KR102317409B1 - Food compositions comprising probiotics lactic acid bacteria and a amino acid mineral complex as effective components - Google Patents

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Abstract

본 발명은 프로바이오틱스 유산균 및 아미노산 미네랄 복합체를 유효성분으로 하는 식품 조성물에 관한 것으로, 프리바이오틱스와 같이 유산균의 생육을 억제하지 않고 오히려 생육 및 증식을 촉진하면서 생체 흡수율이 뛰어나고 식품의 풍미를 저해하지 않는 복합 식품 조성물로서, 면역 증강 활성이 뛰어나므로 성장기 어린이용 건강기능식품으로 활용될 수 있다. The present invention relates to a food composition containing probiotic lactic acid bacteria and an amino acid mineral complex as active ingredients, which does not inhibit the growth of lactic acid bacteria like prebiotics, but rather promotes growth and proliferation, has excellent bioabsorption rate, and does not impair the flavor of food. As a complex food composition, it has excellent immune enhancing activity, so it can be used as a health functional food for growing children.

Description

프로바이오틱스 유산균 및 아미노산 미네랄 복합체를 유효성분으로 하는 식품 조성물{Food compositions comprising probiotics lactic acid bacteria and a amino acid mineral complex as effective components}Food compositions comprising probiotics lactic acid bacteria and a amino acid mineral complex as effective components

본 발명은 프로바이오틱스 유산균 및 아미노산 미네랄 복합체를 유효성분으로 하는 식품 조성물에 관한 것으로, 특히 성장기 어린이용 건강기능식품에 관한 것이다. The present invention relates to a food composition comprising probiotic lactic acid bacteria and amino acid mineral complex as active ingredients, and more particularly, to a health functional food for growing children.

유산균은 인체의 소화계에 공생하면서 섬유질 및 복합 단백질들을 분해하여 중요한 영양 성분으로 만드는 역할을 담당하며, 이와 같이 사람을 포함한 동물의 위장관 내에서 숙주의 장내 미생물 환경을 개선하여 숙주의 건강에 유익한 영향을 주는 살아있는 미생물을 통칭하여 프로바이오틱스라고 한다. Lactic acid bacteria play a role in making important nutrients by decomposing fiber and complex proteins while coexisting in the digestive system of the human body. Live microorganisms are collectively called probiotics.

국내에서 건강기능식품용 프로바이오틱스와 관련하여, 동화약품은 2016년 락토바실러스 사케이 OK67발효물의 고혈당 개선 건강기능식품 사업화를 위한 연구를 수행한 바 있고, 2018년 농림축산식품부의 미생물유전체 전략연구사업단 과제로 ㈜종근당바이오는 항비만 프로바이오틱스 산업화 연구를, ㈜에이투젠은 콜레스테롤 저하 유산균 소재 개발 연구를 수행한 바 있다. 한편 CJ 제일제당은 특허 10-1406168호(발명의 명칭 “신규한 락토바실러스 플란타룸 및 이를 이용한 조성물”)의 락토바실러스 플란타룸 CJLP-133 균주를 이용해 2015년 “BYO 피부 유산균”이라는 피부상태 개선에 도움을 줄 수 있는 개별인정형 건강기능식품을 출시하였다.In relation to probiotics for health functional food in Korea, Dong Wha Pharm has conducted a study for commercialization of high blood sugar improvement health functional food of Lactobacillus Sakei OK67 fermented product in 2016. Chong Kun Dang Bio Co., Ltd. has conducted research on the industrialization of anti-obesity probiotics, and A2Gen Co., Ltd. has conducted research on the development of cholesterol-lowering lactic acid bacteria. On the other hand, CJ CheilJedang used the Lactobacillus plantarum CJLP-133 strain of Patent No. 10-1406168 (the title of the invention “new Lactobacillus plantarum and composition using the same”) to produce a skin condition called “BYO skin lactic acid bacteria” in 2015. Individually recognized health functional foods that can help improve

한편 미네랄 영양에 있어서 아미노산 미네랄 복합체의 장점은 점막세포 및 식물세포에서 능동수송(active transport) 또는 기타 다른 기전에 의해 그것이 손쉽게 흡수가 된다는 사실이다. 즉, 운반분자로서 아미노산을 사용하여 미네랄을 흡수시키게 되면, 흡수를 위하여 활성부위에 대한 경쟁과 관련된 문제와 미네랄간의 특수미량요소의 흡수저해 기능 등을 회피할 수 있는 장점이 있다.On the other hand, the advantage of amino acid-mineral complex in mineral nutrition is the fact that it is easily absorbed by active transport or other mechanisms in mucosal cells and plant cells. That is, when minerals are absorbed using amino acids as transport molecules, there is an advantage in that it is possible to avoid problems related to competition for active sites for absorption and the function of inhibiting absorption of special trace elements between minerals.

미네랄 아미노산 복합체는 일반적으로 알파-아미노산과 금속이온 사이의 반응에 의해 생성되며, 상기 복합체가 환구조를 갖기 위해서는 2 또는 그 이상의 원자가를 가진 금속이온이 요구된다. 이러한 반응에서, 금속이온의 양전하는 알파-아미노산의 아미노기 또는 카르복실기의 음전하와 반응하여 중화된다.A mineral amino acid complex is generally produced by a reaction between an alpha-amino acid and a metal ion, and in order for the complex to have a ring structure, a metal ion having a valence of 2 or more is required. In this reaction, the positive charge of the metal ion is neutralized by reacting with the negative charge of the amino or carboxyl group of the alpha-amino acid.

미네랄 아미노산 복합체의 구조 및 화학식 그리고 생체 이용성에 대한 관련문헌은 매우 다양한 바, 대표적으로, 애쉬 머드 등(Ashmead et al., Chelated Mineral Nutrition, (1982), Chas. C. Thomas Publishers, Springfield, Ill.), 애쉬머드 등(Ashmead et al., Intestinal Absorption of Metal Ions, (1985)), 애쉬머드 등(Ashmead et al., Foliar Feeding of Plants with Amino Acid Chelates, (1986)) 및 미국특허 제4,020,158호, 제4,167,564호, 제4,216,143호, 제4,721,644호, 제4,599,152호, 제4,774,089호, 제4,830,716호, 제4,863,898호, 제4,725,427호 등을 들 수 있다.The structure and chemical formula of the mineral amino acid complex and the related literature on bioavailability are very diverse, representatively, Ashmead et al., Chelated Mineral Nutrition, (1982), Chas. C. Thomas Publishers, Springfield, Ill. ), Ashmead et al., Intestinal Absorption of Metal Ions, (1985), Ashmead et al., Foliar Feeding of Plants with Amino Acid Chelates, (1986), and U.S. Patent No. 4,020,158 , 4,167,564, 4,216,143, 4,721,644, 4,599,152, 4,774,089, 4,830,716, 4,863,898, 4,725,427, and the like.

