KR102481339B1 - Method for producing amino acids using plasma and blood cells separated from whole blood - Google Patents

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Abstract

본 발명은 a) 가축, 가금류 및 어류의 전혈(全血)을 원심분리시켜서 혈장과 혈구로 분리하는 단계;
b) 상기에서 분리된 혈장을 혈장 가수분해 탱크로 이송하여, 혈장의 온도를 45 내지 65℃로 조절하고, pH를 4.5 내지 10.5로 보정하고, 혈장가수분해효소를 투입하여, 고분자 유기물인 혈장을 저분자 유기물인 혈장 아미노산으로 가수분해하는 단계;
c) 상기에서 분리된 혈구를 혈구 가수분해 탱크로 이송하여, 저장액을 투입하여 혈구세포막을 삼투압원리에 의한 용혈작용에 의해 파괴시키고, 상기 세포막이 파괴된 혈구의 온도가 45 내지 65℃가 되게 조절하고, pH를 4.5 내지 10.5로 보정하고, 혈구가수분해효소를 투입하여, 고분자 유기물인 혈구를 저분자 유기물인 혈구 아미노산으로 가수분해하는 단계;
d) 상기 가수분해된 혈장 아미노산 및 혈구 아미노산을 각각 여과하여 이물질을 제거하는 단계;
e) 상기 여과된 혈장 아미노산 및 혈구 아미노산을 각각 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크로 이송하는 단계; 및
f) 상기 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크 각각에 살균제를 투입하는 단계;를 포함하는 아미노산의 제조방법을 제공한다.
The present invention comprises the steps of a) centrifuging whole blood of livestock, poultry and fish to separate into plasma and blood cells;
b) The plasma separated above is transferred to a plasma hydrolysis tank, the temperature of the plasma is adjusted to 45 to 65 ° C, the pH is corrected to 4.5 to 10.5, and a plasma hydrolase is introduced to obtain plasma, which is a high molecular organic substance. Hydrolyzing low-molecular-weight organic substances into plasma amino acids;
c) The blood cells separated above are transferred to a blood cell hydrolysis tank, and a stock solution is introduced to break the blood cell membranes by hemolysis based on the osmotic pressure principle, and the blood cells with the cell membranes destroyed are brought to a temperature of 45 to 65 ° C. adjusting the pH, correcting the pH to 4.5 to 10.5, and injecting hemocyte hydrolase to hydrolyze blood cells, which are high molecular weight organic substances, into blood cell amino acids, which are low molecular weight organic substances;
d) filtering the hydrolyzed plasma amino acids and blood cell amino acids to remove impurities;
e) transferring the filtered plasma amino acids and blood cell amino acids to a plasma amino acid storage tank and a blood cell amino acid storage tank, respectively; and
f) injecting a disinfectant into each of the plasma amino acid storage tank and the blood cell amino acid storage tank;

Description

전혈에서 혈장과 혈구를 분리하여 사용하는 아미노산의 제조방법{Method for producing amino acids using plasma and blood cells separated from whole blood} Method for producing amino acids using plasma and blood cells separated from whole blood}

본 발명은 전혈(全血)에서 혈장과 혈구를 분리하여 사용하는 아미노산의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for preparing amino acids by separating plasma and blood cells from whole blood.

21세기 인간의 식생활 환경은 육류 소비의 지속적 증가로 식용의 수단인 가축과 가금류 및 어류의 종류와 개체수도 폭발적으로 늘어나고 있는 추세이다. 이로 인하여 식용으로 가장 많이 소비되는 돼지와 소의 도축과정에서 발생하는 폐기 혈액은 세계적으로 년간 1,500만톤에 이르고 있으며, 가금류와 어류혈액을 포함한다면 실로 엄청난 폐기 혈액이 발생하고 있다. 이러한 폐기 혈액은 5~10% 수준만 식용, 사료, 의약품 원료 등으로 재활용하고 대부분은 해양 투기로 폐기하여 왔으나, 2013년부터 해양오염방지를 위한 런던협약에 따라 국제적으로 해양투기가 전면금지됨에 따라 각국에서는 육상처리를 위하여 많은 비용을 지출함은 물론 처리에 따른 2차폐기물의 다량 발생으로 심각한 환경오염원으로 작용하고 있는 실정이다.In the 21st century, the human dietary environment tends to explosively increase the number and type of livestock, poultry, and fish, which are means of eating, due to the continuous increase in meat consumption. As a result, waste blood generated during the slaughter of pigs and cows, which are consumed the most for food, amounts to 15 million tons annually worldwide, and if poultry and fish blood are included, a huge amount of waste blood is generated. Only 5 to 10% of this waste blood is recycled as food, feed, raw material for pharmaceuticals, etc., and most of it has been discarded by dumping at sea. Each country not only spends a lot of money for land treatment, but also generates a large amount of secondary waste due to treatment, which acts as a serious environmental pollutant.

도축혈액은 약 78~79%의 수분을 제외하고는 혈장(plasma)과 혈구(blood corpuscle)로 구성된 단백질(protein)이 약 18%, 지방(fat)이 약 0.9%, 탄소화물(carbohydrate), 미네랄(minerals), 비타민(vitamins)이 약 1.8% 등 잠재적가치가 상당히 높은 양질의 영양물질로 구성되어 있어 이를 폐기하지 않고 재활용을 확대할 수 있는 가성비 높은 관련기술과 공정이 확보된다면 자원의 재활용에 있어 모범적인 사례가 될 수 있을 것이다.Except for about 78-79% of water, slaughtered blood contains about 18% of protein composed of plasma and blood corpuscle, about 0.9% of fat, carbohydrates, and minerals. It is composed of high-quality nutrients with high potential value, such as minerals and vitamins (approximately 1.8%), so if cost-effective technologies and processes that can expand recycling without discarding them are secured, it will be possible to recycle resources. It could be a good example.

도축혈액을 재활용할 수 있는 기술적인 핵심요소로는 전혈(全血)의 대부분을 차지하고 있는 고분자 유기물인 단백질(protein)을 활용가치가 높은 저분자 유기물인 아미노산(amino acid)으로 분해하는 것으로, 종래기술로는 전혈(全血)을 단순하게 가열건조한 혈분(血粉)단백질이나 전혈(全血)을 혈액전용 원심분리기로 혈장(혈청)만 분리하여 가열건조한 혈장(혈청)단백질 등을 제조하거나, 강산이나 강알칼리를 적용한 화학적방식으로 분해한 아미노산을 제조하고 있으나 이러한 대부분의 종래기술은 고가의 설비, 과다한 처리비용, 품질저하, 2차폐기물 다량발생 등 많은 문제점을 내포하고 있고, 도축혈액은 부패와 오염을 발생시키는 혐오물질로 인식되어 있어 관련 연구개발은 지지 부진한 상태에 머물러 있다.A key technical element to recycle slaughtered blood is to decompose protein, a high-molecular organic substance that accounts for most of whole blood, into amino acid, a low-molecular organic substance with high utility value. The furnace produces blood meal protein by simply heating and drying whole blood or plasma (serum) protein by separating only plasma (serum) from whole blood with a blood-only centrifugal separator, or by using strong acids or Amino acids decomposed by a chemical method using strong alkali are manufactured, but most of these conventional technologies have many problems such as expensive equipment, excessive processing cost, quality deterioration, and generation of large amounts of secondary waste, and slaughter blood is decomposed and contaminated. As it is recognized as a hate substance that generates, related R&D remains sluggish.

도축혈액을 재활용하는 선행기술로는 한국 특허등록공보 제10-1390516(2014.04.23)의 '동물 폐혈액을 이용한 고농도 아미노산 조성물 및 그 제조방법'에서는 도축 폐혈액의 전혈(全血)을 유기산 등으로 1차 pH 보정과 침전, 수산화나트륨으로 2차 pH 보정, 보정된 단백질에 효소처리, 살균처리 등에 관한 것과, 한국 등록등록공보 제10-1502376(2015.03.09)의 '도축혈액을 이용한 아미노산 액비와 단백질 건조사료의 제조장치'에서는 도축혈액의 전혈(全血)의 혈구세포 분쇄처리, 초음파로 전처리, 효소분해, 고액분리, 마이크로파조사 등에 관한 것 등이 있으나, 상기의 선행문헌을 살펴보면 도축혈액을 효소분해 처리함에 있어 단백질을 가장 많이 함유하고 있는 혈구의 세포막 파쇄를 위해서 여전히 복잡한 제조공정과 비효율성 등으로 재활용하기에는 일정부분 한계를 보이고 있어 효율적 혈구세포 파쇄 등 도축혈액을 빠른 시간 내에 아미노산으로 전환수율을 높일 수 있는 저비용 고효율구조의 진일보한 기술과 공정이 절실히 필요한 환경이다. As a prior art for recycling slaughtered blood, Korean Patent Registration Publication No. 10-1390516 (April 23, 2014), 'High Concentration Amino Acid Composition Using Animal Lung Blood and Manufacturing Method Thereof' 1st pH correction and precipitation with sodium hydroxide, 2nd pH correction with sodium hydroxide, enzyme treatment for corrected protein, sterilization treatment, etc., Korean Registration Registration No. 10-1502376 (2015.03.09) 'Amino acid liquid ratio using slaughter blood' and protein dry feed manufacturing device' relates to blood cell crushing treatment of whole blood of slaughter blood, pretreatment with ultrasonic waves, enzymatic degradation, solid-liquid separation, microwave irradiation, etc. In order to break down the cell membrane of blood cells that contain the most protein in the enzymatic degradation process, there are still some limitations in recycling due to complicated manufacturing processes and inefficiencies. It is an environment that desperately needs advanced technologies and processes with a low-cost, high-efficiency structure that can increase yield.

한국 특허등록공보 제10-1390516(등록일자 2014.04.23)Korean Patent Registration No. 10-1390516 (registration date 2014.04.23) 한국 등록등록공보 제10-1502376(등록일자 2015.03.09)Korea Registration Registration No. 10-1502376 (registration date 2015.03.09)

본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 전혈(全血)로부터 아미노산을 제조하는데 있어서, 빠른 시간 내에 아미노산 전환수율을 높일 수 있는, 저비용 고효율의 아미노산의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다. The present invention was made to solve the problems of the prior art as described above, and provides a low-cost and high-efficiency amino acid production method that can increase the amino acid conversion yield in a short time in preparing amino acids from whole blood. aims to do

본 발명은the present invention

a) 가축, 가금류 및 어류의 전혈(全血)을 원심분리시켜서 혈장과 혈구로 분리하는 단계;a) centrifuging whole blood of livestock, poultry and fish to separate into plasma and blood cells;

b) 상기에서 분리된 혈장을 혈장 가수분해 탱크로 이송하여, 혈장의 온도를 45 내지 65℃로 조절하고, pH를 4.5 내지 10.5로 보정하고, 혈장가수분해효소를 투입하여, 고분자 유기물인 혈장을 저분자 유기물인 혈장 아미노산으로 가수분해하는 단계;b) The plasma separated above is transferred to a plasma hydrolysis tank, the temperature of the plasma is adjusted to 45 to 65 ° C, the pH is corrected to 4.5 to 10.5, and a plasma hydrolase is introduced to obtain plasma, which is a high molecular organic substance. Hydrolyzing low-molecular-weight organic substances into plasma amino acids;

c) 상기에서 분리된 혈구를 혈구 가수분해 탱크로 이송하여, 저장액을 투입하여 혈구세포막을 삼투압원리에 의한 용혈작용에 의해 파괴시키고, 상기 세포막이 파괴된 혈구의 온도가 45 내지 65℃가 되게 조절하고, pH를 4.5 내지 10.5로 보정하고, 혈구가수분해효소를 투입하여, 고분자 유기물인 혈구를 저분자 유기물인 혈구 아미노산으로 가수분해하는 단계;c) The blood cells separated above are transferred to a blood cell hydrolysis tank, and a stock solution is introduced to break the blood cell membranes by hemolysis based on the osmotic pressure principle, and the blood cells with the cell membranes destroyed are brought to a temperature of 45 to 65 ° C. adjusting the pH, correcting the pH to 4.5 to 10.5, and injecting hemocyte hydrolase to hydrolyze blood cells, which are high molecular weight organic substances, into blood cell amino acids, which are low molecular weight organic substances;

d) 상기 가수분해된 혈장 아미노산 및 혈구 아미노산을 각각 여과하여 이물질을 제거하는 단계;d) filtering the hydrolyzed plasma amino acids and blood cell amino acids to remove impurities;

e) 상기 여과된 혈장 아미노산 및 혈구 아미노산을 각각 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크로 이송하는 단계; 및e) transferring the filtered plasma amino acids and blood cell amino acids to a plasma amino acid storage tank and a blood cell amino acid storage tank, respectively; and

f) 상기 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크 각각에 살균제를 투입하는 단계;를 포함하는 아미노산의 제조방법을 제공한다.f) injecting a disinfectant into each of the plasma amino acid storage tank and the blood cell amino acid storage tank;

상기 혈장가수분해효소 및 혈구가수분해효소는 각각 단백질분해효소를 포함할 수 있다. Each of the plasma hydrolase and the hematopoietic enzyme may include a proteolytic enzyme.

