KR102176394B1 - A composition for immune enhancement comprising taheebo extract - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a composition for enhancing immunity, comprising a taheebo extract and Illicium verum as an active ingredient.

Description

타히보 추출물을 유효성분으로 함유하는 면역 증진용 조성물{A COMPOSITION FOR IMMUNE ENHANCEMENT COMPRISING TAHEEBO EXTRACT}A composition for enhancing immunity containing tahibo extract as an active ingredient {A COMPOSITION FOR IMMUNE ENHANCEMENT COMPRISING TAHEEBO EXTRACT}

본 발명은 타히보 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역 증진용 조성물에 관한 것으로, 의약품 및 식품 등 다양한 용도로서 활용 가능하다.The present invention relates to a composition for enhancing immunity comprising a tahibo extract as an active ingredient, and can be used for various purposes such as pharmaceuticals and foods.

모든 생물체는 생명을 영위하기 위해 끊임없이 많은 영양소를 필요로 하며, 영양소는 식품의 형태로 항상 외부로부터 공급되거나 일부는 체내에서 합성된다.All living organisms constantly need a lot of nutrients in order to live life, and nutrients are always supplied from the outside in the form of food or some are synthesized in the body.

음식물 속에는 인간의 생명현상을 유지하는데 필요한 물질들이 포함되어 있으며, 인간은 음식물을 섭취하여 소화기관에서 소화시키고 흡수하여 체내의 조직세포에 공급함으로써 생명을 유지할 수 있다.Food contains substances necessary to maintain human life phenomena, and humans can sustain life by ingesting food, digesting it in the digestive system, absorbing it, and supplying it to tissue cells in the body.

최근 생활 수준이 높아지고 식생활이 서구화되면서 영양과잉, 운동부족 등으로 인한 비만, 당뇨, 고혈압 및 심장병 등과 같은 성인병 발병률이 증가하고 있다. 또한 평균수명 연장으로 인하여 인구가 점차 노령화되면서 건강에 대한 관심이 점차 높아지고 있다.Recently, as the standard of living has increased and the diet has become westernized, the incidence of adult diseases such as obesity, diabetes, high blood pressure and heart disease due to overnutrition and lack of exercise is increasing. In addition, as the population gradually ages due to the extended life expectancy, interest in health is gradually increasing.

건강증진(health promotion)은 질병, 특히 만성 퇴행성질환이나 감염증, 계속되는 스트레스에 대한 저항력의 증가, 일상의 활동력의 증대를 꾀하는 것으로 이를 위해 영양의 개선, 면역기능 강화, 적절한 운동과 휴식, 정신적 활동의 지속 등 생활양식 전반에 미치는 관리가 요구된다.Health promotion is aimed at increasing resistance to diseases, especially chronic degenerative diseases or infections, and continuing stress, and increasing daily activity. To this end, improving nutrition, strengthening immune function, proper exercise and rest, and mental activity. Management that affects the overall lifestyle such as continuity is required.

면역은 체내에 존재하는 자기방어체계로서 인체가 외부에서 침입하는 각종 물질이나 생명체를 자기 자신에 대한 이물질로 인식하여 제거하고 대사시키는 과정이다.Immune is a self-defense system that exists in the body and is a process by which the human body recognizes, removes, and metabolizes various substances or living organisms that invade from the outside as foreign substances to itself.

생체는 다양한 외부인자(병원성 미생물 등)로부터 방어작용을 하는데 이를 면역계라고 한다. 인체의 면역계는 감염에 대한 신체방어기전으로서, 태어날 때부터 가지고 있는 선천면역(innate immunity)과 생활 등에 적응되어 얻어지는 후천면역(acquired immunity)의 두 가지 메커니즘으로 구성되어 있다. The living body acts as a defense against various external factors (pathogenic microorganisms, etc.), which is called the immune system. The body's immune system is a body defense mechanism against infection, and is composed of two mechanisms: innate immunity that has been born since birth and acquired immunity that is obtained through adaptation to life.

후천면역은 B 림프구, T 림프구의 면역세포로 구성되어 외부 항원(antigen)에 대하여 특이적으로 작용하여 면역반응을 나타내며, 면역 기억작용을 통하여 활성화된다. Acquired immunity is composed of immune cells of B lymphocytes and T lymphocytes, acting specifically against foreign antigens, exhibiting an immune response, and is activated through immune memory.

선천면역은 일명 자연면역이라고도 하는 것으로, 후천면역과 달리 항원에 비특이적인 면역반응을 의미한다.Innate immunity is also called natural immunity, and unlike acquired immunity, it means a non-specific immune response to an antigen.

선천면역은 감염 후 수 시간 내에 유도되어 작동하는 숙주의 가장 신속한 대응책으로, 선천면역계의 수용체들은 넓은 범위의 바이러스성 감염을 인지하고 사이토카인(cytokine)과 케모카인(chemokine) 등의 체액성 인자(humoral factor)를 발현시키는 유전자를 활성화시킨다. Innate immunity is the fastest response of a host that is induced and operates within a few hours after infection. Receptors in the innate immune system recognize a wide range of viral infections and humoral factors such as cytokines and chemokines. factor).

바이러스 감염에 대한 선천면역 핵심반응은 인터페론(Interferon)의 발현이 유도되는 것으로, 바이러스성 감염에서 가장 중요한 사이토카인으로 여겨지는 인터페론은 뛰어난 항바이러스 활성을 갖는 것으로 알려져 있다.The key innate immune response to viral infection is that the expression of interferon is induced, and interferon, which is considered the most important cytokine in viral infection, is known to have excellent antiviral activity.

따라서 면역 기능의 증진은 인체에 대한 면역 기능 조절뿐만 아니라 인체 내 바이러스의 증식이나 감염과 매우 밀접하게 연관될 수 있다.Therefore, the enhancement of immune function can be very closely related to the proliferation or infection of viruses in the human body as well as the regulation of immune function in the human body.

면역 기능에 영향을 미치는 요인에는 유전적, 환경적 요인, 나이, 성별, 심리적 스트레스, 영양상태, 식이습관, 질병 등이 있다.Factors affecting immune function include genetic and environmental factors, age, sex, psychological stress, nutritional status, dietary habits, and disease.

면역 기능의 조절 기능을 갖는 건강기능식품은 현재까지, 저하된 면역기능을 증진 시키는 기능성과 과도한 면역기능을 조절하는 기능성, 자기 성분에 대한 면역반응을 조절하는 자가면역기능 조절 기능성으로 구분된다.Health functional foods with the function of regulating immune function are classified into the function of enhancing the reduced immune function, the function of controlling the excessive immune function, and the function of regulating the autoimmune function that regulates the immune response to magnetic components.

면역기능이 저하되면 과민반응을 일으키는 경우가 있는데 이러한 과민반응은 천식, 계절성 또는 동년성 비염, 알러지성 부비강염, 결막염, 식품과 약품에 의한 알러지, 아토피성 피부염, 두드러기, 벌침에 의한 알러지 등과 같이 다양하게 나타난다.When the immune function is lowered, hypersensitivity reactions may occur.These hypersensitivity reactions vary, such as asthma, seasonal or homogenous rhinitis, allergic sinusitis, conjunctivitis, food and drug allergies, atopic dermatitis, urticaria, allergies caused by bee stings, etc. Appears to be.