‘건강기능식품의 기준 및 규격’(식약처고시 제2019-10호)에 고시된 프로바이오틱스 유산균의 경우 ‘유산균 증식 및 유해균 억제·배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음’이라는 기능성 표시가 가능하고, 아연의 경우 '정상적인 면역 기능 필요함' 및 '정상적인 세포분열에 필요함'이라는 기능성 표시가 가능하다.In the case of probiotic lactobacilli announced in the 'Standards and Specifications of Health Functional Foods' (Ministry of Food and Drug Safety Notice No. 2019-10), the functional label 'can help proliferate lactic acid bacteria, suppress harmful bacteria, and facilitate bowel movements' is possible. In the case of zinc, functional labels such as 'required for normal immune function' and 'necessary for normal cell division' are possible.

미네랄은 프로바이오틱스 유산균의 생육에 필수적이지만 건강기능식품으로서 기능성을 나타내는 함량으로 과량 사용할 경우 오히려 프로바이오틱스 유산균의 생육을 저해할 수 있다는 문제가 있고, 현재까지 유산균 또는 미네랄 아미노산 복합체 단독 사용에 대한 생리활성을 검증한 예는 있으나, 아직까지 이들의 효과를 증진시키기 위한 방법에 대해서는 보고된 바 없다. Minerals are essential for the growth of probiotic lactic acid bacteria, but as a health functional food, there is a problem that when used in excess, the growth of probiotic lactic acid bacteria can be inhibited. There is one example, but a method for enhancing their effect has not been reported yet.

미국특허 제4,020,158호US Patent No. 4,020,158 미국특허 제4,167,564호U.S. Patent No. 4,167,564

Ashmead et al., Chelated Mineral Nutrition, (1982), Chas. C. Thomas Publishers, Springfield, Ill. Chas. C. Thomas Publishers, Springfield, Ill.Ashmead et al., Chelated Mineral Nutrition, (1982), Chas. C. Thomas Publishers, Springfield, Ill. Chas. C. Thomas Publishers, Springfield, Ill. Ashmead et al., Intestinal Absorption of Metal Ions, (1985)Ashmead et al., Intestinal Absorption of Metal Ions, (1985) Ashmead et al., Foliar Feeding of Plants with Amino Acid Chelates, (1986)Ashmead et al., Foliar Feeding of Plants with Amino Acid Chelates, (1986)

본 발명은 수용성 아미노산 미네랄 착화합물과 유산균을 면역 활성 증강용 조성물로 응용하여, 소장에서 미네랄의 능동흡수를 증강시켜, 인간 또는 인간을 제외한 동물의 면역력을 향상시키고, 생체 내 축적없이 장기간 복용하여 안정한 현저한 효과를 나타낼 수 있는 식품, 약학 또는 사료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.The present invention applies a water-soluble amino acid mineral complex and lactic acid bacteria as a composition for enhancing immune activity, enhances active absorption of minerals in the small intestine, improves immunity of humans or animals other than humans, and is stable by taking for a long time without accumulation in vivo An object of the present invention is to provide a food, pharmaceutical or feed composition that can exhibit an effect.

본 발명은, 프로바이오틱스 유산균; 및 분자식 C4H9NO7Zn이고, 하기 화학식 1의 아연 아스파르트산 수화물이며, 상기 아연 아스파르트산 수화물 1 g은 25 ℃의 물 1 내지 30 ml에 용해되는 수용해성을 가지고, 사방정계 결정인 아미노산 미네랄 복합체;를 유효성분으로 하는 면역 활성 증강용 식품 조성물에 관한 것이다.The present invention, probiotic lactic acid bacteria; and an amino acid having a molecular formula of C 4 H 9 NO 7 Zn, a zinc aspartic acid hydrate of Formula 1 below, wherein 1 g of the zinc aspartic acid hydrate has water solubility in 1 to 30 ml of water at 25° C. and is an orthorhombic crystal. It relates to a food composition for enhancing immune activity comprising a mineral complex as an active ingredient.

[화학식 1][Formula 1]

Figure 112019109072845-pat00001
Figure 112019109072845-pat00001

상기 프로바이오틱스 유산균은, 락토바실러스 애시도필러스(L.acidophilus), 락토바실러스 카제이(L.casei), 락토바실러스 가세리(L.gasseri), 락토바실러스 델브루키 서브스피시스 불가리쿠스(L.delbrueckii ssp. bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(L.helveticus), 락토바실러스 퍼멘툼(L.fermentum), 락토바실러스 파라카제이(L.paracasei), 락토바실러스 플란타룸(L.plantarum), 락토바실러스 루테리(L.reuteri), 락토바실러스 람노서스(L.rhamnosus) 및 락토바실러스 살리바리우스(L.salivarius) 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 락토바실러스속 유산균; 락토코커스 락티스(Lc. lactis); 엔테로코커스 페시움(E.faecium) 및 엔테로코커스 피칼리스(E.faecalis) 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 엔테로코커스속 유산균; 스트렙토코커스 써모필러스(S.thermophilus); 및 비피도박테리움 비피덤(B.bifidum), 비피도박테리움 브레베(B.breve), 비피도박테리움 롱검(B.longum) 및 비피도박테리움 애니말리스 서브스피시스 락티스(B.animalis spp. lactis) 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 비피도박테리움속 유산균;으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 유산균일 수 있다.The probiotic lactic acid bacteria, Lactobacillus acidophilus ( L.acidophilus ), Lactobacillus casei ( L.casei ), Lactobacillus gasseri ( L.gasseri ), Lactobacillus delbrooki subspisis bulgaricus ( L. delbrueckii ssp. bulgaricus ), Lactobacillus helveticus ( L.helveticus ), Lactobacillus fermentum ( L.fermentum ), Lactobacillus paracasei ( L.paracasei ), Lactobacillus plantarum ( L.plantarum ), Lactobacillus Bacillus reuteri ( L.reuteri ), Lactobacillus rhamnosus ( L.rhamnosus ) and Lactobacillus salivarius ( L.salivarius ) Any one or more Lactobacillus genus lactic acid bacteria selected from; Lactococcus lactis ( Lc. lactis ); Enterococcus faecium ( E. faecium ) and Enterococcus faecalis ( E. faecalis ) Any one or more Enterococcus genus lactic acid bacteria selected from; Streptococcus Thermo filler's (S.thermophilus); and Bifidobacterium bifidum ( B.bifidum ), Bifidobacterium breve ( B.breve ), Bifidobacterium longum ( B.longum ) and Bifidobacterium animalis subspicis lactis ( B. animalis spp. lactis ) any one or more lactic acid bacteria of the genus Bifidobacterium selected from; may be any one or more lactic acid bacteria selected from the group consisting of.

상기 면역 활성 증강용 식품 조성물은 유기태화 칼슘 및 유기태화 마그네슘을 추가로 포함할 수 있다.The food composition for enhancing immune activity may further include organic calcium passivation and organic magnesium passivation.

상기 면역 활성 증강용 조성물은 성장기 어린이용 건강기능식품일 수 있다.The composition for enhancing immune activity may be a health functional food for growing children.

본 발명은 프로바이오틱스 유산균 및 아미노산 미네랄 복합체를 유효성분으로 하는 식품 조성물에 관한 것으로, 프리바이오틱스와 같이 유산균의 생육을 억제하지 않고 오히려 생육 및 증식을 촉진하면서 생체 흡수율이 뛰어나고 식품의 풍미를 저해하지 않는 복합 식품 조성물로서, 면역 증강 활성이 뛰어나므로 성장기 어린이용 건강기능식품으로 활용될 수 있다. The present invention relates to a food composition containing probiotic lactic acid bacteria and an amino acid mineral complex as active ingredients, which does not inhibit the growth of lactic acid bacteria like prebiotics, but rather promotes growth and proliferation, has excellent bioabsorption rate, and does not impair the flavor of food. As a complex food composition, it has excellent immune enhancing activity, so it can be used as a health functional food for growing children.

