KR102427242B1 - 유스카픽 에시드를 포함하는 피로 개선용 조성물 - Google Patents
유스카픽 에시드를 포함하는 피로 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 유스카픽 에시드 (Euscaphic acid)를 포함하는 피로 회복용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항염 및 항산화 활성을 통해 육체적 피로 회복에 효과를 나타내는 유스카픽 에시드를 이용한 피로 회복용 식품 조성물, 건강기능식품 조성물 및/또는 약학 조성물을 제공한다.
Description
본 발명은 유스카픽 에시드 (Euscaphic acid)를 포함하는 피로 회복용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항염 및 항산화 활성을 통해 육체적 피로 회복에 효과를 나타내는 유스카픽 에시드를 이용한 피로 회복용 식품 조성물, 건강기능식품 조성물 및/또는 약학 조성물을 제공한다.
피로는 크게 정신적, 육체적 피로로 나누어지며, 이 중 육체적 피로는 근 수축 활동에 요구되는 힘을 충분히 발휘 또는 유지하지 못하는 상태, 과로 또는 에너지 고갈로 인해 휴식에 의해 회복되지 않을 만큼 신체적 또는 정신적 능력이 감소한 상태, 작업 능률 또는 운동 수행 능력이 저하된 상태로 정의된다. 대표적인 피로의 증상은, 나른함, 지침, 기진맥진함, 졸림, 집중력 저하, 두통, 근육통 등이 알려져 있다.
일반적인 육체적 피로의 원인은 체내에 저장되어 있는 에너지원의 결핍 또는 이용 불능, 대사 작용에 의한 활성 산소 등 피로 물질의 축적, 체내의 항상성 실조 등이 알려져 있다. 특히 활성 산소는 과도한 신체활동, 과한 정신적/육체적 스트레스 등에 의하여 발생이 더 증가하는 것으로 밝혀졌다.
한편, 피로는 한가지의 요인으로 생기는 것이 아니라 다양한 요인이 복합적으로 작용하여 발생하는 경우가 많다. 예를 들어, 암, 결핵, 당뇨병, 간질환, 갑상선기능항진증, 심부전증, 빈혈 등의 신체 질환에 의해 피로를 느낄 수 있고, 심한 스트레스, 우울증, 불안증, 수면장애, 사회생활 부적응 등의 정신적 문제로 피로를 느낄 수 있으며, 과도한 신체 활동으로도 피로를 느낄 수 있다.
육체적 피로의 회복을 위해서는 충분한 에너지원의 공급과 휴식, 체내 피로물질의 생성 억제 및 제거 등이 요구되나, 실제로 바쁜 현대사회에서 충분한 영양섭취와 휴식은 이루어지고 있지 않다. 따라서, 피로를 회복시켜 주거나 억제시켜 줄 수 있는 물질의 개발이 필요하다.
한편, 항피로제와 관련하여, 한국공개특허 제10-2012-0033443호에는 대황 추출물을 이용한 항피로 조성물 및 이의 제조방법이 개시되어 있고, 대한민국 공개특허 제10-2016-0122110호에는 발효 태반 조성물을 이용한 항피로 조성물이 개시되어 있으나, 유스카픽 에시드에 대한 항피로 효능에 대해서는 알려진 바가 없다.
이러한 배경 하에, 본 발명자들은 유스카픽 에시드가 항염 또는 항산화 활성을 갖고 있고, 이러한 활성을 통해 혈액, 근육 및 간에서의 항피로 활성과 관련된 다양한 지표를 조절하여 우수한 피로 회복 효과를 나타냄을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
이에 따라, 본 발명은 유스카픽 에시드를 이용한 피로 회복용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상술한 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 유스카픽 에시드 (Euscaphic acid) 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피로 회복용 식품 조성물을 제공한다.
추가로, 본 발명은 유스카픽 에시드 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피로 회복용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한, 유스카픽 에시드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피로 회복용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 피로는 육체적 피로 또는 만성피로를 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 상기 육체적 피로는 근육 피로를 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 상기 피로 회복 효과는 항염 또는 항산화 효과에 의해 유도될 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 상기 조성물은 a) 내지 h) 중 어느 하나 이상의 효과를 나타낼 수 있다:
a) 혈액 내 LDH (Lactate dehydrogenase) 수준 감소, BUN (Blood urea nitrogen) 수준 감소, AST (aspartate aminotransferase) 수준 감소 및 ALT (alanine aminotransferse) 수준 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과;
b) 근육 내 글리코겐 증가 효과;
c) 혈액 내 글루코스 수준 감소, 젖산 수준 감소, 코르티솔 수준 감소 및 CK (Creatine kinase) 수준 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과;
d) 혈액 내 유리지방산 수준 증가 및 SOD 수준 (Superoxide dismutase) 증가로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과;
e) 혈액 내 MDA (Malondialdehyde) 수준 감소 효과;
f) 간 내 SOD (Superoxide dismutase) 활성 증가 및 카탈라아제 활성 증가로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과;
g) 근육 내 SOD (Superoxide dismutase) 활성 증가 및 시트르산 합성효소 활성 증가로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과; 및
h) 혈액 내 TNF-α 수준 감소, IL-6 수준 감소, IL-1β 수준 감소 및 IL-4 수준 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과.
