 명세서를 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.Hereinafter, examples will be described in detail in order to specifically describe the present specification. However, the embodiments according to the present specification may be modified in many different forms, and the scope of the present specification is not construed as being limited to the embodiments described below. The embodiments herein are provided to more completely explain the present specification to those skilled in the art.

실험예Experimental example 1. 악취 1. Stink 저감능을reducing ability 가지는 미생물의 배양 Cultivation of eggplant microorganisms

1-1. 1-1. 바실러스bacillus 리케니포미스licheniformis SF5-1( SF5-1( Bacillus Bacillus licheniformislicheniformis ) 배양 ) culture

바실러스 리케니포미스 SF5-1 균주(KACC 91618P)를 분양 받아 하기 표 1의 조성의 배지에서 호기 조건으로 배양기를 통해 대량 배양하였다. 배양기는 2,000L용량 배양기를 사용하였으며, 최적온도 35℃, 공기주입량 150L/min 조건에서 24시간 배양하였다. 배양 후 필요성에 따라서 농축 후 동결건조하여 분말 제제로 제조하여 보관하기도 하였다. 상기 균주는 단백질 분해능이 있는 것으로 공지된 균주이다(특허 제10-1278617호 참조).Bacillus licheniformis SF5-1 strain (KACC 91618P) was distributed and mass-cultivated through an incubator under aerobic conditions in a medium having the composition shown in Table 1 below. The incubator used a 2,000L capacity incubator, and was cultured for 24 hours under conditions of an optimal temperature of 35℃ and an air injection rate of 150L/min. After culturing, it was concentrated and lyophilized, if necessary, to prepare a powder formulation and store it. This strain is known to have proteolytic ability (see Patent No. 10-1278617).

배지 원료badge raw material 함량, %content, % GlucoseGlucose 0.50.5 PeptonePeptone 1.01.0 Yeast extractYeast extract 0.50.5 KH2PO4KH2PO4 0.30.3

1-2. 1-2. 바실러스bacillus 아밀로리퀴파시엔스Amyloliquifaciens AEYAEY -1(-One( Bacillus Bacillus amyloliquefaciensamyloliquefaciens ) 배양 ) culture

바실러스 아밀로리퀴파시엔스 AEY-1 균주(KCTC 18314P)를 분양받아, 아래 표 2의 조성의 배지에서 호기 조건으로 배양하였다. 배양기는 2,000L용량 배양기를 사용하였으며, 최적온도 35℃, 공기주입량 150L/min 조건에서 24시간 배양하였다. 배양 후 필요성에 따라서 농축 후 동결건조하여 분말 제제로 제조하여 보관하기도 하였다. 상기 균주는 암모니아 제거 효과를 가지는 것으로 공지된 균주이다(특허 제 10-1799750호 참고).Bacillus amyloliquefaciens AEY-1 strain (KCTC 18314P) was received and cultured under aerobic conditions in a medium having the composition shown in Table 2 below. The incubator used a 2,000L capacity incubator, and was cultured for 24 hours under conditions of an optimal temperature of 35℃ and an air injection rate of 150L/min. After culturing, it was concentrated and lyophilized, if necessary, to prepare a powder formulation and store it. The strain is a strain known to have an ammonia removal effect (see Patent No. 10-1799750).

배지 원료badge raw material 함량, %content, % GlucoseGlucose 0.50.5 PeptonePeptone 1.01.0 Yeast extractYeast extract 0.50.5 KH2PO4 KH 2 PO 4 0.30.3

1-3. 1-3. 로도슈도모나스Rhodopseudomonas 팔루스트리스palustris JKJK -1(-One( RhodopseudomonasRhodopseudomonas palustrispalustris ) 배양 ) culture

