KR102390927B1 - 락토바실러스 루테리 idcc 3701을 포함하는 숙취해소용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 숙취해소 기능을 가지는 조성물에 관한 것으로, 락토바실러스 루테리 IDCC 3701[기탁번호: ATCC BAA-2837] 및 바실러스 코아글란스 IDCC 1201[기탁번호: ATCC BAA-3143] 중 어느 하나를 포함한다.
Description
본 발명은 유산균을 포함하는 숙취해소용 조성물에 관한 것이다.
알코올은 위장에서 20% 가량 분해되며, 나머지는 소장과 대장에서 흡수되어 혈관을 통해 간으로 이동한다.
간으로 운반된 알코올은 ADH(Alcohol dehydrogenase, 알코올 탈수소효소)에 의해 아세트알데하이드로 분해된 후, ALDH(Aldehyde dehydrogenase, 알데하이드 탈수소효소)에 의해 아세트산으로 대사가 이루어진다.
아세트산은 이산화탄소와 물로 분해되어 호흡, 땀, 소변 등으로 체내에서 배출된다. 이때, 아세트알데하이드는 안면홍조나 빈맥, 두통, 구토 같은 숙취를 유발하며, 독성을 가지고 있어 세포와 DNA를 손상시킨다.
섭취한 알코올의 90%이상이 간에서 분해되기 때문에 알코올 분해로 생성된 아세트알데하이드는 간을 손상시키는 주 원인으로 작용한다.
이와 같이 아세트알데하이드 등으로 생기는 숙취문제를 해결하기 위한 많은 조성물이 개발되고 있다.
본 발명은 유산균을 포함하는 숙취해소용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 목적은 숙취해소 기능을 가지는 조성물에 있어서, 락토바실러스 루테리 IDCC 3701[기탁번호: ATCC BAA-2837] 및 바실러스 코아글란스 IDCC 1201[기탁번호: ATCC BAA-3143] 중 어느 하나를 포함하는 것에 의해 달성된다.
조성물은 상기 락토바실러스 루테리 IDCC 3701 및 상기 바실러스 코아글란스 IDCC 1201을 포함할 수 있다.
상기 락토바실러스 루테리 IDCC 3701 및 상기 바실러스 코아글란스 IDCC 1201의 단백질의 총질량비는 1:0.3 내지 1:3일 수 있다.
본 발명의 목적은 상기 조성물을 0.1 내지 50중량% 포함하는 식품에 의해 달성될 수 있다.
본 발명의 목적은 상기 조성물을 0.1 내지 50중량% 포함하며 숙취해소 기능이 있는 건강기능식품에 의해 달성될 수 있다.
본 발명의 목적은 상기 조성물을 0.1 내지 50중량% 포함하며 숙취를 해소하며 간장을 보호하는 약학적 조성물에 의해 달성될 수 있다.
본 발명에 따르면 유산균을 포함하는 숙취해소용 조성물이 제공된다.
도 1은 다양한 프로바이오틱스에 대해 세포에 1% 에탄올을 처리한 결과를 나타낸 것이다.
이하 도면을 참조하여 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
첨부된 도면은 본 발명의 기술적 사상을 더욱 구체적으로 설명하기 위하여 도시한 일 예에 불과하므로 본 발명의 사상이 첨부된 도면에 한정되는 것은 아니다. 또한 첨부된 도면은 각 구성요소 간의 관계를 설명하기 위해 크기와 간격 등이 실제와 달리 과장되어 있을 수 있다.
본 발명은 유산균을 포함하는 숙취해소용 조성물에 관한 것이다.
좀 더 구체적으로, 본 발명은 락토바실러스(Lactobacillus)속, 엔테로코커스(Enterococcus)속, 스트렙토 코커스(Streptococcus)속, 비피도박테리움(Bifidobacterium)속, 바실러스(Bacillus)속의 프로바이오틱스 중에서 숙취해소에 도움을 주는 프로바이오틱스 용해물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 락토바실러스 루테리 IDCC 3701[기탁번호: ATCC BAA-2837] 및 바실러스 코아글란스 IDCC 1201[기탁번호: ATCC BAA-3143] 중 어느 하나를 포함할 수 있다.
또한 본 발명의 조성물은 락토바실러스 루테리 IDCC 3701 및 바실러스 코아글란스 IDCC 1201을 모두 포함하며, 조성비는 단백질의 총질량비로 루테리 IDCC 3701 및 바실러스 코아글란스 IDCC 1201가 1:0.3 내지 1:3일 수 있다.
루테리 IDCC 3701 및 바실러스 코아글란스 IDCC 1201은 생균 또는 용해물의 형태일 수 있다.