본 발명에 따른 유스카픽 에시드를 이용한 피로 회복용 조성물은 항염 또는 항산화 활성을 통해, 보다 구체적으로 다음의 a) 내지 h) 중 어느 하나 이상의 효과를 통해, 우수한 항피로 효과를 나타내어, 육체 내 누적된 피로를 회복하는데 효과적이다: a) 혈액 내 LDH (Lactate dehydrogenase) 수준 감소, BUN (Blood urea nitrogen) 수준 감소, AST (aspartate aminotransferase) 수준 감소 및 ALT (alanine aminotransferse) 수준 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과; b) 근육 내 글리코겐 증가 효과; c) 혈액 내 글루코스 수준 감소, 젖산 수준 감소, 코르티솔 수준 감소 및 CK (Creatine kinase) 수준 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과; d) 혈액 내 유리지방산 수준 증가 및 SOD 수준 (Superoxide dismutase) 증가로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과; e) 혈액 내 MDA (Malondialdehyde) 수준 감소 효과; f) 간 내 SOD (Superoxide dismutase) 활성 증가 및 카탈라아제 활성 증가로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과; g) 근육 내 SOD (Superoxide dismutase) 활성 증가 및 시트르산 합성효소 활성 증가로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과; 및 h) 혈액 내 TNF-α 수준 감소, IL-6 수준 감소, IL-1β 수준 감소 및 IL-4 수준 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과.
도 1은 산화스트레스가 유도된 근육세포주 (C2C12)에서 유스카픽 에시드 처리에 따른 염증성 마커 TNF-α 및 IL-6의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 2는 산화스트레스가 유도된 근육세포주 (C2C12)에서 유스카픽 에시드 처리에 따른 항산화 마커 SOD, 카탈라아제 및 MDA의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 3은 강제 수영 부하 실험 (Forced swimming test, FST)에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 부동 시간 변화를 4주간 매주 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 피로 개선 관련 지표인 LDH, BUN, AST 및 ALT의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 5는 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 근육 내 글리코겐 함량을 나타낸 그래프이다.
도 6은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 피로 개선 관련 생화학적 지표인 글루코스, 젖산, 코르티솔 및 CK의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 7은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 피로 개선 관련 생화학적 지표인 유리지방산 및 SOD의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 8은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 MDA 농도를 나타낸 것이다.
도 9는 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 간 내 항산화 효소 SOD 및 카탈라아제의 활성을 나타낸 그래프이다.
도 10은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 근육 내 SOD 및 시트르산 합성효소의 활성을 나타낸 그래프이다.
도 11은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 염증 관련 지표 TNF-α, IL-6, IL-1β 및 IL-4의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 2는 산화스트레스가 유도된 근육세포주 (C2C12)에서 유스카픽 에시드 처리에 따른 항산화 마커 SOD, 카탈라아제 및 MDA의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 3은 강제 수영 부하 실험 (Forced swimming test, FST)에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 부동 시간 변화를 4주간 매주 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 피로 개선 관련 지표인 LDH, BUN, AST 및 ALT의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 5는 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 근육 내 글리코겐 함량을 나타낸 그래프이다.
도 6은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 피로 개선 관련 생화학적 지표인 글루코스, 젖산, 코르티솔 및 CK의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 7은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 피로 개선 관련 생화학적 지표인 유리지방산 및 SOD의 수준을 나타낸 그래프이다.
도 8은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 MDA 농도를 나타낸 것이다.
도 9는 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 간 내 항산화 효소 SOD 및 카탈라아제의 활성을 나타낸 그래프이다.
도 10은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 근육 내 SOD 및 시트르산 합성효소의 활성을 나타낸 그래프이다.
도 11은 강제 수영 부하 실험에서 유스카픽 에시드 투여에 따른 혈액 내 염증 관련 지표 TNF-α, IL-6, IL-1β 및 IL-4의 수준을 나타낸 그래프이다.
상술한 바와 같이, 육체적 피로의 회복을 위해서는 충분한 에너지원의 공급과 휴식, 체내 피로물질의 생성 억제 및 제거 등이 요구되나, 실제로 바쁜 현대사회에서 충분한 영양섭취와 휴식은 이루어지고 있지 않으며, 이에 따라, 피로를 효과적으로 회복시켜 주거나 억제시켜 줄 수 있는 물질의 개발이 지속적으로 요구되고 있는 실정이다.
본 발명자들은 유스카픽 에시드가 항염 또는 항산화 활성을 갖고 있고, 이러한 활성을 통해 혈액, 근육 및 간에서의 항피로 활성과 관련된 다양한 지표를 조절하여 우수한 피로 회복 효과를 나타냄을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 제1 측면은 유스카픽 에시드 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피로 회복용 식품 조성물 및/또는 유스카픽 에시드 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피로 회복용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 식품 조성물에 있어서, 유효성분으로 포함되는 유스카픽 에시드 (Euscaphic acid)는 하기 [화학식 1]의 구조를 가지는 펜타사이클릭 트리테르페노이드 (pentacyclic triterpenoid) 화합물로, 송아지 DNA 중합효소 α (pol α) 및 래트 DNA 중합효소 β (pol β)를 억제하는 DNA 중합효소 억제제로 알려져 있으며 (Murakami C, et al. Novel anti-inflammatory compounds from Rubus sieboldii, triterpenoids, are inhibitors of mammalian DNA polymerases. Biochim Biophys Acta. 2002 Apr 29;1596(2):193-200.), 세포자멸자 (apoptosis)를 유도하는 것으로 알려져 있다 (Dai W, et al. Euscaphic acid inhibits proliferation and promotes apoptosis of nasopharyngeal carcinoma cells by silencing the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway. Am J Transl Res. 2019 Apr 15;11(4):2090-2098.).
[화학식 1]
본 발명의 식품 조성물에 있어서, 상기 유스카픽 에시드는 인공적으로 합성하여 사용하거나, 시판되는 것을 사용할 수 있다. 또한, 유스카픽 에시드를 포함하는 물질 또는 천연의 공급원 등으로부터 정제하여 사용할 수 있다.
