KR102104850B1 - Skin-lightening Composition Using an Extract of Polygonum amphibium - Google Patents

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Abstract

본 발명은 멜라닌 합성 저해능을 가지는 물여뀌 추출물을 이용한 피부 미백용 조성물을 개시한다.The present invention discloses a composition for skin whitening using water extract having a melanin synthesis inhibitory ability.

Description

물여뀌 추출물을 이용한 피부 미백용 조성물{Skin-lightening Composition Using an Extract of Polygonum amphibium}Skin-lightening composition using an extract of polygonum amphibium

본 발명은 물여뀌(Polygonum amphibium) 추출물을 이용한 피부 미백용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for skin whitening using an extract of Polygonum amphibium .

현대사회에서 생활수준이 향상됨에 따라 건강뿐만 아니라 미용에 대한 관심도 점차 높아지고 있다. 이 중 자외선, 대기오염 등에 의한 피부손상 및 노화로 인하여 유발되는 기미(melasma), 주근깨(freckle)와 같은 색소 침착형 피부질환 개선과 전반적인 피부톤 개선을 위한 제품 개발이 활발하다. 표피의 기저층에 존재하는 멜라닌(melanin)은 피부색을 결정하는 주요한 색소로서 자외선에 의한 손상을 막고 활성산소를 제거하여 피부를 보호역할을 한다. 그러나 멜라닌 과발현은 피부 흑화, 색소침착, 기미, 주근깨, 피부암 등 피부 건강뿐만 아니라 미적 측면에서도 크게 영향을 받게 된다(Pigment Cell Res 10, 127-138. 1997;Vet Dermatol. 2003 Apr;14(2):57-65.).As the standard of living in modern society improves, interest in beauty as well as health is gradually increasing. Among them, it is actively developing products for improving pigmentation-type skin diseases such as melasma and freckle caused by skin damage and aging caused by ultraviolet rays and air pollution, and improving overall skin tone. Melanin, which is present in the base layer of the epidermis, is a major pigment that determines skin color. It prevents damage by ultraviolet rays and removes free radicals to protect the skin. However, overexpression of melanin is greatly affected not only in skin health such as skin darkening, pigmentation, blemishes, freckles, skin cancer, etc. (Pigment Cell Res 10, 127-138. 1997; Vet Dermatol. 2003 Apr; 14 (2) : 57-65.).

멜라닌은 피부(표피)내 기저층에 존재하는 색세포인 멜라노사이트(melanocyte)에서 합성되며 주변 각질세포(keratinocyte)로 전이되어 사람의 피부색을 나타내는 것으로 알려져 있다. 피부가 햇빛을 받으면 색소 형성 세포인 멜라노사이트에서 화학반응이 일어나 멜라닌이 만들어진다. 멜라닌의 주요한 역할을 피부에서 발생하는 활성산소가 프리라디칼(free radical)을 제거하고, 자외선의 투과를 막아 피부의 내부를 보호하는 것이다(Brain Research Bulletin 10 (6): 847-851, 1983; Mutation Research 571 (1-2): 121-32, 2005; Nature. 22;445(7130):843-50. 2007). It is known that melanin is synthesized from melanocytes, which are color cells present in the base layer in the skin (epidermis), and is metastasized to peripheral keratinocytes, and is known to exhibit human skin color. When the skin receives sunlight, melanin is produced by chemical reactions in melanocytes, pigment-forming cells. The main role of melanin is to protect the inside of the skin by removing free radicals and free radicals generated by the skin (Brain Research Bulletin 10 (6): 847-851, 1983; Mutation) Research 571 (1-2): 121-32, 2005; Nature. 22; 445 (7130): 843-50. 2007).

멜라닌을 만드는 출발물질은 인체에 정상적으로 존재하는 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)이다. 티로신은 멜라닌세포 내에서 티로시나제(tyrosinase)라는 효소에 의해 산화되어 도파(dihydroxy phenylalanine, DOPA)로 변하고, 도파는 더욱 산화하여 도파퀴논(DOPA-Quinone)을 만들어 낸다. 그리고 도파퀴논이 시스테인(cysteine)을 만나게 되면 시스테이닐도파(cysteinyldopa)가 만들어지고, 그 결과 적갈색의 페오멜라닌(pheomelanin)이 만들어 진다. 이후 생성된 멜라닌은 멜라노소체(melanosome)에 실려 각질 형성 세포로 전달된다(Pigment Cell Res.12(1):4-12.1999.;Cell Mol Biol (Noisy-le-grand).45(7):981-90.1999; An Bras Dermatol.88(1): 76-83. 2013).The starting material for melanin is tyrosine, a type of amino acid normally present in the human body. Tyrosine is oxidized in the melanocytes by an enzyme called tyrosinase to turn into dopa (dihydroxy phenylalanine, DOPA), and dopa further oxidizes to produce dopaquinone (DOPA-Quinone). And when dopaquinone encounters cysteine, cysteinyldopa is produced, resulting in a reddish-brown pheomelanin. The produced melanin is then carried on a melanosome and delivered to keratinocytes (Pigment Cell Res. 12 (1): 4-12.1999 .; Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 45 (7): 981 -90.1999; An Bras Dermatol. 88 (1): 76-83. 2013).