상기 혈장가수분해효소 및 혈구가수분해효소는 각각 지방분해효소, 다당류분해효소, 및 섬유소분해효소 중에서 선택되는 1종 이상을 더 포함할 수 있다. Each of the plasma hydrolase and the hematopoietic enzyme may further include at least one selected from a lipolytic enzyme, a polysaccharide hydrolase, and a fibrinolytic enzyme.

상기 혈장 가수분해 탱크 및 혈구 가수분해 탱크에서 pH 보정은 산성화에는 시트르산(C6H8O7) 및 아세트산(C2H4O2) 중에서 선택되는 1종 이상이 사용되며, 알칼리화에는 수산화나트륨(NaOH) 및 수산화칼륨(KOH) 중에서 선택되는 1종 이상이 사용될 수 있다. For pH correction in the plasma hydrolysis tank and the blood cell hydrolysis tank, at least one selected from citric acid (C 6 H 8 O 7 ) and acetic acid (C 2 H 4 O 2 ) is used for acidification, and sodium hydroxide (sodium hydroxide) is used for alkalinization. NaOH) and potassium hydroxide (KOH) may be used.

상기 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크에 투입되는 살균제는 염화나트륨(NaCl), 탄산수소나트륨(NaHCO3), 및 목초액(木醋液) 중에서 선택되는 1종 이상일 수 있다. The disinfectant introduced into the plasma amino acid storage tank and the blood cell amino acid storage tank may be at least one selected from sodium chloride (NaCl), sodium bicarbonate (NaHCO 3 ), and wood vinegar.

상기 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크에 투입되는 살균제는 0.01 내지 2%w/w 농도로 첨가되는 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물 중에서 선택되는 1종 이상을 더 포함할 수 있다. The disinfectant introduced into the plasma amino acid storage tank and the blood cell amino acid storage tank may further include at least one selected from a hot water extract of pumpkin leaves and an ethanol extract of lambtan peel added at a concentration of 0.01 to 2% w/w.

본 발명의 아미노산의 제조방법에 의하면, 전혈(全血)을 혈장과 혈구로 분리하여 사용하며, 혈구의 세포막을 용혈(hemolysis)작용으로 파괴하여 사용함으로써, 빠른 시간 내에 아미노산 전환수율을 높이는 것이 가능하여 저비용 고효율의 아미노산을 제조할 수 있다. According to the amino acid production method of the present invention, whole blood is separated into plasma and blood cells, and the cell membrane of blood cells is destroyed by hemolysis, thereby increasing the amino acid conversion yield in a short time. Thus, amino acids with low cost and high efficiency can be produced.

또한, 본 발명은 잠재적가치가 상당한 도축혈액을 폐기하지 않고 재활용을 확대함으로써, 식량증산, 안전한 먹거리, 토양개량, 환경보전 등 유용한 효과들을 제공할 수 있다. In addition, the present invention can provide useful effects such as increased food production, safe food, soil improvement, and environmental preservation by expanding recycling without discarding slaughter blood of considerable potential value.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 전혈(全血)을 혈장과 혈구를 분리하여 아미노산으로 제조하는 시스템 전체에 대한 블록 구성도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 전혈(全血)을 혈장과 혈구로 분리하여 아미노산으로 제조하는 시스템 전체에 대한 단면도이다.
도 3은 도 2에서 사용된 혈장과 혈구를 분리하는 원심분리기 부분을 확대하여 도시한 개략도이다.
도 4는 도 2에서 사용된 혈장 가수분해 탱크로 pH 보정액과 가수분해효소를 정량 공급하는 제1정량투입장치 부분을 확대하여 도시한 단면도이다.
도 5는 도 2에서 사용된 혈구 가수분해 탱크로 저장액과 pH 보정액 및 가수분해효소를 정량 공급하는 제2정량투입장치 부분을 확대하여 도시한 단면도이다.
1 is a block diagram of the entire system for producing amino acids from whole blood by separating plasma and blood cells according to an embodiment of the present invention.
2 is a cross-sectional view of the entire system for preparing amino acids by separating whole blood into plasma and blood cells according to an embodiment of the present invention.
FIG. 3 is a schematic diagram showing an enlarged portion of the centrifuge used in FIG. 2 for separating blood plasma and blood cells.
FIG. 4 is an enlarged cross-sectional view of a portion of the first quantitative injection device for quantitatively supplying a pH correction solution and a hydrolytic enzyme to the plasma hydrolysis tank used in FIG. 2 .
FIG. 5 is an enlarged cross-sectional view of a portion of a second metering injector for quantitatively supplying a storage solution, a pH correction solution, and a hydrolytic enzyme to the blood cell hydrolysis tank used in FIG. 2 .

이하에서 본 발명을 자세하게 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 고분자 유기물인 전혈(全血)을 혈장과 혈구를 분리하여 저분자 유기물인 아미노산으로 제조하는 아미노산의 제조방법과 상기 제조방법에 사용되는 시스템에 관한 것이다. The present invention relates to a method for producing amino acids, in which whole blood, which is a high molecular weight organic substance, is separated from blood plasma and blood cells to produce amino acids, which are low molecular weight organic substances, and a system used in the manufacturing method.

상기 아미노산의 제조방법은 먼저, 도축현장에서 발생하는 가축과 가금류 및 어류 등의 전혈을 원심분리기를 사용하여 혈장과 혈구로 분리한다. 혈장 가수분해 탱크로 이송된 혈장은 가수분해효소의 활성화에 적합한 온도로 가열하고, pH를 보정한 후, 혈장 가수분해효소를 투입하여 가수분해하여 양질의 혈장아미노산을 수득한다. 혈구 가수분해 탱크로 이송된 혈구는 저장액(hypotonic)을 적절히 첨가하여 가수분해효소의 활성화에 장해요소로 작용하는 혈구세포막을 삼투압원리에 의한 용혈(hemolysis)작용으로 파괴한 후, 가수분해효소의 활성화에 적합한 온도로 가열하고, pH를 보정한 후, 혈구 가수분해효소를 투입하여 가수분해하여 양질의 혈구아미노산을 수득한다. 또한 이물질을 제거하기 위하여 여과기를 거친 혈장아미노산과 혈구아미노산은 부패 등 변질 방지를 위하여 각각 살균 처리한 후 저장(활용)하거나 필요한 경우 이를 혼합하여 저장(활용)할 수 있는 기능을 특징으로 한다.In the manufacturing method of the amino acid, first, whole blood of livestock, poultry, fish, etc. generated at the slaughter site is separated into plasma and blood cells using a centrifuge. Plasma transported to the plasma hydrolysis tank is heated to a temperature suitable for activating the hydrolase, corrected for pH, and hydrolyzed by adding plasma hydrolase to obtain high-quality plasma amino acids. The blood cells transported to the blood cell hydrolysis tank are appropriately added with a storage solution (hypotonic) to destroy the blood cell cell membrane, which acts as an obstacle to the activation of hydrolase, by hemolysis based on the osmotic principle, and then After heating to a temperature suitable for activation, correcting the pH, and hydrolyzing by adding hemocyte hydrolase, high-quality hemocyte amino acids are obtained. In addition, plasma amino acids and blood amino acids that have passed through a filter to remove foreign substances are characterized by a function that can be stored (utilized) after being sterilized separately to prevent deterioration such as corruption, or mixed and stored (utilized) if necessary.

상기의 도축혈액의 전혈(全血)은, 혈장과 혈구로 대별하며 액체성분인 혈장(plasma)은 알부민(albumin), 글로브린(globulin), 피브리노겐(fibrinogen)등으로 구성되어 있으며, 세포성분인 혈구(blood corpuscle)는 적혈구(red blood cell), 백혈구(white blood cell), 혈소판(blood platelet) 등으로 구성되어 있다. 구체적인 성분구성요소는 아래의 표 1과 같다.Whole blood of the above slaughtered blood is divided into plasma and blood cells, and the liquid component, plasma, is composed of albumin, globulin, fibrinogen, etc., and the cell component, Blood corpuscles are composed of red blood cells, white blood cells, and blood platelets. Specific ingredient components are shown in Table 1 below.

Figure 112021058188849-pat00001
Figure 112021058188849-pat00001

본 발명의 아미노산의 제조방법은 도 2에 도시된 아미노산 제조 시스템을 사용하여 수행할 수 있다. 구체적으로, 상기 아미노산 제조 시스템은,The amino acid production method of the present invention can be performed using the amino acid production system shown in FIG. Specifically, the amino acid production system,

가축, 가금류 및 어류의 전혈(全血)을 원심분리시키는 원심분리장치(10);A centrifugal separator (10) for centrifuging whole blood of livestock, poultry and fish;

상기 원심분리장치에서 분리된 혈장이 이송되는, 제1간접가열기(12-1) 및 제1정량투입장치(18)를 포함하는 혈장 가수분해 탱크(12);a plasma hydrolysis tank (12) including a first indirect heater (12-1) and a first metering device (18) to which plasma separated by the centrifugal separator is transported;

상기 원심분리장치에서 분리된 혈구가 이송되는, 제2간접가열기(13-1) 및 제2정량투입장치(19)를 포함하는 혈구 가수분해 탱크(13);a blood cell hydrolysis tank (13) including a second indirect heater (13-1) and a second metering device (19) to which the blood cells separated by the centrifugal separator are transported;

상기 혈장 가수분해 탱크(12)로부터 가수분해된 혈장 아미노산을 여과하는 제1여과기(17);a first filter (17) for filtering the plasma amino acids hydrolyzed from the plasma hydrolysis tank (12);

상기 혈구 가수분해 탱크(13)로부터 가수분해된 혈구 아미노산을 여과하는 제2여과기(17-1); 및a second filter (17-1) for filtering the hydrolyzed blood cell amino acids from the blood cell hydrolysis tank (13); and

상기 제1 및 제2 여과기에서 여과된 혈장 아미노산 및 혈구 아미노산이 각각 이송되는, 제1살균제투입장치(20)를 포함하는 혈장 아미노산 저장탱크(14) 및 제2살균제투입장치(21)를 포함하는 혈구 아미노산 저장탱크(15);를 포함하는 특징을 갖는다.A plasma amino acid storage tank 14 including a first disinfectant input device 20 and a second disinfectant input device 21 to which the plasma amino acids and blood cell amino acids filtered by the first and second filters are transferred, respectively It has a feature including; blood cell amino acid storage tank (15).

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 원심분리장치(10)와 혈장 가수분해 탱크(12); 원심분리장치(10)와 혈구 가수분해 탱크(13); 상기 혈장 가수분해 탱크(12)와 제1여과기(17); 상기 혈구 가수분해 탱크(13)와 제2여과기(17-1); 상기 제1여과기(17)와 혈장 아미노산 저장탱크(14); 및 상기 제2여과기(17-1)와 혈구 아미노산 저장탱크(15);는 각각 이송관에 의해 연결될 수 있다. In one embodiment of the present invention, the centrifugal separator 10 and the plasma hydrolysis tank 12; a centrifugal separator 10 and a blood cell hydrolysis tank 13; the plasma hydrolysis tank 12 and the first filter 17; the blood cell hydrolysis tank 13 and the second filter 17-1; the first filter 17 and the plasma amino acid storage tank 14; and the second filter 17-1 and the blood cell amino acid storage tank 15; may be connected by transfer pipes, respectively.

