KR102321147B1 - Cosmetic composition comprising Extracts of Ngoc Linh Ginseng, Curcuma longa, and Morinda citrifolia - Google Patents

Cosmetic composition comprising Extracts of Ngoc Linh Ginseng, Curcuma longa, and Morinda citrifolia Download PDF

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Abstract

응옥린삼 추출물을 제 1 성분으로서 포함하고, 증숙한 강황 및 노니 혼합물의 추출물을 제 2 성분으로서 포함하는 미백 개선용 화장료 조성물이 개시된다.Disclosed is a cosmetic composition for improving whitening comprising an extract of ngokrin ginseng as a first component and an extract of a mixture of steamed turmeric and noni as a second component.

Description

응옥린삼, 강황, 및 노니 추출물을 포함하는 화장료 조성물{Cosmetic composition comprising Extracts of Ngoc Linh Ginseng, Curcuma longa, and Morinda citrifolia}Cosmetic composition comprising Extracts of Ngoc Linh Ginseng, Curcuma longa, and Morinda citrifolia

본 발명은 응옥린삼, 강황, 및 노니 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition comprising ngokrin ginseng, turmeric, and noni extract.

최근 환경오염에 의한 오존층 파괴로 인해 자외선이 증가하고, 이로 인한 피부색 변화, 기미, 주근깨 등이 증가하고 있다. 멜라닌은 피부의 색소로서 티로시나제의 작용에 의해 생합성되는 것으로 보고되고 있다. 티로시나제는 자외선에 노출된 피부에 멜라닌 색소를 침착시켜 피부의 색을 짙어지게 만들거나 기미 주근깨 등을 유발한다. 때문에 화장품 및 의약품 산업에서는 멜라닌 생성을 억제함으로써 피부 손상을 예방 및 개선할 수 있는 물질을 개발하는 연구가 활발히 이루어지고 있다. 지금까지 멜라닌 생성 저해제의 연구는 주로 티로시나제 저해제를 개발하는 방향으로 집중되어 왔고, 대표적인 티로시나제 저해제로는 티로시나제 활성부위의 구리 이온에 대한 킬레이트 형성물질, 퀴논류를 페놀류로 환원시키는 아스코르브산 등의 환원제 그리고 티로시나제 자체를 변성시키는 바이설파이트(bisulfites) 제제 등을 들수 있다. 예를 들어, 멜라닌 생합성 저해제로서 하이드로퀴논(hydroquinone), 아스코르브산 또는 그의 유도체, 코직산(kojic acid), 글루타치온(glutathione), 알부틴(arbutin)과 같은 티로시나아제에 대해 저해 활성을 갖는 물질이 알려져 있다. 그러나, 하이드로퀴논은 피부 자극성이 매우 강하여 사용이 제한되는 문제점이 있고, 아스코르브산은 산화되기 쉬워 제형의 변색, 변취 되는 등의 문제가 발생한다. 또한, 코직산은 용액 내에서 불안정하여 제형의 안정성이 낮고 갑상선암 발생에 대한 발암성의 문제가 있다. 그리고 알부틴의 경우는 그 활성이 높지 않으며, 글루타티온, 시스테인 등의 티올계 화합물은 특유의 불쾌한 냄새를 가질 뿐만 아니라 경피 흡수에도 문제점이 있고 이들이 배당체 및 유도체들도 극성이 높으므로 화장품 원료에 배합하기 어려운 문제가 있다. 따라서 인체에 유해하지 않으면서도 미백 효과를 달성할 수 있는 천연물 유래 기능성 물질의 발굴이 필요하다. Recently, due to the destruction of the ozone layer due to environmental pollution, ultraviolet rays are increasing, and skin color changes, freckles, etc. are increasing. Melanin is reported to be biosynthesized by the action of tyrosinase as a pigment of the skin. Tyrosinase deposits melanin pigment on the skin exposed to UV rays, making the skin color darker or causing spots and freckles. Therefore, in the cosmetics and pharmaceutical industries, research is being actively conducted to develop substances that can prevent and improve skin damage by inhibiting melanin production. So far, research on melanogenesis inhibitors has been mainly focused on the development of tyrosinase inhibitors. Representative tyrosinase inhibitors include chelate-forming substances for copper ions in the tyrosinase active site, reducing agents such as ascorbic acid that reduce quinones to phenols, and and bisulfites that modify tyrosinase itself. For example, as a melanin biosynthesis inhibitor, hydroquinone, ascorbic acid or a derivative thereof, kojic acid, glutathione, a substance having inhibitory activity against tyrosinase such as arbutin is known. . However, hydroquinone has very strong skin irritation, so there is a problem that its use is limited, and ascorbic acid is easily oxidized, causing problems such as discoloration and odor of the formulation. In addition, kojic acid is unstable in solution, so the stability of the formulation is low, and there is a problem of carcinogenicity for the occurrence of thyroid cancer. And in the case of arbutin, its activity is not high, and thiol-based compounds such as glutathione and cysteine have a characteristic unpleasant odor and have a problem in transdermal absorption. there is a problem. Therefore, it is necessary to discover a functional material derived from natural products that can achieve a whitening effect without being harmful to the human body.