색소 침착의 예방 또는 완화를 목적으로 미백 화장품에 배합되는 약제의 기본적인 메커니즘은 티로시나아제 작용 억제, 티로시나아제 생성 억제, 멜라닌 생성 미디에이터의 억제, 멜라닌의 환원 및 강산화 억제, 멜라닌 배설의 촉진, 자외선 차단 등이 있다. 기존의 미백에 관한 연구로는 멜라닌 합성의 과정에 주요한 역할을 하는 티로시나아제의 활성 억제하는 정도를 스크리닝하여 미백소재를 개발하는 경우가 많이 있었지만, 최근에는 멜라닌 생성, 이동, 축척 등 여러 단계에서의 기작을 조절함으로써 다양한 메커니즘을 연구를 통해 보다 효능이 우수한 미백소재를 개발하려는 경우가 증가하고 있다(Lee et al., J Soc Cosmet Scientists Korea 37, 275-822. 2011). 생성된 멜라닌을 환원시키는 미백제로는 비타민C, 글루타티온(glutathione), 아스코르빈산 인산 에스테르 마그네슘 등 항산화제가 알려져 있다(J Cosmet Sci.65(6):365-75. 2014; Int J Cosmet Sci.37(6):567-73. 2015; Yakugaku Zasshi. 128(8):1203-7. 2008; Int J Cosmet Sci.27(3):147-53. 2005; Acta Derm Venereol.63(3):209-14.1983; Skin Pharmacol Appl Skin Physiol.13(3-4):143-9. 2000; J Cosmet Laser Ther.15(2):107-13. 2013.).The basic mechanisms of drugs formulated in whitening cosmetics for the purpose of preventing or alleviating pigmentation are inhibiting tyrosinase action, inhibiting tyrosinase production, inhibiting melanin production mediators, inhibiting melanin reduction and strong oxidation, promoting melanin excretion, And sun protection. Previous studies on whitening have often screened the degree of tyrosinase activity, which plays a major role in the process of melanin synthesis, to develop whitening materials, but recently, at various stages such as melanin production, migration, and scale. By controlling various mechanisms, there are increasing cases in which various mechanisms are studied to develop whitening materials with better efficacy (Lee et al., J Soc Cosmet Scientists Korea 37, 275-822. 2011). Antioxidants such as vitamin C, glutathione, and ascorbic acid phosphate ester magnesium are known as whitening agents that reduce the produced melanin (J Cosmet Sci. 65 (6): 365-75. 2014; Int J Cosmet Sci. 37 (6): 567-73. 2015; Yakugaku Zasshi. 128 (8): 1203-7.2008; Int J Cosmet Sci.27 (3): 147-53. 2005; Acta Derm Venereol.63 (3): 209 -14.1983; Skin Pharmacol Appl Skin Physiol. 13 (3-4): 143-9.2000; J Cosmet Laser Ther.15 (2): 107-13. 2013.).

멜라닌의 생합성에는 여러 종류의 관련 인자들이 관여하기 때문에 단순한 멜라닌 합성 저해 실험 이외에 다양한 실험 방법이 적용되고 있다. 최근 제브라피쉬를 이용한 연구도 활발하게 진행되고 있는데 제브라피쉬는 한번에 100개 이상의 알을 얻을 수 있어 다량의 샘플 확보가 가능하며 투명한 피부를 통해 색소 생성 여부가 바로 관찰 가능하다(Grunwald and Eisen, Nat Rev Genet, 3:717-724,2002).Since various kinds of related factors are involved in the biosynthesis of melanin, various experimental methods are applied in addition to the simple melanin synthesis inhibition experiment. Recently, research using zebrafish has been actively conducted. Since zebrafish can obtain more than 100 eggs at a time, it is possible to secure a large amount of samples, and it is possible to immediately observe whether pigments are generated through transparent skin (Grunwald and Eisen, Nat Rev) Genet, 3: 717-724, 2002).

미백에 대한 관심이 고조됨에 따라 기존의 잘 알려진 물질 이외에 더욱 우수한 효과를 지닌 미백 화장품 개발이 활발하게 이루어지고 있으나 합성미백원료들은 사용 중 분해나 착색, 이취, 안정성 및 안전성 등의 문제가 대두되고 있다. 따라서 세포에 영향을 끼치지 않으며 멜라닌 합성을 감소시키는 천연 미백제에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다.As interest in whitening has increased, whitening cosmetics with more excellent effects have been actively developed in addition to the existing well-known substances, but synthetic whitening materials have problems such as decomposition, coloring, odor, stability and safety during use. . Therefore, studies on natural whitening agents that do not affect cells and reduce melanin synthesis are being actively conducted.

본 발명의 목적은 물여뀌 추출물을 이용한 피부 미백용 조성물을 제공하는 데 있다.An object of the present invention is to provide a composition for skin whitening using water extract.

본 발명의 다른 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.Other or specific objects of the present invention will be presented below.

본 발명은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 물여뀌 추출물이 마우스 유래 멜라노마 세포주인 B16F10에서 멜라닌 합성 저해능을 가지고 제브라피시에서도 멜라닌 생합성 저해능을 가짐을 확인함으로써 완성된 것이다.The present invention was completed by confirming that the extract is water-extracted and has a melanin synthesis inhibitory ability in mouse-derived melanoma cell line B16F10 and also has melanin biosynthesis inhibitory activity in zebrafish, as shown in the following examples and experimental examples.

전술한 바를 고려할 때, 본 발명의 피부 미백용 조성물은 물여뀌 추출물을 유효성분으로 포함함을 특징으로 한다.Considering the above, the composition for skin whitening of the present invention is characterized by including water extract as an active ingredient.

