KR102481102B1 - 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물에 관한 것으로, 항균 활성을 나타내며, 복용량 및 복용기간이 증가하여도 부작용 및 내성 등의 부작용이 없다.
또한, 화장료 조성물, 기능성 식품 조성물 또는 약제학적 조성물로 제공하여, 우수한 항균 효과를 나타낼 수 있는 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물을 제공할 수 있다.

Description

불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물 {ANTIBACTERIAL COMPOSITION CONTAINING STARFISH EXTRACT AND CINNAMON EXTRACT AS ACTIVE INGREDIENTS}
본 발명은 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는 불가사리 추출물을 유효 성분으로 포함하여, 복용량 및 복용기간이 증가하여도 부작용의 문제가 없는 불가사리 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물에 관한 것이다.
항균성을 부여하기 위하여 종래에는 세균 및 진균 등 유해 미생물의 대사 메카니즘을 파괴할 수 있는 다양한 화학물질을 첨가하는 방법을 사용하였으나, 이와 같이 종래에 사용되던 다양한 항균성 물질에 대한 인체 유해성 논란이 끊임없이 제기되고 있는 실정이다.
예를 들어, 최근 수많은 사람들이 사망하거나 폐질환에 걸려 사회적으로 심각한 이슈가 되었던 가습기 살균제 사건의 경우도 살균제나 부패방지제 등으로 흔히 사용되는 구아디닌(guanidine) 계열의 화학물질인 폴리헥사메틸렌 구아니딘 (PHMG, polyhexamethylene guanidine)과 올리고-2-(2-에톡시)에톡시에틸 구아니딘 클로라이드(PGH, oligo(2-(2-ethoxy)ethoxyethyl guanidine chloride)를 가습기 항균제로 사용하여 인체의 폐에 치명적인 손상을 일으킴으로써 발생한 안타까운 사건이다.
즉, 이와 같은 화학물질의 경우 인체에 유해한 세균 등의 대사 메카니즘을 파괴하는 동시에 잠재적으로는 인체에도 치명적일 수 있는 문제가 있는 바, 이들 화학물질을 각종 세제 첨가제, 식품 첨가제, 구강세정액 첨가제, 가습기 살균제, 항균탈취제 또는 화장품 첨가제로 사용하기에는 안전성 측면에서 한계가 있다.
특히, 피부 표면에 도포하는 화학적 항균제들은 효과와 상관없이 강한 피부자극을 일으키므로 각종 트러블성 피부질환을 가지고 있는 상태에서는 사용에 부담을 가지게 되므로 피부 자극이 없는 천연 항균제의 개발이 필요하며, 여드름 피부와 관계 있는 황색포도상구균에 대한 천연 항균제의 개발이 강력히 요구되고 있다.
상기 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)은 생육함에 따라 세포집괴(덩어리)를 형성하는 그람양성의 통성 혐기성 세균으로, 건강한 사람이나 가축의 피부와 비강 표면에 일반적으로 존재하고 있다. 내열성인 외독소를 생산하여 식중독을 일으키며, 식세포를 죽이는 독소(류코시딘), 용혈소, 응고효소 등을 분비하여 감염 숙주세포의 저항성에서 벗어나 화농성감염증을 일으킨다.
또한, 여드름 발생 시 여드름의 악화에 영향을 주는 피부 상재균이다. 대표적인 피부 염증 질환의 하나인 여드름은 호르몬의 작용, 과도한 피지 분비, 세균의 감염 등에 의한 모피지선, 모낭 및 주변 조직의 염증성 질환을 말한다.
상기 여드름의 치료는 국소 제제 도포 요법 및 경구 약물 복용 요법과 최근 시행되고 있는 레이저 시술, 박피술 등 수술 요법이 있다. 국소 도포 요법은 여드름의 원인균에 대한 항균 작용 목적으로 아젤라익산(azelaic acid), 살리실산 등의 항균제를 사용하거나 면포 용해 작용을 위해 벤조일퍼옥사이드(benzoyl peroxide) 등을 외용 연고 타입으로 사용하는 방법이나, 이는 제형화에 어려움이 있고, 관련 법 규제 등으로 제품화에 어려운 점이 있었다. 또한, 경구약물 복용요법은 피지선의 기능 억제와 모낭 벽 파괴의 억제 목적으로 레티노이드, 부신피질 호르몬 등을 이용하는 방법인데, 이들 경구제제의 과량 복용 시 피부 발적, 피부 과민반응, 피부 건조증 등의 부작용이 발생하는 문제점이 있다.