이하 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명은, 프로바이오틱스 유산균; 및 분자식 C4H9NO7Zn이고, 하기 화학식 1의 아연 아스파르트산 수화물이며, 상기 아연 아스파르트산 수화물 1 g은 25 ℃의 물 1 내지 30 ml에 용해되는 수용해성을 가지고, 사방정계 결정인 아미노산 미네랄 복합체;를 유효성분으로 하는 면역 활성 증강용 식품 조성물에 관한 것이다.The present invention, probiotic lactic acid bacteria; and an amino acid having a molecular formula of C 4 H 9 NO 7 Zn, a zinc aspartic acid hydrate of Formula 1 below, wherein 1 g of the zinc aspartic acid hydrate has water solubility in 1 to 30 ml of water at 25° C. and is an orthorhombic crystal. It relates to a food composition for enhancing immune activity comprising a mineral complex as an active ingredient.

[화학식 1][Formula 1]

Figure 112019109072845-pat00002
Figure 112019109072845-pat00002

상기 면역 활성 증강용 식품 조성물은 프로바이오틱스 유산균의 생육을 저해하지 않고 오히려 생육 및 증식을 촉진하는 프리바이오틱 활성을 나타내는 상기 화학식 1의 아미노산 미네랄 복합체가 프로바이오틱스 유산균과 혼합되어 형성된 단일제제로, 미네랄을 소장에서 더욱 잘 흡수되도록 하며, 장내의 면역활성을 증진시키는 효과를 갖는다.The food composition for enhancing immune activity is a single formulation formed by mixing the amino acid-mineral complex of Formula 1 with the probiotic lactic acid bacteria, which does not inhibit the growth of probiotic lactic acid bacteria, but rather exhibits prebiotic activity that promotes growth and proliferation. It allows better absorption and has the effect of enhancing the immune activity in the intestine.

상기 면역 증강은 생체 내 면역시스템의 면역반응 또는 활성을 증가시키는 것을 의미하며, 노화, 임신, 면역억제치료 등으로 인한 면역기능 저하의 완화 또는 면역기능 저하로 기인되는 질환의 예방이나 개선에 효과가 있으며, 상기 면역기능 저하로 기인되는 질환으로는 감기 등의 바이러스 감영성 질환 및 염증성 질환, 만성피로 및 암으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.The immune enhancement means to increase the immune response or activity of the immune system in vivo, and is effective in alleviating the decrease in immune function due to aging, pregnancy, immunosuppressive treatment, etc. or in the prevention or improvement of diseases caused by decreased immune function. And, the disease caused by the decrease in immune function may be any one or more selected from virus-sensitive diseases such as colds and inflammatory diseases, chronic fatigue and cancer.

상기 면역 활성 증강용 식품 조성물에서 상기 화학식 1의 아미노산 미네랄 복합체는 아연의 1일 섭취량을 기준으로 3.6 내지 12 mg이 되도록 혼합할 수 있고, 상기 프로바이오틱스 유산균은 1일 섭취량을 기준으로 1 ×108 내지 1×1010이 되도록 혼합할 수 있다.In the food composition for enhancing immune activity, the amino acid and mineral complex of Formula 1 may be mixed to be 3.6 to 12 mg based on the daily intake of zinc, and the probiotic lactic acid bacteria is 1 × 10 8 to based on the daily intake. It can be mixed so that it becomes 1×10 10.

상기 면역 활성 증강용 식품 조성물은 유기태화 칼슘 및 유기태화 마그네슘을 추가로 포함할 수 있다. 유기태화 칼슘은 칼슘의 1일 섭취량을 기준으로 210 내지 800 mg이 되도록 혼합할 수 있고, 상기 유기태화 마그네슘은 마그네슘의 1일 섭취량을 기준으로 66 내지 250 mg이 되도록 혼합할 수 있다.The food composition for enhancing immune activity may further include organic calcium passivation and organic magnesium passivation. Organic passivation calcium may be mixed so as to be 210 to 800 mg based on the daily intake of calcium, and the organic passivation magnesium may be mixed to be 66 to 250 mg based on the daily intake of magnesium.

상기 면역 활성 증강용 식품 조성물은 성장기 어린이용 건강기능식품일 수 있다. 상기 성장기 어린이라 함은 만 3세부터 만 15세까지의 어린이를 의미한다.The food composition for enhancing immune activity may be a health functional food for growing children. The growing child means a child from 3 to 15 years of age.

상기 면역 활성 증강용 식품 조성물은 1일 1 내지 3회 섭취하도록 하는 것이 바람직하고, 1회 섭취 용량은 100 mg 내지 5 g, 바람직하게는 500 mg 내지 2 g일 수 있다.The food composition for enhancing immune activity is preferably to be ingested 1 to 3 times a day, and a single intake dose may be 100 mg to 5 g, preferably 500 mg to 2 g.

상기 프로바이오틱스 유산균은 기존에 숙주의 장내에서 서식하는 유익균 및 섭취되어 장에 도달하였을 때 장내 환경에 유익한 작용을 하는 균주를 의미한다. 이들은 위산과 담즙산에서 살아남아 도달하여 장에서 증식하고 정착하며, 장관 내에서 유용한 효과를 나타내고, 독성이 없으며 비병원성인 조건을 만족하는 균을 의미한다.The probiotic lactic acid bacteria means beneficial bacteria that live in the intestine of the host and a strain that has a beneficial effect on the intestinal environment when it is ingested and reaches the intestine. These are bacteria that survive and reach stomach acid and bile acid, multiply and settle in the intestine, exhibit useful effects in the intestinal tract, and satisfy the non-toxic and non-pathogenic conditions.