본 명세서에서, "물여뀌 추출물"이란 추출 대상인 물여뀌 전초, 잎, 줄기, 지상부, 뿌리, 근경, 지하부 또는 이들의 혼합물을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등), 메틸렌클로라이드, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, N,N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 침출하여 얻어진 추출물, 이산화탄소, 펜탄 등 초임계 추출 용매를 사용하여 얻어진 추출물 또는 그 추출물을 분획하여 얻어진 분획물을 의미하며, 추출 방법은 활성물질의 극성, 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방법을 적용할 수 있다. 분획된 추출물의 경우 추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 극성이 다른 용매와 혼합·정치시켜 얻은 분획물, 상기 조추출물을 실리카겔 등이 충진된 칼럼에 흡착시킨 후 소수성 용매, 친수성 용매 또는 이들의 혼합 용매를 이동상으로 하여 얻은 분획물을 포함하는 의미이다. 또한 상기 추출물의 의미에는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등의 방식으로 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고형상의 추출물이 포함된다. 바람직하게는 추출용매로서 물, 에탄올 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물, 특히 추출용매로서 에탄올을 사용하여 얻어진 추출물을 의미한다. 더 바람직하게는 에탄올 추출물의 에탈아세테이트 가용성 추출물, 더욱 바람직하게는 에탄올 추출물을 물에 현탁시킨 후, 노르말 헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트 및 노르말 부탄올을 이용하여 순차적으로 분획하여 얻어진 각 분획에 따른 추출물, 특히 에틸아세테이트층의 분획물을 의미한다. 여기서 "순차적으로 분획한다"는 것의 의미는 물층의 분획물을 분획 후에도 계속 사용하여 상기 열거된 순서의 용매로 분획한다는 의미이다.In the present specification, the term "water quenched extract" refers to water quenched outpost, leaves, stems, ground, roots, roots, underground parts or mixtures thereof, water, and lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms (methanol, ethanol, butanol, etc.), Methylene chloride, ethylene, acetone, hexane, ether, chloroform, ethyl acetate, butyl acetate, N, N-dimethylformamide (DMF), dimethylsulfoxide (DMSO), 1,3-butylene glycol, propylene glycol or their Extracts obtained by leaching using mixed solvents, extracts obtained using supercritical extraction solvents such as carbon dioxide and pentane, or fractions obtained by fractionating the extracts. The extraction method considers the polarity, extraction degree, and storage degree of the active substance. Thus, any method such as cold immersion, reflux, warming, ultrasonic radiation, and supercritical extraction can be applied. In the case of fractionated extracts, the fractions obtained by suspending the extracts in a specific solvent and mixing and policing with a solvent of different polarity, adsorb the crude extract on a column filled with silica gel, etc., and then use a hydrophobic solvent, a hydrophilic solvent or a mixed solvent thereof. It means that it contains the fraction obtained as a mobile phase. In addition, the meaning of the extract includes a concentrated liquid extract or a solid extract in which the extraction solvent is removed by a method such as freeze drying, vacuum drying, hot air drying, spray drying, and the like. Preferably, it means an extract obtained by using water, ethanol or a mixed solvent thereof as an extraction solvent, in particular an extract obtained by using ethanol as an extraction solvent. More preferably, the ethanol extract of ethanol acetate-soluble extract, more preferably, after ethanol extract is suspended in water, the extract according to each fraction obtained by sequentially fractionation using normal hexane, dichloromethane, ethyl acetate and normal butanol, In particular, it means a fraction of the ethyl acetate layer. Here, "sequential fractionation" means that the fraction of the water layer is continuously used after fractionation and fractionated with a solvent in the order listed above.

또 본 명세서에서 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.In addition, in the present specification, "active ingredient" refers to a component that can exhibit the desired activity alone or itself can exhibit activity with an inactive carrier.

본 발명의 조성물은 그 유효성분을 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 피부 미백 활성 등을 나타낼 수 있는 한 임의의 양(유효량)으로 포함할 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 15 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 그 적용 대상인 포유동물 바람직하게는 사람에게 의료 전문가, 피부 전문가 등의 제언에 의한 투여 기간 동안 본 발명의 조성물이 투여될 때, 피부 미백 효과 등 의도한 의료적·피부학적 효과를 나타낼 수 있는, 본 발명의 조성물에 포함되는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.The composition of the present invention may contain the active ingredient in any amount (effective amount) as long as it can exhibit skin whitening activity, etc. according to the use, formulation, blending purpose, etc., the typical effective amount is based on the total weight of the composition It will be determined within the range of 0.001% to 15% by weight. Here, the "effective amount" refers to the intended medical and dermatological effect, such as skin whitening effect, when the composition of the present invention is administered to a mammal, preferably a person, to which a target is applied, by a medical expert, a skin expert, etc. It refers to the amount of active ingredients contained in the composition of the present invention. Such an effective amount can be determined empirically within the ordinary skill in the art.

본 발명의 피부 미백용 조성물은 유효성분 이외에, 피부 관련 활성을 보강·추가를 위하여 당업계에서 이미 안전성이 검증되고 해당 활성을 갖는 것으로 당업계에 공지된 임의의 화합물이나 천연 추출물을 추가로 포함할 수 있다. The composition for skin whitening of the present invention, in addition to the active ingredient, may further include any compound or natural extract known in the art as having safety and verified safety in the art for enhancing and adding skin-related activity. You can.

구체적으로 피부 미백 성분으로서는 알부틴, 나이아신아마이드, 아스코빌글루코사이드, 알파-비사보롤, 유용성 감초 추출물(Oil Soluble Licorice(Glycyrrhiza) Extract) 등을 들 수 있으며, 또 피부 주름 개선 성분으로서는 레티놀, 레티닐팔미테이트, 아데노신, 폴리에톡실레이티드아마이드 등을 들 수 있고, 자외선 보호 성분으로서는 드로메트리졸, 드로메트리졸트리실록산, 디갈로일트리올리에이트, 디메치코디에칠벤잘말로네이트, 디에칠헥실부타미도트리아존, 소나무 껍질 추출물 등의 복합물, 포스파티딜세린, 핑거루트 추출 분말, 홍삼과 산수유 등의 복합 추출물 등을 들 수 있다. 또 보습 성분으로서는 AP 콜라겐 효소 분해 펩타이드, Collactive 콜라겐 펩타이드, N-아세틸글루코사민, 곤약 감자 추출물, 민들레 등의 복합 추출물, 쌀겨 추출물, 옥수수 배아 추출물, 저분자 콜라겐 펩타이드, 지초 추출 분말, 포스파티딜세린, 히알루론산 등을 들 수 있다. 여타의 피부 미백 성분, 주름 개선 성분, 자외선 보호 성분, 피부 보습 성분들에 대해서는 각국 기능성화장품공전(한국에서는 식약처고시인 "기능성화장품 기준 및 시험방법"임), 각국 건강기능식품공전(한국에서는 식약처고시 "건강기능식품 기준 및 규격임)을 참조할 수 있다. 이러한 성분들은 본 발명의 피부 미백용 조성물에 그 유효성분과 함께 하나 이상 포함될 수 있다.Specifically, examples of skin whitening ingredients include arbutin, niacinamide, ascorbyl glucoside, alpha-bisabolol, oil soluble licorice (Glycyrrhiza) extract, and retinol, retinyl palmimi as skin wrinkle improvement ingredients. Tate, adenosine, polyethoxylated amide, and the like, and examples of UV protection components include drometrizole, drometrizoletrisiloxane, digalloyl trioleate, dimethycodiethyl benzalmalonate, and diethylhexylbutami And complexes such as dotriazone and pine bark extract, phosphatidylserine, fingerroot extract powder, and complex extracts such as red ginseng and cornus officinalis. In addition, as a moisturizing ingredient, AP collagen enzyme degrading peptide, Collactive collagen peptide, N-acetylglucosamine, konjac potato extract, dandelion, etc., complex extracts, rice bran extract, corn germ extract, low molecular collagen peptide, ground extract powder, phosphatidylserine, hyaluronic acid, etc. Can be mentioned. For other skin whitening ingredients, wrinkle improvement ingredients, UV protection ingredients, and skin moisturizing ingredients, functional cosmetics exhibitions in each country (in Korea, it is the "standard and test method for functional cosmetics" announced by the Ministry of Food and Drug Safety), health functional foods exhibition in each country (in Korea The Ministry of Food and Drug Safety may refer to "Health functional food standards and standards." These ingredients may be included in the composition for skin whitening of the present invention together with one or more of its active ingredients.