여러 원인으로 인한 면역기능 장애를 극복하기 위하여, 다양한 면역 증강제가 사용되고 있으나, 부작용 및 생체 안전성의 문제가 있으므로 장기 복용이 가능하고 예방용으로도 적합한 면역 증진 조성물이 요구되는 실정이다.In order to overcome immune function disorders due to various causes, various immunity enhancers are used, but there is a problem of side effects and biosafety, so long-term use is possible and an immunity enhancing composition suitable for prevention is required.

이러한 상황하에서, 최근 해외 및 국내에서 기존의 항바이러스 제제의 단점을 극복하고자 많은 노력들이 이루어지고 있으며, 그 노력의 일환으로 국내에서는 생약 추출물 및 식물 추출물을 대상으로 항바이러스 효능에 대한 연구가 활발하게 진행되고 있다.Under these circumstances, many efforts have been made to overcome the shortcomings of existing antiviral agents in both overseas and domestic markets, and as part of that effort, studies on antiviral efficacy have been actively conducted on herbal extracts and plant extracts in Korea. It is going on.

본 발명은 전술한 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로, 본 발명의 목적은 생체 안전성이 우수한 천연 식물 유래의 기능성 식의약품을 제공하는 것이다.The present invention is to solve the problems of the prior art described above, an object of the present invention is to provide a functional food drug derived from a natural plant excellent in biosafety.

본 발명의 일 측면에 따르면, 타히보 추출물 및 팔각회향을 유효성분으로 포함하는 면역 증진용 조성물이 제공된다.According to one aspect of the present invention, there is provided a composition for enhancing immunity comprising tahibo extract and octagonal fennel as an active ingredient.

일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 꽃송이버섯 추출물을 더 포함할 수 있다.In one embodiment, the composition may further include a flower mushroom extract.

일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 후코이단 또는 사삼 추출물을 더 포함할 수 있다.In one embodiment, the composition may further include fucoidan or sasamin extract.

본 발명의 다른 측면에 따르면, 타히보 추출물 및 팔각회향; 및 꽃송이버섯 추출물, 후코이단, 및 사삼 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 면역 증진용 건강기능식품이 제공된다.According to another aspect of the present invention, tahibo extract and octagonal fennel; And there is provided a health functional food for enhancing immunity comprising at least one selected from the group consisting of a flower mushroom extract, fucoidan, and sasam extract.

일 실시예에 있어서, 상기 건강기능식품은 항바이러스 용도를 더 포함할 수 있다. In one embodiment, the health functional food may further include antiviral use.

일 실시예에 있어서, 상기 바이러스는 코로나바이러스(coronavirus), 인플루엔자바이러스(influenza virus), 신종인플루엔자 A 바이러스(Influenza A virus subtype H1N1), 및 아데노바이러스(adenovirus)로 이루어진 군에서 하나 이상 선택될 수 있다.In one embodiment, the virus may be one or more selected from the group consisting of coronavirus, influenza virus, swine influenza A virus (Influenza A virus subtype H1N1), and adenovirus. .

본 발명의 다른 측면에 따르면, 타히보 추출물 및 팔각회향; 및 꽃송이버섯 추출물, 후코이단, 및 사삼 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 면역 증진용 약학 조성물이 제공된다.According to another aspect of the present invention, tahibo extract and octagonal fennel; And there is provided a pharmaceutical composition for improving immunity comprising at least one selected from the group consisting of a flower mushroom extract, fucoidan, and sasam extract.

일 실시예에 있어서, 상기 약학 조성물은 바이러스성 질환의 예방 및 치료 용도를 더 포함할 수 있다.In one embodiment, the pharmaceutical composition may further include a use for preventing and treating viral diseases.

본 발명의 일 측면에 따른 조성물은 천연 추출물을 유효성분으로 포함하여 생체 안전성이 우수할 뿐만 아니라 면역 증진 활성이 우수하므로 건강기능식품뿐만 아니라 관련 질환의 치료 용도로서 유용하게 활용할 수 있다.The composition according to an aspect of the present invention includes a natural extract as an active ingredient, and thus has excellent biosafety as well as excellent immunity-promoting activity, and thus can be usefully utilized not only as a health functional food but also for the treatment of related diseases.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.The effects of the present invention are not limited to the above effects, and should be understood to include all effects that can be deduced from the configuration of the invention described in the detailed description or claims of the present invention.

본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. Terms used in the present specification have selected general terms that are currently widely used as possible while considering functions in the present invention, but this may vary depending on the intention or precedent of a technician working in the field, the emergence of new technologies, and the like.

또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.In addition, in certain cases, there are terms arbitrarily selected by the applicant, and in this case, the meaning of the terms will be described in detail in the description of the corresponding invention. Therefore, the terms used in the present invention should be defined based on the meaning of the term and the overall contents of the present invention, not a simple name of the term.

다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다. Unless otherwise defined, all terms used herein, including technical or scientific terms, have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which the present invention belongs. Terms such as those defined in commonly used dictionaries should be interpreted as having a meaning consistent with the meaning in the context of the related technology, and should not be interpreted as an ideal or excessively formal meaning unless explicitly defined in this application. Does not.

수치 범위는 상기 범위에 정의된 수치를 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최대의 수치 제한은 낮은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 낮은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최소의 수치 제한은 더 높은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 높은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 수치 제한은 더 좁은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼, 더 넓은 수치 범위 내의 더 좋은 모든 수치 범위를 포함할 것이다.The numerical range includes the numerical values defined in the above range. All maximum numerical limits given throughout this specification include all lower numerical limits as if the lower numerical limits were expressly written. All minimum numerical limits given throughout this specification are inclusive of all higher numerical limits as if the higher numerical limits were expressly written. All numerical limits given throughout this specification will include all better numerical ranges within the wider numerical range, as if the narrower numerical limits were expressly written.

이하, 본 발명의 실시예를 상세히 기술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 아니함은 자명하다.Hereinafter, examples of the present invention will be described in detail, but it is obvious that the present invention is not limited by the following examples.

본 발명의 일 측면은 타히보 추출물 및 팔각회향을 유효성분으로 포함하는 면역 증진용 조성물을 제공한다.One aspect of the present invention provides a composition for enhancing immunity comprising tahibo extract and octagonal fennel as an active ingredient.

상기 “면역(immunity)”은 생물체 내에서 병원체와 종양 세포 등을 탐지한 후 무력화하여 질병으로부터 생명체를 보호하는 기작을 의미하는 것으로, 상기 “면역 증진(Immunostimulation)”은 암 및 염증 등과 같은 다양한 질환에 대한 신체 방어 기전을 보강하는 일련의 치료학적 또는 예방학적 전략을 모두 포함할 수 있다.The “immunity” refers to a mechanism that protects the organism from diseases by detecting pathogens and tumor cells in an organism, and disabling it. The “immunostimulation” refers to various diseases such as cancer and inflammation. A set of therapeutic or prophylactic strategies to augment the body's defense mechanisms against the disease can be included.

상기 “타히보(Taheebo)”는 아마존의 일부지역에서 자생하는 능소화과(Bignoniaceae)의 타베뷔아 아벨라네대(Tabebuiaavellanedae) 나무를 원료로 한다. The “Taheebo” is made from the Tabebuiaavellanedae tree of the Bignoniaceae family, which grows naturally in some areas of the Amazon.