상기 프로바이오틱스 유산균은, 락토바실러스 애시도필러스(L.acidophilus), 락토바실러스 카제이(L.casei), 락토바실러스 가세리(L.gasseri), 락토바실러스 델브루키 서브스피시스 불가리쿠스(L.delbrueckii ssp. bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(L.helveticus), 락토바실러스 퍼멘툼(L.fermentum), 락토바실러스 파라카제이(L.paracasei), 락토바실러스 플란타룸(L.plantarum), 락토바실러스 루테리(L.reuteri), 락토바실러스 람노서스(L.rhamnosus) 및 락토바실러스 살리바리우스(L.salivarius) 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 락토바실러스속 유산균; 락토코커스 락티스(Lc. lactis); 엔테로코커스 페시움(E.faecium) 및 엔테로코커스 피칼리스(E.faecalis) 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 엔테로코커스속 유산균; 스트렙토코커스 써모필러스(S.thermophilus); 및 비피도박테리움 비피덤(B.bifidum), 비피도박테리움 브레베(B.breve), 비피도박테리움 롱검(B.longum) 및 비피도박테리움 애니말리스 서브스피시스 락티스(B.animalis spp. lactis) 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 비피도박테리움속 유산균;으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.The probiotic lactic acid bacteria, Lactobacillus acidophilus ( L.acidophilus ), Lactobacillus casei ( L.casei ), Lactobacillus gasseri ( L.gasseri ), Lactobacillus delbrooki subspisis bulgaricus ( L. delbrueckii ssp. bulgaricus ), Lactobacillus helveticus ( L.helveticus ), Lactobacillus fermentum ( L.fermentum ), Lactobacillus paracasei ( L.paracasei ), Lactobacillus plantarum ( L.plantarum ), Lactobacillus Bacillus reuteri ( L.reuteri ), Lactobacillus rhamnosus ( L.rhamnosus ) and Lactobacillus salivarius ( L.salivarius ) Any one or more Lactobacillus genus lactic acid bacteria selected from; Lactococcus lactis ( Lc. lactis ); Enterococcus faecium ( E. faecium ) and Enterococcus faecalis ( E. faecalis ) Any one or more Enterococcus genus lactic acid bacteria selected from; Streptococcus Thermo filler's (S.thermophilus); and Bifidobacterium bifidum ( B.bifidum ), Bifidobacterium breve ( B.breve ), Bifidobacterium longum ( B.longum ) and Bifidobacterium animalis subspicis lactis ( B. animalis spp. lactis ) any one or more lactic acid bacteria of the genus Bifidobacterium selected from; may be any one or more selected from the group consisting of.

상기 화학식 1의 아미노산 미네랄 복합체는 아스파르트산을 물에 넣고 교반하는 단계; 상기 교반하는 단계에서 얻은 아스파르트산 수용액에 아연 전구체와 아스파르트산이 1 : 0.8 내지 2.5 몰(mole)비가 되도록 상기 아연 전구체로 산화아연을 넣고 교반하면서 50 내지 100 ℃에서 10 분 내지 24 시간 가열하여 반응시키는 단계; 및 상기 반응시키는 단계 후 불용물을 제거하는 단계;를 포함하여 제조될 수 있다.The amino acid-mineral complex of Formula 1 is prepared by adding aspartic acid to water and stirring; Zinc oxide is added as the zinc precursor so that the zinc precursor and aspartic acid are in a ratio of 1:0.8 to 2.5 moles in the aqueous aspartic acid solution obtained in the stirring step, and heated at 50 to 100° C. for 10 minutes to 24 hours while stirring to react step; and removing insolubles after the reacting step.

상기 아연 전구체는 식품, 약품 또는 사료로서 사용될 수 있는 아연염 또는 아연산화물로서, 물에 불용성인 산화아연이 사용될 수 있고, 산화아연은 항바이러스 백신의 항체 생성율을 증대시키는 활성이 더욱 뛰어나다. 특히 종래 아연 아스파르트산 복합체의 제조에는 물에 잘 녹는 수용성 아연염을 사용하는 것이 당연시되었으나, 오히려 물에 불용성인 산화아연을 사용하면서 일정온도 및 시간 이상 가열할 경우 더욱 효과가 뛰어난 아연 아스파르트산 복합체가 형성됨을 확인하였다.The zinc precursor is a zinc salt or zinc oxide that can be used as a food, drug or feed, and zinc oxide that is insoluble in water may be used, and the zinc oxide has more excellent activity of increasing the antibody production rate of the antiviral vaccine. In particular, in the conventional production of zinc aspartic acid complexes, it was taken for granted to use water-soluble zinc salts that are well soluble in water. On the contrary, zinc aspartic acid complexes, which are more effective when heated over a certain temperature and time while using water-insoluble zinc oxide, are produced. formation was confirmed.

상기 아연 전구체 및 아스파르트산의 몰비는, 아연과 아스파르트산의 몰비를 의미하며, 1 : 0.8 내지 2.5 몰, 바람직하게는 1 : 1.5 내지 2.2 몰이 유리하다. 화학식 1의 아연 아스파르트산 수화물에서 아연과 아스파르트산의 이론적 몰비는 1:2이지만, 아연 전구체에 비해 아스파르트산을 과량으로 첨가할 때 불용성 산화아연이 줄어들면서 수용해성 아연 아스파르트산 수화물을 더 용이하게 형성할 수 있다.The molar ratio of the zinc precursor and aspartic acid means a molar ratio of zinc and aspartic acid, and is preferably 1:0.8 to 2.5 moles, preferably 1:1.5 to 2.2 moles. Although the theoretical molar ratio of zinc and aspartic acid in the zinc aspartic acid hydrate of Formula 1 is 1:2, when aspartic acid is added in excess compared to the zinc precursor, insoluble zinc oxide is reduced and water-soluble zinc aspartic acid hydrate is more easily formed. can do.

상기 반응시키는 단계는 50 내지 100 ℃에서 10 분 내지 24 시간, 특히 산화아연의 경우 80 내지 100 ℃에서 1 시간 이상, 바람직하게는 1.5 시간 가열하는 것이 바람직하다. 한편 산화아연은 3 시간 이내에 대부분 약 95%, 바람직하게는 99% 이상의 아스파르트산이 반응하므로, 3 시간을 초과하여 가열하더라도 불용물 또는 미반응물의 감소는 크지 않을 수 있다. 상기 반응시키는 단계에서 반응시간을 단축시키기 위해 초음파 처리가 이용될 수 있다. In the reacting step, it is preferable to heat at 50 to 100° C. for 10 minutes to 24 hours, particularly in the case of zinc oxide, at 80 to 100° C. for 1 hour or more, preferably for 1.5 hours. On the other hand, most of zinc oxide reacts with about 95%, preferably 99% or more of aspartic acid within 3 hours. In the reacting step, ultrasonic treatment may be used to shorten the reaction time.

상기 단계의 반응액에서 불용물을 제거하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 불용물을 제거하는 단계는 산화아연을 아연 전구체로 사용하는 경우 더욱 필요할 수 있다. It may further include the step of removing insolubles from the reaction solution of the above step. The step of removing the insoluble material may be more necessary when zinc oxide is used as a zinc precursor.

상기 제조방법은 종래 아연 아스파르트산 복합체의 제조방법과 달리 아연 전구체, 아스파르트산 및 물 이외에 별도의 첨가제를 필요로 하지 않고, 제조공정이 단순하여 공정 비용이 절감된다는 장점을 가진다.The manufacturing method does not require a separate additive other than the zinc precursor, aspartic acid and water, unlike the conventional manufacturing method of the zinc aspartic acid complex, and has the advantage of reducing the process cost because the manufacturing process is simple.

상기 아미노산 미네랄 복합체에 프로바이오틱스 유산균이 혼합되는데, 이때, 프로바이오틱스 유산균은 유산균 배양배지인 MRS에 30-40 ℃에서 12시간 증균배양한 것일 수 있다. Probiotic lactic acid bacteria are mixed in the amino acid mineral complex, and at this time, the probiotic lactic acid bacteria may be enriched in MRS, which is a lactic acid bacteria culture medium, at 30-40 ° C. for 12 hours.

본 발명의 면역 활성 증강용 식품 조성물은 프로바이오틱스 유산균 또는 아미노산 미네랄 복합체를 각각 단독으로 사용하는 것보다, 아미노산 미네랄 복합체와 유산균을 혼합하여 사용하는 것이 현저히 우수한 면역 활성을 가지며, 장내 유익균의 증식 활성이 보다 우수한 것을 확인할 수 있엇다.The food composition for enhancing immune activity of the present invention has significantly superior immune activity when mixed with an amino acid mineral complex and lactic acid bacteria, rather than using probiotic lactic acid bacteria or amino acid mineral complex alone, and the proliferative activity of beneficial intestinal bacteria is more I could confirm that it was excellent.

본 명세서에서 '유효성분으로 하는'이란 상기 프로바이오틱스 유산균 및 미네랄 아미노산 복합체의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. In the present specification, 'with an active ingredient' means including an amount sufficient to achieve the efficacy or activity of the probiotic lactic acid bacteria and the mineral amino acid complex.

본 발명에 따른 식품 조성물은 건강기능식품으로 이용하거나, 각종 일반 식품에 첨가할 수 있다. 상기 일반 식품으로는 예를 들어, 음료류, 알코올 음료류, 과자류, 다이어트바, 유제품, 육류, 초코렛, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류, 비타민 복합제, 건강보조식품류 등이 있다.The food composition according to the present invention may be used as a health functional food or added to various general foods. The general food includes, for example, beverages, alcoholic beverages, sweets, diet bars, dairy products, meat, chocolate, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, vitamin complexes, and health supplements.

본 발명의 식품 조성물은 유효성분으로서 프로바이오틱스 유산균 및 미네랄 아미노산 복합체 뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제와 음료류로 제조되는 경우에는 프로바이오틱스 유산균 및 미네랄 아미노산 복합체 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 및 각종 식물 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.The food composition of the present invention may include not only probiotic lactic acid bacteria and mineral amino acid complex as active ingredients, but also ingredients commonly added during food production, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients, seasonings and flavoring agents. includes Examples of the above-mentioned carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like; and polysaccharides, for example, conventional sugars such as dextrin, cyclodextrin, and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents, natural flavoring agents [taumatine, stevia extract (eg, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.)) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be used. For example, when the food composition of the present invention is prepared as a drink or beverage, citric acid, high fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, fruit juice, and various plant extracts may be additionally included in addition to the probiotic lactic acid bacteria and mineral amino acid complex. .

본 발명의 식품 조성물은 장내 유익균의 증식 및 장내 유해균의 생육 억제용으로 이용될 수 있다. 상기 장내 유익균은 기존에 숙주의 장내에서 서식하는 유익균 및 섭취되어 장에 도달하였을 때 장내 환경에 유익한 작용을 하는 균주를 의미한다. 장내 유해균은 기존에 숙주의 장내에서 서식하는 유해균 및 섭취되어 장에 도달하였을 때 장내 환경에 유해한 작용을 하는 균주를 의미한다.The food composition of the present invention can be used for the growth of beneficial intestinal bacteria and inhibition of the growth of intestinal harmful bacteria. The beneficial bacteria in the intestine means a strain that has a beneficial effect on the intestinal environment when it is ingested and reaches the intestine and previously inhabited in the intestine of the host. Intestinal harmful bacteria refer to harmful bacteria existing in the intestine of the host and strains that have a detrimental effect on the intestinal environment when ingested and reach the intestine.

상기 장내 유익균은 비피도박테리움 속, 류코노스톡 속, 페디오코쿠스 속, 웨이셀라 속, 스트렙토코커스 속, 락토바실러스 속 및 이들의 조합으로부터 선택된 적어도 하나의 균주일 수 있다.The intestinal beneficial bacteria may be at least one strain selected from the genus Bifidobacterium, the genus Leukonostok, the genus Pediococcus, the genus Weissella, the genus Streptococcus, the genus Lactobacillus, and combinations thereof.

상기 장내 유해균은 클로스트리디움 속, 유박테리움 속, 박테로이드 속, 대장균 속, 바실러스 속, 살모넬라 속 및 이들의 조합으로부터 선택된 적어도 하나의 균주일 수 있다. 보다 바람직하게는 상기 클로스트리디움 속 균주는 클로스트리디움 디피실리, 클로스트리디움 퍼프린젠스 및 이들의 조합으로부터 선택된 적어도 하나이고,The intestinal harmful bacteria may be at least one strain selected from Clostridium genus, Eubacterium genus, Bacteroid genus, Escherichia coli genus, Bacillus genus, Salmonella genus, and combinations thereof. More preferably, the Clostridium sp. strain is at least one selected from Clostridium difficile, Clostridium perfringens, and combinations thereof,

이하 실시예 등을 통해 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 하며, 다만 이하에 실시예 등에 의해 본 발명의 범위와 내용이 축소되거나 제한되어 해석될 수 없다. 또한, 이하의 실시예를 포함한 본 발명의 개시 내용에 기초한다면, 구체적으로 실험 결과가 제시되지 않은 본 발명을 통상의 기술자가 용이하게 실시할 수 있음은 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연하다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples, etc., but the scope and contents of the present invention cannot be construed as being reduced or limited by the examples below. In addition, based on the disclosure of the present invention including the following examples, it is clear that a person skilled in the art can easily practice the present invention for which no specific experimental results are presented, and such modifications and modifications are included in the attached patent. It goes without saying that they fall within the scope of the claims.

제조예 1: 아연 아스파르트산 복합체의 제조Preparation Example 1: Preparation of Zinc Aspartic Acid Complex

아스파르트산 57.5 g을 500 ㎖의 물에 넣고 교반하면서, 여기에 산화아연(아연 81 중량%)을 17.5 g 넣어 교반시키면서 90 ℃의 온도로 120 분 이상 충분히 반응시킨 후 반응액을 0.2 ㎛ 여과지로 여과하고, 여과액을 65 ℃에서 3 시간 80%까지 농축한 후, 진공건조하여 수용성 아연 아스파르트산 복합체를 얻었다.57.5 g of aspartic acid was placed in 500 ml of water and stirred while 17.5 g of zinc oxide (81 wt% of zinc) was added thereto and reacted sufficiently at a temperature of 90° C. for at least 120 minutes while stirring, and then the reaction solution was filtered with a 0.2 μm filter paper. Then, the filtrate was concentrated to 80% at 65° C. for 3 hours, and then vacuum dried to obtain a water-soluble zinc aspartic acid complex.

실험예 1: 제조예 1의 아연 아스파르트산 복합체 구조 확인Experimental Example 1: Confirmation of the structure of the zinc aspartic acid complex of Preparation Example 1

Bruker SMART APEX II X-ray Crystallograph(XRC) 및 Bruker SHELXTL Structure Analysis Program을 이용하여 제조예 1의 아연 아스파르트산 복합체의 구조 확인하였다.The structure of the zinc aspartic acid complex of Preparation Example 1 was confirmed using Bruker SMART APEX II X-ray Crystallograph (XRC) and Bruker SHELXTL Structure Analysis Program.

결정학적 데이터crystallographic data

분자식 C4H9NO7ZnMolecular formula C 4 H 9 NO 7 Zn

분자량 248.49Molecular weight 248.49

결정계 사방정계crystalline orthorhombic

스페이스그룹 P2(1)2(1)2(1)Space group P2(1)2(1)2(1)

Z 4Z 4

단위 셀 디멘전 a=7.8012(15)Å α=90°Unit cell dimension a=7.8012(15)Å α=90°

b=9.3435(17)Å β=90°b=9.3435(17)Å β=90°

c=11.576(2)Å γ=90°c=11.576(2)Å γ=90°

부피 843.8(3) / Å 3 Volume 843.8(3) / Å 3

계산된 밀도 1.956Mg/m3 Calculated Density 1.956 Mg/m 3

온도 296(1)KTemperature 296(1)K

절대적 구조 파라미터 0.00Absolute structural parameter 0.00

결정 크기 0.18 x 0.12 x 0.08 mm3 Crystal size 0.18 x 0.12 x 0.08 mm 3

F(000) 504F(000) 504

흡수 계수 2.920 mm-1 Absorption coefficient 2.920 mm -1

또한 상기 제조예 1의 아연 아스파르트산 복합체의 원자 좌표들(x104), 등가 등방성 변위(equivalent isotropic displacement) 파라미터들(Å2x103), 결합 길이(Å), 각도(°), 비등방성 변위 파라미터들(Å2x103), 수소 좌표들(x104), 등가 등방성 변위(equivalent isotropic displacement) 파라미터들(Å2x103), 뒤틀림 각도(torsion angles)(°)를 확인하여 분자식 C4H9NO7Zn이고, 하기 화학식 1의 아연 아스파르트산 수화물임을 확인하였다. In addition, the atomic coordinates (x10 4 ) of the zinc aspartic acid complex of Preparation Example 1, equivalent isotropic displacement parameters (Å 2 x10 3 ), bond length (Å), angle (°), anisotropic displacement Molecular formula C 4 H by checking the parameters (Å 2 x10 3 ), hydrogen coordinates (x10 4 ), equivalent isotropic displacement parameters (Å 2 x10 3 ), and torsion angles (°) 9 NO 7 Zn, and zinc aspartic acid hydrate represented by the following formula (1) was confirmed.

[화학식 1][Formula 1]

Figure 112019109072845-pat00003
Figure 112019109072845-pat00003

실시예 1: 아연 아스파르트산 복합체, 유기태화 칼슘, 유기태화 마그네슘, 비피도박테리움 비피덤 및 락토바실러스 루테리의 면역 활성 증강용 조성물 제조Example 1: Preparation of a composition for enhancing immune activity of zinc aspartic acid complex, organic passivating calcium, organic passivating magnesium, Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus reuteri

제조예 1의 아연 아스파르트산 복합체는 아연을 기준으로 6 mg/g이 되도록 혼합하고, (주)비티엔에서 제조한 유기태화 칼슘(칼슘 아스파르트산 복합체)을 칼슘을 기준으로 400 mg/g이 되도록 혼합하며, 유기태화 마그네슘(마그네슘 아스파르트산 복합체)을 마그네슘을 기준으로 100 mg/g이 되도록 혼합하고, 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) 균 및 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균을 각각 유산균 배양배지인 MRS에 37 ℃에서 12시간 증균배양한 후 각각 1 ×109 CFU/g이 되도록 혼합하여 실시예 1의 면역 활성 증강용 식품 조성물을 제조하였다.The zinc-aspartic acid complex of Preparation Example 1 was mixed so as to be 6 mg/g based on zinc, and organic passivating calcium (calcium aspartic acid complex) prepared by BTN was mixed so as to be 400 mg/g based on calcium. and organic passivating magnesium (magnesium aspartic acid complex) is mixed so as to be 100 mg/g based on magnesium, and Bifidobacterium bifidum bacteria and Lactobacillus reuteri bacteria are each in a lactic acid culture medium After 12 hours of enrichment culture in MRS at 37 ℃, each mixed to 1 × 10 9 CFU / g to prepare the food composition for enhancing immune activity of Example 1.

실시예 2: 아연 아스파르트산 복합체, 비피도박테리움 비피덤 및 락토바실러스 루테리를 혼합한 면역 활성 증강용 조성물 제조Example 2: Preparation of a composition for enhancing immune activity by mixing zinc aspartic acid complex, Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus reuteri

제조예 1의 아연 아스파르트산 복합체는 아연을 기준으로 6 mg/g이 되도록 혼합하고, 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) 균 및 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균을 각각 유산균 배양배지인 MRS에 37 ℃에서 12시간 증균배양한 후 각각 1 ×109 CFU/g이 되도록 혼합하여 실시예 2의 면역 활성 증강용 식품 조성물을 제조하였다.The zinc aspartic acid complex of Preparation Example 1 was mixed so as to be 6 mg/g based on zinc, and Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus reuteri bacteria were respectively added to MRS, which is a lactic acid bacteria culture medium. After 12 hours of enrichment culture at 37 ° C., each was mixed to 1 × 10 9 CFU/g to prepare the food composition for enhancing immune activity of Example 2.

실시예 3: 아연 아스파르트산 복합체 및 락토바실러스 루테리를 혼합한 면역 활성 증강용 조성물 제조Example 3: Preparation of a composition for enhancing immune activity by mixing zinc aspartic acid complex and Lactobacillus reuteri

제조예 1의 아연 아스파르트산 복합체는 아연을 기준으로 6 mg/g이 되도록 혼합하고, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균을 유산균 배양배지인 MRS에 37 ℃에서 12시간 증균배양한 후 1 ×109 CFU/g이 되도록 혼합하여 실시예 3의 면역 활성 증강용 식품 조성물을 제조하였다.The zinc aspartic acid complex of Preparation Example 1 was mixed so as to be 6 mg/g based on zinc, and Lactobacillus reuteri was enriched in MRS, a lactic acid bacteria culture medium, for 12 hours at 37 ° C., and then 1 × 10 9 The food composition for enhancing immune activity of Example 3 was prepared by mixing to CFU/g.

비교예 1: 무기태 아연, 칼슘 및 마그네슘, 비피도박테리움 비피덤 및 락토바실러스 루테리를 혼합한 면역 활성 증강용 조성물 제조Comparative Example 1: Preparation of a composition for enhancing immune activity by mixing inorganic zinc, calcium and magnesium, Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus reuteri

실시예 1에서 사용한 제조예 1의 아연 아스파르트산 복합체, (주)비티엔에서 제조한 유기태화 칼슘(칼슘 아스파르트산 복합체) 및 유기태화 마그네슘(마그네슘 아스파르트산 복합체) 대신에 각각 산화아연, 젖산칼슘 및 황산마그네슘을 사용하고, 그 사용량은 각각 아연, 칼슘 및 마그네슘을 기준으로 각각 6 mg/g, 400 mg/g 및 100 mg/g이 되도록 혼합하고, 비피도박테리움 비피덤 및 락토바실러스 루테리는 실시예 1과 동일하게 혼합하여 비교예 1의 식품 조성물을 제조하였다.Zinc oxide, calcium lactate and sulfuric acid, respectively, instead of the zinc aspartic acid complex of Preparation Example 1 used in Example 1, organic calcium passivation (calcium aspartic acid complex) and organic magnesium passivation (magnesium aspartic acid complex) prepared by Vitien Co., Ltd. Magnesium is used, and the amount used is mixed to be 6 mg/g, 400 mg/g and 100 mg/g, respectively, based on zinc, calcium and magnesium, respectively, and Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus reuteri are Examples The food composition of Comparative Example 1 was prepared by mixing in the same manner as in 1.

비교예 2: 무기태 아연 및 락토바실러스 루테리를 혼합한 면역 활성 증강용 조성물 제조Comparative Example 2: Preparation of a composition for enhancing immune activity in which inorganic zinc and Lactobacillus reuteri were mixed

실시예 3에서 사용한 제조예 1의 아연 아스파르트산 복합체 대신에 각각 산화아연을 사용하고, 그 사용량은 각각 아연을 기준으로 6 mg/g이 되도록 혼합하고, 락토바실러스 루테리는 실시예 3과 동일하게 혼합하여 비교예 2의 식품 조성물을 제조하였다.Zinc oxide was used instead of the zinc aspartic acid complex of Preparation Example 1 used in Example 3, and the amount was mixed to be 6 mg/g based on zinc, and Lactobacillus reuteri was mixed in the same manner as in Example 3 To prepare a food composition of Comparative Example 2.

실험예 1: 산화질소 생성량 측정Experimental Example 1: Measurement of nitric oxide production

실시예 1 내지 3 및 비교예 1 및 2의 면역 증강 효과를 확인하기 위하여 산화질소 생성능을 확인하였다.In order to confirm the immune enhancing effect of Examples 1 to 3 and Comparative Examples 1 and 2, the ability to produce nitric oxide was confirmed.

실시예 1 내지 3 및 비교예 1 및 2의 식품 조성물을 50 ppm의 농도로 하여 50 ng/ml IFN-γ로 priming 된 Raw 264.7 cell에서의 NO 생성능을 확인하였다. 대조구는 LPS 1μg/ml에 의한 NO 생성능과 비교하였다. 상기 RAW 264.7 세포는 한국세포주은행으로부터 분양받았으며, 10% FBS, 1% Anti-anti를 포함한 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM)을 배양액으로 사용하여 5% CO2, 30℃ incubator에서 배양하였다.Examples 1 to 3 and Comparative Examples 1 and 2 at a concentration of 50 ppm to confirm the NO production ability in Raw 264.7 cells primed with 50 ng / ml IFN-γ. Control was compared with the NO production ability by LPS 1μg / ml. The RAW 264.7 cells were purchased from the Korea Cell Line Bank, and were cultured in an incubator at 30°C in 5% CO2 using Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) containing 10% FBS and 1% anti-anti as a culture medium.

배양액에서의 산화질소 생성은 산화질소의 산화물인 아질산의 측정을 통해 평가하였다. Griess 분석 방법을 이용하였으며 Raw 264.7 cell 세포를 96 well plate에 2 x 105 cells/mL 농도로 분주하고 24 시간 배양한 뒤, Raw 264.7 cell에 500 μg/mL으로 제조해 놓은 상기 표 1의 균체 시료를 각각 50 μg/mL 농도로 처리한 다음, 20 시간 배양하였다. 배양 후 상등액 100 μL를 새로운 96-well plate에 옮긴 후 griess reagent (SigmaAldrich Co.)와 1:1로 혼합하여 넣고 shaker에서 10분 동안 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 540 nm 에서 흡광도를 측정하였다. standard curve는 sodium nitrite를 이용하여 측정하여 그 결과를 표 1에 나타내었다.Nitric oxide production in the culture medium was evaluated by measuring nitrous acid, which is an oxide of nitric oxide. Griess analysis method was used, and Raw 264.7 cell cells were aliquoted in a 96 well plate at a concentration of 2 x 10 5 cells/mL and cultured for 24 hours. were each treated at a concentration of 50 μg/mL, and then incubated for 20 hours. After incubation, 100 μL of the supernatant was transferred to a new 96-well plate, mixed with griess reagent (SigmaAldrich Co.) 1:1, and reacted on a shaker for 10 minutes, and then absorbance was measured at 540 nm using a microplate reader. The standard curve was measured using sodium nitrite and the results are shown in Table 1.

구분division 대조군
(LPS)
control
(LPS)
실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2
산화질소(%)Nitric oxide (%) 100100 142.7%142.7% 136.4%136.4% 130.8%130.8% 63.5%63.5% 52.3%52.3%

양성대조군인 LPS에 의한 산화질소 생성량을 기준으로 실시예 1, 실시예 2 및 실시예 3의 순서로 산화질소 생성량이 대조군에 비해 현저히 증가하였고, 이와는 달리 비교예 1 및 2에서는 산화질소의 생성량이 오히려 감소하였다.Based on the amount of nitrogen oxide produced by LPS, which is a positive control group, the amount of nitrogen oxide produced was significantly increased compared to the control in the order of Examples 1, 2, and 3, whereas in Comparative Examples 1 and 2, the amount of nitrogen oxide produced was rather decreased.

실험예 2: 장내 유익균의 생육 활성에 미치는 영향 확인Experimental Example 2: Confirmation of effect on growth activity of beneficial intestinal bacteria

본 발명의 조성물이 장내 유익균 중 비피도박테리움 롱검, 락토바실러스 에스피 및 락토바실러스 아시도필러스 균주의 생육 활성에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다. 장내 유익균의 생육 활성에 미치는 영향에 대한 실험은 3번 반복하여 실시하였고, 실험결과는 물로 처리한 대조군에 대해 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 및 2를 처리한 실험군의 O.D. 값에 대한 비로 나타내었다.In order to examine the effect of the composition of the present invention on the growth activity of Bifidobacterium longum, Lactobacillus sp and Lactobacillus acidophilus strains among beneficial intestinal bacteria, the following experiment was performed. The experiment on the effect on the growth activity of beneficial intestinal bacteria was repeated three times, and the experimental results showed that the O.D. It is expressed as a ratio to the value.

1) 장내 세균 준비1) Preparation of intestinal bacteria

장내 유익균의 지표로 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum ATCC 15707), 락토바실러스 에스피(Lactobacillus sp. KCTC 3930), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus ATCC 4356)를 사용하였다. 균주들은 Reinforced Clostridial Media(RCM, Difco, USA) 배지에서 37℃ BBL GasPak(Becton Dickinson and Company, USA)에 넣은 혐기적 조건으로 배양하여 사용하였다. Bifidobacterium longum ATCC 15707, Lactobacillus sp. KCTC 3930, and Lactobacillus acidophilus ATCC 4356) were used as indicators of beneficial intestinal bacteria. The strains were cultured in Reinforced Clostridial Media (RCM, Difco, USA) medium at 37° C. in BBL GasPak (Becton Dickinson and Company, USA) under anaerobic conditions and used.