본 발명의 피부 미백용 조성물에서 그 유효성분은 그것이 피부 미백 활성을 나타낼 수 있는 한, 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 임의의 양(유효량)으로 포함될 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 20.0 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 피부 미백 효과를 유도할 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다. In the composition for skin whitening of the present invention, the active ingredient may be included in any amount (effective amount) according to use, formulation, blending purpose, etc., as long as it can exhibit skin whitening activity, and the typical effective amount is based on the total weight of the composition It will be determined within the range of 0.001% by weight to 20.0% by weight. Here, "effective amount" refers to the amount of active ingredients that can induce skin whitening effects. Such an effective amount can be determined empirically within the ordinary skill in the art.

본 발명의 피부 미백용 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 화장료 조성물로 파악할 수 있다.In the specific aspect, the composition for skin whitening of the present invention can be identified as a cosmetic composition.

본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 파악될 경우에도 그 화장료 조성물은 그 용도상, 법률상 임의의 제품 구분을 띨 수 있으며, 구체적으로 피부 미백 등의 용도를 가진 기능성 화장품, 비기능성 일반 화장품 등일 수 있다. 제품 형태에 있어서도 임의의 제품 형태를 띨 수 있는데, 구체적으로 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 등으로 제형화될 수 있다. 구체적인 제품 형태에 있어서는 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형 등일 수 있다.Even if the composition of the present invention is identified as a cosmetic composition, the cosmetic composition may be classified into any product in accordance with its use, and may be a functional cosmetic, non-functional general cosmetic, or the like specifically having a purpose such as skin whitening. . As for the product form, any product form can be taken, specifically, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing, oils, powder foundations, emulsion foundations, waxes It can be formulated as a foundation, spray, or the like. In a specific product form, it may be flexible lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder formulation.

본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들, 예컨대, 안정화제, 용해화제, 계면활성제, 비타민, 색소 및 항료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 포함할 수 있다. The cosmetic composition of the present invention may include, in addition to its active ingredients, ingredients commonly used in cosmetic compositions, such as stabilizers, solubilizers, surfactants, vitamins, pigments and conventional auxiliary agents such as colorants and carriers.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, trakant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide, etc. may be used as a carrier component. You can.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder can be used as a carrier component, and in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane / Propellant such as butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol, fatty acid ester of sorbitan, and the like can be used.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, liquid diluents such as water, ethanol or propylene glycol as carrier components, ethoxylated isostearyl alcohol, suspending agents such as polyoxyethylene sorbitol esters, polyoxyethylene sorbitan esters, and microcrystals Sex cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar and the like can be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivatives, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide as a carrier component Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 미백 활성을 나타내는 그 유효성분을 포함하는 것을 제외하고는 당업계에 통상적으로 행하여지는 화장료 조성물의 제조방법에 따라 제조할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention can be prepared according to the manufacturing method of a cosmetic composition that is conventionally performed in the art, except that it contains an active ingredient that exhibits skin whitening activity.

본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 식품 조성물로서 파악할 수 있다. 본 발명의 조성물이 식품 조성물로 파악될 경우 그 용도는 피부 과민 반응 억제 또는 과민 반응 억제로 이해될 수 있다.In the specific aspect, the composition of the present invention can be grasped as a food composition. When the composition of the present invention is identified as a food composition, its use may be understood as inhibiting skin hypersensitivity or inhibiting hypersensitivity reactions.

본 발명의 식품 조성물은 어떠한 형태로도 제조될 수 있으며, 예컨대 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구르트 등의 가공 유류, 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 등의 건강기능식품 제제류 등으로 제조될 수 있다. The food composition of the present invention can be produced in any form, such as tea, juice, carbonated beverages, beverages such as ionic beverages, processed oils such as milk, yogurt, gums, rice cakes, Chinese medicines, breads, cookies, noodles, etc. Food, tablets, capsules, pills, granules, liquids, powders, flakes, pastes, syrups, gels, jelly, bars, etc. can be prepared as health functional food formulations.

또 본 발명의 식품 조성물은 법률상·기능상의 구분에 있어서 제조·유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띨 수 있다. 예컨대 한국 「건강기능식품에관한법률」에 따른 건강기능식품이거나, 한국 「식품위생법」의 식품공전(식약처 고시 「식품의 기준 및 규격」)상 각 식품유형에 따른 과자류, 두류, 다류, 음료류, 특수용도식품 등일 수 있다.In addition, the food composition of the present invention can be classified into any product as long as it complies with the enforcement regulations at the time of manufacturing and distribution in the legal and functional classification. For example, it is a health functional food pursuant to the Korean Act on Health Functional Food, or a confectionary, soybean, tea, or beverage according to each food type in the Food Fair of the Korean Food Sanitation Act (「Food Standards and Standards」) , Special purpose foods, and the like.

본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 식품첨가물이 포함될 수 있다. 식품첨가물은 일반적으로 식품을 제조, 가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가되어 혼합되거나 침윤되는 물질로서 이해될 수 있는데, 식품과 함께 매일 그리고 장기간 섭취되므로 그 안전성이 보장되어야 한다. 식품의 제조·유통을 규율하는 각국 법률(한국에서는 「식품위생법」임)에 따른 식품첨가물공전에는 안전성이 보장된 식품첨가물이 성분 면에서 또는 기능 면에서 한정적으로 규정되어 있다. 한국 식품첨가물공전(식약처 고시 「식품첨가물 기준 및 규격」)에서는 식품첨가물이 성분 면에서 화학적 합성품, 천연 첨가물 및 혼합 제제류로 구분되어 규정되어 있는데, 이러한 식품첨가물은 기능 면에 있어서는 감미제, 풍미제, 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등으로 구분된다. Food composition of the present invention may include a food additive in addition to the active ingredient. Food additives can be generally understood as substances added to foods, mixed or infiltrated in the manufacture, processing, or preservation of foods, and their safety must be ensured because they are consumed daily and for a long time with foods. Food additives in accordance with national laws governing the manufacture and distribution of food ("Food Sanitation Act" in Korea) are limited in terms of ingredients or functions in terms of safety and food additives. In the Korean Food Additives Fair (the Ministry of Food and Drug Safety's 「Food Additive Standards and Standards」), food additives are divided into chemical synthetic products, natural additives, and mixed preparations in terms of ingredients. It is divided into agents, preservatives, emulsifiers, acidulants, and thickeners.

감미제는 식품에 적당한 단맛을 부여하기 위하여 사용되는 것으로, 천연의 것이거나 합성된 것 모두 본 발명의 조성물에 사용할 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다. Sweeteners are used to impart a moderate sweetness to food, and both natural and synthetic can be used in the composition of the present invention. Preferably, a natural sweetener is used, and examples of the natural sweetener include sugar sweeteners such as corn syrup solids, honey, sucrose, fructose, lactose, and maltose.

풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다. Flavoring agents can be used to enhance the taste or aroma, and both natural and synthetic can be used. Preferably, it is the case of using a natural thing. In addition to flavor, when using natural ones, the purpose of enhancing nutrition can also be combined. As a natural flavoring agent, it may be obtained from apples, lemons, citrus fruits, grapes, strawberries, peaches, etc., or may be obtained from green tea leaves, perilla, large leaves, cinnamon, chrysanthemum leaves, jasmine, and the like. In addition, those obtained from ginseng (red ginseng), bamboo shoots, aloe vera, and ginkgo can be used. Natural flavoring agents may be liquid concentrates or solid extracts. In some cases, synthetic flavoring agents may be used, and synthetic flavoring agents may include esters, alcohols, aldehydes, terpenes, and the like.

보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등이 사용될 수 있고, 또 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있으며, 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등이 사용될 수 있다. 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다.As a preservative, sodium sorbate, sodium sorbate, potassium sorbate, calcium benzoate, sodium benzoate, potassium benzoate, EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) and the like can be used, and as an emulsifier, acacia gum, carboxymethylcellulose, xanthan gum, Pectin and the like, and as the acidulant, arithmetic, malic acid, fumaric acid, adipic acid, phosphoric acid, gluconic acid, tartaric acid, ascorbic acid, acetic acid, phosphoric acid and the like can be used. The acidulant may be added so that the food composition has an appropriate acidity for the purpose of suppressing the growth of microorganisms in addition to the purpose of enhancing taste.

점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등이 사용될 수 있다.As a thickener, a suspending agent, sedimentation agent, gel forming agent, swelling agent, etc. may be used.

본 발명의 식품 조성물은 전술한 바의 식품첨가물 이외에, 기능성과 영양성을 보충, 보강할 목적으로 당업계에 공지되고 식품첨가물로서 안정성이 보장된 생리활성 물질이나 미네랄류를 포함할 수 있다.The food composition of the present invention may include bioactive substances or minerals known in the art for the purpose of supplementing and reinforcing functional and nutritional properties in addition to the food additives described above, and guaranteed stability as food additives.

그러한 생리활성 물질로서는 녹차 등에 포함된 카테킨류, 비타민 B1, 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B12 등의 비타민류, 토코페롤, 디벤조일티아민 등을 들 수 있으며, 미네랄류로서는 구연산 칼슘 등의 칼슘 제제, 스테아린산마그네슘 등의 마그네슘 제제, 구연산철 등의 철 제제, 염화 크롬, 요오드칼륨, 셀레늄, 게르마늄, 바나듐, 아연 등을 들 수 있다. Examples of such bioactive substances include catechins contained in green tea, vitamins such as vitamin B1, vitamin C, vitamin E, and vitamin B12, tocopherol, dibenzoyl thiamine, and the like, and calcium preparations such as calcium citrate and magnesium stearate as minerals Magnesium preparations such as iron, iron preparations such as iron citrate, chromium chloride, potassium iodide, selenium, germanium, vanadium, zinc, and the like.

본 발명의 식품 조성물에는 전술한 바의 식품첨가물이 제품 유형에 따라 그 첨가 목적을 달성할 수 있는 적량으로 포함될 수 있다.The food composition of the present invention may include the food additives as described above in an appropriate amount to achieve the purpose of addition according to the product type.

본 발명의 식품 조성물에 포함될 수 있는 기타의 식품첨가물과 관련하여서는 각국 식품공전이나 식품첨가물 공전을 참조할 수 있다.With regard to other food additives that may be included in the food composition of the present invention, it is possible to refer to national foods or food additives.

본 발명의 피부 미백용 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 약제학적 조성물로 파악할 수 있다. The composition for skin whitening of the present invention can be identified as a pharmaceutical composition in a specific embodiment.

본 발명의 피부 미백용 조성물이 약제학적 조성물로 파악될 경우 대상 질환은 피부 과색소침착증으로 이해될 수 있으며, 그러한 과색소침작증의 구체적인 예로서는 주근깨, 노인성 반점, 간반, 기미, 갈색 또는 흑점, 일광 색소반, 푸른 흑피증, 칼슘 길항제와 같은 약물 사용 후의 과다색소침착, 조직경화치료법에 따른 과다색소침착 후유증, 임신성 갈색반, 경구 피임약을 복용한 여성에서의 흑피증, 찰상 및 화상을 비롯한 상처 또는 피부염으로 인한 염증 후 과다 색소 침착, 광독성 반응 또는 다른 유사한 소형의 고정 색소성 병변 등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.When the composition for skin whitening of the present invention is identified as a pharmaceutical composition, the target disease may be understood as skin hyperpigmentation, and specific examples of such hyperpigmentation are freckles, senile plaques, liver spots, spots, brown or black spots, and sun pigment Wounds or dermatitis, including hyperpigmentation after use of drugs such as half, blue dermatosis, calcium antagonists, hyperpigmentation sequelae according to tissue sclerotherapy, gestational brown spots, black dermatosis, scratches and burns in women taking oral contraceptives After inflammation caused by hyperpigmentation, phototoxic reactions or other similar small fixed pigmented lesions, but may be included, but is not limited thereto.

본 발명의 약제학적 조성물은 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 경구용 제형 또는 비경구용 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 투여 경로는 국소 경로, 경구 경로, 정맥 내 경로, 근육 내 경로, 및 점막 조직을 통한 직접 흡수를 포함하는 임의의 적절한 경로일 수 있으며, 두 가지 이상의 경로를 조합하여 사용할 수도 있다. 두 가지 이상 경로의 조합의 예는 투여 경로에 따른 두 가지 이상의 제형의 약물이 조합된 경우로서 예컨대 1차로 어느 한 약물은 정맥 내 경로로 투여하고 2차로 다른 약물은 국소 경로로 투여하는 경우이다. The pharmaceutical composition of the present invention may be prepared in an oral dosage form or a parenteral dosage form according to the route of administration by a conventional method known in the art, including a pharmaceutically acceptable carrier in addition to the active ingredient. Here, the route of administration may be any suitable route including a local route, an oral route, an intravenous route, an intramuscular route, and direct absorption through mucosal tissue, and two or more routes may be used in combination. An example of a combination of two or more routes is when two or more formulations of the drug are combined according to the route of administration, for example, when one drug is administered by intravenous route and the second drug is administered by topical route.

약학적으로 허용되는 담체는 투여 경로나 제형에 따라 당업계에 주지되어 있으며, 구체적으로는 "대한민국약전"을 포함한 각국의 약전을 참조할 수 있다. Pharmaceutically acceptable carriers are well known in the art depending on the route of administration or formulation, and specifically refer to the pharmacopeia of each country, including "Korea Pharmacopoeia".

본 발명의 약제학적 조성물이 경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때 적합한 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 덱스트로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 등의 당류, 옥수수 전분, 감자 전분, 밀 전분 등의 전분류, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 맥아, 젤라틴, 탈크, 폴리올, 식물성유, 에탄올, 그리세롤 등을 들 수 있다. 제제화활 경우 필요에 따라적절한 결합제, 윤활제, 붕해제, 착색제, 희석제 등을 포함시킬 수 있다. 적절한 결합제로서는 전분, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분페리스트, 젤라틴, 메틸셀룰로스, 소듐 카복시메틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 글루코스, 옥수수 감미제, 소듐 알지네이트, 폴리에틸렌 글리콜, 왁스 등을 들 수 있고, 윤활제로서는 올레산나트륨, 스테아르산나트륨, 스테아르산마그네슘, 벤조산나트륨, 초산나트륨, 염화나트륨, 실리카, 탈쿰, 스테아르산, 그것의 마그네슘염과 칼슘염, 폴리데틸렌글리콜 등을 들 수 있으며, 붕해제로서는 전분, 메틸 셀룰로스, 아가(agar), 벤토나이트, 잔탄 검, 전분, 알긴산 또는 그것의 소듐 염 등을 들 수 있다. 또 희석제로서는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 소비톨, 셀룰로스, 글라이신 등을 들 수 있다. When the pharmaceutical composition of the present invention is prepared in an oral dosage form, powders, granules, tablets, pills, dragees, capsules, liquids, gels, syrups, suspensions, wafers according to methods known in the art with suitable carriers And the like. Examples of suitable carriers at this time include sugars such as lactose, glucose, sucrose, dextrose, sorbitol, mannitol, xylitol, starches such as corn starch, potato starch, wheat starch, cellulose, methylcellulose, ethylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, Celluloses such as hydroxypropyl methylcellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, magnesium stearate, mineral oil, malt, gelatin, talc, polyol, vegetable oil, ethanol, green Serol, etc. are mentioned. In the case of formulation, if necessary, suitable binders, lubricants, disintegrants, colorants, diluents, etc. may be included. Suitable binders include starch, magnesium aluminum silicate, starch ferist, gelatin, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, polyvinylpyrrolidone, glucose, corn sweetener, sodium alginate, polyethylene glycol, wax, etc., and lubricants include oleic acid Sodium, sodium stearate, magnesium stearate, sodium benzoate, sodium acetate, sodium chloride, silica, talcum, stearic acid, magnesium salts and calcium salts thereof, polydetylene glycol, and the like, and starch and methyl cellulose as disintegrants , Agar, bentonite, xanthan gum, starch, alginic acid or its sodium salt. Moreover, lactose, dextrose, sucrose, mannitol, sorbitol, cellulose, glycine etc. are mentioned as a diluent.

본 발명의 약제학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사제로 제제화할 경우 적합한 담체로서는 수성 등장 용액 또는 현탁액을 사용할 수 있으며, 구체적으로는 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화할 수 있다. 비강 흡입제의 경우 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 등의 적합한 추진제를 사용하여 에어로졸 스프레이 형태로 제제화할 수 있으며, 좌제로 제제화할 경우 그 담체로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 폴리에틸렌글리콜류, 카카오지, 라우린지, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트류, 소르비탄 지방산 에스테르류 등을 사용할 수 있다.When the pharmaceutical composition of the present invention is prepared in a parenteral dosage form, it may be formulated in the form of injections, transdermal administrations, nasal inhalants and suppositories according to methods known in the art with suitable carriers. When formulated as an injectable agent, an aqueous isotonic solution or suspension may be used as a suitable carrier. Specifically, an isotonic solution such as PBS (phosphate buffered saline) containing triethanol amine, sterile water for injection, or 5% dextrose may be used. . When formulated as a transdermal dosage form, it can be formulated in the form of ointments, creams, lotions, gels, external solutions, pasta, linen agents, aerosols, and the like. For nasal inhalers, dichlorofluoromethane, trichlorofluoromethane, dichlorotetrafluoroethane, carbon dioxide, etc. can be formulated in the form of an aerosol spray using a suitable propellant. witepsol), tween 61, polyethylene glycols, cacao butter, laurin, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, polyoxyethylene stearate, sorbitan fatty acid esters, and the like.

약제학적 조성물의 구체적인 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 예컨대 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주 된다.Regarding the specific formulation of the pharmaceutical composition, it is known in the art, and for example, see Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995) and the like. The above documents are regarded as part of this specification.

본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 성별, 연령, 환자의 중증도, 투여 경로에 따라 1일 0.001mg/kg ~ 10g/kg 범위, 바람직하게는 0.001mg/kg ~ 1g/kg 범위일 수 있다. 투여는 1일 1회 또는 수회로 나누어 이루어질 수 있다. 이러한 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 아니 된다. Preferred dosages of the pharmaceutical compositions of the present invention range from 0.001 mg / kg to 10 g / kg per day, preferably 0.001 mg / kg to 1 g per day, depending on the patient's condition, weight, sex, age, patient severity, and route of administration. / kg range. Administration can be made once a day or divided into several times. Such dosages should not be construed as limiting the scope of the invention in any aspect.

전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 물여뀌 추출물을 이용한 피부 미백용 조성물을 제공할 수 있다.As described above, according to the present invention, it is possible to provide a composition for skin whitening using water extract.

본 발명의 피부 미백용 조성물은 식품, 화장품, 약품 등으로 제품화될 수 있다.The composition for skin whitening of the present invention can be commercialized as food, cosmetics, and drugs.

도 1은 물여뀌 추출물과 그 분획물의 제조 과정 모식도이다.
도 2 내지 도 4는 물여뀌 추출물과 그 분획물의 마우스 유래 멜라노마 세포주인 B16F10에서의 멜라닌 합성 저해능을 나타낸 결과이다.
도 5는 에틸아세테이트 분획물의 마우스 유래 멜라노마 세포주인 B16F10에서의 세포독성을 나타낸 결과이다.
도 6은 에틸아세테이트 분획물의 제브라피시에서의 멜라닌 합성 저해능을 나타낸 결과이다.
1 is a schematic diagram showing the manufacturing process of the water extract and its fraction.
2 to 4 is a result showing the melanin synthesis inhibitory ability in the mouse-derived melanoma cell line B16F10 of water extract and its fraction.
5 is a result showing the cytotoxicity in the mouse-derived melanoma cell line B16F10 of the ethyl acetate fraction.
6 is a result showing the ability to inhibit melanin synthesis in zebrafish of ethyl acetate fraction.

이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described with reference to Examples and Experimental Examples. However, the scope of the present invention is not limited to these examples and experimental examples.

<< 실시예Example > 물여뀌 추출물> Water extract of 제조 Produce

물여뀌(전초) 분말에 20배 중량의 100% 에탄올(100% ethanol, HPLC grade)를 첨가하여 24시간 침출한 뒤 와트만(whatman paper) 여과지 No.2로 여과하고 그 여과액을 감압농축하여 물여뀌 추출물을 제조하였다. 다음 그 에탄올 추출물을 물에 현탁시키고 여기에 동량의 노르말 헥산을 첨가하여 분획한 후 그 증류수 증에 동량의 클로로포름, 동량의 에틸아세테이트, 동량의 노르말 부탄올을 가하여 순차적으로 분획하여 각 분획물을 얻었다. 상기 추출물과 각 분획물을 얻는 과정의 모식도를 그 수율과 함께 도 1에 나타내었다. 20% by weight of 100% ethanol (HPLC grade) was added to the water filtration (outpost) powder, leached for 24 hours, filtered with Whatman paper filter paper No.2, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. Water extract was prepared. Then, the ethanol extract was suspended in water, and the same amount of normal hexane was added thereto to fractionate. Then, the same amount of chloroform, the same amount of ethyl acetate, and the same amount of normal butanol were added to the distilled water to sequentially fractionate to obtain each fraction. The schematic diagram of the process of obtaining the extract and each fraction is shown in FIG. 1 together with the yield.

<< 실험예Experimental example > 미백 활성 실험> Whitening activity experiment

<< 실험예Experimental example 1> 멜라닌 합성 저해능 평가 1> Evaluation of melanin synthesis inhibitory ability

C57BL/6 마우스에서 유래한 멜라노마 세포주인 B16F10을 이용하여 물여뀌 추출물의 멜라난 합성 저해능을 분석하였다. Using the melanoma cell line B16F10 derived from C57BL / 6 mice, the melanin synthesis inhibitory ability of the extract was changed.

B16F10 세포의 배양은 10% fetal bovine serum, streptomycin-penicillin (100 mg/mL)과 100 nM α-melanocyte stimulating hormone이 포함된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2의 환경에서 세포주를 배양하여 사용하였다. 멜라닌 생합성 저해 활성을 보기 위한 구체적 실험방법은 B16F10 세포 1×105개를 24-well plate의 각 well에 분주하여 하룻밤 배양하여 실험에 사용하였다. 각 샘플을 농도별로 배지에 처리하여 3일 동안 배양했다. 이후 phosphate-buffered saline으로 세척하고 1N NaOH를 200㎕씩 각 well에 처리하여 용해시켰다. 용해된 세포를 96 well plate로 옮겨 microplate reader를 사용하여 optical density를 405 nm에서 측정하고 melanin 생성 억제율은 시료 무처리군인 음성 대조군과 대비해 백분율로 계산하고 결과를 도 2 내지 도 4에 나타내었다.For cultivation of B16F10 cells, a cell line was cultured at 37 ° C and 5% CO 2 using DMEM medium containing 10% fetal bovine serum, streptomycin-penicillin (100 mg / mL) and 100 nM α-melanocyte stimulating hormone. Used. As a specific experimental method to see the melanin biosynthesis inhibitory activity, 1 × 10 5 B16F10 cells were dispensed into each well of a 24-well plate and cultured overnight to be used in the experiment. Each sample was cultured for 3 days by treating the medium for each concentration. Then, washed with phosphate-buffered saline and treated with 200 μl of 1N NaOH to dissolve each well. The lysed cells were transferred to a 96 well plate, the optical density was measured at 405 nm using a microplate reader, and the melanin production inhibition rate was calculated as a percentage compared to the negative control group, which was not treated with the sample, and the results are shown in FIGS. 2 to 4.