용어 "정제된"의 사용으로, 유스카픽 에시드가 천연 유래로 얻을 수 있는 형태에 비하여 농축된 형태임을 의미하고자 한다. 정제된 성분들은 이들의 천연원으로부터 농축시키거나, 또는 화학적 합성 방법을 통해 얻을 수 있다.
본 발명에서 용어 "피로"는 육체적, 정신적 능력이 감소되는 현상으로 병리적 피로, 생리적인 피로, 심리적인 피로로 분류할 수 있다. 첫째, 병리적 피로란 피로 감각이 생겨 간 기능 저하, 당뇨병, 위장병 등 질병까지 발생하는 것을 이른다. 둘째, 혈액 속에 피로물질이 축적됨에 따라 피로감을 느끼는 것을 생리적인 피로라 말한다. 생리적인 피로는 근육 내 포스포크레아티닌 부족, 근육 내 프로톤 축적 (산성 혈증), 근육 내 글루카곤 부족, 혈액 내 글루코스 농도 감소, 혈장 내 특정 아미노산 비율의 증가 등으로 발생되어, 말초, 중추 피로에 영향을 주게 된다. 셋째, 심리적 피로는 감정적인 갈등, 불안 또는 권태감에서 생기는 피로를 말하며 지속적인 활동이나 자극 후 세포, 근육, 기관의 힘이나 민감도가 일시적으로 감퇴된 상태를 말한다.
본 발명의 식품 조성물에 있어서, 상기 피로는 육체적 피로 또는 만성피로를 포함한다. 구체적으로, 육체적 피로는 과도한 신체 활동으로 인한 근육 피로를 포함하나, 이로 한정되지 않는다. 근육 피로는 피로감, 지구력 저하, 순발력 저하 또는 무기력 증세로 나타날 수 있다.
만성피로는 암, 결핵, 당뇨병, 간질환, 갑상선기능항진증, 심부전증, 빈혈 등의 신체 질환으로 인한 피로, 심한 스트레스, 우울증, 불안증, 수면장애, 사회생활 부적응 등의 정신적 문제로 인한 피로 또는 과도한 신체 활동으로 인한 피로가 6개월 이상 지속되거나 반복되는 증상을 말한다.
피로 정도를 나타내는 주요 지표에는 사이토카인, MDA 및 SOD가 있다. 사이토카인은 표적 세포의 세포막에 존재하는 특이적인 수용체에 결합하고 신호전달 경로를 활성화하여 궁극적으로 효소 활성이나 유전자의 발현을 변화시킨다. 운동으로 인하여 증가된 사이토카인은 근조직의 염증반응을 일으킬 수 있다.
MDA (Malondialdehyde)는 조직 손상의 지표로 사용되는 산화물로서, 근육조직에서 근육 내 피로감을 야기시키는 주요 물질인 산화스트레스를 평가하는 지표이다. 운동 시 운동에 따른 스트레스로 인하여 MDA가 증가할 경우, 근 조직에 손상을 준다.
이외에도 산화 스트레스와 관련된 항산화 효소로 SOD (Superoxide dismutase)가 있다. SOD는 슈퍼옥사이드 (superoxide)를 산소와 과산화수소 (H2O2)로 전환시키는 반응을 촉매하는 항산화효소로서, 혈중에서 자유 라디칼을 제거시키는 역할을 하며, 혈중 SOD의 증가는 근육 내 피로감을 감소시킨다.
따라서, 본 발명의 구체적인 일실시예에서는, 산화 스트레스가 유도된 근육세포주에서 유스카픽 에시드 처리에 따른 항염 및 항산화 효과를 확인하였다. 그 결과, 도 1 및 2에 나타난 바와 같이, 산화 스트레스에 의해 증가된 TNF-α 및 IL-6의 수준이 유스카픽 에시드 처리에 의해 유의적으로 감소하였고 (도 1), 산화 스트레스에 의해 감소된 SOD 및 카탈라아제의 수준이 유스카픽 에시드 처리에 의해 유의적으로 증가하였으며 (도 2), 산화 스트레스에 의해 증가된 MDA 수준은 유스카픽 에시드 처리에 의해 유의적으로 감소하여 (도 2), 항염 및 항산화 활성을 통해 근육 내 피로 개선 효과가 유도될 수 있음을 확인하였다.
LDH (Lactate dehydrogenase)는 근육활동 중 무산소해당계에 의해 ATP를 생산하고 피루브산과 젖산의 반응을 촉매하는 효소로 주로 적혈구와 근세포에 존재한다. 심한 육체 운동에 의한 직접적인 세포막의 파괴 및 조직 괴사, 스트레스에 의한 지질 과산화 등에 의하여 세포막 투과성이 증가되면 세포질 내의 LDH가 혈중으로 방출되며, 혈중 LDH 농도는 근 손상의 지표로 사용된다.
혈청 AST(Aspartate amino-transferase)와 ALT(Alaninetransferase)는 SGOT(Serum glutamic oxalate transaminase)와 SGPT(Serum glutamic pyruvate transaminase)로도 불린다. 특히, ALT는 장기간의 격렬한 운동 시에 글루탐산 (glutamate)의 아미노산을 피루브산으로 전이시키는 반응을 촉진시켜 단백질이 에너지로 사용될 수 있도록 작용하기도 한다고 한다. AST 및 ALT는 거의 모든 장기에 존재하는데, 특히 AST는 심장, 간장, 골격근에 많이 존재하며, ALT는 간장에 많이 존재한다. 이들은 혈청에 각각 소량 존재하지만 과도한 운동 후에는 AST값의 상승을 가져오고 식사에 의한 영향은 거의 받지 않는 것으로 알려져 있다.
