KR102470808B1 - 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102470808B1
KR102470808B1 KR1020200144497A KR20200144497A KR102470808B1 KR 102470808 B1 KR102470808 B1 KR 102470808B1 KR 1020200144497 A KR1020200144497 A KR 1020200144497A KR 20200144497 A KR20200144497 A KR 20200144497A KR 102470808 B1 KR102470808 B1 KR 102470808B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
inflammatory bowel
composition
bowel disease
preventing
treating inflammatory
Prior art date
Application number
KR1020200144497A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20220059200A (ko
Inventor
윤상선
윤미영
유진선
Original Assignee
주식회사 바이오미
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 바이오미 filed Critical 주식회사 바이오미
Priority to KR1020200144497A priority Critical patent/KR102470808B1/ko
Priority to PCT/KR2021/015569 priority patent/WO2022092964A1/ko
Publication of KR20220059200A publication Critical patent/KR20220059200A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102470808B1 publication Critical patent/KR102470808B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0031—Rectum, anus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 명세서에서는 박테로이데스 테타이오타오마이크론(Bacteroides thetaiotaomicron), 박테로이데스 우니포르미스(Bacteroides uniformis) 및 루미노코커스 파에시스(Ruminococcus faecis) 중 둘 이상을 포함하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

Description

염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물{COMPOSITION FOR THE PREVENTATION OR TREATMENT OF INFLAMMATORY BOWEL DISEASE}
본 발명은 건강한 한국인의 장내 특성을 대표하는 특정 미생물을 포함하는 염증성 장질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.
위장관계(gastrointestinal tract)에는 수많은 미생물이 군집을 이루고 있으며, 이들 장내 세균총(intestinal microbiota)은 장의 항상성과 기능을 유지하는 데 필수적이다. 반면, 항생제나 병원균의 장내 유입에 의해 장내 균총이 급변하거나, 장내 균총이 지속적으로 불안정한 경우, 장 불균형이 야기되어 만성적인 염증성 장질환으로 발전한다.
보다 구체적으로, 수정 이후 발생과 동시에 형성되는 미생물 군집인 장내 세균총은 장내에 존재하는 세균(bacteria), 고세균(archaea), 진핵생물(eukarya), 바이러스를 포함한 미생물 군집(microbial community)을 의미한다. 장내 세균총은 초기 군집의 구성에 있어 다양한 환경과 숙주의 유전적 특성에서 유래하는 고유성(ndemism) 및 다양성을 갖는데, 성인이 되면서 점차 안정화를 갖는다. 그러나, 성장 후에도 식이(diet), 유전적(genetic) 및 후성유전학적(epigenetic) 구성 등에 의해 장내 세균총은 매우 큰 변화를 겪을 수 있다.
예를 들어, 인슐린이 첨가된 프리바이오틱스(prebiotics)는 짧은 사슬 지방산(short-chain fatty acids, SCFA)을 생산하는 박테리아의 성장을 촉진하여 장내 세균총을 변화시키고, 특정 장내 세균이 분비하는 독소로 인해 장내 염증이 야기되어 장내 세균총의 구성이 변하기도 한다. 나아가, 지속적으로 여러 종류의 항생제를 투여 받는 경우, 유익균을 포함하는 균의 감소로 인하여 감염증이 야기될 수도 있다. 이와 같이, 위장관 내 고유한 장내 세균총의 구성이 어떤 이유로든 불균형한 상태로 변형되는 것을 장 불균형(dysbiosis)이라 하며, 환경적으로 야기된 장 불균형은 종종 비가역적이고 숙주 대사에 변형을 가져와 다른 질환을 야기시키거나 기존 질환을 악화시킬 수 있다.
특히, 다양한 장관 염증성 질환 중 염증성 장질환(inflammatory bowel disease, IBD)은 원인을 알 수 없는 복잡한 만성 염증 질환으로 최근 국내에서의 발생 빈도가 매우 높다. 과거에는 특정 병원균이나 크론병으로 인하여 궤양성 대장염과 같은 염증성 장질환이 유발된다고 추측하였으나, 최근에는 일부 장내 미생물이 지속적인 항원 자극을 유발함으로써 병원성 T세포를 꾸준히 활성화시켜 만성적인 장 세포 손상을 일으킬 수 있다는 것이 밝혀지고 있다. 즉, 염증성 장질환의 병태생리학적 원인을 고려하였을 때 숙주-미생물 상호작용(host-microbial interaction)을 안정화시킬 수 있는 장내 상재균을 활용한 치료가 중요한 해결 방안이 될 수 있다.
이에, 만성적인 염증성 장질환을 치료하기 위해 분변 미생물군 이식(fecal microbiota transplantation, FMT)이 제안되고 있으나, 환자 유래 균총에 의한 저항 및 공여자와 수여자 간의 적합성 등에서 기인한 반응 차이로 인해 성공 여부를 확실시 하기 어렵고, 공여자의 분변에 상재 가능한 병원성 유기체에 의한 이차 감염의 우려도 배제하기 어려운 문제를 가지고 있다.
이러한 이유로, 장 관련 염증성 질환의 치료 및 예방 효과를 갖는 새로운 치료용 조성물의 개발이 지속적으로 요구되고 있는 실정이다.