인삼(Panax ginseng C.A. Meyer)은 오가피과 인삼 속에 속하는 식물로서 한국을 비롯한 아시아에서 오래 전부터 사용된 생약이다. 지금까지 알려진 인삼의 효능은 사포닌에서 비롯된 중추신경계, 항스트레스, 항당뇨 등에 대한 약리작용이 밝혀져 있다. Ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) is a plant belonging to the genus Ginseng of the family Orchidaceae and has been used as a herbal medicine in Korea and other Asian countries for a long time. The efficacy of ginseng known so far has been found to have pharmacological effects on the central nervous system, anti-stress, and anti-diabetes derived from saponins.

강황(Curcuma longa)은 커큐민의 함유량이 풍부하며 카레의 주재료이고 항염 및 항산화 효과가 있는 것으로 알려져 있다. Turmeric (Curcuma longa) is rich in curcumin, a main ingredient in curry, and is known to have anti-inflammatory and antioxidant effects.

노니(Morinda citrifolia)는 열매가 감자처럼 생겼으며 표면이 울퉁불퉁하고 패인 자국이 있다. 열매에는 여러 개의 작은 갈색 씨가 들어있으며 익을 경우 역한 냄새가 나서 이용이 활발하지 않았다. 최근 노니 열매의 당뇨병, 통풍, 혈관염, 관절염 개선에 효과가 있다는 연구 결과가 알려져 있다.Noni (Morinda citrifolia) has a potato-like fruit with a rough surface and dents. The fruit contains several small brown seeds, and when ripe, it has a foul odor and is not used actively. Recently, research results are known that noni fruit is effective in improving diabetes, gout, vasculitis, and arthritis.

대한민국 공개공보 제10-2014-0145393호(2014.12.23)Republic of Korea Publication No. 10-2014-0145393 (2014.12.23)

일 구체예에 따르면, 응옥린삼(Panax vietnamensis, Ngoc Linh) 추출물, 및 강황(Curcuma longa) 및 노니(Morinda citrifolia) 혼합물의 추출물을 포함함으로써 기존 인삼의 에탄올 추출물보다 멜라닌 생성을 효과적으로 억제하고 뛰어난 미백 효과를 발휘할 수 있는 화장료 조성물을 제공한다.According to one embodiment, by including an extract of a mixture of Ngoc Linsam (Panax vietnamensis, Ngoc Linh) extract, and a mixture of turmeric (Curcuma longa) and noni (Morinda citrifolia), it effectively inhibits melanin production and has excellent whitening effect than the ethanol extract of conventional ginseng To provide a cosmetic composition that can exhibit

일 양상은 응옥린삼(Panax vietnamensis, Ngoc Linh) 추출물을 제 1 성분으로서 포함하고, 강황(Curcuma longa) 및 노니(Morinda citrifolia) 혼합물의 추출물을 제 2 성분으로서 포함하는 미백 개선용 화장료 조성물을 제공한다. One aspect provides a cosmetic composition for improving whitening comprising an extract of Ngoc Linh (Panax vietnamensis, Ngoc Linh) as a first component, and an extract of a mixture of turmeric (Curcuma longa) and noni (Morinda citrifolia) as a second component .

상기 응옥린삼은 인삼 전체를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 인삼 뿌리를 사용할 수 있다. 상기 강황은 바람직하게 뿌리줄기 또는 덩이뿌리를 사용할 수 있다. 상기 노니는 바람직하게 열매를 사용할 수 있다. The ngokrin ginseng may use the whole ginseng, preferably ginseng root may be used. The turmeric may preferably be a rhizome or tuber. The noni may preferably be a fruit.

본 발명자는 인삼 중에 응옥린삼의 추출물이 가장 미백효과가 뛰어나며, 증숙한 강황 및 노니 혼합물의 추출물을 더 혼합하면 미백효과가 더욱 상승함을 발견하였다. The present inventors have found that the extract of Ngolin ginseng has the most excellent whitening effect among ginseng, and that the whitening effect is further increased when the extract of the steamed turmeric and noni mixture is further mixed.

일 구체예에서, 상기 응옥린삼 추출물은 응옥린삼을 열처리하는 단계; 열처리한 응옥린삼을 증숙하는 단계; 및 증숙한 응옥린삼을 에탄올을 용매로 하여 추출한 것일 수 있다. 상기 응옥린삼을 열처리하는 단계는 120 내지 160℃에서 20 내지 30분에서 열처리하는 것일 수 있다. 상기 열처리한 응옥린삼을 증숙하는 단게는 60 내지 80℃로 4 내지 5시간에서 실시하는 것일 수 있다. In one embodiment, the ngokrinsam extract is heat-treating ngokrinsam; Steaming the heat-treated Ngogrin ginseng; And steamed ngokrin ginseng may be extracted using ethanol as a solvent. The step of heat-treating the ngokrin ginseng may be heat-treating at 120 to 160° C. for 20 to 30 minutes. The step of steaming the heat-treated ngokrin ginseng may be carried out at 60 to 80° C. for 4 to 5 hours.

응옥린 삼은 열처리 및 증숙으로 전처리하고 알코올 추출하면 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과가 전처리하지 않은 알코올 추출물보다 더욱 향상될 수 있다. If Ngocrin ginseng is pretreated with heat treatment and steaming and alcohol extraction is performed, the melanin production inhibitory effect of the extract can be further improved than that of an alcohol extract that is not pretreated.

