KR102342047B1 - Cosmetic composition with skin moisturizing and elasticity that contains vaginal extract as active ingredient - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a cosmetic composition having the effects of moisturizing skin and strengthening skin barrier, containing a Plantago asiatica extract as an active ingredient. The present invention aims to exhibit excellent efficacy in skin moisturization and skin barriers by mixing the Plantago asiatica extract, a Foeniculum vulgare fruit extract, lactobacillus plantarum culture, an Artemisia princeps leaf extract, and polyglutamic acid together. In addition, various development possibilities as a new cosmetic raw material can be raised by applying the same to the actual human skin.

Description

질경이 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습과 탄력 효과를 갖는 화장료 조성물{Cosmetic composition with skin moisturizing and elasticity that contains vaginal extract as active ingredient} Cosmetic composition with skin moisturizing and elasticity that contains vaginal extract as active ingredient}

본 발명은 질경이 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습과 탄력, 피부 장벽 강화 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition containing plantain extract as an active ingredient and having skin moisturizing and elasticity and skin barrier strengthening effects.

인간의 피부는 시간이 지남에 따라 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 된다. 또한, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선 중 지표에 도달하는 자외선의 함량이 증가하게 되고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 피부의 두께가 감소하고, 주름이 증가되고, 탄력이 감소될 뿐 아니라, 기미, 주근깨 및 검버섯 또한 증가하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다. 그러나 현대사회는 젊고 아름다운 외모를 중시하기 때문에 이와 같은 피부 문제를 해결하려고 하는 욕구가 크다. 이에 따라, 다양한 주름 개선제, 탄력 개선제, 미백제 등이 개발되고 있다. As time goes by, the secretion of various hormones that internally control the metabolism of human skin decreases, and the function and activity of immune cells decreases, thereby reducing the biosynthesis of immune proteins and biological constituent proteins necessary for the living body. . In addition, externally, due to the destruction of the ozone layer, the content of ultraviolet rays reaching the surface of the sun increases, and as environmental pollution further deepens, the thickness of the skin decreases, wrinkles increase, elasticity decreases, and freckles , freckles and age spots also increase, causing various changes. However, since modern society places importance on young and beautiful appearance, there is a great desire to solve such skin problems. Accordingly, various wrinkle improving agents, elasticity improving agents, whitening agents, and the like have been developed.

한편, 피부에 나타나는 주름, 탄력 상실, 피부 건조증 등의 증상들은, 피부를 구성하는 물질인 콜라겐, 엘라스틴, 히아루론산, 프로테오글리칸, 글리코스아미노글리칸, 피브로넥틴 및 당단백질의 함유량 및 배열이 변하거나 감소하고, 수분과 결합할 수 있는 능력이 저하되고, 그 결과 피부를 구성하는 기질물질이 감소하고, 피부의 수분함유능력이 상실되어 나타나게 된다. 따라서 이를 해결하는 것이 피부 수분을 정상적으로 유지시키는 것이 피부 건강에 중요하다.On the other hand, symptoms such as wrinkles, loss of elasticity, and dry skin appearing on the skin change or decrease the content and arrangement of collagen, elastin, hyaluronic acid, proteoglycan, glycosaminoglycan, fibronectin and glycoprotein, which are substances constituting the skin. , the ability to bind with water is reduced, and as a result, the matrix material constituting the skin is reduced, and the skin's ability to contain water is lost. Therefore, it is important for skin health to maintain normal skin moisture to solve this problem.

한편, 피부를 구성하는 대부분의 세포에서는 염증을 일으킨다고 알려져 있는 전염증성 사이토카인 (proinflammatory cytokine)인 종양괴사인자알파 (TNF α, Tumor necrosis factor α), 인터루킨-1베타 (IL-1β, interleukin-1β), 프로스타글란딘(prostaglandin)을 생성하는 효소인 사이클로옥시게나제-2 (Cox-2, cyclooxygenase)의 생합성이 증가하고, 이들 염증성 인자에 의해 피부조직을 분해하는 효소인 매트릭스 메탈로프로테아제 (MMP, Matrix metalloproteinase)의 생합성이 증가하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 상기와 같은 피부세포를 증식시키거나 피부를 구성하는 기질물질을 증가시킴으로써 피부를 두껍게 할 수 있는 물질, 피부를 구성하는 기질 물질인 콜라겐을 분해하는 타입 I 콜라게나제(MMP-1)의 생합성을 억제할 수 있는 물질, 사이클로옥시게나 제-2의 생합성을 억제할 수 있는 물질, 종양괴사인자의 생합성을 억제할 수 있는 물질, 피부 섬유아세포에서의 트로포엘라스틴 및 피브릴린 생성을 촉진하는 물질 등을 개발한다면, 주름, 탄력 상실, 피부 건조증 등의 피부의 증상을 완화시킬 수 있다. 따라서 피부의 두께를 조절하여 피부 장벽을 강화하고, 탄력 있고 건강한 피부 상태를 유지시키면서, 피부의 수분을 촉촉하게 유지시키는데 기여할 새로운 원료의 화장품을 개발하는 것이 필요한 실정이다.On the other hand, tumor necrosis factor alpha (TNFα, tumor necrosis factor α), interleukin-1beta (IL-1β, interleukin- 1β), an enzyme that produces prostaglandin, cyclooxygenase-2 (Cox-2, cyclooxygenase), increases biosynthesis, and matrix metalloprotease (MMP, an enzyme that decomposes skin tissue by these inflammatory factors) It is known to increase the biosynthesis of matrix metalloproteinase). Therefore, a substance capable of thickening the skin by proliferating the skin cells or increasing the matrix material constituting the skin, as described above, of type I collagenase (MMP-1) that decomposes collagen, a matrix material constituting the skin. A substance capable of inhibiting biosynthesis, a substance capable of inhibiting the biosynthesis of cyclooxygenase-2, a substance capable of inhibiting the biosynthesis of tumor necrosis factor, a substance that promotes the production of tropoelastin and fibrillin in skin fibroblasts If the material is developed, symptoms of the skin such as wrinkles, loss of elasticity, and dry skin can be alleviated. Therefore, it is necessary to develop a cosmetic with new raw materials that will contribute to strengthening the skin barrier by controlling the thickness of the skin, maintaining an elastic and healthy skin condition, and keeping the moisture of the skin moist.

대한민국 공개특허 제 10-2009-0025500호(공개일자: 2009.03.11)는 질경이 추출물을 함유하는 자외선에 대한 피부보호용 화장료 조성물에 대한 것으로, 질경이 추출물이 자외선을 흡수하고 자외선에 의한 피부 세포의 변형을 완화시키며 피부 자극이 나타나지 않는 효과가 있어, 자외선 차단 효과를 상승시키고 자외선에 의한 손상된 피부를 회복시킴에 대해 기재되어 있다.Korean Patent Laid-Open No. 10-2009-0025500 (published on March 11, 2009) relates to a cosmetic composition for skin protection against ultraviolet rays containing plantain extract, wherein the plantain extract absorbs ultraviolet rays and prevents the transformation of skin cells by ultraviolet rays. It has an effect that relieves skin irritation and does not appear, and it is described for increasing the UV protection effect and restoring the skin damaged by UV rays.

본 발명은 질경이 추출물과 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물, 폴리글루타믹애씨드를 함께 혼합함으로써 피부 보습과 탄력, 피부 장벽 강화에 뛰어난 효능을 발휘하는 화장료 조성물을 제공하고자 한다.The present invention provides skin hydration and elasticity by mixing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract, and polyglutamic acid together. An object of the present invention is to provide a cosmetic composition that exhibits excellent efficacy in strengthening the skin barrier.

본 발명은 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드를 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for moisturizing the skin containing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma-glutamic acid as active ingredients.

한편, 본 발명의 피부 보습용 화장료 조성물에 있어서, 상기 질경이 추출물은, 바람직하게 질경이에 메탄올, n-헥산(n-hexane), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 에틸 아세테이트(ethyl acetate) 중 선택되는 어느 하나 이상을 추출용매로 사용하여 추출한 것이 좋다.On the other hand, in the cosmetic composition for moisturizing the skin of the present invention, the plantain extract is preferably selected from among methanol, n-hexane, methylene chloride, and ethyl acetate in plantain. It is preferable to extract using one or more as an extraction solvent.

또한, 본 발명은 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드를 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 증진용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for enhancing skin elasticity containing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma-glutamic acid as active ingredients.

한편, 본 발명의 피부 탄력 증진용 화장료 조성물에 있어서, 상기 질경이 추출물은, 바람직하게 질경이에 메탄올, n-헥산(n-hexane), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 에틸 아세테이트(ethyl acetate) 중 선택되는 어느 하나 이상을 추출용매로 사용하여 추출한 것이 좋다.On the other hand, in the cosmetic composition for enhancing skin elasticity of the present invention, the plantain extract is preferably selected from among methanol, n-hexane, methylene chloride, and ethyl acetate in plantain. It is preferable to use any one or more as an extraction solvent for extraction.

또한, 본 발명은 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드를 유효성분으로 함유하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for strengthening the skin barrier containing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma-glutamic acid as active ingredients.

한편, 본 발명의 피부 장벽 강화용 화장료 조성물에 있어서, 상기 질경이 추출물은, 바람직하게 질경이에 메탄올, n-헥산(n-hexane), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 에틸 아세테이트(ethyl acetate) 중 선택되는 어느 하나 이상을 추출용매로 사용하여 추출한 것이 좋다.On the other hand, in the cosmetic composition for strengthening the skin barrier of the present invention, the plantain extract is preferably selected from among methanol, n-hexane, methylene chloride, and ethyl acetate in plantain. It is preferable to use any one or more as an extraction solvent for extraction.

본 발명은 질경이 추출물과 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물, 폴리글루타믹애씨드를 함께 혼합함으로써, 피부 보습과 탄력, 피부 장벽에 뛰어난 효능을 발휘하고자 한다. 또한, 실제 인체 피부에도 이를 적용함으로써 새로운 화장품 원료로서의 다양한 개발 가능성을 제기할 수 있다.The present invention is a plantain extract and fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum By mixing the culture, mugwort leaf extract, and polyglutamic acid together, it is intended to exert excellent effects on skin moisture, elasticity, and skin barrier. In addition, by applying it to actual human skin, various development possibilities as a new cosmetic raw material can be raised.