발명의 배경이 되는 기술은 본 발명에 대한 이해를 보다 용이하게 하기 위해 작성되었다. 발명의 배경이 되는 기술에 기재된 사항들이 선행 기술로 존재한다고 인정하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
한편, 장내 세균총 생태계는 장내 세균 중 어떤 특정 종 및 성분이 장 염증 질환의 유발에 관여하는지 알기 어렵다. 따라서, 이러한 질병에서 장내 세균총의 병태생리학적 역할을 규명하기 위해서는, 정상군과 비정상군에서 장내 균총의 차이와 특징을 종합적으로 밝히는 것이 중요하다. 대부분의 장내 세균이 통상적인 배양 방법으로는 분리 및 발견이 어려워, 복잡한 장내 세균 총의 특성을 확인하는 연구는 많이 제약을 가지고 있다. 최근 DNA 및 RNA의 염기서열을 이용한 분자생태학적 분석법이 도입됨에 따라, 건강한 사람과 환자간에 장내 미생물 균총의 차이가 있음을 이해하고, 건강한 사람의 균총이 질병을 치료하는데 효과적임을 확인하였으나, 구성된 장내 미생물의 생리·화학적 역할을 규명하는 일은 여전히 어려워 분변 미생물군 이식의 안정성을 확보하기 어렵다.
이에, 본 발명의 발명자들은, 장내 미생물의 군집이 국가나 인종에 따라 유의미한 차이가 있다는 점에 착안하여, 전술한 분자생태학적 분석법을 통하여 다수의 건강한 한국인의 균총을 분석한 결과, 한국인 고유의 특성을 가진 미생물이 우점화되어 있다는 것을 확인하였으며, 이를 대표하는 12종의 미생물을 선별하였다.
나아가, 본 발명의 발명자들은, 전술한 미생물 중 일부 미생물이 특정 비율로 포함된 경우, 안정적으로 건강한 균총이 우점화되며 염증성 장질환이 개선된다는 것을 확인할 수 있었다.
이에, 본 발명의 발명자들은 전술한 특정 균주를 일정 비율로 포함하는 약학적 조성물을 발견하기에 이르렀고, 상기 조성물이 염증성 장질환의 예방 및 치료에 이용될 수 있음을 인지할 수 있었다.
그 결과, 본 발명의 발명자들은, 건강한 한국인 장내에서 서식하며, 수여자의 장내에 성공적으로 우점화되어 지속적이고 안정적으로 균총을 이루어 최종적으로 염증성 장질환을 예방 및 완화시킬 수 있는 특정 균주를 포함하는 조성물을 개발하기에 이르렀다.
이에, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는, 박테로이데스 테타이오타오마이크론(Bacteroides thetaiotaomicron), 박테로이데스 우니포르미스(Bacteroides uniformis) 및 루미노코커스 파에시스(Ruminococcus faecis) 중 둘 이상을 포함하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 과제들은 이상에서 언급한 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당 업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
전술한 바와 같은 과제를 해결하기 위해, 본 발명은, 박테로이데스 테타이오타오마이크론(Bacteroides thetaiotaomicron), 박테로이데스 우니포르미스(Bacteroides uniformis) 및 루미노코커스 파에시스(Ruminococcus faecis) 중 둘 이상을 포함하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명의 특징에 따르면, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은, 박테로이데스 테타이오타오마이크론 1에 대하여 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스가 각각 약 1의 비율로 조성될 수 있으며, 직장 투여 형태(rectally administered form) 또는 경구 섭취 가능한 형태(orally ingestible form)로 제형화되어 제공될 수 있다.
본 발명의 다른 특징에 따르면, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은, 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따르면, 박테로이데스 테타이오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스의 함량은 각각 105 내지 1011 CFU/ml일 수 있으나, 바람직하게는, 5 X 108 CFU/ml일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 특징에 따르면, 염증성 장질환은, 궤양성 대장염, 크론병, 교원성 대장염, 림프성 대장염, 허혈성 대장염, 전환성 대장염 및 베체트 증후군 중 적어도 하나를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 장내에서 유발될 수 있는 다양한 질환을 모두 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따르면, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은, 조성물을 투여한 시점을 기준으로, 염증성 장질환의 활성도(disease activity index)가 감소될 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따르면, 테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스의 우점율(colonization)은, 조성물을 개체에게 투여한 24시간 이후, 장내에서 약 10 % 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 개체의 상태 따라 상이한 우점율을 나타낼 수 있다.
전술한 바와 같은 과제를 해결하기 위해, 본 발명은, 박테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스의 균주를 각각 배양하는 단계, 배양된 각각의 균주를 원심분리하는 단계, 원심분리된 각각의 균주를 희석하는 단계, 및 희석된 각각의 균주를 하나로 혼합하는 단계를 포함하는 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법을 제공한다.
본 발명의 특징에 따르면, 배양하는 단계는, 각각의 균주를 액체배지에서 배양하는 단계를 포함할 수 있으며, 이때, 액체 배지는 GAM(Gifu Anaerobic Medium)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 전술한 각각의 균주가 배양될 수 있는 다양한 배지를 모두 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 특징에 따르면, 배양하는 단계는, 각각의 균주를 제 1 배양하는 단계, 및 배양된 각각의 균주를 제 2 배양하는 단계를 포함하고, 제 1 배양하는 단계는 1 내지 3 의 계대 배양이 수행될 수 있다. 나아가, 전술한 제 1 배양하는 단계 및 제 2 배양하는 단계는, 각각 20 내지 48 시간 동안 수행될 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따르면, 원심분리하는 단계는, 4,000 내지 5,000 rpm으로 5 내지 15분간 수행될 수 있으며, 희석하는 단계는, 각각의 균주가 105 내지 1011 CFU/ml이 되도록 희석할 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따르면, 혼합하는 단계는, 박테로이데스 테타이오타오마이크론 1에 대하여 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스가 각각 약 1의 비율로 혼합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 개체에 따라 다양한 비율로 혼합되어 사용될 수 있다.