일 구체예에서, 상기 제 1 성분 및 제 2 성분의 중량비는 1.1:1 내지 2.9:1, 1.3:1 내지 2.7:1, 1.5:1 내지 2.5:1, 1.8:1 내지 2.2:1, 또는 2:1 일 수 있다. 제 1 성분 및 제 2 성분을 상기 중량비로 혼합하면 멜라닌 생성 억제 효과가 더욱 향상될 수 있다. In one embodiment, the weight ratio of the first component and the second component is 1.1:1 to 2.9:1, 1.3:1 to 2.7:1, 1.5:1 to 2.5:1, 1.8:1 to 2.2:1, or 2 It can be 1:1. When the first component and the second component are mixed in the above weight ratio, the effect of inhibiting melanin production can be further improved.

일 구체예에서, 상기 제 1 성분 및 제 2 성분은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.1 내지 10 중량%, 0.2 내지 10 중량%, 0.3 내지 10 중량%, 0.4 내지 10 중량%, 0.5 내지 10 중량%, 1 내지 10 중량%, 2 내지 10 중량%, 또는 3 내지 10 중량% 만큼 포함할 수 있다. In one embodiment, the first component and the second component are 0.1 to 10% by weight, 0.2 to 10% by weight, 0.3 to 10% by weight, 0.4 to 10% by weight, 0.5 to 10% by weight, based on the total weight of the cosmetic composition; 1 to 10% by weight, 2 to 10% by weight, or 3 to 10% by weight.

일 구체예에서, 상기 제 2 성분은 강황 및 노니의 중량비가 0.8:1 내지 1.2:1, 0.9:1 내지 1.2:1, 0.8:1 내지 1.1:1, 0.9:1 내지 1.1:1, 또는 1:1인 혼합물을 추출한 것일 수 있다. In one embodiment, the second component has a weight ratio of turmeric and noni of 0.8:1 to 1.2:1, 0.9:1 to 1.2:1, 0.8:1 to 1.1:1, 0.9:1 to 1.1:1, or 1 It may be an extraction of a mixture of 1:1.

일 구체예에서, 상기 제2 성분은 60 내지 80% 에탄올, 또는 70% 에탄올로 추출한 것일 수 있다. In one embodiment, the second component may be extracted with 60 to 80% ethanol, or 70% ethanol.

일 구체예에서, 상기 강황은 증숙하여 전처리한 강황일 수 있다. 강황을 증숙하여 에탄올 추출하면 증숙하지 않은 강황의 에탄올 추출물보다 멜라닌 생성 억제 효과가 더욱 향상될 수 있다. In one embodiment, the turmeric may be turmeric pre-treated by steaming. When ethanol is extracted by steaming turmeric, the effect of inhibiting melanin production can be further improved than the ethanol extract of turmeric that is not steamed.

일 구체예에서, 상기 증숙한 강황은 40 내지 60℃로 30분 내지 1시간, 30분 내지 50분, 또는 30분 내지 40분 증숙한 것일 수 있다. In one embodiment, the steamed turmeric may be steamed at 40 to 60° C. for 30 minutes to 1 hour, 30 minutes to 50 minutes, or 30 minutes to 40 minutes.

본 발명의 화장료 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 각종 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 핸드크림, 파운데이션, 메이크업베이스, 트윈케익, 마스카라, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 또는 바디클린저일 수 있다. Products to which the cosmetic composition of the present invention can be added include, for example, various skin lotions, skin softeners, skin toners, astringents, lotions, milk lotions, nourishing lotions, massage creams, nourishing creams, hand creams, foundations, and makeup. It may be a base, twin cake, mascara, essence, nourishing essence, pack, soap, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion or body cleanser.

본 발명의 화장품 조성물이 상술한 형태의 제형으로 제조될 때, 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있다. 또한, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.When the cosmetic composition of the present invention is prepared in the form described above, it may contain various bases and additives necessary and appropriate for the formulation of the dosage form. In addition, the type and amount of these components can be easily selected by those skilled in the art.

예를 들어, 본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.For example, when the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide as a carrier component etc. may be used.

또 다른 예로, 본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 사용될 수 있다.As another example, when the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, Propylene glycol, 1,3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid ester of sorbitan may be used.

또 다른 예로, 본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.As another example, when the formulation of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester, and polyoxyethylene sorbitan ester, such as suspension agent, microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth and the like can be used.

또 다른 예로, 본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로 플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.As another example, when the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in particular, in the case of a spray, additional chlorofluoro propellants such as hydrocarbons, propane/butane or dimethyl ether.

또 다른 예로, 본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.As another example, when the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing agent, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate as carrier components , fatty acid amide ether sulfate, alkylamidobetaine, fatty alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, lanolin derivative or ethoxylated glycerol fatty acid ester and the like can be used.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.In addition, the cosmetic composition of the present invention may be used alone or in combination, or may be used in combination with other cosmetic compositions other than the present invention. In addition, the cosmetic composition according to the present invention can be used according to a conventional method of use, and the number of times of use can be varied according to the skin condition or taste of the user.

일 구체예에 따른 화장료 조성물은 멜라닌 생성 억제 효과가 우수함이 확인되었으므로 뛰어난 미백 효과를 가질 수 있다. Since it was confirmed that the cosmetic composition according to one embodiment has an excellent effect of inhibiting melanin production, it may have an excellent whitening effect.