로도슈도모나스 팔루스트리스 JK-1 균주(KACC 92045P)를 분양받아, 아래 표 3의 조성의 배지를 사용하였다. 용량 2,000L 미생물 배양기를 이용하였으며, working volume 1,000L에 배지량 20kg(2%, w/v)를 넣고 멸균하여 사용하였으며 최적조건 30℃, 광조건으로 혐기배양을 실시하였다. 상기 균주는 광합성을 하는 균주로서, 황화수소 분해에 효과적이다. Rhodopseudomonas palustris JK-1 strain (KACC 92045P) was received, and a medium having the composition shown in Table 3 below was used. A microbial incubator with a capacity of 2,000 L was used, and 20 kg (2%, w / v) of the medium amount was put into a working volume of 1,000 L, and sterilization was used, and anaerobic culture was performed under optimal conditions of 30 ° C and light conditions. The strain is photosynthetic and is effective in decomposing hydrogen sulfide.

배지 원료badge raw material 1L 기준, gBased on 1L, g Yeast extractYeast extract 0.20.2 Sodium lactateSodium lactate 1.01.0 MgSO4 MgSO 4 0.20.2 NaClNaCl 0.20.2 CaCl2 CaCl 2 0.050.05 KH2PO4 KH 2 PO 4 0.50.5 NH4ClNH 4Cl 0.50.5

1-4. 1-4. 사카로마이세스Saccharomyces 세레비지애Celebrity UB28-30( UB28-30( SaccharomycesSaccharomyces cerevisiaecerevisiae ) 배양 ) culture

사카로마이세스 세레비지애 UB28-30은 출원인이 기 보유한 균주로서, 하기 표 4의 조성의 배지에, 35℃, 호기 조건으로 배양기를 통해 대량 배양 하였다. 배양기는 2,000L용량 배양기를 사용하였으며, 최적온도 35℃, 공기주입량 100L/min 조건에서 36시간 배양하였다. 배양 후 필요성에 따라서 농축 후 동결건조하여 분말 제제로 제조하여 보관하기도 하였다. 상기 균주는 단백질과 같은 유기물에 대한 분해능을 가진다. Saccharomyces cerevisiae UB28-30 is a strain previously owned by the applicant, and was mass-cultured through an incubator at 35 ° C. in aerobic conditions in a medium having the composition shown in Table 4 below. did The incubator used a 2,000L capacity incubator, and was cultured for 36 hours under the conditions of an optimal temperature of 35℃ and an air injection amount of 100L/min. After culturing, it was concentrated and lyophilized, if necessary, to prepare a powder formulation and store it. The strain has a degrading ability for organic substances such as proteins.

배지 원료badge raw material 함량, %content, % 당밀molasses 1010 Corn Steep Liquor(CSL)Corn Steep Liquor (CSL) 4.04.0 Yeast extractYeast extract 0.50.5 GlucoseGlucose 0.50.5 KH2PO4 KH 2 PO 4 0.30.3

1-5. 1-5. 바실러스bacillus 서브틸리스subtilis UBUB -156(-156( Bacillus Bacillus subtilissubtilis ) 배양) culture

바실러스 서브틸리스 UB-156은 출원인이 기 보유한 균주로서, 하기 표 5의 조성의 배지에서 호기 조건으로 배양기를 통해 대량 배양하였다. 배양기는 2,000L용량 배양기를 사용하였으며, 최적온도 35℃, 공기주입량 150L/min 조건에서 24시간 배양하였다. 배양 후 필요성에 따라서 농축 후 동결건조하여 분말제제로 제조하여 보관하기도 하였다. 상기 균주는 단백질 등 유기물과, 암모니아에 대한 분해능을 가진다. Bacillus subtilis UB-156 is a strain already possessed by the applicant, and was mass-cultured through an incubator under aerobic conditions in a medium having the composition shown in Table 5 below. The incubator used a 2,000L capacity incubator, and was cultured for 24 hours under conditions of an optimal temperature of 35℃ and an air injection rate of 150L/min. After culturing, it was concentrated and lyophilized, if necessary, to prepare a powder formulation and store it. The strain has an ability to decompose organic matter such as protein and ammonia.