락토바실러스 루테리 IDCC 3701은 ADH의 활성이 우수하며, 바실러스 코아글란스 IDCC 1201는 ALDH의 활성이 우수하다. 이들 두 유산균을 모두 포함하는 조성물은 ADH의 활성과 ALDH의 활성이 높으며, 특히 ADH의 활성이 크게 증가한다.
본 발명의 조성물은 락토바실러스 루테리 IDCC 3701 및 바실러스 코아글란스 IDCC 1201외의 다른 유산균을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 약학적 조성물로 제조될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여 방식으로 적용된다. 본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물의 일반적인 투여량은 성인 기준으로 0.001-100 ㎎/kg 범위 또는 0.001-1000 ㎎/kg 범위내이다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 61(tween 61), 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
한편, 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명의 용어 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 건강상태, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여, 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 사용목적, 질환의 중독도, 환자의 연령, 체중, 성별, 기왕력, 또는 유효성분으로 사용되는 물질의 종류 등을 고려하여 당업자가 결정할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 약학 조성물은 성인 1인당 약 0.1 ng 내지 약 1000 mg/kg, 구체적으로 1 ng 내지 약 100 mg/kg 또는 1 ng 내지 약 10 mg/kg로 투여할 수 있고, 본 발명의 조성물의 투여빈도는 특별히 이에 제한되지 않으나, 1일 1회 투여하거나 또는 용량을 분할하여 수회 투여할 수 있다.
다른 예시로, 숙취해소용 및/또는 간장보호용 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서는 1일 0.0001 내지 2,000 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 2,000 mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한 번 투여할 수도 있고, 수회 나누어서 투여할 수도 있다. 다만, 상기 투여량에 의해서 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 달라질 수 있으므로, 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
또한 본 발명은 숙취해소용 및/또는 간장보호용 식품 또는 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태의 식품에 대한 조성물을 포함한다. 상기 유형의 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 예를 들면, 건강식품으로는 유산균이 함유된 껌, 비타민 복합체, 차, 주스 및 드링크 형태로 제조할 수 있으며, 락토바실러스 루테리 IDCC 3701 및/또는 바실러스 코아글란스 IDCC 1201을 유효성분으로 하는 식품 조성물을 과립화, 캡슐화 또는 분말화하여 섭취할 수 있다.
본 발명의 기능성 식품 조성물은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함할 수 있다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 대추 추출액, 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.
상기 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 추출물을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
다른 예로, 식품 조성물의 제형은 산제, 과립제, 환, 정제, 캡슐제의 형태뿐만 아니라 일반 식품 또는 음료의 형태 어느 것이나 가능하다.
식품의 종류에는 특별히 제한은 없고, 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸콜렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함할 수 있다.
일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 락토바실러스 루테리 IDCC 3701 및 바실러스 코아글란스 IDCC 1201의 합계 사용량은 0.1 내지 50중량%, 0.1 내지 20중량% 또는 0.1 내지 10중량% 포함될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있다.
일 구체예에 따른 식품 조성물 중 음료는 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다.
상기 외에 일 구체예에 따른 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제를 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다.
이하 실험예를 통해 본 발명을 상세히 설명한다.
[실험예 1] SDS-PAGE를 통한 효소확인
프로바이오틱스 배양을 위해 MRS 액체배지를 120℃, 15분 동안 멸균하였으며, 에탄올을 첨가하지 않은 배지와 에탄올 1%를 첨가한 배지를 따로 준비하였다. 플레이트로부터 단일 콜로니를 배지에 1일 동안 혐기적으로 37℃, 200 rpm의 조건으로 배양한 후, 배양액을 4℃, 13,000 rpm 조건에서 원심분리하여 균체만을 회수하였다. 균체를 Alcohol dehydrogenase assay buffer 0.4mL에 재현탁시킨 후, 냉장조건에서 30분 동안 초음파분쇄기로 균체를 파쇄하였다. 파쇄된 균체액을 동일한 조건으로 원심분리하여 프로바이오틱스의 용해물을 수확하였다. 이 후, ADH와 ALDH 효소가 잘 발현되는지 확인하기 위해서 SDS-PAGE 실험을 진행하였으며, 12% 아크릴아마이드 및 0.1% SDS를 함유하는 겔에서 수행하였다.