한편, 불가사리로 인한 해안 생태계, 관련산업의 피해가 늘고 있어 세계적으로 불가사리로 인한 관광자원훼손, 어패류 포식 등으로 연간 6조 4000억원의 직접적 경제적 손실을 입고 있으며 우리나라 역시 국내양식업의 피해규모만 4000억원에 달해 수매 또는 폐기에 정부예산을 수십억을 쓰는 실정이다.
그러나, 폐기 외의 처리방안인 비료 등으로의 사용은 성능이 좋지못하여 사용량이 저조하므로, 한국 전 연안에 분포하며 해양 생태계에 피해를 입히는 불가사리로부터 항균 물질을 추출하여 항균 조성물을 개발하고자 하였다.
상기 항균 물질은 황색포도상구균에 대한 항균 효능이 있으며, 입수가 용이하고 화학물질에 비해 상대적으로 내성 등의 부작용이 적어 장기간 사용할 수 있는 천연 식물 유래의 항균 조성물을 개발하고자 하였다.
KR 10-0606500 B1 KR 10-1990545 B1 KR 10-2020-0082268 A
본 발명의 목적은 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물에 관한 것이다.
발명의 다른 목적은 항균 활성을 나타내며 복용량 및 복용기간이 증가하여도 부작용의 문제가 없는 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 기능성 식품 조성물 및 약학적 조성물로 제공하여, 우수한 항균 효과를 나타낼 수 있는 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 항균 조성물은 불가사리 추출물 및 계피(Cinnamon) 추출물을 유효성분으로 포함할 수 있다.
상기 불가사리는 빗살판불가사리류 (Ctenodiscus), 작은불가사리류 (Leptychaster), 검은띠불가사리류 (Luidia), 헛불가사리류 (Pseudarchaster), 애기불가사리류 (Henricia), 해님불가사리류 (Solaster), 입방불가사리류 (Pteraster), 문어불가사리류 (Plazaster), 일본불가리류 (Distolasterias), 아팰불가사리류 (Aphelasterias) 및 아무르불가사리류(Asterias)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이다.
상기 불가사리 추출물은 불가사리를 가수분해효소 처리하여 추출된 화학식 1로 표시되는 프롤린을 포함하는 것이다.
상기 조성물은 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)에 대한 항균 효과가 우수하다.
상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출 용매를 이용하여 추출된 것이다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 상기 항균 조성물을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 기능성 식품 조성물은 상기 항균 조성물을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 약학적 조성물은 상기 항균 조성물을 포함할 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 '추출물'은 상술한 바와 같이 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 추출물은 상술한 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 예컨대, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 추출물에 포함되는 것이다.
본 발명에서 이용되는 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 항균 조성물은 불가사리 추출물 및 계피(Cinnamon) 추출물을 유효성분으로 포함한다.
상기 계피(Cinnamon)는 녹나무과 Cinnamomum cassia(Nees) Nee set Blume의 줄기 껍질로 만든 약재로서, 맛은 맵고 단맛이 나며 약성은 열성이다. 계피는 비위장의 기능을 활성화시키므로 소화기가 차서 소화장애가 있거나 복부가 차서 일어나는 복통 설사 등에 널리 이용되고 배가 차서 일어나는 구토에도 신속한 반응을 일으킨다. 또한, 계피는 풍습성(風濕性)으로 인한 사지마비와 동통을 그치게 하고, 허리나 무릎이 차고 시리면서 아픈 신경통과 관절 질환 및 하복부가 차면서 방광염이 자주 발생하는 질환에도 널리 응용되고, 산후에 출혈이 계속되거나 오래된 이질과 대변시에 출혈되는 증상, 콩팥기능 감퇴 증상에도 효력이 높다고 알려져 있으며, 예로부터 방부제 역할을 하는 향신료로도 사용되어 왔다.
상기 불가사리(Asteroidea)는 몸은 편평한 별모양으로 연안에서 우리가 가장 흔하게 접할 수 있는 해양동물 중의 하나로서, 전국 연안에 30 여종의 불가사리가 서식하고 있으며, 번식률은 대단히 높아서 마리당 200만~300만개를 산란하고, 극피동물문의 바다나리강, 불가사리아강, 거미불가사리아강, 성게강, 해삼강에 포함되는 해산 무척추동물(seamount invertebrate)이다. 우리나라에는 불가사리류 47종이 보고되어 있으며 남쪽에 비해 북방계의 종이 풍부하다. 불가사리류는 북태평양에 널리 분포하는 종으로서 일본의 북부와 북미 쪽에 공통해 있는 종이다.
상기 불가사리는 빗살판불가사리류 (Ctenodiscus), 작은불가사리류 (Leptychaster), 검은띠불가사리류 (Luidia), 헛불가사리류 (Pseudarchaster), 애기불가사리류 (Henricia), 해님불가사리류 (Solaster), 입방불가사리류 (Pteraster), 문어불가사리류 (Plazaster), 일본불가리류 (Distolasterias), 아팰불가사리류 (Aphelasterias) 및 아무르불가사리류(Asterias)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이다.