글리코겐은 간 (2~10%)과 골격근(1~2%)에 저장이 되며, 간에서 저장된 글리코겐은 주로 뇌, 신장 등에서 사용된다. 고강도의 지구력 운동 시 간의 글리코겐이 고갈되면 근육 글리코겐이 에너지원이 된다. 따라서, 에너지원인 글리코겐의 증가는 피로도 감소를 의미한다.
따라서, 본 발명의 다른 구체적인 일실시예에서는, 마우스 강제 수영 부하 실험을 통해 유스카픽 에시드 처리에 따른 부동 시간 변화 및 다양한 항피로 관련 지표들을 측정함으로써 이의 항피로 효과를 확인하였다. 도 3에 나타낸 바와 같이 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군에 비해 유스카픽 에시드를 투여한 군의 부동 시간이 감소함을 확인하였다. 또한, 도 4 및 5에 나타낸 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군에 비해 유스카픽 에시드를 투여한 군은 혈액 내 LDH, BUN, AST 및 ALT의 수준을 유의적으로 감소시켰으며 (도 4), 근육 내 글리코겐 수준 또한 증가시켜 (도 5), 항피로 효과가 유도됨을 확인하였다.
혈중 글루코스 농도가 감소하고, 산소의 부족으로 인하여 당 생성과정이 저해될 경우 젖산 생성의 증가로 인하여 피로감을 느끼게 된다.
또한, 강도 높은 운동 시 근육에 대한 산소 공급이 해당과정 속도에 따라 갈 수 없을 때, 피루브산이 젖산탈수소효소에 의해 젖산으로 생성된다. 젖산의 축적으로 인체가 산성화되면 세포 내 pH를 떨어뜨리게 되고, 이로 인해 효소의 활성이 감소하게 되어 미토콘드리아의 산화 및 근육의 이완과 수축 활동이 억제된다. 따라서, 갑자기 심한 운동을 하는 경우, 세포 내 pH가 낮아짐에 따라 근육통이 초래될 수 있다.
코르티솔은 급성 스트레스에 반응하여 콩팥의 부신 피질에서 분비되는 스트레스 호르몬으로, 스트레스에 대항하는 신체에 필요한 에너지를 공급해 주는 역할을 한다. 분비된 코르티솔은 스트레스와 같은 외부 자극에 맞서 신체가 대항할 수 있도록 신체 각 기관으로 더 많은 혈액을 방출시키는데, 그 결과로 맥박과 호흡이 증가한다. 그러나, 스트레스를 지나치게 받거나, 만성 스트레스 상태가 되면 코르티솔의 혈중 농도가 높아지고 식욕이 증가하게 되어, 지방의 축적을 야기하며, 또한, 혈압이 올라 고혈압의 위험이 증가하고, 근조직의 손상도 야기될 수 있다. 불안과 초조 상태가 이어질 수 있고, 체중의 증가와 함께 만성피로, 만성두통, 불면증 등의 증상이 나타날 수 있다.
CK (Creatine kinase)는 근육에 많이 존재하는 효소로서, 근육 세포들이 손상될 때 혈액으로 방출되어 에너지원을 생성한다. CK는 운동 중인 근육 세포에서 무산소 시 ATP 재합성 (ADP와 포스포크레아티닌으로부터 ATP를 합성하는 과정)에 필요한 크레아티닌 포스페이트를 합성하는 역할을 한다.
따라서, 본 발명의 또 다른 구체적인 일실시예에서는, 마우스 강제 수영 부하 실험을 통해 유스카픽 에시드 처리에 따른 혈액 내 피로 개선 관련 생화학적 지표인 글루코스, 젖산, 코르티솔 및 CK의 수준 변화를 확인하였다. 그 결과, 도 6에서 확인되는 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군에 비해 유스카픽 에시드를 투여한 군은 혈액 내 글루코스 수준이 감소되고, 젖산, 코르티솔 및 CK의 수준이 유의적으로 감소되는 것으로 나타났다. 운동 부하로 증가된 혈액 내 글루코스, 젖산 및 CK 수준이 유스카픽 에시드의 투여에 따라 감소하였는바, 이를 통해 유스카픽 에시드가 근육 피로 회복에 효과적임을 확인할 수 있었다. 또한, 강제 수영과 같은 육체적 스트레스로 급격하게 증가된 혈액 내 코르티솔 수준은 유스카픽 에시드의 투여에 따라 유의적으로 감소하였는바, 이를 통해 유스카픽 에시드가 만성피로 회복에 효과적임을 확인할 수 있었다.
혈중 유리 지방산 (Free fatty acid, FFA)은 운동 시 지방 세포로부터 혈중으로 방출되어 순환하는 가장 중요한 에너지원으로 알려져 있다. 따라서, 유리 지방산은 당 생산과정을 거쳐 에너지원으로 이용되고, 이는 피로도를 감소시킨다.
따라서, 본 발명의 또 다른 구체적인 일실시예에서는, 마우스 강제 수영 부하 실험을 통해 유스카픽 에시드 처리에 따른 혈액 내 피로 개선 관련 생화학적 지표인 FFA 및 SOD의 수준 변화를 확인하였다. 그 결과, 도 7에서 확인되는 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군에 비해 유스카픽 에시드를 투여한 군은 혈액 내 FFA 수준이 유의적으로 증가하고, SOD 수준이 증가하는 것으로 나타났다. 운동 부하로 감소된 혈액 내 FFA 및 SOD 수준이 유스카픽 에시드의 투여에 따라 증가하였는바, 이를 통해 유스카픽 에시드가 근육 피로 회복에 효과적임을 확인할 수 있었다.
전술한 바와 같이, MDA는 운동에 따른 스트레스로 인해 증가하여 근 조직에 손상을 준다.