배지 원료badge raw material 함량, %content, % GlucoseGlucose 0.50.5 PeptonePeptone 1.01.0 Yeast extractYeast extract 0.50.5 KH2PO4 KH 2 PO 4 0.30.3

실험예Experimental example 2. 적응 미생물의 분리 및 배양 2. Isolation and cultivation of adapted microorganisms

2-1. 현장 맞춤형 배지 제조(Field Customizing Agar, 2-1. Field Customizing Agar, FCAFCA ))

적응 미생물은 악취 발생 현장의 악취 발생원으로부터 시료를 채취하여 이를 배양하는 방법으로 분리한다. 먼저, 고체 한천 분말(agar powder) 1.2g에, 각각의 악취 발생 현장에서 채취한 시료(액비)를 5% 비율로 증류수에 희석하여 첨가한 후, 121℃에서 15분 간 멸균한 후, 분주하여 배양하였다(1차 배양).Adaptive microorganisms are isolated by taking samples from odor sources at the site of odor generation and culturing them. First, to 1.2 g of solid agar powder, samples (liquid fertilizer) collected from each odor generating site were diluted in distilled water at a rate of 5% and added, sterilized at 121 ° C for 15 minutes, and then dispensed. cultured (primary culture).

구분division 100ml 기준 투입량Input amount based on 100ml 증류수Distilled water 95ml95ml 현장 액비 및 퇴비On-site liquid manure and compost 5ml5ml Agar powderAgar powder 1.2g1.2g

2-2. 적응 미생물의 분리 배양 (2차 배양)2-2. Separate culture of adapted microorganisms (secondary culture)

상기 2-1에서 제조한 현장 맞춤형 배지(FCA)에 연속적희석을 통해 알맞은 농도로 시료를 만들고 이를 FAC배지에 도말하여 30℃, 2~3일간 인큐베이터에서 배양하였다. 다양한 세균중에 콜로니모양, 색상, 냄새등이 유사한 세균을 파악하고 이 중 가장 많은 개체수를 보이는 세균을 분리하여 이를 재 배양하였다. 배양 배지는 고체 한천 배지로서, TSA(Tripic Soy Agar) 또는 NA(Nutrient Agar)배지를 사용하였다. 도 2와 같이, 적응 미생물의 1차 및 2차 배양 결과물을 얻었다. A sample was made at an appropriate concentration through serial dilution in the field-customized medium (FCA) prepared in 2-1 above, and it was smeared on a FAC medium and cultured in an incubator at 30 ° C. for 2 to 3 days. Among various bacteria, bacteria with similar colony shape, color, smell, etc. were identified, and the bacteria showing the largest population were isolated and re-cultured. As the culture medium, TSA (Tripic Soy Agar) or NA (Nutrient Agar) medium was used as a solid agar medium. As shown in Figure 2, the primary and secondary culture results of the adapted microorganisms were obtained.

2-3. 적응 미생물의 대량 배양 2-3. Mass culture of adapted microorganisms

상기 2-2의 분리 배양 결과 얻어진 적응 미생물을 각각 액체 배지에 접종하여 진탕 배양하였다(도 3 참고). TSB(Tripic Soy Broth) 배지에 상기 분리 배양된 적응 미생물을 접종하고, 35℃, 150rpm 조건으로 2~3일간 진탕 배양하여 보관하였다. Each of the adapted microorganisms obtained as a result of the separate culture in 2-2 was inoculated into a liquid medium and cultured with shaking (see FIG. 3). The isolated and cultured adapted microorganisms were inoculated in a TSB (Tripic Soy Broth) medium, shaken and cultured for 2 to 3 days at 35° C. and 150 rpm and stored.