한편, 본 발명의 일 실시예에 따른 약학적 조성물은 다양한 형태로 제형화 될 수 있다. 예를 들어, 약학적 조성물이 고형 제제로 제조되는 경우, 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제의 형태로 제조될 수 있다. 이러한 고형 제제는 1 개 이상의 부형제 예를 들어, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로오스, 락토오스 또는 젤라틴을 더 포함할 수 있다. 또한 고형 제제의 조성물은 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 등과 같은 윤활제들을 더 포함할 수 있다. 나아가, 본 발명의 일 실시예에 따른 약학 조성물이 액상 제제로 제조되는 경우, 수용액, 현탁액 및 약학적으로 허용 가능한 지방 및 오일, 알코올 또는 유기 용매, 에스테르, 에멀젼, 시럽 또는 엘릭시르, 비발포성 과립으로부터 재구성된 현탁액, 및 발포성 과립으로부터 재구성된 발포성 제제의 형태로 제조될 수 있다. 이때, 액상 제제의 조성물은 불활성 담체와 결합하여 액상 투약 제형으로 경구 투여될 수 있다. 적절한 불활성 담체로는 에탄올, 글리세롤, 물과 같은 약학적으로 허용 가능한 불활성 담체가 있을 수 있다. 나아가, 액상 제제의 조성물은 용매, 방부제, 유화제, 현탁화제, 희석제, 감미제, 증점제 및 용융조제를 더 포함할 수 있다. 또한 환자 허용성 (patient acceptance)을 증가시키기 위해 액상 제제의 조성물은 착색제 및 향미제를 더 포함할 수 있다.
이에, 본 발명의 또 다른 특징에 따르면, 혼합하는 단계는, 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 혼합하는 단계를 더 포함할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 다만, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것에 불과하므로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것으로 해석되어서는 아니된다.
본 발명은 염증성 장질환에 대한 치료 및 예방 효과가 있다.
보다 구체적으로, 본 발명은 건강한 한국인의 장내에 있어, 다수로 분포하는 특정 미생물 군집을 이용하여, 장내 균총의 균형과 안정화를 유도하거나 실질적으로 장내 감염을 일으키는 특정 병원성 미생물을 억제하여 이로부터 야기되는 장질환에 대한 예방용 또는 치료용 약학 조성물로서 이용될 수 있다.
이에, 본 발명은 항생제의 사용을 줄이는 것과 항생제 사용에 따라 발생되는 문제점들을 해결하는 것에 기여할 수 있다.
본 발명에 따른 효과는 이상에서 예시된 내용에 의해 제한되지 않으며, 더욱 다양한 효과들이 본 명세서 내에 포함되어 있다.
도 1 및 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법의 절차를 도시한 것이다.
도 3a 및 3b은 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물에 이용되는 한국인 장내 미생물에 대한 결과를 도시한 것이다.
도 4a 및 4b는 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 처리에 따른 장내 균총 변화에 대한 결과를 도시한 것이다.
도 5a 및 5b는 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물에 따른 숙주 상태 결과를 도시한 것이다.
도 6 내지 7b는 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물에 따른 숙주 장 상태 결과를 도시한 것이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나, 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
본 명세서에서 사용되는 용어 " 개체 "는, 염증성 장질환이 발병될 가능성이 있거나, 발병된 인간을 포함하는 모든 동물을 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 개체는 인간을 제외한 모든 동물을 의미할 수도 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 " 염증성 장질환 "은, 호전과 재발을 반복하며 장내 만성적인 염증과 궤양을 일으키는 질환으로, 환경적, 면역적 및 유전적인 요인으로 인하여 발병될 수 있으며, 궤양성 대장염, 크론병, 교원성 대장염, 림프성 대장염, 허혈성 대장염, 전환성 대장염 및 베체트 증후군을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용되는 용어 " 완화 "는, 본 발명에 따른 조성물의 투여로 염증성 장질환의 병증이 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위를 의미할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 " 투여 "는, 어떠한 적절한 방법으로 대상에게 본 발명의 약학적 조성물을 도입하는 것을 말하며, 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다. 나아가, 본 발명의 일 실시예에 따른 약학적 조성물은 목적 또는 필요에 따라 당업계에서 사용되는 통상적인 방법, 투여 경로, 투여량에 따라 적절하게 개체에 투여될 수 있다. 투여 경로의 예로는 경구, 비경구, 피하, 복강 내, 폐 내, 및 비강 내로 투여될 수 있으며, 비경구 주입에는 근육 내, 정맥 내, 동맥 내, 복강 내 또는 피하투여가 포함된다. 또한, 당업계에 공지된 방법에 따라 적절한 투여량 및 투여 횟수가 선택될 수 있으며, 실제로 투여되는 본 발명의 약학적 조성물의 양 및 투여 횟수는 치료하고자 하는 증상의 종류, 투여 경로, 성별, 건강 상태, 식이, 개체의 연령 및 체 중, 및 질환의 중증도와 같은 다양한 인자에 의해 적절하게 결정될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "약학적으로 유효한 양"은, 의학적 용도에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 혈관 투과성 증가를 억제 또는 완화하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 " 생균제(probiotic) "는, 숙주 생물체의 건강상 이점 및/또는 숙주 생물체에서 질병, 장애, 질환 또는 이벤트의 위험 및/또는 증상의 감소와 관련된 미생물 유형을 의미한다. 