상기 타히보는 타베뷔아 아벨라네대 나무의 외피와 목질 사이의 7mm 정도의 내부 수피만이 원료로 사용될 수 있다. 상기 타히보의 성분 중 퀴논계열(quinon)의 NFD(naphtoquinon)에 대한 항암효과가 주목받고 있으며, NFD는 신생혈관을 만드는 것을 억제하여 종양의 침윤을 억제하는 역할을 함이 알려져 있다. The taheebo can only be used as a raw material with an inner bark of about 7 mm between the outer skin of the Tabevia Abellanedae tree and the wood. Among the ingredients of tahibo, the anticancer effect of quinones against naphtoquinon (NFD) is attracting attention, and it is known that NFD plays a role of inhibiting tumor invasion by inhibiting the formation of new blood vessels.

상기 “팔각회향(Illicium verum Hooker fil.)”은 목련과 상록수의 열매를 말하는 것으로, 단단한 껍질로 싸인 꼬투리 여덟 개가 마치 별처럼 붙어있는 모양을 하고 있어 일반적으로 스타아니스(star anise)라고 불린다.The " Ilicium verum Hooker fil. " refers to the fruits of magnolias and evergreen trees, and is generally called star anise because eight pods wrapped in a hard shell are attached like stars.

상기 팔각회향은 파주로 건조한 후 분말형태로 만들어 향신료로 널리 사용되고 있으며, 항암(Journal of Medicinal Plants Research, 4(24): 2666-2673. 2016), 항산화(Food Chemistry, 104(1): 59-66, 2007), 항염(Journal of Ethnopharmacology, 144(1): 182-189, 2012) 등의 활성이 보고되고 있다.The octagonal fennel is widely used as a spice after drying in Paju, making it into a powder form, and anti-cancer (Journal of Medicinal Plants Research, 4(24): 2666-2673. 2016), antioxidant (Food Chemistry, 104(1): 59- 66, 2007), and anti-inflammatory activity (Journal of Ethnopharmacology, 144(1): 182-189, 2012) have been reported.

상기 “유효성분으로 포함하는”은 투여하고자 하는 개체에 대한 치료적 또는 예방적 효과를 제공하기에 충분한 양을 포함하는 것을 의미하며, 상기 천연 추출물 기반의 조성물은 생체 안전성이 우수하므로 당업자가 양적 상한을 적절히 조정할 수 있다.The “contained as an active ingredient” means containing an amount sufficient to provide a therapeutic or prophylactic effect to the individual to be administered, and the natural extract-based composition is excellent in biosafety, so those skilled in the art will have a quantitative upper limit Can be adjusted appropriately.

상기 “추출물”은 용매와 추출 원료를 특정 조건 하에서 접촉시킴으로써 추출 원료에 함유된 유효성분이 전이된 용매를 지칭하는 것으로, 천연물로부터 원료에 함유된 성분을 분리해낸 물질이라면, 추출 방법이나 성분의 종류와 무관하게 모두 포함할 수 있다. The "extract" refers to a solvent in which the active ingredient contained in the raw material for extraction is transferred by contacting the solvent with the raw material for extraction under specific conditions. You can include all regardless.

예컨대, 상기 추출물은 물이나 유기용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출한 것, 천연물의 특정 성분, 예컨대 오일과 같은 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함할 수 있다.For example, the extract may include extracting a component soluble in a solvent from a natural product using water or an organic solvent, and extracting only a specific component of a natural product, such as an oil.

상기 추출물은 추출 원료를 건조 후 분말화하거나, 열수추출법, 에탄올 추출법 등 종래 알려진 다양한 추출법에 의해 수득할 수 있다.The extract may be obtained by drying and powdering the raw material for extraction, or by various conventionally known extraction methods such as hot water extraction and ethanol extraction.

상기 추출물은 물, 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 핵산, 디클로로메탄 또는 이들의 혼합 용매로 추출될 수 있고, 바람직하게는 60 내지 90%(w/w) 농도의 에탄올에 의해 추출될 수 있다.The extract may be extracted with water, alcohol, ethyl acetate, acetone, nucleic acid, dichloromethane, or a mixed solvent thereof, and preferably with ethanol at a concentration of 60 to 90% (w/w).

상기 원료에 포함된 유효성분은 용매의 극성에 따라 추출 비율이 상이해질 수 있으므로, 용매에 따른 생리 활성 물질의 선택성을 고려하여 달리할 수 있다.Since the extraction ratio of the active ingredient contained in the raw material may be different depending on the polarity of the solvent, it may be changed in consideration of the selectivity of the physiologically active substance according to the solvent.

상기 추출물은 추출 원료를 물로 수세한 후 건조 및 분쇄하여, 원료 중량의 8 내지 12배에 달하는 부피의 용매로 약 1 내지 24시간 동안 환류 순환 추출, 가압 추출, 초음파 추출 등 통상적인 방법으로 추출 및 여과하여 제조할 수 있다.The extract is extracted by conventional methods such as reflux extraction, pressure extraction, ultrasonic extraction, etc. for about 1 to 24 hours with a solvent having a volume of 8 to 12 times the weight of the raw material by washing the extraction raw material with water, drying and grinding, and It can be prepared by filtration.

상기 추출물은 감압 증류 또는 동결 건조 등과 같은 추가적인 공정에 의해 분말 상태로 수득할 수 있다.The extract can be obtained in powder form by an additional process such as distillation under reduced pressure or freeze drying.

상기 추출물은 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함할 수 있다. 예컨대, 상기 추출물은 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획물을 포함할 수 있다.The extract may also include an extract that has undergone a conventional purification process. For example, the extract may be subjected to various purification methods additionally performed, such as separation using an ultrafiltration membrane having a certain molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (one prepared for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity). It may contain a fraction obtained through.

상기 조성물은 꽃송이버섯 추출물을 더 포함할 수 있다.The composition may further include a flower mushroom extract.

상기 “꽃송이버섯(Sparassis crispa)”은 민주름버섯목 꽃송이과에 속하는 식용버섯으로, 식이섬유가 풍부하고 특히 포도당이 베타-1,3-결합으로 연결된 주쇄에 베타-1,6-결합의 측쇄를 가진 베타-글루칸(β의 함량이 식용 가능한 버섯인 영지나 상황버섯에 비해 10배 이상 높고 항종양, 항당뇨 등의 다양한 생리활성을 가지는 것으로 알려져 있다. The " Sparassis crispa " is an edible mushroom belonging to the flower family of the Minorum Mushroom Order, and is rich in dietary fiber, and in particular, the side chain of beta-1,6-linked to the main chain of which glucose is linked by a beta-1,3-bond It is known that the content of beta-glucan (β) is 10 times higher than that of edible mushrooms such as Ganoderma lucidum or Pseudomonas mushrooms, and has various physiological activities such as anti-tumor and anti-diabetes.

상기 조성물은 후코이단 또는 사삼 추출물을 더 포함할 수 있다.The composition may further include fucoidan or sasamin extract.