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 원심분리장치(10)와 혈장 가수분해 탱크(12) 사이의 이송관; 원심분리장치(10)와 혈구 가수분해 탱크(13) 사이의 이송관; 상기 혈장 가수분해 탱크(2)와 제1여과기(17) 사이의 이송관; 상기 혈구 가수분해 탱크(13)와 제2여과기(17-1) 사이의 이송관;에는 각각 이송펌프가 구비될 수 있다. In one embodiment of the present invention, a transfer pipe between the centrifugal separator 10 and the plasma hydrolysis tank 12; a transfer pipe between the centrifugal separator 10 and the blood cell hydrolysis tank 13; a transfer pipe between the plasma hydrolysis tank 2 and the first filter 17; A transfer pump may be provided in each transfer pipe between the blood cell hydrolysis tank 13 and the second filter 17-1.

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 혈장 가수분해 탱크(12), 상기 혈장 아미노산 저장탱크(14), 상기 혈구 가수분해 탱크(13), 및 혈구 아미노산 저장탱크(15)는 각각의 탱크에서 배출되는 생성물을 재처리를 위해 원래의 탱크로 되돌리는 순환배관(24)을 더 포함할 수 있다. In one embodiment of the present invention, the plasma hydrolysis tank 12, the plasma amino acid storage tank 14, the blood cell hydrolysis tank 13, and the blood cell amino acid storage tank 15 are discharged from each tank It may further include a circulation pipe 24 for returning the product to the original tank for reprocessing.

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 각각의 순환배관(24)은 각각의 탱크에서 다음단계로 생성물을 이송하는 이송배관과 일단부가 연통되게 연결되고 타단부는 각각의 탱크에 연결되며, 상기 이송배관과 순환배관의 연결부에는 이송배관과 순환배관을 연통시키고 이송배관을 차단하거나, 이송배관과 순환배관의 연결을 차단하는 밸브가 구비될 수 있다. In one embodiment of the present invention, one end of each circulation pipe 24 is connected in communication with a transfer pipe for transferring products from each tank to the next step and the other end is connected to each tank, A valve connecting the transfer pipe and the circulation pipe and blocking the transfer pipe or blocking the connection between the transfer pipe and the circulation pipe may be provided at the connection part between the pipe and the circulation pipe.

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 혈구 가수분해 탱크(13)의 제2정량투입장치(19)를 통하여 저장액을 공급하는 저장액 공급 탱크를 더 포함할 수 있다. In one embodiment of the present invention, a storage liquid supply tank for supplying a storage liquid through the second metering device 19 of the blood cell hydrolysis tank 13 may be further included.

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 혈구 가수분해 탱크(13)는 상기 저장액 공급 탱크로부터 공급되는 저장액에 의해 혈구세포막을 삼투압원리에 의한 용혈작용에 의해 파괴시키는 작용을 수행할 수 있다. In one embodiment of the present invention, the blood cell hydrolysis tank 13 can perform an action of destroying blood cell membranes by hemolysis based on the osmotic pressure principle with the storage solution supplied from the storage solution supply tank.

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 혈장 아미노산 저장탱크(12) 및 혈구 아미노산 저장탱크(13)로부터 이송되는 혈장 아미노산 및 혈구 아마노산을 혼합하여 저장하는 혼합아미노산 저장탱크(16)를 더 포함할 수 있다. In one embodiment of the present invention, a mixed amino acid storage tank 16 for mixing and storing plasma amino acids and blood amino acids transported from the plasma amino acid storage tank 12 and the blood cell amino acid storage tank 13 may be further included. can

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 제1살균제투입장치(20) 및 제2살균제투입장치(21)는 살균제로서 소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 및 실리신산 중에서 선택되는 1종 이상의 식품첨가물을 첨가할 수 있다. In one embodiment of the present invention, the first disinfectant input device 20 and the second disinfectant input device 21 may add at least one food additive selected from potassium sorbate, sodium benzoate, and silicic acid as a disinfectant. can

본 발명의 일 실시형태에 있어서, 상기 제1살균제투입장치 및 제2살균제투입장치는 살균제로서 염화나트륨(NaCl), 탄산수소나트륨(NaHCO3), 목초액(木醋液), 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물 중에서 선택되는 1종 이상을 더 첨가할 수 있다. In one embodiment of the present invention, the first disinfectant input device and the second disinfectant input device use sodium chloride (NaCl), sodium hydrogen carbonate (NaHCO 3 ), wood vinegar, pumpkin leaf hot water extract and lambtan as disinfectants One or more species selected from the skin ethanol extract may be further added.

상기의 원심분리기(10)는 원심력을 이용한 장치로서 도축혈액의 전혈(全血)을 투입하고 구동모터를 고속으로 회전시키면 비중 차이에 의해서 전혈을 혈장과 혈구로 분리할 수 있다. 산업용으로는 대량으로 혈장과 혈구를 분리할 수 있는 연속식 원심분리기를 사용하는 것이 바람직하다.The centrifugal separator 10 is a device using centrifugal force, and when whole blood of slaughter blood is put in and the driving motor is rotated at high speed, the whole blood can be separated into plasma and blood cells due to the difference in specific gravity. For industrial purposes, it is preferable to use a continuous centrifugal separator capable of separating plasma and blood cells in large quantities.

또한, 상기의 제1정량투입장치(18)와 제2정량투입장치(19)에 의해 혈장 가수분해 탱크(12)와 혈구 가수분해 탱크(13)에 투입되는 pH 보정액은 pH 7.2~7.3인 혈장과 혈구를 가수분해효소의 종류별 활성화에 최적인 pH 4.5~10.5 범위로, 더 바람직하게는 pH 5.5~9.5 범위로 보정하기 위한 것으로, 보정액으로는 산성화에는 시트르산(C6H8O7), 아세트산(C2H4O2) 등을 대표적으로 사용하고 알칼리화에는 수산화나트륨(NaOH), 수산화칼륨(KOH) 등을 대표적으로 사용할 수 있다. In addition, the pH correction solution injected into the plasma hydrolysis tank 12 and the blood cell hydrolysis tank 13 by the first metering device 18 and the second metering device 19 has a pH of 7.2 to 7.3. It is intended to calibrate blood plasma and blood cells to a pH range of 4.5 to 10.5, more preferably to a pH range of 5.5 to 9.5, which is optimal for activation of each type of hydrolytic enzyme. As a correction solution, citric acid (C 6 H 8 O 7 ) is used for acidification. , Acetic acid (C 2 H 4 O 2 ), etc. are typically used, and sodium hydroxide (NaOH), potassium hydroxide (KOH), etc. can be used for alkalization.

상기의 제2정량투입장치(19)를 통하여 혈구가수분해탱크에 투입되는 저장액(hypotonic)은 혈구세포보다 적게 물질이 용해되어 있는 용액을 총칭하며, 가수분해효소의 활성화에 장해요소로 작용하는 혈구세포막을 삼투압원리에 의한 용혈(hemolysis)작용으로 파쇄하기 위한 것으로, 혈구세포액의 농도 0.9%보다 저 농도인 증류수, 수돗물 등을 대표적으로 적용할 수 있으며, 세포막을 파괴하기 위한 저장액의 사용량은 혈구 100 %v/v를 기준으로 50~300%v/v(증류수 기준)로, 더 바람직하게는 80~250%v/v일 수 있다. Hypotonic, which is injected into the blood cell hydrolysis tank through the second metering device 19, is a general term for a solution in which less substances than blood cells are dissolved, and acts as an obstacle to the activation of hydrolase. It is for disrupting blood cell membranes by hemolysis based on the osmotic pressure principle. Distilled water and tap water, which have a concentration lower than 0.9% of blood cell fluid, can be typically applied. The amount of storage solution used to destroy cell membranes is Based on 100% v/v of blood cells, it may be 50 to 300% v/v (based on distilled water), more preferably 80 to 250% v/v.

상기 제1살균제투입장치(20)와 제2살균제투입장치(21)는 살균제의 투입을 위하여 사용된다. 상기 살균제는 가수분해가 완료된 혈장아미노산과 혈구아미노산의 부패 등 변질을 방지하고 품질을 보존하기 위한 것으로 식품첨가물로 사용하는 소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 실리신산 등으로부터 선택되는 1종 이상이 사용될 수 있다. 상기 살균제는 0.01~0.45%w/v로, 더 바람직하게는 0.05~0.35%w/v로 포함될 수 있다. The first sterilant input device 20 and the second sterilant input device 21 are used to inject the sterilant. The disinfectant is to prevent deterioration such as corruption of hydrolyzed blood plasma amino acids and blood cell amino acids and to preserve quality, and at least one selected from potassium sorbate, sodium benzoate, silicic acid, etc. used as a food additive can be used. The disinfectant may be included at 0.01 to 0.45% w/v, more preferably at 0.05 to 0.35% w/v.

또한, 혈장아미노산과 혈구아미노산의 용도와 기능에 따라서는 염화나트륨(NaCl), 탄산수소나트륨(NaHCO3), 목초액(木醋液) 등을 사용할 수도 있으며, 사용범위는 염화나트륨(NaCl)은 5~30%w/v로, 더 바람직하게는 10~20%w/v로, 탄산수소나트륨(NaHCO3)은 0.5~5%w/v로, 더 바람직하게는 1~4%w/v로, 목초액(木醋液)은 10~60%v/v로, 더 바람직하게는 15~40%v/v로 포함될 수 있으며, 필요에 따라서는 이를 적절한 비율에 맞추어 혼용하여 사용할 수도 있다.In addition, sodium chloride (NaCl), sodium hydrogen carbonate (NaHCO 3 ), wood vinegar, etc. can be used depending on the purpose and function of plasma amino acids and blood amino acids. %w/v, more preferably 10-20%w/v, sodium bicarbonate (NaHCO 3 ) is 0.5-5%w/v, more preferably 1-4%w/v, wood vinegar (木醋液) may be included in 10 to 60% v / v, more preferably 15 to 40% v / v, and if necessary, it may be used in combination in an appropriate ratio.

본 발명의 특장점은 첨부한 도면에 의하여 설명되는 실시예에 의하여 충분히 이해할 수 있을 것이다. 본 발명은 유기물의 종류와 규모 등 현장상황에 따라 여러가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예로만 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명의 특장점을 설명하기 위하여 명세서의 구성요소에 대하여 이해를 돕기 위하여 표시한 부호나 단어는 사전적인 의미로만 한정하지 않고 본 발명에서 의도하는 기술적 개념으로 확대해석하는 것이 바람직하다.Features of the present invention will be fully understood by the embodiments described by the accompanying drawings. The present invention can be implemented in a variety of different forms depending on site conditions, such as the type and scale of organic matter, and is not limited to the examples described herein. In addition, in order to explain the features and advantages of the present invention, it is preferable to expand the interpretation of the symbols or words indicated to aid understanding of the components of the specification to the technical concepts intended in the present invention, not limited only to the dictionary meaning.

본 발명은 전혈(全血)을 혈장과 혈구로 분리하여 아미노산을 제조하는 방법과 시스템에 관한 것으로서 도 1 내지 도 5을 참조하여 더욱 자세히 설명한다.The present invention relates to a method and system for preparing amino acids by separating whole blood into plasma and blood cells, and will be described in more detail with reference to FIGS. 1 to 5.

먼저, 본 발명의 구체적인 실시예의 실현을 위하여 전처리에 적용한 원심분리기(10)는 원심력과 비중차이에 의하여 혼합액의 성분을 분리하는 장치로서, 전혈을 혈장과 혈구로 분리시키는 기본원리는 구동부(10-1)와 회전체(10-2)를 이용하여 투입한 전혈을 고속회전 시키면 강력한 원심력이 가해져 혈장(비중 1.02~1.03)과 혈구(비중 1.09~1.10)는 비중차이로 분리가 된다. 더 바람직하게는 비중이 클수록 가해지는 원심력도 커지므로 혈장은 안쪽으로, 혈구는 바깥쪽으로 분리가 되는 것이다. 또한, 전혈을 혈장과 혈구로 분리시키는 원심분리기의 회전속도는 10,000rpm이 최적이다. 10,000rpm을 초과하면 혈구세포의 파쇄현상이 발생하여 효율성이 떨어지므로 주의를 요한다.First, the centrifugal separator 10 applied to the pretreatment for the realization of a specific embodiment of the present invention is a device that separates components of a mixed solution by centrifugal force and a difference in specific gravity. When the input whole blood is rotated at high speed using 1) and the rotating body 10-2, a strong centrifugal force is applied to separate blood plasma (specific gravity 1.02-1.03) and blood cells (specific gravity 1.09-1.10) due to the difference in specific gravity. More preferably, as the specific gravity increases, the applied centrifugal force also increases, so plasma is separated inwardly and blood cells are separated outwardly. In addition, the optimum rotational speed of the centrifuge for separating whole blood into plasma and blood cells is 10,000 rpm. When the speed exceeds 10,000 rpm, blood cells are disrupted and the efficiency decreases, so care is required.

또한, 혈장 가수분해 탱크(12)는 적정온도를 유지할 수 있는 제1간접가열기(12-1); 내용물을 교반하고 혼합할 수 있는 제1교반기(12-2); 및 제1정량펌프(18)를 통하여 pH 보정액과 가수분해효소를 정량투입 할 수 있는 제1정량투입장치; 등을 구비하며, 제1이송펌프(11-1)를 통하여 투입된 혈장을 가수분해를 위한 제반조건을 형성한다. In addition, the plasma hydrolysis tank 12 includes a first indirect heater 12-1 capable of maintaining an appropriate temperature; A first stirrer (12-2) capable of stirring and mixing the contents; and a first quantitative injection device capable of quantitatively injecting the pH correction solution and the hydrolytic enzyme through the first quantitative pump 18; and the like, and forms various conditions for hydrolysis of plasma injected through the first transfer pump 11-1.

혈구 가수분해 탱크(13) 또한, 적정온도를 유지할 수 있는 제2간접가열기(13-1); 내용물을 교반하고 혼합할 수 있는 제2교반기(13-2); 및 제2정량펌프(19)를 통하여 저장액과 pH 보정액 및 가수분해효소를 정량투입 할 수 있는 제2정량투입 장치; 등을 구비하여, 제2이송펌프(11-2)를 통하여 투입된 혈구를 가수분해하기 위한 제반조건을 형성한다.The blood cell hydrolysis tank 13 also includes a second indirect heater 13-1 capable of maintaining an appropriate temperature; A second stirrer (13-2) capable of stirring and mixing the contents; and a second metering device capable of quantitatively injecting the storage solution, the pH correction solution, and the hydrolytic enzyme through the second metering pump 19; etc. are provided to form various conditions for hydrolyzing the blood cells injected through the second transfer pump 11-2.

여기서, 제1간접가열기(12-1)와 제2간접가열기(13-1)는 3중구조로 된 탱크의 중간층에 히터봉을 내장하여 내용물을 간접으로 가열할 수 있는 장치로서 열손실이 적고 온도제어가 용이하여 독립된 열공급원으로 많이 사용하고 있는 추세이다.Here, the first indirect heater (12-1) and the second indirect heater (13-1) are devices that can indirectly heat the contents by incorporating heater rods in the middle layer of the tank having a triple structure, and have low heat loss and temperature It is easy to control, so it is a trend that is widely used as an independent heat supply source.

여기서, 가수분해효소의 활성화에 중요한 요소인 온도는 45~65℃, 더 바람직하게는 50~60℃로 하고, 제1교반기(12-2)와 제2교반기(13-2)의 교반속도는 60~360rpm, 더 바람직하게는 90~180rpm으로 설정하는 것이 바람직하다.Here, the temperature, which is an important factor in activating the hydrolase, is 45 to 65 ° C, more preferably 50 to 60 ° C, and the stirring speed of the first stirrer 12-2 and the second stirrer 13-2 is It is preferable to set it to 60-360 rpm, more preferably 90-180 rpm.

여기서, 제1정량투입장치와 제2정량투입장치에 구비된 pH 보정액은, pH 7.2~7.3 범위에 있는 혈장과 혈구의 가수분해에 투입되는 가수분해효소의 종류별 최적의 조건인 pH 4.5~10.5 범위로, 더 바람직하게는 pH 5.5~9.5 범위로 보정하기 위한 것으로, 산성화에는 시트르산(C6H8O7), 아세트산(C2H4O2) 등을 알칼리화에는 수산화나트륨(NaOH), 수산화칼륨(KOH) 등을 대표적으로 사용한다. 사용량은 투입하는 가수분해효소의 기질 특이성, 적정온도 등을 감안하여 통상의 pH 보정방법에 의하여 산정하여야 한다.Here, the pH correction solution provided in the first and second quantitative injection devices is pH 4.5 to 10.5, which is the optimal condition for each type of hydrolytic enzyme used for hydrolysis of blood plasma and blood cells in the range of pH 7.2 to 7.3. In the range, more preferably to correct the pH in the range of 5.5 to 9.5, citric acid (C 6 H 8 O 7 ), acetic acid (C 2 H 4 O 2 ) for acidification, sodium hydroxide (NaOH), hydroxide for alkalinization Potassium (KOH) and the like are typically used. The amount used should be calculated by a conventional pH correction method, taking into account the specificity of the substrate of the hydrolase to be added, the appropriate temperature, and the like.

여기서, 제2정량투입장치에 구비된 저장액(hypotonic)은 혈구세포보다 적게 물질이 용해되어 있는 용액을 총칭하며, 가수분해효소의 활성화에 가장 큰 장해요소로 작용하는 혈구세포막을 삼투압원리에 의한 용혈(hemolysis)작용으로 파괴하기 위한 것으로, 혈구세포액의 농도 0.9%보다 저 농도인 증류수, 수돗물 등을 대표적으로 적용할 수 있다. 세포막을 파쇄하기 위한 저장액의 사용량은 혈구 100%v/v를 기준으로 50~300%v/v(증류수 기준)로, 더 바람직하게는 80~250%v/v로 한다. 물론 저장액을 상기에서 제시한 %v/v보다 많이 사용하면 보다 빠른 세포막 파쇄로 가수분해시간이 단축될 수는 있으나 농도저하로 품질과 효과면에서 불리할 수도 있음을 고려하여야 한다.Here, the hypotonic provided in the second metering device is a general term for a solution in which substances less than that of blood cells are dissolved. It is intended to be destroyed by hemolysis, and distilled water, tap water, etc., which have a concentration lower than 0.9% of the blood cell and cell fluid, can be applied representatively. The amount of the stock solution used to disrupt cell membranes is 50 to 300% v/v (based on distilled water) based on 100% v/v of blood cells, and more preferably 80 to 250% v/v. Of course, if the stock solution is used more than the % v / v presented above, the hydrolysis time may be shortened due to faster cell membrane disruption, but it should be considered that the quality and effect may be disadvantageous due to a decrease in concentration.

여기서, 제1정량투입장치와 제2정량투입장치를 통하여 투입되는 혈장 또는 혈구 가수분해효소는 미생물기원으로 발효 및 배양하여 농축한 것으로서 기질인 혈장과 혈구의 주된 성분인 단백질과 미량이지만 잔존하는 지방, 다당류, 섬유소 등을 복합적으로 가수분해할 수 있는 것을 의미한다. 상기의 성분별분해효소로서 단백질 분해효소로는 protex, trypsin, Bromeline, papain, actinidain, Flavourzyme, Protamex, collagenase, Esperase, Liquanase, Savinase, Everlase 등에서 선택되는 1종 이상이 사용될 수 있으며; 지방 분해효소로는 Lipex, Lipopan, Palatase, Lecitase, Lactozyme 등에서 선택되는 1종 이상이 사용될 수 있으며; 다당류 분해효소로는 Stainzyme, Termamyl, Glucoamylase, Pullulanase 등에서 선택되는 1종 이상이 사용될 수 있으며; 섬유소 분해효소로는 Carezyme, Celluclean, xylanase, cellulase 등에서 선택되는 1종 이상이 사용될 수 있다. 상기의 성분 별 분해효소는 상업용으로나 자체 제조하는 등 다양하게 존재하지만 가수분해 효율을 높이려면 온도, pH, type(endo,exe) 등 기질의 특성에 맞추어 성분별 적절한 비율로 배합한 가수분해효소를 사용하는 것이 바람직하다. 예를 들어, 상기 가수분해효소는 0.1%v/v 내지 2%v/v로 사용될 수 있으며, 더 바람직하게는 0.2%v/v 내지 0.6%v/v로 사용될 수 있다. Here, the plasma or blood cell hydrolase introduced through the first and second metering devices is fermented and cultured with a microbial origin and concentrated. Plasma as a substrate, protein as a main component of blood cells, and trace amounts of remaining fat , polysaccharide, cellulose, etc. means that it can hydrolyze complexly. One or more of the proteolytic enzymes selected from the group consisting of protex, trypsin, bromeline, papain, actinidain, Flavorzyme, Protamex, collagenase, Esperase, Liquanase, Savinase, Everlase, etc. may be used as the above component-specific enzymes; As the lipolytic enzyme, one or more selected from Lipex, Lipopan, Palatase, Lecitase, and Lactozyme may be used; As the polysaccharide degrading enzyme, one or more selected from Stainzyme, Termamyl, Glucoamylase, and Pullulanase may be used; As the fibrinolytic enzyme, one or more selected from Carezyme, Celluclean, xylanase, cellulase, and the like may be used. Digestive enzymes for each component above exist in various ways, such as commercial or self-manufactured. It is preferable to use For example, the hydrolase may be used at 0.1% v/v to 2% v/v, more preferably at 0.2% v/v to 0.6% v/v.

이와 같이 전혈을 혈장과 혈구로 분리한 상태에서 가수분해효소의 활성에 적합한 온도, 교반속도, pH 보정 및 저장액으로 세포막 파괴 등의 제반조건이 구비된다면, 혈장과 혈구 각각 가수분해효소투입 후 98%이상의 높은 아미노산 전환율까지는 공통으로 약120~150분 정도밖에 소요되지 않는다. 이것은 통상의 방법인 전혈을 그대로 사용할 경우 90% 이상의 아미노산전환율까지 약 360~540분 이상 소요되는 것과 비교한다면 단시간내 아미노산전환율이 실로 획기적이다.In this way, in the state where whole blood is separated into plasma and blood cells, if all conditions such as temperature, agitation speed, pH correction suitable for the activity of hydrolase, and destruction of cell membranes with storage solution are provided, plasma and blood cells can be 98 In common, it only takes about 120 to 150 minutes to achieve a high amino acid conversion rate of more than %. Compared to the conventional method, which takes about 360 to 540 minutes or more to reach an amino acid conversion rate of 90% or more when whole blood is used as it is, the amino acid conversion rate in a short time is truly epoch-making.

상기와 같이 혈장 가수분해 탱크(12)에서 수득한 혈장아미노산은 제3이송펌프(11-3)를 통하여 잔존하는 이물질을 제거하는 제1여과기(17)를 거쳐 혈장아미노산저장탱크(14)로 이송되고, 혈구 가수분해 탱크(13)에서 수득한 혈구아미노산 또한 제4이송펌프(11-4)를 통하여 잔존하는 이물질을 제거하는 제2여과기(17-1)를 거쳐 혈구아미노산저장탱크(15)로 이송된다.The plasma amino acids obtained from the plasma hydrolysis tank 12 as described above are transferred to the plasma amino acid storage tank 14 through the third transfer pump 11-3 and the first filter 17 for removing remaining foreign substances. The blood cell amino acid obtained from the blood cell hydrolysis tank 13 is also transferred to the blood cell amino acid storage tank 15 through the second filter 17-1 that removes remaining foreign substances through the fourth transfer pump 11-4. are transferred

또한, 혈장아미노산저장탱크(14)는 가수분해가 완료된 혈장아미노산을 교반하고 혼합할 수 있는 제3교반기(14-1) 및 제3정량펌프를 통하여 살균제를 정량투입할 수 있는 제1살균제투입장치(20) 등을 구비한다.In addition, the plasma amino acid storage tank 14 has a third stirrer 14-1 capable of agitating and mixing hydrolyzed plasma amino acids and a first disinfectant input device capable of quantitatively injecting the disinfectant through a third metering pump. (20) etc. are provided.

혈구아미노산저장탱크(15)는 또한, 가수분해가 완료된 혈구아미노산을 교반하고 혼합할 수 있는 제4교반기(15-1) 및 제4정량펌프를 통하여 살균제를 정량투입 할 수 있는 제2살균제투입장치(21) 등을 구비한다.The blood cell amino acid storage tank 15 also includes a fourth stirrer 15-1 capable of stirring and mixing hydrolyzed blood cell amino acids and a second disinfectant input device capable of quantitatively injecting the disinfectant through a fourth metering pump (21) etc. are provided.

여기서, 제1살균제투입장치와 제2살균제투입장치에 구비된 살균제는 가수분해가 완료된 혈장아미노산과 혈구아미노산의 부패 등 변질을 방지하고 품질을 보존하기 위한 것으로 식품첨가물로 사용하는 소르빈산 칼륨(Potassium sorbate), 벤조산나트륨(Sodium benzoate), 실리신산(Salicylic acid) 등에서 선택되는 1종 이상을 성분으로 한다. 이들의 사용농도는 0.01~0.45%w/v로, 더 바람직하게는 0.05~0.35%w/v이다.Here, the disinfectant provided in the first disinfectant input device and the second disinfectant input device is to prevent deterioration such as corruption of hydrolyzed plasma amino acids and blood cell amino acids and to preserve quality. Potassium sorbate used as a food additive ), sodium benzoate, salicylic acid, etc. as a component. Their use concentration is 0.01 to 0.45% w/v, more preferably 0.05 to 0.35% w/v.

또한, 혈장아미노산과 혈구아미노산의 용도와 기능에 따라서는 염화나트륨(NaCl), 탄산수소나트륨(NaHCO3), 목초액(木醋液) 등 중에서 선택되는 1종 이상을 사용할 수도 있으며, 사용농도는 염화나트륨(NaCl)은 5~30%w/v로, 더 바람직하게는 10~20%w/v로; 탄산수소나트륨(NaHCO3)은 0.5~5%w/v로, 더 바람직하게는 1~4%w/v로; 목초액(木醋液)은 10~60%v/v로, 더 바람직하게는 15~40%v/v로 하며, 필요에 따라서는 이를 적절한 비율에 맞추어 혼용하여 사용할 수도 있는 것이다.In addition, depending on the use and function of plasma amino acids and blood amino acids, one or more types selected from sodium chloride (NaCl), sodium hydrogen carbonate (NaHCO 3 ), wood vinegar, etc. may be used, and the concentration used is sodium chloride ( NaCl) at 5-30% w/v, more preferably at 10-20% w/v; Sodium bicarbonate (NaHCO 3 ) is 0.5 to 5% w/v, more preferably 1 to 4% w/v; Wood vinegar (木醋液) is 10 ~ 60%v / v, more preferably 15 ~ 40%v / v, and if necessary, it may be used in combination according to the appropriate ratio.

상기 혈장아미노산 또는 혈구아미노산의 살균 처리 후에, 식물 항균 추출물을 0.01 내지 2%w/w 농도로 첨가하는 경우, 아미노산의 보존기간을 더 늘릴 수 있다. 상기 식물 항균 추출물로는 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물 중에서 선택되는 1종 이상을 들 수 있다. 특히 이들을 3:7 내지 7:3의 중량비로 혼합하여 사용하는 경우 서로 항균기능이 상보적으로 작용하며, 시너지 효과를 제공하므로 바람직하다.After sterilization of the blood plasma amino acids or blood cell amino acids, when the plant antibacterial extract is added at a concentration of 0.01 to 2% w/w, the shelf life of amino acids can be further increased. The plant antibacterial extract may include at least one selected from hot water extract of pumpkin leaf and ethanol extract of lambtan peel. In particular, when they are mixed and used in a weight ratio of 3:7 to 7:3, their antibacterial functions are complementary to each other, and it is preferable because they provide a synergistic effect.

호박잎은 식이섬유소와 비타민이 풍부하고 칼로리는 낮아, 다이어트와 피부미용에 좋으며, 베타카로틴 성분이 함유되어 암을 예방하며, 루테인 성분이 들어있어 눈의 피로를 완화해주며, 특히 칼륨도 풍부해서 혈관을 깨끗하게 해주고 콜레스테롤 수치를 낮추는 것으로 알려져 있다. Pumpkin leaves are rich in dietary fiber and vitamins, low in calories, good for diet and skin care, contain beta-carotene to prevent cancer, contain lutein to relieve eye fatigue, and are especially rich in potassium to help blood vessels. It is known to cleanse the stomach and lower cholesterol levels.

또한, 항산화 효능도 있어, 노화 방지는 물론 성인병을 예방하며, 피로 해소와 구강 건강에 좋으며, 손발이 차거나 빈혈이 있는 사람에게 좋은 것으로 알려져 있다. In addition, it has an antioxidant effect, preventing aging as well as preventing adult diseases, relieving fatigue and improving oral health, and is known to be good for people with cold hands and feet or anemia.

본 발명자들은 상기와 같은 호박잎의 효능에 주목하여 연구하던 중 호박잎 열수추출물이 항균 활성을 갖는 것을 발견하여 본 발명에 적용하였다. The present inventors, while paying attention to the efficacy of pumpkin leaves as described above, found that the hot-water extract of pumpkin leaves had antibacterial activity and applied it to the present invention.

상기 람부탄(Rambutan)은 인도네시아어로 “람붓(Rambut)”은 '털'을 뜻한다. 빨간색과 노란색이 있는데 노란색이 더 달고 맛있다. 껍질을 손으로 쏙 까면 투명한 속살이 나오는데 단맛이다. The Rambutan is Indonesian and “Rambut” means 'hair'. There are red and yellow, but the yellow is sweeter and more delicious. If you peel the skin open with your hands, the transparent flesh comes out, which is sweet.

본 발명자들은 상기 람브탄 껍질 에탄올 추출물이 항균 활성을 갖는 것을 발견하여 본 발명에 적용하였다. The present inventors found that the lambtan peel ethanol extract had antibacterial activity and applied it to the present invention.

본 발명에서, 제3교반기(14-1)과 제4교반기(15-1)는 변질방지와 품질보전을 위한 살균제와 용도에 따라 추가로 투입되는 첨가물을 고르게 혼합하는 기능을 한다. 교반속도는 숙성 및 안정화를 위하여 10~60rpm, 더 바람직하게는 20~50rpm으로 설정하는 것이 바람직하다.In the present invention, the third agitator 14-1 and the fourth agitator 15-1 function to evenly mix the disinfectant for preventing deterioration and preserving quality and the additives additionally added according to the purpose. The stirring speed is preferably set to 10 to 60 rpm, more preferably 20 to 50 rpm for aging and stabilization.

상기와 같이 변질방지와 품질보전을 위하여 살균처리가 되고 숙성 및 안정화가 된 혈장아미노산과 혈구아미노산은 각각 그 용도에 맞게 적절하게 사용하거나 각각의 저장탱크에 저장할 수도 있다.Plasma amino acids and blood cell amino acids that have been sterilized, matured, and stabilized for the purpose of preventing deterioration and preserving quality as described above can be appropriately used or stored in separate storage tanks according to their intended use.

또한, 혈장아미노산저장탱크(14)와 1차저장된 혈장아미노산은 제5이송펌프(11-5)를 통하여 혈장혈구혼합아미노산저장탱크(16)로 이송하고 혈구아미노산저장탱크(15)에 1차저장된 혈구아미노산은 제6이송펌프(11-6)를 통하여 혈장혈구혼합아미노산저장탱크(16)로 이송한다.In addition, plasma amino acids primarily stored in the plasma amino acid storage tank 14 are transported to the plasma blood cell mixed amino acid storage tank 16 through the fifth transfer pump 11-5, and primarily stored in the blood cell amino acid storage tank 15. Blood cell amino acids are transferred to the plasma blood cell mixed amino acid storage tank 16 through the sixth transfer pump 11-6.

여기서, 혈장혈구혼합아미노산저장탱크(16)는 이송되어온 혈장아미노산과 혈구아미노산을 교반하고 혼합할 수 있는 제5교반기(16-1)와 투입구와 배출구가 탱크내부에 순환하도록 연결된 제7이송펌프(11-7)를 구비한다. 5교반기(16-1)의 교반속도는 제3교반기(14-1)과 제4교반기(15-1)와 같이 숙성 및 안정화를 위하여 10~60rpm, 더 바람직하게는 20~50rpm으로 설정하는 것이 바람직하다.Here, the plasma and blood cell mixed amino acid storage tank 16 includes a fifth agitator 16-1 capable of stirring and mixing the transferred plasma amino acids and blood cell amino acids, and a seventh transfer pump ( 11-7). 5 The stirring speed of the agitator (16-1) is set to 10 to 60 rpm, more preferably 20 to 50 rpm for aging and stabilization like the third agitator (14-1) and the fourth agitator (15-1). desirable.

여기서, 상기한 제3~제7 이송펌프(11-3~7)는 이송기능은 물론, 투입구와 배출구가 탱크내부에 순환하도록 연결되어 있어 내용물을 교반하고 혼합하는 보조적인 역할을 기대할 수 있다.Here, the above-described third to seventh transfer pumps 11-3 to 7 are connected so that the inlet and outlet circulate inside the tank as well as the transfer function, so that they can be expected to play an auxiliary role of agitating and mixing the contents.

이와 같이, 본 발명의 실시예처럼 상기한 본 발명은 고분자 유기물인 가축과 가금류 및 어류 등의 전혈(全血)을 혈장과 혈구로 분리하여 저분자 유기물인 아미노산으로 제조하는 시스템 및 그 방법에 관한 것으로, 혈액전용 원심분리기 등을 통하여 전혈을 혈장과 혈구로 분리하는 단계; 분리된 혈장과 혈구를 가열, 교반, 첨가제 등 각각의 가수분해조건을 구비한 혈장 가수분해 탱크와 혈구 가수분해 탱크로 각각 이송하는 단계; 각각의 탱크로 투입된 혈장과 혈구를 가수분해효소에 의하여 아미노산으로 전환시키는 가수분해단계; 가수분해가 완료되어 수득한 혈장아미노산과 혈구아미노산은 이물질제거를 위하여 각각 별도의 여과기를 거친 후 혈장아미노산저장탱크와 혈구아미노산저장탱크로 이송하고, 또한 부패 등 변질방지를 위하여 각각 살균 처리한 후 저장하거나 필요한 용도로 활용하는 1차저장단계; 혈장아미노산저장탱크와 혈구아미노산저장탱크에 1차저장된 혈장아미노산과 혈구아미노산을 혼합아미노산저장탱크로 이송하여 저장하거나 이에 맞는 필요한 용도로 활용할 수 있는 2차저장단계; 등 고분자 유기물인 전혈(全血)을 빠른 시간내에 저분자유기물인 아미노산으로 전환수율을 높일 수 있는 저비용 고효율구조의 진일보한 기술과 공정을 적용한 시스템과 그 방법을 제시하였다.As such, the present invention described above, like an embodiment of the present invention, separates whole blood such as livestock, poultry, and fish, which are high molecular weight organic substances, into plasma and blood cells, and prepares amino acids, which are low molecular weight organic substances, to a system and method thereof. Separating whole blood into plasma and blood cells using a centrifugal separator for blood; transferring the separated plasma and blood cells to a plasma hydrolysis tank and a blood cell hydrolysis tank equipped with respective hydrolysis conditions such as heating, stirring, and additives; a hydrolysis step of converting plasma and blood cells injected into each tank into amino acids by a hydrolase; Plasma amino acids and blood cell amino acids obtained from hydrolysis are transferred to plasma amino acid storage tanks and blood cell amino acid storage tanks after passing through separate filters to remove foreign substances, and also sterilized and stored separately to prevent deterioration such as corruption. Primary storage step to use for necessary purposes; A secondary storage step in which the plasma amino acids and blood amino acids stored primarily in the plasma amino acid storage tank and the blood cell amino acid storage tank are transported to the mixed amino acid storage tank for storage or used for necessary purposes; A low-cost, high-efficiency structure that can increase the conversion yield of whole blood, a high-molecular-weight organic substance, into amino acids, a low-molecular-weight organic substance, in a short period of time, and a system and method applying advanced technology and processes are presented.

이상과 같이, 본 발명에 대한 특장점을 한정된 실시예를 제시한 도면을 기반으로 설명하였으나, 본 발명은 이것에 만 국한하지 않고 통상의 관련기술 분야에서 상기의 명세서 청구항목의 유사한 조건과 범위내라면 다양하게 수정 또는 확대가 가능함은 당연하다.As described above, the features and advantages of the present invention have been described based on the drawings showing limited embodiments, but the present invention is not limited thereto and is within the similar conditions and scope of the above specification claims in the general related art field. It is natural that it can be modified or expanded in various ways.

본 발명의 실시예에서 제시한 전혈을 혈장과 혈구로 분리하여 아미노산으로 제조하는 시스템과 그 방법을 실증하고자 실험을 통해 상세히 설명한다, 하기의 실험은 본 발명을 예시하기 위한 일사례인 것으로 여기에 한정하는 것은 아님을 밝혀 둔다.In order to demonstrate the system and method for separating whole blood into plasma and blood cells and producing amino acids presented in Examples of the present invention, an experiment will be described in detail. The following experiment is an example for illustrating the present invention. Note that it is not limiting.

1. 실험을 위한 준비물1. Materials for the experiment

시료 1: 소(牛)도축과정에서 발생한 전혈(2℃ 냉장보관)Sample 1: Whole blood generated during cattle slaughter (refrigerated storage at 2°C)

시료 2: 시료 1을 연속식원심분리기(10,000rpm, 100 ℓ/h로 분리한 혈장과 혈구(2℃냉장보관)Sample 2: Plasma and blood cells separated from sample 1 in a continuous centrifugal separator (10,000 rpm, 100 ℓ/h (refrigerated at 2℃)

(소량을 사용할 경우 중력에 의한 혈구의 침강효과를 이용하여 혈장과 혈구가 층을 이루도록 하여 분리하여 사용할 수도 있다.)(If a small amount is used, plasma and blood cells may be layered and used separately by using the sedimentation effect of blood cells by gravity.)

pH 보정액: NaOH 5% 수용액(pH 14.00), 시트르산(C6H8O7) 10% 수용액(pH 1.68)pH correction solution: NaOH 5% aqueous solution (pH 14.00), citric acid (C 6 H 8 O 7 ) 10% aqueous solution (pH 1.68)

저장액: 증류수(DW)Stock solution: distilled water (DW)

가수분해효소: 상용화 된 효소를 기질의 최적활성 운전조건인 pH, 온도 등 특성에 맞게 6종을 혼합하여 사용Hydrolase: Commercially available enzymes are used by mixing 6 types according to the characteristics such as pH and temperature, which are the optimal operating conditions for substrate activity.

단백질분해효소 3종(Bromeline 20%v/v + Savinase 30%v/v + Flavourzyme 40%v/v) + 지방분해효소1종(Lipex 6%v/v) + 다당류분해효소1종(Glucoamylase 2%v/v) + 섬유소분해효소1종(Carezyme 2%v/v)3 proteolytic enzymes (Bromeline 20%v/v + Savinase 30%v/v + Flavorzyme 40%v/v) + 1 lipolytic enzyme (Lipex 6%v/v) + 1 polysaccharide enzyme (Glucoamylase 2 %v/v) + 1 type of fibrinase (Carezyme 2%v/v)

살균제: 2종 혼합사용-Potassium sorbate 80%w/w + NaHCO3 20%w/wSterilizer: 2 types of mixed use-Potassium sorbate 80%w/w + NaHCO 3 20%w/w

실험결과 유리아미노산분석은 아미노산 분석기(Amino Acid Analyzer L-8900)를 사용하였다.As a result of the experiment, an amino acid analyzer (Amino Acid Analyzer L-8900) was used for free amino acid analysis.

Specification of Amino Acid Analyzer(L-8900) Specification of Amino Acid Analyzer (L-8900)

1. Performance; Using protein hydrolysate analysis Post-reaction type (Ninhydrin reagent)1. Performance; Using protein hydrolysate analysis Post-reaction type (Ninhydrin reagent)

2. Detection Limit (DL); 3pmol(S/N 2, Asp) 3. Detecter; Photometer 440, 570㎚ 4. Inject Vol: 20㎕ 5. Sample cycle time; PH 53min, PF 148min2. Detection Limit (DL); 3 pmol (S/N 2 , Asp) 3. Detector; Photometer 440, 570nm 4. Inject Vol: 20 μl 5. Sample cycle time; PH 53min, PF 148min

실험 1: 본 발명의 혈장의 시간별 가수분해물 유리아미노산 함량 측정Experiment 1: Determination of free amino acid content of hydrolyzate over time in plasma of the present invention

연속식원심분리기로 분리한 혈장의 성분을 AOAC(Association of Official Analytical Chemists) 표준분석법에 따라 정량분석한 결과는 아래의 표 2와 같았다.The results of quantitative analysis of components of the plasma separated by the continuous centrifuge according to the AOAC (Association of Official Analytical Chemists) standard analysis method are shown in Table 2 below.

Figure 112021058188849-pat00002
Figure 112021058188849-pat00002

먼저, 혈장을 가수분해하고자 시트르산(C6H8O7) 10% 수용액(pH 1.68)으로 가수분해효소의 종류별 활성화에 최적인 pH 5.50로 보정하였고, 온도는 52℃로, 교반속도는 120rpm으로 유지하였다. 상기와 같은 조건을 구비한 상태에서 첨가한 가수분해효소의 투입량은 0.3%v/v, 0.5%v/v, 0.7%v/v로 각각 달리하여 가수분해효소 투입 후 60분경과시점부터 30분 간격으로 가수분해물의 유리아미노산함량을 분석하였다. 유리아미노산분석에 사용한 시료는 유리아미노산 표준시료와 동일한 농도로 희석하여 일관성과 정확성을 유지하였고, 표 2 혈장의 가수분해효소 투입량별 시간별 가수분해물에 대한 분석결과는 아래의 표 3에 나타내었다.First, in order to hydrolyze plasma, the pH was adjusted to 5.50, which is optimal for the activation of each type of hydrolase, with a 10% aqueous solution of citric acid (C 6 H 8 O 7 ) (pH 1.68), the temperature was 52 ° C, and the stirring speed was 120 rpm. maintained. The input amount of the hydrolase added under the above conditions was 0.3%v/v, 0.5%v/v, and 0.7%v/v, respectively, and 30 minutes after 60 minutes after the hydrolytic enzyme was added. At intervals, the free amino acid content of the hydrolyzate was analyzed. The sample used for free amino acid analysis was diluted to the same concentration as the free amino acid standard sample to maintain consistency and accuracy.

Figure 112021058188849-pat00003
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상기 표 3에서 확인되는 바와 같이, 유리아미노산분석결과를 보면 가수분해효소 0.5%v/v와 0.7%v/v는 시간대별 가수분해능력에 거의 차이가 나지 않고, 120분이 경과하는 시점에서 아미노산전환율이 96~98%에 도달한 후, 더 이상 시간이 경과하여도 큰 변화가 없었다. 가수분해효소 0.3%v/v는 150분이 경과한 시점에 아미노산전환율이 89%에 도달한 후 더 이상 시간이 경과하여도 전환율이 높아지지 않았다. 상기의 결과로 볼 때 가수분해효소 투입량은 0.5%v/v가 경제성과 효율성 측면에서 적합하다고 판단된다. 또한, 혈장은 혈구와 같이 세포막 파쇄가 필요하지 않고 수분함량 91% 등 가수분해효소의 활성화에 최적의 환경이 조성되어 최단시간인 120분만에 아미노산전환율이 96~98%에 이르는 것으로 판단된다.As confirmed in Table 3, the results of free amino acid analysis show that hydrolytic enzymes of 0.5% v/v and 0.7% v/v show little difference in hydrolytic ability by time, and the amino acid conversion rate at the time of 120 minutes has elapsed. After reaching 96-98%, there was no significant change over time. After 0.3% v/v of hydrolase reached 89% amino acid conversion rate after 150 minutes, the conversion rate did not increase over time. From the above results, it is judged that 0.5% v / v of the hydrolase input is suitable in terms of economics and efficiency. In addition, plasma does not require cell membrane disruption like blood cells, and it is judged that the amino acid conversion rate reaches 96 to 98% in 120 minutes, the shortest time, because an optimal environment is created for the activation of hydrolases, such as a water content of 91%.

실험 2: 혈구의 시간별 가수분해물 유리아미노산 함량Experiment 2: Free amino acid content of hydrolyzate over time in blood cells

연속식원심분리기로 분리한 혈구의 성분을 AOAC(Association of Official Analytical Chemists) 표준분석법에 따라 정량분석한 결과는 아래의 표 4와 같았다.The results of quantitative analysis of components of blood cells separated by continuous centrifugation according to the Association of Official Analytical Chemists (AOAC) standard analysis are shown in Table 4 below.

Figure 112021058188849-pat00004
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먼저, 가수분해효소의 활성화에 장해요소로 작용하는 혈구세포막을 용혈(파괴)하기 위하여 저장액으로 증류수(DW)를 사용하였다. 혈구총량대비 증류수(DW) 첨가량에 따른 수분과 단백질의 함량은 아래의 표 5와 같았다.First, distilled water (DW) was used as a stock solution to hemolyze (destroy) blood cell membranes that act as an obstacle to the activation of hydrolase. The contents of water and protein according to the amount of distilled water (DW) added to the total blood count were shown in Table 5 below.

Figure 112021058188849-pat00005
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상기 표 5의 결과에 의하면, 증류수(DW)를 첨가하지 않은 혈구와 혈구총량대비 증류수(DW)를 첨가한 3종(80%v/v, 150%v/v, 231%v/v) 총 4종에 대하여 시트르산(C6H8O7) 10% 수용액(pH 1.68)으로 가수분해효소의 종류별 활성화에 최적인 pH 5.50로 보정하였고, 온도는 52℃로, 교반속도는 120rpm으로 유지하였다. 상기와 같은 조건을 구비한 상태에서 가수분해효소의 투입량은 실험 1의 결과와 같이 최적인 0.5%v/v로 하였다. 가수분해효소 투입 후 120min, 150min, 180min에서 가수분해물의 유리아미노산함량을 분석하였다. 이 또한 유리아미노산분석에 사용한 시료는 유리아미노산 표준시료와 동일한 농도로 희석하여 일관성과 정확성을 유지하였고, 표 5 혈구4종의 가수분해효소 투입에 따른 시간별 가수분해물에 대한 분석결과는 아래의 표 6과 같았다.According to the results of Table 5, the blood cells without distilled water (DW) and the total amount of blood cells with distilled water (DW) added (80% v / v, 150% v / v, 231% v / v) total For the four types, the pH was corrected to 5.50, which is optimal for the activation of each type of hydrolase, with a 10% aqueous solution of citric acid (C 6 H 8 O 7 ) (pH 1.68), and the temperature was maintained at 52 ° C and the stirring speed was 120 rpm. Under the above conditions, the input amount of the hydrolase was set to 0.5% v/v, which is optimal, as in Experiment 1. After adding the hydrolytic enzyme, the free amino acid content of the hydrolyzate was analyzed at 120 min, 150 min, and 180 min. In addition, the sample used for free amino acid analysis was diluted to the same concentration as the free amino acid standard sample to maintain consistency and accuracy. It was like

Figure 112021058188849-pat00006
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상기 표 6에서 확인되는 바와 같이, 유리아미노산분석 결과 증류수(DW)를 첨가하지 않은 혈구는 아미노산전환율이 120분 경과시점 25%에서 180분이 경과하는 시점에서도 28%수준으로 가수분해가 더 이상 진행되지 않음을 보여준다. 이것은 혈구세포를 용혈(파괴)하지 않은 상태에서는 세포막이 가수분해효소의 활성화에 장해요소로 작용하고 있음을 분명히 보여준다. 증류수(DW)를 80%v/v 첨가한 혈구는 아미노산전환율이 120분 경과시점 65%에서 180분이 경과하는 시점은 72%수준으로 가수분해가 더 이상 진행되지 않는 한계를 보여주고 있어 혈구세포가 완전히 용혈(파괴)되지 않았음을 보여준다. 증류수(DW)를 150%v/v, 231%v/v 첨가한 혈구는 120분 경과시점에서 96~97%이상의 높은 아미노산 전환율을 보이고 있어 혈구세포가 완전히 용혈(파괴)되었음을 알 수 있다. 상기의 결과로 볼 때 혈구의 아미노산 전환율을 고려한 증류수(DW)첨가는 150%v/v 전후가 적합하다고 판단된다. 물론 혈구세포를 빠르게 용혈(파쇄)시키기 위해서 증류수(DW)를 150%v/v이상으로 많이 사용하면 아미노산전환율을 빠르게 높일 수는 있겠으나 농도저하 등 경제성을 고려하여야 할 것이다.As confirmed in Table 6, as a result of free amino acid analysis, blood cells without distilled water (DW) had an amino acid conversion rate of 25% after 120 minutes to 28% after 180 minutes, and hydrolysis did not proceed any further. show that it is not This clearly shows that the cell membrane acts as an obstacle to the activation of hydrolase in the state in which blood cells are not lysed (destroyed). In blood cells with 80% v/v of distilled water (DW) added, the amino acid conversion rate was 65% after 120 minutes and 72% after 180 minutes, showing the limit that hydrolysis does not proceed any further. It shows that it is not completely hemolyzed (destroyed). The blood cells to which 150% v/v and 231% v/v of distilled water (DW) were added showed a high amino acid conversion rate of 96 to 97% or more after 120 minutes, indicating that the blood cells were completely lysed (destroyed). From the above results, it is judged that around 150% v/v is appropriate for the addition of distilled water (DW) considering the amino acid conversion rate of blood cells. Of course, if distilled water (DW) is used more than 150% v/v in order to rapidly hemolyze (disrupt) blood cells, the amino acid conversion rate can be rapidly increased, but economic feasibility such as concentration reduction should be considered.

실험 3: 항균 활성을 갖는 식물 추출물 제조Experiment 3: Preparation of plant extracts with antibacterial activity

본 발명에서 제조된 혈장아미노산과 혈구아미노산은 부패 등 변질 방지를 위하여 각각 살균 처리한 거친다. 이 때, 살균 처리 완료 후, 하기와 같은 호박잎 열수추출, 람브탄 껍질 에탄올 추출물, 또는 이들을 혼합한 항균 추출물을 0.01 내지 2%w/w로 첨가하는 경우, 아미노산의 보존기간을 더 늘릴 수 있다. Plasma amino acids and blood cell amino acids prepared in the present invention are sterilized respectively to prevent deterioration such as corruption. At this time, after the sterilization treatment is completed, when the following hot water extract of pumpkin leaves, ethanol extract of lambtan peel, or an antibacterial extract obtained by mixing them is added at 0.01 to 2% w/w, the shelf life of amino acids can be further increased.

(1)(One) 호박잎 열수추출의 제조Preparation of Pumpkin Leaf Hot Water Extraction

세절한 호박잎 500g 및 물 1.5 리터를 추출용기에 넣고, 전체부피가 1 리터가 될 때까지 끓여주었다. 다음으로 여과하여 추출액을 분리한 후, 다시 부피가 1/2이 될 때까지 농축하여 호박잎 열수추출물을 제조하였다.500 g of cut pumpkin leaves and 1.5 liters of water were put in an extraction container and boiled until the total volume was 1 liter. Next, after separating the extract by filtration, the extract was concentrated until the volume became 1/2 again to prepare a hot water extract of pumpkin leaves.

(2)(2) 람브탄 껍질 에탄올 추출물의 제조Preparation of Lambtan Peel Ethanol Extract

람부탄(Rambutan) 껍질을 세절하여 1 kg에 50~70 부피% 농도의 에탄올 10 리터를 혼합한 후, 교반기를 이용하여 60~80℃에서 교반속도 300rpm으로 3시간 동안 교반하여 추출용액을 제조하였다.Rambutan (Rambutan) peel was minced and mixed with 10 liters of ethanol at a concentration of 50 to 70% by volume in 1 kg, and then stirred for 3 hours at a stirring speed of 300 rpm at 60 to 80 ° C using a stirrer to prepare an extract solution.

다음으로 상기 추출용액을 부직포 여과지를 이용하여 1차 여과한 뒤, 1차 여과액을 규조토필터를 사용하여 침전물이 생기지 않도록 2차 여과하였다.Next, the extraction solution was firstly filtered using a non-woven filter paper, and then the first filtrate was secondarily filtered using a diatomaceous earth filter so as not to form a precipitate.

회수한 2차 여과액을 농축기를 이용하여 60℃에서 감압 농축하여 람브탄 껍질 에탄올 추출물을 수득하였다.The recovered secondary filtrate was concentrated under reduced pressure at 60° C. using a concentrator to obtain an ethanol extract of lambtan skin.

(3)(3) 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물의 안전성 확인Safety confirmation of pumpkin leaf hot water extract and lambtan peel ethanol extract

실험동물은 4주령 Sprague-Dawley종 수컷 흰쥐(Central Lab animal, Seoul, Korea)를 환경이 조절된 사육실(기온 20℃, 습도 55%, 12시간 dark/light cycle)에서 펠렛형 고형사료(Jeil animal feed Co., Daejeon, Korea)로 2주간 사육하여 평균 체중이 200g 정도로 성장한 6주령의 쥐를 사용하여 상기 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물의 독성테스트를 실시하였다.Experimental animals were 4-week-old male Sprague-Dawley rats (Central Lab animals, Seoul, Korea) fed pellet-type solid feed (jeil animal Feed Co., Daejeon, Korea), 6-week-old mice whose average body weight grew to about 200 g after being bred for 2 weeks were used to test the toxicity of the pumpkin leaf hot water extract and lambtan peel ethanol extract.

구체적으로, 상기 4주령의 쥐 각각 5 마리씩에게 상기 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물을 1일 30ml씩을 펠렛형 고형사료(Jeil animal feed Co., Daejeon, Korea)와 함께 4주간 급여하면서 독성을 평가하였다.Specifically, 30ml of the pumpkin leaf hot-water extract and lambtan peel ethanol extract per day were fed to 5 each of the 4-week-old rats together with pellet-type solid feed (Jeil animal feed Co., Daejeon, Korea) for 4 weeks to reduce toxicity. evaluated.

상기 독성평가결과, 실험에 참여한 쥐 중 한 마리도 폐사하지 않고, 10마리 모두 4주간 건강을 유지한 것으로 확인되었다.As a result of the toxicity evaluation, it was confirmed that none of the rats participating in the experiment died, and all 10 rats maintained their health for 4 weeks.

(4) 실험: 항균활성 측정(4) Experiment: Measurement of antibacterial activity

상기 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물의 항균 활성을 다음과 같은 방법으로 평가하였다.The antibacterial activity of the hot water extract of pumpkin leaves and the ethanol extract of lambtan peel was evaluated in the following manner.

대표적인 식중독균(Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Campylobacter jejuni, Escherichia coli, Escherichia coli O-157, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella enteritidis, Salmonella thypimurium, Vibrio parahaemolyticus, Yersinia enterocolitica)을 사용하였다.Representative food poisoning bacteria ( Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Campylobacter jejuni, Escherichia coli, Escherichia coli O-157, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella enteritidis, Salmonella thypimurium, Vibrio parahaemolyticus, Yersinia enterocolitica ) were used.

상기 세균류를 멸균된 TSB 배지 10㎖에 배양물 50㎕를 접종하여 30℃에서 24±1 시간 계대배양하였다. 이 배양물의 농도는 microplate reader 흡수파장 655㎚에서 Abs 0.6±0.1이 유지되었다. 계대배양 한 실험균을 멸균증류수로 10-3배로 희석하여 원판확산법을 실시하였다. 즉, 희석균주를 멸균면봉에 묻혀 4mm 두께의 평판배지에 확산 도말하고 멸균된 8mm(두께 1mm) 여지를 올려 상기 호박잎 열수추출물, 람브탄 껍질 에탄올 추출물 및 이들의 혼합물(중량비= 1:1) 을 각각 50㎕를 주입하였다. 20분 정도 충분히 흡입시킨 후 30에서 24±1 시간 배양하고 생육환을 확인하였다. The bacteria were inoculated with 50 μl of the culture in 10 ml of sterilized TSB medium and subcultured at 30° C. for 24±1 hours. The concentration of this culture maintained Abs 0.6±0.1 at a microplate reader absorption wavelength of 655 nm. The subcultured test bacteria were diluted 10 -3 times with sterile distilled water, and the disc diffusion method was performed. That is, the diluted strain was spread on a 4 mm thick plate medium by soaking it in a sterile cotton swab, and a sterilized 8 mm (thickness 1 mm) filter was placed to obtain the pumpkin leaf hot water extract, lambtan peel ethanol extract, and a mixture thereof (weight ratio = 1:1). 50 μl of each was injected. After inhalation for about 20 minutes, the cells were cultured at 30°C for 24±1 hours, and growth circles were confirmed.

상기 항균활성은 여지를 포함한 투명대의 크기를 측정하여 평가하고, 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.The antibacterial activity was evaluated by measuring the size of the transparent zone including filter paper, and the results are shown in Table 7 below.

균주명strain name 균주번호a strain number a 항균활성(mm)b Antibacterial activity (mm) b 호박잎 열수추출물Pumpkin Leaf Hot Water Extract 람브탄 껍질 에탄올 추출물Lambtan Bark Ethanol Extract 호박잎 및 람부탄 추출혼합물(1:1 중량비)Pumpkin leaf and rambutan extract mixture (1:1 weight ratio) 세균류bacteria Bacillus cereusBacillus cereus KCTC 1012KCTC 1012 1515 1313 1616 Bacillus subtilisBacillus subtilis KCCM 1021KCCM 1021 1616 1616 16.616.6 Campylobacter jejuniCampylobacter jejuni KCCM 41772KCCM 41772 1414 1515 15.515.5 Escherichia coliEscherichia coli ATCC 25922ATCC 25922 1515 1717 17.717.7 Escherichia coli O-157Escherichia coli O-157 ATCC 43888ATCC 43888 1515 1414 1616 Listeria monocytogenesListeria monocytogenes ATCC 15313ATCC 15313 1616 1414 16.516.5 Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosa KCTC 1750KCTC 1750 1616 1616 16.316.3 Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus ATCC 25923ATCC 25923 1414 1616 1616 Salmonella enteritidisSalmonella enteritidis KCCM 11862KCCM 11862 1414 1515 15.915.9 Salmonella thypimuriumSalmonella thypimurium ATCC 13076ATCC 13076 1515 1717 17.317.3 Vibrio parahaemolyticusVibrio parahaemolyticus ATCC 17802ATCC 17802 1717 1515 17.617.6 Yersinia enterocoliticaYersinia enterocolitica ATCC 23715ATCC 23715 1515 1717 17.217.2

a: ATCC American Type Culture Collection, KCTC 한국생명공학연구원 생물자원센터; KCCM (사)한국종균협회Inc. a : ATCC American Type Culture Collection, KCTC Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology Biological Resources Center; KCCM Korea Incubation Association

b: 투명대의 크기(직경 mm) b : size of transparent zone (diameter mm)

상기 표 7에서 확인되는 바와 같이, 상기 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물은 모두 전체 세균류들에 대하여 우수한 항균활성을 나타냈다. 특히, 이들 혼합물은 시너지 효과를 나타내는 것으로 확인되었다.As confirmed in Table 7, both the hot water extract of pumpkin leaves and the ethanol extract of lambtan peel showed excellent antibacterial activity against all bacteria. In particular, these mixtures were found to exhibit synergistic effects.