도 1은 본 발명의 락토바실러스 플란타럼의 분리 공정을 나타낸 모식도이다.
도 2는 본 발명 질경이 바이옴-13과 이의 분획물의 세포 생존율을 측정한 결과 그래프이다.
도 3은 본 발명 질경이 바이옴-13과 이의 분획물에 의한 인볼루크린(Involucrin), 로리크린(Loricrin), 필라그린(Filaggrin)의 mRNA(a) 및 단백질(b) 발현변화를 나타낸 결과 그래프이다.
도 4는 본 발명 질경이 바이옴-13과 이의 분획물에 의한 human β-defeinsin(HBD-1, HBD-2, HBD-3)과 카텔리시딘(cathelicidin, LL-37) mRNA의 발현변화를 나타낸 결과 그래프이다.
도 5는 본 발명 질경이 바이옴-13과 이의 분획물에 의한 히알루론산의 생성량(a) 및 히알루론산 합성효소(HAS-1, HAS-2, HAS-3)의 mRNA 발현변화(b)를 나타낸 결과 그래프이다.
도 6은 본 발명 질경이 바이옴-13을 실제 인체 피부에 도포한 후, 시간(20분, 2시간)에 따른 수분도 변화를 측정한 결과 그래프이다. 그래프의 위쪽에서 아래 순으로 왼쪽에 적힌 실험물질에 대응된다.
도 7은 본 발명 질경이 바이옴-13을 함유하는 화장료 조성물로 실제 피부 임상시험을 수행하여 도포 후 피부수분함량 결과(a) 및 개선율(b)을 나타낸 결과 그래프이다.
도 8은 본 발명 질경이 바이옴-13을 함유하는 화장료 조성물로 실제 피부 임상을 수행하여 시간에 따른 피부의 탄력도를 측정한 결과 그래프이다.
1 is a schematic diagram showing the separation process of Lactobacillus plantarum of the present invention.
2 is a graph showing the results of measuring the cell viability of the present invention plantain biome-13 and its fractions.
3 is a graph showing changes in mRNA (a) and protein (b) expression of Involucrin, Loricrin, and Filaggrin by the present invention plantain biome-13 and its fractions. .
Figure 4 is a result showing the expression change of human β-defeinsin (HBD-1, HBD-2, HBD-3) and cathelicidin (cathelicidin, LL-37) mRNA by the present invention plantain biome-13 and its fractions; It is a graph.
5 is a result showing the production amount of hyaluronic acid (a) and mRNA expression change (b) of hyaluronic acid synthetase (HAS-1, HAS-2, HAS-3) by the plantain biome-13 and its fractions of the present invention; It is a graph.
6 is a graph showing the result of measuring the change in moisture content according to time (20 minutes, 2 hours) after applying the plantain biome-13 of the present invention to actual human skin. It corresponds to the test substance written on the left in order from top to bottom of the graph.
7 is a graph showing the results of skin moisture content (a) and improvement rate (b) after application of an actual skin clinical test with a cosmetic composition containing plantain biome-13 of the present invention.
8 is a graph showing the results of measuring the elasticity of the skin over time by performing an actual skin clinical trial with a cosmetic composition containing plantain biome-13 of the present invention.

본 발명은 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드를 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드를 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 증진용 화장료 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드를 유효성분으로 함유하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for moisturizing the skin containing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma-glutamic acid as active ingredients. In addition, the present invention provides a cosmetic composition for enhancing skin elasticity containing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma-glutamic acid as active ingredients. In addition, the present invention provides a cosmetic composition for strengthening the skin barrier containing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma-glutamic acid as active ingredients.

질경이는 질경이과(Plantaginaceae)에 속하는 다년생 초본으로 어린잎은 식용한다. 한방에서는 뿌리채 뽑아 말려서 차전초(車前草)라 하고, 종자를 차전자(車前子)라는 약재로 사용하고, 한국, 일본, 사할린, 타이완, 중국, 시베리아, 동부 히말라야, 자바, 말레이시아 등지에 분포한다. 질경이에는 "플란타기닌"이라는 배당체와 탄닌이 함유되어 있어서 이뇨제, 진해, 거담, 건위, 지사(止瀉), 해열, 소염, 강장제 등으로 쓰이고, 간 기능을 활성화하여 어지럼증, 두통에 효과가 있고, 폐열로 인한 해수에도 효과가 있다. 항균작용도 있어서 급만성 세균성 설사, 신장염, 방광염, 요도염의 치료에도 이용한다. 민간약으로는 종기에 생잎을 불에 쬐어 부드럽게 해서 붙이면 좋고 치통에는 생잎을 소금에 비벼서 아픈 이에 물고 있으면 치통이 멎는다고 한다.Plantain is a herbaceous perennial belonging to the family Plantaginaceae, and its young leaves are edible. In oriental medicine, the roots are pulled and dried, and the seeds are used as medicinal herbs, and are distributed in Korea, Japan, Sakhalin, Taiwan, China, Siberia, Eastern Himalayas, Java, and Malaysia. . Since plantain contains glycosides called "plantaginin" and tannins, it is used as a diuretic, antitussive, expectorant, gastric, antidiarrheal, antipyretic, anti-inflammatory, and tonic. , is also effective in seawater from waste heat. It also has antibacterial action, so it is also used in the treatment of acute and chronic bacterial diarrhea, nephritis, cystitis, and urethritis. As a folk medicine, it is said that it is good to soften raw leaves by exposing them to the fire for toothache. For toothache, rubbing raw leaves with salt and biting them on a sore tooth is said to stop the toothache.

질경이 종자의 페닐프로파노이드 (phenylpropanoid) 성분이 이뇨효과와 항염효과(특히 간염)가 있다고 알려져 있고, 차전자와 차전자피에는 물을 함유할 수 있는 피토스테롤글리코시드(phytosterol glyicoside), 뮤실라제 (mucilage)로 대표되는 점액성 성분을 가지고 있어 식품쪽에서는 다이어트와 변비개선의 용도로 사용된다. 또한 보체를 활성화시키는 면역증강작용, 항바이러스작용, 플란타고시드는 알파만노시다제 억제제 (α-mannosidase inhibitor) 로서 면역억제 기능이 있다. 그리고 질경이 잎은 상처재생효과 (wound healing)도 가지고 있으며, 페닐에타노이드 (phenylethanoid)는 생쥐 귀의 부종을 감소시키는 작용도 있다. 질경이에 함유된 우르솔산(Ursolic acid)과 지방산 (Fatty acid)들은 사이클로옥시게나제-2 (COX-2) 억제제로도 작용한다고 알려져 있다.The phenylpropanoid component of plantain seeds is known to have diuretic and anti-inflammatory effects (especially hepatitis), and phytosterol glyicoside, mucilage ), it is used for diet and constipation improvement. In addition, immune enhancing action, antiviral action, and plantagoside that activate complement are α-mannosidase inhibitors and have immunosuppressive functions. Also, plantain leaves have wound healing effects, and phenylethanoids also reduce swelling in the ears of mice. Ursolic acid and fatty acids contained in plantain are known to act as cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitors.

본 발명은 질경이 추출물을 이용하여 피부의 주름, 탄력, 보습 등의 증상을 전반적으로 개선하고자 하며, 더 나아가 다른 물질들과의 배합을 통해 피부 보습과 탄력, 피부 장벽 강화에 뛰어난 효능을 가지는 화장료 조성물의 새로운 원료를 제공하고자 한다. The present invention is to improve the overall symptoms of skin wrinkles, elasticity, moisturizing, etc. by using plantain extract, and furthermore, through combination with other substances, a cosmetic composition having excellent efficacy in skin moisturizing, elasticity, and skin barrier strengthening. We want to provide new raw materials.

한편, 본 발명에 있어서, 상기 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드는 바람직하게 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5의 비율로 혼합하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 1 : 1 : 1 : 1 : 1의 비율로 혼합하는 것이 좋다.Meanwhile, in the present invention, the plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma glutamic acid are preferably 0.5 to 1.5: 0.5 to 1.5: 0.5 to 1.5: 0.5 to 1.5 : It is preferable to mix in a ratio of 0.5 to 1.5, more preferably 1:1: 1: 1: 1 is good to mix in a ratio.

회향(Foeniculum vulgare, fennel)은 높이가 1.5 ~ 2 m인 지중해 연안이 원산지인 식물로, 줄기는 곧게 자라며 속은 비어있고 잎은 긴 칼집 모양으로 끝이 뾰족하며 깃털처럼 3 ~ 4 갈래로 가늘게 갈라진 형태를 가진다. 식품 또는 향신료로 주로 이용되며 각종 여성병의 치료, 스트레스 해소와 숙면, 이뇨작용 촉진 등의 각종 약리효과를 가지고 있다. 본 발명에서는 회향 열매 추출물을 사용하였다.Fennel ( Foeniculum vulgare , fennel) is a plant native to the Mediterranean coast with a height of 1.5 to 2 m. It has a straight stem, an empty inside, and a long sheath-shaped leaf with a sharp tip, and is divided into 3 or 4 branches like a feather. have It is mainly used as a food or spice and has various pharmacological effects such as treatment of various female diseases, relieving stress, good sleep, and promoting diuresis. In the present invention, fennel fruit extract was used.

락토바실러스(Lactobacillus)는 당류를 발효하여 에너지를 획득하여 다량의 유산을 생성하는 세균으로 이를 이용한 발효를 통해 김치, 요거트, 치즈 등의 발효 식품을 만드는데 사용하곤 한다. 본 발명에서는 락토바실러스 플란타럼 배양물을 사용하였으며, 이때 락토바실러스는 당 업계에 공지된 것이라면 어느 것에든 제한되지 않으나 바람직하게는 요거트에서 분리한 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)인 것이 좋다. 본 발명에서는 도 1의 분리공정으로부터 분리해낸 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 사용하였다.Lactobacillus bacteria (Lactobacillus) are often used through fermentation by the fermentation of sugars obtained using the same energy as a bacterium to generate a large amount of lactic acid to make the fermentation of kimchi, yogurt, cheese and the like. In the present invention, a Lactobacillus plantarum culture was used, and at this time, the Lactobacillus is not limited to any known in the art, but preferably Lactobacillus plantarum isolated from yogurt. In the present invention, Lactobacillus plantarum separated from the separation process of FIG. 1 was used.