바람직하게, 본원발명 조성물에 사용되는 불가사리는 아무르 불가사리(Asterias amurensis)이다.
상기 아무르 불가사리는 동물계 불가사릿과에 해당하며, 제주도 남부를 제외한 우리나라 전 연안에 분포하고, 조간대에서부터 조하대의 암반이나 진흙 바닥 등지에 광범위하게 분포하며 집단으로 서식한다. 팔을 포함한 전체 길이는 보통 20~25cm 이나, 큰 개체의 경우 30cm 이상까지 자라기도 한다. 몸통의 전체적인 색깔과 무늬에는 변이가 많아서 전체적으로 노랑, 오렌지, 보라색까지 매우 다양하다. 아무르 불가사리의 주요 구성 성분으로는 단백질 물질(펩타이드), 칼슘, 인 등이 있다.
한편, 아무르 불가사리는 각종 어패류나 치어들까지 잡아먹는 수산자원을 황폐화시키는 주범으로 한 지역에 집단으로 서식하고, 왕성한 식욕을 가지며 구체적으로 대형 이매패류(조개류)뿐만 아니라 고둥류, 게류, 따개비류를 포함해 먹을 수 있는 먹이는 모두 먹어 치우는 강력한 포식활동을 한다.
이에 따른 국내양식업 피해 방지를 위해 정부에서는 예산을 들여 아무르 불가사리를 폐기하는 실정으로, 이에 대해 본원발명에서는 폐기되는 아무르 불가사리로부터 이로운 생리 활성 물질, 그 중에서도 항균 물질을 추출하여 세균의 증식을 억제할 수 있는 항균 조성물로 제공하고자 한다.
상기 불가사리 추출물은 불가사리를 가수분해효소 처리하여 추출된 하기 화학식 1로 표시되는 프롤린을 포함하는 것이다:
[화학식 1]
Figure 112020125228781-pat00001
.
상기 프롤린(proline)은 단백질을 구성하는 아미노산의 하나로, 단백질의 가수분해 과정을 통해 얻을 수 있는 화합물이며, 주로 포유동물조직에 가장 많이 존재하는 단백질인　콜라겐에서 발견되고, 하이드로 프롤린과 함께 콜라겐의 2/3를 차지한다.
구체적으로, 본 발명의 불가사리 추출물은 불가사리를 세척 및 침지하고 가수분해효소를 처리한 후, 원심 분리시켜 상등액을 회수하여 불가사리 추출물을 제조할 수 있다.
상기 가수분해효소는 물분자가 도입되어 기질의 공유결합을 가수분해 시키는 효소로, 에스테르(ester) 결합에 작용하는 효소, 글리코시딕(glycosidic) 결합에 작용하는 효소 및 펩타이드(peptide) 결합에 작용하는 효소가 있다.
이 중, 상기 펩티드(peptide) 결합에 작용하는 효소는 단백질 분해 효소(protease)라고 하며, 단백질의 펩티드 결합을 가수분해하여 아미노산이나 펩티드를 만들기 때문에, 모든 단백질 분해효소를 아미노산과 펩티드의 혼합물 생성제라고도 하며, 주요 단백질 분해효소는 펩신, 펩티디아제, 트립신 등이 있다.
본원발명의 불가사리로부터 단백질 용출량을 증가시키기 위해, 상기 단백질 분해효소를 처리하였으며, 그 중에서도 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) 유래의 프로테아제(protease)가 선택되는 것이 바람직하다.
상기 프로테아제는 불가사리 100 중량부에 대하여 0.2 내지 2 중량부로 처리될 수 있으며,
상기 범위에 의하는 경우, 불가사리로부터 단백질 용출 량이 가장 많이 용출될 수 있으며,
상기 가수분해효소를 처리하는 과정은 40 내지 60℃ 에서 10 내지 20시간 동안 처리하여 수행되는 것이 바람직하다.
상기 가수분해된 불가사리 침지액은 원심 분리시켜 상등액을 회수하여 불가사리 추출물을 제조할 수 있다.
상기 항균 조성물은 불가사리 추출물만 포함하는 경우에도 항균 효과가 우수하나, 불가사리 특유의 이취미로 인해 기호도가 떨어질 수 있다.
이에, 바람직하게 상기 항균 조성물은 불가사리 추출물과 계피 추출물을 혼합하는 경우 항균 효과가 우수하며, 불가사리 추출물과 계피 추출물의 혼합 비율이 7:3 인 것이 가장 바람직하다.