이상과 같이 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 설명하였지만, 본 발명은 이에 한정되는 것은 아니고 가공식품, 가축사료, 농작물의 영양제에 이르기까지 전혈을 재활용하는 분야에서 폭넓게 활용할 수 있을 것이다. 또한, 본 발명의 특허청구의 범위와 상세한 설명 및 첨부한 도면의 범위안에서도 다양한 형태로 변형하여 실시하는 것도 가능한 것으로 본 발명의 범위에 속하는 것은 당연하다.Although preferred embodiments of the present invention have been described as described above, the present invention is not limited thereto and can be widely used in the field of recycling whole blood, ranging from processed food, livestock feed, and nutritional supplements for crops. In addition, it is natural that it belongs to the scope of the present invention as it is possible to modify and practice in various forms even within the scope of the claims, detailed description and accompanying drawings of the present invention.

10: 원심분리장치, 10-1: 구동부(motor), 10-2: 회전체(Separation Bowl),
11-1: 혈장이송펌프, 11-2: 혈구이송펌프, 11-3: 혈장아미노산이송펌프(1),
11-4: 혈구아미노산이송펌프(1), 11-5: 혈장아미노산이송펌프(2), 11-6: 혈구아미노산이송펌프(2),
11-7: 혈장+혈구아미노산이송펌프, 12: 혈장 가수분해 탱크, 12-1: 제1간접가열기,
12-2: 교반기(1), 12-3: 구동모터(1), 13: 혈구 가수분해 탱크,
13-1: 제2간접가열기, 13-2: 교반기(2), 13-3: 구동모터(2),
14: 혈장아미노산저장탱크, 14-1: 교반기(3), 14-2: 구동모터(3),
15; 혈구아미노산저장탱크, 15-1; 교반기(4), 15-2; 구동모터(4),
16: 혈장+혈구혼합아미노산저장탱크, 16-1: 교반기(5), 16-2: 구동모터(5),
17: 제1여과기, 17-1: 제2여과기, 18: 제1정량투입장치,
19: 제2정량투입장치, 20: 제1살균제투입장치,
21: 제2살균제투입장치,
22: 유입구, 23: 배출구, 24: 순환배관,
25: 체크밸브
10: centrifugal separator, 10-1: motor, 10-2: separation bowl,
11-1: plasma transfer pump, 11-2: blood cell transfer pump, 11-3: plasma amino acid transfer pump (1),
11-4: blood cell amino acid transfer pump (1), 11-5: plasma amino acid transfer pump (2), 11-6: blood cell amino acid transfer pump (2),
11-7: plasma + blood cell amino acid transfer pump, 12: plasma hydrolysis tank, 12-1: first indirect heater,
12-2: agitator (1), 12-3: drive motor (1), 13: blood cell hydrolysis tank,
13-1: second indirect heater, 13-2: stirrer (2), 13-3: drive motor (2),
14: plasma amino acid storage tank, 14-1: stirrer (3), 14-2: drive motor (3),
15; blood cell amino acid storage tank, 15-1; Agitator (4), 15-2; drive motor (4),
16: plasma + blood cell mixed amino acid storage tank, 16-1: stirrer (5), 16-2: drive motor (5),
17: first filter, 17-1: second filter, 18: first quantitative input device,
19: second quantitative input device, 20: first disinfectant input device,
21: second disinfectant input device,
22: inlet, 23: outlet, 24: circulation piping,
25: check valve

Claims (7)

a) 가축, 가금류 및 어류의 전혈(全血)을 원심분리시켜서 혈장과 혈구로 분리하는 단계;
b) 상기 a) 단계에서 분리된 혈장을 혈장 가수분해 탱크로 이송하여, 혈장의 온도를 45 내지 65℃로 조절하고, pH를 4.5 내지 10.5로 보정하고, 혈장가수분해효소를 투입하여, 고분자 유기물인 혈장을 저분자 유기물인 혈장 아미노산으로 가수분해하는 단계;
c) 상기 a) 단계에서 분리된 혈구를 혈구 가수분해 탱크로 이송하여, 저장액을 투입하여 혈구세포막을 삼투압원리에 의한 용혈작용에 의해 파괴시키고, 상기 혈구세포막이 파괴된 혈구의 온도가 45 내지 65℃가 되게 조절하고, pH를 4.5 내지 10.5로 보정하고, 혈구가수분해효소를 투입하여, 고분자 유기물인 혈구를 저분자 유기물인 혈구 아미노산으로 가수분해하는 단계;
d) 상기 가수분해된 혈장 아미노산 및 혈구 아미노산을 각각 여과하여 이물질을 제거하는 단계;
e) 상기 여과된 혈장 아미노산 및 혈구 아미노산을 각각 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크로 이송하는 단계; 및
f) 상기 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크 각각에 살균제를 투입하는 단계;를 포함하며,
상기 c) 단계에서 저장액으로는 증류수(DW)가 사용되며, 상기 증류수(DW)는 혈구 100%v/v를 기준으로 150~250%v/v로 투입되는 것을 특징으로 하는 아미노산의 제조방법.
a) centrifuging whole blood of livestock, poultry and fish to separate into plasma and blood cells;
b) The plasma separated in step a) is transferred to a plasma hydrolysis tank, the temperature of the plasma is adjusted to 45 to 65 ° C, the pH is adjusted to 4.5 to 10.5, and a plasma hydrolase is added to the polymer organic matter. hydrolyzing phosphorus plasma into plasma amino acids, which are low-molecular-weight organic substances;
c) The blood cells separated in step a) are transferred to a blood cell hydrolysis tank, a stock solution is introduced, and the blood cell membrane is destroyed by hemolysis based on the osmotic pressure principle, and the temperature of the blood cell with the blood cell membrane destroyed is from 45 to 45° C. adjusting the temperature to 65° C., correcting the pH to 4.5 to 10.5, and injecting hemocyte hydrolase to hydrolyze blood cells, which are high molecular weight organic substances, into blood cell amino acids, which are low molecular weight organic substances;
d) filtering the hydrolyzed plasma amino acids and blood cell amino acids to remove impurities;
e) transferring the filtered plasma amino acids and blood cell amino acids to a plasma amino acid storage tank and a blood cell amino acid storage tank, respectively; and
f) injecting a disinfectant into each of the plasma amino acid storage tank and the blood cell amino acid storage tank ;
In the step c), distilled water (DW) is used as the stock solution, and the distilled water (DW) is added at 150 to 250% v / v based on 100% v / v of the blood cell Preparation of amino acids, characterized in that method.
제1항에 있어서,
상기 혈장가수분해효소 및 혈구가수분해효소는 각각 단백질분해효소를 포함하는 것을 특징으로 하는 아미노산의 제조방법.
According to claim 1,
The method for producing amino acids, characterized in that each of the plasma hydrolase and the hematopoietic enzyme comprises a proteolytic enzyme.
제1항에 있어서,
상기 혈장가수분해효소 및 혈구가수분해효소는 각각 지방분해효소, 다당류분해효소, 및 섬유소분해효소 중에서 선택되는 1종 이상을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 아미노산의 제조방법.
According to claim 1,
Wherein the plasma hydrolase and the hematopoietic enzyme each further comprise at least one selected from a lipolytic enzyme, a polysaccharide hydrolase, and a fibrinolytic enzyme.
제1항에 있어서,
상기 혈장 가수분해 탱크 및 혈구 가수분해 탱크에서 pH 보정은 산성화에는 시트르산(C6H8O7) 및 아세트산(C2H4O2) 중에서 선택되는 1종 이상이 사용되며, 알칼리화에는 수산화나트륨(NaOH) 및 수산화칼륨(KOH) 중에서 선택되는 1종 이상이 사용되는 것을 특징으로 하는 아미노산의 제조방법.
According to claim 1,
For pH correction in the plasma hydrolysis tank and the blood cell hydrolysis tank, at least one selected from citric acid (C 6 H 8 O 7 ) and acetic acid (C 2 H 4 O 2 ) is used for acidification, and sodium hydroxide (sodium hydroxide) is used for alkalinization. NaOH) and potassium hydroxide (KOH) method for producing an amino acid, characterized in that at least one selected from is used.
제1항에 있어서,
상기 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크에 투입되는 살균제는 소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 및 실리신산 중에서 선택되는 1종 이상의 식품첨가물인 것을 특징으로 하는 아미노산의 제조방법.
According to claim 1,
The method of producing amino acids, characterized in that the disinfectant introduced into the plasma amino acid storage tank and the blood cell amino acid storage tank is at least one food additive selected from potassium sorbate, sodium benzoate, and silicic acid.
제5항에 있어서,
상기 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크에 투입되는 살균제는 염화나트륨(NaCl), 탄산수소나트륨(NaHCO3), 목초액(木醋液), 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물 중에서 선택되는 1종 이상을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 아미노산의 제조방법.
According to claim 5,
The disinfectant introduced into the plasma amino acid storage tank and the blood cell amino acid storage tank is sodium chloride (NaCl), sodium hydrogen carbonate (NaHCO 3 ), wood vinegar (wood vinegar), pumpkin leaf hot water extract, and at least one selected from lambtan peel ethanol extract A method for producing an amino acid, characterized in that it further comprises.
제5항에 있어서,
상기 혈장 아미노산 저장탱크 및 혈구 아미노산 저장탱크에 투입되는 살균제는 0.01 내지 2%w/w 농도로 첨가되는 호박잎 열수추출물 및 람브탄 껍질 에탄올 추출물 중에서 선택되는 1종 이상을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 아미노산의 제조방법.
According to claim 5,
The bactericide introduced into the plasma amino acid storage tank and the blood cell amino acid storage tank further comprises at least one selected from pumpkin leaf hot water extract and lambtan peel ethanol extract added at a concentration of 0.01 to 2% w / w Amino acid, characterized in that Manufacturing method of.
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100935020B1 (en) * 2009-01-30 2010-01-06 한명규 System for treating waste blood of the slaughtered livestock and a method for producing high quality amino acid solution using the waste blood of the slaughtered livestock
KR101195724B1 (en) 2011-11-29 2012-10-29 보령메디앙스 주식회사 Preservative composition and article comprising the same
KR101390516B1 (en) * 2013-02-18 2014-04-30 주식회사 케이엠에프 High quality amino acid composition using waste blood of the slaughtered livestock and manufacturing method thereof
KR102086166B1 (en) * 2017-12-05 2020-03-06 이은서 Antimicrobial composition comprising the extracts of rambutan peel

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20060099192A (en) * 2005-03-10 2006-09-19 (주)바이오뉴트리젠 A composition for feed additive comprising plant powder or extracts containing antioxidant materials
KR101502376B1 (en) 2013-03-12 2015-03-13 한국산업기술시험원 Manufacturing apparatus of the amino acid liquid fertilizer and protein feed using slaughter blood
KR20170036397A (en) * 2015-09-24 2017-04-03 최정란 Composition for Functional Hard Shampoo Soap having Activity of Anti-Oxidant Anti-Microbial and Method for Soap Using Thereof

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100935020B1 (en) * 2009-01-30 2010-01-06 한명규 System for treating waste blood of the slaughtered livestock and a method for producing high quality amino acid solution using the waste blood of the slaughtered livestock
KR101195724B1 (en) 2011-11-29 2012-10-29 보령메디앙스 주식회사 Preservative composition and article comprising the same
KR101390516B1 (en) * 2013-02-18 2014-04-30 주식회사 케이엠에프 High quality amino acid composition using waste blood of the slaughtered livestock and manufacturing method thereof
KR102086166B1 (en) * 2017-12-05 2020-03-06 이은서 Antimicrobial composition comprising the extracts of rambutan peel

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