이때, 본 발명의 다양한 실시예에서 사용되는 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은 생균제로서, 품, 기능성 식품 또는 건강 식품으로 제형화될 수 있으며, 약학적 조성물로서도 제형화 될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 " 미생물군 "은, 특정 환경에서 미생물(박테리아, 곰팡이, 원생생물), 이들의 유전 요소(게놈)의 총체를 의미할 수 있으며, 위장관계, 경구, 기관지, 피부, 질 등의 다양한 미생물을 포함할 수 있으나, 바람직하게는 위장관계 미생물일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용되는 용어 " 약 "은, 기재된 값의 ± 10%를 포함하는 것을 의미할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "포함하다(comprises or includes)", "포함하는(comprising or including)", "가지는(having)" 및 그것들의 활용은 "포함하지만 이에 한정되지 않는(including but not limited to)"을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 용어 " 방법(method) "은, 화학, 약학, 생물학, 생화학 및 의약 분야의 실무자들에게 알려졌거나 그들에 의해 공지의 방식들, 수단들, 기술들 및 공정들로부터 쉽게 개발된 방식들, 수단들, 기술들 및 공정들을 포함하나 이제 한정되지 않는, 주어진 임무를 수행하기 위한 방식들, 수단들, 기술들 및 공정들을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 용어, " 예방 "은 약학적 조성물의 투여로 질병을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 " 치료(treatment) "는 질환의 진행을 끝내고(abrogating), 실질적으로 억제하고(inhibiting), 지연(slowing) 또는 역전(reversing)시키고, 질환의 임상학적 또는 심미적 증상을 실질적으로 개 선하거나, 질환의 임상학적 또는 심미적 증상의 출현을 실질적으로 예방하는 것을 포함한다.
이하에서는, 도 1을 참조하여, 본 발명의 다양한 실시예에서 이용되는 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법에 대하여 구체적으로 설명한다. 이때, 설명의 편의를 위하여 도 2를 참조하여 설명한다.
염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법
도 1을 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법은 박테로이데스 테타이오타오마이크론(Bacteroides thetaiotaomicron), 박테로이데스 우니포르미스(Bacteroides uniformis) 및 루미노코커스 파에시스(Ruminococcus faecis)의 균주를 각각 배양하는 단계(S110), 배양된 각각의 균주를 원심분리하는 단계(S120), 원심분리된 각각의 균주를 희석하는 단계(S130) 및 희석된 각각의 균주를 하나로 혼합하는 단계(S140)을 포함한다.
이때, 배양하는 단계(S110)에서는 각각의 균주를 제 1 배양하는 단계 및 배양된 각각의 균주를 제 2 배양하는 단계를 포함할 수 있다. 보다 구체적으로, 도 2를 참조하면, 배양하는 단계(S110)의 제 1 배양은 B. thetaiotaomicron, B. uniformis, R. faecis 균주에 대한 보존액(stock solution)이 분주된 GAM(Gifu anaerobic media) 배지를 혐기적 조건(anaerobic condition)에서 24시간 동안 배양하고, 24시간 동안 배양된 균주를 새로운 배지로 교체하여 1 내지 3계대 배양하는 과정을 포함한다. 이때, 배양 환경 조건에서 온도는 36 ℃ 내지 38 ℃, 바람직하게는 36.5 ℃ 내지 37.5 ℃일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
그 다음, 배양하는 단계(S110)의 제 2 배양은 전술한 계대 배양된 균주를 고용량의 부피로 옮겨 혐기적 조건에서 24시간 동안 배양한다.
이때, 제 2 배양은 균수를 증가시키기 위한 대량 배양(large culture)과정이며, 이때 이식된 균주가 계대 배양 즉, 제 1 배양을 수행하지 않을 경우, 균주가 혐기적 조건에서 원하는 만큼 자라지 않을 수 있다. 이에, 배양하는 단계(S110)에서는 각 균주의 안정화를 위하여, 계대 배양인 제 1 배양이 필수적으로 수행된 후, 제 2 배양이 수행되어야 한다.
다시, 도 1을 참조하면, 배양하는 단계(S110) 이후 배양된 각각의 균주를 원심분리하는 단계(S120)가 수행될 수 있다. 이때, 원심분리하는 단계(S120)는 4,000 내지 5,000 rpm으로 5 내지 15분간 수행될 수 있다.
그 다음, 원심분리하는 단계(S120) 이후 원심분리된 각각의 균주를 희석하는 단계(S130)가 수행될 수 있다. 이때, 희석하는 단계(S130)는 원심분리 이후 가라 앉은 균을 PBS로 희석해주며, 각각의 균의 함량이 105 내지 1011 CFU/ml이 되도록 OD 값을 600으로 맞추어 준다. 이때, 균의 함량은 105 내지 1011 CFU/ml일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 바람직하게는 108 CFU/ml일 수 있다.
그 다음, 희석하는 단계(S130) 이후 희석된 각각의 균주를 하나로 혼합하는 단계(S140)가 수행될 수 있다. 혼합하는 단계(S140)에서는 동일 농도로 희석된 각각의 균주를 동량 즉, 1:1:1 비율로 혼합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
나아가, 혼합하는 단계(S140)에서는, 약학적 조성물로서의 제형화를 위하여 락토오즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아 레이트 및 광물유 중 적어도 하나의 희석제 및 부형제를 더 혼합할 수 있다. 이에, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은 전술한 희석제 및 부형제를 통하여, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제공될 수 있다.