쑥은 국화과에 속하는 다년생초의 하나로서, 전체가 거미줄 같은 털로 덮여 있고 땅속줄기가 옆으로 뻗으며 자란다. 주로 어린 순을 나물이나 떡으로 만들어 먹고 성숙한 것은 쑥뜸 등으로 약용하며, 쑥 향으로 모기와 파리를 쫓는데 사용하기도 한다. 또한, 고혈압과 동맥경화 예방, 면역 기능과 해독작용, 간기능 개선과 노화방지, 각종 부인병 치료, 위장장애 개선 등의 다양한 약리 효과가 있다.Mugwort is one of the perennial plants belonging to the Asteraceae family, and the whole is covered with cobweb-like hairs and grows with underground stems extending sideways. Mainly, young shoots are made into greens or rice cakes, and mature ones are used medicinally for moxibustion, etc., and the scent of mugwort is also used to repel mosquitoes and flies. In addition, it has various pharmacological effects such as prevention of hypertension and arteriosclerosis, immune function and detoxification, improvement of liver function and anti-aging, treatment of various gynecological diseases, and improvement of gastrointestinal disorders.

폴리감마글루타믹애씨드(poly-gamma-glutamic acid: PGA)는 D.L-글루타믹애씨드가 감마-글루타밀과 결합된 중합체로, 점액성 물질이며 한국의 전통 발효식품 중 하나인 청국장과 일본의 낫또, 네팔의 키네마 등에서 분리된 바실러스속 균주로부터 생산된다. 폴리감마글루타믹애씨드는 식용, 수용성 및 생분해성 고분자물질로서 흡습제 및 보습제로 화장품의 원료 물질로 이용되고 있다. Poly-gamma-glutamic acid (PGA) is a polymer in which DL-glutamic acid is combined with gamma-glutamyl. It is produced from a strain of Bacillus sp. isolated from natto and Kinema of Nepal. Polygamma glutamic acid is an edible, water-soluble and biodegradable polymer material, and is used as a raw material for cosmetics as a desiccant and moisturizer.

한편, 본 발명의 추출물들은 당업계에서 공지된 추출방법이라면 어느 것이든 한정하지 않으며, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있으나, 일예로 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 이용한 용매 추출법, (b) 이산화탄소에 의한 감압 및 고온에 의한 초임계 추출법 또는 (c) 초음파 추출법을 이용하여 추출한다. 본 발명에서는 바람직하게 메탄올, n-헥산(n-hexane), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 에틸 아세테이트(ethyl acetate) 중 선택되는 어느 하나 이상을 추출용매로 사용하여 추출한 것이 좋다.On the other hand, the extracts of the present invention are not limited to any extraction method known in the art, and may be prepared using a conventional solvent under conditions of ordinary temperature and pressure, but for example (a) water, carbon number 1 -4 anhydrous or hydrous lower alcohols (e.g., methanol, ethanol, propanol and butanol), propylene glycol, 1,3-butylene glycol, glycerin, acetone, diethyl ether, ethyl acetate, butyl acetate, dichloromethane, The extraction is performed using a solvent extraction method using a solvent selected from the group consisting of chloroform, hexane, and mixtures thereof, (b) supercritical extraction using reduced pressure and high temperature with carbon dioxide, or (c) ultrasonic extraction. In the present invention, it is preferable to extract using at least one selected from methanol, n-hexane, methylene chloride, and ethyl acetate as an extraction solvent.

한편, 하기 실험에 의하면, 본 발명의 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물, 폴리글루타믹애씨드를 혼합한 '질경이 바이옴-13'은 세포 독성이 나타나지 않아 안전하고, 각질형성세포 분화 촉진시 분비되는 유전자들의 발현을 높여 피부의 물리적 장벽을 강화시키며, 더 나아가 항균 펩타이드의 발현을 높여 피부의 화학적 장벽을 강화시킬 수 있다. 또한, 히알루론산의 생성량을 증가시키고 히알루론산 합성효소의 발현을 높여 피부 보습에 탁월하였으며 이는 실제 인체 피부에 적용할 시에도 피부 수분도가 개선되는 것을 통해 확인할 수 있었다. 또한, 각각의 추출물들을 단독으로 처리하는 것보다 5가지 물질을 혼합하였을 때 수분도의 개선 정도가 뛰어난 것을 확인할 수 있었다. 게다가, 질경이 바이옴-13을 함유하는 화장료 조성물에서 임상시험을 한 결과, 피부의 탄력 개선도가 우수한 것을 확인하였다. 이를 종합할 때, 본 발명의 '질경이 바이옴-13'은 5가지 물질을 혼합하여 사용함으로써 뛰어난 피부 보습과 탄력, 피부 장벽 강화 효능을 가지는 화장료 조성물의 새로운 원료로의 가능성을 확인할 수 있었다.On the other hand, according to the following experiment, 'Plantain Biome-13', which is a mixture of plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract, and polyglutamic acid of the present invention, is safe because it does not show cytotoxicity. In addition, it is possible to strengthen the physical barrier of the skin by increasing the expression of genes secreted when keratinocyte differentiation is promoted, and furthermore, by increasing the expression of antibacterial peptides, the chemical barrier of the skin can be strengthened. In addition, it was excellent in moisturizing the skin by increasing the amount of hyaluronic acid production and increasing the expression of hyaluronic acid synthase, which was confirmed through the improvement of skin moisture level even when applied to actual human skin. In addition, it was confirmed that the degree of improvement in moisture content was excellent when the five substances were mixed rather than each of the extracts treated alone. In addition, as a result of a clinical test on a cosmetic composition containing plantain biome-13, it was confirmed that the improvement of skin elasticity was excellent. Taken together, the 'plantain biome-13' of the present invention was confirmed as a new raw material for a cosmetic composition having excellent skin moisturizing, elasticity, and skin barrier strengthening effects by using a mixture of five substances.

한편, 본 발명의 화장료 조성물은, 일 예로, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형 중 선택되는 어느 하나의 기초 화장료 제형; 스킨; 로션; 아이크림; 수딩젤; 연고; 마스크팩용 제형; 바디워시용 제형; 필링젤; 수중유형 및 유중수형 메이크업베이스; 파운데이션; 스킨커버; 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라 및 아이브로우 펜슬류 중 선택되는 어느 하나의 색조화장료 제형; 두피용 제형; 중에서 선택되는 어느 하나인 것일 수 있다.On the other hand, the cosmetic composition of the present invention, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, lotions, gels, water-soluble liquids, creams, essences, surfactant-containing cleansing, oils, oil-in-water (O/W) type and water-in-oil (W / O) any one of the basic cosmetic formulation selected from the type; skin; Lotion; eye cream; soothing gel; Ointment; Formulations for mask packs; formulation for body wash; peeling gel; Oil-in-water and water-in-oil makeup base; foundation; skin cover; Any one color cosmetic formulation selected from lipstick, lip gloss, face powder, two-way cake, eye shadow, cheek color and eyebrow pencil; formulations for the scalp; It may be any one selected from among.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제 예컨대 친수성 또는 친유성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제, 염료 등을 함유할 수 있다. 이들 다양한 보조제의 양은 당해 분야에서 통상적으로 사용되는 양이며, 예컨대 조성물 총 중량에 대해 0.001 내지 30 중량% 이다. 다만, 어떠한 경우라도 보조제 및 그 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 악영향을 미치지 않도록 선택될 것이다.In addition, the cosmetic composition of the present invention may contain auxiliary agents such as hydrophilic or lipophilic active agents, preservatives, antioxidants, solvents, fragrances, fillers, blocking agents, pigments, odorants, dyes, etc. commonly used in the art to which the present invention pertains. can The amount of these various adjuvants is an amount conventionally used in the art, for example, 0.001 to 30% by weight relative to the total weight of the composition. However, in any case, the auxiliary agent and its ratio will be selected so as not to adversely affect the desirable properties of the cosmetic composition according to the present invention.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 일례로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소리비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.On the other hand, in the cosmetic composition of the present invention, when the formulation is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as a carrier component, for example, water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, Benzoate, propylene glycol, 1,3-butylene glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid ester of sorbitan may be used.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸트 등이 이용될 수 있다.In addition, in the cosmetic composition of the present invention, when the formulation is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester, and polyoxyethylene sorbitan ester Suspending agents such as, microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tragacanth may be used.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실라카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.In addition, in the cosmetic composition of the present invention, when the formulation is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tragacanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica as a carrier component , talc or zinc oxide may be used.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성부능로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.In addition, in the cosmetic composition of the present invention, when the formulation is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as carrier performance, and in particular, in the case of a spray, It may additionally contain propellants such as chlorofluorohydrocarbons, propane/butane or dimethyl ether.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.In addition, in the cosmetic composition of the present invention, when the formulation is surfactant-containing cleansing, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, sarcosinate, Fatty acid amide ether sulfate, alkylamidobetaine, fatty alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, lanolin derivative or ethoxylated glycerol fatty acid ester and the like can be used.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.In addition, the cosmetic composition of the present invention can be used overlapping with other cosmetic compositions other than the present invention. In addition, the cosmetic composition according to the present invention can be used according to a conventional method of use, and the number of times of use can be varied according to the skin condition or taste of the user.

이하, 본 발명에 대해 하기 실시예 및 실험예에서 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 모두 포함한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail in the following Examples and Experimental Examples. However, the scope of the present invention is not limited only to the following examples and experimental examples, and includes all modifications of the technical idea equivalent thereto.

[실시예 1 내지 6: 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물, 폴리글루타믹애씨드 및 이들의 혼합물 제조][Examples 1 to 6: Preparation of plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract, polyglutamic acid and mixtures thereof]

건조된 질경이 분말 200g, 회향 열매 분말 200g, 락토바실러스 플란타럼 배양물 분말 200g, 쑥잎분말 200g 및 폴리감마글루타믹애씨드분말 200g에 80% 메탄올(methanol) 900 ml를 가하여 3시간 동안 추출하고 추출액을 여과한 후 rotary vacuum evaporator로 농축한 다음 동결 건조하여 92.5 g의 메탄올 추출물(M)을 얻었으며, 이를 '질경이 바이옴-13(Jilgyungyi Biome-13)'으로 명명하였다(실시예 6). 상기 락토바실러스 배양물 분말은 도 1의 분리공정으로 분리해낸 락토바실러스 플란타럼 균주 배양액을 분말화한것으로부터 사용하였다.Dried plantain powder 200g, fennel fruit powder 200g, Lactobacillus plantarum culture powder 200g, mugwort leaf powder 200g, and polygamma glutamic acid powder 200g 80% methanol 900ml was added, extracted for 3 hours, and the extract was After filtering, it was concentrated with a rotary vacuum evaporator and then freeze-dried to obtain 92.5 g of methanol extract (M), which was named 'Plantary Biome-13 (Jilgyungyi Biome-13)' (Example 6). The Lactobacillus culture powder was used from the powdered Lactobacillus plantarum strain culture solution separated by the separation process of FIG. 1 .

상기 질경이 바이옴-13((메탄올 추출물, M)은 극성차를 이용해 n-헥산(n-hexane; H), 메틸렌클로라이드(methylene chloride; MC), 에틸 아세테이트(ethyl acetate; E), n-부탄올(n-butanol; B) 용매를 첨가하여 각 단계별로 2회씩 분획하였다. 메탄올 추출물 중 90 g을 물에 현탁한 후 동일양의 n-헥산과 혼합하여 분획하고, 물 층은 다시 메틸렌클로라이드로 분획하고, 다시 물 층은 에틸 아세테이트로 분획한 후, 남은 물 층은 마지막으로 n-부탄올로 분획하엿다. 이후 수득한 각 분획층을 여과, 농축, 동결건조하여 분획물 H는 47.8 g, 분획물 MC는 1.4 g, 분획물 E는 1.6 g, 분획물 B는 5.5 g 을 얻었다. 동결건조 후 얻은 시료는 -78℃의 deep freezer에 보관하면서 실험에 사용하였다. The plantain biome-13 ((methanol extract, M) is n-hexane (n-hexane; H), methylene chloride (MC), ethyl acetate (ethyl acetate; E), n-butanol using a polarity difference (n-butanol; B) was fractionated twice in each step by adding a solvent, 90 g of the methanol extract was suspended in water, fractionated by mixing with the same amount of n-hexane, and the water layer was again fractionated with methylene chloride Then, the water layer was again fractionated with ethyl acetate, and the remaining water layer was finally fractionated with n-butanol.After that, each fraction layer obtained was filtered, concentrated and lyophilized to obtain a fraction H of 47.8 g and a fraction MC of 1.4. g, 1.6 g of fraction E, and 5.5 g of fraction B. The sample obtained after freeze-drying was used in the experiment while being stored in a deep freezer at -78°C.

또한, 회향 열매 분말, 질경이 분말, 락토바실러스 플란타럼 배양물 분말, 쑥잎분말, 폴리감마글루타믹애씨드분말 각각을 상기의 메탄올 추출과 동일한 방법으로 추출하여 질경이 추출물(실시예 1, 질경이 분말 1% 함유), 회향 열매 추출물(실시예 2, 회향 열매 분말 1% 함유), 락토바실러스 플란타럼 배양물(실시예 3, 락토바실러스발효물분말 1% 함유), 쑥잎 추출물(실시예 4, 쑥잎분말 1% 함유), 폴리글루타믹애씨드(실시예 5, 폴리감마글루타믹애씨드분말 1% 함유)를 제조하였다. 이후 상기와 같이 각각의 메탄올 추출물들로부터 분획물을 얻었다. In addition, each of fennel fruit powder, plantain powder, Lactobacillus plantarum culture powder, mugwort leaf powder, and polygamma glutamic acid powder was extracted in the same manner as the above methanol extraction to extract plantain extract (Example 1, plantain powder 1). %), fennel fruit extract (Example 2, fennel fruit powder containing 1%), Lactobacillus plantarum culture (Example 3, lactobacillus fermented powder containing 1%), mugwort leaf extract (Example 4, mugwort leaf) Powder containing 1%) and polyglutamic acid (Example 5, containing 1% polygamma glutamic acid powder) were prepared. Thereafter, fractions were obtained from each methanol extract as described above.

[실험예 1: 본 발명의 질경이 바이옴-13의 세포독성 여부 평가][Experimental Example 1: Evaluation of cytotoxicity of the plantain biome-13 of the present invention]

본 실험예에서는 상기 실시예 6에서 제조한 질경이 바이옴-13의 세포독성 여부를 평가하고자 하였다.In this experimental example, the cytotoxicity of the plantain biome-13 prepared in Example 6 was evaluated.

사람 유래 각질형성세포(keratinocyte)인 HaCaT 세포에 질경이 바이옴-13과 이의 분획물을 0, 10, 50, 또는 100 ㎍/㎖의 농도로 처리한 후 XTT assay를 수행하여 세포생존율을 측정하였다. 그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 질경이 바이옴-13(M)과 모든 분획물에서 50 ㎍/㎖의 농도까지는 95%의 세포 생존율을 보였다. 그러나 100 ㎍/㎖의 농도에서 질경이 바이옴-13(M)을 처리한 경우에는 99%, 분획물 H는 87%, 분획물 MC는 28%, 분획물 E는 77%, 및 분획물 B는 84%의 생존율을 나타내어, 질경이 바이옴-13(M)을 제외한 나머지 분획물의 경우 세포독성을 유발함을 확인하였다. 따라서 모든 처리군에서 세포독성을 나타내지 않은 50 ㎍/㎖의 농도로 결정하여 하기 실험들을 진행하였다.HaCaT cells, which are human keratinocytes, were treated with plantain biome-13 and its fractions at a concentration of 0, 10, 50, or 100 μg/ml, and then XTT assay was performed to measure cell viability. As a result, as shown in Figure 2, the plantain biome-13 (M) and all fractions showed a cell viability of 95% up to a concentration of 50 ㎍ / ㎖. However, when the plantain biome-13 (M) was treated at a concentration of 100 μg/ml, the survival rate was 99%, 87% for fraction H, 28% for fraction MC, 77% for fraction E, and 84% for fraction B. , it was confirmed that plantain induced cytotoxicity in the case of the remaining fractions except for biome-13 (M). Therefore, the following experiments were performed by determining a concentration of 50 μg/ml that did not show cytotoxicity in all treatment groups.

[실험예 2: 본 발명의 질경이 바이옴-13의 피부장벽강화 효능 평가][Experimental Example 2: Evaluation of skin barrier strengthening efficacy of plantain biome-13 of the present invention]

본 실험예에서는 상기 실시예 6에서 제조한 질경이 바이옴-13의 피부장벽 효능을 평가하고자 하였다. In this experimental example, the skin barrier efficacy of the plantain biome-13 prepared in Example 6 was evaluated.

1) 질경이 바이옴-13의 물리적 피부 장벽에 대한 효능 평가 1) Efficacy evaluation of plantain biome-13 on the physical skin barrier

피부장벽은 각질형성세포의 분화 말기과정에서 분비되는 분화 촉진인자들에 의해 각질세포 외막을 형성함으로써 물리적 장벽의 정상적인 기능을 유지하게 된다. 질경이 바이옴-13이 피부장벽 기능에 미치는 영향을 알아보기 위하여 이를 각질형성세포주에 처리한 후 각질형성세포 분화 촉진시 분비되는 유전자들의 발현 변화를 확인하였다. 구체적으로, 사람 유래 각질형성세포주인 HaCaT 세포에 질경이 바이옴-13과 이의 분획물을 각각 50 ㎍/㎖의 농도로 처리하고 24시간 동안 배양한 후 역전사 중합효소연쇄반응(RT-PCR)과 웨스턴 블롯팅(western blotting) 을 통해 인볼루크린(involucrin), 로리크린(loricrin), 및 필라그린(filaggrin)의 mRNA와 단백질의 발현변화를 관찰하였다. 이때, 양성대조군으로는 각질형성세포 분화 촉진에 관여하는 생체인자로써 피부장벽 기능 강화에 관여하는 칼슘(calcium)을 사용하였다.The skin barrier maintains the normal function of the physical barrier by forming the outer membrane of the keratinocytes by differentiation promoting factors secreted during the final stage of differentiation of keratinocytes. In order to investigate the effect of plantain biome-13 on the skin barrier function, the expression change of the genes secreted when promoting the differentiation of keratinocytes after treatment with keratinocytes was confirmed. Specifically, HaCaT cells, a human-derived keratinocyte line, were treated with plantain biome-13 and its fractions at a concentration of 50 μg/ml, respectively, and cultured for 24 hours, followed by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blotting. Expression changes in mRNA and protein of involucrin, loricrin, and filaggrin were observed through western blotting. In this case, as a positive control group, calcium, which is involved in strengthening the skin barrier function as a bio factor involved in promoting the differentiation of keratinocytes, was used.

RT-PCR 수행 결과, 도 3a에 나타낸 바와 같이, 인볼루크린 유전자의 경우 질경이 바이옴-13(M)과 이의 분획물(H, MC, E, B)을 처리한 군에서 모두 대조군에 비해 mRNA의 발현량이 증가하였으며, 특히, M, H, E, 및 B에서 유의하게 증가한 것으로 나타났다. 반면, 로리크린과 필라그린 유전자의 경우 조성물 처리에 의해 mRNA 발현이 유의하게 증가하지 않았다. 더 나아가 웨스턴 블롯팅을 통한 단백질 발현변화 관찰 결과, 도 3b에 나타낸 바와 같이, 인볼루크린 유전자의 경우 대조군에 비해 E, B에서 단백질 발현량이 증가하였으며 필라그린 유전자의 경우에는 전반적으로 단백질 발현량이 증가하였다. As a result of RT-PCR, as shown in Fig. 3a, in the case of involucrin gene, in the group treated with plantain biome-13 (M) and its fractions (H, MC, E, B) compared to the control group, both mRNA The expression level was increased, and, in particular, it was found to be significantly increased in M, H, E, and B. On the other hand, in the case of loricrin and filaggrin genes, mRNA expression was not significantly increased by the composition treatment. Furthermore, as a result of observation of changes in protein expression through western blotting, as shown in FIG. 3b , in the case of the involucrin gene, the protein expression levels in E and B were increased compared to the control group, and in the case of the filaggrin gene, the overall protein expression level increased. did

2) 질경이 바이옴-13의 화학적 피부 장벽에 대한 효능 평가 2) Efficacy evaluation of plantain biome-13 on chemical skin barrier

사람 유래 각질형성세포주인 HaCaT 세포에 질경이 바이옴-13과 이의 분획물을 각각 50 ㎍/㎖의 농도로 처리하고 24시간 배양한 후 RT-PCR을 통해 항균 펩타이드인 human β-defeinsin(HBD-1, HBD-2, HBD-3)과 카텔리시딘(cathelicidin, LL-37) mRNA의 발현변화를 관찰하였다.HaCaT cells, a human-derived keratinocyte line, were treated with plantain biome-13 and its fractions at a concentration of 50 μg/ml, respectively, and cultured for 24 hours. HBD-2, HBD-3) and cathelicidin (LL-37) mRNA expression changes were observed.

그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, HBD-1의 경우 모든 처리군에서 대조군에 비해 mRNA의 발현량이 증가하였다. 또한, LL-37의 경우에서도 모든 처리군에서 대조군에 비해 mRNA의 발현량이 증가하는 경향인 것으로 나타났다. 이와 같이 질경이 바이옴-13은 피부 물리적 장벽 및 화학적 장벽을 강화시킬 수 있는 것으로 확인되었다.As a result, as shown in FIG. 4 , in the case of HBD-1, the mRNA expression level was increased in all treatment groups compared to the control group. In addition, in the case of LL-37, it was found that the mRNA expression level tended to increase in all treatment groups compared to the control group. As such, it was confirmed that the plantain biome-13 can strengthen the skin physical and chemical barriers.

[실험예 3: 본 발명의 질경이 바이옴-13의 피부보습 효능 평가][Experimental Example 3: Evaluation of skin moisturizing effect of plantain biome-13 of the present invention]

본 실험예에서는 상기 실시예 6에서 제조한 질경이 바이옴-13의 피부보습 효능을 평가하고자 하였다.In this experimental example, the skin moisturizing effect of the plantain biome-13 prepared in Example 6 was evaluated.

사람 유래 각질형성세포주인 HaCaT 세포에 질경이 바이옴-13과 이의 분획물을 각각 50 ㎍/㎖의 농도로 처리하고 24시간 동안 배양한 후 배양액을 회수하여 ELISA kit를 이용해 세포에서 분비된 히알루론산 (hyaluronic acid)의 생성량을 측정하였으다. 이후, RT-PCR을 수행하여 세포 내 히알루론산 합성효소(hyaluronic acid synthase; HAS)인 HAS-1, HAS-2, 및 HAS-3 mRNA의 발현변화를 관찰하였다.HaCaT cells, a human-derived keratinocyte line, were treated with plantain biome-13 and its fractions at a concentration of 50 μg/ml, respectively, and cultured for 24 hours. acid) was measured. Thereafter, RT-PCR was performed to observe changes in the expression of intracellular hyaluronic acid synthase (HAS), HAS-1, HAS-2, and HAS-3 mRNA.

그 결과, 도 5a에 나타낸 바와 같이, 대조군에 비하여 모든 처리 군에서 히알루론산 농도가 증가하였다. 또한, 도 5b에 나타낸 바와 같이, HAS-1의 경우 모든 군에서 대조군에 비해 mRNA의 발현량이 증가하였고, HAS-3의 경우 M, H, E, B에서 증가하는 경향임을 확인하였다. 이와 같이 질경이 바이옴-13은 피부 보습에 효능이 있는 것으로 확인되었다.As a result, as shown in Figure 5a, the hyaluronic acid concentration was increased in all treatment groups compared to the control group. In addition, as shown in FIG. 5b , in the case of HAS-1, the mRNA expression level was increased in all groups compared to the control group, and in the case of HAS-3, it was confirmed that there was a tendency to increase in M, H, E, and B. As such, the plantain biome-13 was confirmed to be effective in moisturizing the skin.

[실험예 4 : 인체 피부에서의 질경이 바이옴-13의 피부보습 효능 평가][Experimental Example 4: Evaluation of skin moisturizing effect of plantain biome-13 on human skin]

본 실험예에서는 실제 인체 피부에서 상기 실시예 6에서 제조한 질경이 바이옴-13의 피부보습 효능을 평가하고자 하였다.In this experimental example, it was attempted to evaluate the skin moisturizing effect of the plantain biome-13 prepared in Example 6 on actual human skin.

인체 중 팔의 정상 피부에 실시예 1 내지 5의 회향 열매 추출물, 질경이 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎추출물, 폴리글루타믹애씨드를 각각 함유하는 조성물, 실시예 6의 질경이 바이옴-13을 함유하는 조성물 또는 상기 5가지 추출물을 모두 함유하지 않는 대조조성물을 1회 도포한 후, 수분도 측정기(Corneometer TM)를 이용하여 수분도의 증감을 0분(도포 전), 도포 20분 후 및 도포 2시간 후에 각각 측정하였다(n=9). 조성물의 도포는 1.5 ㎝ × 1.5 ㎝ 넓이의 사각형에 점성물질용 파이펫을 이용해 15 ㎕씩 동일하게 도포하였으며, 개인별로 각 부위의 도포 직전의 기저 측정값에 비해 증가한 정도(ΔAU)를 계산하고, 대조조성물을 도포한 부위의 증가량을 보정하여 제한값을 그래프로 나타내었다.Composition containing the fennel fruit extract, plantain extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract, and polyglutamic acid of Examples 1 to 5, respectively, on the normal skin of the arm in the human body, the plantain biome of Example 6- After the composition containing 13 or the control composition not containing all of the above five extracts was applied once, the moisture level was increased or decreased by using a moisture meter (Corneometer TM) for 0 minutes (before application), 20 minutes after application, and Each measurement was performed 2 hours after application (n=9). The composition was applied equally to a square of 1.5 cm × 1.5 cm using a pipette for a viscous material in 15 μl each. The limit value was graphically shown by correcting the increase in the area to which the control composition was applied.

그 결과, 도 6과 같이 질경이 바이옴-13('질경이 추출물 5% 5-MIX'로 기재)의 경우에는 도포 후 20분 째에 측정한 수분도가 대조조성물 도포 부위에 비해 유의하게 증가한 것으로 나타났으며(n=9), 2시간까지도 유의한 수분도 증가 효과를 나타냈다. 반면, 회향 열매 추출물, 질경이 추출물, 폴리글루타믹애씨드, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎추출물을 단독으로 함유하는 각각의 조성물들은 수분도 증가 효과가 상대적으로 미비했다. 따라서, 피부에 도포할 때, 상기 5가지 추출물들의 혼합이 상승 효과를 내어 보습 효과가 더 긴 시간 동안 유지될 수 있도록 하는 효과가 있음을 확인하였다.As a result, as shown in FIG. 6 , in the case of plantain biome-13 (described as 'plantain extract 5% 5-MIX'), the moisture content measured 20 minutes after application was significantly increased compared to the site where the control composition was applied. and (n=9), showed a significant increase in moisture content up to 2 hours. On the other hand, each composition containing fennel fruit extract, plantain extract, polyglutamic acid, Lactobacillus plantarum culture, and mugwort leaf extract alone showed relatively insignificant effects of increasing moisture. Therefore, when applied to the skin, it was confirmed that the mixing of the above five extracts had a synergistic effect so that the moisturizing effect could be maintained for a longer period of time.

[실시예 7 : 본 발명의 질경이 바이옴-13을 함유하는 화장료 조성물 제조 및 이를 이용한 피부임상시험][Example 7: Preparation of cosmetic composition containing plantain biome-13 of the present invention and skin clinical test using the same]

본 실시예에서는 상기 실시예 6에서 제조한 질경이 바이옴-13을 함유하는 젤 제형의 화장료 조성물을 제조하고 이를 이용하여 피부임상시험을 수행하였다.In this example, a cosmetic composition of a gel formulation containing the plantain biome-13 prepared in Example 6 was prepared, and a skin clinical test was performed using it.

1) 질경이 바이옴-13을 함유하는 젤 제형의 화장료 조성물 제조1) Preparation of gel-type cosmetic composition containing plantain biome-13

먼저 다이소듐(Disodium) EDTA와 본 발명의 질경이 바이옴-13을 정제수에 넣고 아지믹서를 이용하여 용해시켰다. 다음으로, 상기 혼합물에 잔탄검(Xanthangum)을 서서히 첨가하며 점증시킨 후, 코코-베타인(Coco-Betaine)과 1,2-헥산다이올(hexanediol)을 넣고 혼합하였다. 자세한 조성은 하기 표 1과 같았다.First, disodium EDTA and plantain biome-13 of the present invention were put in purified water and dissolved using an azimuth mixer. Next, xanthan gum (Xanthangum) was gradually added to the mixture to increase the thickness, and then, coco-betaine and 1,2-hexanediol were added and mixed. The detailed composition is shown in Table 1 below.

조성Furtherance 함량(중량부)Content (parts by weight) 대조군control 실시예 7-1Example 7-1 실시예 7-2Example 7-2 실시예 7-3Example 7-3 정제수Purified water to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100 잔탄검xanthan gum 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 다이소듐(Disodium) EDTADisodium EDTA 0.020.02 0.020.02 0.020.02 0.020.02 질경이 바이옴-13Plantain Biome-13 00 0.010.01 55 1010 코코-베타인coco-betaine 2020 2020 2020 2020 1,2-헥산다이올1,2-Hexanediol 22 22 22 22

2) 피부 보습 효능 확인을 위한 피부임상시험2) Skin clinical test to confirm skin moisturizing effect

(1) 사용장비(1) Equipment used

'Corneometer CM 825 (Courage & Khazaka, Germany)'를 사용하였으며, Corneometer는 피부 각질층의 정전용량(capacitance)이 수분함량과 비례하여 증가하는 성질을 이용하여 간접적으로 수분함량을 측정하는 장비이다. 재현성이 높고 다루기가 쉬우며 측정 시간이 짧아 각질층의 수분량을 측정할 때 세계적으로 가장 많이 사용되고 있는 기기이다.'Corneometer CM 825 (Courage & Khazaka, Germany)' was used, and the Corneometer is a device that indirectly measures the moisture content by using the property that the capacitance of the stratum corneum increases in proportion to the moisture content. Due to its high reproducibility, easy handling, and short measurement time, it is the most widely used instrument in the world to measure the amount of moisture in the stratum corneum.

측정 원리는 절연체(dielectric)인 매개체에 의해 전기적으로 절연 작용을 하는 두 개의 복잡한 금속판 콘덴서(condenser)를 이용하는 물리적인 법칙에 근거하고 있다. 전기 전하를 저장하는 전기량을 정전용량(capacitance)이라 하는데 이러한 피부의 정전용량은 수분함량과 서로 비례하는 경향이 있어 피부 수분함량이 낮을수록 수치가 낮게 나타나며, 피부 수분함량이 높을수록 수치가 높게 나타난다. 측정단위는 Arbiturary Unit(A.U.)으로 표하는데, 이는 피부 수분함량의 상대적, 임의적 수치라 생각하면 된다. 측정 방법은 Corneometer에 부착된 탐침(probe)을 피부 표면에 수직으로 밀착시킨 후 가볍게 눌러 수분함량을 측정한다.The measurement principle is based on a physical law using two complex metal plate capacitors that are electrically insulated by a medium that is an insulator. The amount of electricity that stores electric charge is called capacitance, and the capacitance of the skin tends to be proportional to the moisture content. . The measurement unit is expressed as Arbiturary Unit (A.U.), which can be thought of as a relative, arbitrary number of skin moisture content. The measurement method is to measure the moisture content by pressing the probe attached to the corneometer vertically to the skin surface and then lightly pressing it.

(2) 시험 순서(2) Test sequence

시험자가 제공하는 기준 세안제를 이용하여 세안 후 페이퍼 타올로 가볍게 두드려 물기를 제거한 후 30분간 항온항습 조건 (20~24℃, 40~60%RH)에서 두었다. 이때, 평가 시마다 동일한 부위에서 측정이 이루어질 수 있도록 측정 부위-일측 비익 (alare)에서의 수평선과 동측 동공중심선 (mid-pupillary line)이 만나는 지점-를 구획하고 기기 측정을 실시하였다. Corneometer의 측정은 각각 5회씩 시행한 후 측정치의 평균값을 측정값으로 기록하였다.After washing the face using the standard cleanser provided by the tester, tap lightly with a paper towel to remove moisture, and then leave it under constant temperature and humidity conditions (20~24℃, 40~60%RH) for 30 minutes. At this time, the measurement site - the point where the horizontal line on the alare and the mid-pupillary line meet - was partitioned and the instrument measurement was performed so that the measurement could be made at the same site for each evaluation. The corneometer was measured 5 times, and the average value of the measured values was recorded as the measured value.

시험 시료를 시험 부위에 도포하고 30분간 항온항습 조건 (20~24℃, 40~60%RH)에서 대기한 후, 대조군 도포후와 동일한 방법으로 동일한 부위에서 기기평가를 시행하였다. 피부과 전문의가 이상반응 (소양증, 홍반 등의 자극증상) 유무를 확인하였다. 시험참여비는 시험 종료 직후 피험자에게 지급하였다.After applying the test sample to the test site and waiting in constant temperature and humidity conditions (20~24℃, 40~60%RH) for 30 minutes, device evaluation was performed at the same site in the same manner as after the control application. A dermatologist confirmed the presence of adverse reactions (irritating symptoms such as pruritus and erythema). The test participation fee was paid to the subjects immediately after the end of the test.

(3) 평가 방법(3) Evaluation method

- Corneometer를 이용한 수분함량 개선 효과 평가- Evaluation of water content improvement effect using Corneometer

시험 부위의 대조군 도포후와 실시예 7-1 내지 7-3을 도포후에 Corneometer를 이용하여 피부 수분함량 변화를 측정하고, 하기 수학식 1과 같이 그 개선율을 확인하였다.After applying the control to the test site and after applying Examples 7-1 to 7-3, the change in skin moisture content was measured using a Corneometer, and the improvement rate was confirmed as shown in Equation 1 below.

Figure 112021107787883-pat00001
Figure 112021107787883-pat00001

- 피부과 전문의에 의한 안정성 평가- Stability evaluation by a dermatologist

시험 기간 중 시료 사용에 의한 부작용 (홍반, 부종, 인설, 가려움, 자통, 작열감, 뻣뻣함, 따끔거림 및 기타 이상증) 발생 여부를 평가하였다.The occurrence of side effects (erythema, edema, scale, itching, stinging, burning, stiffness, tingling and other abnormalities) due to the use of the sample during the test period was evaluated.

(4) 통계 분석 방법(4) Statistical analysis method

Minitab 19 (Minitab® 19.2, Minitab Inc.) 프로그램을 이용해 유의성을 확인하였다. 결과값은 정규성 검정(Ryan-Joiner Normality Test)을 통해 정규 분포로 추정되는 경우, 아래의 모수적인 통계법을 통해 유의성을 확인하였다.Significance was confirmed using the Minitab 19 (Minitab® 19.2, Minitab Inc.) program. When the result value is estimated to have a normal distribution through the Ryan-Joiner Normality Test, the significance was confirmed through the following parametric statistical method.

동일 그룹 내 전후 결과값 비교의 경우, 시험 전, 후 측정한 값의 비교는 paired t-검정을 이용하며, 3회 이상 반복 측정할 시, 반복측정분산분석(Repeated measure ANOVA)을 통해 유의수준 p < 0.05 수준에서 유의성을 확인하였다. 2 이상의 상이한 그룹간 결과값 비교의 경우, 두 그룹간 결과값의 비교는 Welch’s t-검정을 이용하며, 3 이상의 그룹간 결과값 비교는 일원분산분석(one-way ANOVA)을 통해 유의수준 p < 0.05 수준에서 유의성을 확인하였다. 반복 측정한 2 이상의 상이한 그룹의 결과값 비교의 경우, 반복측정분산분석(Repeated measure ANOVA)을 통해 유의수준 p < 0.05 수준에서 유의성을 확인하며, 그룹간 초기 측정 값이 유의하게 다른 경우 초기 측정값을 공변량으로 한 공분산분석(Analysis of Covariance)을 통해 그룹간 결과값의 차이를 확인하였다. In the case of comparison of pre- and post-result values within the same group, paired t-test is used for comparison of measured values before and after the test. Significance was confirmed at the <0.05 level. For comparison of results between two or more different groups, Welch's t-test is used to compare results between two groups, and for comparison of results between groups of three or more, significance level p < Significance was confirmed at the 0.05 level. In the case of comparing the results of two or more different groups repeatedly measured, the significance is checked at the significance level p < 0.05 through repeated measure ANOVA. The difference in the results between groups was confirmed through Analysis of Covariance with .

한편, 정규성 검정(Ryan-Joiner Normality Test)에서 정규성이 기각되는 경우, 아래의 비모수적인 통계법을 통해 유의성을 확인하였다. 동일 그룹 내 전후 결과값 비교의 경우, 시험 전, 후 측정한 값의 비교는 Wilcoxon signed rank 검정을 이용하며, 3 회 이상 반복 측정한 경우, Friedman 검정을 통해 유의수준 p < 0.05 수준에서 유의성을 확인하였다. 2 이상의 상이한 그룹간 결과값 비교의 경우, 두 그룹간 결과값의 비교는 Mann-Whitney U 검정을 이용하며, 3 이상의 그룹간 결과값 비교는 Kruskal-Wallis 검정을 통해 유의수준 p < 0.05 수준에서 유의성을 확인하였다. 반복 측정한 2 이상의 상이한 그룹의 결과값 비교의 경우, Friedman 검정을 통해 유의수준 p < 0.05 수준에서 그룹간 결과값의 차이를 확인하였다. 모든 자료는 연속형 변수는 평균과 표준편차로, 범주형 변수는 빈도와 백분율로 요약하였다.On the other hand, when normality was rejected in the Ryan-Joiner Normality Test, significance was confirmed through the following non-parametric statistical method. In the case of comparison of pre- and post-result values within the same group, Wilcoxon signed rank test is used to compare values measured before and after the test. did For comparison of results between two or more different groups, the Mann-Whitney U test is used to compare the results between the two groups, and the Kruskal-Wallis test to compare the results between groups of 3 or more is significant at the significance level p < 0.05. was confirmed. In the case of comparing the results of two or more different groups repeatedly measured, the difference in the results between the groups was confirmed at the significance level p < 0.05 through Friedman's test. All data were summarized as mean and standard deviation for continuous variables and frequency and percentage for categorical variables.

(5) 피험자 정보 및 시험 결과(5) Subject information and test results

- 피험자 기본 정보- Subject basic information

NO.NO. IDID GenderGender AgeAge NO.NO. IDID GenderGender AgeAge 1One 21712171 FemaleFemale 2424 1212 27712771 FemaleFemale 4545 22 32573257 FemaleFemale 2525 1313 976976 FemaleFemale 4646 33 31093109 FemaleFemale 2626 1414 20952095 FemaleFemale 4747 44 21642164 FemaleFemale 2727 1515 33253325 FemaleFemale 4848 55 42264226 FemaleFemale 3838 1616 32583258 FemaleFemale 5252 66 35263526 FemaleFemale 3838 1717 35253525 FemaleFemale 5353 77 37053705 FemaleFemale 3838 1818 39223922 FemaleFemale 5454 88 29272927 FemaleFemale 3939 1919 24502450 FemaleFemale 5555 99 35523552 FemaleFemale 3939 2020 25292529 FemaleFemale 5555 1010 38813881 FemaleFemale 3939 2121 20312031 FemaleFemale 5757 1111 36783678 FemaleFemale 4141

전체 피험자 수total number of subjects 21명21 people 성별gender 남: 0명 / 여: 21명Male: 0 / Female: 21 평균 연령average age 42세42 years old 연령분포age distribution 20대20's 4명4 people 30대30's 6명6 people 40대40's 5명5 people 50대50's 6명6 people

- 시험 결과- Test result

각질층 수분함량 (Comeometer Value, A.U.) 측정 결과Measuring result of stratum corneum moisture content (Comeometer Value, A.U.) NO.NO. 시험 부위test site 대조군 도포후After application of control 실시예7-1 도포후Example 7-1 After application 실시예7-2 도포후Example 7-2 After application 실시예7-3 도포후Example 7-3 After application 1One 61.461.4 61.561.5 61.861.8 62.262.2 22 56.056.0 56.156.1 56.456.4 67.867.8 33 26.226.2 26.326.3 26.626.6 28.428.4 44 40.640.6 40.740.7 42.042.0 46.046.0 55 25.425.4 25.525.5 35.235.2 59.259.2 66 32.032.0 32.132.1 38.138.1 41.441.4 77 27.827.8 27.927.9 35.735.7 67.667.6 88 47.847.8 47.947.9 50.150.1 56.856.8 99 27.427.4 27.527.5 29.129.1 47.247.2 1010 33.833.8 33.933.9 40.840.8 45.045.0 1111 46.446.4 46.546.5 48.648.6 55.055.0 1212 42.442.4 42.542.5 48.348.3 56.256.2 1313 52.852.8 52.952.9 53.753.7 56.056.0 1414 19.419.4 19.519.5 47.047.0 66.066.0 1515 32.232.2 32.332.3 34.134.1 39.039.0 1616 60.260.2 60.360.3 62.062.0 72.072.0 1717 34.234.2 34.334.3 39.039.0 56.256.2 1818 38.038.0 8.18.1 41.541.5 52.852.8 1919 38.438.4 38.538.5 46.346.3 63.663.6 2020 46.046.0 46.146.1 47.247.2 55.055.0 2121 45.645.6 45.745.7 48.048.0 50.250.2

각질층 수분함량 (Comeometer Value) 정규성 검정, Ryan-Joiner Normality TestMoisture content in the stratum corneum (Comeometer Value) normality test, Ryan-Joiner Normality Test 구분division 평균average NN RJRJ p-value p -value 검정black 시험
부위
exam
part
대조군 도포후After application of control 39.7139.71 2121 0.9890.989 >0.100>0.100 정규분포normal distribution
실시예7-1 도포후Example 7-1 After application 39.8139.81 2121 0.9880.988 >0.100>0.100 정규분포normal distribution 실시예7-3 도포후Example 7-3 After application 54.4654.46 2121 0.9840.984 >0.100>0.100 정규분포normal distribution

각질층 수분함량 (Comeometer Value) 전후 비교 통계, paired t testStatistical comparison before and after stratum corneum moisture content (Comeometer Value), paired t test 구분division 관측수number of observations 각질층 수분함량 변화Change in stratum corneum moisture content T-valueT-value p-value p -value 평균average 표준편차Standard Deviation 시험 부위test site 2121 -14.74-14.74 12.4412.44 -5.43-5.43 <0.001<0.001

각질층 수분함량 (Comeometer Value) 결과 정리Summary of stratum corneum moisture content (Comeometer Value) results 구분division 측정값(A.U.)Measured value (A.U.) 개선율improvement rate p-value p -value 대조군 도포후After application of control 실시예7-3 도포후Example 7-3 After application 시험 부위test site 39.7139.71 54.46***54.46*** 37.12%37.12% <0.001<0.001

-significant probability : *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001-significant probability : *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001

시험 기간 동안 발생한 피부 이상증Skin abnormalities that occurred during the trial period 구분division 홍반erythema 부종edema 인설생성scalding 가려움itch 자통sting 작열감burning sensation 뻣뻣함stiffness 따끔
거림
sting
stutter
기타
이상증
Etc
dystrophy
경증mild 00 00 00 00 00 00 00 00 00 중등증moderate 00 00 00 00 00 00 00 00 00 중증severe 00 00 00 00 00 00 00 00 00

시험 결과는, 표 4 내지 6과 같았으며, 결과를 정리한 표 7 및 도 7과 같이 실시예 7-3(시험시료 1회 도포)의 경우, 각질층 수분함량이 대조군을 도포한 부위에 비해 통계적으로 유의한 수준(p<0.05) 증가하여, 시험 시료가 즉각적 피부 수분함량 개선 효과를 가지고 있는 것을 확인하였다. 또한, 표 8과 같이 시험 기간 동안 특별한 이상 증상이 발생하지 않음을 확인하였다.The test results were as shown in Tables 4 to 6, and as shown in Table 7 and Figure 7, which summarized the results, in the case of Example 7-3 (one-time application of the test sample), the moisture content of the stratum corneum was statistically higher than that of the control area. was increased to a significant level (p<0.05), confirming that the test sample had an immediate skin moisture content improvement effect. In addition, as shown in Table 8, it was confirmed that no special abnormal symptoms occurred during the test period.

(6) 고찰 및 결론(6) Considerations and Conclusions

총 21명의 피험자를 대상으로 ㈜ 에코먼트의 “질경이 바이옴-13” 시료(회향 열매 추출물, 질경이 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎추출물, 폴리글루타믹애씨드 포함)의 즉각적 피부 수분함량 개선 효능 평가 시험을 실시하였으며, 중도탈락자 없이 21명의 피험자가 모두 시험을 완료하였다. Immediate skin moisture content of Ecoment's "Plantary Biome-13" sample (including fennel fruit extract, plantain extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract, and polyglutamic acid) for a total of 21 subjects An improvement efficacy evaluation test was conducted, and all 21 subjects completed the test without dropouts.

시험 결과는 다음과 같았다. 1) 피부 수분함량을 나타내는 Corneometer 측정값 (A.U.)이 대조군시료와 비교하여 실시예7-3 시료 도포 후 37.12% 증가되어 시험 부위의 각질층 수분함량이 개선됨을 나타내었다. 2) 시험기간 동안 모든 피험자에서 특별한 이상반응이 관찰되지 않았다.The test results were as follows. 1) The Corneometer measurement value (A.U.) indicating the skin moisture content increased by 37.12% after application of the Example 7-3 sample compared to the control sample, indicating that the stratum corneum moisture content of the test site was improved. 2) No special adverse reactions were observed in all subjects during the test period.

결론적으로 (주)에코먼트 “질경이 바이옴-13”시험 시료를 1회 도포한 시험 부위는 도포 전에 비해 통계적으로 유의한 수준(p<0.05)으로 각질층 수분함량이 증가하여 시험 시료가 즉각적 피부 수분함량 개선 효과를 가지고 있는 것으로 판단되었다. 또한 모든 피험자에서 특별한 이상 반응이 관찰되지 않아 안전한 시료로 사료되었다. (일시적, 개인차 있음) In conclusion, the test site where the Ecoment Co., Ltd. “Plantary Biome-13” test sample was applied once showed a statistically significant (p<0.05) increase in the moisture content of the stratum corneum compared to before application, so that the test sample instantly moisturized the skin. It was judged to have the effect of improving the content. In addition, no special adverse reaction was observed in all subjects, so it was considered a safe sample. (temporary, there are individual differences)

[실시예 8 : 본 발명의 질경이 바이옴-13을 함유하는 화장료 조성물 제조 및 이를 이용한 피부임상시험][Example 8: Preparation of cosmetic composition containing plantain biome-13 of the present invention and skin clinical test using the same]

본 실시예에서는 상기 실시예 6에서 제조한 질경이 바이옴-13을 함유하는 크림 제형의 화장료 조성물을 제조하고 이를 이용하여 피부임상시험을 수행하였다.In this example, a cosmetic composition of a cream formulation containing the plantain biome-13 prepared in Example 6 was prepared, and a skin clinical test was performed using it.

1) 질경이 바이옴-13 (5-Mix)을 함유하는 크림 제형의 화장료 조성물 제조1) Preparation of a cream-type cosmetic composition containing plantain biome-13 (5-Mix)

질경이 바이옴-13 (5-Mix)을 함유하는 크림 제형의 화장료 조성물을 제조하였으며, 자세한 조성은 하기 표 9와 같았다.A cosmetic composition of a cream formulation containing plantain biome-13 (5-Mix) was prepared, and the detailed composition is shown in Table 9 below.

조성Furtherance 함량(중량부)Content (parts by weight) 실시예 8-1Example 8-1 실시예 8-2Example 8-2 실시예 8-3Example 8-3 정제수Purified water to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100 잔탄검xanthan gum 0.500.50 0.500.50 0.500.50 다이소듐(Disodium) EDTADisodium EDTA 0.020.02 0.020.02 0.020.02 5-Mix5-Mix 5.005.00 5.005.00 10.0010.00 코코-베타인coco-betaine 20.0020.00 20.0020.00 20.0020.00 히알루로닉산hyaluronic acid 5.005.00 10.0010.00 5.005.00 1,2-헥산다이올1,2-Hexanediol 2.002.00 2.002.00 2.002.00 솔비탄 올리베이트Sorbitan Oliveate 4.004.00 4.004.00 4.004.00 비스왁스(beeswax)beeswax 2.502.50 2.502.50 2.502.50

2) 탄력도 측정을 위한 피부임상시험2) Skin clinical test to measure elasticity

탄력도 측정은 Reviscometerⓡ RVM600을 측정 단위는 Arbiturary Unit(AU)로 표기하였다. 피부의 점성 탄력도는 탐침을 피부 표면에 접촉하면 특수한 유형의 탄성파(shear wave)를 피부 표면으로 내보내고 이로부터 발생하는 공명주행시간(resonance running time, RRT)의 도달 차이를 두 센서 간의 거리를 기준으로 계측하여 피부결 상태 또는 피부의 점성 탄력도를 정량적으로 측정하는 점성 탄력기(Reviscometerⓡ RVM600: COURAGE + KHAZAKA electronic GmbH, Germany)를 사용하여 측정하였다.The elasticity measurement was expressed as Reviscometerⓡ RVM600 and the unit of measurement was Arbiturary Unit (AU). The viscous elasticity of the skin is determined by applying a special type of shear wave to the skin surface when the probe is in contact with the skin surface. It was measured using a viscous elastic device (Reviscometerⓡ RVM600: COURAGE + KHAZAKA electronic GmbH, Germany) that quantitatively measures the skin texture condition or the viscous elasticity of the skin.

Reviscometerⓡ RVM600은 진동 주파수의 변화를 측정하여 피부표면의 단단함(stiffness)/유연함(suppleness)를 계산하는 형태이며 이것은 탄성파를 측정하는 것으로 측정 단위는 Arbiturary Unit(AU)로 표현한다. Reviscometerⓡ RVM600은 부착된 탐침을 피부 표면에 수직으로 밀착 시킨 후 사방을(360도 회전) 가볍게 눌러 측정한 값을 평균하여 사용하였다.Reviscometerⓡ RVM600 measures the change in vibration frequency to calculate the stiffness/suppleness of the skin surface. The Reviscometerⓡ RVM600 was used by averaging the measured values by pressing the attached probe vertically to the skin surface and then lightly pressing it in all directions (360 degree rotation).

피부의 수분 함유량은 피부 탄력에 밀접한 영향을 미치며 탄력있는 피부를 유지하기 위해서는 피부에 적당한 수분이 유지되어야 하고 수분이 10% 이하가 되면 피부에 주름이 생길 수 있으며 탄력이 저하될 수 있다. 피부의 점성 탄력도를 측정하기 위해 공명주행시간(RRT: Resonance running time)을 측정하여 피부의 점성 및 탄력도를 측정하는 점성탄력기 Reviscometerⓡ RVM600을 사용하였다.The moisture content of the skin has a close influence on the elasticity of the skin, and in order to maintain elastic skin, adequate moisture must be maintained in the skin. To measure the viscous elasticity of the skin, Reviscometerⓡ RVM600 was used, which measures the skin's viscosity and elasticity by measuring the resonance running time (RRT).

질경이 바이옴-13을 함유하는 크림이 점성탄력도에 미치는 영향을 알아보기 위해 8주 동안 실시예 8-1 내지 실시예 8-3, 각각의 제품을 사용한 세 그룹의 측정시점별 점성탄력도의 변화를 분석하였다. In order to investigate the effect of the cream containing plantain biome-13 on the viscous elasticity, the changes in the viscous elasticity at each measurement point of the three groups using each product, Examples 8-1 to 8-3, were examined for 8 weeks. analyzed.

그룹(N)group (N) Measurement time(mean±SD)Measurement time (mean±SD) prepre After 2weeksAfter 2 weeks After 4weeksAfter 4 weeks After 6weeksAfter 6weeks After 8weeksAfter 8weeks 실시예8-3Example 8-3 114.89±23.60114.89±23.60 121.64±35.10121.64±35.10 137.83±30.83137.83±30.83 150.50±35.12150.50±35.12 137.52±25.77137.52±25.77 실시예8-2Example 8-2 109.60±29.38109.60±29.38 110.40±25.35110.40±25.35 123.82±31.25123.82±31.25 139.18±37.61139.18±37.61 134.06±33.44134.06±33.44 실시예8-1Example 8-1 124.07±27.90124.07±27.90 120.56±21.32120.56±21.32 134.21±42.68134.21±42.68 134.97±26.32134.97±26.32 131.63±18.46131.63±18.46

그 결과, 표 10 및 도 8과 같이 실시예 8-3을 사용한 그룹의 경우, 제품을 적용하기 전 점성 탄력도는 114.89±23.60AU이었으나 2주 후에는 121.64±35.10AU, 4주 후에는 137.83±30.83AU, 6주 후에는 150.50±35.12AU, 8주 후에는 137.52±25.77AU로 시간이 지남에 따라 점성탄력도가 유의하게 증가되었다. 실시예8-2을 사용한 그룹의 경우에도 제품을 적용하기 전 109.60±29.38AU이었으나 2주 후에는 110.40±25.35AU, 4주 후에는 123.82±31.25AU, 6주 후에는 139.18±37.61AU, 8주 후에는 134.06±33.44AU로 유의하게 증가하였다(p<0.01). 실시예 8-1을 사용한 그룹의 경우에는 제품을 적용하기 전 124.07±27.90AU, 2주 후에는 120.56±21.32AU, 4주 후에는 134.21±42.68, 6주후에는 134.97±26.32, 8주 후에는 131.63±18.46AU로 시간이 지남에 따라 점성탄력도가 증가하였다(유의한 차이는 없었다).As a result, in the case of the group using Example 8-3 as shown in Table 10 and FIG. 8, the viscous elasticity before application of the product was 114.89±23.60AU, but after 2 weeks, 121.64±35.10AU, and after 4 weeks, 137.83±30.83 AU, 150.50±35.12AU after 6 weeks, and 137.52±25.77AU after 8 weeks, the viscous elasticity significantly increased with time. In the case of the group using Example 8-2, it was 109.60±29.38AU before application of the product, but 110.40±25.35AU after 2 weeks, 123.82±31.25AU after 4 weeks, 139.18±37.61AU after 6 weeks, 8 weeks Afterwards, it significantly increased to 134.06±33.44AU (p<0.01). In the case of the group using Example 8-1, 124.07±27.90AU before product application, 120.56±21.32AU after 2 weeks, 134.21±42.68 after 4 weeks, 134.97±26.32 after 6 weeks, 131.63 after 8 weeks The viscous elasticity increased over time to ±18.46 AU (there was no significant difference).

5회 측정 시점에서 세 그룹 간 점성탄력도는 차이가 없었으며 시간이 지남에 따라 측정시점별 세 그룹간 점성탄력도 변화량의 차이에서도 실시예 8-3의 점성탄력도의 변화가 가장 컸고, 실시예 8-2, 실시예 8-1 순으로 나타났다. 점성탄력도 변화의 경우 질경이 바이옴-13을 사용한 그룹에서 시간이 지남에 따라 점성탄력도가 증가함을 보였으며, 이를 종합하면 질경이 바이옴-13 함유 크림은 함유하지않은 크림에 비해 점성탄력도에 긍정적 영향을 미침을 알 수 있었다.There was no difference in the viscous elasticity between the three groups at the time of the 5th measurement, and the change in the viscous elasticity of Example 8-3 was the largest in the difference in the amount of change in the viscous elasticity between the three groups at each measurement point over time, and Example 8- 2, Example 8-1 appeared in the order. As for the change in viscous elasticity, the group using the plantain biome-13 showed that the viscous elasticity increased over time. Taken together, the plantain biome-13 containing cream had a positive effect on the viscoelasticity compared to the cream containing no plantain biome-13. could see the madness.

따라서 질경이 바이옴-13이 피부 탄력 화장품 소재로 유용하게 활용될 수 있을 것으로 사료되며, 질경이 바이옴-13 함유 크림이 피부에 긍정적 영향을 미침을 보여주어 화장품 소재로서의 다양한 질경이 바이옴-13 개발 가능성을 제기하였다.Therefore, it is thought that plantain biome-13 can be usefully used as a cosmetic material for skin elasticity, and it is possible to develop various plantain biome-13 as a cosmetic material by showing that cream containing plantain biome-13 has a positive effect on the skin. has been filed.

이상 종합하면, 질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리글루타믹애씨드를 혼합함으로써 피부 보습과 탄력, 피부 장벽 강화에 뛰어난 효능을 발휘할 수 있으며, 이를 화장품에 적용함으로써 새로운 화장품 원료로 활용할 수 있을 것으로 사료된다.Summarizing the above, by mixing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polyglutamic acid, excellent effects can be exerted on skin moisturizing, elasticity and skin barrier strengthening. It is thought that it can be used as a new cosmetic raw material.

Claims (6)

질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드를 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for moisturizing the skin containing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma glutamic acid as active ingredients.
제1항에 있어서,
상기 질경이 추출물은,
질경이에 메탄올, n-헥산(n-hexane), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 에틸 아세테이트(ethyl acetate) 중 선택되는 어느 하나 이상을 추출용매로 사용하여 추출한 것임을 특징으로 하는 피부 보습용 화장료 조성물.
According to claim 1,
The plantain extract,
A cosmetic composition for moisturizing the skin, characterized in that it is extracted from plantain using any one or more selected from methanol, n-hexane, methylene chloride, and ethyl acetate as an extraction solvent.
질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드를 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 증진용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for enhancing skin elasticity containing plantain extract, fennel fruit extract, Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma glutamic acid as active ingredients.
제3항에 있어서,
상기 질경이 추출물은,
질경이에 메탄올, n-헥산(n-hexane), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 에틸 아세테이트(ethyl acetate) 중 선택되는 어느 하나 이상을 추출용매로 사용하여 추출한 것임을 특징으로 하는 피부 탄력 증진용 화장료 조성물.
4. The method of claim 3,
The plantain extract,
A cosmetic composition for enhancing skin elasticity, characterized in that it is extracted from plantain using any one or more selected from methanol, n-hexane, methylene chloride, and ethyl acetate as an extraction solvent.
질경이 추출물, 회향 열매 추출물, 락토바실러스 플란타럼 배양물, 쑥잎 추출물 및 폴리감마글루타믹애씨드를 유효성분으로 함유하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물.
plantain extract, fennel fruit extract, A cosmetic composition for strengthening the skin barrier containing Lactobacillus plantarum culture, mugwort leaf extract and polygamma-glutamic acid as active ingredients.
제5항에 있어서,
상기 질경이 추출물은,
질경이에 메탄올, n-헥산(n-hexane), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 에틸 아세테이트(ethyl acetate) 중 선택되는 어느 하나 이상을 추출용매로 사용하여 추출한 것임을 특징으로 하는 피부 장벽 강화용 화장료 조성물.
6. The method of claim 5,
The plantain extract,
A cosmetic composition for strengthening the skin barrier, characterized in that it is extracted from plantain using any one or more selected from methanol, n-hexane, methylene chloride, and ethyl acetate as an extraction solvent.
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