실험예Experimental example 3. 현장 맞춤형 탈취제 조성물의 제조 3. Preparation of site-specific deodorant composition

하기와 같은 조성으로, 실시예 및 비교예를 제조하였다. 상기 실험예 1 및 2에서 배양한 악취 저감능을 가지는 미생물 및 적응 미생물을 배합하고, 영양원, 담체 및 첨가제 등을 하기 표 7의 비율에 따라 제조하였다. (실시예 1 내지3, 비교예 1 내지 3) With the following composition, Examples and Comparative Examples were prepared. Microorganisms and adapted microorganisms having odor reduction ability cultured in Experimental Examples 1 and 2 were mixed, and nutrient sources, carriers, and additives were prepared according to the ratios shown in Table 7 below. (Examples 1 to 3, Comparative Examples 1 to 3)

실험의 대상이 된 현장은 각각 1. 충북 괴산 소재의 농협 퇴비장, 2. 강원도 철원 소재의 양돈 농장, 3. 전북 고창 소재의 양돈 농장으로, 현장의 악취 발생원으로부터 시료를 채취하여 적응 미생물을 배양한 후 사용하였다. The test sites were 1. Nonghyup composting facility in Goesan, Chungcheongbuk-do, 2. Pig farm in Cheorwon, Gangwon-do, and 3. Pig farm in Gochang, Jeonbuk. used after.

비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교예 3Comparative Example 3 실시예 1Example 1 실시예 2Example 2 실시예 3Example 3 맥주 효모brewer's yeast 5050 5050 5050 -- -- -- 사카로마이세스 세르비지애 UB28-30Saccharomyces Serviziae UB28-30 1010 1010 1010 2020 2020 2020 바실러스 서브틸리스 UB156Bacillus subtilis UB156 1010 1010 1010 2020 2020 2020 바실러스 리케니포미스 SF5-1Bacillus licheniformis SF5-1 1010 -- 1010 -- -- -- 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 AEY-1Bacillus amyloliquifaciens AEY-1 1010 -- -- 2020 -- -- 로도슈도모나스 팔루스트리스 JK-1Rhodopseudomonas palustris JK-1 -- 1515 -- -- 2020 1010 당밀molasses 1010 1010 1010 -- -- -- 포도당glucose -- -- -- 1010 1010 1010 제올라이트zeolite -- -- 55 -- -- 55 아미노산amino acid -- 55 55 -- 55 55 유산균(L. Plantalum)Lactic acid bacteria ( L. Plantalum ) -- -- -- 2020 1515 2020 적응 미생물adapted microbes -- -- -- 1010 1010 1010 합계 Sum 100100 100100 100100 100100 100100 100100

실험예Experimental example 4. 악취 4. Stink 저감reduction 효과 확인 Check the effect

상기 실험예 3으로부터 제조된 실시예 및 비교예의 조성으로 현장에 상기 조성물을 살포한 후, 악취 발생원의 종류에 따른 악취 원인 물질의 농도 변화를 측정하였다. 악취의 측정은 가스텍 검지관과 악취측정기를 통해 종류 및 농도를 측정하였다.After spraying the composition of Example and Comparative Example prepared from Experimental Example 3 on the site, the change in concentration of the odor-causing substance according to the type of odor-generating source was measured. The odor was measured by measuring the type and concentration through a Gastech detector and an odor meter.

그 결과, 하기 표 8에서 보듯이, 각각의 현장 별로, 본 발명의 적응 미생물을 포함하는 조성물의 경우 악취 원인 물질의 농도가 크게 감소한 것을 확인하였으며, 이러한 결과를 토대로, 적응 미생물을 포함할 경우, 현장에 따른 악취 저감 효과가 더욱 우수함을 확인할 수 있다. As a result, as shown in Table 8 below, it was confirmed that the concentration of odor-causing substances was greatly reduced in the case of the composition containing the adapted microorganisms of the present invention for each site, and based on these results, when the adapted microorganisms were included, It can be confirmed that the odor reduction effect according to the site is more excellent.