더 나아가, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은 약학적 조성물뿐만 아니라, 식품 조성물로서 제공될 수 있다. 이에, 혼합하는 단계(S140)에서 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신(niacin), 비오틴(biotin), 폴레이트(folate), 판토텐산(panthotenic acid), 아연(Zn), 철(Fe), 칼슘(Ca), 크롬(Cr), 마그네슘(Mg), 망간(Mn), 구리(Cu), 크륨(Cr), 라이신, 트립토판, 시스테인, 발린 등의 아미노산, 방부 제(소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 살리실산, 데히드로초산나트륨 등), 살균제(표백분과 고도 표백분, 차아염소 산나트륨 등), 산화방지제(부틸히드록시아니졸(BHA), 부틸히드록시톨류엔(BHT) 등), 착색제(타르색소 등), 발색 제(아질산 나트륨, 아초산 나트륨 등), 표백제(아황산나트륨), 조미료(MSG 글루타민산나트륨 등), 감미료(둘신, 사이클레메이트, 사카린, 나트륨 등), 향료(바닐린, 락톤류 등), 팽창제(명반, D-주석산수소칼륨 등), 강화제, 유화제, 증점제(호료), 피막제, 검기초제, 거품억제제, 용제, 개량제 등의 식품 첨가물(food additives)을 더 포함할 수 있다.
이상의 과정을 통하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법은, 개체에게 이식되어 염증성 장질환을 효과적으로 예방 및 치료할 수 있는 새로운 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물에 따른 장내 균총의 우점화(colonization)
이하에서는, 도 3a 내지 4b를 참조하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 처리에 따른 장내 균총 변화에 대하여 설명하도록 한다.
먼저 도 3a을 참조하면, 본 발명의 발명자들의 의하여 선발된 한국인 위장관내의 대표적인 균들이 도시된다. 건강한 한국인 위장관내에 가장 많이 서식하는 균(Major Gut Microbes among Korean, MGMK)은 총 12종으로써, 박테로이데스 테타이오타오마이크론(Bacteroides thetaiotaomicron), 박테로이데스 우니포르미스(Bacteroides uniformis), 박테로이데스 멜라니노게니쿠스(Prevotella melaninogenica), 클로스트리디움 스킨덴스 (Clostridium scindens), 스트리디움 오르비신덴스(Clostridium orbiscindens), 유박테리움 렉탈레(Eubacterium rectale), 루미노코커스 파에시스(Ruminococcus faecis), 파에칼리박테리움 프라우스니트지(Faecalibacterium prausnitzii), 락토바실루스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 아시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 대장균(Escherichia coli) 및 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum sub. Infantis)인 것으로 나타난다. 즉, 전술한 12종 미생물이 장내에 컨소시움(consortium)을 이루며, 숙주에게 이로운 영향을 주는 것으로 나타난다.
이때, 전술한 균들 중 박테로이데스 테타이오타오마이크론(Bacteroides thetaiotaomicron), 박테로이데스 우니포르미스(Bacteroides uniformis) 및 루미노코커스 파에시스(Ruminococcus faecis)가 숙주의 위장관 내에서 보다 우점화가 우월한 것으로 나타난다.
보다 구체적으로, 도 3b를 참조하면, 전술한 12종의 균총의 이식에 따른 무균(GF) 마우스 모델의 장내 균총 결과가 도시된다. 이때, 마우스 모델에게 전술한 12종의 미생물을 동량으로 혼합한 1.2X108 CFU/ml 농도의 배양액을 경구 섭식(Oral gavage)으로 이식하고, 33일간 분변을 수집하여, 16S rRNA 영역 유전자의 염기 서열을 대상으로 하는 메타지노믹 시퀀싱(Metagenomic Sequencing)을 이용하여 각 균의 분포를 분석하고 미생물의 정착능 및 우점화를 확인하였다.
이식하고 12시간까지는, 박테로이데스 테타이오타오마이크론 및 대장균이 가장 많이 우점화되어 있는 것으로 나타나나, 24시간 이후부터는, 박테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스가 유사한 비율로 가장 많이 우점화되어 있는 것으로 나타난다. 나아가, 접종 24시간 이후부터, 무균 마우스 모델에서 박테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스에 대한 우점율은 각각 10 % 이상인 것으로 나타난다. 나아가, 전술한 3종의 미생물은 33일까지 장내에서 안정적으로 유지되는 것으로 나타난다.
즉, 박테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스의 3종의 미생물이 장내에서 정착능 및 우점화가 가장 우수한 것으로 나타난다. 따라서, 전술한 3종의 미생물을 장내에 이식할 경우, 가장 안정적으로 장내에서 균총을 유지할 수 있음에 따라, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물로서, 전술한 3종의 미생물이 선택되었다.
이에, 도 4a를 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물에 따른 장내 균총의 분포 변화에 대한 결과이다. 이때, 마우스 모델은 DSS(dextran sulfate sodium)를 식수에 섞어 경구로 투여하여, 장 불균형(Dysbiosis)이 유도된 급성 염증성 장질환 모델로 만든 후, 실시예 및 비교예를 투여하여 비교하였다. 나아가, 실시예는 박테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스의 3종의 미생물을 포함하는 조성물을 처리한 그룹을 의미하며, 비교예는 대조군으로서 PBS를 처리한 그룹을 의미한다. 더 나아가, 실시예는 도 1 내지 2에서 설명한 바와 동일한 과정을 거쳐, 105 내지 1011 CFU/ml 함량을 갖는 각각의 균주를 동량의 비율로 혼합하여 사용하였다.