따라서, 본 발명의 또 다른 구체적인 일실시예에서는, 마우스 강제 수영 부하 실험을 통해 유스카픽 에시드 처리에 따른 혈액 내 MDA의 수준 변화를 확인하였다. 그 결과, 도 8에서 확인되는 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군에 비해 유스카픽 에시드를 투여한 군은 혈액 내 MDA 수준이 유의적으로 감소하는 것으로 나타났다. 운동 부하로 증가된 혈액 내 MDA 수준이 유스카픽 에시드의 투여에 따라 감소하였는바, 이를 통해 유스카픽 에시드가 근육 피로 회복에 효과적임을 확인할 수 있었다.
CAT (Catalase)는 SOD에 의해 전환된 과산화수소를 물과 산소로 변화시키는 효소로서, 운동 과정에서 발생되는 과산화수소의 축적을 억제하여 피로 개선에 도움을 준다.
따라서, 본 발명의 또 다른 구체적인 일실시예에서는, 마우스 강제 수영 부하 실험을 통해 유스카픽 에시드 처리에 따른 간 내 SOD 및 CAT 활성을 확인하였다. 그 결과, 도 9에서 확인되는 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군에 비해 유스카픽 에시드를 투여한 군은 간 내 SOD 및 CAT 활성이 유의적으로 증가하는 것으로 나타났다. 운동 부하로 감소된 간 내 SOD 및 CAT 활성이 유스카픽 에시드의 투여에 따라 유의적으로 증가하였는바, 이를 통해 유스카픽 에시드가 근육 피로 회복에 효과적임을 확인할 수 있었다.
CS (Citrate synthase)는 TCA 회로의 첫 단계에서 시트르산 합성을 촉매하는 효소로서, TCA 회로가 원활하게 돌아가지 않는다면 혈중 젖산이 축적되어 피로 유발의 원인이 된다.
따라서, 본 발명의 또 다른 구체적인 일실시예에서는, 마우스 강제 수영 부하 실험을 통해 유스카픽 에시드 처리에 따른 근육 내 SOD 활성 및 CS 농도 변화를 확인하였다. 그 결과, 도 10에서 확인되는 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군에 비해 유스카픽 에시드를 투여한 군은 근육 내 SOD 활성이 유의적으로 증가하고 CS 농도가 증가하는 것으로 나타났다. 운동 부하로 감소된 근육 내 SOD 활성 및 CS 농도가 유스카픽 에시드의 투여에 따라 증가하였는바, 이를 통해 유스카픽 에시드가 근육 피로 회복에 효과적임을 확인할 수 있었다.
전술한 바와 같이, 운동으로 인하여 증가된 사이토카인은 근조직의 염증반응을 일으킬 수 있다.
따라서, 본 발명의 또 다른 구체적인 일실시예에서는, 마우스 강제 수영 부하 실험을 통해 유스카픽 에시드 처리에 따른 혈액 내 TNF-α, IL-6, IL-1β 및 IL-4의 수준 변화를 확인하였다. 그 결과, 도 11에서 확인되는 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군에 비해 유스카픽 에시드를 투여한 군은 혈액 내 TNF-α 수준이 감소하고, IL-6, IL-1β 및 IL-4의 수준이 유의적으로 감소하는 것으로 나타났다. 운동 부하로 증가된 혈액 내 TNF-α, IL-6, IL-1β 및 IL-4의 수준이 유스카픽 에시드의 투여에 따라 감소하였는바, 이를 통해 유스카픽 에시드가 피로 회복에 효과적임을 확인할 수 있었다.
본 발명에서, 용어 "건강기능식품"은 "기능성 식품"및 "건강 식품"의 의미를 모두 포함한다.
본 발명에서, 용어 "기능성 식품(functional food)"은 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)와 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다.
본 발명에서 용어, "건강 식품(health food)"은 일반식품에 비해 적극적인 건강유지나 효과를 가지는 식품을 의미하고, 건강보조식품(health supplement food)는 건강 보조 목적의 식품을 의미한다. 경우에 따라, 기능성식품, 건강식품, 건강보조식품의 용어는 호용된다. 상기 식품은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 다양한 형태로 제조될 수 있다.
이러한 기능성 식품의 구체적인 예로, 상기 조성물을 이용하여 농산물, 축산물 또는 수산물의 특성을 살려 변형시키는 동시에 저장성을 좋게 한 가공식품을 제조할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 또한, 영양 보조제 (nutritional supplement) 및 식품 첨가제 (food additives) 등의 형태로 제조될 수 있으며, 인간을 취식 대상으로 한다.
상기 유형의 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 일반 식품으로는 이에 한정되지 않지만 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게이트, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용식물 유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 유스카픽 에시드를 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 영양보조제로는 이에 한정되지 않지만 캡슐, 타블렛, 환 등에 유스카픽 에시드를 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 건강기능식품으로는 이에 한정되지 않지만 예를 들면, 상기 유스카픽 에시드를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용(건강음료)할 수 있도록 액상화, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 상기 유스카픽 에시드를 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다. 또한, 상기 유스카픽 에시드는 피로 회복에 효과가 있다고 알려진 공지의 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물이 건강음료 조성물로 이용되는 경우, 상기 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 수크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.
유스카픽 에시드는 피로 예방 또는 피로 회복용 식품 조성물의 유효성분으로 함유될 수 있는데, 그 양은 상기 예방 또는 회복 효과를 얻기에 유효한 양으로, 예를 들어 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%인 것이 바람직하나, 이에 특별히 한정되는 것은 아니다.