상기 “후코이단(Fucoidan)”은 해조류에 존재하는 후코오즈(fucose)를 주성분으로 황산기를 함유하고 있는 다당류로서 일반적으로 다시마, 미역, 톳 등과 같은 갈조류에 다량 존재하며, 이러한 후코이단은 혈행 개선, 항암 등 생리적 활성이 우수할 뿐만 아니라 미백, 보습, 주름개선 등의 효과가 있는 것으로 알려져 화장품 원료로서도 각광받고 있다.The “Fucoidan” is a polysaccharide containing a sulfuric acid group as a main component of fucose present in seaweed. It is generally present in a large amount in brown algae such as kelp, seaweed, and soybean. These fucoidan improve blood circulation, anticancer, etc. Not only is it excellent in physiological activity, but it is also known to be effective in whitening, moisturizing, and wrinkle improvement.

상기 “사삼”은 초롱꽃과의 잔대(Adenophora triphylla var. japonica Hara) 또는 당잔대의 뿌리를 의미한다. 상기 사삼은 한약재로 쓰이며, 진액을 보충하여 폐를 윤택하게 하고 열을 식히며 담을 없애 인후건조, 마른기침, 가래, 해수, 천식 등에 사용된다. The “sasam” refers to the root of the plantain family ( Adenophora triphylla var. japonica Hara ) or the dangzandae. Sasamin is used as a medicinal herb, and supplements essence to moisten the lungs, cools heat, and removes phlegm to dry the throat, dry cough, phlegm, seawater, and asthma.

본 발명자들은 상기 천연 추출물이 상호 작용을 통해 우수한 면역 증진 활성이 구현될 수 있음을 규명하였다.The present inventors have found out that the natural extract can be implemented with excellent immune enhancing activity through the interaction.

본 발명의 다른 측면은 타히보 추출물 및 팔각회향; 및 꽃송이버섯 추출물, 후코이단, 및 사삼 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 면역 증진용 건강기능식품을 제공한다.Another aspect of the present invention is tahibo extract and octagonal fennel; And it provides a health functional food for improving immunity comprising at least one selected from the group consisting of a flower mushroom extract, fucoidan, and sasam extract.

상기 면역 증진용 조성물은 식품 조성물, 예컨대 면역 증진이나 항바이러스 관련 건강기능식품으로서 사용될 수 있다.The composition for enhancing immunity may be used as a food composition, such as an immunity enhancing or antiviral-related health functional food.

상기 건강기능식품은 건강기능식품에 관한 법률에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, 상기 기능성은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미할 수 있다.The health functional food refers to a food manufactured and processed using raw materials or ingredients that have useful functionality for the human body according to the Health Functional Food Act, and the functionality is to control nutrients for the structure and function of the human body or It may mean ingestion for the purpose of obtaining a useful effect for health purposes such as action.

상기 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 상기 식품 첨가물은 다른 규정이 없는 한 식품의약품안전처에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 적합성 여부를 판단할 수 있다.The health functional food may contain ordinary food additives, and the food additives comply with the standards and standards for the relevant item in accordance with the general rules and general test methods of food additives approved by the Ministry of Food and Drug Safety, unless otherwise specified. The suitability can be determined by this.

상기 식품 첨가물 공전에 기재된 품목은 예컨대 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류를 들 수 있다.The items described in the food additive code include, for example, ketones, glycine, potassium citrate, nicotinic acid, cinnamic acid, etc., chemical compounds such as dark pigments, licorice extract, crystalline cellulose, high color pigments, natural additives such as guar gum, sodium L-glutamate preparations, noodles Mixed preparations, such as an added alkali agent, a preservative preparation, and a tar color preparation, are mentioned.

상기 면역 증진용 조성물은 건강 개선을 위한 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있으며, 예컨대, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 보조 식품, 식품 첨가제 등에 사용될 수 있다.The composition for improving immunity may be variously used in foods and beverages for improving health, and for example, various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, health functional supplements, food additives, and the like.

상기 건강기능식품은 건강 개선을 목적으로 정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조 및 가공될 수 있다.The health functional food may be manufactured and processed into any one formulation selected from the group consisting of tablets, granules, powders, capsules, liquid solutions, and pills for the purpose of improving health.

구체적으로 상기 정제 형태의 건강기능식품은 유효성분과 함께 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와의 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 후, 활택제 등을 넣어 압축 성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형하여 제조할 수 있다.Specifically, for the health functional food in the form of a tablet, a mixture of an excipient, a binder, a disintegrant, and other additives together with an active ingredient is granulated in a conventional manner, and then compression molded by putting a lubricant or the like, or directly compression molding the mixture. It can be manufactured.

또한, 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수 있으며, 필요에 따라 적당한 제피제로 제피할 수도 있다.In addition, the health functional food in the form of a tablet may contain a mating agent or the like, if necessary, and may be coated with a suitable coating agent if necessary.

상기 캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질캅셀제는 통상의 경질캅셀에 부형제 등의 첨가제와의 혼합물 또는 그의 입상물 또는 제피한 입상물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질캅셀제는 유효성분 및 부형제 등의 첨가제와의 혼합물을 젤라틴 등 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. Among the capsule-type health functional foods, hard capsules can be prepared by filling a conventional hard capsule with a mixture of additives such as excipients, granular or skinned granules thereof, and additives such as active ingredients and excipients. A mixture of and can be prepared by filling a capsule base such as gelatin.

상기 연질캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 솔비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.The soft capsules may contain plasticizers such as glycerin or sorbitol, colorants, preservatives, and the like, if necessary.

상기 환 형태의 건강기능식품은 유효성분과 함께 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 적당한 제피제로 제피를, 또는 전분, 탈크 또는 적당한 물질로 환의를 입힐 수도 있다.The ring-shaped health functional food can be prepared by molding a mixture of excipients, binders, disintegrants, etc. together with the active ingredients in an appropriate way, and if necessary, the skin is coated with a white sugar or other suitable skin-forming agent, or starch, talc, or a suitable material. It can also make you happy.

상기 과립형태의 건강기능식품은 유효성분과 함께 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다. The granular health functional food may be prepared in a granular form by an appropriate method of a mixture of an excipient, a binder, and a disintegrant together with an active ingredient, and may contain a flavoring agent, a flavoring agent, and the like, if necessary.

또한, 상기 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 교미제, 착향제 등에 대한 용어 정의는 당업계에 공지된 문헌에 기재된 것으로 그 기능 등이 동일 내지 유사한 것들을 포함할 수 있다.In addition, the definitions of terms for the excipients, binders, disintegrants, lubricants, flavoring agents, flavoring agents, and the like are described in documents known in the art, and may include those having the same or similar functions.

상기 건강기능식품은 항바이러스 용도를 더 포함할 수 있다. The health functional food may further include antiviral use.

상기 “항바이러스(anti-virus)”는 항바이러스 효과 혹은 작용과 같이 사용되며, 식물, 동물, 세균 등의 살아 있는 세포에 기생하고 증식하여 여러 질환을 일으키는 여과성 병원체인 바이러스 감염 및 증식을 억제하는 것을 의미한다.The “anti-virus” is used in conjunction with an antiviral effect or action, and is used to inhibit viral infection and proliferation, a filter pathogen that causes various diseases by parasitic and proliferation in living cells such as plants, animals, and bacteria. Means that.