먼저, 비교예를 처리한 그룹은 아커만시아 무시니필라(Akkermansia muciniphila), 박테로이데스 카카에(Bacteroides caccae) 및 루미노코커스 알브스(Ruminococcus albus) 순으로 장내에 우점화되어 있는 것으로 나타난다. 즉, 장내에 전술한 아커만시아 무시니필라, 박테로이데스 카카에 및 루미노코커스 알브스의 균이 우점화될 경우, 염증성 장질환이 야기될 수 있다.
한편, 실시예를 처리한 그룹은 뮤리박컬럼 인테스티날리(Muribaculum intestinale), 아커만시아 무시니필라, 루미노코커스 알브스, 박테로이데스 테타이오타오마이크론 및 박테로이데스 우니포르미스 순으로 장내에 우점화되어 있는 것으로 나타나며, 박테로이데스 테타이오타오마이크론 및 박테로이데스 우니포르미스는 각각 9 % 내지 10 %의 비율을 차지하는 것으로 나타난다.
즉, 실시예 처리로 인하여, 장내 균총이 보다 다양해지며, 염증성 장질환을 야기시킬 수 있는 아커만시아 무시니필라와 같은 병원균이 감소한 것으로 나타난다. 즉, 염증성 장질환을 야기시킬 수 있는 병원균이 감소됨에 따라, 실시예 처리를 통하여 염증성 장질환이 개선될 수 있다. 나아가, 실시예 처리를 통하여 장내 균총이 보다 풍부함과 다양성을 가질 수 있으며, 이에 따라, 보다 다양한 질병에 대한 다양한 방어 및 치료 효과가 나타날 수 있다.
나아가, 도 4b를 참조하면, 전술한 4a에서 실시예의 분포 변화에 대한 결과이다. 실시예에서의 박테로이데스 테타이오타오마이크론 및 박테로이데스 우니포르미스은 염증성 장질환 모델의 장내에서는 존재하지 않았지만, 주입 후 빠른속도록 장내에서 우점화(colonization)가 되며, 안정적으로 균총을 유지하는 것으로 나타난다. 나아가, 루미노코커스 파에시스는 전술한 2종의 미생물과 마찬가지로, 주입 후 빠른 속도로 장내에서 우점화(colonization)가 되는 것으로 나타나나, 주입 4일 이후부터는 전술한 2종의 미생물에 비하여 우점화 비율이 낮아지는 것으로 나타난다. 즉, 박테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스는 장내에서 우점화 능력이 좋은 것으로 나타나나, 이를 유지할 수 있는 지속능은 박테로이데스 테타이오타오마이크론 및 박테로이데스 우니포르미스이 가장 우수한 것으로 나타난다.
이에, 박테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스 중 적어도 하나를 포함하는 조성물을 장내에 이식한 경우, 전술한 미생물이 장내에서 빠른 속도로 우점화되어 건강한 균총을 장시간 유지하며, 장질환을 빠르게 회복시킬 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물에 따른 장질환 회복
이하에서는, 도 5a 내지 7b를 참조하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 처리에 따른 염증성 장질환의 예방 및 치료에 대하여 설명하도록 한다.
먼저, 도 5a를 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 투여에 따른 장질환 마우스 모델의 체중 변화에 대한 결과가 도시된다. 이때, 비교예 및 실시예는 DSS를 투여한 후, 18일, 19일 및 20일에 3차례 투여하였다.
실시예를 투여한 경우, 비교예를 투여한 경우에 비해 DSS를 투여하기 전 정상 몸무게까지 회복하는데 소요되는 시간이 2일 이상 빠른 것으로 나타난다. 즉, 실시예를 처리한 그룹이 보다 질환을 완화하는 속도가 빠르다는 것을 의미할 수 있다.
나아가, 도 5b를 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 투여에 따른 장질환 마우스 모델의 염증성 장질환에 대한 활성도 평가가 도시된다. 이때, 염증성 장질환에 대한 활성도를 임상적으로 평가하기 위하여 체중 감소(변화)의 정도, 대변의 경도, 육안적 혈변의 유무에 따라 점수를 부여하여 실험 기간 동안 매일 질환 활성도를 측정하였다.
DSS로 인하여 염증성 장질환이 유발된 개체는 시간이 경과될수록, 질환의 활성도(disease activity index, DAI)가 증가하는 것으로 나타난다. 그러나, 염증성 장질환 유발을 위한 DSS 처리 16일 이후, 실시예를 처리한 결과, DAI가 급격하게 낮아지는 것으로 나타나며, 이는 비교예보다 2배 이상 DAI가 감소한 것으로 나타난다. 즉, 실시예를 처리한 경우, 보다 염증성 장질환의 회복이 빠르게 진행될 수 있다는 것을 의미할 수 있다.
도 6을 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 투여에 따른 장질환 마우스 모델의 장 조직에 대한 관찰 이미지 결과가 도시된다.
비교예를 처리한 개체의 경우, 장 상피조직에 미란 등이 발생하여 일부 조직층이 사라지고, 점막이 부풀어 올랐으며 조직 내 호중구나 단핵구와 같은 염증 세포들이 뭉쳐서 침윤된 것으로 나타난다. 즉, DSS 처리로 인하여 손상된 장 조직이 회복하지 못한 것으로 나타난다.
반면에, 실시예를 처리한 경우, 장 상피조직이 탈락없이 촘촘하게 구성되어, 일정 두께의 층을 유지한 것으로 나타난다. 즉, DSS 처리로 인하여 손상된 장 조직이 정상적인 장 상피조직의 모습으로 회복한 것으로 나타난다.
이에, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은 염증성 장질환 개체에 있어, 손상된 장 상피조직을 정상적으로 회복시킬 수 있는 효과가 있다.