상기 외에 본 발명의 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강식품은 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명의 제2 측면은 유스카픽 에시드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피로 회복용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약학 조성물에 있어서, 유효성분인 유스카픽 에시드에 대한 설명 및 이의 효과는 제1 측면에서 기술한 것과 동일하므로, 그 기재를 생략한다.
본원에서, 용어 "약학적으로 허용가능한"은 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 것을 말하며, 상기 염으로는 약제학적으로 허용가능한 유리산 (free acid)에 의하여 형성된 산 부가산염이 바람직하다.
상기 약학적으로 허용가능한 염은 유기산 또는 무기산을 이용하여 형성된 산 부가염일 수 있으며, 상기 유기산은 예를 들면 포름산, 아세트산, 프로피온산, 락트산, 부티르산, 이소부티르산, 트리플루오로아세트산, 말산, 말레산, 말론산, 푸마르산, 숙신산, 숙신산 모노아미드, 글루탐산, 타르타르산, 옥살산, 시트르산, 글리콜산, 글루쿠론산, 아스코르브산, 벤조산, 프탈산, 살리실산, 안트라닐산, 디클로로아세트산, 아미노옥시 아세트산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산 또는 메탄술폰산을 포함한다. 무기산은 예를 들면 염산, 브롬산, 황산, 인산, 질산, 탄산 또는 붕산을 포함한다. 산 부가염은 바람직하게는 염산염 또는 아세트산염 형태일 수 있으며, 보다 바람직하게는 염산염 형태일 수 있다.
이외에도 추가적으로 염이 가능한 형태는 가바염, 가바펜틴염, 프레가발린염, 니코틴산염, 아디페이트염, 헤미말론산염, 시스테인염, 아세틸시스테인염, 메티오닌염, 아르기닌염, 라이신염, 오르니틴염 또는 아스파르트산염 등이 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 더 포함할 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체로는 예컨대, 경구 투여용 담체 또는 비경구 투여용 담체를 추가로 포함할 수 있다. 경구 투여용 담체는 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등을 포함할 수 있다. 비경구 투여용 담체는 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코스 및 글리콜 등을 포함할 수 있다. 또한, 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다. 그 밖의 약학적으로 허용되는 담체로는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다 (Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).
본 발명의 약학 조성물은 인간을 비롯한 포유동물에 어떠한 방법으로도 투여할 수 있다. 예를 들어, 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 비경구적인 투여방법으로는 이에 제한되는 것은 아니나, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장 내 투여일 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 상술한 바와 같은 투여 경로에 따라 경구 투여용 또는 비경구 투여용 제제로 제형화할 수 있다. 제형화할 경우에는 하나 이상의 완충제(예를 들어, 식염수 또는 PBS), 카보하이드레이트(예를 들어, 글루코스, 만노스, 수크로스, 또는 덱스트란 등), 항산화제, 정균제, 킬레이트화제(예를 들어, EDTA 또는 글루타치온), 충진제, 증량제, 결합제, 아쥬반트(예를 들어, 알루미늄 하이드록사이드), 현탁제, 농후제, 습윤제, 붕해제 또는 계면활성제, 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액 또는 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 약학 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분(옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분 등 포함), 칼슘카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose), 락토오스(Lactose), 덱스트로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 말티톨, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 또는 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 예컨대, 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다.
단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물 또는 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 또는 보존제 등이 포함될 수 있다.
또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있으며, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
비경구적으로 투여하는 경우 본 발명의 약학 조성물은 적합한 비경구용 담체와 함께 주사제, 경피 투여제 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법에 따라 제형화 될 수 있다. 상기 주사제의 경우에는 반드시 멸균되어야 하며 박테리아 및 진균과 같은 미생물의 오염으로부터 보호되어야 한다. 주사제의 경우 적합한 담체의 예로는 이에 한정되지는 않으나, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 이들의 혼합물 및/또는 식물유를 포함하는 용매 또는 분산매질일 수 있다. 보다 바람직하게는, 적합한 담체로는 행크스 용액, 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline) 또는 주사용 멸균수, 10% 에탄올, 40% 프로필렌 글리콜 및 5% 덱스트로즈와 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 상기 주사제를 미생물 오염으로부터 보호하기 위해서는 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르빈산, 티메로살 등과 같은 다양한 항균제 및 항진균제를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 주사제는 대부분의 경우 당 또는 나트륨 클로라이드와 같은 등장화제를 추가로 포함할 수 있다.
경피 투여제의 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태가 포함된다. 상기에서 '경피 투여'는 약학적 조성물을 국소적으로 피부에 투여하여 약학적 조성물에 함유된 유효한 양의 활성성분이 피부 내로 전달되는 것을 의미한다.
흡입 투여제의 경우, 본 발명에 따라 사용되는 화합물은 적합한 추진제, 예를 들면, 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 다른 적합한 기체를 사용하여, 가압 팩 또는 연무기로부터 에어로졸 스프레이 형태로 편리하게 전달 할 수 있다. 가압 에어로졸의 경우, 투약 단위는 계량된 양을 전달하는 밸브를 제공하여 결정할 수 있다. 예를 들면, 흡입기 또는 취입기에 사용되는 젤라틴 캡슐 및 카트리지는 화합물, 및 락토오스 또는 전분과 같은 적합한 분말 기제의 분말 혼합물을 함유하도록 제형화할 수 있다. 비경구 투여용 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975. Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 18042, Chapter 87: Blaug, Seymour)에 기재되어 있다.