2) 아가 분산법(Agar diffusion method)에 의한 생육 활성 실험2) Growth activity experiment by agar diffusion method

EG 한천배지를 멸균한 후 50 ℃로 식히고 3 종의 균주가 각각 2~3% 포함 되도록 군주를 접종한 플레이트 3개를 만든 후, 상온에서 배지를 굳혔다. 직경 6 mm 디스크 페이퍼(Whatman paper No.41)에 실시예 1-1, 1-2, 1-3, 1-4의 조성물을 각각 0.1 ㎎ 적하한 후, 이를 굳힌 배지위에 일정 간격을 두고 배치하였다. 상기 배지를 혐기적 조건으로 37℃에서 48시간 배양한 다음 생육 활성환의 크기를 관찰하였다. After sterilizing the EG agar medium, cool it to 50 ℃, make 3 plates inoculated with the monarch so that each of the 3 strains contains 2-3%, and then harden the medium at room temperature. After 0.1 mg of each of the compositions of Examples 1-1, 1-2, 1-3, and 1-4 were dripped onto a 6 mm diameter disk paper (Whatman paper No. 41), it was placed at regular intervals on the hardened medium. . The medium was incubated for 48 hours at 37° C. under anaerobic conditions, and then the size of the growth active ring was observed.

균주strain 실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 비피도박테리움 롱검Bifidobacterium longum ++++++ ++++++ ++++ -- -- 락토바실러스 에스피Lactobacillus sp. ++++ ++++++ ++++ ++ ++ 락토바실러스 아시도필러스Lactobacillus acidophilus ++++ ++++ ++++ ++ --

그 결과, 표 2에 나타난 바와 같이, 실시예 1, 2, 및 3을 처리한 고체 배지에서 비피도박테리움 롱검 균주는 ++ 내지 +++ 정도의 생육 활성환을 나타내었으나, 비교예 1 및 2에서는 - 정도의 생육 활성환을 나타내었다.As a result, as shown in Table 2, the Bifidobacterium longum strain in the solid medium treated with Examples 1, 2, and 3 showed a growth activity of about ++ to +++, but Comparative Example 1 and In 2, growth activity of - degree was shown.

실시예 1, 2 및 3을 처리한 락토바실러스 에스피 균주는 ++ 내지 +++ 정도의 생육 활성환을 나타내었으나, 비교예 1 및 2에서는 + 정도의 생육 활성환을 나타내었다.The Lactobacillus sp. strains treated with Examples 1, 2 and 3 showed a growth activity of about ++ to +++, but Comparative Examples 1 and 2 showed a growth activity of about +.

실시예 1, 2 및 3을 처리한 락토바실러스 아시도필러스 균주는 ++ 정도의 생육 활성환을 나타내었으나, 비교예 1 및 2에서는 - 내지 + 정도의 생육 활성환을 나타내었다.The Lactobacillus acidophilus strains treated with Examples 1, 2 and 3 showed a growth activity of about ++, but Comparative Examples 1 and 2 showed a growth activity of about - to +.

종합적으로 보면 본 발명의 면역 활성 증강용 조성물이 장내 유익균에 대하여 높은 생육 활성 효능을 갖는 것을 확인하였다.Overall, it was confirmed that the composition for enhancing immune activity of the present invention has a high growth activity against beneficial intestinal bacteria.

Claims (4)

프로바이오틱스 유산균; 및
분자식 C4H9NO7Zn이고, 하기 화학식 1의 아연 아스파르트산 수화물이며, 상기 아연 아스파르트산 수화물 1 g은 25 ℃의 물 1 내지 30 ml에 용해되는 수용해성을 가지고, 사방정계 결정인 아미노산 미네랄 복합체;
를 유효성분으로 하는 면역 활성 증강용 식품 조성물:
[화학식 1]
Figure 112019109072845-pat00004
.
probiotic lactic acid bacteria; and
An amino acid mineral having a molecular formula C 4 H 9 NO 7 Zn, zinc aspartic acid hydrate represented by the following formula 1, wherein 1 g of zinc aspartic acid hydrate is soluble in 1 to 30 ml of water at 25° C. and is orthorhombic crystals complex;
A food composition for enhancing immune activity comprising as an active ingredient:
[Formula 1]
Figure 112019109072845-pat00004
.
제1항에 있어서,
상기 프로바이오틱스 유산균은,
락토바실러스 애시도필러스(L.acidophilus), 락토바실러스 카제이(L.casei), 락토바실러스 가세리(L.gasseri), 락토바실러스 델브루키 서브스피시스 불가리쿠스(L.delbrueckii ssp. bulgaricus), 락토바실러스 헬베티쿠스(L.helveticus), 락토바실러스 퍼멘툼(L.fermentum), 락토바실러스 파라카제이(L.paracasei), 락토바실러스 플란타룸(L.plantarum), 락토바실러스 루테리(L.reuteri), 락토바실러스 람노서스(L.rhamnosus) 및 락토바실러스 살리바리우스(L.salivarius) 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 락토바실러스속 유산균;
락토코커스 락티스(Lc. lactis);
엔테로코커스 페시움(E.faecium) 및 엔테로코커스 피칼리스(E.faecalis) 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 엔테로코커스속 유산균;
스트렙토코커스 써모필러스(S.thermophilus); 및
비피도박테리움 비피덤(B.bifidum), 비피도박테리움 브레베(B.breve), 비피도박테리움 롱검(B.longum) 및 비피도박테리움 애니말리스 서브스피시스 락티스(B.animalis spp. lactis) 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 비피도박테리움속 유산균;으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 유산균인 것을 특징으로 하는 면역 활성 증강용 식품 조성물.
According to claim 1,
The probiotic lactic acid bacteria,
Lactobacillus acidophilus ( L.acidophilus ), Lactobacillus casei ( L.casei ), Lactobacillus gasseri ( L.gasseri ), Lactobacillus delbrooki subspica bulgaricus ( L.delbrueckii ssp. bulgaricus ) , Lactobacillus helveticus ( L.helveticus ), Lactobacillus fermentum ( L.fermentum ), Lactobacillus paracasei ( L.paracasei ), Lactobacillus plantarum ( L.plantarum ), Lactobacillus reuteri ( L. reuteri ), Lactobacillus rhamnosus ( L.rhamnosus ) and Lactobacillus salivarius ( L.salivarius ) Any one or more Lactobacillus genus lactic acid bacteria selected from;
Lactococcus lactis ( Lc. lactis );
Enterococcus faecium ( E. faecium ) and Enterococcus faecalis ( E. faecalis ) Any one or more Enterococcus genus lactic acid bacteria selected from;
Streptococcus Thermo filler's (S.thermophilus); and
Bifidobacterium Bifidobacterium bonus (B.bifidum), Bifidobacterium breve (B.breve), Bifidobacterium ronggeom (B.longum) and Bifidobacterium lactis Annie Marlies sub-speaker system (B.animalis spp. lactis ) Any one or more lactic acid bacteria of the genus Bifidobacterium selected from; Food composition for enhancing immune activity, characterized in that it is any one or more lactic acid bacteria selected from the group consisting of.
제1항에 있어서,
상기 면역 활성 증강용 식품 조성물은 유기태화 칼슘 및 유기태화 마그네슘을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 면역 활성 증강용 식품 조성물.
According to claim 1,
The food composition for enhancing immune activity is a food composition for enhancing immune activity, characterized in that it further comprises organic passivating calcium and organic passivating magnesium.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 활성 증강용 조성물은 성장기 어린이용 건강기능식품인 것을 특징으로 하는 면역 활성 증강용 식품 조성물.The food composition for enhancing immune activity according to any one of claims 1 to 3, wherein the composition for enhancing immune activity is a health functional food for growing children.
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