상기 혼합 비율에 의하는 경우, 항균 효과가 높게 나타났으며, 상기 혼합 비율을 벗어나는 경우, 불가사리 추출물만을 포함하는 경우에 비해 항균 효과가 떨어지는 문제가 있으며, 불가사리 추출물과 계피 추출물의 혼합 비율에서 불가사리 추출물의 비율이 낮아질수록 항균 효과 또한 떨어지는 문제가 있다.
상기 조성물은 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)에 대한 항균 효과가 우수하다.
상기 황색포도상구균은 생육함에 따라 세포집괴(덩어리)를 형성하는 그람양성의 통성 혐기성 세균으로 건강한 사람이나 가축의 피부와 비강표면에 일반적으로 존재한다. 　내열성인 외독소를 생산하여 식중독을 일으키며, 　식세포를 죽이는 독소(류코시딘), 용혈소 및　 응고효소　등을 분비하여 감염숙주세포의 저항성에서 벗어나 화농성　감염증을 일으킨다.
또한, 인체에서는 급성 피부염의 원인 균이며, 이 급성 피부염은 갑자기 패혈증으로 발전하여 환자의 목숨을 앗아갈 수 있고, 화농성 질환, 땀 냄새, 식중독 등의 원인 균이기도 하다.
본원발명의 항균 조성물은 상기 황색포도상구균에 대한 항균 활성이 우수하다.
상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출 용매를 이용하여 추출되는 것으로, 보다 구체적으로 에탄올을 추출 용매로 이용하는 것이나, 상기 예시에 국한되지 않고 제한 없이 모두 사용 가능하다.
보다 구체적으로, 추출물의 제조 단계는, 천연물을 분쇄하는 단계; 유기 용매를 사용하여 상기 분쇄물을 침출시키는 단계; 시료를 침출 후 건조 시키는 단계; 건조된 시료를 유기 용매를 사용하여 재 침출시키는 단계; 시료를 침출 후 건조 시키는 단계; 물을 이용하여 침출시키는 단계; 및 침출하는 단계를 포함하여, 추출물을 획득할 수 있다.
상기 유기 용매를 사용하여 추출한 추출물을 유기 용매를 사용하여 분획을 실시하는 단계를 더 포함할 수 있다.
상기 추출물을 제조하는 방법은 초음파 추출법, 침출법 및 환류 추출법 등 당업계의 통상적인 추출 방법일 수 있다. 구체적으로 세척 및 건조로 이물질이 제거된 천연물을 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물일 수 있으며, 상기 용매들을 순차적으로 시료에 적용하여 추출한 추출물일 수도 있다.
상기 환류추출법은 탄소수 1 내지 6의 알코올 100mL기준으로, 천연물의 분쇄물 10 내지 30g, 환류 시간 1 내지 3시간 및 50 내지 100%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한다. 보다 구체적으로, 탄소수 1 내지 6의 알코올 100mL기준으로, 천연물의 분쇄물 10 내지 20g, 환류 시간 1 내지 2시간 및 70 내지 90%의 탄소수 1 내지 4의 알코올에 의한 것이다.
상기 침출법은 15 내지 30℃, 24 내지 72시간 동안 및 50 내지 100% 의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다. 보다 구체적으로는 20 내지 25℃, 30 내지 54시간 동안 및 70 내지 80%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다.
상기 초음파 추출법은 30 내지 50℃, 0.5 내지 2.5시간 동안 및 50 내지 100%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다. 구체적으로는 40 내지 50℃, 1 내지 2.5시간 동안 및 70 내지 80%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다.
상기 추출 용매는 시료의 중량 기준으로 2 내지 50배를 사용할 수 있으며, 보다 구체적으로는 2 내지 20배이다. 추출을 위해 시료는 추출 용매에서 침출을 위해 1 내지 72 시간 동안 방치될 수 있으며, 보다 구체적으로 24 내지 48시간 동안 방치될 수 있다.
추출 후, 추출물은 새로운 분획 용매를 순차적으로 적용하여 분획할 수 있다. 분획 시 사용하는 분획 용매는 상기 용매는 물, 헥산, 부탄올, 에틸아세트산, 에틸 아세테이트, 메틸렌클로라이드 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상이며, 바람직하게는 에틸아세테이트 또는 메틸렌클로라이드이다. 추출물 또는 분획물을 얻은 후에는 농축 또는 동결건조 등의 방법을 추가적으로 사용할 수 있다.
바람직하게, 본 발명의 항균 조성물은 개감채 추출물, 구슬갓냉이 추출물, 세실레연영초 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군을 추가로 포함한다.