본 발명의 약학 조성물은 유스카픽 에시드를 유효량으로 포함할 때 바람직한 피로 회복 효과를 제공할 수 있다. 본원에서, 용어 "유효량"은 음성 대조군에 비해 그 이상의 반응을 나타내는 양을 말하며, 바람직하게는 피로를 예방 또는 회복하기에 충분한 양을 말한다. 본 발명의 약학 조성물에 유스카픽 에시드는 0.01 내지 99.9% 포함될 수 있으며, 잔량은 약학적으로 허용가능한 담체가 차지할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물에 포함되는 유스카픽 에스드의 유효량은 조성물이 제품화되는 형태 등에 따라 달라질 것이다.
본 발명의 약학 조성물의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 환자의 상태에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있다. 예를 들어, 유스카픽 에시드를 기준으로 하루에 체중 1 kg당 바람직하게 0.001 내지 100 mg, 더 바람직하게는 0.01 내지 10 mg의 양으로 투여되도록 1 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다. 그러나 상기 유스카픽 에시드의 용량은 약학 조성물의 투여 경로 및 치료 횟수뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 건강 상태, 성별, 질환의 중증도, 식이 및 배설율 등 다양한 요인들을 고려하여 환자에 대한 유효 투여량이 결정되는 것이므로, 이러한 점을 고려할 때 당 분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 상기 유스카픽 에시드를 피로 예방 또는 회복을 위한 특정한 용도에 따른 적절한 유효 투여량으로 결정할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 약학 조성물은 본 발명의 효과를 보이는 한 그 제형, 투여 경로 및 투여 방법에 특별히 제한되지 아니한다.
추가로, 본 발명의 제3 측면은 유스카픽 에시드를 포함하는 피로 회복용 의약외품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 의약외품 조성물에 있어서, 유효성분인 유스카픽 에시드에 대한 설명 및 이의 효과는 제1 측면에서 기술한 것과 동일하므로, 그 기재를 생략한다.
본 발명에서 용어, "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적을 사용되는 섬유, 고무제품 또는 이와 유사한 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 아니하며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염형 예방을 위하여 살균, 살충 및 이와 유사한 용도로 사용되는 제제 중 하나에 해당하는 물품으로서, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미할 수 있다. 또한 상기 의약외품은 피부외용제 및 개인위생용품을 포함할 수 있다. 바람직하게는 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 또는 연고제일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에 따른 상기 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용 할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
근육세포주에서의 항염 및 항산화 효과 확인
1-1. 시료의 준비
유스카픽 에시드 (BP1819, Biopurify Phytochemicals)를 10 mg 취하여 10 ml 매스 플라스크 (volumetric flask)에 넣은 후, 메탄올을 첨가하여 30분간 초음파 처리하였다. 이후 용액을 0.45 μm 멤브레인 필터 (membrane filter)로 여과하여 적정 농도로 희석한 후, 실험에 사용하였다.
1-2. 항염 활성 확인
C2C12 근육세포주 (ATCC® CRL-1772™)에 H2O2를 처리한 후 유스카픽 에시드 1 ㎍/㎖를 처리하여 염증성 마커 TNF-α 및 IL-6의 수준 변화를 확인하였다. 도 1에 나타난 바와 같이 정상군 (normal)에 비해 H2O2를 처리한 대조군 (control)에서 TNF-α 및 IL-6의 수준이 모두 증가되었으나, 유스카픽 에시드의 처리에 따라 유의적으로 감소하여 항염 효과가 유도됨을 확인하였다.
1-3. 항산화 활성 확인
C2C12 근육세포주 (ATCC® CRL-1772™)에 H2O2를 처리한 후 유스카픽 에시드 1 ㎍/㎖를 처리하여 항산화 마커 SOD, 카탈라아제 (catalase) 및 MDA의 수준 변화를 확인하였다. 도 2에 나타난 바와 같이 정상군 (normal)에 비해 H2O2를 처리한 대조군 (control)에서 SOD 및 카탈라아제의 수준은 현저하게 감소하고, MDA 수준은 현저하게 증가하였으나, 유스카픽 에시드 처리에 따라 SOD 및 카탈라아제의 수준은 유의적으로 증가하고, MDA 수준은 유의적으로 감소하여, 유스카픽 에시드 처리에 따라 항산화 효과가 유도됨을 확인하였다.
마우스 강제 수영 부하 실험 (Forced swimming test, FTS)
4주령 ICR 마우스 (Dae-Han Experimental Animal Center)에 유스카픽 에시드 1 mg/kg을 하루에 1회, 4주간 경구투여하고 물에서 움직임 없이 부동 상태로 유지된 시간을 측정하여 대조군과 비교하였다. 부동 시간은 매주 측정하였다. 그 결과, 도 3에서 확인되는 바와 같이, 유스카픽 에시드를 경구투여한지 3주차부터 대조군에 비해 부동 시간이 감소하기 시작하였고, 4주차에는 유의적으로 감소하였다.
항피로 효과 확인
3-1. 혈액 내 항피로 관련 지표 확인
실시예 2에서 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 ICR 마우스를 희생하여 피로 회복과 관련된 지표인 LDH, BUN, AST 및 ALT의 혈액 내 수준을 확인하였다. 도 4에서 확인되는 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군 (control)은 정상군 (normal)에 비해 혈액 내 LDH, BUN, AST 및 ALT의 수준이 현저하게 상승하였으나, 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 군에서는 모든 지표가 유의적으로 감소되어 우수한 항피로 효과를 나타내었다.
3-2. 근육 내 항피로 관련 지표 확인
실시예 2에서 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 ICR 마우스를 희생하여 피로 회복과 관련된 지표인 글리코겐의 근육조직 내 수준을 측정하였다. 그 결과, 도 5에 나타난 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군 (control)은 정상군 (normal)에 비해 근육 내 글리코겐 수준이 감소하였으나, 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 군에서는 글리코겐 수준이 증가하여 항피로 효과가 유도됨을 확인하였다.