도 7a를 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 투여에 따른 장질환 마우스 모델의 장 조직 길이에 대한 관찰 이미지 결과가 도시된다. 이때, 장 조직 길이의 확인은, 염증성 장질환의 상태를 확인하기 위한 방법으로서, 염증성 장질환이 발생한 개체의 경우, 대표적인 증상으로 장 길이의 단축이 발생한다. 이에, 장 조직 길이의 확인을 통하여 염증성 장질환의 상태를 확인할 수 있다.
장질환이 발생하지 않은 정상 대조군의 장 길이의 경우, 8 cm인 것으로 나타나며, 실시예를 처리한 개체의 경우, 정상 대조군과 유사한 장 길이를 가진 나타난다. 반면에, 비교예를 처리한 개체의 경우, 정상 대조군 및 실시예보다 짧은 6cm의 장 길이를 가진 것으로 나타난다.
보다 구체적으로, 도 7b를 참조하면, 전술한 7a에 대한 그룹들의 전체 장 길이 변화에 대한 결과가 도시된다. 정상 대조군에 대한 장 길이의 평균은 약 7.4 cm인 것으로 나타나며, 실시예에 대한 장 길이의 평균은 약 7.3 cm로 정상 대조군과 유사한 것으로 나타난다. 반면에, 비교예에 대한 장 길이의 평균은 약 6.1 cm로 전술한 정상 대조군 및 실시예보다 짧은 길이의 장 길이를 갖는 것으로 나타난다.
즉, 실시예의 처리로 인하여, 염증성 장질환으로 손상된 장 길이가 회복된다는 것을 의미할 수 있다. 이에, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은 염증성 장질환 개체에 있어, 손상된 장 조직의 길이를 정상적으로 회복시킬 수 있는 효과가 있다.
이상의 결과에 따라, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은 항생제와 같은 화학성 약물과 달리 장내 균총에 손상으로 인한 미생물의 다양성 감소를 야기시키지 않고, 염증성 장질환을 빠른 속도로 정상으로 회복시킬 수 있는 효과가 있다. 나아가, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은 안정적인 장내 균총의 균형을 장시간 유지하여, 다양한 감염성 질환 및 외부 환경적 자극으로부터 야기될 수 있는 장내 불균형을 억제할 수 있는 효과가 있다. 이에, 본 발명의 일 실시예에 따른 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은 숙주의 면역을 증진시킬 수 있는 효과가 있다.
이상 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시 예들을 더욱 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 반드시 이러한 실시 예로 국한되는 것은 아니고, 본 발명의 기술사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양하게 변형 실시될 수 있다. 따라서, 본 발명에 개시된 실시 예들은 본 발명의 기술사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시 예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 그러므로, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (18)

  1. 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물로서,
    박테로이데스 테타이오타오마이크론(Bacteroides thetaiotaomicron), 박테로이데스 우니포르미스(Bacteroides uniformis) 및 루미노코커스 파에시스(Ruminococcus faecis) 로 이루어지고,
    상기 염증성 장질환은,
    궤양성 대장염, 크론병, 교원성 대장염, 림프성 대장염, 허혈성 대장염, 전환성 대장염 및 베체트 증후군 중 적어도 하나를 포함하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은,
    상기 박테로이데스 테타이오타오마이크론 1에 대하여 상기 박테로이데스 우니포르미스 및 상기 루미노코커스 파에시스가 각각 약 1의 비율로 조성된, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물은,
    직장투여 형태(rectally administrated form) 또는 경구섭취 가능한 형태(orally ingestible form)로 제형화된, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 박테로이데스 테타이오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스의 함량은,
    각각 105 내지 1011 CFU/ml인, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물.
  6. 삭제
  7. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은,
    상기 조성물을 투여한 시점을 기준으로, 염증성 장질환의 활성도(disease activity index)가 감소되는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물.
  8. 제 1항에 있어서,
    상기 박테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스의 우점율(colonization)은,
    상기 조성물을 개체에게 투여한 24시간 이후, 장내에서 전체에 대해 약 10 % 이상인, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물.
  9. 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법으로서,
    박테로이데스 테타이오타오마이크론, 박테로이데스 우니포르미스 및 루미노코커스 파에시스의 균주를 각각 배양하는 단계;
    배양된 상기 각각의 균주를 원심분리하는 단계;
    원심분리된 상기 각각의 균주를 희석하는 단계, 및
    희석된 상기 각각의 균주를 하나로 혼합하는 단계를 포함하고,
    상기 염증성 장질환은,
    궤양성 대장염, 크론병, 교원성 대장염, 림프성 대장염, 허혈성 대장염, 전환성 대장염 및 베체트 증후군 중 적어도 하나를 포함하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
  10. 제 9항에 있어서,
    상기 배양하는 단계는,
    상기 각각의 균주를 액체배지에서 배양하는 단계인, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
  11. 제 10항에 있어서,
    상기 액체배지는,
    GAM(Gifu Anaerobic Medium)인, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
  12. 제 9항에 있어서,
    상기 배양하는 단계는,
    상기 각각의 균주를 제 1 배양하는 단계, 및
    배양된 상기 각각의 균주를 제 2 배양하는 단계를 포함하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
  13. 제 12항에 있어서,
    상기 제 1 배양하는 단계 및 제 2 배양하는 단계는,
    각각 20 내지 48 시간동안 수행되는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
  14. 제 12항에 있어서,
    상기 제 1 배양하는 단계는,
    1 내지 3 의 계대배양이 수행되는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
  15. 제 9항에 있어서,
    상기 원심분리하는 단계는,
    4000 내지 5000 rpm으로 5 내지 15분간 수행되는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
  16. 제 9항에 있어서,
    상기 희석하는 단계는,
    상기 각각의 균주를 105 내지 1011 CFU/ml이 되도록 희석하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
  17. 제 9항에 있어서,
    상기 혼합하는 단계는,
    상기 박테로이데스 테타이오타오마이크론 1에 대하여 상기 박테로이데스 우니포르미스 및 상기 루미노코커스 파에시스가 각각 약 1의 비율로 혼합하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
  18. 제 9항에 있어서,
    상기 혼합하는 단계는,
    약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 혼합하는 단계를 더 포함하는, 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물의 제조 방법.