도 1은 일 실시예에 따른 서로 다른 종류의 인삼 추출물 처리시 세포 생존률을 측정한 것이다. MSHg는 고려인삼 추출물이고, MSHn은 전칠삼 추출물이고, MSHj는 죽절삼 추출물이고, MSHv는 응옥린삼 추출물이다.
도 2는 일 실시예에 따른 서로 다른 종류의 인삼 에탄올 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 3은 일 실시예에 따른 서로 다른 온도의 응옥린삼 에탄올 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 4는 일 실시예에 따른 서로 다른 온도로 증숙처리한 응옥린삼의 에탄올 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 5는 일 실시예에 따른 서로 다른 온도로 열처리하고 증숙처리한 응옥린삼의 에탄올 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 6은 일 실시에에 따른 서로 다른 온도로 열처리하고 증숙하지 않은 응옥린삼의 에탄올 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 7은 강황의 에탄올 추출물, 노니의 에탄올 추출물, 및 강황 및 노니의 에탄올 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 8은 증숙한 강황의 에탄올 추출물 및 증숙한 노니의 에탄올 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과를 비교한 것이다.
1 is a measurement of the cell viability during treatment with different types of ginseng extracts according to an embodiment. MSHg is Korean ginseng extract, MSHn is Korean ginseng extract, MSHj is bamboo jeol ginseng extract, and MSHv is Ngolin ginseng extract.
Figure 2 shows the melanin production inhibitory effect of different types of ginseng ethanol extract according to an embodiment.
Figure 3 shows the melanin production inhibitory effect of the ethanol extract of ngokrinsam at different temperatures according to an embodiment.
Figure 4 shows the melanin production inhibitory effect of the ethanol extract of ngokrinsam steamed at different temperatures according to an embodiment.
Figure 5 shows the melanin production inhibitory effect of the ethanol extract of ngokrinsam, which was heat-treated and steamed at different temperatures according to an embodiment.
Figure 6 shows the melanin production inhibitory effect of the ethanol extract of ngokrinsam that is not heat-treated and steamed at different temperatures according to one embodiment.
7 shows the melanin production inhibitory effect of the ethanol extract of turmeric, the ethanol extract of noni, and the ethanol extract of turmeric and noni.
8 is a comparison of the melanin production inhibitory effect of the ethanol extract of steamed turmeric and the ethanol extract of steamed noni.

이하 하나 이상의 구체예를 실시예를 통해 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 하나 이상의 구체예를 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, one or more specific embodiments will be described in more detail through examples. However, these examples are for illustrative purposes of one or more embodiments, and the scope of the present invention is not limited to these examples.

실시예 1: 인삼 추출물의 세포 생존율 및 미백효과 확인Example 1: Confirmation of cell viability and whitening effect of ginseng extract

1-1. 4 종류의 인삼 추출물 준비1-1. Preparation of 4 kinds of ginseng extract

고려인삼(Panax ginseng), 전칠삼(P. notoginseng), 죽절삼(P. japonicas), 응옥린삼(P.vietnamensis, Ngoc Linh)의 미백효과를 비교하였다. 응옥린삼은 Ngoc Linh Mountain in Kon tum Province로부터 입수하였다. 각 인삼의 뿌리는 2 내지 3년근을 사용하였으며, 사용 전까지 -70℃에서 보관하였다. The whitening effects of Korean ginseng (Panax ginseng), Korean ginseng (P. notoginseng), bamboo japonicas (P. japonicas), and Ngoc Linh (P. vietnamensis, Ngoc Linh) were compared. Ngoc Linh Ginseng was obtained from Ngoc Linh Mountain in Kon tum Province. The root of each ginseng was used for 2-3 years, and stored at -70°C until use.

각 인삼의 뿌리를 해동하고 500g을 70% 에탄올 용매 5L에 침지시켜 상온에서 24시간 동안 추출하고 필터 페이퍼로 여과하였다. 알코올의 양은 증숙한 인삼 중량의 약 10배를 사용하였다. Each root of ginseng was thawed, and 500 g was immersed in 5 L of 70% ethanol solvent, extracted at room temperature for 24 hours, and filtered through filter paper. The amount of alcohol used was about 10 times the weight of steamed ginseng.

1-2. B16F10 멜라노마 세포주 배양1-2. B16F10 melanoma cell line culture

한국 세포주은행에서 B16F10 마우스 멜라노마 세포(mouse melanoma cell)을 분양받아 10% FBS(fetal bovine serum, Welgene)와 1% 페니실린-스트렙토마이신(Gibco BRL)이 첨가된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 주 2회 계대배양 후, 24웰 플레이트에 약 1 X 104 세포/웰로 분주하여 24시간 배양하였다. 세포 과밀도 현상을 방지하기 위해 트립신을 이용하여 적정수의 세포를 유지하였다. B16F10 mouse melanoma cells were distributed from the Korean cell line bank, and 10% FBS (fetal bovine serum, Welgene) and 1% penicillin-streptomycin (Gibco BRL) were used in DMEM medium supplemented with 37°C, 5 % CO 2 Incubated under conditions. After subculture twice a week, the cells were seeded at about 1 X 10 4 cells/well in a 24-well plate and cultured for 24 hours. An appropriate number of cells was maintained using trypsin to prevent cell overdensity.

1-3. B16F10 멜라노마 세포의 생존율 측정1-3. Measurement of viability of B16F10 melanoma cells

세포 배양용 6 well plate에 B16F10 세포를 3 X 104 세포/웰로 분주하여 증숙 인삼 추출물을 각 웰당 200 μg/ml 처리하였다. 3일 후 희석된 0.5 mg/ml 농도의 tetrazolium bromide salt(MTT, Amresco, Solon, USA)를 200 μl씩 분주하고 2시간 동안 CO2 인큐베이터에서 배양한 다음 배지와 MTT 시약을 제거하고 DMSO를 2ml씩 분주하여 well에 생성된 포르마진을 녹인 후 96 well plate에 200μl씩 분주하여 ELISA reader로 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 세포에 대한 독성은 각각의 대조군의 평균 흡광도를 구하여 백분율로 나타내었다. B16F10 cells were aliquoted at 3 X 10 4 cells/well in a 6-well plate for cell culture, and 200 μg/ml of the steamed ginseng extract was treated per well. After 3 days, 200 μl of diluted 0.5 mg/ml tetrazolium bromide salt (MTT, Amresco, Solon, USA) was dispensed and incubated in a CO 2 incubator for 2 hours, then the medium and MTT reagent were removed and DMSO was added 2 ml each. After dissolving the formazin generated in the wells, 200 μl of each was dispensed into a 96 well plate, and absorbance was measured at 540 nm with an ELISA reader. Toxicity to each cell was expressed as a percentage by obtaining the average absorbance of each control group.

도 1에 따르면 각 인삼추출물을 처리한 군들은 모두 세포생존율이 우수하였으므로 화장료 조성물로 사용시 부작용이 크지 않을 것으로 예상되었다. According to FIG. 1, all groups treated with each ginseng extract had excellent cell viability, so side effects were not expected to be significant when used as a cosmetic composition.

1-4. B16F10 멜라노마 세포의 멜라닌 생성량 측정1-4. Measurement of melanin production in B16F10 melanoma cells

B16F10 세포에 α-melanocyte stimulating hormone(α-MSH) 및 상기 실시예 1-1에서 준비한 4종의 인삼 추출물을 100μg/ml 처리하여 2일간 배양하고 세포를 수거하여 PBS로 세척하였다. 그 후 10% DMSO가 함유된 1N NaOH를 넣고 80℃에서 1시간 인큐베이션하여 멜라닌을 용해시킨 후 ELISA reader(Molecular Device, Sunnyvale, CA, USA)로 425mm에서 흡광도를 측정하였다. B16F10 cells were treated with α-melanocyte stimulating hormone (α-MSH) and 4 types of ginseng extracts prepared in Example 1-1 at 100 μg/ml, cultured for 2 days, and cells were collected and washed with PBS. After that, 1N NaOH containing 10% DMSO was added and incubated at 80° C. for 1 hour to dissolve melanin, and then absorbance was measured at 425 mm with an ELISA reader (Molecular Device, Sunnyvale, CA, USA).

도 2를 참조하면, 멜라닌 생성은 α-MSH를 처리한 군에서 증가하였으나, 고려인삼, 전칠삼, 죽절삼, 응옥린삼 추출물을 처리한 군에서는 멜라닌 함량의 증가가 억제되었으며, 특히 응옥린 삼 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과가 가장 뛰어남을 확인하였다. Referring to FIG. 2 , melanin production was increased in the group treated with α-MSH, but the increase in melanin content was inhibited in the group treated with Korean ginseng, Korean ginseng, jeonchilsam, bamboo jeolsam, and Ngolin ginseng extract. It was confirmed that the melanin production inhibitory effect was the most excellent.

실시예 2: 응옥린삼 추출 방법에 따른 미백효과 확인Example 2: Confirmation of whitening effect according to the method of extracting ngokrin ginseng

2-1. 추출온도에 따른 효과 변화 확인2-1. Confirmation of effect change according to extraction temperature

최적의 추출온도를 확립하기 위해 응옥린삼을 70% 에탄올로 상온에서 24시간 추출, 40℃에서 8시간 추출, 50℃에서 4시간 추출, 60℃에서 2시간 추출하였다. 각 추출물을 상기 실시예 1-4의 방법과 동일하게 실험하여 멜라닌 생성량을 측정하였다. To establish the optimal extraction temperature, ngokrin ginseng was extracted with 70% ethanol at room temperature for 24 hours, extracted at 40°C for 8 hours, extracted at 50°C for 4 hours, and extracted at 60°C for 2 hours. Each extract was tested in the same manner as in Examples 1-4 to measure melanin production.

도 3을 참조하면, 50℃에서 4 시간 추출한 응옥린삼 추출물이 멜라닌 생성 억제 효과가 가장 뛰어나다는 점을 확인할 수 있었다. Referring to FIG. 3 , it was confirmed that the Ngolin ginseng extract extracted at 50° C. for 4 hours had the best melanin production inhibitory effect.

2-2. 증숙 응옥린삼의 효과 변화 확인 2-2. Confirmation of effect change of steamed ngokrin ginseng

증숙한 응옥린삼의 70% 알코올 추출물의 멜라닌 생성 억제효과를 확인하였다. The melanin production inhibitory effect of the 70% alcohol extract of the steamed Ngolin ginseng was confirmed.

인삼을 찜기에 넣고 온도를 달리하여 50℃, 60℃, 70℃, 80℃, 90℃, 및 100℃에서 약 4시간 동안 증숙시켜 증숙 인삼을 준비하였다. Steamed ginseng was prepared by putting ginseng in a steamer and steaming it at 50 °C, 60 °C, 70 °C, 80 °C, 90 °C, and 100 °C for about 4 hours at different temperatures.

각 온도별로 증숙한 인삼을 70% 알코올로 50℃의 온도조건에서 4시간 추출하고 상기 실시예 1-4 방법과 동일하게 멜라닌 생성량을 측정하였다. Ginseng steamed at each temperature was extracted with 70% alcohol at a temperature of 50° C. for 4 hours, and the amount of melanin production was measured in the same manner as in Example 1-4.

도 4를 참조하면, 70℃에서 4시간 증숙한 인삼을 추출한 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과가 가장 뛰어나다는 것을 확인할 수 있었다. Referring to Figure 4, it was confirmed that the melanin production inhibitory effect of the extract extracted from ginseng steamed for 4 hours at 70 ℃ is the most excellent.

2-3. 열처리 후 증숙한 인삼의 효과 변화 확인2-3. Confirmation of effect change of steamed ginseng after heat treatment

서로 다른 온도로 열처리한 응옥린삼을 준비하고 각각을 증숙 후 에탄올 추출하여 멜라닌 생성 억제 효과를 비교하였다. Ngolin ginseng heat-treated at different temperatures was prepared and each was steamed and extracted with ethanol to compare the effect of inhibiting melanin production.

열처리한 응옥린삼은 오븐에서 100℃, 120℃, 140℃, 및 160℃에서 각각 25분간 열처리하여 준비하였다. Heat-treated ngokrin ginseng was prepared by heat-treating in an oven at 100 °C, 120 °C, 140 °C, and 160 °C for 25 minutes, respectively.

증숙 및 에탄올 추출은 상기 실시예와 동일한 방법으로 하였으며, 증숙은 70℃에서 4시간 진행하였고, 에탄올 추출은 50℃에서 4시간 추출하였다. Steaming and ethanol extraction were performed in the same manner as in the above example, and steaming was performed at 70° C. for 4 hours, and ethanol extraction was performed at 50° C. for 4 hours.

도 5를 참조하면, 140℃에서 열처리한 응옥린삼을 증숙하고 에탄올 추출한 추출물의 멜라닌 생성 억제효과가 가장 뛰어나며, 온도를 더 높이는 경우 오히려 효과 감소한다는 것을 확인할 수 있었다. Referring to FIG. 5 , it was confirmed that the melanin production inhibitory effect of the ethanol-extracted extract after steaming ngokrin ginseng heat-treated at 140° C. was the most excellent, and the effect decreased when the temperature was increased.

또한 도 3의 결과와 비교하면, 열처리 및 증숙 단계를 거친 응옥린삼의 에탄올 추출물은 이러한 단계를 거치지 않고 해동 후 즉시 에탄올 추출한 추출물과 비교할 때 멜라닌 생성 억제 효과가 유의미하게 증가하였다. In addition, compared with the results of Figure 3, the ethanol extract of Ngolin ginseng, which had undergone the heat treatment and steaming steps, significantly increased the melanin production inhibitory effect when compared to the ethanol-extracted extract immediately after thawing without going through these steps.

2-4. 열처리 후 에탄올 추출한 인삼의 효과 변화 확인2-4. Confirmation of effect change of ethanol-extracted ginseng after heat treatment

상기 실시예 2-3에서 증숙하는 단계를 생략하고 건조 후 에탄올 추출한 인삼의 효과 변화를 확인하였다. The change in the effect of ethanol-extracted ginseng after drying and omitting the steaming step in Example 2-3 was confirmed.

응옥린삼의 건조 조건 및 에탄올 추출 조건은 상기 실시예 2-3과 동일하게 진행하였다. Drying conditions and ethanol extraction conditions of ngokrin ginseng were carried out in the same manner as in Example 2-3.

도 6을 참조하면, 응옥린삼을 건조 후 증숙하지 않고 에탄올 추출한 경우, 건조 및 증숙을 모두 처리한 응옥린삼 추출물보다 멜라닌 생성 억제효과가 열등하며, 해동 후 그대로 추출한 경우와 큰 차이가 없다는 것을 확인할 수 있었다. Referring to Figure 6, when ethanol extraction without steaming after drying, the melanin production inhibitory effect is inferior to that of the Ngoulin ginseng extract treated with both drying and steaming, and it can be confirmed that there is no significant difference from the case of extracting as it is after thawing. there was.

따라서 응옥린삼을 건조하고 증숙하는 단계를 거침으로써 응옥린삼의 에탄올 추출물시 멜라닌 생성 억제 성분의 추출을 촉진하는 것으로 생각되었다. Therefore, it was thought to promote the extraction of melanin production inhibitory components during the ethanol extract of Ngogrin ginseng by drying and steaming.