상기 개감채(Lloydia serotina (L.) Rchb.)는 외떡잎식물 백합목 백합과의 여러해살이풀로 두메무릇, 산무룻 또는 와판화라고도 불린다. 높은 산의 암석지대에서 자란다. 높이 약 15cm이다. 비늘줄기는 원기둥 모양이고 외피는 연한 황갈색이다. 뿌리에 달린 잎은 보통 2개씩이고 길이 7∼20cm,　나비 1mm　정도로 줄 모양이다. 꽃줄기는 7∼15cm로 2∼4개의 잎이 달린다. 줄기에 달린 잎은 어긋나고 줄 모양이며 길이 4∼35mm로 끝이 뭉툭하고 가장자리가 위로 말린다. 한국의 함경남도(백두산)·함경북도(관모봉)를 비롯하여 북반구 한대지역에 널리 분포한다.
개감채는 주로 어린순과 인경을 먹으며 민간에서는 풀전체를 강장, 강절, 건뇌, 강심 등에 다른 약재와 같이 처방하여 약으로 쓴다.
상기 구슬갓냉이(Rorippa globosa (Turcz.) Thellung)는 십자화과의 여러해살이풀로 참구슬냉이, 둥근속속이풀 또는 구과한채라고도 불린다. 산기슭이나 냇가에서 자라며 높이는 60cm　정도이며, 잎은 마주나고 긴 타원형이며 깃 모양으로 갈라진다. 6월에 노란 꽃이 총상(總狀) 화서로 줄기 끝에 피고 열매는 둥근 각과(角果)를 맺는다. 산이나 들에 나는데 우리나라의 중부ㆍ북부 등지에 분포한다.
상기 세실레연영초(Trillium sessile L.)는 백합과의 연영초속의 여러해살이 풀로, 길이 10cm, 가로 8cm에 이르는 3 개의 타원형에서 거의 원형의 포엽을 가지고 있다.　포엽은 녹색이거나 때로는 푸르스름하며 일반적으로 꽃이 성숙함에 따라 희미 해지는 반점이 있다.　각 꽃에는 세 개의 꽃받침과 세 개의 꽃잎이 있고, 꽃잎은 일반적으로 적갈색 또는 갈색, 때로는 녹색 또는 황록색이며 최대 길이 3.5cm, 폭 2cm 이다.　5월과 6월 사이에 꽃이 핀다.　
상기 조성물은 불가사리 추출물 및 계피 추출물에 더하여, 개감채 추출물, 구슬갓냉이 추출물, 세실레연영초 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 더 포함하여 사용하며, 복합 추출물로 사용 시, 항균 효과가 더욱 우수하게 나타날 수 있다.
또한, 개감채 추출물, 구슬갓냉이 추출물, 세실레연영초 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 더 포함하여 사용할 경우, 복합 추출물로 구성함에 따라, 불가사리 추출물 및 계피 추출물만을 혼합으로 사용하는 경우에 비해, 기호성 높은 항균 조성물로의 제공을 가능하게 한다.
바람직하게 본 발명의 조성물은 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 혼합한 혼합 추출물 100 중량부에 대해, 개감채 추출물 40 내지 60 중량부, 구슬갓냉이 추출물 40 내지 60 중량부 및 세실레연영초 추출물 10 내지 30 중량부로 포함할 수 있다.
상기 중량부 범위 내에서 복합 추출물로 사용하는 경우, 각 성분 간의 복합 작용으로 인해 항균 효과가 더욱 상승하게 되며, 불가사리 추출물 특유의 이취미를 개선하여 기호도가 향상될 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 상기 항균 조성물을 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 항균 조성물을 포함하는 형태인 것이다. 상기 화장료 조성물은 통상의 화장료 제조방법에 따라, 다양한 형태로 제조될 수 있다.
예를 들어, 상기 화장료 조성물은 상기 항균 조성물을 함유하는 향장 제품, 화장수, 크림, 로션 등의 형태로 제조될 수 있으며, 이는 통상의 클렌징액, 수렴액 및 보습액으로 희석하여 사용될 수 있다.
또한, 상기 화장료 조성물은 화장료 조성물 분야에서 통상적으로 사용되는 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 기능성 식품 조성물은 상기 항균 조성물을 포함한다.
구체적인 예로, 상기 식품 조성물을 이용하여 항균을 나타내는 가공식품을 제조할 수 있다. 이런 가공식품에는 예를 들어, 과자, 음료, 주류, 발효식품, 통조림, 우유가공식품, 육류가공식품, 국수 등을 포함한다. 과자는 비스킷, 파이, 케익, 빵, 캔디, 젤리, 껌, 시리얼 등을 포함한다. 음료는 음용수, 탄산음료, 기능성 이온음료, 기능성이온음료, 주스(예를 들어, 사과, 배, 포도, 알로에, 감귤, 복숭아, 당근, 토마토 주스 등), 식혜 등을 포함한다. 주류는 청주, 위스키, 소주, 맥주, 양주, 과실주 등을 포함한다. 발효식품은 간장, 된장, 고추장 등을 포함한다. 통조림은 수산물 통조림(예들 들어, 참치, 고등어, 꽁치, 소라 통조림 등), 축산물 통조림(쇠고기, 돼지고기, 닭고기, 칠면조 통조림 등), 농산물 통조림(옥수수, 복숭아, 파인애플 통조림 등)을 포함한다. 우유가공식품은 치즈, 버터, 요구르트 등을 포함한다. 육류가공식품은 돈까스, 비프까스, 치킨까스, 소세지. 탕수육, 너겟류, 너비아니 등을 포함한다. 밀봉포장생면 등의 국수를 포함한다. 이 외에도 상기 조성물은 레토르트식품, 스프류 등에 사용될 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 약학적 조성물은 상기 항균 조성물을 포함한다.
상기 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및 희석제로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 추가로 포함할 수 있다.
구체적으로, 상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
본 발명에서, 상기 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물과 이의 분획물들에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등 이 사용될 수 있다.
상기 본 발명의 약학 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있는데, 본 발명의 용어 "약제학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료 또는 예방에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료 또는 예방하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 질환의 중증도, 약물의 활성, 환자의 연령, 체중, 건강, 성별, 환자의 약물에 대한 민감도, 사용된 본 발명 조성물의 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율 치료기간, 사용된 본 발명의 조성물과 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 단독으로 투여하거나 공지된 면역치료제와 병용하여 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하다.
본 발명은 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명은 항균 활성을 나타내며 복용량 및 복용기간이 증가하여도 부작용의 문제가 없는 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명의 다른 목적은 불가사리 추출물 및 계피 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 기능성 식품 조성물 및 약학적 조성물로 제공하여, 우수한 항균 효과를 나타낼 수 있는 항균 조성물을 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 혼합추출물의 균주 4종에 대한 항균 실험 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 혼합추출물의 황색포도상구균에 대한 항균 실험 결과이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
[제조예 1: 혼합추출물의 제조]
1. 아무르 불가사리 추출물의 제조
아무르 불가사리를 세척한 후, 불가사리 중량을 기준으로 8배수 양의 증류수를 원료에 첨가하여 침지 하였다. 가수분해를 위해 불가사리 100 중량부에 대한 프로테아제 1 중량부를 증류수에 녹여 처리하고, 50 ℃ 에서 15 시간 동안 불가사리를 침지 추출 및 가수분해를 실시하였다. 이후, 와트만 여과지로 여과하고 그 여액을 수득하였으며 수득 된 불가사리 수득액을 원심 분리시켜 얻어진 상등액을 회수하여 아무르 불가사리 추출물(AE)로 제조하였다.
2. 계피 추출물의 제조
계피를 세척하고 건조한 뒤 이를 분쇄하여 계피 가루를 형성한 뒤, 상기 계피 가루를 에탄올에 혼합하고 이를 약 2주간 방치한 뒤 여과지로 여과하여 그 여액을 수득하여 계피 에탄올 추출물(CEE)로 제조하였다.
3. 혼합 추출물의 제조
상기 아무르 불가사리 추출물(AE) 및 계피 에탄올 추출물(CEE)을 하기 표 1과 같이 혼합하여 혼합 추출물로 제조하였다.
MX1 MX2 MX3 MX4 MX5 MX6
AE 100 30 70 40 60 50
CEE - 70 30 60 40 50
(단위 : 중량부)
[실험예 1: 혼합추출물의 항균 실험]
1-1. 대상 균주와 배양배지 및 시료
항균력 측정에 사용된 균주는 황색포도상구균(Staphylococcus aureus KCTC1928), 대장균(Escherichia coli), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa) 및 메티실린 내성 황색포도상구균(MRSA, Methicillin resistant staphylococcus aureus)을 사용하였다.
상기 시험 균주는 배지(muller hinton broth)를 이용하여, 37℃의 온도조건으로 배양하여 McFarland 탁도가 0.5가 될 때까지 배양한 후, 항균시험에 사용하였다.
1-2. 항균 활성 측정
본 발명의 제조예 1에서 제조된 복합추출물의 항균 활성을 알아보기 위하여, 하기와 같이 실험을 수행하였다.
항균활성 검증은 디스크 확산법(paper disk diffusion method, Toama et al., 1978)으로 수행하였다.
상기 실험예 1-1에서 배양된 시험대상 균주 4종에 대한 배양액 0.1ml를 각각 멸균된 한천 배지(MHB, Muller Hinton agar, Merk Co., 독일)에 도말하고, 상기 제조예 1에서 제조된 혼합 추출물(M1 내지 M6)을 각각 추출용매와 동일한 용매에 10 mg/ml의 농도로 녹여 추출시료를 제조한 후, 10 ㎕ 또는 20 ㎕를 지름 0.8 mm 크기의 종이 디스크(paper disk, Advantac, USA)에 적하하고, 37℃에서 배양하였다. 이후, 생육 저지환 생성 유무 및 생육 저지환의 지름으로 항균력을 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 2, 도 1 및 도 2에 나타내었다.
구분 황색포도상구균 대장균 녹농균 메티실린 내성
황색포도상구균		 평균
MX1 0.2 0.16 0.16 0.18 0.18
MX2 0.1 0.08 0.06 0.09 0.08
MX3 0.26 0.19 0.18 0.20 0.21
MX4 0.13 0.10 0.09 0.10 0.11
MX5 0.15 0.12 0.13 0.13 0.13
MX6 0.15 0.11 0.10 0.12 0.12
(단위 : cm)
하기 도 2를 참고하면, MX1 즉, 불가사리 추출물만을 포함하여 황색포도상구균에 대한 항균 실험을 진행한 결과이며, 도2B는 MX3 즉, 불가사리 추출물 및 계피 추출물이 7:3의 비율로 포함하여 황색포도상구균에 대한 항균 실험을 진행한 결과를 나타내는 것이다.
도2A 및 도2B를 통해 MX1 및 MX3의 경우 황색포도상구균에 대한 항균 활성으로 생육저지환이 형성됨을 확인하였으며, 그 중에서도 MX3은 생육저지환이 뚜렷하며 크기가 더 큼을 확인하였다.
또한, 상기 표 2와 같이, 균주 4종에 있어서 상기 MX1 내지 MX6를 처리함에 따라 생육 저지환의 생성이 모두 나타남을 확인하였다.
보다 자세하게, 상기 표 2 불가사리 추출물과 계피 추출물을 7:3의 비율로 포함하는 MX3의 경우 균주 4종 즉, 황색포도상구균, 대장균, 녹농균 및 메티실린 내성 황색포도상구균의 순으로 생육저지환의 지름이 0.26cm, 0.19cm, 0.18cm 및 0.20cm로 나타났으며, 평균 지름은 0.21cm로 MX1 내지 MX6 중 가장 우수한 생육저지환 지름 길이를 나타냄을 확인하였다. 이를 통해, 불가사리 추출물 및 계피 추출물이 7:3의 비율로 나타나는 경우 항균 활성이 가장 우수함을 확인하였다.
상기 MX3 다음으로는 불가사리 추출물만을 포함하는 MX1에서 항균활성이 우수하였으며, MX5, MX6, MX4, MX2 순으로 생육 저지환의 지름이 줄어 불가사리 추출물과 계피 추출물의 혼합 비율에 따라 황색포도상구균에 대한 항균 활성이 차이가 있음을 확인하였다.
[제조예 2: 복합추출물의 제조]
1. 기타 추출물의 제조
상기 제조예 1의 계피 에탄올 추출물(CEE)과 동일한 방법으로 개감채 에탄올 추출물(LEE), 구슬갓냉이 에탄올 추출물(REE) 및 세실레연영초 에탄올 추출물(TEE)를 제조하였다.
2. 복합 추출물의 제조
상기 아무르 불가사리 추출물(AE) 및 계피 에탄올 추출물(CEE)의 혼합 추출물 중 항균 효과가 가장 우수한 M3과 개감채 에탄올 추출물(LEE), 구슬갓냉이 에탄올 추출물(REE) 및 세실레연영초 에탄올 추출물(TEE)을 하기 표 3와 같이 혼합하여 복합추출물로 제조하였다.
K1 K2 K3 K4 K5
MX3 100 100 100 100 100
LEE 30 40 50 60 70
REE 30 40 50 60 70
TEE 1 10 20 30 40
(단위 : 중량부)
[실험예 2: 복합추출물의 항균 실험]
상기 제조예 1에서 제조된 아무르 불가사리 추출물(AE) 및 계피 에탄올 추출물(CEE)의 혼합 추출물 MX3에 개감채 에탄올 추출물(LEE), 구슬갓냉이 에탄올 추출물(REE) 및 세실레연영초 에탄올 추출물(TEE)을 더 포함함으로써 항균 효과의 증감 여부를 확인하기 위하여, 추출시료만 변경하여 상기 실험예 1과 동일한 방식으로 실험을 진행하여 복합 추출물(K1 내지 K5)의 황색포도상구균에 대한 항균 효과를 실험하여 황색포도상구균에 대한 생육저지환의 크기를 비교하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다. 하기 표에서 결과 값이 클수록 항균 활성이 우수함을 나타낸다.
구분 황색포도상구균 대장균 녹농균 메티실린 내성
황색포도상구균		 평균
K1 0.26 0.19 0.18 0.20 0.21
K2 0.28 0.23 0.21 0.22 0.24
K3 0.30 0.24 0.23 0.23 0.25
K4 0.29 0.24 0.22 0.23 0.25
K5 0.26 0.21 0.20 0.22 0.22
(단위 : cm)
상기 표 4에 따르면, 복합 추출물 K1 내지 K5의 경우, 아무르 불가사리 추출물 및 계피 에탄올 추출물의 혼합 추출물을 단독으로 사용하는 경우에 비해 동등하거나 더 우수한 생육저지환의 지름을 나타내어 복합 추출물에 의해 우수한 항균 효과를 나타냄을 확인하였다.
특히, 바람직한 중량부의 천연추출물을 포함하는 K2 내지 K4의 경우, 생육저지환의 지름이 가장 길게 나타나 바람직한 중량부를 포함하는 경우 항균 활성이 우수함을 확인하였으며, 이는 개감채 에탄올 추출물, 구슬갓냉이 에탄올 추출물 및 세실레연영초 에탄올 추출물을 추가로 포함함으로써 각 성분의 유효성분이 상호작용하여 불가사리 추출물 및 계피 에탄올 추출물의 항균 활성이 더욱 향상되는 것을 의미한다.
또한, 상기 표 4에 따르면, 균주 4종 중 황색포도상구균에 있어 항균 활성이 가장 우수함을 확인하였다.
[실험예 3: 관능 실험]
상기 MX1, MX3 , K1 내지 K5에 대해 기호성 평가를 진행하였다.
MX1, MX3, K1 내지 K5를 차로 제조한 후, 10대부터 50대 까지 각 세대별 5명씩 모집하여 맛 및 향에 대한 평가를 요청하였다.
평가 점수는 각 항목 당 1 내지 10점으로 평가를 요청하였으며, 평가 결과는 평균 점수(0.5 반올림)를 환산하여 나타냈으며, 상기 지수는 높을수록 기호도가 높은 것이다.
구분 MX1 MX3 K1 K2 K3 K4 K5
맛 4 5 5 7 8 8 5
향 2 5 6 8 9 8 6
종합기호도 (평균) 3 5 6 8 9 8 6
(단위 : 지수)
상기 표 5를 참조하면, MX1의 경우 아무르 불가사리 특유의 맛과 향으로 인해 기호도가 떨어짐을 확인하였다.
반면, MX3의 경우 아무르 불가사리에 계피를 첨가하여 향에 대한 기호도가 향상됨을 확인하였다.
또한, K1 내지 K5의 경우 다른 천연 추출물들을 혼합함에 따라 맛과 향에 대한 기호도가 우수함을 확인하였고 특히 K2 내지 K4의 경우 상대적으로 더욱 높은 점수의 기호도를 나타내는 것으로 확인됨에 따라 기호도가 높은 화장료 조성물, 기능성 식품 조성물로의 제공이 가능함을 확인하였다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.

Claims (8)

  1. 불가사리 추출물 및 계피(Cinnamon) 추출물을 7:3의 중량비로 유효성분으로 포함하며,
    개감채 추출물, 구슬갓냉이 추출물 및 세실레연영초 추출물을 더 포함하는
    항균 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 불가사리는 빗살판불가사리류 (Ctenodiscus), 작은불가사리류 (Leptychaster), 검은띠불가사리류 (Luidia), 헛불가사리류 (Pseudarchaster), 애기불가사리류 (Henricia), 해님불가사리류 (Solaster), 입방불가사리류 (Pteraster), 문어불가사리류 (Plazaster), 일본불가리류 (Distolasterias), 아팰불가사리류 (Aphelasterias), 아무르불가사리류 (Asterias) 으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인
    항균 조성물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 불가사리 추출물은 불가사리를 가수분해효소 처리하여 추출된 하기 화학식 1로 표시되는 프롤린을 포함하는
    항균 조성물:
    [화학식 1]
    Figure 112020125228781-pat00002
    .
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)에 대한 항균 효과를 나타내는
    항균 조성물.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출 용매를 이용하여 추출된
    항균 조성물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 항균 조성물을 포함하는
    화장료 조성물.
  7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 항균 조성물을 포함하는
    기능성 식품 조성물.
  8. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 항균 조성물을 포함하는
    황색포도상구균 유발성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
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