악취 구분smell classification 현장명site name 레시피recipe 처리 전(ppm)Before treatment (ppm) 처리 후(ppm)After treatment (ppm) 암모니아 우세ammonia dominance 충북 괴산
00농협 퇴비장
Chungbuk Goesan
00Nonghyup Composting Ground
레시피 번호 ①Recipe number ① NH3 470NH 3 470 NH3 50NH 3 50
황화수소 우세hydrogen sulfide dominance 강원 철원
00농장
Gangwon Cheorwon
00Farm
레시피 번호 ⑤Recipe number ⑤ H2S 253 H2S253 H2S 60 H2S60
복합 악취complex odor 전북 고창
00농장
Jeonbuk Gochang
00Farm
`레시피 번호 ⑥`Recipe number ⑥ NH3 100
H2S 100
CH4S 10
NH 3 100
H 2 S 100
CH4S10
NH3 3
H2S 0.2
CH4S 0
NH 3 3
H 2 S 0.2
CH4S0

또한, 적응 미생물을 포함하는 본 발명의 악취 제거 조성물을 하기와 같이 제제화 하여(제품명 : 사카로) 다양한 현장에 살포한 후, 3일 경과 시, 악취 원인 물질의 농도를 가스검지관(가스텍)과 악취측정기를 통해 측정하였다. 도 4는 적응 미생물 살포 전후 액비(분뇨) 상태를 나타낸 도이다. 그 결과, 다양한 악취원인물질의 농도가 표 9와 같이 현저히 감소된 것을 확인하였다. 또한, 육안으로 보기에도 액비 초기에 검은색 분뇨가 발효가 잘 되서 갈색 또는 흑갈색을 띠는 것을 볼 수 있다. 퇴비 및 액비의 부숙을 판단하는 방법은 냄새, 색상, 가스측정기를 이용하여 분석에 의한 지시법, pH, 전기전도도(EC) 등 다양하지만. 현장에서는 색상을 기준으로 판단하는 방법이 가장 쉽고 빠르기에 많이 사용되고 있다. 액비는 초기에 흑회색, 암흑색을 띠고 부숙중기에는 암갈색에서 부숙후기 및 완료에는 흑갈색 또는 갈색으로 나타난다.In addition, the odor removal composition of the present invention containing adapted microorganisms is formulated as follows (product name: Saccharo) and sprayed on various sites, and then, after 3 days, the concentration of odor-causing substances is measured through a gas detection tube (Gastech) and was measured through an odor meter. Figure 4 is a diagram showing the state of liquid manure (manure) before and after spraying adapted microorganisms. As a result, it was confirmed that the concentrations of various odor-causing substances were significantly reduced as shown in Table 9. In addition, even with the naked eye, it can be seen that black manure is well fermented in the early stage of liquid manure and turns brown or dark brown. There are various ways to judge the ripeness of compost and liquid manure, such as smell, color, indication by analysis using a gas meter, pH, and electrical conductivity (EC). In the field, the method of judging based on color is widely used because it is the easiest and fastest. The liquid manure is black gray or dark black at the beginning, dark brown in the middle of ripening, and dark brown or brown in the late and complete ripening.

현장site 현장 1scene 1 현장 2scene 2 현장 3scene 3 현장 4scene 4 현장 5scene 5 현장 6scene 6 현장 7scene 7 현장 8scene 8 현장 9scene 9 원인물질causative agent 황화수소 hydrogen sulfide 메틸메르캅탄methyl mercaptan 암모니아ammonia 암모니아ammonia 암모니아ammonia 암모니아ammonia 암모니아ammonia 암모니아ammonia 암모니아ammonia 암모니아ammonia 살포전Before spraying 16.016.0 9.99.9 2525 6060 1818 2525 8484 6262 7575 5858 살포후After spraying 0.00.0 0.40.4 99 1717 1414 99 4040 2020 2525 33

(농도:ppm)(Concentration: ppm)

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.So far, the present invention has been looked at with respect to its preferred embodiments. Those skilled in the art to which the present invention pertains will be able to understand that the present invention can be implemented in a modified form without departing from the essential characteristics of the present invention. Therefore, the disclosed embodiments should be considered from an illustrative rather than a limiting point of view. The scope of the present invention is shown in the claims rather than the foregoing description, and all differences within the equivalent range should be construed as being included in the present invention.