도 2 및 도 3에 에탄올 추출물과 그 각 분획물을 50 ㎍/ml 농도로 처리하였을 때의 멜라닌 생합성 저해 활성을 나타내었고, 도 4에 가장 활성이 우수한 에틸아세테이트 분획물의 처리 농도별 멜라닌 생합성 저해 활성을 나타내었다. 에틸아세테이트 분획물은 농도 의존적으로 멜라닌 생합성 저해 활성을 보였고 최고 처리 농도인 50 ㎍/ml에서 32.6%의 저해 활성을 보였다. 양성대조군으로는 알부틴(Arbutin)을 사용하였다.2 and 3 show the melanin biosynthesis inhibitory activity when the ethanol extract and its fractions were treated at a concentration of 50 μg / ml, and the melanin biosynthesis inhibitory activity by treatment concentration of the ethyl acetate fraction having the highest activity in FIG. 4 was shown. Shown. The ethyl acetate fraction showed melanin biosynthesis inhibitory activity in a concentration-dependent manner and 32.6% inhibitory activity at the highest treatment concentration of 50 μg / ml. Arbutin was used as a positive control.

도 5에는 MTT assay에 의한 세포독성 결과를 나타내었는데, 최고 처리 농도인 50 ㎍/ml에서도 특별한 세포독성을 나타내지 않았다.5 shows the cytotoxicity results by MTT assay, and did not show any particular cytotoxicity even at the highest treatment concentration of 50 μg / ml.

<< 실험예Experimental example 2>  2> 제브라피시에서의 멜라닌 합성 저해능 평가Evaluation of melanin synthesis inhibitory activity in zebrafish

가장 높은 미백활성을 나타낸 물여뀌 유래 에틸아세테이트 분획물을 이용하여 제브라피시(zebrafish) 멜라닌 합성 저해 실험을 하였다. 성숙 제브라피시 암수를 알 채취 전날 알 채취용 수조에 넣고 다음날 광주기 시기 1-2시간 이후에 알을 채취하였다. 채취된 알은 제브라피시 배아용 배지(zebrafish embryo medium)에 넣고 24시간 발생 시킨 후, 각 샘플을 농도별로 처리하였다. 샘플 처리 시 코리온(chorion)의 샘플 투과 정도를 알 수 없기에 각 알의 코리온에 구멍을 내어 처리 하였고, 샘플 처리 후 24시간 이후 샘플의 독성이 나타난 알은 제거 하고, 나머지 알의 코리온을 완전 제거 후 2번째 샘플을 처리 하였다. 샘플 처리 48 시간 이후에 대조구 대비 샘플 처리구의 색소 발생 정도를 실체현미경으로 관찰하였다.Inhibition of the synthesis of melanin by zebrafish was performed using the ethyl acetate fraction derived from water mud, which showed the highest whitening activity. The mature zebrafish male and female were placed in an egg collection tank the day before the eggs were collected, and the eggs were collected 1-2 hours after the Gwangju period the next day. The collected eggs were placed in a zebrafish embryo medium and generated for 24 hours, and then each sample was treated by concentration. When the sample was processed, the permeability of the sample was not known because the degree of permeation of the sample was not known, and after the sample was processed, the eggs that showed toxicity of the sample after 24 hours were removed, and the remaining eggs were removed. The second sample was processed after complete removal. After 48 hours of sample treatment, the degree of pigment generation in the sample treatment group compared to the control group was observed with a stereomicroscope.

그 결과, 도 6에서와 같이 시료를 처리하지 않은 대조구(Control)에 비해 물여뀌 유래 에틸아세테이트 분획물을 50 ㎍/ml을 처리한 제브라피시의 요크(yolk) 부분의 색소 침착이 저해 될 뿐만 아니라 전체적으로 멜라닌의 합성이 저해됨을 확인하였다. As a result, the pigmentation of the yolk portion of zebrafish treated with 50 µg / ml of the ethyl acetate fraction derived from water quenched as compared to the control (Control) without sample treatment as shown in FIG. It was confirmed that the synthesis of melanin was inhibited.

Claims (6)

물여뀌 전초의 물, 에탄올 또는 그 혼합 용매 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 식품 조성물.
A food composition for skin whitening comprising water, ethanol, or a mixed solvent extract of outpost as an active ingredient.
제1항에 있어서,
상기 물여뀌 전초의 추출물은 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 식품 조성물.
According to claim 1,
Food composition for skin whitening, characterized in that the water-extracted outpost extract is an ethanol extract.
제1항에 있어서,
상기 물여뀌 전초 추출물은 물여뀌 전초의 에탄올 추출물을 물에 현탁시킨 후, 노르말 헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트 및 노르말 부탄올을 이용하여 순차적으로 분획하여 얻어진 에틸아세테이트층의 분획물인 것인 특징으로 하는 피부 미백용 식품 조성물.
According to claim 1,
The water-exchanged outpost extract is a skin characterized by being a fraction of the ethyl acetate layer obtained by suspending the ethanol extract of water-exchanged outpost in water and then sequentially fractionating using normal hexane, dichloromethane, ethyl acetate and normal butanol. Food composition for whitening.
물여뀌 전초의 물, 에탄올 또는 그 혼합 용매 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for skin whitening comprising water, ethanol, or a mixed solvent extract of outpost as an active ingredient.
제4항에 있어서,
상기 물여뀌 전초의 추출물은 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
According to claim 4,
The cosmetic composition for skin whitening, characterized in that the water-extracted outpost extract is an ethanol extract.
물여뀌 전초의 물, 에탄올 또는 그 혼합 용매 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 과색소침착증 치료 또는 예방용 약제학적 조성물.



A pharmaceutical composition for the treatment or prevention of hyperpigmentation of the skin comprising water, ethanol or a mixed solvent extract of the outpost as an active ingredient.



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