혈액 내 항피로 관련 다양한 생화학적 지표 확인
4-1. 글루코스, 젖산, 코르티솔 및 CK 수준 확인
실시예 2에서 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 ICR 마우스를 희생하여 피로 회복과 관련된 생화학적 지표인 글루코스, 젖산, 코르티솔 및 CK의 혈액 내 수준을 측정하였다. 그 결과, 도 6에 나타난 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군 (control)은 정상군 (normal)에 비해 혈액 내 글루코스, 젖산, 코르티솔 및 CK 수준이 급격하게 증가하였으나, 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 군에서는 혈액 내 글루코스 수준이 감소하고, 젖산, 코르티솔 및 CK의 수준이 유의적으로 감소하여 항피로 효과가 유도됨을 확인하였다.
4-2. 유리지방산 및 SOD 수준 확인
실시예 2에서 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 ICR 마우스를 희생하여 피로 회복과 관련된 또 다른 생화학적 지표인 유리지방산 (free fatty acid, FFA) 및 SOD의 혈액 내 수준을 측정하였다. 도 7에 나타난 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군 (control)은 정상군 (normal)에 비해 혈액 내 FFA 및 SOD의 수준이 현저하게 감소하였으나, 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 군에서는 FFA 및 SOD 수준이 증가하였고, 특히 FFA의 수준이 유의적으로 증가함을 확인하였다.
4-3. MDA 수준 확인
실시예 2에서 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 ICR 마우스를 희생하여 피로 회복과 관련된 또 다른 생화학적 지표인 MDA의 혈액 내 수준을 측정하였다. 도 8에 나타난 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군 (control)은 정상군 (normal)에 비해 혈액 내 MDA 수준이 현저하게 증가하였으나, 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 군에서는 MDA 수준이 유의적으로 감소하였다.
간 내 항산화 효소 활성 확인
실시예 2에서 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 ICR 마우스를 희생하여 항산화 효소 SOD 및 카탈라아제의 간 내 활성을 측정하였다. 도 9에 나타난 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군 (control)은 정상군 (normal)에 비해 간 내 SOD 및 카탈라아제 활성이 현저하게 감소하였으나, 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 군에서는 SOD 및 카탈라아제 활성이 유의적으로 증가하였다.
근육 내 SOD 및 시트르산 합성효소 농도 확인
실시예 2에서 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 ICR 마우스를 희생하여 항산화 효소 SOD 및 항피로 관련 생화학적 지표인 시트르산 합성효소의 근육 내 활성 및 농도를 측정하였다. 그 결과, 도 10에 나타난 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군 (control)은 정상군 (normal)에 비해 근육 내 SOD 활성이 현저하게 감소하고 시트르산 합성효소의 농도가 현저하게 감소하였으나, 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 군에서는 SOD 활성이 유의적으로 증가하고 시트르산 합성효소의 농도가 증가하였다.
혈액 내 항염 활성 확인
실시예 2에서 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 ICR 마우스를 희생하여 염증 관련 지표인 TNF-α, IL-6, IL-1β 및 IL-4의 혈액 내 수준을 측정하였다. 그 결과, 도 11에 나타난 바와 같이, 유스카픽 에시드를 투여하지 않은 대조군 (control)은 정상군 (normal)에 비해 혈액 내 TNF-α, IL-6, IL-1β 및 IL-4의 수준이 모두 현저하게 증가하였으나, 유스카픽 에시드를 4주간 경구투여한 군에서는 TNF-α, IL-6, IL-1β 및 IL-4의 수준이 모두 감소하였고, 특히 IL-6, IL-1β 및 IL-4의 수준이 유의적으로 감소하였다.
이상의 결과를 바탕으로, 유스카픽 에시드는 육체적 피로 상태에서의 당 생성 과정 조절 및 해당 과정에서의 젖산 대사, 산화 스트레스 상태에서의 항산화 효소 조절, 운동 시 증가되는 사이토카인 조절을 통해 항피로 및 피로 유발 억제에 효과적임을 확인하였다.
Claims (11)
- 유스카픽 에시드 (Euscaphic acid) 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염을 포함하며, 다음의 a) 내지 c) 중 어느 하나 이상의 효과를 나타내는, 육체적 피로 개선용 식품 조성물:
a) 혈액 내 LDH (Lactate dehydrogenase) 수준 감소, BUN (Blood urea nitrogen) 수준 감소, AST (aspartate aminotransferase) 수준 감소 및 ALT (alanine aminotransferse) 수준 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과;
b) 혈액 내 CK (Creatine kinase) 수준 감소 효과; 및
c) 근육 내 시트르산 합성효소 활성 증가 효과. - 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 육체적 피로는 근육 피로를 포함하는, 육체적 피로 개선용 식품 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 제1항 또는 제3항에 있어서, 상기 식품 조성물은 건강기능식품 조성물인, 육체적 피로 개선용 식품 조성물.
- 유스카픽 에시드 (Euscaphic acid) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하며, 다음의 a) 내지 c) 중 어느 하나 이상의 효과를 나타내는, 육체적 피로 개선용 약학 조성물:
a) 혈액 내 LDH (Lactate dehydrogenase) 수준 감소, BUN (Blood urea nitrogen) 수준 감소, AST (aspartate aminotransferase) 수준 감소 및 ALT (alanine aminotransferse) 수준 감소로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 효과;
b) 혈액 내 CK (Creatine kinase) 수준 감소 효과; 및
c) 근육 내 시트르산 합성효소 활성 증가 효과. - 삭제
- 제7항에 있어서, 상기 육체적 피로는 근육 피로를 포함하는, 육체적 피로 개선용 약학 조성물.
- 삭제
- 삭제
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