구체적으로, 상기 항바이러스는 코로나바이러스(coronavirus), 인플루엔자바이러스(influenza virus), 신종인플루엔자 A 바이러스(Influenza A virus subtype H1N1), 및 아데노바이러스(adenovirus)로 이루어진 군에서 하나 이상 선택된 바이러스의 증식을 억제하거나 사멸시키는 활성을 의미할 수 있으나, 그 외에도 다양한 바이러스를 사멸시키거나 증식을 억제할 수 있으면 족하다.Specifically, the antivirus inhibits the proliferation of at least one virus selected from the group consisting of coronavirus, influenza virus, swine influenza A virus (Influenza A virus subtype H1N1), and adenovirus. It may mean the activity of killing or killing, but it is sufficient if it can kill or inhibit the proliferation of various viruses in addition to that.

본 발명의 다른 측면은 타히보 추출물 및 팔각회향; 및 꽃송이버섯 추출물, 후코이단, 및 사삼 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 면역 증진용 약학 조성물을 제공한다.Another aspect of the present invention is tahibo extract and octagonal fennel; And it provides a pharmaceutical composition for enhancing immunity comprising at least one selected from the group consisting of a flower mushroom extract, fucoidan, and sasam extract.

상기 조성물은 면역 활성을 증진시킴으로써, 면역결핍, 면역저하 또는 면역계 손상으로 인한 질환의 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 이용될 수 있다The composition can be usefully used in the prevention, improvement or treatment of diseases caused by immunodeficiency, immunodeficiency or damage to the immune system by enhancing immune activity.

상기 “예방”은 병리학적 현상의 발생 빈도 또는 정도를 감소시키는 모든 행위를 의미한다. 예방은 완전할 수 있으며 또는 부분적일 수도 있다. 이 경우에는 개체 내의 염증에 의해 발생되는 증상이 상기 조성물을 사용 하지 않은 경우와 비교하여 감소하는 현상을 의미할 수 있다.The "prevention" means any action that reduces the frequency or severity of pathological symptoms. Prevention can be complete or partial. In this case, it may refer to a phenomenon in which symptoms caused by inflammation in the individual decrease compared to the case where the composition is not used.

상기 “치료”는 치료하고자 하는 대상 또는 세포의 천연 과정을 변경시키기 위하여 임상적으로 개입하는 모든 행위를 의미하며, 임상 병리 상태가 진행되는 동안 또는 이를 예방하기 위하여 수행할 수 있다. The “treatment” refers to any action that clinically intervenes in order to change the natural process of a target or cell to be treated, and may be performed while a clinical pathology is in progress or to prevent it.

목적하는 치료 효과는 질병의 발생 또는 재발을 예방하거나, 증상을 완화시키거나, 질병에 따른 모든 직접 또는 간접적인 병리학적 결과를 저하시키거나, 전이를 예방하거나, 질병 진행 속도를 감소시키거나, 질병 상태를 경감 또는 일시적 완화시키거나, 예후를 개선시키는 것을 포함할 수 있다.The desired therapeutic effect is to prevent the occurrence or recurrence of the disease, alleviate symptoms, reduce all direct or indirect pathological consequences of the disease, prevent metastasis, reduce the rate of disease progression, or It may include alleviating or temporarily alleviating the condition, or improving the prognosis.

또한, 상기 약학 조성물은 바이러스성 질환의 예방 및 치료 용도를 더 포함할 수 있다.In addition, the pharmaceutical composition may further include a use for preventing and treating viral diseases.

상기 “바이러스성 질환”은 바이러스의 감염에 의해 유발되는 질병으로, 상기 약학 조성물은 코로나바이러스(coronavirus), 인플루엔자바이러스(influenza virus), 신종인플루엔자 A 바이러스(Influenza A virus subtype H1N1), 및 아데노바이러스(adenovirus)의 감염에 의해 야기되는 증상을 효과적으로 완화시킬 수 있다. The “viral disease” is a disease caused by infection with a virus, and the pharmaceutical composition includes a coronavirus, an influenza virus, a swine influenza A virus (Influenza A virus subtype H1N1), and an adenovirus ( adenovirus) can effectively relieve symptoms caused by infection.

상기 조성물은 경구적 전달, 비경구적 전달의 형태로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 전신 또는 국소 투여될 수 있으며, 상기 투여는 경구 투여 및 비경구 투여를 포함할 수 있다. 상기 조성물은 적절한 투여 형태를 제공하도록 적합한 양의 약학적으로 허용되는 비히클 또는 담체와 함께 제형화될 수 있다.The composition may be administered in the form of oral delivery or parenteral delivery. The composition may be administered systemically or locally, and the administration may include oral administration and parenteral administration. The composition may be formulated with an appropriate amount of a pharmaceutically acceptable vehicle or carrier to provide an appropriate dosage form.

상기 조성물은 약학 조성물의 제조에 사용되는 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유를 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The composition may further include a carrier, an excipient, and a diluent used in the preparation of a pharmaceutical composition. Examples of the carrier, excipient and diluent include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, gum acacia, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline Cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, or mineral oil may be mentioned, but the present invention is not limited thereto.

또한, 상기 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제제화하여 사용할 수 있다.In addition, the composition may be formulated and used in the form of oral dosage forms such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, and aerosols, external preparations, suppositories, and sterile injectable solutions.

경구 투여를 위한 고형제제는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 사용될 수 있고, 상기 고형제제는 상기 천연 추출물과 이의 분획물들에 적어도 하나 이상의 부형제, 예컨대, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로스, 락토오스, 또는 젤라틴 등을 혼합하여 조제할 수 있다. 또한, 상기 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제가 사용될 수 있다.Solid preparations for oral administration may include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and the solid preparations may contain at least one excipient, such as starch, calcium carbonate, sucrose, or the like, in the natural extract and its fractions. It can be prepared by mixing lactose or gelatin. In addition, lubricants such as magnesium stearate and talc may be used in addition to the excipients.

경구 투여를 위한 액상 제제는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 사용될 수 있고, 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 외에 여러 가지 부형제, 예컨대 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 사용될 수 있다.Liquid preparations for oral administration may include suspensions, liquid solutions, emulsions, syrups, etc., and various excipients, such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives, etc., may be used in addition to simple diluents such as water and liquid paraffin.

비경구 투여를 위한 제제는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 사용될 수 있다.Formulations for parenteral administration may be sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, lyophilized formulations, and suppositories.

상기 비수성용제, 현탁제는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르가 사용될 수 있다. 상기 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴이 사용될 수 있다.The non-aqueous solvent and suspension may be propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, or injectable ester such as ethyl oleate. As a base for the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin paper, and glycerogelatin may be used.

상기 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양이 대상체에 투여될 수 있다. 상기 “약제학적으로 유효한 양”은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.The pharmaceutical composition may be administered to a subject in a pharmaceutically effective amount. The “pharmaceutically effective amount” refers to an amount sufficient to treat a disease with a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level is the type of disease, severity, drug activity, drug Sensitivity, time of administration, route of administration and rate of excretion, duration of treatment, factors including co-used drugs and other factors well known in the medical field.

상기 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 바람직하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.The pharmaceutical composition may be administered as an individual therapeutic agent or administered in combination with other therapeutic agents, may be administered sequentially or simultaneously with a conventional therapeutic agent, and may be administered single or multiple. It is preferable to administer an amount capable of obtaining the maximum effect in a minimum amount without side effects in consideration of all the above factors, and this can be easily determined by a person skilled in the art.

이하 실시예를 통해, 본 발명을 더욱 상술하나 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다.It is apparent that the present invention is further elaborated through the following examples, but the present invention is not limited by the following examples.

실시예 및 비교예Examples and Comparative Examples

수득한 추출물의 생리 활성을 검증하고자 하기 표 1 및 2와 같이 시료를 혼합하여 실시예 및 비교예를 설정하였다.In order to verify the physiological activity of the obtained extract, samples were mixed as shown in Tables 1 and 2 to set Examples and Comparative Examples.

각각의 원료는 시중에서 구득하여 사용하였다.Each raw material was obtained and used on the market.

[함량(중량부)][Content (parts by weight)] 구분division 실시예Example 1One 22 33 44 55 66 타히보 추출물Taheebo extract 200200 200200 200200 200200 200200 200200 팔각회향Octagonal fennel 150150 7575 7575 7575 5050 37.537.5 꽃송이버섯 추출물Blossom Mushroom Extract -- 7575 -- -- 5050 37.537.5 후코이단Fucoidan -- -- 7575 -- 5050 37.537.5 사삼 추출물Four ginseng extract -- -- -- 7575 -- 37.537.5

[함량(중량부)][Content (parts by weight)] 구분division 비교예Comparative example 1One 22 33 44 55 66 77 88 99 타히보 추출물Taheebo extract 350350 -- -- -- -- 200200 200200 200200 -- 팔각회향Octagonal fennel -- 350350 -- -- -- -- -- -- 87.587.5 꽃송이버섯 추출물Blossom Mushroom Extract -- -- 350350 -- -- 150150 -- -- 87.587.5 후코이단Fucoidan -- -- -- 350350 -- 150150 -- 87.587.5 사삼 추출물Four ginseng extract -- -- -- -- 350350 -- -- 150150 87.587.5

실험예 1 : 세포 배양 및 독성 평가(MTT assay)Experimental Example 1: Cell culture and toxicity evaluation (MTT assay)

세포주인 RAW264.7 macrophage cell은 American Type Culture Collection(ATCC, Manassas. USA)에서 구입하여 사용하였다.The cell line RAW264.7 macrophage cell was purchased and used from the American Type Culture Collection (ATCC, Manassas. USA).

세포의 배양을 위하여 10% Fetal Bovin Serum(FBS, Hyclone USA), 100 units/mL penicillin/Streptoycin(Hyclone, USA)이 함유된 DMEM(Dulbecco's modified of Eagle's medium, Hyclone,USA) 배지를 사용하였으며, 37℃, 5% CO2 존재하의 incubator(Thermo, Forma, Germany)에서 배양하였다.DMEM (Dulbecco's modified of Eagle's medium, Hyclone, USA) medium containing 10% Fetal Bovin Serum (FBS, Hyclone USA), 100 units/mL penicillin/Streptoycin (Hyclone, USA) was used for cell culture, 37 C. Incubated in an incubator (Thermo, Forma, Germany) in the presence of 5% CO 2 .

살아있는 세포 내 미토콘드리아의 탈수소효소에 의해 Tetrazolium salt(WST-1)에서 formazan으로 변화하는 것을 이용하여, 생성된 formazan의 농도를 spectrophotometer로 측정함으로써 세포 생존율을 측정하였다.Cell viability was measured by measuring the concentration of the generated formazan with a spectrophotometer using the change from Tetrazolium salt (WST-1) to formazan by mitochondrial dehydrogenase in living cells.

Ez-cytox(Dozen, Korea)을 이용하여 프로토콜에 따라 MTT assay를 수행하였다.MTT assay was performed according to the protocol using Ez-cytox (Dozen, Korea).

Raw264.7 세포를 5x103 cells / 100μL로 96 well에 분주한 후 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다.Raw264.7 cells were dispensed into 96 wells at 5x10 3 cells/100μL and cultured for 24 hours in a 37°C, 5% CO 2 incubator.

농도별로 시료를 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. The samples were treated by concentration and incubated for 24 hours.

배양 후 10% MTT 시약이 포함된 배지로 교체하고 37℃에서 1시간 동안 반응시킨 후 450 nm 파장에서 microplate reader(Epoch, Biotek)로 측정하였다.After incubation, it was replaced with a medium containing 10% MTT reagent, reacted at 37° C. for 1 hour, and then measured with a microplate reader (Epoch, Biotek) at 450 nm wavelength.

각 시료에 대한 세포생존율에 의한 독성 평가는 3회 반복하여 측정하였으며, 그에 대한 평균값과 표준편차를 산출하였다.Toxicity evaluation based on cell viability for each sample was measured by repeating three times, and the mean value and standard deviation were calculated.

측정 결과, 실시예 및 비교예의 시료는 모든 농도(10, 100, 1000 μg/mL) 범위에서 유의적인 세포 독성이 나타나지 않았다.As a result of the measurement, the samples of Examples and Comparative Examples did not show significant cytotoxicity at all concentrations (10, 100, 1000 μg/mL).

실험예 2 : 면역 효능 평가(NO assay)Experimental Example 2: Evaluation of immune efficacy (NO assay)

Nitric Oxide(NO)의 농도 측정을 위해 그리스 반응(griess reaction)을 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다.To measure the concentration of Nitric Oxide (NO), the absorbance was measured at 540 nm using a grease reaction.

N-(1-naphthyl)-ethylenediamine, sulfanilamide, 및 NO2 -가 반응하여 azo couling을 이루는데, 두 개의 링 형태가 540nm의 파장에서 최대 흡광도 값을 가진다.N-(1-naphthyl)-ethylenediamine, sulfanilamide, and NO 2 - react to form azo couling, and the two ring shapes have maximum absorbance values at a wavelength of 540 nm.

Raw264.7 세포를 5x104 cells / 250μL로 24 well plate 에 분주하고 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다.Raw264.7 cells were dispensed in a 24 well plate at 5x10 4 cells / 250 μL and incubated in a 37°C, 5% CO 2 incubator for 24 hours.

시료를 500μg/mL 농도로 처리하고 48시간 동안 CO2 배양기에 배양하였다. 세포배양 상등액 50μL를 취해 N1 buffer 50μL를 혼합하고 5 내지 10분 상온에 반응시켰다. The sample was treated at a concentration of 500 μg/mL and incubated in a CO 2 incubator for 48 hours. Take 50 μL of the cell culture supernatant, mix 50 μL of N1 buffer, and react at room temperature for 5 to 10 minutes.

N2 buffer 50 μL를 혼합하여 10분간 반응시킨 후 microplate reader(Epoch, Biotek)를 이용하여 560nm 흡광도를 측정하였다.After 50 μL of N2 buffer was mixed and reacted for 10 minutes, absorbance at 560 nm was measured using a microplate reader (Epoch, Biotek).

동일한 방법으로 3회 측정하였으며, 그에 대한 평균값과 표준편차를 산출하였다.It was measured three times in the same way, and the average value and standard deviation thereof were calculated.

측정값은 시료를 처리하지 않은 대조군 대비 NO 농도 증가율로 나타내었다.The measured value was expressed as the increase rate of NO concentration compared to the control without the sample treatment.

비고Remark NO 생성능(%)NO generation ability (%) 실시예 1Example 1 236236 실시예 2Example 2 274274 실시예 3Example 3 269269 실시예 4Example 4 285285 실시예 5Example 5 337337 실시예 6Example 6 393393 비교예 1Comparative Example 1 136136 비교예 2Comparative Example 2 121121 비교예 3Comparative Example 3 118118 비교예 4Comparative Example 4 125125 비교예 5Comparative Example 5 132132 비교예 6Comparative Example 6 145145 비교예 7Comparative Example 7 138138 비교예 8Comparative Example 8 148148 비교예 9Comparative Example 9 143143

표 3을 참조하면, 상기 실시예의 시료는 비교예의 시료 대비 NO 생성능이 현저히 증진되었다.상기 결과는 타히보 추출물 및 팔각회향을 동시에 적용한 실시예의 경우 각 원료의 시너지 효과로 인해 면역 증진 효능이 현저히 증대될 수 있음을 시사한다.Referring to Table 3, the sample of the above example significantly improved the NO generation ability compared to the sample of the comparative example. The results show that in the case of the example in which Tahibo extract and octagonal fennel were applied at the same time, the immunity enhancing effect would be significantly increased due to the synergistic effect of each raw material Suggests that you can.

실험예 4 : 면역 효능 평가(TNF-a 생성량 평가)Experimental Example 4: Evaluation of immune efficacy (evaluation of TNF-a production amount)

면역 증가 효능을 알아보기 위해 Raw264.7 세포를 5x104 cells/250μL로 24 well plate 에 분주하고 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다.In order to examine the immunity increasing efficacy, Raw264.7 cells were dispensed in a 24 well plate at 5×10 4 cells/250 μL and incubated for 24 hours in a 37°C, 5% CO 2 incubator.

시료를 500μg/mL 농도로 처리하고 4시간동안 CO2 배양기에 배양한 후 세포 부유액을 원심 분리하여 세포들은 침전시켜 상층액을 수집하였다.The sample was treated at a concentration of 500 μg/mL, incubated in a CO 2 incubator for 4 hours, and then the cell suspension was centrifuged to precipitate the cells and the supernatant was collected.

상층액 내 TNF-a 생성량을 ELISA kit(R&D systems Inc., Minneapolis, MN, USA를 이용하여 사용자 매뉴얼에 기재된 방법대로 정량하였다(표 4).The amount of TNF-a produced in the supernatant was quantified according to the method described in the user's manual using an ELISA kit (R&D systems Inc., Minneapolis, MN, USA) (Table 4).

비고Remark TNF-a 생성량(pg/mL)TNF-a production amount (pg/mL) 실시예 1Example 1 52315231 실시예 2Example 2 58585858 실시예 3Example 3 57215721 실시예 4Example 4 60266026 실시예 5Example 5 65196519 실시예 6Example 6 72627262 비교예 1Comparative Example 1 23562356 비교예 2Comparative Example 2 21252125 비교예 3Comparative Example 3 22312231 비교예 4Comparative Example 4 19531953 비교예 5Comparative Example 5 22052205 비교예 6Comparative Example 6 28342834 비교예 7Comparative Example 7 27532753 비교예 8Comparative Example 8 26342634 비교예 9Comparative Example 9 27312731

표 4를 참조하면, 상기 실시예의 시료는 비교예의 시료 대비 TNF-a 생성능이 현저히 증진되었다.Referring to Table 4, the sample of the above example significantly improved the TNF-a production ability compared to the sample of the comparative example.

상기 결과는 타히보 추출물 및 팔각회향을 동시에 적용한 실시예의 경우 각 원료의 시너지 효과로 인해 면역 강화 활성이 현저히 증대될 수 있음을 시사한다.The above results suggest that in the case of the examples in which the tahibo extract and the octagonal fennel are applied at the same time, the immunity enhancing activity can be remarkably increased due to the synergistic effect of each raw material.

실험예 5 : 항바이러스 활성 평가Experimental Example 5: Evaluation of antiviral activity

실시예 및 비교예의 시료가 바이러스에 의해 야기되는 세포변성효과(CPE) 억제 활성을 확인하고자 술포로다민 B(Sulforhodamine B, SRB)법을 수행하였다.Samples of Examples and Comparative Examples were subjected to the sulforhodamine B (SRB) method to confirm the cytopathic effect (CPE) inhibitory activity caused by the virus.

구체적으로, 96 웰 배양 플레이트(BD Biosciences, San Jose, CA, USA)에 웰 당 2×104의 베로 세포(vero cell; 미국 세포주 은행(American Type Culture Collection; ATCC)를 우태아혈청(fetal bovine serum; FBS) 및 1% 항생제-항진균제 용액을 포함하는 최소필수배지(minimum essential medium; MEM)(Gibco 사, 독일)에 접종하고, 37℃에서 24 시간 동안 배양하였다.Specifically, in a 96-well culture plate (BD Biosciences, San Jose, CA, USA) 2 × 10 4 vero cells per well (American Type Culture Collection; ATCC) fetal bovine serum (fetal bovine) Serum; FBS) and a minimum essential medium (MEM) containing a 1% antibiotic-antifungal solution (Gibco, Germany) was inoculated and incubated at 37°C for 24 hours.

24시간 경과 후, 각 웰의 배지를 제거하고 인산완충식염수(phosphate buffered saline; PBS) 용액으로 1 회 세척하였으며, 바이러스(한국질병관리본부, KCDC)를 포함하는 배지로 교체하여 베로 세포를 바이러스로 각각 감염시켰다.After 24 hours, the medium of each well was removed, washed once with phosphate buffered saline (PBS) solution, and replaced with a medium containing virus (Korea Centers for Disease Control and Prevention, KCDC) to convert Vero cells to virus. Each was infected.

감염된 세포에 실시예 및 비교예의 시료를 1, 10, 100 μM의 농도로 각각의 세포에 처리하고 48시간 동안 배양하였다.Samples of Examples and Comparative Examples were treated with the infected cells at concentrations of 1, 10, and 100 μM to each of the cells and cultured for 48 hours.

각각의 웰에 SRB(Sigma-Aldrich, 미국)를 처리하고 VERSAmax 마이크로플레이트 리더기(Molecular Devices, Palo Alto, CA, 미국)을 사용하여 540nm 파장에서 흡광도를 측정하였으며 세포의 생존 정도를 확인하였다. 기저선 흡광도는 620nm로 설정하였다.Each well was treated with SRB (Sigma-Aldrich, USA), and absorbance was measured at a wavelength of 540 nm using a VERSAmax microplate reader (Molecular Devices, Palo Alto, CA, USA), and the degree of viability of cells was confirmed. The baseline absorbance was set to 620 nm.

모든 실험군의 측정값은 비감염된 정상 대조군 세포에서의 세포 생존 정도로 표준화한 후, 비감염 세포의 최대 생존 정도에 따른 감염 세포의 상대적인 세포 생존율(%)을 계산하였다.Measurement values of all experimental groups were normalized to the degree of cell viability in non-infected normal control cells, and then the relative cell viability (%) of the infected cells was calculated according to the maximum viability of the non-infected cells.

세포 독성을 확인하기 위해, 비감염 베로 세포에 상기 화합물들을 처리하여 세포 생존율을 평가하였다.In order to confirm cytotoxicity, non-infected Vero cells were treated with the above compounds to evaluate cell viability.

모든 실험은 동일한 과정을 3 회 반복 수행하였으며, 평균값을 산출하고 10μM 농도에서 바이러스 감염 세포의 생존율을 표 5에 나타내었다.In all experiments, the same process was repeated three times, the average value was calculated, and the viability of virus-infected cells at a concentration of 10 μM is shown in Table 5.

비고Remark 감염 세포 생존율(%)Infected cell viability (%) 코로나바이러스Coronavirus 인플루엔자바이러스Influenza virus 실시예 1Example 1 69.369.3 73.673.6 실시예 2Example 2 73.773.7 78.878.8 실시예 3Example 3 75.275.2 80.680.6 실시예 4Example 4 73.573.5 78.678.6 실시예 5Example 5 79.279.2 85.485.4 실시예 6Example 6 87.287.2 90.290.2 비교예 1Comparative Example 1 38.238.2 40.240.2 비교예 2Comparative Example 2 34.634.6 33.933.9 비교예 3Comparative Example 3 36.836.8 34.634.6 비교예 4Comparative Example 4 40.140.1 38.538.5 비교예 5Comparative Example 5 34.734.7 32.032.0 비교예 6Comparative Example 6 41.241.2 39.839.8 비교예 7Comparative Example 7 42.842.8 43.843.8 비교예 8Comparative Example 8 39.239.2 37.437.4

표 5를 참조하면, 바이러스에 감염된 베로 세포에 실시예의 시료를 처리하였을 때 처리 농도가 증가함에 따라 세포 생존율이 증가하였으며, 실시예의 시료는 비교예의 시료 또는 미처리군에 비해 유의적으로 세포 생존율을 증가시켰다.Referring to Table 5, when the sample of Example was treated with virus-infected Vero cells, the cell survival rate increased as the treatment concentration increased, and the sample of Example significantly increased the cell survival rate compared to the sample of Comparative Example or the untreated group. Made it.

실험예 6 : 항산화 활성 평가Experimental Example 6: Evaluation of antioxidant activity

실시예 및 비교예의 추출물을 정제수에 현탁하여 자유라디칼 소거 활성(free radical scavenging acticity)을 평가하였다.The extracts of Examples and Comparative Examples were suspended in purified water to evaluate free radical scavenging acticity.

DPPH 측정법은 억제제(inhibitor)가 안정한 라디칼 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl radical)를 소거하여 탈색되는 정도를 540n에서 흡광도를 측정하는 방법이다.The DPPH measurement method is a method of measuring the absorbance at 540n to determine the degree of decolorization by scavenging the stable radical DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl radical) by an inhibitor.

대조군으로 비타민 C를 이용하였고, 실험의 정확도를 위하여 동일한 실험을 3회 반복하였으며, 결과는 하기 표 6과 같다.Vitamin C was used as a control, and the same experiment was repeated 3 times for the accuracy of the experiment, and the results are shown in Table 6 below.

[라디칼 DPPH의 50% 소거하는 농도][Concentration to eliminate 50% of radical DPPH] 구분division SCSC 5050 (μg/mL)(μg/mL) 실시예 1Example 1 139.2139.2 실시예 2Example 2 127.8127.8 실시예 3Example 3 125.0125.0 실시예 4Example 4 124.5124.5 실시예 5Example 5 120.8120.8 실시예 6Example 6 118.8118.8 비교예 1Comparative Example 1 214.3214.3 비교예 2Comparative Example 2 209.9209.9 비교예 3Comparative Example 3 197.2197.2 비교예 4Comparative Example 4 196.0196.0 비교예 5Comparative Example 5 192.9192.9 비교예 6Comparative Example 6 185.4185.4 비교예 7Comparative Example 7 176.0176.0 비교예 8Comparative Example 8 182.9182.9 비교예 9Comparative Example 9 175.4175.4 대조군(비타민 C)Control (vitamin C) 121.5121.5

SC50의 값이 낮을수록 DPPH 자유라디칼의 소거 활성이 높은 것을 의미한다.표 6을 참조하면, 실시예의 시료는 비교예 대비 항산화 효과가 현저히 우수하였다.The lower the value of SC 50, the higher the scavenging activity of DPPH free radicals is. Referring to Table 6, the sample of Example showed remarkably superior antioxidant effect compared to the comparative example.

특히, 타히보 추출물 및 팔각회향을 동시에 포함하는 실시예의 시료는 일부만을 포함하는 비교예 시료에 비해 자유라디칼 소거 활성이 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 각 구성의 조합에 따른 시너지 효과를 시사한다.In particular, the sample of the Example containing both the Tahibo extract and the octagonal fennel at the same time showed remarkably superior free radical scavenging activity compared to the comparative sample containing only part of the sample, and the result suggests a synergistic effect according to the combination of each composition.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.The above description of the present invention is for illustrative purposes only, and those of ordinary skill in the art to which the present invention pertains will be able to understand that other specific forms can be easily modified without changing the technical spirit or essential features of the present invention will be. Therefore, it should be understood that the embodiments described above are illustrative in all respects and not limiting. For example, each component described as a single type may be implemented in a distributed manner, and similarly, components described as being distributed may also be implemented in a combined form.

본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.The scope of the present invention is indicated by the claims to be described later, and all changes or modified forms derived from the meaning and scope of the claims and the concept of equivalents thereof should be construed as being included in the scope of the present invention.

Claims (8)

타히보 추출물 및 팔각회향을 유효성분으로 포함하는 면역 증진용 건강기능식품.Health functional food for enhancing immunity containing taheebo extract and octagonal fennel as active ingredients. 제1항에 있어서,
꽃송이버섯 추출물을 더 포함하는 건강기능식품.
The method of claim 1,
A health functional food that further contains a flower mushroom extract.
제2항에 있어서,
후코이단 또는 사삼 추출물을 더 포함하는 건강기능식품.
The method of claim 2,
Health functional food further comprising fucoidan or sasamin extract.
타히보 추출물 및 팔각회향; 및
꽃송이버섯 추출물, 후코이단, 및 사삼 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 코로나바이러스(coronavirus) 또는 인플루엔자바이러스(influenza virus)에 대한 항바이러스용 건강기능식품.
Tahibo extract and octagonal fennel; And
A health functional food for antiviral against coronavirus or influenza virus comprising at least one selected from the group consisting of blossom mushroom extract, fucoidan, and sasam extract.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
코로나바이러스(coronavirus) 또는 인플루엔자바이러스(influenza virus)에 대한 항바이러스 용도를 더 포함하는 건강기능식품.
The method according to any one of claims 1 to 3,
Health functional food that further includes antiviral use for coronavirus or influenza virus.
삭제delete 타히보 추출물 및 팔각회향을 유효성분으로 포함하는 코로나바이러스(coronavirus) 또는 인플루엔자바이러스(influenza virus) 유발 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of diseases caused by coronavirus or influenza virus, comprising taheebo extract and octagonal fennel as active ingredients. 제7항에 있어서,
꽃송이버섯 추출물, 후코이단, 및 사삼 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 더 포함하는 약학 조성물.
The method of claim 7,
A pharmaceutical composition further comprising at least one selected from the group consisting of flower mushroom extract, fucoidan, and sasam extract.
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