본 실험예에서 진행한 효소확인 결과는 도 1에 나타내었다. 도면에서의 기호에 대한 내용은 다음과 같다. M, protein marker; ADH, Alcohol dehydrogenase; ALDH, Aldehyde dehydrogenase; COA, 바실러스 코아글란스 IDCC 1201; BR, 비피도박테리움 브레베 IDCC 4401; LA, 비피도박테리움 락티스 IDCC 4301; FA, 엔테로코커스 페시움 IDCC 2102; AC, 락토바실러스 아시도필러스 IDCC 3302; CA, 락토바실러스 카제이 IDCC 3451; PL, 락토바실러스 플란타럼 IDCC 3501; RH, 락토바실러스 람노서스 IDCC 3201; TH, 락토바실러스 썰모필러스 IDCC 2201; RE, 락토바실러스 루테리 IDCC 3701; LLA, 락토코커스 락티스 IDCC 2301
발현의 정도는 positive control로 사용한 표준 ADH와 ALDH와 동일한 위치의 밴드를 비교하여 파악하였다. 그 결과, 알코올을 처리하지 않고 배양을 했을 땐 비교적으로 낮게 발현된 것을 확인하였다. 이에 반해, 1%의 알코올을 처리하였을 때는 두 효소 모두 진한 밴드를 보이며 발현율이 증가된 것을 확인할 수 있었다.
[실험예 2] 프로바이오틱스의 ADH 및 ALDH의 활성도 측정
검사를 위한 시료는 실험예 1에서의 용해물을 사용하였다. 용해물 내의 단백질 정량을 위해 BCA protein assay kit (Thermo Fisher 사)를 사용하였다. BCA reagent A와 reagent B를 50:1로 섞어 mixture를 제조한 후, mixture 160 ㎕와 표준물질 또는 용해물 20 ㎕을 혼합하여 37℃에서 30분 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후 562 nm, 37℃에서 흡광도를 측정하여 단백질 농도를 확인하였다. 제조사의 지침에 따라 Alcohol dehydrogenase activity assay kit (Sigma Aldrich 사)를 사용하여 ADH 활성을 측정하였다. 반응액은 ADH assay buffer 82 ㎕, developer 8 ㎕, 2 M 에탄올 10 ㎕의 mixture를 사용하였고, 대조군은 에탄올이 없는 반응액을 기준으로 하였다. 또한, 제조사의 지침에 따라 Aldehyde dehydrogenase activity assay kit (Sigma Aldrich 사)를 사용하여 ALDH 활성을 측정하였다. 반응액은 ALDH assay buffer 43 ㎕, ALDH substrate 2 ㎕, 아세트알데하이드 5 ㎕의 mixture를 사용하였고, 대조군은 아세트알데하이드가 없는 반응액을 기준으로 하였다. 반응이 완료된 후 용액 내의 생성된 NADH 함량을 보기 위해 450 nm, 37℃에서 흡광도를 측정하였다. 측정된 결과를 통하여 조효소액의 단백질 mg당 반응시간 동안 생성된 NADH양을 표 1에 나타내었다.
[표 1]
그 결과, 에탄올을 첨가하지 않은 프로바이오틱스의 용해물에서는 전반적으로 두 효소의 활성이 낮은 것을 확인하였다. 반면, 에탄올 1%를 첨가하여 얻은 용해물에서는 락토바실러스 루테리 IDCC 3701와 락토코커스 락티스 IDCC 2301은 ADH의 활성이 우수하였고, 바실러스 코아글란스 IDCC 1201와 비피도박테리움 브레베 IDCC 4401은 ALDH의 활성이 우수한 것으로 나타났다.
[실험예 3] 프로바이오틱스 혼합제제의 알코올 분해능 확인
실험예 2에서 ADH 또는 ALDH의 활성이 높은 균주를 혼합한 후 활성을 추가적으로 확인하였다. 실험예 3에서도 에탄올 첨가 여부에 따라 진행하였으며 균주의 조성비는 단백질의 총질량비를 기준으로 1:1로 혼합하여 사용하였다. 단백질 농도, ADH 및 ALDH의 활성은 상기 실험예 2와 동일한 방법으로 확인하였다. 측정된 결과를 통하여 혼합 조효소액의 단백질 mg당 반응시간 동안 생성된 NADH양을 표 2에 나타내었다.
[표 2]
실험예 2에서 효소활성에 효과가 있는 두 균주들의 용해물 조합을 통하여 효소활성의 시너지를 비교하여 본 결과, 바실러스 코아글란스 IDCC 1201와 락토바실러스 루테리 IDCC 3701를 혼합하였을 때 ADH와 ALDH 활성이 모두 높은 것을 확인하였다.
Claims (6)
- 숙취해소 기능을 가지는 조성물에 있어서,
락토바실러스 루테리 IDCC 3701[기탁번호: ATCC BAA-2837] 및 바실러스 코아글란스 IDCC 1201[기탁번호: ATCC BAA-3143]를 포함하는 조성물. - 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 락토바실러스 루테리 IDCC 3701 및 상기 바실러스 코아글란스 IDCC 1201의 단백질의 총질량비는 1:0.3 내지 1:3인 조성물. - 제1항 및 제3항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 0.1 내지 50중량% 포함하는 식품.
- 제1항 및 제3항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 0.1 내지 50중량% 포함하며 숙취해소 기능이 있는 건강기능식품.
- 삭제
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