Claims (5)

악취 발생 원인 물질을 분해하여 악취 저감능을 가지는 미생물, 상기 미생물의 배양물, 상기 배양물의 농축액 또는 건조물; 및
악취 발생원으로부터 채취한 시료로부터 분리한 적응 미생물, 상기 적응 미생물의 배양물, 상기 배양물의 농축액 또는 건조물을 포함하고,
상기 악취 저감 효과를 가지는 미생물은 사카로마이세스 세레비지애, 바실러스 아밀로리퀴파시엔스, 바실러스 서브틸리스, 바실러스 리케니포미스 및 로도슈도모나스 팔루스트리스로 이루어진 군으로부터 선택된 1이상의 미생물을 포함하고,
상기 적응 미생물은 악취 발생원으로부터 채취한 시료를 배양하여, 배지 내에 우점하는 미생물을 하나 이상 분리 배양한 것임을 특징으로 하는, 시료를 채취한 악취 발생원에 사용하기 위한 현장 맞춤형 악취 제거용 조성물.
microorganisms having an odor reducing ability by decomposing odor-causing substances, cultures of the microorganisms, concentrates or dried products of the cultures; and
Including an adapted microorganism isolated from a sample collected from an odor generating source, a culture of the adapted microorganism, and a concentrate or dried product of the culture,
The microorganism having the odor reducing effect includes at least one microorganism selected from the group consisting of Saccharomyces cerevisiae, Bacillus amyloliquifaciens, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis and Rhodopseudomonas palustris,
Wherein the adapted microorganism is obtained by culturing a sample taken from the odor source and isolating and culturing one or more microorganisms dominant in the culture medium.
삭제delete 제1항의 조성물을 포함하는 시료를 채취한 악취 발생원에 사용하기 위한 현장 맞춤형 악취 제거용 미생물 제제. A field-customized microbial agent for removing malodor for use in a malodor generating source from which a sample containing the composition of claim 1 is taken. 악취 발생원으로부터 시료를 채취하여, 시료 내 포함된 미생물을 1차 배양하는 단계;
상기 1차 배양된 미생물 중, 적응 미생물을 분리하여 별도의 배지에서 2차 배양하는 단계: 및
상기 적응 미생물 또는 이의 배양액 및 악취 저감 효과를 가지는 미생물 또는 이의 배양액을 혼합하는 단계를 포함하고,
상기 1차 또는 2차 배양은 고체 배지에 악취 발생원으로부터 채취한 시료를 도말하여 배양하는 것이며,
상기 적응 미생물은 1차 배양된 시료 중 우점 배양된 미생물을 1 또는 2 이상 분리하여 2차 배양한 것이고,
상기 악취 저감 효과를 가지는 미생물은 사카로마이세스 세레비지애, 바실러스 아밀로리퀴파시엔스, 바실러스 서브틸리스, 바실러스 리케니포미스 및 로도슈도모나스 팔루스트리스를 포함하는 군으로부터 하나 이상의 미생물을 선택하여 포함하는, 시료를 채취한 악취 발생원에 사용하기 위한 현장 맞춤형 미생물 탈취제의 제조 방법.
Collecting a sample from an odor generating source and primary culturing microorganisms included in the sample;
Separating adapted microorganisms from among the primary cultured microorganisms and secondary culture in a separate medium: and
Mixing the adapted microorganism or its culture medium and the microorganism having an odor reducing effect or its culture medium,
The primary or secondary culture is cultured by smearing a sample collected from an odor generating source on a solid medium,
The adapted microorganisms are secondary cultures obtained by isolating one or two or more predominantly cultured microorganisms from the primary cultured samples,
The microorganism having the odor reducing effect is selected from the group consisting of Saccharomyces cerevisiae, Bacillus amyloliquifaciens, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, and Rhodopseudomonas palustris. A method for manufacturing a site-specific microbial deodorant for use in a sampled odor source.
제1항의 악취 제거용 조성물을 시료를 채취한 악취 발생원의 폐수, 축산 분뇨, 퇴비 또는 생활 폐기물과 함께 배양하여 악취를 제거하는 방법.A method of removing odor by incubating the composition for removing odor of claim 1 together with wastewater, livestock manure, compost, or household waste from a source of odor.
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