실시예 3: 강황 및 노니의 미백효과 확인Example 3: Confirmation of whitening effect of turmeric and noni

3-1. 강황 및 노니의 에탄올 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과 확인3-1. Confirmation of melanin production inhibitory effect of ethanol extracts of turmeric and noni

강황의 에탄올 추출물, 노니의 에탄올 추출물, 강황 및 노니의 에탄올 추출물을 상기 실시예 2-1 및 실시예 2-2의 방법으로 추출하여 멜라닌 생성 억제 효과를 확인하였다. 구체적으로 강황의 에탄올 추출물은 강황 500g을 사용하고, 노니의 에탄올 추출물은 노니 500g을 사용하였으며, 강황 및 노니는 1:1 중량비로 500g을 사용하였고 70% 에탄올을 5L 에 침지시켜 사용하였다. 온도 및 시간은 상온에서 24시간 추출, 40℃에서 8시간 추출, 50℃에서 4시간 추출, 60℃에서 2시간 추출하였다. The ethanol extract of turmeric, the ethanol extract of noni, and the ethanol extract of turmeric and noni were extracted by the methods of Examples 2-1 and 2-2 to confirm the effect of inhibiting melanin production. Specifically, 500 g of turmeric was used for the ethanol extract of turmeric, 500 g of noni was used for the ethanol extract of noni, and 500 g of turmeric and noni were used in a 1:1 weight ratio, and 70% ethanol was immersed in 5L. The temperature and time were extracted at room temperature for 24 hours, extracted at 40°C for 8 hours, extracted at 50°C for 4 hours, and extracted at 60°C for 2 hours.

도 7을 참조하면, 강황 추출물, 노니 추출물, 그리고 강황 및 노니 추출물은 대조군과 비교할 때 멜라닌 생성량 억제 효과가 있는 것으로 판단되나 효과가 크지 않았고, 추출시 온도 조건에 따른 차이도 유의미한 차이는 없는 것으로 확인되었다. Referring to Figure 7, turmeric extract, noni extract, and turmeric and noni extract were judged to have the effect of inhibiting melanin production compared to the control group, but the effect was not large, and the difference according to the temperature conditions during extraction was also confirmed that there is no significant difference. became

3-2. 증숙한 강황 및 증숙한 노니 혼합 추출물의 미백효과 확인 3-2. Confirmation of whitening effect of steamed turmeric and steamed noni mixed extract

강황 및 노니를 70℃에서 4시간 증숙시키고 70% 에탄올로 상온추출하여 미백효과를 확인하였다. 온도 및 시간은 상온에서 24시간 추출, 40℃에서 8시간 추출, 50℃에서 4시간 추출, 60℃에서 2시간 추출하였다.The whitening effect was confirmed by steaming turmeric and noni at 70° C. for 4 hours and extracting them at room temperature with 70% ethanol. The temperature and time were extracted at room temperature for 24 hours, extracted at 40°C for 8 hours, extracted at 50°C for 4 hours, and extracted at 60°C for 2 hours.

도 8을 참조하면, 증숙한 강황을 에탄올 추출하는 경우 멜라닌 생성 억제효과가 더 향상되었으나, 증숙한 노니는 오히려 멜라닌 생성 억제 효과가 저하됨을 확인하였다. 노니의 경우는 증숙 처리시 조직이 파괴되어 성분의 손실이 발생하기 때문으로 생각된다. 또한 추출시 온도 조건에 따른 차이도 유의미한 차이는 없는 것으로 확인되었다.Referring to Figure 8, when the steamed turmeric was extracted with ethanol, the melanin production inhibitory effect was further improved, but it was confirmed that the steamed noni rather decreased the melanin production inhibitory effect. In the case of noni, it is thought that this is because the tissue is destroyed during the steaming process, resulting in loss of components. In addition, it was confirmed that there was no significant difference in the difference according to the temperature conditions during extraction.

실시예 4: 응옥린삼 추출물과 증숙한 강황 및 노니 추출물의 혼합물의 미백효과 확인Example 4: Confirmation of whitening effect of a mixture of Ngolin ginseng extract and steamed turmeric and noni extract

상기 실시예 2-4의 방법으로 제조한 응옥린삼 에탄올 추출물(HSEG), 상기 실시예 3-2의 증숙한 강황 에탄올 추출물(SEC), 상기 실시예 3-1의 노니 에탄올 추출물(EN)을 다양하게 혼합하여 멜라닌 생성 억제 효과를 확인하였다. The ethanol extract of ngokrinsam (HSEG) prepared by the method of Example 2-4, the steamed turmeric ethanol extract (SEC) of Example 3-2, and the noni ethanol extract (EN) of Example 3-1 were varied. The melanin production inhibitory effect was confirmed by mixing.

Figure 112019110854362-pat00001
Figure 112019110854362-pat00001

상기 표 1에 따르면 HSEG와 SEC를 1:1의 중량비로 혼합하고 멜라닌 생성 억제 효과를 확인한 결과, 멜라닌 생성 억제 효과가 HSEG와 SEC의 중간값(예상값)보다 낮아졌음을 발견하였다. According to Table 1, as a result of mixing HSEG and SEC in a weight ratio of 1:1 and confirming the melanogenesis inhibitory effect, it was found that the melanogenesis inhibitory effect was lower than the median value (expected value) of HSEG and SEC.

HSEG와 EN을 1:1의 중량비로 혼합하고 멜라닌 생성 억제 효과를 확인한 결과, 마찬가지로 멜라닌 생성효과가 HSEG와 EN의 중간값(예상값)보다 낮아졌다는 것을 확인할 수 있었다. As a result of mixing HSEG and EN in a weight ratio of 1:1 and confirming the melanogenesis inhibitory effect, it was confirmed that the melanogenesis effect was similarly lower than the median value (expected value) of HSEG and EN.

HSEG, SEC 및 EN을 비율을 달리하여 혼합한 결과, HSEG:SEC:EN의 중량비가 2:1:1일 때 HSEG 추출물만을 처리한 경우보다 멜라닌 생성 억제 효과가 유의미하게 향상되었음을 확인하였다. As a result of mixing HSEG, SEC, and EN in different ratios, it was confirmed that the melanogenesis inhibitory effect was significantly improved compared to the case where only the HSEG extract was treated when the weight ratio of HSEG:SEC:EN was 2:1:1.

실시예 5: 열처리 및 증숙한 응옥린삼, 증숙한 강황 및 노니를 혼합하여 추출한 추출물의 미백효과 확인Example 5: Confirm the whitening effect of the extract extracted by mixing heat-treated and steamed Ngolin ginseng, steamed turmeric and noni

열처리 및 증숙 단계를 거친 응옥린삼, 증숙 단계를 거친 강황, 및 무처리 노니를 다르게 혼합하고 70% 에탄올에 침지시켜 50℃에서 4시간 동안 추출하였다. 응옥린삼과 강황의 전처리 과정은 상기 실시예에서 기술한 내용과 동일하다. Ngocrin ginseng, which has been subjected to heat treatment and steaming, turmeric, which has undergone a steaming step, and untreated noni were mixed differently, immersed in 70% ethanol, and extracted at 50° C. for 4 hours. The pretreatment process of ngokrin ginseng and turmeric is the same as described in the above embodiment.

Figure 112019110854362-pat00002
Figure 112019110854362-pat00002

상기 표 2를 참조하면, 열처리 및 증숙한 응옥린삼, 증숙한 강황, 노니를 각각 에탄올 추출하여 혼합하는 것보다 증숙한 강황 및 노니를 함께 추출하고 열처리 및 증숙한 응옥린삼은 별도로 추출하여 혼합하는 것이 멜라닌 생성 억제 효과가 더 향상됨을 확인하였다.Referring to Table 2, it is better to extract and mix steamed turmeric and noni together and separately extract and mix heat-treated and steamed ngocrinsam, steamed turmeric, and noni rather than extracting and mixing ethanol respectively. It was confirmed that the melanin production inhibitory effect was further improved.

Claims (9)

응옥린삼 추출물을 제 1 성분으로서 포함하고,
증숙한 강황 및 노니 혼합물의 추출물을 제 2 성분으로서 포함하는,
미백 개선용 화장료 조성물로서,
상기 응옥린삼 추출물은,
응옥린삼을 열처리하는 단계;
열처리한 응옥린삼을 증숙하는 단계; 및
증숙한 응옥린삼을 에탄올 추출하는 단계로 제조된 것인,
화장료 조성물.
Ngocrin ginseng extract as a first component,
An extract of a mixture of steamed turmeric and noni as a second component,
A cosmetic composition for improving whitening, comprising:
The ngokrin ginseng extract,
Heat-treating ngokrin ginseng;
Steaming the heat-treated Ngogrin ginseng; and
Which is prepared in the step of ethanol extraction of steamed ngokrin ginseng,
cosmetic composition.
삭제delete 제 1항에 있어서,
상기 응옥린삼을 열처리하는 단계는 120 내지 160℃에서 20 내지 30분 열처리하는 것이고,
상기 열처리한 응옥린삼을 증숙하는 단계는 60 내지 80℃로 4 내지 5시간 증숙하는 것인,
화장료 조성물.
The method of claim 1,
The heat treatment of the ngokrin ginseng is to heat treatment at 120 to 160 ° C for 20 to 30 minutes,
The step of steaming the heat-treated ngokrin ginseng is to steam for 4 to 5 hours at 60 to 80 ℃,
cosmetic composition.
제 1 항에 있어서,
상기 에탄올 추출하는 단계는 40 내지 60℃의 온도에서 추출한 것인,
화장료 조성물.
The method of claim 1,
The step of extracting the ethanol will be extracted at a temperature of 40 to 60 ℃,
cosmetic composition.
제 1 항에 있어서,
상기 제 1 성분 및 제 2 성분의 중량비는 1.1:1 내지 2.9:1인,
화장료 조성물.
The method of claim 1,
The weight ratio of the first component and the second component is 1.1:1 to 2.9:1,
cosmetic composition.
제 1 항에 있어서,
상기 제 2 성분은 강황 및 노니의 중량비가 0.8:1 내지 1.2:1인 혼합물을 추출한 것인,
화장료 조성물.
The method of claim 1,
The second component is a mixture of turmeric and noni in a weight ratio of 0.8:1 to 1.2:1 is extracted,
cosmetic composition.
제 1 항에 있어서,
상기 제 2 성분은 60 내지80% 에탄올로 추출한 것인,
화장료 조성물.
The method of claim 1,
The second component is extracted with 60 to 80% ethanol,
cosmetic composition.
삭제delete 제 7 항에 있어서,
상기 증숙한 강황은 40 내지 60℃로 30분 내지 1시간 증숙한 것인,
화장료 조성물.

8. The method of claim 7,
The steamed turmeric is steamed at 40 to 60° C. for 30 minutes to 1 hour,
cosmetic composition.

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