KR1020200144497A 2020-11-02 2020-11-02 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물 KR102470808B1 (ko)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200144497A KR102470808B1 (ko) 2020-11-02 2020-11-02 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물
PCT/KR2021/015569 WO2022092964A1 (ko) 2020-11-02 2021-11-01 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200144497A KR102470808B1 (ko) 2020-11-02 2020-11-02 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20220059200A KR20220059200A (ko) 2022-05-10
KR102470808B1 true KR102470808B1 (ko) 2022-11-28

Family

ID=81382978

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200144497A KR102470808B1 (ko) 2020-11-02 2020-11-02 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR102470808B1 (ko)
WO (1) WO2022092964A1 (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115478031A (zh) * 2022-09-28 2022-12-16 中国科学院深圳先进技术研究院 防治炎症性肠病的胆汁酸代谢菌及其应用
CN116218735A (zh) * 2023-03-14 2023-06-06 中国海洋大学 一种单形拟杆菌菌株及其培养方法和应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019118515A2 (en) * 2017-12-11 2019-06-20 Vedanta Biosciences, Inc. Compositions and methods for suppressing pathogenic organisms

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6479685B2 (ja) * 2013-02-04 2019-03-06 セレス セラピューティクス インコーポレイテッド 病原性細菌生育の抑制のための組成物および方法
WO2016033439A2 (en) * 2014-08-28 2016-03-03 Yale University Compositions and methods for the treating an inflammatory disease or disorder
JP6886142B2 (ja) * 2017-01-04 2021-06-16 国立大学法人 新潟大学 腸内細菌叢改善剤及びその使用
MA53860A (fr) * 2018-10-09 2021-09-15 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019118515A2 (en) * 2017-12-11 2019-06-20 Vedanta Biosciences, Inc. Compositions and methods for suppressing pathogenic organisms

Also Published As

Publication number Publication date
KR20220059200A (ko) 2022-05-10
WO2022092964A1 (ko) 2022-05-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7473285B2 (ja) 相乗作用のある細菌組成物ならびにその製造及び使用方法
CN108712906B (zh) 微生物群落用于人类和动物健康的用途
AU2019200628B2 (en) Network-based microbial compositions and methods
JP6506173B2 (ja) 相乗的細菌組成物並びにその生成及び使用の方法
JP6479685B2 (ja) 病原性細菌生育の抑制のための組成物および方法
Rosander et al. Removal of antibiotic resistance gene-carrying plasmids from Lactobacillus reuteri ATCC 55730 and characterization of the resulting daughter strain, L. reuteri DSM 17938
JP2024003162A (ja) クロストリジウム・ディフィシル感染症の治療における新たな使用
US11357801B2 (en) Methods for treating autism spectrum disorder and associated symptoms
JP7153569B2 (ja) 健康な皮膚微生物叢の維持及び／又は回復に対する皮膚科調合剤
Lim et al. Antibacterial and anticavity activity of probiotic Lactobacillus plantarum 200661 isolated from fermented foods against Streptococcus mutans
US20050232909A1 (en) Inhibition of pathogens by probiotic bacteria
KR102470808B1 (ko) 염증성 장질환 예방 또는 치료용 조성물
US20130266539A1 (en) Probiotic recolonisation therapy
Ebersbach et al. Xylo-oligosaccharides inhibit pathogen adhesion to enterocytes in vitro
WO2020008149A1 (fr) Utilisation d'une souche de roseburia intestinalis pour la prévention et le traitement de l'inflammation de l'intestin
Meleh et al. Isolation and safety characterisation of lactobacilli strains with antimicrobial properties as potential probiotics for human use
WO2018112739A1 (zh) 一种假小链状双歧杆菌及其培养方法和应用
US20050074440A1 (en) Lactobacillus rhamnosus strain and uses thereof
KR20150066772A (ko) 신규한 유산균 및 이를 포함하는 영유아의 설사병 예방 또는 치료용 조성물
JP2023012558A (ja) 腸内細菌叢構成比率調整剤
US20190134115A1 (en) Activated Lactobacillus Reuteri Strains for Selective Pathogen Inhibition in a Human Microbial Community
KR101708871B1 (ko) 신규한 유산균 및 이를 포함하는 영유아의 설사병 예방 또는 치료용 조성물
Van Zyl Gastrointestinal persistence of the probiotic bacteria Lactobacillus plantarum 423 and Enterococcus mundtii ST4SA, and their anti-listerial activity
US20240041950A1 (en) Decolonization of enterobacteria, such as klebsiella pneumoniae, from the gut using strains of klebsiella oxytoca
EP4011384A1 (en) Decolonization of enterobacteria, such as klebsiella pneumoniae, from the gut using strains of klebsiella oxytoca

Legal Events

Date Code Title Description
N231 Notification of change of applicant
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant