KR102143246B1 - 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 페질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이의 제조 방법 - Google Patents
새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 페질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이의 제조 방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 항산화 및 항염증 효과가 현저히 우수하여 만성폐쇄성 폐질환의 의해 증가한 염증성 사이토카인을 현저히 감소시킬 수 있는 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 항산화 및 항염증 효과가 현저히 우수하여 만성폐쇄성 폐질환의 의해 증가한 염증성 사이토카인을 현저히 감소시킬 수 있는 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.
만성폐쇄성 폐질환 (Chronic Obstructive pulmonary disease, COPD)는 전세계적으로 해마다 증가하고 있는 질환으로, 현재, 만성폐쇄성 폐질환은 많은 나라에서 사망의 주요원인으로 주목되고 있으며, 특히 2020년에는 만성폐쇄성 폐질환이 인류의 사망원인 중 3번째 원인이 될 것으로 예측되고 있다. 만성 기관지염(chronic bronchitis) 또는 폐포 구조의 손상을 보이는 폐기종, 또는 두 질환이 혼합되어 나타나고, 기관지에서 폐포에 이르는 기도가 폐쇄되는 질환이다. 또한 지속적인 폐조직내 공기흐름을 억제 및 폐쇄시켜 결국 환자를 사망에 이르게 한다 이러한 만성폐쇄성 폐질환은 담배연기, 먼지, 화학물질, 대기오염, 세균감염등의 다양한 원인에 의해서 발생된다. 특히, 흡연은 만성폐쇄성 폐질환의 가장 큰 원인으로 간주되고 있으며, 실제 만성 폐쇄성 폐질환에 걸린 환자의 80% 이상이 흡연자로 밝혀졌다. 담배연기에는 수많은 독성화학물질 포함되어 있어, 흡연시에 폐조직 내 해로운 변화를 야기한다. 이러한 독성화학물질은 폐조직내호중구 (Neutrophils) 를 비롯한 다양한 염증세포의 침윤을 일으키고, 이로 인하여 폐염증이 발생하게 된다.
미세먼지는 복합한 성분을 가진 대기 중에 부유된 물질로서, 대부분 자동차의 기가스, 도로 주행과정에서 발생하는 먼지에서 발생한다. 그 입자의 크기와 화학적 조성이 건강 영향을 결정하는데, 미세먼지의 노출은 호흡기 및 심혈관계 질환의 발생과 관련이 있으며, 사망률도 증가시키는 것으로 보고되고 있다. 특히, 크기가 10㎛ 이하의 작은 먼지 입자들은 폐와 혈중으로 유입될 수 있기 때문에 큰 위협이 된다. 지름이 10㎛보다 작고, 2.5㎛보다 큰 입자를 미세먼지라고 부르며, 주로 도로변이나 산업단지 등에서 발생한다. 지름이 2.5㎛ 이하의 입자는 초미세먼지라고 하며, 담배 연기나 연료의 연소 시에 생성된다. 입자의 성분이 인체의 독성에 중요한 역할을 하는데, 주로 연소 입자인 탄소, 유기탄화수소, 질산염, 황산염, 유해금속 성분 등으로 구성되어 있다. 이들은 크기가 매우 작아서 코와 기도를 거쳐 기도 깊숙한 폐포에 도달할 수 있으며, 크기가 작을수록 폐포를 직접 통과해서 혈액을 통해 전신적인 순환을 할 수 있다. 미세먼지의 급성 노출 시에는 기도의 [0005] 자극으로 인한 기침과 호흡 곤란이 발생하며, 천식이 악화되고 부정맥이 발생한다. 만성 노출 시에는 폐기능이 감소하고 만성 기관지염이 증가하고 사망률을 높일 수 있다. 특히, 심장이나 폐질환자, 아이와 노인, 임산부는 미세먼지 노출에 의한 영향이 더 크며, 심지어 건강한 성인이어도 높은 농도에 노출되면 일시적으로 이런 증상들을 경험하게 된다.
폐의 염증세포들은 활성산소종(Reactive oxygen species), 염증성 사이토카인(Cytokines), 케모카인 및 조직손상을 야기하는 다양한 효소를 생산하며 특히, 호중구는 만성폐쇄성 폐질환이 발병하는데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 호중구는 많은 염증성 사이토카인, 케모카인 및 화학주성인자를 생성할 뿐만 아니라, 엘라스틴 분해효소(Elastase)를 분비하여, 정상적인 폐포형태를 파괴하고 결국에는 폐기종(Emphysema)을 야기한다. 담배연기로 인한 염증세포 특히 호중구의 침윤을 억제하는 것은 만성폐쇄성 폐질환의 치료에 있어 매우 중요한 치료수단으로 인식되고 있다.
따라서, 만성 폐쇄성 폐질환은 가역적인 기류 폐쇄와 알러지성 기관지 염증 반응을 주된 특징으로 나타내는 천식과는 구분되어서 적합하게 치료되어야 하지만, 현재의 치료법은 단지 증상의 경감을 제공함에 불과하고, 최근치료법 중 어느 것도 만성 폐쇄성 폐질환의 근본적인 치료 효과를 임상적인 결과로 나타내지 못하고 있다.
한편, 율무는 자양강장제, 건위제, 건습제, 물사마귀, 신경통, 류마티즘 치료제,이뇨제로 한방에서 많이 사용되고 있으나, 만성 폐쇄성 폐질환에 대한 새싹율무의 효과에 대해서는 알려진 바가 없다.
본 발명은 항산화 및 항염증 효과가 현저히 우수하여 만성폐쇄성 폐질환의 의해 증가한 염증성 사이토카인을 현저히 감소시킬 수 있는 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 및 이의 제조 방법을 제공하는데 목적이 있다.
또한, 본 발명은 본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 유효성분으로 포함하는 건강기능식품, 의약품 및 구강청정제를 제공하는데 또 다른 목적이 있다.
본 발명은 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 새싹율무 추출물은 발아 후 7 ~ 10일이 경과한 새싹율무로부터 추출된 것일 수 있다.
또한 본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 만성폐쇄성 폐질환은 만성폐쇄성 기관지염, 만성 세기관지염 및 폐기종 중에서 선택된 적어도 어느 하나일 수 있다.
또한 본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 새싹율무 추출물은 NADPH 및 Nrf-2 활성을 증가시킬 수 있다.
또한 본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 새싹율무 추출물은 10 ~ 150 ㎍/ml의 농도로 포함될 수 있다.
또한 본 발명은 (1) 새싹율무를 분쇄하여 새싹율무 분말을 제조하는 단계, (2) 상기 새싹율무 분말을 용매와 혼합하여 새싹율무 추출 용액을 제조하는 단계 및 (3) 상기 새싹율무 추출 용액으로부터 용매를 제거하여 새싹율무 추출물을 수득하는 단계를 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물의 제조 방법을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 용매는 물, 탄소수 1 ~ 4의 알코올, 에틸아세테이트, 시클로부탄온, 시클로 펜탄, n-헥산, 클로로포름, 아세톤, 에틸렌글리콜 중에서 선택된 적어도 어느 하나를 포함할 수 있다.
또한 본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 (2)단계는 30 ~ 100℃에서 10 ~ 48 시간 동안 수행될 수 있다.
또한 본 발명은 본 발명에 따른 조성물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 의약품을 제공한다.
또한 본 발명은 본 발명에 따른 조성물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방 또는 개선용 구강 청정제를 제공한다.
또한 본 발명은 본 발명에 따른 조성물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물은 항산화 및 항염증 효과가 현저히 우수하여 만성폐쇄성 폐질환의 의해 증가한 염증성 사이토카인을 현저히 감소시킬 수 있으므로 건강기능식품, 의약품 또는 구강 청정제 내 포함되어 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료 용도로 널리 활용될 수 있다.
도 1은 흡연추출물(Cigarette smoking extract: CSE) 및 미세먼지(particulate matter:PM)로 처리된 Beas-2B 세포에 본 발명의 일 실시예에 따른 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 처리하였을 때의 항세포독성 평가 결과를 도시한 그래프이다.
도 2a는 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전 세포에 대한 형광현미경 사진이다.
도 2b는 흡연추출물 및 미세먼지 처리 후 세포에 대한 형광현미경 사진이다.
도 2c는 흡연추출물 및 미세먼지로 처리된 세포에 실시예1에 따른 새싹율무 추출물을 50 ㎍/ml의 농도로 포함하는 조성물 처리 후 형광현미경 사진이다.
도 2d는 흡연추출물 및 미세먼지로 처리된 세포에 실시예1에 따른 새싹율무 추출물을 100 ㎍/ml의 농도로 포함하는 조성물 처리 후 형광현미경 사진이다.
도 2e는 흡연추출물 및 미세먼지로 처리된 세포에 실시예2에 따른 새싹율무 추출물을 50 ㎍/ml의 농도로 포함하는 조성물 처리 후 형광현미경 사진이다.
도 2f는 흡연추출물 및 미세먼지로 처리된 세포에 실시예2에 따른 새싹율무 추출물을 100 ㎍/ml의 농도로 포함하는 조성물 처리 후 형광현미경 사진이다.
도 3은 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전후 및 이에 발명의 일 실시예에 따른 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 처리하였을 때의 NADP/NADPH 비 측정 결과를 도시한 그래프이다.
도 4는 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전후 및 이에 발명의 일 실시예에 따른 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 처리하였을 때의 Nrf-2 활성도 측정 결과를 도시한 그래프이다.
도 5는 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전후 및 이에 발명의 일 실시예에 따른 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 처리하였을 때의 염증성 사이토카인(IL-8) 함량 측정 결과를 도시한 그래프이다.
도 6은 LPS로 자극한 RAW264.7 대식세포주에 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전후 및 이에 발명의 일 실시예에 따른 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 처리하였을 때의 활성질소 합성율 측정 결과를 도시한 그래프이다.
도 2a는 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전 세포에 대한 형광현미경 사진이다.
도 2b는 흡연추출물 및 미세먼지 처리 후 세포에 대한 형광현미경 사진이다.
도 2c는 흡연추출물 및 미세먼지로 처리된 세포에 실시예1에 따른 새싹율무 추출물을 50 ㎍/ml의 농도로 포함하는 조성물 처리 후 형광현미경 사진이다.
도 2d는 흡연추출물 및 미세먼지로 처리된 세포에 실시예1에 따른 새싹율무 추출물을 100 ㎍/ml의 농도로 포함하는 조성물 처리 후 형광현미경 사진이다.
도 2e는 흡연추출물 및 미세먼지로 처리된 세포에 실시예2에 따른 새싹율무 추출물을 50 ㎍/ml의 농도로 포함하는 조성물 처리 후 형광현미경 사진이다.
도 2f는 흡연추출물 및 미세먼지로 처리된 세포에 실시예2에 따른 새싹율무 추출물을 100 ㎍/ml의 농도로 포함하는 조성물 처리 후 형광현미경 사진이다.
도 3은 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전후 및 이에 발명의 일 실시예에 따른 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 처리하였을 때의 NADP/NADPH 비 측정 결과를 도시한 그래프이다.
도 4는 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전후 및 이에 발명의 일 실시예에 따른 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 처리하였을 때의 Nrf-2 활성도 측정 결과를 도시한 그래프이다.
도 5는 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전후 및 이에 발명의 일 실시예에 따른 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 처리하였을 때의 염증성 사이토카인(IL-8) 함량 측정 결과를 도시한 그래프이다.
도 6은 LPS로 자극한 RAW264.7 대식세포주에 흡연추출물 및 미세먼지 처리 전후 및 이에 발명의 일 실시예에 따른 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 처리하였을 때의 활성질소 합성율 측정 결과를 도시한 그래프이다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다.
이하, 첨부한 도면을 참고로 하여 본 발명의 실시예에 대하여 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
용어 “조성물(composition)”은 본 발명의 털여뀌 추출물에 희석제 또는 담체와 같은 다른 화학 성분들을 혼합한 혼합물을 의미한다.
용어 “담체(carrier)”는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다. 예를 들어, 디메틸술폭사이드(DMSO)는 생물체의 세포 또는 조직 내로의 많은 유기 화합물들의 투입을 용이하게 하는 통상 사용되는 담체이다.
용어 “희석제(diluent)”는 대상 화합물의 생물학적 활성 형태를 안정화시킬 뿐만 아니라, 화합물을 용해시키게 되는 물에서 희석되는 화합물로 정의된다. 버퍼 용액에 용해되어 있는 염은 당해 분야에서 희석제로 사용된다. 통상적으로 사용되는 버퍼 용액은 포스페이트 버퍼 식염수이며, 이는 인간 용액의 염 상태를 모방하고 있기 때문이다. 버퍼 염은 낮은 농도에서 용액의 pH를 제어할 수 있기 때문에, 버퍼 희석제가 화합물의 생물학적 활성을 변형하는 일은 드물다.
본 발명에 따른 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 대하여 설명한다.
상기 만성폐쇄성 폐질환은 만성폐쇄성 기관지염, 만성 세기관지염 및 폐기조 중에서 선택된 적어도 어느 하나일 수 있다.
상기 조성물은 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함함으로써, 항산화 및 항염증 효과가 현저히 우수하여 만성폐쇄성 폐질환의 의해 증가한 염증성 사이토카인을 현저히 감소시킬 수 있다.
상기 새싹율무 추출물은 발아 후 4~10일, 더욱 바람직하게는 7 ~ 10일이 경과한 새싹율무로부터 추출된 것일 수 있다. 더욱 상세하게는 발아 후 7 ~ 10일이 경과한 새싹율무는 종자가 싹이 튼 후 외줄기가 올라오고 잎이 찢어지기 전(번엽 전개 전) 상태를 의미한다.
만일 상기 새싹율무 추출물이 발아 후 4일 미만 또는 10일이 초과한 새싹율무로부터 추출될 경우, 항산화 및 항염증 효과가 목적하는 수준으로 발현되지 않을 수 있고, 상기 새싹율무 추출물이 발아 후 7 ~ 10일이 경과한 새싹율무로부터 추출될 경우 항염증 효과가 더욱 우수하여 NADPH, Nrf-2 활성이 더욱 향상되고, 염증성 사이토카인의 발현을 더욱 감소시킬 수 있다.
또한 상기 새싹율무 추출물은 전체 조성물 내 10 ~ 150 ㎍/ml의 농도로 포함될 수 있으며, 만일 상기 새싹율무 추출물이 10 ㎍/ml 미만의 농도로 포함될 경우, 목적하는 수준의 항산화 및 항염증 효과를 발현하기에 어려울 수 있고, 150 ㎍/ml를 초과하는 농도로 포함될 경우, 새싹율무 추출물의 세포 독성이 나타날 우려가 있다.
다음으로, 본 발명에 따른 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물의 제조 방법에 대하여 설명한다.
(1)단계로서 새싹율무를 분쇄하여 새싹율무 분말을 제조한다.
새싹율무를 분쇄하기 전에 세척수로 세정한 후 건조하는 과정을 수행할 수 있으며, 상기 세척수는 일예로 정제수일 수 있고, 상기 건조는 당업계에서 통상적으로 사용되는 건조 방법, 일예로 일광 건조, 열풍 건조 또는 동결 건조 방법을 사용할 수 있다.
상기 (1)단계는 당업계에서 통상적으로 사용되는 분쇄기를 사용하여 수행될 수 있으며, 상기 새싹율무를 분쇄함으로써 추출되는 새싹율무 추출물 내 유효성분의 함량이 더욱 증가하여, 항산화 및 항염증 효과가 더욱 향상될 수 있다.
다음으로 (2)단계로서 상기 새싹율무 분말을 용매와 혼합하여 새싹율무 추출 용액을 제조한다.
상기 용매는 물, 탄소수 1 ~ 4의 알코올, 에틸아세테이트, 시클로부탄온, 시클로 펜탄, n-헥산, 클로로포름, 아세톤, 에틸렌글리콜 중에서 선택된 적어도 어느 하나를 포함할 수 있으며, 바람직하게는 물 및 탄소수 1 ~ 4의 알코올을 포함할 수 있다.
상기 (2)단계에서 사용될 수 있는 추출 방법은 가열 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 중에서 선택된 어느 하나일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 새싹율무 추출 용액으로부터 추출되는 새싹율무 추출물 내 유효성분의 함량이 더욱 증가시키기 위하여 상기 (2)단계는 30 ~ 100℃에서 수행될 수 있다.
상기 유효성분의 함량을 더욱 증가시키기 위한 다른 방법으로서 상기 (2)단계를 3 ~ 5회 반복 수행할 수 있다.
다음으로 (3)단계로서, 상기 (2)단계에서 제조된 새싹율무 추출 용액으로부터 용매를 제거하여 새싹율무 추출물을 수득한다.
상기 용매의 제거 방법은 당업계에서 통상적으로 사용되는 추출 용액으로부터 용매를 제거하는 방법을 사용할 수 있으며, 일예로 상기 새싹율무 추출 용액을 여과한 후 감압 농축하는 방법을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 (3)단계를 수행한 후 미량의 용매가 잔류할 경우 추가적으로 건조 과정을 더 수행할 수 있으며, 이 때 사용되는 건조 방법은 일예로, 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 및 동결건조 중에서 선택된 어느 하나일 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
또한 본 발명은 본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 건강기능식품 조성물의 종류에는 통상적으로 제조 및/또는 판매되는 것이라면 특별히 제한하지 않는다. 예를 들면, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있고 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
상기 건강 음료 조성물은 본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 함유하는 것 외에는 액체성분에는 특별한 제한은 없으며 통상의 음료와 같이 여러가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
통상적으로, 건강기능식품에 포함되는 새싹율무 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.1~20 중량%, 바람직하게는 0.1~10 중량%로 포함될 수 있다. 또한, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수도 있다.
이하, 본 발명의 항산화 조성물을 함유하는 건강기능식품의 제조예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
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제조예
1>
황기 추출물 200 ㎎
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B 1 0.13 ㎎
비타민 B 2 0.15 ㎎
비타민 B 6 0.5㎎
비타민 B 12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
또한, 본 발명은 본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방, 개선 또는 치료용 의약품을 제공한다.
본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상세하게는, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈61(tween 61), 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 일반적으로 0.01 내지 50 ㎎/㎏의 양, 바람직하게는 0.1 내지 10 ㎎/㎏의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 또한 시코닌의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또 는 뇌혈관내 주사에 의해 투여될 수 있다.
이하, 본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 함유하는 주사제의 제조예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
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제조예
2>
새싹 율무 추출물 1 mg
만니톨 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
Na2HPO4·12H2O 26mg
또한, 본 발명은 본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 유효성분으로 포함하는 만성폐쇄성 폐질환 예방 또는 개선용 구강청정제를 제공한다.
본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 상기 구강청정제 내 0.3 ~ 1.0중량%로 포함될 수 있다. 상기 조성물 이외의 구강청정제에 포함되는 구성은 당업계에서 공지된 구성을 채용할 수 있으며, 일예로 구강내의 각종 음식물 찌꺼기 및 프라그를 분해하는 효소류, 구강청정제의 안정성과 약간의 점도를 유지시키는 습윤제, 기포를 발생시켜 세정력을 향상시키고 입안을 개운하게 해주는 계면활성제, 용제, 방부제, 완충제, 감미료, 향, 색소 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
이하, 본 발명에 따른 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 함유하는 구강청정제의 제조예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
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제조예3
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새싹율무 추출물: 500 mg
자일톨: 5g
에틸알코올: 5g
솔비톨: 5g
사이클로덱스트린: 300mg
사카린 나트륨: 10mg
소듐 모노플루오루포스페이트: 500mg
소듐 라우릴설페이트: 100mg
폴리솔베이트 20: 100mg
페퍼민트 플레이버: 10mg
소듐 벤조에이트: 10mg
색소: 적정량
정제수: 100g
이하 하기 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 기술적 사상의 내용과 범위를 쉽게 설명하기 위한 예시일 뿐, 이에 의해 본 발명의 기술적 범위가 한정되거나 변경되는 것은 아니다. 또한 이러한 예시에 기초하여 본 발명의 기술적 사상의 범위 안에서 다양한 변형과 변경이 가능함은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
(실시예 1) 새싹율무 A
충북음성 인삼특작부에서 재배한, 발아 후 5일이 경과된 새싹율무를 세척한 후, 새싹율무 중량의 10배 중량에 달하는 증류수 와 혼합하고 60℃에서 24시간 동안 3회 열수 추출하였다. 이를 실온에서 냉각시킨 후, 냉각된 용액을 여과한 후 감압농축기(SB-1000, EYELA, Tokyo, Japan)로 농축하였다. 시료를 동결건조기(FD8508, IlShin, Yangju, Korea)를 이용하여 -70℃에서 건조하여 새싹율무 추출물을 수득하였다.
(실시예 2)
실시예1과 동일하게 실시하되, 발아 후 8일이 경과된 새싹율무로부터 새싹율무 추출물을 수득하였다.
(실험예1)
실시예에서 제조된 조성물의 만성폐쇄성 폐질환에 대한 효능을 확인하기 위하여 하기와 같이 항세포독성, 항산화 및 항염증 특성을 평가하였다.
1) 항세포독성 평가
흡연추출물(Cigarette smoking extract: CSE) 및 미세먼지(particulate matter:PM)로 처리된 Beas-2B 세포에 실시예에서 제조된 새싹율무 추출물을 25, 50, 100 ㎍/ml 농도로 포함하는 조성물을 처리한 후 세포독성의 정도를 LDH assay 방법을 통해 확인하였다. LDH assay 결과를 도 1에 도시하였다.
도 1을 참조하면, 흡연추출물 및 미세먼지로 처리된 Beas-2B 세포는 처리전 LDH 양을 기준 266%로 증가하였으며, 실시예1과 실시예2 모두 CSE+PM 자극에 의하여 증가된 LDH를 35% 이상 감소시킨 것을 확인할 수 있다.
2) 형광현미경 관측
CSE+PM 자극에 대하여 실시예에서 제조된 조성물 처리에 의한 산화적 스트레스(oxidative stress) 변화 유무를 확인하기 위해서 2,7-dichlorofluorescein diacetate(DCFDA)를 prove로 이용하여 세포 내 생성된 ROS 분비정도를 형광현미경으로 관찰하였다. 관찰된 형광현미경 사진을 도 2a 내지 도2f에 도시하였다.
도2a 내지 도2f를 참조하면, CSE+PM 자극 시 세포 내 ROS양이 증가되는 것을 도 2a 대비 도 2b의 형광 정도를 통해 확인할 수 있으며, 이를 실시예1 및 실시예2에서 제조된 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물로 처리할 경우, CSE+PM 자극으로 증가된 세포내 ROS양이 감소되는 것을 확인할 수 있다. 또한, 도 2f를 참조하면, 새싹율무 추출물의 농도가 증가함에 따라 CSE+PM 자극으로 증가된 세포내 ROS양이 더욱 감소하는 것을 간접적으로 확인할 수 있다.
3) NADPH 활성 평가
또한 NADPH는 Nrf2와는 또 다른 항산화계의 주요 조효소로, 생체 항산화 효소계의 작용에 필수적으로 요구되어 ROS에 대한 세포 손상 억제에 중요한 역할을 한다. 일반적으로 NADP와 NADPH는 각각 산화제(oxidant)와 항산화제(anti-oxidant)로 알려져 있다. ELISA 방법을 이용해 세포내 NADP/NADPH 비(ratio)를 측정하였으며, 그 결과를 도 3에 도시하였다. 실시예1 및 실시예2에서 제조된 새싹율무 추출물을 100㎍/ml의 농도로 조성물 내 포함되었다.
도 3을 참조하면, CSE+PM 자극 시 NADP/NADPH 비가 현저히 증가하는 것을 확인할 수 있고, 실시예2에서 제조된 새싹율무 추출물을 처리할 경우 NADP/NADPH 비가 8.36으로 실시예1보다 유의적으로 감소되는 것을 확인할 수 있다. 이는 새싹율무 추출물이 NADPH 활성을 향상시킴으로써 항산화 작용에 영향을 미치는 것으로 판단된다.
4) Nrf-2 활성 평가
Nrf2 전사인자는 세포가 산화적 스트레스에 노출되었을 때 이를 방어하기 위해 활성이 증가되고, 항산화제 처리에 의해서도 전사인자의 활성을 증가시켜 관련 유전자들인 NQO1과 HO-1 등의 발현을 증가시킨다. CSE+PM 자극에 의해 증가된 핵 내 Nrf-2 전사인자 활성이 새싹율무 추출물의 처리에 의해 활성이 증가되는지 확인하고자 ELISA 분석을 수행하였다. 실시예1 및 실시예2에서 제조된 새싹율무 추출물을 100㎍/ml의 농도로 조성물 내 포함되었다.
도4를 참조하면, 새싹율무 추출물 A와 B 처리에 의해서 Nrf-2 활성이 증가되는 경향을 나타내었으며, 이 중에서도 실시예2에서 제조된 새싹율무 추출물은 Nrf-2의 활성을 더욱 증가시킨 것을 확인할 수 있다.
3) 항염증 특성 평가
CSE+PM 자극에 대하여 실시예에서 제조된 조성물 처리에 의한 염증성 사이토카인 감소 효과를 확인하기 위해서 세포외로 분비되는 IL-8을 ELISA로 측정하였으며, 측정 결과를 도5에 도시하였다. 실시예1 및 실시예2에서 제조된 새싹율무 추출물을 100㎍/ml의 농도로 조성물 내 포함되었다.
도5를 참조하면, CSE에 노출된 세포가 미세먼지 자극(PM)에 의해 염증반응이 악화되는 것을 확인할 수 있다. 이에 실시예1 및 실시예2에서 제조된 새싹율무 추출물을 처리할 경우, CSE+PE 처리된 세포의 염증성 사이토카인(IL-8)을 감소시키는 효과를 나타내었다. 또한, 실시예2가 실시예1보다 염증성 사이토카인(IL-8) 감소 효과가 더욱 우수한 것을 확인할 수 있다.
5) 활성 질소 생성 억제 활성 평가
LPS로 자극한 RAW264.7 대식세포주에 실시예2에서 제조된 새싹율무 추출물을 포함하는 조성물을 25, 50, 100 농도별로 처리하여 활성질소 생성에 대한 억제효과를 확인하였으며, 그 결과를 도 6에 도시하였다.
도 6을 참조하면, 실시예2에서 제조된 새싹율무 추출물은 우수한 활성질소 억제효과를 갖는 것으로 나타났으며, 농도가 높아질수록 활성질소 생성 억제 효과가 더욱 향상되는 것을 확인하였다.
Claims (11)
- 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하고,
상기 새싹율무는 율무 종자 발아 후 5 ~ 10일이 경과한 것을 특징으로 하는,
만성폐쇄성 기관지염, 만성 세기관지염 및 폐기종 중에서 선택된 적어도 어느 하나의 만성폐쇄성 폐질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 새싹율무는 율무 종자 발아 후 5 ~ 8일이 경과한 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 새싹율무 추출물은 NADPH 및 Nrf-2 활성을 증가시키는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 새싹율무 추출물은 10 ~ 150 ㎍/ml의 농도로 포함되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하고,
상기 새싹율무는 율무 종자 발아 후 5 ~ 10일이 경과한 것을 특징으로 하는,
만성폐쇄성 기관지염, 만성 세기관지염 및 폐기종 중에서 선택된 적어도 어느 하나의 만성폐쇄성 폐질환 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
- 새싹율무 추출물을 유효성분으로 포함하고,
상기 새싹율무는 율무 종자 발아 후 5 ~ 10일이 경과한 것을 특징으로 하는,
만성폐쇄성 기관지염, 만성 세기관지염 및 폐기종 중에서 선택된 적어도 어느 하나의 만성폐쇄성 폐질환 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물
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